KR20130079387A

KR20130079387A - ４―티오우레이도―이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트계 결핵 약물의 제조 및 치료 방법

Info

Publication number: KR20130079387A
Application number: KR1020127028910A
Authority: KR
Inventors: 알렉산더 세르지비치 구시친; 타티아나 이바노브나 비노그라도바; 페트르 카지미로비치 야블론스키; 젠나디 안드레비치 베티유닌; 나탈리야 비야체슬라보나 자보로티냐; 스페탈라나 니콜라에브나 바실리에바; 알렉시 빌라디미로비치 말리진
Original assignee: 조인트 스톡 컴퍼니 “파르마신세즈”
Priority date: 2010-04-20
Filing date: 2011-04-12
Publication date: 2013-07-10
Also published as: CN105147679A; AU2011244054A1; PE20130202A1; WO2011132114A9; RU2423977C1; CA2794439C; US9750727B2; MX339367B; AP2012006486A0; EA201201308A1; MX2012011907A; CL2012002924A1; CN102844024A; UA102970C2; WO2011132114A3; BR112012027000A2; US20130052265A1; AU2016265974A1; ZA201207189B; WO2011132114A2

Abstract

본 발명은, 활성 성분으로서, 치료학적으로 효과적이고 안정한 수준의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디디움 퍼클로레이트 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 함유하는, 화학-약제 산업 분야, 특히, 신규 결핵 치료의 분야에 관한 것이다. 또한, 당해 치료는 신규 치료(제)를 고수율로 제공하는, 신규 약물의 제조방법에 관한 것이다. 신규 치료는 원형 약물과 비교하여, 보다 높은 결핵 활성(200배 높음) 및 보다 낮은 독성(2.4배 낮음)을 가지며 장기간 저장 동안 안정하다. 당해 의약은 다른 TB 약물과 함께 신규 치료를 사용함으로써 모든 형태의 폐 및 폐외 TB를 치료하고 예방하기 위해 사용될 수 있다.

Description

４―티오우레이도―이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트계 결핵 약물의 제조 및 치료 방법{TUBERCULOSIS DRUG BASED ON 4―THIOUREIDO―IMINOMETHYLPYRIDINIUM PERCHLORAT: METHOD OF PREPARATION AND TREATMENT}

발명의 분야

본 발명은 신규한 생성물로서, 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트를 함유하는 화학-약제 산업, 특히 신규한 항결핵(TB) 치료의 분야에 관한 것이며, 당해 신규한 생성물의 제조 방법 및 다른 TB 약물과 함께 사용함으로써 모든 형태의 폐 및 폐외 TB를 치료하고 예방하는 방법에 관한 것이다.

TB로 인한 높은 사망률은 위급한 건강 문제이다. 세계적으로, 세계 보건 기구(WHO) 데이타에 따르면, 2007년도에 TB의 추정된 927만의 발생 경우가 존재하였다. 이는 2006년도에 924만 경우로부터 2000년도에 830만 경우 및 1990년도에 660만 경우로 증가하고 있다. 2007년도에 추정된 전체 경우의 대부분은 아시아(55%) 및 아프리카(31 %)이며, 동부유럽(6%), 유럽(5%), 및 아메리카(3%)에서는 작은 비율로 존재하였다. 2007년도에 전체 발생의 측면에서 상위 5개 국가는 인도(2백만), 중국(130만), 인도네시아(53만), 나이지리아(46만) 및 남아프리카(46만)이었다. 927만 건의 발생 경우 중, 추정된 137만(15%) 건은 HIV-양성이었으며; 이들 HIV-양성 경우 중 79%는 아프리카에서 존재하였고 11%는 남동아시아에서 존재하였다.

비록 TB의 발생 경우의 전체 수가 집단 성장의 결과로서 절대적 측면에서 증가하고 있다고 해도, 1인당 다수의 경우들이 실패중에 있다. 감소율은 매년 1% 미만으로 느리다. 전세계적으로, 2004년에 인구 100,000 명당 142개 경우에서 비율이 최대였다. 2007년에는, 인구 100,000 명당 추정된 139 건의 발생 경우들이 존재하였다.

발생률은 6개의 WHO 지역 중 5개 지역(비율은 대략적으로 안정한 유럽은 제외함)에서 감소하고 있다.

다중약물-내성 TB(MDR-TB)의 추정된 5000만 건의 경우가 존재하였다. 이러한 경우들 모두 중 85%에 대해 계산된 27개국(이중 15개국이 유럽에 존재함)이 있다. MDR-TB 경우들의 전체 수의 측면에서 가장 우세한 국가들은 인도(131,000), 중국(112,000), 러시아(43,000), 남아프리카(16,000), 및 방글라데시(15,000)이다. 2008년 말기에, 55개의 국가 및 지역이 강력한 약물-내성 TB(XDR-TB)의 적어도 하나의 경우로 보고되었다[세계 보건 기구(WHO) 보고서 2009 [http://www.who.int/tb/_publications/global_report/2009/key_points/ru/index.html].

TB 방제에 있어서 현저한 달성은 약물 치료와 관련되어 있다. 이러한 TB 의약의 다수가 이미 존재해 왔다. 최초의 화학 제제(스트렙토마이신, 나트륨 파라-아미노살리실레이트, 및 티본)은 1940년대 말기에 출현하였다. 이후에, 프티바지드, 이소니아지드, 및 에티온아미드, 카나마이신, 플로리마이신, 사이클로세린, 및 프로티온아미드와 같은 신규의 효과적인 화학 제제가 개발되어 가장 적절하고 효과적인 개개 치료를 허용하면서 개발되었다. 이후에, TB 약물에 매우 효과적인 리팜피신, 에탐부톨, 및 마이코부틴이 이용가능하게 되었다. 그러나, 이후에 이들 식규 약물에 대해 강력한 내성을 지닌 마이코박테리움 투베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis)가 출현하였다.

표준 TB 치료요법(TB의 모든 형태의 경우)에서, 기본적이고 가장 효과적인 TB 약물은 이러한 새로운 개발의 선구물질인, 이소니아지드(이소니코틴산 하이드라지드, INH)[참조: M.D. Mashkovsky: Pharma Products, vol.2, Kharkov, Torsing, 1997, p. 332-333, 341 -342.], 및 리람피신[참조: M.D. Mashkovsky: Pharma Products, vol.2, Kharkov, Torsing, 1997, p. 332-333, 341-342; A.G. Khomenko: Chemotherapy of Pulmonary Tuberculosis, Moscow; Meditsina, 1980, 279 p.]이다. 비록 이소니아지드가 우수한 치료학적 효능을 나타낸다고 해도, 이는 매우 독성(LD50은 150 mg/kg이다)이며, 이의 장-기간 투여는 소화적, 신장의, 정서적, 혈액학적 및 알레르기 질환 및 독성 간염과 관련되어 있다. 이소니아지드의 주요 단점은, 엠. 튜베르쿨로시스에 있어서의 내성이 환자의 70%에서 신속하게 진행되고 TB 환자의 30% 이하가 만성 매개체로 된다. 반합성 항생제 리팜피신은 또한 고 독성 효과를 가진다고 해도, 엠. 투베르쿨로시스에 대해 매우 활성이다. 이소니아지드를 사용하는 경우, 리팜피신의 주요 단점은 TB 환자의 40 내지 50%에서 관찰되는 엠. 투베르쿨로시스에서 리팜피신 내성의 신속한 발달이며 약물의 효능을 유의적으로 감소시킨다. 리팜피신-내성 TB의 경우에, 리팜피신을 다른 TB 약물(스트렙토마이신, 이소니아지드, 에탐부톨 등)과 결합하는 것이 필수적이다[참조: M.D. Mashkovsky: Pharma Products, vol.2, Kharkov, Torsing, 1.997, p. 332-333, 341 -342]. 이용가능한 TB 약물에 대한 엠. 투베르쿨로시스의 내성은 신규 유형의 치료 및 이들의 조합의 개발을 필요로 하였다.

본원에 요약된 신규 제제의 목적은 최소의 독성 효과를 가지며 저장 동안 안정한 신규의 고도로 효과적인 TB 치료(제)(TB treatment)를 제조하는 것이다.

발명의 요약

당해 의약은 활성 성분으로서, 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트를 치료학적으로 효과적이고 안정한 수준으로 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 함유하는 신규의 원래 TB 치료이다.

4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트는 (과량의) 4-피리딘 알데하이드를 티오세미카르바지드와 48 내지 55%의 과염소산의 물-에탄올 용액 속에서 80 내지 85℃에서 반응시킴으로써, 개발자들에 의해 앞서 개발된 방법을 사용하여 수득된다[참조: 2004년 5월 13일자의 특허 제RU 2265014호].

TB 약물은 활성 성분인 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 5.0 내지 90.0% w/w 및 약제학적으로 허용되는 보조 물질 100% w/w (총 제형의 중량당 표시된 %)를 함유한다.

제형 중 활성 성분의 유효량은 5 내지 1,000 mg이다.

의약은 바람직하게는 적어도 하나의 추가의 TB 제제를 함유함으로써 상승 효과를 생산한다.

