KR20110028445A

KR20110028445A - 퇴행성 및 염증성 질병의 치료에 유용한 축합된 피라진 화합물

Info

Publication number: KR20110028445A
Application number: KR1020107027298A
Authority: KR
Inventors: 마틴 제임스 인그리스 앤드류; 마크 스튜어트 챔버스; 허브 밴 드 포엘; 그레고리 루이스 조셉 바
Original assignee: 갈라파고스 엔.브이.
Priority date: 2008-05-07
Filing date: 2009-05-06
Publication date: 2011-03-18
Also published as: IL209104A0; ZA201008759B; AU2009245731A1; CL2009001064A1; CO6321159A2; UY31813A; BRPI0912412A2; TW201002716A; AR071619A1; CR11823A; US8012983B2; PE20091880A1; WO2009135885A1; US20090286798A1; JP2011519897A; CA2723745A1; EA201071275A1; CN102036997A; MX2010011994A; EP2307426A1

Abstract

하기 화학식 Ia 및 Ib로 나타내는 화학식을 갖는 신규의 [1.2.4]트라이아졸로[1,5-a]피라진 및 이미다조[1,2-a]피라진 화합물을 개시한다:
화학식 Ia

화학식 Ib

상기 화합물을 약학 조성물로서 제조할 수 있으며, 인간을 포함한 포유동물에서, 비 제한적으로 통증, 염증 및 다른 증상들을 포함하는 다양한 병의 예방 및 치료에 사용할 수 있다.

Description

퇴행성 및 염증성 질병의 치료에 유용한 축합된 피라진 화합물{FUSED PYRAZINE COMPOUNDS USEFUL FOR THE TREATMENT OF DEGENERATIVE AND INFLAMMATORY DISEASES}

본 발명은 세린/쓰레오닌 키나제의 활성 부위에 결합할 수 있고 그 발현이 세포 외 기질(ECM)의 분해, 관절 퇴행 및 상기와 같은 분해 및/또는 염증을 수반하는 질병을 생성시키는 경로에 관련되는 축합된 피라진 화합물 부류에 관한 것이다.

세포 외 기질의 분해를 수반하는 질병으로는 비 제한적으로 건선성 관절염, 소아 관절염, 초기 관절염, 반응성 관절염, 골관절염, 류머티스성 관절염, 강직성 척추염, 골다공증, 건염 및 치주 질환과 같은 근 골격 질병, 암 전이, 기도 질병(COPD, 천식), 신장 및 간 섬유증, 죽상경화증 및 심부전과 같은 심혈관 질병, 및 신경염증 및 다발성 경화증과 같은 신경병이 있다. 주로 관절 퇴행을 수반하는 질병으로는 비 제한적으로 건선성 관절염, 소아 관절염, 초기 관절염, 반응성 관절염, 류머티스성 관절염, 골관절염 및 강직성 척추염이 있다.

류머티스성 관절염(RA)은 관절 구조의 염증 및 파괴를 특징으로 하는 만성적인 관절 퇴행성 질병이다. 상기 질병이 억제되지 않으면, 관절 기능의 상실로 인한 실질적인 불구 및 통증, 및 심지어 조기 사망에 이른다. 따라서 RA 치료의 목적은 상기 질병을 늦추는 것이 아니라 관절 파괴를 중지시키기 위한 완화에 이르는 것이다. 상기 질병 결과의 중증도 외에, RA의 높은 이환율(세계적으로 성인의 ∼0.8%가 걸린다)은 높은 사회경제적인 영향을 의미한다. (RA에 대한 고찰에 관하여, 문헌[Smolen and Steiner(2003); Lee and Weinblatt(2001); Choy and Panayi(2001); O'Dell(2004) and Firestein(2003)]을 참조하시오).

RA가 자가면역질병임은 널리 인정되고 있지만, 상기 질병의 '개시 단계'를 r구동하는 정확한 기전에 관하여 일치된 바는 없다. 알려진 것은 초기 촉발제(들)가, 감염되기 쉬운 숙주에서, 다양한 세포 유형들(B-세포, T-세포, 대식세포, 섬유모세포, 내피 세포, 수지상 세포 및 다른 것들)의 활성화를 유도하는 연속적인 사건들을 매개한다는 것이다. 부수적으로, 다양한 사이토킨들(예를 들어 TNF-α, IL-6, IL-1, IL-15, IL-18 및 다른 것들)의 증가된 생산이 관절 및 상기 관절 주변 조직들에서 관찰된다. 상기 질병이 진행하면, 세포 활성화 및 사이토킨 생산 캐스케이드가 저절로 계속되게 된다. 상기 초기 단계에서, 관절 구조의 파괴는 이미 매우 분명하다. 상기 환자의 30%는 진단 시에 골 미란의 방사선 사진상 증거를 가지며 상기 비율은 2 년 후에 60%까지 증가한다.

RA 환자의 관절에 대한 조직학적 분석은 RA-관련된 분해 과정에 관계된 기전들을 명백히 입증한다. 상기 분석은 RA-관련된 관절 분해에 원인이 되는 주요 효과기가 판누스임을 보이며, 상기 판누스에서 활막 섬유모세포는 다양한 단백질분해 효소들을 생산함으로써 연골 및 골 미란의 제 1 구동자이다. 관절은 전통적으로 연골 층 상에 이어지고 활막 및 관절 피막에 의해 둘러싸인 2 개의 인접한 뼈를 함유한다. 진행된 RA 환자에서, 상기 관절의 활막은 상기 활막 섬유모세포의 증식 및 T-세포, B-세포, 단핵구, 대식세포 및 호중구와 같은 단핵 세포들의 침윤으로 인해, 상기 판누스가 형성될 정도로 크기가 증가한다. 상기 판누스는 인접한 연골의 분해를 매개하여 관절 공간을 좁아지게 하고, 인접한 뼈와 연골에 침범할 가능성을 갖는다. 뼈 및 연골 조직은 각각 주로 I 또는 II 형 콜라겐으로 구성되므로, 상기 판누스 파괴 및 침습 성질은 콜라겐 분해성 프로테아제, 주로 기질 메탈로 프로테이나제(MMP)의 분비에 의해 매개된다. 상기 연골 아래 및 이에 인접한 뼈의 미란이 또한 상기 RA 과정의 일부이며, 이는 주로 뼈와 판누스 접촉면의 파골세포의 존재로부터 발생한다. 파골세포는 뼈 조직에 부착 시 폐쇄된 구획을 형성하고, 이 안에서 상기 뼈 조직을 분해하는 프로테아제(카텝신 K, MMP9)를 분비하는 다핵 세포이다. 상기 관절 중의 파골세포 집단은 활성화된 SF 및 T-세포에 의한 NFκB 리간드(RANKL)의 수용체 활성화제의 분비에 의해 유도된 전구체 세포로부터 조골세포 형성에 의해 비정상적으로 증가한다.

다양한 콜라겐 유형들이 세포 외 기질(ECM)의 안정성을 한정하는데 중요한 역할을 한다. 예를 들어 I형 콜라겐 및 II형 콜라겐은 각각 뼈와 연골의 주요 성분이다. 콜라겐 단백질은 전형적으로는 콜라겐 피브릴이라 칭하는 다량체 구조로 편제된다. 천연 콜라겐 피브릴은 단백질 분해적 절단에 매우 내성이다. 단지 몇 가지 유형의 ECM-분해 단백질들(MMP 및 카텝신)만이 천연 콜라겐을 분해하는 능력을 갖는 것으로 보고되었다. 카텝신 중에서도, 주로 파골세포에서 활성인 카텝신 K가 가장 잘 특성화되어 있다. MMP 중에서는, MMP1, MMP2, MMP8, MMP13 및 MMP14가 콜라겐 분해 성질을 갖는 것으로 공지되어 있다. 활막 섬유모세포(SF)에 의한 MMP1의 증가된 발현과 관절염 질병의 진행 간의 상관성은 잘 확립되어 있으며 이는 관절 미란 진행을 예견한다(Cunnane et al., 2001). 따라서 RA와 관련하여, MMP1은 고도로 관련된 콜라겐 분해 단백질이다. 시험관 내에서, RA 병리학에 관련된 사이토킨(예를 들어 TNF-α 및 IL1β)에 의한 배양된 SF의 처리는 상기 세포에 의한 MMP1의 발현을 증가시킬 것이다(Andreakos et al., 2003). 따라서 SF에 의해 발현된 MMP1 수준의 모니터는, 상기 수준이 생체 내에서 연골 분해에 원인이 될 수 있는 미란성 표현형에 대한 SF의 활성화를 가리키므로, RA 분야에 적절한 정보이다. SF에 의한 MMP1 발현의 억제는 RA의 치료에 대한 귀중한 치료학적 접근을 나타낸다.

ECM-분해 단백질의 활성은 또한, 예를 들어 관절의 분해를 수반하는 다른 질병들로서, RA와 상이한 다양한 질병들의 진행에 원인이거나 이와 관련이 있을 수 있다. 이러한 질병으로는 비 제한적으로 건선성 관절염, 소아 관절염, 초기 관절염, 반응성 관절염, 골관절염 및 강직성 척추염이 있다. 본 발명에 개시된 바와 같이 MMP의 발현에 관련된 표적을 사용하여 본 발명에 따라 동정된 화합물에 의해 치료될 수 있는 다른 질병은 골다공증, 건염 및 치주 질환과 같은 근 골격 질병(Gapski et al., 2004), 암 전이(Coussens et al, 2002), 기도 질병(COPD, 천식)(Suzuki et al., 2004), 폐, 신장 섬유증(Schanstra et al., 2002), 만성 간염과 관련된 간 섬유증(Reiff et al., 2005), 죽상경화증 및 심부전과 같은 심혈관 질병(Creemers et al., 2001), 및 신경염증 및 다발성 경화증과 같은 신경병(Rosenberg, 2002)이다. 상기와 같은 질병을 앓고 있는 환자들은 상기 ECM의 안정화(상기를 분해로부터 보호함으로써)가 이로울 수 있다.

마이토젠-활성화된 단백질 키나제-활성화된 단백질 키나제 5(MAPKAPK5 또는 PRAK)로서 동정된 471-아미노산 세린/쓰레오닌 키나제는 넓은 조직 구획에서 발현된다. 상기 단백질은 N-말단 단부에 그의 촉매 도메인을 함유하고 그의 C-말단 단부에는 핵 국소화 신호(NLS) 및 핵 배출 신호(NES) 모두를 함유한다. 내생적인 MAPKAPK5는 세포질 중에 우세하게 존재하나, 상기 세포의 스트레스 또는 사이토킨 활성화가 핵 내로의 그의 전좌를 매개한다(New et al., 2003). 이 사건은 MAPKAPK5의 인산화에 의존한다. Thr182는 MAPKAPK5의 조절 인산화 부위이다. p38α 키나제는 과발현 환경에서 MAPKAPK5를 인산화할 수 있지만, 내생적인 MAPKAPK5를 사용한 실험들은 이러한 가설을 지지하지 못한다(Shi et al., 2003). 생육 가능하고 번식 가능한 MAPKAPK5 녹아웃 마우스가 생성되었다. 상기 마우스의 표현형은 p38α에 의해 조절되는 MAPKAPK5 관련된 키나제인 MAPKAPK2 결핍 마우스의 표현형과 매우 상이하다(Shi et al., 2003). 이는, 각 단백질의 작용이 다르며 어느 키나제도 다른 것의 활성을 보상할 수 없음을 가리킨다. 이와 함께, MAPKAPK5 및 MAPKAPK2는 중복되지 않는 역할로 별개의 표적을 나타낸다. MAPK6(또한 ERK3이라고도 칭함)이 최근에 MAPKAPK5에 대해 생리학적으로 적합한 기질로서 동정되었으며, 이는 새로운 신호 전달 경로를 한정한다(Seternes et al., 2004).

NSAIDS(비-스테로이드성 소염 약물)는 RA와 관련된 통증을 감소시키고 상기 환자의 삶의 질을 개선하는데 사용된다. 그러나, 상기 약물은 상기 RA-관련된 관절 파괴에 제동을 걸 수 없을 것이다.

코르티코스테로이드는 방사선 사진에 의해 검출된 바와 같이 RA의 진행을 감소시키는 것으로 밝혀졌으며 저 용량으로 RA 환자의 일부(30 내지 60%)를 치료하는데 사용된다. 그러나, 심각한 부작용들이 코르티코스테로이드의 장기간 사용과 관련된다(피부 얇아짐, 골다공증, 백내장, 고혈압 및 고지혈증).

합성 DMARD(질병-개질성 류머티스 치료 약물)(예를 들어 메토트렉세이트, 레플루노미드, 설파살라진)는 주로 RA의 면역-염증 성분과 맞싸운다. 주요 단점으로서, 상기 약물은 단지 제한된 효능을 갖는다(관절 파괴가 DMARD에 의해 단지 늦춰질 뿐이며 차단되지 않아 장기적인 질병 진행이 계속된다). 효능의 결여는 평균적으로 상기 환자의 단지 30%만이 메토트렉세이트 24 개월 치료 후 ACR50 점수를 성취한다는 사실에 의해 지시된다. 이는, 미국 류머티스학회에 따르면, 상기 환자의 단지 30%만이 그 증상의 50% 개선을 성취함을 의미한다(O'Dell et al., 1996). 또한, DMARD의 정확한 작용 기전은 종종 불명확하다.

생물학적 DMARD(인플릭시맵, 에타너셉트, 아달리뮤맵, 리툭시맵, 아바타셉트)는 상기 RA 병태생리학에 중요한 역할을 하는 사이토킨(예를 들어 TNF-α) 또는 세포(예를 들어 B-세포 또는 T-세포)를 불활성화시키는 치료 단백질이다(Kremer et al., 2003; Edwards et al., 2004). 상기 TNF-α-차단제(인플릭시맵, 에타너셉트, 아달리뮤맵) 및 메토트렉세이트 복합 요법이 현재 이용 가능한 가장 유효한 RA 치료이지만, 상기 요법이 12 개월 치료 후에조차도 환자의 50 내지 60%에서 50%의 질병 증상 개선(ACR50)을 성취할 뿐임은 인상적이다(St Clair et al., 2004). 항-TNF-α 약물에 대한 일부 불리한 사건들의 경고는 상기 유형 약물과 관련된 부작용들을 비춘다. 감염(결핵), 혈액학적 사건들 및 탈수초성 질환에 대한 증가된 위험이 상기 TNF-α 차단제에 대해 개시되었다(또한 문헌[Gomez-Reino et al., 2003] 참조). 상기 심각한 부작용들 외에, 상기 TNF-α 차단제는 상기 생물학적 치료제 부류의 일반적인 단점들(불쾌한 투여 방식(주입 부위 반응을 동반하는 빈번한 주사) 및 높은 생산 비용)을 또한 공유한다. 최근 개발 단계에 있는 더 새로운 작용제들은 사이토킨, 예를 들어 IL-6, T-세포 동시-자극 분자 및 B-세포를 표적으로 한다. 이들 작용제의 효능은 상기 TNF-α 차단제의 효능과 유사할 것으로 예상된다. 다양한 표적화된 요법들이 유사하지만 제한된 효능을 갖는다는 사실은 RA에 대해 다양한 발병 인자들이 존재함을 암시한다. 이는 또한 RA와 관련된 병원성 사건들의 이해 부족을 가리킨다.

RA에 대한 현행 요법들은 제한된 효능(상기 환자의 30%에 대해 적합한 요법이 존재하지 않는다)으로 인해 만족스럽지 않다. 이는 완화를 성취하기 위해 추가적인 전략을 요구한다. 완화는 후유증이 점진적인 관절 손상 및 따라서 점진적인 불구의 위험성을 갖기 때문에 필요하다. RA 질병의 면역-염증 성분(현재 RA 치료에 사용되는 약물의 주요 표적을 나타낸다)을 억제하는 것은 상기 질병의 주요 특징인 관절 분해를 봉쇄하지 못한다.

US 2005/0009832는 MAPKAPK5를 포함한, 단백질 키나제의 조절제로서 치환된 이미다조[1,2-a]피라진-8-일-아민을 개시한다. WO02/056888은 몇몇 사이토킨의 발현을 조절할 수 있는 TNF 조절제로서 MAPKAPK5의 억제제를 개시한다. 이들 종래 기술 참고문헌들 중 어느 것도 하기 본 발명에 개시된 화합물 부류의 범위 내에 있는 임의의 화합물들을 개시하지 않는다.

본 발명은 MAPKAPK5가 MMP1의 발현을 생성시키는 경로에서 작용하고 MAPKAPK5 활성의 억제제, 예를 들어 본 발명의 화합물이 MMP 활성의 비정상적으로 높은 발현을 수반하는 질병의 치료에 유용하다는 발견에 근거한다.

본 발명의 화합물은 일반적으로 5 번 위치가 아릴 또는 헤테로아릴 그룹에 의해 치환되고 8 번 위치가 헤테로아릴아미노 그룹에 의해 치환된 [1.2.4]트라이아졸로[1,5-a]피라진 및 이미다조[1,2-a]피라진으로서 개시될 수 있다.

본 발명의 화합물은 보다 적은 독성, 양호한 흡수, 양호한 반감기, 양호한 용해성, 낮은 단백질 결합 친화성, 보다 적은 약물-약물 상호작용, 및 양호한 대사 안정성을 나타낼 수 있다. 특정 태양에서, 본 발명의 화합물은 약물학적 성질의 뜻밖의 현저한 개선, 특히 개선된 효능 및 개선된 허용성을 나타낸다.

보다 특히, 본 발명은 하기 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관한 것이다:

[화학식 Ia]

[화학식 Ib]

상기 식들에서,

각각의 W, W', Y 및 Y'는 독립적으로 CR^2a 또는 N이나; 단 W, W', Y 및 Y' 중 2 개 이하가 동시에 N일 수 있고;

X는 N 또는 CH이고;

L은 단일 결합, -CO-, -SO-, -SO₂-, -N(R^2c)CO- 및 -N(R^2c)SO₂- 중에서 선택되고;

고리 P는 치환되거나 치환되지 않은

이고;

R¹은 H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬이고;

각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고;

각각의 R^2c는 H 및 C₁-C₆ 알킬 중에서 선택되고;

R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이고; 각각의 m1, m2 및 m3은 독립적으로 1 또는 2이며;

R³은 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되거나 치환되지 않은 사이클로알킬, 치환되거나 치환되지 않은 헤테로사이클로알킬, 치환되거나 치환되지 않은 아릴, 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.

하나의 실시태양에서, 화학식 I 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R¹은 H, Me, Et, i-Pr 또는 CF₃이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R¹은 H이다.

또 다른 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R³은 치환되거나 치환되지 않은 페닐 중에서 선택된다.

또 다른 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R³은 치환되거나 치환되지 않은 피리딜 중에서 선택된다.

또 다른 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R³은 페닐, 인돌릴, 아이소이놀릴, 피롤릴, 퓨라닐, 티에닐, 피라졸릴, 옥사졸릴 및 티아졸릴 중에서 선택되고, 이들은 각각 치환되거나 치환되지 않을 수도 있다.

바람직한 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R³은 치환되거나 치환되지 않은 퓨라닐이다.

추가의 태양에서, 본 발명은 본 발명의 화합물, 및 약학 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 본 발명의 상기 태양에서, 상기 약학 조성물은 본 발명에 개시된 본 발명의 화합물들 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 더욱이, 본 발명에 개시된 약학 조성물 및 치료 방법에 유용한 본 발명의 화합물들은 모두 제조 및 사용 시 약학적으로 허용 가능하다.

본 발명의 또 다른 태양은 염증, 콜라겐 분해를 수반하는 질병, 및 특히 비정상적인 기질 메탈로 프로테아제(MMP1) 및/또는 마이토젠-활성화된 단백질-키나제 활성화된 단백질 키나제 5(MAPKAPK5) 활성을 특징으로 하는 질병(이 중에서 류머티스성 관절염(RA)이 특히 상기와 같은 질병이다)의 치료에 유용한, 치료 방법, 약학 조성물 및 상기와 같은 조성물의 제조에서 본 발명 화합물의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

다른 목적 및 이점들은 하기 예시적인 도면들과 함께 고려되는, 다음의 상세한 설명을 고려하여 당해 분야의 숙련가들에게 자명해질 것이다.

퇴행성 및 염증성 질병의 치료에 유용한 축합된 피라진 화합물을 제공하며, 인간을 포함한 포유동물에서, 비 제한적으로 통증, 염증 및 다른 증상들을 포함하는 다양한 병의 예방 및 치료에 사용할 수 있다.

도 1은 건강한 관절과 RA 환자의 관절 간의 현저한 조직학적 차이를 나타내는 다이어그램이다.
도 2는 류머티스성 관절염 병리학에 연루된 사이토킨들에 의해 촉발되는 활막 섬유모세포에서의 MMP1의 증가된 발현을 나타내는 차트이다.
도 3은 공지된 소염 화합물에 의한, SF에 의한 MMP1의 "TNF-α-계 촉발제"-유도된 발현의 용량-의존성 억제를 나타내는 그래프이다.
도 4는 MAPKAPK5를 표적화하는 Ad-siRNA 바이러스에 의한 세포의 감염에 의한, SF 중의 MAPKAPK5 발현의, 단백질 수준의 감소를 나타내는 젤이다.
도 5는 MAPKAPK5를 표적화하는 Ad-siRNA 바이러스에 의한, SF에 의한 MMP1 발현의 '복합 촉발제' 유도된 수준의 감소를 나타내는 차트이다.
도 6A는 본 발명의 화합물을 사용하여 수행된 허용성 연구의 결과를 나타내는 그래프로서, 여기에서 측정된 효과는 전체 체중에 대한 것이었다.
도 6B는 비교용 화합물에 대한 허용성 연구의 결과를 나타내는 그래프이다.
도 7은 패혈증에서 담즙 분비 중지를 유발하는 것으로 공지된 LPS(세균성 리포폴리사카라이드)의 주입 후에 본 발명의 화합물에 의해 획득된 TNF 알파 방출의 억제 퍼센트를 나타내는 그래프이다. 여기에서 기준은 널리 공지된 덱사메타손(100% 억제)(DEX)이다.

정의

하기의 용어들은 하기에 함께 제공되고 본 발명의 설명 및 의도된 범위를 이해하는데 유용한 의미들을 갖는 것으로 해석된다.

화합물, 상기와 같은 화합물을 함유하는 약학 조성물 및 상기와 같은 화합물 및 조성물의 사용 방법을 포함할 수 있는 본 발명을 개시하는 경우, 하기의 용어들(존재하는 경우)은 달리 나타내지 않는 한 하기의 의미를 갖는다. 또한 본 발명에 개시되는 경우 하기에 정의된 부분들 중 어느 하나가 다양한 치환체들로 치환될 수 있고 각각의 정의가 하기에 나타내는 바와 같은 그의 범위 내에서 상기와 같은 치환된 부분들을 포함하는 것으로 해석됨은 물론이다. 달리 나타내지 않는 한, "치환된"이란 용어는 하기에 나타내는 바와 같이 정의된다. "그룹" 및 "라디칼"이란 용어는 본 발명에 사용되는 경우 호환적으로 간주될 수 있음은 또한 물론이다.

"하나의"란 관사는 본 발명에서 상기 관사의 문법적 목적어 중 하나 또는 하나보다 많음(즉 하나 이상)을 지칭하는데 사용될 수 있다. 예로서 "하나의 동족체"는 하나 또는 하나보다 많은 동족체를 의미한다.

'아실' 또는 '알카노일'은 라디칼 -C(O)R²⁰을 지칭하며, 여기에서 R²⁰은 본 발명에서 정의한 바와 같은 수소, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬메틸, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 폼일, 아세틸, 사이클로헥실카보닐, 사이클로헥실메틸카보닐, 벤조일 및 벤질카보닐이 있다. 예시적인 '아실' 그룹은 -C(O)H, -C(O)-C₁-C₈ 알킬, -C(O)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -C(O)-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -C(O)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -C(O)-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이며, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이다.

'치환된 아실' 또는 '치환된 알카노일'은 라디칼 -C(O)R²¹을 지칭하며, 여기에서 R²¹은 독립적으로

·할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 또는

·C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아릴알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이며, 이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시로 치환된다.

'아실아미노'는 라디칼 -NR²²C(O)R²³을 지칭하며, 여기에서 R²²는 수소, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아릴알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이고, R²³은 본 발명에서 정의한 바와 같은, 수소, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아릴알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이다. 예시적인 '아실아미노'는 비 제한적으로 폼일아미노, 아세틸아미노, 사이클로헥실카보닐아미노, 사이클로헥실메틸-카보닐아미노, 벤조일아미노 및 벤질카보닐아미노를 포함한다. 예시적인 '아실아미노' 그룹은 -NR^21'C(O)-C₁-C₈ 알킬, -NR^21'C(O)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -NR^21'C(O)-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -NR^21'C(O)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -NR^21'C(O)-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이며, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이고 각각의 R^21'은 독립적으로 H 또는 C₁-C₈ 알킬을 나타낸다.

'치환된 아실아미노'는 라디칼 -NR²⁴C(O)R²⁵를 지칭하며, 여기에서

R²⁴는 독립적으로

·H, 할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 또는

·C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아릴알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이며, 이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시로 치환되고;

R²⁵는 독립적으로

·H, 할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 또는

·C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아릴알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이며, 이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록실로 치환되나; 단

R²⁴ 및 R²⁵ 중 하나 이상은 H 이외의 것이다.

'알콕시'는 그룹 -OR²⁶을 지칭하며, 여기에서 R²⁶은 C₁-C₈ 알킬이다. 특정한 알콕시 그룹은 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 아이소프로폭시, n-부톡시, 3급-부톡시, 2급-부톡시, n-펜톡시, n-헥속시 및 1,2-다이메틸부톡시이다. 특정한 알콕시 그룹은 저급 알콕시, 즉 탄소수 1 내지 6의 알콕시이다. 추가의 특정한 알콕시 그룹은 탄소수 1 내지 4를 갖는다.

'치환된 알콕시'는 본 발명에서 "치환된"의 정의에 인용된 그룹들 중 하나 이상으로 치환된 알콕시 그룹을 지칭하며, 특히 아미노, 치환된 아미노, C₆-C₁₀ 아릴, -O-아릴, 카복실, 시아노, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, 할로겐, 5 내지 10원 헤테로아릴, 하이드록실, 나이트로, 티오알콕시, 티오-O-아릴, 티올, 알킬-S(O)-, 아릴-S(O)-, 알킬-S(O)₂- 및 아릴-S(O)₂-로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 치환체, 예를 들어 1 내지 5 개의 치환체, 및 특히 1 내지 3 개의 치환체, 특히 하나의 치환체를 갖는 알콕시 그룹을 지칭한다. 예시적인 '치환된 알콕시' 그룹은 -O-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -O-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -O-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -O-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며, 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. 특정의 예시적인 '치환된 알콕시' 그룹은 OCF₃, OCH₂CF₃, OCH₂Ph, OCH₂-사이클로프로필, OCH₂CH₂OH, OCH₂CH₂NMe₂이다.

'알콕시카보닐'은 라디칼 -C(O)-OR²⁷을 지칭하며, 여기에서 R²⁷은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬알킬, 아르알킬, 또는 5 내지 10원 헤테로아릴알킬이다. 예시적인 "알콕시카보닐" 그룹은 C(O)O-C₁-C₈ 알킬, -C(O)O-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -C(O)O-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -C(O)O-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -C(O)O-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이며, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이다.

'치환된 알콕시카보닐'은 라디칼 -C(O)-OR²⁸을 지칭하며, 여기에서 R²⁸은

·C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬알킬, 또는 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬알킬(이들은 각각 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된다); 또는

·C₆-C₁₀ 아르알킬, 또는 5 내지 10원 헤테로아릴알킬이며, 이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시로 치환된다.

'-O-아릴카보닐'은 라디칼 -C(O)-OR²⁹를 지칭하며, 여기에서 R²⁹는 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₆-C₁₀ 아릴을 나타낸다. 예시적인 "-O-아릴카보닐" 그룹은 -C(O)O-(C₆-C₁₀ 아릴)이다.

'치환된 -O-아릴카보닐'은 라디칼 -C(O)-OR³⁰을 지칭하며, 여기에서 R³⁰은

·치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록실로 치환된 C₆-C₁₀ 아릴을 나타낸다.

'헤테로-O-아릴카보닐'은 라디칼 -C(O)-OR³¹을 지칭하며, 여기에서 R³¹은 본 발명에서 정의한 바와 같은 5 내지 10원 헤테로아릴을 나타낸다.

'치환된 헤테로-O-아릴카보닐'은 라디칼 -C(O)-OR³²를 지칭하며, 여기에서 R³²는

·치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴을 나타낸다.

'알킬'은 탄소수 1 내지 20의 직쇄 또는 분지된 지방족 탄화수소를 의미한다. 특정의 알킬은 탄소수 1 내지 12를 갖는다. 보다 특히 탄소수 1 내지 6을 갖는 저급 알킬이다. 추가의 특정 그룹은 탄소수 1 내지 4를 갖는다. 예시적인 직쇄 그룹으로는 메틸, 에틸 n-프로필 및 n-부틸이 있다. 분지된은 메틸, 에틸, 프로필 또는 부틸과 같은 하나 이상의 저급 알킬 그룹이 선형 알킬 쇄에 부착됨을 의미하며, 예시적인 분지쇄 그룹으로는 아이소프로필, 아이소-부틸, t-부틸 및 아이소아밀이 있다.

