KR20140106821A - 돌돔 유래의 단백질을 유효성분으로 함유하는 어류용 백신 보조제 - Google Patents
돌돔 유래의 단백질을 유효성분으로 함유하는 어류용 백신 보조제 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 어류의 면역을 효과적으로 증진시킬 수 있는 돌돔(Oplegnathus fasciatus) 유래 단백질을 유효성분으로 함유하는, 어류용 백신 보조제을 유효성분으로 함유하는, 어류용 백신 보조제 및 이를 어류용 백신과 함께 어류에 투여하는 단계를 포함하는 면역증진 방법을 제공한다.
Description
본 발명은 어류용 백신 보조제에 관한 것으로서, 더 상세하게는 돌돔 유래의 단백질을 유효성분으로 함유하는 어류용 백신 보조제에 관한 것이다.
우리나라 양식 산업은 과학기술의 발달과 함께 꾸준하게 발전하여 왔다. 그러나 최근 다양한 질병 감염에 의해 양식 산업의 생산성은 감소하고 있는 추세이다. 어류의 대표적인 세균성 질병은 에드워드균 감염증(Edwasdsiellosis), 연쇄구균 감염증(Streptococcosis), 비브리오균 감염증(Vibriosis)을 들 수 있다. 이러한 질병을 예방하기 위하여 국내에서도 다양한 불활화 백신이 개발되어 양식현장에서 사용되고 있으나 백신효능을 높이고 지속 기간을 늘리기 위한 추가접종으로 어민들에게 많은 경제적 부담을 주고 있다. 백신은 병인이 분명하게 알려져 있는 하나의 질병에 대해서만 특이적 면역반응을 증강시키므로 단순감염 보다는 복합감염이 일어나기 쉬운 어류 질병을 예방하는데 있어 한계를 가지고 있다. 이러한 이유로 백신 효과에 대한 개선이 꾸준하게 요구되어왔고, 그런 요구의 대안으로 각종 생리 활성물질들을 이용하여 어류의 면역반응을 활성화함으로써 복합적인 어류질병 감염에 대한 저항성을 증강시켜줄 수 있는 백신 면역보조제(Adjuvant) 개발의 필요성이 대두되었다.
현재까지 백신 면역보조제로 이용되어 온 수산화 알루미늄 겔(aluminum hydroxide gel) 또는 미네랄 오일 에멀전(mineral oil emulsion)과 같은 보조제들은 체액성 면역뿐만 아니라 세포 매개성 면역반응을 증가시킨다고 보고되었으나, 여러 가지 부작용이 나타나 인간에게는 사용이 금지되어 백신의 효과 증대를 위한 새로운 보조제의 개발이 요구되고 있다. 포유류에서는 새로운 면역 보조제의 개발을 위해서 면역과 관련 있는 다양한 유전자들로부터 재조합 단백질을 제작하여 보조제로서의 효능에 대한 연구가 이루어지고 있으나, 어류에서는 백신의 효능 증강을 위한 분자 보조제(molecular adjuvant)의 연구가 초기 단계라고 말할 수 있다.
백신은 하나의 질병에 대해서만 특이적 면역반응을 증강시키므로 단순감염 보다는 복합감염이 일어나기 쉬운 어류 질병 예방에 한계를 가지고 있으며, 이러한 이유로 백신 효과에 대한 개선이 요구되고 있다. 이에 대한 대안으로 각종 생리 활성물질들을 이용하여 어류의 면역반응을 활성화함으로써 복합적인 어류질병 감염에 대한 저항성을 증강시킬 수 있는 어류용 백신 면역 보조제(adjuvant)의 개발이 요구되고 있다.
본 발명자는 돌돔 유래 단백질인 CC 케모카인 1 단백질 및 TRx(Thioredoxin) 1 단백질의 면역 증진효과를 최초로 규명한 것으로서 어류의 면역반응을 활성화하여, 복합적인 어류 질병 감염에 대한 저항성을 증강시킬 수 있는 어류 백신 보조제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 그러나 이러한 과제는 예시적인 것으로, 이에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 관점에 따르면, 돌돔(Oplegnathus fasciatus) 유래 단백질을 유효성분으로 함유하는, 어류용 백신 보조제가 제공된다.
