KR20090084010A - 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산의 베타 엔도르핀분비를 통한 우울증 질환의 예방 또는 치료효과 - Google Patents

Abstract

본 발명은 캠페롤(Kaempferol), 퀘세틴(Quercetin), 또는 클로로제닉산(Chlorogenic acid)을 유효성분으로 포함하는 우울증 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명의 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산의 β-엔도르핀 분비를 통한 항우울증에 효과를 나타내므로 우울증을 예방 또는 치료하는 항우울증제로서 유용하게 사용될 수 있다.

캠페롤 (Kaempferol), 퀘세틴 (Quercetin), 클로로제닉산 (Chlorogenic acid), β-엔도르핀, 항우울증,

Description

캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산의 베타 엔도르핀 분비를 통한 우울증 질환의 예방 또는 치료효과 {Antidepressant Therapeutic Effect of Kaempferol, Quercetin or Chlorogenic Acid through β-Endorphin Release}

본 발명은 우울증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

현대사회에서 우울증은 임상적으로 가장 흔한 정신장애 중 하나로 성인 10명 중 1명은 일생 동안 한 번 이상 우울증을 경험한다. 우울증의 정확한 원인은 아직까지 밝혀지지 않았지만 생리학적, 심리적, 사회적, 신체적 등 다양한 원인에 의해서 그것이 뇌의 신경전달체계에 영향을 미쳐 화학적 불균형을 초래함으로 우울증이 온다고 알려져 있다. 뇌 속에는 신경을 조절하는 여러 가지 성분들이 있는데 이 중에 노르에피네프린, 세로토닌, 아세틸콜린, 도파민, 엔도르핀 등과 같은 물질들의 분비 부족으로 생기는 경우가 많다. 또 그 외에 일주기 리듬의 이상, 뇌의 기능 이상 등이 원인이 될 수도 있다. 우울증 환자들에게서는 세로토닌 수치가 떨어져 있는 것이 자주 발견된다. 또한 신경 전달 체계 중 5-HT1b 자가수용체(5-HT1b autoreceptor)라는 세포 단백질이 너무 많이 생겨나게 하기도 한다. 이 5-HT1b 자가수용체가 많이 생기면 말 그대로 세로토닌을 붙잡는 단백질이 늘어나는 것으로, 세로토닌의 분비량이 적어지는 것과 같은 효과를 나타낸다. 우울증 환자를 검사해보면 이 물질이 과도한 활성을 띠고 있고, 이런 변화들은 스트레스에 의한 신체 반응 결과로 일어나기도 하지만, 이런 스트레스 없이도 신체 내의 호르몬 균형이 깨져 세로토닌 분비가 줄어들면 갑자기 우울해질 수 있다. 따라서, 현재 시판되고 있는 항우울제 중에는 세로토닌의 분비량을 늘리거나, 세로토닌이 재흡수 되는 것을 방지하거나 해서 혈중 세로토닌 농도를 유지시켜주는 기작을 통해 우울증을 치료하는 치료제들이 개발되어 있다.

한편, 베타 엔도르핀(β-엔도르핀)은 정서적 스트레스를 해소하고 행복감과 극치감을 느끼게끔 만들어주는데 아주 효과적인 물질로 잘 알려져 있다. 하지만 현재까지 체내의 엔도르핀 분비량을 늘리기 위해서는 운동이나 외부적인 자극 요건에 의해서 자연적으로 분비가 되도록 하는 방법 외에는 알려진 바가 없다. 우울증을 유발시키는데 가장 커다란 원인이 되는 스트레스 작용을 억제시킴으로 우울증을 치료하기 위한 치료방법은 매우 유용한 방법이라고 생각된다. 특히, 탁월한 항스트레스 작용을 보이는 β-엔도르핀을 분비시키는 물질을 이용하여 우울증을 치료하는 방법이 매우 유효한 치료법이라고 사료된다.

