KR20120079067A

KR20120079067A - 잔디 식물의 영양 번식을 위한 방법

Info

Publication number: KR20120079067A
Application number: KR1020127006619A
Authority: KR
Inventors: 존 토드 캐롤; 노르만 볼로틴
Original assignee: 트리프리 바이오메스 솔루션스, 인코포레이티드
Priority date: 2009-08-13
Filing date: 2010-08-13
Publication date: 2012-07-11
Also published as: UA112838C2; HK1173909A1; MA33586B1; MX2012001941A; EA024962B1; CN102625653A; WO2011019984A3; IL218056A; PE20120859A1; EP2464211A2; EP2464211A4; ES2742185T3; MX336738B; EP2464211B1; ZA201201814B; NZ598761A; BR112012002983A2; CA2808147A1; CN102625653B; AP2012006156A0

Abstract

본 발명은 적어도 하나의 옥신, 적어도 하나의 사이토키닌, 및 적어도 하나의 폴리아스파르트산을 포함하며, 적어도 하나의 해초 농축물 및 적어도 하나의 계면활성제를 임의로 포함하는, 식물 호르몬-계 성장-증진용 조성물을 제공한다. 또한, 멸균 잔디 식물 아룬도 도낙스(Arundo donax)와 같은 벼과식물의 것들을 포함한 잔디 식물의 성숙한 또는 미성숙 줄기들을 성장-증진용 조성물로 처리함으로써 분열조직으로부터 뿌리 및 순의 발달을 자극시켜 상기 잔디 식물을 증식하는 방법이 제공된다.

Description

잔디 식물의 영양 번식을 위한 방법{METHODS FOR VEGETATIVE PROPAGATION OF GRASS PLANTS}

관련 출원의 상호 참조

본원은 2009년 8월 13일자로 출원된, 미국 가특허원 제61/233,713호의 35 U. S. C. § 119(e) 따른 이익을 청구하며, 이의 전문은 여기서 참조로 인용된다.

기술 분야

본 발명은 벼과 식물(family Poaceae)의 잔디식물을 포함하는, 외떡잎식물(Monocotyledonae) 부류의 멸균 잔디 식물과 같은 잔디 식물을 증식시키기 위한 성장-증진용 조성물 및 이를 사용하는 개선된 방법에 관한 것이다.

특정의 외떡잎 잔디 식물은 다른 용도들 중에서 생물량 작물로서 유용하다. 하나의 외떡잎, 아룬도 도낙스(Arundo donax), 또는 포알레스(Poales) 목 및 벼과[벼(Gramineae)]의 물대(Giant Reed)는 세계에서 최대의 잔디들 중 하나이며, 매력적이고, 튼튼하며, 다년생인 갈대이다(참조: Tucker, J. Arnold Arb., 71 :145-177, 1990). 수평의 얽힌 근경으로부터 성장하는, 매우 강력하고, 어느 정도는 목질이며, 무리진 대(clustering culm)들은 8 내지 10 미터의 높이까지 성장하는 것으로 알려져 있다[참조: 예를 들면, Bailey, Manual of cultivated plants: Most commonly grown in the continental United States and Canada, Rev. Ed., MacMillan, New York, (1954); 및 Mabberley, The plant-book: a portable dictionary of the vascular plants, 2nd Rev., Cambridge Univ. Press, Oxford, 1997]. 물대는 최대 초본 잔디 중 하나이며, 이로부터 토양속으로 깊숙이 침투하는 강인한 수염뿌리가 발생하는, 밀집된 무리를 형성하는 엽육의, 서서히 진행하는 근경을 갖는다. 대(culm)는 일반적으로 2년째 성장 동안 갈라져서 두께가 2 내지 7mm인 벽과 함께 속이 비어 있다.

당해 식물은 카리조(carrizo), 대나무 갈대(bamboo reed), 도나우 갈대(Danubian reed), 도낙스 케인(donax cane), 이탈리아 갈대(Italian reed), 프로방스 갈대(Provence cane) 및 스페인 갈대(Spanish reed)를 포함하는 다양한 일반명으로 알려져 있다. 에이. 도낙스(A. donax)는 아마도 동부 아시아의 온화한 지역의 민물로부터 기원하였다. 이는 아시아, 북부 아프리카 및 중동에서 수천년 동안 재배되어 왔으며 또한 북부 및 남부 아메리카, 오스트레일리아 및 남아프리카에서도 지난 세기 동안 재배되어 왔다. 에이. 도낙스의 재배에 대한 추가의 정보는 예를 들면, 미국 특허 제6,389,746호; 미국 특허 제7,303,916호; 문헌[참조: Bell, Ecology and management of Arundo donax , and approaches to riparian habitat restoration in Southern California ; in Plant Invasions : Studies From North America and Europe, Brock et al ., Eds. pp.103-113, Backhuys Publishers, Leiden (1997); Perdue, Econ . Bot . 12:368-404 (1958); Rossa et al ., Bot . Acta , 111 :216-221 , 1998; Roys, Ethnobotany of the Maya: The Department of Middle American Research . M.A.R. Series Pub. 2, Tulane U., New Orleans (1931 ); Zahran et al ., The vegetation of Egypt. Chapman & Hall, London (1992); 및 Zohary, Plant Life of Palestine. Ronald Press, New York (1962)]에서 찾을 수 있다.

에이. 도낙스와 같은 외떡잎식물 부류로부터의 식물은 다목적 식물이다. 예를 들어, 물대는 관악기를 제조하는데 있어서 5,000년 이상 사용되어 왔으며, 지금까지 클라리넷, 오르간 파이프, 및 다른 목관 악기용 갈대의 주요 공급원으로 남아있다.

물대는 또한 침식 조절에 사용되며 에너지 작물로서의 용도를 위한 큰 잠재력을 가지고 있다(참조: 예를 들면, Szabo et al ., J. Anal . Appl . Pyrolysis . 36:179-190, 1996). 간은 또한 낚싯대, 지팡이, 오두막의 건축시 매트 및 격자용으로 사용된다. 물대는 또한 제지 및 레이온 제조용, 및 다른 다당류의 생산용의 산업의 셀룰로즈의 공급원이다(참조: Neto et al ., Ind . Crops & Prods . 6:51-58, 1997). 이는 또한 종이를 제조하기 위한 펄프의 공급원으로 고려되어 왔다.

물대는 매우 빠르게 성장한다. 조건이 양호한 경우, 수주 동안 주당 0.3 내지 0.7 미터 속도의 성장은 일반적이다. 어린 대는 전형적으로 초기 성장기 내에 이들의 완전한 직경으로 성장하지만, 이후 이들의 벽이, 두께가 증가한다.

그러나, 이의 천연 범위 및 지중해 외부 지역에서, 당해 식물은 불임이며; 꽃은 피지만, 생존가능한 종자를 생산하지 않는다. 대신, 이는 줄기 및 뿌리줄기의 단편으로부터 생장하여 재생한다(참조: 예를 들면, Boose et al ., Weed Res . 39:117-127, 1999). 따라서, 이들 식물들을 신뢰가능하고 효과적으로 증식시키는데 있어서 상당한 어려움이 있었다.

물대의 전통적인 원예학적 증식은 뿌리줄기의 분할에 의한 것이다. 그러나, 뿌리줄기 분할에 의한, 또는 전통적인 종자 배양에 의한 물대의 증식은 분할 초기, 또는 식재(planting)와, 성장하는 식물의 성공적인 확립 사이에 유의적인 양의 시간 및 노력을 필요로 한다. 더욱이, 통상적인 증식 방법은 제한된 유전적 조작 기회를 제공하며, 종자의 경우에는, 수득되는 후대의 유전적 조절을 허용하지 않는다. 이러한 통상의 기술들은 또한 충분한 수의 식물들이 연료 또는 생물량의 생산용 프로그램에서, 또는 생물적 환경정화 프로그램에서 사용하기에 유용하도록 하기 위해 큰 지역을 필요로 한다.

다수의 특수한 증식 방법이 멸균 잔디 식물과 같은 잔디 식물에 대해 개발되어 왔다. 이러한 방법은 취목(layering), 분얼(stooling), 뿌리 분할, 조직 배양, 삽목(cuttage), 뿌리 배양, 및 절단된 마디배양(sectioned node culture)을 포함한다. 그러나, 이들 방법들이 지난 20년에 걸쳐 광범위하게 사용되어 왔다고 해도, 이들은, 부분적으로 증식 주기가 너무 길고, 단지 제한된 수의 번식체만이 주어진 양의 시간 및 양의 공간에서 생성될 수 있기 때문에, 효율적이지 않거나 비용면에서 효과적이지 않다. 또한, 특정의 이들 방법들은 소말클로날(somalclonal) 변이, 클론 균일성을 필요로 하는 조작시 심각한 단점을 초래한다.

물대는 이러한 다수의 용도를 나타내는 외떡잎 식물 중 유일한 것이다. 장식용, 에너지원, 또는 산업적 공정을 수행하기 위한 유용한 수단(vehicle)으로서 사용하는 것에 상관없이, 이러한 잔디-유사 식물은 중요하다. 따라서, 외떡잎식물 부류의 잔디 식물이 심지어 이들 속의 식물이 멸균되어, 통상의 방법보다 더 시간이 짧고, 노력이 덜 들며 면적(area)이 적게 요구될 수 있는 방식에서조차 증식할 수 있는 방법을 제공하는 것이 유용할 수 있다. 본 발명은 이러한 및 다른 장점들을 제공한다.

본 발명의 양태들은 다른 성분들 중에서 사이토키닌 및 옥신을 포함하는 개선된 성장-증진용 조성물, 및 벼과 식물 과의 것들을 포함하는, 외떡잎식물 부류의 잔디 식물을 증식시키기 위한 이의 사용 방법에 관한 것이다. 특수 양태는 멸균 잔디 식물을 증식시키기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 양태에는 (a) 잔디 식물의 줄기 또는 이의 분절(segment)을 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 옥신, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 사이토키닌, 및 약 1 ppm 내지 약 250,000 ppm의 폴리아스파르트산을 포함하는 조성물로 처리하는 단계; (b) 단계 (a)에서 처리한 줄기를 수거하는 단계; 및 단계 (b)에서 수거한 줄기를 식재(planting)하는 단계를 포함하여, 잔디 식물을 증식시키는 방법이 포함된다. 특정의 양태에서, 단계 (a)는 동일계내(in situ)로 수행된다.

단계 (a)에서와 같은, 특정의 양태에서, 잔디 식물의 줄기는 미성숙 줄기 또는 이의 분절이다. 특정의 양태에서, 미성숙 줄기는, 높이가 약 10 내지 25 인치이고, 마디가 약 4 내지 10개이다. 특정의 양태에서, 미성숙 줄기는 약 3 내지 약 6 주령이다. 단계 (a)에서와 같은 특정의 양태에서, 잔디 식물의 줄기는 성숙한 줄기의 분절이다.

특정의 양태에서, 단계 (b)는, 단계 (a)를 수행한 후 약 3 내지 20일 째에 수행된다. 특정의 양태에서, 단계 (b)는, 단계 (a)를 수행한 후 약 14일 째에 수행된다. 특정의 양태에서, 잔디 식물은 멸균 잔디 식물이다. 구체적인 양태에서, 멸균 잔디 식물은 아룬도 도낙스(Arundo donax) 식물, 또는 이의 재배품종이다. 특정의 양태에서, 잔디 식물은 벼과 식물에 속한다. 특정의 양태에서, 잔디 식물은 아룬도 기간티움(Arundo gigantium), 게라니움 사기타툼(Geranium sagitatum), 미스칸투스 x 기간테우스(Miscanthus x giganteus), 사카룸 오피시아나룸(Saccharum officianarum) 또는 다른 사카룸 아종(Saccharum spp .), 페니세툼 푸르페레움(Pennisetum purpereum) 식물, 또는 이의 재배품종(cultivar)이다.

특정의 양태에서, 상기 기술된 조성물은 1 ppm 내지 약 500,000 ppm의 해초 농축물을 추가로 포함한다. 특정의 양태에서, 해초 농축물은 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 해초 농축물은 아스코필룸 노도숨(Ascophyllum nodosum)으로부터의 추출물이다.

특정의 양태에서, 위에서 기술한 조성물은 1 ppm 내지 약 250 ppm의 계면활성제를 추가로 포함한다. 특정의 양태에서, 계면활성제는 트윈(Tween) 20이다.

