KR20090010987A - 신규 아밀로이드 친화성 화합물 - Google Patents
신규 아밀로이드 친화성 화합물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20090010987A KR20090010987A KR1020087028172A KR20087028172A KR20090010987A KR 20090010987 A KR20090010987 A KR 20090010987A KR 1020087028172 A KR1020087028172 A KR 1020087028172A KR 20087028172 A KR20087028172 A KR 20087028172A KR 20090010987 A KR20090010987 A KR 20090010987A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- group
- compound
- carbon
- pyridine
- mmol
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 253
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 98
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims abstract description 71
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 70
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims abstract description 25
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims abstract description 21
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 14
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 46
- -1 triphenylstannyl group Chemical group 0.000 claims description 30
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 14
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 claims description 13
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 11
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 6
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 5
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 5
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 4
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 3
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical group CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000005208 trialkylammonium group Chemical group 0.000 claims description 2
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical group OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 3
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000007886 mutagenicity Effects 0.000 abstract description 13
- 231100000299 mutagenicity Toxicity 0.000 abstract description 13
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 abstract 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 216
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 165
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 162
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 150
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 150
- VNHBYKHXBCYPBJ-UHFFFAOYSA-N 5-ethynylimidazo[1,2-a]pyridine Chemical compound C#CC1=CC=CC2=NC=CN12 VNHBYKHXBCYPBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 98
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 88
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 86
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 85
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 84
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 80
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 76
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 72
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 58
- 239000000047 product Substances 0.000 description 54
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 51
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 50
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 48
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 47
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 46
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 43
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 43
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 41
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 38
- LJYOFQHKEWTQRH-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-1-(4-hydroxyphenyl)ethanone Chemical compound OC1=CC=C(C(=O)CBr)C=C1 LJYOFQHKEWTQRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 35
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 34
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 description 33
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 32
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 32
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 32
- TXFPEBPIARQUIG-UHFFFAOYSA-N 4'-hydroxyacetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 TXFPEBPIARQUIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 30
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 30
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 30
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 30
- JADVWWSKYZXRGX-UHFFFAOYSA-M thioflavine T Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=[N+](C)C2=CC=C(C)C=C2S1 JADVWWSKYZXRGX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 30
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 29
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 29
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 27
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 26
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 25
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 24
- QTMDXZNDVAMKGV-UHFFFAOYSA-L copper(ii) bromide Chemical compound [Cu+2].[Br-].[Br-] QTMDXZNDVAMKGV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 24
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 24
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 23
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 22
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 21
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 20
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 20
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 20
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 19
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 18
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 description 18
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 18
- DJAPVDCXTHRTAM-UHFFFAOYSA-N 4-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=CN(C=C(Br)C=C2)C2=N1 DJAPVDCXTHRTAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000000211 autoradiogram Methods 0.000 description 17
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 17
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 17
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 16
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 16
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 16
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 16
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 15
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 15
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 15
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 15
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 description 15
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 14
- KPMVHELZNRNSMN-UHFFFAOYSA-N chembl1985849 Chemical compound N1=CC=C2NCCN21 KPMVHELZNRNSMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 14
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 14
- UTCSSFWDNNEEBH-UHFFFAOYSA-N imidazo[1,2-a]pyridine Chemical compound C1=CC=CC2=NC=CN21 UTCSSFWDNNEEBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 13
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 13
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 13
- 229910021590 Copper(II) bromide Inorganic materials 0.000 description 12
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 12
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 12
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 12
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 12
- WGOLHUGPTDEKCF-UHFFFAOYSA-N 5-bromopyridin-2-amine Chemical compound NC1=CC=C(Br)C=N1 WGOLHUGPTDEKCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 11
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 11
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 11
- FVAUCKIRQBBSSJ-VVUPZWBASA-M sodium;iodine-123(1-) Chemical compound [Na+].[123I-] FVAUCKIRQBBSSJ-VVUPZWBASA-M 0.000 description 11
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 10
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 10
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 10
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 9
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 9
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 9
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 9
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- YHHGLIPKAMQMBD-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-2-[4-(3-fluoropropoxy)phenyl]imidazo[1,2-a]pyridine Chemical compound C1=CC(OCCCF)=CC=C1C1=CN(C=C(Br)C=C2)C2=N1 YHHGLIPKAMQMBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 8
- IUJDSEJGGMCXSG-UHFFFAOYSA-N Thiopental Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=S)NC1=O IUJDSEJGGMCXSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 8
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 8
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 8
- 125000004857 imidazopyridinyl group Chemical group N1C(=NC2=C1C=CC=N2)* 0.000 description 8
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 8
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 8
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 8
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 8
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960003279 thiopental Drugs 0.000 description 8
- VNHWPVLQRKKKRY-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-3-fluoropropane Chemical compound FCCCBr VNHWPVLQRKKKRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 7
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 7
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 7
- WOTSEKGXOIGTRF-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethoxy-tert-butyl-diphenylsilane Chemical compound C=1C=CC=CC=1[Si](OCCBr)(C(C)(C)C)C1=CC=CC=C1 WOTSEKGXOIGTRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PSDNWUFMRMFHDZ-UHFFFAOYSA-N 3-[4-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]propyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)OCCCOC1=CC=C(C=2N=C3C=CC(Br)=CN3C=2)C=C1 PSDNWUFMRMFHDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 6
- IOJUPLGTWVMSFF-UHFFFAOYSA-N benzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC=NC2=C1 IOJUPLGTWVMSFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 6
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 229940087646 methanolamine Drugs 0.000 description 6
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 6
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 6
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 6
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-M fluorine-18(1-) Chemical compound [18F-] KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-M 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 5
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 5
- DKFFAVRVYDPJBA-UHFFFAOYSA-N tributyl-[2-[4-(3-fluoropropoxy)phenyl]imidazo[1,2-a]pyridin-6-yl]stannane Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=C(OCCCF)C=C1 DKFFAVRVYDPJBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NPFKHHDTLDINMW-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(6-tributylstannylimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=C(OCCO)C=C1 NPFKHHDTLDINMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZWHNFDKDABJADV-UHFFFAOYSA-N 3-[4-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]propan-1-ol Chemical compound C1=CC(OCCCO)=CC=C1C1=CN(C=C(Br)C=C2)C2=N1 ZWHNFDKDABJADV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LUJMEECXHPYQOF-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxyacetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=CC(O)=C1 LUJMEECXHPYQOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GVPCWJLUMQDVKG-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-2-[4-(2-fluoroethoxy)phenyl]imidazo[1,2-a]pyridine Chemical compound C1=CC(OCCF)=CC=C1C1=CN(C=C(Br)C=C2)C2=N1 GVPCWJLUMQDVKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 4
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 4
- KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N Peracetic acid Chemical compound CC(=O)OO KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 4
- ODWXUNBKCRECNW-UHFFFAOYSA-M bromocopper(1+) Chemical compound Br[Cu+] ODWXUNBKCRECNW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 4
- MHYGQXWCZAYSLJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl-chloro-diphenylsilane Chemical compound C=1C=CC=CC=1[Si](Cl)(C(C)(C)C)C1=CC=CC=C1 MHYGQXWCZAYSLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 4
- PISQDQHXMQKKMZ-UHFFFAOYSA-N tributyl-[2-(4-ethoxyphenyl)imidazo[1,2-a]pyridin-6-yl]stannane Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=C(OCC)C=C1 PISQDQHXMQKKMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KPSSTNXVRDDWRU-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]ethyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)OCCOC1=CC=C(C=2N=C3C=CC(Br)=CN3C=2)C=C1 KPSSTNXVRDDWRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LDLCZOVUSADOIV-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethanol Chemical compound OCCBr LDLCZOVUSADOIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MNICSAISFYMXCH-UHFFFAOYSA-N 3-[4-(6-tributylstannylimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]propan-1-ol Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=C(OCCCO)C=C1 MNICSAISFYMXCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 3
- FFBHFFJDDLITSX-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[2-hydroxy-4-(3-oxomorpholin-4-yl)phenyl]carbamate Chemical compound OC1=C(NC(=O)OCC2=CC=CC=C2)C=CC(=C1)N1CCOCC1=O FFBHFFJDDLITSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 3
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000012332 laboratory investigation Methods 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 3
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 3
- 238000012636 positron electron tomography Methods 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- WTWGISIRNOHXHD-UHFFFAOYSA-N tributyl-[2-[4-(2-fluoroethoxy)phenyl]imidazo[1,2-a]pyridin-6-yl]stannane Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=C(OCCF)C=C1 WTWGISIRNOHXHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- 0 *C(N(C=C(c1ccccc1)N)*=*)=C Chemical compound *C(N(C=C(c1ccccc1)N)*=*)=C 0.000 description 2
- IAVCEBMLYVGBLA-UHFFFAOYSA-N 2-[1-[6-[2-fluoroethyl(methyl)amino]naphthalen-2-yl]ethylidene]propanedinitrile Chemical compound C1=C(C(C)=C(C#N)C#N)C=CC2=CC(N(CCF)C)=CC=C21 IAVCEBMLYVGBLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OIPVFNYBOOVXSL-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(6-tributylstannylimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=CC(OCCO)=C1 OIPVFNYBOOVXSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQAQXZBSGZUUNL-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(methylamino)phenyl]-1,3-benzothiazol-6-ol Chemical compound C1=CC(NC)=CC=C1C1=NC2=CC=C(O)C=C2S1 ZQAQXZBSGZUUNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IEPSGFQQGKPTPM-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-1-(3-hydroxyphenyl)ethanone Chemical compound OC1=CC=CC(C(=O)CBr)=C1 IEPSGFQQGKPTPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VJMIEHFULCHDLD-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-1-(4-ethoxyphenyl)ethanone Chemical compound CCOC1=CC=C(C(=O)CBr)C=C1 VJMIEHFULCHDLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQFUZUMFPRMVDX-UHFFFAOYSA-N 3-Bromo-1-propanol Chemical compound OCCCBr RQFUZUMFPRMVDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WKRCOZSCENDENK-UHFFFAOYSA-N 4-(1,3-benzothiazol-2-yl)aniline Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=NC2=CC=CC=C2S1 WKRCOZSCENDENK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XTZDIUGVJZDRGY-UHFFFAOYSA-N 4-imidazo[1,2-a]pyridin-2-ylphenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=CN(C=CC=C2)C2=N1 XTZDIUGVJZDRGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YHHGLIPKAMQMBD-SQZVAGKESA-N 6-bromo-2-[4-(3-(18F)fluoranylpropoxy)phenyl]imidazo[1,2-a]pyridine Chemical compound [18F]CCCOC1=CC=C(C=C1)C=1N=C2N(C=C(C=C2)Br)C=1 YHHGLIPKAMQMBD-SQZVAGKESA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BRFOGCNOLRDVCD-UHFFFAOYSA-N N=1C=CN2C1C=CC=C2.[I] Chemical compound N=1C=CN2C1C=CC=C2.[I] BRFOGCNOLRDVCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N ac1l2y5h Chemical compound [18FH] KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 102000034240 fibrous proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091005899 fibrous proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 2
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 2
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004464 hydroxyphenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- OEOPVJYUCSQVMJ-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethyl-4-(6-methyl-1,3-benzothiazol-2-yl)aniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=NC2=CC=C(C)C=C2S1 OEOPVJYUCSQVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 210000002682 neurofibrillary tangle Anatomy 0.000 description 2
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 2
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- NDVLTYZPCACLMA-UHFFFAOYSA-N silver oxide Chemical compound [O-2].[Ag+].[Ag+] NDVLTYZPCACLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- FVAUCKIRQBBSSJ-FXMLPJBTSA-M sodium;iodine-125(1-) Chemical compound [Na+].[125I-] FVAUCKIRQBBSSJ-FXMLPJBTSA-M 0.000 description 2
- PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N stilbene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C=CC1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021286 stilbenes Nutrition 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 2
- LYAHJFZLDZDIOH-VURMDHGXSA-N (Z)-2-(2-furyl)-3-(5-nitro-2-furyl)acrylamide Chemical compound C=1C=COC=1/C(C(=O)N)=C/C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 LYAHJFZLDZDIOH-VURMDHGXSA-N 0.000 description 1
- YJFNFQHMQJCPRG-UHFFFAOYSA-N 1-(4-ethoxyphenyl)ethanone Chemical compound CCOC1=CC=C(C(C)=O)C=C1 YJFNFQHMQJCPRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAONJNQXCRQBQZ-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-1-fluoropropane Chemical compound CCC(F)Br ZAONJNQXCRQBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRHNUZCXXOTJCA-UHFFFAOYSA-N 1-fluoropropane Chemical compound CCCF JRHNUZCXXOTJCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROMSXTLRDQOKOR-GKTGUEEDSA-N 2-[4-(6-(18F)fluoranylimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound [18F]C=1C=CC=2N(C=1)C=C(N=2)C1=CC=C(C=C1)OCCO ROMSXTLRDQOKOR-GKTGUEEDSA-N 0.000 description 1
- FEQHPJGNTRHJRX-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(6-nitroimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound C1=CC(OCCO)=CC=C1C1=CN(C=C(C=C2)[N+]([O-])=O)C2=N1 FEQHPJGNTRHJRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQAQXZBSGZUUNL-BJUDXGSMSA-N 2-[4-(methylamino)phenyl]-1,3-benzothiazol-6-ol Chemical compound C1=CC(N[11CH3])=CC=C1C1=NC2=CC=C(O)C=C2S1 ZQAQXZBSGZUUNL-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- DBTWOTKWIVISQR-UHFFFAOYSA-N 2-bromopropan-1-ol Chemical compound CC(Br)CO DBTWOTKWIVISQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDRCIXUKBBBOPH-UHFFFAOYSA-N 2-ethenyl-1,3-benzoxazole Chemical class C1=CC=C2OC(C=C)=NC2=C1 FDRCIXUKBBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004777 2-fluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(F)C([H])([H])* 0.000 description 1
- DZVSAHOHDQUFMZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)OCCO)C=C1 DZVSAHOHDQUFMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDECRAPHCDXMIJ-UHFFFAOYSA-N 2-methylbenzenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(Cl)(=O)=O HDECRAPHCDXMIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDHWCFCNNGUJCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylimidazo[1,2-a]pyridine Chemical compound N1=C2C=CC=CN2C=C1C1=CC=CC=C1 KDHWCFCNNGUJCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 2.2.2-cryptand Chemical compound C1COCCOCCN2CCOCCOCCN1CCOCCOCC2 AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGMROEZDWJTIDW-UHFFFAOYSA-N 3-bromopropoxy-tert-butyl-dimethylsilane Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)OCCCBr QGMROEZDWJTIDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBCARPJOEUEZLS-UHFFFAOYSA-N 3-bromopyridin-2-amine Chemical compound NC1=NC=CC=C1Br RBCARPJOEUEZLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXQIHUAMASSHIW-UHFFFAOYSA-N 4-(3-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenol Chemical compound BrC1=C(N=C2N1C=CC=C2)C1=CC=C(C=C1)O LXQIHUAMASSHIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SZSBJKUORKLYBS-UHFFFAOYSA-N 4-(6-tributylstannylimidazo[1,2-a]pyridin-2-yl)phenol Chemical compound C=1N2C=C([Sn](CCCC)(CCCC)CCCC)C=CC2=NC=1C1=CC=C(O)C=C1 SZSBJKUORKLYBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HAFKCGZQRIIADX-UHFFFAOYSA-N 5-iodopyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC=C(I)C=N1 HAFKCGZQRIIADX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HWTDMFJYBAURQR-UHFFFAOYSA-N 80-82-0 Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HWTDMFJYBAURQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 238000010953 Ames test Methods 0.000 description 1
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 1
- 230000007082 Aβ accumulation Effects 0.000 description 1
- FQABRUIJDVHOEW-UHFFFAOYSA-N C1=CC(=CC=C1C2=C(N3C=C(C=CC3=N2)Br)Br)OCCCO Chemical compound C1=CC(=CC=C1C2=C(N3C=C(C=CC3=N2)Br)Br)OCCCO FQABRUIJDVHOEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008805 Chromosomal abnormalities Diseases 0.000 description 1
- UNPLRYRWJLTVAE-UHFFFAOYSA-N Cloperastine hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC(Cl)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)OCCN1CCCCC1 UNPLRYRWJLTVAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 206010067477 Cytogenetic abnormality Diseases 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N Stilbene Natural products C=1C=CC=CC=1/C=C/C1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- YUENFNPLGJCNRB-UHFFFAOYSA-N anthracen-1-amine Chemical compound C1=CC=C2C=C3C(N)=CC=CC3=CC2=C1 YUENFNPLGJCNRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 230000031709 bromination Effects 0.000 description 1
- 238000005893 bromination reaction Methods 0.000 description 1
- LUZSPGQEISANPO-UHFFFAOYSA-N butyltin Chemical compound CCCC[Sn] LUZSPGQEISANPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000692 cap cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- GTPDFCLBTFKHNH-UHFFFAOYSA-N chloro(phenyl)silicon Chemical compound Cl[Si]C1=CC=CC=C1 GTPDFCLBTFKHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N dihydrogen phosphate;triethylazanium Chemical compound OP(O)(O)=O.CCN(CC)CC UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 description 1
- 150000005234 imidazo[1,2-a]pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N malononitrile Chemical compound N#CCC#N CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCAWEPFNJXQPAN-UHFFFAOYSA-N methoxyfenozide Chemical compound COC1=CC=CC(C(=O)NN(C(=O)C=2C=C(C)C=C(C)C=2)C(C)(C)C)=C1C QCAWEPFNJXQPAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N phenylbenzene Natural products C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)N=NC(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 235000013849 propane Nutrition 0.000 description 1
- 125000002572 propoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910001923 silver oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 150000001629 stilbenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N tetrabutylammonium Chemical group CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- PIILXFBHQILWPS-UHFFFAOYSA-N tributyltin Chemical compound CCCC[Sn](CCCC)CCCC PIILXFBHQILWPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
- A61K51/0455—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
- A61K51/0459—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, e.g. piperazine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D471/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
- C07F7/22—Tin compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
- C07F7/22—Tin compounds
- C07F7/2208—Compounds having tin linked only to carbon, hydrogen and/or halogen
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(과제) 본 발명은 아밀로이드에의 친화성을 갖고, 정상 조직으로부터의 클리어런스가 충분히 빠르고, 또한, 변이원성 등의 독성이 억제된 화합물을 얻는다.
