KR20130008570A

KR20130008570A - Ｃ형 간염의 치료를 위한 피라졸로피리다진 유도체

Info

Publication number: KR20130008570A
Application number: KR1020127024874A
Authority: KR
Inventors: 존 에프. 카도우; 리차드 프라시토
Original assignee: 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date: 2010-02-25
Filing date: 2011-02-23
Publication date: 2013-01-22
Also published as: WO2011106340A1; AU2011220915A1; MX2012009759A; EP2539340B1; EP2539340A1; CN102858777A; JP2013520507A; CN102858777B; US8324212B2; US20120046294A1

Abstract

본 개시내용은 하기 화학식 I의 화합물 (그의 염 포함) 뿐만 아니라 이 화합물을 사용하는 조성물 및 방법을 제공한다. 본 화합물은 C형 간염 바이러스 (HCV)에 대해 활성을 갖고, HCV에 감염된 것을 치료하는데 유용할 수 있다.
<화학식 I>

Description

Ｃ형 간염의 치료를 위한 피라졸로피리다진 유도체 {PYRAZOLOPYRIDAZINE DERIVATIVES FOR THE TREATMENT OF HEPATITIS C}

<관련 출원에 대한 상호 참조>

본 특허 출원은 2010년 2월 25일에 출원된 미국 가특허 출원 번호 61/308,084의 이점을 우선권 주장한다.

본 개시내용은 일반적으로 C형 간염 바이러스 (HCV)에 대해 활성을 갖고, HCV에 감염된 것의 치료에 유용한 신규한 화학식 I의 화합물 (그의 염 포함)에 관한 것이다. 본 개시내용은 또한 이들 화합물을 사용하는 조성물 및 방법에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스 (HCV)는 전세계적으로 대략 1억 7천만명 (인간 면역결핍 바이러스 제1형에 의한 감염자수의 약 5배)을 감염시킨 주요한 인간 병원체이다. 대다수의 이들 HCV 감염 개체에서는 간경변증 및 간세포 암종을 비롯한 심각한 진행성 간 질환이 발생한다 (문헌 [Lauer, G. M.; Walker, B. D. N. Engl. J. Med. 2001, 345, 41-52]).

HCV는 양성-가닥 RNA 바이러스이다. 추정되는 아미노산 서열의 비교 및 5'-비번역 영역에서의 광범위한 유사성을 기반으로, HCV는 플라비비리다에(Flaviviridae) 과 내의 별도의 속으로서 분류되어 있다. 플라비비리다에 과의 모든 구성원은, 중단되지 않는 단일 오픈 리딩 프레임의 번역을 통해 모든 공지된 바이러스-특이적 단백질을 코딩하는 양성 가닥 RNA 게놈을 함유하는 외피보유 비리온을 갖는다.

HCV 게놈 전체에 걸쳐 뉴클레오티드 및 코딩된 아미노산 서열 내에서 상당한 이질성이 발견된다. 적어도 6종의 주요 유전자형이 특성화되어 있고, 50종 초과의 하위유형이 기재되어 있다. HCV의 주요 유전자형은 전세계적으로 그의 분포가 상이하며, HCV의 유전적 이질성의 임상적 의미는 발병기전 및 요법에 대한 유전자형의 가능한 영향에 대한 수많은 연구에도 불구하고 파악되지 못한 채로 남아있다.

단일 가닥 HCV RNA 게놈은 길이가 뉴클레오티드 대략 9500개이고, 약 3000개 아미노산의 단일 거대 폴리단백질을 코딩하는 단일 오픈 리딩 프레임 (ORF)을 갖는다. 감염된 세포에서, 이 폴리단백질은 세포 및 바이러스 프로테아제에 의해 다중 부위에서 절단되어 구조적 및 비-구조적 (NS) 단백질을 생성한다. HCV의 경우에, 성숙 비-구조적 단백질 (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A 및 NS5B)의 생성은 2종의 바이러스 프로테아제에 의해 이루어진다. 첫번째 것은 메탈로프로테아제인 것으로 여겨지고, 이는 NS2-NS3 접합부를 절단하며; 두번째 것은 NS3의 N-말단 영역 내에 함유된 세린 프로테아제 (NS3 프로테아제라고도 지칭됨)로서, 이는 NS3-NS4A 절단 부위에서는 시스로, 및 나머지 NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B 부위에 대해서는 트랜스로 NS3 하류에서의 모든 후속 절단을 매개한다. NS4A 단백질은, NS3 프로테아제에 대한 보조인자로서 작용하고 NS3 및 다른 바이러스 레플리카제 성분의 막 국재화를 보조할 수 있는 복합 기능을 수행하는 것으로 나타났다. NS4A와의 NS3 단백질의 복합체 형성은 프로세싱 사건에 필요한 것으로 여겨지고, 모든 부위에서 단백질분해 효능을 증진시킨다. NS3 단백질은 또한 뉴클레오시드 트리포스파타제 및 RNA 헬리카제 활성을 나타낸다. NS5B (HCV 폴리머라제라고도 지칭됨)는 HCV의 복제에 관여하는 RNA-의존성 RNA 폴리머라제이다. HCV NS5B 단백질은 문헌 ["Structural Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides (Bressanelli; S. et al., Journal of Virology 2002, 3482-3492; 및 Defrancesco and Rice, Clinics in Liver Disease 2003, 7, 211-242]에 기재되어 있다.

현재, 가장 효과적인 HCV 요법은 환자의 40％에서 지속적인 효능을 나타내는, 알파-인터페론 및 리바비린의 조합을 사용한다 (문헌 [Poynard, T. et al. Lancet 1998, 352, 1426-1432]). 최근의 임상 결과는 PEG화 알파-인터페론이 단독요법으로서의 비변형된 알파-인터페론보다 우수함을 입증한다 (문헌 [Zeuzem, S. et al. N. Engl. J. Med. 2000, 343, 1666-1672]). 그러나, PEG화 알파-인터페론 및 리바비린의 조합을 포함하는 실험적 치료 요법으로도, 대다수의 환자에서는 바이러스 로드가 지속적으로 감소되지는 않는다. 따라서, HCV 감염의 치료를 위한 효과적인 치료제의 개발에 대한 명백하고 중요한 필요성이 존재한다.

HCV NS5B 억제제인 HCV-796은 환자에서 HCV RNA 수준을 감소시키는 능력을 나타내었다. 단일 작용제로서의 화합물로 치료하는 경우 투여 동안 바이러스 RNA 수준이 일시적으로 감소한 후에 되돌아왔지만, 인터페론 및 리바비린 형태인 표준 치유제와 조합된 경우에는 수준이 보다 크게 떨어졌다. 이 화합물의 개발은 조합 요법으로 확장하여 투여하는 중에 관찰된 간 독성으로 인해 중지되었다. 미국 특허 7,265,152 및 상응하는 PCT 특허 출원 WO2004/041201A2에 HCV-796 클래스의 화합물이 기재되어 있다.

본 발명은 기술적인 이점을 제공하며, 예를 들어 본 발명의 화합물이 신규하고 C형 간염에 대해 효과적이다. 추가로, 화합물은 제약 용도를 위한, 예를 들어, 작용, 결합, 억제 효능, 표적 선택성, 용해도, 안전성 프로파일 또는 생체이용률의 그의 메커니즘 중 하나 이상에 관한 이점을 제공한다.

<발명의 설명>

본 발명의 한 측면은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:

<화학식 I>

상기 식에서,

R¹은 할로, 알킬, 시클로알킬, 알콕시, 디옥소티아지닐, (R⁵)(R⁶)N,

, 피리디닐 또는 페닐이고, 여기서 상기 피리디닐 또는 페닐은 알킬, 히드록시알킬, 알콕시알킬, ((R⁷)(R⁸)N)알킬, 히드록시, 알콕시, (R⁷)(R⁸)N, 카르복시, 알콕시카르보닐 및 CON(R¹⁶)(R¹⁷)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되고, 여기서 상기 피리디닐 또는 페닐은 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬, 알콕시, 피리디닐, 페닐, 할로페닐, (할로)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 또는 (알콕시)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 치환기로 치환되고;

R²는 수소, 할로, 알킬, 시클로알킬, 알콕시 또는 (R⁵)(R⁶)N이고;

R³은 시아노, 알콕시카르보닐, (시클로알킬)옥시카르보닐, (알킬술포닐)아미노카르보닐, CON(R¹¹)(R¹²), (R¹³)(R¹⁴)NCONH, 트리아졸릴, 티아졸릴 또는 테트라졸릴이고;

R⁴는 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고;

