KR20110079088A - 고순도 카테킨을 함유하는 아토피 피부용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 고순도 카테킨을 함유하는 아토피 치료용 화장료 조성물에 관한 것으로 항산화, 항염, 면역조절 기능을 가진 카테킨을 95%(w/w) 이상의 고순도로 정제하여 불순물을 제거한 분말상의 카테킨을 얻고, 이를 금은화, 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 에탄올, 물 또는 그 혼합물로 추출한 다음 용매를 제거하고 얻어진 농축액을 1,3-부틸렌글리콜로 재추출하여 얻어지는 추출액에 가하고, 용해하여 얻어지는 것을 주요성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 아토피 질환으로 고생하는 환자에 있어 가려움증을 완화시키며, 항균성 및 항염증성 효과를 제공하여 염증의 발생 및 지속을 억제하고, 피부의 건조함을 막아 피부 트러블을 억제하며, 면역조절기능을 제공함으로써 아토피 질환의 근원적인 개선효과를 제공한다.

카테킨, 에피카테킨, 아토피, 항산화, 항염, 면역조절

Description

고순도 카테킨을 함유하는 아토피 피부용 화장료 조성물{Cosmetic composition containing purified catechin for atopic dermatitis}

본 발명은 아토피 피부염으로 인한 피부트러블의 해소, 가려움증의 완화, 항염 및 항균효과에 의한 염증발생의 억제 및 완화 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것으로 감비르에서 유래한 카테킨을 고순도로 정제하여 얻어진 분말을 금은화, 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 에탄올, 물 또는 1,3-부틸렌글리콜로 추출하여 얻어진 추출액에 용해하여 얻어지는 조성물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

아토피 피부염은 각종 환경오염물질에 대한 과민성 면역반응의 결과로 나타나는 여러가지 제 증상을 일컫는 것으로 가려움증, 염증, 천식, 알레르기성 비염 등의 형태로 나타난다. 아토피 피부염의 정확한 원인은 아직 규명되지 않았으며, 유전적 원인을 포함하여 환경적 발병요인으로 추정되고 있으며, 건조한 피부, 정상인에 비해 연약한 피부, 세균, 바이러스, 곰팡이 등 미생물에 의한 감염, 정서적, 환경적 요인 등 매우 복잡한 병인에 의해 나타나는 것으로 보고 있으며, 최근 발병률이 현저하게 증가하고 있으며 그 비율이 우리나라의 경우 최대 10%에 달하며, 특히 유,소아에게서 심각한 증상이 발생한다.

아토피성 피부염의 가장 대표적인 증상은 가려움증, 염증 및 그로 인한 진물, 장기간에 걸친 긁음, 염증의 반복으로 피부가 각질화되고 두꺼워지는 현상, 장기적이고 만성적인 재발을 들 수 있다. 지금까지는 이러한 증상의 치료를 위하여 항히스타민제, 스테로이드제 등이 처방되어 왔으나, 이 역시 일시적인 증상의 완화효과를 볼 뿐 치료효과를 주지는 못했으며, 장기적 사용으로 심각한 부작용을 초래하는 경우가 많았다. 이는 아토피성 피부염의 소양증을 유발하는 원인이 히스타민 이외의 여러가지 사이토카인(TNF-alpha, IL-1, IL-2...)에 의해서도 유발되기 때문이다.