(해결수단) 하기 식(1)
로 나타내어지는 화합물(식 중 A1, A2, A3 및 A4는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소, R1은 할로겐 치환기, R2는 할로겐 치환기, m은 0~2의 정수이다. 단, R1 및 R2 중 적어도 어느 한쪽은 방사성 할로겐 치환기이며, 또한, A1, A2, A3 및 A4 중 적어도 1개는 탄소이며, R1은 탄소인 A1, A2, A3 또는 A4에 결합된다.) 또는 그 염, 및 상기 식으로 나타내어지는 화합물 또는 그 염을 함유해서 이루어지는 저독성 알츠하이머병 진단제.
신규 아밀로이드 친화성 화합물
Description
본 발명은 두부 변성 질환의 진단에 사용하는 화합물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 알츠하이머병을 비롯한 아밀로이드가 축적되는 질환의 진단에 있어서, 병소 부위에 있어서의 아밀로이드의 검출에 유용한 화합물에 관한 것이다.
아밀로이드라고 불리는 섬유상 단백질이 체내의 여러 기관 또는 조직에 침착됨으로써 발증하는 질환은 아밀로이드증(amyloidosis)이라고 총칭되고 있다. 아밀로이드증에 공통되고 있는 것은 아밀로이드라고 불리는 β시트 구조가 풍부한 섬유상 단백질이 전신의 여러 장기 또는 국소에 침착되고, 그 장기나 조직에 있어서의 기능 이상을 발생시키는 점이다.
아밀로이드증의 대표적 질환인 알츠하이머병(이하, AD라고 함)은 인지증의 원인이 되는 질환으로서 알려져 있다. 이 병은 점차 진행성으로 아밀로이드가 뇌에 침착되어 죽음에 이르는 질환이기 때문에 다른 아밀로이드증과 비교해도 사회적 관심이 높은 질환이라고 할 수 있다. 최근, 선진 각국에서는 사회의 고령화에 따라 AD 환자수가 급격하게 증가하고 있어 사회적인 문제로 되고 있다.
병리조직학적 견지에 의하면, AD는 노인반(senile plaques)의 출현, 신경원 섬유 변화(neurofibrillary tangles) 및 광범위한 신경 탈락의 3개의 뇌내 병리 소견에 의해 특징지어진다. 노인반은 아밀로이드를 주요 구성 성분으로 하는 구조물이며, AD 발증에 있어서의 최초기, 즉 임상 증상이 출현하는 10년 이상전에 출현하는 뇌내의 병리 소견으로 된다.
AD의 진단은 CT 및 MRI 등의 화상 진단을 보조적으로 조합한 후에, 여러 인지 기능 평가(예를 들면, 하세가와식 스케일, ADAS-JCog, MMSE 등)를 행함으로써 실시되고 있다. 그러나, 이러한 인지 기능 평가에 기초한 방법은 발증 초기에 있어서의 진단 감도가 낮고, 또한, 각 개인이 태어나면서부터 갖는 인식 기능에 의해 진단 결과가 영향을 받기 쉽다는 결점이 있다. 또한 확정 진단에는 질환부의 생검이 불가결하기 때문에 환자의 존명중에 AD의 확정 진단을 행하는 것은 현재의 상태에서는 사실상 불가능이다(비특허문헌 1).
한편, 노인반을 구성하는 아밀로이드는 아밀로이드 β단백질(이하, Aβ라고함)의 응집체인 것이 보고되고 있으며, 또한 Aβ의 응집체가 β시트 구조를 취함으로써 신경 세포 독성을 나타내는 것이 많은 연구로부터 보고되고 있다. 이들 지견에 기초해서 Aβ의 뇌내로의 침착이 계기가 되어 그 하류의 현상으로서 신경원 섬유 변화의 형성 및 신경 탈락이 일어난다고 하는 소위 「아밀로이드 캐스케이드 가설」이 제창되어 있다(비특허문헌 2).
이러한 사실에 기초해서 최근 아밀로이드에 높은 친화성을 갖는 화합물을 마커로서 사용하고, AD를 인 비보(in vivo)에 의해 검출하는 시도가 이루어지고 있다.
이러한 뇌내 아밀로이드 화상 진단용 프로브의 대부분은 아밀로이드에 대한 친화성이 높고, 또한 뇌이행성이 높은 소수성 저분자 화합물을 각종 방사성 핵종, 예를 들면 11C, 18F 및 123I 등으로 표식한 화합물이다. 구체예로서 6-요오드-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]벤조티아졸(이하, TZDM이라고 함)이나 6-히드록시-2-[4'-(N-메틸아미노)페닐]벤조티아졸(이하, 6-OH-BTA-1이라고 함)을 비롯한 각종 티오플라빈 유도체(특허문헌 1, 비특허문헌 3), (E)-4-메틸아미노-4'-히드록시스틸벤(이하, SB-13이라고 함)이나 (E)-4-디메틸아미노-4'-요오드스틸벤(이하, m-I-SB라고 함)을 비롯한 스틸벤 화합물(특허문헌 2, 비특허문헌 4, 비특허문헌 5), 6-요오드-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]벤조옥사졸(이하, IBOX라고 함), 6-[2-(플루오로)에톡시]-2-[2-(2-디메틸아미노티아졸-5-일)에테닐]벤조옥사졸을 비롯한 벤조옥사졸 유도체(비특허문헌 6, 비특허문헌 7), 2-(1-{6-[(2-플루오로에틸)(메틸)아미노]-2-나프틸}에틸리덴)말로노니트릴(이하, FDDNP라고 함)을 비롯한 DDNP 유도체(특허문헌 4, 비특허문헌 8) 및 6-요오드-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘(이하, IMPY라고 함)을 비롯한 이미다조피리딘 유도체(특허문헌 3, 비특허문헌 9) 등을 11C나 방사성 할로겐으로 표식한 화합물이 보고되고 있다. 또한, 이들 화상 진단용 프로브의 일부에 대해서는 인간 이미징 연구가 실시되고, AD 환자에 있어서 건상례와는 확실히 다른 뇌에의 방사능 집적을 나타내는 것이 보고되고 있다(비특허문헌 10, 비특허문헌 11, 비특허문헌 12, 비특허문헌 13).
특허문헌 1: 일본 특허 공표 2004-506723호 공보
특허문헌 2: 일본 특허 공표 2005-504055호 공보
특허문헌 3: 일본 특허 공표 2005-512945호 공보
특허문헌 4: 일본 특허 공표 2002-523383호 공보
비특허문헌 1: J. A. Hardy & G. A. Higgins, "Alzheimer's Disease: The Amyloid Cascade Hypohesis.", Science, 1992, 256, p.184-185
비특허문헌 2: G. McKhann et al., "Clinical diagnosis of Alzheimer's disease: Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer's Disease.", Neurology, 1984, 34, p.939-944
비특허문헌 3: Z.-P. Zhuang et al., "Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins as Probes for Amyloid Aggregates.", J. Med. Chem., 2001, 44, p.1905-1914
비특허문헌 4: Masahiro Ono et al., "11C-labeled stilbene derivatives as Aβ-aggregate-specific PET imaging agents for Alzheimer's disease.", Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571
비특허문헌 5: H. F. Kung et al., "Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques.", J. American Chemical Society, 2001, 123, p.12740-12741
비특허문헌 6: Zhi-Ping Zhuang et al., "IBOX(2-(4'-dimethylaminophenyl)-6-iodobensoxazole): a ligand for imaging amyloid plaques in the brain.", Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894
비특허문헌 7: Furumoto Y et al., "[11C]BF-227: A New 11C-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-β Plaques Imaging.", European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging, 2005, 32, Sup.1, P759
비특허문헌 8: Eric D. Agdeppa et al., "2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes(DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer's Disease.", Molecular Imaging and Biology, 2003, 5, p.404-417
비특허문헌 9: Zhi-Ping Zhuang et al., "Structure-Activity Relationship of Imidazo[1,2-a]pyridines as Ligands for Detectingβ-Amyloid Plaques in the Brain.", J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243
비특허문헌 10: W. E. Klunk et al., "Imaging brain amyloid in Alzheumer's disease with Pittsburgh Compound-B.", Ann. Neurol., 2004, 55, p.306-319
비특허문헌 11: Nicolaas P. L. G. Verhoeff et al., "In-Vivo Imaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With[11C]SB-13 PET.", American Journal of Geriatric Psychiatry, 2004, 12, p.584-595
비특허문헌 12: Hiroyuki Arai et al., "[11C]-BF-227 AND PET to Visualize Amyloid in Alzheimer's Disease Patients", Alzheimer's & Dementia: The Journal of the Alzheimer's Association, 2006, 2, Sup.1, S312
비특허문헌 13: Christopher M. Clark et al., "Imaging Amyloid with I123 IMPY SPECT", Alzheimer's & Dementia: The Journal of the Alzheimer's Association, 2006, 2, Sup.1, S342
상기한 바와 같이 아밀로이드를 대상으로 한 화상 진단 프로브로서 여러 화합물이 개시되고, 임상 응용을 향해서 검토가 진행되고 있다.
TZDM, IBOX 및 m-I-SB의 요오드를 [125I]로 표식한 화합물은 정상 마우스를 사용한 실험 결과, 투여 후 2분점에 있어서 모두 뇌내로의 이행이 확인되었다. 그러나 이들 화합물은 정상 조직으로부터의 클리어런스가 충분하지 않고, 투여 후의 시간 경과에 따라 서서히 뇌내에 집적되는 경향을 나타내고 있다(일본 특허 공표 2005-512945호 공보, Zhi-Ping Zhuang et al., Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894, H. F. Kung et al., J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, p.12740-12741). 정상 조직으로부터의 클리어런스가 충분하지 않으면, 아밀로이드 집적 부위에서 충분한 콘트라스트가 얻어지지 않는다는 문제가 있다. SB-13을 [11C]로 표식 한 화합물에 대해서는 쥐를 사용한 실험에 의해 정상 조직으로부터의 클리어런스를 갖는 것이 나타내어져 있지만, 그 클리어런스 속도는 충분히 빠르다고는 할 수 없다(Masahiro Ono et al., Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571).
한편, IMPY를 비롯한 이미다조피리딘 골격을 갖는 화합물은 투여 후 뇌내로 이행해서 아밀로이드에 집적된다는 성질을 가짐과 아울러 상술한 화합물과는 달리 정상 조직으로부터의 클리어런스가 빠르다는 우수한 성질을 갖지만, [125I] 표식 화합물을 사용한 실험의 결과 명백해졌다. 그러나, IMPY는 복귀 돌연변이 시험에서 양성을 나타내는 화합물이며, 이 화합물을 화상 진단 프로브로서 사용하기 위해서는 그 투여량이나 투여 형태에 대해서 충분한 주의가 필요하다.(국제공개 제03/106439호 팸플릿)
FDDNP에 대해서도 복귀 돌연변이 시험에서 양성을 나타내는 것이 보고되고 있다.(국제공개 제03/106439호 팸플릿)
아밀로이드를 표적으로 한 화상 진단 프로브로서는 아밀로이드로의 친화성을 갖고, 정상 조직으로부터의 클리어런스가 충분히 빠르다는 IMPY의 우수한 성능을 유지하면서 변이원성 등의 독성이 억제된 화합물을 사용하는 것이 바람직하지만, 현재 시점에서 그러한 성능을 갖춘 화합물은 개시되어 있지 않다.
또한 IMPY에 있어서, 아밀로이드가 침착되어 있지 않은 백실(白實) 등으로의 비특이적인 집적이 보여지는 것이 우리들 검토의 결과 확인되었다(후술하는 비교예 II-6 참조). AD 진단제로서 사용하기 위해서는 아밀로이드 침착 부위 이외에 있어서의 비특이적인 집적이 억제된 화합물을 사용할 필요가 있지만, 그러한 화합물은 지금까지 개시되어 있지 않다.
본 발명은 아밀로이드를 표적으로 한 화상 진단 프로브로서 여러 화합물이 개시되어 있지만, 임상 사용에 견딜 수 있는 성능을 갖는 것이 확인된 화합물은 아직 존재하지 않는다는 상기 사정을 감안하여 이루어진 것이며, 아밀로이드에의 친화성을 갖고, 또한, 정상 조직으로부터의 클리어런스가 충분히 빠른 화합물, 또한 변이원성 등의 독성이 억제된 화합물을 얻는 것을 목적으로 했다.
발명자는 이미다조피리딘-페닐 골격 또는 그것과 유사한 골격을 갖는 화합물로서, 그 페닐기의 탄소에 산소를 결합시킨 화합물을 사용함으로써 상기 조건을 만족시킬 수 있는 화합물군이 얻어지는 것을 찾아내어 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명의 일측면에 의하면, 하기 식(1):
로 나타내어지는 화합물 또는 그 염, 및, 상기 식(1)로 나타내어지는 화합물 또는 그 염을 함유해서 이루어지는 저독성 알츠하이머병 진단제가 제공된다.
식(1) 중 R1 및 R2는 할로겐 치환기이며, R1 및 R2 중 적어도 어느 한쪽은 방사성 할로겐 치환기이다. 할로겐으로서는 여러 원소를 사용할 수 있고, 불소, 브롬 또는 요오드를 바람직하게 사용할 수 있다. 방사성 할로겐으로서는 여러 원소를 사용할 수 있고, 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 또는 131I로부터 선택되는 할로겐을 사용하는 것이 바람직하고, 18F, 123I 또는 125I로부터 선택되는 할로겐을 사용하는 것이 보다 바람직하다.
A1, A2, A3 및 A4는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소이지만, 적어도 하나는 탄소일 필요가 있다. A1, A2, A3 및 A4 중 3개 이상을 탄소로 하는 것이 바람직하고, 전체를 탄소로 하는 것이 보다 바람직하다. 또한, 식(1)에 있어서 R1은 탄소인 A1, A2, A3 또는 A4에 결합된다.
또한, m은 0~2의 정수이다. 또한, R1의 결합 부위는 탄소인 A3, 즉, 6위치의 탄소인 것이 바람직하다.
본 발명의 다른 일측면에 의하면, 하기 식(2):
로 나타내어지는 화합물 또는 그 염이 제공된다.
식(2) 중 R3은 비방사성 할로겐 치환기, 니트로 치환기, 알킬쇄의 탄소수가 1~4인 트리알킬스타닐 치환기, 및 트리페닐스타닐 치환기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기이다. 트리알킬스타닐 치환기로서는 여러 치환기를 사용할 수 있고, 트리메틸스타닐 치환기 및 트리부틸스타닐 치환기를 바람직하게 사용할 수 있다.
R4는 비방사성 할로겐 치환기, 메탄술폰산 치환기, 트리플루오로메탄술폰산 치환기 및 방향족 술폰산 치환기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기이다. 방향족 술폰산 치환기로서는 톨루엔술폰산, 니트로벤젠 술폰산 및 벤젠술폰산을 바람직하게 사용할 수 있다.