R⁵는 수소, 알킬, 시클로알킬, (시클로알킬)알킬, 벤질, 알킬카르보닐, 할로알킬카르보닐, 페닐카르보닐, (알콕시페닐)카르보닐, 알킬술포닐, 페닐술포닐, (알콕시페닐)술포닐 또는 (할로알콕시페닐)술포닐이고;

R⁶은 수소, 알킬, 히드록시알킬 또는 알콕시알킬이거나; 또는

R⁵ 및 R⁶은 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 디옥소티아지닐이고;

R⁷은 수소 또는 알킬이고;

R⁸은 수소 또는 알킬이고;

R⁹는 수소 또는 알킬이고;

R¹⁰은 수소 또는 알킬이거나; 또는

R⁹ 및 R¹⁰은 함께 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌 또는 펜틸렌이고, 0 내지 2개의 플루오린 원자로 치환되고;

R¹¹은 수소 또는 알킬이고;

R¹²는 수소 또는 알킬이거나; 또는

R¹¹ 및 R¹²는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;

R¹³은 수소 또는 알킬이고;

R¹⁴는 수소 또는 알킬이거나; 또는

R¹³ 및 R¹⁴는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;

R¹⁵는 알킬 또는 시클로알킬이고;

R¹⁶은 수소, 알킬,

이고;

R¹⁷은 수소 또는 알킬이고;

R¹⁸은 수소, 할로, 알킬 또는 알콕시이고;

Ar¹은 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐이고; 0 내지 3개의 할로, 알킬, 할로알킬, 알콕시, (R⁷)(R⁸)N 또는 페닐 치환기로 치환된다.

본 발명의 또 다른 측면은

R¹이 피리디닐 또는 페닐이고, 카르복시, 알콕시카르보닐 및 CON(R¹⁶)(R¹⁷)로 이루어진 군으로부터 선택된 1개의 치환기로 치환되고, 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환되고;

R²가 수소, 할로, 알킬, 시클로알킬, 알콕시 또는 (R⁵)(R⁶)N이고;

R³이 CON(R¹¹)(R¹²)이고;

R⁴가 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고;

R⁹가 수소 또는 알킬이고;

R¹⁰이 수소 또는 알킬이거나; 또는

R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌 또는 펜틸렌이고;

R¹¹이 수소 또는 알킬이고;

R¹²가 수소 또는 알킬이거나; 또는

R¹¹ 및 R¹²가 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;

R¹⁶이 수소, 알킬 또는

이고;

R¹⁷이 수소 또는 알킬이고;

R¹⁸이 수소이고;

Ar¹이 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐이고; 0 내지 3개의 할로, 알킬, 할로알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 것인

화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

본 발명의 또 다른 측면은

R¹이 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 페닐이고;

R²가 수소이고;

R³이 CON(R¹¹)(R¹²)이고;

R⁹가 수소 또는 알킬이고;

R¹⁰이 수소 또는 알킬이거나; 또는

R¹¹이 수소 또는 알킬이고;

R¹²가 수소 또는 알킬이거나; 또는

R¹⁶이

이고;

R¹⁷이 수소 또는 알킬이고;

화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R¹이 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 페닐이고; R²가 수소이고; R³이 CON(R¹¹)(R¹²)이고; R⁴가 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고; R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌이고; R¹¹이 알킬이고; R¹²가 수소이고; R¹⁶이

이고; R¹⁷이 수소이고; Ar¹이 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R¹이 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기 및 1개의 알킬 치환기 및 0 내지 1개의 알콕시 치환기로 치환된 페닐이고; R²가 수소이고; R³이 CONHMe이고; R⁴가 모노플루오로페닐이고; R¹⁶이

이고; R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌이고; R¹⁷이 수소이고; Ar¹이 피리미디닐 또는 페닐인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R¹이 피리디닐 또는 페닐이고, 알킬, 히드록시알킬, 알콕시알킬, ((R⁷)(R⁸)N)알킬, 히드록시, 알콕시, (R⁷)(R⁸)N, 카르복시, 알콕시카르보닐 및 CON(R¹⁶)(R¹⁷)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되고, 여기서 상기 페닐 또는 피리디닐이 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬, 알콕시, 피리디닐, 페닐, 할로페닐, (할로)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 또는 (알콕시)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 치환기로 치환된 것인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R¹이 페닐이고, 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고, 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬, 알콕시, 피리디닐, 페닐, 할로페닐, (할로)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 또는 (알콕시)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 치환기로 치환된 것인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R¹이 페닐이고, 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고, 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 것인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R³이 CON(R¹¹)(R¹²)인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R³이 CON(H)(알킬)인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R⁴가 할로페닐인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 R⁴가 페닐 또는 모노플루오로페닐인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 Ar¹이 페닐인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 하기 화학식 Ia의 화합물이다.

<화학식 Ia>

R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷,R¹⁸ 또는 Ar¹을 비롯한 임의의 가변기의 임의의 범주는 가변기의 임의의 다른 경우의 범주와 독립적으로 사용될 수 있다.

달리 명시되지 않는 한, 이들 용어는 하기 의미를 갖는다. "알킬"은 1 내지 6개의 탄소로 구성된 직쇄형 또는 분지형 알킬 기를 의미한다. "알케닐"은 적어도 1개의 이중 결합을 갖는 2 내지 6개의 탄소로 구성된 직쇄형 또는 분지형 알킬 기를 의미한다. "시클로알킬"은 3 내지 7개의 탄소로 구성된 모노시클릭 고리계를 의미한다. "히드록시알킬", "알콕시" 및 치환된 알킬 모이어티를 갖는 다른 용어는 알킬 모이어티에 대해 1 내지 6개의 탄소 원자로 구성된 직쇄형 및 분지형 이성질체를 포함한다. "할로"는 할로로 규정된 치환기에서 치환된 퍼할로에 대해 치환된 모노할로로부터의 모든 할로겐화 이성질체, 예를 들어 "할로알킬" 및 "할로알콕시", "할로페닐", "할로페녹시"를 포함한다. "아릴"은 카르보시클릭 및 헤테로시클릭 방향족 치환기를 포함한다. 괄호 및 다중괄호가 사용된 용어는 당업자에게 결합 관계를 명확하게 하려는 의도이다. 예를 들어, ((R)알킬)과 같은 용어는 치환기 R로 추가로 치환된 알킬 치환기를 의미한다. 다중 고리계 (예를 들어, 비시클릭 고리계) 상의 가변기 위치에서의 결합에 대해 화학 도면으로 도시한 치환기는 이들이 부착된 것으로 그려져 있는 고리에 대한 결합을 의도하는 것이다. 예를 들어, 화학식 IV의 치환기 R¹ 및 R²는 화학식 IV의 티오펜 고리가 아닌 벤젠 고리에 대한 결합을 의도하는 것이다.

에틸렌은 에탄디일 또는 -CH₂CH₂-를 의미하고; 프로필렌은 프로판디일 또는 -CH₂CH₂CH₂-를 의미하고; 부틸렌은 부탄디일 또는 -CH₂CH₂CH₂CH₂-를 의미하고; 펜틸렌은 펜탄디일 또는 -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-를 의미한다.

디옥소티아지닐은

을 의미한다.

본 발명은 화합물의 모든 제약상 허용되는 염 형태를 포함한다. 제약상 허용되는 염은 반대이온이 화합물의 생리학적 활성 또는 독성에 유의하게 기여하지 않으며, 그 자체로 약리학적 등가물로서 작용하는 것이다. 이러한 염은 상업적으로 입수가능한 시약을 사용하여 통상의 유기 기술에 따라 제조할 수 있다. 일부 음이온 염 형태는 아세테이트, 아시스트레이트, 베실레이트, 브로마이드, 캄실레이트, 클로라이드, 시트레이트, 푸마레이트, 글루코로네이트, 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 히드로아이오다이드, 아이오다이드, 락테이트, 말레에이트, 메실레이트, 니트레이트, 파모에이트, 포스페이트, 숙시네이트, 술페이트, 타르트레이트, 토실레이트 및 크시노포에이트를 포함한다. 일부 양이온 염 형태는 암모늄, 알루미늄, 벤자틴, 비스무트, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디에탄올아민, 리튬, 마그네슘, 메글루민, 4-페닐시클로헥실아민, 피페라진, 칼륨, 나트륨, 트로메타민 및 아연을 포함한다.

