KR20130003401A - Standard marker for determining place of origin or age of processed ginseng, establishing method thereof, or method for determining place of origin or age using the same - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A standard marker for determining origin or age of processed ginseng and a method for determining the origin or age are provided to quickly analyze and compare the origin or age of the processed ginseng such as a concentrate liquid and a power. CONSTITUTION: A marker of chemical formula 1 or 2 for determining origin of raw ginseng is used for distinguishing domestic ginseng and Chinese ginseng. A compound of chemical formula 1 is a marker for identifying domestic ginseng. A compound of chemical formula 2 is a marker for identifying Chinese ginseng. A method for establishing the marker comprises: a step of extracting a metabolite from the domestic ginseng and Chinese ginseng; a step of analyzing the metabolite by a liquid chromatography-mass spectrometer(LC-MS); and a step of detecting ingredients with difference between two groups and selecting an ingredient with largest difference.

Description

가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법{Standard marker for determining place of origin or age of processed ginseng, establishing method thereof, or method for determining place of origin or age using the same}Standard marker for determining place of origin or age of processed ginseng, establishing method approximately, or method for determining place of origin or age using the same}

본 발명은 가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a standard marker for determining the origin or age of processed ginseng, a method for establishing the same or a method for determining the origin or age using the same.

종래 농산물의 원산지판별을 위하여 최근에는 비파괴기술인 근적외선 분광법, 전자코, X-선 형광분석법 등이 많이 사용되고 있으며, 특히 근적외선 분광법을 이용한 비파괴 기술은 과채류의 당도, 곡류의 함수율, 아밀로오소의 함량, 우유와 유제품의 지방, 단백질 및 고형분함량 분석에 많이 응용되고 있으며, 농산물의 품종이나 원산지를 판별하기 위하여 전기영동, HPLC 분석법 등과 같은 기존의 단백질분석법을 활용할 수 있으나 시간과 비용이 많이 소요되는 단점이 있어 현장에서의 적용에 어려움이 있었다. 그러나 최근, 기존의 분석법보다 분석시간이 짧고 분리능(resolution)이 높아 분석에 필요한 시간 및 시료량을 최소화할 수 있으며 양적 디지털 분석이 가능한 새로운 기법으로서 CE 크로마토그램이 적용되기 시작했으나 아직까지 곡류, 특히 밀의 품종 판별에 주로 활용되고 있다(김남수, "국산 및 수입농산물(가공식품)의 판별기술과 안전성 평가기술 개발" 연구과제보고서, 2003). In recent years, non-destructive techniques such as near-infrared spectroscopy, electronic nose, and X-ray fluorescence spectroscopy have been widely used. In particular, nondestructive techniques using near-infrared spectroscopy are used to determine the sugar content of fruit vegetables, the moisture content of cereals, Protein and solids content of milk and dairy products and it is possible to utilize existing protein analysis methods such as electrophoresis and HPLC method in order to discriminate the kind or origin of agricultural products, And there was difficulty in application in the field. Recently, however, CE chromatograms have been applied as a new technique capable of quantitative digital analysis and shorter analysis time due to shorter analysis time and higher resolution than conventional methods. It is mainly used for breed identification (Nam Soo Kim, "Development of Discrimination Technology and Safety Evaluation Technique for Domestic and Imported Agricultural Products (Processed Foods)" Research Project Report, 2003).

이에, 가공인삼, 비가공인삼 등을 포함한 다양한 농산물의 산지나 재배조건에 따라 발생하는 품질의 차이를 효율적으로 구분하고 WTO 체제에 의한 농산물의 산지표시 강화 및 제도화에 부응하기 위한 과학적 판별방법 개발이 시급히 요구되며 부정 유통되는 수입산 농산물이 날로 증가하고 있으므로 현장 단속 과정에서 수거된 이들 농산물의 원산지 검정을 위한 과학적인 식별방법 개발이 요구된다.
Therefore, it is possible to efficiently classify the difference in quality caused by the production area or cultivation conditions of various agricultural products including processed ginseng and unprocessed ginseng, and to develop scientific discrimination methods to meet the strengthening and institutionalization of agricultural labeling by the WTO system. As there is an increasing number of imported and illegally imported agricultural products, there is a need to develop a scientific identification method for verifying the origin of these agricultural products collected in the process of on-site enforcement.

인삼(panax ginseng C.A. Meyer)은 약용식물로서의 수천 년 전부터 사용되어 왔으며, 인삼은 오랫동안 자기 환경에 알맞게 진화해왔다. 조금씩 자기가 처한 환경에서 잘 살 수 있도록 적응해 왔으며 그 환경에 맞게 자신을 변화시켜 왔고, 인삼은 가공 방법에 따라 수삼, 백삼, 홍삼 등으로 구분하고, 채굴된 자연 상태의 인삼을 수삼이라고 하며, 수삼의 껍질을 벗긴 뒤 햇빛이나 열풍에 건조시킨 것을 백삼(white ginseng)이라고 한다. 또한, 백삼을 껍질을 벗기지 않은 상태로 증기로 쪄서 건조한 것을 홍삼(red ginseng)이라 한다. Ginseng (panax ginseng C.A. Meyer) has been used for thousands of years as a medicinal plant, and ginseng has long evolved to fit its environment. Little by little, they have adapted themselves to live well in their environment and have changed themselves according to their environment.Ginseng is divided into ginseng, white ginseng and red ginseng according to the processing method, and the ginseng of mined natural state is called ginseng. Peeled and dried in sunlight or hot air is called white ginseng. In addition, red ginseng is steamed and dried without steaming white ginseng (red ginseng).

인삼은 세계적으로 한국산 고려인삼이 가장 우수한 것으로 예부터 알려져 왔다. 그러나 최근 해외시장에서는 값싼 중국산과 미국과 캐나다산 인삼에 국제시장을 잠식당하고 있는 실정으로, 최근 중국산 인삼이 밀무역으로 국내시장에 들어와 국내 재배 인삼의 입지를 어렵게 하고 있는 실정이고(서동상, “한국산 장뇌산삼과 중국산 장뇌삼의 분류체계 확립 및 효능에 관한 연구” 연구과제보고서, 2007), 또한, 해외 인삼의 경우 3-4년생 인삼을 채굴하기 때문에 연근판별에 큰 의미를 두지 않으나, 국내의 경우 고년근일수록 약효가 뛰어나다는 관습적 믿음에 따라 고년근일수록 가격이 비싼 특성 때문에 유통시장에서 저년근을 6년 근으로 위장하는 사례가 빈번하여 유통질서가 교란되고 소비자 신뢰도가 떨어지는 원인이 되고 있기에 인삼의 연근판별이 큰 문제점이 되고 있는 실정이다.
Korean ginseng has been known to be the best among Korean ginseng. In recent years, however, international markets have been encroached on cheap Chinese and American and Canadian ginseng, and Chinese ginseng has recently entered the domestic market through wheat trade, making it difficult to position domestically grown ginseng. Study on the Establishment and Efficacy of Classification System of Wild Ginseng and Chinese Camphor Ginseng ”Research Project Report, 2007) Also, overseas ginseng does not have much meaning for lotus root discrimination because it is mined for 3-4 years old ginseng. According to the customary belief that the better the drug is, the older the roots are, the more expensive they are, and so the cases of disguising the lower roots as 6 years old in the distribution market frequently cause disturbances in the distribution order and low consumer confidence. Discrimination is a big problem.

