KR101409848B1 - Standard marker for determining place of origin or age of processed ginseng, establishing method thereof, or method for determining place of origin or age using the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, 국내산 가공인삼 즉, 백삼과 홍삼에서 표준 마커를 확립하고, 상기 마커를 이용하여 산지 또는 연령의 식별이 쉽지 않은 농축액, 분말 등의 가공인삼의 산지 또는 연령을 신속하게 비교 분석이 가능하므로 수출입 시, 가공인삼의 산지 또는 연령 판별에 유용하게 사용될 수 있다.The present invention relates to a standard marker for discriminating the origin or age of processed ginseng, a method for establishing the same, or a method for determining the country of origin or age using the same. According to the present invention, it is possible to establish standard markers in domestic processed ginseng, that is, white ginseng and red ginseng, and to quickly compare and analyze the origin or age of processed ginseng such as concentrate and powder, Therefore, it can be useful for determining the origin or age of processed ginseng at the time of import and export.

Description

가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법{Standard marker for determining place of origin or age of processed ginseng, establishing method thereof, or method for determining place of origin or age using the same}BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for determining the origin or age of processed ginseng, the same}

본 발명은 가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법에 관한 것이다.The present invention relates to a standard marker for discriminating the origin or age of processed ginseng, a method for establishing the same, or a method for determining the country of origin or age using the same.

종래 농산물의 원산지판별을 위하여 최근에는 비파괴기술인 근적외선 분광법, 전자코, X-선 형광분석법 등이 많이 사용되고 있으며, 특히 근적외선 분광법을 이용한 비파괴 기술은 과채류의 당도, 곡류의 함수율, 아밀로오소의 함량, 우유와 유제품의 지방, 단백질 및 고형분함량 분석에 많이 응용되고 있으며, 농산물의 품종이나 원산지를 판별하기 위하여 전기영동, HPLC 분석법 등과 같은 기존의 단백질분석법을 활용할 수 있으나 시간과 비용이 많이 소요되는 단점이 있어 현장에서의 적용에 어려움이 있었다. 그러나 최근, 기존의 분석법보다 분석시간이 짧고 분리능(resolution)이 높아 분석에 필요한 시간 및 시료량을 최소화할 수 있으며 양적 디지털 분석이 가능한 새로운 기법으로서 CE 크로마토그램이 적용되기 시작했으나 아직까지 곡류, 특히 밀의 품종 판별에 주로 활용되고 있다(비특허문헌 1). In recent years, non-destructive techniques such as near-infrared spectroscopy, electronic nose, and X-ray fluorescence spectroscopy have been widely used. In particular, nondestructive techniques using near-infrared spectroscopy are used to determine the sugar content of fruit vegetables, the moisture content of cereals, Protein and solids content of milk and dairy products and it is possible to utilize existing protein analysis methods such as electrophoresis and HPLC method in order to discriminate the kind or origin of agricultural products, And there was difficulty in application in the field. However, recently, the analysis time is shorter and the resolution is higher than that of the conventional method, so that the time and sample amount required for the analysis can be minimized, and CE chromatogram has been applied as a new technique capable of quantitative digital analysis. However, It is mainly used for discrimination of cultivars (Non-Patent Document 1).

이에, 가공인삼, 비가공인삼 등을 포함한 다양한 농산물의 산지나 재배조건에 따라 발생하는 품질의 차이를 효율적으로 구분하고 WTO 체제에 의한 농산물의 산지표시 강화 및 제도화에 부응하기 위한 과학적 판별방법 개발이 시급히 요구되며 부정 유통되는 수입산 농산물이 날로 증가하고 있으므로 현장 단속 과정에서 수거된 이들 농산물의 원산지 검정을 위한 과학적인 식별방법 개발이 요구된다.
Therefore, it is necessary to effectively distinguish the differences in quality caused by the production and cultivation conditions of various agricultural products including processed ginseng and non-processed ginseng, and to develop a scientific discrimination method to respond to the strengthening and institutionalization of agricultural product indication by the WTO system Since the number of imported agricultural products that are urgently demanded and circulated illegally is increasing day by day, it is required to develop a scientific identification method to check the origin of these agricultural products collected in the field control process.

인삼(panax ginseng C.A. Meyer)은 약용식물로서의 수천 년 전부터 사용되어 왔으며, 인삼은 오랫동안 자기 환경에 알맞게 진화해왔다. 조금씩 자기가 처한 환경에서 잘 살 수 있도록 적응해 왔으며 그 환경에 맞게 자신을 변화시켜 왔고, 인삼은 가공 방법에 따라 수삼, 백삼, 홍삼 등으로 구분하고, 채굴된 자연 상태의 인삼을 수삼이라고 하며, 수삼의 껍질을 벗긴 뒤 햇빛이나 열풍에 건조시킨 것을 백삼(white ginseng)이라고 한다. 또한, 백삼을 껍질을 벗기지 않은 상태로 증기로 쪄서 건조한 것을 홍삼(red ginseng)이라 한다. Panax ginseng C.A. Meyer has been used for thousands of years as a medicinal plant, and ginseng has evolved for a long time in its own environment. Ginseng has been adapted to the environment to be able to live well in its own environment, and ginseng is divided into ginseng, white ginseng, red ginseng according to the processing method, White ginseng is called "dried white ginseng" after it is peeled off and dried in sunlight or hot air. In addition, red ginseng is called "red ginseng" when steamed white ginseng is unpeeled and dried.

인삼은 세계적으로 한국산 고려인삼이 가장 우수한 것으로 예부터 알려져 왔다. 그러나 최근 해외시장에서는 값싼 중국산과 미국과 캐나다산 인삼에 국제시장을 잠식당하고 있는 실정으로, 최근 중국산 인삼이 밀무역으로 국내시장에 들어와 국내 재배 인삼의 입지를 어렵게 하고 있는 실정이고(비특허문헌 2), 또한, 해외 인삼의 경우 3-4년생 인삼을 채굴하기 때문에 연근판별에 큰 의미를 두지 않으나, 국내의 경우 고년근일수록 약효가 뛰어나다는 관습적 믿음에 따라 고년근일수록 가격이 비싼 특성 때문에 유통시장에서 저년근을 6년 근으로 위장하는 사례가 빈번하여 유통질서가 교란되고 소비자 신뢰도가 떨어지는 원인이 되고 있기에 인삼의 연근판별이 큰 문제점이 되고 있는 실정이다.
Ginseng has long been known to be the best Korean ginseng from all over the world. In recent years, Chinese ginseng has entered the domestic market as a ginseng market, making it difficult to locate domestic ginseng (Non-Patent Document 2). In recent years, In addition, in case of overseas ginseng, ginseng is 3-4 years old so it does not have much significance in the determination of lotus root. However, according to the customary belief that the longer the old age is, the more expensive the year, In the past decade, the distribution system has been disturbed and the reliability of consumers has been reduced. Therefore, the identification of ginseng root is a big problem.