특정의 양태에서, 옥신(Auxin)은 인돌 부티르산(IBA), 인돌-3-아세트산(IAA), 나프탈렌 아세트산(NAA), 4-클로르인돌-3-아세트산(4-CI-IAA), 2-페닐아세트산(PAA), 2,4-디클로로페녹시아세트산, 2-메톡시-3,6-디클로로벤조산, 4-아미노-3,5,6-트리클로로피콜린산 또는 이의 혼합물이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 벤질아미노푸린(BA), 키네틴, 제아틴(Z), 디하이드로제아틴(DHZ) 및 이소펜테닐아데노신(IPA), 오르토-토폴린(oT), 메타-토폴린(mT), 오르토-메톡시토폴린(MeoT), 메타-메톡시토폴린(MemT), 벤즐아데닌(BA), 또는 이의 혼합물이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 코폴리-[(3-카복시프로피온아미드)(2-(카복시메틸)아세트아미드)]이다.

특정의 양태에서, 옥신은 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 500 ppm 내지 약 5000 ppm이다.

또한, 옥신을 1 ppm 내지 약 10,000 ppm, 사이토키닌을 1 ppm 내지 약 10,000 ppm, 및 폴리아스파르트산을 1 ppm 내지 약 250,000 ppm으로 포함하는, 잔디 식물을 동일계내에서 처리하기 위한 조성물이 포함된다. 특정의 양태에서, 이들 조성물은 해초 농축물을 1 ppm 내지 약 500,000 ppm으로 추가로 포함한다. 특정의 양태에서, 해초 농축물은 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm으로 존재한다. 특정의 양태에서, 해초 농축물은 아스코필룸 노도숨(Ascophyllum nodosum)으로부터의 추출물이다.

특정의 양태에서, 조성물은 계면활성제를 1 ppm 내지 약 250 ppm으로 추가로 포함한다. 특정의 양태에서, 계면활성제는 트윈 20이다. 특정의 양태에서, 옥신은 인돌 부티르산 (IBA), 인돌-3-아세트산 (IAA), 나프탈렌 아세트산 (NAA), 4-클로르인돌-3-아세트산 (4-CI-IAA), 2-페닐아세트산 (PAA), 2,4-디클로로페녹시아세트산, 2-메톡시-3,6-디클로로벤조산, 4-아미노-3,5,6-트리클로로피콜린산, 또는 이의 혼합물이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 벤질아미노푸린 (BA), 키네틴, 제아틴 (Z), 디하이드로제아틴 (DHZ) 및 이소펜테닐아데노신 (IPA), 오르토-토폴린 (oT), 메타-토폴린 (mT), 오르토-메톡시토폴린 (MeoT), 메타-메톡시토폴린 (MemT), 벤즐아데닌 (BA), 또는 이의 혼합물이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 코폴리-[(3-카복시프로피온아미드)(2-(카복시메틸)아세트아미드)]이다.

본원에 제공된 특정의 조성물에서, 옥신은 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 100 ppm 내지 약 300 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 300 ppm 내지 약 700 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 700 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 200 ppm 내지 약 400 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 400 ppm 내지 약 600 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 600 ppm 내지 약 800 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 800 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 750 ppm 내지 약 1700 ppm이다.

본원에 제공된 특정의 조성물에서, 사이토키닌은 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 100 ppm 내지 약 300 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 300 ppm 내지 약 700 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 700 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 200 ppm 내지 약 400 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 400 ppm 내지 약 600 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 600 ppm 내지 약 800 ppm이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 800 ppm 내지 약 1000 ppm이다.

특정의 양태에서, 옥신은 IBA이다. 특정의 양태에서, 옥신은 IAA이다. 특정의 양태에서, 옥신은 NAA이다. 특정의 양태에서, 옥신은 IAA 및 NAA의 혼합물이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 제아틴이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 BA이다.

특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 500 ppm 내지 약 5000 ppm이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 500 ppm 내지 약 1000 ppm이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 1000 ppm 내지 약 2000 ppm이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 2000 ppm 내지 약 3000 ppm이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 3000 ppm 내지 약 4000 ppm이다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 약 4000 ppm 내지 약 5000 ppm이다.

또한 (a) 잔디 식물의 미성숙 줄기 또는 이의 분절을 본원에 제공된 조성물로 처리하는 단계; (b) 단계 (a)에서 처리된 줄기의 부위를 수거하여 종자 줄기를 생산하는 단계; (c) 단계 (b)의 줄기의 나머지 일부를 미성숙 줄기로 성장시키는 단계; 및 (d) 단계 (a) 및 (b)를 적어도 1회 반복함으로써 종자 줄기를 생산하는 단계를 포함하는, 종자 줄기의 생산 방법이 포함된다. 특정의 양태에서, 단계 (a)는 동일계내에서 수행된다.

특정의 양태에서, 미성숙 줄기는, 높이가 약 10 내지 25 인치이고, 마디가 약 4 내지 10개이다. 특정의 양태에서, 미성숙 줄기는 약 3 내지 약 6주령이다.

특정의 양태에서, 단계 (b)는 단계 (a)의 수행 후 3 내지 20일 째에 수행된다. 특정의 양태에서, 단계 (b)는 단계 (a)의 수행 후 약 14일 째에 수행된다. 특정의 양태에서, 단계 (b)는 슈도리좀(pseudorhizome) 형성 전에 수행된다. 특정의 양태에서, 단계 (d)는 단계 (c)가 수행된 후 약 1 내지 8 주째에 개시된다. 특정의 양태에서, 단계 (d)는 단계 (c)가 수행된 후 약 3 내지 6주 째에 개시된다.

특정의 양태에서, 식물은 멸균 잔디 식물이다. 구체적인 양태에서, 멸균 잔디 식물은 아룬도 도낙스(Arundo donax) 식물이다. 특정의 양태에서, 잔디 식물은 벼과 식물에 속한다. 특정의 양태에서, 잔디 식물은 아룬도 기간티움, 게라니움 사기타툼, 미스칸투스 x 기간테우스, 사카룸 오피시아나룸 또는 다른 사카룸 아종, 펜니세툼 푸르페레움 식물 또는 이의 재배품종이다.

또한, 본원에 제공된 조성물을 사용하여 동일계내에서 처리된 잔디 식물의 줄기 또는 이의 분절이 포함된다. 또한, 적어도 하나의 뿌리 및 적어도 하나의 순(shoot)을 포함하는, 잔디 식물의 미성숙 줄기 또는 이의 분절이 포함되며, 여기서, 줄기는 직경이 약 ⅛ 인치 내지 약 ¼ 인치이며, 여기서, 적어도 하나의 마디에 대한 뿌리 대 순 질량 비는 약 1/1.5 내지 약 1.5/1이다. 특정의 양태에서, 적어도 하나의 마디에 대한 뿌리 대 순 질량비는 약 1/1이다. 구체적인 양태에서, 줄기 또는 분절은 멸균 잔디 식물로부터 기원한다.

도 1은 멸균 잔디 식물의 성숙한 대[영양분체(ramet)]의 영상을 나타낸다.
도 2는 멸균 잔디 식물의 미성숙 줄기(또는 영양분체)의 영상을 나타낸다.
도 3은 성숙한 줄기로부터 수득된 미성숙 줄기의 무리를 나타낸다.
도 4는 적어도 하나의 이의 마디로부터 성장하는 뿌리 및 순 둘다를 가지며, 수거 준비가 된 처리된 미성숙 줄기를 나타낸다.
도 5는 미성숙 줄기의 무리를 수득하기 위해 처리된 성숙한 줄기를 나타낸다. 뿌리 및 순은 처리된 성숙한 줄기의 마디로부터 성장함을 알 수 있다.
도 6은 단면화된 마디 또는 분절로 절단된 성숙한 줄기를 나타낸다.
도 7은 토양속으로 손으로 식재되는(hand-planted) 처리된 성숙한 마디 단면을 나타낸다.
도 8은 단면화된 미성숙 영양분체 또는 미세-마디를 나타낸다.
도 9는 단면화 전 미성숙 줄기(또는 영양분체)를 나타낸다.
도 10은 슈도리좀(pseudorhizome)의 영상을 나타낸다.
도 11은 성숙 줄기[부유층(float bed)]로부터 형성된 미성숙 줄기의 무리를 형성하기 위한 뿌리 및 순 증식을 나타낸다.
도 12는 미성숙 줄기의 무리에서 뿌리 발달을 예시하기 위한 부유층 시스템의 횡단면을 나타낸다.
도 13은 트레이(tray) - 최소 뿌리를 증식시키는데 있어서 미세-마디 순 발달을 나타낸다.
도 14는 순이 발달하지만 뿌리가 없는 미처리된 미세-마디(황색의 좌측); 및 순 및 뿌리 둘 다를 가지는 처리된 미세-마디 (황색 우측)의 비교를 나타낸다.
도 15는 옥신/사이토키닌 혼합물로 처리하고, 순 및 뿌리 발달 둘 다를 나타내는 미성숙 줄기(또는 영양분체)를 나타낸다.
도 16은 수거 전 부유 층내 미성숙 줄기(또는 영양분체) 무리를 나타낸다. 이들 무리는 약 6 내지 10개의 개별 줄기와 각각의 줄기내 약 5 내지 8개 마디를 갖는다.
도 17은 지탱한 뿌리 발달을 나타내는 처리된 미세-마디(미성숙 줄기로부터)를 나타낸다.
도 18은 처리된 미성숙 줄기(또는 영양분체)로부터 단면화되고, 순 및 뿌리 둘다를 갖는 마디를 나타낸다.
도 19는 식재 전에 옥신/사이토키닌/해초 농축물/PEG로 처리하는 마키아스(Machias) 마디를 나타낸다.
도 20은 심토 식재 자루(subsoil planting shank)를 사용하여 미세-마디를 토양내로 주입 처리하는 공정을 나타낸다.
도 21은 심토 자루(subsoil shank)를 사용하여 토양내로 식재된 미세-마디의 세부사항을 나타낸다.
도 22는 약 5개월 째에 마키아스 식물을 나타낸다.
도 23은 약 7개월 째에 마키아스 식물을 나타낸다.
도 24는 뿌리 및 순 발달을 나타내는 배지로부터 제거된 줄기(또는 영양분체)를 나타낸다.
도 25는 완전한 영양분체로부터 16일 후 미성숙 줄기(영양분체)의 보충을 나타낸다.

본 발명의 양태들은 일반적으로 개선된 성장-증진용 조성물 및 벼과 식물의 것들을 포함하는 외떡잎식물 부류의 잔디 식물을 증식시키기 위한 이의 사용 방법에 관한 것이다. 특수 양태는 아룬도 도낙스 또는 이의 재배품중과 같은 멸균 잔디 식물을 증식시키기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본원에 상세히 기술한 바와 같이, 이들 양태는, 부분적으로는, 잔디 식물의 분열조직에 성장-증진용 조성물을 시의적절하게 동일계내 적용하면 이들 식물의 증식 주기를 크게 가속화시킨다는 발견에 기초한다. 주로, 본원에 제공된 증식의 개선된 방법은 적어도 하나의 옥신, 적어도 하나의 사이토키닌, 및 적어도 하나의 폴리아스파르트산의 혼합물을 포함하는, 성장-증진용 조성물을 사용한 잔디 식물의 미성숙 줄기의 동일계내 처리를 포함한다. 특정의 양태에서, 이들 조성물은 적어도 하나의 해초 추출물, 적어도 하나의 계면활성제 또는 이들 둘다를 추가로 포함할 수 있다.

어떠한 하나의 이론에 얽메이지 않고, 본 발명의 성장-증진용 조성물은 잔디 식물 줄기의 마디, 특히 미성숙 줄기의 마디들에서 분열조직의 휴지기를 파괴함으로써 마디 가장자리를 따라 순 및 뿌리 형성을 어긋나도록 한다. 본원에 기술된 다른 용도 및 당해 분야의 기술자에게 명백한 다른 용도 중에서, 줄기를 따른 기타 경우의 잠재적인 마디로부터 형성된 순(Shoot) 및 뿌리를 함유하는 이들 줄기를 이후에 밭에 직접 식재하여 성숙한 잔디 식물을 생산하거나, 증식 층내 종자 줄기로 사용하여 식물 스톡을 증가시키거나, 또는 이들 둘다를 수행할 수 있다. 식재된 후, 처리된 미성숙 줄기는 궁극적으로 다른 방법에 의해 달성될 수 있는 시간보다 적은 시간내에 성숙한 잔디 식물로 성장한다.