현재 농림부령 연근판별 검사기준은 수확시 검사담당직원이 입회하여 연근을판정하며, 세부기준으로는 머리, 몸통 및 표피 형태, 다리 발달정도, 절단시 나이테 등을 육안 또는 발색시켜 판별(농림부, 인삼산업법, 법률 제8조, 2004)하도록되어있는데, 재배 이력이 확인되는 현장에서 보조적인 판별법으로 사용되지만 관능평가 수준이라 논란의 여지가 많고, 더욱이 재배이력이 불분명한 유통시장에서는 적용하기 힘든 실정이라고 할 수 있다. 그동안 연구 보고된 연근판별법으로는 뇌두경흔(J. Ginseng Res. vol.31, 142-146, 2007), 나이테(J. Ginseng Res. vol 30, 153-157, 2006, 인삼연구보고서-재배편, 한국인삼연초연구소 p331, 1987), 지근발달(인삼연구보고서-재배편, 한국인삼연초연구소 p175, 1988), 기계건조법(J.Ginseng Res. vol 30, 153-157, 2006), 분비도관 조직염색(J. Ginseng Res. vol 25, 101-105, 2001), 진세노사이드 함량(Can. J. Plant Sci. vol 76, p 855 1996) 분석법 등이 보고된 바 있으나 분비도관 조직염색법이 정확한 판별법으로 평가되고, 그 외 방법들은 신뢰도가 낮아 보조적으로 활용되는 수준이다. 그러나 분비도관 조직염색법은 주근의 뿌리 단면으로 판별하기 때문에 재배인삼의 경우에 한정되고 인삼분말에는 적용 불가능하고, 가공된 홍삼의 경우에는 적용하기 힘든 방법이다.At present, the inspection standard for the determination of lotus root by the Ministry of Agriculture and Forestry is determined by the inspecting staff at the time of harvest, and the lotus root is judged by detailed inspection.The detailed criteria is determined by visually or coloring the head, trunk and epidermis, the degree of leg development, and the ring during cutting. Industrial Law, Article 8, 2004), which is used as an auxiliary discrimination method in the field where the cultivation history is confirmed, but it is difficult to apply in the distribution market where the level of sensory evaluation is controversial, and the cultivation history is unclear. It can be said. The researches reported on the lotus root scarring (J. Ginseng Res. Vol. 31, 142-146, 2007), Nayte (J. Ginseng Res. Vol 30, 153-157, 2006, Ginseng Research Report-cultivation, Korean Ginseng and Tobacco Research Institute, p331, 1987), Geun-Gi-Development (Ginseng Research Report-Recultivation, Korean Ginseng and Tobacco Research Institute, p175, 1988), Machine Drying Method (J.Ginseng Res. Vol 30, 153-157, 2006), Tissue Dyeing (J. Ginseng Res. Vol 25, 101-105, 2001) and ginsenoside content (Can. J. Plant Sci. Vol 76, p 855 1996) have been reported, but secretory conduit tissue staining is an accurate method. It is evaluated and other methods are low level of reliability and are used as auxiliary. However, the secretory conduit tissue staining method is limited to cultivated ginseng and is not applicable to ginseng powder, and is difficult to apply to processed red ginseng because it is distinguished by root section of root.

이에 본 발명자들은 상기 문제점을 해결하고자 국내산 가공인삼과 중국산 가공인삼의 산지 또는 연근 판별법을 연구하던 중, 국내산 가공인삼과 중국산 가공인삼에서 표준 마커를 분리 및 분석하여 선별하고, 이를 이용하여 산지를 판별하거나 연근을 판별할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
In order to solve the above problems, the present inventors are studying the origin or lotus root discrimination method of domestic processed ginseng and Chinese processed ginseng, separating and analyzing the standard markers from domestic processed ginseng and Chinese processed ginseng, and selecting them using the same. Or it was confirmed that the lotus root can be identified and completed the present invention.

본 발명의 목적은 백삼의 산지판별에 사용되는 백삼 산지 판별용 마커를 제공하는 것이다.An object of the present invention is to provide a marker for determining the production area of white ginseng used to determine the production of white ginseng.

본 발명의 다른 목적은 백삼의 산지 판별방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for determining a mountain of white ginseng.

본 발명의 또 다른 목적은 홍삼의 산지판별에 사용되는 홍삼 산지 판별용 마커를 제공하는 것이다. Still another object of the present invention is to provide a marker for determining a red ginseng producing region, which is used for determining the area of red ginseng.

본 발명의 다른 목적은 홍삼의 산지 판별방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for determining the production of red ginseng.

본 발명의 또 다른 목적은 홍삼의 연령 판별에 사용되는 홍삼 연령 판별용 마커를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a marker for determining the age of red ginseng used to determine the age of red ginseng.

본 발명의 다른 목적은 홍삼의 연령 판별방법을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a method for determining the age of red ginseng.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:In order to achieve the above object, the present invention provides a marker for determining the production location of white ginseng represented by the following Chemical Formula 1 or 2 used for the production of domestic white ginseng and Chinese white ginseng:

[화학식 1][Formula 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

[화학식 2][Formula 2]

Figure pat00002
Figure pat00002

또한, 본 발명은 피검 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);In addition, the present invention comprises the steps of extracting a metabolite from the test white ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 1 또는 2의 산지 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 백삼의 산지 판별방법을 제공한다.It provides a method for determining the mountain area of white ginseng comprising the step (step 3) of comparing the LC-MS analysis result obtained in step 2 with the marker for determining the mountain region of Formula 1 or 2.

나아가, 본 발명은 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:Furthermore, the present invention provides a marker for determining the origin of red ginseng represented by the following Chemical Formula 3 or 4, which is used for the determination of the production of Korean red ginseng and Chinese red ginseng:

[화학식 3](3)

Figure pat00003
Figure pat00003

[화학식 4][Formula 4]

Figure pat00004
Figure pat00004

또한, 본 발명은 피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);In addition, the present invention comprises the steps of extracting a metabolite from the test red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 3 또는 4의 산지 판별 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 산지 판별방법을 제공한다.It provides a method for determining the location of red ginseng comprising the step (step 3) of comparing the LC-MS analysis result obtained in step 2 with the acid determination marker of the formula (3) or (4).