본 발명의 화합물의 일부는 비대칭 탄소 원자를 함유한다 (예를 들어, 하기 구조 참조). 본 발명은 거울상이성질체 및 부분입체이성질체를 비롯한 모든 입체이성질체 형태 뿐만 아니라 입체이성질체의 혼합물, 예컨대 라세미체를 포함한다. 일부 입체이성질체는 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제조될 수 있다. 화합물 및 관련 중간체의 입체이성질체 혼합물은 당업계에 통상적으로 공지된 방법에 따라 개별 이성질체로 분리될 수 있다. 하기 반응식 및 표에 있는 분자 구조의 묘사에서 웨지 또는 해시의 사용은 상대적인 입체 화학을 나타내기 위한 의도일 뿐이며, 절대 입체화학 배열을 의미하는 것으로 해석되어서는 안된다.

본 발명은 본 발명의 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함하는 것으로 의도된다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 갖되 상이한 질량수를 갖는 원자를 포함한다. 일반적인 예로서 비제한적으로, 수소의 동위원소는 중수소 및 삼중수소를 포함한다. 탄소의 동위원소는 ¹³C 및 ¹⁴C를 포함한다. 동위원소-표지된 본 발명의 화합물은 일반적으로 당업자에게 공지된 통상의 기술 또는 본원에 기재된 것과 유사한 방법에 의해, 달리 사용되는 표지되지 않은 시약 대신에 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하여 제조할 수 있다. 이러한 화합물은 다양한 잠재적 용도, 예를 들어 생물학적 활성의 결정에서의 표준물 및 시약으로서의 용도를 가질 수 있다. 안정한 동위원소의 경우에, 이러한 화합물은 생물학적, 약리학적 또는 약동학적 특성을 유리하게 변경하는 잠재력을 가질 수 있다.

합성 방법

화합물은 하기 기재된 것들을 포함하여 당업계에 공지된 방법에 의해 만들어질 수 있다. 일부 시약 및 중간체는 당업계에 공지되어 있다. 다른 시약 및 중간체는 이용가능한 물질을 사용하여 당업계에 공지된 방법에 의해 제조할 수 있다. 화합물의 합성을 기재하기 위해 사용되는 가변기 (예를 들어, 번호가 매겨진 "R" 치환기)는 단지 제조 방법을 예시하기 위한 의도일 뿐이며, 특허청구범위 또는 명세서의 다른 섹션에서 사용되는 가변기와 혼동해서는 안 된다. 반응식에 사용된 약어는 일반적으로 당업계에서 사용되는 관례를 따른다.

화합물은 하기 기재된 것들을 포함하여 당업계에 공지된 방법에 의해 만들어질 수 있다. 일부 시약 및 중간체는 당업계에 공지되어 있다. 다른 시약 및 중간체는 상업적으로 입수가능한 물질을 사용하여 당업계에 공지된 방법에 의해 제조할 수 있다. 화합물의 합성을 기재하기 위해 사용되는 가변기 (예를 들어, 번호가 매겨진 "R" 치환기)는 단지 제조 방법을 예시하기 위한 의도일 뿐이며, 특허청구범위 또는 명세서의 다른 섹션에서 사용되는 가변기와 혼동해서는 안 된다. 반응식에 사용된 약어는 일반적으로 당업계에서 사용되는 관례를 따른다.

반응식에 사용된 약어는 일반적으로 당업계에서 사용되는 관례를 따른다. 본 명세서 및 실시예에 사용된 화학적 약어는 하기와 같이 정의된다: "NaHMDS" = 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드; "DMF" = N,N-디메틸포름아미드; "MeOH" = 메탄올; "NBS" = N-브로모숙신이미드; "Ar" = 아릴; "TFA" = 트리플루오로아세트산; "LAH" = 수소화리튬알루미늄; "BOC", "DMSO" = 디메틸술폭시드; "h" = 시간; "rt" = 실온 또는 체류 시간 (문맥에서 지시될 것임); "min" = 분; "EtOAc" = 에틸 아세테이트; "THF" = 테트라히드로푸란; "EDTA" = 에틸렌디아민테트라아세트산; "Et₂O" = 디에틸 에테르; "DMAP" = 4-디메틸아미노피리딘; "DCE" = 1,2-디클로로에탄; "ACN" = 아세토니트릴; "DME" = 1,2-디메톡시에탄; "HOBt" = 1-히드록시벤조트리아졸 수화물; "DIEA" = 디이소프로필에틸아민, "Nf" = CF₃(CF₂)₃SO₂-; 및 "TMOF" = 트리메틸오르토포르메이트.

반응식 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 일부 화합물은 적절한 피리다진으로 아민화한 후에 적합하게는 관능화된 아세틸렌으로 고리화함으로써 제조될 수 있다. 실험 섹션에서 기술된 바와 같이 보호기의 표준적인 제거는 생성물을 제공한다. 다른 커플링 파트너, 기술 및 조건은 반응을 형성하는 다른 탄소-탄소 결합과 같이 당업계에 공지되어 있다. 산 및 에스테르는 당업계에 공지된 방법에 의해 아미드로 전환될 수 있다.

<반응식 1>

생물학적 방법

본 발명의 화합물은 하기의 HCV RdRp 검정에서 결정된 바와 같이 HCV NS5B에 대한 활성이 입증되었다.

HCV NS5B RdRp 클로닝, 발현 및 정제. HCV (유전자형 1b)의 NS5B 단백질을 코딩하는 cDNA를 pET21a 발현 벡터 내로 클로닝하였다. 상기 단백질은 18개 아미노산의 C-말단 절단형으로 발현되어 용해도가 증진되었다. 이. 콜라이(E. coli) 적격 세포주 BL21(DE3)을 단백질 발현에 사용하였다. 배양물이 600 nm에서 광학 밀도 2.0에 도달할 때까지, 배양물을 37℃에서 약 4시간 동안 성장시켰다. 배양물을 20℃로 냉각시키고, 1 mM IPTG로 유도시켰다. 새로운 암피실린을 최종 농도 50 ㎍/ml로 첨가하고, 세포를 밤새 20℃에서 성장시켰다.

세포 펠릿 (3 L)을 정제를 위해 용해시켜 15-24 mg의 정제된 NS5B를 수득하였다. 용해 완충제는 20 mM 트리스-HCl (pH 7.4), 500 mM NaCl, 0.5％ 트리톤 X-100, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 20％ 글리세롤, 0.5 mg/ml 리소자임, 10 mM MgCl2, 15 ㎍/ml의 데옥시리보뉴클레아제 I 및 완전 TM 프로테아제 억제제 정제 (로슈(Roche))로 구성되어 있다. 용해 완충제를 첨가한 후, 냉동된 세포 펠릿을 조직 균질화기를 사용하여 재현탁시켰다. 샘플의 점도를 감소시키기 위해, 브렌슨(Branson) 소니케이터에 부착된 마이크로팁을 사용하여 용해물의 분취액을 얼음 상에서 초음파처리하였다. 초음파처리된 용해물을 100,000 x g에서 1시간 동안 4℃에서 원심분리하고, 0.2 ㎛ 필터 유닛 (코닝(Corning))을 통해 여과하였다.

헤파린 세파로스 CL-6B, 폴리U 세파로스 4B 및 하이트랩(HiTrap) SP 세파로스 (파마시아(Pharmacia))의 3개 순차적 크로마토그래피 단계를 사용하여 단백질을 정제하였다. 크로마토그래피 완충제는 상기 용해 완충제와 동일하되, 리소자임, 데옥시리보뉴클레아제 I, MgCl2 또는 프로테아제 억제제를 함유하지 않았고, 단백질을 칼럼 상에 충전하기 위한 요건에 따라 완충제의 NaCl 농도를 조정하였다. 칼럼 유형에 따라 길이가 5-50 칼럼 부피로 다양한 각각의 칼럼을 NaCl 구배로 용리하였다. 최종 크로마토그래피 단계 후, 생성된 효소의 순도는 SDS-PAGE 분석을 기반으로 >90％였다. 효소를 분취하여 -80℃에서 저장하였다.

표준 HCV NS5B RdRp 효소 검정. HCV RdRp 유전자형 1b 검정은 96웰 플레이트 (코스타(Costar) 3912)에서 최종 부피 60 ㎕로 실행하였다. 검정 완충제는 20 mM Hepes (pH 7.5), 2.5 mM KCl, 2.5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1.6 U RNAse 억제제 (프로메가(Promega) N2515), 0.1 mg/ml의 BSA (프로메가 R3961) 및 2％ 글리세롤로 구성되어 있다. 모든 화합물을 DMSO 중에 연속 희석하고 (3배), 물 중에 추가로 희석하여, 검정시에 DMSO의 최종 농도가 2％가 되도록 하였다. HCV RdRp 유전자형 1b 효소를 최종 농도 28 nM로 사용하였다. 폴리A 주형을 6 nM로 사용하였고, 비오티닐화 올리고-dT12 프라이머는 최종 농도 180 nM로 사용하였다. 주형은 상업적으로 입수하였다 (아머샴(Amersham) 27-4110). 비오티닐화 프라이머는 시그마 제노시스(Sigma Genosys)에 의해 제조되었다. 3H-UTP는 0.6 μCi (0.29 μM의 총 UTP)로 사용하였다. 효소를 첨가하여 반응을 개시하고, 30℃에서 60분 동안 인큐베이션하고, SPA 비드 (4 ㎍/㎕, 아머샴 RPNQ 0007)를 함유한 50 mM EDTA 25 ㎕를 첨가하여 반응을 중단시켰다. 실온에서 1시간 초과로 인큐베이션한 후, 플레이트를 팩커드 탑 카운트(Packard Top Count) NXT 상에서 판독하였다.