현재 농림부령 연근판별 검사기준은 수확시 검사담당직원이 입회하여 연근을판정하며, 세부기준으로는 머리, 몸통 및 표피 형태, 다리 발달정도, 절단시 나이테 등을 육안 또는 발색시켜 판별(농림부, 인삼산업법, 법률 제8조, 2004)하도록 되어있는데, 재배 이력이 확인되는 현장에서 보조적인 판별법으로 사용되지만 관능평가 수준이라 논란의 여지가 많고, 더욱이 재배이력이 불분명한 유통시장에서는 적용하기 힘든 실정이라고 할 수 있다. 그동안 연구 보고된 연근판별법으로는 뇌두경흔(비특허문헌 3), 나이테(비특허문헌 4 및 비특허문헌 5), 지근발달(비특허문헌 6), 기계건조법(비특허문헌 4), 분비도관 조직염색(비특허문헌 7), 진세노사이드 함량(비특허문헌 8) 분석법 등이 보고된 바 있으나 분비도관 조직염색법이 정확한 판별법으로 평가되고, 그 외 방법들은 신뢰도가 낮아 보조적으로 활용되는 수준이다. 그러나 분비도관 조직염색법은 주근의 뿌리 단면으로 판별하기 때문에 재배인삼의 경우에 한정되고 인삼분말에는 적용 불가능하고, 가공된 홍삼의 경우에는 적용하기 힘든 방법이다.At present, the criteria for the inspection of the root of the agriculture and forestry bureaucrats are to be inspected at the time of harvest and the lotus root is judged. Detailed criteria are the head, body and epidermal shape, degree of leg development, And it is difficult to apply it to the distribution market where the cultivation history is unclear because it is used as an auxiliary discrimination method in the field where the cultivation history is confirmed, . In this study, we have investigated the effect of lysozyme on the lyophilisation of lysozyme. The lyophilisation method has been reported in the past. However, the secretory ductal tissue staining method is evaluated by the accurate discrimination method, and the other methods are low in reliability, and are used as an auxiliary method (see Non-Patent Document 7) and ginsenoside content (non-patent document 8) . However, the secretory ductal tissue staining method is limited to the cultivated ginseng powder because it is identified as the root cross section of the main root, and it is not applicable to the ginseng powder.

이에 본 발명자들은 상기 문제점을 해결하고자 국내산 가공인삼과 중국산 가공인삼의 산지 또는 연근 판별법을 연구하던 중, 국내산 가공인삼과 중국산 가공인삼에서 표준 마커를 분리 및 분석하여 선별하고, 이를 이용하여 산지를 판별하거나 연근을 판별할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the inventors of the present invention, in studying the discrimination method of locally produced or ginseng roots of domestic processed ginseng and Chinese ginseng, separated and analyzed standard markers from domestic processed ginseng and Chinese processed ginseng to discriminate the origin Or a lotus root can be discriminated, and the present invention has been completed.

김남수, "국산 및 수입농산물(가공식품)의 판별기술과 안전성 평가기술 개발" 연구과제보고서, 2003;Kim, Nam-Soo, "Development of identification technology and safety evaluation technology for domestic and imported agricultural products (processed foods)" 서동상, “한국산 장뇌산삼과 중국산 장뇌삼의 분류체계 확립 및 효능에 관한 연구” 연구과제보고서, 2007;Seo Dong Sang, "A Study on the Establishment and Effectiveness of Classification System of Korean Cinnamon Ginseng and Chinese Ginseng Ginseng", 2007 Research Report, 2007; J. Ginseng Res. vol.31, 142-146, 2007;J. Ginseng Res. vol. 31, 142-146, 2007; J. Ginseng Res. vol 30, 153-157, 2006;J. Ginseng Res. vol 30, 153-157, 2006; 인삼연구보고서-재배편, 한국인삼연초연구소 p331, 1987;Ginseng Research Report - Cultivation, Korea Ginseng and Tobacco Research Institute p331, 1987; 인삼연구보고서-재배편, 한국인삼연초연구소 p175, 1988;Ginseng Research Report - Cultivation, Korean Ginseng and Tobacco Research Institute p175, 1988; J. Ginseng Res. vol 25, 101-105, 2001;J. Ginseng Res. vol 25, 101-105, 2001; Can. J. Plant Sci. vol 76, p 855 1996.Can. J. Plant Sci. vol. 76, p 855 1996.

본 발명의 목적은 백삼의 산지판별에 사용되는 백삼 산지 판별용 마커를 제공하는 것이다.An object of the present invention is to provide a marker for discriminating the white ginseng from the white ginseng used for discriminating the origin of white ginseng.

본 발명의 다른 목적은 백삼의 산지 판별방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for discriminating the origin of white ginseng.

본 발명의 또 다른 목적은 홍삼의 산지판별에 사용되는 홍삼 산지 판별용 마커를 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a marker for distinguishing red ginseng from red ginseng, which is used in the identification of the red ginseng.

본 발명의 다른 목적은 홍삼의 산지 판별방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for discriminating the origin of red ginseng.

본 발명의 또 다른 목적은 홍삼의 연령 판별에 사용되는 홍삼 연령 판별용 마커를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a marker for determining the age of red ginseng used in the age determination of red ginseng.

본 발명의 다른 목적은 홍삼의 연령 판별방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for determining the age of red ginseng.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:In order to achieve the above object, the present invention provides a marker for discriminating the origin of white ginseng represented by the following formula (1) or (2), which is used for discriminating the origin of domestic white ginseng and Chinese white ginseng:

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure 112014020983045-pat00001
Figure 112014020983045-pat00001

[화학식 2](2)

Figure 112014020983045-pat00002
Figure 112014020983045-pat00002

또한, 본 발명은 피검 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);In addition, the present invention provides a method for extracting a metabolite from a white ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 1 또는 2의 산지 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 백삼의 산지 판별방법을 제공한다.Comparing the result of the LC-MS analysis obtained in the step 2 with the marker for discriminating the mountain area of the formula (1) or (2) (step 3).

나아가, 본 발명은 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:Furthermore, the present invention provides a marker for discriminating the origin of red ginseng represented by the following formula (3) or (4) used for discriminating the origin of domestic red ginseng and Chinese red ginseng:

[화학식 3](3)

Figure 112014020983045-pat00003
Figure 112014020983045-pat00003

[화학식 4][Chemical Formula 4]

Figure 112014020983045-pat00004
Figure 112014020983045-pat00004

또한, 본 발명은 피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);The present invention also relates to a method of extracting a metabolite from a red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 3 또는 4의 산지 판별 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 산지 판별방법을 제공한다.Comparing the result of the LC-MS analysis obtained in the step 2 with the marker of the mountain area discrimination of the formula (3) or (4) (step 3).