나아가, 본 발명은 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 연근판별에 사용되는 하기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커를 제공한다:Furthermore, the present invention provides a marker for determining the age of red ginseng represented by the following formulas 5 to 11 used for the discrimination of lotus root of Korean four-year-old red ginseng and six-year-old red ginseng:

[화학식 5][Chemical Formula 5]

Figure pat00005
Figure pat00005

[화학식 6][Formula 6]

Figure pat00006
Figure pat00006

[화학식 7][Formula 7]

Figure pat00007
Figure pat00007

[화학식 8][Formula 8]

Figure pat00008
Figure pat00008

[화학식 9][Chemical Formula 9]

Figure pat00009
Figure pat00009

[화학식 10][Formula 10]

Figure pat00010
Figure pat00010

[화학식 11][Formula 11]

Figure pat00011
Figure pat00011

또한, 본 발명은 피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);In addition, the present invention comprises the steps of extracting a metabolite from the test red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 5 내지 11로 표시되는 화합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 연령 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 연령 판별방법을 제공한다.
It provides a method for determining the age of red ginseng comprising the step (step 3) comparing the LC-MS analysis obtained in step 2 with an age discriminating marker selected from the group consisting of the compounds represented by Formulas 5 to 11.

본 발명에 의하면, 국내산 가공인삼 즉, 백삼과 홍삼에서 표준 마커를 확립하고, 상기 마커를 이용하여 산지 또는 연령의 식별이 쉽지 않은 농축액, 분말 등의 가공인삼의 산지 또는 연령을 신속하게 비교 분석이 가능하므로 수출입 시, 가공인삼의 산지 또는 연령 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
According to the present invention, a standard marker is established in domestic processed ginseng, that is, white ginseng and red ginseng, and the comparative analysis of the origin or age of processed ginseng, such as concentrate or powder, which is difficult to identify the origin or age using the markers, is performed. Therefore, when importing and exporting, it can be useful for determining the origin or age of processed ginseng.

도 1은 본 발명의 실시예의 국내산 백삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명의 실시예의 중국산 백삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 3은 본 발명의 실시예의 국내산 백삼 추출물과 중국산 백삼 추출물의 스코어 스캐터 플럿을 나타내는 도면이다.
도 4는 본 발명의 실시예의 국내산 백삼 추출물과 중국산 백삼 추출물의 최소 직교자승분석의 S 플럿을 나타내는 도면이다.
도 5는 본 발명의 실시예의 (a)국내산 백삼 추출물과 (b)중국산 백삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
도 6은 실시예의 국내산 백삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 7은 실시예의 중국산 백삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 8은 본 발명의 실시예의 국내산 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 9는 본 발명의 실시예의 중국산 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 10은 본 발명의 실시예의 국내산 홍삼 추출물과 중국산 홍삼 추출물의 스코어 스캐터 플럿을 나타내는 도면이다.
도 11은 본 발명의 실시예의 국내산 홍삼 추출물과 중국산 홍삼 추출물의 최소 직교자승분석의 S 플럿을 나타내는 도면이다.
도 12는 본 발명의 실시예의 (a)국내산 홍삼 추출물과 (b)중국산 홍삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
도 13은 실시예의 국내산 홍삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 14는 실시예의 중국산 홍삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 15는 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 16은 본 발명의 실시예의 국내산 6년근 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 17은 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물과 6년근 홍삼 추출물의 스코어 스캐터 플럿을 나타내는 도면이다.
도 18은 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물과 6년근 홍삼 추출물의 최소 직교자승분석의 S 플럿을 나타내는 도면이다.
도 19는 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
도 20은 본 발명의 실시예의 국내산 6년근 홍삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
1 is a view showing an ion chromatogram of domestic white ginseng extract of the embodiment of the present invention.
Figure 2 is a view showing an ion chromatogram of Chinese ginseng extract of the embodiment of the present invention.
Figure 3 is a diagram showing a score scatter plot of domestic white ginseng extract and Chinese white ginseng extract of the embodiment of the present invention.
Figure 4 is a view showing the S plot of the least orthogonal square analysis of domestic white ginseng extract and Chinese white ginseng extract of the embodiment of the present invention.
Figure 5 is a view showing a box plot of (a) domestic white ginseng extract and (b) Chinese white ginseng extract of the embodiment of the present invention.
Figure 6 is a view showing the mass cutting method of domestic white ginseng extract of the embodiment.
7 is a view showing a mass cutting method of the Chinese white ginseng extract of the embodiment.
8 is a diagram showing an ion chromatogram of domestic red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
9 is a view showing an ion chromatogram of Chinese red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
10 is a view showing a score scatter plot of the domestic red ginseng extract and the Chinese red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
11 is a view showing the S plot of the least-orthogonal square analysis of domestic red ginseng extract and Chinese red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
12 is a view showing a box plot of (a) domestic red ginseng extract and (b) Chinese red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
13 is a view showing the mass cutting method of the domestic red ginseng extract of the embodiment.
14 is a view showing the mass cutting method of the Chinese red ginseng extract of the embodiment.
15 is a diagram showing an ion chromatogram of 4 years old Korean red ginseng extract of the Example of the present invention.
16 is a diagram showing an ion chromatogram of 6 years old Korean red ginseng extract of the Example of the present invention.
17 is a diagram showing a score scatter plot of domestic four-year-old red ginseng extract and six-year-old red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
FIG. 18 is a diagram showing a S-plot of a minimum orthogonal square analysis of 4-year old Korean red ginseng extract and 6-year old green ginseng extract of the present invention.
19 is a diagram showing a box plot of the domestic four-year-old red ginseng extract of the embodiment of the present invention.
20 is a view showing a box plot of the domestic six-year-old red ginseng extract of the embodiment of the present invention.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:The present invention provides a marker for determining the production location of white ginseng represented by the following formula (1) or 2 used for the production of domestic white ginseng and Chinese white ginseng:

Figure pat00012
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Figure pat00013
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이때, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 국내산 백삼의 산지 판별용 마커이고, 상기 화학식 2로 표시되는 화합물은 중국산 백삼의 산지 판별용 마커이다.
At this time, the compound represented by the formula (1) is a marker for determining the production of domestic white ginseng, the compound represented by the formula (2) is a marker for determining the production of white ginseng from China.

본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커는 국내산 백삼과 중국산 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Marker for determining the production site of white ginseng represented by the formula (1) or 2 according to the present invention comprises the steps of extracting a metabolite from domestic white ginseng and Chinese white ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 방법으로 확립될 수 있다.
In step 2, the result analyzed by LC-MS is converted into a numerical value that can be statistically processed, and the data obtained by analyzing the converted value by the multivariate analysis method are detected. It can be established in a method comprising the step (step 3) of establishing as a standard marker according to the mountain.

구체적으로, 본 발명에 따른 단계 1은 국내산 백삼과 중국산 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계로써, 상기 추출용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C4 저급 알코올을 이용하는 것이 바람직하고, 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 더욱 바람직하며, 70% 메탄올을 이용하는 것이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 추출 방법으로는 여과법, 열수추출, 침지추출, 환류냉각추출 및 초음파추출 등 당업계의 통상적인 방법을 이용할 수 있으며, 초음파추출 방법으로 1회 내지 5회 추출하는 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 추출온도는 20 내지 30 ℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
Specifically, step 1 according to the present invention is a step of extracting metabolites from domestic white ginseng and Chinese white ginseng, and the extraction solvent is preferably water, alcohol or a mixture thereof. As the alcohol, C 1 to C 4 lower alcohols are preferably used, more preferably ethanol or methanol, and most preferably 70% methanol, but not always limited thereto. Examples of the extraction method include filtration, hot water extraction, immersion extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction, and the like, and the extraction is preferably performed once to five times by the ultrasonic extraction method, But is not limited thereto. Extraction temperature is preferably 20 to 30 ℃ but is not limited thereto.