지금까지의 보고된 아토피성 피부염 관련 화장료 조성물로는 대한민국특허 제10-0909386호에서 우엉을 주성분으로 하고 금은화, 소태나무, 인진쑥 및 자소엽 성분을 포함하는 생약조성물의 화장료를 제시하고 있으며, 한국특허 10-0609643호에서는 쑥, 뱀딸기, 달맞이꽃, 버드나무, 느릅나무 및 탱자열매의 추출액과 달걀노른자위 기름을 포함하는 아토피용 조성물을 제시하고 있고, 한국특허공개 10-2009-0002678호에서는 금은화, 사삼, 어성초, 치마버섯, 녹차, 상황버섯, 자소, 저실자, 황련, 갈근, 목련, 문형, 백화사설초, 범부채, 삼백초, 선복화, 앵두, 유근피, 적송, 지모, 차전자, 창이자, 형개 및 호이초 중 한가지 이상의 발효추출물을 사용한 화장료조성물을 제시하고 있고, 한국특허 10-0881884호에서는 당귀, 목단피, 생지 황, 감초, 방풍, 부평초, 연교, 적작약, 천궁, 형개, 백강잠, 박하, 서우각 및 황금의 추출물을 유효성분으로 하는 아토피용 화장료 조성물을 제시하고 있으며, 한국특허공개 10-0074038호에서는 부평초, 우슬, 금은화, 당귀, 금잔화, 알로에, 황금의 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제시하고 있으며, 한국특허공개 10-2007-0095588호에서는 어성초, 당귀, 약쑥, 천궁, 신선초, 홰나무, 솔싹, 박하, 녹두, 살구씨, 송진, 상황버섯, 금은화, 생강, 현삼, 조피, 녹차, 금잔화, 도라지, 검은콩의 추출액을 이용한 아토피용 조성물을 제시하고 있으며, 한국특허 10-0878353호에서는 생지황, 석고, 고백반, 금은화, 현삼, 화피, 백지, 조각자 및 백질려의 추출물을 함유하는 아토피용 조성물을 제시하고 있으며, 한국특허 10-0889606호에서는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기 중 한가지 이상의 버섯 발효물을 유산균으로 발효시켜 추출한 발효 추출물을 함유하는 아토피용 화장료를 제시하고 있으며, 한국특허공재 10-2006-0092373호에서는 화분, 박강잠, 동출하초, 사상자를 주성분으로 하는 소아 아토피 피부염의 예방 및 개선작용을 하는 조성물이 제시되어 있다.

상기의 천연 식물 유래 추출물 또는 약재들은 항산화, 항균효과를 이용하여 피부 관련 생리활성이 보고되고 있어 화장료 조성물에 많이 이용되어 왔으나, 화장료로서 조성물화 되었을 경우 그 효과가 미미하고, 일시적인 증상의 완화에 주효능이 집중되어 있는 것이 사실이다.

또한, 기존의 의학적 처방인 스테로이드제의 경우 여러가지 부작용이 알려져 있어 지속적 사용이 어려워, 아토피 관련 증상의 근원적이며 지속적인 개선효능을 가진 화장료 조성물의 수요가 증가하고 있는 것이 현실이다.

아토피용 조성물이 가진 종래의 문제점은 개선효과의 일시성, 효과의 미약성, 과다한 조성물로 인한 부작용, 화장료 조성물화 되었을 경우의 효과의 현저한 감소 및 용해도 문제로 인한 고용량의 투입불가능 등의 문제가 있어 새로운 아토피용 조성물을 제공함에 있어 효능물질을 고용량으로 화장료 조성물로 제공하는 점과, 그 효능이 지속될 수 있게 하는 점 및 지속적 사용에도 부작용 없이 사용할 수 있는 안전성을 확보하고자 하였다.

본 발명은 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개를 각각 1~10 중량비로 하고, 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 각각 5~10 중량비로 한 혼합생약을 물, 에탄올또는 그 혼합물로 추출하고, 용매를 제거하여 고형분의 농도가 20~50%(w/v)가 되게 하고, 여기에 1,3-부틸렌글리콜을 가하여 용해물을 분획하여 얻어진 분획물에 감비르 추출물에서 정제된 순도 95%(w/w)이상의 카테킨을 0.1~10%(w/v) 가하고, 용해하여 얻어지는 것을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부질환 개선용 조성물에 의하여 지속적이고 부작용 없는 아토피 치료용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 고순도 카테킨은 항산화, 항염, 항균효능을 가진 물질로 불순물 을 제거하여 효능을 강화 하였으며, 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개, 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초는 항균, 보습성을 가진 천연물로 그 추출물은 면역조절 효능을 가지고 있어, 면역조절 이상으로 인한 아토피 피부염의 항균, 항염, 항소양증에 우수한 효과를 나타낸다. 또한, 이를 함유하는 화장료 조성물은 아토피 피부염을 완화하고 치료하는데 매우 우수한 효과를 나타낸다.