상기 돌돔 유래 단백질은 CC 케모카인(chemokine) 1 단백질 또는 TRx(Thioredoxin) 1 단백질일 수 있다.
상기 CC 케모카인 1 단백질은 서열번호 1로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드일 수 있으며, 상기 TRx(Thioredoxin) 1 단백질은 서열번호 2로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드일 수 있다. 본 발명자는 본 발명의 일 실시예를 통하여 상기 CC 케모카인 1 단백질 또는 TRx(Thioredoxin) 1 단백질을 어류용 백신과 함께 사용시, 백신의 효과가 지속됨에 따라 어류의 면역반응을 활성화하여, 복합적인 어류 질병 감염에 대한 저항성을 증강시켜, 어류의 폐사율을 감소시킬 수 있음을 최초로 입증하였다. 상기 감염성 질환은 에드워드균 감염증(Edwasdsiellosis), 연쇄구균 감염증(Streptococcosis), 비브리오균 감염증(Vibriosis), 및 활주세균증 등 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 어류용 백신 보조제에 있어서, 본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질의 유효 투여량은 0.001 mg/ml 내지 1 mg/ml일 수 있으며, 더 바람직하게는 0.05 mg/ml 내지 0.5 mg/ml일 수 있다. 한편, 상기 투여량은 어류의 상태에 따라 적절히 조절될 수 있다.
상기 어류용 백신 보조제에 있어서, 본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질은 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며, 비경구 투여 시 복강 주사에 의해 투여될 수 있으며, 이외에도 사료에 첨가될 수 있다.
본 발명의 일 관점에 따르면, 돌돔 유래 단백질을 유효성분으로 함유하는, 어류용 백신 보조제를 어류용 백신 조성물과 함께 어류에 투여하는 단계를 포함하는 어류의 면역 증진 방법이 제공된다.
상기한 바와 같이 이루어진 본 발명의 일 실시예에 따르면, 경제적이며 효과적으로 어류의 면역을 증진시키는 면역 보조제를 구현할 수 있다. 물론 이러한 효과에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 CC 케모카인 1 단백질(rRbCC1)에 의한 백신의 효율성이 증가되는 것을 혈청 응집(agglutination)반응을 통하여 확인한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 TRx1 단백질(rRbTRx1)에 의한 백신의 효율성이 증가되는 것을 혈청 응집(agglutination)반응을 통하여 확인한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 CC 케모카인 1 단백질(rRbCC1)과 백신(S. iniae FKC)을 병용 투여한 돌돔에 연쇄구균(S. iniae FP5228)을 인위 감염시킨 후, 폐사율을 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 TRx1 단백질(rRbTRx1)과 백신(S. iniae FKC)을 병용 투여한 돌돔에 연쇄구균(S. iniae FP5228)을 인위 감염시킨 후, 폐사율을 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 TRx1 단백질(rRbTRx1)에 의한 백신의 효율성이 증가되는 것을 혈청 응집(agglutination)반응을 통하여 확인한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 CC 케모카인 1 단백질(rRbCC1)과 백신(S. iniae FKC)을 병용 투여한 돌돔에 연쇄구균(S. iniae FP5228)을 인위 감염시킨 후, 폐사율을 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 재조합 TRx1 단백질(rRbTRx1)과 백신(S. iniae FKC)을 병용 투여한 돌돔에 연쇄구균(S. iniae FP5228)을 인위 감염시킨 후, 폐사율을 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예 및 실험예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있는 것으로, 이하의 실시예 및 실험예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이다.
실시예 1: 돌돔 유래의 단백질(rRbCC1, rRTRx1)의 합성
돌돔(Rock bream) 유래의 CC 케모카인(chemokine) 1 cDNA는 본 발명자의 이전 연구에서 LPS(lipopolysaccharide,지질다당류)로 자극된 돌돔 간 cDNA library의 EST(expressed sequence tag) 분석에 의하여 규명되었다(Kim JW, et al., J. Fish pathol., 23:229-38, 2010). 상기 돌돔 유래의 CC 케모카인 1 폴리펩타이드는 서열번호 1로 본 발명에 참조하였으며, TRx(Thioredoxin) 1 폴리펩타이드는 서열번호 2로 본 발명에 참조하였다.