변형된 HCV NS5B RdRp 효소 검정. 변형된 효소 검정은 하기를 제외하고는 본질적으로 표준 효소 검정에 대해 기재된 바와 같이 수행하였다: 프라이머와 비드를 검정 완충제 중에 혼합하고 실온에서 1시간 동안 인큐베이션함으로써, 비오티닐화 올리고 dT12 프라이머를 스트렙타비딘-코팅된 SPA 비드 상에 미리 포획하였다. 원심분리한 후에 미결합 프라이머를 제거하였다. 프라이머-결합된 비드를 20 mM Hepes 완충제 (pH 7.5) 중에 재현탁시키고, 최종 농도 20 nM의 프라이머 및 0.67 ㎍/㎕의 비드를 검정에서 사용하였다. 검정 시 첨가 순서는 다음과 같다: 효소 (14 nM)를 희석된 화합물에 첨가한 후에, 주형 (0.2 nM), 3H-UTP (0.6 μCi, 0.29 μM) 및 프라이머-결합된 비드의 혼합물을 첨가하여 반응을 개시하였다 (제시된 농도는 최종 농도임). 반응이 30℃에서 4시간 동안 진행되도록 하였다.

화합물에 대한 IC₅₀ 값은 7개의 상이한 [I]를 사용하여 결정하였다. IC₅₀ 값은 식 y = A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))을 사용하여 억제로부터 계산하였다.

FRET 검정 준비. HCV FRET 스크리닝 검정을 수행하기 위해 96-웰 세포 배양 플레이트를 사용하였다. FRET 펩티드 (아나스펙, 인크.(Anaspec, Inc.)) (문헌 [Taliani et al., Anal. Biochem. 1996, 240, 60-67])는, 펩티드의 한쪽 말단 근처에는 형광 공여자인 EDANS를 함유하고, 다른쪽 말단 근처에는 수용자인 DABCYL을 함유한다. 펩티드의 형광은 공여자와 수용자 사이의 분자간 공명 에너지 전달 (RET)에 의해 켄칭되지만, NS3 프로테아제가 펩티드를 절단하면, 그 생성물이 RET 켄칭으로부터 방출되어, 공여자의 형광이 분명해진다. 검정 시약은 하기와 같이 제조하였다: 프로메가로부터의 5X 세포 루시페라제 세포 배양 용해 시약 (#E153A)을 dH₂O로 1X 희석하고, NaCl을 최종 농도 150 mM로 첨가하고, FRET 펩티드를 2 mM 원액으로부터 20 μM의 최종 농도로 희석하였다.

플레이트를 제조하기 위해, 레닐라 루시페라제 리포터 유전자가 존재하거나 존재하지 않는 HCV 레플리콘 세포를 트립신처리하여 96-웰 플레이트의 각각의 웰에 넣고, 적정된 시험 화합물을 칼럼 3 내지 12 첨가하고; 칼럼 1 및 2에는 대조군 화합물 (HCV 프로테아제 억제제)이 함유되었고, 바닥 열에는 화합물 없이 세포가 함유되었다. 이어서 플레이트를 37℃의 CO₂ 인큐베이터에 두었다.

검정. 상기 (FRET 검정 준비)에 기재된 시험 화합물의 첨가 이후에, 다양한 시점에서 플레이트를 제거하고, 알라마르 블루 용액 (트렉 디아그노스틱스(Trek Diagnostics), #00-100)을 세포 독성의 척도로서 웰 마다 첨가하였다. 사이토플라워(Cytoflour) 4000 기기 (PE 바이오시스템즈(PE Biosystems))에서 판독한 후, 플레이트를 PBS로 세정한 후에, 상기 (FRET 검정 준비)에 기재된 FRET 펩티드 검정 시약 30 ㎕를 웰마다 첨가하여 FRET 검정에 사용하였다. 그 후, 플레이트를 340 여기/490 방출, 20회 주기에 대해 자동 모드, 및 동역학적 모드에서의 플레이트 판독으로 설정된 사이토플라워 4000 기기에 넣었다. 전형적으로, 판독 후 종점 분석을 사용하였을 때 신호 대 노이즈는 적어도 3배였다. 대안적으로, 알라마르 블루 판독 후, 플레이트를 PBS로 세척하고, 페놀 레드를 함유하지 않은 DMEM (높은 글루코스) 50 ㎕를 첨가한 후에 상기 플레이트를 프로메가 듀얼-글로 루시페라제 검정 시스템(Promega Dual-Glo Luciferase Assay System)을 이용하는 루시페라제 검정에 사용하였다.

화합물 분석은 상대적인 HCV 레플리콘 억제 및 상대적인 세포독성 값의 정량화에 의해 결정되었다. 세포독성 값을 계산하기 위해, 대조군 웰로부터의 평균 알라마르 블루 형광 신호를 100％ 비-독성인 것으로 설정하였다. 이어서, 화합물 시험 웰 각각의 개별 신호를 평균 대조군 신호로 나누고 100％를 곱하여 세포독성 백분율을 결정하였다. HCV 레플리콘 억제 값을 계산하기 위해서, 검정 기간 말기에 최고량의 HCV 프로테아제 억제제를 함유한 2개의 웰로부터 평균 백그라운드 값을 얻었다. 이들 수치는 나이브 Huh-7 세포로부터 얻은 것과 유사하였다.

이어서, 백그라운드 수치를 대조군 웰로부터 얻은 평균 신호에서 빼고, 이 수치를 100％ 활성으로 사용하였다. 이어서, 각각의 화합물 시험 웰의 개별 신호는 백그라운드 차감 후 평균 대조군 값으로 나누고 100%을 곱하여 활성 백분율을 결정하였다. 프로테아제 억제제 적정을 위한 EC₅₀ 값은 FRET 또는 루시페라제 활성에서 50％ 감소를 유발하는 농도로서 계산하였다. 화합물 플레이트에 대해 생성된 2가지 수치인 세포독성 백분율 및 활성 백분율을 사용하여 추가 분석에서 관심 화합물을 결정하였다.

HCV 레플리콘 루시페라제 리포터 검정

HCV 바이러스성 복제에 대한 개시내용에 기재된 화합물의 억제 효과를 모니터링하기 위하여 HCV 레플리콘 루시페라제 검정을 개발하였다. 레플리콘 루시페라제 리포터 검정의 이용은 문헌 [Krieger et al. (Krieger N, Lohmann V, and Bartenschlager R, J. Virol. 75(10):4614-4624 (2001))]에서 처음 기재되었다. HCV 레플리콘을 구성적으로 발현하는 HUH-7 세포를, 10％ 소 태아 혈청 (FCS) (시그마) 및 1 mg/ml G418 (깁코(Gibco)-BRL)을 함유하는 둘베코 변형된 이글 배지 (DMEM) (깁코-BRL)에서 성장시켰다. 20-포인트 적정을 위하여 화합물을 DMSO 중에 3배 연속 희석하고, 이후에 멸균 384-웰 조직-배양 처리된 플레이트 (코닝 cat #3571)로 옮겼다. 이어서, 4％ FCS를 함유하는 DMEM 중에 3.0 x 10³개 세포/웰의 밀도로 세포 50 ㎕를 플레이트에 시딩하였다 (최종 DMSO 농도 0.5％). 37℃에서 3일 인큐베이션한 후, 기질로서 엔두렌(EnduRen) (프로메가 cat #E6485)을 사용하여 세포를 레닐라 루시페라제 활성에 대해 분석하였다. 엔두렌 기질을 DMEM 중에 희석한 후, 7.5 μM의 최종 농도로 플레이트에 첨가하였다. 플레이트를 2시간 동안 37℃에서 인큐베이션한 후에 즉시 발광 프로그램을 이용하는 뷰럭스(Viewlux) 영상화기 (퍼킨엘머(PerkinElmer))로 30초 동안 판독하였다. 화합물의 세포 독성을 평가하기 위하여, 엔두렌-함유 플레이트를 셀타이터-블루(CellTiter-Blue) (프로메가, cat # G8082)로 다양화시켜 CC₅₀ 값을 생성하였다. 셀타이터 블루 3 ㎕를 각각의 웰에 첨가하고, 37℃에서 8시간 동안 인큐베이션하였다. 각각의 웰로부터의 형광 신호를 뷰럭스 영상화기를 이용하여 525/10 nm에서의 여기 파장 및 598/10 nm의 방출 파장으로 판독하였다.