치료는 추가의 TB 제제로서, 이소니아지드, 피라진아미드, 리팜피신, 리파부티, 아미카신, 에탐부톨, 및 플루오로퀴놀론 항생제 또는 이들의 조합물과 같은 활성 성분을 함유할 수 있다.

방식(presentation)은 바람직하게는 필름-피복된 정제(장내 피복된 개질된 방출 정제), 또는 조합된 정제, 캅셀제, 입제, 좌제, 및 현탁제의 형태일 수 있다. 본 발명의 약제학적 용량형은 통상의 기술을 사용하여 제조할 수 있다[참조: Pharmaceutical Technology. Dosage Form technology, 2nd ed., Moscow, 2006].

투여는 경구 또는 비경구일 수 있다. 의약의 투여량은 환자의 연령, 상태 및 체중 및 투여 경로에 의존한다.

활성 성분 외에, 의약은 결합제, 증량 물질(bulking material), 방부제, 활주제(glidant), 연화제, 습윤제, 분산제, 유화제, 희석제, 항산화제 및/또는 추진제 및 연장제와 같은 부형제를 함유할 수 있다[참조: Sucker et al.: Pharmazeutische Technologie, Thieme- Verlag, Stuttgart, 1991].

표적 첨가제는 바람직하게는 활성 성분의 중량%로 나타낸 양의 슈크로즈, 포비돈, 미세결정성 셀룰로즈, 콜로이드성 이산화규소, 에틸셀룰로즈, 메타크릴산 및 에틸 아크릴레이트의 공중합체, 트리에틸 시트레이트, 마크라골, 활석, 및 산화철 염료(ferric oxide dye)이다:

슈크로즈: 3.1 - 50.4

포비돈: 0.9 - 14.4

미세결정성 셀룰로즈: 1.1 - 18.0

콜로이드성 이산화규소: 0.2 - 3.6

에틸셀룰로즈: 0.2 - 3.6

정제를 제조하기 위한 가장 일반적인 기술은 3개의 기술적 과정: 습윤 과립화, 무수 과립화, 및 직접적인 압착이다.

그러나, 신규한 TB 치료(제)의 제조를 위한 신규 방법이 제안된다.

이러한 목적을 위한, 최적 기술은 혼합, 습윤화, 과립화, 건조, 더스팅(dusting), 및 타정(tabletting)을 포함하는 습윤 과립화 공정이다[참조: Dosage Form technology, Ed. L.A. Ivanova, Moscow: Meditsina, 1991 , vol. 2, p. 142, 223.].

당해 방법은:

(a) 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 콜로이드성 이산화규소, 크로스포비돈, 스테아르산마그네슘, 포비돈, 미세결정설 셀룰로즈, 하이프로멜로즈(하이드록시프로필 메틸셀룰로즈), 활석, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 이산화티탄, 및 황색 산화철의 분말을 체(sieve)를 통해 별도로 거르는 단계;

(b) 습윤제를 제조하기 위해, 정제된 냉수 및 포비돈을 반응기 속에 두고 30분 동안 60℃에서 담황색의 투명한 균질 용액이 수득될 때까지 혼합하는 단계;

(c) 타정용 덩어리를 제조하기 위해, 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 및 미세결정성 셀룰로즈를 15분 동안 혼합한 후, 습윤제를 가하고 단일의 균질한 덩어리가 수득될 때까지 적어도 15분 동안 혼합하는 단계;

(d) 단계 (c)에서 수득된 덩어리를 습윤 과립화에 적용시키는 단계;

(e) 단계 (d)에서 수득된 습윤 과립화된 물질을 20분 동안 0.2 mPa 및 55±2℃에서 잔류 습윤 내용물이 1.0 내지 2.0%가 될 때까지 건조시키는 단계;

(f) 단계 (e)에서 수득한 건조된 과립화된 물질을 더스팅 및 무수 과립화에 적용시키고, 여기서 이를 비브로시브 호퍼(vibrosieve hopper)내에 둔 후 항부착제(에어로실, 크로스포비돈, 스테아르산마그네슘)를 혼합기에 넣어, 분진 생성을 피하고, 15분 동안 혼합하여 타정용 덩어리를 수득하는 단계;

(g) 단계 (f)에서 수득된 타정용 덩어리를 정제 프레스(tablet press) 속에서 압착시키는 단계;

(h) 정제 코어를 하이프로멜로즈 혼합물, 황색 산화철, 마크로골, 활석, 프로필렌 글리콜, 및 이산화티탄을 포함하는 수성 현탁액으로 피복시켜 최종 생성물을 수득하는 단계를 포함한다.

최종 정제는 타원형, 양볼록형(biconvex)이며, 황색 내지 암황색 필름으로 피복시킨다. 깨진 경우, 각각의 정제의 파열 부분은 담황색 내지 녹-황색이다.

약물 수율은 99.47%이다. 당해 방법을 사용하여, 최대 이러한 수율을 수득하는 것이 가능하다.

신규한 TB 치료의 제조를 위한 제2 방법이 또한 제안된다.

이는 혼합, 습윤, 과립화, 목적한 크기까지 롤링(rolling), 피복 및 건조를 포함하는 직접적인 압착 및 습윤 과립화 과정을 포함한다[참조: Dosage Form technology, Ed. L.A. Ivanova, Moscow: Meditsina, 1991 , vol. 2, p. 142, 223].

여기서, 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트는 콜로이드성 이산화규소, 미세결정성 셀룰로즈, 및 에틸셀룰로즈와 합하고; 혼합된 물질은 3.0 내지 5.0%의 포비돈 및 30.0 내지 35.0 %의 당 시럽의 수용액과 혼합하고; 롤링한다. 과립은 40 내지 45℃에서 잔류 습윤 함량이 1.5 내지 4.5 %가 될 때까지 건조된다.

과립 코어는 확립된 기술을 사용하여 피복하며, 여기서 메타크릴산-에틸 아크릴레이트 공중합체의 20% 수용액 및 활석과 산화철의 안료 현탁액이 사용된다.

다른 TB 약물과 함께 폐 및 폐외 TB의 모든 형태를 치료하고 예방하는 방법은 본원에 요약된 신규 의약에 상세히 설명되어 있다.

당해 치료 요법하에서, 약물은 경구 또는 비경구(피하, 정맥내, 근육내, 복강내)로 20 mg/kg (1,200 mg/kg)의 단일 1일 투여량에서, 30 mg/kg (1 ,800 mg/일)의 최대 단일 투여량으로 투여할 수 있다.

엠. 투베르쿨로시스에서 약물 내성의 발달을 지연시키기 위해, 약물을 다른 TB 약물 또는 이들의 조합물(이소니아지드, 피라지노미드, 리팜피신, 리파부틴, 아미카신, 에탐부톨, 플루오로퀴놀론 항생제)와 함께 처방된다.

신규한 치료의 생물학적 활성

신규한 치료의 항결핵 활성을 연구하기 위한 물질 및 방법

1. 시험관내 활성의 평가(미생물의 배양 및 방법)

다음 미생물 균주가 사용되었다:

1) 연구기관(Tarasevich State Scientific Research Institution for Standardization and Control of Biomedical Preparations)으로부터 입수되고 현재 TB 약물에 대해 민감성인, 마이코박테리움 투베르쿨로시스 복합체로부터의 실험실 시험 균주:

- 엠. 투베르쿨로시스 에르드만(M. tuberculosis Erdman);

- 엠. 투베르쿨로시스 H37Rv;

- 엠. 투베르쿨로시스 "아카데미아(Academia)";

- 엠. 보비스 보비누스(M. bovis bovinus) 8;

2) 새로이 진단된 TB를 지닌 환자로부터 분리된 다중 약물 내성을 지닌 배양물(14개 균주):

- 이소니아지드(10㎍/ml), 리팜피신(40 ㎍/ml), 및 스트렙토마이신(50㎍/ml)에 대해 내성인 5419번 StPIP¹;

- 이소니아지드(1㎍/ml), 리팜피신(40㎍/ml), 스트렙토마이신(5 및 10 μg/ml), 리파부틴(40㎍/ml), 에탐부톨(22㎍/ml)에 대해 내성인 2483번 StPIP;

- 이소니아지드(1㎍/ml), 리팜피신 (20 및 50㎍/ml), 스트렙토마이신(50 μg/ml), 카나마이신(30㎍/ml), 에탐부톨(2㎍/ml), 에티온아미드(30㎍/ml)에 대해 내성인 3485번 및 3589번 StPIP;

- 이소니아지드(1 및 25㎍/ml), 리팜피신 (20 및 50㎍/ml), 스트렙토마이신 및 카나마이신 (각각 30 및 50㎍/ml), 에티온아미드(30㎍/ml)에 대해 내성인 3019번 StPIP;

- 이소니아지드 (1μg/ml), 리팜피신 (20 및 50 μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml), 카나마이신 및 에탐부톨 (30 μg/ml)에 대해 내성인 3655번 StPIP;