실시예 2: 돌돔 사육
돌돔(약 70 g)은 통영의 경상남도 수산자원연구소로부터 제공받았다. 돌돔은 여과 해수가 공급되는 5톤 수조에서 사육하였으며, 사육시 일정하게 통기하였으며, 하루에 3번 시판되는 상업용 사료를 공급하였다. 해수는 23± 1℃로 유지하였다. 이하 실험예에서 백신접종을 수행하기 이전에 약 2주 동안 순치하였다.
실험예 1: 혈청 응집(agglutination) 반응을 통한 돌돔 유래 단백질의 백신 보조제로서의 효과 분석
본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질인 rRbCC1 단백질 또는 rRbTRx1 단백질의 백신 보조제로서의 효율성을 측정하기 위하여, 한국의 양식 어종의 주요 폐사원인이 되는 연쇄상구균감염증(streptococcosis)에 대한 백신을 제조하여 실험에 이용하였다. rRbCC1 단백질을 백신과 병용으로 돌돔에 투여한 후, 혈청 응집(agglutination) 실험을 수행하였다.
우선, 백신으로 이용할 포르말린 불활화 백신(FKC, formalin-killed cell)을 제조하기 위하여 국립수산과학원 병리연구과로부터 S. iniae FP5228 균주를 분양받았고, 배양된 상기 박테리아를 1.5%(w/v) NaCl이 첨가된 BHIB(Brain Heart Infusion broth) 액체배지(Difco, USA)에 대량 배양하였다. 대량 배양된 상기 박테리아를 원심분리를 통하여 수거하였고, 인산완충액(PBS, phosphate buffered saline)에 현탁한 후에, 최종농도를 4%가 되도록 포르말린(formalin)을 첨가하여, 상온에서 48시간 동안 불활화 시킨 다음, PBS를 이용하여 3회 세척하고, PBS에 재현탁시켜, S. iniae FKC를 제조하였다.
그 후, S. iniae FKC 단독, S. iniae FKC와 rRbCC1 단백질 병용 투여 또는 S. iniae FKC와 rRbTRx1 단백질 병용 투여에 의한 혈청 응집 반응을 관찰하였다. 상기 S. iniae FKC 단일 투여군은 실험 시작과 동시에 100 μl(어류 1 마리당 1 mg의 백신투여량임)를 복강을 통해 1회 투여하였으며, 상기 S. iniae FKC와 rRbCC1 단백질 병용 투여군은 돌돔 1마리당 100 μL FKC와 rRbCC1 단백질(100 μg/ml)을 함께 복강으로 1회 투여하였으며, 상기 S. iniae FKC와 rRbTRx1 단백질 병용 투여군은 돌돔 1마리당 100 μL FKC와 rRbTRx1 단백질(10 μg/ml)을 함께 복강으로 1회 투여하였dmaum 4주 동안 면역화 실험(immunization test)을 수행하였다.
각 실험군 별로 매주 9 마리를 수거하여 미부정맥으로부터 혈액 샘플을 채취하고 4℃에서 4시간 동안 방치하였다. 그 후, 원심분리를 통해서 혈청을 분리하고 이를 새로운 튜브(flash tube)에 옮겼다.