화합물에 대한 대표적인 데이터를 표 1에 기록하였다.

어떠한 데이터로 입력되지 않았다면 하기 키를 사용한다: A 0.002 이하 내지 0.25 μM; B >0.25 μM - <1.0 μM; C 1.0 μM - 10.0 μM; D >0.67 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); E >10.0 μM; F >0.4 μM; (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); G > 1.39 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); H >0.62 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); I >4 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); J>3.7 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); K >1.23 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); L >4.17 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음); M > 0.5 μM (그러나 정확한 값이 측정되지 않음).

제약 조성물 및 치료 방법

본 화합물은 HCV NS5B에 대한 활성이 입증되고, HCV 및 HCV 감염을 치료하는데 유용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 또 다른 측면은 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 화합물을 더 포함하는 조성물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 화합물이 인터페론인 조성물이다. 본 발명의 또 다른 측면에서는 인터페론이 인터페론 알파 2B, PEG화 인터페론 알파, 컨센서스 인터페론, 인터페론 알파 2A 및 림프모구성 인터페론 타우로부터 선택된다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 화합물이 시클로스포린인 조성물이다. 본 발명의 또 다른 측면에서는 시클로스포린이 시클로스포린 A이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 화합물이 인터류킨 2, 인터류킨 6, 인터류킨 12, 제1형 헬퍼 T 세포 반응의 발생을 증진시키는 화합물, 간섭 RNA, 안티-센스 RNA, 이미퀴모드, 리바비린, 이노신 5'-모노포스페이트 데히드로게나제 억제제, 아만타딘 및 리만타딘으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 조성물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 화합물이 HCV 메탈로프로테아제, HCV 세린 프로테아제, HCV 폴리머라제, HCV 헬리카제, HCV NS4B 단백질, HCV 진입, HCV 조립, HCV 방출, HCV NS5A 단백질, IMPDH, 및 HCV 감염의 치료를 위한 뉴클레오시드 유사체로부터 선택된 표적의 기능을 억제하는데 효과적인 것인 조성물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 담체, 인터페론 및 리바비린을 포함하는 조성물이다.

본 발명의 또 다른 측면은 HCV 레플리콘을 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 것을 포함하는, HCV 레플리콘의 기능을 억제하는 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 HCV NS5B 단백질을 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 것을 포함하는, HCV NS5B 단백질의 기능을 억제하는 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 치료 유효량의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 HCV 감염을 치료하는 방법이다. 또 다른 실시양태에서 상기 화합물은 HCV 레플리콘의 기능을 억제하는데 효과적이다. 또 다른 실시양태에서 상기 화합물은 HCV NS5B 단백질의 기능을 억제하는데 효과적이다.

본 발명의 또 다른 측면은 치료 유효량의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 항-HCV 활성을 갖는 또 다른 화합물과 함께 (이들 이전에, 이후에 또는 동시에) 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 HCV 감염을 치료하는 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 다른 화합물이 인터페론인 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 인터페론이 인터페론 알파 2B, PEG화 인터페론 알파, 컨센서스 인터페론, 인터페론 알파 2A 및 림프모구성 인터페론 타우로부터 선택된 것인 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 다른 화합물이 시클로스포린인 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 시클로스포린이 시클로스포린 A인 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 다른 화합물이 인터류킨 2, 인터류킨 6, 인터류킨 12, 제1형 헬퍼 T 세포 반응의 발생을 증진시키는 화합물, 간섭 RNA, 안티-센스 RNA, 이미퀴모드, 리바비린, 이노신 5'-모노포스페이트 데히드로게나제 억제제, 아만타딘 및 리만타딘으로부터 선택된 것인 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 다른 화합물이 HCV 메탈로프로테아제, HCV 세린 프로테아제, HCV 폴리머라제, HCV 헬리카제, HCV NS4B 단백질, HCV 진입, HCV 조립, HCV 방출, HCV NS5A 단백질, IMPDH, 및 HCV 감염의 치료를 위한 뉴클레오시드 유사체로 이루어진 군으로부터 선택된 표적의 기능을 억제하는데 효과적인 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 항-HCV 활성을 갖는 다른 화합물이 HCV NS5B 단백질 이외의 다른 HCV 생활 주기에서의 표적의 기능을 억제하는데 효과적인 것인 방법이다.

"치료상 유효한"은 간염 및 HCV 감염 분야에서 진료의에 의해 이해된 바와 같은 의미있는 환자 이익을 제공하는데 요구되는 작용제의 양을 의미한다.

"환자"는 HCV 바이러스에 감염되고, 간염 및 HCV 감염 분야에서 진료의에 의해 이해된 바와 같은 요법에 적합한 사람을 의미한다.

"치료", "요법", "투약법", "HCV 감염" 및 관련된 용어는 간염 및 HCV 감염 분야에서 진료의에 의해 이해된 바와 같이 사용된다.

본 발명의 화합물은 일반적으로, 치료 유효량의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체를 포함하고 통상의 부형제를 함유할 수 있는 제약 조성물로서 제공된다. 제약상 허용되는 담체는 허용되는 안전성 프로파일을 갖는 통상적으로 공지된 담체이다. 조성물은 예를 들어 캡슐, 정제, 로젠지 및 분말 뿐만 아니라 액체 현탁액, 시럽, 엘릭시르 및 용액을 비롯한 모든 통상의 고체 및 액체 형태를 포함한다. 조성물은 통상의 제제화 기술을 사용하여 제조되며, 통상적인 부형제 (예컨대, 결합제 및 습윤제) 및 비히클 (예컨대, 물 및 알콜)이 조성물에 일반적으로 사용된다. 예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 17th edition, 1985]을 참조한다.

통상적으로, 고체 조성물은 투여량 단위로 제제화되며, 용량 당 약 1 내지 1000 mg의 활성 성분을 제공하는 조성물이 바람직하다. 일부 투여량 예는 1 mg, 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg 및 1000 mg이다. 일반적으로, 기타 작용제는 임상적으로 사용되는 클래스의 작용제와 유사한 단위 범위로 제공될 것이다. 전형적으로, 이는 0.25-1000 mg/단위이다.

통상적으로, 액체 조성물은 투여량 단위 범위 내에 있다. 일반적으로, 액체 조성물은 1-100 mg/mL의 단위 투여량 범위 내에 있을 것이다. 일부 투여량 예는 1 mg/mL, 10 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL 및 100 mg/mL이다. 일반적으로, 기타 작용제는 임상적으로 사용되는 클래스의 작용제와 유사한 단위 범위로 제공될 것이다. 전형적으로, 이는 1-100 mg/mL이다.

본 발명은 모든 통상적인 투여 방식을 포함하며; 경구 및 비경구 방법이 바람직하다. 일반적으로, 투여 요법은 임상적으로 사용되는 기타 작용제와 유사할 것이다. 전형적으로, 1일 용량은 1일 체중 1 kg 당 1-100 mg일 것이다. 일반적으로, 경구 방법은 보다 많은 화합물이 요구되며, 비경구 방법은 보다 적은 화합물이 요구된다. 그러나, 구체적인 투여 요법은 타당한 의학적 판단을 이용하여 의사에 의해 결정될 것이다.

본 발명은 또한, 화합물이 조합 요법으로 제공되는 방법을 포함한다. 즉, 화합물은 간염 및 HCV 감염의 치료에 유용한 기타 작용제와 함께, 그러나 서로 개별적으로 사용될 수 있다. 이러한 조합 방법의 경우, 화합물은 일반적으로 기타 작용제와 함께 1일 체중 1 kg 당 1-100 mg의 1일 용량으로 제공될 것이다. 기타 작용제는 일반적으로 치료적으로 사용되는 양으로 제공될 것이다. 그러나, 구체적인 투여 요법은 타당한 의학적 판단을 이용하여 의사에 의해 결정될 것이다.

조성물 및 방법에 적합한 화합물의 일부 예를 하기 표 2에 열거하였다.