R3 및 R4의 비방사성 할로겐 치환기로서는 여러 할로겐을 사용할 수 있지만, 바람직하게는 방사성 불소를 사용한 구핵 치환 반응에 있어서의 표적이 될 수 있는 할로겐 또는 방사성 요요드 사이의 동위체 교환 반응의 표적이 될 수 있는 할로겐을 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는 염소, 요오드 또는 브롬을 사용할 수 있다. R3 및 R4 중 적어도 한쪽이 비방사성 할로겐 치환기인 것이 바람직하다.
A5, A6, A7 및 A8은 각각 독립적으로 탄소 또는 질소이지만 적어도 하나는 탄소일 필요가 있다. A5, A6, A7 및 A8 중 3개 이상을 탄소로 하는 것이 바람직하고, 전체를 탄소로 하는 것이 보다 바람직하다. 또, 식(2)에 있어서, R3은 탄소인 A5, A6, A7 또는 A8에 결합된다.
또한, n은 0~2의 정수이다.
또한, 본 발명에 의하면, 이미다조피리딘페닐 골격에 있어서의 페닐기의 4'위치 탄소에 산소를 통해 말단이 치환 또는 비치환의 알킬쇄를 결합시킨 화합물이 제공된다. 또한, R3의 결합 부위는 탄소인 A7, 즉, 6위치의 탄소인 것이 바람직하다.
즉, 본 발명의 또 다른 일측면에 의하면, 하기 식(3):
으로 나타내어지는 화합물 또는 그 염, 및 상기 식(3)으로 나타내어지는 화합물 또는 그 염을 함유해서 이루어지는 저독성 알츠하이머병 진단제가 제공된다. 특히, 상기 식(3)으로 나타내어지는 화합물 또는 그 염에 의하면, 특이성이 높은 저독성 알츠하이머병 진단제가 제공된다. 여기에서, 특이성이 높은 저독성 알츠하이머병 진단제란 아밀로이드에의 집적성을 갖고, 그 밖의 부위에의 집적이 거의 없거나, 어떤 경우라도 그곳으로부터 빠르게 클리어런스되는 성질을 가지므로, 투여 후 일정시간 경과후의 화상에 있어서의 아밀로이드 묘출의 특이성이 높은 진단제를 말하는 것으로 한다.
식(3) 중 R5는 방사성 할로겐 치환기이다. R5로서는 여러 방사성 할로겐을 사용할 수 있고, 바람직하게는 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방사성 할로겐을 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는 18F 또는 123I를 사용할 수 있다.
R6은 수소, 수산기, 메톡시기, 카르복실기, 아미노기, N-메틸아미노기, N,N-디메틸아미노기, 및 시아노기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기이다. R6은 바람직하게는 수소, 수산기, 카르복실기 또는 아미노기이며, 보다 바람직하게는 수소 또는 수산기이며, 특히 바람직하게는 수산기이다.
A9, A10, A11 및 A12는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소이지만, 적어도 하나는 탄소일 필요가 있다. A9, A10, A11 및 A12 중 3개 이상을 탄소로 하는 것이 바람직하고, 전체를 탄소로 하는 것이 보다 바람직하다. 또, 식(3)에 있어서, R5는 탄소인 A9, A10, A11 또는 A12에 결합된다. 또한, R5의 결합 부위는 탄소인 A11, 즉, 6위치의 탄소인 것이 바람직하다.
또한, p는 0~2의 정수이다.
본 발명의 또 다른 일측면에 의하면, 하기 식(4):
로 나타내어지는 화합물 또는 그 염이 제공된다.
식(4) 중 R7은 비방사성 할로겐 치환기, 니트로 치환기, 알킬쇄의 탄소수가 1~4인 트리알킬암모늄기, 알킬쇄의 탄소수가 1~4인 트리알킬스타닐 치환기 및 트리페닐스타닐기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기이다. 비방사성 할로겐 치환기로서는 방사성 불소를 사용한 구핵 치환 반응에 있어서의 표적이 될 수 있는 할로겐 또는 방사성 요오드 사이의 동위체 교환 반응의 표적이 될 수 있는 할로겐을 사용할 수 있고, 바람직하게는 염소, 요오드 또는 브롬을 사용할 수 있다. 트리알킬스타닐 치환기로서는 여러 치환기를 사용할 수 있고, 트리메틸스타닐 치환기 및 트리부틸스타닐 치환기를 바람직하게 사용할 수 있다.
R8은 수소, 수산기, 메톡시기, 카르복실기, 아미노기, N-메틸아미노기, N,N-디메틸아미노기, 및 시아노기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기이다. R8은 바람직하게는 수소, 수산기, 카르복실기 또는 아미노기이며, 보다 바람직하게는 수소 또는 수산기이며, 특히 바람직하게는 수산기이다.
A13, A14, A15 및 A16은 각각 독립적으로 탄소 또는 질소이지만, 적어도 하나는 탄소일 필요가 있다. A13, A14, A15 및 A16 중 3개 이상을 탄소로 하는 것이 바람직하고, 전체를 탄소로 하는 것이 보다 바람직하다. 또, 식(4)에 있어서, R7은 탄소인 A13, A14, A15 또는 A16에 결합된다. 또한, R7의 결합 부위는 탄소인 A15, 즉, 6위치의 탄소인 것이 바람직하다.
또한, q는 0~2의 정수이다.
(발명의 효과)
본 발명에 의해 아밀로이드에의 친화성을 갖고, 정상 조직으로부터의 클리어런스가 충분히 빠르고, 또한, 변이원성 등의 독성이 억제된 화합물 및 저독성 알츠하이머병 진단제, 또한 아밀로이드에의 높은 친화성을 갖고, 생체내에 있어서의 양호한 아밀로이드 묘출 능력이 우수한 화합물 및 고특이성 알츠하이머병 진단제를 얻는 것이 가능해졌다.
도 1A는 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1B는 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴
도 1C는 6-브로모-2-[4'-(2"-파라톨루엔술포닐옥시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴
도 1D는 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1E는 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1F는 6-브로모-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1G는 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1H는 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘의 합성 스킴.
도 1I는 [125I]-2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1J는 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1K는 시료 용액 중의 아밀로이드 농도와 방사능 농도의 관계.
도 1L의 (a)는 화합물 I-7 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.)
도 1M는 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 1N의 (a)는 화합물 I-9 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.).
도 2A는 2-[4'-(2-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성 스킴.
도 2B는 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 2C는 2-(4'-에톡시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성 스킴.
도 2D는 6-트리부틸스타닐-2-(4'-에톡시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 2E의 (a)는 123I-IMPY 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.).
도 2F의 (a)는 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.).
도 2G의 (a)는 2-(4'-에톡시페닐)-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.).
도 2H는 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성 스킴.
도 2I는 6-트리부틸스타닐-2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 2J는 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성 스킴.
도 2K는 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-이미다조[1,2-a]피리딘의 합성 스킴.
도 2L의 (a)는 화합물 II-4 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.).
도 2M의 (a)는 화합물 II-6 투여 후의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 (b)는 티오플라빈 T 염색 시료의 형광 현미경상(아밀로이드 현탁액 투여 부위의 확대 표시.).
I. 상기 식(1) 또는 (2)의 화합물의 합성 방법
(방사성 할로겐 표식 화합물의 전구체 화합물의 합성 방법)
이하, 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 예로 들어 본 발명의 하나의 실시 형태에 따른 방사성 할로겐 표식 화합물의 전구체 화합물의 합성 방법을 설명한다.
우선, 4'-히드록시아세토페논과 브롬화 제2동을 반응시켜 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 합성한다(도 1A, 공정 1). 이 때의 반응은 정법, 예를 들면 문헌(King L. Carroll & Ostrum G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12), p.3459-3461)에 기재된 방법에 따라서 행할 수 있다.
이어서, 상기에서 합성한 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 2-아미노-5-브로모피리딘과 반응시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시)페닐이미다조[1,2-a]피리딘을 합성한다(도 1A, 공정 2). 이 공정은, 하기의 요령으로 행할 수 있다.
우선, 2-브로모-4'-히드록시아세토페논과 2-아미노-5-브로모피리딘을 아세토니트릴 등의 불활성 용매에 용해하고, 환류 온도에서 2~6시간 반응시키면, 6-브로 모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘의 브롬화 수소산염이 생성되고, 백색 침전을 발생시킨다. 이 때의 용매로서는 아세토니트릴 외에 메탄올이나 아세톤이라는 동일한 반응에서 통상 이용되는 용매를 사용할 수 있다. 또한 반응 온도는 환류할 수 있는 온도이면 좋고, 예를 들면 아세토니트릴을 용매로 한 경우에는 90℃로 할 수 있다. 또, 사용하는 용매의 양은 반응에 충분한 양이면 좋지만, 지나치게 많으면 반응물의 침전을 얻을 수 없기 때문에 주의가 필요하다. 예를 들면, 10mmol 상당의 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 이용하여 반응시키는 경우에는 약 40~50mL의 용매를 사용하면 좋다.
이어서, 반응액을 여과해서 침전물을 여과 분별 후, 이 백색 침전을 메탄올/물 혼액(1:1)에 현탁하고, 이것에 포화 탄산수소나트륨 수용액을 침전물에 대하여 대과잉이 되도록 첨가하면, 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘이 유리되어 침전이 생긴다. 이 새롭게 생긴 침전을 여과 채취함으로써, 본 공정의 목적물인 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘을 얻을 수 있다(도 1A, 공정 2). 메탄올/물 혼액의 양은 반응시키기 위해서 충분한 양이면 특별히 한정할 필요는 없지만, 지나치게 많으면 생성물의 석출의 방해가 되므로 주의가 필요하다. 예를 들면, 10mmol 상당의 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 사용한 경우이면, 40~100mL 정도의 메탄올/물 혼액을 사용하면 좋다. 또한, 탄산수소나트륨의 양은 반응 기질인 상기 침전물에 대하여 대과잉이면 특별히 한정할 필요는 없고, 예를 들면, 상기 조건으로 반응시키는 경우이면 25mL 정도의 포화 탄산수소나트륨 수용액을 반응액에 첨가하면 좋다.
이어서, 합성한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘을 충분히 건조시킨 후, N,N-디메틸포름아미드에 용해하고, 탄산칼륨 및 3-브로모-1-플루오로프로판을 첨가해서 실온하에서 하룻밤 정도 교반함으로써 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 얻는다(도 1A, 공정 3). 탄산칼륨의 양은 반응중에 3-브로모-1-플루오로프로판으로부터 발생되는 브롬화 수소산을 중화할 수 있는 양이면 좋고, 전형적으로는 부원료인 3-브로모-1-플루오로프로판에 대하여 몰비로 해서 2배 정도 사용하면 좋다. 또한, 3-브로모-1-플루오로프로판의 양은 반응 기질에 대하여 과잉량이면 좋고, 전형적으로는 반응 기질인 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘에 대하여 몰비로 해서 1.5배정도 사용하면 좋다.
얻어진 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 디옥산에 용해하고, 트리에틸아민을 첨가한 후, 비스트리부틸주석 및 촉매량의 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐을 첨가한다. 이 반응액을 약 90℃로 가열해서 약 24시간 반응시킨 후, 용매를 증류 제거하고, 크로마토그램 정제를 행해서 목적물인 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 얻을 수 있다(도 1A, 공정 4). 이 때, 비스트리부틸주석의 양은 반응 기질에 대하여 과잉량이 되는 조건을 만족시키는 양이면 좋고, 구체적으로는 반응 기질인 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘에 대하여 몰비로 해서 1.5배 정도이면 좋다.
또, 6위치의 치환기를 트리부틸스타닐 치환기 이외의 트리알킬스타닐 치환기 로 한 화합물을 얻는 경우에는 공정 4에서 비스트리부틸주석을 사용하는 대신에 목적에 따른 여러가지 비스트리알킬주석을 사용하면 좋다. 예를 들면, 6위치의 치환기를 트리메틸스타닐 치환기로 한 화합물을 합성하는 경우에는 공정 4에서 비스트리메틸주석을 이용하여 상기와 같은 반응을 행하면 좋다.
이미다조피리딘환에 있어서의 관능기의 결합 부위를 6위치의 탄소 이외의 탄소로 한 화합물은 공정 2에서 사용한 2-아미노-5-브로모피리딘 대신에 피리딘환에 있어서의 브롬의 결합 부위가 여러가지 다른 화합물을 사용함으로써 얻을 수 있다. 예를 들면, 관능기의 결합 부위를 이미다조피리딘환의 8위치의 탄소로 하는 경우에는 공정 2에서 2-아미노-5-브로모피리딘 대신에 2-아미노-3-브로모피리딘을 사용하면 좋다.
또한, 방사성 할로겐에 의한 표식 부위를 이미다조피리딘환의 2위치의 탄소에 결합된 알콕시페닐 치환기로 하는 전구체 화합물은 공정 3에서 3-브로모-1-플루오로프로판 대신에 3-브로모-1-프로판올을 사용하고, 생성된 화합물에 파라톨루엔술포닐클로리드 등을 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 예를 들면, 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 경우에는 하기의 요령으로 합성할 수 있다.
우선, 상기 합성한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘을 N,N-디메틸포름아미드에 용해하고, 탄산칼륨 및 3-브로모-1-프로판올을 첨가해서 실온하에서 하룻밤 정도 교반함으로써 6-브로모-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 얻는다. 이것을 피리딘에 용해하고, 빙욕하에서 파라톨루 엔술포닐클로리드를 첨가한 후, 실온에서 반응시켜 목적물인 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 얻을 수 있다. 이 때, 파라톨루엔술포닐클로리드의 양은 반응 기질에 대하여 과잉량이면 좋고, 구체적으로는 반응 기질인 6-브로모-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘에 대하여 몰비로 해서 2배 정도이면 좋다.
또한, 이미다조피리딘환의 2위치 페닐기에 결합되는 알콕시 치환기는 4'위치 이외에 결합되는 화합물, 예를 들면, 3'위치에 플루오로프로폭시기가 결합된 6-트리부틸스타닐-2-[3'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 합성하기 위해서는 공정 1에서 4'-히드록시아세토페논 대신에 3'-히드록시아세토페논을 원료로 사용하여 상기와 동일한 반응을 행하면 좋다.
(방사성 할로겐 표식 화합물의 합성 방법)
이어서, 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 예로 들어 본 발명의 다른 일측면에 따른 방사성 할로겐 표식 화합물의 제조 방법에 대해서 설명한다.
2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 제조에 있어서는 우선, 표식에 제공하는 [123I]요오드화 나트륨 용액을 얻는다. [123I]방사성 요오드는 예를 들면, 크세논 가스를 타깃으로 해서 프로톤 조사를 행한다는 공지의 방법으로 얻을 수 있다. 이 [123I]방사성 요오드를 공지의 방법을 이 용하여 [123I]요오드화 나트륨 용액으로 하여 표식에 사용한다.
이어서, 표식 전구체인 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 불활성 유기 용매에 용해하고, 상기 [123I]요오드 벌크를 물로 용해한 액, 산 및 산화제를 첨가해서 반응시켜 목적물인 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 얻는다. 전구체를 용해시키는 불활성 유기 용매로서는 표식 전구체 및 [123I]요오드 벌크와의 사이에서 반응성을 갖지 않는 여러가지 용매를 사용할 수 있고, 바람직하게는 메탄올을 사용할 수 있다.
산은 여러가지 것을 사용할 수 있고, 바람직하게는 염산을 사용할 수 있다.
산화제는 반응액 중의 요오드를 산화시킬 수 있는 것이면 특별히 한정할 필요는 없고, 바람직하게는 과산화수소 또는 과초산을 사용할 수 있다. 산화제의 첨가량은 반응 용액 중의 요오드를 산화시키는데에 충분한 양이면 좋다.
요오드 이외의 방사성 할로겐 표식체는 합성 목적에 따른 표식 전구체를 목적에 따른 방사성 할로겐으로 표식함으로써 합성할 수 있다. 예를 들면, 2-[4'-(3"-[18F]플루오로프로폭시)페닐]-6-브로모이미다조[1,2-a]피리딘을 합성하는 경우에는 표식 전구체인 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 상간 이동 촉매와 탄산칼륨의 존재하에서 [18F]불화물 이온과 반응시키면 좋다.
II. 상기 식(3) 또는 (4)의 화합물의 합성 방법
(방사성 할로겐 표식 화합물의 전구체 화합물의 합성 방법)
이하, 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 예로 들어 본 발명의 하나의 실시 형태에 따른 방사성 할로겐 표식 화합물의 전구체 화합물의 합성 방법을 설명한다.
6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성에 있어서는, 우선, 4'-히드록시아세토페논과 브롬화 제2동을 반응시켜 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 합성한다(도 2A, 공정 1). 이 때의 반응은 정법, 예를 들면 문헌(King L. Carroll & Ostrum G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12), p.3459-3461)에 기재된 방법에 따라서 행할 수 있다.
이어서, 상기에서 합성한 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 2-아미노-5-요오드피리딘과 반응시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 합성한다(도 2A, 공정 2). 이 공정은, 하기의 요령으로 행할 수 있다.