또한, 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계로써, 컬럼크로마토그래피는 30-40 ℃에서 사용하였으며, 이때 사용가능한 이동상 A는 물과 포름산(100:0.1, v/v)이고, 이동상 B는 아세토니트릴(acetonitril) 및 포름산(100:0.1,v/v)로 하여 사용하였다. 이동상의 유속량은 0.4㎖/분 그리고 시료 주입량은 국내산 백삼 추출액과 중국산 백삼 추출액 시료를 각각 1 ㎕를 취하여 측정에 사용할 수 있다. 또한, 질량분석기는 사중극자 직교 가속 비행시간 텐덤 질량 분석기를 사용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
In addition, step 2 is a step of analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), column chromatography was used at 30-40 ℃, wherein the mobile phase A is available Water and formic acid (100: 0.1, v / v) and mobile phase B were used as acetonitrile (acetonitril) and formic acid (100: 0.1, v / v). The flow rate of the mobile phase is 0.4 ml / min and the sample injection amount can be used for the measurement by taking 1 μl of each sample of domestic white ginseng extract and Chinese white ginseng extract. In addition, the mass spectrometer may use a quadrupole orthogonal accelerated flight time tandem mass spectrometer, but is not limited thereto.

나아가, 상기 단계 3은 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출한 다음 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 국내산 백삼 표준마커와 중국산 백삼의 표준 마커를 확립하는 단계로써, 이때 사용된 상기 다변량 분석법은 직교 최소자승 분석법이고, 이러한 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터는 스코어 스캐터 플롯으로 표준 마커를 확인할 수 있다.
Further, Step 3 converts the result analyzed by LC-MS into a numerical value that can be statistically processed, and analyzes the converted value by multivariate analysis to detect a component having a difference between groups from the data, and then selects the component having the largest difference. By establishing the standard markers of domestic white ginseng standard markers and Chinese white ginseng as standard markers according to the regions, the multivariate analysis used at this time is an orthogonal least-squares analysis, and the data obtained by analyzing the multivariate analysis is a score scatter plot. Standard markers can be identified.

또한, 본 발명은 In addition,

피검 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Extracting the metabolite from the test white ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 1 또는 2의 산지 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 백삼의 산지 판별방법을 제공한다.
It provides a method for determining the mountain area of white ginseng comprising the step (step 3) of comparing the LC-MS analysis result obtained in step 2 with the marker for determining the mountain region of Formula 1 or 2.

상기 백삼의 산지 판별방법은 산지 식별이 어려운 농축액, 분말 등의 백삼 산지를 표준 마커를 이용하여 신속하게 비교가 가능하므로 수출입 시, 백삼의 산지 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
The production method of white ginseng can be used to determine the production location of white ginseng when importing and exporting, because it is possible to quickly compare the production area of white ginseng, such as concentrate, powder, etc. difficult to identify the mountain.

나아가, 본 발명은 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:Furthermore, the present invention provides a marker for determining the origin of red ginseng represented by the following Chemical Formula 3 or 4, which is used for the determination of the production of Korean red ginseng and Chinese red ginseng:

Figure pat00014
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Figure pat00015
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이때, 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물은 국내산 홍삼의 산지 판별용 마커이고, 상기 화학식 4로 표시되는 화합물은 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커이다.
At this time, the compound represented by the formula (3) is a marker for discriminating the production site of Korean red ginseng, and the compound represented by the formula (4) is a marker for determining the production site of Chinese red ginseng.

또한, 본 발명에 따른 상기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커는 국내산 홍삼과 중국산 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Further, the markers for discriminating the origin of red ginseng represented by the above formula (3) or (4) according to the present invention may include a step (step 1) of extracting metabolites from Korean red ginseng and Chinese red ginseng;

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 방법으로 확립될 수 있다.In step 2, the result analyzed by LC-MS is converted into a numerical value that can be statistically processed, and the data obtained by analyzing the converted value by the multivariate analysis method are detected. It can be established in a method comprising the step (step 3) of establishing as a standard marker according to the mountain.

구체적으로, 상기 단계 1 내지 3은 상기 백삼의 산지 판별방법과 동일한 방법으로 수행될 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
Specifically, the steps 1 to 3 may be performed by the same method as the method for determining the production of the white ginseng, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 In addition,

피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Extracting the metabolite from the red ginseng to be examined (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 3 또는 4의 산지 판별 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 산지 판별방법을 제공한다.
It provides a method for determining the location of red ginseng comprising the step (step 3) of comparing the LC-MS analysis result obtained in step 2 with the acid determination marker of the formula (3) or (4).

상기 홍삼의 산지 판별방법은 산지 식별이 어려운 농축액, 분말 등의 홍삼 산지를 표준 마커를 이용하여 신속하게 비교가 가능하므로 수출입 시, 홍삼의 산지 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
The method for determining the production location of red ginseng can be used to determine the production location of red ginseng at the time of import and export, since it is possible to quickly compare the production area of red ginseng such as concentrate, powder, etc. which are difficult to identify.

나아가, 본 발명은 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 연근판별에 사용되는 하기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커를 제공한다:Furthermore, the present invention provides a marker for determining the age of red ginseng represented by the following formulas 5 to 11 used for the discrimination of lotus root of Korean four-year-old red ginseng and six-year-old red ginseng:

Figure pat00016
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Figure pat00017
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Figure pat00018
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이때, 상기 화학식 5 내지 8로 표시되는 화합물은 4년근 홍삼의 연령 판별용 마커이고, 상기 화학식 9 내지 11로 표시되는 화합물은 6년근 홍삼의 연령 판별용 마커이다.
At this time, the compound represented by the formula 5 to 8 is a marker for determining the age of 4 years old red ginseng, the compound represented by the formula 9 to 11 is a marker for determining the age of 6 years old red ginseng.

본 발명에 따른 상기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커는 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);The age-determining markers of red ginseng represented by Chemical Formulas 5 to 11 according to the present invention include the steps of extracting metabolites from domestic 4 year old red ginseng and 6 year old red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 홍삼의 연령에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 방법으로 확립될 수 있다.In step 2, the result analyzed by LC-MS is converted into a numerical value that can be statistically processed, and the data obtained by analyzing the converted value by the multivariate analysis method are detected. It can be established by a method comprising the step of establishing as a standard marker according to the age of red ginseng (step 3).

구체적으로, 상기 단계 1 내지 3은 상기 백삼의 산지 판별방법과 동일한 방법으로 수행될 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
Specifically, the steps 1 to 3 may be performed by the same method as the method for determining the production of the white ginseng, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 In addition,

피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Extracting the metabolite from the red ginseng to be examined (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 5 내지 11로 표시되는 화합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 연령 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 연령 판별방법을 제공한다.
It provides a method for determining the age of red ginseng comprising the step (step 3) comparing the LC-MS analysis obtained in step 2 with an age discriminating marker selected from the group consisting of the compounds represented by Formulas 5 to 11.