본 발명은 카테킨을 함유하는 감비르(Gambir)로 부터 카테킨을 추출하고, 정제하여 고순도의 카테킨을 확보하고, 천연물로서 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개를 각각 1~10 중량비로 하고, 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 각각 5~10 중량비로 한 혼합생약을 물, 에탄올 또는 그 혼합물로 추출하고, 용매를 제거하여 고형분의 농도가 20~50%(w/v)가 되게 하고, 여기에 1,3-부틸렌글리콜을 가하여 용해물을 분획하여 얻어진 분획물에 감비르 추출물에서 정제된 순도 95%(w/w)이상의 카테킨을 0.1~10%(w/v) 가하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 아토피 치료용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 생약조성물에 있어 금은화(Lonicera japonica Thunberg)는 인동이라고도 불리는 것으로 배당체 루테올린, 이노시톨(Inositol)이 있으며, 단맛은 약 1%의 이노시톨에 의한다. 그외 탄닌질 약 8%, 사포닌(saponin)등을 함유하고 있다. 또한 잎과 줄기에는 5~8%의 탄닌질이 있으며 항균, 항암작용이 있는 것으로 알려져 있다.

감초(Glycyrrhiza uralensis Fisch)는 글리시리진(glycyrrhizin 6~10%), 플라보노이드와 아이소(iso), 그리시리진산(glycyrrhizic/glycyrrhizic acid), 사포닌(saponins), 쿠마린, 정유, 전분, 파이토스테롤(phytostrol), 탄닌 및 효소, beturic acid, oleanolic acid, liquiritigenin, isoliquiritigenin, liquiritin, licuraside, rhamnoliquiritin 등의 성분을 함유하고 있으며, 한방에서는 해독효느응ㄹ 가지는 약재로 알려져 있다.

치자(Gardenia jasminoides Ellis)는 주성분은 색소인 crocin과 iridoid배당체인 genipin, geniposide, gardenoside이며, 항산화능이 있는 것으로 알려져 있다.

연교(Forsythia koreana Nakai)는 saponin, flavonoid, alkaloid 등을 함유하고 있으며, 항균작용, 항염증작용, 혈압강하, 지혈작용, 간치료작용, 해열, 진통, 이뇨작용이 보고되어 있다.

황백(Phellodendron amurense Ruprecht)은 Alkaloid 1.5∼4.5%를 함유하고 있으며 주성분은 Berberine이고 이 밖에 Palmitine, Magnoflorine, Guanidine, Phellodendrine, Obakunone, Candicine, Jaterorrhizine과 고미질, β-Sitosterol, Campesterol이 들어 있다. 잎에서는 10개가 넘는 플라보노이드가 분리되었는데 펠라빈, 펠라틴, 데히드로펠로시드, 펠로시드, 노리카리시드, 아무레신, 약 1%의 펠라무린 등이 있다. 잎에는 또한 280mg%의 아스코르브산이 있다. 정유는 잎에 0.01%, 꽃이삭에 0.15%, 마른열매에 8.05% 있는데 정유의 92%는 미르센, 메틸-n-노닐케톤, 메틸-n-헵틸케톤, 흔적의 게라니올로 되어있다. 잎에는 또한 3~5%의 펠레 린이 있다. 펠레린은 항바이러스 활성이 있어 헤르페스바이러스에 의한 감염증에 이용되고 있으며 잎을 그 제조원료로 쓰고 있다. 또한, 여러 세균의 내성(耐性)도 생기지 않으므로 유행성 눈병이 유행할 때 세안 소독약으로도 사용할 수 있다. 그 외에도 혈압강하·중추신경계 억제·항염증 등의 효과도 보고되어 있다.

자초(Bupleurum falcatum L.)는 면역을 증가시키고, 항균효능이 있는 것으로 알려져 있다.

인진쑥(Artemisia capillaris Thunberg)은 스코폴레틴, 정유, 방향족옥시카본산, 플라보노이드, 옥시쿠마린 등을 함유하고 있으며, 항균, 항염효과가 있으며, 보습기능도 있는 것으로 알려져 있다.

어성초(Houttuynia cordata Thunb)는 주성분은 Methylnonylketone, Myrcene, Auricaldehyde, Afzerin, Capricaldehyde, Capric acid, Quercitrin, Isoquercitrin, Decanoyl Acetaldehyde(특유의 고기 비린내 성분)이며, 항산화 작용, 항균작용이 알려져 있으며, 보습효과도 알려져 있다.

