KR20110136093A - 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법 및 이에 의해 제조된 벼 종자 - Google Patents

고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법 및 이에 의해 제조된 벼 종자 Download PDF

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Abstract

본 발명은 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 단계; 및
상기 물에 침지된 벼 종자를 21 내지 27℃하에 14 내지 18시간의 명조건과 6 내지 10 시간의 암조건을 반복처리하여 1 내지 7일간 발아시키는 단계를 포함하는 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법을 제공한다.

Description

고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법 및 이에 의해 제조된 벼 종자{Preparation method of rice seed comprising high concentrated resveratrol and piceid}
본 발명은 레스베라트롤과 피세이드의 함량이 극대화된 벼 종자의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 벼 종자를 물에 침지하고 명조건과 암조건을 반복처리하여 주는 것에 의해 레스베라트롤의 유전자 발현을 증가시키고, 이에 의해 종자내 레스베라트롤과 피세이드의 함량이 극대화된 벼 종자의 제조방법 및 이에 의해 제조된 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자에 관한 것이다.
레스베라트롤 생합성 유전자 (resveratrol synthase, RS)의 산물인 레스베라트롤은 식물이 외부로부터의 물리적 자극이나 곰팡이균에 감염되었을 때 만들어내는 항독성물질인 피토알렉신 (phytoalexin)의 일종으로서, 포도, 오디, 땅콩 등에 들어있으며, 특히 적포도주에 다량 함유되어 있다고 알려져 있다.
레스베라트롤은 항암작용, 항혈전작용, 항산화작용, 심혈관계질환의 발병을 낮추는 등의 효과를 나타낸다고 보고되어 있다. 특히, 레스베라트롤은 상기의 약리활성 효과 외에도 수명연장 관련 단백질인 sir2를 활성화 시키는 물질로 알려지면서 세인의 주목을 끌게 되었고, 레스베라트롤의 함량을 인위적으로 증진시키기 위하여 재배시 포도에 인위적으로 균주를 접종하거나, 수확 후 포도와 땅콩 종자에 초음파 세척 처리나, UV 조사 등을 통하여 레스베라트롤의 함량을 증진시키는 연구들이 시도되고 있다.
레스베라트롤 합성 유전자는 1분자의 쿠마로일-CoA(coumaroyl-CoA)와 3분자의 말로닐-CoA(malonyl-CoA)를 전구물질로 이용하여 레스베라트롤을 생합성한다. 또한, 찰콘 합성 (chalcone synthase) 유전자도 레스베라트롤 합성 유전자와 마찬가지로 1분자의 쿠마로일-CoA와 3분자의 말로닐-CoA를 전구물질로 이용하여 플라보노이드를 생합성한다. 벼에는 레스베라트롤 합성 유전자는 존재하지 않으나, 찰콘 합성 유전자가 11번 염색체에 존재하며, 또한 정상적인 단백질을 생산한다고 알려져 있다.
본 발명자들은 상기와 같은 점들을 감안하여 팔광땅콩에서 레스베라트롤 합성 유전자를 분리하여 레스베라트롤과 피세이드 (resveratrol-3-O-D-glucoside, 레스베라트롤과 배당체 결합물)를 생합성하는 형질전환 벼를 개발하였으나, 여전히 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 이용한 레스베라트롤과 피세이드 함량 및 레스베라트롤 합성 유전자의 발현량을 최대한 증폭시킬 수 있는 발아조건에 관한 연구개발은 지속적으로 요구되고 있다.
본 발명은 상기한 바와 같은 종래기술이 가지는 문제를 해결하기 위해 안출된 것으로, 그 목적은 벼 종자를 물에 침지하고 명조건과 암조건을 반복처리하여 주는 것에 의해 레스베라트롤의 유전자 발현을 증가시키고, 이에 의해 종자내 레스베라트롤과 피세이드의 함량이 극대화된 벼 종자를 제공함에 있다.
상기한 바와 같은 본 발명의 기술적 과제는 다음과 같은 수단에 의해 달성되어진다.
(1) 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 단계; 및
상기 물에 침지된 벼 종자를 명조건과 암조건을 반복처리하여 발아시키는 단계를 포함하는 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법.
(2) 제 1항에 있어서,
침지된 벼 종자는 21 ~ 27℃에서 배양되는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
(3) 제 1항에 있어서,
명조건은 14 내지 18 시간 처리되어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
(4) 제 1항에 있어서,