본 발명은 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산이 항스트레스 작용을 보이는 β-엔도르핀을 활성화시켜 항우울증 작용을 할 수 있음을 확인하고, 이를 유효성분으로 포함하는 우울증 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 캠페롤, 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산을 유효성분으로 함유하는 β-엔도르핀 활성화용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 캠페롤, 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산을 유효성분으로 함유하는 항우울증 조성물을 제공한다.

β-엔도르핀의 활성화는 β-엔도르핀의 발현량을 증가시키거나, 발현된 β-엔도르핀의 분비를 촉진시키거나, 또는 분비된 β-엔도르핀의 활성(activity)을 높이는 등의 다양한 방법에 의해 수행될 수 있으나, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 화학식 1로 표시되는 캠페롤, 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 화학식 3으 로 표시되는 클로로제닉산은 Sigma사의 제품을 사용하였다.

본 발명의 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 캠페롤, 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 캠페롤, 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산에 추가로 다른 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.

본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 형태로 제조될 수 있으며, 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 본 발명의 활성성분과 양립가능 하여야 하며, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있고, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 통상의 환자 증후와 질병의 심각도에 기초하여 본 기술분야의 통상의 전문가가 결정할 수 있다. 또한, 산제, 정제, 캡슐제, 액제, 주사제, 연고제, 시럽제 등의 다양한 형태로 제제화할 수 있으며 단위-투여량 또는 다-투여량 용기, 예를 들면 밀봉된 앰플 및 병 등으로 제공될 수도 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여가 가능하다. 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만, 예를 들면, 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 장관, 설하 또는 국소 투여가 가능하다.

이와 같은 임상투여를 위해 본 발명의 약학적 조성물은 공지의 기술을 이용하여 적합한 제형으로 제제화할 수 있다. 예를 들어, 경구투여 시에는 불활성 희석제 또는 식용 담체와 혼합하거나, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐에 밀봉되거나 또는 정제로 압형하여 투여할 수 있다. 경구 투여용의 경우, 활성 화합물은 부형제와 혼합되어 섭취형 정제, 협측 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭시르, 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다. 또한, 주사용, 비경구 투여용 등의 각종 제형은 당해 기술 분야의 공지된 기법 또는 통용되는 기법에 따라 제조할 수 있다.

본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 일일 투여량은 본 발명의 조성물 내에 포함되는 상기 화학식 1로 표시되는 캠페롤, 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산을 기준으로 각각 0.1~500 mg/kg 이고, 바람직하게는 0.1~100 mg/㎏이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 더욱 바람직하다.

아울러, 본 발명의 조성물은 우울증 억제/해소를 위하여, 생체의 우울증 반응시 중요한 생리적 역할을 수행할 수 있는 물질, 예를 들면 β-엔도르핀을 발현시켜 체내의 항상성을 유지하기 위한 목적으로 건강식품의 형태로 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물의 유효성분인 캠페롤, 퀘세틴, 클로로제닉산을 식품 첨가물로 사용할 경우, 캠페롤, 퀘세틴, 클로로제닉산을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 캠페롤, 퀘세틴, 클로로제닉산이 원료에 대하여 각각 15 중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함 한다.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1~20 g, 바람직하게는 약 5~12 g 이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만, 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0~20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

현재 시판되고 있는 항우울제 중에는 세로토닌의 분비량을 늘리거나, 세로토닌이 재흡수되는 것을 방지하거나 해서 주로 혈중 세로토닌 농도를 유지시켜주는 기작을 통해 우울증을 치료하는 치료제들이 개발되어 있다.