상기 홍삼의 연령 판별방법은 연령 식별이 어려운 농축액, 분말 등의 홍삼의 연령을 표준 마커를 이용하여 신속하게 비교가 가능하므로 수출입 시, 홍삼의 연령 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
The age determination method of the red ginseng can be used to determine the age of the red ginseng at the time of import and export, since it is possible to quickly compare the age of the red ginseng, such as concentrate, powder, etc., difficult to identify the age using a standard marker.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
However, the following examples are illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the following examples.

<< 제조예Manufacturing example 1> 가공 인삼의 준비 1> Preparation of Processed Ginseng

연근(연령)에 관계없이 한국과 중국 백삼의 산지 판별을 위하여 국내산 백삼 53점을 국내로부터 구입하고, 중국산 백삼 18점을 중국현지와 국내에서 구입하고, 또한, 한국과 중국 홍삼의 산지 판별을 위하여 한국산 홍삼 50점을 국내에서 구입하고, 중국산 홍삼을 중국현지와 국내에서 35점을 구입하여 실험에 사용하였다. 나아가, 홍삼의 4근과 6근의 연근 판별을 위하여 경기도 이천으로부터 4근 10뿌리와 6근 10뿌리의 인삼을 이용하여 홍삼으로 제조한 후, 연근판별에 사용하였다.
Regardless of the age of lotus root (age), 53 Korean white ginseng from Korea were purchased from Korea to determine the origin of Korean and Chinese white ginseng, 18 Chinese white ginseng from Korea and from China, and also from Korea and Chinese red ginseng. 50 Korean red ginseng were purchased in Korea and 35 Chinese red ginseng were purchased in China and Korea. In addition, red ginseng was prepared from 4 ginseng 10 roots and 6 ginseng 10 roots ginseng from Icheon, Gyeonggi-do.

<< 실시예Example 1> 백삼의 산지 판별용 표준  1> Standard for producing mountainous ginseng 마커의Marker 확립 Establish

국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지 판별을 위한 마커를 확립하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.The following experiment was performed to establish markers for determining the origin of domestic white ginseng and Chinese white ginseng.

단계 1: 백삼 Step 1: white ginseng 대사체의Metabolic 추출 extraction

상기 제조예 1에서 준비된 국내산 백삼과 중국산 백삼을 건조한 후, 각각을 분쇄하여 0.2 mg씩을 취한 후, 70% 메탄올 5 ml를 첨가하고, 350W의 초음파 분해 장치를 1시간 조사한 후, 추출액을 0.2 μm의 막여과기(membrane filter)(SUN-SRi, TN, USA)로 여과한 다음 추출액을 모았다.
After drying domestic white ginseng and Chinese white ginseng prepared in Preparation Example 1, each was pulverized, 0.2 mg of each was added, 70 ml of 70% methanol was added, and an ultrasonic degradation apparatus of 350 W was irradiated for 1 hour, and then the extract was 0.2 μm. The extract was collected by filtration through a membrane filter (SUN-SRi, TN, USA).

단계 2: 액체 크로마토그래피-질량분석기(Step 2: Liquid Chromatography-Mass Spectrometry LCLC -- MSMS )를 이용한 백삼 추출물의 분석Analysis of White Ginseng Extract Using

상기 단계 1에서 제조된 백삼 추출물의 대사체를 분석하기 위하여 UPLC는 워터스 에큐어티 UPLC 시스템을 이용하였으며, 컬럼은 에큐어티™ BEHC18(ACQUITY UPLC™ BEHC18)(10 mm×2.1 mm, i.d., 1.7μm, waters, USA)을 35 ℃에서 사용하였으며, 이동상 A는 물과 포름산(100:0.1, v/v)과 이동상 B는 아세토니트릴(acetonitril) 및 포름산(100:0.1,v/v)로 하여 초기에 이동상 B를 10%로부터 30%까지 7분까지 증가시킨 후, 44%로 14분까지, 100%로 21분까지 이동상 B를 증가시켜 분석 한 후, 이동상 B를 100%로 23.5분까지 유지시키고, 23.6분에 이동상 B를 10%로 낮춘 후 평형화 상태가 된 후 다음 분석에 사용하였다. 이동상의 유속량은 0.4㎖/분 그리고 시료 주입량은 국내산 백삼 추출액과 중국산 백삼 추출액 시료를 각각 1 ㎕를 취하여 측정에 사용하였다.In order to analyze the metabolites of the white ginseng extract prepared in step 1, UPLC used a Waters Equity UPLC System, and the column was EQUITY ™ BEHC 18 (ACQUITY UPLC ™ BEHC 18 ) (10 mm × 2.1 mm, id). , 1.7 μm, waters, USA) was used at 35 ° C., mobile phase A was water and formic acid (100: 0.1, v / v), and mobile phase B was acetonitrile (acetonitril) and formic acid (100: 0.1, v / v). Initially, mobile phase B was increased from 10% to 30% for 7 minutes, 44% to 14 minutes, 100% to 21 minutes, and then mobile phase B was analyzed for 23.5 minutes to 100%. Until the mobile phase B was lowered to 10% at 23.6 minutes, then equilibrated and used for the next analysis. The flow rate of the mobile phase was 0.4 ml / min, and the sample injection amount was 1 μl each of domestic white ginseng extract and Chinese white ginseng extract.

Q-TOF 질량분석기는 워터스사의 사중극자 직교 가속 비행시간 텐덤 질량 분석기(quadrupole orthogonal acceleration time of-flight tandem mass spectrometer(Waters Q-TOF Premier™))를 사용하였다. 질량 분석기의 분석조건은 하기 표 1에 나타낸 바와 같다. The Q-TOF mass spectrometer used Waters' quadrupole orthogonal acceleration time of-flight tandem mass spectrometer (Waters Q-TOF Premier ™). Analysis conditions of the mass spectrometer are as shown in Table 1 below.

이온 원(Ion source)Ion source ESI+ESI + 분무 기체(Nebulizer gas)Nebulizer gas 500 L/h500 L / h 분무 온도(Nebulizer Temperature)Nebulizer Temperature 350 ℃350 ℃ 콘 기체(Con gas)Con gas 50 L/h50 L / h 소스 온도(Source temperature)Source temperature 100 ℃100 ℃ 모세관 전압(Capillary voltage)Capillary voltage 2.7 kV2.7 kV 콘 전압(Con Voltage)Con Voltage 27 V27 V

상기 국내산 백삼 추출물과 중국산 백삼 추출물의 액체크로마토그래피-질량분석(LC-MS)의 전체이온 크로마토그램(total ionchromatogram) 결과는 도 1 및 2에 나타내었다.
The total ion chromatogram of liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) of the domestic white ginseng extract and the Chinese white ginseng extract is shown in FIGS. 1 and 2.