암조건은 6 내지 10 시간 처리되어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
(5) 제 1항에 있어서,
배양은 1 내지 7일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
(6) 제 1항에 있어서,
배양은 5일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
(7) 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 단계; 및
상기 물에 침지된 벼 종자를 21 내지 27℃하에 14 내지 18시간의 명조건과 6 내지 10 시간의 암조건을 반복처리하여 1 내지 7일간 발아시키는 단계를 포함하는 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법.
(8) 제 7항에 있어서,
배양은 5일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
(9) 제 1항 내지 제 8항 중 선택된 어느 한 항에 의해 제조된 고농도의 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자.
본 발명에 의하면, 벼 종자를 물에 침지하고 명조건과 암조건을 반복처리하여 주는 것에 의해 레스베라트롤의 유전자 발현을 증가시키고, 이에 의해 종자내 레스베라트롤과 피세이드의 함량이 극대화된 벼 종자를 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 사용된 익산 515호의 발아 일자별 레스베라트롤 및 피세이드 함량 변화를 나타낸다.
도 2a,b는 본 발명에 사용된 익산 515호의 발아처리 후 일자별 레스베라트롤 합성 유전자 발현 변화를 나타낸다.
본 발명은 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 단계; 및
상기 물에 침지된 벼 종자를 명조건과 암조건을 반복처리하여 발아시키는 단계를 포함하는 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법을 제공한다.
이하 본 발명의 내용을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 고농도의 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자를 얻기 위해 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자가 이용된다. 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자는 유전자 조작에 의해 또는 돌연변이에 의해 레스베라트롤 합성에 관여하는 유전자가 함유된 어떠한 벼 종자도 여기에 포함될 수 있다. 바람직하게는 상기 벼 종자는 국내특허공보 제10-0894148호에 개시된 방법에 따라 얻어질 수 있는 벼 종자가 이용될 수 있으며, 보다 구체적인 예로는 현재 국내에서 생산되고 있는 익산 515호 품종을 들 수 있다. 상기 벼 종자는 농촌진흥청에서 육성한 팔광땅콩에서 분리한 레스베라트롤 합성 유전자를 이용하여 레스베라트롤과 피세이드를 합성하는 벼 종자로서 형질전환된 것이다.
상기 본 발명에 따른 벼 종자의 제조방법은 상기 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 과정을 포함한다. 이러한 과정은 예를 들어 페트리디쉬에 필터페이퍼를 깔고 물이 충분히 스며들게 한 후 여기에 벼 종자를 파종하는 과정을 통해 수행되어진다.
본 발명에서는 상기 과정에 따라 침지처리된 벼 종자를 21 ~ 27 ℃에서 배양하는 과정을 포함한다. 상기 배양과정에서의 온도가 21 ℃ 미만으로 떨어지거나 27 ℃를 초과할 경우에는 레스베라트롤의 합성 및 벼 종자의 발아가 원활하게 이루어지지 않을 우려가 있어 상기 범위로 하는 것이 바람직하다.
또, 상기 본 발명에 따른 벼 종자의 제조방법은 침지처리된 벼 종자를 명조건과 암조건을 반복 처리하는 과정을 포함하는 것으로 한다. 이러한 과정에 의해서만이 벼 종자의 발아와 이에 따른 레스베라트롤 및 피세이드의 합성이 극대화 될 수 있다. 바람직하게는 상기 명조건은 광을 14 내지 18시간 연속하여 처리하는 과정을 포함하는 것이 좋고, 암조건은 6 내지 10시간 연속하여 처리하는 과정을 포함하는 것이 좋다. 이러한 명배양 조건과 암배양 조건의 반복적인 배양조건은 벼 종자의 발아 및 이에 따른 레스베라트롤 및 피세이드의 합성을 극대화함에 있어서 중요한 요인으로 작용되며, 이러한 반복배양은 바람직하게는 1 내지 7일간, 보다 바람직하게는 5일간 수행한다. 본 발명에 의하면 특히 5일 동안의 발아처리조건에서 유전자 발현량 및 레스베라트롤과 피세이드의 함량이 최대치가 되는 것으로 확인되었다.
상기 본 발명에 따라 제조되는 고농도의 레스베라트롤 및 피세이드 함량 벼 종자는 기능성 화장품, 건강음료, 사료 등 다양한 가공품의 생산에 널리 활용될 수 있다.