수거되면, 성숙한 잔디 식물은 이후에 다양한 적용에서의 유용성을 찾을 수 있다. 예를 들면, 성숙한 잔디 식물은 바이오에너지의 생산시 공급원 또는 공급 원료(feedstock)로서 유용하다.

본 발명의 성장-증진용 조성물 및 관련 방법은 당해 분야의 잔디 식물 증식 기술보다도 다수의 장점을 제공한다. 하나로, 본 방법은 존재하는 실행들로 이행하기가 용이한데, 이는 주로 이들 실행들이 고도로-효과적이고, 기술적으로 복잡하지 않으며, 정상적인 밭 조건하에서 재생될 수 있는 비-무균성 방법이기 때문이다. 또한, 이들 방법들은 소말클로날 변이(somalchonal variation)를 감소시키거나 제거하며, 클론적 균일성을 필요로하는 작업에서 이들을 유용하도록 한다.

또한, 본원에 제공된 조성물 및 방법들은 비교적 작은 공간 및 비교적 짧은 시간내에 극히 많은 수의 번식체 및 성숙한 식물을 생산하도록 한다. 한가지, 식물 스톡을 확장시키는 주요 수단으로서 어린 또는 미성숙 줄기의 사용은 증식 및 처리를 위한 공간을 거의 필요로 하지 않는다. 또한, 처리된 미성숙 줄기의 부분들이 이식되어 성숙한 줄기를 생성할 뿐 아니라 치료를 위한 새로운 세대의 미성숙 줄기를 생산할 수 있는 종자 스톡으로서 사용할 수 있다는 점에서도, 본원에 제공된 방법은 식물 스톡을 신속하게 및 기하급수적으로 확장시키는데 사용될 수 있다. 또한, 약 12주까지 잔디 식물의 전체 증식 주기를 감소시킴에 의해, 보다 많은 양의 성숙한 생성물이 시간에 걸쳐 생산될 수 있다.

이들 방법은 또한 비용-효과적이다. 1회 측정으로, 본 비용에 따라, 성숙한 잔디 식물을 생성하는 비용은 약 1.38불($)/단위(unit)에서 약 0.03불($)/단위로 감소시킬 수 있다. 다른 측정에 의해, 증식하는 잔디 식물의 비용은, 부분적으로 약 0.001불($)/단위(또는 마디)의 보다 낮은 단위당 비용으로 인하여, 약 $5-6000 에이커(acre)에서 약 $300 에이커로 감소시킬 수 있다.

전체적으로, 거대한 에이커의 식재를 허용하는 존재하는 지방 기술(rural technology)을 사용함으로써, 본 발명은 멸균 잔디 식물인 아룬도 도낙스와 같은 잔디 식물의 대규모 식재(planting)를 용이하게 간소화함으로써 이들 경제적으로 가치있고 유용한 식물에 대한 비용-효과적인 생산 시스템을 생성할 수 있다.

본원에 인용된 모든 공보, 특허 및 특허출원은 이의 전문이 여기서 참고로 인용된다.

달리 정의하지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속한 당해 분야의 통상의 숙련가에 의해 일반적으로 이해되는 동일한 의미를 갖는다. 비록 본원에 기술된 것들과 유사하거나 동등한 어떠한 방법 및 물질들이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있다고 해도, 바람직한 방법 및 물질들이 기술되어 있다. 본 발명의 목적을 위해, 다음 용어들이 하기에 정의되어 있다.

정의

정관사 "단수(a 및 an)"는 본원에서 관사의 문법적 대상의 하나 또는 하나 이상(즉, 적어도 하나)를 언급하기 위해 사용된다. 예로서, "성분"은 하나의 성분 또는 하나 이상의 성분을 의미한다.

"약"은 참조 수량, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 25, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1 % 정도로 많은 수량, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 면적, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.

당해 명세서 전체에서, 내용에 달리 요구되지 않는 한, 단어 "포함하다(comprise, comprises)" 및 "포함하는"은 기술된 단계 또는 성분 또는 단계들 또는 성분들의 그룹의 포함을 내포하나 다른 어떠한 단계 또는 성분 또는 단계들 또는 성분들의 그룹을 배제하지 않는 것으로 이해된다.

"로 이루어진(consisting of)"은 어구 "로 이루어진"을 수반하는 모든 것을 포함하며 이에 한정된다. 따라서, 어구 "로 이루어진"은, 나열된 성분들이 요구되거나 의무적이며, 다른 성분들은 존재하지 않을 수 있음을 나타낸다. "로 필수적으로 이루어진"은 어구 뒤에 나열된 특정 성분들을 포함함을 의미하며, 나열된 성분들에 대한 기재내용에서 명시된 활성 또는 작용을 방해하지 않거나 또는 기여하는 다른 성분들로 한정된다. 따라서, 어구 "로 필수적으로 이루어진"은, 나열된 성분들이 요구되거나 의무적이지만, 다른 성분들이 임의적이며 이들이 나열된 성분들의 활성 또는 작용에 영향을 미치는 것에 상관없이 존재하거나 존재하지 않을 수 있음을 나타낸다.

"옥신"은 일반적으로 또한 식물 성장을 조정하는데 있어 중심적인 역활을 하며, 가장 일반적으로 줄기에서 세포 연장을 유도하는 이들의 능력에 의해 특징화되는, 식물 호르몬(phytohormone 또는 plant hormone)으로서 언급되는 식물 성장 물질의 부류에 관한 것이다. 그러나, 옥신은 또한 형성층내 세포 분열, 체관부 및 목질부의 분화, 가지꽂이(stem cutting)에서 뿌리 개시, 및 조직 배양(즉, 시험관내)시 측부 뿌리 발달과 같은, 식물 성장 및 발달과 관련된 다른 공정들에 영향을 미친다. 옥신은 또한 사이토키닌의 생합성을 조절할 수 있다.

분자 수준에서, 옥신은 방향족 환 및 카복실산 그룹에 의해 전형적으로 특징화된다. 옥신의 예는 인돌-3-아세트산 (IAA), 인돌-3-부티르산 (IBA), 나프탈렌 아세트산 (NAA), 4-클로르인돌-3-아세트산 (4-CI-IAA), 2-페닐아세트산 (PAA), 2,4-디클로로페녹시아세트산, 2-메톡시-3,6-디클로로벤조산, 및 4-아미노-3,5,6-트리클로로피콜린산을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

"사이토키닌"은 일반적으로 세포 분열을 자극하는 식물 성장 물질(즉, 식물 호르몬)의 부류를 말한다. 추가로, 다른 세포 공정 중에서, 이들 성장 물질들은 조직 배양물에서 형태형성(순 개시/싹(bud) 형성)을 자극하고, 끝눈 우성(apical dominance)의 측부 싹-방출의 성장을 자극하고, 세포 확장으로부터 수득되는 잎 확장을 자극하며 클로로필 합성의 자극을 통한 황백화색소체의 엽록체로의 전환을 촉진하다.

사이토키닌은 거의 모든 고등 식물, 및 또한 이끼, 진균 및 세균에서 발견되어 왔다. 사이토키닌 농도는 분열조직 영역 및, 뿌리, 어린 잎, 발달하는 과일 및 종자와 같은 연속된 성장 잠재력 부위에서 최대로 높다. 이들 성장 물질은 일반적으로 뿌리에서 합성되는 것으로 여겨지며 목질부를 통해 순으로로 이동(translocate)된다. 천연적으로-발생하는 사이토키닌 생합성은 아데닌의 생화학적 변형을 통해 주로 발생하므로; 대부분의 사이토키닌은 아데닌과 유사한 구조를 갖는다. 이러한 사이토키닌의 예는 키네틴, 제아틴(Z), 디하이드로제아틴(DHZ) 및 이소펜테닐아데노신 (IPA), 벤질아미노푸린 (BA), 오르토-토폴린 (oT), 메타-토폴린 (mT), 오르토-메톡시토폴린 (MeoT), 메타-메톡시토폴린 (MemT), 및 벤즐아데닌 (BA)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 또한, 디페닐우레아 및 티디아주론(TDZ)과 같은 페닐우레아-유형 사이토키닌이 포함된다.

"폴리아스파르트산(PASP)"은 일반적으로 특정의 바이오미네랄화(biomineralization)-조절 단백질의 소도메인의 구조적 및 기능적 유사체인 합성 폴리아미드의 부류에 관한 것이다. 각종 PASP가 특성화될 수 있으며 당해 분야에서 공지된 기술에 따라 합성될 수 있다(참조: 예를 들면, 미국 특허 제6,380,350호; 제5,688,902호, 제5,457,176호; 제5,830,985호; 제5,391,764호; 제5,319,145호; 제5,380,817호; 제5,484,945호; 제5,756,595호, 이들 각각은 참조로 인용된다). PASP는 또한 시판되고 있다. 특정의 양태에서, 폴리아스파르트산은 또한 "카르프라미드" 또는 코폴리-[(3-카복시프로피온아미드)(2-(카복시메틸)아세트아미드)]로 언급된 Amisorb™(제조원: Amilar Corp., 일리노이주 시카고 소재)이다(참조: 예를 들면, Bernardz et al ., Journal of Plant Nutrition . 21 :2417-2427, 1998, 본원에 참조로 혼입됨). 어떠한 하나의 이론에 얽메이지 않고, Amisorb™은 분열 조직과 같은, 활성화 부위에 대해 다른 화학물질 또는 제제(예를 들면, 사이토키닌, 옥신)를 이동시킴으로써, 영양물 흡수를 증가시키는 것으로 여겨진다.

본원에 사용된 바와 같은, "계면활성제"는 일반적으로 액체의 표면 장력을 저하시킴으로써, 이러한 액체의 보다 용이한 확산을 허용하는 습윤제에 관한 것이다. 계면활성제는 전형적으로 양친매성 유기 화합물이며, 이는 적어도 하나의 소수성 그룹 및 적어도 하나의 친수성 그룹 둘다를 함유한다. 이러한 특징으로, 계면활성제는 흔히 유기 용매 및 물 속 둘다에서 가용성이다.

이온성 및 비-이온성 계면활성제도 포함된다. 이온성 계면활성제의 예는 음이온성 계면활성제(예를 들면, 설페이트, 설포네이트 또는 카복실레이트 음이온을 기준으로 함), 예를 들면, 퍼플루오로옥타노에이트 (PFOA 또는 PFO), 퍼플루오로옥탄설포네이트 (PFOS), 나트륨 도데실 설페이트 (SDS), 암모늄 라우릴 설페이트, 및 다른 알킬 설페이트 염, 나트륨 라우레쓰 설페이트 (즉, 나트륨 라우릴 에테르 설페이트 (SLES)), 및 알킬 벤젠 설포네이트; 양이온성 계면활성제 (예를 들면, 4급 암모늄 양이온을 기준으로 함), 예를 들면, 세틸 트리메틸암모늄 브로마이드 (CTAB), 세틸피리디늄 클로라이드 (CPC), 폴리에톡실화된 수지 아민(POEA), 벤즈알코늄 클로라이드 (BAC), 및 벤제토늄 클로라이드 (BZT); 및 쯔비터이온성(zwitterionic) 또는 양쪽성 계면활성제, 예를 들면, 도데실 베타인 코카미도프로필 베타인 및 코코 암포 글리시네이트를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 비-이온성 계면활성제의 예는 알킬 폴리(에틸렌 옥사이드), 알킬페놀 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(에틸렌 옥사이드) 및 폴리(프로필렌 옥사이드)의 공중합체(즉, 폴록사머 또는 폴록사민), 알킬 폴리글루코사이드, 예를 들면, 옥틸 글루코사이드 및 데실 말토사이드, 지방 알코올, 예를 들면, 세틸 알코올 및 올레일 알코올, 코카미드 MEA, 코카미드 DEA, 및 폴리소르베이트, 예를 들면, 트윈 20, 트윈 80, 및 도데실 디메틸아민 옥사이드를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

"해초 농축물"은 일반적으로 당해 분야에 공지된 다른 것들 중에서, 거시적인, 다중 세포 및 해저 해양 조류, 및 또한 적조류, 갈조류 및 녹조류의 구성원을 포함하는 하나 이상의 해초로부터 추출된 비료를 말한다. 특정의 시아노박테리아 또한 해초로 고려된다. 통상적으로, 해초 식물의 완전한 가용성 부위가 바람직한 무기물 및 활성 성분을 함유하므로, 이들만이 추출된다. 건조시킨 해초 생성물은 해초 식사(예를 들면, 파쇄되고 건조된 신선한 해초), 흔히 해초를 비등시키고 이의 액체 성분을 증발시켜, 분말화되는 농축된 고형 추출물을 남기는, 분말화된 해초 추출물을 포함한다. 또한, 수(water) 추출에 의해 신선한 해초로부터 흔히 생산된 액체 해초 추출물이 포함된다. 많은 해초 농축물이 액체 또는 분말 형태로 시판되고 있다. 시판되는 해초 농축물의 예는 당해 분야에 공지된 다른 것들 중에서, Kelpak™, Sea Magic™, Natrakelp™, Alg-A-Mic™, Neptune's Harvest™, 및 DynaKelp™을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 특정의 양태에서, 해초 농축물은 Maxicrop™(제조원: Maxicrop USA, Inc., 일리노이주 엘크 그로브 빌리지 소재)과 같이, 아스코필룸 노도숨(Ascophyllum nodosum)으로부터의 것이다.