- 이소니아지드 (1μg/ml), 리팜피신 (20 및 50μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml), 카나마이신 (30 μg/ml)에 대해 내성인 3689번 StPIP;

- 이소니아지드 (1 μg/ml), 리팜피신 (20 및 50 μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml), 카나마이신 및 에티온아미드 (30 μg/ml)에 대해 내성인 3910번 StPIP;

- 이소니아지드 (1 μg/ml), 리팜피신 (20 μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml), 카나마이신 (30 μg ml), 에탐부톨 (2㎍/ml)에 대해 내성인 1201번 StPIP;

- 이소니아지드 (1 μg/ml), 리팜피신 (20 및 50 μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml)에 대해 내성인 41번 및 779번 StPIP;

- 리팜피신 (20 μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml)에 대해 내성인 1081번 StPIP;

- 이소니아지드 (1 μg/ml), 리팜피신 (20 μg/ml), 스트렙토마이신 (50 μg/ml), 카나마이신 및 에티온아미드 (30 μg/ml)에 대해 내성인 1719번 및 1279번 StPIP;

3) 항미생물 제제에 대해 민감성인 비특이적인 미생물(StPIP, Roszdrav의 컬렉션으로부터):

- 그람-음성 바실러스 이. 콜라이;

- 그람-양성 코키(cocci): 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 스트렙토코쿠스 아우레우스(Streptococcus aureus), 코리네박테리움 슈도디프테리쿰(Corynebacterium pseudodiphtericum)(디프테로이드(diphtheroid)).

페클로존의 항미생물 활성은 시험 균주의 생물학적 특성에 따라 영양 배지 속에서 이중 일련 희석의 일반적인 방법을 사용하여 연구하였다:

- 10% 정상 혈청을 함유하는 소톤 합성 배지(Soton's synthetic medium)(마이코박테리아의 경우);

- 당 브로쓰(그람-양성 및 그람-음성 세균의 경우).

미생물 현탁액을 5 x 10⁶ 세포/ml의 작업 농도에서 즉석으로 제조하였다.

퍼클로로존 투여량은 100 내지 0.19 ㎍/ml의 범위에서 연구되었으며, 3회의 반복 시험을 각각의 배양물에 대해 수행하였다. 시험 균주의 현탁액의 0.2ml의 시료를 각각의 시험 및 대조군 튜브에 가하였다: 표면 플레이팅 방법(surface plating method)을 마이코박테리아 현탁액에 대해 사용하고 딥 플레이팅 방법(deep plating method)을 비특이적인 세균의 현탁액에 대해 사용하였다. 비특이적인 세균 성장 및 마이코박테리아 성장을 각각 24시간 및 7 내지 10일 후에 측정하였다. 활성의 기준은 세균 성장을 완전히 억제하는 배지 중 신규 치료의 최저 농도(최소 억제 농도, MIC, ㎍/ml)이었다.

TB 약물에 민감성인 균주 엠. 보비스 보비누스(M. bovis bovinus) 8을 결핵의 실험 모델에서 사용하였다.

2. 신규 치료의 치료학적 효과의 평가

당해 목적을 위해, 치료 효능의 지수(index of treatment effectiveness: ITE)(%)를 사용하였다. ITE는 대조군 그룹 및 신규 치료를 제공받은 동물에서 TB 감염의 중증도와 비교함을 포함하는, 상대적인 변화이다. 이는 다음 식으로 계산한다:

상기식에서,

n_c 및 n_t는 각각 대조군 및 시험 그룹에서 평균값이다.

양성 ITE(플러스-효과)는 신규 치료와 조합된 TB 약물의 칙료학적 활성에 있어서의 증가 또는 유병률에 있어서의 감소를 나타낸다.

음성 ITE(마이너스-효과)는 신규 치료와 조합된 TB 약물의 치료학적 활성에 있어서의 감소 또는 유병률에 있어서의 증가를 나타낸다.

비교 약물의 활성을 평가하는 경우, ITE는 유사한 방식으로 계산되었으며 일반적인 기호(약물명의 첫번째 문자)를 사용하여 지정한다.

치료학적 효과의 변화에 있어서 관계 정도는 Y 및 X의 순위 상관계수(r) 및 회귀 계수(regression coefficient)를 사용하여 측정하였다. 당해 목적을 위해, 스튜던트-피셔 방법(Student-Fisher method)을 사용하였다.

2. 신규 치료의 시험관내 항미생물 활성

현재의 TB 약물에 대해 민감성인, 마이코박테리움 투베르쿨로시스 복합체로부터의 시험 균주의 성장에 있어서 신규 치료의 효과에 대한 데이타는 표 1에 제공된다.

마이코박테리아의 약물-민감성 시험 균주의 성장에 있어서 신규 치료의 효과(마이코박테리아 현탁액 밀도는 10⁶ 세포/ml이다)

배지에서 신규 치료의 농도 (㎍/ml)	마이코박테리아 성장의 정도
배지에서 신규 치료의 농도 (㎍/ml)	엠. 보비스 보비누스 8	엠. 투베르쿨로시스 H37RV	엠. 투베르쿨로시스 에르드만	엠. 투베르쿨로시스 "아카데미아"
100	---	---	---	---
50	---	---	---	---
25	---	---	---	---
12.5	---	---	---	---
6.25	---	---	---	---
3.125	---	++	---	++
1.56	---	+++	+	+++
0.78	+	+++	++	+++
0.39	++	+++	++	+++
0.19	++	+++	++	+++
배양 대조군	+++	+++	+++	+++

표 1에서 알 수 있는 바와 같이, 신규 치료는 1.56 ㎍/ml 내지 6.25 ㎍/ml 범위의 농도에서 시험 균주의 성장을 억제하였다. 약물은 엠. 보비스 보비누스 8에 대해 최대 억제 활성을 나타내었다. 마이코박테리아 성장(++)의 주요 억제는 0.19㎍/ml의 농도에서 검출되었고; 완전한 억제는 1.56 ㎍/ml의 농도에서 검출되었다. 다음 균주는 억제 효과의 강하하는 순서로 제공된다:

· 엠. 투베르쿨로시스 에르드만(MIC = 3.125 μg/ml)

· 엠. 투베르쿨로시스 H37RV u 엠. 투베르쿨로시스 "아카데미아" (MI06.25 ㎍/ml)

그람-양성 코키(스타필로코쿠스 아우레우스, 스트렙토코쿠스 아우레우스) 및 그람-양성 및 그람-음성 바실러스(이. 콜라이 및 디프테로이드)에 대한 퍼클로존의 활성을 연구하여 퍼클로존의 항미생물 활성의 범위를 측정하였다. 연구의 결과를 표 2에 제공한다.

그람(+) 및 그람(-) 미생물의 성장 시험 균주에 있어서 신규 치료의 효과(미생물 현탁액 밀도는 10⁶ 세포/ml이다)

배지에서 신규 치료의 농도 (㎍/ml)	시험 균주의 성장의 정도
배지에서 신규 치료의 농도 (㎍/ml)	스타필로코쿠스 아우레우스	스트렙토코쿠스 아우레우스	이. 콜라이	디프테로이드
100	+++	+++	+++	+++
50	+++	+++	+++	+++
25	+++	+++	+++	+++
12.5	+++	+++	+++	+++
6.25	+++	+++	+++	+++
3.125	+++	+++	+++	+++
1.56	+++	+++	+++	+++
0.78	+++	+++	+++	+++
0.39	+++	+++	+++	+++
0.19	+++	+++	+++	+++
배양 대조군	+++	+++	+++	+++

표 2로부터 알 수 있는 바와 같이, 배지 중의 고농도(100㎍/ml)에서도, 신규 치료는 그람-양성 및 그람-음성 미생물의 성장에 영향을 미치지 않았다.

약물-민감성 마이코박테리아에 대한 신규 치료의 억제 활성을 14개의 임상 분리체에서 연구하였으며, 이중 2개(14.3%)의 분리체가 6개의 TB 약물에 대해 내성이었고, 7개(50%)가 5개의 TB 약물에 대해, 1개(7.1 %)가 4개의 TB 약물에 대해, 3개(21.4%)가 3개의 TB 약물에 대해, 및 1개(7.1%)가 2개의 TB 약물에 대해 내성이었다(참조: 표 3).

