KR20120049624A - Method for selecting pigs with excellent meat color trait - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A method for selecting pigs with excellent meat color is provided to obtain information of meat color without killing pigs. CONSTITUTION: A method for selecting pigs with excellent meat color comprises: a step of isolating nucleic acid molecules from pigs; a step of detecting 61th nucleotide of a polynucleotide of sequence numbers 1-6 from the nucleic acid molecules and complementary polynucleotide thereof; and a step of selecting pigs with excellent meat color. A DNA chip contains a polynucleotide with 10-120 serial bases having the 61th nucleotide.

Description

육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법{Method for selecting pigs with excellent meat color trait}Method for selecting pigs with excellent meat color trait}

본 발명은 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하고 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 돼지에서 핵산분자를 분리하여 이로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하거나 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a method for providing information on the color of a pig and selecting a pig having a good color. More specifically, a polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 is isolated from a nucleic acid molecule in a pig. And identifying a base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides complementary thereto. will be.

모든 생물의 게놈은 진화의 과정에서 자손의 서열에 변이체를 생기게 하는 자발적 돌연변이를 겪는다(Gusella, Ann. Rev. Biochem. 55, 831-854, 1986). 변이체는 자손 형태에 비하여 진화적으로 이익 또는 불이익을 주거나 중성적일 수 있다.The genomes of all organisms undergo spontaneous mutations that result in variants in the sequence of progeny during evolution (Gusella, Ann. Rev. Biochem. 55, 831-854, 1986). Variants may be evolutionarily beneficial or disadvantageous or neutral compared to progeny forms.

어떤 경우는 변이체가 치사적 불이익을 주어 자손에게 전달되지 않는 경우도 있다. 다른 경우에는, 종에게 진화학적인 이익을 주고, 결국에는 종의 대부분에 DNA가 삽입되어 효과적으로 선조 형태가 된다. 많은 경우 이 선조 형태 및 변이체는 살아남아 종집단 중에 공존하게 된다. 서열의 복수 형태의 공존에 의하여, 다형(polymorphism)이 발생한다.In some cases, variants may be fatally penalized and not passed on to their offspring. In other cases, it gives evolutionary benefit to the species, and eventually DNA is inserted into most of the species, effectively forming a ancestral form. In many cases, these ancestral forms and variants survive and coexist among species. By coexistence of plural forms of sequences, polymorphism occurs.

이러한 다형에는 RFLP(restriction fragment length polymorphism: 제한 단편 길이 다형), STR(short tandem repeats), SNP(single nucleotide polymorphism) 등이 알려져 있다. 이중 SNP(단일염기 다형성)는 동일한 종의 개체 사이의 단일뉴클레오티드 변이의 형태를 취한다. SNP는 코딩 영역 서열에 발생하는 경우, 다형 형태 중 어느 하나에 의하여 결함 있거나 변이된 단백질이 발현될 수도 있다. 다른 경우에는 비코딩 영역 서열에 SNP가 발생할 수 있다. 이들 중 일부는 결함 있거나 변이된 단백질의 발현을 초래할 수 있다(예를 들면, 결함 있는 스플라이싱의 결과로서). 어떤 SNP는 표현형에 아무런 영향을 미치지 않을 수도 있다.Such polymorphisms include restriction fragment length polymorphism (RFLP), short tandem repeats (STR), and single nucleotide polymorphism (SNP). Dual SNPs (monobase polymorphisms) take the form of single nucleotide variations between individuals of the same species. When SNPs occur in the coding region sequence, a defective or mutated protein may be expressed by any of the polymorphic forms. In other cases, SNPs may occur in the non-coding region sequence. Some of these may result in the expression of defective or mutated proteins (eg, as a result of defective splicing). Some SNPs may have no effect on the phenotype.

이들 SNP가 표현형에 영향을 미치는 경우, 상기 단일 염기 다형을 포함하는 폴리뉴클레오티드는 표현형에 관한 정보를 제공하거나 우수한 표현형을 선별하는 데에 프라이머 또는 프로브로서 사용될 수 있다. 현재 여러 연구 기관에서 단일염기 분석 및 그 기능 분석에 관한 연구를 수행하고 있다.
If these SNPs affect the phenotype, the polynucleotides comprising the single base polymorph can be used as primers or probes to provide information about the phenotype or to select good phenotypes. Currently, several research institutes are conducting research on single base analysis and its functional analysis.

식육의 품질은 최종적으로 소비자들에 의해 판정되며, 소비자들의 생활수준 향상에 따른 육류 소비량의 급증과 함께 최근에는 소비자들의 기호 또한 다양해지고 있다. 따라서 돼지 개량의 목표도 과거 육량 위주의 개량에서 고품질의 돈육 생산을 위한 육질개량으로 변화하고 있으며, 소비자들의 다양한 요구를 충족시킬 수 있는 육질의 개량이 현대 양돈산업에 있어서 중요한 경쟁력의 한 요인이 되고 있다. The quality of meat is finally determined by consumers, and in recent years, consumers 'tastes have also diversified with the rapid increase in meat consumption due to the improvement of consumers' living standards. Therefore, the goal of pig improvement is changing from meat-based improvement to meat quality for producing high quality pork, and the improvement of meat quality to meet the various needs of consumers is an important factor in the modern pig industry. have.

육질에 영향을 미치는 요인들에는 연도, 보수성, 육색, 조직감, 사후pH의 변화, 전단력 등이 있으며, 이러한 대부분의 육질형질은 그 특성상 도축해야만 형질의 측정이 가능하기 때문에 표현형 성적을 얻기가 쉽지 않으며 경제적으로 많은 비용이 소요된다. 특히 우수한 형질의 종돈을 선발하기 위하여는 그 용도상 가축이 건강하게 살아있는 상태를 유지하며 형질에 관한 정보를 입수하여야 하므로 가축에 해를 입히지 아니하면서 가축의 형질에 관한 정보를 획득하는 수단이 필요하다.Factors affecting meat quality include year, conservatism, meat color, texture, post-pH change, and shear force, and most of these meat traits are not easy to obtain phenotypic results because traits can only be measured by slaughter. Economically expensive. Particularly, in order to select good breeding traits, it is necessary to obtain information on the traits of the livestock without harming the livestock, since the livestock must be kept healthy and obtain information on the traits. .

이러한 수단의 하나로 형질에 관한 유전자 발굴 및 SNP와 형질과의 관련성에 관한 연구가 활발히 진행되고 있으며, 현재까지 몇몇 유전자 또는 표지인자가 양돈산업에 활용되고 있으나 그 활용 정도가 미비하다.
As one of these means, the discovery of genes related to traits and researches on the relationship between SNPs and traits are being actively conducted. Until now, some genes or markers have been used in the pig industry, but their utilization is insufficient.