몰약(Commiphora molmol Engler)은 수지, 수교(樹膠), 정유 등이 함유되어 있고, 분비 초기에는 무색이나 점차 황록색으로 변한다. 정유 2.5%∼8%(cuminaldehyde.eugenol)수지25∼40%(α,β,γ-comphoric acid) 및 resines, phenol등이 있고, 화합물로는 protocatechuric acid, protocatechin 등이 있다. 피부진정효과가 있으며, 트러블을 안정화 시키는 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

황금(Scutellaria baicalensis)은 뿌리에 바이칼린 4-5%, 바이카레인, 워고, 워고노시드, 7-메톡시-바이칼레인, 네오바이칼레인, 7-메톡시노르워고닌, 오록실론 A, 스쿨캅플라본 등이 있다. 염증을 가라앉히고, 항균효과가 있는 것으로 알려져 있다.

형개(Schizonepeta tenuifolia var. japonica)는 정유 1-2%를 함유하며 d-Menthone을 주성분으로 하고, dℓ-Menthone, ℓ-limonene, ℓ-pulegone, ℓ-isomenthone, isopulegone, α-pinene, β-pinene, d-Limone, d-Limonene, caryophyllene, β-elememe, β-humulene, schizo-nepetoside A, B, C, D, E, diosmetin, hesperetin, luteolin이 들어 있다. 염증을 가라 앉히고, 혈액순환을 개선하는 효과가 있다.

본 발명에 있어 생약 추출물의 제조는 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개를 각각 1~10 중량비로 하고, 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 각각 5~10 중량비로 한 혼합생약을 물, 에탄올 또는 그 혼합물로 추출하는 것에서 시작한다. 먼저, 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개의 경우 추출 용매로서 에탄올의 농도가 바람직하게는 30~80%(v/v)가 되게 하고 추출하는 것이 좋으며(이를 "추출물 1"이라고 한다), 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초의 경우 에탄올의 농도가 바람직하게는 70~95%(v/v)가 되게 하여 추출하는 것(이를 "추출물 2"라고 한다.)이 좋다. 그 이유는 에탄올의 농도에 따라 추출되는 성분의 극성이 달라지기 때문이다. 이는 활성성분의 추출양에도 영향을 주지만, 화장료 조성물을 제조할 때 조성의 안정성에도 많은 영향을 미친다. 추출용매의 양으로서는 생약재의 무게의 5~10배수를 가하고, 온도는 10~40℃에서 추출시간은 5~24시간 추출하여 가용성분을 추출한다. 추출물 1과 2를 회수하여 추출액의 부피가 2/3~1/2이 되도록 농축하고, 각각 1:1의 부 피비로 혼합하고, 그 혼합 농축액에 다시 물을 동량 가하고 농축하여 부피를 1/5이하가 되게 한 다음, 여기에 1,3-부틸렌글리콜을 혼합농축액 부피의 2~8배수를 가하고, 가용성분을 회수하여 1,3-부틸렌글리콜 분획을 완성한다. 여기에 감비르 추출물에서 정제된 순도 95%(w/w)이상의 카테킨을 0.1~10%(w/v) 가하고, 용해하여 얻어지는 것을 주된 제조방법으로 한다.

상기의 고순도 카테킨이 용해된 1,3-부틸렌글리콜 분획물을 주요 기능성 성분으로 하여 통상의 약학용 담체 또는 화장품 제조용 기제물질과 혼합하여 가려움증 완화, 항염, 항균 효능윽 가지는 화장료 조성물을 제공하게 된다.

상기의 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개로 구성되는 군으로 부터 하나 이상의 추출물 또는 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초로 구성되는 군으로 부터 하나 이상의 추출물 만으로 구성되는 경우 항균, 항산화 및 피부 보습효능에 있어 뛰어난 효과를 얻을 수 없다. 따라서 본 발명에서는 이들 추출물을 그룹으로 나누어 2개로 구분하고 별도의 용매조성으로 추출한 다음 혼합하고 재추출, 분획하여 기능성이 뛰어난 추출물 분획을 완성하게 되었다.