엠. 투베르쿨로시스의 약물-내성 임상 분리체의 성장에 있어서 신규 치료의 효과(마이코박테리아 현탁액 밀도는 5 x 10⁶개 미생물 세포/ml이다)

엠. 투베르쿨로시스의 시험 분리체	최소 억제 농도(MIC, ㎍/ml)
6개의 TB 약물 번호 N3485에 대한 내성	6.25
6개의 TB 약물 번호 3589에 대한 내성	6.25
5개의 TB 약물 번호 2485에 대한 내성	50
5개의 TB 약물 번호 1201에 대한 내성	6.25
5개의 TB 약물 번호 3019에 대한 내성	3.125
5개의 TB 약물 번호 3655에 대한 내성	3.125
5개의 TB 약물 번호 3910에 대한 내성	3.125
5개의 TB 약물 번호 1719에 대한 내성	3.125
5개의 TB 약물 번호 1279에 대한 내성	3.125
4개의 TB 약물 번호 3689에 대한 내성	6.25
3개의 TB 약물 번호 5419에 대한 내성	3.125
3개의 TB 약물 번호 779에 대한 내성	1.56
3개의 TB 약물 번호 41에 대한 내성	3.125
2개의 TB 약물 번호 1081에 대한 내성	1.56

시험들은 신규한 치료가 모든 약물-내성 임상 분리체의 성장을 억제하였음을 나타내었다:

* 14.3% (2개 균주) - 1 .56 ㎍/ml의 투여량에서;

* 50.0% (7개 균주) - 3.125㎍/ml의 투여량에서;

* 28.6% (4개 균주) - 6.25 ㎍/ml의 투여량에서;

* 7.1% (1개 균주) - 50.0 ㎍/ml의 투여량에서.

특히, 신규 치료는 5 및 6개 TB 약물에 대해 내성인 균주에 대해 효과적이었으며, 여기서 균주의 88.8%에 대한 MIC는 3.125 내지 6.25㎍/ml이었다.

따라서, 시험관내 연구는, 신규 치료가:

· 엠. 투베르쿨로시스에 대해서만 선택적인 항미생물 활성을 나타내었고;

· 엠. 투베르쿨로시스의 약물-민감성 및 약물-내성 균주 둘다에 대해 현저한 항투베르쿨로시스 활성을 가졌음을 나타내었다.

1.2 마우스에서 실험적 결핵의 단독치료요법으로 사용된 신규 치료의 효능

당해 연구는, 체중이 19 내지 20g인 200마리의 새끼를 갖지 않은 수컷 마우스에서 수행하였다. 이들 마우스에서, 균주 엠. 보비스 보비누스 8은 일반화된 결핵의 임상 특징을 유발하였고, 염증의 특징적인 초점이 감염 후 11일째에 가시화되었다. 당일로부터 시작하여, 연구된 약물은 시험 동물에게 투여되었다.

감염 후 52일째에, 대조군 그룹(치료하지 않은 감염된 동물)에서 치사율은 95.8%(표 4)이었다.

10, 20, 및 30 mg/kg의 투여량에서, 신규 치료는 치사율을 각각 31.6%, 73.9%, 및 97.5% 까지 감소시켰다. 약물의 보호 효과는 또한 감염된 마우스에서 체중 손실을 감소시키는 것으로 관찰된다. 10, 20, 및 30 mg/kg의 투여량에서, 약물은 체중 손실을 각각 5.3%, 21.5%, 및 19.0%까지 감소시켰다(표 4).

엠. 보비스 보비누스로 감염된 마우스에서 치사율 및 체중 변화로 측정된, 신규 치료의 보호 효과

그룹 번호	실험 조건	치사율		체중
그룹 번호	실험 조건	%	ITE%	초기 %	ITE%
2	치료하지 않은 감염된 동물 n=24	95.8	0	77.8	0
3	신규 치료 10mg/kg, 경구 n=16	62.5	+31.6	81.9	+5.3
4	신규 치료 20mg/kg, 경구 n=16	25.0	+73.9	94.5	+21.5
5	신규 치료 30mg/kg, 경구 n=16	2.4	+97.5	92.6	+19.0

주: ITE = 치료 효능의 지수

따라서, 실험적 결핵을 지닌 마우스에서 단독치료요법으로서 사용된 약물의 고 보호성 및 치료학적 특성은, 이것이 효과적인 항마이코박테리아 치료법(remedy)으로 고려될 수 있음을 나타낸다. 이들 결과는 균주 엠. 보비스 보비누스 8의 시험관내 성장을 억제하는 약물의 능력과 일치한다(표 1).

2. 토끼에서 실험적 결핵에 있어서 단독치료요법으로 사용된 신규 치료의 효능

당해 연구는 엠. 보비스 보비누스 8로 감염된 18마리의 수컷 친칠라(chinchilla) 토끼에서 귀 모세 정맥(marginal auricular vein)에서 수행하였다. 감염일로부터 시작하여, 신규 치료를 경구로 토끼(n=6)에게 20 mg/kg의 투여량으로 2개월 동안 투여하였다. 비교 그룹: 치료하지 않은 감염된 토끼(감염 대조군, n=6) 및 이소니아지드(15 mg/kg, 경구, n=6)로 치료된 감염된 토끼. 실험 결과는 표 5에 제공한다.

엠. 보비스 보비누스 8로 감염된 토끼에서 치사율 및 체중에 있어서의 변화에 의해 측정된, 신규 치료의 보호 효과

그룹 번호	실험 조건	치사율		체중
그룹 번호	실험 조건	초기 수의 %	ITE%	초기 %	ITE%
1.	감염 대조군 n=6	100	0	-27.6	---
2.	이소니아지드 15mg/kg, 경구 n=6	0	+100.0	-6.99	+74.67
3.	신규 치료 20mg/kg, 경구 n=6	0	+100.0	-7.13	+77.17

표 5로부터 알 수 있는 바와 같이, 이소니아지드와 비교하여, 약물은 TB 감염으로부터의 토끼 사망을 예방하고 이들의 체중을 증가(평균 77.17% 대 74.67%)시키는데 보다 효과적이었다.

2.1. 마우스에서 실험적 결핵에 있어서 TB 약물의 치료요법에 있어서 신규 치료의 효과

당해 연구는 250 마리의 새끼를 갖지 않은 수컷 마우스에서 수행하였다. 6개의 조합을 상이한 특이적 활성의 TB 약물을 사용한 신규 치료(20 mg/kg, 경구)를 비교하였다. 치료 그룹에게 시험 TB 약물을 사용한 단독치료요법을 평균 치료학적 투여량으로 제공하였다. 모든 그룹에서, 치료는, 폐내 특이적인 염증 변화가 감염 대조군 그룹으로부터의 마우스에서 부검으로 확인된 경우, 감염 후 12일째에 시작하였다. 결과는 치료 42일(6주) 후 평가하였다.

기관 손상의 중증도에 의해 측정된 것으로서, TB 약물의 치료학적 효능에 있어서 신규 치료의 효과는 시험 약물의 특성에 따라 변하였다(표 6). TB 약물을 신규 치료와의 상호작용에 따라 3개 그룹으로 나누었다.

그룹 1. 신규 치료와의 상승적 상호작용(기관 손상의 지수에 의해 반영된 증가된 치료학적 효능)을 갖는 TB 약물:

· 이소니아지드: 치료학적 효능은 평균 13.9%로 증가하였으며, 3.6%(간 중량의 계수에 있어서의 감소)로부터 25%(비장에서 CPU 수준의 감소)로 변하였다;

· 아미카신: 치료학적 효능은 평균 11.34%로 증가하였으며, 34.6%(간 중량의 계수에 있어서의 감소, p < 0.001)로부터 1.8%(폐 손상의 지수에 있어서의 감소)로 변하였다.

그룹 2. 기관 손상의 대부분의 지수(5개 중 3개)에 의해 측정된 것으로서, 증가된 치료학적 효능을 제공하는 TB 약물:

· 리팜피신: 치료학적 효능은, CFU 수준이 6.19%까지 증가하였지만, 폐(1 8.2%까지, p < 0.05), 비장(34.6%까지, p < 0.01 ), 및 간(1.6%까지) 중량의 계수에 있어서의 감소로 인하여 9.66% 까지 증가하였다;

· 리파부틴: 치료학적 효능은, 간 중량의 계수 및 폐 손상의 지수(각각 0.4% 및 7.4%) 둘다에서 증가하였지만, 엠. 투베르쿨로시스의 폐(12.4% 까지) 및 비장(20.6% 까지, p < 0.05) 중량의 계수에 있어서의 감소로 인하여, 7.68%까지 증가하였다;

· 에탐부톨: 치료학적 효능은, 폐 손상의 지수 및 폐 중량의 지수(각각 4.0 및 3.1%까지) 둘 다에서 증가되었지만, 비장(22.1%까지) 및 간(8.9%까지) 중량의 계수 및 비장에서 CFU 수준(33.3% 까지)에 있어서의 감소로 인하여 11.44%까지 증가하였다.

그룹 3. 길항 방식의 신규 치료로 작용하는 TB 약물:

· 오플록사신: 치료학적 효능은, 폐 손상의 지수에 있어서 2.6%까지의 증가를 제외하고는, 4.65% 내지 11.9%로 변하는 지수에 있어서의 감소와 함께, 6.2%까지 감소하였다.

시험 그룹에서 복강 대식구(pMP)의 식세포 활성이 표 7에 제공된다. 당해 표로부터 알 수 있는 바와 같이, 신규 치료를 사용한 단독치료요법 동안 pMP의 평균 대식세포 활성은 완전한 마우스의 것과 유사하였다(132.41 대 154.97). 신규한 치료는 단독 치료요법 동안 식균작용의 유효성이 감소한 약물들을 활성화하였다. 신규 약물이 리팜피신(1.4배 증가, 71.43로부터 99.12로), 리파부틴(1.3배 증가, 66.88로부터 83.55로), 및 오플록사신(1.2배 증가, 95.14로부터 111.66으로)과 함께 사용되는 경우 식균작용은 활성화되었다. pMP 활성은, 신규 약물이 이소니아지드(1.2배 감소, 77.66으로부터 66.54로), 에탐부톨(1.3배 감소, 106.35로부터 81 .95로), 및 아미카신(2.8배 감소, 193.42로부터 68.29로)과 함께 사용되는 경우 감소하였다.