"향상시키다" 또는 "향상시키는", 또는 "증가하다" 또는 "증가하는", 또는 "자극하다" 또는 "자극하는"은 일반적으로, 비 조성물 또는 대조군 조성물에 기인한 반응과 비교할 때, 식물, 미성숙 줄기, 성숙 줄기 또는 이의 분절에서보다 큰 생리학적 반응을 생산하거나 유발하는 본 발명의 하나 이상의 조성물의 능력을 말한다. 측정가능한 생리학적 반응은 예를 들면, 당해 분야에서의 이해되는 것 및 본원 기술된 내용으로부터 명백한 다른 것들 중에서, 흔히 다른 것보다 보다 짧은 시간에 걸쳐 마디 여백으로부터 증가된 조직 발달(예를 들면, 뿌리 또는 순 또는 둘다의 증가된 성장)을 포함할 수 있다. "증가된" 또는 "향상된" 양은 전형적으로 "통계적으로 유의적인" 양이며, 비 조성물 또는 대조군 조성물에 의해 생산된 양의 1.1배, 1.2배, 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 7배, 8배, 9배, 10배, 15배, 20배, 30배 또는 그 이상(예를 들면, 500, 1000배)(1배, 예를 들면, 1.5배, 1.6배, 1.7배, 1.8배 등 사이 및 초과의 모든 정수 및 소수점 포함)을 포함할 수 있다.

잔디 식물의 "동일계내" 처리는 완전한 줄기(즉, 식물의 다른 부위에 부착된 줄기), 또는 이의 분절(즉, 식물의 다른 부위로부터 제거된 줄기의 단면)을, 예를 들면, 인공 기상실(climate room), 온실, 부유 층, 증식 층, 토양(내부 또는 외부) 등 속에서, 본 발명의 조성물과 접촉시키는 것에 관한 것이다.

본원에 사용된 바와 같은 "잔디 식물"은 벼과 식물의 "진정한 잔디들", 사초과(Cyperaceae family)의 사초(sedge), 및 골풀과(Juncaceae)의 골풀(rushes)을 포함하는 외떡잎식물 부류의 개화기 식물 또는 속씨식물(angiosperm)에 관한 것이다. 벼과 식물의 잔디 식물은 식용 곡물 및 곡류(cereal), 대나무, 및 잔디밭 및 초원의 잔디를 포함한다. 또한, 벼과내에는 2개 속[아노모클로아(Anomochloa),스트렙토카에타(Streptochaeta)]을 포함하는 잎이 넓은 잔디의 계통인, 아노모클로이데아에(Anomochlooideae)와 같은 서브-패밀리(sub-family); 파루스(Pharus) 및 렙타스피스(Leptaspis)를 포함하는 3개 속을 포함하는 잔디의 계통인 파로이데아에(Pharoideae); 아프리카 속 푸엘리아(African genus Puelia)를 포함하는 계통인 푸엘리오이데아에(Puelioideae); 밀, 보리, 귀리, 브롬-잔디(brome-grass)[브로무스(Bromus)], 및 갈대[칼라마그로스티스(Calamagrostis)]를 포함하는 푸이데아에(Pooideae); 대나무를 포함하는 밤부소이데아에(Bambusoideae); 벼 및 야생 벼(wild rice)를 포함하는 에르하르토이데아에(Ehrhartoideae); 물대 및 물억새(common reed)를 포함하는 아룬디노이데아에(Arundinoideae); 때때로 파니코이데아에(Panicoideae)속에 포함되는 약 12개 속의 서브패밀리인 센토테코이데아에(Centothecoideae); 참새그령(lovegrass)[예를 들면, 에라그로스티스(Eragrostis), 테프(teff)], 드롭씨드(dropseed)[스포로볼루스(Sporobolus), 손가락 조(finger millet)[엘레우신 코라카나(Eleusine coracana)], 및 물리 잔디(muhly grasses)[물렌베르기아(Muhlenbergia)]를 포함하는 클로리도이데아에(Chloridoideae); 수수속(panic grass), 옥수수(maize), 수수(sorghum), 사탕수수, 대부분의 기장(most millet), 포니오(fonio) 및 나도기름새(bluestem grass)를 포함하는 파니코이데아에(Panicoideae); 미크라이로이데아에(Micrairoideae); 팜파스 잔디(pampas grass)를 포함하는 단토니오이데아에(Danthonioideae); 및 반구 둘다의 온도 영역에 대해 천연의 잔디 약 500 종의 속인, 포아(Poa)를 포함한다.

본원에 사용된 바와 같은 "멸균 잔디 식물"은, 뿌리줄기 단면의 클로닝 또는 분할에 의해 증식하며, 생존가능한 종자 세트를 생산하지 않는 잔디 식물에 관한 것이다. 멸균 잔디 식물의 예시적 예는 아룬도 도낙스, 아룬도 기간티움, 게라니움 사기타툼, 미스칸투스 x 기간테우스, 사카룸 오피시아나룸 및 다른 사카룸 아종, 펜니세툼 푸르페레움 식물, 준쿠스 아종, 시르푸스 아종(Scirpus spp .), 시페루스 아종(Cyperus spp .), 카렉스 아종, 에리안투스 아종, 티파 아종, 및 이의 재배품중을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

"재배품종"은 이의 특수한 표현형 또는 특성으로 인하여 선택되어 독특한 명칭이 부여되어지고, 일반적으로 관련 식물 또는 이것이 기원한 식물로부터 일부 방식에서 명백한 배양된 식물에 관한 것이다. 재배품종은 전형적으로 증식시 명백한 특성을 보유한다. 재배품종의 명칭은 배양된 식물의 명명법의 국제 코드[International Code of Nomenclature for Cultivated Plants(ICNCP, 일반적으로 배양된 식물 코드로 공지됨)]에 일치하여야 한다. 당해 코드와 일치시키기 위해서는, 재배품종이 다른 재배품종으로부터 명백해야할 뿐 아니라, 유성 또는 무성 수단에 의해 이러한 특별 재배품종에 대해 기술된 방식으로 증식하는데 신뢰할 수 있어야 한다.

당해 분야에 공지된 다른 지역 중에서, 중동, 하와이, 캘리포니아, 및 극동으로부터의 잔디 식물 재배품종이 포함된다. 아룬도 도박스(Arundo Dovax) 재배품종의 예는 전환체(cv.) "바리에가타(Variegata)"로서 공지된, 굵은 백색 줄무늬가 있는 잎을 가지며 약 8피트(2.4 m) 신장으로 성장하는 줄무늬 물대[striped giant reed: 에이. 도낙스 변이체 베르시콜로르(A. donax var. versicolor)], 및 회색 또는 청갈색인 약 3 인치(7.6 cm) 너비의 큰 잎을 갖는 재배품종 "마크로필라(Macrophylla)"가 포함되나, 이에 한정되지 않는다.

"줄기"는 일반적으로 "마디" 및 "절간(internode)"로 분할되는 관다발 식물의 2개의 주요 구조적 축중 하나를 말한다. 용어 "마디"는 이 지점에서 부착될 수 있고 이 위에서 단일의 마디의 싹이 존재하는 줄기 또는 대 상의 관절(joint) 또는 노치(notch)를 말한다. 마디는 전형적으로 하나 이상의 잎들, 꽃들 또는 다른 줄기들로 성장하는 싹들을 포함한다.

"분열 조직"은 식물 기관으로 추가로 발달할 수 있는 조직 형성 세포의 그룹을 말한다.

잔디 식물의 "성숙한" 줄기(또는 간)은, 비록 소수의 변이체가 고려된다고 해도, 전형적으로 직경이 약 ½ 내지 약 1½ 내지 약 3 인치 이상(참조: 예를 들면, 도 1)임을 특징으로 한다. 본원에 사용된 것으로서, 성숙한 줄기의 "분절"은, 길이가 약 ½, 1, 1½, 2, 2½, 3, 3½, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 인치 이상일 수 있으며, 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 이상의 마디 또는 관절을 포함할 수 있다. 특정의 양태에서, 성숙한 줄기의 분절은, 길이가 약 1½인치이고 하나의 마디를 포함한다. 특정의 양태에서, 성숙한 줄기의 분절은, 직경이 약 ½ 인치 내지 약 ¾ 인치이다.

잔디 식물의 "미성숙" 줄기(또는 영양분체)는, 비록 소수의 변이체가 고려된다고 해도, 직경이 약 ⅛ 내지 약 ¼ 내지 약 ⅜ 인치, 가능하게는 약 ½ 인치 이하(참조: 예를 들면, 도 2)임을 특징으로 한다. 본 발명의 조성물로 처리하기 위해 준비된 미성숙 줄기와 같은 미성숙 줄기, 또는 이의 분절은 전형적으로, (예를 들면, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25 인치 높이) 사이의 모든 정수를 포함하는 약 6 내지 25, 10 내지 25, 12 내지 16, 또는 15 내지 25 인치의 높이(또는 길이)이다. 미성숙 줄기는 전형적으로 약 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12개의 마디들을 포함하는, 약 4 내지 약 10 또는 12개의 분열 조직 마디 단면(즉, 마디들)을 함유한다. 특정의 양태에서, 바람직한 수거 주기, 위치 또는 계절에 따라, 미성숙 줄기는, 길이가 약 6 내지 10 피트까지(예를 들면, 길이가 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12피트, 또는 그 이상)를 포함하는, 25 인치보다 길 수 있으며, 미성숙 줄기의 직경을 여전히 유지할 수 있다. 미성숙 줄기의 "분절"은 또한, 길이가 약 ½, 1, 1½, 2, 2½, 3, 3½ 인치일 수 있고, 전형적으로 하나의 분열 조직 마디를 함유하는, 미세-분절 또는 미세-마디를 포함할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 "모(mother)" 줄기 또는 "모" 식물은, 종자 줄기 또는 종자 식물을 생성하기 위한 식재 물질과 같이, 흔히 반복적으로 사용될 수 있는, 전체 줄기 또는 간, 또는 이의 분절을 말한다. 예를 들면, 모체 식물은 비성숙 줄기의 무리를 포함할 수 있다.

"종자" 줄기 또는 "종자" 식물은 전형적으로 적어도 하나의 마디를 함유하며, 흔히 모 식물의 상부로부터 쪼개져서, 이후 토양으로 식재될 수 있는 적어도 하나의 마디를 함유하는 미성숙 줄기, 또는 이의 부위에 관한 것이다.

"뿌리줄기" 또는 "근경(roottalk)"은 일반적으로 지하에서 발견되며, 흔히 이의 마디로부터 뿌리 및 순이 나오는 식물의 특징적으로 수평인 줄기이다. 유관속 식물에서, "뿌리"는, 비록 뿌리가 또한 대기(지면 위로 성장하는) 또는 통기(지면의 상부까지 또는 특히 물 위로 성장하는)일 수 있다고 해도, 전형적으로 토양의 표면 아래에 있는 식물의 기관이다. 전형적으로, 뿌리는 잎을 생성하지 않으며, 또한 마디를 결여하고 있는 식물체의 부분으로 정의될 수 있다. 순은 줄기, 가지 또는 잎으로 성장하는, 식물상의 새로운, 미성숙 성장이다.