따라서 가축에 해를 입히지 아니하면서 가축의 형질에 관한 정보를 획득하는 수단으로 가축에 대한 다양한 형질에 대하여 그 형질과 관련이 깊은 SNP의 발굴이 필요하다.
Therefore, as a means of obtaining information on the traits of livestock without harming the livestock, it is necessary to discover SNPs that are closely related to the traits for various traits of the livestock.

본 발명자들은 우수 형질의 돼지를 종돈으로 선발하기 위하여 돼지의 여러 형질에 대한 정보를 얻는 방법에 관하여 연구하던 중 특정 SNP가 돼지의 육색과 관련이 있음을 밝혀내어 본 발명을 완성하였다.
The present inventors completed the present invention by finding out that a specific SNP is related to the flesh color of pigs while studying how to obtain information about various traits of pigs in order to select pigs having excellent traits as pigs.

따라서 본 발명의 목적은 Therefore, the object of the present invention

(a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및 (a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and

(b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하는 방법을 제공하는 것이다.
(b) identifying the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides thereof from the isolated swine nucleic acid molecules; It is to provide a way to provide information about the color of the pig.

본 발명의 다른 목적은 Another object of the present invention

(a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및(a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and

(b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법을 제공하는 것이다.
(b) identifying the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides thereof from the isolated swine nucleic acid molecules; It is to provide a method for screening pigs having excellent meat color.

본 발명의 또 다른 목적은 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드에서 각 61번째 뉴클레오티드를 포함하며 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 칩(chip)을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is a polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and a polynucleotide consisting of 10 to 120 consecutive bases, each comprising the 61st nucleotide in at least one polynucleotide selected from the group consisting of It is to provide a gene chip (chip) comprising a nucleotide.

상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 The present invention to achieve the above object

(a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및 (a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and

(b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
(b) identifying the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides thereof from the isolated swine nucleic acid molecules; It provides a method of providing information about the color of the pig.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 In order to achieve the other object of the present invention,

(a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및(a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and

(b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법을 제공한다.
(b) identifying the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides thereof from the isolated swine nucleic acid molecules; Provided is a method for screening pigs having excellent meat color.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드에서 각 61번째 뉴클레오티드를 포함하며 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 칩(chip)을 제공한다.
In order to achieve another object of the present invention, the present invention comprises 10 to 120 nucleotides each of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and polynucleotides complementary thereto; Provided is a genetic chip comprising a polynucleotide consisting of consecutive bases.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 (a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및 (b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하는 방법 및 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법을 제공한다.
The present invention provides a composition comprising (a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and (b) at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOS: 1 to 6 and complementary polynucleotides from the isolated pig nucleic acid molecules. It provides a method for providing information on the meat color of a pig comprising the step of identifying the base type of the 61st nucleotide of the nucleotide and a method for selecting a pig of a good color trait.

본 발명의 방법은 돼지(Sus scrofa)에 적용되며, 식용으로 사용되는 모든 품종의 돼지를 포함한다. 예를 들어 본 발명의 돼지는 한국재래돼지, 랜드레이스, 요크셔, 버크셔, 햄프셔 및 이들의 교잡 후대 일 수 있다. 바람직하게는 한국재래돼지와 랜드레이스 품종을 교잡하여 구축한 참조축군의 F2일 수 있다.
The method of the present invention applies to swine (Sus scrofa) and includes all breeds of pigs used for food. For example, the pig of the present invention may be a Korean native pig, Landrace, Yorkshire, Berkshire, Hampshire and their hybrids. Preferably, it may be F2 of the reference herb constructed by hybridizing Korean native pigs and land race breeds.

(a) 단계에서는 돼지로부터 돼지의 핵산분자를 분리한다.In step (a), the nucleic acid molecules of the pig are separated from the pig.

본 발명의 핵산분자는 genomic DNA, cDNA 및 RNA 분자를 모두 포함하며, 핵산분자를 구성하는 뉴클레오티드는 자연계에 존재하는 일반적인 뉴클레오티드 및 당 또는 염기부위가 변형된 유사체(analogue)도 포함한다.
Nucleic acid molecules of the present invention include all genomic DNA, cDNA and RNA molecules, the nucleotides constituting the nucleic acid molecule also includes common nucleotides in nature and analogues in which sugar or base sites are modified.

본 발명의 핵산분자는 돼지의 다양한 조직으로부터 얻을 수 있다. 핵산분자를 얻을 수 있는 조직은 이에 한정되지 아니하나 예를 들어 근육, 표피, 혈액, 뼈 또는 장기조직으로부터 얻을 수 있으며, 바람직하게는 근육 또는 혈액으로부터 얻을 수 있다. 본 발명의 핵산분자를 돼지로부터 분리하는 것은 당업계에 공지된 방법을 통하여 분리할 수 있다. Nucleic acid molecules of the present invention can be obtained from various tissues of pigs. The tissue from which the nucleic acid molecule can be obtained may be obtained from, for example, muscle, epidermis, blood, bone, or organ tissue, and preferably from muscle or blood. Separation of the nucleic acid molecule of the present invention from pigs can be separated by methods known in the art.

예를 들어, 조직 또는 세포로부터 DNA를 직접적으로 정제하거나 PCR과 같은 증폭 방법을 사용하여 특정한 영역을 특이적으로 증폭하고 이를 분리함으로써 이루어질 수 있다.
For example, it can be done by directly purifying DNA from tissue or cells or by specifically amplifying and isolating a specific region using an amplification method such as PCR.

(b) 단계에서는 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인한다.
In step (b), the base type of the 61st nucleotide of one or more polynucleotides selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides is identified from the isolated swine nucleic acid molecule.

서열번호 1 내지 6 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기 타입은 돼지의 육색 형질과 연관성이 높다.The base types of the 61 nucleotides of SEQ ID NOs: 1-6 and complementary polynucleotides are highly associated with the meat color trait of swine.

본 발명자들은 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드가 돼지의 육색 형질과 연관성이 높다는 것은 본 발명자들이 최초로 밝혀낸 것이다.The inventors have found for the first time that the 61st nucleotide of the polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 is highly related to the pig's color trait.