단계 3: 통계 처리 가능한 수치로 변환 및 백삼 표준 Step 3: convert to statistical numbers and white ginseng standard 마커의Marker 확립 Establish

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 데이터를 통계 처리 가능한 수치로 변환하기 위하여 워터스사의 마커링스 어플리케이션 매니저(MarkerLynx applications manager(ver. 4.1))를 이용하여 피크 발견(peak finding), 피크 정렬(peak alignment) 및 피크 여과(peak filtering)를 실행하였다. 상기 과정을 위하여 분석 데이터의 0.5분부터 19분까지를 이용하였고, 분석질량 범위는 200-1500 Da, 질량 오차허용범위는 0.02 Da, 매스 잡음(mass noise) 수준은 기초 피크 세기(base peak intensity)의 10%로 하였다. 이 과정을 통해 얻어진 모든 LC-MS 데이터에서 피크별로 머무름 시간(RT) 값과 매스값을 일치시키고 그에 따른 각 피크의 면적값을 얻은 후, 다변량분석(Multivariate statistical analysis)을 위하여 Simca-P+ ver. 12.0(Umetrics, Sweden) 소프트웨어를 이용하여 모든 데이터를 퍼-스케일(par-scaled(scaled to square root of SD))로 하여 국내산과 중국산 백삼을 그룹화하여 직교 최소자승분석(OPLS-DA)의 스코어 스캐터 플롯을 나타내었고, 직교 최소자승분석의 S 플롯(Simca-P+)을 얻어 두 산지간의 차이가 많은 성분들을 박스 플럿으로 나타내어 판별을 가능하게 하는 천연물 피크를 선발하고 이들의 질량 이온 크로마토그램[mass ion chromatogram, MassLynx(ver 4.1)]을 비교하여 유의성 있게 차이가 나는 성분을 질량 절단 방식(mass fragmentation pattern)으로 표준 마커를 선정하여 구조를 동정하였다. 그 결과를 도 3 내지 7에 나타내었다.
In order to convert the LC-MS data obtained in step 2 into numerical values capable of being statistically processed, peak finding and peak alignment are performed using Waters Markerynx applications manager (ver. 4.1). And peak filtering was performed. For the above process, 0.5 to 19 minutes of analysis data were used, analytical mass range was 200-1500 Da, mass error tolerance was 0.02 Da, and mass noise level was the base peak intensity. Was 10%. In all LC-MS data obtained through this process, the retention time (RT) value and the mass value of each peak were matched, and the area value of each peak was obtained. Then, for multivariate statistical analysis, Simca-P + ver. Using the 12.0 (Umetrics, Sweden) software, all data are par-scaled (scaled to square root of SD), grouping domestic and Chinese white ginseng to score scores of orthogonal least squares analysis (OPLS-DA). Cat plots were shown, and the S plot (Simca-P +) of orthogonal least-squares analysis was taken to represent box-plots of components with high differences between the two mountain regions to select natural peaks for discrimination and their mass ion chromatograms [mass] Ion chromatogram, MassLynx (ver 4.1)] was compared to identify the structure of the significantly different components by mass fragmentation pattern (mass fragmentation pattern) to identify the structure. The results are shown in FIGS. 3 to 7.

결과result

(1) 상기 직교 최소자승분석의 스코어 스캐터 플롯 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 국내산 백삼과 중국산 백삼은 산지에 따라 두 그룹으로 분리되었다.(1) As a result of the score scatter plot of the orthogonal least-squares analysis, as shown in FIG. 3, domestic white ginseng and Chinese white ginseng were separated into two groups according to the mountain region.

(2) 또한, 상기 직교 최소자승분석의 S 플럿 결과, 도 4 및 5에 나타낸 바와 같이, 5.21분의 963.5582의 질량을 가지는 성분과 9.30분의 771.4919의 질량을 가지는 성분이 유의적 차이가 있는 것으로 나타났다(t-test; p>0.001). (2) In addition, as a result of the S plot of the orthogonal least-squares analysis, as shown in FIGS. 4 and 5, there is a significant difference between a component having a mass of 963.5582 for 5.21 and a component having a mass of 771.4919 for 9.30. (T-test; p> 0.001).

(3) 나아가, 질량 절단 방식(mass fragmentation pattern) 결과, 도 6 및 7에 나타낸 바와 같이, 국내산 백삼의 표준마커는 하기 화학식 1에 나타낸 바와 같이, 20-글루코진세노사이드 Rf(5.21분, M.W. 963.5582)로 확인되었으며, 중국산 백삼의 표준마커는 하기 화학식 2에 나타낸 바와 같이, 노토진세토사이드 R2(9.30분, M.W. 771.4919)로 확인되었다.
(3) Furthermore, as a result of the mass fragmentation pattern, as shown in FIGS. 6 and 7, the standard marker of domestic white ginseng was 20-glucosinenoside Rf (5.21 min, MW), as shown in the following formula (1). 963.5582), and the standard marker of Chinese ginseng was identified as notogincetoside R2 (9.30 min, MW 771.4919), as shown in the following Chemical Formula 2.

[화학식 1] [화학식 2]      [Formula 1] [Formula 2]

Figure pat00023
Figure pat00024

Figure pat00023
Figure pat00024

<< 실시예Example 2> 홍삼의 산지 판별용 표준  2> Standards for the Production of Red Ginseng 마커의Marker 확립 Establish

국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지 판별을 위한 마커를 확립하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.The following experiment was conducted to establish markers for determining the location of Korean red ginseng and Chinese red ginseng.

단계 1: 홍삼 Step 1: red ginseng 대사체의Metabolic 추출 extraction

상기 제조예 1에서 준비된 국내산 홍삼과 중국산 홍삼을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하였다.
Except for using domestic red ginseng and Chinese red ginseng prepared in Preparation Example 1 was carried out in the same manner as in Step 1 of Example 1.

단계 2: 액체 크로마토그래피-질량분석기(Step 2: Liquid Chromatography-Mass Spectrometry LCLC -- MSMS )를 이용한 홍삼 추출물의 분석Analysis of Red Ginseng Extract Using

상기 단계 1에서 제조된 홍삼 추출물의 대사체를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하였다.Except for using the metabolite of the red ginseng extract prepared in step 1 was carried out in the same manner as in step 2 of Example 1.

상기 국내산 홍삼 추출물과 중국산 홍삼 추출물의 액체크로마토그래피-질량분석(LC-MS)의 전체이온 크로마토그램(total ionchromatogram) 결과는 도 8 및 9에 나타내었다.
Results of the total ion chromatogram of the liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) of the domestic red ginseng extract and the Chinese red ginseng extract are shown in FIGS. 8 and 9.

단계 3: 통계 처리 가능한 수치로 변환 및 홍삼 표준 Step 3: Convert Statistical Numbers to Processable Red Ginseng Standards 마커의Marker 확립 Establish

상기 단계 2에서 얻은 결과를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하였다.
The same procedure as in Example 3, except that the results obtained in step 2 were used.

결과result

(1) 상기 직교 최소자승분석의 스코어 스캐터 플롯 결과, 도 10에 나타낸 바와 같이, 국내산 홍삼과 중국산 홍삼은 산지에 따라 두 그룹으로 분리되었다.(1) As a result of the score scatter plot of the orthogonal least-squares analysis, as shown in FIG. 10, domestic red ginseng and Chinese red ginseng were separated into two groups according to the mountain region.