'치환된 알킬'은 본 발명에서 "치환된"의 정의에 인용된 그룹들 중 하나 이상으로 치환된 상기 정의한 바와 같은 알킬 그룹을 지칭하며, 특히 아실, 아실아미노, 아실옥시(-O-아실 또는 -OC(O)R²⁰), 알콕시, 알콕시카보닐, 알콕시카보닐아미노(-NR"-알콕시카보닐 또는 -NH-C(O)-OR²⁷), 아미노, 치환된 아미노, 아미노카보닐(카바모일 또는 아미도 또는 -C(O)-NR"₂), 아미노카보닐아미노(-NR"-C(O)-NR"₂), 아미노카보닐옥시(-OC(O)NR"₂), 아미노설포닐, 설포닐아미노, 아릴, -O-아릴, 아지도, 카복실, 시아노, 사이클로알킬, 할로겐, 하이드록시, 헤테로아릴, 나이트로, 티올, -S-알킬, -S-아릴, -S(O)-알킬, -S(O)-아릴, -S(O)₂-알킬 및 -S(O)₂아릴로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 치환체, 예를 들어 1 내지 5 개의 치환체, 및 특히 1 내지 3 개의 치환체, 특히 하나의 치환체를 갖는 알콕시 그룹을 지칭한다. 특정 실시태양에서 '치환된 알킬'은 할로, 시아노, 나이트로, 트라이플루오로메틸, 트라이플루오로메톡시, 아지도, -NR"'SO₂R", -SO₂NR"R"', -C(O)R", -C(O)OR", -OC(O)R", -NR"'C(O)R", -C(O)NR"R"', -NR"R"' 또는 -(CR"'R"")_mOR"'로 치환된 C₁-C₈ 알킬 그룹을 지칭하며; 여기에서 각각의 R"는 독립적으로 H, C₁-C₈ 알킬, -(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬) 중에서 선택되고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며, 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. R"' 및 R""는 각각 독립적으로 H 또는 C₁-C₈ 알킬을 나타낸다.

'아미노'는 라디칼 -NH₂를 지칭한다.

'치환된 아미노'는 본 발명에서 "치환된"의 정의에 인용된 그룹들 중 하나 이상으로 치환된 아미노 그룹을 지칭하며, 특히 그룹 -N(R³³)₂을 지칭하고, 여기에서 각각의 R²³은 독립적으로

·수소, C₁-C₈ 알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, 또는 C₃-C₁₀ 사이클로알킬;

·할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬;

·-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 또는 -(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)(여기에서 t는 0 내지 8의 정수이고 이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환된다)

중에서 선택되고;

·2 개의 R³³은 모두 결합하여 알킬렌 그룹을 형성한다.

2 개의 R³³ 그룹이 모두 수소인 경우, -N(R³³)₂은 아미노 그룹이다. 예시적인 '치환된 아미노' 그룹은 -NR^33'-C₁-C₈ 알킬, -NR^33'-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -NR^33'-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -NR^33'-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -NR^33'-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며 각각의 R^33'은 독립적으로 H 또는 C₁-C₈ 알킬을 나타내고; 존재하는 임의의 알킬 그룹은 자신이 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있으며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. 의심을 피하기 위해서 "치환된 아미노"란 용어는 하기 정의된 바와 같은 알킬아미노, 치환된 알킬아미노, 알킬아릴아미노, 치환된 알킬아릴아미노, 아릴아미노, 치환된 아릴아미노, 다이알킬아미노 및 치환된 다이알킬아미노 그룹들을 포함한다.

'알킬아미노'는 그룹 -NHR³⁴를 지칭하며, 여기에서 R³⁴는 C₁-C₈ 알킬이다.

'치환된 알킬아미노'는 그룹 -NHR³⁵를 지칭하며, 여기에서 R³⁵는 C₁-C₈ 알킬이고; 상기 알킬 그룹은 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 하이드록시, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬에 의해 치환되며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'알킬아릴아미노'는 그룹 -NR³⁶R³⁷을 지칭하며, 여기에서 R³⁶은 C₆-C₁₀ 아릴이고 R³⁷은 C₁-C₈ 알킬이다.

'치환된 알킬아릴아미노'는 그룹 -NR³⁸R³⁹를 지칭하며, 여기에서 R³⁸은 C₆-C₁₀ 아릴이고 R³⁹는 C₁-C₈ 알킬이며; 상기 알킬 그룹은 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 하이드록시, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬에 의해 치환되며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 시아노, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'아릴아미노'는 라디칼 -NHR⁴⁰을 의미하며, 이때 R⁴⁰은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₆-C₁₀ 아릴 및 5 내지 10원 헤테로아릴 중에서 선택된다.

'치환된 아릴아미노'는 그룹 -NHR⁴¹을 의미하며, 이때 R⁴¹은 C₆-C₁₀ 아릴 및 5 내지 10원 헤테로아릴 중에서 선택되고; 존재하는 임의의 아릴 또는 헤테로아릴 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 시아노, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'다이알킬아미노'는 그룹 -NR⁴²R⁴³을 지칭하며, 여기에서 R⁴² 및 R⁴³ 은 각각 독립적으로 C₁-C₈ 알킬로부터 선택된다.

'치환된 다이알킬아미노'는 그룹 -NR⁴⁴R⁴⁵를 지칭하며, 여기에서 R⁴⁴ 및 R⁴⁵ 는 각각 독립적으로 C₁-C₈ 알킬로부터 선택되고; 상기 알킬 그룹은 할로, 하이드록시, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬에 의해 치환되며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'다이아릴아미노'는 그룹 -NR⁴⁶R⁴⁷을 지칭하며, 여기에서 R⁴⁶ 및 R⁴⁷ 은 각각 독립적으로 C₆-C₁₀ 아릴로부터 선택된다.

"아미노설포닐" 또는 "설폰아미드"는 라디칼 -S(O₂)NH₂를 지칭한다.

"치환된 아미노설포닐" 또는 "치환된 설폰아미드"는 라디칼 -S(O₂)N(R⁴⁸)₂를 지칭하며, 여기에서 각각의 R⁴⁸은 독립적으로

·H, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아르알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴, 및 헤테로아르알킬;

·할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 및

·C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아르알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아르알킬(이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환된다)

중에서 선택되나; 단

하나 이상의 R⁴⁸은 H 이외의 것이다.

예시적인 '치환된 아미노설포닐' 또는 '치환된 설폰아미드' 그룹은 -S(O₂)N(R^48')-C₁-C₈ 알킬, -S(O₂)N(R^48')-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -S(O₂)N(R^48')-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -S(O₂)N(R^48')-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -S(O₂)N(R^48')-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며 각각의 R^48'은 독립적으로 H 또는 C₁-C₈ 알킬을 나타내고; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'아르알킬' 또는 '아릴알킬'은 상기 정의한 바와 같은 하나 이상의 아릴 그룹으로 치환된, 상기 정의한 바와 같은 알킬 그룹을 지칭한다. 특정한 아르알킬 또는 아릴알킬 그룹은 하나의 아릴 그룹으로 치환된 알킬 그룹이다.

'치환된 아르알킬' 또는 '치환된 아릴알킬'은 하나 이상의 아릴 그룹으로 치환된, 상기 정의한 바와 같은 알킬 그룹이고; 존재하는 임의의 아릴 그룹 중 하나 이상은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 시아노, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'아릴'은 모 원자 고리 시스템의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거하여 유도된 1가 방향족 탄화수소 그룹을 지칭한다. 특히 아릴은 5 내지 12 개의 고리 구성원, 보다 대개는 6 내지 10 개의 고리 구성원을 포함하는 모노-사이클릭 또는 폴리-사이클릭 방향족 고리 구조를 지칭한다. 상기 아릴 그룹이 모노사이클릭 고리 시스템인 경우, 상기는 우선적으로 탄소수 6을 함유한다. 전형적인 아릴 그룹으로는 비 제한적으로 아세안트릴렌, 아세나프틸렌, 아세펜안트릴렌, 안트라센, 아줄렌, 벤젠, 크리센, 코로넨, 플루오르안텐, 플루오렌, 헥사센, 헥사펜, 헥사렌, as-인다센, s-인다센, 인단, 인덴, 나프탈렌, 옥타센, 옥타펜, 옥타렌, 오바렌, 펜타-2,4-다이엔, 펜타센, 펜타렌, 펜타펜, 페릴렌, 페날렌, 펜안트렌, 피센, 플레이아덴, 피렌, 피란트렌, 루비센, 트라이페닐렌 및 트라이나프탈렌으로부터 유도된 그룹들이 있다. 특히 아릴 그룹은 페닐, 나프틸, 인데닐, 및 테트라하이드로나프틸을 포함한다.

'치환된 아릴'은 본 발명에서 '치환된'의 정의에 인용된 그룹들 중 하나 이상으로 치환된 아릴 그룹을 지칭하며, 특히 하나 이상의 치환체, 예를 들어 1 내지 5 개의 치환체, 특히 1 내지 3 개의 치환체, 특히 하나의 치환체로 임의로 치환될 수도 있는 아릴 그룹을 지칭한다. '치환된 아릴'은 할로, C₁-C₈ 알킬, C₁-C₈ 할로알킬, C₁-C₈ 할로알콕시, 시아노, 하이드록시, C₁-C₈ 알콕시 및 아미노 중에서 선택된 그룹들 중 하나 이상으로 치환된 아릴 그룹을 지칭한다.

전형적인 치환된 아릴의 예로는 하기의 것들이 있다:

상기 화학식들에서 R⁴⁹ 및 R⁵⁰ 중 하나는 수소일 수 있고 R⁴⁹ 및 R⁵⁰ 중 하나 이상은 각각 독립적으로 C₁-C₈ 알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, 알카노일, C₁-C₈ 알콕시, 헤테로-O-아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, NR⁵¹COR⁵², NR⁵¹SOR⁵²NR⁵¹SO₂R⁵², COO알킬, COO아릴, CONR⁵¹R⁵², CONR⁵¹OR⁵², NR⁵¹R⁵², SO₂NR⁵¹R⁵², S-알킬, SO알킬, SO₂알킬, S아릴, SO아릴, SO₂아릴 중에서 선택되거나; 또는 R⁴⁹ 및 R⁵⁰이 결합하여 그룹 N, O 및 S 중에서 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 임의로 함유하는, 5 내지 8 개 원자의 사이클릭 고리(포화되거나 불포화된)를 형성할 수도 있다. R⁵¹ 및 R⁵²는 독립적으로 수소, C₁-C₈ 알킬, C₁-C₄ 할로알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 치환된 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴이다.

'아릴알킬옥시'는 -O-알킬아릴 라디칼을 지칭하며 이때 알킬아릴은 본 발명에서 정의한 바와 같다.

'치환된 아릴알킬옥시'는 -O-알킬아릴 라디칼을 지칭하며 이때 알킬아릴은 본 발명에서 정의한 바와 같고; 존재하는 임의의 아릴 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 시아노, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'아지도'는 라디칼 -N₃을 지칭한다.

'카바모일 또는 아미도'는 라디칼 -C(O)NH₂를 지칭한다.

'치환된 카바모일 또는 치환된 아미도'는 라디칼 -C(O)N(R⁵³)₂을 지칭하며, 여기에서 각각의 R⁵³은 독립적으로

·할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 및

·C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아르알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아르알킬이며, 이들은 각각 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환되나; 단

하나 이상의 R⁵³ 은 H 이외의 것이다.

예시적인 '치환된 아미도/카바모일' 그룹은 -C(O)NR^53'-C₁-C₈ 알킬, -C(O)NR^53'-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -C(O)NR^53'-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -C(O)NR^53'-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -C(O)NR^53'-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며 각각의 R^53'은 독립적으로 H 또는 C₁-C₈ 알킬을 나타내고; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'카복시'는 라디칼 -C(O)OH를 지칭한다.

'사이클로알킬'은 탄소수 3 내지 10의 사이클릭 비-방향족 하이드로카빌 그룹을 지칭한다. 상기와 같은 사이클로알킬 그룹은 예로서 단일 고리 구조, 예를 들어 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 및 사이클로옥틸을 포함한다.

'치환된 사이클로알킬'은 본 발명에서 '치환된'의 정의에 인용된 그룹들 중 하나 이상으로 치환된 상기 정의한 바와 같은 사이클로알킬 그룹을 지칭하며, 특히 하나 이상의 치환체, 예를 들어 1 내지 5 개의 치환체, 특히 1 내지 3 개의 치환체, 특히 하나의 치환체를 갖는 사이클로알킬 그룹을 지칭한다.

'시아노'는 라디칼 -CN을 지칭한다.

'할로' 또는 '할로겐'은 플루오로(F), 클로로(Cl), 브로모(Br) 및 요오도(I)를 지칭한다. 특히 할로 그룹은 플루오로이거나 클로로이다.

'헤테로'는 화합물 상에 존재하는 화합물 또는 그룹을 기술하기 위해 사용되는 경우 상기 화합물 또는 그룹 중의 하나 이상의 탄소 원자가 질소, 산소 또는 황 헤테로원자에 의해 치환된 것을 의미한다. 헤테로는 상술한 하이드로카빌 그룹들 중 어느 하나, 예를 들어 알킬에 적용될 수 있다, 예를 들어 헤테로알킬, 사이클로알킬, 예를 들어 헤테로사이클로알킬, 아릴, 예를 들어 헤테로아릴, 사이클로알케닐, 예를 들어 사이클로헤테로알케닐, 및 1 내지 5, 및 특히 1 내지 3 개의 헤테로원자를 갖는 유사한 것들이 있다.

'헤테로아릴'은 하나 이상의 헤테로원자 및 5 내지 12 개의 고리 구성원, 보다 대개는 5 내지 10 개의 고리 구성원을 포함하는 모노-사이클릭 또는 폴리사이클릭 방향족 고리 구조를 의미한다. 상기 헤테로아릴 그룹은 예를 들어 축합된 5 및 6원 고리 또는 2 개의 축합된 6원 고리, 또는 추가의 예로 2 개의 축합된 5원 고리로부터 형성된 5원 또는 6원 모노사이클릭 고리 또는 바이사이클릭 구조일 수 있다. 각각의 고리는 전형적으로 질소, 황 및 산소 중에서 선택된 4 개 이하의 헤테로원자를 함유할 수도 있다. 전형적으로 상기 헤테로아릴 고리는 4 개 이하의 헤테로원자, 보다 전형적으로는 3 개 이하의 헤테로원자, 보다 대개는 2 개 이하, 예를 들어 단일 헤테로원자를 함유할 것이다. 하나의 실시태양에서, 상기 헤테로아릴 고리는 하나 이상의 고리 질소 원자를 함유한다. 상기 헤테로아릴 고리 중의 질소 원자는, 이미다졸 또는 피리딘의 경우에서와 같이 염기성이거나, 또는 인돌 또는 피롤 질소의 경우에서와 같이 본질적으로 비-염기성일 수 있다. 일반적으로 상기 헤테로아릴 그룹 중에 존재하는 염기성 질소 원자의 수는, 상기 고리의 임의의 아미노 그룹 치환체를 포함하여, 5 개 미만일 것이다. 5원 모노사이클릭 헤테로아릴 그룹의 예로는 비 제한적으로 피롤, 퓨란, 티오펜, 이미다졸, 퓨라잔, 옥사졸, 옥사다이아졸, 옥사트라이아졸, 아이속사졸, 티아졸, 아이소티아졸, 피라졸, 트라이아졸 및 테트라졸 그룹이 있다. 6원 모노사이클릭 헤테로아릴 그룹의 예로는 비 제한적으로 피리딘, 피라진, 피리다진, 피리미딘 및 트라이아진이 있다. 또 다른 5원 고리에 축합된 5원 고리를 함유하는 바이사이클릭 헤테로아릴 그룹의 특정 예로는 비 제한적으로 이미다조티아졸 및 이미다조이미다졸이 있다. 5원 고리에 축합된 6원 고리를 함유하는 바이사이클릭 헤테로아릴 그룹의 특정한 예로는 비 제한적으로 벤즈퓨란, 벤즈티오펜, 벤즈이미다졸, 벤즈옥사졸, 아이소벤즈옥사졸, 벤즈아이속사졸, 벤즈티아졸, 벤즈아이소티아졸, 아이소벤조퓨란, 인돌, 아이소인돌, 아이소인돌론, 인돌리아연, 인돌린, 아이소인돌린, 퓨린(예를 들어 아데닌, 구아닌), 인다졸, 피라졸로피리미딘, 트라이아졸로피리미딘, 벤조다이옥솔 및 피라졸로피리딘 그룹이 있다. 2 개의 축합된 6원 고리를 함유하는 바이사이클릭 헤테로아릴 그룹의 특정한 예로는 비 제한적으로 퀴놀린, 아이소퀴놀린, 크로만, 티오크로만, 크로멘, 아이소크로멘, 크로만, 아이소크로만, 벤조다이옥산, 퀴놀리아연, 벤족사진, 벤조다이아진, 피리도피리딘, 퀴녹살린, 퀴나졸린, 신놀린, 프탈라진, 나프티리딘 및 프테리딘 그룹이 있다. 특정한 헤테로아릴 그룹은 티오펜, 피롤, 벤조티오펜, 벤조퓨란, 인돌, 피리딘, 퀴놀린, 이미다졸, 옥사졸 및 피라진으로부터 유도된 것들이다.

헤테로원자 함유 치환을 갖는 전형적인 아릴의 예로는 하기의 것들이 있다:

상기에서,

각각의 W는 C(R⁵⁴)₂, NR⁵⁴, O 및 S 중에서 선택되고; 각각의 Y는 카보닐, NR⁵⁴, O 및 S 중에서 선택되고; R⁵⁴는 독립적으로 수소, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 및 5 내지 10원 헤테로아릴이다.

전형적인 헤테로아릴의 예로는 하기의 것들이 있다:

상기에서,

각각의 Y는 카보닐, N, NR⁵⁵, O 및 S 중에서 선택되고; R⁵⁵는 독립적으로 수소, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 및 5 내지 10원 헤테로아릴이다.

본 발명에 사용된 바와 같이, '헤테로사이클로알킬'이란 용어는 4 내지 10원의 안정한 헤테로사이클릭 비-방향족 고리 및/또는 상기 고리에 축합된, N, O 및 S 중에서 독립적으로 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 고리를 지칭한다. 축합된 헤테로사이클릭 고리 시스템은 카보사이클릭 고리를 포함할 수 있으며 오직 하나의 헤테로사이클릭 고리를 포함하는 것만이 필요하다. 헤테로사이클릭 고리의 예로는 비 제한적으로 모폴린, 피페리딘(예를 들어 1-피페리디닐, 2-피페리디닐, 3-피페리디닐 및 4-피페리디닐), 피롤리딘(예를 들어 1-피롤리디닐, 2-피롤리디닐 및 3-피롤리디닐), 피롤리돈, 피란(2H-피란 또는 4H-피란), 다이하이드로티오펜, 다이하이드로피란, 다이하이드로퓨란, 다이하이드로티아졸, 테트라하이드로퓨란, 테트라하이드로티오펜, 다이옥산, 테트라하이드로피란(예를 들어 4-테트라하이드로 피라닐), 이미다졸린, 이미다졸리디논, 옥사졸린, 티아졸린, 2-피라졸린, 피라졸리딘, 피페라진, 및 N-알킬 피페라진, 예를 들어 N-메틸 피페라진이 있다. 추가의 예로 티오모폴린 및 그의 S-옥사이드 및 S,S-다이옥사이드(특히 티오모폴린)가 있다. 더욱 추가의 예로 아제티딘, 피페리돈, 피페라존, 및 N-알킬 피페리딘, 예를 들어 N-메틸 피페리딘이 있다. 헤테로사이클로알킬 그룹의 특정한 예를 하기 예시적인 예로 나타낸다:

상기에서,

각각의 W는 CR⁵⁶, C(R⁵⁶)₂, NR⁵⁶, O 및 S 중에서 선택되고; 각각의 Y는 NR⁵⁶, O 및 S 중에서 선택되고; R⁵⁶은 독립적으로 수소, C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 및 5 내지 10원 헤테로아릴이다. 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 아실, 아실아미노, 아실옥시(-O-아실 또는 -OC(O)R²⁰), 알콕시, 알콕시카보닐, 알콕시카보닐아미노(-NR"-알콕시카보닐 또는 -NH-C(O)-OR²⁷), 아미노, 치환된 아미노, 아미노카보닐(아미도 또는 -C(O)-NR"₂), 아미노카보닐아미노(-NR"-C(O)-NR"₂), 아미노카보닐옥시(-O-C(O)-NR"₂), 아미노설포닐, 설포닐아미노, 아릴, -O-아릴, 아지도, 카복실, 시아노, 사이클로알킬, 할로겐, 하이드록시, 나이트로, 티올, -S-알킬, -S-아릴, -S(O)-알킬, -S(O)-아릴, -S(O)₂-알킬, 및 -S(O)₂-아릴로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 그룹으로 임의로 치환될 수도 있다. 치환 그룹은 예를 들어 락탐 및 유레아 유도체를 제공하는 카보닐 또는 티오카보닐을 포함한다.

'하이드록시'는 라디칼 -OH를 지칭한다.

'나이트로'는 라디칼 -NO₂를 지칭한다.

'치환된'은 하나 이상의 수소 원자가 동일하거나 상이한 치환체(들)로 각각 독립적으로 치환된 그룹을 지칭한다. 전형적인 치환체를

할로겐, -R⁵⁷, -O^-, =O, -OR⁵⁷, -SR⁵⁷, -S^-, =S, -NR⁵⁷R⁵⁸, =NR⁵⁷, -CCl₃, -CF₃, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO₂, =N₂, -N₃, -S(O)₂O^-, -S(O)₂OH, -S(O)₂R⁵⁷, -OS(O₂)O^-, -OS(O)₂R⁵⁷, -P(O)(O^-)₂, -P(O)(OR⁵⁷)(O^-), -OP(O)(OR⁵⁷)(OR⁵⁸), -C(O)R⁵⁷, -C(S)R⁵⁷, -C(O)OR⁵⁷, -C(O)NR⁵⁷R⁵⁸, -C(O)O^-, -C(S)OR⁵⁷, -NR⁵⁹C(O)NR⁵⁷R⁵⁸, -NR⁵⁹C(S)NR⁵⁷R⁵⁸, -NR⁶⁰C(NR⁵⁹)NR⁵⁷R⁵⁸ 및 -C(NR⁵⁹)NR⁵⁷R⁵⁸

로 이루어진 그룹 중에서 선택할 수 있고;

여기에서 각각의 R⁵⁷, R⁵⁸, R⁵⁹ 및 R⁶⁰은 독립적으로

·수소, C₁-C₈ 알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아릴알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬; 또는

·할로 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 또는

·치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환된 C₆-C₁₀ 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, C₆-C₁₀ 사이클로알킬 또는 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬이다.

특정 실시태양에서, 치환된 그룹들은 하나 이상의 치환체, 특히 1 내지 3 개의 치환체, 특히 하나의 치환체 그룹으로 치환된다.

추가의 특정 실시태양에서, 상기 치환체 그룹 또는 그룹들은 할로, 시아노, 나이트로, 트라이플루오로메틸, 트라이플루오로메톡시, 아지도, -NR"'SO₂R", -SO₂NR"R"', -C(O)R", -C(O)OR", -OC(O)R", -NR"'C(O)R", -C(O)NR"R"', -NR"R"', -(CR"'R"')_mOR"' 중에서 선택되고, 여기에서 각각의 R"는 독립적으로 H, C₁-C₈ 알킬, -(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬) 중에서 선택되고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며;

·존재하는 임의의 알킬 그룹은 자신이 할로 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있고;

·존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. 각각의 R"는 독립적으로 H 또는 C₁-C₆알킬을 나타낸다.

'치환된 설파닐'은 그룹 -SR⁶¹을 지칭하며, 여기에서 R⁶¹은

·C₁-C₈ 알킬, C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아르알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴, 및 헤테로아르알킬;

·할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬; 및

중에서 선택된다.

예시적인 '치환된 설파닐' 그룹은 -S-(C₁-C₈ 알킬) 및 -S-(C₃-C₁₀ 사이클로알킬), -S-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -S-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -S-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -S-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. '치환된 설파닐'이란 용어는 하기 정의하는 바와 같은 '알킬설파닐' 또는 '알킬티오', '치환된 알킬티오' 또는 '치환된 알킬설파닐', '사이클로알킬설파닐' 또는 '사이클로알킬티오', '치환된 사이클로알킬설파닐' 또는 '치환된 사이클로알킬티오', '아릴설파닐' 또는 '아릴티오' 및 '헤테로아릴설파닐' 또는 '헤테로아릴티오' 그룹들을 포함한다.

'알킬티오' 또는 '알킬설파닐'은 라디칼 -SR⁶²을 지칭하며, 이때 R⁶²는 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₁-C₈ 알킬 또는 그룹이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 메틸티오, 에틸티오, 프로필티오 및 부틸티오가 있다.

'치환된 알킬티오' 또는 '치환된 알킬설파닐'은 그룹 -SR⁶³을 지칭하며, 이때 R⁶³는 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된 C₁-C₈ 알킬이다.

'사이클로알킬티오' 또는 '사이클로알킬설파닐'은 라디칼 -SR⁶⁴를 지칭하며, 이때 R⁶⁴는 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₃-C₁₀ 사이클로알킬 또는 그룹이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 사이클로프로필티오, 사이클로헥실티오 및 사이클로펜틸티오가 있다.

'치환된 사이클로알킬티오' 또는 '치환된 사이클로알킬설파닐'은 그룹 -SR⁶⁵를 지칭하며, 이때 R⁶⁵는 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된 C₃-C₁₀ 사이클로알킬이다.

'아릴티오' 또는 '아릴설파닐'은 라디칼 -SR⁶⁶을 지칭하며, 이때 R⁶⁶은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₆-C₁₀ 아릴 그룹이다.

'헤테로아릴티오' 또는 '헤테로아릴설파닐'은 라디칼 -SR⁶⁷을 지칭하며, 이때 R⁶⁷은 본 발명에서 정의한 바와 같은 5 내지 10원 헤테로아릴 그룹이다.

'치환된 설피닐'은 그룹 -S(O)R⁶⁸을 지칭하며, 여기에서 R⁶⁸은

·치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환된 C₃-C₁₀ 사이클로알킬, 4 내지 10원 헤테로사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 아르알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로아르알킬

중에서 선택된다.

예시적인 '치환된 설피닐' 그룹은 -S(O)-(C₁-C₈ 알킬) 및 -S(O)-(C₃-C₁₀ 사이클로알킬), -S(O)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -S(O)-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -S(O)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -S(O)-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. 치환된 설피닐이란 용어는 본 발명에서 정의하는 바와 같은 '알킬설피닐', '치환된 알킬설피닐', '사이클로알킬설피닐', '치환된 사이클로알킬설피닐', '아릴설피닐' 및 '헤테로아릴설피닐' 그룹들을 포함한다.

'알킬설피닐'은 라디칼 -S(O)R⁶⁹를 지칭하며, 이때 R⁶⁹는 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₁-C₈ 알킬 그룹이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 메틸설피닐, 에틸설피닐, 프로필설피닐 및 부틸설피닐이 있다.

'치환된 알킬설피닐'은 라디칼 -S(O)R⁷⁰을 지칭하며, 이때 R⁷⁰은 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된, 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₁-C₈ 알킬 그룹이다.

'사이클로알킬설피닐'은 라디칼 -S(O)R⁷¹을 지칭하며, 이때 R⁷¹은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₃-C₁₀ 사이클로알킬 또는 그룹이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 사이클로프로필설피닐, 사이클로헥실설피닐 및 사이클로펜틸설피닐이 있다.

'치환된 사이클로알킬설피닐'은 그룹 -S(O)R⁷²를 지칭하며, 이때 R⁷²는 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된 C₃-C₁₀ 사이클로알킬이다.

'아릴설피닐'은 라디칼 -S(O)R⁷³을 지칭하며, 이때 R⁷³은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₆-C₁₀ 아릴 그룹이다.

'헤테로아릴설피닐'은 라디칼 -S(O)R⁷⁴를 지칭하며, 이때 R⁷⁴는 본 발명에서 정의한 바와 같은 5 내지 10원 헤테로아릴 그룹이다.

'치환된 설포닐'은 그룹 -S(O)₂R⁷⁵를 지칭하며, 여기에서 R⁷⁵는

중에서 선택된다.

예시적인 '치환된 설포닐' 그룹은 -S(O)₂-(C₁-C₈ 알킬) 및 -S(O)₂-(C₃-C₁₀ 사이클로알킬), -S(O)₂-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -S(O)₂-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -S(O)₂-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -S(O)₂-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다. 치환된 설포닐이란 용어는 알킬설포닐, 치환된 알킬설포닐, 사이클로알킬설포닐, 치환된 사이클로알킬설포닐, 아릴설포닐 및 헤테로아릴설포닐 그룹들을 포함한다.