나아가, 본 발명은 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 연근판별에 사용되는 하기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커를 제공한다:Further, the present invention provides a marker for determining the age of red ginseng represented by the following formulas (5) to (11), which is used for distinguishing the lotus root of Korean 4-year old red ginseng and 6-year old ginseng root ginseng:

[화학식 5][Chemical Formula 5]

Figure 112014020983045-pat00005
Figure 112014020983045-pat00005

[화학식 6][Chemical Formula 6]

Figure 112014020983045-pat00006
Figure 112014020983045-pat00006

[화학식 7](7)

Figure 112014020983045-pat00007
Figure 112014020983045-pat00007

[화학식 8][Chemical Formula 8]

Figure 112014020983045-pat00008
Figure 112014020983045-pat00008

[화학식 9][Chemical Formula 9]

Figure 112014020983045-pat00009
Figure 112014020983045-pat00009

[화학식 10][Chemical formula 10]

Figure 112014020983045-pat00010
Figure 112014020983045-pat00010

[화학식 11](11)

Figure 112014020983045-pat00011
Figure 112014020983045-pat00011

또한, 본 발명은 피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);The present invention also relates to a method of extracting a metabolite from a red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 5 내지 11로 표시되는 화합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 연령 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 연령 판별방법을 제공한다.(Step 3) of comparing the LC-MS analysis result obtained in the step 2 with an age discriminating marker selected from the group consisting of the compounds represented by the above-mentioned formulas 5 to 11, to provide an age discrimination method for red ginseng.

본 발명에 의하면, 국내산 가공인삼 즉, 백삼과 홍삼에서 표준 마커를 확립하고, 상기 마커를 이용하여 산지 또는 연령의 식별이 쉽지 않은 농축액, 분말 등의 가공인삼의 산지 또는 연령을 신속하게 비교 분석이 가능하므로 수출입 시, 가공인삼의 산지 또는 연령 판별에 유용하게 사용될 수 있다.According to the present invention, it is possible to establish standard markers in domestic processed ginseng, that is, white ginseng and red ginseng, and to quickly compare and analyze the origin or age of processed ginseng such as concentrate and powder, Therefore, it can be useful for determining the origin or age of processed ginseng at the time of import and export.

도 1은 본 발명의 실시예의 국내산 백삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명의 실시예의 중국산 백삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 3은 본 발명의 실시예의 국내산 백삼 추출물과 중국산 백삼 추출물의 스코어 스캐터 플럿을 나타내는 도면이다.
도 4는 본 발명의 실시예의 국내산 백삼 추출물과 중국산 백삼 추출물의 최소 직교자승분석의 S 플럿을 나타내는 도면이다.
도 5는 본 발명의 실시예의 (a)국내산 백삼 추출물과 (b)중국산 백삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
도 6은 실시예의 국내산 백삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 7은 실시예의 중국산 백삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 8은 본 발명의 실시예의 국내산 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 9는 본 발명의 실시예의 중국산 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 10은 본 발명의 실시예의 국내산 홍삼 추출물과 중국산 홍삼 추출물의 스코어 스캐터 플럿을 나타내는 도면이다.
도 11은 본 발명의 실시예의 국내산 홍삼 추출물과 중국산 홍삼 추출물의 최소 직교자승분석의 S 플럿을 나타내는 도면이다.
도 12는 본 발명의 실시예의 (a)국내산 홍삼 추출물과 (b)중국산 홍삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
도 13은 실시예의 국내산 홍삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 14는 실시예의 중국산 홍삼 추출물의 질량 토막내기 방식을 나타내는 도면이다.
도 15는 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 16은 본 발명의 실시예의 국내산 6년근 홍삼 추출물의 이온 크로마토그램을 나타내는 도면이다.
도 17은 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물과 6년근 홍삼 추출물의 스코어 스캐터 플럿을 나타내는 도면이다.
도 18은 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물과 6년근 홍삼 추출물의 최소 직교자승분석의 S 플럿을 나타내는 도면이다.
도 19는 본 발명의 실시예의 국내산 4년근 홍삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
도 20은 본 발명의 실시예의 국내산 6년근 홍삼 추출물의 박스 플럿을 나타내는 도면이다.
FIG. 1 is a view showing an ion chromatogram of a domestic white ginseng extract according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a view showing ion chromatogram of Chinese white ginseng extract of an example of the present invention. FIG.
FIG. 3 is a view showing a scorecard plot of domestic white ginseng extract and Chinese white ginseng extract according to an embodiment of the present invention.
FIG. 4 is a graph showing S flots of least square analysis of domestic white ginseng extract and Chinese white ginseng extract according to an embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 5 is a graph showing the (a) domestic white ginseng extract and (b) the Chinese white ginseng extract box fillet according to the embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 6 is a view showing a mass-trapping system of domestic white ginseng extract of the example.
Fig. 7 is a view showing the mass-trapping method of Chinese white ginseng extract of the Example. Fig.
FIG. 8 is a graph showing ion chromatograms of Korean red ginseng extract according to an embodiment of the present invention.
9 is a view showing ion chromatogram of Chinese red ginseng extract of the example of the present invention.
10 is a view showing a scorecard plot of domestic red ginseng extract and Chinese red ginseng extract according to an embodiment of the present invention.
11 is a diagram showing S flots of the least square analysis of Korean red ginseng extract and Chinese red ginseng extract of the present invention.
FIG. 12 is a view showing the (a) domestic red ginseng extract and (b) the Chinese red ginseng extract box-fillet according to the embodiment of the present invention.
FIG. 13 is a view showing the mass-trapping method of the domestic red ginseng extract of the Example.
Fig. 14 is a view showing the mass-trapping method of Chinese red ginseng extract of the Example. Fig.
FIG. 15 is a graph showing ion chromatograms of 4-year-old Korean red ginseng extract of the present invention.
FIG. 16 is a graph showing ion chromatograms of 6-year old Korean red ginseng extract of the present invention.
17 is a view showing a scorecard plot of 4-year old Korean red ginseng extract and 6-year old red ginseng extract of the present invention.
FIG. 18 is a diagram showing a S-plot of a minimum orthogonal square analysis of 4-year old Korean red ginseng extract and 6-year old green ginseng extract of the present invention.
FIG. 19 is a view showing a box plat of 4-year old Korean red ginseng extract of the present invention.
FIG. 20 is a view showing a box plat of Korean domestic red ginseng extract of the present invention of the present invention. FIG.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:The present invention provides a marker for discriminating the origin of white ginseng represented by the following formula (1) or (2), which is used for discriminating the origin of domestic white ginseng and Chinese white ginseng:

Figure 112014020983045-pat00012
Figure 112014020983045-pat00012

Figure 112014020983045-pat00013
Figure 112014020983045-pat00013

이때, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 국내산 백삼의 산지 판별용 마커이고, 상기 화학식 2로 표시되는 화합물은 중국산 백삼의 산지 판별용 마커이다.
The compound represented by Formula 1 is a marker for discriminating the origin of domestic white ginseng and the compound represented by Formula 2 is a marker for discriminating the origin of Chinese white ginseng.