우선, 2-브로모-4'-히드록시아세토페논과 2-아미노-5-요오드피리딘을 아세토니트릴 등의 불활성 용매에 용해하고, 환류 온도에서 2~6시간 반응시키면, 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 브롬화 수소산염이 생성되어 백색 침전을 발생시킨다. 이 때의 용매로서는 아세토니트릴 외에 메탄올이나 아세톤이라는 동일한 반응에서 통상 이용되는 용매를 사용할 수 있다. 또한, 반응 온도는 환류할 수 있는 온도이면 좋고, 예를 들면 아세토니트릴을 용매로 한 경우에는 110℃ 로 할 수 있다. 또, 사용하는 용매의 양은 반응에 충분한 양이면 좋지만, 지나치게 많으면 반응물의 침전을 얻을 수 없기 때문에 주의가 필요하다. 예를 들면, 10mmol 상당의 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 이용하여 반응시키는 경우에는 약 40~80mL의 용매를 사용하면 좋다.
이어서, 반응액을 여과해서 침전물을 여과 분별 후, 이 백색 침전을 메탄올/물 혼액(1:1)에 현탁하고, 이것에 포화 탄산수소나트륨 수용액을 침전물에 대하여 대과잉이 되도록 첨가하면 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘이 유리되어 침전이 생긴다. 이 새롭게 생긴 침전을 여과 채취함으로써, 본 공정의 목적물인 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 얻을 수 있다(도 2A, 공정 2). 메탄올/물 혼액의 양은 반응시키기 위해서 충분한 양이면 특별히 한정할 필요는 없지만, 지나치게 많으면 생성물의 석출의 방해가 되므로 주의가 필요하다. 예를 들면, 10mmol 상당의 2-브로모-4'-히드록시아세토페논을 사용한 경우이면, 40~100mL 정도의 메탄올/물 혼액을 사용하면 좋다. 또한, 탄산수소나트륨의 양은 반응 기질인 상기 침전물에 대하여 대과잉이면 특별히 한정할 필요는 없고, 예를 들면, 상기 조건으로 반응시키는 경우이면 50mL 정도의 포화 탄산수소나트륨 수용액을 반응액에 첨가하면 좋다.
여기에서 별도로 2-브로모에탄올과 t-부틸디페닐클로로실란(TBDPSCl)을 반응시켜 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄을 합성한다(도 2A, 공정 3). 이 때의 반응은 정법, 예를 들면 문헌{Organic Syntheses, Coll. Vol.10, p.170(2004); Vol.79, p.59(2002)}에 기재된 방법에 따라서 행할 수 있다.
이어서, 합성한 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 충분히 건조시킨 후, N,N-디메틸포름아미드에 용해하고, 탄산칼륨 및 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄을 첨가한다. 이 혼합물을 약 90℃에서 약 2시간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가해서 초산 에틸에 의해 추출하고, 초산 에틸층을 농축해서 크로마토그램 정제를 행함으로써, 2-[4'-(2"-t-부틸디페닐실록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 얻는다(도 2A, 공정 4). 탄산칼륨의 양은 반응중에 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄으로부터 발생하는 브롬화 수소산을 중화할 수 있는 양이면 좋고, 전형적으로는 부원료인 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄에 대하여 몰비로 해서 2~3배 정도 사용하면 좋다. 또한, 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄의 양은 반응 기질에 대하여 과잉량이면 좋고, 전형적으로는 반응 기질인 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘에 대하여 몰비로 해서 1.5배 정도 사용하면 좋다.
이어서, 얻어진 2-[4'-(2"-t-부틸디페닐실록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 t-부틸디페닐실릴기를 테트라부틸암모늄플루오리드를 이용하여 탈보호함으로써 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 얻을 수 있다(도 2A, 공정 5). 이 때의 반응은 정법, 예를 들면 문헌{Organic Syntheses, Coll. Vol.9, p.417(1998); Vol.74, p.248(1997)}에 기재된 방법에 따라서 행할 수 있다.
얻어진 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 디옥산에 용해하고, 트리에틸아민을 첨가한 후, 비스트리부틸주석 및 촉매량의 테 트라키스트리페닐포스핀팔라듐을 첨가한다. 이 반응액을 약 90℃로 가열해서 약 24시간 반응시킨 후, 용매를 증류 제거하고, 크로마토그램 정제를 행하여 목적물인 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 얻을 수 있다(도 2B, 공정 1). 이 때, 비스트리부틸주석의 양은 반응 기질에 대하여 과잉량이 되는 조건을 만족시키는 양이면 좋고, 구체적으로는 반응 기질인 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘에 대하여 몰비로 해서 1.5배 정도이면 좋다.
또, 이미다조피리딘환에 있어서의 6위치의 치환기를 트리부틸스타닐 치환기 이외의 트리알킬스타닐 치환기로 한 화합물을 얻는 경우에는 도 2B의 공정 1에서 비스트리부틸주석을 사용하는 대신에 목적에 따른 각종 비스트리알킬주석을 사용하면 좋다. 예를 들면, 6위치의 치환기를 트리메틸스타닐 치환기로 한 화합물을 합성하는 경우에는 도 2B의 공정 1에 있어서 비스트리메틸주석을 이용하여 상기와 동일한 반응을 행하면 좋다.
이미다조피리딘환에 있어서의 관능기의 결합 부위를 6위치의 탄소 이외의 탄소로 한 화합물은 도 2A의 공정 2에서 사용한 2-아미노-5-요오드피리딘 대신에 피리딘환에 있어서의 요오드의 결합 부위가 여러가지 다른 화합물을 사용함으로써 얻을 수 있다. 예를 들면, 관능기의 결합 부위를 이미다조피리딘환의 8위치의 탄소로 하는 경우에는 도 2A의 공정 2에 있어서 2-아미노-5-요오드피리딘 대신에 2-아미노-3-요오드피리딘을 사용하면 좋다.
(방사성 할로겐 표식 화합물의 합성 방법)
이어서, 방사성 요오드 표식체 화합물을 예로 들어 본 발명의 다른 일측면에 따른 방사성 할로겐 표식 화합물의 제조 방법에 대해서 설명한다.
방사성 요오드 표식체 화합물의 합성은 상기의 요령으로 합성한 표식 전구체 화합물을 불활성 유기 용매에 용해하고, 이것에 공지의 방법으로 얻어진 [123I]요오드화 나트륨 용액 등을 첨가하고, 산 및 산화제를 첨가해서 반응시킴으로써 행할 수 있다. 표식 전구체 화합물을 용해시키는 불활성 유기 용매로서는 표식 전구체 및 [123I]요오드화 나트륨 등과의 사이에서 반응성을 갖지 않는 여러가지 용매를 사용할 수 있고, 바람직하게는 메탄올을 사용할 수 있다.
산은 여러가지 것을 사용할 수 있고, 바람직하게는 염산을 사용할 수 있다.
산화제는 반응액 중의 요오드를 산화시킬 수 있는 것이면 특별히 한정할 필요는 없고, 바람직하게는 과산화수소 또는 과초산을 사용할 수 있다. 산화제의 첨가량은 반응 용액 중의 요오드를 산화시키는데에 충분한 양이면 좋다.
요오드 이외의 방사성 할로겐 표식체는 합성 목적에 따른 표식 전구체를 목적에 따른 방사성 할로겐으로 표식함으로써 합성할 수 있다. 예를 들면, 6-[18F]플루오로-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 합성하는 경우에는 표식 전구체인 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-니트로이미다조[1,2-a]피리딘을 상간 이동 촉매와 탄산칼륨의 존재하에서 [18F]불화물 이온과 반응시키면 좋다.
(본 발명에 따른 진단제의 조제 방법 및 사용 방법)
본 발명에 따른 진단제는 다른 일반적으로 알려져 있는 방사성 진단제와 마찬가지로 본 발명에 따른 방사성 할로겐 표식 화합물을 원하는 바에 의해 적당한 pH로 조정된 물 또는 생리 식염수, 또는 링거액 등에 배합시킨 액으로서 조제할 수 있다. 이 경우에 있어서의 본 화합물의 농도는 배합된 본 화합물의 안정성이 얻어지는 농도 이하로 할 필요가 있다. 본 화합물의 투여량은 투여된 약제의 분포를 화상화하기 위해서 충분한 농도이면 특별히 한정할 필요는 없다. 예를 들면, 요오드-123(123I)표식 화합물 및 불소-18(18F)표식 화합물의 경우에는 체중 60kg의 성인 1인당 50~600MBq 정도, 정맥 투여 또는 국소 투여해서 사용할 수 있다. 투여된 약제의 분포는 공지의 방법으로 화상화할 수 있고, 예를 들면 요오드-123(123I)표식 화합물의 경우에는 SPECT 장치, 불소-18(18F)표식 화합물의 경우에는 PET 장치를 이용하여 화상화할 수 있다.
(실시예)
이하, 실시예, 비교예 및 참고예를 기재해서 본 발명을 더욱 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이들의 내용에 한정되는 것은 아니다.
(실시예 I)
하기 실시예에 있어서, 실험에 제공하는 각 화합물의 명칭을 표 1-1과 같이 정의했다.
(표 1-1)
(실시예 I-1) 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조(粗)생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1A, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕(油 浴)에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 1A, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 290㎎(1.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 10mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 413㎎(3.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 1-브로모-3-플루오로프로판 138μL(1.5mmol 상당)를 첨가해서 실온하에서 20.5시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용해서 정제하여 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 302㎎(0.866mmol 상당)을 얻었다(도 1A, 공정 3).
6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 85㎎(0.24mmol 상당)을 디옥산 10mL에 용해하고, 트리에틸아민 2mL를 첨가한 후, 이것에 비스트리부틸주석 185μL(0.36mmol 상당)와 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 20㎎(촉매량)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 24시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류 제거하고, 잔사를 프리파라티브 TLC(용리액: 헥산/초산 에틸=6/4)에 의해 정제했다. 또한, 얻어진 조생성물을 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용하여 정제해서 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 42㎎(74.2μmol 상당)을 얻었다(도 1A, 공정 4).
얻어진 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ8.01-7.93(m,1H), 7.91-7.87(m,2H), 7.75-7.74(m,1H), 7.63-7.58(m,1H), 7.20-7.11(m,1H), 7.00-6.95(m,2H), 4.67(dt,JHF=47.0Hz, J=6.0Hz,2H), 4.15(t,J=6.0Hz,2H), 2.20(dquint, JHF=26.1Hz, J=6.0Hz,2H), 1.64-1.47(m,6H), 1.39-1.31(m,6H), 1.19-1.04(m,6H), 0.91(t,J=7.2Hz,9H)
(실시예 I-2) 2-(4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 의 메탄올 용액(농도: 1㎎/mL) 53μL에 1mol/L 염산 100μL, 11.1MBq의 [125I]요오드화 나트륨(용량으로서 20μL), 10%(W/V) 과산화수소 10μL를 첨가했다. 상기 혼합 액을 실온에서 10분간 정치한 후, 하기 조건의 HPLC에 부여하여 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션(fraction)을 분취했다.
HPLC 조건:
칼럼: Phenomenex Luna C18(상품명, Phenomenex사제, 사이즈: 4.6×150㎜)
이동상: 0.1% 트리플루오로초산/아세토니트릴= 20/80→0/100(17분, 직선 그레이디언트)
유속: 1.0mL/분
검출기: 자외 가시 흡광 광도계(검출 파장: 282㎚) 및 방사선 검출기(형식: STEFFI형, raytest사제)
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C18 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 130㎎}에 통액(通液)하고, 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 에탄올 1mL를 통액해서 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 화합물의 방사능량은 5.5MBq(제조 직후)이었다. 또한, 하기 조건 에 의한 TLC 분석에 의해 측정한 결과, 그 방사 화학적 순도는 96.0%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: RP-18F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 메탄올/물=20/1
검출기: 바이오 이미징 애널라이저, BAS-2500(형식: BAS-2500, 후지 샤신 필름 가부시키가이샤제)
(실시예 I-3) 2-(4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 메탄올 용액(농도: 1㎎/mL) 70μL에 1mol/L 염산 100μL, 260~330MBq의 [123I]요오드화 나트륨(용량으로서 30~60μL), 1mmol/L 요오드화 나트륨 용액 20μL, 10%(W/V) 과산화수소 20μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 가열한 후, 실시예 I-2와 동일한 조건의 HPLC에 부여하여 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취하여 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 얻었다.
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C18 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 130㎎}에 통액하고, 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼 에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 에탄올 1mL를 통액해서 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 112~153MBq이었다. 또한, 실시예 I-2와 동일한 조건으로 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 97.0%였다.
(실시예 I-4) 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시킨 액에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)을 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액에 용해시킨 액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1B, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용 액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 1B, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 1.45g(5.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 50mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 2.07g(15.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 3-브로모-1-프로판올 680μL (7.5mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 17시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 메탄올로부터 재결정하여 6-브로모-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 1.28g(3.67mmol 상당)을 얻었다(도 1B, 공정 3).
6-브로모-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 177㎎(0.5mmol 상당)을 피리딘 10mL에 용해하고, 빙욕하에서 파라톨루엔술포닐클로리드 197㎎(1.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것을 실온에서 16시간 교반한 후, 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층을 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용하여 정제해서 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다 조[1,2-a]피리딘 87㎎(0.17mmol 상당)을 얻었다(도 1B, 공정 4).
얻어진 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ8.26-8.24(m,1H), 7.84-7.80(m,2H), 7.77-7.74(m,2H), 7.74(s,1H), 7.50(d,J=9.7Hz,1H), 7.26-7.23(m,2H), 7.21(dd,J=9.7,2.0Hz,1H), 6.84-6.80(m,2H), 4.26(t,J=6.0Hz,2H), 3.98(t,J=6.0Hz,2H), 2.35(s,3H), 2.13(quint.,J=6.0Hz,2H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 125MHz): δ158.67, 146.53, 144.79, 144.08, 132.77, 129.80, 127.87, 127.81, 127.28, 126.20, 125.43, 117.87, 114.63, 107.40, 106.76, 66.97, 63.08, 28.85, 21.60.
(실시예 I-5) 6-브로모-2-[4'-(3"-[18F]플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘
[18F]불화물 이온 함유 H2 18O(방사능량 4210MBq, 합성 개시시 보정값)를 Sep-Pak Light QMA(상품명, 니혼 워터즈 가부시키가이샤제)에 통액하고, [18F]불화물 이온을 흡착 포집했다. 이어서, 상기 칼럼에 탄산칼륨 수용액(66.7mmol/L, 0.3mL) 및 20㎎(53.2μmol 상당)의 크리프토픽스 222(상품명, 메르크사제)의 아세토니트릴 1.5mL 용액을 통액하여 [18F]불화물 이온을 용출했다.
이것을 헬륨 가스의 통기하에서 100℃로 가열해서 물을 증발시킨 후, 아세토니트릴(0.3mL×2)을 첨가하여 공비시키고, 건조시켰다. 여기에 상기 실시예 I-4에서 합성한 6-브로모-2-[4'-(3"-파라톨루엔술포닐옥시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 5㎎(10.0μmol 상당)의 디메틸포름아미드 1.0mL 용액을 첨가하고, 130℃에서 10분간 가열했다. 반응액을 30℃까지 냉각시킨 후, 반응액에 에테르(3.5mL×3)를 첨가하고, 그 때마다 Sep-Pak Plus Silica(상품명, 니혼 워터즈사제)에 통액했다. 통액 후의 에테르 용액을 헬륨 가스의 통기하에서 60℃로 가온해서 농축하고, 농축액에 메탄올/물/트리에틸아민=800:200:1의 혼합액 2mL를 첨가해서 희석했다.
얻어진 용액을 HPLC{칼럼: Capcell Pak C18 MG(15mmi.d.×250㎜, 가부시키가이샤 시세이도제), 용리액: 메탄올/물/트리에틸아민=700/300/1}를 사용해서 정제를 행했다. 목적물을 함유하는 용리액의 프랙션에 물 100mL를 첨가해서 희석한 후, 이 액을 Sep-Pak Plus C18(상품명, 니혼 워터즈사제)에 통액하고, 목적물을 흡착 포집했다. 이어서, 상기 칼럼을 물 20mL를 통액해서 세정한 후, 에탄올 4mL를 통액해서 용출하여 6-브로모-2-[4'-(3"-[18F]플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 에탄올 용액을 얻었다. 얻어진 방사능량은 769MBq(합성 개시 후 107분)이며, 하기 조건으로 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 95.9%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: Silica Gel 60 F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 클로로포름/메탄올/트리에틸아민=500/10/0.5
검출기: Rita Star(제품명, raytest사제)
(실시예 I-6) 6-브로모-2-[4'-(2"-파라톨루엔술포닐옥시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1C, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부 터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 1C, 공정 2).