육색은 고기의 빛깔을 말하며 일반적으로 소고기는 적색도를 중요시 하며, 돼지고기는 명도가 주된 판단 기준이 된다. 본 발명의 육색은 CIE(Commission Internationale d'clairage) Lab에서 명도를 나타내는 CIE-L 값으로 표시한다. CIE-L의 경우 +100(백색)?0(회색)?-100(흑색)의 범위를 가진다. 일반적으로 돼지고기의 CIE-L은 보통 47?55 범위에 있는 것이 바람직하다. 일반적으로 돼지를 반도체 상태에서 등심부분을 채취하여 측정한다.
Meat color refers to the color of meat. In general, beef is important for redness, and pork is the main criterion. The color of the present invention is represented by CIE-L value indicating brightness in the Commission Internationale d'clairage (CIE) Lab. CIE-L ranges from +100 (white) to 0 (grey) to -100 (black). In general, pork CIE-L is usually in the range of 47-55. In general, pigs are measured by taking a fillet in a semiconductor state.

본 발명의 방법에 의하는 경우 이미 보유하고 있는 집단의 육색을 고려하여 집단의 육색을 바람직한 방향으로 조절할 수 있는 종돈의 선발이 가능하다.
According to the method of the present invention, it is possible to select sows that can adjust the color of the group in the desired direction in consideration of the color of the group already held.

본 발명의 일실시예에서는 돼지 551두의 DNA를 추출하여 본 발명의 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 조사하고 이를 해당 돼지의 육색 정보와 비교하여 그 연관성을 측정하고 염기 타입에 따른 육색의 변화를 수치화 하였다.In one embodiment of the present invention, the DNA of 551 pigs was extracted, and the base type of the 61st nucleotide of the polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 of the present invention was examined and compared with the meat color information of the corresponding pig. The change in color was determined according to the base type.

그 결과 하기 [표 1]에서 보는 바와 같이 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입은 육색과 관련이 있으며 그 타입에 따라 육색이 우수한 정도를 예측할 수 있음을 확인하였다.
As a result, as shown in the following [Table 1], the base type of the 61st nucleotide of the polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 was related to meat color, and it was confirmed that the degree of meat color was excellent according to the type.

서열번호 1 내지 6의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 육색 및 육질과의 관련성에 대한 정보Information on the color and association of the 61st nucleotide of the polynucleotide of SEQ ID NOS: 1-6 with the quality 서열번호SEQ ID NO: 61번째 뉴클레오티드의 가능한 염기타입Possible basetype of the 61st nucleotide 육색 및 육질과의 관련성Relationship between meat color and meat quality 영향력 수치Influence Figure 1One AA ++ 0.790.79 GG -- 22 CC ++ 1.021.02 TT -- 33 TT ++ 1.011.01 CC -- 44 TT ++ 0.790.79 CC -- 55 GG ++ 1.041.04 AA -- 66 TT ++ 2.032.03 CC --

상기 표에서 +는 해당 염기타입을 가지는 경우 육색이 -로 표시된 염기타입을 가지는 경우에 비하여 해당 영향력 수치만큼 우수해지는 것을 뜻한다.In the above table, + means that the color of the base is superior to the influence value compared to the case of having the base type indicated by-.

예를 들어 서열번호 1의 경우 AA, AG, GG형에 대하여 유전자의 상가적 효과(additive effect)를 회귀분석하여 구한 것으로 상기 영향력 수치는 회귀방정식의 기울기에 해당한다.
For example, the sequence number 1 was obtained by regression analysis of the additive effects of genes for AA, AG, and GG types. The influence value corresponds to the slope of the regression equation.

따라서 본 발명의 방법에 따라 돼지의 핵산분자를 분리하여 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하면 해당 돼지의 육색 형질이 (평균 돼지)에 비하여 우수한지 여부를 알 수 있으며, 육색은 고기의 육질과 밀접한 관계가 있으므로 결과적으로 돼지의 육색 및 육질에 관한 정보를 알 수 있다.
Therefore, according to the method of the present invention, the nucleic acid molecule of the pig is separated from the isolated nucleic acid molecule of the pig, wherein the polynucleotides represented by SEQ ID NOS: 1 to 6 and the polynucleotides complementary thereto are selected from the 61st one or more polynucleotides Checking the base type of the nucleotides shows whether the pig's meat color is superior to that of the average pig, and meat color is closely related to the meat's meat, resulting in information about the meat's meat color and meat quality. have.

본 발명의 방법은 특히 돼지를 죽이지 않고 육색에 관한 정보를 알 수 있으며 우수한 육색 형질을 가지는 종돈을 선발 할 수 있다.
In particular, the method of the present invention can know information about meat color without killing pigs, and can select sows having excellent meat color traits.

(b) 단계에서 뉴클레오티드의 염기 타입을 확인하는 방법은 당업계에 공지된 방법에 의할 수 있다. 이에 제한되지는 아니하나 예를 들어 직접 DNA의 염기서열을 결정하거나(sequencing), TaqMan 어세이, 분자 비컨 어세이, 대립유전자-특이적 프라이머 연장(ASPE, allele-specific primer extension), 대립유전자-특이적 PCR(AS-PCR), APEX(arrayed primer extension), 상동성 프라이머 연장 어세이(homogeneous primer extension assays), 파이로시퀀싱(pyrosequencing), RFLP(restriction-fragment length polymorphism), SBE-Tag어세이(single base extension-tag assay), 인베이더 어세이, L-RCA(ligation-rolling circle amplification) 또는 DNA 마이크로어레이(microarray) 등의 핵산 어레이 방법에 의하여 확인될 수 있다.The method of identifying the base type of the nucleotide in step (b) may be by a method known in the art. Examples include, but are not limited to, direct sequencing of DNA, TaqMan assays, molecular beacon assays, allele-specific primer extensions (ASPEs), alleles- Specific PCR (AS-PCR), arrayed primer extension (APEX), homogeneous primer extension assays, pyrosequencing, restriction-fragment length polymorphism (RFLP), SBE-Tag assay (single base extension-tag assay), invader assay, ligation-rolling circle amplification (L-RCA) or DNA microarray (nucleotide microarray) method, such as can be confirmed.