'알킬설포닐'은 라디칼 -S(O)₂R⁷⁶을 지칭하며, 이때 R⁷⁶은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₁-C₈ 알킬 그룹이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 메틸설포닐, 에틸설포닐, 프로필설포닐 및 부틸설포닐이 있다.

'치환된 알킬설포닐'은 라디칼 -S(O)₂R⁷⁷을 지칭하며, 이때 R⁷⁷은 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된, 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₁-C₈ 알킬 그룹이다.

'사이클로알킬설포닐'은 라디칼 -S(O)₂R⁷⁸을 지칭하며, 이때 R⁷⁸은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₃-C₁₀ 사이클로알킬 또는 그룹이다. 전형적인 예로는 비 제한적으로 사이클로프로필설포닐, 사이클로헥실설포닐 및 사이클로펜틸설포닐이 있다.

'치환된 사이클로알킬설포닐'은 그룹 -S(O)₂R⁷⁹를 지칭하며, 이때 R⁷⁹는 할로, 치환되거나 치환되지 않은 아미노, 또는 하이드록시로 치환된 C₃-C₁₀ 사이클로알킬이다.

'아릴설포닐'은 라디칼 -S(O)₂R⁸⁰을 지칭하며, 이때 R⁸⁰은 본 발명에서 정의한 바와 같은 C₆-C₁₀ 아릴 그룹이다.

'헤테로아릴설포닐'은 라디칼 -S(O)₂R⁸¹을 지칭하며, 이때 R⁸¹은 본 발명에서 정의한 바와 같은 5 내지 10원 헤테로아릴 그룹이다.

'설포' 또는 '설폰산'은 -SO₃H와 같은 라디칼을 지칭한다.

'치환된 설포' 또는 '설폰산 에스터'는 그룹 -S(O)₂OR⁸²를 지칭하며, 여기에서 R⁸²는

중에서 선택된다.

예시적인 '치환된 설포' 또는 '설폰산 에스터' 그룹은 -S(O)₂-O-(C₁-C₈ 알킬) 및 -S(O)₂-O-(C₃-C₁₀ 사이클로알킬), -S(O)₂-O-(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -S(O)₂-O-(CH₂)_t(5 내지 10원 헤테로아릴), -S(O)₂-O-(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -S(O)₂-O-(CH₂)_t(4 내지 10원 헤테로사이클로알킬)이고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이며; 존재하는 임의의 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹은 자신이 치환되지 않은 C₁-C₄ 알킬, 할로, 치환되지 않은 C₁-C₄ 알콕시, 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₄ 하이드록시알킬, 또는 치환되지 않은 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

'티올'은 그룹 -SH를 지칭한다.

유기 합성 분야의 통상적인 숙련가는 안정한, 화학적으로 적합한 헤테로사이클릭 고리 중의 헤테로원자의 최대 수가, 상기 고리가 방향족이든 방향족이 아니든 간에, 상기 고리의 크기, 불포화 정도 및 상기 헤테로원자의 원자가에 의해 결정됨을 알 것이다. 일반적으로, 헤테로사이클릭 고리는 상기 헤테로방향족 고리가 화학적으로 적합하고 안정한 한 1 내지 4 개의 헤테로원자를 가질 수 있다.

'약학적으로 허용가능한'은 연방 또는 주 정부의 규제 기관 또는 미국 이외 국가의 해당 기관에 의해 승인되거나 승인될 수 있음, 또는 동물, 및 보다 특히 인간용으로 미국 약전 또는 다른 일반적으로 인정된 약전에 나열됨을 의미한다.

'약학적으로 허용 가능한 염'은 약학적으로 허용 가능하고 모 화합물의 목적하는 약물 활성을 갖는 본 발명 화합물의 염을 지칭한다. 특히, 상기와 같은 염은 무독성이며 무기 또는 유기 산 부가염 및 염기 부가염일 수 있다. 구체적으로, 상기와 같은 염은 (1) 무기산, 예를 들어 염산, 브롬화 수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나, 또는 유기산, 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄포설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3급 부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등으로 형성된 산 부가염; 또는 (2) 모 화합물 중에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어 알칼리 금속 이온, 알칼리 토 이온, 또는 알루미늄 이온에 의해 치환되거나, 또는 유기 염기, 예를 들어 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, N-메틸글루카민 등과 배위하는 경우 형성되는 염을 포함한다. 염은 단지 예로서 나트륨 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 암모늄, 테트라알킬암모늄 등; 및 상기 화합물이 염기성 작용기를 함유하는 경우, 무독성 유기 또는 무기산의 염, 예를 들어 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 타르트레이트, 메실레이트, 아세테이트, 말리에이트, 옥살레이트 등을 추가로 포함한다. "약학적으로 허용 가능한 양이온"이란 용어는 산성 작용기의 허용 가능한 양이온성 대이온을 지칭한다. 상기와 같은 양이온은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 암모늄, 테트라알킬암모늄 양이온 등으로 예시된다.

'약학적으로 허용 가능한 비히클'은 본 발명의 화합물과 함께 투여되는 희석제, 보조제, 부형제 또는 담체를 지칭한다.

'전구약물'은 절단 가능한 그룹을 가지며 가용매 분해에 의해 또는 생리학적 조건 하에서 생체 내에서 약학적으로 활성인 본 발명의 화합물로 되는, 본 발명 화합물의 유도체를 포함한 화합물을 지칭한다. 상기와 같은 예로는 비 제한적으로 콜린 에스터 유도체 등, N-알킬모폴린 에스터 등이 있다.

'용매화물'은 대개 가용매 분해 반응에 의해, 용매와 회합되는 화합물의 형태를 지칭한다. 상기 물리적인 회합은 수소 결합을 포함한다. 통상적인 용매로는 물, 에탄올, 아세트산 등을 포함한다. 본 발명의 화합물을 예를 들어 결정성 형태로 제조할 수 있으며 용매화 또는 수화시킬 수 있다. 적합한 용매화물은 약학적으로 허용 가능함 용매화물, 예를 들어 수화물을 포함하며, 화학량론적 용매화물 및 비-화학량론적 용매화물 모두를 추가로 포함한다. 몇몇 경우에 상기 용매화물은, 예를 들어 하나 이상의 용매 분자가 결정성 고체의 결정 격자 중에 결합된 경우 단리가 가능할 것이다. '용매화물'은 용액상 및 단리 가능한 용매화물 모두를 포함한다. 전형적인 용매화물은 수화물, 에탄올레이트 및 메탄올레이트를 포함한다.

'환자'는 인간을 포함한다. '인간' 및 '환자'란 용어는 본 발명에서 호환적으로 사용된다.

'치료 유효량'은 질병의 치료를 위해 환자에게 투여 시 상기 질병에 대해 상기와 같은 치료를 수행하기에 충분한 본 발명 화합물의 양을 의미한다. "치료 유효량"은 상기 화합물, 질병 및 그의 중증도, 및 치료하려는 환자의 연령, 체중 등에 따라 변할 수 있다.

'예방하다' 또는 '예방'은 질병 또는 질환이 초래되거나 발병할 위험의 감소(즉 질병 유발제에 노출되거나 질병의 발병에 앞서 상기 질병에 걸리기 쉬울 수 있는 환자에게서 상기 질병의 임상적 증상들 중 하나 이상이 발생하지 않게 함)를 지칭한다.

'예방학'이란 용어는 '예방'과 관련이 있으며, 질병을 치료 또는 치유하는 것이기 보다는, 예방을 목적으로 하는 수단 또는 시술을 지칭한다. 예방학적 수단의 비 제한적인 예로 백신의 투여; 예를 들어 고정화로 인한 혈전증의 위험이 있는 환자에게 저 분자량 헤파린의 투여; 및 말라리아가 유행하는 지역 또는 말라리아 접촉 위험이 높은 지역을 방문하기에 앞서, 항말라리아제, 예를 들어 클로로퀸의 투여가 있을 수 있다.

임의의 질병 또는 질환을 '치료하는' 또는 '치료'는 하나의 실시태양에서 상기 질병 또는 질환의 개선(즉 상기 질병을 억제하거나 그의 임상적 증상들 중 하나 이상의 표시, 정도 또는 중증도를 감소시킴)을 지칭한다. 또 다른 실시태양에서 '치료하는' 또는 '치료'는 환자가 분간할 수 없을 수도 있는 하나 이상의 신체 매개변수의 개선을 지칭한다. 더욱 또 다른 실시태양에서, '치료하는' 또는 '치료'는 상기 질병 또는 질환을 신체적으로(예를 들어 분간할 수 있는 증상의 안정화), 생리학적으로(예를 들어 신체 매개변수의 안정화), 또는 이둘 모두로 조절함을 지칭한다. 추가의 실시태양에서, '치료하는' 또는 '치료'는 상기 질병의 진행을 늦추는 것에 관한 것이다.

본 발명에 사용된 바와 같이 '본 발명의 화합물(들)'이란 용어 및 동등한 표현은 본 발명에 개시된 바와 같은 화학식(들) 중 어느 하나에 따른 화합물을 포함함을 의미하며, 그 표현은 상기 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 및 상기 약학적으로 허용 가능한 염의 용매화물, 예를 들어 수화물(내용상 그렇게 허용하는 경우)을 포함한다. 유사하게, 중간체에 대한 언급은, 그 자체가 청구되었는지의 여부와 관계없이, 그의 염 및 용매화물(내용상 그렇게 허용하는 경우)을 포함함을 의미한다.

범위를 본 발명에서 언급하는 경우, 예를 들어 비 제한적으로 C₁-C₈ 알킬을 언급하는 경우, 상기 범위의 인용은 상기 범위의 각 구성원의 표시를 고려해야 한다.

본 발명 화합물의 다른 유도체들은 그들의 산 및 산 유도체 형태 모두에서 활성을 가질 수 있으나, 산 민감성 형태에서는 종종 용해도의 이점, 조직 적합성, 또는 포유동물 유기체에서 지연된 방출을 제공한다(문헌[Bundgard, H., Design of Prodrugs, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985]을 참조하시오). 전구약물은 당해 분야의 숙련가들에게 널리 공지된 산 유도체, 예를 들어 모 산과 적합한 알콜과의 반응에 의해 제조된 에스터, 또는 모 산 화합물과 치환되거나 치환되지 않은 아민과의 반응에 의해 제조된 아미드, 또는 산 무수물, 또는 혼합된 무수물을 포함한다. 본 발명의 화합물에 펜던트인 산 그룹으로부터 유도된 간단한 지방족 또는 방향족 에스터, 아미드 및 무수물이 특히 유용한 전구약물이다. 일부의 경우, 이중 에스터 유형 전구약물, 예를 들어 (아실옥시)알킬 에스터 또는 ((알콕시카보닐)옥시)알킬에스터를 제조하는 것이 바람직할 수 있다. 특정의 상기와 같은 전구약물은 본 발명 화합물의 C₁ 내지 C₈ 알킬, C₂-C₈ 알케닐, 아릴, C₇-C₁₂ 치환된 아릴, 및 C₇-C₁₂ 아릴알킬 에스터이다.

본 발명에 사용된 바와 같이, '동위원소 변체'란 용어는 화합물을 구성하는 원자들 중 하나 이상에 부자연한 비율의 동위원소를 함유하는 상기와 같은 화합물을 지칭한다. 예를 들어, 화합물의 '동위원소 변체'는 하나 이상의 비-방사성 동위원소, 예를 들어 중수소(²H 또는 D), 탄소-13(¹³C), 질소-15(¹⁵N) 등을 함유할 수 있다. 상기와 같은 동위원소 치환이 이루어진 화합물에서, 하기의 원자들(존재하는 경우)은, 예를 들어 임의의 수소가 ²H/D이거나, 임의의 탄소가 ¹³C이거나, 또는 임의의 질소가 ¹⁵N일 수 있고 상기와 같은 원자의 존재 및 치환이 당해 분야의 기술 내에서 측정될 수 있도록 다양할 수 있음을 이해할 것이다. 마찬가지로, 본 발명은 방사성 동위원소를 갖는 동위원소 변체의 제조를, 예를 들어 생성 화합물이 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에 사용될 수 있는 경우, 포함할 수 있다. 상기 방사성 동위원소 삼중수소, 즉 ³H 및 탄소-14, 즉 ¹⁴C는 그들의 결합 용이성 및 용이한 검출 수단에 비추어 상기 목적에 특히 유용하다. 더욱이, 양전자 방출 동위원소, 예를 들어 ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O 및 ¹³N으로 치환되고 기질 수용체 점유를 검사하기 위한 양전자 단층촬영(PET) 연구에 유용한 화합물들을 제조할 수 있다.

본 발명에 제공된 본 발명 화합물의 모든 동위원소 변체들을, 방사성이든 아니든, 본 발명의 범위 내에 포함하고자 한다.

또한 동일한 분자식을 갖지만 원자들의 결합 성질 또는 순서 또는 원자들의 공간상 배열이 상이한 화합물들을 '이성체'라 칭함은 물론이다. 상기 원자들의 공간상 배열이 상이한 이성체를 '입체이성체'라 칭한다.

서로 거울상이 아닌 입체이성체를 '부분입체이성체'라 칭하며, 서로 겹쳐질 수 없는 거울상인 것들은 '거울상 이성체'라 칭한다. 화합물이 비대칭 중심을 갖는 경우, 예를 들어 4 개의 상이한 그룹들에 결합하는 경우, 한 쌍의 거울상 이성체가 가능하다. 거울상 이성체는 그의 비대칭 중심의 절대 형태를 특징으로 할 수 있으며 칸과 프레로그의 R- 및 S-서열화 규칙에 의해서, 또는 상기 분자가 편광된 빛의 면을 회전하는 방식에 의해 우선성 또는 좌선성(즉 각각 (+) 또는 (-)-이성체)으로 표시하여 개시된다. 키랄 화합물이 개별적인 거울상 이성체로서 또는 그의 혼합물로서 존재할 수 있다. 같은 비율의 거울상 이성체들을 함유하는 혼합물을 '라세미 혼합물'이라 칭한다.

'토오토머'는 모 화합물 구조의 호환 가능한 형태이고 수소 원자 및 전자의 치환이 다양한 화합물을 지칭한다. 따라서, 2 개의 구조가 π 전자 및 원자(대개 H)를 통해 평형일 수 있다. 예를 들어, 에놀 및 케톤은 산이나 염기에 의한 처리에 의해 신속히 상호전환되므로 토오토머이다. 토오토머화의 또 다른 예는 페닐나이트로메탄의 액시- 및 나이트로-형태이며, 이는 마찬가지로 산 또는 염기에 의한 처리에 의해 형성된다. 상기와 같은 토오토머는, 적합한 경우, 본 발명에 개시된 바와 같은 본 발명의 화합물 내에 포함된다.

토오토머 형태는 관심 화합물의 최적의 화학적 안정성 및 생물학적 안정성의 획득과 관련이 있을 수 있다.

본 발명의 화합물은 하나 이상의 비대칭 중심을 가질 수 있으며; 따라서 상기와 같은 화합물을 개별적인 (R)- 또는 (S)-입체이성체로서 또는 이들의 혼합물로서 생성시킬 수 있다.

달리 나타내지 않는 한, 명세서 및 청구의 범위의 특정 화합물에 대한 설명 및 명명은 라세미 또는 달리 그의 개별적인 거울상 이성체 및 혼합물을 모두 포함함을 의미한다. 입체화학의 측정 및 입체이성체의 분리 방법은 당해 분야에 널리 공지되어 있다.

화합물

본 발명은 MAPKAPK5가 MMP1의 발현을 생성시키는 경로에 작용을 하고 MAPKAPK5 활성의 억제제, 예를 들어 본 발명의 화합물이 MMP 활성의 비정상적으로 높은 발현을 수반하는 질병의 치료에 유용하다는 발견에 근거 한다.

본 발명의 화합물을 일반적으로 5 번 위치가 아릴 또는 헤테로아릴 그룹으로 치환되고 8 번 위치가 헤테로아릴아미노 그룹으로 치환된 [1.2.4]트라이아졸로[1,5-a]피라진 및 이미다조[1,2-a]피라진으로서 개시할 수 있다.

화학식 Ia

화학식 Ib

상기 식들에서,

X는 N 또는 CH이고;

고리 P는 치환되거나 치환되지 않은

이고;

R¹은 H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬이고;

각각의 R^2c는 H 및 C₁-C₆ 알킬 중에서 선택되고;

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R¹은 H, Me, Et, i-Pr 또는 CF₃이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합, -CO- 또는 -N(R^2c)CO-이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R¹은 Me, Et, n-Pr 또는 i-Pr이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y'는 독립적으로 CR^2a이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, W, W', Y 및 Y' 중 하나는 N이고 나머지는 독립적으로 CR^2a이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, W, W', Y 및 Y' 중 2 개는 N이고 나머지는 독립적으로 CR^2a이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y'는 독립적으로 CH이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W' 및 Y는 독립적으로 CH이고; Y'는 N이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W 및 W'는 독립적으로 CH이고, 각각의 Y 및 Y'는 N이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 IIa, IIb, IIc 또는 IId에 따른다:

[화학식 IIa]

[화학식 IIb]

[화학식 IIc]

[화학식 IId]

상기 식들에서,

X, L 및 고리 P는 화학식 Ia에 대해서 정의한 바와 같고; 각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고; R³은 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 아릴 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.

추가의 실시태양에서, 화학식 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 IIe, IIf 또는 IIg에 따른다:

[화학식 IIe]

[화학식 IIf]

[화학식 IIg]

상기 식들에서,

L 및 고리 P는 화학식 Ib에 대해서 정의한 바와 같고; 각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고; R³은 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 아릴 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 R^2a는 H이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 R^2a는 Me, Et, Pr, 아이소-Pr, Cl, F, CN, OMe 및 CF₃ 중에서 선택된다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 -CO- 또는 -NHCO-이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 고리 P는 치환되거나 치환되지 않은:

이고;

여기에서 R^2d 및 m1은 화학식 I에 대하여 정의한 바와 같다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 R^2a는 H, 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되지 않은 C₁-C₆ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 또는 할로이다.

또 다른 추가의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 하나의 R^2a는 Me, Et, Pr, 아이소-Pr, Cl, F, CN, OMe 및 CF₃ 중에서 선택되고, 나머지는 H이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은 치환되거나 치환되지 않은 아릴 중에서 선택된다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은 할로, 시아노, 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 또는 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬로 임의로 치환된 아미도로 임의로 치환된 페닐이다.

추가의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은 F, Cl, Br, 시아노, OMe, OEt, On-Pr, Oi-Pr, 또는 Me, Et, n-Pr 또는 i-Pr로 임의로 치환된 아미도로 임의로 치환된 페닐이다.

또 다른 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.

추가의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은 페닐, 피리딜, 인돌릴, 아이소인돌릴, 피롤릴, 퓨라닐, 티에닐, 피라졸릴, 옥사졸릴 및 티아졸릴 중에서 선택되고, 이들은 각각 치환되지 않거나 또는 하이드록실, 시아노, 할로, 또는 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬로 임의로 치환된 아미도로 치환될 수도 있다.

또 다른 추가의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은 페닐, 피리딜, 인돌릴, 아이소인돌릴, 피롤릴, 퓨라닐, 티에닐, 피라졸릴, 옥사졸릴, 및 티아졸릴 중에서 선택되고, 이들은 각각 치환되지 않거나 또는 하이드록실, 시아노, F, Cl, Br, 또는 Me, Et, n-Pr, i-Pr로 임의로 치환된 아미도로 치환될 수도 있다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c 및 R^2d 는 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R³은

이고, 각각의 A¹, A² 및 A³ 는 독립적으로 S, O, N, NR^3a 및 CR^3a 중에서 선택되고; 각각의 R^3a는 독립적으로 H 또는 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬이고; R^3b는 CONH₂, CONHMe 또는 CN이다.

이다.

이다.

중에서 선택된다.

이고; 여기에서 아래 첨자 m은 0, 1, 2, 3 및 4 중에서 선택되고, 각각의 R^3d는 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬 또는 할로이다.

이고; 여기에서 아래 첨자 m은 0, 1, 2 및 3 중에서 선택되고, 각각의 R^3d는 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬 또는 할로이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c, R^2d 및 R³은 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, m은 1 또는 2이고; 각각의 R^3d는 Me, Cl 또는 F이다.

몇몇 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c, R^2d 및 R³은 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R^3a는 C₁-C₆ 알킬이다. 또 다른 실시태양에서, R^3a는 C₁-C₄ 알킬이다.

몇몇 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 각각의 W, W', Y 및 Y', X, L, 고리 P, R¹, R^2a, R^2c, R^2d 및 R³은 선행 단락들 중 어느 하나에 개시되어 있고, R^3d는 C₁-C₆ 알킬이다. 또 다른 실시태양에서, R^3d는 C₁-C₄ 알킬이다.

하나의 실시태양에서, C₁-C₆ 알킬 그룹은 할로, 시아노, 나이트로, 트라이플루오로메틸, 트라이플루오로메톡시, 아지도, -NR¹⁰SO₂R⁹, -SO₂NR⁹R¹⁰, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -OC(O)R⁹, -NR¹⁰C(O)R⁹, -C(O)NR⁹R¹⁰, -NR⁹R¹⁰, -(CR¹⁰R¹¹)_mOR¹⁰ 중에서 독립적으로 선택된 하나 이상의 그룹(예를 들어 1 내지 3 개의 치환체, 특히 하나의 치환체 그룹)에 의해 임의로 치환되고, 여기에서 m은 1 내지 5의 정수이다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R⁹는 독립적으로 H, C₁-C₈ 알킬, -(CH₂)_t(C₆-C₁₀ 아릴), -(CH₂)_t(C₅-C₁₀ 헤테로아릴), -(CH₂)_t(C₃-C₁₀ 사이클로알킬) 및 -(CH₂)_t(C₅-C₁₀ 헤테로사이클로알킬) 중에서 선택되고, 여기에서 t는 0 내지 4의 정수이다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R⁹는 상술한 바와 같고, 상기 C₁-C₆ 알킬 그룹은 할로에 의해 임의로 치환될 수 있고 O, S 및 -N(R¹²)- 중에서 선택된 하나 또는 2 개의 헤테로 부분을 임의로 함유하나, 단 2 개의 O 원자, 2 개의 S 원자, 또는 O 및 S 원자가 서로 직접 결합되지는 않는다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R⁹는 상술한 바와 같고, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 그룹 중 어느 하나는 자신이 C₁-C₄ 알킬, 할로, C₁-C₄ 알콕시, C₁-C₄ 할로알킬, C₁-C₄ 하이드록시알킬 또는 C₁-C₄ 할로알콕시 또는 하이드록시에 의해 치환될 수도 있다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R⁹는 상술한 바와 같고, 각각의 R¹⁰ 및 R¹¹은 독립적으로 H 또는 C₁-C₆ 알킬을 나타낸다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R⁹는 상술한 바와 같고, 각각의 R¹² 및 R¹³은 독립적으로 H 또는 C₁-C₄ 알킬을 나타낸다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R¹⁰ 및 R¹¹은 독립적으로 H 또는 C₁-C₆ 알킬을 나타낸다.

하나의 실시태양에서, 각각의 R⁹는 H 이외의 것이다.

몇몇 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 IIg 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2a는 C₁-C₆ 알콕시이고; 상기 알콕시 그룹은 -OR⁹이고; R⁹는 상기 실시태양들 중 어느 하나에 개시된 바와 같으나; 단 R⁹는 H 이외의 것이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 IIIa, IIIb 또는 IIIc에 따른다:

[화학식 IIIa]

[화학식 IIIb]

[화학식 IIIc]

상기 식들에서,

X는 CH 또는 N이고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는

이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.

추가의 실시태양에서, 화학식 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 IIId 또는 IIIe에 따른다:

[화학식 IIId]

[화학식 IIIe]

상기 식들에서,

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 IIIa 내지 IIIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 IVa, IVb 또는 IVc에 따른다:

[화학식 IVa]

[화학식 IVb]

[화학식 IVc]

상기 식들에서,

하나의 실시태양에서, 화학식 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 IVd 또는 IVe에 따른다:

[화학식 IVd]

[화학식 IVe]

상기 식들에서,

X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 IVa 내지 IVe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 Va, Vb 또는 Vc에 따른다:

[화학식 Va]

[화학식 Vb]

[화학식 Vc]

상기 식들에서,

하나의 실시태양에서, 화학식 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 Vd 또는 Ve에 따른다:

[화학식 Vd]

[화학식 Ve]

상기 식들에서,

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Va 내지 Ve 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 실시태양에서, 화학식 Ia에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 VIa, VIb 또는 VIc에 따른다:

[화학식 VIa]

[화학식 VIb]

[화학식 VIc]

상기 식들에서,

하나의 실시태양에서, 화학식 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 화학식 VId 또는 VIe에 따른다:

[화학식 VId]

[화학식 VIe]

상기 식들에서,

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 VIa 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 단일 결합이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 -CO-이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, L은 -NHCO-이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2d는 H, Me, Et, i-Pr, t-Bu, 사이클로프로필메틸 또는 CH₂CF₃이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 I 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2d는 H, Me, i-Pr, t-Bu, CH₂CONH₂, 사이클로프로필메틸 또는 CH₂CF₃이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2d는 H이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2d는 i-Pr이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2d는 t-Bu이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, R^2d는 사이클로프로필메틸이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 고리 P는

이다.

이다.

이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, X는 CH이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 내지 VIe 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, X는 N이다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia 또는 Ib에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 표 1에 나열된 화합물들 중에서 선택된다.

하나의 특정 실시태양에서, 화학식 Ia에 따른 본 발명의 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 중에서 선택된다:

5-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)아이소인돌린-1-온;

4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;

4-(8-(4-((1S,4R)-5-3급-부틸-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;

4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;

5-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복실산 아미드;

4-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)-1H-피리딘-2-온;

4-{8-(4-(5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄-2-일)페닐아미노)[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(4-(5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄-2-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(4-(3-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)페닐아미노)[1,2,4]-트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(4-(3-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)페닐아미노)[1,2,4]-트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

4-{8-(4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;

5-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복실산 아미드;

5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온;

5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복실산 아미드; 및

5-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온.

또 다른 실시태양에서, 화학식 Ib에 따른 화합물에 관하여, 상기 화합물은 하기 중에서 선택된다:

4-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;

4-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;

5-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)아이소인돌린-1-온.

하나의 태양에서 본 발명에 개시된 실시태양들 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물은 유리 염기로서 존재한다.

하나의 태양에서 본 발명에 개시된 실시태양들 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염이다.

하나의 태양에서 본 발명에 개시된 실시태양들 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물은 본 발명 화합물의 용매화물이다.

하나의 태양에서 본 발명에 개시된 실시태양들 중 어느 하나에 따른 본 발명의 화합물은 본 발명 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 용매화물이다.

각 실시태양들에 대해 명시된 그룹들이 별도로 상기에 일반적으로 나열되었지만, 본 발명의 화합물은 상기 화학식들뿐만 아니라 본 발명에 제공된 다른 화학식들 중의 여러 가지 또는 각각의 실시태양이 각각의 변수에 대해, 각각 나타낸 특정 구성원들 또는 그룹들 중 하나 이상 중에서 선택된 것을 포함한다. 따라서, 본 발명은 그의 범위 내에 상기와 같은 실시태양들의 모든 조합을 포함하고자 한다.

몇몇 태양에서, 본 발명은 상기 화학식들에 따른 본 발명 화합물의 전구 약물 및 유도체를 제공한다. 전구 약물은 대사적으로 절단 가능한 그룹을 가지며 가용매 분해에 의해 또는 생리학적 조건 하에서 생체 내에서 약학적으로 활성인 본 발명의 화합물로 되는, 본 발명 화합물의 유도체이다. 전구 약물은 환자에게 투여될 때 불활성일 수 있지만 생체 내에서 본 발명의 활성 화합물로 전환된다. 본 발명에 사용된 바와 같은 "약학적으로 허용 가능한 전구 약물"은 건전한 의학적 판단의 범위 내에서, 타당한 이익/위험 비에 상응하는 과도한 독성, 자극, 알러지 반응으로 환자의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고 본 발명 화합물의 목적하는 용도에 유효한, 본 발명에 유용한 화합물의 전구 약물을 지칭한다. '전구 약물'이란 용어는 생체 내에서 형질 전환되어 본 발명에 유용한 유효 화합물 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화물을 제공하는 화합물을 의미한다. 상기 형질 전환은 다양한 기전들에 의해, 예를 들어 혈액 중에서 가수분해를 통해 일어날 수 있다. 대사적으로 절단 가능한 그룹을 갖는 화합물은 상기 화합물이 상기 대사적으로 절단 가능한 그룹의 존재 덕분에 모 화합물에 부여된 흡수율 및/또는 상승된 용해도의 결과로서 개선된 생체이용률을 나타낼 수 있는 이점을 가지며, 따라서 상기와 같은 화합물은 전구-약물로서 작용한다. 철저한 논의가 문헌[Design of Prodrugs, H. Bundgard, ed., Elsevier(1985); Methods in Enzymology; K. Widder et al., Ed., Academic Press, 42, 309-396(1985); A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgard, ed., Chapter 5; "Design and Applications of Prodrugs" 113-191(1991); Advanced Drug Delivery Reviews, H. Bundgard, 8, 1-38, (1992); J. Pharm. Sci., 77, 285(1988); Chem. Pharm. Bull., N. Nakeya et al., 32, 692(1984); Pro-drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi and V. Stella, 14 A.C.S. Symposium Series, and Bioreversible Carriers in Drug Design, E.B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987](본 발명에 참고로 인용된다)에 제공되어 있다. 상기와 같은 예는 비 제한적으로 콜린 에스터 유도체 등, N-알킬모폴린 에스터 등을 포함한다.