본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 2로 표시되는 백삼의 산지 판별용 마커는 국내산 백삼과 중국산 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);The markers for determining the origin of white ginseng represented by Chemical Formulas 1 or 2 according to the present invention include extracting metabolites from domestic white ginseng and Chinese white ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 방법으로 확립될 수 있다.
In step 2, the results analyzed by the LC-MS are converted into numerical values that can be processed statistically. From the data obtained by analyzing the converted numerical values by the multivariate analysis method, components showing differences between the groups are detected, And establishing it as a standard marker along the origin (step 3).

구체적으로, 본 발명에 따른 단계 1은 국내산 백삼과 중국산 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계로써, 상기 추출용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C4 저급 알코올을 이용하는 것이 바람직하고, 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 더욱 바람직하며, 70% 메탄올을 이용하는 것이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 추출 방법으로는 여과법, 열수추출, 침지추출, 환류냉각추출 및 초음파추출 등 당업계의 통상적인 방법을 이용할 수 있으며, 초음파추출 방법으로 1회 내지 5회 추출하는 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 추출온도는 20 내지 30 ℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
Specifically, step 1 according to the present invention is a step of extracting metabolites from domestic white ginseng and Chinese white ginseng, and it is preferable to use water, alcohol or a mixture thereof as the extraction solvent. The alcohol is preferably a C 1 to C 4 lower alcohol, more preferably ethanol or methanol, most preferably 70% methanol, but is not limited thereto. Examples of the extraction method include filtration, hot water extraction, immersion extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction, and the like, and the extraction is preferably performed once to five times by the ultrasonic extraction method, But is not limited thereto. The extraction temperature is preferably 20 to 30 占 폚, but is not limited thereto.

또한, 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계로써, 컬럼크로마토그래피는 30-40 ℃에서 사용하였으며, 이때 사용가능한 이동상 A는 물과 포름산(100:0.1, v/v)이고, 이동상 B는 아세토니트릴(acetonitril) 및 포름산(100:0.1,v/v)로 하여 사용하였다. 이동상의 유속량은 0.4㎖/분 그리고 시료 주입량은 국내산 백삼 추출액과 중국산 백삼 추출액 시료를 각각 1 ㎕를 취하여 측정에 사용할 수 있다. 또한, 질량분석기는 사중극자 직교 가속 비행시간 텐덤 질량 분석기를 사용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
The step 2 is a step of analyzing the metabolite extracted in the step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS), and column chromatography was carried out at 30-40 ° C, Water and formic acid (100: 0.1, v / v) and mobile phase B was used as acetonitrile and formic acid (100: 0.1, v / v). The flow rate of the mobile phase is 0.4 ml / min and the sample injection amount can be measured by taking 1 μl of the domestic white ginseng extract and the Chinese white ginseng extract sample, respectively. In addition, the mass spectrometer can use, but is not limited to, a quadrupole orthogonal acceleration flight time tandem mass spectrometer.

나아가, 상기 단계 3은 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출한 다음 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 국내산 백삼 표준마커와 중국산 백삼의 표준 마커를 확립하는 단계로써, 이때 사용된 상기 다변량 분석법은 직교 최소자승 분석법이고, 이러한 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터는 스코어 스캐터 플롯으로 표준 마커를 확인할 수 있다.
Further, in step 3, the result analyzed by LC-MS is converted into a statistically processable value, and the converted numerical value is analyzed by multivariate analysis to detect components showing differences between data and groups. Then, And the standard markers of domestic white ginseng and white ginseng are established as standard markers according to the mountain area. The multivariate analysis method used at this time is orthogonal least-squares analysis, and the data obtained by analyzing with the multivariate analysis method are used as a score scatter plot You can see the standard markers.

또한, 본 발명은 In addition,

피검 백삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Extracting a metabolite from the white ginseng to be tested (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 1 또는 2의 산지 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 백삼의 산지 판별방법을 제공한다.
Comparing the result of the LC-MS analysis obtained in the step 2 with the marker for discriminating the mountain area of the formula (1) or (2) (step 3).

상기 백삼의 산지 판별방법은 산지 식별이 어려운 농축액, 분말 등의 백삼 산지를 표준 마커를 이용하여 신속하게 비교가 가능하므로 수출입 시, 백삼의 산지 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
The method for determining the origin of white ginseng can be used for discriminating the origin of white ginseng at the time of import and export because it is possible to quickly compare white ginseng seeds such as concentrate and powder which are difficult to identify the origin, using standard markers.

나아가, 본 발명은 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지판별에 사용되는 하기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커를 제공한다:Furthermore, the present invention provides a marker for discriminating the origin of red ginseng represented by the following formula (3) or (4) used for discriminating the origin of domestic red ginseng and Chinese red ginseng:

Figure 112014020983045-pat00014
Figure 112014020983045-pat00014

Figure 112014020983045-pat00015
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이때, 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물은 국내산 홍삼의 산지 판별용 마커이고, 상기 화학식 4로 표시되는 화합물은 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커이다.
Here, the compound represented by Formula 3 is a marker for discriminating the origin of domestic red ginseng, and the compound represented by Formula 4 is a marker for discriminating the origin of Chinese red ginseng.

또한, 본 발명에 따른 상기 화학식 3 또는 4로 표시되는 홍삼의 산지 판별용 마커는 국내산 홍삼과 중국산 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Further, the markers for discriminating the origin of red ginseng represented by the above formula (3) or (4) according to the present invention may include a step (step 1) of extracting metabolites from Korean red ginseng and Chinese red ginseng;

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 방법으로 확립될 수 있다.In step 2, the results analyzed by the LC-MS are converted into numerical values that can be processed statistically. From the data obtained by analyzing the converted numerical values by the multivariate analysis method, components showing differences between the groups are detected, And establishing it as a standard marker along the origin (step 3).

구체적으로, 상기 단계 1 내지 3은 상기 백삼의 산지 판별방법과 동일한 방법으로 수행될 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
Specifically, the steps 1 to 3 may be performed in the same manner as in the method for determining the mountain area of white ginseng, but the present invention is not limited thereto.

또한, 본 발명은 In addition,

피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Extracting a metabolite from the red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 3 또는 4의 산지 판별 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 산지 판별방법을 제공한다.
Comparing the result of the LC-MS analysis obtained in the step 2 with the marker of the mountain area discrimination of the formula (3) or (4) (step 3).