카테킨의 경우 녹차에 많이 함유되어 있다고 알려져 있으며 (-)-epicatechin(EC), (-)-epicatechin-3-gallate(ECG), (-)-epigallocatechin(EGC), (-)epigallocatechin--gallate(EGCG)가 주요성분으로 알려져 있다. 그러나, 본 발명에서 기능성 성분으로 고순도 카테킨으로 사용한 것은 녹차에 함유된 플라보노이드류(또는 폴리페놀) 중 (-)-epicatechin(EC)과 그 이성질체로 알려진 (+)-catechin으로서 전체의 합이 순도로 95%(w/w) 이상이 되는 것이며 여기에는 일반적 으로 녹차에 함유된 주요 폴리페놀성분인 (-)-epicatechin-3-gallate(ECG), (-)-epigallocatechin(EGC), (-)epigallocatechin--gallate(EGCG)가 함유되어 있지 않다. 따라서 본 발명의 카테킨은 고순도이면서 녹차에서 유래된 카테킨 성분과는 다른 조성을 이루고 있다고 말할 수 있다. 본 발명의 고순도 카테킨은 (-)-epicatechin(EC)과 그 이성질체로 알려진 (+)-catechin이 함량비로 0.8~1.2 : 1의 비로 함유되어 있어 거의 유사한 비율로 함유되어 있다고 할 수 있다. 도 1에 카테킨의 화학적 구조를 보였다.

본 발명의 조성물은 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 피부 외용제에 일반적으로 사용되는 성분들, 예를 들면, 수용성 성분, 분말성분, 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하여 사용 가능하다. 또한, 종래의 아토피 피부 치료제에 많이 사용되어 온 세라마이드류, 지질성분, 하이드로코티손(hydrocortisone) 등의 스테로이드류, retynyl palmitate 등의 비타민 유도체, 토코페롤, 기타 식물추출물 등의 공지의 유화제류를 이용하여 리포좀의 형태로 만들거나 파이토스핑고신 등에 포접시켜 병용도 가능하다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형은 읨의로 선택할 수 있으되, 종래의 화장료 제형인 피부외용연고, 에센스, 미백크림, 로션, 에멀젼, 팩, 화장수, 스킨, 크림, 세럼, 미용비누, 헤어토닉, 전신세정제, 오일젤과 같은 다양한 형태로 제조할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 점증제, 색소, 방부제 및 향료 등으로 이루어지는 군으로 부터 1종 이상 선택되는 첨가제를 추가로 포함하는 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

또한, 본 발명에 사용된 생약재들은 오래 전 부터 한방에서 주로 사용해 오던 재료들로서 본 발명에서 사용한 용량 범위 내에서 피부 외용제로 사용 시 인체에 대한 안전성이 확인되어 있으며, 피부 및 점막, 두피에 대한 자극은 거의 없는 것으로 알려져 있다. 특히 본 발명의 조성물은 아토피 피부염의 증상을 완화, 개선이 필요한 소아, 청소년 등에 유용한 생약추출물로서 건강기능식품의 형태로도 제조 가능하다.

본 발명의 추출물 1, 2 및 카테킨을 함유하는 1,3-butyleneglycol(이하 BG라고 함.)분획 조성물은 가려움증을 진정시키며, 항균성 및 항염성으로 염증의 발생 및 진행을 억제하며, 피부의 보습성을 제공하며, 피부의 면역기능을 조절함에 의하여 아토피 환자의 증상을 완화 및 개선시키며 궁극적으로 치유할 수 있게하는 우수한 효과를 가진다. 또한, 가려움증 및 염증의 발생 및 악화에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 IgE, TNF-alpha, IL-4, IL-13, IL-5 등을 감소시킴에 의해 이러한 효과가 나타나므로 아토피 질환 환자를 포함하여 염증성 피부질환자에 있어서도 우수한 효과를 나타낸다.

이하 본 발명의 조성물을 하기의 실시예로서 상술하고자 한다. 다만, 하기의 실시예에 의하여 본 발명의 범위가 한정되지는 않는다.