본 발명 화합물의 다른 유도체들은 그들의 산 및 산 유도체 형태 모두에서 활성을 가지나, 산 민감성 형태는 종종 포유동물 유기체에서 용해도 이점, 조직 적합성 또는 지연된 방출을 제공한다(문헌[Bundgard, H., Design of Prodrugs, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985] 참조). 전구 약물은 당해 분야의 숙련가에게 널리 공지된 산 유도체, 예를 들어 모 산과 적합한 알콜과의 반응에 의해 제조된 에스터, 또는 모 산 화합물과 치환되거나 치환되지 않은 아민과의 반응에 의해 제조된 아미드, 또는 산 무수물, 또는 혼합된 무수물을 포함한다. 본 발명의 화합물에 펜던트인 산 그룹으로부터 유도된 간단한 지방족 또는 방향족 에스터, 아미드 및 무수물이 특히 바람직한 전구 약물이다. 일부의 경우, 이중 에스터 유형 전구 약물, 예를 들어 (아실옥시)알킬 에스터 또는 ((알콕시카보닐)옥시)알킬에스터를 제조하는 것이 바람직할 수 있다. 본 발명 화합물의 C₁ 내지 C₈ 알킬, C₂-C₈ 알케닐, 아릴, C₇-C₁₂ 치환된 아릴, 및 C₇-C₁₂ 아릴알킬 에스터가 바람직하다.

약학 조성물

본 발명의 화합물은 약제로서 사용될 때, 전형적으로는 약학 조성물의 형태로 투여된다. 상기와 같은 조성물을 제약 분야에 널리 공지된 방식으로 제조할 수 있으며, 상기 조성물은 하나 이상의 활성 화합물을 포함한다.

일반적으로, 본 발명의 화합물을 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 실제로 투여되는 상기 화합물의 양을 전형적으로는 관련 환경, 예를 들어 치료하려는 병, 선택된 투여 경로, 투여되는 실제 화합물, 개인 환자의 연령, 체중 및 반응, 상기 환자 증상의 중증도 등에 비추어 의사가 결정할 것이다.

본 발명의 약학 조성물을 다양한 경로, 예를 들어 경구, 직장, 피 내, 피 하, 정맥 내, 근육 내 및 비 내로 투여할 수 있다. 의도하는 전달 경로에 따라, 본 발명의 화합물을 바람직하게는 주사가능한 또는 경구 조성물로서 또는 연고로서, 로션으로서, 또는 경피 투여용 패치로서 제형화할 수 있다.

경구 투여용 조성물은 벌크 액체 용액 또는 현탁액, 또는 벌크 분말의 형태를 취할 수 있다. 그러나 보다 통상적으로 상기 조성물은 정확한 투약을 용이하게 하기 위해 단위 투여형으로 제공된다. "단위 투여형"이란 용어는 인간 환자 및 다른 포유동물에게 단위 투여량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위들을 지칭하며, 각 단위는 적합한 약학 부형제와 함께, 목적하는 치료 효과를 생성시키도록 계산된 소정 량의 활성 물질을 함유한다. 전형적인 단위 투여형은 액체 조성물의 이미 충전된, 미리 측정된 앰풀 또는 주사기, 또는 고체 조성물의 경우에 환제, 정제, 캡슐 등을 포함한다. 상기와 같은 조성물에서, 퓨란설폰산 화합물은 대개 소량 성분(약 0.1 내지 약 50 중량% 또는 바람직하게는 약 1 내지 약 40 중량%)이며 나머지는 목적하는 투여형을 형성시키는데 도움이 되는 다양한 비히클 또는 담체 및 가공 보조제들이다.

경구 투여에 적합한 액체 형태는 완충제, 현탁 및 분배제, 착색제, 풍미제 등과 함께 적합한 수성 또는 비 수성 비히클을 포함할 수 있다. 고체 형태는 예를 들어 하기의 성분들, 또는 유사한 성질의 화합물들 중 어느 하나를 포함할 수 있다: 결합제, 예를 들어 미정질 셀룰로스, 트라가칸트 또는 젤라틴 검; 부형제, 예를 들어 전분 또는 락토오스, 붕해제, 예를 들어 알긴산, 프리모젤, 또는 옥수수 전분; 윤활제, 예를 들어 마그네슘 스테아레이트; 윤활제, 예를 들어 콜로이드성 이산화 규소; 감미제, 예를 들어 슈크로스 또는 사카린; 또는 풍미제, 예를 들어 페퍼민트, 메틸 살리실레이트, 또는 오렌지 풍미제.

주사 가능한 조성물은 전형적으로는 주사 가능한 멸균 염수 또는 포스페이트-완충 염수 또는 당해 분야에 공지된 다른 주사 가능한 담체를 기본으로 한다. 이전과 같이, 상기와 같은 조성물 중의 활성 화합물은 전형적으로는 소량 성분이며, 종종 약 0.05 내지 10 중량%이고 나머지는 상기 주사 가능한 담체 등이다.

경피 조성물은 전형적으로는 활성 성분(들)을, 일반적으로 약 0.1 내지 약 20 중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 20 중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 10 중량%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5 내지 약 15 중량% 범위의 양으로 함유하는 국소 연고 또는 크림으로서 제형화된다. 연고로서 제형화 시, 상기 활성 성분들을 전형적으로는 파라핀 또는 수-혼화성 연고 베이스와 배합할 것이다. 한편으로, 상기 활성 성분을 예를 들어 수중 유적형 크림 베이스와 함께 크림으로 제형화할 수 있다. 상기와 같은 경피 제형은 당해 분야에 널리 공지되어 있으며 일반적으로 상기 활성 성분 또는 제형의 피부 침투 안정성을 향상시키기 위한 추가의 성분들을 포함한다. 모든 상기와 같은 공지된 경피 제형 및 성분은 본 발명의 범위 내에 포함된다.

본 발명의 화합물을 또한 경피 장치에 의해 투여할 수 있다. 따라서, 경피 투여를 저장소나 다공성 멤브레인 유형, 또는 고체 기질 종류의 패치를 사용하여 수행할 수 있다.

경구 투여가능하거나, 주사 가능하거나 또는 국소 투여 가능한 조성물에 대해 상술한 성분들은 단지 전형적인 것이다. 다른 물질들뿐만 아니라 가공 기법 등이 문헌[Part 8 of Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th edition, 1985, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania](본 발명에 참고로 인용된다)에 나열되어 있다.

본 발명의 화합물을 또한 서방성 형태로 또는 서방성 약물 전달 시스템으로부터 투여할 수 있다. 전형적인 서방성 물질에 대한 설명을 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences]에서 찾을 수 있다.

하기의 제형예들은 본 발명에 따라 제조될 수 있는 전형적인 약학 조성물을 예시한다. 그러나, 본 발명은 하기의 약학 조성물들로 제한되지 않는다.

제형 1 - 정제

본 발명의 화합물을 무수 젤라틴 결합제와 적합한 1:2 중량비로 건조 분말로서 혼합할 수 있다. 소량의 마그네슘 스테아레이트를 윤활제로서 첨가한다. 상기 혼합물은 정제 프레스에서 240 내지 270 ㎎ 정제(정제당 80 내지 90 ㎎의 활성 아미드 화합물)로 형성된다.

제형 2 - 캡슐

본 발명의 화합물을 전분 희석제와 적합한 1:1 중량비로 건조 분말로서 혼합할 수 있다. 상기 혼합물을 250 ㎎ 캡슐(캡슐당 125 ㎎의 활성 아미드 화합물)에 충전한다.

제형 3 - 액체

본 발명의 화합물(125 ㎎)을 슈크로스(1.75 g) 및 잔탄 검(4 ㎎)과 함께 혼합하고 생성 혼합물을 블렌딩하고, 10 번 메쉬 U.S. 체에 통과시키고, 이어서 앞서 제조된 수중 미정질 셀룰로스 및 나트륨 카복시메틸 셀룰로스의 용액(11:89, 50 ㎎)과 혼합한다. 나트륨 벤조에이트(10 ㎎), 풍미제 및 착색제를 물로 희석하고 교반하면서 첨가한다. 이어서 충분한 물을 가하여 5 ㎖의 전체 부피를 생성시킬 수 있다.

제형 4 - 정제

본 발명의 화합물을 무수 젤라틴 결합제와 적합한 1:2 중량비로 건조 분말로서 혼합할 수 있다. 소량의 마그네슘 스테아레이트를 윤활제로서 첨가한다. 상기 혼합물은 정제 프레스에서 450 내지 900 ㎎ 정제(150 내지 300 ㎎의 활성 아미드 화합물)로 형성된다.

제형 5 - 주사

본 발명의 화합물을 완충된 멸균 염수 주사 가능한 수성 매질에 대략 5 ㎎/㎖의 농도로 용해하거나 현탁할 수 있다.

제형 6 - 국소

스테아릴 알콜(250 g) 및 백색 바셀린(250 g)을 약 75 ℃에서 용융시키고 이어서 물(약 370 g)에 용해된 본 발명의 화합물(50 g) 메틸파라벤(0.25 g), 프로필파라벤(0.15 g), 나트륨 라우릴 설페이트(10 g), 및 프로필렌 글리콜(120 g)의 혼합물을 가할 수 있으며 생성 혼합물을 응고시까지 교반할 수 있다.

치료 방법

본 발명의 화합물을 MMP1 및/또는 MAPKAPK5의 이상 활성과 인과 관계로 관련되거나 상기 활성에 기인하는 포유동물의 병을 치료하기 위한 치료제로서 사용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물 및 그의 약학 조성물은 인간을 포함한 포유동물에게서 염증성 질병의 예방 및/또는 치료를 위한 치료제로서 사용된다. 따라서, 및 초기에 서술한 바와 같이, 본 발명은 그의 범위 내에 상기 인용된 치료 방법뿐만 아니라 상기와 같은 방법에 사용하고 상기와 같은 방법에 유용한 약제의 제조를 위한 상기 화합물을 포함하며, 상기 화합물로 확장된다.

치료 방법의 태양에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는, 세포 외 기질(ECM) 분해와 관련된 병, 특히 관절염, 및 보다 특히 류머티스성 관절염에 걸리기 쉽거나 이에 걸린 포유동물을 치료하는 방법을 제공한다.

치료 방법의 또 다른 태양에서, 본 발명은 치료 유효량의 본 발명의 화합물 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는, MMP1의 이상 세포 발현과 관련된 병에 걸리기 쉽거나 이에 걸린 포유동물을 치료하는 방법을 제공한다.

치료 방법의 또 다른 태양에서, 본 발명은 치료학적으로 유효한 기질 메탈로 프로테이나제 억제량의 본 발명의 화합물 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는, 비정상적인 기질 메탈로 프로테이나제 활성을 특징으로 하는 병의 치료 또는 예방 방법을 제공한다.

치료 방법의 더욱 또 다른 태양에서, 본 발명은 유효한 병-치료 또는 병-예방 량의 본 발명의 화합물 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는, 염증에 의해 매개되거나 염증을 생성시키는 질병 또는 질환, 예를 들어 류머티스성 관절염 및 골관절염, 심근 경색, 다양한 자가면역 질병 및 질환, 포도막염 및 죽상경화증; 가려움증/소양증, 예를 들어 건선; 및 신장 질환에 걸리기 쉽거나 이에 걸린 포유동물의 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 마이토젠-활성화된 단백질 키나제-활성화된 단백질 키나제 5의 억제제의 투여에 의해 예방되거나, 개선되거나 제거되는 병, 또는 비정상적인 콜라게나제 활성을 특징으로 하는 병, 또는 ECM 분해와 관련된 병 또는 염증을 수반하는 병의 치료 또는 예방, 가장 바람직하게는 류머티스성 관절염의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서 본 발명 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 추가의 태양으로서 특히 상기 언급한 병 및 질병의 치료 또는 예방에 있어서 약제로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다. 또한 본 발명에서 상기 언급한 병 및 질병들 중 하나의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에 있어서 본 발명 화합물의 용도를 제공한다.

추가의 태양에서 본 발명은 MMP1 및/또는 MAPKAPK5의 이상 활성과 인과 관계로 관련되거나 상기 활성에 기인하는 포유동물의 병의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다. 특히 본 발명은 인간을 포함한 포유동물에게서 염증성 질병의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 본 발명의 화합물 및/또는 그의 약학 조성물을 제공한다.

추가의 태양에서, 본 발명은 세포 외 기질(ECM) 분해와 관련된 병, 특히 관절염, 및 보다 특히 류머티스성 관절염의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다.

추가의 태양에서, 본 발명은 MMP1의 비정상적인 세포 발현과 관련된 병의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다.

추가의 태양에서, 본 발명은 비정상적인 기질 메탈로 프로테이나제 활성을 특징으로 하는 병의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다.

추가의 태양에서, 본 발명은 염증에 의해 매개되거나 염증을 생성시키는 질병 또는 질환, 예를 들어 류머티스성 관절염 및 골관절염, 심근 경색, 다양한 자가면역 질병 및 질환, 포도막염 및 죽상경화증; 가려움증/소양증, 예를 들어 건선; 및 신장 질환의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다.

본 발명의 바람직한 섭생은 세포 외 기질 분해를 특징으로 하는 질병을 앓고 있는 환자에게서 비정상적인 수준의 세포 외 기질 분해를 감소시키고, 바람직하게는 상기 분해에 원인이 되는 저절로 계속되는(self-perpetuating) 과정들을 종결시키기에 충분한 기간 동안 유효한 기질 메탈로-프로테아제 억제 량의 본 발명의 화합물을 투여함을 포함한다. 상기 방법의 특별한 실시태양은 류머티스성 관절염을 앓고 있거나 이에 걸리기 쉬운 환자에게, 상기 환자의 관절에서 각각 콜라겐 및 골 분해를 감소시키거나 방지하고, 바람직하게는 상기 분해에 원인이 되는 저절로 계속되는 과정들을 종결시키기에 충분한 기간 동안, 유효한 기질 메탈로-프로테아제 억제 량의 본 발명의 화합물을 투여함을 포함한다.

본 발명의 화합물은 낮은 독성, 양호한 흡수, 양호한 반감기, 양호한 용해도, 낮은 단백질 결합 친화성, 적은 약물-약물 상호작용, 및 양호한 대사 안정성을 나타낼 수 있다. 특정 태양에서, 본 발명의 화합물은 약물학적 성질의 뜻밖의 현저한 개선, 특히 개선된 효능 및 개선된 허용성을 나타낸다. 상기 화합물이 상기 개선들 중 임의의 하나 이상을 나타내는 경우, 이는 본 발명에 개시된 병들에서 상기 화합물의 사용에 대해 효과를 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 화합물이 개선된 효능을 나타내는 경우, 상기 화합물을 보다 적은 용량으로 투여할 수 있으며, 따라서 임의의 가능한 바람직하지 못한 부작용의 발생을 감소시킬 수 있음을 기대할 수 있다. 유사하게, 상기 화합물이 증가된 허용성을 나타내는 경우, 상기 화합물을 원치않는 부작용의 발생 없이 보다 높은 농도로 투여할 수 있게 한다. 상기와 같은 효능 또는 허용성의 변경은 본 발명의 상기 화합물들에 대해 개선된 치료 창을 생성시킬 것으로 기대할 수 있다. 유사하게, 상기 나열된 다른 성질들의 개선도 또한 상기 화합물의 잠재적인 사용에 이점들을 부여할 것이다.

주사 용량 수준은 전부 약 1 내지 약 120 시간 및 특히 24 내지 96 시간 동안 약 0.1 내지 10 ㎎/㎏/시간 이상의 범위이다. 적합한 정상 상태 수준을 성취하기 위해서 또한 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 약 10 ㎎/㎏ 이상의 프리로딩(preloading) 일시주사를 투여할 수 있다. 상기 최대 전체 용량은 40 내지 80 ㎏ 인간 환자의 경우 약 2 g/일을 초과하지 않을 것으로 예상된다.

장기적인 병, 예를 들어 염증 및 자가면역 병의 예방 및/또는 치료를 위해서, 상기 치료 섭생을 대개는 수 개월 또는 수 년 이상 연장하며, 따라서 경구 투여가 환자의 편리성 및 허용성을 위해 바람직하다. 경구 투여의 경우, 하루에 1 내지 5 회 및 특히 2 내지 4 회 및 전형적으로 3 회 경구 용량이 전형적인 섭생이다. 상기 투여 패턴을 사용하는 경우, 각 용량은 약 0.01 내지 약 20 ㎎/㎏의 본 발명의 화합물을 제공하며, 바람직한 용량은 각각 약 0.1 내지 약 10 ㎎/㎏ 및 특히 약 1 내지 약 5 ㎎/㎏을 제공한다.

주사 용량을 사용하여 성취되는 경우와 유사하거나 이보다 낮은 혈액 수준을 제공하기 위해 일반적으로 경피 용량이 선택된다.

염증성 병의 발병을 예방하기 위해 사용되는 경우, 본 발명의 화합물을 상기 병의 발병 위험이 있는 환자에게, 전형적으로는 의사의 조언 및 관리 하에, 상술한 투여량 수준으로 투여할 것이다. 특정 병의 발병 위험이 있는 환자는 상기 병의 가족력이 있는 환자, 또는 유전자 시험 또는 선별에 의해 상기 병이 발병하기 특히 쉬운 것으로 확인된 환자를 포함한다.

본 발명의 화합물을 유일한 활성제로서 투여하거나 또는 다른 치료제들, 예를 들어 동일하거나 유사한 치료 활성을 나타내고 병행 투여에 대해 안전하고 효능 있는 것으로 결정된 다른 화합물들과 함께 투여할 수 있다. 특정 실시태양에서, 2 개(또는 그 이상) 작용제의 동시 투여는 각각을 현저하게 더 낮은 용량으로 사용할 수 있게 하며, 따라서 나타나는 부작용들이 감소된다.

하나의 실시태양에서, 본 발명의 화합물을 염증을 수반하는 질병의 치료 및/또는 예방을 위한 또 다른 치료제와 함께 투여하며; 특정 작용제는 비 제한적으로 면역조절제, 예를 들어 아자티오프린, 코르티코스테로이드, 사이클로포스파미드, 사이클로스포린 A, FK506, 마이코페놀레이트 모페틸, OKT-3 및 ATG를 포함한다.

하나의 실시태양에서, 본 발명의 화합물을 류머티스성 관절염의 치료 및/또는 예방을 위한 또 다른 치료제와 함께 투여하며; 특정 작용제는 비 제한적으로 진통제, 비-스테로이드성 소염 약물(NSAID), 스테로이드, 합성 DMARDS(예를 들어 비 제한적으로 메토트렉세이트, 레플루노미드, 설파살라진, 아우라노핀, 나트륨 아우로티오말레이트, 페니실라민, 클로로퀸, 하이드록시클로로퀸, 아자티오프린, 및 시클로스포린) 및 생물학적 DMARDS(예를 들어 비 제한적으로 인플릭시맵, 에타너셉트, 아달리뮤맵, 리툭시맵 및 아바타셉트)를 포함한다.

동시 투여는 숙련가에게 자명한 바와 같이, 2 개 이상의 치료제를 동일한 치료 섭생의 부분으로서 환자에게 전달하는 임의의 수단을 포함한다. 2 개 이상의 작용제들을 단일 제형으로 동시에 투여할 수도 있지만, 이는 필수적인 것은 아니다. 상기 작용제들을 상이한 제형 및 상이한 시간으로 투여할 수 있다.

일반적인 합성 과정

본 발명의 트라이아졸로피라진 및 이미다조피라진 화합물을 하기의 일반적인 방법 및 과정을 사용하여 쉽게 입수할 수 있는 출발 물질로부터 제조할 수 있다. 전형적이거나 바람직한 공정 조건들(즉 반응 온도, 시간, 반응물들의 몰 비, 용매, 압력 등)이 주어지는 경우, 달리 나타내지 않는 한 다른 공정 조건들도 또한 사용할 수 있음을 알 것이다. 최적 반응 조건은 사용되는 특정 반응물 또는 용매에 따라 변할 수 있지만, 상기와 같은 조건들은 통상적인 최적화 과정에 의해 당해 분야의 숙련가에 의해 결정될 수 있다.

또한, 당해 분야의 숙련가들에게 자명한 바와 같이, 몇몇 작용기들이 바람직하지 못한 반응을 겪지 않기 위해서 통상적인 보호 그룹들이 필요할 수 있다. 적합한 보호 및 탈보호 조건들뿐만 아니라 특정 작용기들에 적합한 보호 그룹의 선택은 당해 분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 다수의 보호 그룹들, 및 이들의 도입 및 제거가 문헌[T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Second Edition, Wiley, New York, 1991] 및 이 중에 인용된 참고문헌들에 개시되어 있다.

하기의 방법들을 상기 본 발명에 나타낸 전형적인 바이사이클로헤테로아릴들의 제조에 대한 상세한 설명과 함께 제공한다. 본 발명의 화합물을 유기 합성 분야의 숙련가에 의해, 공지되거나 상업적으로 입수할 수 있는 출발 물질로부터 제조할 수 있다.

모든 시약들은 상업적인 등급이며 달리 나타내지 않는 한 추가의 정제 없이 제공받은 대로 사용되었다. 상업적으로 입수할 수 있는 무수 용매들을 불활성 분위기 하에서 수행된 반응들에 대해 사용하였다. 시약 등급 용매를, 달리 나타내지 않는 한, 모든 다른 경우들에 사용하였다. 컬럼 크로마토그래피를 실리카젤 60(35-70 ㎛) 상에서 수행하였다. 박층 크로마토그래피를 예비 코팅된 실리카젤 F-254 플레이트(두께 0.25 ㎜)를 사용하여 수행하였다. ¹H NMR 스펙트럼을 브루커 DPX 400 NMR 광도계(400 MHz) 상에 기록하였다. ¹H NMR 스펙트럼에 대한 화학 이동(δ)은 내부 기준으로서 테트라메틸실란(δ 0.00) 또는 적합한 잔류 용매 피크, 즉 CHCl₃(δ 7.27)에 대한 ppm으로 기록한다. 중복성을 단일선(s), 이중선(d), 삼중선(t), 사중선(q), 다중선(m) 및 브로드(br)로서 제공한다. 커플링 상수(J)를 Hz로 제공한다. 전기분무 MS 스펙트럼을 마이크로매스 플랫폼 LC/MS 광도계 상에서 획득하였다. 모든 LCMS 분석에 대해 사용된 컬럼: 워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC BEH C18 1.7 ㎛, 2.1 ㎜ ID x 50 ㎜ L(파트 No. 186002350). 예비 HPLC: 워터스 XBridge Prep C18 5 ㎛ ODB 19 ㎜ ID x 100 ㎜ L(파트 No. 186002978). 상기 방법들은 모두 MeCN/H₂O 구배를 사용한다. H₂O는 0.1% TFA 또는 0.1% NH₃를 함유한다.

실험 부분에 사용된 약어들의 목록

DCM: 다이클로로메탄

DiPEA: N,N-다이아이소프로필에틸아민

MeCN 아세토나이트릴

BOC 3급-부틸옥시-카보닐

DMF N,N-다이메틸폼아미드

TFA 트라이플루오로아세트산

THF 테트라하이드로퓨란

NMR 핵 자기 공명

DMSO 다이메틸설폭사이드

DPPA 다이페닐포스포릴아지드

LC-MS 액체 크로마토그래피-질량 분광측정

Ppm 백만 당 부

EtOAc 에틸 아세테이트

APCI 대기압 화학 이온화

Rt 체류 시간

s 단일선

br s 브로드 단일선

m 다중선

d 이중선

PdCl₂dppf [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)

TEA 트라이에틸아민

AIBN 2,2'-아조비스아이소부티로나이트릴

IPA 아이소-프로필 알콜

BINAP 2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸

MTBE 메틸 3급-부틸 에테르

2-MeTHF 2-메틸 테트라하이드로퓨란

EDTA 에틸렌다이아민테트라아세트산

ATP 아데노신 트라이포스페이트

EGTA 에틸렌 글리콜 테트라아세트산

BSA 소 혈청 알부민

DTT 다이티오쓰레이톨

FBS 소 태아 혈청

PBST 트윈 3.2 mM Na2HPO4, 0.5 mM KH2PO4, 1.3 mM KCl, 135 mM NaCl, 0.05% 트윈 20, pH 7.4를 갖는 포스페이트 완충 염수

MMP 기질 메탈로 프로테이나제

shRNA 짧은 헤어핀 RNA

RNA 리보핵산

Ad-Si RNA 아데노바이러스 암호화된 siRNA

DMEM 둘베코의 변형된 이글 배지

APMA 4-아미노페닐머큐릭 아세테이트

hCAR 인간 세포 아데노바이러스 수용체

dNTP 데옥시리보뉴클레오사이드 트라이포스페이트

QPCR 정량적인 폴리머라제 쇄 반응

cDNA 데옥시리보핵산 사본

GAPDH 글리세르알데하이드 포스페이트 데하이드로게나제

PVDF 폴리비닐리덴 플루오라이드

RIPA 완충제

방사성면역침전 분석 완충제

MAPKAPK5 마이토젠-활성화된 단백질 키나제-활성화된 단백질 키나제 5

PBMC 말초 혈액 단핵 세포

TNFα 종양 괴사 인자 알파

LPS 리포폴리사카라이드

ip 복강 내

iv 정맥 내

본 발명 화합물의 합성적 제조

중간체의 합성

중간체 Ia : 3,6- 다이브로모 -피라진-2- 일아민의 제조

일반적인 반응식:

단계 1: 상기 일반적인 반응식에 개시된 바와 같은 화합물 (B): 3,6-다이브로모-피라진-2-카복실산의 합성

LiOH(655 ㎎, 27 mmol)를 THF:물:MeOH(18:4.5:4.5 ㎖) 중의 3,6-다이브로모-피라진-2-카복실산 메틸 에스터(A)(J. Med. Chem. 1969, 12, 285-87)(2.7 g, 9 mmol)의 용액에 가한다. 상기 반응물을 5 ℃에서 30 분간 교반하고, 진공 하에서 농축시키고, DCM에 용해시키고 1N HCl로 세척한다. 유기 상을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시켜 화합물(B)을 제공한다. ¹H NMR(250 MHz, CDCl₃)δ(ppm) 8.70(s, 1H).

단계 2: 상기 일반적인 반응식에 개시된 바와 같은 화합물 (C): 3,6-다이브로모-피라진-2-일아민의 합성

다이페닐포스포릴아지드(2.59 ㎖, 12 mmol) 및 트라이에틸아민(1.67 ㎖, 12 mmol)을 t-부탄올(90 ㎖) 중의 3,6-다이브로모-피라진-2-카복실산(3.52 g, 12 mmol)의 용액에 가한다. 상기 반응물을 18 시간 동안 가열 환류시킨다. 상기 반응물을 물로 급냉시키고, 이어서 진공 하에서 농축시키고 DMC에 용해시킨다. 상기 유기 용액을 물 및 1N NaOH로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시킨다. 생성된 고체를 EtOAc를 사용하여 실리카 패드를 통해 여과하고, 이어서 농축시키고 TFA:DCM(4:1, 12 ㎖)을 상기 고체에 가하고 30 분간 교반한다. 상기 용액을 진공 하에서 농축시키고 이어서 1N NaOH로 중화시키고 DCM으로 추출한다. 유기 층을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시켜 생성물을 제공한다. ¹H NMR(250 MHz, DMSO-d6)δ(ppm) 7.25(br s,2H), 7.68(s,1H); m/z(APCI)254(M+H)⁺; m.p 135-139 ℃.

중간체 1b: 3- 클로로 -6- 브로모 -피라진-2-일- 아민의 제조

한편으로 3-클로로-6-브로모피라진-2-일-아민을 3,6-다이브로모-피라진-2-일 아민 대신에 사용할 수 있으며 하기 반응식에 따라 제조한다:

단계 1: 상기 일반적인 반응식에 개시된 바와 같은 화합물 (A'): 2-클로로-3,5-다이브로모-피라진의 합성

0 ℃로 냉각시킨 DMC(20 ㎖) 중의 2-아미노-3,5-다이브로모피라진(3.21 g, 12.692 mmol)의 잘 교반된 용액에 TiCl₄(2.41 g, 12.692 mmol, 1.00 당량)를 한 번에 가하여, 짙은 적색 슬러리를 제공한다. 이어서 t-부틸나이트릴(2.62 g, 25.385 mmol, 2.00 당량)을 적가하여, 상기 용액이 밝은 황색으로 변화를 일으킨다. 이어서 빙 욕을 제거하고 이어서 상기 반응을 실온에서 진행시킨다. 추가의 TiCl₄(1.50 g, 1.2 당량)를 가하고 상기 혼합물을 1 시간 동안 추가로 교반한다. 이 시점에서 오렌지색 용액이 형성되었으며 LC-MS는 출발 물질이 목적하는 생성물(매우 불충분하게 이온화한다)로 완전히 전환됨을 보인다. 물(100 ㎖)을 상기 반응물에 가하여, 유화액이 형성된다. DCM(50 ㎖)을 가하고, 상기 DCM 층이 분리되며, 수성 층을 상기 DCM 층이 무색이 될 때까지 DCM(3 x 50 ㎖)으로 추가로 추출한다. 상기 DCM 층을 모으고, 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켜, 용매를 제거한 후에 오렌지색 오일로서 화합물 A'(2.81 g, 82%)를 제공하고, 이를 그 자체로서 다음 단계에 사용한다.