상기 홍삼의 산지 판별방법은 산지 식별이 어려운 농축액, 분말 등의 홍삼 산지를 표준 마커를 이용하여 신속하게 비교가 가능하므로 수출입 시, 홍삼의 산지 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
The method of determining the origin of red ginseng can be used for discriminating the origin of red ginseng at the time of import and export because it is possible to quickly compare the origin of red ginseng such as concentrate and powder, which are difficult to identify the origin, using standard markers.

나아가, 본 발명은 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 연근판별에 사용되는 하기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커를 제공한다:Further, the present invention provides a marker for determining the age of red ginseng represented by the following formulas (5) to (11), which is used for distinguishing the lotus root of Korean 4-year old red ginseng and 6-year old ginseng root ginseng:

Figure 112014020983045-pat00016
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Figure 112014020983045-pat00017
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Figure 112014020983045-pat00018
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Figure 112014020983045-pat00019
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Figure 112014020983045-pat00020
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Figure 112014020983045-pat00021
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Figure 112014020983045-pat00022
Figure 112014020983045-pat00022

이때, 상기 화학식 5 내지 8로 표시되는 화합물은 4년근 홍삼의 연령 판별용 마커이고, 상기 화학식 9 내지 11로 표시되는 화합물은 6년근 홍삼의 연령 판별용 마커이다.
The compounds represented by Formulas 5 to 8 are markers for age determination of 4-year old red ginseng, and the compounds represented by Formulas 9 to 11 are markers for age determination of 6-year old red ginseng.

본 발명에 따른 상기 화학식 5 내지 11로 표시되는 홍삼의 연령 판별용 마커는 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);The marker for determining the age of red ginseng represented by the above Chemical Formulas 5 to 11 according to the present invention comprises the steps of: (1) extracting metabolites from domestic 4-year old red ginseng and 6-year old ginseng red ginseng;

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 홍삼의 연령에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 방법으로 확립될 수 있다.In step 2, the results analyzed by the LC-MS are converted into numerical values that can be processed statistically. From the data obtained by analyzing the converted numerical values by the multivariate analysis method, components showing differences between the groups are detected, And establishing it as a standard marker according to the age of red ginseng (step 3).

구체적으로, 상기 단계 1 내지 3은 상기 백삼의 산지 판별방법과 동일한 방법으로 수행될 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
Specifically, the steps 1 to 3 may be performed in the same manner as in the method for determining the mountain area of white ginseng, but the present invention is not limited thereto.

또한, 본 발명은 In addition,

피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);Extracting a metabolite from the red ginseng (step 1);

상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 상기 화학식 5 내지 11로 표시되는 화합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 연령 판별용 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 연령 판별방법을 제공한다.
(Step 3) of comparing the LC-MS analysis result obtained in the step 2 with an age discriminating marker selected from the group consisting of the compounds represented by the above-mentioned formulas 5 to 11, to provide an age discrimination method for red ginseng.

상기 홍삼의 연령 판별방법은 연령 식별이 어려운 농축액, 분말 등의 홍삼의 연령을 표준 마커를 이용하여 신속하게 비교가 가능하므로 수출입 시, 홍삼의 연령 판별에 유용하게 사용될 수 있다.
The age determination method of the red ginseng can be used to determine the age of red ginseng at the time of import and export because it is possible to quickly compare the age of red ginseng such as concentrate and powder which is difficult to identify with age using a standard marker.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
However, the following examples are illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the following examples.

<제조예 1> 가공 인삼의 준비Preparation Example 1 Preparation of Processed Ginseng

연근(연령)에 관계없이 한국과 중국 백삼의 산지 판별을 위하여 국내산 백삼 53점을 국내로부터 구입하고, 중국산 백삼 18점을 중국현지와 국내에서 구입하고, 또한, 한국과 중국 홍삼의 산지 판별을 위하여 한국산 홍삼 50점을 국내에서 구입하고, 중국산 홍삼을 중국현지와 국내에서 35점을 구입하여 실험에 사용하였다. 나아가, 홍삼의 4근과 6근의 연근 판별을 위하여 경기도 이천으로부터 4근 10뿌리와 6근 10뿌리의 인삼을 이용하여 홍삼으로 제조한 후, 연근판별에 사용하였다.
53 domestic white ginsengs were purchased from Korea for the discrimination of Korean and Chinese white ginsengs regardless of lotus root (age), 18 white ginsengs were purchased from China and domestically, and in order to discriminate the origin of Korean and Chinese red ginseng 50 Korean red ginseng were purchased in Korea and 35 Chinese red gins were purchased in China and in Korea. In addition, red ginseng was used to distinguish four root and six root ginseng from red ginseng by using 4 root and 10 root and 6 root and 10 root ginseng from Icheon, Gyeonggi - do.

<실시예 1> 백삼의 산지 판별용 표준 마커의 확립Example 1 Establishment of a Standard Marker for Identifying the Origin of White Ginseng

국내산 백삼과 중국산 백삼의 산지 판별을 위한 마커를 확립하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.The following experiment was carried out to establish markers for discrimination between the domestic white ginseng and the Chinese white ginseng.

단계 1: 백삼 대사체의 추출Step 1: Extraction of white ginseng metabolite

상기 제조예 1에서 준비된 국내산 백삼과 중국산 백삼을 건조한 후, 각각을 분쇄하여 0.2 mg씩을 취한 후, 70% 메탄올 5 ml를 첨가하고, 350W의 초음파 분해 장치를 1시간 조사한 후, 추출액을 0.2 μm의 막여과기(membrane filter)(SUN-SRi, TN, USA)로 여과한 다음 추출액을 모았다.
Each of the domestic white ginseng and white ginseng prepared in Preparation Example 1 was dried and then pulverized to obtain 0.2 mg of each. Then, 5 ml of 70% methanol was added and the resultant was irradiated for 1 hour with a 350 W sonicator. After filtration through a membrane filter (SUN-SRi, TN, USA), the extract was collected.