에틸렌글리콜 621㎎(10.0mmol 상당)을 염화 메틸렌 100mL에 용해하고, 빙욕하에서 이것에 산화은 3.49g(15.0mmol 상당), 요오드화 칼륨 350㎎(2.1mmol 상당) 및 파라톨루엔술포닐클로리드 2.10g(11.0mmol 상당)을 첨가하고, 0℃에서 2시간 교반했다. 반응 혼합물로부터 불용분을 여과하고, 다시 불용분을 초산 에틸에 의해 세정했다. 여과액과 세정액을 합쳐서 농축하고, 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=1/1)에 의해 정제하여 2-히드록시에틸파라톨루엔술포네이트 643㎎(2.97mmol 상당)을 얻었다(도 1C, 공정 3).
2-히드록시에틸파라톨루엔술포네이트 639㎎(2.95mmol 상당)의 테트라히드로푸란 10mL 용액에 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 388㎎(1.34mmol 상당)과 트리페닐포스핀 780㎎(2.97mmol 상당)을 첨가하고, N,N-디메틸포름아미드 6mL를 더 첨가해서 내용물을 완전히 용해시켰다. 반응 혼합물에 디이소프로필아조디카르복실레이트 0.58mL(2.95mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 17시간 교반한 후, 반응액을 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=65/35)에 의해 정제하고, 목적물을 함유하는 프랙션으로부터 클로로포름 불용 성분을 여과 분별한 후, 또한, 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용해서 정제하여 6- 브로모-2-[4'-(2"-파라톨루엔술포닐옥시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 79.7㎎(164μmol 상당)을 얻었다(도 1C, 공정 4).
얻어진 6-브로모-2-[4'-(2"-파라톨루엔술포닐옥시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸포름아미드, 공명 주파수: 500MHz): δ8.73-8.71(m,1H), 8.19-8.17(m,1H), 7.81-7.77(m,2H), 7.73-7.70(m,2H), 7.41-7.38(m,1H), 7.39-7.36(m,2H), 7.20(dd,J=9.5,1.9Hz), 6.85-6.81(m,2H), 4.34-4.31(m,2H), 4.19-4.15(m,2H).
13C-NMR(용매: 중디메틸포름아미드, 공명 주파수: 125MHz): δ158.32, 145.91, 145.24, 143.84, 133.15, 130.18, 127.83, 127.54, 127.19, 127.15, 126.90, 117.56, 114.86, 108.73, 105.80, 69.28, 65.88, 20.69.
(참고예 I-1) 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 불소화체)의 합성
본 발명에 따른 화합물의 아밀로이드에의 친화성, 지용성 및 변이원성을 조사하기 위한 시료로서 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 비방사성 불소화체의 합성을 행했다.
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로 포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1D, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 1D, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 290㎎(1.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 10mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 413㎎(3.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 1-브로모-3-플루오로프로판 138μL(1.5mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 20.5시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 포화 식 염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용하여 정제해서 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 302㎎(0.866mmol 상당)을 얻었다(도 1D, 공정 3).
얻어진 6-브로모-2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ8.23(dd,J=1.9,0.2Hz,1H), 7.88-7.83(m,2H), 7.51-7.48(m,1H), 8.21(dd,J=9.5,1.9Hz,1H), 6.99-6.95(m,2H), 4.67(dt,2JHF=47.1Hz,J=5.9Hz,2H), 4.15(t,J=5.9Hz,2H), 2.19(dquint,3JHF=25.9Hz,J=5.9Hz,2H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 125MHz): δ159.01, 146.61, 144.07, 127.81, 127.38, 126.15, 125.41, 117.87, 114.78, 107.41, 106.71, 80.71(d,1JCF=164.6Hz), 63.59(d,3JCF=5.3Hz), 30.43(d,2JCF=19.7Hz).
19F-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 470MHz): δ- 222.07(dd,2JHF=47.1Hz, 3JHF=25.9Hz).
(참고예 I-2) 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 불소화체)의 합성
본 발명에 따른 화합물의 아밀로이드에의 친화성, 지용성 및 변이원성을 조사하기 위한 시료로서 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 비방사성 불소화체의 합성을 행했다.
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1E, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 441㎎(2.0mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 449㎎(2.0mmol 상당)을 아세토니트릴 15mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 5시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 10mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 10mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 526㎎(1.56mmol 상당)을 얻었다(도 1E, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 673㎎(2.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 25mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 831㎎(6.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 1-브로모-3-플루오로프로판 275μL(3.0mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 24시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 물과 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름)에 의해 정제하고, 또한, 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용해서 정제하여 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 349㎎(0.881mmol 상당)을 얻었다(도 1E, 공정 3).
얻어진 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ8.37-8.35(m,1H), 7.88-7.84(m,2H), 7.72(s,1H), 7.42-7.39(m,1H), 7.32(dd,J=9.4,1.6Hz,1H), 6.99-6.96(m,2H), 4.67(dt,2JHF=47.0Hz,J=6.0Hz,2H), 4.15(t,J=6.0Hz,2H), 2.20(dquint,3JHF=25.9Hz,J=6.0Hz,2H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 125MHz): δ159.01, 146.23, 144.16, 132.36, 130.28, 127.42, 126.05, 118.31, 114.77, 106.90, 80.72(d,1JCF=164.6Hz), 74.80, 63.57(d,3JCF=5.3Hz), 30.42(d,2JCF=20.2Hz).
19F-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 470MHz): δ-222.09(dd,2JHF=47.0Hz,3JHF=25.9Hz).
(참고예 I-3) 6-브로모-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 불소화체)의 합성
본 발명에 따른 화합물의 아밀로이드에의 친화성, 지용성 및 변이원성을 조사하기 위한 시료로서 6-브로모-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 비방사성 불소화체의 합성을 행했다.
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시 켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1F, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 1F, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 578㎎(2.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 20mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 830㎎(6.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 2-플루오로에틸파라톨루엔술포네이트 510μL(3.0mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 44.5시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 물 및 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여 과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=100/1)에 의해 정제하고, 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용하여 정제한 후, 프리파라티브 TLC(용리액: 클로로포름/메탄올=50:1)에 의해 더 정제해서 6-브로모-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 446㎎(1.33mmol 상당)을 얻었다(도 1F, 공정 3).
얻어진 6-브로모-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ8.23-8.21(m,1H), 7.87-7.84(m,1H), 7.72(s,1H), 7.51-7.47(m,1H), 7.20(dd,J=9.5,1.9Hz,1H), 7.01-6.97(m,2H), 4.84-4.71(m,2H), 4.30-4.21(m,2H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 125MHz): δ158.62, 146.46, 144.06, 127.85, 127.41, 126.58, 125.42, 117.87, 114.91, 107.49, 106.74, 81.86(d,1JCF=170.8Hz), 67.15(d,2JCF=20.2Hz).
19F-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 470MHz): δ- 223.80(dd,2JHF=47.4Hz,3JHF=27.6Hz).
(참고예 I-4) 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 불소화체)의 합성
본 발명에 따른 화합물의 아밀로이드에의 친화성, 지용성 및 변이원성을 조사하기 위한 시료로서 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 비방사성 불소화체의 합성을 행했다.
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1G, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 441㎎(2.0mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 449㎎(2.0mmol 상당)을 아세토니트릴 15mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 5시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 10mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 10mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 526㎎(1.56mmol 상당)을 얻었다(도 1G, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 368㎎(1.1mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 15mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 453㎎(3.3mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 2-플루오로에틸파라톨루엔술포네이트 280μL(1.6mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 22시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 물 및 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=1/1)에 의해 정제하고, 또한, 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용하여 정제해서 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 222㎎(0.580mmol 상당)을 얻었다(도 1G, 공정 3).
얻어진 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ8.35-8.33(m,1H), 7.88-7.84(m,2H), 7.70(s,1H), 7.39(d,J=9.4Hz,1H), 7.31(dd,J=9.4,1.8Hz,1H), 7.01-6.97(m,2H), 4.84-4.71(m,2H), 4.30-4.22(m,2H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 125MHz): δ158.62, 146.08, 144.16, 132.38, 130.30, 127.44, 126.52, 118.30, 114.91, 106.99, 81.86(d,2JCF=170.8Hz), 74.82, 67.15(d,3JCF=20.6Hz).
19F-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 470MHz): δ-223.74(dd,2JHF=47.4Hz,3JHF=27.7Hz).
(참고예 I-5) 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘(비방사성 불소화체)의 합성
본 발명에 따른 화합물의 아밀로이드에의 친화성, 지용성 및 변이원성을 조사하기 위한 시료로서 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘의 비방사성 불소화체의 합성을 행했다.
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)을 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액에 용해시킨 액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에 틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1H, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 646㎎(3.0mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리미딘 668㎎(3.0mmol 상당)을 아세토니트릴 20mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 8시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 10mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 15mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 3분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘 737㎎(2.19mmol 상당)을 얻었다(도 1H, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘 339㎎(1.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 20mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 414㎎(3.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 1-브로모-3-플루오로프로판 138μL(1.5mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 22시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 N,N-디메틸포름아미드로부터 재결정하여 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시) 페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘 236㎎(0.594mmol 상당)을 얻었다(도 1H, 공정 3).
얻어진 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리미딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 디메틸술폭시드)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 500MHz): δ9.27(d,J=2.3Hz,1H), 8.55(d,J=2.3Hz,1H), 8.15(s,1H), 7.94-7.90(m,2H), 7.06-7.02(m,2H), 4.62(dt,2JHF=47.2Hz,J=6.1,2H), 4.14(t,J=6.1Hz,2H), 2.13(dquint,3JHF=25.5Hz, J=6.1Hz,2H).
13C-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 125MHz): δ159.16, 154.12, 146.54, 146.26, 139.00, 127.60, 126.06, 115.21, 106.52, 81.15(d,1JCF=161.7Hz), 74.43, 64.07(d,3JCF=5.8Hz), 30.13(d,2JCF=19.7Hz).
19F-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 470MHz): δ-220.13(tt,2JHF=47.2Hz,3JHF=25.5Hz).
(참고예 I-6) [125I]-IMPY의 합성
아밀로이드 결합성에 관한 검토에 있어서의 비교예에 사용하기 위해서 하기의 공정에 따라서 [125I]-IMPY를 합성했다.
문헌(Zhi-Ping Zhuang et al., J.Med.Chem, 2003, 46, p.237-243)에 기재된 방법에 따라 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 합성하고, 메탄올에 용해했다(농도: 1㎎/mL). 상기 용액 53μL에 1mol/L 염산 75μL, 13.5MBq의 [125I]요오드화 나트륨 20μL, 10%(W/V) 과산화수소 10μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 실시예 I-2와 동일한 조건의 HPLC에 부여하여 [125I]-IMPY 프랙션을 분취했다.
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C18 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 130㎎}에 통액하고, [125I]-IMPY를 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 에탄올 1mL를 통액해서 [125I]-IMPY를 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 2.6MBq이었다. 또한, 실시예 I-2와 동일한 조건으로 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 98.0%였다.
(참고예 I-7) [123I]-IMPY의 합성
logPoctanol 및 뇌집적성에 관한 검토에 있어서의 비교예에 사용하기 위해서 하기 공정에 따라 [123I]-IMPY를 합성했다.
문헌(Zhi-Ping Zhuang et al., J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243)에 기재된 방법에 따라 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 합성하고, 메탄올에 용해했다(농도: 1㎎/mL). 상기 용액 53μL에 1mol/L 염산 100μL, 190~240MBq의 [123I]요오드화 나트륨 20~50μL, 1mmol/L 요오드화 나트륨 용액 10μL, 10%(W/V) 과산화수소 10μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 실시예 I-2와 동일한 조건의 HPLC에 부여하여 [123I]-IMPY 프랙션을 분취했다.
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C18 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 130㎎}에 통액하고, [123I]-IMPY를 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 에탄올 1mL를 통액해서 [123I]-IMPY를 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 47~56MBq이었다. 또한, 실시예 I-2와 동일한 조건으로 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 98.0%였다.
(참고예 I-8) 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
logPHPLC의 산출에 사용하는 계산식을 작성하는 목적으로 하기 공정에 따라 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 합성했다.
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)을 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액에 용해시킨 액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1I, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 1I, 공정 2).
6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 138㎎(0.476mmol 상당)을 디옥산 20mL에 용해하고, 트리에틸아민 2mL를 첨가한 후, 비스트리부틸주석 360μL(0.713mmol 상당)와 촉매량의 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 20㎎을 첨가했 다. 반응 혼합물을 90℃에서 22시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류 제거하고, 잔사를 프리파라티브 TLC(용리액: 헥산/초산 에틸=1/4)에 의해 정제했다. 또한, 얻어진 조생성물을 리사이클 분취 HPLC{HPLC 장치: LC-908(제품명, 니혼 분세키 코교사제), 칼럼: JAIGEL 2H(제품명, 니혼 분세키 코교사제)를 2개 연결, 이동상: 클로로포름}를 이용하여 정제해서 6-트리부틸스타닐-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 47㎎(94.9μmol 상당)을 얻었다(도 1I, 공정 3).
6-트리부틸스타닐-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘의 메탄올 용액(농도: 1㎎/mL) 53μL에 1mol/L 염산 75μL, 136MBq의 [125I]요오드화 나트륨 40μL, 10%(W/V) 과산화수소 10μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 실시예 I-2와 동일한 조건의 HPLC에 부여하여 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취했다(도 1I, 공정 4).
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C18 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 130㎎}에 통액하고, 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 에탄올 1mL를 통액해서 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 37.5MBq이었다. 또한, 실시예 I-2와 동일한 조건으로 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 96.5%였다.
(참고예 I-9) 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼합액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 1J, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 441㎎(2.0mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 449㎎(2.0mmol 상당)을 아세토니트릴 15mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 5시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 10mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 10mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 526㎎(1.56mmol 상당)을 얻었다(도 1J, 공정 2).
얻어진 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 디메틸술폭시드)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 500MHz): δ8.86-8.84(m,1H), 8.14(s,1H), 7.78-7.74(m,2H), 7.40-7.35(m,2H), 6.86-6.82(m,2H).
13C-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 125MHz): δ158.08, 145.87, 143.87, 132.48, 131.72, 127.67, 124.99, 118.14, 116.14, 108.02, 75.85.
(실시예 I-7 및 비교예 I-1) 아밀로이드 결합성의 측정
본 발명 화합물의 아밀로이드 친화성을 이하의 in vitro 결합 시험에 의해 평가했다.
(1) Aβ1-40(펩티드 켄큐쇼)을 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕함으로써 1㎎/mL의 응집된 Aβ(이하, 본 실시예에 있어서 아밀로이드로 함) 현탁액(이하, 본 실시예에 있어서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 상기 아밀로이드 현탁액에 대해서 문헌{Naiki,H.등, Laboratory Investigation.74, p.374-383(1996)}에 기재된 방법에 따라 티오플라빈 T(Fluka사제)를 사용한 형광 광도 측정에 의한 정성 실험을 행하여 (1)에서 얻은 응집화 Aβ가 아밀로이드인 것을 확인했다(측정 조건: 여기 파장 446㎚, 형광 파장 490㎚).
(3) 상기 실시예 I-2의 방법으로 합성한 화합물 I-6의 에탄올 용액(방사능 농도 37MBq/mL)을 조제하고, 이것을 0.1% 소혈청 알부민을 함유하는 인산 완충액(pH7.4)에 의해 희석해서 2-[4'-(3"-플루오로프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 총량으로서 2nmol/L 상당의 용액을 조제했다.
(4) 96 구멍 마이크로플레이트의 각 웰에 상기 (3)에서 조제한 용액 50μL (최종 농도 400pM), 아밀로이드 현탁액을 0.1% 소혈청 알부민 함유 인산 완충액(pH7.4)에 용해한 액(아밀로이드의 농도는 시료 용액 중의 아밀로이드 농도에 따라 조정) 50μL를 첨가한 후, 동 완충액 150μL를 첨가하여 아밀로이드의 최종 농도가 2.5, 12.5, 25, 62.5, 125, 250, 625, 1000nmol/L인 액을 조제했다.
(5) 상기 마이크로플레이트를 22℃에서 3시간, 일정 속도(400회전/분)로 진탕한 후, 각 웰의 혼합액을 유리 섬유 필터(미리포아사, MulutiscreenTM-FC)에 의해 여과함으로써 아밀로이드에 결합된 화합물 I-6 및 유리의 화합물 I-6을 분리했다.
(6) 혼합액을 여과한 유리 섬유 필터에 대해서 0.1% 소혈청 알부민을 함유하는 인산 완충액에 의해 세정(0.5mL×5회)한 후, 유리 섬유 필터의 방사능을 오토웰 감마 시스템(Aloka사, ARC-301B)에 의해 측정했다.