단계 2: 상기 일반적인 반응식에 개시된 바와 같은 화합물 (B'): 3-클로로-6-브로모피라진-2-일 아민의 합성

선행 단계에 개시된 화합물 A'(9.5 g, 37.55 mmol)를 농축된 NH₄OH(60 ㎖)에 현탁하고, 생성 혼합물을 가압 오토클레이브에서 80 ℃로, 전형적으로는 밤새 가열한다. 이어서 상기 용기를 실온으로 서서히 냉각시키고 이어서 빙 욕에서 추가로 냉각시켜 목적하는 물질을 침전시킨다. 상기 고체를 여과에 의해 분리시키고, 사이클로헥산으로 세척하여, 건조시킨 후에 위치이성체들의 83/17 혼합물로서 표제 화합물 B'(5 g)을 제공한다. 이어서 상기 혼합물을 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시킨다. M+H+, m/z = 209

중간체 2: 5,8- 다이브로모 - 이미다조[1,2-a]피라진

브로모아세트알데하이드 다이에틸 아세탈(49 ㎖, 326 mmol) 및 48% 브롬화 수소산을 1.5 시간 동안 가열 환류하고, 이어서 프로판-2-올(600 ㎖)에 붓고, NaHCO₃로 급냉시킨다. 여과 후에, 3,6-다이브로모피라진-2-일 아민(41.34 g, 163 mmol)을 상기 용액에 가하고 밤새 가열 환류한다. 상기 반응물을 냉각시키고 용매를 진공 하에서 제거한 다음 수성 NaHCO₃를 첨가하고 EtOAc로 추출한다. 유기 상을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 하에서 농축시켜 갈색 고체를 제공한다.

중간체 3: 5,8- 다이브로모 -[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진

일반적인 반응식:

단계 1: N'-(3,6-다이브로모-피라진-2-일)-N,N-다이메틸폼아미딘(D)

에탄올(150 ㎖) 중에 현탁된, 3,6-다이브로모-피라진-2-일아민(15.37 g, 60.80 mmol) 및 N,N-다이메틸폼아미드 다이메틸 아세탈(10.1 ㎖, 76.00 mmol)의 혼합물을 2 시간 동안 환류시킨다. 반응 혼합물을 진공 하에서 증발시켜 표제 화합물을 제공한다.

단계 2: N-(3,6-다이브로모-피라진-2-일)-N'-하이드록시폼아미딘(E)

메탄올(200 ㎖) 중의 N'-(3,6-다이브로모-피라진-2-일)-N,N-다이메틸폼아미딘(18.6 g, 60.80 mmol)의 용액에 하이드록실아민 하이드로클로라이드(5.91 g, 85.12 mmol)를 한 번에 가한다. 상기 반응물을 실온에서 16 시간 동안 교반한다. 용매를 증발시키고 고체 잔사를 냉(빙 냉각) 수로 처리하고 여과에 의해 수거한다. 침전물을 물 및 석유 에테르로 2 회 세척하고 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 제공한다.

단계 3: 5,8-다이브로모-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진(F)

N-(3,6-다이브로모-피라진-2-일)-N'-하이드록시폼아미딘(17.4 ㎎, 58.80 mmol)을 50 ℃에서 1 시간 동안 및 70 ℃에서 1.75 시간 동안 폴리인산(150 g)으로 처리한다. 실온으로 냉각시킨 후에, 물을 상기 반응 혼합물에 가한다. 생성 현탁액을, 고체 NaHCO₃를 조금씩 조심스럽게 가하여 pH 8로 만든다. 형성된 침전물을 여과에 의해 수거하고, 1N NaOH로 1 회, 물로 3 회 세척하고 진공 하에서 건조시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트와 1N NaOH 사이에 분배시키고 유기상을 1N NaOH로 1 회 더 및 염수로 1 회 세척한다. 유기상을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시켜 백색 고체로서 표제 화합물(10.15 g)을 제공한다.

중간체 4: 5-(4,4,5,5- 테트라메틸 -[1,3,2] 다이옥사보로란 -2-일)-2,3- 다이하 이드로- 아이소인돌 -1-온

단계 1: 4-브로모-2-브로모메틸-벤조산 메틸 에스터

4-브로모-2-메틸-벤조산(4.6 g, 21.39 mmol)을 MeOH 중의 2M HCl에 용해시키고 3 시간 동안 환류시킨다. 용매를 증발시켜 4-브로모-2-메틸-벤조산 메틸 에스터(4.24 g, 86%)를 제공한다. 상기 중간체(18.51 mmol)를 사염화 탄소(100 ㎖)에 용해시키고 N-브로모숙신이미드(5.57 g, 24.06 mmol)를 가한다. 이어서 AIBN(122 ㎎, 740 μmol)을 가하고 상기 혼합물을 질소로 5 분간 퍼징시킨다. 이어서 반응 혼합물을 4 시간 동안 환류시킨다. 실온으로 냉각시킨 후에 반응 혼합물을 여과하고 여액을 증발시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카젤, 2:1 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제시켜 표제 화합물(3.42 g, 60%)을 제공한다.

단계 2: 5-브로모-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온

4-브로모-2-브로모메틸-벤조산 메틸 에스터(0.5 g, 16.2 mmol)를 메탄올 암모니아(10 ㎖, MeOH 중의 7N NH₃)로 90 ℃에서 5 분간 처리한다. 실온으로 냉각시킨 후에 형성된 침전물을 여과하고 소량의 메탄올로 세척하여 무색 고체로서 표제 화합물(224 ㎎, 65%)을 제공한다.

단계 3: 5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보로란-2-일)-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온

5-브로모-2,3,-다이하이드로-아이소인돌-1-온(230 ㎎, 1.08 mmol), 비스(피나콜레이토)다이보론(300 ㎎, 1.18 mmol), PdCl₂dppf(25 ㎎, 31 μmol) 및 KOAc(320 ㎎, 3.26 mmol)를 다이옥산(4 ㎖)에 현탁하고, 5 분간 질소로 퍼징시키고 이어서 85 ℃에서 밤새 가열한다. 용매를 진공 하에서 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배시킨다. 수성층을 에틸 아세테이트로 3 회 추출하고 합한 유기 상들을 염수로 1 회 세척하고, 무수 MgSO₄를 통해 여과하고 증발시킨다. 고체 잔사를 헥산으로 연마하고 진공 하에서 건조시켜 회색 고체로서 표제 화합물(185 ㎎, 66%)을 제공한다.

중간체 5: 4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -[1,3,2] 다이옥사보로란 -2-일)- 퓨란 -2- 카복 실산 아미드

단계 1: 4-브로모-퓨란-2-카복실산 아미드

NH₄OH(100 ㎖) 중의 4,5-다이브로모-퓨란-2-카복실산(12.5 g, 46.32 mmol)의 냉각된(냉 수 욕 사용) 용액에 아연 분진(활성화된, 분말화된(2M HCl, 물, MeOH, CH₂Cl₂로 세척된) 4.54 g, 65.39 mmol)을 조금씩 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고 이어서 셀라이트 상에서 여과하고 물로 세척한다. 여액을 -10 ℃(빙/염 욕)로 냉각시키고 농 HCl을 사용하여 pH 1로 서서히 산성화시킨다. 수성 층을 에틸 아세테이트(4 x)로 바로 추출한다. 유기상을 염수로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 하에서 농축시켜 오일(4.96 g)을 제공하며, 이는 정치 시 고화되어 백색 고체를 제공하고, 이를 추가의 정제 없이 사용한다.

상기 고체(4.93 g, 25.81 mmol)를 염화 티오닐(44.2 ㎖)에 용해시키고 1 시간 동안 환류시킨다. 용매를 진공 하에서 제거한 후에 잔사를 다이클로로메탄(75 ㎖)에 용해시키고 다이옥산(52 ㎖) 중의 0.5M NH₃ 용액을 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 이어서 33% 수성 NH₃(5 ㎖)를 가하고 반응물을 추가로 2 시간 동안 교반한다. 용매를 진공 하에서 제거하고 잔사를 포화된 NaHCO₃ 용액으로 용해시킨다. 상기 염기성 용액을 에틸 아세테이트(3 x)를 사용하여 추출하고, 합한 유기층들을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시킨다. 에틸 아세테이트:석유 에테르:아세트산(50:49:1)의 혼합물로 용출시키면서 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물(1.2 g, 22%)을 제공한다.

단계 2: 4-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보로란-2-일)-퓨란-2-카복실산 아미드

4-브로모-퓨란-2-카복실산 아미드(1.2 g, 6.32 mmol), 비스(피나콜레이토)다이보론(1.76 g, 6.94 mmol), PdCl₂dppf(0.154 g, 0.189 mmol) 및 KOAc(1.85 g, 18.94 mmol)를 다이옥산(20 ㎖)에 현탁하고, 질소로 5 분간 퍼징하고 이어서 85 ℃에서 밤새 가열한다. 용매를 진공 하에서 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배시킨다. 수성층을 에틸 아세테이트로 4 회 추출하고, 무수 MgSO₄를 통해 여과하고 증발시킨다. 상기 고체 잔사를 헥산으로 연마하고 진공 하에서 건조시켜 고체로서 표제 화합물(0.984 g, 66%)을 제공한다. N.B. 화합물은 ¹H-NMR에 의하면 대개 50 내지 60% 순수하다.

중간체 5에 대한 또 다른 경로:

3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보로란-2-일)-퓨란(5.0 g, 25.77 mmol)을 무수 아세토나이트릴(30 ㎖)에 용해시킨다. 무수 아세토나이트릴(20 ㎖) 중의 클로로설포닐아이소시아네이토(5.47 g, 38.65 mmol, 1.5 당량) 용액을 실온에서 상기 퓨란에 한 번에 가하여 분홍색 용액을 생성시키고 이는 밤새 침전하여 황색으로 변한다. 생성 용액을 빙 욕으로 냉각시키며, 물(5 ㎖)을 가하고 발열 반응이 일어난다. 생성 혼합물을 DCM(100 ㎖)과 물(30 ㎖) 사이에 분배시킨다. 수성 층을 DCM(50 ㎖)으로 3 회 더 추출하고, 이어서 유기층들을 모으고, 염수(10 ㎖)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 최종적으로 용매를 진공 하에서 제거한다. 유성 잔사를 DCM(3 ㎖)에 용해시키고, 초음파 처리하여 결정성 고체의 현탁액을 제공한다. 상기 고체를 여과에 의해 분리시키고, 케이크를 매우 소량의 DCM으로 세척하고, 이어서 다이에틸 에테르로 세척하고 흡입 하에 건조시켜 백색 분말로서 표제 화합물 3 g을 제공한다.

중간체 6: 2- 에톡시피리딜 -4- 보론산 피나콜 에스터

2-에톡시-4-브로모피리딘(2.5 g, 12.4 mmol), 비스-피나콜레이토다이보론(3.4 g, 13.7 mmol) 및 칼륨 아세테이트(3.64 g, 37.20 mmol)를 1,4-다이옥산(40 ㎖)에 용해시키고 질소로 15 분간 탈기시킨다. 이어서 PdCl₂dppf(3 몰%, 0.37 mmol, 0.3 g)를 가하고 상기 혼합물을 90 ℃에서 16 시간 동안 밀폐된 용기 중에서 가열하였다. 물을 가하고 상기 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 상기 유기물질을 염수로 세척하고 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고 이어서 진공 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카(가솔린에서부터 가솔린 중 10% EtOAc로) 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 엷은 색 오일로서 2-에톡시피리딜-4-보론산 피나콜 에스터(2.58 g, 83%)를 제공한다.

중간체 7: 4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로 [2.2.1]헵트-2-일)- 페닐아민

단계 1: ((1S,4S)-5-(4-나이트로-페닐)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터

4-플루오로나이트로페닐(4.00 g, 28.348 mmol), DiPEA(5.89 ㎖, 60.667 mmol, 2.14 당량) 및 (1S,4S)-2-BOC-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄(6.02 g, 30.333 mmol, 1.07 당량)을 아세토나이트릴(20 ㎖) 중에서 혼합한다. 생성 용액을 밤새 가열 환류시키고, 그 후에 완전한 전환이 일어났다. 상기 용매를 진공 하에서 제거하고, 상기 황색 고체 잔사를 0.25 시간 동안 사이클로헥산(50 ㎖) 중에서 교반하고, 이어서 침전시키고, 상등액을 버리고, 상기 과정을 2 회 반복한다. 세 번째로, 상기 고체를 여과에 의해 분리시키고, 흡입 하에서 건조시켜 황색 고체로서 순수한 표제 화합물(8.8 g)을 제공한다.

단계 2: (1S,4S)-2-(4-나이트로-페닐)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄

선행 단계에서 수득한 고체(8.2 g)를 DCM(12 ㎖) 및 TFA(12 ㎖)의 혼합물에 용해시킨다. 상기 반응을 RT에서 2 시간 동안 진행시키고, 이 시점에서 완전한 탈보호가 일어났다. 휘발성 물질을 진공 하에서 제거하고 조 생성물 고체를 그 자체로서 추가의 처리 없이 사용한다.

단계 3: (1S,4S)-2-아이소프로필-5-(4-나이트로-페닐)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄

선행 단계에서 수득된 조 화합물(6.22 g, 28.356 mmol)을 아세토나이트릴(70 ㎖)에 용해시킨다. K₂CO₃(19.59 g, 141.770 mmol, 5.00 당량)를 가한 다음, i-프로필 요오다이드(9.64 g, 56.708 mmol, 2.00 당량)를 가하고 생성 현탁액을 교반하면서 3 시간 동안 가열 환류시키고, 이 시점에서 완전한 전환이 일어났다. 상기 반응 혼합물을 DCM(100 ㎖)과 물(50 ㎖) 사이에 분배시킨다. 유기층을 물(50 ㎖), 염수(25 ㎖)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 하에서 증발시켜 황색 고체로서 표제 화합물(9.90 g)을 제공한다.

단계 4: 4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐아민

선행 단계에서 수득된 화합물(3.30 g, 9.35 mmol)을 EtOH(107 ㎖)에 용해시킨다. 상기 시스템을 탈기시키고 질소 하에 둔다. 10% Pd/C(0.50 g, 5 몰%)를 가한 다음 수중 35% 하이드라진(4.3 ㎖, 46.75 mmol, 5 당량)을 가하고, 완전한 전환이 일어날 때까지(전형적으로 1 시간) 상기 반응을 100 ℃에서 진행시킨다. 이어서 상기 반응물을 냉각시키고, 셀라이트 상에서 여과하고 여액을 진공 하에서 증발시켜 분홍색 오일로서 표제 화합물(2.07 g)을 제공한다.

중간체 8: ((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵트-2- 일)- 페닐아민

단계 1: (2S,4R)-4-하이드록시-1-(4-나이트로-페닐)-피롤리딘-2-카복실산 메틸 에스터

(2S,4R)-L-프롤린 메틸 에스터(4.7 g, 25.878 mmol)를 아세토나이트릴(10 ㎖) 및 DiPEA(13.5 ㎖, 77.635, 3 당량)에 용해시킨다. 이어서 4-플루오로나이트로벤젠을 상기 반응 혼합물에 가하고 이를 밤새 50 ℃로 가열한다. 용매 제거 후에, 진공 하에서 상기 오렌지색 유성 잔사를 DCM(50 ㎖)과 물(pH 4)(50 ㎖) 사이에 분배시킨다. 수성층을 DCM(4 x 50 ㎖)으로 추가로 추출하고, 합한 유기층을 염수로 세척하고 무수 MgSO₄ 상에서 건조시켜 오렌지색 오일로서 표제 화합물을 제공한다.

단계 2: (3R,5S)-5-하이드록시메틸-1-(4-나이트로-페닐)-피롤리딘-3-올

선행 단계에서 수득된 화합물(6.89 g, 25.878 mmol)을 THF(50 ㎖)에 용해시키고 LiBH₄(51.756 mmol, 1.13 g, 2.00 당량)를 상기 생성 용액에 조금씩 가하여 비등이 일어난다. 생성 혼합물을 완전한 전환이 일어날 때까지 실온에서 반응시킨다. 이어서 상기 반응물을 1M HCl로 pH 7로 급냉시키고, 생성 용액을 DCM(100 ㎖)과 물(50 ㎖) 사이에 분배시킨다. 이어서 수성층을 DCM(4 x 50 ㎖)으로 추출한다. 유기층을 모으고, 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켜 황색 오일로서 표제 화합물(3.2 g)을 제공하고 이를 그 자체로서 다음 단계에 사용한다.

단계 3: (3R,5S)-3-토실옥시-5-토실옥시메틸-1-(4-나이트로-페닐)-피롤리딘

선행 단계에서 수득된 다이올(6.2 g, 25.878 mmol)을 피리딘(31 ㎖)에 용해시키고 0 ℃로 냉각시킨다. 이어서 토실 클로라이드(14.8 g, 77.734 mmol, 3 당량)를 한 번에 가하고 상기 혼합물을 상기 온도에서 교반하고 필요 시까지 냉동기에 보관한다.

단계 4: (1S,4S)-2-3급-부틸-5-(4-나이트로-페닐)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄

선행 단계에서 수득된 다이-토실화된 물질(1 g, 1.829 mmol)을 가압 튜브에서 톨루엔(3 ㎖)에 용해시키고, t-부틸 아민(0.67 g, 9.147 mmol, 5 당량)을 가하고, 따라서 암적색 용액을 제공한다. 이어서 상기 튜브를 밀폐시키고 밤새 110 ℃로 가열하고, 이 시점에서 출발 물질의 완전한 전환이 일어났다. 조 혼합물을 실온으로 냉각시키고 DCM(20 ㎖)으로 희석하고, 이어서 3M HCl(2 x 10 ㎖)로 추출한다. 산성 수성층을 모으고, DCM(5 ㎖)으로 세척하고, 이어서 10% NaOH를 가하여 pH = 12 내지 13으로 염기성으로 만든다. 생성된 염기성 층을 DCM(4 x 20 ㎖)으로 추출하고, 유기층을 모으고, 염수로 세척하고 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켜, 용매 제거 및 용출제로서 DCM/MeOH 96/4를 사용하여 실리카 크로마토그래피 후에 황색 오일로서 표제 화합물을 제공한다.

단계 5: 4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐아민

상기 화합물을 중간체 7, 단계 4에 대해 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

중간체 9: 4-(5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자바이사이클로[2.2.1]옥탄 -2-일)아닐린

상기 화합물을 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄 다이하이드로클로라이드(J. Heterocycl. Chem. 1974, 11, 449-451)를 사용하여 중간체 7에 대해 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

중간체 10: 4-(8- 아이소프로필 -3,8- 다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 -3-일)아닐린

상기 화합물을 8-(3급-부톡시카보닐)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄(J. Med. Chem. 1998, 41, 674-681)을 사용하여 중간체 7에 대해 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

중간체 11: 4-(8- 아이소프로필 -3,8- 다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 -3-일)아닐린

단계 1: 3-(3급-부톡시카보닐)-8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄

메탄올(25 ㎖) 중의 8-(3급-부톡시카보닐)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄(J. Med. Chem., 1998, 41, 674-681)(1.54 g, 7.25 mmol)의 용액에 나트륨 아세테이트(595.0 ㎎, 7.25 mmol), 아세트산(415 ㎕, 7.25 mmol) 및 아세톤(2.66 ㎖, 36.25 mmol)을 가한다. 상기 반응 혼합물을 1 시간 동안 40 ℃에서 교반하고, 이어서 시아노붕수소화 나트륨(912.0 ㎎, 14.50 mmol)을 가한다. 상기 반응물을 40 ℃에서 18 시간 동안 가열하고, 진공 하에서 농축시키고, DCM에 용해시키고 수성 NaHCO₃로 세척한다. 유기상을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시켜 3-(3급-부톡시카보닐)-8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄(1.51 g, 82%)을 제공한다.

단계 2: 8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄

상기 화합물을 중간체 7, 단계 2에 대해서 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

단계 3: 8-아이소프로필-3-(4-나이트로페닐)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄

상기 화합물을 중간체 7, 단계 3에 대해서 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

단계 4: 4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)아닐린

상기 화합물을 중간체 7, 단계 4에 대해서 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

중간체 12: 6-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자바이사이클로[2.2.1]헵 탄-2-일)피리딘-3-아민

상기 화합물을 2-클로로-5-나이트로피리딘을 사용하여 중간체 7에 대해서 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조한다.

중간체 13: 3-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자바이사이클로 [2.2.1]헵탄-2-일) 페닐아민

단계 1: (1S,4S)-2-아이소프로필-5-(3-나이트로페닐)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄

톨루엔(120 ㎖) 중의 BINAP(0.47 g, 0.75 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(0.34 g, 0.37 mmol)의 용액을 질소 하에서 15 분간 90 ℃로 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 40 ℃로 냉각시킨 후에 1-브로모-3-나이트로벤젠(1.89 g, 9.37 mmol), (1S,4S)-2-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄 다이하이드로클로라이드(2.0 g, 9.37 mmol) 및 나트륨 3급-부톡사이드(3.14 g, 32.74 mmol)를 가하였다. 상기 반응물을 질소 하에서 18 시간 동안 90 ℃로 가열하였다. 실온으로 복귀한 후에, 상기 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고 셀라이트를 통해 여과하였다. 상기 여액을 감압 하에서 농축시켰다. 잔사를 메탄올(96/4) 중의 DCM/7N NH₃의 혼합물로 용출시키면서 실리카젤 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물(1.92 g, 78%)을 제공하였다.

단계 2: 3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아민

선행 단계에서 수득된 화합물(1.92 g, 7.34 mmol)을 EtOH(50 ㎖)에 용해시켰다. 상기 시스템을 탈기시키고 질소 하에 두었다. 활성된 목탄(10%, 0.2 g) 상의 Pd(OH)₂를 가하고 생성 현탁액을 실온에서 수소 분위기 하에 18 시간 동안 교반하였다. 이어서 상기 반응물을 셀라이트 상에서 여과하고 여액을 진공 하에서 증발시켜 갈색 오일로서 표제 화합물(1.89 g, 98%)을 제공하였다.

중간체 14: 2-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵 트-2-일)-피리미딘-5- 일아민

상기 유형의 중간체를 문헌[DiMauro et al., J. Med. Chem., 2008, 51, 1681-1694]에 개시된 방법에 의해 제조할 수 있다. 2-클로로-5-나이트로피리미딘과 (1S,4S)-2-BOC-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄과의 초기 반응에 이어서 중간체 7에 대한 과정을 적용하여 본 발명의 화합물에 포함시키기에 적합한 중간체를 제공한다.

중간체 15: (4-아미노- 페닐 )-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2.5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵트 -2-일)- 메탄온

상기 유형의 중간체를 WO 2007/138072에 개시된 방법을 사용하여 생성시킬 수 있다. 4-나이트로벤조산과 (1S,4S)-2-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄과의 초기 반응에 이어서 상기 나이트로 그룹을 환원시켜 본 발명의 화합물에 포함시키기에 적합한 중간체를 제공할 것이다.

중간체 16: (1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵탄 -2-카복실산(4-아미노- 페닐 )-아미드

상기 유형의 중간체를 문헌[Bioorg. Med Chem Lett, 2008; 4838-4843]에 개시된 방법을 사용하여 생성시킬 수 있다. 1-아이소시아네이토-4-나이트로벤젠과 (1S,4S)-2-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄과의 초기 반응에 이어서 상기 나이트로 그룹을 환원시켜 본 발명의 화합물에 포함시키기에 적합한 중간체를 제공할 것이다.

중간체 17: (1R,4R)-2- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵탄 -다이하이드로브로마이드

단계 1: (2R,4R)-4-하이드록시-피롤리딘-2-카복실산 에틸 에스터(1)

절대 에탄올(20 ㎖) 중의 시스-4-하이드록시-피롤리딘-2-카복실산(1 g, 7.6 mmol)의 교반된 용액에 염화 티오닐(0.67 ㎖, 9.15 mmol)을 0 ℃에서 질소 분위기 하에 적가한다. 이어서 상기 반응 혼합물을 질소 하에서 약 2 시간 동안 환류시킨다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 모든 용매를 감압 하에서 제거한다. 백색 침전물을 여과하고 다이에틸 에테르(1 x 25 ㎖)로 세척하여 백색 고체로서 화합물(1)을 수득한다.

단계 2: (2R,4R)-1-(톨루엔-4-설포닐)-4-(톨루엔-4-설포닐옥시)-피롤리딘-2-카복실산 에틸 에스터(2)

피리딘(14 ㎖) 중의 4-하이드록시-피롤리딘-2-카복실산 에틸 에스터(1)(1.4 g, 7.1 mmol) 및 트라이에틸 아민(0.998 ㎖, 7.1 mmol)의 저온 용액에 -5 ℃에서 4-톨루엔설포닐 클로라이드(3.42 g, 17.9 mmol)를 조금씩 나누어 가하였다. 이어서 상기 저온 용액을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하고 밤새 냉장고에서 보관하였다. 이어서 상기 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 추가로 교반하고 빙 수(10 ㎖)에 부었다. 분리된 침전물을 여과하고, 물(2 x 5 ㎖)로 세척하고 건조시켜 백색 고체로서 화합물(2)을 제공하였다.

단계 3: (2R,4S)-4-아세톡시-1-(톨루엔-4-설포닐)-피롤리딘-2-카복실산 에틸 에스터(3)

무수 DMF(25 ㎖) 중의 1-(톨루엔-4-설포닐)-4-(톨루엔-4-설포닐옥시)-피롤리딘-2-카복실산 에틸 에스터(2)(1 g, 2.14 mmol)의 교반된 용액에 칼륨 아세테이트(0.314 g, 3.21 mmol)를 한 번에 가한다. 이어서 반응 혼합물을 60 ℃에서 4 시간 동안 가열한다. 물(50 ㎖)을 상기 반응 혼합물에 가하고, 에틸 아세테이트(2 x 75 ㎖)로 추출하고, 합한 유기층을 물(2 x 50 ㎖)로 세척하고, 건조시키고(Na₂SO₄), 여과하고 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 제공한다. 조 화합물을 용출제로서 15% 에틸 아세테이트-헥산을 사용하여 실리카젤(100 내지 200 메쉬) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 화합물(3)을 제공한다.

단계 4: (3S,5R)-5-하이드록시메틸-1-(톨루엔-4-설포닐)-피롤리딘-3-올(4)

THF(10 ㎖) 중의 4-아세톡시-1-(톨루엔-4-설포닐)-피롤리딘-2-카복실산 에틸 에스터(3)(0.65 g, 1.83 mmol)의 빙 냉 용액에 LiAlH₄(0.135 g, 3.66 mmol)를 조금씩 나누어 가한다. 이어서 상기 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한다. 반응의 완료 후에, 상기를 0 ℃로 냉각시키고 이어서 반응 혼합물의 pH를 6N HCl(0.65 ㎖)을 가하여 3으로 조절한다. 상기 혼합물을 농축시키고, 잔사를 물(8 ㎖)로 연마하고, 침전된 고체를 여과하고, 냉수(2 x 4 ㎖)로 세척하고, 감압 하에서 건조시켜 백색 고체로서 화합물(4)을 제공한다.

단계 5: (2R,4S)-1-(4-톨루엔설포닐)-2-[[(4-톨릴설포닐)옥시]-메틸]-4-[(4-톨릴설포닐)옥시]-피롤리딘(5)

피리딘(3 ㎖) 중의 5-하이드록시메틸-1-(톨루엔-4-설포닐)-피롤리딘-3-올(4)(0.45 g, 1.66 mmol)의 빙 냉 용액에 4-톨루일설포닐 클로라이드(1.11 g, 5.81 mmol)를 한 번에 가한다. 상기 온도가 50 ℃로 상승하고, 이어서 반응 혼합물을 10 ℃로 냉각시키고, 상기 온도에서 추가로 2 시간 동안 유지시키고 이어서 실온에서 밤새 방치시킨다. 상기 혼합물을 2N HCl(13 ㎖)에 붓는다. 냉각 시 상기 화합물은 침전하며 이를 여과에 의해 분리시키고, 냉수(2 x 5 ㎖)로 세척하고, 감압 하에서 건조시켜 백색 고체로서 화합물(5)을 제공한다.

단계 6: (1R,4R)-2-아이소프로필-5-(톨루엔-4-설포닐)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄(6)

무수 톨루엔(3 ㎖) 중의 (2R,4S)-1-(4-톨릴설포닐)-2-[[(4-톨릴설포닐)옥시]-메틸-4-[(4-톨릴설포닐)옥시]피롤리딘(5)(0.5 g, 0.93 mmol) 및 아이소프로필 아민(0.3 ㎖, 0.33 mmol)의 혼합물을 10 시간 동안 110 ℃로 가열한다. 이어서 상기 혼합물을 실온으로 냉각시키고; 고체가 분리되며 이를 여과에 의해 분리시키고 톨루엔(1 x 15 ㎖)으로 세척한다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 제공하고 이를 용출제로서 1% 트라이에틸아민-에틸 아세테이트를 사용하여 실리카젤(100 내지 200 메쉬) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물(6)을 제공한다.