그러나 스트레스 대처 능력을 증진시킴으로서 우울증을 유발시키는데 가장 근본 원인이 되는 스트레스 그 자체를 감소시키는 것도 우울증을 치료하기 위한 매우 효과적인 치료방법이라고 사료된다. β-엔도르핀은 정서적 스트레스를 해소하고 행복감과 극치감을 느끼게끔 만들어주는데 아주 효과적인 물질로서 스트레스 대처 능력의 증진을 통한 우울증 치료에 핵심역할을 할 수 있다. 하지만 현재까지 체내의 β-엔도르핀 분비량을 늘리기 위해서는 운동이나 외부적인 자극 요건에 의해서 자연적으로 분비가 되도록 하는 방법 외에는 알려진 바가 없다.

본 발명의 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 유효성분으로 하는 조성물은 우울증질환 시 중요한 생리적 역할을 수행할 수 있는 β-엔도르핀의 발현을 증가시켜 체내의 항상성 유지에 큰 효과를 나타내고, 우울증 모델과 관련한 실험에서 스트레스 대처 능력의 증진에 탁월한 효과를 나타내므로 우울증 등의 질병에 대한 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 조성물이 생체의 우울증 반응시 중요한 생리적 역할을 수행하는 β-엔도르핀을 발현시켜 체내의 항상성을 유지하는 효과는 이미 시험법이 확립되어 있는 ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) 방법을 통해 확인할 수 있다. 본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 농도를 달리하여 구강 내로 투여한 후 농도별로 그 발현 정도를 관찰한 결과, 혈중 β-엔도르핀이 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산에 대해 대부분 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다(제1도 제2도 내지 제3도 참조). 또한 감금 스트레스를 통한 Tail Suspension Test(꼬리 매달기 실험), Forced Swim Test(강제 수영 실험), Rota-rod Test(운동행동 실험)와 같은 다양한 우울증 테스트에서도 효과가 있는 것을 확인하였다(제4도 및 제5도 내지 제6도 참조).

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발 명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 캠페롤 용액의 제조

캠페롤(Sigma K0133) 1g을 에탄올 0.5 ml와 PEG400 (polyethylglycol400) <Sigma> 0.5 ml에 습윤시킨 후 적당한 시간동안 녹였다. 습윤되지 않은 덩어리가 존재할 경우에는 스패츌라(spatula) 등의 적당한 도구로 덩어리를 잘게 으깨어 주었다. 이와는 별도로 증류수 혹은 탈이온수 9 ml에 Na-CMC (sodium-carboxydemethylcellulose) 100 mg을 잘 용해시킨 후, 이들을 서로 혼합하여 실험용액으로 사용하였다.

< 실시예 2> 퀘세틴 용액의 제조

퀘세틴(Sigma Q3001) 1g을 생리식염수로 희석한 후 실험용액으로 사용하였다.

< 실시예 3> 클로로제닉산 용액의 제조

클로로제닉산(Sigma C3878) 1g을 에탄올 0.5 ml와 PEG400 (polyethylglycol400) <Sigma> 0.5 ml에 습윤시킨 후 적당한 시간 동안 녹였다. 습윤 되지 않은 덩어리가 존재할 경우에는 스패츌라(spatula) 등의 적당한 도구로 덩어리를 잘게 으깨어 주었다. 이와는 별도로 증류수 혹은 탈이온수 9 ml에 Na-CMC (sodium-carboxydemethylcellulose) 100 mg을 잘 용해시킨 후, 이들을 서로 혼합하여 실험용액으로 사용하였다.

< 실시예 4> 감금 스트레스 처리와 약물 처리 방법

무게

22-23 g 8주차 마우스를 공기가 통하는 50 ml 원뿔 튜브에 머리 쪽을 먼저 넣고, 3cm 긴 중간 튜브로 막고 마지막으로 50 ml 튜브의 마개를 닫아 개별적으로 감금을 시켰다. 마우스는 이 방법으로 앞이나 뒤로 움직일 수 없게 된다. 이 감금 스트레스는 규정된 시간인 매일 오전 10시부터 2시간씩 가해졌다. 대조군 마우스는 본래의 우리 속에서 방해받지 않게 두었다. 감금 스트레스 시행 후, 감금되었던 마우스는 한 쌍으로 수용된 그들의 보통 수용환경으로 돌려 보내졌다. 이 과정은 14일 동안 계속 되었다.