그 후, S. iniae 에 대한 혈청 응집 농도를 미세적정 분석방법(microtiter assay)을 이용하여 분석하였으며(Cho MY, et al., J. Fish pathol., 19(2):165?72, 2006), 이를 간략하게 설명하면 상기 원심분리를 통하여 획득한 각각의 혈청 50 μl를 순차적으로 50 μl PBS에 희석하고, 50 μl S. iniae FP5228 FKC (OD 0.8 at 600nm)를 첨가하고, 플레이트(96-well plate)를 상온에서 밤새 방치하고 현미경을 통하여 응집반응을 관찰하였다. 항체 역가(titer)는 응집 양성반응은 나타낸 혈청의 가장 높은 희석배수의 역수로 표현하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 백신을 투여하고 4주 동안 변화를 살펴보면, FKC 단일 투여와 FKC와 재조합 단백질 rRbCC1 또는 rRbTRx1 단백질의 병용투여 군 사이의 혈청 응집은 통계학적으로는 크게 차이가 나지 않았으나, FKC 단일 백신 투여에 비하여 FKC 백신과 rRbCC1 단백질을 병용하여 투여하였을 때, 혈청 응집이 더욱 오랫동안 유지되는 것이 관찰되었다(도 1 및 도 2 참조). 이러한 결과는 본 발명의 일 실시예에 따른 rRbCC1 및 rRbTRx1 재조합 단백질이 백신의 효과를 유지하는 보조제로서 기능할 수 있음을 시사한다.
실험예 2: 혈액학적 지표 분석을 통한 돌돔 유래 단백질의 어체 내 독성 분석
본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질인 rRbCC1 또는 rRbTRx1 단백질 투여에 의한 혈액학적 지표 변화를 통하여 돌돔 유래 단백질 자체의 독성 여부를 확인하였다.
우선, 재조합 단백질 rRbCC1를 200 μg/ml(2배), 500 μg/ml(5배), 및 1,000 μg/ml(10배)의 고농도로 제조하고, 각 농도별로 100 μl를 돌돔 복강에 투여하였다. 또한, 재조합 단백질 rRbTRx1은 20 μg/ml(2배), 50 μg/ml(5배), 및 100 μg/ml(10배)의 고농도로 제조하고, 각 농도별로 100 μl를 돌돔 복강에 투여하였다. 이에 대한 대조군으로는 동량의 PBS를 투여하였다. 투여 후, 24시간 및 48시간이 경과한 후, 각 군별(n=3)로 미정맥으로부터 혈액샘플을 채취하고 4℃에서 4시간 동안 방치하여 혈병이 응고되도록 하였다.
그 후 원심분리를 통하여 혈청을 분리하여 새로운 튜브로 옮기고, 혈액학적 지표로 총 단백질(total protein), 알부민(albumin), 알칼리성 인산가수분해 효소(alkaline phosphatase), 혈액내 요소태 질소(blood urea nitrogen, BUN), 젖산탈수효소(lactate dehydrogenase), 트리글리세리드(triglyceride), 총콜레스테롤(total cholesterol), 아스파르트산 아미노기 전이효소(aspartate aminotransferase), 알라닌 아미노기 전이효소(alanine aminotransferase), 및 글루코오스(glucose)를 분석하였다(Jung SH, et al., J. Fish pathol., 19(3):253-65, 2006). 상기 지표들은 FUJI DRY-CHEM 4000i 기기(FUJI PHOTO FILM Co., Japan)의 동물용 건식 생화학 분석 시스템(dry chemical system)의 베이스라인 범위를 기준으로 분석하였다
그 결과, 표 1에 나타난 바와 같이, 전반적으로 재조합 단백질 rRbCC1를 투여하고 48시간이 경과하였을 때, 200, 500 및 1,000 μg/ml 투여군은 대조군과 혈액학적 지표에 대하여 통계학적으로 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 특히, GPT는 PBS를 투여한 대조군과 비교하면, 거의 변화가 없었다. 또한, 재조합 단백질 rRbTRx1를 투여하고 48시간이 경과하였을 때, 20, 50 및 100 μg/ml 투여군은 대조군과 혈액학적 지표에 대하여 통계학적으로 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 특히, GPT는 PBS를 투여한 대조군과 비교하면, 거의 변화가 없었다. 이러한 결과는 본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질인 rRbCC1 및 rRbTRx1이 독성이 거의 없어, 백신 보조제로서 유용하게 적용될 수 있음을 의미한다.