<구체적 실시양태의 설명>

중간체 1

3-(4-플루오로페닐)-N-메틸프로피올아미드. N-메틸프로피올아미드의 제조는 WO1998022429A1, 제조예 2, 페이지 27에 기재되어 있고, 이 중간체의 제조에 사용되었다. 3-(4-플루오로페닐)-N-메틸프로피올아미드는 문헌 [J. Org. Chem. Vol. 63, No. 15, 1998, 5050-5058]에서 밝혀진 3-(3-플루오로페닐)-N-메틸프로피올아미드 또는 3-(2,5-디플루오로페닐)-N-메틸프로피올아미드의 제조 또는 문헌 [Organic Letters vol 7, No. 21, 2005, 4753 supplementary info page 1.]에서 밝혀진 4-플루오로 아이오도 벤젠의 TMS 아세틸렌으로의 커플링을 위한 방법에 따라 유사하게 제조될 수 있다. 따라서, 상업적으로 입수가능한 1-플루오로-4-아이오도벤젠, N-메틸프로피올아미드, Pd(PPh₃)₂Cl₂, 구리 (I) 아이오다이드, 및 트리에틸아민을 조합하고 가열하여 후처리 후에 목적 생성물을 제공할 수 있다.

LC 데이터는 시마즈(Shimadzu) LC-10AS 액체 크로마토그래프 (페노메넥스-루나(Phenomenex-Luna), 10 마이크로미터, C18, 3.0 x 50 mm 칼럼 장착, SPD-10AV UV-Vis 검출기 사용, 검출기 파장 220 nM) 상에서 기록하였다. 용리 조건은 하기를 사용하였다: 유량 4 mL/분, 구배 100% 용매 A/0% 용매 B → 0% 용매 A/100% 용매 B, 구배 시간 3분, 유지 시간 1분, 및 분석 시간 4분, 여기서 용매 A는 10% 메탄올/90% H₂O/10 mM TFA였고, 용매 B는 10% H₂O/90% 메탄올/10 mM TFA였다. MS 데이터는 전기분무 방식으로 LC에 대해 마이크로매스 플랫폼 (Micromass Platform)을 사용하여 결정하였다.

중간체 2

tert-부틸 3-(4-플루오로페닐)프로피올로일(메틸)카르바메이트. 3-(4-플루오로페닐)-N-메틸프로피올아미드 (10.0 g, 56 mmol), 디-tert-부틸 디카르보네이트 (13.5 g, 62 mmol) 및 THF (282 mL)를 함유하는 용액에 디메틸아미노피리딘 (0.69 g, 5.6 mmol)을 한 번에 첨가하였다. 용액을 1시간 동안 유지시키고, 농축하여 모든 용매를 제거하고, 실리카 겔 (0-80% 에틸아세테이트/헥산, 60분 구배) 상에서 정제하여 백색 고체를 수득하였다.

LC 데이터는 시마즈 LC-10AS 액체 크로마토그래프 (페노메넥스-루나, 10 마이크로미터, C18, 3.0 x 50 mm 칼럼 장착, SPD-10AV UV-Vis 검출기 사용, 검출기 파장 220 nM) 상에서 기록하였다. 용리 조건은 하기를 사용하였다: 유량 4 mL/분, 구배 100% 용매 A/0% 용매 B → 0% 용매 A/100% 용매 B, 구배 시간 3분, 유지 시간 1분, 및 분석 시간 4분, 여기서 용매 A는 10% 메탄올/90% H₂O/10 mM TFA였고, 용매 B는 10% H₂O/90% 메탄올/10 mM TFA였다. MS 데이터는 전기분무 방식으로 LC에 대해 마이크로매스 플랫폼을 사용하여 결정하였다.

중간체 3

4-메틸-3-(피리다진-4-일)벤조산. 4-브로모피리다진 (0.10 g, 0.63 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조산 (0.18 g, 0.69 mmol), 탄산나트륨 (0.27 g, 2.52 mmol), 디옥산 (5.2 mL) 및 물 (1.01 mL)을 함유하는 탈기된 혼합물에 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.02 g, 0.02 mmol)을 질소 분위기 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 95℃에서 4시간 동안 빠르게 교반하면서 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 여과하였다. 여과된 용액을 1N HCl (5.0 mL)로 pH 4 아래로 산성화시켰다. 생성된 침전물을 여과에 의해 회수하고, 물 (3 x 3.0 mL)로 세척하고, 공기 건조시켰다. 생성된 황갈색 고체를 n-펜탄 (4 mL)에 현탁시키고, 20분 동안 교반하고, 여과에 의해 회수하고, 공기 건조시켜 4-메틸-3-(피리다진-4-일)벤조산을 황갈색 고체로 수득하였고, 이를 추가로 정제하지 않고 사용하였다. LCMS: 체류 시간: 1.325분. LC 데이터는 시마즈 LC-10AS 액체 크로마토그래프 (선파이어(Sunfire), 5 마이크로미터, C18, 3.0 x 50 mm 칼럼 장착, SPD-10AV UV-Vis 검출기 사용, 검출기 파장 220 nM) 상에서 기록하였다. 용리 조건은 하기를 사용하였다: 유량 4 mL/분, 구배 100% 용매 A/0% 용매 B → 0% 용매 A/100% 용매 B, 구배 시간 3분, 유지 시간 1분, 및 분석 시간 4분, 여기서 용매 A는 10% CH₃CN/90% H₂O/10 mM TFA였고, 용매 B는 10% H₂O/90% CH₃CN/10 mM TFA였다. MS 데이터는 전기분무 방식으로 LC에 대해 마이크로매스 플랫폼을 사용하여 결정하였다.

중간체 4

4-메틸-N-(1-페닐시클로프로필)-3-(피리다진-4-일)벤즈아미드. 2-페닐시클로프로판아민 히드로클로라이드 (0.13 g, 0.76 mmol), 디이소프로필에틸아민 (0.88 mL, 5.0 mmol), 4-메틸-3-(피리다진-4-일)벤조산 (0.14 g, 0.63 mmol) 및 DMF (4.2 mL)을 함유하는 용액에 HATU (0.48 g, 1.3 mmol)를 한 번에 첨가하였다. 용액을 실온에서 40분 동안 유지시키고, 잔류물로 농축하였다. 이와 같이 수득한 잔류물을 실리카 겔 (0-8% 메탄올/디클로로메탄, 45분 구배) 상에서 정제하여 4-메틸-N-(1-페닐시클로프로필)-3-(피리다진-4-일)벤즈아미드를 수득하였다.

LC 데이터는 시마즈 LC-10AS 액체 크로마토그래프 (선파이어 C18, 5 마이크로미터, C18, 4.6 x 50 mm 칼럼 장착, SPD-10AV UV-Vis 검출기 사용, 검출기 파장 220 nM) 상에서 기록하였다. 용리 조건은 하기를 사용하였다: 유량 4 mL/분, 구배 100% 용매 A/0% 용매 B → 0% 용매 A/100% 용매 B, 구배 시간 3분, 유지 시간 1분, 및 분석 시간 4분, 여기서 용매 A는 10% CH₃CN/90% H₂O/10 mM TFA였고, 용매 B는 10% H₂O/90% CH₃CN/10 mM TFA였다. MS 데이터는 전기분무 방식으로 LC에 대해 마이크로매스 플랫폼을 사용하여 결정하였다.

중간체 5 및 중간체 6

tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트 및 tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트. 파트 A: 4-메틸-N-(1-페닐시클로프로필)-3-(피리다진-4-일)벤즈아미드 (0.21 g, 0.55 mmol) 및 디클로로메탄 (4 mL)을 함유하는 냉각된 용액 (0℃, 빙조)에 디클로로메탄 (3 mL) 중 O-(메시틸술포닐)히드록실아민 (0.23 g, 0.58 mmol)을 빠르게 적가하였다. 용액을 0℃에서 5분 동안 유지시키고, 냉각조로부터 분리하고, 주위 온도에서 45분 동안 유지시켰다. 용액을 발포체로 농축하고, 20분 동안 교반하면서 n-펜탄 (5 mL)에 현탁시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 공기 건조시켜 1-아미노-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피리다진-1-이움 2,4,6-트리메틸벤젠술포네이트를 황색 분말 (345 MH⁺)로 수득하였다. 파트 B: 파트 A에서와 같이 수득한 생성물을 THF (3.7 mL)에 현탁시켰다. tert-부틸 3-(4-플루오로페닐)프로피올로일(메틸)카르바메이트 (0.19 g, 0.69 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 -78℃ (드라이 아이스/아세톤 배스)로 냉각시켰다. THF (2 mL) 중 DBU (0.17 g, 1.14 mmol)를 5분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 냉각조에 두고, 20시간 동안 주위 온도에서 진행시켰다. 혼합물을 농축하였다. 실리카 겔 (30-100% 에틸 아세테이트/헥산, 60분 구배) 상에서 정제하여 tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트 및 tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트를 별개의 위치이성질체로 수득하였다. tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트:

tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트:

실시예 1

2-(4-플루오로페닐)-N-메틸-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드. tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트 (0.044 g, 0.065 mmol) 및 디클로로메탄 (4 mL)을 함유하는 용액에 TFA (0.41 mL, 5.3mmol)를 실온에서 첨가하였다. 용액을 15분 동안 유지시키고, 농축하였다. 생성된 잔류물을 정제용 HPLC (워터스-엑스브릿지(Waters-Xbridge), 50 x 100 mm, 5 마이크로미터, C18 칼럼; 0.1M 아세트산암모늄, 0-100% B (B = 5% H₂O/CH₃CN)/A (A = 95% H₂O/CH₃CN), 15분 구배)를 이용하여 정제하여 2-(4-플루오로페닐)-N-메틸-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드를 백색 고체로 수득하였다. 정제용 HPLC: 체류 시간: 12.6분.