이하 본 발명의 내용을 실시예를 참조하여 보다 구체적으로 설명하고자 하나 이들 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위해 제시된 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것으로 해석되어져서는 아니될 것이다.
[실시예 1] 고농도 레스베라트롤 함유 벼 종자의 제조 및 UPLC를 이용한 레스베라트롤 및 피세이드 함량 분석
(a) 종자 발아
페트리디쉬에 필터페이퍼를 놓고 물이 충분히 스며들게 한 후 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자(익산 515호)를 파종하여 조직배양실에서 21~27℃, 14~18시간 명배양, 6~10시간 암배양 조건으로 반복처리하여 1~7일간 발아시켰다. 물은 발아 종자가 썩지 않도록 매일 교체하였다.
(b) 레스베라트롤 추출
발아 1~7일 시료를 마쇄기를 이용하여 마쇄하고 1.5 ㎖ EP 튜브에 300 ㎎ 씩 정량한 후 80 % 메탄올 900 ㎕를 첨가하여 약 20초간 강하게 교반하였다. 교반한 시료를 45 ℃, 150 rpm 조건에서 50분간 처리 후 4 ℃, 10,000 g에서 5분간 원심분리하여 상등액을 취하였다. 추출물을 0.2 ㎛ PTFE 재질 필터를 이용하여 여과한 후 분석에 이용하였다.
(c) 레스베라트롤 분석
표준물질로 Sigma 사의 트랜스-레스베라트롤(Sigma, R5010)을 이용하였다. 1 mg 레스베라트롤을 100 % 메탄올 1 ㎖에 녹여 1,000 ppm 표준물질을 조제한 후 분석 조건에 맞게 표준물질을 희석하여 사용하였다.
UPLC 분석은 HPLC급 아세토나이트릴과 3차 증류수(초순수)를 건전하게 세척된 여과기 세트와 진공펌프를 이용하여, 0.2㎛ PVDF 재질 필터로 여과하였다. 초순수는 매일 교체하여 사용하였으며, 아세토나이트릴 시약은 매일 5분간 초음파 처리로 탈기를 시킨 후 분석에 이용하였다. UPLC 분석은 ACQUITY Ultra Performance LCTM, (Waters, US)를 이용하였다. 컬럼은 ACQUITY UPLCTM BEH C18 1.7㎛, 2.1× 100mm Column을 이용하였으며, 분석은 물과 아세토나이트릴을 용매로 이용한 그라디언트 법을 사용하였다. 분석 용매를 초기조건에서 1.0 ㎖/min 유속으로 흘려보내면서 UV 검출기는 308nm 파장에서 측정하였다.
UPLC 그라디언트 조건
시간 용매 A
(아세토나이트릴)		 용매 B
(DCW)		 유속(㎖/min.)
0 10 90 0.4
1.54 10 90 0.4
10 15 85 0.4
22 25 75 0.4
22.4 90 10 0.4
25 90 10 0.4
26 10 90 0.4
익산515호의 발아 일자별 피세이드 및 레스베라트롤 함량변화
구 분 0일 발 아 처 리
1일 3일 5일 7일
레스베라트롤
(㎍/g)		 1.94 3.48 3.69 4.50 2.54
피세이드
(㎍/g)		 3.34 3.31 10.73 35.29 100.85
도 1과 표 2에서 알 수 있듯이 발아 일수에 따라 레스베라트롤 및 피세이드 함량이 증가하여 5일째에 각각 4.50, 35.29 ㎍/g으로 2.3배, 10.6배 증가하였으며, 7일째는 레스베라트롤이 2.54 ㎍/g으로 5일째의 절반 수준으로 감소하였으며, 피세이드는 100.85 ㎍/g으로 30.2배 증가하였다.
[실시예 2] Real-Time PCR을 이용한 레스베라트롤 합성 유전자 발현 분석
(a) 종자 발아
벼 종자의 발아실험은 실시예 1에서와 동일한 과정에 따라 실시하였다.
(b) RNA 분리 및 cDNA 합성
액체 질소를 이용하여 식물체의 잎을 곱게 마쇄한 후 TRI reagent (MRC, USA)를 이용하여 총 RNA를 분리하여 정량하고, 올리고(dT) 프라이머를 이용한 iScriptTM select cDNA synthesis kit (Bio-rad, USA)로 cDNA를 합성하였다.
(c) Real-Time PCR 이용 발현 분석
Real-Time PCR은 iQTM SYBR green supermix와 정방향 프라이머 (CGGATCCATGG TGTCTGTGAGTG)와 역방향 프라이머 (CGAGCTCCGTTATATGGCCACA)를 이용하여 95 ℃에서 3분을 거친 후 95 ℃에서 20초, 63 ℃에서 20초, 72 ℃에서 20초간 40 사이클을 반복하고 매 신장 단계에서 SYBR/FAM channel로 형광량을 측정하였으며, 95 ℃에서 10초를 거친 후 65 ℃에서 95 ℃까지 Melt. curve를 측정하여 AhRS의 mRNA 발현량을 조사하였다.
도 2a,b에서 보는 바와 같이 Real-Time PCR을 이용하여 발아처리 후 일자별 RS 유전자의 발현양을 조사한 결과, 처리일수가 증가할수록 유전자 발현양도 증가하였으나 7일째에는 유전자 발현양이 발아처리 1일째의 절반 수준으로 감소하였다. 발아처리 3일째와 비교하여 5일째는 약 25배 발현양이 증가하였는데, 이것은 UPLC 결과에서도 발아처리 5일째 레스베라트롤 및 피세이드 생성량이 급격히 증가한 것과 동일한 결과를 나타내었다.
상기와 같이, 본 발명의 바람직한 실시 예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