(7) (6)의 측정 결과로부터 화합물 I-6의 아밀로이드에의 결합량과 첨가한 아밀로이드량의 관계를 평가했다. 비특이적 결합에 대해서는 상기 (4)에 있어서 화합물 I-2(비RI 표식 화합물)를 100nM(최종 농도)가 되도록 첨가한 샘플로부터 구했다(실시예 I-7).
(8) 또한, 상기 참고예 I-6에서 합성한 [125I]-IMPY에 대해서 상기 (2)~(6)과 동일한 조작을 행하여 대상 데이터를 얻었다(비교예 I-1).
시료 용액 중의 아밀로이드 농도와, 상기 (6)에서 측정한 유리 섬유 필터 상의 방사능 카운트의 관계를 도 1K에 나타낸다. 유리 섬유 필터 상의 방사능이 아밀 로이드 농도(첨가량)에 비례해서 증가되어 있었다(실시예 I-7). 본 실험에 있어서의 조건에서는 아밀로이드 및 그것에 결합된 화합물은 유리 섬유로 유지된다. 따라서, 유리 섬유 상의 방사능 카운트는 아밀로이드에 결합된 화합물량을 반영한 값이며, 그 방사능 카운트를 아밀로이드 농도에 대해서 플롯한 그래프의 기울기는 화합물의 아밀로이드 결합성의 강도를 나타내는 지표가 될 수 있는 값이라고 할 수 있다. 화합물 I-6에 있어서의 유리 섬유 필터 상의 방사능 카운트의 값이 아밀로이드 농도의 증가에 따라 증가되어 있었다는 점에서 화합물 I-6은 아밀로이드에 결합되는 성질을 갖는 화합물인 것이 시사되었다. 또한, 그 직선의 기울기는 [125I]-IMPY에 있어서의 동일한 플롯에 있어서의 기울기와 동등 이상이며, 화합물 I-6의 아밀로이드 결합성의 강도는 아밀로이드에의 강한 친화성을 갖는 것이 알려져 있는 [125I]-IMPY와 동등 이상인 것이 시사되었다.
이상의 결과로부터 화합물 I-6은 높은 아밀로이드 결합성을 갖는 것이 시사되었다.
(실시예 I-8~I-12, 비교예 I-2~I-6) 아밀로이드 친화성의 측정
본 발명 화합물의 아밀로이드 친화성을 이하의 in vitro 결합 시험에 의해 평가했다.
(1) Aβ1-40(펩티드 켄큐쇼)을 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 62~72시간 진탕시켜 1㎎/mL의 응집 Aβ 현탁액(이하, 본 실시예에서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 상기 아밀로이드 현탁액에 대해서 문헌{Naiki,H.등, Laboratory Investigation.74, p.374-383(1996)}에 기재된 방법에 따라 티오플라빈 T(Fluka사제)를 사용한 형광 광도 측정에 의한 정성 실험을 행하여 (1)에서 얻은 응집화 Aβ가 아밀로이드인 것을 확인했다(측정 조건: 여기 파장 446㎚, 형광 파장 490㎚).
(3) 문헌{Wang,Y.등, J.Labelled Compounds Radiopharmaceut.44, S239(2001)}에 기재된 방법에 따라 2-(4'-아미노페닐)벤조티아졸을 표식 전구체로 해서 [125I]2-(3'-요오드-4'-아미노페닐)벤조티아졸(이하, [125I]3'-I-BTA-0)을 조제하고, 에탄올에 용해했다. 콩고레드, 티오플라빈 T 및 6-메틸-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]벤조티아졸(이하, 6-Me-BTA-2)은 시판의 시약을 그대로 칭량해서 사용했다.
(4) 2-(3'-요오드-4'-아미노페닐)벤조티아졸(이하, 3'-I-BTA-0) 및 IMPY를 각각 문헌{Wang,Y.등, J.Labelled Compounds Radiopharmaceut.44, S239(2001)} 및 문헌{Zhuang,Z.P.등, J.Med.Chem.46, 237(2003)}에 기재된 방법에 따라서 합성했다.
(5) [125I]3'-I-BTA-0, 각 평가 화합물 및 아밀로이드의 최종 농도가 표 1-2에 기재된 농도가 되도록 0.1% 소혈청 알부민 함유 인산 완충액(pH7.4)에 용해한 시료를 조제하고, 96 구멍 마이크로플레이트의 각 웰(용량 약 0.3mL)에 충전했다.
(표 1-2)
(6) 시료 용액을 충전한 마이크로플레이트를 22℃에서 3시간, 일정 속도(400회전/분)로 진탕한 후, 각 시료 용액을 유리 섬유 필터(상품명: MulutiscreenTM-FC, 미리포아사제)에 의해 여과함으로써 아밀로이드에 결합된 [125I]3'-I-BTA-0과 결합되어 있지 않은 [125I]3'-I-BTA-0을 분리했다.
(7) 각 시료 용액의 여과에 사용한 유리 섬유 필터를 0.1% 소혈청 알부민 함유 인산 완충액(pH7.4)에 의해 세정(0.5mL×5회)하고, 유리 섬유 필터의 방사능을 오토웰 감마 시스템(Aloka사제, 형식: ARC-301B)에 의해 측정하고, 각 시료 용액의 방사능량으로서 저해율의 계산에 사용했다(이하, 각 평가 화합물 농도가 0인 시료에 있어서의 방사능량을 A, 평가 화합물 농도가 0.001nmol/L 이상인 시료에 있어서의 방사능량을 B로 함).
(8) 별도로, 6-Me-BTA-2를 15μmol/L, [125I]3'-I-BTA-0을 400pmol/L, Aβ1-40을 1μmol/L 배합시킨 액을 조제하고, 상기 (6) 및 (7)과 동일한 조작을 행하여 방 사능량을 측정했다. 구한 방사능량을 백그라운드 방사능량으로 하여 저해율의 계산에 사용했다(이하, BG로 함).
(9) 상기 (7) 및 (8)에서 측정한 방사능량을 사용하고, 하기 식(1-1):
로부터 저해율을 구했다. 얻어진 저해율을 프로빗 변환한 값을 평가 화합물의 농도의 대수에 대해서 플롯한 그래프를 작성하고, 최소 제곱법에 의해 근사 직선을 작성했다. 이 직선을 사용하여 방사능량이 각 평가 화합물 무첨가 시료에 있어서의 값의 반이 되는 각 평가 화합물 농도를 구하고, 각 화합물의 50% 저해 농도(이하, IC50%값이라고 함)로 했다. 이 값을 지표로서 사용하여 각 평가 화합물의 아밀로이드(응집화 Aβ1-40) 친화성을 평가했다.
각 평가 화합물에 있어서의 IC50%값을 표 1-3에 나타낸다. 화합물 I-1~I-5는 모두 100 미만의 IC50%값을 나타내고, 콩고레드 및 티오플라빈 T보다 높은 아밀로이드(응집화 Aβ1-40) 친화성을 갖고 있었다. 이 결과로부터 화합물 I-1~I-5는 양호한 아밀로이드(응집화 Aβ1-40) 친화성을 갖는 화합물인 것이 나타내어졌다. 특히, 화합물 I-1~I-4에 있어서는 3'-I-BTA-0 및 6-Me-BTA-2보다 높고, IMPY와 동등한 아밀로이드(응집화 Aβ1-40) 친화성을 갖고 있었다.
(표 1-3)
(실시예 I-13~I-14, 비교예 I-7) 옥탄올 추출법을 사용한 분배 계수의 측정
화합물의 혈액뇌관문(이하, BBB라고 함) 투과성의 지표로서 일반적으로 알려져 있는 옥탄올 추출법을 사용한 분배 계수(이하, logPoctanol이라고 함)를 측정했다.
옥탄올 2mL에 화합물 I-7(실시예 I-13) 및 화합물 I-8(실시예 I-14)을 함유하는 용액 10μL 및 10mmol/L 인산 완충액(pH7.4) 2mL를 첨가하고, 30초간 교반했다. 이 혼합액을 저속 원심기에 의해 원심 분리(2000회전/분×60분간)한 후, 옥탄올층 및 물층을 각 1mL 분취하고, 각각의 방사능을 오토웰 감마 시스템(Aloka사제, 형식: ARC-301B)에 의해 계측했다. 얻어진 방사능을 사용하여 식(1-2)로부터 logPoctanol값을 산출했다.
결과를 표 1-4에 나타낸다. logPoctanol의 값은 화합물 I-7 및 화합물 I-8 중 어느 것에 있어서나 1~3 사이의 값을 나타내고 있었다. BBB를 투과할 수 있는 화합물에 있어서는 logPoctanol값은 1~3 사이의 값인 것이 알려져 있다(Douglas D.Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038). 이상의 결과로부터 양 화합물은 IMPY와 마찬가지로 BBB 투과성을 갖는 것으로 시사되었다.
(표 1-4)
(실시예 I-15~I-19, 비교예 I-8) HPLC를 사용한 분배 계수의 측정
HPLC에 의한 분배 계수(이하, logPHPLC라고 함)를 하기 방법에 의해 측정했다. 이 logPHPLC는 화합물의 BBB 투과성의 지표로서 일반적으로 알려져 있는 logPoctanol과, pH7.2~7.4에 있어서 동등한 값을 갖는 것이 알려져 있는 값이다(Franco Lombardo et al., J.Med.Chem., (2000), 43, p.2922-2927).
우선, 표 1-5에 기재된 각 평가 화합물을 농도 1㎎/mL가 되도록 10% 디메틸술폭시드 함유 메탄올에 용해하여 시료 용액을 조제했다. 이 시료 용액 1μL에 대해서 하기 조건에 의한 HPLC 분석을 행하여 용매의 용출 시간(t0) 및 화합물의 용출 시간(tR)을 구했다.
(표 1-5)
HPLC 조건:
칼럼: Prodigy ODS(3)(제품명, phenomenex사제, 사이즈: 4.6×250㎜)
이동상: 50mM 트리에틸아민인산(pH7.2)/아세토니트릴=40/60 혼액
유속: 0.7mL/분
검출기: 자외 가시 흡광 광도계(검출 파장: 282㎚)
얻어진 t0 및 tR을 사용해서 하기 계산식 (1-3)으로부터 각 평가 화합물의 리텐션 팩터(이하, K'HPLC값이라고 함)를 구했다.
별도로, 상기 참고예 I-8에서 합성한 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 용액(방사능 농도 37MBq/mL) 및 화합물 I-6 용액(방사능 농도 37MBq/mL)을 각각 준비한 옥탄올 2mL에 10μL씩 첨가하고, 각각의 용액에 10mmol/L 인산 완충액(pH7.4) 2mL를 더 첨가했다. 각 액을 30초간 교반한 후, 2000회전/분의 조건으로 60분간 원심 분리를 행했다. 옥탄올상 및 수상(水相)을 각 1mL 분취하고, 방사능을 오토웰 감마 시스템(Aloka사, 형식: ARC-301B)에 의해 계측했다. 얻어진 방사능량으로부터 상기 식(1-2)를 사용해서 logPoctanol값을 산출했다.
또한, 화합물 I-2 및 참고예 I-9에서 조제한 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 용액 각각에 대해서 상기와 동일한 HPLC 분석을 행하여 각각의 화합물에 있어서의 K'HPLC값을 구했다.
화합물 I-2 및 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘에 있어서의 log10K'HPLC에 대해서 화합물 I-6 및 2-(4'-히드록시페닐)-6-[125I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘에 있어서의 logPoctanol값을 플롯한 그래프를 작성하여 직선의 기울기와 y절편을 어림잡았다. 이 값을 사용하여 logPoctanol값과 logPHPLC값이 pH7.2~7.4에 있어서 동일하다고 가정하고, 하기 식(1-4)를 구했다.
각 평가 화합물에 대해서 구한 K'HPLC를 사용하여 상기 계산식 (1-4)에 따라 각 평가 화합물에 있어서의 logPHPLC값을 구했다.
결과를 표 1-6에 나타낸다. 이 표에 나타내는 바와 같이, logPHPLC값은 화합물 I-1~I-5 중 어느 것에 있어서나 1~3 사이의 값을 나타내고 있었다. 상술한 바와 같이 BBB를 투과할 수 있는 화합물에 있어서는 logPoctanol값은 1~3 사이의 값인 것이 보고되어 있다(Douglas D.Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030- 1038). 또한, 상술한 바와 같이 logPoctanol과 logPHPLC는 pH7.2~7.4에 있어서 동등한 값을 갖는 것이 알려져 있다(Franco Lombardo et al., J.Med.Chem., (2000), 43, p.2922-2927). 이상의 결과로부터 화합물 I-1~I-5는 BBB를 투과하는 성질을 갖는 것이 시사되었다.
(표 1-6)
(실시예 I-20~I-21, 비교예 I-9) 뇌내 이행성 및 클리어런스의 측정(그 1)
화합물 I-7(실시예 I-20) 및 8(실시예 I-21)을 사용하여 웅성의 Wister계 쥐(7주령)에 있어서의 뇌에의 방사능 집적의 경시적 변화를 측정했다.
화합물 I-7(실시예 I-20)을 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 액, 화합물 I-8(실시예 I-21)을 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 액 및 상기 참고예 I-7에서 조제한 [123I]-IMPY(비교예 I-9)를 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 액(방사능 농도 20~30MBq/mL) 각 0.05mL를 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 상기 쥐에 투여했다. 투여 후 2분, 5분, 30분, 60분에 복부 대동맥으로부터 탈혈된 후에 뇌를 채취하고, 뇌의 방사능을 오토웰 감마 시스템(형식: ARC-301B, Aloka사제)을 이용하여 계측하고(이하, 본 실시예에서 A로 함), 또한, 뇌의 질량을 측정했다. 또한, 투여액을 1000배 희석한 용액 0.05mL에 대한 방사능량을 마찬가지로 측정했다(이하, 본 실시예에서 B로 함). 이들의 측정 결과를 사용하여 하기 식(1-5)로부터 각 해부 시간점에 있어서의 뇌에의 단위 중량당 방사능 분포율(%ID/g)을 산출했다.
각 시간점에 있어서 실시예 I-20 및 비교예 I-9에 대해서는 3마리, 실시예 I-21에 대해서는 2마리의 동물을 이용하여 실험을 행했다.
결과를 표 1-7에 나타낸다. 표 1-7에 나타내는 바와 같이, 화합물 I-7 및 화합물 I-8은 투여 후 2분점에 있어서 [123I]-IMPY와 동등 이상의 집적이 확인되고, 그 후 60분에 걸쳐서 신속하게 소실되는 경향을 나타내고 있었다. 이 결과로부터 화합물 I-7 및 화합물 I-8은 [123I]-IMPY와 마찬가지로 높은 뇌이행성 및 신속한 뇌로부터의 클리어런스를 갖는 것이 시사되었다.
(표 1-7)
(실시예 I-22) 뇌내 아밀로이드의 묘출의 확인
본 발명에 따른 화합물이 뇌내 아밀로이드를 묘출할 수 있는지를 평가하기 위해서 하기의 실험을 행했다.
(1) Aβ1-40(펩티드 켄큐쇼제)을 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕시켜 1㎎/mL의 응집 Aβ 현탁액(이하, 본 실시예에서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 웅성 Wistar계 쥐(7주령)의 편측 편도핵(扁桃核)에 상기 아밀로이드 현탁액을 25μL(25㎍ 상당) 주입하고, 대조로서 반대측의 편도핵에 인산 완충 생리 식염액(pH7.4)을 25μL 주입했다. 아밀로이드 현탁액 및 인산 완충 생리 식염액(pH7.4) 주입 1일 후의 쥐를 검체로 했다.
(3) 화합물 I-7을 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해하고, 시료용액으로 했다(방사능 농도 32MBq/mL). 이 용액을 상기 쥐에 미정맥으로부터 투여했다(투여량: 0.5mL, 투여한 방사능: 16MBq 상당).
(4) 투여 60분 후에 뇌를 적출하여 마이크로톰(형식: CM3050S, LEICA사제) 을 이용하여 두께 10㎛의 뇌절편을 제작했다. 상기 뇌절편을 이미징 플레이트 상에서 20시간 노광시킨 후, 바이오 이미징 애널라이저(형식: BAS-2500, 후지 샤신 필름 가부시키가이샤제)를 이용하여 화상 해석을 행했다.
(5) 바이오 이미징 애널라이저를 사용한 상기 화상 해석 종료 후, 티오플라빈 T에 의한 병리 염색을 행하고, 형광 현미경(가부시키가이샤 니콘제, 형식: TE2000-U형, 여기 파장: 400~440㎚, 검출 파장: 470㎚)을 사용한 이미징을 행하여 상기 절편 상에 아밀로이드가 침착되어 있는 것을 확인했다(도 1L의 b).