단독 치료요법으로서 및 신규 치료와 함께 사용된, 6개의 TB 약물에 대해 수득된 형태학적 지수는 표 7에 제공된다. 후자는, 리팜피신, 이소니아지드, 오플록사신, 에탐부톨 및 아미카신과 조합되는 경우, 폐 손상의 지수를 각각 16.9, 10.1, 3.24, 3.19, 및 2.56%까지 증진시켰다. 폐 손상의 지수는, 신규 치료가 리파부틴과 함께 사용된 경우에만 증가(15.9% 까지)하였다.

상관 분석을 사용한 총괄적인 시험에 의해 측정된 것으로서, 신규 치료와 함께 사용된 이들 약물의 치료학적 효능에 따른 TB 약물 분류는 표 8에 제공된다. 7개의 손상 시험(20개 경우)에서 최대 양성 효과를 지닌 3개의 조합물이 존재하였다. 이들 조합물 중에서, 선도하는 조합물은 리파부틴 + 신규 치료 및 피팜피신 + 신규 치료(7개 경우에서 각각)이었다. 거의 흔치않은 조합물은 아미카신 + 신규 치료(4개 경우) 및 이소니아지드 + 신규 치료(2개 경우)이었다. 약한 치료학적 효능은 오플록사신 또는 에탐부톨과 신규 치료의 조합물의 경우 관찰되었다.

조합물에 사용되는 경우 TB 약물의 치료학적 효능에 있어서 신규 치료의 효과(치료 42일째)

그룹번호	실험조건	기관 중량의 계수			비장에서 CFU수준	폐 손상지수	유행의 평균 지수	평균 ITE(%)
그룹번호	실험조건	폐	비장	간		폐 손상지수	유행의 평균 지수	평균 ITE(%)
1	2	3	4	5	6	7	8	9
4 n=13	리팜피신 10mg/kg, 경구	1.98±0.1	1.3±0.11	5.6±0.1	113.0±36.9	2.13±0.08	24.8	-
5 n=12	신규치료, 20mg/kg, 경구+리팜피신	1.62±0.14 p₄ _-5<0.05	0.85±0.08 p₄ _-5<0.01	5.51±0.2	120.0±21.46	2.13±0.07	26.02	-
5 n=12	ITE(%)	+18.2	+34.6	+1.6	-6.19	0	-	+9.66
6 n=13	이소니아지드, 10mg/kg, s/c	1.74±0.08	1.54±0.11	5.57±0.21	160.0±21.46	2.29±0.04	34.2	-
7 n=15	신규치료+이소니아지드	1.58±0.12	1.3±0.13	5.37±0.19	120.0±21.46	1.92±0.06 p₇ _-6<0.001	26.0	-
7 n=15	ITE(%)	+9.2	+15.6	+3.6	+25.0	+16.1	-	+13.9
8 n=12	리파부틴 8.5mg/kg, 경구	1.37±0.09	1.02±0.07	5.37±0.14	61.5±12.1	1.48±0.09	14.1	-
9 n=11	신규치료+리파부틴	1.2±0.16	0.81±0.06 p₉ _-8<0.05	5.39±0.2	53.4±31.11	1.59±0.09	12.5	-
9 n=11	ITE(%)	+12.4	+20.6	-0.4	+13.2	-7.4	-	+7.68
10 n=12	아미카신 20mg/kg, s/c	2.42±0.14	1.85±0.09	6.29±0.15	140.0±21.46	2.25±0.07	30.6±	-
11 n=12	신규치료+아미카신	2.08±0.21	1.21±0.07 p₁₁ _-10<0.001	5.89±0.19	140.0±21.46	2.21±0.12	30.3	-
11 n=12	ITE(%)	+14.0	+34.6	+6.3	0	+1.8	-	+11.34
12 n=7	에탐부톨 20mg/kg, 경구	3.27±0.38	3.08±0.57	8.08±0.52	180.0±21.46	2.48±0.08	39.4	-
13 n=12	신규치료+에탐부톨	3.37±0.19	2.4±0.2	7.39±0.21	120.0±21.46	2.58±0.05	27.1	-
13 n=12	ITE(%)	-3.1	+22.1	+8.9	+33.3	-4.0	-	+11.44
15 n=7	오플록사신 20mg/kg, 경구	3.87±0.28	2.44±0.19	7.1±0.9	200.0±0	2.7±0.11	43.2	-
16 n=12	신규치료+오플록사신	4.05±0.11	2.73±0.22	7.95±0.35	200.0±42.92	2.63±0.07	43.4	-
16 n=12	ITE(%)	-4.6	-11.9	-11.9	0	-2.6	-	-6.2

형태학적 활성에 의해 측정된, TB 약물의 활성에 있어서 신규 치료의 효과

그룹 번호	약물	부위의 점수 합
그룹 번호	약물	호흡하는 폐 조직	농밀한 림프구 침윤물	박리성 폐렴	다형세포 침윤물	폐 조직 합계
4	리팜피신	19.65	2.37	1.94	0	23.96
5	리팜피신+신규치료	17.9	3.63	2.7	0	24.23
	% ITE	-8.9	+53.1	+39.2	0	+1.1
8	리파부틴	23.27	0.53	0.16	0	23.96
9	리파부틴+신규치료	23.24	0.64	0	0	23.88
	% ITE	-0.13	+20.7	-100.0	-	-
6	이소니아지드	17.5	1.59	3.52	0.86	23.47
7	이소니아지드+신규치료	19.23	3.01	1.81	0	24.05
	% ITE	+9.89	+89.3	-48.6	-	-
9	아미카신	17.7	3.12	2.94	0	23.76
10	아미카신+신규치료	17.32	2.98	3.51	0.07	23.88
	% ITE	-2.1	-4.5	+19.4	-	-
12	에탐부톨	9.78	6.8	6.93	0.27	23.78
13	에탐부톨+신규치료	14.49	4.65	4.68	0.14	23.96
	% ITE	+48.14 -5	-31.6	-32.5	-	-
14	오플록사신	7.32	6.32	10.49	0.04	24.17
15	오플록사신+신규치료	8.95	3.47	11.18	0.42	24.02
	% ITE	+22.3	-45.1	+6.6	-	-

신규 치료와 함께 사용된 이들 약물의 치료학적 효능에 따른 TB 약물의 분류

손상 시험	신규 치료와 함께 사용된 TB 약물의 효과
	강화	약화
폐 중량의 계수	리팜피신 아미카신 리파부틴	오플록사신 에탐부톨
비장 중량의 계수	리팜피신 아미카신 리파부틴	오플록사신 에탐부톨
비장에 있어서 CFU 수준	리팜피신 아미카신 리파부틴	오플록사신
호흡하는 폐 조직 점수	리파부틴 리팜피신	오플록사신 에탐부톨
농밀한 림프구 침윤물 점수	리파부틴 아미카신 리팜피신	에탐부톨
박리성 폐렴 점수	리파부틴 이소니아지드 리팜피신	오플록사신 에탐부톨

따라서, 신규 치료는 현재의 TB 약물에 대해 민감성 또는 내성인 마이코박테리움 투베르쿨로시스에 대해 현저하고, 엄격하게 선택적인 억제 활성을 나타낸다. 신규 치료는 저 독성제이며 위장 점막의 자극없이 필수적인 기관 및 시스템에 대해 유의적인 구조적 및 기능적 손상을 유발하지 않는다.

신규 치료는 주로 기관생성 동안 투여되는 경우, 중간의 배아 독성을 나타내며, 동물의 개개 민감성에 따라 선택적인 활성을 갖는다. 신규 치료는 기관생성 동안 투여되는 경우 100 mg/kg의 투여량으로도(치료학적 투여량의 5배) 생명을 위협하지 않는 골격 기형의 형태의 기형발생 효과를 가지며, 흉골 및 사지의 골화, 및 피하 출혈을 지연시키는 것으로 여겨진다. 이는 태반 발달 및 성 형성에 있어서 변경을 유발하지 않는다. 신규 치료의 지속적인 투여는 동물에서 재생 기능 및 자손 발달에 있어 영향을 미치지 않는다.

신규 치료는 알레르기발생, 면역독성 및 돌연변이유발 특성을 가지지 않는다.

상기 데이타를 기준으로 하여, 원형 약물(prototype drug)과 비교하여 보다 높은 항결핵 활성(200배 높음) 및 보다 낮은 독성(2.4배로 낮음)을 지닌 신규 의약이 개발된 것으로 결론짓는 것이 타당하다.