단계 2: 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)를 이용한 백삼 추출물의 분 Step 2: Analysis of white ginseng extract by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS)

상기 단계 1에서 제조된 백삼 추출물의 대사체를 분석하기 위하여 UPLC는 워터스 에큐어티 UPLC 시스템을 이용하였으며, 컬럼은 에큐어티™ BEHC18(ACQUITY UPLC™ BEHC18)(10 mm×2.1 mm, i.d., 1.7μm, waters, USA)을 35 ℃에서 사용하였으며, 이동상 A는 물과 포름산(100:0.1, v/v)과 이동상 B는 아세토니트릴(acetonitril) 및 포름산(100:0.1,v/v)로 하여 초기에 이동상 B를 10%로부터 30%까지 7분까지 증가시킨 후, 44%로 14분까지, 100%로 21분까지 이동상 B를 증가시켜 분석 한 후, 이동상 B를 100%로 23.5분까지 유지시키고, 23.6분에 이동상 B를 10%로 낮춘 후 평형화 상태가 된 후 다음 분석에 사용하였다. 이동상의 유속량은 0.4㎖/분 그리고 시료 주입량은 국내산 백삼 추출액과 중국산 백삼 추출액 시료를 각각 1 ㎕를 취하여 측정에 사용하였다.In order to analyze the white ginseng extract metabolites, prepared as described in Step 1 UPLC was used Acuity UPLC system Waters, column Acuity ™ BEHC 18 in (ACQUITY UPLC ™ BEHC 18) ( 10 mm × 2.1 mm, id (100: 0.1, v / v) and mobile phase B were acetonitrile and formic acid (100: 0.1, v / v) The mobile phase B was initially increased from 10% to 30% to 7 minutes, then increased to 44% to 14 minutes and to 100% to 21 minutes. The mobile phase B was then diluted to 100% , And the mobile phase B was lowered to 10% at 23.6 min and then equilibrated and used for the next analysis. The flow rate of the mobile phase was 0.4 ml / min and the sample injection amount was 1 μl each of the domestic white ginseng extract and the Chinese white ginseng extract sample.

Q-TOF 질량분석기는 워터스사의 사중극자 직교 가속 비행시간 텐덤 질량 분석기(quadrupole orthogonal acceleration time of-flight tandem mass spectrometer(Waters Q-TOF Premier™))를 사용하였다. 질량 분석기의 분석조건은 하기 표 1에 나타낸 바와 같다. The Q-TOF mass spectrometer was a quadrupole orthogonal acceleration time-of-flight tandem mass spectrometer (Waters Q-TOF Premier ™) from Waters. The analysis conditions of the mass spectrometer are shown in Table 1 below.

이온 원(Ion source)Ion source ESI+ESI + 분무 기체(Nebulizer gas)Nebulizer gas 500 L/h500 L / h 분무 온도(Nebulizer Temperature)Nebulizer Temperature 350 ℃350 ℃ 콘 기체(Con gas)Con gas 50 L/h50 L / h 소스 온도(Source temperature)Source temperature 100 ℃100 ℃ 모세관 전압(Capillary voltage)Capillary voltage 2.7 kV2.7 kV 콘 전압(Con Voltage)Con Voltage 27 V27 V

상기 국내산 백삼 추출물과 중국산 백삼 추출물의 액체크로마토그래피-질량분석(LC-MS)의 전체이온 크로마토그램(total ionchromatogram) 결과는 도 1 및 2에 나타내었다.
The results of the total ion chromatograms of the liquid white-ginseng extract and the white ginseng extract of the domestic white and ginseng extracts (LC-MS) are shown in FIGS. 1 and 2.

단계 3: 통계 처리 가능한 수치로 변환 및 백삼 표준 마커의 확립Step 3: Transform to a statistical value and establish white marker standard markers

상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 데이터를 통계 처리 가능한 수치로 변환하기 위하여 워터스사의 마커링스 어플리케이션 매니저(MarkerLynx applications manager(ver. 4.1))를 이용하여 피크 발견(peak finding), 피크 정렬(peak alignment) 및 피크 여과(peak filtering)를 실행하였다. 상기 과정을 위하여 분석 데이터의 0.5분부터 19분까지를 이용하였고, 분석질량 범위는 200-1500 Da, 질량 오차허용범위는 0.02 Da, 매스 잡음(mass noise) 수준은 기초 피크 세기(base peak intensity)의 10%로 하였다. 이 과정을 통해 얻어진 모든 LC-MS 데이터에서 피크별로 머무름 시간(RT) 값과 매스값을 일치시키고 그에 따른 각 피크의 면적값을 얻은 후, 다변량분석(Multivariate statistical analysis)을 위하여 Simca-P+ ver. 12.0(Umetrics, Sweden) 소프트웨어를 이용하여 모든 데이터를 퍼-스케일(par-scaled(scaled to square root of SD))로 하여 국내산과 중국산 백삼을 그룹화하여 직교 최소자승분석(OPLS-DA)의 스코어 스캐터 플롯을 나타내었고, 직교 최소자승분석의 S 플롯(Simca-P+)을 얻어 두 산지간의 차이가 많은 성분들을 박스 플럿으로 나타내어 판별을 가능하게 하는 천연물 피크를 선발하고 이들의 질량 이온 크로마토그램[mass ion chromatogram, MassLynx(ver 4.1)]을 비교하여 유의성 있게 차이가 나는 성분을 질량 절단 방식(mass fragmentation pattern)으로 표준 마커를 선정하여 구조를 동정하였다. 그 결과를 도 3 내지 7에 나타내었다.
Peak finding, peak alignment, and the like are performed using Waters' MarkerLynx application manager (ver. 4.1) to convert the LC-MS data obtained in step 2 into statistically processed values. And peak filtering were performed. The analytical data range is 200-1500 Da, the mass error tolerance range is 0.02 Da, and the mass noise level is the base peak intensity. . In all the LC-MS data obtained from this procedure, the retention time (RT) value and the mass value for each peak were matched and the area value of each peak was obtained. Then, for the multivariate statistical analysis, Simca-P + ver. (OPLS-DA) scores by grouping domestic and Chinese white ginsengs with par- scaled (scaled to square root of SD) using 12.0 (Umetrics, Sweden) (Simca-P +) of Orthogonal Least Squares analysis, and the natural peaks that can discriminate by boxplotting the components having a large difference between two mountain regions are selected and their mass ion chromatogram [mass ion chromatogram, MassLynx (ver 4.1)], and the standard marker was selected as the mass fragmentation pattern. The results are shown in Figs.

결과result

(1) 상기 직교 최소자승분석의 스코어 스캐터 플롯 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 국내산 백삼과 중국산 백삼은 산지에 따라 두 그룹으로 분리되었다.(1) As a result of the score scatter plot of the orthogonal least-squares analysis, as shown in Fig. 3, domestic white ginseng and Chinese white ginseng were divided into two groups according to their mountain regions.

(2) 또한, 상기 직교 최소자승분석의 S 플럿 결과, 도 4 및 5에 나타낸 바와 같이, 5.21분의 963.5582의 질량을 가지는 성분과 9.30분의 771.4919의 질량을 가지는 성분이 유의적 차이가 있는 것으로 나타났다(t-test; p>0.001). (2) Further, as a result of the S-PLOT of the orthogonal least-squares analysis, as shown in Figs. 4 and 5, there is a significant difference between components having a mass of 963.5582 of 5.21 and components having a mass of 771.4919 of 9.30 (T-test; p> 0.001).