아밀로이드 뇌내 주입 쥐의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 티오플라빈 T 염색의 이미지를 도 1L에 나타낸다. 이 도면에 나타내는 바와 같이, 아밀로이드 현탁액을 주입한 측의 편도핵에 있어서 명백한 방사능 집적이 확인되었다. 또한, 방사능 집적 부위에 있어서의 티오플라빈 T 염색의 결과로부터 상기 부위에 있어서 아밀로이드가 존재하고 있는 것이 확인되었다. 한편, 생리 식염액을 주입한 측의 편도핵에 있어서는 다른 부위와 비교한 유의한 방사능 집적은 확인되지 않았다.
이 결과로부터 화합물 I-7은 뇌내 아밀로이드에 집적되는 성능을 갖고, 뇌내 아밀로이드의 묘출 능력을 갖는 것이 시사되었다.
(실시예 I-23~I-26) 복귀 돌연변이 시험
화합물 I-1, 화합물 I-2, 화합물 I-4 및 화합물 I-5의 유전자 돌연변이 유발성을 조사하기 위해서 살모넬라균(Salmonella typhimurium)의 TA98 및 TA100을 사용하는 복귀 돌연변이 시험(이하, Ames시험이라고 함)을 행했다.
시험은 S9mix 무첨가와 S9mix 첨가의 경우에 대해서 실시했다. 음성 대상은 디메틸술포옥사이드를 사용하고, 양성 대상은 S9mix 무첨가인 경우에는 2-(2-푸릴)-3-(5-니트로-2-푸릴)아크릴아미드를 사용하고, S9mix 첨가인 경우에는 2-아미노안트라센을 사용했다.
시험용 플레이트에의 각 시료의 첨가량은 화합물 I-1 및 화합물 I-5에 대해서는 1250㎍/플레이트를 최고 용량으로 해서 7용량(공비 4)으로 하고, 화합물 I-2 및 화합물 I-4에 대해서는 5000㎍/플레이트를 최고 용량으로 해서 7용량(공비 3)으로 했다. 피검 물질과 시험 균주(TA98 또는 TA100) 또는 피검 물질과 S9mix와 시험 균주를 혼합한 후, 연한천을 이용하여 시험용 플레이트 상의 배지에 중층하고, 37℃에서 48시간 배양했다. 판정은 배양 후의 플레이트에 있어서의 복귀 돌연변이 콜로니수를 카운팅함으로써 행하고, 복귀 돌연변이 콜로니수가 음성 대조의 2배 이상의 값을 나타내고, 또한, 농도에 의존해서 증가한 경우를 양성으로 했다.
결과를 표 1-8에 나타낸다. 화합물 I-1, 화합물 I-2, 화합물 I-4 및 화합물 I-5 처리군에 있어서의 복귀 돌연변이 콜로니수는 어느 균주 모두 S9mix 첨가의 유무 및 피검 물질 첨가량에 관계없이 음성 대조 물질 처리군의 2배 미만이었다. 이상의 결과로부터 화합물 I-1, 화합물 I-2, 화합물 I-4 및 화합물 I-5는 Ames 음성으로 판정되어 모두 유전자 돌연변이 유발성은 없는 것으로 판단되었다.
(표 1-8)
(실시예 I-27) 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
참고예 I-3에서 얻어진 6-브로모-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다 조[1,2-a]피리딘 88㎎(0.260mmol 상당)을 디옥산 10.0mL에 용해하고, 트리에틸아민 2.0mL를 첨가한 후, 비스트리부틸주석 0.20mL(0.39mmol 상당)와 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 20.1㎎(촉매량)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 9시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류 제거하고, 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=4/1)에 의해 정제를 행하여 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 71.6㎎(0.131mmol 상당)을 얻었다(도 1M, 공정 1).
얻어진 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ7.97(s,1H), 7.90(d,J=8.7Hz,2H), 7.58(d,J=8.7Hz,1H), 7.14(d,J=8.7Hz,1H), 6.99(d,J=8.7Hz,2H), 4.77(dt,J=47.2,4.1Hz,2H), 3.99(dt,J=28.0,4.1Hz,2H), 1.59-1.53(m,6H), 1.39-1.32(m,6H), 1.13-1.10(m,6H), 0.92(t,J=7.3Hz,9H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수 500MHz): δ158.3, 145.6, 144.9, 131.2, 130.0, 127.4, 121.9, 116.9, 114.9, 106.4, 82.6, 81.3, 67.2, 29.0, 27.3, 13.6, 9.8.
(실시예 I-28) 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 메탄올 용액(농도: 1㎎/mL) 35μL에 1mol/L 염산 100μL, 614MBq의 [123I]요오드화 나트륨(용량으로서 100μL), 1mmol/L 요오드화 나트륨 용액 10μL, 10%(W/V) 과산화수소 20μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 가열한 후, 실시예 I-2와 동일한 조건의 HPLC에 부여하여 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취하여 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 얻었다.
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C8 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 130㎎}에 통액하고, 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 에탄올 1mL를 통액해서 2-[4'-(2"-플루오로에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 64MBq이었다. 또한, 하기 조건으로 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 97.0%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: Silica Gel 60 F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 클로로포름/메탄올/트리에틸아민=100/1/2
검출기: Rita Star(제품명, raytest사제)
(실시예 I-29, 비교예 I-10) 옥탄올 추출법을 사용한 분배 계수의 측정
실시예 I-28에서 조제한 화합물 I-9의 디에틸에테르 용액(실시예 I-29) 및 [123I]-IMPY의 디에틸에테르 용액(비교예 I-10)을 각각 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 의해 희석하고, 방사능 농도 20~30MBq/mL가 되도록 조정했다. 조제한 시료 용액 각 10μL를 각각 옥탄올 2mL에 첨가하고, 10mmol/L 인산 완충액(pH7.4) 2mL를 더 첨가하여 30초간 교반했다. 이 혼합액을 저속 원심기에 의해 원심 분리(2000회전/분×60분간)한 후, 옥탄올층 및 물층을 각 1mL 분취하고, 각각의 방사능 카운트를 오토웰 감마 시스템(형식: ARC-301B, Aloka사제)에 의해 계측했다. 얻어진 방사능 카운트를 사용하고, 식(1-6)을 사용해서 logPoctanol값을 산출했다.
결과를 표 1-9에 나타낸다. logPoctanol의 값은 화합물 I-9에 있어서도 1~3 사이의 값을 나타내고 있었다. BBB를 투과할 수 있는 화합물에 있어서는 logPoctanol값은 1~3 사이의 값인 것이 알려져 있다{Douglas D.Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038}. 이상의 결과로부터 화합물 I-9는 IMPY와 마찬가지로 BBB 투과성을 갖는 것으로 시사되었다.
(표 1-9)
(실시예 I-30, 비교예 I-11) 뇌내 이행성 및 클리어런스의 측정(그 2)
화합물 I-9를 사용하여 웅성의 Wistar계 쥐(7주령)에 있어서의 뇌에의 방사능 집적의 경시적 변화를 측정했다.
화합물 I-9(실시예 I-30) 및 상기 참고예에서 조제한 [123I]-IMPY(비교예 I-11)를 각각 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 액(방사능 농도 20~31MBq/mL)을 조제했다. 이들 액 각각 0.05mL를 각각의 Wistar계 쥐(7주령)에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다. 투여 후 2분, 5분, 30분, 60분에 복부 대동맥으로부터 탈혈된 후에 뇌를 채취하여 뇌의 질량을 측정하고, 또한, 뇌의 방사능을 싱글 채널 애널라이저(검출기 형번: SP-20, 오요코켄코교 가부시키가이샤제)를 이용하여 계측했다(이하, 본 실시예에서 A로 함). 또한, 나머지 전신의 방사능량을 마찬가지로 측정했다(이하, 본 실시예에서 B로 함). 이들의 측정 결과를 사용하여 하기 식(1-7)로부터 각 해부 시간점에 있어서의 뇌에의 단위 질량당 방사능 분포율(%ID/g)을 산출했다.
또한, 실험은 각 시간점에 있어서 3마리의 동물을 사용해서 행했다.
결과를 표 1-10에 나타낸다. 표 1-10에 나타내는 바와 같이, 화합물 I-9는 [123I]-IMPY와 마찬가지로, 투여 후 2분점에 있어서 높은 방사능 집적이 확인되고, 그 후 60분에 걸쳐서 신속하게 소실되는 경향을 나타내고 있었다. 이 결과로부터 화합물 I-9는 [123I]-IMPY와 마찬가지로, 높은 뇌이행성 및 신속한 뇌로부터의 클리어런스를 갖는 것이 시사되었다.
(표 1-10)
(실시예 I-31) 뇌내 아밀로이드 묘출의 확인
(1) Aβ1-42(와코쥰야쿠코교)를 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕시켜 1㎎/mL의 응집 Aβ 현탁액(이하, 본 실시예에서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 웅성 Wistar계 쥐(7주령)의 편측 편도핵에 상기 아밀로이드 현탁액을 2.5μL(25㎍ 상당) 주입하고, 대조로서 반대측의 편도핵에 인산 완충 생리 식염액(pH7.4)을 2.5μL 주입했다. 아밀로이드 현탁액 및 인산 완충 생리 식염액(pH7.4) 주입 1일 후의 쥐를 검체로 했다.
(3) 화합물 I-9를 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 시료 용액(시료 용액 중의 방사능 농도 21MBq/mL, 실시예 I-31)을 조제했다. 이 용액을 상 기 쥐에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다(투여량: 0.5mL, 투여한 방사능: 11~15MBq 상당).
(4) 투여 60분 후에 뇌를 적출하여 마이크로톰(형식: CM3050S, LEICA사제) 을 이용하여 두께 10㎛의 뇌절편을 제작했다. 상기 뇌절편을 이미징 플레이트 상에서 20시간 노광시킨 후, 바이오 이미징 애널라이저(형식: BAS-2500, 후지 샤신 필름 가부시키가이샤제)를 이용하여 화상 해석을 행했다.
(5) 바이오 이미징 애널라이저를 사용한 상기 화상 해석의 종료 후, 티오플라빈 T에 의한 병리 염색을 행하고, 형광 현미경(가부시키가이샤 니콘제, 형식: TE2000-U형, 여기 파장: 400~440㎚, 검출 파장: 470㎚)을 사용한 이미징을 행하여 상기 절편 상에 아밀로이드가 침착되어 있는 것을 확인했다(도 1N).
아밀로이드 뇌내 주입 쥐의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 티오플라빈 T 염색의 이미지를 도 1N에 나타낸다. 이 도면에 나타내는 바와 같이, 화합물 I-9를 투여한 검체에 있어서도 아밀로이드 현탁액을 주입한 측의 편도핵에 있어서 명백한 방사능 집적이 확인되었다. 한편, 생리 식염액을 주입한 측의 편도핵에 있어서는 다른 부위와 비교한 유의한 방사능 집적은 확인되지 않았다. 또한, 이 오토라디오그램 상에 있어서 아밀로이드 주입 부위 이외에 있어서의 방사능 집적은 거의 보여지지 않았다. 또한, 티오플라빈 T 염색의 결과로부터 방사능 집적 부위에 있어서 아밀로이드가 존재하고 있는 것이 확인되어 있다(도 1N). 이상의 결과로부터 화합물 I-9는 뇌내 아밀로이드에 집적되는 성능을 갖고, 뇌내 아밀로이드의 묘출 능력을 갖는 것이 시사되었다.
(실시예 I-32) 염색체 이상 시험
화합물 I-4의 염색체 이상 유발성의 유무를 검토하기 위해서 차이니즈 햄스터 섬유 아세포주(CHL/IU 세포)를 이용하여 단시간 처리법의 S9 무첨가 및 S9 첨가 배양 계열과 연속 처리법의 24시간 배양 계열에 의해 염색체 이상 시험을 실시했다. 피검 물질의 첨가량은 모든 배양 계열에 있어서 1.2, 0.6, 0.3, 0.15㎎/mL의 합계 4용량으로 했다.
염색체 이상을 갖는 세포의 출현 빈도가 음성 대조군과 비교해서 명백하게 상승하고, 또한, 용량 의존성이 확인된 경우 또는 단독 용량으로 명백하게 상승하고, 또한, 재현성이 확인된 경우에는 양성으로 판정하고, 그 이외에는 음성으로 판정했다.
시험 결과, 화합물 I-4에서 처리한 모든 배양 계열에 있어서 구조 이상 또는 수적 이상(배수체)을 갖는 세포의 출현 빈도는 음성 대조군과 동일한 정도였다. 한편, 각 배양 계열의 양성 대조군에서는 구조 이상을 갖는 세포의 출현 빈도에 현저한 증가가 확인되었다. 이상의 결과로부터 상기 시험 조건하에 있어서의 화합물 I-4의 염색체 이상 유발성은 음성으로 판단되었다.
(실시예 I-33) 소핵 시험
화합물 I-4의 변이원성(in vivo)을 검토하기 위해서 Crlj: CD1(ICR)계의 웅성 마우스의 골수 세포를 이용하여 소핵을 갖는 다염성 적혈구(이하, MNPCE라고 함)의 유발성을 조사했다.
시험의 용량으로서 0㎎/kg(음성 대조군), 250, 500, 1000 및 2000㎎/kg(피검 물질군)을 설정했다. 단회 경구 투여 후 24 및 48시간 후에 마우스를 도살하고, 골수 도말 표본을 제작해서 관찰했다. 또한, 양성 대조군에서는 MMC를 2㎎/kg 단회 복강 내 투여하고, 투여 후 24시간에 마우스를 도살한 후, 골수 도말 표본을 제작해서 관찰했다.
각 투여군에 있어서의 소핵을 갖는 MNPCE의 출현 빈도에 용량 의존성을 수반하는 증가 또는 음성 대조군과 비교해서 통계학적으로 유의한 증가가 확인되는 경우에 양성으로 판정하고, 그 이외에는 음성으로 판정했다. 통계학적 해석으로서 각투여군의 MNPCE의 출현 빈도 및 다염성 적혈구(이하, PCE라고 함)와 총 적혈구(이하, RBC라고 함)의 비율에 대해서 음성 대조군과 피검 물질군 및 양성 대조군 사이 또는 각 군 사이에서 Wilcoxon의 순위합 검정에 의해 유의차 검정을 실시했다. 또한, 유의 수준은 각각 위험율 5% 미만 및 1% 미만으로 했다.
시험 결과, 피검 물질군의 소핵을 갖는 MNPCE의 출현 빈도 및 RBC에 대한 PCE의 비율은 음성 대조군과 비교해서 통계학적으로 유의한 차는 확인되지 않았다. 한편, 양성 대조군의 소핵을 갖는 MNPCE의 출현 빈도는 음성 대조군과 비교해서 유의하게 증가했다. 이상의 결과로부터 상기 시험 조건하에서 화합물 I-4에 마우스 골수 세포에 대한 소핵 유발 작용은 확인되지 않았다는 점에서 본 피검 물질의 변이원성(in vivo)은 음성으로 판단되었다.
(실시예 II)
하기 실시예에 있어서 실험에 제공되는 각 화합물의 명칭을 표 2-1과 같이 정의했다.
(표 2-1)
(실시예 II-1) 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)을 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액에 용해한 액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 2A, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 441㎎(2.0mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 449㎎(2.0mmol 상당)을 아세토니트릴 15mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 5시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 10mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 10mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 526㎎(1.56mmol 상당)을 얻었다(도 2A, 공정 2).
별도로, 2-브로모에탄올 2.50g(20.0mmol 상당)과 이미다졸(Imidazole) 2.72g(40.0mmol 상당)을 디메틸포름아미드(DMF) 10mL에 용해하고, 0℃로 냉각시킨 후, t-부틸디페닐클로로실란(TBDPSCl) 5.50g(20.0mmol 상당)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가해서 초산 에틸에 의해 3회 추출을 행했다. 합친 초산 에틸층을 무수황산나트륨에 의해 건조시킨 후 감압 농축하고, 얻어진 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=10/1)에 의해 정제를 행하여 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄 7.04g(19.4mmol 상당)을 얻었다(도 2A, 공정 3).
2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 200㎎(0.595mmol 상당)을 디메틸포름아미드 3.0mL에 용해하고, 탄산칼륨 247㎎(1.79mmol 상당)을 첨가한 후, 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄 259㎎(0.714mmol 상당)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가해서 초산 에틸에 의해 3회 추출을 행했다. 합친 초산 에틸층을 무수황산나트륨에 의해 건조시킨 후, 감압 농축하고, 얻어진 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리 액: 헥산/초산 에틸=2/1)에 의해 정제를 행하여 2-[4'-(2"-t-부틸디페닐실록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 368㎎(0.595mmol 상당)을 얻었다(도 2A, 공정 4).