이와 같은 뉴클레오티드의 염기 타입을 확인하는 것을 SNP 유전자 타이핑(Single nucleotide polymorphism genotyping)이라고 하며, 이러한 SNP 유전자 타이핑 방법들은 Chen et al., “Single nucleotide polymorphism genotyping: biochemistry, protocol, cost and throughput”, Pharmacogenomics J. 2003;3(2):77-96; Kwok et al., “Detection of single nucleotide polymorphisms”, Curr Issues Mol. Biol. 2003 April;5(2):43-60; Shi, “Technologies for individual genotyping: detection of genetic polymorphisms in drug targets and endometriosis genes”, Am J Pharmacogenomics. 2002;2(3):197-205; and Kwok, “Methods for genotyping single nucleotide polymorphisms" Annu Rev Genomes Hum Genet 2001;2:235-58에 설명되어 있다. 다량-처리 SNP 유전자 타이핑에 대한 예시는 Marnellos, “High-throughput SNP analysis for gene association studies”, Curr Opin Drug Discov Devel. 2003 May;6(3):317-21에서 설명하고 있다.The identification of such nucleotide base types is called single nucleotide polymorphism genotyping, and these SNP gene typing methods are described in Chen et al., “Single nucleotide polymorphism genotyping: biochemistry, protocol, cost and throughput”, Pharmacogenomics J. 2003; 3 (2): 77-96; Kwok et al., “Detection of single nucleotide polymorphisms”, Curr Issues Mol. Biol. 2003 April; 5 (2): 43-60; Shi, “Technologies for individual genotyping: detection of genetic polymorphisms in drug targets and endometriosis genes”, Am J Pharmacogenomics. 2002; 2 (3): 197-205; and Kwok, “Methods for genotyping single nucleotide polymorphisms” Annu Rev Genomes Hum Genet 2001; 2: 235-58. Examples of high-throughput SNP gene typing are described in Marnellos, “High-throughput SNP analysis for gene association studies. ”, Curr Opin Drug Discov Devel. 2003 May; 6 (3): 317-21.

바람직하게는 본 발명의 뉴클레오티드의 염기 타입을 확인하는 방법은 DNA 마이크로어레이 일 수 있다.Preferably, the method for identifying the base type of the nucleotide of the present invention may be a DNA microarray.

상기 DNA 마이크로어레이 방법은 특정 뉴클레오티드의 염기 타입을 확인할 수 있도록 제작된 DNA 칩(DNA chip, 유전자 칩)에 시료인 핵산분자를 혼성화(hybridization)하여 혼성화 된 이중가닥의 형성을 검출하는 것이다.The DNA microarray method detects the formation of hybridized double strands by hybridizing a nucleic acid molecule as a sample to a DNA chip (DNA chip, gene chip) prepared to identify a base type of a specific nucleotide.

따라서 본 발명의 (b) 단계의 염기타입을 확인하는 단계는 (i) 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인할 수 있도록 제작된 DNA 칩(DNA chip)에 상기 (a) 단계에서 분리된 핵산분자를 혼성화(hybridization)하는 단계 및 (ii) 혼성화된 이중 가닥의 형성을 검출하는 단계를 포함할 수 있다.
Therefore, the step of identifying the base type of step (b) of the present invention comprises the steps of: (i) from one or more polynucleotides selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOS: 1 to 6 and complementary polynucleotides Hybridizing the nucleic acid molecules separated in step (a) to a DNA chip prepared to identify the base type of the 61st nucleotide, and (ii) detecting the formation of hybridized double strands. It may include.

DNA 칩이란 유리, 실리콘, 또는 나일론 등의 재질로 된 작은 고형의 기판 위에 프로브 역할을 할 수 있는 핵산들, 예컨대 그 서열이 알려진 DNA, DNA 단편, cDNA, 올리고뉴클레오티드 등의 핵산들을 적게는 수백 개부터 많게는 수십만 개까지 일정한 간격으로 배열하여 부착시킴으로써 시료 DNA에 포함된 뉴클레오티드의 염기타입을 탐지할 수 있는 생물학적 마이크로칩을 말한다. 시료에 함유되어 있는 핵산과 표면에 고정된 프로브는 염기 서열의 상보성 정도에 따라 각기 다른 정도로 결합하여 혼성화(hybridization) 상태를 이루게 되며, 이를 검출하고 해석함으로써 시료가 함유하는 핵산에 관한 정보를 동시에 얻을 수 있다.A DNA chip is a small number of nucleic acids, such as DNA, DNA fragments, cDNAs, oligonucleotides, etc., that can serve as probes on small solid substrates made of glass, silicon, or nylon. It refers to a biological microchip that can detect the base type of the nucleotides contained in the sample DNA by attaching and arranged at regular intervals up to hundreds of thousands. The nucleic acids contained in the sample and the probes immobilized on the surface are combined to different degrees depending on the degree of complementarity of the nucleotide sequence to form a hybridization state. By simultaneously detecting and interpreting the information, the information on the nucleic acid contained in the sample can be obtained. Can be.

DNA 마이크로어레이를 통한 분석에서, 본 발명의 DNA 칩은 확인 대상 뉴클레오티드를 포함하는 서열에 상보적인 프로브를 하나 또는 둘 이상 포함한다. 상기 확인 대상 뉴클레오티드는 서열번호 1 내지 6으로 표기되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드를 말한다.In analysis via DNA microarrays, the DNA chip of the invention comprises one or more probes complementary to a sequence comprising the nucleotide to be identified. The nucleotide to be identified refers to the polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and the 61st nucleotide of the polynucleotide complementary thereto.

프로브와 확인 대상 뉴클레오티드를 포함하는 서열의 혼성화 시그널을 검출하여 직접적으로 SNP 변이체 여부를 결정한다. 상기 프로브는 특정 뉴클레오티드 서열에 혼성화될 수 있는 디옥시리보뉴클레오티드 및 리보뉴클레오티드를 포함하는 자연 또는 변형되는 모노머 또는 결합을 갖는 선형의 올리고머를 의미한다. 프로브는 최적의 혼성화를 위하여 단일가닥인 것이 바람작하다. 프로브는 바람직하게는 디옥시 리보뉴클레오티드이다. 본 발명에 이용되는 프로브로서, 확인 대상 뉴클레오티드를 포함하는 서열에 완전하게 (perfectly) 상보적인 서열이 이용될 수 있으나, 특이적 혼성화를 방해하지 않는 범위 내에서 실질적으로 (substantially) 상보적인 서열이 이용될 수도 있다. The hybridization signal of the sequence including the probe and the nucleotide to be identified is detected to directly determine whether the SNP variant is present. By probe is meant a linear oligomer having naturally occurring or modified monomers or bonds, including deoxyribonucleotides and ribonucleotides that can hybridize to a particular nucleotide sequence. The probe is preferably single stranded for optimal hybridization. The probe is preferably deoxy ribonucleotide. As the probe used in the present invention, a sequence that is perfectly complementary to a sequence including a nucleotide to be identified may be used, but a sequence that is substantially complementary to a range that does not prevent specific hybridization is used. May be

바람직하게는, 본 발명에 이용되는 프로브는 서열목록 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드에 혼성화 될 수 있는 서열을 포함할 수 있다. 보다 바람직하게는 서열목록 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드에서 61번째 뉴클레오티드를 포함하며, 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드일 수 있다.Preferably, the probe used in the present invention may include a polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and a sequence capable of hybridizing to the 61st nucleotide of the polynucleotide complementary thereto. More preferably, the polynucleotide represented by SEQ ID NO: 1 to 6 and the polynucleotide complementary to the 61 nucleotide, and may be a polynucleotide consisting of 10 to 120 consecutive bases.