단계 7: (1R,4R)-2-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄 다이하이드로브로마이드

33% HBr(0.5 ㎖) 및 아세트산(3 ㎖)의 용액에 70 ℃에서 (1R,4R)-2-아이소프로필-5-(톨루엔-4-설포닐)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄(6)(0.24 g, 0.000816 mol)을 가한다. 이어서 상기 혼합물을 동일한 온도에서 12 시간 동안 교반한다. 상기 혼합물을 10 ℃로 냉각시켜 백색 침전물을 제공하고 이를 여과하고 다이아이소프로필 에테르(1 x 5 ㎖) 및 에틸 아세테이트(1 x 5 ㎖)로 세척하고 감압 하에서 건조시켜 백색 고체로서 중간체 17을 제공한다.

중간체 18: 2- 카복스아미도 -4- 퓨란보론산

3-퓨란보론산 피나콜 에스터 15 g(77.3 mmol, 1.0 당량)을 아세토나이트릴 120 ㎖에 용해시키고, 클로로설포닐 아이소시아네이트 10.2 ㎖(116 mmol, 1.5 당량)을 한 번에 가한다. 교반을 밤새 계속한다. 완전한 전환이 LCMS에 의해 측정된다. H₂O 30 ㎖을 서서히 가하여 반응물을 급냉시킨다. 상기 용액을 농축시키고 IPA 100 ㎖을 가한다. 상기 과정을 반복하고 상기 반응 혼합물을, H₂O 120 ㎖ 및 IPA 8 ㎖을 가하여 희석하고 2 시간 동안 교반한다. 상기 과정 동안 형성된 침전물을 여과하고 H₂O 30 ㎖로 세척한다. 건조시킨 후에, 상기 고체를 IPA 120 ㎖ 및 H₂O 6 ㎖로부터 재결정화시킨다. 상기 결정을 IPA 30 ㎖로 세척하고 99+% 순도로 단리한다.

본 발명 화합물의 구체적인 실시예

화합물 1: 5-{8-[4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵트 -2-일)- 페닐아미노 ]-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}-2,3- 다이하이드로 - 아이소인돌 -1-온

상기 화합물을 상술한 상응하는 중간체를 사용하여 화합물 2에 대해 개시된 바와 동일한 과정에 따라 제조할 수 있다.

화합물 2: 4-{8-[4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵트 -2-일)- 페닐아미노 ]-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

단계 1: (5-브로모-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-8-일)-[4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐]-아민

5,8-다이브로모-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진(2.26 g, 8.14 mmol), 4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐아민(2.07 g, 8.95 mmol, 1.10 당량) 및 DiPEA(4.3 ㎖, 24.42 mmol, 3.00 당량)를 질소 하에서 아이소프로판올(28 ㎖) 중에서 혼합한다. 상기 반응물을 반응이 완료될 때까지(전형적으로 5 시간) 85 ℃로 가열한다. 용매를 진공 하에서 제거하고 잔사를 수성 나트륨 포스페이트 완충액(pH 7) 60 ㎖과 DCM 20 ㎖ 사이에 분배시키고, 유기층을 포화된 NaCl 60 ㎖로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 하에서 증발시켜 녹-흑색 발포성 고체로서 표제 화합물(3.67 g)을 제공한다.

단계 2: 4-{8-[4-(1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐아미노]-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드

선행 단계에서 수득된 화합물(3.25 g, 7.59 mmol)을 1,4-다이옥산(51 ㎖) 및 물(13 ㎖) 중의 4-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보로란-2-일)-퓨란-2-카복실산 아미드(2.70 g, 11.40 mmol, 1.50 당량), PdCl₂dppf.DCM(0.310 g, 0.38 mmol, 5 mol%), DiPEA(2.65 ㎖, 15.20 mmol, 2.00 당량)과 혼합한다. 상기 시스템을 스케일링하고, 진공/N2에 의해 퍼징하고 6 시간 동안 110 ℃로 가열하고, 이 시점에서 완전한 전환이 일어았다. 상기 반응 혼합물을 DCM(60 ㎖) 및 MeOH(60 ㎖)로 희석하고 셀라이트 상에서 여과한다. 상기 여액을 증발시켜 흐린 갈색 잔사를 제공한다. 상기 잔사를 EtOH(50 ㎖), MeOH(25 ㎖) 및 DCM(20 ㎖)으로 처리하고, 증발 건조시키고, 이어서 진공 하에 40 ℃에서 추가로 1 시간 동안 방치시켜 가능한 한 많은 수분 및 알콜을 제거하고자 한다. 상기 건조 잔사를 DCM(100 ㎖)에 현탁하고 약 1 시간 동안 초음파 처리하여 모든 고체 조각들을 분산시킨다. 미세 고체의 현탁액을 수득한다. 이를 0 ℃로 냉각시키고, 부흐너 상에서 여과하고, 상기 고체를 DCM(30 ㎖)으로 세척하고 진공 하에서 건조시켰다.

상기 잔사를 1M KOH(40 ㎖)로 처리하고, 상기 고체가 잘 분산될 때까지 초음파 처리하고 소결된 유리 깔때기 상에서 여과한다. 최종적으로, 상기 고체를 DCM(450 ㎖) 및 MeOH(50 ㎖)에 용해시키고, 포화된 수성 NaF(250 ㎖), 물(500 ㎖) 및 iPrOH(250 ㎖)의 혼합물로 세척한다. 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 하에서 증발시켜 황-갈색 고체로서 4-{8-[4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐아미노]-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카실산l아미드(2.34 g)를 제공한다.

화합물 3: 4-{8-[4-(1S,4S)-5-3급-부틸-2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵 트-2-일)- 페닐아미노 ]-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 4: 4-{8-[4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵트 -2-일)- 페닐아미노 ]- 이미다조[1,2-a]피라진 -5-일}- 퓨란 -2-카복스아미드

화합물 5: 5-{8-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일)- 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}-1H- 피라졸 -3- 카복스아미드

단계 1: 에틸 5-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피라진-1H-피라졸-3-카복실레이트

THF(3 ㎖) 중의 에틸 5-(트라이부틸스타닐)-1H-피라졸-3-카복실레이트(109.0 ㎎, 0.25 mmol)(Heterocycles, 1992, 813-818), (5-브로모-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-8-일)-[4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-페닐]아민(163.0 ㎎, 0.38 mmol) 및 Pd(PPh₃)₂Cl₂(27.0 ㎎, 0.04 mmol)의 혼합물을 18 시간 동안 환류시킨다. 실온으로 복귀 후에, 용매를 감압 하에서 제거한다. 상기 잔사를 메탄올 중의 DCM/7N NH₃의 혼합물(97/3)로 용출시키면서 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물(35.0 ㎎, 28%)을 제공한다.

단계 2: 5-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복스아미드

메탄올(12 ㎖) 중의 선행 단계에서 수득된 화합물(30.0 ㎎, 0.06 mmol), 염화 암모늄(200 ㎎) 및 수산화 암모늄(2 ㎖)의 혼합물을 85 ℃에서 18 시간 동안 가열한다. 실온으로 복귀 후에, 용매를 감압 하에서 제거한다. 메탄올 중의 DCM/7N NH₃의 혼합물(95/5)로 용출시키면서 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물(20.0 ㎎, 71%)을 제공한다.

화합물 6: 4-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵탄 -2-일)- 페닐아미노 ) 이미다조 [1,2-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 7: 4-{8-(6-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일)피리딘-3- 일아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 8: 4-{8-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일)- 페닐아미노 ) 이미다조 [1,2-a]피라진-5-일}-1H-피리딘-2-온

단계 1: 5-(2-에톡시피리딘-4-일)-N-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐)이미다조[1,2-a]피라진-8-아민

단계 2: 4-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)이미다조-[1,2-a]피라진-5-일}-1H-피리딘-2-온

선행 단계에서 수득된 화합물(135.0 ㎎, 0.29 mmol) 및 피리딘 하이드로클로라이드(332.0 ㎎, 2.90 mmol)의 혼합물을 18 시간 동안 120 ℃로 가열한다. 실온으로 복귀 후에, 상기 조 물질을 메탄올에 용해시키고, 실리카 상에 건조 로딩한다. 메탄올 중의 DCM/7N NH₃의 혼합물(96/4)로 용출시키면서 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물(46.0 ㎎, 36%)을 제공한다.

화합물 9: 4-{8-(4-(5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.2]옥탄 -2-일) 페닐아미노 )[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 10: 4-{8-(4-(5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.2]옥탄 -2-일) 페닐아미노 )- 이미다조[1,2-a]피라진 -5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 11: 4-{8-(4-(3- 아이소프로필 -3,8- 다이아자바이사이클로[3.2.1]옥 탄-8-일) 페닐아미노 )- 이미다조[1,2-a]피라진 -5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 12: 4-{8-(4-(8- 아이소프로필 -3,8- 다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 -3-일) 페닐아미노 )[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 13: 4-{8-(4-(3- 아이소프로필 -3,8- 다이아자바이사이클로[3.2.1]옥 탄-8-일) 페닐아미노 )[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 14: 4-{8-(4-(8- 아이소프로필 -3,8- 다이아자바이사이클로[3.2.1]옥 탄-3-일) 페닐아미노 )- 이미다조[1,2-a]피라진 -5-일}- 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 15: 5-{8-(6-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일)피리딘-3- 일아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}-1H- 피라졸 -3- 카복실산 아미드

화합물 16: 5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1] 헵탄-2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로- 아이소인돌 -1-온

화합물 17: 5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}-1H- 피라졸 -3- 카복실산아미드

화합물 18: 5-{8-(6-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일)피리딘-3- 일아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일}-2,3- 다이하이드로 - 아이소인돌 -1-온

화합물 19: 5-(2- 에톡시피리딘 -4-일)-N-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-8-아민

화합물 20: 4-(8-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일)피리딘-2(1H)-온

화합물 21: 에틸 5-(8-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 - 바이사이클로[2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일)-1H- 피라졸 -3- 카복실레이트

상기 화합물의 제조는 상술한 상응하는 중간체를 사용하여 화합물 5에 대한 단계 1에 개시되어 있다.

화합물 22: 4-{8-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐 -아미노) 이미다조 [1,2-a]피라진-5-일}-1H-피리딘-2-온

상기 화합물의 제조는 상술한 상응하는 중간체를 사용하여 화합물 8에 대한 단계 1에 개시되어 있다.

화합물 23: 3-(8-(4-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일)-1,2,4- 옥사다이아졸 -5- 카복스아미드

단계 1: 8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로-[1,5-a]피라진-5-카보나이트릴

밀봉된 튜브를 (5-브로모-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-8-일)-[4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)페닐아민(화합물 2, 단계 1)(0.30 g, 0.70 mmol), 칼륨 페로시아나이드(0.13 g, 0.35 mmol), 탄산 나트륨(0.037 g, 0.35 mmol), 요오드화 칼륨(0.058 g, 0.35 mmol), 구리(II) 테트라플루오로보레이트 하이드레이트(0.36 g, 1.05 mmol), DMA(5 ㎖) 및 N,N-다이메틸에틸렌다이아민(340 ㎕, 3.15 mmol)으로 충전한다. 상기 반응 혼합물을 18 시간 동안 85 ℃에서 가열한다. 실온으로 복귀 후에, 상기 반응물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배시킨다. 수성 상을 에틸 아세테이트로 2 회 추출한다. 합한 유기 상들을 물로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시킨다. 상기 잔사를 메탄올 중의 DCM/7N NH₃의 혼합물(99/1)로 용출시키면서 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물을 제공한다.

단계 2: 3-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)-1,2,4-옥사다이아졸-5-카복스아미드

에탄올(300 ㎕) 중의 선행 단계에서 수득된 화합물(26.0 ㎎, 0.07 mmol), DIPEA(12 ㎕, 0.07 mmol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(5 ㎎, 0.07 mmol)의 혼합물을 85 ℃에서 18 시간 동안 가열한다. 실온으로 복귀 후에, 용매를 증발 건조시키고 잔사를 피리딘(400 ㎕)에 용해시킨다. 상기 용액을 0 ℃로 냉각시키고, 에틸 옥살릴 클로라이드(24 ㎕, 0.21 mmol)를 가하고 이어서 상기 반응물을 2 시간 동안 70 ℃로 가열한다. 실온으로 복귀 후에, 얼음 물을 가하고 30 분간 교반 방치한다. DCM(5 ㎖)을 가하고 수성 상을 2 회 추출한다. 합한 유기 상들을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시킨다. 상기 잔사를 메탄올 중의 DCM/7N NH₃의 혼합물(99/1에서 98/2)로 용출시키면서 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물을 제공한다.

화합물 24: 4-(8-(3-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일) 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 25: 4-(8-(3-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 ) 이미다조 [1,2-a]피라진-5-일) 퓨란 -2- 카복스아미드

화합물 26: 5-(8-(3-((1S,4S)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵탄 -2-일) 페닐아미노 )-[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일) 아이소인돌린 -1-온

화합물 27: 4-[8-({4-[(1R,4R)-5- 아이소프로필 -2,5- 다이아자 -바이사이클로[ 2.2.1]헵트 -2-일] 페닐 }아미노)[1,2,4] 트라이아졸로 [1,5-a]피라진-5-일]-2- 퓨라미드

(4-클로로나이트로벤젠/5,8-다이브로모[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진/가열/[5-(아미노카보닐)-3-퓨릴]보론산/가열/화합물 27)

단계 1: (1R,4R)-2-아이소프로필-5-(4-나이트로페닐)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄(3)

(1R,4R)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄 다이하이드브로마이드(2)(3.0 g; 9.9 mmol), 4-클로로나이트로벤젠(1.7 g; 11 mmol), 다이메틸설폭사이드(6.2 ㎖) 및 수돗물의 혼합물에 고체 K₂CO₃(1.7 g; mmol; 기체 발포)를 가한다. 생성 현탁액을 50 ℃로 가열하고, 그 후에 2-MeTHF(0.5 ㎖) 및 추가의 고체 K₂CO₃(1.9 g; mmol)를 가한다. 반응 온도를 125 ℃로 증가시키고 반응기 내용물을 상기 온도에서 밤새 유지시킨다. 상기 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각시키고, 그 후에 수돗물(25 ㎖)을 가한다. 상기 수성 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30 ㎖)로 추출하고 상기 합한 유기 추출물을 진공 하에서 농축시켜 고체 잔사를 제공하고, 이를 고온 MTBE(300 ㎖)에 재용해시킨다. 상기 고온 용액을 여과하여 잔류 고체를 제거하고 진공 하에서 농축시켜 조 물질(2)을 제공한다. 상기 조 물질을 에틸 아세테이트(70 ㎖)와 묽은 염산(pH 1; 250 ㎖) 사이에 분배시키고, 층들을 분리시키고, 수성 상을 에틸 아세테이트(2 x 50 및 2 x 100 ㎖)로 세척하고, 합한 유기 층들을 묽은 염산(pH 1; 100 ㎖)으로 추출하고, 합한 수성 층을 10N 수성 NaOH로 pH 10으로 염기성으로 만들고, 상기 알칼리성 수성 층을 MTBE(2 x 200 ㎖) 및 에틸 아세테이트(2 x 200 ㎖)로 추출하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시킴으로써 정제시켜 백색 고체를 제공한다. 상기 고체를 헵탄/MTBE 1:1 v/v(20 ㎖)에 재슬러리화하고, 생성 현탁액을 여과하고 필터 케이크를 헵탄/MTBE 1:1 v/v(20 ㎖)로 세척하고 공기 건조시켜 백색 고체로서 (3)을 제공한다.

LC-순도: 99.3 면적-%

단계 2: 4-[(1R,4R)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일]아닐린(4)

2-MeTHF(25 ㎖) 중의 3(1.6 g; 6.1 mmol)의 용액을 Pd/C 촉매(10% Degussa 유형 E101 NE/W; 0.1 g)의 존재 하에 1 바 수소 분위기 하에서 30 ℃에서 3 시간의 기간 동안 교반한다. 상기 촉매를 다이칼라이트(Dicalite) 478의 층 상에서 여과하고 필터 케이크를 2-MeTHF(2 x 10 ㎖)로 세척한다. 여액을 진공 하에서 25 ㎖의 부피로 농축시키고 생성 용액을 그 자체로서 다음 단계에 사용한다.

단계 3: 5-브로모-N-{4-[(1R,4R)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일]페닐}[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-8-아민(5)

단계 2로부터 수득된 용액에 5,8-다이브로모[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]-피라진(1.6 g; 5.8 mmol) 및 트라이에틸아민(3.4 ㎖)을 가한다. 생성 혼합물을 70 시간 동안 가열 환류시키고, 그 후에 상기 반응기 내용물을 냉각시키고 여과하여 고체를 제거하였다. 필터 케이크를 2-MeTHF(2 x 5 ㎖)로 세척하고 상기 여액을 그 자체로서 다음 단계에 사용하였다.

단계 4: 화합물 27 4-[8-({4-[(1R,4R)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일]페닐}아미노)[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일]-2-퓨라미드(6)

단계 3으로부터 수득된 용액에 2-MeTHF(5 ㎖), 수돗물(6.5 ㎖), [5-(아미노카보닐)-3-퓨릴]보론산(1.3 g; 8.6 mmol) 및 Pd(dppf)₂Cl₂(0.26 g; 0.3 mmol)를 가한다. 생성 혼합물을 진공/질소 퍼지 주기에 의해 5 회 탈기시키고 80 ℃에서 6 시간 동안 가열한다. 이어서 상기 반응기 내용물을 주변 온도로 냉각시키고, 1,2-다이아미노-프로판(2 ㎖)을 가하고, 생성 현탁액을 여과하고(서서히), 필터 케이크를 2-MeTHF(6 x 5 ㎖)로 세척하여 녹색 고체로서 조 화합물 27을 수득한다. 상기 조 물질을 메탄올(15 ㎖)에 재 슬러리화하고, 여과하고 필터 케이크를 메탄올(5 ㎖)로 세척한다. 이어서 상기 필터 케이크를 물/아세트산(pH 1; 대략 50 ㎖)과 혼합하고, 생성 현탁액을 등명한 여액이 수득될 때까지 여과하고, 필터 케이크를 상기 세척액이 무색으로 변할 때까지 물로 세척한다. 합한 여액 및 세척액을 진공 하에 50 ℃에서 농축시켜 물을 제거하고, 잔사를 2-프로판올(2 회) 및 톨루엔(3 회)으로 스트립핑하고, 후속적으로 메탄올(70 ㎖) 및 톨루엔(5 ㎖)에 용해시킨다. 생성 현탁액에 1,2-다이아미노프로판(2 ㎖) 및 dppe(0.08 g; 0.2 mmol)를 가하고, 그 후에 밤새 교반을 계속한다. 상기 정제된 생성물을 여과에 의해 단리하고, 상기 필터 케이크를 세척액이 담황색으로 변할 때까지 메탄올로 세척한 다음, 에틸 아세테이트로 세척하고 40 ℃에서 진공 하에 건조시켜 황색 고체로서 화합물 27을 제공한다.

LC-순도 98.6 면적-%

LC-MS: m/z = 459(100)[M+H]+.

정제 조건 및 특성화

통상적으로, 합성 후 모든 화합물들을 길슨(Gilson) 예비 HPLC 시스템(322 펌프, 155 UV/VIS 검출기, 215 액체 핸들러)을 사용하는 역상 HPLC를 사용하여 정제할 수 있다. 상기 길슨 215는 자동-샘플러와 분획 수거기 모두로서 작용한다. 화합물을 또한 실리카젤 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제할 수 있다.

화합물들을 전기분무 소스를 갖는 단일 4 극자 장치를 사용하는 질량 분광측정에 의해 특성화한다.

생물학적 실시예

실시예 1: MAPKAP - K5 분석

MAPKAP-K5 반응을 0.1 또는 0.2 μCi 33P-ATP; 0.6 μM ATP; 1 mU MAPKAP-K5; 3 μM MAPKAP-K5 펩타이드 기질(실온에서 30 분간 배양됨)을 사용하여 플래시플레이트 포맷으로 수행한다.

플래시플레이트 분석:

상기 MAPKAP-K5 키나제 반응을 384 웰 폴리프로필렌 플레이트(Matrix Technologies)에서 수행하고 이어서 스트렙트아비딘-코팅된 384 웰 플래시플레이트(Perkin-Elmer)로 옮긴다. 2 ㎕의 시험 화합물 또는 표준 억제제를 함유하는 웰에, 효소 혼합물 또는 희석제 13 ㎕를 하이드라(Hydra)(Robbins Scientific)를 사용하여 가한다. 반응을 멀티드롭(Multidrop)(Thermo-Labsystems)을 사용하여 [2.5x] 기질 칵테일 10 ㎕의 첨가에 의해 출발시켜 상기 분석에 하기의 최종 농도들을 제공한다:

1 mU MAPKAP-K5

3 μM MAPKAP-K5 펩타이드 기질

0.6 μM ATP

0.004 μCi[33P]-γ-ATP/㎕

1x 반응 완충제

플레이트를 실온에서 30 분간 배양한다. 반응을 마이크로-필(Micro-fill)(Biotek)을 사용하여 각 웰에 EDTA(50 mM) 25 ㎕를 첨가함으로써 종료시킨다. 반응물을 지마크(Zymark) 로봇 시스템을 사용하여 스트렙트아비딘-코팅된 플래시플레이트로 옮긴다. 플레이트를 실온에서 60 분간 배양한다. 모든 웰을 테칸(Tecan) 플레이트 세척기를 사용하여 포스페이트 완충 염수 100 ㎕로 3 회 세척한다. 상기 플래시플레이트(빈 웰)를 팩카드 탑카운트(Packard TopCount) 상에서 섬광 카운팅하여 방사능을 측정한다.

효소 혼합물:

효소

50 mM 트리스 Hcl(pH 7.5)

0.1 mM EGTA

2 mM DTT

1 ㎎/㎖ BSA

반응 완충제:

50 mM 트리스 Hcl(pH 7.5)

0.1 mM EGTA

10 mM 마그네슘 아세테이트

2 mM DTT

실시예 2. 활성화된 1차 활막 섬유모세포에 의한 MMP1 발현 조절제의 식별을 위한 분석의 개발

세포의 ECM-분해 활성을 감소시키는 화합물을 식별하기 위해서, 상기 활성의 적합한 검출과 더욱 분명한 판독을 성취하기 위해 상기 세포의 ECM-분해 활성을 유도할 수 있다. RA와 관련하여, 선택 세포는 포유동물 활막 섬유모세포이고 상기 ECM-분해 활성의 유도에 사용할 수 있는 촉발제는 관절염 분야에 적합한 사이토킨, 예를 들어 TNF-α, IL1β, IL6, OSM, IL17 및 MIF1-α이다. 이 목록은 RA 병인에 잠재적으로 관련된 사이토킨들의 과잉으로 인해 포괄적인 것은 아니다(Smolen and Steiner, 2003). 상기 병리학의 복잡성에 가능한 한 가까운 시험관 내 분석을 설정하기 위해서, 상기 적용되는 촉발제는, 관절염 분야에 적합한 사이토킨-생산 세포, 예를 들어 단핵구, 대식세포, T-세포 및 B-세포를 촉발제와 접촉시킴으로써 생성된 인자들의 혼합물이어야 한다. 상기 사이토킨-생산 세포는 인자들의 복잡하고 치우치지 않은 혼합물을 생성시킴으로써 상기 접촉에 반응할 것이다. 상기 사용된 사이토킨-생산 세포가 판누스에서 또한 발견되고 상기 촉발제를 생산하기 위해 적용된 사이토킨이 류머티스성 관절염 환자의 활액에서 발견되는 경우, 최종적으로 생산된 인자들의 혼합물은 관절염 환자의 관절 중에 존재하는 인자들의 일부를 함유할 것이다.

' MMP 분석'의 원리

기질 메탈로 프로테아제(MMP)는 예를 들어 다른 프로테아제, 성장 인자의 성숙, 및 세포 외 기질 성분의 분해와 같은 다양한 생리학적 역학들을 갖는다. MMP1은 뼈와 연골의 주성분인 천연 콜라겐을 분해할 수 있는 MMP 계열의 구성원들 중 하나이다. 활막 섬유모세포(SF)에 의한 MMP1의 증가된 발현은 관절염 질병의 진행에 대한 징후이며 관절 중의 미란 과정을 예견한다(Cunnane et al., 2001). SF에 의한 MMP1의 발현을, SF를 TNF-α 또는 IL1β와 같은 사이토킨으로서 류머티스성 관절염에 적합한 촉발제에 의해 활성화시킴으로써 증가시킬 수 있다(Andreakos et al., 2003). 이와 함께, 활성화된 SF에 의해 생산된 MMP1의 수준 측정을 판독하며 이는 상기 사건이 판누스에서 나타나는 바와 같은 미란성 표현형에 대한 SF의 활성화 수준을 반영하므로 RA와 매우 관련이 있다. 활성화된 SF에서 약물 표적 후보의 감소된 발현이 상기 세포에 의한 MMP1 발현의 감소를 유도하는 경우, 상기 약물 표적은 MMP1 발현의 조절에 관련이 있는 것으로 입증되며 따라서 RA의 치료를 위한 치료 전략의 개발에 적합한 것으로 간주된다.

하기의 실시예들에서, 분석(또한 'MMP 분석'이라 지칭됨)의 개발은 다양한 활성화 촉발제에 반응한 활막 섬유모세포(SF)에 의한 MMP1 생산을 모니터한다(실시예 2.1). 이어서 RA 치료의 개발을 위한 약물 표적을 고려하는 유전자 생성물의 확인을 위한 상기 분석의 용도를 개시한다(실시예 2.2). 상기 약물 표적의 확인을, RNAi(RNA 간섭)-기본 기전에 의해 표적화된 유전자의 발현 수준을 감소시키는 shRNA의 세포 중 발현을 매개하는 재조합 아데노바이러스(또한 녹다운 바이러스 또는 Ad-siRNA라 칭한다)를 사용하여 수행한다(WO 03/020931 참조). 이어서 상기 확인된 약물 표적의 활성을 매개하는 화합물의 식별을 표 3에 개시한다. 상기 확인된 약물 표적의 활성을 조절하는 화합물들을 시험하기 위한 상기 'MMP 분석'의 용도를 하기에 추가로 개시한다.

분석 실시예

사용된 대조용 바이러스:

본 연구에 사용된 대조용 바이러스를 하기에 나열한다. dE1/dE2A 아데노바이러스를 WO99/64582에 개시된 바와 같이, PER.E2A 패키지 세포에서 헬퍼 플라스미드 pWEAd5AflII-rlTR.dE2A의 동시 형질감염에 의해 상기 어댑터 플라스미드로부터 생성시킨다.

음성 대조용 바이러스:

Ad5-eGFP_KD: 표적 서열: GCTGACCCTGAAGTTCATC(서열식별번호: 1). 벡터 내 Sap1-부위 및 WO03/020931에 개시된 바와 같이 생성된 바이러스를 사용하여 클로닝됨.

Ad5-Luc_v13_KD: 표적 서열 GGTTACCTAAGGGTGTGGC(서열식별번호: 2). 벡터 내 Sap1-부위 및 WO03/020931에 개시된 바와 같이 생성된 바이러스를 사용하여 클로닝됨.

Ad5-M6PR_v1_KD: 표적 서열 CTCTGAGTGCAGTGAAATC(서열식별번호: 3). 벡터 내 Sap1-부위 및 WO03/020931에 개시된 바와 같이 생성된 바이러스를 사용하여 클로닝됨.

양성 대조용 바이러스:

Ad5-MMP1_v10_KD: 표적 서열 ACAAGAGCAAGATGTGGAC(서열식별번호: 4). 벡터 내 Sap1-부위 및 WO03/020931에 개시된 바와 같이 생성된 바이러스를 사용하여 클로닝됨.

표적 확인에 사용된 바이러스:

Ad5-MAPKAPK5_v13_KD: 표적 서열 CGGCACTTTACAGAGAAGC(서열식별번호: 5). 벡터 내 Sap1-부위 및 WO03/020931에 개시된 바와 같이 생성된 바이러스를 사용하여 클로닝됨.

Ad5-MAPKAPK5_v12_KD: 표적 서열 ATGATGTGTGCCACACACC(서열식별번호: 6). 벡터 내 Sap1-부위 및 WO03/020931에 개시된 바와 같이 생성된 바이러스를 사용하여 클로닝됨.