(3) 나아가, 질량 절단 방식(mass fragmentation pattern) 결과, 도 6 및 7에 나타낸 바와 같이, 국내산 백삼의 표준마커는 하기 화학식 1에 나타낸 바와 같이, 20-글루코진세노사이드 Rf(5.21분, M.W. 963.5582)로 확인되었으며, 중국산 백삼의 표준마커는 하기 화학식 2에 나타낸 바와 같이, 노토진세토사이드 R2(9.30분, M.W. 771.4919)로 확인되었다.
(3) Furthermore, as shown in FIGS. 6 and 7, the standard markers of domestic white ginseng contained 20-glucosinenoside Rf (5.21 min, MW 963.5582), and the standard marker of Chinese white ginseng was identified as notozynecoside R2 (9.30 min, MW 771.4919) as shown in the following formula (2).

[화학식 1] [화학식 2]      [Chemical Formula 1] &lt; EMI ID =

Figure 112014020983045-pat00023
Figure 112014020983045-pat00024

Figure 112014020983045-pat00023
Figure 112014020983045-pat00024

<실시예 2> 홍삼의 산지 판별용 표준 마커의 확립&Lt; Example 2 > Establishment of standard markers for discrimination of red ginseng

국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지 판별을 위한 마커를 확립하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.The following experiment was carried out to establish markers for discrimination between the domestic red ginseng and the Chinese red ginseng.

단계 1: 홍삼 대사체의 추출Step 1: Extraction of red ginseng metabolite

상기 제조예 1에서 준비된 국내산 홍삼과 중국산 홍삼을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하였다.
The procedure of Step 1 of Example 1 was repeated except that the Korean red ginseng and the Chinese red ginseng prepared in Preparation Example 1 were used.

단계 2: 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)를 이용한 홍삼 추출물의 분 Step 2: Analysis of red ginseng extract using liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS)

상기 단계 1에서 제조된 홍삼 추출물의 대사체를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하였다.The procedure of Step 2 of Example 1 was repeated except that the metabolite of the red ginseng extract prepared in Step 1 was used.

상기 국내산 홍삼 추출물과 중국산 홍삼 추출물의 액체크로마토그래피-질량분석(LC-MS)의 전체이온 크로마토그램(total ionchromatogram) 결과는 도 8 및 9에 나타내었다.
The total ion chromatogram results of the liquid chromatographic-mass spectrometry (LC-MS) of the Korean red ginseng extract and the Chinese red ginseng extract are shown in FIGS. 8 and 9.

단계 3: 통계 처리 가능한 수치로 변환 및 홍삼 표준 마커의 확립Step 3: Conversion into statistical processable values and establishment of red ginseng standard markers

상기 단계 2에서 얻은 결과를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하였다.
The procedure of Step 3 of Example 1 was repeated except that the result obtained in Step 2 was used.

결과result

(1) 상기 직교 최소자승분석의 스코어 스캐터 플롯 결과, 도 10에 나타낸 바와 같이, 국내산 홍삼과 중국산 홍삼은 산지에 따라 두 그룹으로 분리되었다.(1) As a result of the score scatter plot of the orthogonal least squares analysis, as shown in FIG. 10, domestic red ginseng and Chinese red ginseng were divided into two groups according to the mountain area.

(2) 또한, 상기 직교 최소자승분석의 S 플럿 결과, 도 11 및 12에 나타낸 바와 같이, 9.04분의 801.4988의 질량을 가지는 성분과 11.70분의 767.4952의 질량을 가지는 성분이 유의적 차이가 있는 것으로 나타났다(t-test; p>0.001). (2) Further, as a result of the S-PLOT of the orthogonal least-squares analysis, as shown in Figs. 11 and 12, there is a significant difference between the component having a mass of 801.4988 of 9.04 and the component having a mass of 767.4952 of 11.70 (T-test; p> 0.001).

(3) 나아가, 질량 절단 방식(mass fragmentation pattern) 결과, 도 13 및 14에 나타낸 바와 같이, 국내산 홍삼의 표준마커는 하기 화학식 3에 나타낸 바와 같이, 진세노사이드 Rf(9.04분, M.W. 801.4988)로 확인되었으며, 중국산 홍삼의 표준마커는 하기 화학식 4에 나타낸 바와 같이, 진세노사이드 Rd(11.70분, M.W. 767.4952)로 확인되었다.
(3) Furthermore, as shown in FIGS. 13 and 14, the standard marker of domestic red ginseng was a ginsenoside Rf (9.04 min, MW 801.4988) as shown in the following formula (3) , And the standard marker of Chinese red ginseng was identified as ginsenoside Rd (11.70 min, MW 767.4952) as shown in the following formula (4).

[화학식 3] [화학식 4]      [Chemical Formula 3]

Figure 112014020983045-pat00025
Figure 112014020983045-pat00026

Figure 112014020983045-pat00025
Figure 112014020983045-pat00026

<실시예 6> 홍삼의 연령(4년근, 6년근) 판별용 표준 마커의 확립<Example 6> Establishment of standard markers for discrimination of age (4 years old and 6 years old) of red ginseng

국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 산지 판별을 위한 마커를 확립하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.The following experiment was conducted to establish markers for the identification of the four - year old Korean red ginseng and six - year old ginseng Korean red ginseng.

단계 1: 홍삼 대사체의 추출Step 1: Extraction of red ginseng metabolite

상기 제조예 1에서 준비된 4년근 국내산 홍삼과 6년근 국내산 홍삼을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하였다.
The same procedure as in Step 1 of Example 1 was conducted except that 4-year-old domestic red ginseng prepared in Preparation Example 1 and 6-year old domestic ginseng red gins were used.

단계 2: 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)를 이용한 홍삼 추출물의 분 Step 2: Analysis of red ginseng extract using liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS)

상기 단계 1에서 제조된 홍삼 추출물의 대사체를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하였다.The procedure of Step 2 of Example 1 was repeated except that the metabolite of the red ginseng extract prepared in Step 1 was used.

상기 국내산 4년근 홍삼 추출물과 6년근 홍삼 추출물의 액체크로마토그래피-질량분석(LC-MS)의 전체이온 크로마토그램(total ionchromatogram) 결과는 도 15 및 16에 나타내었다.
The total ion chromatogram results of liquid chromatographic-mass spectrometry (LC-MS) of the Korean 4-year old red ginseng extract and 6-year old ginseng extract are shown in FIGS.

단계 3: 통계 처리 가능한 수치로 변환 및 홍삼 표준 마커의 확립Step 3: Conversion into statistical processable values and establishment of red ginseng standard markers

상기 단계 2에서 얻은 결과를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하였다.
The procedure of Step 3 of Example 1 was repeated except that the result obtained in Step 2 was used.