혼성화(hybridization)이란 두 개 이상의 상보적인 염기 서열이 공유결합이 아닌 서열특이적 결합을 하여 하나의 하이브리드를 형성하는 것을 말한다.Hybridization refers to the formation of a hybrid by sequence-specific binding of two or more complementary base sequences rather than covalent bonds.

혼성화에 적합한 조건은 Joseph Sambrook, et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.(2001) 및 Haymes, B. D., et al., Nucleic Acid Hybridization, A Practical Approach , IRL Press, Washington, D.C. (1985)에 개시된 사항을 참조하여 결정할 수 있다.Conditions suitable for hybridization include Joseph Sambrook, et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (2001) and Haymes, BD, et al., Nucleic Acid Hybridization, A Practical Approach, IRL Press, Washington, DC Decisions may be made with reference to those disclosed in (1985).

상기 (ii) 단계의 혼성화된 이중 가닥의 형성을 검출은 DNA 마이크로어레이 방법에서 사용되는 공지의 검출방법이면 어떤 것이든 가능하며, 예를 들어 레이저 형광 유발법일 수 있다.
The formation of the hybridized double strand of step (ii) may be any known detection method used in the DNA microarray method, and may be, for example, laser fluorescence induction.

또한 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드에서 61번째 뉴클레오티드를 포함하며 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 DNA 칩(DNA chip)을 제공한다.
In addition, the polynucleotide represented by SEQ ID NO: 1 to 6 and polynucleotides complementary to it, comprising at least one polynucleotide selected from the group consisting of a polynucleotide consisting of 10 to 120 consecutive bases comprising the 61st nucleotide It provides a DNA chip (DNA chip).

본 발명의 DNA 칩 및 본 발명의 DNA 칩에 포함되는 폴리뉴클레오티드에 관한 것은 상기 기술한 바와 같다.The DNA chip of the present invention and the polynucleotide included in the DNA chip of the present invention are as described above.

본 발명의 DNA 칩은 돼지의 육질, 특히 육색과 연관성이 높은 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드에서 61번째 뉴클레오티드를 포함하며 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하므로 DNA 마이크로어레이 기법을 사용한 육질 및 육색이 우수한 돼지 선발에 사용할 수 있다.
The DNA chip of the present invention comprises a polynucleotide represented by SEQ ID Nos. 1 to 6 highly related to pork flesh, particularly meat color, and a polynucleotide comprising 61 to nucleotides in the polynucleotide complementary thereto, and composed of 10 to 120 consecutive bases. Since it includes one or more polynucleotides selected from the group consisting of can be used for the selection of pigs excellent in meat and meat color using the DNA microarray technique.

따라서 이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하고 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 돼지로부터 소량의 핵산분자만 획득하면 돼지의 육질에 관한 정보를 알 수 있고 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별할 수 있으며 특히 돼지를 죽이지 않고 육색에 관한 정보를 알 수 있으므로 우수한 육질 형질을 가지는 종돈을 선발 할 수 있다.
Therefore, as described above, the present invention provides a method for providing information on meat color of pigs and selecting pigs having excellent meat color. According to the method of the present invention, if only a small amount of nucleic acid molecules are obtained from a pig, it is possible to know the information about the meat quality of the pig and can select the pigs having excellent meat color, and in particular, the meat color information can be known without killing the pig. Sows with traits can be selected.

도 1은 돼지 1번 염색체 상의 육색과 연관성이 높은 SNP의 염색체상 위치 및 이들의 p-value를 나타낸 그래프이다.
도 2는은 돼지 16번 염색체 상의 육색과 연관성이 높은 SNP의 염색체상 위치 및 이들의 p-value를 나타낸 그래프이다.
도 3은 돼지 18번 염색체 상의 육색과 연관성이 높은 SNP의 염색체상 위치 및 이들의 p-value를 나타낸 그래프이다.
Figure 1 is a graph showing the chromosomal location and the p-value of SNPs highly associated with meat color on porcine chromosome 1.
Figure 2 is a graph showing the chromosomal location and their p-value of SNPs highly associated with meat color on porcine chromosome 16.
Figure 3 is a graph showing the chromosomal location and their p-value of SNPs highly associated with meat color on porcine chromosome 18.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
However, the following examples are merely to illustrate the invention, but the content of the present invention is not limited to the following examples.

<실시예 1> &Lt; Example 1 >

유전자형 분석Genotyping

육색 등 생산형질의 자료를 가지고 있는 돼지 551두의 혈액으로부터 Wizard Genomic DNA Purification Kit(Promega, Madison, WI, USA)를 이용하여 DNA를 추출하였다. 형질관련 유전자 발굴에는 참조축군(reference family)이 많이 활용되고 있다. 사용된 돼지는 한국재래돼지와 랜드레이스를 교잡하여 구축한 참조축군의 F2 개체이다. 측정은 돼지를 도축 후 반도체 상태에서 일반적으로 육질 분석에 사용되는 부위인 등심부분을 채취하여 사용하였다.DNA was extracted from the blood of 551 pigs containing meat color and production data using Wizard Genomic DNA Purification Kit (Promega, Madison, Wis., USA). Reference family is widely used to discover genes related to traits. The pigs used were F2 individuals of the reference herb, constructed by hybridizing Korean native pigs and land races. In the measurement, pigs were taken from a sirloin portion, which is generally used for meat analysis, in a semiconductor state after slaughter.

본 집단에서 조사된 육색은 가장 낮은 것이 34.65이며, 가장 높은 것이 67.07이다. 돼지고기는 CIE-L 값이 50에 근접할수록 육색이 우수함을 뜻한다.
The lowest surveyed meat color in this group was 34.65 and the highest was 67.07. Pork has a better color as the CIE-L value approaches 50.

상기 추출한 DNA를 대상으로 전체 62,163개의 SNP 정보로 구성되어 있는 iSelect Infinium Porcine ArrayChips(Illumina, San Diego, 미국)를 이용하여 SNP 유전자형 분석을 실시하였다.SNP genotyping was performed on the extracted DNA using iSelect Infinium Porcine ArrayChips (Illumina, San Diego, USA) consisting of 62,163 SNP information.