조성물

위에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 양태는 멸균 잔디 식물과 같은 잔디 식물을 증식시키기 위한 성장-증진용 조성물, 및 이의 사용 방법에 관한 것이다. 특정의 양태에서, 이들 조성물은 적어도 하나의 옥신, 적어도 하나의 사이토키닌, 및 적어도 하나의 폴리아스파르트산을 포함한다. 임의로, 조성물들은 적어도 하나의 해초 농축물, 적어도 하나의 계면활성제, 또는 이들 둘다를 추가로 포함할 수 있다.

옥신의 예는 인돌-3-아세트산(IAA), 인돌-3-부티르산 (IBA), 나프탈렌 아세트산 (NAA), 4-클로르인돌-3-아세트산 (4-CI-IAA), 2-페닐아세트산 (PAA), 2,4-디클로로페녹시아세트산, 피클로람, 2-메톡시-3,6-디클로로벤조산, 및 4-아미노-3,5,6-트리클로로피콜린산을 독립적으로, 또는 이의 조합물 또는 혼합물로 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 20 내지 8000 ppm, 약 30 내지 7000 ppm, 약 40 내지 6000 ppm, 약 50 내지 5000 ppm, 약 60 내지 4000 ppm, 약 70 내지 3000 ppm, 약 80 내지 2000 ppm, 약 100 내지 1000 ppm, 100 내지 2000 ppm, 100 내지 3000 ppm, 100 내지 4000 ppm, 100 내지 5000 ppm, 100 내지 6000, 100 내지 8000 ppm, 1000 내지 8000 ppm, 1000 내지 7000 ppm, 1000 내지 6000 ppm, 1000 내지 5000 ppm, 1000 내지 4000 ppm, 1000 내지 3000 ppm, 1000 내지 2000 ppm, 100 내지 300 ppm, 300 내지 700 ppm, 700 내지 1000 ppm, 200 내지 400 ppm, 400 내지 600 ppm, 600 내지 800 ppm, 800 내지 1000 ppm, 1000 내지 1200 ppm, 1200 내지 1400 ppm, 1400 내지 1800 ppm, 1800 내지 2200 ppm, 2000 내지 2200 ppm, 2200 내지 2400 ppm, 2400 내지 2600 ppm, 2600 내지 2800 ppm, 2800 내지 3000 ppm, 3000 내지 3200 ppm, 3200 내지 3400 ppm, 3400 내지 3600 ppm, 3600 내지 3800 ppm, 3800 내지 4000 ppm, 4000 내지 4200 ppm, 4200 내지 4400 ppm, 4400 내지 4600 ppm, 4600 내지 4800 ppm, 4800 내지 5000 ppm, 1 내지 100 ppm, 100 내지 400 ppm, 200 내지 800 ppm, 300 내지 1000 ppm, 1 내지 500 ppm, 500 내지 1000 ppm, 750 내지 1700 ppm, 1000 내지 1500 ppm, 1500 내지 2000 ppm, 2000 내지 2500 ppm, 2500 내지 3000 ppm, 3000 내지 3500 ppm, 3500 내지 4000 ppm, 4000 내지 4500 ppm, 4500 내지 5000 ppm을 포함하는 약 1ppm 내지 약 10,000ppm으로부터의 범위, 및 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 범위로 존재할 수 있다.

특정의 양태에서, 옥신은 이들 사이의 모든 정수를 포함하는 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm으로 존재할 수 있다.

특정의 구체적인 조성물은 약 750 ppm 내지 약 1700 ppm의 총 옥신 농도에 대해 IAA(예를 들면, 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 450 내지 800 ppm에서) 및 NAA(예를 들면, 이들 사이의 모든 정수들 포함하여, 약 300 내지 900 ppm)의 혼합물을 포함할 수 있다.

특정의 구체적인 조성물은 옥신만으로서 IBA(예를 들면, 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 200 내지 1000 ppm, 200 내지 400 ppm, 400 내지 600 ppm, 600 내지 800 ppm, 800 내지 1000 ppm, 1000 내지 1200 ppm, 1200 내지 1400 ppm, 1400 내지 1600 ppm, 1600 내지 1800 ppm, 1800 내지 2000 ppm)을 포함할 수 있다.

특정 양태에서, 옥신은 이들 사이의 모든 정수들을 포함하는, 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm의 IBA이다, 특정의 양태에서, 옥신은 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm의 IAA이다. 특정의 양태에서, 옥신은 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm의 NAA이다.

사이토키닌의 예는 키네틴, 제아틴 (Z)(시스 및 트랜스), 디하이드로제아틴 (DHZ) 및 이소펜테닐아데노신 (IPA), 벤질아미노푸린 (BA), 오르토-토폴린 (oT), 메타-토폴린 (mT), 오르토-메톡시토폴린 (MeoT), 메타-메톡시토폴린 (MemT), 및 벤즐아데닌 (BA)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 또한 페닐우레아-유형 사이토키닌, 예를 들면, 디페닐우레아 및 티디아주론(TDZ)이 포함된다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 약 20 내지 8000 ppm, 약 30 내지 7000 ppm, 약 40 내지 6000 ppm, 약 50 내지 5000 ppm, 약 60 내지 4000 ppm, 약 70 내지 3000 ppm, 약 80 내지 2000 ppm, 약 100 내지 1000 ppm, 100 내지 2000 ppm, 100 내지 3000 ppm, 100 내지 4000 ppm, 100 내지 5000 ppm, 100 내지 6000, 100 내지 8000 ppm 1000 내지 8000 ppm, 1000 내지 7000 ppm, 1000 내지 6000 ppm, 1000 내지 5000 ppm, 1000 내지 4000 ppm, 1000 내지 3000 ppm, 1000 내지 2000 ppm, 100 내지 300 ppm, 300 내지 700 ppm, 700 내지 1000 ppm, 200 내지 400 ppm, 400 내지 600 ppm, 600 내지 800 ppm, 800 내지 1000 ppm, 1000 내지 1200 ppm, 1200 내지 1400 ppm, 1400 내지 1800 ppm, 1800 내지 2200 ppm, 2000 내지 2200 ppm, 2200 내지 2400 ppm, 2400 내지 2600 ppm, 2600 내지 2800 ppm, 2800 내지 3000 ppm, 3000 내지 3200 ppm, 3200 내지 3400 ppm, 3400 내지 3600 ppm, 3600 내지 3800 ppm, 3800 내지 4000 ppm, 4000 내지 4200 ppm, 4200 내지 4400 ppm, 4400 내지 4600 ppm, 4600 내지 4800 ppm, 4800 내지 5000 ppm, 1 내지 100 ppm, 100 내지 400 ppm, 200 내지 800 ppm, 300 내지 1000 ppm, 1 내지 500 ppm, 500 내지 1000 ppm, 750 내지 1700 ppm, 1000 내지 1500 ppm, 1500 내지 2000 ppm, 2000 내지 2500 ppm, 2500 내지 3000 ppm, 3000 내지 3500 ppm, 3500 내지 4000 ppm, 4000 내지 4500 ppm, 4500 내지 5000 ppm을 포함하는, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 범위, 및 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 범위로 존재할 수 있다.

특정의 양태에서, 사이토키닌은 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm으로 존재할 수 있다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm의 제아틴이다. 특정의 양태에서, 사이토키닌은 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000 ppm의 BA이다.

폴리아스파르트산(PASP)의 예는 또한 "카르프라미드" 또는 코폴리-[(3-카복시프로피온아미드)(2-(카복시메틸)아세트아미드)로 언급된 Amisorb™(제조원: Amilar Corp., 일리노이주 시카고 소재)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Amisorb™과 같은 하나 이상의 PASP는 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 범위들 중에서 약 1 ppm 내지 약 250,000 ppm, 10 내지 225,000 ppm, 20 내지 200,000 ppm, 30 내지 150,000 ppm, 40 내지 100,000 ppm, 50 내지 90,000 ppm, 60 내지 80,000 ppm, 70 내지 70,000 ppm, 80 내지 60,000 ppm, 90 내지 50,000 ppm, 100 내지 40,000 ppm, 90 내지 30,000 ppm, 100 내지 20,000 ppm, 100 내지 10,000 ppm, 100 내지 5,000 ppm, 100 내지 3,000 ppm, 200 내지 15,000 ppm, 200 내지 10,000 ppm, 200 내지 5,000 ppm, 300 내지 10,000 ppm, 400 내지 5000 ppm, 500 내지 5000 ppm, 500 내지 2500 ppm, 500 내지 1000 ppm, 5,000 내지 25,000 ppm, 100,000 내지 200,000 ppm, 220 내지 1200 ppm, 1200 내지 2200 ppm, 2200 내지 3200 ppm, 3200 내지 4200 ppm, 4200 내지 5200 ppm, 1000 내지 2000 ppm, 2000 내지 3000 ppm, 3000 내지 4000 ppm, 4000 내지 5000 ppm의 범위로 존재할 수 있다. 특정의 양태에서, 하나 이상의 PASP가 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 개별적으로 또는 전체적으로 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4200, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000, 20,000, 30,000, 40,000, 50,000, 60,000, 70,000, 80,000, 90,000, 100,000, 150,000, 200,000, 250,000 ppm으로 존재할 수 있다.

특정의 양태에서, 해초 농축물은 당해 분야에 공지된 다른 것들 중에서 Kelpak™, Sea Magic™, Natrakelp™, Alg-A-Mic™, Neptune's Harvest™, 및 DynaKelp™과 같은 시판되고 있는 것들을 포함할 수 있다. 특정의 양태에서, 해초 농축물은 Maxicrop™(제조원: Maxicrop USA, Inc., 일리노이주 엘크 그로브 빌리지 소재)과 같은 아스코필룸 노도숨으로부터 기원한다. 특정의 양태에서, 존재할 경우, 하나 이상의 해초 농축물은, 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 범위들을 포함하여, 약 1 ppm 내지 약 500,000 ppm, 10 내지 400,000 ppm, 20 내지 300,000 ppm, 30 내지 400,000 ppm, 40 내지 300,000 ppm, 50 내지 200,000 ppm, 60 내지 100,000 ppm, 70 내지 90,000 ppm, 80 내지 80,000 ppm, 90 내지 70,000 ppm, 100 내지 60,000 ppm, 150 내지 50,000 ppm, 200 내지 40,000 ppm, 250 내지 30,000 ppm, 300 내지 20,000 ppm, 350 내지 15,000, 400 내지 10,000 ppm, 450 내지 5000, 500 내지 2500 ppm, 500 내지 1000 ppm, 50,000 내지 500,000 ppm, 100,000 내지 400,000 ppm, 200,000 내지 300,000 ppm, 1000 내지 3000 ppm, 1000 내지 2000 ppm, 100 내지 300 ppm, 300 내지 700 ppm, 700 내지 1000 ppm, 200 내지 400 ppm, 400 내지 600 ppm, 600 내지 800 ppm, 800 내지 1000 ppm, 1000 내지 1200 ppm, 1200 내지 1400 ppm, 1400 내지 1800 ppm, 1800 내지 2200 ppm, 2000 내지 2200 ppm, 2200 내지 2400 ppm, 2400 내지 2600 ppm, 2600 내지 2800 ppm, 2800 내지 3000 ppm, 3000 내지 3200 ppm, 3200 내지 3400 ppm, 3400 내지 3600 ppm, 3600 내지 3800 ppm, 3800 내지 4000 ppm, 4000 내지 4200 ppm, 4200 내지 4400 ppm, 4400 내지 4600 ppm, 4600 내지 4800 ppm, 4800 내지 5000 ppm, 1 내지 100 ppm, 100 내지 400 ppm, 200 내지 800 ppm, 300 내지 1000 ppm, 1 내지 500 ppm, 500 내지 1000 ppm, 750 내지 1700 ppm, 1000 내지 1500 ppm, 1500 내지 2000 ppm, 2000 내지 2500 ppm, 2500 내지 3000 ppm, 3000 내지 3500 ppm, 3500 내지 4000 ppm, 4000 내지 4500 ppm, 4500 내지 5000 ppm으로 존재할 수 있다.

특정의 양태에서, Maxicrop™과 같은 하나 이상의 해초 농축물은 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 1 , 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4200, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500, 또는 10,000, 20,000, 30,000, 40,000, 50,000, 60,000, 70,000, 80,000, 90,000, 100,000, 150,000, 200,000, 250,000, 300,000, 350,000, 400,000, 450,000, 또는 500,000 ppm으로 존재할 수 있다.