다만, TP 수치의 경우 통계학적으로 유의한 차이가 관찰되었으나, 이는 대조군 수치가 정상보다 매우 낮은 수치를 나타냈기 때문인 것으로 파악되었다(표 1 참조).
| ALB (g/dL) |
BUN (mg/dl) |
GPT (U/L) |
GOT (U/L) |
GLU (mg/dl) |
TP (g/dL) |
TG(mg/dL) |
||
| Reference normal range in the veterinary | 3.8-5.0 |
8.0-23 |
4.0-44 |
3.0-38 |
70-110 |
6.7-8.3 |
50-149 |
|
| PBS | Control | 1.7±0.3 | 8.3±1.2 | 11.7±1.2 | 38.0±6.2 | 61.3±9.8 | 3.2±0.3 | 250.7±27.4 |
| rRbCC1 24h | 2-fold | 2.3±0.4 | 11.1±0.8 | 9.7±0.6 | 43.3±5.0 | 73.7±4.5 | 6.7±0.4* | 314.3±19.1 |
| 5-fold | 1.7±0.1 | 8.4±0.3 | 7.3±1.5 | 20.7±1.5 | 45.7±4.2 |
5.8±0.3* |
403.0±22.1* | |
| 10-fold | 3.0±0.6* |
7.9±0.2 |
19.0±1.0 |
53.3±18.9 | 48.0±3.6 |
6.4±0.4* |
276.3±11.5 |
|
| rRbCC1 48h | 2-fold | 2.4±0.4 |
9.4±1.0 |
19.0±13.5 |
22.7±4.7 | 62.7±33.2 | 7.6±0.7* |
349.3±33.5* |
| 5-fold | 2.1±0.2 |
9.2±2.1 |
12.7±4.6 |
41.3±5.0 | 31.7±9.1* | 6.4±0.2* |
259.7±33.5 |
|
| 10-fold | 2.3±0.2 | 10.3±5.9 | 10.0±1.0 | 33.7±8.4 | 31.3±1.5* | 6.2±0.4* |
254.7±34.4 |
|
| rRbTRx1 24h | 2-fold | 2.0±0.7 | 8.4±1.1 | 7.3±1.5 | 26.0±3.0 | 40.0±6.2 | 5.5±0.8* | 346.7±9.5* |
| 5-fold | 2.2±0.3 | 7.4±0.6 | 9.0±1.0 | 31.0±1.0 | 50.7±6.7 | 6.4±0.9* | 258.7±15.5 | |
| 10-fold | 2.4±0.7 | 9.4±0.6 | 9.3±0.6 | 43.3±5.7 | 46.3±4.7 | 5.7±0.4* | 278.3±6.4 | |
| rRbTRx1 48h | 2-fold | 2.4±0.6 | 10.8±2.2 |
15.0±8.5 |
45.3±29.7 | 34.7±18.6* | 7.6±0.9* |
296.0±80.3 |
| 5-fold | 2.3±0.3 | 11.7±0.8 |
10.7±8.1 |
26.6±10.5 | 38.7±9.9 |
5.9±1.4* |
237.7±83.1 |
|
| 10-fold | 2.5±0.6* | 14.7±4.5* |
16.3±9.5 |
47.717.2 |
42.0±32.9 | 6.5±0.8* |
215.0±50.9 |
|
실험예 3: rRbCC1와 백신 병용투여에 의한 폐사율 감소 효과 분석
본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질인 rRbCC1 또는 rRbTRx1 재조합 단백질의 백신 보조제로서의 효과를 분석하기 위하여, 백신 단독, rRbTRx1 병용, 또는 rRbTRx1 병용 투여하여 4주간 면역화 시킨 돌돔에 대하여, S. iniae를 인위 감염시킨 후 각 실험구에서 돌돔의 생존율을 관찰하였다.
구체적으로, 100 μl의 S. iniae FKC 백신(1mg/마리당)+ rRbCC1(100 μg/ml) 병용 투여, 또는 S. iniae FKC 백신(1mg/마리당)+ rRbTRx1(10 μg/ml) 병용하여 투여하였으며, 비교를 위하여 100 μl의 S. iniae FKC 백신(1mg/1마리)을 단독으로 투여하였다.대조군으로 100 μl PBS를 1회 복강으로 투여하여 4주 동안 면역화 시킨 후에 살아있는 S. iniae FP5228 균주를 2× 107 cell/마리당(600 nm에서 OD 값이 1.0)을 투여하였다.