이 후, 동물들은 추가 14일 동안 보통의 수용우리 안에서, 더 이상의 감금 스트레스 없이 유지시켰다. 마우스들은 감금 스트레스를 시행하던 14일과 추가 14일의 기간 동안 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산 각각 매일 30 mg/kg씩을 먹었다.

그 후, 이 약물들의 감금 스트레스 대처 능력의 증진 효과를 측정하기 위해 Tail Suspension Test, Forced Swim Test 그리고 Rota-rod Test의 순서로 행동 테스트가 수행되었다.

< 실험예 1> 캠페롤 , 퀘세틴 , 또는 클로로제닉산이 마우스 혈중 β-엔도르핀 수치에 미치는 영향 측정

상기 실시예 1, 2, 3에서 제조한 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산 용액을 마우스의 구강내로 10, 25 또는 50 mg/㎏ 투여하고, 90분 후에 혈액을 채취한 후 원심분리를 통하여 혈청을 얻었다. 이때, 대조군으로는 캠페롤, 퀘세틴, 클로로제닉산 대신 PEG400 (polyethylglycol400)와 증류수 혹은 탈이온수 9 ml에 Na-CMC (sodium-carboxydemethylcellulose)를 잘 혼합한 용액 또는 생리식염수를 사용하였다.

이후, ELISA 실험 방법을 이용하여 마우스의 혈중 β-엔도르핀 수치의 변화를 관찰하였다. 구체적으로, 약물을 투여한 마우스에서 채취한 혈액을 단시간 내에 4℃에서 1,600 xg로 15분 동안 원심 분리하여 혈청을 얻었고, 이렇게 얻어진 혈청을 β-엔도르핀(human) ELISA 키트(Phoenix pharmaceutical사)를 사용하여 실험하였다. 0-100 ng/㎖로 표준(standard)을 잡고 혈청과 1차 항혈청(primary antiserum), 바이오틴화(biotinylated) 펩타이드를 일정시간 동안 실온에서 처리하여 분석용 완충용액으로 세척한 후, SA-HRP 용액을 처리하였다. 다시 분석용 완충용액을 이용하여 세척한 후, TMB 기질 용액 처리하고 2 N HCl로 고정시켰다.

그 결과, 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 농도를 달리하여 구강 내로 투여하고 90분 후에 채취한 마우스 혈액의 혈중 β-엔도르핀 수치가 대조군의 혈중 β-엔도르핀 수치에 비하여 비교적 농도 의존적으로 대부분 뚜렷하게 증가함을 확인하였다(각각 제1도, 제2도 및 제3도).

< 실험예 2> 캠페롤 , 퀘세틴 , 또는 클로로제닉산이 마우스 Tail Suspension Test에 미치는 영향 측정

세 그룹의 마우스들을 실험에 사용하였다. 대조군은 아무 처리 없이 본래의 우리 속에서 방해받지 않게 두었다. 실험대상 (가)군은 상기 실시예 4에 기술된 감금 스트레스만 시행된 마우스들이고 실험대상 (나)군은 상기 실시예 4에 기술된 대로 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산이 투여되며 감금 스트레스가 시행된 마우 스들이다.

Tail Suspension Test를 시행하기 위해 부드러운 천으로 덮인 탁자 표면으로부터 50 cm 위에 고정된 금속막대에 마우스를 개별적으로 꼬리부분을 이용하여 매달았다. 꼬리의 끝은 접착테이프를 사용해 고정시켰고 테스트는 6분간 진행되었다. 꼬리가 막대에 고정되어 있는 시간을 스톱워치를 사용해 측정하였는데 고정 시간이 길수록 감금 스트레스의 영향이 상대적으로 큰 것으로 추정할 수 있다.