계면활성제의 예는 퍼플루오로옥타노에이트 (PFOA 또는 PFO), 퍼플루오로옥탄설포네이트 (PFOS), 나트륨 도데실 설페이트 (SDS), 암모늄 라우릴 설페이트 및 다른 알킬 설페이트 염, 나트륨 라우레쓰 설페이트[즉: 나트륨 라우릴 에테르 설페이트 (SLES)], 알킬 벤젠 설포네이트, 세틸 트리메틸암모늄 브로마이드 (CTAB), 세틸피디니움 클로라이드 (CPC), 폴리에톡실화된 탈로우 아민(POEA), 벤즈알코늄 클로라이드 (BAC), 및 벤제토늄 클로라이드 (BZT), 도데실 베타인 코카미도프로필 베타인, 코코 암포 글리시네이트, 알킬 폴리(에틸렌 옥사이드), 알킬페놀 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(에틸렌 옥사이드) 및 폴리(프로필렌 옥사이드)(즉, 폴록사머 또는 폴록사민)의 공중합체, 옥틸 글루코시드 및 데실 말토사이드와 같은 알킬 폴리글루코사이드, 세틸 알코올 및 올레일 알코올과 같은 지방 알코올, 코카미드 MEA, 코카미드 DEA, 및 트윈 20, 트윈 80과 같은 폴리소르베이트 및 도데실 디메틸아민 옥사이드를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 계면활성제는 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 범위를 포함하여, 약 1 ppm 내지 약 250 ppm, 5 내지 225, 10 내지 200, 15 내지 175, 20 내지 150, 25 내지 100, 30 내지 175, 40 내지 150, 50 내지 125, 60 내지 100 ppm으로 존재할 수 있다. 특정의 양태에서, 계면활성제는, 존재할 경우 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 215, 225, 235, 또는 250 ppm이다. 특정의 양태에서, 트윈 20 또는 트윈 80과 같은 계면활성제는 0.1, 0.25, 0.5, 0.75, 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 또는 100% 스톡 용액으로부터 리터 당 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10개 점적(drop)으로 첨가될 수 있다. 점적은 이들 사이의 모든 정수들을 포함하여, 약 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150 μl 이상, 예를 들면, 약 51 μl(즉, 약 1/80의 티스픈), 약 62 μl(즉, 약 1/60의 미국 플루이드람(U.S. fluidram) 또는 1/80의 티스픈), 약 83⅓ μl(즉, 의학 점적, 약 1/12 ml), 약 99 μl[즉, 임페리얼 점적(Imperial drop), 약 1/36의 플루이드람), 또는 약 78 μl일 수 있다.

각각의 구체적인 옥신 화합물에 대한 각각의 농도 또는 이의 범위는 각각의 구체적인 사이토키닌에 대한 이의 각각의 농도 또는 범위와 합해질 수 있으며, 이는 또한 각각의 구체적인 폴리아스파르트산에 대한 각각의 구체적인 농도 또는 이의 범위와 합해질 수 있다. 이들 조합은 이후에 각각의 구체적인 해초 농축물 및 각각의 구체적인 계면활성제에 대한 각각의 농도 또는 이의 범위와 임의로 합해질 수 있다.

사용 방법

위에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 특정의 양태는 멸균 외떡잎 아룬도 도낙스 및 이의 재배품종과 같은 벼과 식물의 것들을 포함하는, 잔디 식물을 배양하고 증식시키는 개선된 방법에 관한 것이다. 주로, 이들 방법들은 성숙 또는 미성숙 줄기, 또는 이의 분절을 본원에 기술된 바와 같은 성장-증진용 조성물로 시기적절하게 동일계내에서 처리함을 포함한다. 어떠한 하나의 이론에 얽메이지 않고, 이들 조성물은 줄기의 마디들에서 분열 조직의 휴면을 파괴함으로써, 마디 가장자리를 따라 순 및 뿌리 형성을 어긋나도록 한다. 또한 줄기를 따라 이들 다른 휴지기 마디로부터 형성된 순 및 뿌리는 들판으로 직접 식재되거나 본원에 기술되고 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 용도 중에서, 식물 스톡을 증가시키기 위한 증식 또는 부유 층(또는 다른 장치) 속에서 종자 줄기를 생성하는데 사용될 수 있다.

이들 방법은 예를 들면, (a) 잔디 식물 또는 이의 분절을, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 옥신, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 사이토키닌, 및 약 1 ppm 내지 약 250,000 ppm의 폴리아스파르트산을 함유하는 조성물로 처리하는 단계; (b) 단계 (a)에서 처리된 줄기를 수거하는 단계, 및 (c) 단계 (b)에서 수거된 줄기를 식재하는 단계를 포함하여, 잔디 식물을 증식시키는 방법을 포함한다. 특정의 양태에서, 당해 조성물은 또한 적어도 하나의 해초 농축물을 약 1 ppm 내지 약 500,000 ppm으로, 적어도 하나의 계면활성제를 약 1 ppm 내지 약 250 ppm으로, 또는 이들 둘다를 추가로 포함할 수 있다. 구체적인 양태에서, 잔디 식물은 멸균 잔디 식물이다.

상기 단계 (a)의 줄기는 본원에 기술되고 당해 분야에 공지된 바와 같이 미성숙 줄기 또는 성숙 줄기, 또는 이의 분절일 수 있다. 특정의 바람직한 양태에서, 상기 단계 (a)의 줄기는 예를 들면, 식물 스톡을 증가시키거나 식물을 토양에 직접 식재함으로써 성숙한 식물을 생산하거나 또는 이들 둘다를 수행하는데 전형적으로 사용되는, 미성숙 줄기, 또는 이의 분절이다. 특정의 양태에서, 상기 단계 (a)에서의 줄기는 성숙한 줄기, 또는 이의 분절이며, 이는 전형적으로 예를 들면, 후속적인 처리를 위한 미성숙 줄기 또는 미성숙 줄기들의 무리를 수득하거나, 토양내로 직접 식재함으로써 성숙한 식물을 생산하거나, 또는 이들 둘다를 수행하는데 사용된다.

상기 단계 (a)의 처리를 위해, 미성숙 줄기는 본원에 기술되고 당해 분야에 공지된 바와 같은, 각종 기술에 따라 수득할 수 있다. 하나의 예로서, 미성숙 줄기들 또는 미성숙 줄기들의 무리들은 임의 처리된 성숙한 줄기들 또는 이의 분절들로부터 수득될 수 있다(참조: 도 3). 그러나, 본 발명의 양태는 당해 방법으로 미성숙 줄기들을 수득하는 것에 제한되지 않는다. 특정의 양태에서, 예를 들면, 미성숙 줄기들은 당해 분야의 숙련가에게 명백한 다른 공급원 중에서, 어린 식물 또는 성숙한 식물의 어린 줄기, 또는 앞서 처리된 미성숙 줄기(예: 모 줄기)로부터 직접 수득될 수 있다. 이들 미성숙 줄기는 바람직한 길이로 임의로 단면화하여, 토양 또는 증식 또는 부유 층 또는 다른 장치에 두어, 준비된 경우 성장-증진용 조성물로 직접 처리하거나, 기간 동안 배양하여 이들이 바람직한 길이로 성장하고/하거나 하기 기술된 바와 같이 바람직한 수의 분열 조직 마디 단면을 발달시키도록 할 수 있다.

성장-증진용 조성물로 처리하기 위한 준비를 위해, 미성숙 줄기의 무리 또는 다른 공급원을, 개개의 미성숙 줄기들이, 길이가 약 10, 11 , 12, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25 인치를 포함하는, 약 10 내지 25 또는 15 내지 25 인치가 될 때까지 전형적으로 성장시킨다. 특정의 양태에서, 미성숙 줄기는 약 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개 마디 줄기들을 포함하여, 약 4 내지 10개 또는 5 내지 10개 내지 12개의 분열 조직 마디 줄기들을 가질 수 있으며, 전형적으로 직경이 약 ⅛ 내지 약 ¼ 인치 내지 약 ⅜ 인치이다. 당해 단계는 미성숙 줄기(또는 영양분체) 보충 및 증식으로 언급딜 수 있으며, 출발 물질에 따라, 예를 들면, 약 6 내지 15일(이들 사이의 모든 정수들을 포함), 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8주를 포함하는 약 1 내지 8주, 약 2 내지 6주, 약 3 내지 4주를 취할 수 있다. 따라서, 초기 처리 시기에, 미성숙 줄기는 약 6 내지 15일령이거나, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8주령을 포함하는, 1 내지 8주령일 수 있다. 특정의 양태에서, 미성숙 줄기들은 약 3 내지 6주령이다.

보충 후, 미성숙 줄기들은 당해 분야의 숙련가에게 명백할 다른 방법들을 포함하여, 조성물을 엽 스프레이(foliar spray)로서의 조성물을 흘러넘칠때까지 적용시킴에 의한 것과 같이, 이후에 본원에 기술된 바와 같은 성장-증진용 조성물[상기 단계 (a) 참조]로 처리할 수 있다. 이러한 초기는 바람직하게는 반복될 수 있다. 또한, 성장-증진용 조성물을 사용한 처리는 바람직하게는 무균성 또는 비-무균성 환경에서 수행할 수 있다.

초기 처리 후, 및 수거 전[상기 단계 (b) 참조]에, 미성숙 줄기를 기타의 경우 휴지기 마디(및 이들의 분열 조직)을 제조하기 위한 선택된 기간 동안 성장시키거나 배양하여 바람직한 정도의 순 및 뿌리 형성이 어긋나도록 하며, 이는 궁극적으로 토양에 식재하기 전 또는 후에 발생할 수 있다. 특정의 양태에서, 처리된 미성숙 줄기는 수거 전 약 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21일을 포함하여, 약 3일 내지 약 21일 동안 성장시킨다. 특정의 양태에서, 미성숙 줄기는 수거 및 식재 전에 약 14일(약 2주)동안 성장시킨다.

수거(및 식재)할 준비가 된 처리된 미성숙 줄기는 이의 마디들 중의 적어도 하나들 중으로부터 성장하는 뿌리 및 순 둘다를 가질 수 있거나, 이는 아직 가시적인 뿌리 및 순 발달을 나타내지 않을 수 있지만, 대신 이후에 토양내 식재 후 약 3일내에 뿌리 및 순을 어긋나도록 할 것이다(참조: 도 4). 특정의 양태에서, 처리된 미성숙 줄기의 제공된 마디에 대한 뿌리 대 순 질량 비는 약 1:1이지만, 또한 약 1.1/1 , 1.2/1 , 1.3/1 , 1.4/1 , 1.5/1 , 1/1.1 , 1/1.2, 1/1.3, 1/1.4, 또는 1/1.5일 수 있다. 처리된 미성숙 줄기와는 대조적으로, 처리되지 않은 미성숙 줄기의 다른 휴지기 마디는 단지 순을 발달시키며, 식재 전 또는 후에 뿌리를 함유하지 않는다. 이들 처리되지 않은 미성숙 줄기는 토양에 식재 후 사멸한다. 처리된 미성숙 줄기는 흔히 약 12개월내에 완전한 크기의 식물로 성장한다.

위에서 나타낸 바와 같이, 본 방법은 또한 전체 또는 부분 식물의 성숙한 줄기, 또는 성숙한 줄기의 단면화된 마디의 동일계내 처리를 포함한다. 이들 양태들은 주로 미성숙 줄기들을 수득하는데 사용되며, 이는 이후에, 본원에 제공된 방법에 따라 추가로 처리될 수 있다. 그러나, 특정의 양태에서, 처리된 성숙한 줄기 또는 이의 분절은 토양내로 직접 식재되어 성숙한 식물을 생산할 수 있다. 특정의 양태에서, 성숙한 줄기 또는 이의 분절을 임의로 처리하여 미성숙 줄기들의 무리를 수득할 수 있다(참조: 도 5). 하나의 바람직한 양태에서, 미성숙 줄기의 무리는 본원에 기술된 바와 같이, 출발 물질로서 성숙한 줄기를 사용하는 영양분체 보충을 통해서, 주로 부유 층 기술을 통해서 및 성장-증진용 조성물을 사용한 처리를 통해서 수득된다.