결과result

(1) 상기 직교 최소자승분석의 스코어 스캐터 플롯 결과, 도 17에 나타낸 바와 같이, 국내산 4년근 홍삼과 6년근 홍삼은 연근에 따라 두 그룹으로 분리되었다.(1) As a result of the score scatter plot of the orthogonal least-squares analysis, as shown in FIG. 17, domestic 4-year old red ginseng and 6-year old red ginseng were divided into two groups according to lotus root.

(2) 또한, 상기 직교 최소자승분석의 S 플럿 결과, 도 18 내지 20에 나타낸 바와 같이, 4년근 홍삼과 6년근 홍삼의 성분들이 질량에서 유의적 차이가 있는 것으로 나타났다(t-test; p>0.001). (2) Also, as shown in Figs. 18 to 20, the S-plot results of the orthogonal least-squares analysis showed that there was a significant difference in the masses of the 4-year old red ginseng and the 6-year old ginseng red ginseng (t-test; p> 0.001).

이중, 4년근 홍삼 성분은 말로닐 진세노사이드 Rb1(9.89 분의 1195.6145)(화학식 5), 말로닐 진세노사이드 Rc(10.30분, M.W. 1165.6030)(화학식 6), 말로닐 진세노사이드 Rb2(10.75분, M.W. 1165.6036)(화학식 7), 말로닐 진세노사이드 Rd(12.02분, M.W. 853.4980)(화학식 8)로 확인되었고, 또한 6년근 홍삼 성분은 (R)-진세노사이드 Rh1(10.48 분, M.W. 1277.8934)(화학식 9), 퀸퀘노사이드 R1(11.26분, M.W. 1151.6239)(화학식 10), (R)-진세노사이드 Rg3(15.80분, M.W. 749.4871)(화학식 11)로 확인되었다. Among them, malonyl ginsenoside Rb1 (1195.6145 of 9.89) (Formula 5), malonyl ginsenoside Rc (10.30 min, MW 1165.6030) 6, malonyl ginsenoside Rb2 Min, MW 1165.6036), malonyl ginsenoside Rd (12.02 min, MW 853.4980), and the 6-year old red ginseng component was identified as (R) -ginnenoside Rh1 1277.8934), queenquenoside R1 (11.26 min, MW 1151.6239) and (R) -ginnenoside Rg3 (15.80 min, MW 749.4871).

상기 4년근 홍삼 성분과 6년근 홍삼 성분을 하기 표 2에 나타내었다.The 4-year-old red ginseng components and the 6-year-old red ginseng components are shown in Table 2 below.

화학식The 구조rescue 화합물 명칭Name of compound




5





5

Figure 112014020983045-pat00027
Figure 112014020983045-pat00027





말로닐 진세노사이드 Rb1





Malonyl ginsenoside Rb1





6





6
Figure 112014020983045-pat00028
Figure 112014020983045-pat00028





말로닐 진세노사이드 Rc





Malonyl ginsenoside Rc





7





7
Figure 112014020983045-pat00029
Figure 112014020983045-pat00029





말로닐 진세노사이드 Rb2





Malonyl ginsenoside Rb2





8





8
Figure 112014020983045-pat00030
Figure 112014020983045-pat00030





말로닐 진세노사이드 Rd





Malonyl ginsenoside Rd




9




9
Figure 112014020983045-pat00031
Figure 112014020983045-pat00031




(R)-진세노사이드 Rh1




(R) -ginsenoside Rh1





10





10
Figure 112014020983045-pat00032
Figure 112014020983045-pat00032





퀸퀘노사이드 R1





Queen Quenoside R1




11




11
Figure 112014020983045-pat00033
Figure 112014020983045-pat00033




(R)-진세노사이드 Rg3




(R) -ginsenoside Rg3

Claims (7)

하기 화학식 3 또는 4로 표시되는 화합물을 포함하는, 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커 조성물.
[화학식 3]
Figure 112014036550536-pat00034

[화학식 4]
Figure 112014036550536-pat00035

A marker composition for discriminating the origin of domestic red ginseng and Chinese red ginseng comprising a compound represented by the following formula (3) or (4):
(3)
Figure 112014036550536-pat00034

[Chemical Formula 4]
Figure 112014036550536-pat00035

제1항에 있어서, 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물은 국내산 홍삼의 산지 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커 조성물.
[Claim 2] The marker composition according to claim 1, wherein the compound represented by Formula 3 is a marker for discriminating the origin of Korean red ginseng.
제1항에 있어서, 상기 화학식 4로 표시되는 화합물은 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커인 것을 특징으로 하는 국내산 홍삼과 중국산 홍삼의 산지 판별용 마커 조성물.
[Claim 4] The marker composition according to claim 1, wherein the compound represented by Formula 4 is a marker for discriminating the origin of Chinese red ginseng.
국내산 홍삼과 중국산 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 LC-MS로 분석된 결과를 통계 처리 가능한 수치로 변환하고, 변환된 수치를 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터부터 그룹간의 차이를 보이는 성분을 검출하고, 가장 차이가 큰 성분을 선별하여 산지에 따른 표준 마커로서 확립하는 단계(단계 3)를 포함하는 제1항의 홍삼 산지 판별용 마커의 확립방법.
Extracting metabolites from domestic red ginseng and Chinese red ginseng (step 1);
Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And
In step 2, the results analyzed by the LC-MS are converted into numerical values that can be processed statistically. From the data obtained by analyzing the converted numerical values by the multivariate analysis method, components showing differences between the groups are detected, A method for establishing a marker for identifying a red ginseng mountain area according to claim 1, comprising a step (step 3) of establishing as a standard marker along the mountain area.
제4항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법은 직교 최소자승 분석법인 것을 특징으로 하는 홍삼의 산지 판별용 마커의 확립방법.
5. The method according to claim 4, wherein the multivariate analysis method of step 3 is an orthogonal least squares analysis method.
제4항에 있어서, 상기 단계 3의 다변량 분석법으로 분석하여 얻은 데이터는 스코어 스캐터 플롯인 것을 특징으로 하는 홍삼의 산지 판별용 마커의 확립방법.
5. The method according to claim 4, wherein the data obtained by analyzing the multivariate analysis of step 3 is a scorecard plot.
피검 홍삼으로부터 대사체를 추출하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 추출된 대사체를 액체 크로마토그래피-질량분석기(LC-MS)로 분석하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 얻어진 LC-MS 분석 결과를 제1항의 화학식 3 또는 4의 산지 판별 마커와 비교하는 단계(단계 3)를 포함하는 홍삼의 산지 판별방법.
Extracting a metabolite from the red ginseng (step 1);
Analyzing the metabolites extracted in step 1 with a liquid chromatography-mass spectrometer (LC-MS) (step 2); And
Comparing the result of the LC-MS analysis obtained in the step 2 with the marker of the mountainous region of the formula (3) or (4) of claim 1 (step 3).
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