제4도에서 볼 수 있는 Tail Suspension Test 결과, 대조군에 비하여 실험대상 (가)군에서 뚜렷하게 고정 시간이 긴 것으로 나타났으나, 실험대상 (나)군에서는 (가)군에 비해 유의성 있게 고정 시간이 짧아 거의 대조군 수준인 것을 확인할 수 있었다.

제4도에서 왼쪽 그래프는 고정시간을 초로 나타낸 그래프이고, 오른쪽 그래프는 대조군을 100%로 기준 삼아 퍼센트로 나타낸 그래프이다.

< 실험예 3> 캠페롤 , 퀘세틴 , 클로로제닉산이 마우스 Forced Swim Test 에 미치는 영향 측정

이 실험에서도 상기 실험과 동일하게 대조군, (가)군, (나)군 등 세 그룹의 마우스들이 사용되었다. (가)군은 감금 스트레스만 처리한 마우스들이고, (나)군은 감금 스트레스와 동시에 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산으로 처리된 마우스들이다.

플렉시 유리 원통 (Plexiglas cylinder, 높이 :27 cm, 지름 :15 cm)에 24℃ 물을 바닥으로부터 14 cm 높이로 담아 마우스가 바닥에 닿거나 탈출하지 못하도록 하여 15분간 미리 수영시켰다. 15분 후, 마우스를 타월로 신속히 말리고 우리 속으로 돌려보냈다. 하루 경과 후, 마우스를 6분간 강제로 수영시켰는데 처음 1분간 적응을 시키고 그 다음 5분간 행동을 관찰하였다. 고정시간은 동물이 손발을 움직이지 않고 떠있는 동안의 시간 합계를 스톱워치로 측정하였는데 고정 시간이 길수록 감금 스트레스의 영향이 상대적으로 큰 것으로 추정할 수 있다.

그 결과, 제5도에서 볼 수 있는 바와 같이 대조군에 비하여 (가)군의 마우스들에서는 고정되는 시간이 뚜렷하게 길게 나타났으나, (나)군 중 퀘세틴으로 처리한 마우스들에서는 (가)군에 비해 약간 감소 된 고정 시간을 나타내었고, (나)군 중 캠페롤, 또는 클로로제닉산으로 처리한 마우스들에서는 유의성 있게 대조군과 비슷한 수준으로까지 고정 시간이 감소 되는 것을 확인할 수 있었다.

제5도의 그래프에서 왼쪽의 그래프는 고정시간을 초로 나타낸 그래프이고, 오른쪽의 그래프는 대조군을 100%로 기준 삼아 퍼센트로 나타낸 그래프이다.

< 실험예 4> 캠페롤 , 퀘세틴 , 또는 클로로제닉산이 마우스 Rota - rod Test 에 미치는 영향 측정

이 실험에서도 상기 실험과 동일하게 대조군, (가)군, (나)군 등 세 그룹의 마우스들이 사용되었다. (가)군은 감금 스트레스만 처리한 마우스들이고, (나)군은 감금 스트레스와 동시에 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산으로 처리된 마우스들이다.

감금 스트레스가 마우스 운동 근육 활동에 미치는 영향을 Rota-rod Test를 통해 평가하였다. 마우스가 10 rpm 또는 15 rpm으로 회전하는 Rota-rod(로타 로드) 위에서 떨어지지 않고 남아 있는 시간을 측정하였는데 5분을 최대치로 잡아 5분 이상 남아 있는 경우 이를 5분으로 기록하였다. 로타 로드에 남아 있는 시간이 짧을수록 감금 스트레스의 영향이 큰 것으로 추정할 수 있다.

제6도에서 볼 수 있는 바와 같이 10 rpm 경우에는 대조군, (가)군, (나)군의 모든 마우스들에서 별다른 차이 없이 비슷한 결과를 보였다.