Claims (9)

  1. 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 단계; 및
    상기 물에 침지된 벼 종자를 명조건과 암조건을 반복처리하여 발아시키는 단계를 포함하는 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    침지된 벼 종자는 21 ~ 27℃에서 배양되는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
  3. 제 1항에 있어서,
    명조건은 14 내지 18 시간 처리되어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
  4. 제 1항에 있어서,
    암조건은 6 내지 10 시간 처리되어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
  5. 제 1항에 있어서,
    배양은 1 내지 7일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
  6. 제 1항에 있어서,
    배양은 5일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
  7. 레스베라트롤 합성 형질전환 벼 종자를 물에 침지하는 단계; 및
    상기 물에 침지된 벼 종자를 21 내지 27℃하에 14 내지 18시간의 명조건과 6 내지 10 시간의 암조건을 반복처리하여 1 내지 7일간 발아시키는 단계를 포함하는 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법.
  8. 제 7항에 있어서,
    배양은 5일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 벼 종자의 제조방법.
  9. 제 1항 내지 제 8항 중 선택된 어느 한 항에 의해 제조된 고농도의 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자.





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KR1020100055880A KR20110136093A (ko) 2010-06-14 2010-06-14 고농도 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 벼 종자의 제조방법 및 이에 의해 제조된 벼 종자

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN103755752A (zh) * 2013-12-28 2014-04-30 湘西自治州奥瑞克医药化工有限责任公司 一种从虎杖中提取纯化虎杖苷的生产工艺
WO2014098438A1 (ko) * 2012-12-17 2014-06-26 대한민국(농촌진흥청장) 레스베라트롤 생합성 벼 및 이의 용도
KR101528740B1 (ko) * 2013-07-30 2015-06-15 대한민국(농촌진흥청장) 레스베라트롤 생합성 발아현미 추출물을 함유하는 피부미백용 조성물

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014098438A1 (ko) * 2012-12-17 2014-06-26 대한민국(농촌진흥청장) 레스베라트롤 생합성 벼 및 이의 용도
US9840716B2 (en) 2012-12-17 2017-12-12 Republic Of Korea (Management: Rural Development Administration) Resveratrol-enriched rice and the use thereof
KR101528740B1 (ko) * 2013-07-30 2015-06-15 대한민국(농촌진흥청장) 레스베라트롤 생합성 발아현미 추출물을 함유하는 피부미백용 조성물
CN103755752A (zh) * 2013-12-28 2014-04-30 湘西自治州奥瑞克医药化工有限责任公司 一种从虎杖中提取纯化虎杖苷的生产工艺

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