실시예 1. 추출물 1의 제조

인진쑥 100g, 어성초 100g, 몰약 80g, 황금 80g, 형개 90g을 추출 용매로서 50%(v/v) 에탄올을 4.5L 가하고, 25℃에서 24시간 동안 추출하였다. 추출액을 3.7L 얻고, 이를 진공농축하여 2L가 되게 하였다. 이것이 "추출물1"이 된다.

실시예 2. 추출물 2의 제조

금은화 100g, 감초 50g, 치자 50g, 연교 70g, 황백 90g, 자초 100g을 추출 용매로서 85%(v/v) 에탄올을 4.5L 가하고, 20℃에서 24시간 동안 추출하였다. 추출액을 3.5L 얻고, 이를 진공농축하여 2L가 되게 하였다. 이것이 "추출물2"가 된다.

실시예 3. BG 분획물의 제조

상기 실시예 1.에서 얻어진 추출물 1과 실시예 2.에서 얻어진 추출물 2를 각각 1L씩 혼합하고 여기에 물을 2L 가하고 농축하여 최종 농축액의 부피를 500ml이 되도록 하였다. 여기에 BG를 2.5L가하여 용해되는 물질을 회수하였다. 이 액을 BG분획물로 하였으며, 최종적으로 고형분의 농도가 4.5%(w/v)이면서 부피가 2.1L를 얻었다. 여기에 순도 98.8%(w/w)인 카테킨을 168g 가하고 완전 용해 시켰다. 이를 최종적으로 완성된 본 발명의 조성물로 하였으며, "추출물3"이라 명명하였다.

실시예 4. 항균효과의 확인

상기 실시예 1에서 얻어진 추출물1, 실시예 2에서 얻어진 추출물2 및 실시예 3에서 얻어진 추출물3을 대상으로 항균효과를 비교하였다. 그 결과를 다음의 표에 보였다. 사용한 균으로는 피부에 상존하는 균인 Staphylococcus aureus, 화장품의 주요 오염원으로 알려진 Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis를 대상으로 하였다. 실험방법은 일반적으로 항균효과의 확인에 이용되는 페이퍼디스크를 이용한 클리어존의 반지름을 비교하는 방식으로 하였다.

	Escherichia coli KCTC 1923	Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442	Bacillus subtilis ATCC 14593	Staphylococcus aureus ATCC 65389
추출물 1(10ug)	1.1±0.3	0.2±0.08	2.5	3.2
추출물 2(10ug)	1.8±0.3	0.22±0.01	1.5	0.8
추출물 3(10ug)	3.9±0.2	2.5±0.2	8.6	5.9
추출물 1(50ug)	3.3±0.5	0.23±0.02	5.2	5.2
추출물 2(50ug)	4.5±0.8	0.25±0.03	3.9	1.1
추출물 3(50ug)	8.2±0.6	3.9±0.02	12.5	9.5
추출물 1(100ug)	5.2±0.2	0.33±0.02	6.2	6.9
추출물 2(100ug)	7.8±0.6	0.38±0.03	4.5	1.2
추출물 3(100ug)	12.5±0.4	5.6±0.02	13.9	12.9

그 결과 상기 표1에서 알 수 있는 바와 같이 본 발명의 추출물인 "추출물3"이 매우 뛰어난 항균효과를 보임을 알 수 있었다.

실시예 5. 항염효과의 측정

상기 실시예4에서 얻어진 조성물을 이용하여 항염효과를 검증하였다, 항염효과의 측정은 아라키돈산(Arachidonic acid)을 이용한 평가법(Crummey, A., G.P.Harper, E.A.Boyle and F.R.Mangan, Inhibitory effect of arachidonic acid nduced ear edema as a model for assessing topical antiinflannatory compound. Agents and Actions, 1987, 20:69-76)을 이용하였다.