(2) 또한, 상기 직교 최소자승분석의 S 플럿 결과, 도 11 및 12에 나타낸 바와 같이, 9.04분의 801.4988의 질량을 가지는 성분과 11.70분의 767.4952의 질량을 가지는 성분이 유의적 차이가 있는 것으로 나타났다(t-test; p>0.001). (2) In addition, as a result of the S plot of the orthogonal least squares analysis, as shown in FIGS. 11 and 12, there is a significant difference between a component having a mass of 801.4988 for 9.04 and a component having a mass of 767.4952 for 11.70. (T-test; p> 0.001).

(3) 나아가, 질량 절단 방식(mass fragmentation pattern) 결과, 도 13 및 14에 나타낸 바와 같이, 국내산 홍삼의 표준마커는 하기 화학식 3에 나타낸 바와 같이, 진세노사이드 Rf(9.04분, M.W. 801.4988)로 확인되었으며, 중국산 홍삼의 표준마커는 하기 화학식 4에 나타낸 바와 같이, 진세노사이드 Rd(11.70분, M.W. 767.4952)로 확인되었다.
(3) Furthermore, as a result of the mass fragmentation pattern, as shown in FIGS. 13 and 14, the standard marker of Korean red ginseng was represented by ginsenoside Rf (9.04 minutes, MW 801.4988), as shown in the following formula (3). The standard marker of Chinese red ginseng was identified as ginsenoside Rd (11.70 minutes, MW 767.4952) as shown in the following formula (4).

[화학식 3] [화학식 4]      [Formula 3] [Formula 4]

Figure pat00025
Figure pat00026

Figure pat00025
Figure pat00026

<< 실시예Example 6> 홍삼의 연령(4년근, 6년근) 판별용 표준  6> Standard for discriminating the age of red ginseng (4 years old, 6 years old) 마커의Marker 확립 Establish

국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 산지 판별을 위한 마커를 확립하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.The following experiments were performed to establish markers for determining the origin of Korean 4 and 6 year old red ginseng.

단계 1: 홍삼 Step 1: red ginseng 대사체의Metabolic 추출 extraction

상기 제조예 1에서 준비된 4년근 국내산 홍삼과 6년근 국내산 홍삼을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하였다.
Except for using the four-year-old domestic red ginseng and six-year-old domestic red ginseng prepared in Preparation Example 1 was carried out in the same manner as in Step 1 of Example 1.

단계 2: 액체 크로마토그래피-질량분석기(Step 2: Liquid Chromatography-Mass Spectrometry LCLC -- MSMS )를 이용한 홍삼 추출물의 분석Analysis of Red Ginseng Extract Using

상기 단계 1에서 제조된 홍삼 추출물의 대사체를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하였다.Except for using the metabolite of the red ginseng extract prepared in step 1 was carried out in the same manner as in step 2 of Example 1.

상기 국내산 4년근 홍삼 추출물과 6년근 홍삼 추출물의 액체크로마토그래피-질량분석(LC-MS)의 전체이온 크로마토그램(total ionchromatogram) 결과는 도 15 및 16에 나타내었다.
Results of total ion chromatogram of liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) of the domestic four-year-old red ginseng extract and six-year-old red ginseng extract are shown in FIGS. 15 and 16.

단계 3: 통계 처리 가능한 수치로 변환 및 홍삼 표준 Step 3: Convert Statistical Numbers to Processable Red Ginseng Standards 마커의Marker 확립 Establish

상기 단계 2에서 얻은 결과를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하였다.
The same procedure as in Example 3, except that the results obtained in step 2 were used.

결과result

(1) 상기 직교 최소자승분석의 스코어 스캐터 플롯 결과, 도 17에 나타낸 바와 같이, 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼은 연근에 따라 두 그룹으로 분리되었다.(1) As a result of the score scatter plot of the orthogonal least squares analysis, as shown in FIG. 17, domestic four-year-old red ginseng and six-year-old red ginseng were divided into two groups according to lotus root.

(2) 또한, 상기 직교 최소자승분석의 S 플럿 결과, 도 18 내지 20에 나타낸 바와 같이, 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 성분들이 질량에서 유의적 차이가 있는 것으로 나타났다(t-test; p>0.001). (2) In addition, as a result of the S plot of the orthogonal least squares analysis, as shown in FIGS. 18 to 20, the components of four-year-old red ginseng and six-year-old red ginseng showed a significant difference in mass (t-test; p>). 0.001).

이중, 4년근 홍삼 성분은 말로닐 진세노사이드 Rb1(9.89 분의 1195.6145)(화학식 5), 말로닐 진세노사이드 Rc(10.30분, M.W. 1165.6030)(화학식 6), 말로닐 진세노사이드 Rb2(10.75분, M.W. 1165.6036)(화학식 7), 말로닐 진세노사이드 Rd(12.02분, M.W. 853.4980)(화학식 8)로 확인되었고, 또한 6년근 홍삼 성분은 (R)-진세노사이드 Rh1(10.48 분, M.W. 1277.8934)(화학식 9), 퀸퀘노사이드 R1(11.26분, M.W. 1151.6239)(화학식 10), (R)-진세노사이드 Rg3(15.80분, M.W. 749.4871)(화학식 11)로 확인되었다. Of these, four-year-old red ginseng components are malonyl ginsenoside Rb1 (1195.6145 / 9.89 minutes) (Formula 5), malonyl ginsenoside Rc (10.30 minutes, MW 1165.6030) (Formula 6), malonyl ginsenoside Rb2 (10.75 Minutes, MW 1165.6036) (Formula 7), malonyl ginsenoside Rd (12.02 minutes, MW 853.4980) (Formula 8), and 6 years old red ginseng component (R) -ginsenoside Rh1 (10.48 minutes, MW 1277.8934) (Formula 9), Quinquenoside R1 (11.26 minutes, MW 1151.6239) (Formula 10), (R) -ginsenoside Rg3 (15.80 minutes, MW 749.4871) (Formula 11).

상기 4년근 홍삼 성분과 6년근 홍삼 성분을 하기 표 2에 나타내었다.The four-year-old red ginseng components and six-year-old red ginseng components are shown in Table 2 below.

화학식Chemical formula 구조rescue 화합물 명칭Compound name




5





5

Figure pat00027
Figure pat00027





말로닐 진세노사이드 Rb1





Malonyl Ginsenoside Rb1





6





6
Figure pat00028
Figure pat00028





말로닐 진세노사이드 Rc





Malonyl Ginsenoside Rc





7





7
Figure pat00029
Figure pat00029





말로닐 진세노사이드 Rb2





Malonyl Ginsenoside Rb2





8





8
Figure pat00030
Figure pat00030





말로닐 진세노사이드 Rd





Malonyl Ginsenoside Rd




9




9
Figure pat00031
Figure pat00031




(R)-진세노사이드 Rh1




(R) -ginsenoside Rh1





10





10
Figure pat00032
Figure pat00032





퀸퀘노사이드 R1





Queen Quenoside R1




11




11
Figure pat00033
Figure pat00033




(R)-진세노사이드 Rg3




(R) -ginsenoside Rg3

Claims (21)