각 실험군마다 수조를 분류하고, 80L FRP 탱크에 10일 동안 사육하며, 증상, 질병의 진행상태, 폐사율을 매일 기록하였으며, 누적 폐사율을 기록하고, 상대생존율(relative percent survival, RPS)은 하기 수학식 1에 따라 계산하였다. 이러한 실험을 3회 반복하여 수행하였다.
그 결과, 하기 도 3 및 도 4에 나타난 바와 같이, PBS를 주입한 대조군은 5.6± 3.8%의 생존율을 나타냈으며, FKC를 단일로 투여한 군에서는 70± 3.3%를 나타냈으며, FKC와 rRbCC1를 혼합하여 투여한 군에서는 87.8± 5.1%의 생존율을 나타냈으며, FKC와 rRbTRx1를 혼합하여 투여한 군에서는 86.7± 5.8의 생존율을 나타냈다. 또한, 하기 수학식 1에 의하여 도출된 상대적인 생존율(RPS, relative percent survival)은 FKC 단일 투여군에서는 68.2%를 나타냈으나, FKC와 rRbCC1을 함께 투여한 군에서는 87%를 나타냈으며, FKC와 rRbTRx1을 함께 투여한 군에서는 85.9%를 나타내며 FKC 단일 투여군에 비하여 돌돔 유래 단백질을 병용투여하였을 때 RPS가 현저하게 증가한 것을 확인할 수 있었다(표 2 참조). 하기 표 2에 기재된 1, 2 및 3은 반복실험 차수를 의미하며, 통계학적 유의성을 의미하는 *는 P < 0.05을 의미하며, **은 P < 0.01을 의미한다.
이러한 결과는 본 발명의 일 실시예에 따른 돌돔 유래 단백질인 rRbCC1 및 rRbTRx1 재조합 단백질을 백신의 효과를 증진시키는 백신 보조제로 유용하게 적용될 수 있음을 의미하는 것이며, S. iniae와 같은 어류 병원성 미생물에 대하여 선천성 면역 및 비특이적 면역 체계를 자극하는 효과를 제공할 수 있음을 의미한다.
| 실험군 | n | 생존 어류 수 | 생존율(%) | 평균 생존율(%) |
RPS |
유의성 (대조군/FKC) |
| 대조군-1 | 30 | 3 | 10 | 5.6 ±3.8 | ||
| 대조군-2 | 30 | 1 | 3.3 | |||
| 대조군-3 | 30 | 1 | 3.3 | |||
| FKC-1 | 30 | 20 | 66.7 | 70 ±3.3 |
68.2 |
** |
| FKC-2 | 30 | 22 | 73.3 | |||
| FKC-3 | 30 | 21 | 70 | |||
| FKC+rRbCC1-1 | 30 | 28 | 93.3 | 87.8 ±5.1 |
87 |
**/* |
| FKC+rRbCC1-2 | 30 | 25 | 83.3 | |||
| FKC+rRbCC1-3 | 30 | 26 | 86.6 | |||
| FKC+rRbTRx1-1 | 30 | 28 | 93.3 | 86.7 ±5.8 |
85.9 |
**/* |
| FKC+rRbTRx1-2 | 30 | 25 | 83.3 | |||
| FKC+rRbTRx1-3 | 30 | 25 | 83.3 |
본 발명은 도면에 도시된 실시예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 다른 실시예가 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의하여 정해져야 할 것이다.