다른 TB 약물(리파부틴, 리팜피신, 이소니아지드, 아미카신, 및 에탐부톨)과 함께 사용되는 경우, 신규 치료는 신규 치료만을 사용하는 단독치료요법과 비교하여, 치료학적 효능을 증가시켰다.

신규 치료는 저장 동안 안정하며, 이의 외관, 물리적 특징, 및 생물학적 특성은 3년 동안 안정하다.

바람직한 양태의 상세한 설명

다음 실시예는 본 발명의 양태의 가장 바람직한 변형을 설명하고(특허청구범위를 제한하지 않음) 신규 치료를 제조하기 위한 가능성을 입증한다.

실시예 1

제형은 정제 용량형이며 다음 조성을 갖는다(정제 코어의 중량%로 나타냄).

정제당 조성:

코어 조성:	% (mg)
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	8.0(23.2)	50.0(145.0)	68.97(200.0)	90(261.0)
콜로이드성 이산화규소	5.1(14.9)	2.78(8.05)	1.72(5.0)	0.56(1.61)
크로스포비돈	17.9(51.8)	9.72(28.19)	6.03(17.50)	1.94(5.64)
스테아르산마그네슘	2.59(7.5)	1.39(4.03)	0.86(2.50)	0.28(0.81)
포비돈	5.1(14.9)	2.78(8.05)	1.72(5.0)	0.56(1.61)
미세결정성 셀룰로즈	61.3(177.7)	33.34(96.68)	20.69(60.0)	6.66(19.3)
정제 코어 중량(mg):	290.0	290.0	290.0	290.0
피복 조성물:
하이프로멜로즈 E 5	0.12(0.35)	0.12(0.35)	0.12(0.35)	0.12(0.35)
하이프로멜로즈 E 15	2.07(6.0)	2.07(6.0)	2.07(6.0)	2.07(6.0)
황색 산화철	0.14(0.40)	0.14(0.40)	0.14(0.40)	0.14(0.40)
마크로골 6000	0.43(1.25)	0.43(1.25)	0.43(1.25)	0.43(1 .25)
활석	0.35(1.0)	0.43(1.25)	0.43(1.25)	0.43(1.25)
프로필렌 글리콜	0.17(0.50)	0.17(0.50)	0.17(0.50)	0.17(0.50)
이산화티탄	0.17(0.50)	0.17(0.50)	0.17(0.50)	0.17(0.50)
피복된 정제 중량(mg)	300.0	300.0	300.0	300.0

변형된 방출 정제 100, 200, 400, 800, 및 1000 mg

정제당 조성, mg:

4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	100.0	200.0	400.0	800.0	1000.0
콜로이드성 이산화규소	1.5	3.0	6.0	12.0	15.0
인산수소칼슘	12.5	25.0	50.0	100.0	125.0
포비돈	2.5	5.0	10.0	20.0	25.0
스테아르산마그네슘	1.5	3.0	6.0	12.0	15.0
메타크릴산암모늄 공중합체	12.5	25.0	50.0	100.0	125.0
활석	1.5	3.0	6.0	12.0	15.0
미세결정성 셀룰로즈	17.5	35.0	70.0	140.0	175.0
에틸셀룰로즈	0.5	1.0	2.0	4.0	5.0
정제 중량(mg)	150.0	300.0	600.0	1200.0	1500.0

장 피복된 정제 200, 400, 500, 600, 및 800 mg

정제당 조성, mg:

코어 조성:
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	200.0	400.0	500.0	600.0	800.0
콜로이드성 이산화규소	5.0	10.0	12.5	15.0	20.0
크로스포비돈	17.50	35.0	43.75	52.5	70.0
스테아르산마그네슘	2.50	5.0	6.25	7.5	10.0
포비돈	5.0	10.0	12.5	15.0	20.0
미세결정성 셀룰로즈	60.0	120.0	150.0	180.0	240.0
정제 코어 중량±5%	290.0	580.0	725.0	870.0	1160.0
피복 조성:
메타크릴산-에틸 아크릴레이트 공중합체	16	32	40	48	64
황색 산화철	2	4	5	6	8
마크로골	0.75	1.5	1.875	2.25	3
활석	7	14	17.5	21	28
트리에틸 아세테이트	4.25	8.5	10.625	12.75	17
장 피복된 정제 중량(mg)	320.0	640.0	800.0	960.0	1280.0

실시예 2

제형은 고체 용량형: 피복된 과립이다. 피복물을 적용시켜 저장 동안 조성물의 안정성을 제공하고 외관 및 관능적 특성을 향상시킨다.

피복된 과립 용량형

100g당 조성:

코어 조성:
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	5	50	70	80	90
슈크로즈	50.4	25.2	14	8.4	2.8
콜로이드성 이산화규소	3.6	1.8	1	0.6	0.2
포비돈	14.4	7.2	4	2.4	0.8
미세결정성 셀룰로즈	18	9	5	3	1
에틸셀룰로즈	3.6	1.8	1	0.6	0.2
과립 코어 중량:	95	95	95	95	95
피복물 조성:
메타크릴산 공중합체	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
마크로겔	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
황색 산화철	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
활석	0.85	0.85	0.85	0.85	0.85
트리에틸 아세테이트	0.75	0.75	0.75	0.75	0.75
피복된 과립 중량(mg)	100	100	100	100	100

피복 조성물(과립 코어의 중량%로 나타냄)은 다음과 같을 수 있다:

메타크릴산 및 에틸 아크릴레이트 공중합체: 3.0-4.0

트리에틸 아세테이트: 0.8 - 1.2

마크라골: 0.2-0.4

활석: 0.9-1.3

산화철 염료: 0.2-0.3

실시예 3

필제(pill) 100, 200, 300, 및 400 mg

필제당 조성:

4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	100.0	200.0	300.0	400.0
콜로이드성 이산화규소	2.5	5.0	10.0	10.0
슈크로즈	21.0	42.0	63.0	84.0
스테아르산마그네슘	1.2	2.4	3.6	4.8
포비돈	6.0	12.0	18.0	24.0
미세결정성 셀룰로즈	22.0	44.0	66.0	88.0
마크로겔	1.3	2.6	3.9	5.2
황색 산화철	1.0	2.0	3.0	4.0
활석	3.5	7.0	10.5	14
이산화티탄	1.5	3.0	4.5	6.0
피복된 필제 중량(mg):	160.0	320.0	480.0	640.0

실시예 4

캅셀제 50, 100, 200, 300, 및 400 mg

캅셀제당 조성:

성분명	단위, mg
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	mg	50.0	100.0	200.0	300.0	400.0
감자 또는 옥수수 전분	mg	4.0	8.0	16.0	24.0	32.0
콜로이드성 이산화규소	mg	0.5	1.0	2.0	3.0	4.0
크로스포비돈	mg	2.0	4.0	8.0	12.0	16.0
스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘	mg	0.5	1.0	2.0	3.0	4.0
미세결정성 셀룰로즈	mg	3.0	6.0	12.0	18.0	24.0
캅셀제 성분 중량:	mg	60.0	120.0	240.0	360.0	480.0
젤라틴 캅셀제	pcs.	1	1	1	1	1

성분명	단위, mg	%(mg)
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	mg	75 (180.0)	83.33 (200.0)	91.7 (220.0)
감자 또는 옥수수 전분	mg	13.3(24.0)	8.0(16.0)	3.6(8.0)
콜로이드성 이산화규소	mg	1.7(3.0)	1.0(2.0)	0.45(1.0)
크로스포비돈	mg	6.7(12.0)	4.0(8.0)	1.82(4.0)
스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘	mg	1.7(3.0)	1.0(2.0)	0.45(1.0)
미세결정성 셀룰로즈	mg	10.0(18.0)	6.0(12.0)	2.73(6.0)
캅셀제 성분 중량:	mg	240.0	240.0	240.0
젤라틴 캅셀제	pcs.	1	1	1

실시예 5

현탁제 용량형

경구 현탁제(100ml 바이알)용 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 분말 200 mg/5 ml, 300 mg/5 ml, 400 mg/5 ml

100 ml당 조성:

성분명	단위, mg	200mg/5MЛ	300mg/5MЛ	400mg/5MЛ
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	mg	4,000.0	6,000.0	8,000.0
콜로이드성 이산화규소	mg	40.0	60.0	80.0
β-사이클로덱스트린	mg	400.0	600.0	800.0
시트르산	mg	200.0	300.0	400.0
포비돈	mg	1,400.0	2,100.0	2,800.0
슈크로즈(또는 소르비톨)	mg	3,950.0	5,925.0	7,900.0
바닐라, 사과 또는 바나나 풍미	mg	10.0	15.0	20.0
현탁제용 분말의 중량:	mg	10,000.0±3%	15,000.0 ±3%	20,000.0±3%

성분명	단위 mg	%(MЛ)
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	mg	36 (3600.0)	40.0 (4000.0)	44 (4400.0)
콜로이드성 이산화규소	mg	1.19 (43.0)	1.0 (40.0)	0.82 (36.0)
β-사이클로덱스트린	mg	11.94 (430.0)	10.0 (400.0)	8.18 (360.0)
시트르산	mg	5.83 (210.0)	5.0 (200.0)	4.09 (180.0)
포비돈	mg	41.39 (1490.0)	35.0 (1400.0)	28.64 (1260.0)
슈크로즈(또는 소르비톨)	mg	116.94 (4210.0)	98.8 (3950.0)	80.91 (3560.0)
바닐라, 사과, 또는 바나나 풍미	mg	0.31 (11.0)	0.25 (10.0)	0.2 (9.0)
현탁제용 분말 중량:	mg	10,000.0	10,000.0	10,000.0
현탁제의 경우:
정제수	mg	90,000.9	90,000.0	90,000.0
현탁제 중량;	mg	100,000.0	100,000.0	100,000.0

모든 성분들 및 성분들의 비를 실험적으로 측정하여 최적화하며, 이는 주 약제 위원회(state pharmaceutical authority)의 요건을 충족시키는 TB 치료를 제조하는 것을 가능하도록 한다.