실시예 2.1: MMP 분석의 개발

MMP1의 측정을 위한 384-웰 포맷 ELISA를 개발한다. 다양한 1 차 항체들뿐만 아니라 다양한 ELISA 프로토콜을 시험한다. 384 웰 플레이트 중의 SF 상등액 중의 MMP1 수준을 측정하기 위해 하기의 프로토콜을 개발하고 확인한다: 백색 루미트랙(Lumitrac) 600 384 웰 플레이트(Greiner)를 항-MMP1 항체 MAB1346(Chemicon) 2 ㎍/㎖로 코팅한다. 상기 항체를 완충제 40(1 L milliQ 워터 중의 1.21 g 트리스 염기(Sigma), 0.58 g NaCl(Calbiochem) 및 5 ㎖ 10% NaN₃(Sigma), pH 8.5로 조절됨)으로 희석한다. 밤새 4 ℃에서 배양 후, 플레이트를 PBS(10 L milliQ 중의 80 g NaCl, 2 g KCl(Sigma), 11.5 g Na₂HPO₄·7H₂O 및 2 g KH₂PO₄)로 세척하고 10 ㎕/웰 카제인 완충제(PBS 중의 2% 카제인(VWR International))로 차단한다. 다음날, 카제인 완충제를 ELISA 플레이트로부터 제거하고 50 ㎕/웰 EC 완충제(1 L milliQ 중의 4 g 카제인, 2.13 g Na₂HPO₄(Sigma), 2 g 소 알부민(Sigma), 0.69 g NaH₂PO₄·H₂O(Sigma), 0.5 g CHAPS(Roche), 23.3 g NaCl, 4 ㎖ 0.5M EDTA pH 8(Invitrogen), 5 ㎖ 10% NaN₃ , 및 pH 7.0으로 조절됨)로 대체한다. 0.25 mM DTT(Sigma)를 해동된 샘플 플레이트에 가한다. 상기 EC 완충제의 제거 후에, 샘플 20 ㎕를 상기 ELISA 플레이트로 옮긴다. 밤새 4 ℃에서 배양 후에 플레이트를 PBS로 2 회 및 PBST(0.05% 트윈-20(Sigma)이 있는 PBS)로 1 회 세척하고 35 ㎕/웰의 비오틴화된 항-MMP1 항체 용액(R&D)과 함께 배양한다. 상기 2 차 항체를 완충제 C(2 L milliQ 중의 0.82 g Na₂HPO₄·H₂O, 4.82 g Na₂HPO₄, 46.6 g NaCl, 20 g 소 알부민 및 4 ㎖ 0.5M EDTA pH 8, 및 pH 7.0으로 조절됨)로 5 ㎍/㎖의 농도로 희석한다. RT에서 2 시간 배양 후, 플레이트를 상술한 바와 같이 세척하고 5 ㎕/웰 스트렙트아비딘-HRP 접합체(Biosource)와 함께 배양한다. 스트렙트아비딘-HRP 접합체를 0.25 ㎍/㎖ 농도의 완충제 C로 희석한다. 45 분 후에, 플레이트를 상술한 바와 같이 세척하고 5 ㎕/웰 BM Chem ELISA 기질(Roche)과 함께 5 분간 배양한다. 200 msec의 통합 시간으로 루미노스캔 어센트(Luminoscan Ascent) 발광측정기(Labsystems) 상에서 또는 인비젼(Envision) 판독기(Perkin Elmer)로 판독을 수행한다.

RA 분야에 관련된 사이토킨(TNF-α, IL1β 및 OSM) 또는 그의 조합으로 처리 시의 SF에 의한 MMP1 발현의 증가를 백색 막대로서 도 2에 나타낸다. 상기 실험을 위해서, SF를 96 웰 플레이트에 3,000 세포/웰로 시딩한다. 24 시간 후에, 상기 배지를 1% FBS가 보충된 M199 배지로 교환한다. 상기 배지 교환 후 1일째에, 사이토킨 또는 그의 조합을 상기 배양액에 가하며, 각각의 사이토킨을 25 ng/㎖의 최종 농도로 가한다. 사이토킨 첨가 후 72 시간째에, 상등액을 수거하고 상기 제공된 프로토콜에 개시된 바와 같이 MMP1 ELISA를 진행시킨다. 상기 실험과 병행하여, SF를 상기 프로토콜을 사용하여, M199 배지 + 1% FBS 중에서 48 시간 동안 동일한 사이토킨 또는 사이토킨들의 조합으로 처리한 THP1 세포(M199 + 1% FBS로 2 배 희석됨)의 상등액으로 촉발시킨다. 상기 샘플에 대한 MMP1 수준을 회색 막대로서 도 2에 나타낸다. TNF-α-처리된 THP1 세포의 상등액으로 촉발시킨 SF에 의한 MMP1 발현의 유도는 재조합 TNF-α 단독(3 배 유도)에 의해 촉발된 SF에 비해 더 강하고(>4.5 배 유도) 3 개의 정제된 사이토킨(TNF-α, IL1β, OSM)의 혼합물에 의해 획득된 5 배 유도와 같다. 이러한 결과는 TNF-α-유도된 THP1 세포의 상등액이 TNF-α 이외에, MMP1 발현을 향해 SF를 활성화하는 추가적인 염증-전 인자들을 함유함을 가리킨다. 상기 RA 병인론에서 TNF-α의 역할이 확인되고(인플릭시맵 및 에타너셉트와 같은 TNF-α-차단제들은 RA 환자의 치료에 약간의 효능을 나타낸다) 상기 THP-1 세포가 RA 환자의 관절 중에 존재하는 단핵구/대식세포에 전형적이므로, THP-1 세포와 TNF-α와의 접촉에 의해 제조된 상기 TNF-α-기본 촉발제 혼합물은 RA 환자의 관절 중에 존재하는 인자를 함유할 것이며 후속적으로 RA와 관련이 있다. 이러한 TNF-α-기본 복합 촉발제(또한 '복합 촉발제'라고도 칭함)는 'MMP 분석'에 대한 기본으로서 추가로 사용될 것이다.

'복합 촉발제'에 의한 SF의 활성화의 억제를, 설치류에서 콜라겐-유발된 관절염을 또한 강력하게 감소시키는 효능 있는 소염제인 덱사메타손을 사용하여 나타낸다(Yang et al., 2004)(도 3). 덱사메타손은 복합 촉발제 활성화된 SF에 의해 생성된 MMP1의 양을 용량-의존적으로 감소시키는 것으로 나타났다. SF를 96 웰 플레이트 중에 3000 세포/웰의 밀도로 시딩한다. 시딩 후 24시간째에, 증가하는 농도의 덱사메타손을 상기 세포에 가한다. 밤새 배양 후, 모든 웰의 배지를 TNF-α(M199 + 0.5% FBS 중에 50% 희석됨), 및 전날 첨가된 바와 동일한 농도의 덱사메타손으로 처리된 THP-1 세포의 상등액에 충전한다. 처리 후 48시간째에, 상기 상등액을 수거하고 상술한 MMP1 ELISA를 수행한다. 상기 덱사메타손의 첨가는 SF에 의한 MMP1 발현을, 약 1 nM의 IC₅₀ 값으로 분명히 감소시켰다(도 3 참조). 상기 데이터는 활성화된 SF에 의한 MMP1 발현을 생리학적으로 관련된 억제제의 첨가에 의해 감소시킬 수 있고 상기 발현이 'MMP 분석'에 대한 원리의 증거를 나타냄을 입증한다.

실시예 2.2: MAPKAPK5는 SF '복합 촉발제'-유도된 MMP1 발현을 조절한다

(A) Ad - SiRNA 바이러스는 MAPKAPK5 발현을 붕괴시키는 작용을 한다

MAPKAPK5 및 eGFP를 표적화하는 siRNA의 발현을 매개하는 재조합 아데노바이러스를 WO03/020931에 개시된 과정에 따라 생성시킨다. 상기 재조합 아데노바이러스에 사용된 표적 서열은 CGGCACTTTACAGAGAAGC(서열식별번호: 5)뿐만 아니라 ATGATGTGTGCCACACACC(서열식별번호: 6)이다. 상기 재조합 아데노바이러스에 사용된 eGFP mRNA 내의 표적 서열은 GCTGACCCTGAAGTTCATC(서열식별번호: 1)이다. 이들 서열을 Sap1 부위를 사용하여 어댑터 플라스미드 내로 클로닝한다. dE1/dE2A 아데노바이러스를 WO99/64582에 개시된 바와 같이, PER,E2A 패키지 세포에서 헬퍼 플라스미드 pWEAd5AflII-rlTR.dE2A의 동시 형질감염에 의해 상기 어댑터 플라스미드로부터 생성시킨다.

MAPKAPK5를 표적화하는 아데노바이러스의 작용성을 하기와 같이 시험한다. 상기 아데노바이러스를 사용하여 하기와 같이 페트리 디쉬에서 배양된 1 차 인간 SF를 감염시킨다. 1일째에, 페트리 디쉬당 1,500.000 SF를 시딩한다. 1일 후에, 상기 세포를 Ad5-MAPKAPK5-v13_KD(1.6E9 VP/㎖) 또는 Ad5-eGFP-v5_KD(1.3E10 VP/㎖)로 4000의 MOI(Q-rt-PCR에 의해 상기 바이러스에 대해 정의된 역가(㎖당 바이러스 입자의 수)를 기준으로)로 감염시킨다. 7일째에, 세포를 트립신 EDTA 용액을 사용하여 표준 과정에 따라 상기 페트리 디쉬로부터 분리시킨다. 이어서 상기 트립신을 10% FBS가 보충된 DMEM 생육 배지의 첨가에 의해 중화시킨다. 이어서 상기 세포를 원심분리 단계(1000 rpm, 5 분)에 의해 수거한다. 펠릿을 새로운 RIPA 완충제(50 mM 트리스 pH7.5, 150 mM NaCl, 1% 데옥시콜레이트, 1% 트리톤 X100, 0.1% SDS) 100 ㎕에 용해시킨다. 이어서 상기 샘플을 10 초간 초음파 처리한다. 이어서 상기 샘플의 단백질 농도를, 표준으로서 BSA를 사용하여 상기 제공자에 의해 개시된 바와 같이 BCA 키트(Pierce, Cat No. 23227)를 사용하여 측정한다. RIPA 완충액 중에 19.5 ㎕로 희석한 세포 용해물 30 ㎍에, 환원제(NuPage 환원제 No. 10, Invitrogen NP0004) 3.5 ㎕ 및 샘플 완충제(NuPage LDS 샘플 완충제, Invitrogen NP0007) 7.5 ㎕를 가한다. 이어서 상기 샘플 30 ㎕를 5 분간 비등시키고 10% 폴리아크릴아미드 젤(Invitrogen NP0301) 상에 로딩한다. 상기 단백질 분해 수준의 추정을 위해서, 상기 Ad5-eGFP-v5_KD 감염된 세포의 용해물 15 ㎍, 7.5 ㎍ 및 3.75 ㎍을 또한 상기 젤 상에 로딩한다. 이어서 상기 젤을 1 x MOPS/SDS NuPage 실행 완충제(Invitrogen NP001) 중에서 100V로 2 시간 동안 실행시킨다. 씨블루 플러스(Seablue Plus) 예비염색된 표준(Invitrogen LC5925) 10 ㎕를 사용하여 상기 젤 상의 단백질 크기를 추정한다. 이어서 상기 젤 상의 단백질을, 뉴페이지(Nupage) 운반 완충제 20*(NP0006-1) 100 ㎖, 메탄올 400 ㎖ 및 Milli Q 워터 1500 ㎖을 혼합하여 제조한 운반 완충제를 사용하여 습윤 블럿팅 과정에 의해 PVDF 멤브레인(Invitrogen LC2002) 상으로 옮긴다. 상기 운반 전에, 상기 멤브레인을 먼저 메탄올 및 운반 완충제에 흠뻑 적신다. 상기 운반을 100V에서 90 분간 수행한다. 이어서 상기 멤브레인을 차단 완충제(PBST(0.1% 트윈 20(Sigma, P1379)이 보충된 PBS) 중에서 제조된 2% 차단 분말(Amersham, RPN 2109)에 30 분간 흠뻑 적셔 차단한다. 차단 후에, 차단 완충액 중에 250 배 희석된 MAPKAPK5에 대한 마우스 단클론 항체(BD Biosciences, Cat No. 612080)를 사용하여 면역 검출을 수행한다. 상기 1 차 항체와 함께 밤새 배양 후에, 상기 멤브레인을 PBST로 3 회 세척하고 차단 완충제 중에서 5000 배 희석한 2 차 항체(다클론 염소 항-마우스 Ig, HRP 접합된 것(DAKO) P0447))와 함께 1 시간 배양한다. 이어서 상기 블럿을 PBST로 3 회 세척하고 제조자의 지시에 따라 코닥이미저(Kodakimager) 상의 ECL 진행(RPN2109, Amersham)으로 검출을 수행한다. 웨스턴 블럿팅은 Ad5-eGFP-v5_KD 음성 대조용 바이러스로 감염된 세포에 비해 Ad5-MAPKAPK5-v13_KD 감염된 세포 중의 MAPKAPK5의 보다 낮은 발현 수준을 밝혔다. 상기 희석된 Ad5-eGFP-v5_KD 감염된 샘플과의 비교는 상기 발현 감소가 2 배임을 추정케 하였다. 상기 30 ㎍ 샘플의 동등한 로딩은 '스트립핑 과정'(PBST 중의 상기 멤브레인의 5 분 비등)에 의한 상기 MAPKAPK5 항체의 제거 후 β-액틴의 면역검출에 의해 입증된다. MAPKAPK5 검출에 대해 개시된 방법에 따라, 1 차 항체로서 1000 배 희석한 β-액틴(Santa Cruz, Cat No.SC-1615)에 대한 염소 다클론 항체 및 2 차 항체로서 50000 배 희석한 토끼 항 염소 항체를 사용하여 β-액틴의 면역검출을 수행한다. 상기 실험의 결과를 도 4에 제공한다. 이와 함께, 상기 실험은 1 차 인간 SF 중의 MAPKAPK5 발현 수준을 감소시키는 상기 생성된 Ad-siRNA 바이러스의 작용성을 입증하였다.

(B) MAPKAPK5 녹-다운 Ad - siRNA 는 SF -유도된 MMP1 발현을 감소시킨다

상기 'MMP 분석'에서 Ad5-MAPKAPK5-v13_KD 바이러스의 효능을 하기와 같이 시험한다. 1일째, SF(9 내지 10 회 계대배양)를 완전한 활막 생육 배지(Cell Application) 중에서 웰당 3000 세포/웰의 밀도로 96 웰 플레이트에 시딩한다. 하루 후에, 상기 세포를 증가량(3,6; 9,12 또는 15 ㎕)의 하기 바이러스로 감염시킨다: Ad5-eGFP-v5_KD, Ad5-MAPKAPK5-v12_KD, Ad5-MAPKAPK5-v13_KD, Ad5-MMP1-v10_KD. 상기 바이러스 로드를 상기 중성 바이러스 Ad5-Luc-v13_KD의 첨가에 의해 보정하여 모든 웰 중의 상기 세포 상의 최종 바이러스 부피를 15 ㎕로 만든다. 상기 보정은 상기 관찰된 효과들이 상기 세포에 적용된 바이러스 로드로부터 생성되지 않음을 보장한다. 이어서 상기 세포를 활성화 단계 전에 5일간 배양한다. 상기 단계는 모든 웰에서 '복합 촉발제' 25 ㎕가 보충된 M199 배지 75 ㎕에 의한 상기 생육 배지의 대체를 수반한다. 상기 활성화 단계 후 48시간째에, 상등액을 수거하고 실시예 1에 개시된 바와 같이 MMP1 ELISA를 수행한다. 상기 실험의 결과를 도 5에 나타낸다. 상기 실험의 질은 MMP1 자체를 표적화하는 Ad-siRNA 바이러스의 효능에 의해 입증된다. 상기 양성 대조용 바이러스는 SF에 의한 MMP1 발현을 강하게 감소시키는 반면, 루시페라제의 발현을 표적화하기 위해 고안된 음성 대조용 바이러스는 MMP1 발현의 수준에 영향을 미치지 않는다. 상기 MAPKAPK5 표적의 확인에 사용된 2 개의 바이러스(Ad5-MAPKAPK5-v12_KD 및 Ad5-MAPKAPK5-v13)는 또한 1 차 인간 SF에 의한 복합 촉발제 유도된 MMP1 발현의 분명한 감소를 유도한다. 상기 실험으로부터, MAPKAPK5는 SF 중의 MMP1 발현을 조절하는 것으로 나타난 귀중한 약물 표적을 나타낸다는 결론을 내릴 수 있다. 유사하게, 소 분자 화합물에 의한 MAPKAPK5 효소 활성의 억제는 상기 'MMP 분석'에서 '복합 사이토킨' 유도된 MMP1 발현을 감소시키는 것으로 예상된다. 소 분자 화합물에 의한 MAPKAPK5 효소 활성의 억제는 또한 RA와 관련된 관절의 분해를 감소시키는 것으로 예견된다.

(C) MAPKAPK5 를 억제하는 화합물의 시험관 내 ' MMP 분석' 시험

생화학적 분석(즉 무 세포, 정제된 효소 사용)에서 상기 MAPKAPK5 활성을 억제하는 화합물을 하기의 프로토콜에 따라 'MMP 분석'에서 시험한다.

상기 화합물 마스터 모액들(모두 100% DMSO 중의 10 mM 농도에서)을 물(증류수, GIBCO, DNAse 및 RNAse 비 함유)로 10 배 희석하여 10% DMSO 중의 1 mM 중간 실험 모액을 수득한다. 상기 중간 실험 모액을 10% DMSO 중에서 3 배 또는 10 배 추가 희석하여 10% DMSO 중의 각각 333 μM 또는 100 μM 농도의 중간 실험 모액을 수득한다. 이어서 1 mM뿐만 아니라 333 μM(또는 100 μM) 중간 실험 모액을 1.1% DMSO로 10 배 추가 희석하여 2% DMSO 중의 100 μM 및 33.3 μM(또는 10 μM) 농도의 10x 실험 모액들을 수득한다. 이어서 상기 10x 실험 모액을 1% FBS가 보충된 M199 배지로 10 배 희석하여 0.2% DMSO뿐만 아니라 10 μM 및 3.33 μM(또는 1 μM)의 화합물을 함유하는 최종 '1x 화합물 제제'를 수득한다. 이들은 상기 화합물을 상기 세포 상에서 시험하는 최종 조건이다. 병행하여, 상기 10x 실험 모액을 1% FBS가 보충된 M199로 2 배 희석한 '복합 촉발제'(즉 실시예 1에 개시된 바와 같이 생성된 TNF-α 처리된 THP1 세포의 상등액)로 10 배 희석하여 '50% 복합 촉발제 중의 1x 화합물 제제'를 생성시킨다.

1일째에, RASF를 완전 활막 생육 배지(Cell Applications) 중의 3000 세포/웰의 밀도로 96 웰 플레이트(평평한 바닥, 조직 배양물 처리됨, Greiner)에 시딩한다. 5일째에, 상기 화합물을 하기와 같이 상기 배양된 세포에 가한다. 배지를 상기 세포로부터 완전히 제거하고 상기 화합물을 1% FBS 및 0.2% DMSO가 보충된 M199 배지 중에 10 μM 또는 3.33 μM(또는 1 μM)로 함유하는 '1x 화합물 제제' 75 ㎕로 대체한다. 2 시간의 배양기간 후에(상기 화합물들이 평형화되고 세포로 들어간다), 상기 '50% 복합 촉발제 중의 1x 화합물 제제' 25 ㎕를, 상기 상응하는 화합물을 상응하는 농도로 함유하는 웰 중의 '1x 화합물 제제'의 상부에서 상기 웰에 가한다. 이렇게 하여, 8 배 희석된 복합 촉발제를 최종적으로 상기 세포에 적용시킨다. 이어서 48 시간의 배양을 수행하고 상기 세포 상등액 20 ㎕에 대해 상술한 바와 같이 MMP1 ELISA를 진행시켜, 원 데이터(RLU: 상대 발광 단위)를 전달한다. 후속 대조군들을 실험에 포함시킨다. 최대 신호 대조군(세포를 상기 복합 촉발제에 의해, 그러나 단지 0.2% DMSO 비히클(및 따라서 화합물 없음)에 의해서 활성화한다)을 가한다. 상기 대조군은 상기 시험에서 성취할 수 있는 MMP1의 최대 수준을 가리킨다. 최소 신호 대조군을 또한 상기 실험에 포함시킨다. 여기에서, 세포를 촉발시키지 않는다. 이어서 상기 세포의 배지를 5일째에 1% FBS가 보충된 M199 배지 100 ㎕로 교환한다. 상기 대조군은 상기 RASF에 의해 생성된 기본 MMP1 수준을 회복한다. 이어서 상기 화합물에 의해 성취된 MMP1 발현의 억제 퍼센트를 하기 식을 사용하여 ELISA에 의해 복귀된 RLU 데이터를 근거로 계산한다:

[[(최대 MMP1 수준 - 최소 MMP1 수준) - (Y 농도에서 화합물 X MMP1 수준 - 최소 MMP1 수준)]/(최대 MMP1 수준 - 최소 MMP1 수준) x 100

상기 화합물의 독성을 하기와 같이 평가한다. 1일째에, SF를 완전 활막 생육 배지 100 ㎕ 중의 3000 세포/웰의 밀도로 백색의 조직 배양물 처리된 96 웰 플레이트에 시딩한다. 화합물 처리, 세포에 화합물 첨가뿐만 아니라 상기 세포의 활성화를 상기 MMP1 수준의 측정에 대해 본 실시예에서 상술한 바와 같이 추가로 수행한다. 48 시간의 배양 기간 후에, 배지를 상기 웰로부터 제거하고, 1% FBS가 보충된 새로운 M199 배지 50 ㎕로 대체한다. 이어서 기질(Promega Celltiter Glow 세포 생육성 키트) 50 ㎕를 상기 웰에 가한다. 10 분의 배양기간 후에, 발광 신호를 측정한다. 최대 대조용 웰에 비해 50% 초과까지의 상기 발광 신호의 감소는 현저한 독성을 반영하는 것으로 간주한다. 상기 'MMP 분석'에서 시험된 화합물들에 대해 독성이 없음이 관찰된다.

다양한 화합물의 차별적인 세포 침투 능력과 같은 인자들은 시험관 내 생화학 및 세포 MMP 분석에서 화합물들의 활성 간의 불일치에 원인일 수 있음은 물론이다.

실시예 3: 인간 PBMC 에 의한 사이토킨 방출에 대한 화합물들의 효과를 평가하기 위한 분석

인간 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 뵈윰(Boyum)(1984)의 방법에 따라 필수적으로 단리한, 건강한 지원자의 혈액으로부터 제조한 '연막'으로부터 단리한다. 간단히, 연막을 1 x PBS(Gibco)로 1:1 희석하고 30 ㎖을 팔콘(Falcon) 튜브 50 ㎖ 중의 림포프레프(Lymphoprep)^TM(Lucron Bioproducts) 20 ㎖의 상부에 조심스럽게 놓는다. 원심분리(35 분, 400 g, 18 ℃) 후에, 상기 단핵 세포를 백색 중간상으로부터 수거하고 재현탁 및 원심분리(10 분, 200 g)에 의해 1 x PBS로 3 회 세척한다. 단리된 PBMC를 10% 열-불활성화된 FBS(Hyclone)가 보충된 RPMI 1640(Cat.No. 21875, Gibco)에 최종적으로 재현탁한다.

상기 분석을 위해서 PBMC를 96-웰 플레이트(Nunc) 중의 160 ㎕에 2.5E6 세포/㎖로 시딩한다. 시험 화합물들을 먼저 DMSO(Sigma) 및 이어서 1% 열-불활성화된 FBS를 함유하는 M199 배지(Gibco) 중에서 50 배 희석하는 일련의 희석을 수행한다. 화합물을 상기 분석 플레이트에서 추가로 1/10 희석하여 0.2%의 최종 DMSO 농도를 획득한다. 세포를 37 ℃, 5% CO₂에서 1 시간 동안 상기 화합물과 예비배양한다. 이어서, 세포를 20 ㎕의 부피 중에서 1 ㎍/㎖의 최종 농도로 가한 LPS(에스케리키아 콜라이 혈청형 026:B6, Cat.No. L2654, Sigma)로 자극하고 세포를 24 시간 동안 추가로 배양한다. 상기 플레이트를 원심분리하고 상등액을 수거하고 ELISA에서 적합한 희석물의 분석시까지 -80 ℃에서 보관한다.

하기 384-웰 화학발광 ELISA 프로토콜을 상기 상등액 중의 TNFα 수준을 측정하기 위해 개발하였다: 백색 루미트랙 600 384-웰 플레이트(Greiner)를 1 x PBS(Gibco) 중에서 1 ㎍/㎖로 희석한 항-TNFα 포착 항체(40 ㎕/웰)(Cat.No. 551220, BD Pharmingen)로 코팅한다. 4 ℃에서 밤새 배양 후에, 플레이트를 1 x PBS(10 L milliQ 중의 80 g NaCl, 2 g KCl(Sigma), 11.5 g Na₂HPO₄·7H₂O 및 2 g KH₂PO₄; pH 7.4)로 세척하고 100 ㎕/웰 완충제 B(1% BSA(Sigma), 5% 슈크로스(Sigma) 및 0.05% NaN₃(Sigma)을 함유하는 1 x PBS)로 차단한다. RT에서 4 시간 배양 후, 차단 완충제를 제거하고 플레이트를 PBST(0.05% 트윈-20(Sigma)이 있는 1 x PBS)로 1 회 세척한다. 이어서, 샘플 40 ㎕를 ELISA 플레이트로 옮기고 플레이트를 4 ℃에서 배양한다. 다음날, 플레이트를 3 회(PBST로 2 회 및 PBS로 1 회) 세척하고, 먼저 완충제 D(1% BSA가 있는 1 x PBS) 중에서 250 ng/㎖의 농도로 희석한 비오틴화된 항-TNFα 항체(Cat.No. 554511, BD Pharmingen) 35 ㎕/웰을 가한다. RT에서 2 시간 배양 후, 플레이트를 상술한 바와 같이 세척하고 완충제 D 중의 스트렙트아비딘-HRP 접합체(Cat.No. SNN2004, Biosource) 1/2000 희석물 35 ㎕/웰을 가한다. 45 분 후에, 플레이트를 상술한 바와 같이 세척하고 50 ㎕/웰 BM 화학발광 ELISA 기질 POD(Roche)와 함께 5 분간 배양한다. 100 msec의 통합 시간으로 루미노스캔 어센트 발광측정기(Labsystems) 상에서 판독을 수행하여, 원 데이터(RLU: 상대 발광 단위)를 전달한다. 후속 대조군들을 실험에 포함시킨다. 최대 신호 대조군(세포를 LPS에 의해, 그러나 단지 0.2% DMSO 비히클(및 따라서 화합물 없음)에 의해서 활성화한다)을 가한다. 상기 대조군은 상기 시험에서 성취할 수 있는 TNFα의 최대 수준을 가리킨다. 최소 신호 대조군을 또한 상기 실험에 포함시킨다. 여기에서, 세포를 촉발시키지 않는다. 상기 대조군은 상기 PBMC에 의해 생성된 기본 TNFα 수준을 회복한다. 이어서 상기 화합물에 의해 성취된 TNFα 방출의 억제 퍼센트(PIN)를 하기 식을 사용하여 ELISA에 의해 복귀된 RLU 데이터를 근거로 계산한다:

100 - [((Y 농도에서 화합물 X TNFα 수준 - 최소 TNFα 수준)]/(최대 TNFα 수준 - 최소 TNFα 수준) x 100]

화합물을 8 개 농도(1/3 일련의 희석)로 시험하는 경우, EC₅₀-값을 각 시험 농도에서 화합물에 대해 성취된 PIN 데이터 평균의 곡선 대입에 의해 계산할 수 있다.

LPS 자극된 PBMC 배양액에 의한 IL1 및 IL6의 방출에 대한 화합물의 효과를 분석하기 위해서, 상등액의 적합한 희석을 상술한 바와 동일한 ELISA 프로토콜을 사용하여 측정할 수 있다. IL1 및 IL6 ELISA(모두 R&D Systems로부터의 것)를 위해 부합된 항체 쌍을 하기와 같이 사용할 수 있다: 0.5 ㎍/㎖로 사용된 항-IL1 포착 항체(Cat.No. MAB601), 50 ng/㎖로 사용된 비오틴화된 항-IL1 검출 항체(Cat.No. BAF201); 1 ㎍/㎖로 사용된 항-IL6 포착 항체(Cat.No. MAB206); 50 ng/㎖로 사용된 비오틴화된 항-IL6 검출 항체(Cat.No. BAF206).

실시예 4: MMP13 분석

MMP13 ELISA의 프로토콜을 섹션 4.1에 개시하며, 이어서 SW1353 연골육종 세포 주에서 IL-1/OSM-구동된 MMP13 발현의 방출에 대한 화합물의 시험을 섹션 4.2에 개시한다.

4.1 MMP13 ELISA 프로토콜

MMP13의 측정을 위한 384 웰 포맷 ELISA를 개발하였다. 다양한 1 차 항체들뿐만 아니라 다양한 ELISA 프로토콜을 시험하였다. 384 웰 플레이트에서 세포 배양액의 상등액 중의 MMP13 수준을 측정하기 위해서 하기의 프로토콜들을 개발하고 확인한다.