분석은 Illumina 사의 Sentrix BeadChip Array 12-sample HD DNA Analysis BC PorcineSNP60(Cat.No. WG-410-1001)을 사용하여 키트의 사용자 매뉴얼에 따라 수행하였다. chip Scan은 Illumina 사의 iScanTM System을 사용하여 수행하였다.
The analysis was performed using the Sentrix BeadChip Array 12-sample HD DNA Analysis BC Porcine SNP60 (Cat. No. WG-410-1001) from Illumina according to the kit's user manual. Chip Scan was performed using Illumina iScan TM System.

<실시예 2><Example 2>

육색 관련 SNP 발굴 - 통계 분석SNP discovery related to meat color-statistical analysis

얻어진 모든 SNP자료는 R/SNPassoc 패키지를 이용하여 검정하였다. 검정을 통하여 하디-바인베르그 평형(HWE)과 minor allele의 빈도(MAF)가 일정 조건(HWE: P<0.05, MAF: <10%)에 맞지 않는 결과는 유전체전장(whole genome) 연관성 분석에서 배제하였다. 육색 표현형과 SNP 마커 사이의 연관성은 single marker regression분석으로 검정하였다.All SNP data obtained were tested using the R / SNPassoc package. Tests that did not match Hardy-Weinberg equilibrium (HWE) and minor allele frequency (MAF) to certain conditions (HWE: P <0.05, MAF: <10%) were excluded from the whole genome association analysis. It was. The association between the color phenotype and the SNP marker was verified by single marker regression analysis.

육색 표현형에 대한 각 SNP 마커들의 상가적유전효과(additive effect)를 수학식 1과 같이 R-통계 패키지(R/assoc package)를 이용하여 유의적인 SNP를 선발하였다.Significant SNPs were selected using the R-association package (R / assoc package) as an additive effect of the SNP markers on the color phenotype.

<수학식 1> y=Xb + Za + e<Equation 1> y = Xb + Za + e

y는 도체시 성별과 연령이 포함된 고정효과(성과 연령같이 분석하는데 있어서 고정적으로 효과를 미치는 부분)에 대한 표현형 벡터를, X는 SNP에 대한 접속행렬(incidence matrix)을, b는 단일 SNP 유전자형에 대한 회귀계수 벡터를, Z는 animal 효과(개체간의 랜덤 효과)에 대한 접속행렬을, a는 개체효과에 대한 벡터를, e는 잔차에 대한 벡터를 의미한다.
y is the phenotype vector for fixed effects (parts that have a fixed effect on analysis, such as sex and age), including gender and age at carcass, X is the incidence matrix for SNP, and b is a single SNP genotype. The regression coefficient vector for, Z is the connection matrix for the animal effect (random effects between objects), a is the vector for the individual effect, and e is the vector for the residual.

<수학식 1>을 통하여 선발된 유의한 SNP 중 육색과 관련된 최적의 SNP조합을 찾기 위하여 1차로 선발된 유의한 모든 SNP를 수학식의 인자로 포함하는 multiple regression 분석을 ASReml프로그램으로 <수학식 2>에 따라 분석하였다.
In order to find the optimal SNP combination related to meat color among the significant SNPs selected through Equation 1, the multiple regression analysis including the first significant SNPs as an argument of the equation is performed using the ASReml program. Analyzes according to>.

<수학식 2> y=Xβ + Za + Zqi + e<Equation 2> y = Xβ + Za + Zqi + e

y는 표현형 벡터, β는 고정효과에 대한 회귀계수, a는 랜덤 animal 효과, q는 수학식 1에서 검출된 유의한 모든 SNP(QTL), e는 랜덤 잔차 효과를 의미한다.
y is a phenotype vector, β is a regression coefficient for fixed effects, a is a random animal effect, q is all significant SNPs (QTL) detected in Equation 1, and e is a random residual effect.

통계적 추론을 위하여 복합 가설검정에 대해 Benjamini와 Hochberg("Controlling the false discovery rate: a practical and powerful approach to multiple testing" Journal of the Royal Statistical Society, Series B (Methodological) 57 (1): 289300)가 제시한 false discovery rate(FDR)을 계산에 이용하였으며 모든 유의적 가치(value)는 5% chromosome-wise FDR 수준에서 계산되었다.
For statistical inference, Benjamini and Hochberg ("Controlling the false discovery rate: a practical and powerful approach to multiple testing" Journal of the Royal Statistical Society, Series B (Methodological) 57 (1): 289300) presented for complex hypothesis testing. One false discovery rate (FDR) was used for the calculation and all significant values were calculated at the 5% chromosome-wise FDR level.

그 결과 [표 2]에서 보는 바와 같이 총 돼지 유전체상에 존재하는 62,163개의 SNPs 중 육색 형질에 유의성을 가지는 SNPs를 1번, 16번 18번 염색체에서 2개, 1개, 3개 씩 각각 발굴하였다(chromosome-wise P<0.05).As a result, as shown in [Table 2], two, one and three chromosomes of chromosomes No. 1 and No. 16 were detected on chromosomes No. 1 and No. 16 among the 62,163 SNPs present in the total porcine genome. (chromosome-wise P <0.05).

또한 발굴된 SNP의 변화와 육색 형질과의 관계를 수치로 측정한 결과, [표 3]에서 보는 바와 같이 육색 형질과 유의적인 관련이 있음을 확인하였다.In addition, as a result of measuring the relationship between the detected SNP change and the color trait, it was confirmed that there is a significant relationship with the color trait as shown in [Table 3].

[표 3]의 estimate 값은 SNP가 minor 뉴클레오티드로 변하는 경우 변화하는 육색의 값이다.The estimated values in Table 3 are the color values that change when the SNP changes to minor nucleotides.

[표 3]의 estimate 값(영향력 수치)은 각 개체들의 유전자형 분석을 통해 (예를 들어 서열번호 1의 경우) AA, AG, GG형에 대하여 유전자의 상가적 효과를 회귀분석하여 구한 것으로 회귀방정식의 기울기에 해당한다.
The estimated values (impact values) in [Table 3] are obtained by regression analysis of the additive effects of genes on AA, AG, and GG types through genotyping of each individual (for example, SEQ ID NO: 1). Corresponds to the slope of.

1번 염색체의 서얼번호 1에 표시된 SNP는 AA(두 개의 1번 상동 염색체의 해당 SNP가 모두 A)인 경우가 GG인 경우에 비하여 CIE-L 수치가 평균 0.79 가량 증가하는 것을 확인하였다.The SNP shown in the serial number 1 of chromosome 1 was confirmed that the average CIE-L level increased by 0.79 as compared with the case of GG in AA (all corresponding SNPs of two homologous chromosomes A).