<110> INDUSTRY-ACADEMIC COOPERATION FOUNDATION GYEONGSANG NATIONAL UNIVERSITY
<120> Vaccine adjuvants comprising novel peptide from rock bream
<130> PD13-0658
<160> 2
<170> KopatentIn 2.0
<210> 1
<211> 122
<212> PRT
<213> Oplegnathus fasciatus
<400> 1
Met Val Asn Cys Gly Ser Leu Leu Lys Ser Ala Leu Val Ile Leu Ala
1 5 10 15
Leu Val Ala Val Val Gln Pro Gly Ser Ala Pro Glu Lys Leu Ala Ser
20 25 30
Cys Cys Lys Thr Val Ser Asn Gln Lys Ile Thr Glu Pro Ile Leu Gly
35 40 45
Tyr Leu Val Gln Thr Ala Thr Pro Ser Cys Val Arg Ala Val Ile Phe
50 55 60
Gln Thr Glu Ala Gly Leu Phe Cys Ser Gln Val Thr Ala Pro Trp Val
65 70 75 80
Arg Arg Lys Ile Val Ala Phe Glu Arg Ala Lys Ala Leu Ala Ile Pro
85 90 95
Ser Ser Val Val Pro Ser Ser Thr Val Ser Leu Leu Ser Ile Ile Thr
100 105 110
Ser Thr Ala Ser Pro Ser Ser Ser Ser Ile
115 120
<210> 2
<211> 108
<212> PRT
<213> Oplegnathus fasciatus
<400> 2
Met Val Arg Glu Val Glu Asn Leu Asp Glu Phe Lys Ala Ile Leu Lys
1 5 10 15
Glu Ala Gly Asp Arg Leu Val Val Val Asp Phe Thr Ala Thr Trp Cys
20 25 30
Gly Pro Cys Lys Met Ile Gly Pro Glu Phe Glu Arg Leu Ser Lys Leu
35 40 45
Pro Glu Asn Lys Asn Val Ile Phe Leu Lys Val Asp Val Asp Glu Ala
50 55 60
Ser Asp Val Ser Glu His Cys Lys Ile Ser Cys Met Pro Thr Phe His
65 70 75 80
Phe Tyr Lys Asn Glu Ala Lys Val Ser Glu Phe Ser Gly Ala Asn Lys
85 90 95
Asp Thr Leu Ala Glu Lys Val Glu Ala Leu Arg Thr
100 105
Claims (5)
- 돌돔(Oplegnathus fasciatus) 유래 단백질을 유효성분으로 함유하는, 어류용 백신 보조제.
- 제1항에 있어서,
상기 돌돔 유래 단백질은 CC 케모카인(chemokine) 1 단백질 또는 TRx(Thioredoxin) 1 단백질인, 어류용 백신 보조제. - 제2항에 있어서,
상기 CC 케모카인 1 단백질은 서열번호 1로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드인, 어류용 백신 보조제. - 제2항에 있어서,
상기 TRx1 단백질은 서열번호 2로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드인, 어류용 백신 보조제. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 어류용 백신 보조제를 어류용 백신 조성물과 어류에 투여하는 단계를 포함하는, 어류의 면역 증진 방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20130020902A KR101486236B1 (ko) | 2013-02-27 | 2013-02-27 | 돌돔 유래의 단백질을 유효성분으로 함유하는 어류용 백신 보조제 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20130020902A KR101486236B1 (ko) | 2013-02-27 | 2013-02-27 | 돌돔 유래의 단백질을 유효성분으로 함유하는 어류용 백신 보조제 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20140106821A true KR20140106821A (ko) | 2014-09-04 |
| KR101486236B1 KR101486236B1 (ko) | 2015-01-28 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR20130020902A KR101486236B1 (ko) | 2013-02-27 | 2013-02-27 | 돌돔 유래의 단백질을 유효성분으로 함유하는 어류용 백신 보조제 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101486236B1 (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20180084352A (ko) * | 2017-01-17 | 2018-07-25 | 경상대학교산학협력단 | 돌돔 유래의 신규한 피스시딘 펩티드 및 이의 용도 |
| KR20190138609A (ko) * | 2018-06-05 | 2019-12-13 | 전남대학교산학협력단 | 돌돔의 면역글로불린 m에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 |
-
2013
- 2013-02-27 KR KR20130020902A patent/KR101486236B1/ko active IP Right Grant
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20180084352A (ko) * | 2017-01-17 | 2018-07-25 | 경상대학교산학협력단 | 돌돔 유래의 신규한 피스시딘 펩티드 및 이의 용도 |
| KR20190138609A (ko) * | 2018-06-05 | 2019-12-13 | 전남대학교산학협력단 | 돌돔의 면역글로불린 m에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR101486236B1 (ko) | 2015-01-28 |
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