블랙 맥시소브 384 웰 플레이트(Nunc 460518)를 항-MMP13 항체 MAB511(R&D systems) 1.5 ㎍/㎖을 함유하는 완충 용액 35 ㎕로 코팅한다. 상기 항체를 카보네이트-바이카보네이트 코팅 완충제(1 L MilliQ 워터 중의 1.59 g Na₂CO₃(Sigma S-7795) 및 2.93 g NaHCO3(Sigma S-5761), pH 9.6으로 조절됨)로 희석한다. 4 ℃에서 밤새 배양 후, 웰을 100 ㎕ PBST(10 L milliQ 워터 중의 80 g NaCl, 2 g KCl(Sigma), 11.5 Na₂HPO₄·7H₂O 및 2 g KH₂PO₄; pH 7.4 + 0.05% 트윈-20(Sigma))로 2 회 세척하고 100 ㎕/웰 차단 완충제(PBS 중의 5% 무 지방 분유)로 차단한다. 4 ℃에서 밤새 배양 후, 웰을 100 ㎕ PBS로 2 회 세척한다. 상기 PBST를 제거하고 샘플 35 ㎕를 ELISA 플레이트로 옮긴다. RT에서 4 시간 배양 후, 플레이트를 PBST로 2 회 세척하고 37 ℃에서 1 시간 동안 35 ㎕/웰 1.5 mM APMA 용액(10 mM APMA 모액을 전날 제조한다(10 ㎖ 0.1M NaOH(Merck 1.06469.1000) 중의 35.18 ㎎ APMA(Sigma A-9563))과 함께 배양하고 4 ℃에서 보관한다. 사용 전에, 상기 10 mM APMA 모액을 1XAPMA 완충제(10X APMA 완충제: 500 mM 트리스(Roche708976), 50 mM CaCl₂(Sigma C-5080), 500 μM ZnCl₂(Sigma Z-0173), 1.5 M NaCl(Calbiochem 567441), 0.5% Brij35(Sigma 430 AG-6) 및 pH 7.0으로 조절됨) 중에서 1.5 mM로 희석한다. APMA에 의해 MMP13을 활성화한 후에, 플레이트를 다시 100 ㎕ PBST/웰로 2 회 세척하고 기질 용액 35 ㎕를 각 웰에 가한다. 기질 용액을 하기와 같이 제조한다: OmniMMP 형광 기질(Biomol P-126) 모액(DMSO 중의 2 mM, -20 ℃에서 보관)을 1X OmniMMP 완충제(OmniMMP 완충제: 500 mM Hepes(Sigma H4034), 100 mM CaCl₂(Sigma C5080), 0.5% Brij35(Sigma 430 AG-6; pH 7.0으로 조절됨)) 중에서 0.01 mM의 최종 농도로 희석한다. 37 ℃에서 밤새 배양 후, 상기 샘플 중의 활성 MMP13은 상기 기질을 분리시키고 형광을 방출하였다. 320 ㎚ 여기/405 ㎚ 방출 필터를 사용하여 인비젼(Perkin Elmer) 상에서 판독을 수행한다.

4.2 SW 1353 세포에서 사이토킨 구동된 MMP13 발현에 대한 화합물의 효과 평가

인간 연골육종 세포 주 SW 1353을 ATCC로부터 획득하고 가습된 5% CO₂ 배양기 중에서 37 ℃에서 10% 열-불활성화된 FBS 및 1 x 페니실린/스트렙토마이신(Invitrogen)이 보충된 DMEM 중에서 증식시켰다. 상기 세포의 분액을 동결시키고 액체 질소 중에서 저온보존하였다. 저온보존된 분액으로부터 출발하여, 세포를 트립신 처리에 의해 1주일에 2 회 1/5 내지 1/8 비로 계대배양하여 추가로 증식시켰다.

상기 화합물 마스터 모액들(모두 100% DMSO 중의 10 mM 농도)로부터 출발하여, 96-웰 플레이트에서 100% DMSO 중의 3 배 일련의 희석액을 제조한다. 이어서, 플레이트를 1% 열-불활성화된 FBS가 보충된 M199 배지에서 50 배 추가로 희석하여 중간 실험 모액을 수득한다.

1일째에, SW1353 세포를 생육 배지 120 ㎕ 중의 15000 세포/웰의 밀도로 96 웰 플레이트(평평한 바닥, 조직 배양물 처리됨, Greiner)에 시딩한다. 다음날, 상기 중간 모액 중 15 ㎕의 화합물을 가한다. 60 분의 배양기간 후에(상기 화합물들이 평형화되고 세포로 들어간다), 세포를 15 ㎕의 부피로 첨가된, IL-1β와 OSM의 혼합물로 자극하여 1 ng/㎖ IL-1 β 및 25 ng/㎖ OSM의 최종 농도를 획득한다. 이를 위해서, IL-1(10 ㎍/㎖) 및 OSM(25 ㎍/㎖)(모두 PeproTech)의 모액을 1% FBS가 보충된 M199 배지에서 각각 10 ng/㎖ 및 250 ng/㎖로 희석하였다. 48 시간 배양 후에, 상기 세포 상등액을 수확하고 적합한 희석을 상술한 바와 같이 MMP13 ELISA에서 진행시켜 원 데이터(RLU: 상대 발광 단위)를 전달한다. 후속 대조군들을 실험에 포함시킨다: 최대 신호 대조군(여기에서 세포를 IL1-β/OSM 사이토킨 혼합물에 의해 활성화시키나, 단지 0.2% DMSO 비히클(및 따라서 화합물 없음) 만을 가한다. 상기 대조군은 상기 시험에서 성취할 수 있는 MMP13의 최대 수준을 가리킨다. 최소 신호 대조군을 또한 포함시키며, 여기에서 세포는 단지 0.2% DMSO 비히클 만을 수용하고 촉발제는 수용하지 않는다. 상기 대조군은 상기 SW1353 세포에 의해 생성된 기본 MMP13 수준을 회복한다. 이어서 상기 화합물에 의해 성취된 MMP13 발현의 억제 퍼센트를 하기 식을 사용하여 ELISA에 의해 복귀된 RFU 데이터를 근거로 계산한다:

[[(최대 MMP13 수준 - 최소 MMP13 수준) - (Y 농도에서 화합물 X MMP13 수준 - 최소 MMP13 수준)]/(최대 MMP13 수준 - 최소 MMP13 수준) x 100

억제 퍼센트 대 Log(몰 농도)의 플롯 및 곡선 대입을 근거로, 특정 화합물의 IC₅₀ 값을 계산할 수 있다.

하기의 화합물들은 상술한 합성 방법들에 따라 제조되었거나 제조될 수 있다. 하기 표 1의 목적을 위해서, 각 화합물의 활성(실시예 1에 개시된 MAPKAPK5 분석 방법을 사용하여 측정할 수 있다)을 하기와 같이 표현한다:

++++ 화합물이 MAPKAPK5 IC₅₀ 0.01 - 100 nM을 나타내었다

+++ 화합물이 MAPKAPK5 IC₅₀ 101 - 500 nM을 나타내었다

++ 화합물이 MAPKAPK5 IC₅₀ 501 - 1000 nM을 나타내었다

+ 화합물이 MAPKAPK5 IC₅₀ >1000 nM을 나타내었다

Ex#	구조	명칭	MW	M+H+, m/z	MAPKAPK5 IC₅₀ nM
1		5-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)아이소인돌린-1-온	481	482	++++
2		4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드	458	459	++++
3		4-(8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드	472	473	++++
4		4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드	457	458	+++
5		5-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복스아미드	459	459	+++
6		4-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	472	472	+++
7		4-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	460	460	++++
8		4-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)-1H-피리딘-2-온	442	442	+++
9		4-{8-(4-(5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]옥탄-2-일)페닐아미노)[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드	473	473	++++
10		4-{8-(4-(5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]옥탄-2-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	472	472	+++
11		4-{8-(4-(3-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[2.2.1]옥탄-8-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	472	472	+++
12		4-{8-(4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)페닐아미노)[1,2,4]-트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	473	473	++++
13		4-{8-(4-(3-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)페닐아미노)[1,2,4]-트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	473	473	++++
14		4-{8-(4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복스아미드	472	472	+++
15		5-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복스아미드	460	460	+++
16		5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온	495	495	+++
17		5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복스아미드	473	473	+++
18		5-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온	482	482	+++
19		5-(2-에톡시피리딘-4-일)-N-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐)[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-8-아민	471	471	+
20		4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)피리딘-2(1H)-온	443	443	+
21		에틸 5-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)-1H-피라졸-3-카복실레이트	488	488	+
22		5-(2-에톡시피리딘-4-일)-N-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐)이미다조[1,2-a]피라진-8-아민	470	470	+
23		3-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)-1,2,4-옥사다이다졸-5-카복스아미드	461	461	+
24		4-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드	458	459	++++
25		4-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)[1,2-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드	457	458	+++
26		5-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)아이소인돌린-1-온	480	481	+++
27		4-{8-[4-((1R,4R)-5-아이소프로필-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)페닐아미노][1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드	458	459	++++

MMP1 데이터

§§ 화합물이 MMP1 IC₅₀ 1 - 1000 nM을 나타내었다

§ 화합물이 MMP1 IC₅₀ >1000 nM을 나타내었다

MMP13 데이터

*** 화합물이 MMP13 IC₅₀ 1 - 500 nM을 나타내었다

** 화합물이 MMP13 IC₅₀ 501 - 1000 nM을 나타내었다

* 화합물이 MMP13 IC₅₀ >1000 nM을 나타내었다

실시예 5: 화합물의 허용성

본 프로토콜은 효능 있는 용량(마우스 치료학적 콜라겐-유발된 관절염 모델)과 독성 용량 간의 용량 범위에 의해 한정되는 바와 같은 "치료 창"을 측정하기 위해서 건강한 DBA/1J 마우스에서 본 발명 화합물의 허용성을 평가하기 위해 고안된다.

5.1 동물

DBA/1J 누드마우스를 사용하며(CERJ(France)), 상기 마우스는 10 내지 11 주된 것이고 체중은 대략 20 g이었다.

5.2 화합물 제조

화합물을 0.1 ㎖/마우스 10 g의 표준 주사 부피로, 100 ㎎/㎏/d, po, 유리 염기의 투여 섭생(10 ㎎/㎖과 같음)을 위해 제조한다. 용액 제제의 경우, 화합물을 1 주일에 1 회, 0.5% 메틸-셀룰로스 및 1% DMSO에 용해시켰다.

5.3 실험 그룹

그룹들을 체중을 기준으로 무작위 분류하고 2 주까지 처리한다. 각 그룹은 5 마리의 마우스를 함유하였으며 시험 화합물 100 ㎎/㎏, 비교 화합물 100 ㎎/㎏/d(화합물 A) 또는 비히클을 200 ㎕/마우스의 투여 부피로 1일 기준으로 제공하였다.

화합물 A

5.4 동물 모니터링(임상 징후 및 체중)

잠재적인 약물 독성을 매일 관찰에 의해서 및 체중 손실에 대해 1 주일에 3 회 체중을 기록함으로써 모니터한다. 모든 통계학적 분석을 스튜던츠 시험을 사용하여 수행하였다.

상기 처리에 대한 일반적인 허용성을 평가하기 위해서, 전체 체중을 상기 연구 과정 전체를 통해 추적한다. 도 6A는 전체 체중에 대한 화합물 1 및 화합물 2의 영향을 나타내고, 도 6B는 비교 화합물 A(하기 화학식 참조)의 영향을 나타낸다. 데이터는 가교된 화합물들이 가교되지 않은 화합물보다 더 양호하게 허용됨을 가리킨다. 특히 비히클에 비해 화합물 1 또는 2, 100 ㎎/㎏/d로 처리한 동물들의 체중 간에 통계학적으로 의미 있는 차이는 없었다.

실시예 6: CIA 모델

완전 프로인트 항원보강제/콜라겐 II(CFA/Coll II, 소)를 상기 실험의 출발 시 꼬리(피 내)에 주사한다(1 ㎎/㎖, 100 ㎕/동물). 불완전 프로인트 항원보강제/콜라겐 II(IFA/Coll II)를 CFA/Coll II 주사 후 21일째에 같은 수준(1 ㎎/㎖, 100 ㎕/동물)으로 상기 꼬리에 주사한다.

이어서 동물들을 점수를 기준으로 무작위 분류하고 상이한 그룹들에서 동등한 점수 분포가 보장되도록 처리 그룹들로 할당한다.

시험 화합물(1 ㎎/㎏/d, 3 ㎎/㎏/d 또는 30 ㎎/㎏/d), 양성 대조군(Enbrel, 10 ㎎/㎏/3 x 주, ip) 또는 비히클(메틸 셀룰로스, 1% DMSO)에 의한 처리를 IFA/Coll II-추가 접종 후 8일째(즉 상기 실험 28일째)에 시작한다.

동물들에게 상기 시험 화합물, 양성 대조군 또는 비히클을 14일간 매일 투여한다. 상기 동물들을 임상 증상에 대해 매일 점수를 매기고, 각각의 발에 대해 점수를 기록한다. 상기 처리 기간 동안 상기 동물의 체중을 모니터한다. 뼈 보호를 x-선 영상화에 의해 분석한다.

본 발명의 선택된 화합물들은 3 또는 30 ㎎/㎏/d에서 효능이 있었다.

실시예 7: 패혈증 쇼크 모델

리포폴리사카라이드(LPS)의 주사는 용해성 종양 괴사 인자(TNF-α)의 말초 혈관 내로의 빠른 방출을 유도한다. 상기 모델을 사용하여 생체 내 TNF 방출의 가망 있는 차단제들을 분석한다.

그룹당 6 마리의 BALB/cJ 암컷 마우스(20 g)를 1 회 목적하는 용량으로 처리한다, po. 30 분 후에, LPS(15 ㎍/㎏; 이 콜라이 혈청형 0111:B4)를 ip 주사한다. 90 분 후에, 마우스를 안락사시키고 채혈한다. 순환하는 TNF 알파 수준을 상업적으로 입수할 수 있는 ELISA 키트를 사용하여 측정한다. 덱사메타손(5 ㎍/㎏)을 표준 소염 화합물로서 사용한다. 본 발명의 선택된 화합물들은 3, 10 및 20 ㎎/㎏, po에서 효능이 있었다.

실시예 8: 마우스 콜라겐 항체 유도된 관절염( CAIA ) 모델(또한 마우스 단클 론 항체( MAB ) 모델이라 칭함)

그룹당 8 마리의 BALB/cJ 암컷 마우스(20 g)를 목적하는 용량으로 1 회, po 처리한다. 같은 날, 2 ㎎/마우스의 4 개의 단클론 항체 칵테일(MDBiosciences; ref. CIA-MAB-50)을 iv 주사한다. 3일 후에 LPS(50 ㎍/마우스; 이 콜라이 혈청형 55:B5)를 ip 투여한다. 시험 화합물, 양성 대조군(Enbrel, 10 ㎎/㎏/3 x 주, ip 또는 덱사메타손, 1 ㎎/㎏, 매일, po) 또는 비히클(메틸 셀룰로스, 1% DMSO)에 의한 처리를 상기 항체 주사일에 시작한다. 동물들에게 상기 시험 화합물, 양성 대조군 또는 비히클을 10일까지 매일 투여한다. 상기 동물들을 임상 증상에 대해 점수를 매기고, 각각의 발에 대해 점수를 기록한다. 상기 처리 기간 동안 상기 동물의 체중을 모니터한다.

참고문헌

당해 분야의 숙련가들은 상기 설명이 사실상 예시적이고 설명적이며, 본 발명 및 그의 바람직한 실시태양들을 예시하고자 하는 것임을 알 것이다. 통상적인 실험을 통해, 숙련가는 본 발명의 진의로부터 이탈됨 없이 수행될 수 있는 자명한 변경 및 변화들을 인식할 것이다. 따라서, 본 발명을 상기 설명에 의해서가 아니라, 하기 청구의 범위 및 이의 등가물에 의해서 한정하고자 한다.

상기 설명으로부터, 본 발명의 조성물 및 방법의 다양한 변경 및 변화가 당해 분야의 숙련가들에게 떠오를 것이다. 첨부된 청구의 범위 내에 있는 모든 상기와 같은 변경들을 상기 중에 포함시키고자 한다.

다양한 화합물들의 차별적인 세포 침투 능력과 같은 인자들이 시험관 내 생화학 및 세포 분석에서 상기 화합물들의 활성 간의 불일치에 원인이 될 수 있음은 물론이다.

비 제한적으로 본 명세서에 인용된 특허 및 특허 출원들을 포함하여 모든 공보들은, 각각의 개별적인 공보가 충분히 나열된 바와 같이 본 발명에 인용됨을 구체적이고 개별적으로 가리키는 것처럼 본 발명에 참고로 인용된다.

본 출원에 제공되고 나열된 바와 같은 본 발명 화합물들의 화학 명칭 중 적어도 일부는 상업적으로 입수할 수 있는 화학 명명 소프트웨어 프로그램의 사용에 의해 자동적으로 생성될 수도 있다. 상기 기능을 수행하는 전형적인 프로그램은 오픈 아이 소프트웨어 인코포레이티드(Open Eye Software, Inc.)에 의해 판매되는 렉시켐(Lexichem) 명명 도구 및 MDL 인코포레이티드에 의해 판매되는 오토놈(Autonom) 소프트웨어 도구를 포함한다. 상기 나타낸 화학명 및 도시된 구조가 상이한 경우, 상기 도시된 구조는 조절될 것이다.

본 발명에 나타낸 화학 구조는 ChemDra(등록상표) 또는 ISIS(등록상표)/DRAW를 사용하여 제조되었다. 본 발명의 화학식들에 나타낸 탄소, 산소 또는 질소 원자 상에 존재하는 임의의 개방 원자가는 수소 원자의 존재를 가리킨다. 화학식 중에 키랄 중심이 존재하지만 상기 키랄 중심에 대해 구체적인 입체화학을 나타내지 않은 경우, 상기 키랄 구조와 관련된 2 개의 거울상이성체가 모두 상기 구조에 포함된다.

<110> GALAPAGOS N.V. <120> FUSED PYRAZINE COPOUNDS USEFUL FOR THE TREATMENT OF DEGENERATIVE AND INFLAMMATORY DISEASES <150> US 61/145,827 <151> 2009-01-20 <150> US 61/126,833 <151> 2008-05-07 <160> 6 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Target sequence <400> 1 gctgaccctg aagttcatc 19 <210> 2 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Target sequence <400> 2 ggttacctaa gggtgtggc 19 <210> 3 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Target sequence <400> 3 ctctgagtgc agtgaaatc 19 <210> 4 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Target sequence <400> 4 acaagagcaa gatgtggac 19 <210> 5 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Target sequence <400> 5 cggcacttta cagagaagc 19 <210> 6 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Target sequence <400> 6 atgatgtgtg ccacacacc 19

Claims

하기 화학식 Ia에 따른 화합물; 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염; 또는 상기 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용매화물; 및 그의 입체 이성체, 동위원소 변체 및 토오토머:
화학식 Ia

상기 식에서,
각각의 W, W', Y 및 Y'는 독립적으로 CR^2a 또는 N이나; 단 W, W', Y 및 Y' 중 2 개 이하가 동시에 N일 수 있고;
X는 N 또는 CH이고;
L은 단일 결합, -CO-, -SO-, -SO₂-, -N(R^2c)CO- 및 -N(R^2c)SO₂- 중에서 선택되고;
고리 P는 치환되거나 치환되지 않은

이고;
R¹은 H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬이고;
각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되지 않은 C₁-C₆ 할로알킬, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고;
각각의 R^2c는 독립적으로 H 및 C₁-C₆ 알킬 중에서 선택되고;
R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이고; 각각의 m1, m2 및 m3은 독립적으로 1 또는 2이며;
R³은 치환되거나 치환되지 않은 아릴, 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.
하기 화학식 Ib에 따른 화합물; 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염; 또는 상기 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용매화물:
화학식 Ib

상기 식에서,
각각의 W, W', Y 및 Y'는 독립적으로 CR^2a 또는 N이나; 단 W, W', Y 및 Y' 중 2 개 이하가 동시에 N일 수 있고;
X는 N 또는 CH이고;
L은 단일 결합, -CO-, -SO-, -SO₂-, -N(R^2c)CO- 및 -N(R^2c)SO₂- 중에서 선택되고;
고리 P는 치환되거나 치환되지 않은

이고;
R¹은 H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬이고;
각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되지 않은 C₁-C₆ 할로알킬, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고;
각각의 R^2c는 독립적으로 H 및 C₁-C₆ 알킬 중에서 선택되고;
R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이고; 각각의 m1, m2 및 m3은 독립적으로 1 또는 2이며;
R³은 치환되거나 치환되지 않은 아릴, 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
L이 단일 결합, -CO- 또는 -N(R^2c)CO-인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
R¹이 Me, Et, n-Pr 또는 i-Pr인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
R¹이 H인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항에 있어서,
하기 화학식 IIa, IIb, IIc 또는 IId에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 IIa

화학식 IIb

화학식 IIc

화학식 IId

상기 식들에서,
L 및 고리 P는 제 1 항에서와 같고; 각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고; R³은 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 아릴 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.
제 2 항에 있어서,
하기 화학식 IIe, IIf 또는 IIg에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 IIe

화학식 IIf

화학식 IIg

상기 식들에서,
L 및 고리 P는 제 1 항에서와 같고; 각각의 R^2a는 독립적으로 H, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 및 할로 중에서 선택되고; R³은 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 아릴 및 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택된다.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
고리 P가 치환되거나 치환되지 않은:

이고;
여기에서 R^2d 및 m1이 제 1 항에서와 같은
화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2a가 H, 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬, 치환되지 않은 C₁-C₆ 할로알킬, 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시, 시아노 또는 할로인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 9 항에 있어서,
R^2a가 Me, Et, Pr, 아이소-Pr, Cl, F, CN, OMe 또는 CF₃ 인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2a가 H인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이 치환되거나 치환되지 않은 아릴 중에서 선택되는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이 할로, 시아노, 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬로 임의로 치환된 아미도, 또는 치환되지 않은 C₁-C₆ 알콕시로 임의로 치환된 페닐인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이 F, Cl, Br, 시아노, OMe, OEt, O-n-Pr, O-i-Pr, 또는 Me, Et, n-Pr 또는 i-Pr로 임의로 치환된 아미도로 임의로 치환된 페닐인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴 중에서 선택되는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이 페닐, 피리딜, 인돌릴, 아이소인돌릴, 피롤릴, 퓨라닐, 티에닐, 피라졸릴, 옥사졸릴 및 티아졸릴 중에서 선택되고, 이들이 각각 치환되지 않거나 또는 하이드록실, 시아노, 할로, 또는 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬로 임의로 치환된 아미도로 치환될 수도 있는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이 페닐, 피리딜, 인돌릴, 아이소인돌릴, 피롤릴, 퓨라닐, 티에닐, 피라졸릴, 옥사졸릴, 및 티아졸릴 중에서 선택되고, 이들이 각각 치환되지 않거나 또는 하이드록실, 시아노, F, Cl, Br, 또는 Me, Et, n-Pr 또는 i-Pr로 임의로 치환된 아미도로 치환될 수도 있는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이
이고, 각각의 A¹, A² 및 A³ 가 독립적으로 S, O, N, NR^3a 및 CR^3a 중에서 선택되고; 각각의 R^3a가 독립적으로 H 또는 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬이고; R^3b가 CONH₂, CONHMe 또는 CN인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이
인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이

인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이
인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이
이고; 여기에서 아래 첨자 m이 0, 1, 2, 3 및 4 중에서 선택되고, 각각의 R^3d가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬 또는 할로인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이
이고; 여기에서 아래 첨자 m이 0, 1, 2, 3 및 4 중에서 선택되고, 각각의 R^3d가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬 또는 할로인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³이
이고; 여기에서 아래 첨자 m이 0, 1, 2 및 3 중에서 선택되고, 각각의 R^3d가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않은 C₁-C₆ 알킬 또는 할로인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 22 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
m이 1 또는 2이고; 각각의 R^3d가 독립적으로 Me, Cl 또는 F인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 22 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
m이 0인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항에 있어서,
하기 화학식 IIIa, IIIb 또는 IIIc에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 IIIa

화학식 IIIb

화학식 IIIc

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 2 항에 있어서,
하기 화학식 IIId 또는 IIIe에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 IIId

화학식 IIIe

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 1 항에 있어서,
하기 화학식 IVa, IVb 또는 IVc에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 IVa

화학식 IVb

화학식 IVc

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 2 항에 있어서,
하기 화학식 IVd 또는 IVe에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 IVd

화학식 IVe

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 1 항에 있어서,
하기 화학식 Va, Vb 또는 Vc에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 Va

화학식 Vb

화학식 Vc

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 2 항에 있어서,
하기 화학식 Vd 또는 Ve에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 Vd

화학식 Ve

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는 $이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 1 항에 있어서,
하기 화학식 VIa, VIb 또는 VIc에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:
화학식 VIa

화학식 VIb

화학식 VIc

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 2 항에 있어서,
하기 화학식 VId 또는 VIe에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
화학식 VId

화학식 VIe

상기 식들에서,
X는 제 1 항에서와 같고; L은 단일 결합, -CO- 또는 -NHCO-이고; 고리 P는
이고; R^2d는 H, C₃-C₈ 사이클로알킬, 또는 할로, 아미도 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬로 임의로 치환된 C₁-C₆ 알킬이다.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
L이 단일 결합인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
L이 -CO-인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
L이 -NHCO-인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2d가 H, Me, i-Pr, t-Bu, CH₂CONH₂, 사이클로프로필메틸 또는 CH₂CF₃인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2d가 H인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2d가 i-Pr인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2d가 t-Bu인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
R^2d가 사이클로프로필메틸인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
L이 단일 결합이고; 고리 P가
인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
L이 단일 결합이고; 고리 P가
인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,이다.
L이 단일 결합이고; 고리 P가
인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 45 항 중 어느 한 항에 있어서,
X가 CH인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항 내지 제 45 항 중 어느 한 항에 있어서,
X가 N인 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 1 항에 있어서,
하기 중에서 선택되는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염; 또는 상기 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용매화물, 및 그의 입체 이성체, 동위원소 변체 및 토오토머:
5-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)아이소인돌린-1-온;
4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;
4-(8-(4-((1S,4R)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;
4-(8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;
5-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복실산 아미드;
4-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(4-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)-1H-피리딘-2-온;
4-{8-(4-(5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄-2-일)페닐아미노)[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(4-(5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄-2-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(4-(3-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)페닐아미노)[1,2,4]-트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(4-(3-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)페닐아미노)[1,2,4]-트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
4-{8-(4-(8-아이소프로필-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)페닐아미노)-이미다조[1,2-a]피라진-5-일}-퓨란-2-카복실산 아미드;
5-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복실산 아미드;
5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온;
5-{8-(4-((1S,4S)-5-3급-부틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐-아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-1H-피라졸-3-카복실산 아미드; 및
5-{8-(6-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피리딘-3-일아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일}-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온.
제 2 항에 있어서,
하기 중에서 선택되는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염; 및 상기 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용매화물, 및 그의 입체 이성체, 동위원소 변체 및 토오토머:
4-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;
4-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-5-일)퓨란-2-카복스아미드;
5-(8-(3-((1S,4S)-5-아이소프로필-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)페닐아미노)-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-5-일)아이소인돌린-1-온.
약학적으로 허용 가능한 담체 및 약학적으로 유효한 양의 제 1 항 내지 제 49 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학 조성물.
제 50 항에 있어서,
상기 담체가 비 경구 담체인 약학 조성물.
제 50 항에 있어서,
상기 담체가 경구 담체인 약학 조성물.
제 50 항에 있어서,
상기 담체가 국소용 담체인 약학 조성물.
ECM 분해를 특징으로 하는 병의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 제 1 항 내지 제 49 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
염증을 수반하는 질병으로부터 선택된 병의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 제 1 항 내지 제 49 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
제 50 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용도로서, 질병이 류머티스성 관절염인 용도.
마이토젠-활성화된 단백질 키나제-활성화된 단백질 키나제 5의 억제제의 투여에 의해 예방되거나, 개선되거나 제거되는 병의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
치료 유효량의 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 기질 메탈로 프로테이나제 억제 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함하는, 비정상적인 기질 메탈로 프로테이나제 활성을 특징으로 하는 병의 치료 방법.
치료학적으로 유효한 기질 메탈로 프로테이나제 억제 량의 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함하는, 세포 외 기질의 분해를 수반하는 질병으로부터 선택된 병의 치료 방법.
치료학적으로 유효한 기질 메탈로 프로테이나제 억제 량의 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함하는, MMP1의 비정상적인 세포 발현을 수반하는 질병으로부터 선택된 병의 치료 방법.
염증성 질병의 치료 또는 예방이 필요한 환자에게 치료 유효량의 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함하는, 상기 질병의 치료 또는 예방 방법.
류머티스성 관절염의 치료 또는 예방이 필요한 환자에게 치료 유효량의 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함하는, 상기 질병의 치료 또는 예방 방법.
마이토젠-활성화된 단백질 키나제-활성화된 단백질 키나제 5의 억제제의 투여에 의해 예방되거나, 개선되거나 제거되는 병의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 제 1 항 내지 제 50 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
제 63 항에 있어서,
상기 병이 세포 외 기질의 분해를 수반하는 질병, MMP1의 비정상적인 세포 발현을 수반하는 질병, 및 염증성 질병 중에서 선택되는 화합물.