1번 염색체의 서열번호 2에 표시된 SNP는 CC인 경우가 TT인 경우에 비하여 CIE-L 수치가 평균 1.02 가량 증가하며, 16번 염색체의 서열번호 3에 표시된 SNP는 TT인 경우가 CC인 경우에 비하여 1.01 가량 증가하며, 18번 염색체의 서열번호 4에 표시되는 SNP는 TT인 경우가 CC인 경우에 비하여 0.79 가량 증가하며, 18번 염색체의 서열번호 5에 표시되는 SNP는 GG인 경우가 AA인 경우에 비하여 1.04 가량 증가하며, 18번 염색체의 서열번호 6에 표시되는 SNP는 TT인 경우가 CC인 경우에 비하여 2.03 가량 CIE-L 수치가 증가하여 육색의 명도가 증가하는 것을 확인하였다.
SNP shown in SEQ ID NO: 2 of chromosome 1 increased by 1.02 CIE-L on average compared to TT in CC, and SNP shown in SEQ ID NO: 3 of chromosome 16 in CC Compared to 1.01, the SNP shown in SEQ ID NO: 4 of chromosome 18 is increased by 0.79 compared to the case of CC in TT, and the SNP shown in SEQ ID NO: 5 of chromosome 18 is AA in GG. Compared to the case of 1.04, the SNP shown in SEQ ID NO: 6 of the chromosome 18 was confirmed that the increase in the color lightness by increasing the CIE-L value of about 2.03 compared to the case of TT CC.

이러한 유전자형은 육색을 예측하는데 활용이 가능하여 육색 형질이 우수한 종돈 선발을 위한 DNA marker로서 효과가 있을 것으로 판단된다.
These genotypes can be used to predict meat color, which is expected to be effective as a DNA marker for selection of sows with excellent color traits.

각 SNP에 대한 염기서열 정보 Sequence information for each SNP 서열번호SEQ ID NO: SNPsSNPs 염기서열Sequence 1One M1GA0000069M1GA0000069 ATCCAACTCCGAAACTCTGAACACGTGAAGTACGTCTGATACTGTTGTAAATACTTGGTG[A/G]CACCGGCCCCCGCGGAGTTTAACGTTACCAAGACGCCCTTGTGGGCTTGAAGGACTTCTTATCCAACTCCGAAACTCTGAACACGTGAAGTACGTCTGATACTGTTGTAAATACTTGGTG [A / G] CACCGGCCCCCGCGGAGTTTAACGTTACCAAGACGCCCTTGTGGGCTTGAAGGACTTCTT 22 ASGA0003937ASGA0003937 CAGAGGGAATGCTGTCTATCTGTTTAGAAGCTAAAAATTAAAGAGAGAATTAAATGAGTC[T/C]CACATAAATAGTATTTGGGGGAGAGTTTTTTAGTGTCTGCACTTAAAAACAAAAAACAAACAGAGGGAATGCTGTCTATCTGTTTAGAAGCTAAAAATTAAAGAGAGAATTAAATGAGTC [T / C] CACATAAATAGTATTTGGGGGAGAGTTTTTTAGTGTCTGCACTTAAAAACAAAAAACAAA 33 ASGA0072751ASGA0072751 TCTCTTCTTAGGACATTTTACACCTGTTCACTTTCCCCACAGCCTGGGACGTTGTAGCTC[T/C]CTCTCCGTCCTAAACTAACCATTGTCTTTACACATCTCTTTTCTATGAAGTCTCCTGTGCTCTCTTCTTAGGACATTTTACACCTGTTCACTTTCCCCACAGCCTGGGACGTTGTAGCTC [T / C] CTCTCCGTCCTAAACTAACCATTGTCTTTACACATCTCTTTTCTATGAAGTCTCCTGTGC 44 ALGA0116114ALGA0116114 NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNCTGCAAGGCCCTGTCTGTCTG[T/C]CATGAGATGGGGAAGTGTCATCTTCTAGTGTGCCAGAAAGCCGAGGAGACCAGACGACGGNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNCTGCAAGGCCCTGTCTGTCTG [T / C] CATGAGATGTGGAGATGTCATCTTCTAGTGTGCCAGAAAGCCGAGGAGACCAGACGACGG 55 DIAS0004239DIAS0004239 GGATCTGTTTGACCAATTTGCACCGGTTTTATCCTTAATGATGGATTTAACAGCATGACA[A/G]AAATTATTATTTTTTTGTTCTTAATGGAGATTAAGATGCCTTGAATTGTCTAAGGTGTTGGGATCTGTTTGACCAATTTGCACCGGTTTTATCCTTAATGATGGATTTAACAGCATGACA [A / G] AAATTATTATTTTTTTGTTCTTAATGGAGATTAAGATGCCTTGAATTGTCTAAGGTGTTG 66 H3GA0051149H3GA0051149 CCTCCCATCGCCCGTCCCAGTATTCATCCCACTGTGAATGACTGCTGCATCTTTTACCGT[T/C]TTTTGGTCTTTTTAGGGCCACACCCATGGCATATGGAGGTTCCCAGGCTGGGGGTCCAATCCTCCCATCGCCCGTCCCAGTATTCATCCCACTGTGAATGACTGCTGCATCTTTTACCGT [T / C] TTTTGGTCTTTTTAGGGCCACACCCATGGCATATGGAGGTTCCCAGGCTGGGGGTCCAAT

상기 [표 1]에서 [ / ] 안에 표시는 염기가 상호치환 되는 SNP을 표시한다. 예를 들어 [A/G]는 A가 G로 치환 되는 것을 말하며, 하기 [표 3]의 estimate값은 이러한 치환이 일어나는 경우 변화하는 육색(CIE-L 값)의 변화를 수치화 한 것이다.
In Table 1, the mark in [/] indicates the SNP that the base is mutually substituted. For example, [A / G] means that A is replaced with G, and the estimated value in Table 3 below is a numerical value of the change in color (CIE-L value) that changes when such substitution occurs.