그러나 제6도에서 또한 볼 수 있는 바와 같이 15 rpm에서는 대조군에 비하여 (가)군 마우스들이 로타 로드 위에 남아 있는 시간이 뚜렷하게 감소 되었음을 확인할 수 있으나, (나)군 중 캠페롤 또는 퀘세틴으로 처리한 마우스들에서는 로타 로드 위에 남아 있는 시간이 대조군과 비슷하게 상승 된 수치를 보였으며, (나)군 중 클로로제닉산으로 처리한 마우스들에서는 대조군과 대등한 수치를 보이는 것을 확인할 수 있었다.

< 제제예 > 약학적 조성물의 제조

본 발명의 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 포함하는 약제들을 다음과 같이 제조하였다.

1. 캡슐제의 제조

화학식 1로 표시되는 캠페롤, 또는 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산 5 mg을 락토오즈 14.8 mg, 폴리비닐 피롤리돈 10.0 mg, 마그네슘 스테아레이트 0.2 mg과 함께 섞었다.

혼합물을 적당한 장치를 사용하여 단단한 No. 5 젤라틴 캡슐에 채웠다.

상기 분말 및 캡슐제의 구성성분은 다음과 같다.

화학식 1 또는 화학식 2 또는 화학식 3의 화합물 5.0 mg

락토오즈 14.8 mg

폴리비닐 피롤리돈 10.0 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mg

2. 캡슐제의 제조

화학식 1로 표시되는 캠페롤, 또는 화학식 2로 표시되는 퀘세틴, 또는 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산 10 mg, 만니톨 180 mg, Na2HPO4·12H20 26 mg 및 증류수 2974 mg을 함유시켜 주사제를 제조하였다.

상기 용액을 병에 넣고 20℃에서 30분간 가열하여 멸균시켰다.

상기 주사액제의 구성성분은 다음과 같다.

화학식 1 또는 화학식 2 또는 화학식 3의 화합물 10 mg

만니톨 180 mg

Na2HPO4·12H20 26 mg

증류수 0.2 mg

제1도는 캠페롤을 농도를 달리하여 구강 내로 투여한 90분 후에 살펴본 마우스들의 혈중 β-엔도르핀 수치가 증가함을 보여주는 그래프이다.

제2도는 퀘세틴을 농도를 달리하여 구강 내로 투여한 90분 후에 살펴본 마우스들의 혈중 β-엔도르핀 수치가 증가함을 보여주는 그래프이다.

제3도는 클로로제닉산을 농도를 달리하여 구강 내로 투여한 90분 후에 살펴본 마우스들의 혈중 β-엔도르핀 수치가 증가함을 보여주는 그래프이다.

제4도는 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 투여받은 마우스들의 감금 스트레스 대처 능력이 향상됨을 Tail Suspension Test를 통해 보여 주는 그래프이다.

제5도는 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 투여받은 마우스들의 감금 스트레스 대처 능력이 향상됨을 Forced Swim Test를 통해 보여주는 그래프이다.

제6도는 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 투여받은 마우스들의 감금 스트레스 대처 능력이 향상됨을 Rota-rod Test를 통해 보여주는 그래프이다.

Claims (5)

1. 캠페롤(Kaempferol), 퀘세틴(Quercetin), 또는 클로로제닉산(Chlorogenic acid)을 유효성분으로 함유하는 β-엔도르핀 활성화용 조성물.
2. 캠페롤, 퀘세틴, 또는 클로로제닉산을 유효성분으로 함유하는 항우울증용 조성물.
3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 명세서의 화학식 1로 표시되는 캠페롤 및 약학적으로 허용되는 그의 염을 유효성분으로 함유하는 우울증 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
4. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 명세서의 화학식 2로 표시되는 퀘세틴 및 약학적으로 허용되는 그의 염을 유효성분으로 함유하는 우울증 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
5. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 명세서의 화학식 3으로 표시되는 클로로제닉산 및 약학적으로 허용되는 그의 염을 유효성분으로 함유하는 우울증 질환의 예방 또는 치료용 조성물.

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