실시예 6

직장 좌제 50, 100, 200, 및 300 mg

성분명	단위 mg
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	mg	50.0 (46.0-54.0)	100.0 (95.0-105.0)	200.0 (190.0-210.0)	300.0 (285.0-315.0)
β-사이클로덱스트린	mg	40.0	80.0	160.0	240.0
글리세롤	mg	10.0	20.0	40.0	60.0
마크라골	mg	100.0	200.0	400.0	600.0
위텝솔(Witepsol) 좌제 기재	mg	400.0	800.0	1,600.0	2,400.0
좌제 중량	mg	600.0 (570.0-630.0)	1,200.0 (1,140.0-1,260.0)	2,400.0 (2,280.0-2,520.0)	3,600.0 (3,420.0-3,780.0)

실시예 7

(표적 첨가제: 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 44.5% w/w)

70.0 g의 수준에서 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 5.0 g의 미세결정성 셀룰로즈, 1.0 g의 콜로이드성 이산화규소, 및 1.0 g의 에틸셀룰로즈를 혼합기에 넣고 5 내지 10분 동안 25 rpm의 속도에서 혼합한다. 수득되는 혼합물에 4.0 g의 포비돈, 14.0 g의 슈크로즈, 및 28 ml의 물로 이루어진, 포비돈과 슈크로즈의 수용액을 가하고, 습윤 덩어리를 과립화기에 통과시키고; 습윤 과립을 롤링(rolling)하여 이들이 목적하는 크기가 되도록 하고 40 내지 45℃에서, 과립 중 잔류하는 수분 함량이 1.5 내지 4.5%로 될 때까지 건조시킨다 수득되는 과립 코어를 1.0 내지 3.0 mm의 체에 통과시킨다. 직경이 1.0 내지 3.0 mm인 과립 코어를 메타크릴산 공중합체를 기준으로 하여 제조된 현탁액으로 필름-피복한다.

총 0.85 g의 활석 및 0.2 g의 산화철 염료를 0.2 g의 마크로골 및 5 ml의 물과 혼합하여 크림-유사 조도(cream-like consistency)를 수득한 후 15ml의 물 속에 분산시킨 3.0 g의 메타크릴산의 공중합체와 혼합한다. 과립 코어가 45 내지 50℃로 가열되는 경우, 필름 피복을 일정하게 혼합하고 더운 공기로 동시 건조시키면서 수행하여 단일형 피복물을 지닌 과립 100.0g을 수득한다. 수득된 과립은 주 약제 위원회의 요건을 충족한다.

실시예 8

(표적 첨가제: 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 11.0% w/w)

표적 첨가제는 실시에 6과 동일하나, 성분들의 양은 상이하다.

90.0 g의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 1.0 g의 미세결정성 셀룰로즈, 0.2 g의 콜로이드성 이산화규소, 및 0.2 g의 에틸셀룰로즈의 체질한 분말(sieved powder)을 혼합기에 넣고 5 내지 10분 동안 25 rpm의 속도로 혼합한다. 수득되는 혼합물에 0.8 g의 포비돈, 2.8 g의 슈크로즈, 및 6 ml의 물로 이루어진, 포비돈과 슈크로즈의 수용액을 가하고, 습윤 덩어리를 과립화기에 통과시키고; 습윤 과립을 롤링하여 이들이 목적하는 크기가 되도록 하고 40 내지 45℃에서, 과립 중의 잔류하는 수분 함량이 1.5 내지 4.5%가 될 때까지 건조시킨다. 수득되는 과립 코어를 1.0 내지 3.0 mm의 체에 통과시킨다. 직경이 1.0 내지 3.0 mm인 과립 코어를 메타크릴산 공중합체를 기준으로 하여 제조된 현탁액으로 필름-피복한다.

총 0.85 g의 활석 및 0.2 g의 산화철 염료를 0.2 g의 마크로골 및 5 ml의 물과 혼합하여 크림-유사 조도를 수득한 후 15ml의 물 속에 분산시킨 3.0 g의 메타크릴산의 공중합체와 혼합한다. 과립 코어가 45 내지 50℃로 가열되는 경우, 필름 피복을 일정하게 혼합하고 더운 공기로 동시 건조시키면서 수행하여 균일한 피복물을 지닌 과립 100.0g을 수득한다. 수득된 과립은 황색 또는 적색이며, 형태가 둥글거나 불규칙하며, 주 약제 위원회의 요건을 충족한다.

실시예 9

(표적 첨가제: 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 10.0% w/w)

표적 첨가제는 실시에 6과 동일하나, 성분들의 양은 상이하다. 50.0 g의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 9.0 g의 미세결정성 셀룰로즈, 1.8 g의 콜로이드성 이산화규소, 및 1.8 g의 에틸셀룰로즈의 체질한 분말을 혼합기에 넣고 5 내지 10분 동안 25 rpm의 속도에서 혼합한다. 수득되는 혼합물에 7.2 g의 포비돈, 25.2 g의 슈크로즈, 및 50 ml의 물로 이루어진, 포비돈과 슈크로즈의 수용액을 가하고, 습윤 덩어리를 과립화기에 통과시키고; 습윤 과립을 롤링하여 이들이 목적하는 크기가 되도록 하고 40 내지 45℃에서, 과립 중의 잔류하는 수분 함량이 1.5 내지 4.5%으로 될 때까지 건조시킨다. 수득되는 과립 코어를 1.0 내지 3.0 mm의 체에 통과시킨다. 직경이 1.0 내지 3.0 mm인 과립 코어를 메타크릴산 공중합체를 기준으로 하여 제조된 현탁액으로 필름-피복한다. 총 0.85 g의 활석 및 0.2 g의 산화철 염료를 0.2 g의 마크로골 및 5 ml의 물과 혼합하여 크림-유사 조도를 수득한 후 15ml의 물 속에 분산시킨 3.0 g의 메타크릴산의 공중합체와 혼합한다.

과립 코어가 45 내지 50℃로 가열되는 경우, 필름 피복을 일정하게 혼합하고 더운 공기로 동시 건조시키면서 수행하여 단일형 피복물을 지닌 과립 100.0g을 수득한다. 수득된 과립은 주 약제 위원회의 요건을 충족한다.

실시예 10

모두 실시예 1에서와 같은 필요량을 취한 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 콜로이드성 이산화규소, 크로스포비돈, 스테아르산마그네슘, 포비돈, 미세결정성 셀룰로즈, 하이프로멜로즈, 활석, 마크로골, 프로필렌 글리콜, 이산화티탄, 및 황색 산화철의 분말을 독립적으로 체를 통해 이동시킨다

보습제를 제조하기 위해, 정제된 냉수 및 포비돈의 추정된 양을 반응기내로 도입시키고 60℃에서 30분 동안, 담황색 색상의 투명한 균질 용액이 수득될 때까지 혼합한다. 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 및 미세결정성 셀룰로즈의 추정된 양을 혼합기내에 두고 15분 동안 혼합한 후, 습윤제를 가하고 적어도 15분 동안 균일하고 균질한 덩어리가 수득될 때까지 적어도 15분 동안 혼합한다. 덩어리를 습윤 과립화에 적용시킨다. 습윤 과립화된 물질을 20분 동안 0.2 mPa 및 55±2℃에서 잔류하는 수분 함량이 1.0 내지 2.0으로 될 때까지 건조시킨다. 건조된 과립화된 물질을 더스팅(dusting) 및 건조 과립화에 적용시키고 바이브로시이크 호퍼(vibrosieve hopper) 속에 부은 후; 건조된 과립화된 물질 및 더스팅 분말(에어로실, 크로스포비돈, 및 스테아르산마그네슘)을 혼합기 속에 분진 생성을 방지하면서 넣고; 반-생성물을 15분 동안 혼합하여 타정용 덩어리를 수득한다. 수득되는 덩어리를 정제 프레스 속에서 압착시킨다.

정제 코어를 하이프로멜로즈 혼합물, 황색 산화철, 마크로골, 활석, 프로필렌 글리콜, 및 이산화티탄을 함유하는 수성 현탁액으로 필름 피복시켜 특허청구범위 청구항 1에서와 같은 신규한 치료제를 수득한다.