마우스(Hairless mouse) 25마리를 각각 5마리씩 5개의 군으로 구성하고 시료적용 전 양쪽 귀를 소독용 알콜로 세척하고 마이크로미터를 이용하여 측정하고, 상기 실시예4의 조성물, 실시예 1, 및 2의 조성물, 인도메타신(Indomethacin) 1.0%를 처리하는 비교군 및 아타키돈산만을 처리하는 음성대조군으로 나누어 실험을 실시하여 마우스의 귀 두께 평균치를 측정하였다. 도포하는 시료의 양은 20㎕씩 1일 1회, 5일간 도포하였다. 최종 도포 후 1시간 경과 후, 좌측귀에는 에탄올을, 우측귀에는 아라키돈산을 2mg씩 도포하고 도포 1시간 후 귀의 부종(edema)의 정도를 마이크로미터를 이용하여 측정하였다, 처리군의 죄측귀는 시료 자체에 의한 염증 유발정도를 알아보기 위한 대조군으로 이용하였다. 항염효과는 아라키돈산만을 처리한 대조군을 기준으로 부종 억제 정도를 판정하였으며, 그 결과를 하기 표2에 보였다.

억제율은 다음의 계산식에 의하여 계산하였다.

억제율(%)= (A-B)/A * 100

A : 대조군 귀의 평균두께 변화

B : 처리구의 귀의 평균 두께 변화

		농도(%)	억제율(%)
본발명의 추출물3	실시예4	-	37.9
비교군	실시예1	-	15.9
비교군	실시예2	-	12.2
양성비교군	인도메타신	1.0	38.5
음성대조군	아라키돈산	2mg	0

상기 표2에서 알 수 있는 바와 같이 본 발명의 추출물인 추출물3은 의약품으로서 항염효과가 우수한 물질인 인도메타신과 거의 유사한 항염효과를 보였으며, 이는 화장료 조성물로 사용하기에 매우 뛰어난 결과임을 알 수 있었다.

실시예 6. 마우스를 이용한 아토피 완화 효과 시험.

상기 실시예1,2,3에서 제조된 조성물의 아토피에 대한 개선효과를 알아보기 위하여 사람의 아토피 병변과 가장 유사한 병변을 갖는 마우스에서의 치료효과를 검증하기 위하여 7주령의 체중 30~32g인 Nc/Nga 마우스를 사용하였다. Nc/Nga 마우스의 등 부위를 제모하고 아토피유발인자로 알려진 DNCB(2,4-dinitrochloronbenzene) 1%를 실험 시작 3일 전 200mg씩 귀, 등 부분에 도포하고 3일 후 부터는 상기의 추출물 1,2,3을 100mg 씩 매일 도포하여 주었다. DNCB는 0.2%의 농도로 주 2회, 150mg씩 지속적으로 도포하여 주었고, 10주에 걸쳐 주 1회 한번씩 아토피 관련 평가항목(홍반, 짓무름, 태선화) 들을 점수화(0:무증상, 1:경증, 2:중증, 3:매우중증)하여 평균값으로 평가하였고, 그 결과를 도2에 보였다. 도2에 나타난 바와 같이 본 발명의 추출물인 추출물3에서 매우 뛰어난 아토피 개선효과를 보임을 알 수 있었다.

10주째 마우스의 안면 및 귀를 긁는 횟수를 20분간 측정하여 아래 표3에 나타내었다.

	20분간 긁은 횟수(평균)	억제율(%)
Control(-)	10.5	-
DNCB	125	0
추출물1	44.5	70.3
추출물2	55.3	60.9
추출물3	25.7	86.7

상기 표3에 나타난 바와 같이 본 발명의 추출물인 추출물3은 매우 뛰어난 가려움증 억제효과를 보임을 알 수 있었다.

10주가 경과된 후 마우스의 혈액에서 분리한 Serum에서의 IgE, TNF-alpha 값을 측정하여 비교 하였다. 이들 값은 ELISA법을 이용하여 분석하였다. 그 결과를 다음의 표4에 보였다.

	IgE(ng/ml)	TNF-α(pg/ml)	IL-4(ng/ml)
Control(-)	41.5	380	129
DNCB	115	501	198
추출물1	98	425	152
추출물2	91	439	149
추출물3	81	399	132

상기 표4에 나타난 바와 같이 본 발명의 추출물인 추출물3은 아토피 및 염증인자로 알려진 IgE, TNF-α, IL-4의 값을 현저하게 저하시키는 결과를 보였으며, 이를 토대로 본 발명의 추출물은 매우 뛰어난 아토피 치료용 소재로 이용될 수 있음을 알 수 있다.