실시예 2

2-(4-플루오로페닐)-N-메틸-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드. tert-부틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르보닐(메틸)카르바메이트 (0.054 g, 0.087 mmol) 및 디클로로메탄 (4 mL)을 함유하는 용액에 TFA (0.54 mL, 7.6 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 용액을 15분 동안 유지시키고, 농축하였다. 생성된 잔류물을 정제용 HPLC (워터스-엑스브릿지, 50 x 100 mm, 5 마이크로미터, C18 칼럼; 0.1M 아세트산암모늄, 10-100% B (B = 5% H₂O/CH₃CN)/A (A = 95% H₂O/CH₃CN), 15분 구배)를 이용하여 정제하여 2-(4-플루오로페닐)-N-메틸-4-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드를 백색 고체로 수득하였다. 정제용 HPLC: 체류 시간: 11.8분.

중간체 7

메틸 2-메톡시-4-메틸-5-(피리다진-4-일)벤조에이트. 4-브로모피리다진 히드로브로마이드 (0.20 g, 0.83 mmol), 탄산세슘 (1.1 g, 3.3 mmol) 및 4-메톡시-5-(메톡시카르보닐)-2-메틸페닐보론산 (0.22 g, 1.0 mmol)을 함유하는 혼합물을 디옥산 (8.3 mL)으로 충전하였다. 질소 기체를 교반하면서 15분 동안 혼합물을 통해 퍼징하였다. 교반을 정지하고, 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (0.38 g, 0.04 mmol)을 첨가한 후에 톨루엔 (0.15 mL) 중 트리시클로헥실포스핀 (0.04 g, 0.13 mmol)을 첨가하였다. 교반을 재개하고, 혼합물을 80℃에서 105분 동안 질소 기체 하에 가열하였다. 반응물을 RT로 냉각시키고, 여과하고, 잔류물로 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 (5-100% 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 정제하여 메틸 2-메톡시-4-메틸-5-(피리다진-4-일)벤조에이트를 회백색 고체로 수득하였다.

LC 데이터는 시마즈 LC-10AS 액체 크로마토그래프 (페노메넥스-루나, 3 마이크로미터, C18, 2.0 x 50 mm 칼럼 장착, SPD-10AV UV-Vis 검출기 사용, 검출기 파장 220 nM) 상에서 기록하였다. 용리 조건은 하기를 사용하였다: 유량 0.8 mL/분, 구배 100% 용매 A/0% 용매 B → 0% 용매 A/100% 용매 B, 구배 시간 4분, 유지 시간 1분, 및 분석 시간 5분, 여기서 용매 A는 10% 메탄올/90% H₂O/10 mM TFA였고, 용매 B는 10% H₂O/90% 메탄올/10 mM TFA였다. MS 데이터는 전기분무 방식으로 LC에 대해 마이크로매스 플랫폼을 사용하여 결정하였다.

중간체 8 및 중간체 9

메틸 5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트 및 메틸 5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-4-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트. 파트 A: 메틸 2-메톡시-4-메틸-5-(피리다진-4-일)벤조에이트 (0.16 g, 0.66 mmol) 및 디클로로메탄 (3 mL)을 함유하는 냉각된 용액 (0℃, 빙조)에 디클로로메탄 (3 mL) 중 O-(메시틸술포닐)히드록실아민 (0.32 g, 0.90 mmol)을 빠르게 적가하였다. 용액을 0℃에서 5분 동안 유지시키고, 냉각조로부터 분리하고, 주위 온도에서 5시간 동안 유지시켰다. 용액을 농축하여 1-아미노-4-(4-메톡시-5-(메톡시카르보닐)-2-메틸페닐)피리다진-1-이움 2,4,6-트리메틸벤젠술포네이트를 발포체 (274 MH⁺)로 수득하였다. 파트 B: 파트 A에서와 같이 수득한 생성물을 THF (2.0 mL)에 현탁시켰다. tert-부틸 3-(4-플루오로페닐)프로피올로일(메틸)카르바메이트 (0.17 g, 0.60 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 -78℃ (드라이 아이스/아세톤 배스)로 냉각시켰다. THF (1.0 mL) 중 DBU (0.27 g, 1.8 mmol)를 2분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 냉각조에 20분 동안 둔 후에, 냉각으로부터 분리하고, 20시간 동안 주위 온도에서 진행시켰다. 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 실리카 겔 (20-80% 에틸 아세테이트/헥산, 60분 구배) 상에서 정제하여 메틸 5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트 및 메틸 5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-4-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트를 별개의 위치이성질체로 수득하였다.

5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트:

메틸 5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-4-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트:

중간체 10

메틸 5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트. 메틸 5-(3-(tert-부톡시카르보닐(메틸)카르바모일)-2-(4-플루오로페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트 (0.75 g, 0.13 mmol) 및 디클로로메탄 (3 mL)을 함유하는 용액에 TFA (0.2 mL, 2.7 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 용액을 15분 동안 유지시키고, 농축하여 건조시켜 메틸 5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트를 회백색 고체로 수득하였고, 이를 추가로 정제하지 않고 사용하였다.

중간체 11

5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조산. 메틸 5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조에이트 (0.061 g, 0.14 mmol) 및 디옥산 (0.7 mL)을 함유하는 용액에 수성 수산화나트륨 (0.7 mL, 2.0 M)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 수성 HCl (1.5 mL, 1.0 N)로 pH 4 아래로 조정하였다. 5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조산이 황갈색 고체로 침전되었다. 이를 여과하고, 물 (3 x 4 mL)로 세척하고, 공기 건조시켰다.

실시예 3

2-(4-플루오로페닐)-5-(4-메톡시-2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)-N-메틸피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드. 1-페닐시클로프로판아민 히드로클로라이드 (0.008 g, 0.05 mmol), 디이소프로필에틸아민 (0.05 mL, 0.28 mmol), 5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조산 (0.015 g, 0.04 mmol) 및 DMF (0.23 mL)를 함유하는 용액에 HATU (0.026 g, 0.07 mmol)를 한 번에 첨가하였다. 용액을 실온에서 1시간 동안 유지시켰다. 생성물을 정제용 HPLC (워터스-엑스브릿지, 50 x 100 mm, 5 마이크로미터, C18 칼럼; 0.1M 아세트산암모늄, 0-100% B (B = 5% H₂O/CH₃CN)/A (A = 95% H₂O/CH₃CN), 15분 구배)를 이용하여 정제하여 2-(4-플루오로페닐)-5-(4-메톡시-2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)-N-메틸피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드를 백색 고체로 수득하였다. 정제용 HPLC 체류 시간: 12.6분.

LC 데이터는 시마즈 LC-10AS 액체 크로마토그래프 (페노메넥스-루나, 3 마이크로미터, C18, 2.0 x 50 mm 칼럼 장착, SPD-10AV UV-Vis 검출기 사용, 검출기 파장 220 nM) 상에서 기록하였다. 용리 조건은 하기를 사용하였다: 유량 1.0 mL/분, 구배 100% 용매 A/0% 용매 B → 0% 용매 A/100% 용매 B, 구배 시간 2분, 유지 시간 1분, 및 분석 시간 3분, 여기서 용매 A는 10% 메탄올/90% H₂O/10 mM TFA였고, 용매 B는 10% H₂O/90% 메탄올/10 mM TFA였다. MS 데이터는 전기분무 방식으로 LC에 대해 마이크로매스 플랫폼을 사용하여 결정하였다.