성숙한 줄기로부터 미성숙 줄기를 생산하거나 식재용의 성숙한 줄기를 제조하는 하나의 예시적인 예로서, 성숙한 줄기들을 단면화된 마디 또는, 직경(줄기의 직경에 좌우되어)이 약 ½이고, 길이가 약 1 인치 내지 약 1½ 인치 내지 약 2 인치 내지 약 3 인치, 또는 그 이상이며, 적어도 하나의 마디를 함유하는 분절과 같은 분절들로 절단할 수 있다(참조: 도 6). 특정의 양태에서, 야생 식물 또는 에이. 도낙스와 같은 잔디 식물의 재배품종을 수거하여, 마디 단면 또는 분절들로 절단하고, 표면을 4급 암모늄으로 소독하거나 멸균시킬 수 있다. 바람직한 경우, 줄기를 10% v/v 에탄올 및 0.1 % 트윈 80 속에 약 15분 동안 침지시킨 다음 멸균수로 세척하는 것과 같은 대안적인 멸균 기술을 사용할 수 있다. 요구되지 않는다고 해도, 멸균은 환경적 세균 오염을 감소시킬 수 있다. 이들 분절들을 이후에 부유 층(참조: 예를 들면, 미국 특허 제7,052,912호, 본원에 참조로 혼입됨) 또는 다른 장치내로 삽입시켜 순 연장을 조장하고, 적절한 배지와 함께 배양할 수 있다.

전형적으로, 및 단지 설명 방법으로써, 부유 층 시스템의 조건은 약 6O℉ 내지 약 8O℉의 온도, 비료(예: 미량의 철, 아연, 망간, 구리, 붕소, 몰리브덴 및 황을 포함하는 NPK)를 함유한 물, 및 임의로 뿌리화 호르몬(rooting hormone)(사용된 식물 또는 클론의 요건에 좌우되어)의 유지를 포함한다. 이러한 뿌리화 호르몬들은 예를 들면, 인돌아세트산, 1-나프탈렌아세트산, 및 인돌-3-부티르산을 포함한다. 옥신은 뿌리화 단계에서 사이토키닌의 존재 또는 부재하에 사용될 수 있다. 예를 들어, NM은 일반적으로 식물 배양물 속에 0.1 내지 10 mg/l, 보다 바람직하게는 약 3 mg/l를 초과하지 않는 농도로 사용된다. 특수한 옥신 및 이의 추출물 농도는 배양되는 아룬도 도낙스 또는 다른 잔디 식물의 클론에 의존할 것이며, IAA, NAA 및 IBA의 이들 농도는 실험적으로 측정할 수 있다. 부유 층내 유액의 pH는 전형적으로 약 4.5 내지 약 7.5, 바람직하게는 약 6.5이다. 특정의 양태에서, 탈-이온수가 부유 층내 성숙한 줄기 분절을 배양하는데 사용될 수 있다.

특정의 양태에서, 성숙한 줄기 또는 이의 분절은 본원에 기술된 바와 같이, 성장-증진용 조성물로 임의 처리하여 뿌리 개시를 추가로 자극하고, 뿌리 및 순 발달 및 증식을 자극할 수 있다. 비록 성숙한 줄기의 처리가 임의적이라고 해도, 동시 또는 거의 동시에 뿌리 및 순 성장에 의해 측정된 것으로서 개선된 활력을 제공할 수 있다. 예를 들면, 성숙한 줄기를 당해 단계 동안에 성장-증진용 조성물로 처리하는 것은 약 30% 내지 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100%의 활력을 개선시킨다. 특정의 양태(예를 들면, 약 1 내지 8주)에서, 이러한 처리된 성숙한 줄기 분절은 전형적으로 본원에 제공된 방법에 따라 처리될 수 있는 미성숙 줄기의 무리를 생산한다. 대안적으로, 특정의 양태에서, 부분적으로 이들의 증가된 활력으로 인하여, 처리된 성숙한 줄기는 성장-증진용 조성물을 사용한 초기 처리 후 전형적으로 약 3 내지 21일(예를 들면, 약 14일)의 일 또는 수주만에 성숙한 식물을 생산하기 위해 토양내로 직접 식재될 수 있으며, 약 8개월내에 성숙한 식물을 생산할 수 있다.

성숙 또는 미성숙 줄기를 성장시키기 위한 예시적인 공기 온도 범위는 약 15℃ 내지 약 35℃, 또는 약 2O℃ 내지 약 3O℃, 또는 약 24℃ 내지 약 28℃이다. 성숙 또는 미성숙 줄기는 또한 약 25℃에서 성장할 수 있다. 특정의 양태에서, 미성숙 및 성숙 줄기는 성장-증진용 조성물에 대한 노출 전 및 노출 후 탈-이온수 또는 광물계 토양 속에서 배양할 수 있다.

수거 후, 처리된 미성숙 또는 성숙 줄기는 이후에 당해 분야에 공지된 기술에 따라 식재될 수 있다. 기계화된 시스템 또는 손으로 식재하는 시스템 또는 이들 둘다가 다른 기술들 중에서 고려된다(참조: 도 7). 대안적으로, 특정의 양태에서, 처리된 미성숙 줄기를 수송을 위해서와 같이 저장(절단하거나 절단하지 않음)하고 후에 식재할 수 있다.

특정의 양태에서, 처리된 줄기는 밭 또는 용기내에서와 같이, 토양내로 직접 식재할 수 있다. 특정의 양태에서, 처리된 줄기는 식재를 용이하게 하기 위해 전체적으로, 또는 길이가 약 ½ 인치 내지 약 1½ 인치 내지 약 2½ 인치 내지 약 3 인치 내지 약 4 인치 이상인 조각을 포함하는 보다 작은 조각으로 일차적으로 절단할 수 있다. 전형적으로, 절단된 조각은 적어도 하나의 마디, 때때로 식재전 뿌리 및 순 둘다를 갖는 마디, 또는 때때로 식재 후 수일 내에 뿌리 및 순을 생산할 수 있는 마디를 포함한다. 특정의 양태에서, 전형적으로 줄기에 부착되는 토양 입자는 존재하지 않으므로, 처리된 줄기 또는 이의 분절은 추가의 어떠한 처리, 예를 들면, 멸균화 또는 세정없이 및 어떠한 식물위생 걱정없이 토양내로 직접 이식될 수 있다. 또는, 필요한 경우, 처리된 줄기는 수선 왁스-함유 살진균제의 수거-후(식재-전) 처리를 수행하여 주로 건조를 지연시키고 진균 성장을 억제시킬 수 있다. 식재 직전과 같은 특정의 양태에서, 처리된 줄기들 또는 마디들은 옥신/사이토키닌/해초 농축물/폴리에틸렌 글리콜(PEG) 함유 조성물과 같은 성장 조성물로 추가로 처리할 수 있다.

단지 설명의 방법으로 및 제한하지 않고, 처리된 줄기 또는 이의 단면은 토양 아래 약 1 내지 약 3인치의 깊이를 포함하는 토양 표면 아래 약 ¼ 인치 내지 약 6인치 범위의 깊이, 및 중심에 연속으로부터 약 8 인치까지의 범위의 중심을 갖는 열로 토양(예를 들면, 밭 또는 용기)내에 수평으로 위치할 수 있다. 특정의 양태에서, 열 공간은 중심에서 접촉 내지 약 8 인치일 수 있다. 다른 식재 방법은 당해 분야의 숙련가에게 명백할 것이다.

특정의 양태에서, 처리된 줄기들을 토양내로 식재하는 대신, 이들 줄기를 적어도 1개 또는 2개 또는 3개 이상의 마디를 함유하는 조각으로 수거하거나, 손질(trim)하거나 절단한 후, 증식 층 또는 다른 장치(예를 들면, 부유 층)내에 식재시키거나 성장시킬 수 있다. 다른 용도들 중에서, 이들 양태는 식물 스톡을 증가시키거나 증폭시키는데 사용될 수 있으며, 부분적으로 (a) 잔디 식물의 미성숙 줄기 또는 이의 분절을, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 옥신, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 사이토키닌, 및 약 1 ppm 내지 약 250,000 ppm의 폴리아스파르트산을 포함하는 조성물로 처리하는 단계; (b) 단계 (a)에서 처리된 줄기의 일부를 수거하여 종자 줄기를 생산하는 단계; (c) 단계 (b)의 줄기의 남아있는 일부를 미성숙 줄기로 성장시키는 단계; 및 (d) 임의로 단계 (a) 및 (b)를 적어도 1회 반복하는 단계를 포함하여, 종자 줄기를 생산하는 방법에 관한 것이다. 특정의 양태에서, 조성물은 적어도 하나의 해초 농축물 약 1 ppm 내지 약 500,000 ppm, 적어도 하나의 계면활성제 약 1 ppm 내지 약 250 ppm, 또는 이들 둘다를 추가로 포함할 수 있다.

단지 설명의 방법으로, 상기 단계 (a)의 미성숙 줄기들은, 비록 앞서 처리된 미성숙 줄기를 손질 또는 절단에 의해서와 같은 다른 방법들을 이용할 수 있다고 해도, 우선 임의 처리된 성숙한 줄기들을 부유 층 층에서 약 1 내지 8주 동안 본원에 기술된 바와 같이 성장시켜 수득할 수 있다. 상기 단계 (a)에서와 같이, 성장-증진용 조성물로 처리한 후, 상기 단계 (b)에서 처리된 미성숙 줄기의 일부를 적절한 시간(예를 들면, 처리 후 약 3 내지 21일째)에 각종의 예시적인 방법에 따라 수거할 수 있다.

이러한 방법의 하나의 예로서, 처리된 미성숙 줄기들은 미성숙 줄기의 상부 부위의 단순한 손질 및 보다 적은 1개 또는 2개 또는 3개 또는 4개의 마디와 같은 보다 작은 부위를 유지시키면서 수거할 수 있다. 상부 부위(즉, "종자 줄기")는 이후에 필요한 경우, 토양(절단되거나 절단되지 않은)내로 식재될 수 있다. 특정의 양태에서, 종자 줄기들은 슈도리좀(pseudorhizome)의 형성 전에 수거하거나 손질할 수 있다. "슈도리좀"은 성숙한 뿌리줄기의 표피 또는 경 보호성 규모로 아직 발달하지 않은 연질의 새로이 덮혀진 뿌리줄기를 나타낸다. 일반적으로, 슈도리좀은, 직경이 약 약 2 내지 6 센티미터이다(참조: 도 10).

손질된 줄기의 하부 부위는 이후에 본원에 기술된 바와 같이 미성숙 줄기(예: 길이가 약 10 내지 25 인치이고 약 4 내지 10개의 마디를 가짐)로 재-성장될 수 있으므로 모 식물로 제공될 수 있다. 상기와 유사하게, 당해 단계는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8주를 포함하는, 약 6 내지 15일(이들 사이의 모든 정수들 포함), 약 1 내지 8주, 약 2 내지 6주, 약 3 내지 4주가 소요될 수 있다. 이후에, 이들 재-성장한 미성숙 줄기들을 성장-증진용 조성물(상기 단계 (d) 참조)로 처리하여 선택된 기간(예를 들면, 약 3 내지 21일) 동안 성장하도록 한 후, 상기 단계 (b)에 따라 미성숙 줄기의 상부 단면을 손질하거나 제거함으로써 다시 수거하여 종자 줄기의 또다른 뱃치(batch)를 수득할 수 있다. 수거된 종자 줄기는 이후에 식재되어 모 식물의 하부 부위는 미성숙 줄기로 재-성장한다. 상기와 같이, 당해 방법의 단계들은 바람직하게는 반복하여[상기 단계 (d) 참조], 종자 줄기들의 스톡을 주로 유지하고 식물 스톡을 신속하게 증가시키거나 증폭시킬 수 있다. 특정의 양태에서, 종자 스톡은 4 내지 10주 간격으로 수거할 수 있다. 어떠한 시점에서도, 특정의 처리된 미성숙 줄기는 토양내로 직접 식재되거나(절단되거나 절단되지 않고), 나중 사용 또는 수송 또는 둘다를 위해 저장될 수 있다.