국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커.
[화학식 1]
Figure pat00034

[화학식 2]
Figure pat00035

Marker for determining the location of the white ginseng represented by the formula (1) or 2 used for the determination of the production of domestic white ginseng and Chinese white ginseng.
[Formula 1]
Figure pat00034

(2)
Figure pat00035

제1항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 국내산 백삼의 산지 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 백삼의 산지 판별용 마커.
According to claim 1, wherein the compound represented by the formula (1) is a marker for determining the origin of white ginseng, characterized in that the marker for determining the production of domestic white ginseng.
제1항에 있어서, 상기 화학식 2로 표시되는 화합물은 중국산 백삼의 산지 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 백삼의 산지 판별용 마커.
The method of claim 1, wherein the compound represented by the formula (2) is a marker for determining the origin of white ginseng, characterized in that the marker for determining the origin of Chinese ginseng.
국내산 백삼과 중국산 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 제1항의 백삼 산지 판별용 마커의 확립방법.
Extracting metabolites from domestic white ginseng and Chinese white ginseng (step 1);
Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And
In step 2, the result analyzed by LC-MS is converted into a numerical value that can be statistically processed, and the data obtained by analyzing the converted value by the multivariate analysis method are detected. A method for establishing a white ginseng mountain determination marker according to claim 1, comprising the step (step 3) of establishing as a standard marker according to the mountain regions.
제4항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법은 직교 최소자승 분석법인 것을 특징으로 하는 백삼의 산지 판별용 마커의 확립방법.
5. The method of claim 4, wherein the multivariate analysis method of step 3 is an orthogonal least square analysis method.
제4항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터는 스코어 스캐터 플롯인 것을 특징으로 하는 백삼의 산지 판별용 마커의 확립방법.
The method of claim 4, wherein the data obtained by analyzing the multivariate analysis of step 3 is a score scatter plot.
피검 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 제1항의 화학식 1 또는 2의 산지 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 백삼의 산지 판별방법.
Extracting the metabolite from the test white ginseng (step 1);
Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And
Comparing the results of the LC-MS analysis obtained in step 2 with the marker for determining the mountain region of the formula (1) or claim 2 (step 3).
국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커.
[화학식 3]
Figure pat00036

[화학식 4]
Figure pat00037

Marker for determining the location of the red ginseng represented by the formula (3) or (4) used to determine the production of domestic red ginseng and Chinese red ginseng.
(3)
Figure pat00036

[Chemical Formula 4]
Figure pat00037

제8항에 있어서, 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물은 국내산 홍삼의 산지 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 홍삼의 산지 판별용 마커.
The method of claim 8, wherein the compound represented by the formula (3) is a marker for determining the origin of red ginseng, characterized in that the marker for determining the origin of Korean red ginseng.
제8항에 있어서, 상기 화학식 4로 표시되는 화합물은 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 홍삼의 산지 판별용 마커.
The method of claim 8, wherein the compound represented by the formula (4) is a marker for determining the origin of red ginseng, characterized in that the marker for determining the origin of Chinese red ginseng.
국내산 홍삼과 중국산 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 제8항의 홍삼 산지 판별용 마커의 확립방법.
Extracting metabolites from domestic red ginseng and Chinese red ginseng (step 1);
Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And
In step 2, the result analyzed by LC-MS is converted into a numerical value that can be statistically processed, and the data obtained by analyzing the converted value by the multivariate analysis method are detected. A method of establishing a marker for determining the red ginseng mountain region of claim 8, comprising the step (step 3) of establishing as a standard marker according to the mountain region.
제11항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법은 직교 최소자승 분석법인 것을 특징으로 하는 홍삼의 산지 판별용 마커의 확립방법.
12. The method of claim 11, wherein the multivariate analysis method of step 3 is an orthogonal least square analysis method.
제11항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터는 스코어 스캐터 플롯인 것을 특징으로 하는 홍삼의 산지 판별용 마커의 확립방법.
12. The method of claim 11, wherein the data obtained by analyzing the multivariate analysis of step 3 is a score scatter plot.
피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 제8항의 화학식 3 또는 4의 산지 판별 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 산지 판별방법.
Extracting the metabolite from the red ginseng to be examined (step 1);
Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And
Comparing the results of the LC-MS analysis obtained in step 2 with the acid determination marker of the formula (3) or claim 8 (step 3) of the determination region of red ginseng.
국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 연근판별에 사용되는 하기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커.
[화학식 5]
Figure pat00038

[화학식 6]
Figure pat00039

[화학식 7]
Figure pat00040

[화학식 8]
Figure pat00041

[화학식 9]
Figure pat00042

[화학식 10]
Figure pat00043

[화학식 11]
Figure pat00044

Marker for determining the age of red ginseng represented by the following formula 5 to 11 used for the lotus root discrimination of 4 years old red ginseng and 6 years old red ginseng domestic.
[Chemical Formula 5]
Figure pat00038

[Chemical Formula 6]
Figure pat00039

(7)
Figure pat00040

[Chemical Formula 8]
Figure pat00041

[Chemical Formula 9]
Figure pat00042

[Formula 10]
Figure pat00043

(11)
Figure pat00044

제15항에 있어서, 상기 화학식 5 내지 8로 표시되는 화합물은 4년근 홍삼의 연령 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 홍삼의 연령 판별용 마커.
16. The marker for determining age of red ginseng according to claim 15, wherein the compound represented by Chemical Formulas 5 to 8 is an age discriminating marker of 4 years old red ginseng.
제15항에 있어서, 상기 화학식 9 내지 11로 표시되는 화합물은 6년근 홍삼의 연령 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 홍삼의 연령 판별용 마커.
The marker for determining the age of red ginseng according to claim 15, wherein the compound represented by the formulas (9) to (11) is a marker for determining the age of 6-year-old red ginseng.
국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 홍삼의 연령에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 제15항의 홍삼 연령 판별용 마커의 확립방법.
Extracting metabolites from domestic 4 year old red ginseng and 6 year old red ginseng (step 1);
Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And
In step 2, the result analyzed by LC-MS is converted into a numerical value that can be statistically processed, and the data obtained by analyzing the converted value by the multivariate analysis method are detected. A method of establishing a marker for determining the age of red ginseng according to claim 15, comprising the step (step 3) of establishing as a standard marker according to the age of red ginseng.
제18항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법은 직교 최소자승 분석법인 것을 특징으로 하는 홍삼의 연령 판별용 마커의 확립방법.
19. The method of claim 18, wherein the multivariate analysis method of step 3 is an orthogonal least-squares analysis method.
제18항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터는 스코어 스캐터 플롯인 것을 특징으로 하는 홍삼의 연령 판별용 마커의 확립방법.
19. The method of claim 18, wherein the data obtained by analyzing the multivariate analysis of step 3 is a score scatter plot.
피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 제15항의 화학식 5 내지 11로 표시되는 화합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 연령 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 연령 판별방법.
Extracting the metabolite from the red ginseng to be examined (step 1);
Analyzing the metabolite extracted in step 1 by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) (step 2); And
Comparing the LC-MS analysis result obtained in step 2 with the age discriminating marker selected from the group consisting of compounds represented by the formulas 5 to 11 of claim 15 (step 3) age discrimination method.
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