실시예 4

2-(4-플루오로페닐)-5-(4-메톡시-2-메틸-5-(1-(피리미딘-2-일)시클로프로필카르바모일)페닐)-N-메틸피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드. 1-(피리미딘-2-일)시클로프로판아민 히드로클로라이드 (0.008 g, 0.05 mmol), 디이소프로필에틸아민 (0.05 mL, 0.28 mmol), 5-(2-(4-플루오로페닐)-3-(메틸카르바모일)피라졸로[1,5-b]피리다진-5-일)-2-메톡시-4-메틸벤조산 (0.015 g, 0.04 mmol) 및 DMF (0.23 mL)를 함유하는 용액에 HATU (0.026 g, 0.07 mmol)를 한 번에 첨가하였다. 용액을 실온에서 1시간 동안 유지시켰다. 생성물을 정제용 HPLC (워터스-엑스브릿지, 50 x 100 mm, 5 마이크로미터, C18 칼럼; 0.1M 아세트산암모늄, 0-100% B (B = 5% H₂O/CH₃CN)/A (A = 95% H₂O/CH₃CN), 15분 구배)를 사용하여 정제하여 2-(4-플루오로페닐)-5-(4-메톡시-2-메틸-5-(1-(피리미딘-2-일)시클로프로필카르바모일)페닐)-N-메틸피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드를 백색 고체로 수득하였다. 정제용 HPLC 체류 시간: 10.5분.

본 개시내용이 상기 예시적인 실시예로 제한되지 않고, 이것이 그의 본질적 속성에서 벗어나지 않으면서 다른 특정 형태로 구현될 수 있음이 당업자에게 분명할 것이다. 따라서, 예시로서 모든 측면에서 고려되지만 제한되지는 않는 실시예, 상기 실시예 이외의 첨부된 특허청구범위에서의 언급, 및 특허청구범위와 동등한 의미 및 범위 내에 있는 모든 변형법이 그 안에 포함되는 것으로 의도되는 것이 바람직하다.

Claims

하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 I>

상기 식에서,
R¹은 할로, 알킬, 시클로알킬, 알콕시, 디옥소티아지닐, (R⁵)(R⁶)N,
, 피리디닐 또는 페닐이고, 여기서 상기 피리디닐 또는 페닐은 알킬, 히드록시알킬, 알콕시알킬, ((R⁷)(R⁸)N)알킬, 히드록시, 알콕시, (R⁷)(R⁸)N, 카르복시, 알콕시카르보닐 및 CON(R¹⁶)(R¹⁷)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되고, 여기서 상기 피리디닐 또는 페닐은 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬, 알콕시, 피리디닐, 페닐, 할로페닐, (할로)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 또는 (알콕시)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 치환기로 치환되고;
R²는 수소, 할로, 알킬, 시클로알킬, 알콕시 또는 (R⁵)(R⁶)N이고;
R³은 시아노, 알콕시카르보닐, (시클로알킬)옥시카르보닐, (알킬술포닐)아미노카르보닐, CON(R¹¹)(R¹²), (R¹³)(R¹⁴)NCONH, 트리아졸릴, 티아졸릴 또는 테트라졸릴이고;
R⁴는 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고;
R⁵는 수소, 알킬, 시클로알킬, (시클로알킬)알킬, 벤질, 알킬카르보닐, 할로알킬카르보닐, 페닐카르보닐, (알콕시페닐)카르보닐, 알킬술포닐, 페닐술포닐, (알콕시페닐)술포닐 또는 (할로알콕시페닐)술포닐이고;
R⁶은 수소, 알킬, 히드록시알킬 또는 알콕시알킬이거나; 또는
R⁵ 및 R⁶은 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 디옥소티아지닐이고;
R⁷은 수소 또는 알킬이고;
R⁸은 수소 또는 알킬이고;
R⁹는 수소 또는 알킬이고;
R¹⁰은 수소 또는 알킬이거나; 또는
R⁹ 및 R¹⁰은 함께 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌 또는 펜틸렌이고, 0 내지 2개의 플루오린 원자로 치환되고;
R¹¹은 수소 또는 알킬이고;
R¹²는 수소 또는 알킬이거나; 또는
R¹¹ 및 R¹²는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;
R¹³은 수소 또는 알킬이고;
R¹⁴는 수소 또는 알킬이거나; 또는
R¹³ 및 R¹⁴는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;
R¹⁵는 알킬 또는 시클로알킬이고;
R¹⁶은 수소, 알킬,
이고;
R¹⁷은 수소 또는 알킬이고;
R¹⁸은 수소, 할로, 알킬 또는 알콕시이고;
Ar¹은 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐이고; 0 내지 3개의 할로, 알킬, 할로알킬, 알콕시, (R⁷)(R⁸)N 또는 페닐 치환기로 치환된다.
제1항에 있어서,
R¹이 피리디닐 또는 페닐이고, 카르복시, 알콕시카르보닐 및 CON(R¹⁶)(R¹⁷)로 이루어진 군으로부터 선택된 1개의 치환기로 치환되고, 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환되고;
R²가 수소, 할로, 알킬, 시클로알킬, 알콕시 또는 (R⁵)(R⁶)N이고;
R³이 CON(R¹¹)(R¹²)이고;
R⁴가 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고;
R⁹가 수소 또는 알킬이고;
R¹⁰이 수소 또는 알킬이거나; 또는
R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌 또는 펜틸렌이고;
R¹¹이 수소 또는 알킬이고;
R¹²가 수소 또는 알킬이거나; 또는
R¹¹ 및 R¹²가 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;
R¹⁶이 수소, 알킬 또는
이고;
R¹⁷이 수소 또는 알킬이고;
R¹⁸이 수소이고;
Ar¹이 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐이고; 0 내지 3개의 할로, 알킬, 할로알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 것인
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제2항에 있어서,
R¹이 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 페닐이고;
R²가 수소이고;
R³이 CON(R¹¹)(R¹²)이고;
R⁴가 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고;
R⁹가 수소 또는 알킬이고;
R¹⁰이 수소 또는 알킬이거나; 또는
R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌 또는 펜틸렌이고;
R¹¹이 수소 또는 알킬이고;
R¹²가 수소 또는 알킬이거나; 또는
R¹¹ 및 R¹²가 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;
R¹⁶이
이고;
R¹⁷이 수소 또는 알킬이고;
Ar¹이 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐이고; 0 내지 3개의 할로, 알킬, 할로알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 것인
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제3항에 있어서, R¹이 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 페닐이고; R²가 수소이고; R³이 CON(R¹¹)(R¹²)이고; R⁴가 0 내지 2개의 할로, 알콕시, 페녹시 또는 할로페녹시 치환기로 치환된 페닐이고; R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌이고; R¹¹이 알킬이고; R¹²가 수소이고; R¹⁶이
이고; R¹⁷이 수소이고; Ar¹이 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐 또는 페닐인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제4항에 있어서, R¹이 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기 및 1개의 알킬 치환기 및 0 내지 1개의 알콕시 치환기로 치환된 페닐이고; R²가 수소이고; R³이 CONHMe이고; R⁴가 모노플루오로페닐이고; R¹⁶이
이고; R⁹ 및 R¹⁰이 함께 에틸렌이고; R¹⁷이 수소이고; Ar¹이 피리미디닐 또는 페닐인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, R¹이 피리디닐 또는 페닐이고, 알킬, 히드록시알킬, 알콕시알킬, ((R⁷)(R⁸)N)알킬, 히드록시, 알콕시, (R⁷)(R⁸)N, 카르복시, 알콕시카르보닐 및 CON(R¹⁶)(R¹⁷)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되고, 여기서 상기 페닐 또는 피리디닐은 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬, 알콕시, 피리디닐, 페닐, 할로페닐, (할로)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 또는 (알콕시)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 치환기로 치환된 것인 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 페닐이고, 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고, 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬, 알콕시, 피리디닐, 페닐, 할로페닐, (할로)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 또는 (알콕시)(CON(R⁷)(R⁸))페닐 치환기로 치환된 것인 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 페닐이고, 1개의 CON(R¹⁶)(R¹⁷) 치환기로 치환되고, 또한 0 내지 2개의 할로, 알킬 또는 알콕시 치환기로 치환된 것인 화합물.
제1항에 있어서, R³이 CON(H)(알킬)인 화합물.
제1항에 있어서, R⁴가 할로페닐인 화합물.
제1항에 있어서, R⁴가 페닐 또는 모노플루오로페닐인 화합물.
제1항에 있어서,
2-(4-플루오로페닐)-N-메틸-5-(2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드;
2-(4-플루오로페닐)-5-(4-메톡시-2-메틸-5-(1-페닐시클로프로필카르바모일)페닐)-N-메틸피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드; 및
2-(4-플루오로페닐)-5-(4-메톡시-2-메틸-5-(1-(피리미딘-2-일)시클로프로필카르바모일)페닐)-N-메틸피라졸로[1,5-b]피리다진-3-카르복스아미드
로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
환자에게 치료 유효량의 제1항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, C형 간염 감염의 치료 방법.