다른 예로서, 처리된 미성숙 줄기는 단계 (a)로부터의 줄기를 미세-분절 또는 미세 마디(예를 들면, 길이가 약 ½ 내지 약 1 ½ 인치 내지 약 2 인치 또는 그 이상이고 적어도 1개 또는 2개의 마디를 갖는)로 절단하여 수거할 수 있다. 이후에, 이들 미세-마디를 증식 층 또는 다른 장치내에 두고, 임의로 식물 호르몬(예: 본 발명의 성장-증진용 조성물)로 처리하거나 이와 함께 배양하고, 본원에 기술된 바와 같이, 미성숙 줄기들[상기 단계 (c) 참조]로 성장시킬 수 있다(예: 길이가 약 10 내지 25 인치이고 약 4 내지 12개의 마디를 갖는 줄기). 당해 단계는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8주를 포함하는, 약 6 내지 15일(이들 사이의 모든 정수들을 포함), 약 1 내지 8주, 약 2 내지 6주, 약 3 내지 4주가 소요될 수 있다. 준비된 경우, 이들 미성숙 줄기들은 이후 성장-증진용 조성물[단계 (d) 참조]을 흘러넘칠때까지 분무하여 처리함으로써 선택된 기간(예: 약 3 내지 21일) 동안 성장시킨 후 단계 (b)에 따라 다시 수거할 수 있다. 당해 공정은 바람직한 경우 반복할 수 있다.

본원에 제공된 방법을 사용하면, 처리된 미성숙 줄기들은 전형적으로, 이전과는 달리, 토양내로 식재 후 약 3일 째에 뿌리 및 순 형성이 일어난다. 또한, 식재된 줄기는 전형적으로 약 12 내지 16개월 내에 완전히 성숙한 크기로 성장하며, 이 시점에서 이들은 수거할 준비가 된다. 이러한 성숙도로의 신속한 성장은 잔디 식물(예: 멸균 잔디 식물)의 전형적인 증식 주기를 약 12주까지 감소시킨다. 또한, 본원에서 주목한 바와 같이, 이들 식물은 최소 비용으로 튼튼한 성장을 달성하며, 모 식물의 완전한 유전적 완성을 소말클로날 변이(somalclonal variation) 없이 유지시켜, 이들을 클론 균일성을 요구하는 적용들에 이상적이 되도록 한다.

위에서 기술된 각종 양태들은 추가의 양태들을 제공하기 위해 합해질 수 있다. 본 명세서에서 언급되고/되거나 출원 서지사항에 나열된 미국 특허, 미국 특허 공보, 미국 특허원, 외국 특허, 외국 특허원 및 비-특허 공보 모두는 이들의 전문이 참조로 본원에 혼입된다. 양태들의 국면은 필요할 경우 각종 특허, 특허원 및 공보의 개념들을 사용하기 위해 변형되어 여전히 추가의 양태들을 제공할 수 있다.

이들 및 다른 변화들은 상기한 상세한 설명의 측면에서 양태들에 대해 이루어질 수 있다. 일반적으로, 다음 특허청구의 범위에서, 사용된 용어들은 명세서 및 특허청구범위에 기재된 구체적인 양태들로 특허청구범위를 제한하는 것으로 고려되어서는 안되지만, 이러한 특허청구범위가 부여한 등가물의 전체 범위와 함께 모든 가능한 양태들을 포함하는 것으로 고려되어야 한다. 따라서, 본원의 특허청구범위는 기재내용에 의해 제한되지 않는다.

Claims

(a) 잔디 식물의 줄기 또는 이의 분절(segment)을, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 옥신, 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 사이토키닌, 및 약 1 ppm 내지 약 250,000 ppm의 폴리아스파르트산을 포함하는 조성물로 처리하는 단계;
(b) 단계 (a)에서 처리한 줄기를 수거하는 단계; 및
(c) 단계 (b)에서 수거된 줄기를 식재(planting)하는 단계를 포함하는, 잔디 식물의 증식 방법.
제1항에 있어서, 단계 (a)가 동일계내(in situ)에서 수행되는 방법.
제1항에 있어서, 단계 (a)에서, 잔디 식물의 줄기가 미성숙 줄기 또는 이의 분절인 방법.
제2항에 있어서, 상기 미성숙 줄기가, 높이가 약 10 내지 25 인치이고, 약 4 내지 10개의 마디를 가지는 방법.
제2항에 있어서, 상기 미성숙 줄기가 약 3 내지 약 6 주령인 방법.
제1항에 있어서, 단계 (a)에서, 잔디 식물의 줄기가 성숙한 줄기의 분절인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가, 단계 (a)를 수행한 후 약 3 내지 20일 째에 수행되는 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가, 단계 (a)를 수행한 후 약 14일 째에 수행되는 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 잔디 식물이 멸균 잔디 식물인 방법.
제9항에 있어서, 상기 멸균 잔디 식물이 아룬도 도낙스(Arundo donax) 식물, 또는 이의 재배품종(cultivar)인 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 잔디 식물이 벼과 식물에 속하는 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 잔디 식물이 아룬도 기간티움(Arundo gigantium), 게라니움 사기타툼(Geranium sagitatum), 미스칸투스 x 기간테우스(Miscanthus x giganteus), 사카룸 오피시아나룸(Saccharum officianarum) 또는 다른 사카룸 아종(Saccharum spp .), 페니세툼 푸르페레움(Pennisetum purpereum) 식물, 또는 이의 재배품종인 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 1 ppm 내지 약 500,000 ppm의 해초 농축물을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm의 해초 농축물을 추가로 포함하는 방법.
제11항 또는 제14항에 있어서, 상기 해초 농축물이 아스코필룸 노도숨으로부터의 추출물인 방법.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 1 ppm 내지 약 250 ppm의 계면활성제를 추가로 포함하는 방법.
제16항에 있어서, 상기 계면활성제가 트윈(Tween) 20인 방법.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 인돌 부티르산(IBA), 인돌-3-아세트산(IAA), 나프탈렌 아세트산(NAA), 4-클로르인돌-3-아세트산(4-CI-IAA), 2-페닐아세트산(PAA), 2,4-디클로로페녹시아세트산, 2-메톡시-3,6-디클로로벤조산, 4-아미노-3,5,6-트리클로로피콜린산 또는 이의 혼합물인 방법.
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 벤질아미노푸린(BA), 키네틴, 제아틴(Z), 디하이드로제아틴(DHZ) 및 이소펜테닐아데노신(IPA), 오르토-토폴린(oT), 메타-토폴린(mT), 오르토-메톡시토폴린(MeoT), 메타-메톡시토폴린(MemT), 벤즐아데닌(BA), 또는 이의 혼합물인 방법.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 코폴리-[(3-카복시프로피온아미드)(2-(카복시메틸)아세트아미드)]인 방법.
제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm인 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm인 방법.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 약 500 ppm 내지 약 5000 ppm인 방법.
1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 옥신, 1 ppm 내지 약 10,000 ppm의 사이토키닌, 및 1 ppm 내지 약 250,000 ppm의 폴리아스파르트산을 포함하는, 잔디 식물을 동일계내에서 처리하기 위한 조성물.
제24항에 있어서, 1 ppm 내지 약 500,000 ppm의 해초 농축물을 추가로 포함하는 조성물.
제24항에 있어서, 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm의 해초 농축물을 추가로 포함하는 조성물.
제25항 또는 제26항에 있어서, 상기 해초 농축물이 아스코필룸 노도숨으로부터의 추출물인 조성물.
제24항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 1 ppm 내지 약 250 ppm의 계면활성제를 추가로 포함하는 조성물.
제28항에 있어서, 상기 계면활성제가 트윈 20인 조성물.
제24항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 인돌 부티르산 (IBA), 인돌-3-아세트산 (IAA), 나프탈렌 아세트산 (NAA), 4-클로르인돌-3-아세트산 (4-CI-IAA), 2-페닐아세트산 (PAA), 2,4-디클로로페녹시아세트산, 2-메톡시-3,6-디클로로벤조산, 4-아미노-3,5,6-트리클로로피콜린산, 또는 이의 혼합물인 조성물.
제24항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 벤질아미노푸린 (BA), 키네틴, 제아틴 (Z), 디하이드로제아틴 (DHZ) 및 이소펜테닐아데노신 (IPA), 오르토-토폴린 (oT), 메타-토폴린 (mT), 오르토-메톡시토폴린 (MeoT), 메타-메톡시토폴린 (MemT), 벤즐아데닌 (BA), 또는 이의 혼합물인 조성물.
제24항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 코폴리-[(3-카복시프로피온아미드)(2-(카복시메틸)아세트아미드)]인 조성물.
제24항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 100 ppm 내지 약 300 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 300 ppm 내지 약 700 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 700 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 200 ppm 내지 약 400 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 400 ppm 내지 약 600 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 600 ppm 내지 약 800 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 800 ppm 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 약 750 ppm 내지 약 1700 ppm인 조성물.
제24항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 100 ppm 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 100 ppm 내지 약 300 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 300 ppm 내지 약 700 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 700 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 200 ppm 내지 약 400 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 400 ppm 내지 약 600 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 600 ppm 내지 약 800 ppm인 조성물.
제24항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 약 800 ppm 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 IBA인 조성물.
제24항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 IAA인 조성물.
제24항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 NAA인 조성물.
제24항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 옥신이 IAA 및 NAA의 혼합물인 조성물.
제24항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 제아틴인 조성물.
제24항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이토키닌이 BA인 조성물.
제24항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 약 500 ppm 내지 약 5000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리아스파르트산이 약 500 ppm 내지 약 1000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 약 1000 ppm 내지 약 2000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 약 2000 ppm 내지 약 3000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 약 3000 ppm 내지 약 4000 ppm인 조성물.
제24항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리아스파르트산이 약 4000 ppm 내지 약 5000 ppm인 조성물.
(a) 잔디 식물의 미성숙 줄기 또는 이의 분절을 제22항 내지 제59항 중 어느 한 항에 따른 조성물로 처리하는 단계;
(b) 단계 (a)에서 처리된 줄기의 부위를 수거하여 종자 줄기를 생산하는 단계;
(c) 단계 (b)의 줄기의 나머지 부위를 미성숙 줄기로 성장시키는 단계; 및
(d) 단계 (a) 및 (b)를 적어도 1회 반복함으로써 종자 줄기를 생산하는 단계를 포함하는, 종자 줄기의 생산 방법.
제62항에 있어서, 단계 (a)가 동일계내에서 수행되는 방법.
제62항 또는 제63항에 있어서, 상기 미성숙 줄기가, 높이가 약 10 내지 25 인치이고, 약 4 내지 10개의 마디를 갖는 방법.
제63항 또는 제63항에 있어서, 상기 미성숙 줄기가 약 3 내지 약 6주령인 방법.
제62항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가, 단계 (a)가 수행된 후 3 내지 20일 째에 수행되는 방법.
제62항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가, 단계 (a)가 수행된 후 약 14일 째에 수행되는 방법.
제62항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가 슈도리좀(pseudorhizome) 형성 전에 수행되는 방법.
제62항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (d)가, 단계 (c)가 수행된 후 약 1 내지 8 주째에 개시되는 방법.
제62항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (d)가, 단계 (c)가 수행된 후 약 3 내지 6주 째에 개시되는 방법.
제62항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 식물이 멸균 잔디 식물인 방법.
제71항에 있어서, 상기 멸균 잔디 식물이 아룬도 도낙스 식물인 방법.
제62항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 잔디 식물이 벼과 식물에 속하는 방법.
제62항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 잔디 식물이 아룬도 기간티움, 게라니움 사기타툼, 미스칸투스 x 기간테우스, 사카룸 오피시아나룸 또는 다른 사카룸 아종, 펜니세툼 푸르페레움 식물 또는 이의 재배품종인 방법.
제24항 내지 제61항 중 어느 한 항에 따른 조성물로 동일계내에서 처리된 잔디 식물의 줄기 또는 이의 분절.
적어도 하나의 뿌리 및 적어도 하나의 순(shoot)을 갖는 적어도 하나의 마디를 포함하는 잔디 식물의 미성숙 줄기 또는 이의 분절로써, 여기서 상기 줄기는 직경이 약 ⅛ 인치 내지 약 ¼ 인치이며, 여기서 상기 적어도 하나의 마디에 대한 뿌리 대 순 질량 비는 약 1/1.5 내지 약 1.5/1인, 잔디 식물의 미성숙 줄기 또는 이의 분절.
제76항에 있어서, 상기 적어도 하나의 마디에 대한 뿌리 대 순 질량비가 약 1/1인 줄기 또는 이의 분절.
제75항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 식물이 멸균 잔디 식물인 줄기 또는 이의 분절.