실시예 7. 리포좀의 제조

실시예 3의 추출물을 함유하는 로션을 제조하였다. 본 발명의 추출물인 추출물3을 20%, 프로필렌글리콜 40%, 수첨레시틴 5%, 스테아린산 1%, 실리콘오일 2%, 스쿠알란 2%, 세라마이드 5%, 나머지는 정제수를 각각 부피비로 가하여 3,000rpm하에서 2분간 균질화 하여 리포좀을 제조하였다.

실시예 8. 크림의 제조

상기 실시예 7의 리포좀 5%, 호호바오일 5%, 쉐어버터 2%, 해바라기오일 3%, 실리콘오일 2%, 아보카도오일 2%, 세르아르알콜 1%, 히아루론산 1%, EDTA 0.02%, 올리브유화왁스 5%, BG 1% 그리고, 나머지는 정제수를 각각 부피비로 가하고 혼합하여 크림을 제조하였다.

실시예 9. 로션의 제조

상기 실시예 7의 리포좀 1%, 호호바오일 3%, 쉐어버터 2%, 실리콘오일 0.5%, 히아루론산 1%, BG 0.5%, GMS 1.5%, Poly80 1%, 세르아르알콜 5% 그리고, 나머지는 정제수를 각각 부피비로 가하고 혼합하여 로션을 제조하였다.

실시예 10. 에센스의 제조

상기 실시예 7의 리포좀 8%, 스쿠알란 5%, 호호바오일 3%, 쉐어버터 2%, 마카다미아 넛 오일 3.5%, 히아루론산 3%, BG 0.5%, 글리세린 3.5%, Poly80 1%, 세르아르알콜 5% 그리고, 나머지는 정제수를 각각 부피비로 가하고 혼합하여 에센스를 제조하였다.

본 발명은 아토피 관련 질환의 개선 및 치료를 위한 화장품의 제조에 이용될 수 있으며, 화장품으로 제품화 될 수 있으며, 로션, 크림, 에센스를 포함한 기본적인 화장품 외에 화장수, 젤, 두발용 제품 등에 폭넓게 이용될 수 있다.

도 1 : 카테킨의 화학적 구조

도 2 : 아토피 유발인자로 아토피를 유발한 마우스에서의 Response 결과이다.

Claims (7)

1. 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개를 각각 1~10 중량비로 하고, 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 각각 5~10 중량비로 한 혼합생약을 물, 에탄올 또는 그 혼합물로 추출한 추출액의 농축액에서 1,3-부틸렌글리콜 분획물을 얻고 여기에 감비르유래의 카테킨을 0.1~10%(w/v) 첨가하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 아토피 피부질환 개선용 조성물
2. 제 1 항에 있어 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개를 각각 1~10 중량비로 하고, 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초를 각각 5~10 중량비로 한 혼합생약을 물, 에탄올또는 그 혼합물로 추출하고, 용매를 제거하여 고형분의 농도가 20~50%(w/v)가 되게 하고, 여기에 1,3-부틸렌글리콜을 가하여 가용물을 얻고, 여기에 감비르 추출물에서 정제된 순도 95%(w/w)이상의 카테킨을 0.1~10%(w/v) 첨가하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 아토피 피부질환 개선용 조성물의 제조방법
3. 제 2 항에서 인진쑥, 어성초, 몰약, 황금, 형개의 추출용 용매는 에탄올의 농도가 30~80%(v/v)인 것을 특징으로 하는 아토피 피부질환 개선용 조성물.
4. 제 2 항에서 금은화, 감초, 치자, 연교, 황백, 자초의 추출용 용매는 에탄올의 농도가 70~95%(v/v)인 것을 특징으로 하는 아토피 피부질환 개선용 조성물.
5. 제 1 항에서 카테킨이 (+)-catechin과 (-)-epicatechin으로 구성되는 것을 특징으로 하는 아토피 피부질환 개선용 조성물.
6. 제 1 항의 조성물을 포함하는 아토피 피부질환 개선용 화장료
7. 제 6 항에 있어서 화장료 조성물이 피부외용연고, 에센스, 로션, 크림, 에멀젼, 팩, 화장수, 세럼, 미용비누, 헤어토닉, 전신세정제, 오일젤로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 아토피 피부질환 개선용 화장료.

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