돼지 육색과 연관성이 있는 SNP의 정보 Information on SNPs Associated with Pork Meat SNPsSNPs ChrChr PosPos estimatesestimates p-valuep-value R2R2 M1GA0000069M1GA0000069 1One 382854382854 0.7893540.789354 7.60E-097.60E-09 0.950.95 ASGA0003937ASGA0003937 1One 9937500899375008 -1.02291-1.02291 9.08E-079.08E-07 0.950.95 ASGA0072751ASGA0072751 1616 2249546222495462 1.008021.00802 1.64E-061.64E-06 0.950.95 ALGA0116114ALGA0116114 1818 1297536012975360 0.7855580.785558 0.000550.00055 0.950.95 DIAS0004239DIAS0004239 1818 3735816637358166 -1.04431-1.04431 8.10E-068.10E-06 0.950.95 H3GA0051149H3GA0051149 1818 4917464949174649 2.029282.02928 0.000660.00066 0.950.95

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하고 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 돼지로부터 소량의 핵산분자만 획득하면 돼지의 육질에 관한 정보를 알 수 있고 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별할 수 있으며 특히 돼지를 죽이지 않고 육색에 관한 정보를 알 수 있으므로 우수한 육질 형질을 가지는 종돈을 선발 할 수 있어 산업상 이용가능성이 높다.As described above, the present invention provides a method for providing information on meat color of pigs and selecting pigs having excellent meat color. According to the method of the present invention, if only a small amount of nucleic acid molecules are obtained from a pig, it is possible to know the information about the meat quality of the pig and can select the pigs having excellent meat color, and in particular, the meat color information can be known without killing the pig. It is possible to select sows with traits, which is highly industrially applicable.

<110> REPUBLIC OF KOREA(MANAGEMENT : RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> Method for selecting pigs with excellent shear force trait <160> 6 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 1 atccaactcc gaaactctga acacgtgaag tacgtctgat actgttgtaa atacttggtg 60 rcaccggccc ccgcggagtt taacgttacc aagacgccct tgtgggcttg aaggacttct 120 t 121 <210> 2 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 2 cagagggaat gctgtctatc tgtttagaag ctaaaaatta aagagagaat taaatgagtc 60 ycacataaat agtatttggg ggagagtttt ttagtgtctg cacttaaaaa caaaaaacaa 120 a 121 <210> 3 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 3 tctcttctta ggacatttta cacctgttca ctttccccac agcctgggac gttgtagctc 60 yctctccgtc ctaaactaac cattgtcttt acacatctct tttctatgaa gtctcctgtg 120 c 121 <210> 4 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 4 nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnc tgcaaggccc tgtctgtctg 60 ycatgagatg gggaagtgtc atcttctagt gtgccagaaa gccgaggaga ccagacgacg 120 g 121 <210> 5 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 5 ggatctgttt gaccaatttg caccggtttt atccttaatg atggatttaa cagcatgaca 60 raaattatta tttttttgtt cttaatggag attaagatgc cttgaattgt ctaaggtgtt 120 g 121 <210> 6 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 6 cctcccatcg cccgtcccag tattcatccc actgtgaatg actgctgcat cttttaccgt 60 yttttggtct ttttagggcc acacccatgg catatggagg ttcccaggct gggggtccaa 120 t 121 <110> REPUBLIC OF KOREA (MANAGEMENT: RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> Method for selecting pigs with excellent shear force trait <160> 6 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 1 atccaactcc gaaactctga acacgtgaag tacgtctgat actgttgtaa atacttggtg 60 rcaccggccc ccgcggagtt taacgttacc aagacgccct tgtgggcttg aaggacttct 120 t 121 <210> 2 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 2 cagagggaat gctgtctatc tgtttagaag ctaaaaatta aagagagaat taaatgagtc 60 ycacataaat agtatttggg ggagagtttt ttagtgtctg cacttaaaaa caaaaaacaa 120 a 121 <210> 3 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 3 tctcttctta ggacatttta cacctgttca ctttccccac agcctgggac gttgtagctc 60 yctctccgtc ctaaactaac cattgtcttt acacatctct tttctatgaa gtctcctgtg 120 c 121 <210> 4 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 4 nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnc tgcaaggccc tgtctgtctg 60 ycatgagatg gggaagtgtc atcttctagt gtgccagaaa gccgaggaga ccagacgacg 120 g 121 <210> 5 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 5 ggatctgttt gaccaatttg caccggtttt atccttaatg atggatttaa cagcatgaca 60 raaattatta tttttttgtt cttaatggag attaagatgc cttgaattgt ctaaggtgtt 120 g 121 <210> 6 <211> 121 <212> DNA <213> Sus scrofa <400> 6 cctcccatcg cccgtcccag tattcatccc actgtgaatg actgctgcat cttttaccgt 60 yttttggtct ttttagggcc acacccatgg catatggagg ttcccaggct gggggtccaa 120 t 121

Claims (5)

(a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및
(b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 돼지의 육색에 관한 정보를 제공하는 방법.
(a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and
(b) identifying the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides thereof from the isolated swine nucleic acid molecules; How to give information about the flesh of pigs.
(a) 돼지의 핵산분자를 분리하는 단계 및
(b) 상기 분리된 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인하는 단계를 포함하는 육색이 우수한 형질의 돼지를 선별하는 방법.
(a) isolating a nucleic acid molecule of a pig and
(b) identifying the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides thereof from the isolated swine nucleic acid molecules; How to select pigs of good trait trait.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 (b) 단계의 염기타입을 확인하는 단계는
(i) 돼지의 핵산분자로부터 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드의 61번째 뉴클레오티드의 염기타입을 확인할 수 있도록 제작된 DNA 칩(DNA chip)에 상기 (a) 단계에서 분리된 핵산분자를 혼성화(hybridization)하는 단계 및
(ii) 혼성화된 이중 가닥의 형성을 검출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
According to claim 1 or 2, wherein the step of identifying the base type of step (b)
(i) a DNA chip (DNA) prepared to identify the base type of the 61st nucleotide of at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and complementary polynucleotides from swine nucleic acid molecules hybridizing the nucleic acid molecules separated in step (a) to the chip);
(ii) detecting the formation of hybridized double strands.
제3항에 있어서, DNA 칩(DNA chip)은 서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드에서 61번째 뉴클레오티드를 포함하며 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
The group of claim 3, wherein the DNA chip comprises a polynucleotide represented by SEQ ID NOs: 1 to 6 and a polynucleotide comprising 61 to nucleotides in the polynucleotide complementary thereto and composed of 10 to 120 consecutive bases. A method comprising at least one polynucleotide selected from.
서열번호 1 내지 6으로 표시되는 폴리뉴클레오티드 및 이와 상보적인 폴리뉴클레오티드에서 61번째 뉴클레오티드를 포함하며 10 내지 120개의 연속 염기로 구성되는 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 DNA 칩(DNA chip).It comprises at least one polynucleotide selected from the group consisting of polynucleotides represented by SEQ ID NO: 1 to 6 and the polynucleotide comprising a 61 to nucleotide in the polynucleotide complementary thereto and consisting of 10 to 120 consecutive bases DNA chip.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20210156597A (en) * 2020-06-18 2021-12-27 대한민국(농촌진흥청장) Marker for predicting meat color of pork and use thereof

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