실시예 11

(표적 첨가제: 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 20.0% w/w)

200.0 g의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 16.0 g의 무수 감자 전분, 12.0 g의 미세결정성 셀룰로즈, 8.0 g의 크로스포비돈, 2.0 g의 콜로이드성 이산화규소, 및 2.0 g의 스테아르산마그네슘을 혼합기에 넣고 5 내지 10분 동안 50 rpm의 속도에서 활성 성분의 균일한 분포가 수득될 때까지 혼합한다. 혼합물 중의 수분 함량은 1 내지 3%이다. 수득되는 덩어리를 자동 캅셀 충전기(automatic capsule filling machine)에 넣고 캅셀 내로 충전시킨다. 캅셀에 부착된 느슨한 분진을 제거하고, 캅셀을 플라스틱병 또는 블리스터 팩(blister pack) 속에 패킹한다. 수율은 총 중량이 240.0 g 또는 0.24 g ± 10%이고, 각각의 캅셀이 0.20 g ± 10%의 활성 성분을 함유하는 1,000개의 캅셀의 신규 치료제이다. 수득된 캅셀제는 약제학적 제품의 모든 요건을 충족시킨다.

실시예 12

(표적 첨가제: 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 33.3% w/w)

표적 첨가제는 실시예 1과 동일한 양이지만, 옥수수 전분을 감자 전분대신 취하며 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트를 180 g의 양으로 취한다. 수율은, 총 중량이 240.0 g 또는 0.24 g ± 10%이고, 각각의 캅셀이 0.20 g ± 10%의 활성 성분을 함유하는 1,000개 캅셀의 신규한 치료제이다. 수득된 캅셀제는 약제학적 제품의 모든 요건을 충족시킨다.

실시예 13

(표적 첨가제: 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 9.1% w/w)

표적 첨가제는 실시예 1과 동일한 양이지만, 스테아르산칼슘을 스테아르산마그네슘대신 취하며 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트를 220 g의 양으로 취한다. 수율은, 총 중량이 240.0 g 또는 0.24 g ± 10%이고, 각각의 캅셀이 0.20 g ± 10%의 활성 성분을 함유하는 1,000개 캅셀의 신규한 치료제이다. 수득된 캅셀제는 약제학적 제품의 모든 요건을 충족시킨다.

실시예 14

좌제의 제조는 성형 공정을 포함한다. 성분들의 양을 계산하여 100개의 좌제의 수율을 갖도록 한다. 총 5.0 g의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 4.0 g의 β-사이클로덱스트린, 및 1.0 g의 글리세롤을 제분기(milller)에 넣고 30분 동안 분쇄한다. 수득되는 현탁액을 반응기 속에서 15.0 g의 좌제 기재 및 45℃로 가열시킨 마크로골과 함께 혼합한다. 수득되는 농축물을 냉각시킨 후 3시간 동안 3-롤러 연고 분쇄기(three-roller ointment grinder) 속에서 분쇄하여 신규 치료제의 요구된 분산제를 수득한다. 가공된 농축물을 35.0 g의 좌제 기재 및 마크로골과 48℃에서 균일한 덩어리가 수득될 때까지 혼합한다. 수득되는 혼합물을 주형 속에 붓고 패킹한다. 수율은 다음 요건을 충족시키는 100개 좌제이다: 덩어리의 평균 질량 및 균일성: 0.60 g ± 5%; 융점: 37℃ 이하; 좌제당 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트의 양: 0.05 (0.046-0.054).

실시예 15

4.0 g의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트, 0.40 g의 β-사이클로덱스트린, 및 1.40 g의 포비돈의 체질된 분말을 볼 분쇄기(ball mill) 속에 넣고 3시간 동안 분쇄한다. 수득되는 복합체에, 3.95 g의 슈크로즈, 0.20 g의 시트르산, 및 0.01 g의 바닐라 풍미의 체질된 분말을 가하고 1시간 동안 분쇄한다. 분쇄된 분말을 혼합기에 넣고 0.04 g의 콜로이드성 이산화규소와 함께 5 내지 10분 동안 50 rpm의 속도로 균일한 혼합물이 수득될 때까지 혼합한다. 수득되는 혼합물을 바이알(vial) 내로, 각각의 바이알 당 10.0g을 자동 충전시킨다. 바이알을 뚜껑으로 밀폐 밀봉시키고 박스 속에 5ml들이 스푼과 함께 패킹한다. 수득된 현탁액은 다음 요건을 충족시킨다: 바이알 함량의 변화: 9.7g 내지 10.3 g; 분말중 물 함량: 2% 이하; pH: 5 내지 8; 현탁액의 침강 안정성: 24 시간 이상.

경구 투여를 위해, 분말을 90 ml의 물로 용해시켜 표시하고 5 ml 스푼을 사용한다. 각각 100 ml의 현탁제는 20회 투여량을 함유하며, 각각 200 mg의 활성 성분 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트를 함유한다.

실시예 16

캅셀제 형태의 배합 제제 100 mg+100 mg, 150 mg+200 mg (리팜피신+퍼클로존)

캅셀당 조성:

성분명	단위, mg
4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트	mg	100.0	200.0
리팜피신	mg	100.0	150.0
감자 또는 옥수수 전분	mg	38.0	76.0
콜로이드성 이산화규소	mg	1.0	2.0
크로스포비돈	mg	4.0	8.0
스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘	mg	1.0	2.0
미세결정성 셀룰로즈	mg	6.0	12.0
캅셀 중량:	mg	250.0	450.0
젤라틴 캅셀	pcs	1	1

Claims

활성 성분 및 약제학적으로 허용되는 물질을 함유하는 결핵 치료제(tuberculosis treatment)로서, 여기서 활성 성분이 치료학적으로 효과적이고 안정한 양의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트인 결핵 치료제.
제1항에 있어서, 둘다 제형의 중량 %로 표시된 것으로서, 5.0-90.0% w/w의 4-티오우레이도-이미노메틸피리디늄 퍼클로레이트 및 100% w/w의 약제학적으로 허용되는 부형제를 함유하는 결핵 치료제.
제1항에 있어서, 정제 코어의 중량 %로 표현되는 양의:
- 슈크로즈: 3.1 - 50.4
- 포비돈: 0.9 - 14.4
- 미세결정성 셀룰로즈: 1.1 - 18.0
- 콜로이드성 이산화규소: 0.2 - 3.6
- 에틸셀룰로즈: 0.2 - 3.6을 함유하는 결핵 치료제.
제1항에 있어서, 이의 피복물이 정제 코어의 중량 %로 나타낸 양의:
- 메타크릴산 및 에틸 아크릴레이트 공중합체: 3.0-4.0
- 트리에틸 시트레이트: 0.8-1.8
- 마크라골: 0.2-0.4
- 활석: 0.9-1.3
- 산화철 염료: 0.2-0.3의 공중합체를 함유하는 결핵 치료제.
제1항에 있어서, 제1항에 따른 결핵 치료의 90 중량% 이하의 양의 적어도 하나 이상의 추가의 TB 제제를 함유하는 결핵 치료제.
제5항에 있어서, 추가의 TB 제제로서 이소니아지드, 피라진아미드, 리팜피신, 리파부틴, 아미카신, 에탐부톨, 및 플루오로퀴놀론 항생제 또는 이들의 조합물을 함유하는 결핵 치료제.
제1항에 있어서, 필름-피복된 정제, 조합된 정제, 캅셀제, 과립제, 좌제, 및 현탁제의 형태일 수 있는 결핵 치료제.
a) 타정용 정제 덩어리를 제조하는 방법이 습윤 과립화의 방법을 사용하고;
b) 정제 코어를 제조하는 방법이 압착 방법을 사용하며;
c) 필름을 피복하는 방법이 수성 현탁액 형태의 필름을 피복하는 방법을 사용하는, 활성 성분 및 표적 첨가제의 분말을 체질(sieving) 및 혼합하고 압착 또는 습윤화, 습윤 혼합물 과립화, 과립 건조, 건조 과립화, 더스팅(dusting), 정제 코어 형성, 및 필름-피복 공정을 포함하여, 제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 따른 결핵 의약을 제조하는 방법.
a) 과립을 제조하는 방법이 포비돈과 당 시럽의 혼합물에 이어 건조에 의한 과립의 확대 방법을 사용하고;
b) 필름을 피복하는 방법이 수성 현탁액의 형태로 필름을 피복하는 방법을 사용하여, 성분들을 혼합하고, 습윤화하며, 과립화하고, 롤링(rolling)하며, 필름-피복하고 건조하는 공정을 포함하는, 제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 따른 결핵 치료의 제조 방법.
제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 따른 결핵 치료를 치료학적 유효량으로 투여하여, 모든 형태의 폐 및 폐외 TB를 치료하고/하거나 예방하는 방법.
제10항에 있어서, 치료가 경구 또는 비경구 경로로 투여되는 방법.
제10항에 있어서, 제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 기술된 바와 같은 결핵 약물이 20 mg/kg의 단일 1일 투여량으로 투여되는 방법.