2-[4'-(2"-t-부틸디페닐실록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 368㎎(0.595mmol 상당)을 테트라히드로푸란(THF) 1.0mL에 용해하고, 테트라부틸암모늄플루오리드(TBAF)의 1.0mol/L 테트라히드로푸란 용액 0.70mL를 첨가했다. 실온에서 2시간 교반한 후, 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 이어서, 물 5.0mL와 아세토니트릴 2.0mL를 첨가해서 석출된 침전물을 여과 분별했다. 여과 분별한 침전물을 물, 아세토니트릴의 순으로 세정하여 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 226㎎(0.595mmol 상당)을 얻었다(도 2A, 공정 5).
얻어진 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 500MHz): δ8.95(s,1H), 8.27(s,1H), 7.87(d,J=8.7Hz,2H), 7.54-7.46(m,2H), 7.04(d,J=8.7Hz,2H), 4.04(t,J=4.6Hz,2H), 3.73(t,J=4.6Hz,2H).
13C-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수 500MHz): δ158.9, 143.0, 142.4, 133.5, 131.5, 127.1, 124.4, 116.7, 114.8, 108.1, 76.7, 69.5, 59.4.
(실시예 II-2) 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-이미다 조[1,2-a]피리딘의 합성
실시예 II-1에서 얻어진 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 100㎎(0.263mmol 상당)을 디옥산(dioxane) 4.0mL에 용해하고, 트리에틸아민 2.0mL를 첨가한 후, 비스트리부틸주석 0.20mL(0.39mmol 상당)와 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 20.1㎎(촉매량)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 21시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류 제거하고, 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=1/2)에 의해 정제를 행하여 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 75.3㎎(0.139mmol 상당)을 얻었다(도 2B, 공정 1).
얻어진 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ7.98(s,1H), 7.89(d,J=8.7Hz,1H), 7.75(s,1H), 7.56(d,J=8.7Hz,1H), 7.15(d,J=8.7Hz,1H), 6.98(d,J=8.7Hz,1H), 4.13(t,J=4.6Hz,2H), 3.99(t,J=4.6Hz,2H), 2.63(s,3H), 1.64-1.51(m,6H), 1.36(sextet,J=7.3Hz,6H), 1.19-1.06(m,6H), 0.92(t,J=7.3Hz,9H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수 500MHz): δ158.6, 145.7, 145.0, 131.2, 130.0, 127.4, 127.2, 121.9, 116.9, 114.8, 106.4, 69.3, 61.4, 29.0, 27.3, 13.7, 9.8.
(실시예 II-3) 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 메탄올/디메틸술폭시드 혼합 용액(혼합 비율 9:1)에 용해한 액(농도: 1㎎/mL) 60μL에 1mol/L 염산 150μL, 1mmol/mL 요오드화 나트륨 15μL, 274MBq의 [123I]요오드화 나트륨 250μL, 10%(W/V) 과산화수소 15μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 하기 조건의 HPLC에 부여하여 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취했다.
HPLC 조건:
칼럼: Phenomenex Luna C18(상품명, Phenomenex사제, 사이즈: 4.6×150㎜)
이동상: 0.1% 트리플루오로 초산/아세토니트릴=20/80→0/100(17분)
유속: 1.0mL/분
검출기: 자외 가시 흡광 광도계(검출 파장: 282㎚) 및 방사선 검출기(raytest사 STEFFI형)
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C8 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량 145㎎}에 통액하고, 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 디에틸에테르 1mL를 통액해서 2-[4'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 22MBq이었다. 또한, 하기 조건에 의한 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 97%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: TLC 플레이트: Silica Gel 60 F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 클로로포름/메탄올/트리에틸아민=100/1/2
검출기: Rita Star(제품명, raytest사제)
(실시예 II-4) 2-(4'-에톡시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성
브롬화 제2동 2.72g(12.2mmol 상당)에 초산 에틸 30mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-에톡시아세토페논 1.00g(6.09mmol 상당)을 첨가하고, 가열 환류했다. 3시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 농축했다. 얻어진 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=10/1)에 의해 정제하여 2-브로모-4'-에톡시아세토페논 1.20g(4.94mmol 상당)을 얻었다(도 2C, 공정 1).
2-브로모-4'-에톡시아세토페논 1.20g(4.94mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 1.09g(4.95mmol 상당)을 아세토니트릴 20mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 1.5시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 5mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 20mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 10분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-에톡시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 1.64g(4.50mmol 상당)을 얻었다(도 2C, 공정 2).
얻어진 2-(4'-에톡시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 500MHz): δ9.06(s,1H), 8.38(s,1H), 7.86(d,J=8.7Hz,2H), 7.77-7.57(m,2H), 7.06(d,J=8.7Hz,2H), 4.10(q,J=6.9Hz,2H), 1.36(t,J=6.9Hz,3H).
13C-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 500MHz): δ159.3, 141.1, 140.3, 135.9, 132.0, 127.3, 122.1, 115.3, 114.9, 108.5, 78.6, 63.2, 14.5.
(실시예 II-5) 6-트리부틸스타닐-2-(4'-에톡시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
실시예 II-4에서 얻어진 2-(4'-에톡시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 364㎎(1.00mmol 상당)을 디옥산 4.0mL에 용해하고, 트리에틸아민 2mL를 첨가한 후, 비스트리부틸주석 0.76mL(1.5mmol 상당)와 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 76.3㎎(촉매량)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 23시간 교반한 후, 용매를 감압하 에서 증류 제거하고, 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=5/1)에 의해 정제를 행하여 6-트리부틸스타닐-2-(4'-에톡시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 331㎎(0.628mmol 상당)을 얻었다(도 2D, 공정 1).
얻어진 6-트리부틸스타닐-2-(4'-에톡시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ7.96(s,1H), 7.88(d,J=8.7Hz,2H), 7.74(s,1H), 7.58(d,J=8.7Hz,1H), 7.14(d,J=8.7Hz,1H), 6.96(d,J=8.7Hz,2H), 4.07(q,J=6.9Hz,2H), 1.63-1.49(m,6H), 1.43(t,J=6.9Hz,3H), 1.39-1.31(m,6H), 1.18-1.04(m,6H), 0.90(t,J=7.3Hz,9H).
13C-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ159.0, 145.7, 145.2, 131.2, 130.1, 127.4, 126.7, 121.9, 117.0, 114.8, 106.4, 63.6, 29.1, 27.4, 15.0, 13.8.9.9.
(실시예 II-6) 2-(4'-에톡시페닐)-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-(4'-에톡시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘의 메탄올/디메틸술폭시드=9/1 혼합 용액(농도: 1㎎/mL) 60μL에 2mol/L 염산 90μL, 1mmol/mL 요오드화 나트륨 15μL, 436MBq의 [123I]요오드화 나트륨 100μL, 10%(W/V) 과산화수소 15μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 하기 조건의 HPLC에 부여하여 2-(4'-에톡시페닐)-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취했다.
HPLC 조건:
칼럼: Phenomenex Luna C18(상품명, Phenomenex사제, 사이즈: 4.6×150㎜)
이동상: 0.1% 트리플루오로 초산/아세토니트릴=20/80→0/100(17분)
유속: 1.0mL/분
검출기: 자외 가시 흡광 광도계(검출 파장: 282㎚) 및 방사선 검출기(raytest사 STEFFI형)
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C8 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량 145㎎}에 통액하고, 2-(4'-에톡시페닐)-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 디에틸에테르 1mL를 통액해서 2-(4'-에톡시페닐)-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 88MBq이었다. 또한, 하기 조건에 의한 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 98%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: TLC 플레이트: Silica Gel 60 F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 클로로포름/메탄올/트리에틸아민=100/1/2
검출기: Rita Star(제품명, raytest사제)
(참고예 II-1) [123I]-IMPY의 합성
logPoctanol의 측정 및 뇌집적성에 관한 검토에 있어서의 비교예에 사용하기 위해서 하기 공정에 따라 [123I]-IMPY를 합성했다.
문헌(Zhi-Ping Zhuang et al., J.Med.Chem, 2003, 46, p.237-243)에 기재된 방법에 따라서 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘을 합성하고, 메탄올에 용해했다(농도: 1㎎/mL). 상기 용액 53μL에 1mol/L 염산 75μL, 224~253MBq의 [123I]요오드화 나트륨 60~70μL, 1mmol/L 요오드화 나트륨 용액 10μL, 10%(W/V) 과산화수소 15μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 실시예 II-3과 동일한 조건에 의한 HPLC에 부여하여 [123I]-IMPY 프랙션을 분취했다.
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C8 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량: 145㎎}에 통액하고, [123I]-IMPY를 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 디에틸에테르 1mL를 통액해서 [123I]-IMPY를 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 41~57MBq이었다. 또한, 실시예 II-3과 동일한 조건으로 TLC 분석을 행 한 결과, 그 방사 화학적 순도는 93%였다.
(실시예 II-7, 비교예 II-1~II-3) 아밀로이드 친화성의 측정
본 발명 화합물의 아밀로이드 친화성을 이하의 in vitro 결합 시험에 의해 평가했다.
(1) Aβ1-42(와코쥰야쿠코교)를 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕함으로써 1㎎/mL의 응집된 Aβ(이하, 본 실시예에 있어서 아밀로이드로 함) 현탁액(이하, 본 실시예에 있어서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 상기 아밀로이드 현탁액에 대해서 문헌{Naiki,H.등, Laboratory Investigation.74, p.374-383(1996)}에 기재된 방법에 따라 티오플라빈 T(Fluka사제)를 사용한 형광 광도 측정에 의한 정성 실험을 행하여 (1)에서 얻은 응집화 Aβ가 아밀로이드인 것을 확인했다(측정 조건: 여기 파장 446㎚, 형광 파장 490㎚).
(3) 문헌{Wang,Y.등, J.Labelled Compounds Radiopharmaceut.44, S239(2001)}에 기재된 방법에 따라 2-(4'-아미노페닐)벤조티아졸을 표식 전구체로 해서 [125I]2-(3'-요오드-4'-아미노페닐)벤조티아졸(이하, [125I]3'-I-BTA-0이라고 함)을 조제하고, 에탄올에 용해했다. 콩고레드, 티오플라빈 T 및 6-메틸-2-[4'-(N,N-디메틸아미노)페닐]벤조티아졸(이하, 6-Me-BTA-2라고 함)은 시판의 시약을 그대로 칭량해서 사용했다.
(4) IMPY를 문헌{Zhuang,Z.P.등, J.Med.Chem.46, 237(2003)}에 기재된 방법 에 따라서 합성했다.
(5) 각 평가 화합물 또는 그 에탄올 용액, 상기 (3)에서 조제한 [125I]3'-I-BTA-0의 에탄올 용액 및 상기 (1)에서 조제한 아밀로이드 현탁액을 1% 소혈청 알부민 함유 인산 완충액(pH7.4)에 용해하여 각 평가 화합물, [125I]3'-I-BTA-0 및 아밀로이드의 최종 농도가 각각 표 2-2에 기재된 농도가 되는 시료를 조제했다.
(표 2-2)
(6) 상기 (5)에서 조제한 각 시료 용액을 96 구멍 마이크로플레이트의 각웰(용량 약 0.3mL)에 충전했다. 시료 용액을 충전한 마이크로플레이트를 22℃에서 3시간, 일정 속도(400회전/분)로 진탕한 후, 각 시료 용액을 유리 섬유 필터(상품명: MulutiscreenTM-FC, 미리포아사제)에 의해 여과함으로써 아밀로이드에 결합된 [125I]3'-I-BTA-0과 결합되어 있지 않은 [125I]3'-I-BTA-0을 분리했다.
(7) 각 시료 용액의 여과에 사용한 유리 섬유 필터를 1% 소혈청 알부민 함유 인산 완충액(pH7.4)에 의해 세정(0.5mL×5회)하고, 유리 섬유 필터의 방사능을 오토웰 감마 시스템(Aloka사제, 형식: ARC-301B)에 의해 측정했다(이하, 각 평가 화 합물 농도가 0인 시료에 있어서의 방사능량을 A, 각 평가 화합물 농도가 0.001nmol/L 이상인 시료에 있어서의 방사능량을 B로 함).
(8) 별도로, 6-Me-BTA-2를 15μmol/L, [125I]3'-I-BTA-0을 400pmol/L, 아밀로이드를 1μmol/L 배합시킨 액을 조제하고, 상기 (7) 및 (8)과 동일한 조작을 행하여 방사능량을 측정했다. 구한 방사능량을 백그라운드 방사능량으로 하고, 저해율의 계산에 사용했다(이하, BG로 함).
(9) 상기 (7) 및 (8)에서 측정한 방사능량을 사용하여 하기 식(2-1):
로부터 저해율을 구했다. 얻어진 저해율을 프로빗 변환한 값을 평가 화합물의 농도의 대수에 대해서 플롯한 그래프를 작성하고, 최소 제곱법에 의해 근사 직선을 작성했다. 이 직선을 사용하여 각 화합물의 50% 저해 농도(이하, IC50%값이라고 함)를 구했다. 이 값을 지표로서 사용하고, 각 평가 화합물의 아밀로이드 친화성을 평가했다.
각 평가 화합물에 있어서의 IC50%값을 표 2-3에 나타낸다. 화합물 II-3은 100 미만의 IC50%값을 나타내고, 아밀로이드 친화성을 갖는 것이 일반적으로 알려져 있는 콩고레드 및 티오플라빈 T와 비교해서 유의하게 높은 아밀로이드 친화성을 나타내고 있었다. 이 결과로부터 화합물 II-3은 IMPY와 마찬가지로 양호한 아밀로이드 친화성을 갖는 것이 나타내어졌다.
(표 2-3)
(실시예 II-8~II-9, 비교예 II-4) 옥탄올 추출법을 사용한 분배 계수의 측정
화합물의 혈액뇌관문(이하, BBB라고 함) 투과성의 지표로서 일반적으로 알려져 있는 옥탄올 추출법을 사용한 분배 계수(이하, logPoctanol이라고 함)를 측정했다.
실시예 II-3에서 조제한 화합물 II-1의 디에틸에테르 용액(실시예 II-8), 실시예 II-6에서 조제한 화합물 II-2의 디에틸에테르 용액(실시예 II-9) 및 참고예 II-1에서 조제한 [123I]-IMPY의 디에틸에테르 용액(비교예 II-2)을 각각 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 의해 희석하고, 방사능 농도 20~30MBq/mL가 되도록 조정했다. 조제한 시료 용액 각 10μL를 각각 옥탄올 2mL에 첨가하고, 10mmol/L 인산 완충액(pH7.4) 2mL를 더 첨가하여 30초간 교반했다. 이 혼합액을 저속 원심기에 의해 원심 분리(2000회전/분×60분간)한 후, 옥탄올층 및 물층을 각 1mL 분취하고, 각각의 방사능 카운트를 오토웰 감마 시스템(형식: ARC-301B, Aloka사제)에 의해 계측했다. 얻어진 방사능 카운트를 사용하고, 식(2-2)를 사용해서 logPoctanol값을 산출했다.
결과를 표 2-4에 나타낸다. logPoctanol의 값은 어느 화합물에 있어서나 1~3 사이의 값을 나타내고 있었다. BBB를 투과할 수 있는 화합물에 있어서는 logPoctanol값은 1~3 사이의 값의 값인 것이 알려져 있다(Douglas D.Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038). 이상의 결과로부터 양 화합물은 IMPY와 마찬가지로 BBB 투과성을 갖는 것으로 시사되었다.
(표 2-4)
(실시예 II-10~II-11, 비교예 II-5) 뇌내 이행성 및 클리어런스의 측정
화합물 II-1(실시예 II-10) 및 화합물 II-2(실시예 II-11)를 사용하여 웅성의 Wistar계 쥐(7주령)에 있어서의 뇌에의 방사능 집적의 경시적 변화를 측정했다.
실시예 II-3에서 조제한 화합물 II-1의 디에틸에테르 용액(실시예 II-10), 실시예 II-6에서 조제한 화합물 II-2의 디에틸에테르 용액(실시예 II-11) 및 참고예 II-1에서 조제한 [123I]-IMPY의 디에틸에테르 용액(비교예 II-5)을 각각 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 의해 희석하고, 방사능 농도 8~12MBq/mL가 되도록 조정했다. 조제한 시료 용액 각 0.05mL를 상기 쥐에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다. 투여 후 2분, 5분, 30분, 60분에 복부 대동맥으로부터 탈혈된 후에 뇌를 채취하여 뇌의 질량을 측정하고, 또한, 뇌의 방사능을 싱글 채널 애 널라이즈(검출기 형번: SP-20, 오요코켄코교 가부시키가이샤제)를 이용하여 계측했다(이하, 본 실시예에서 A로 함). 또한, 나머지 전신의 방사능량을 마찬가지로 측정했다(이하, 본 실시예에서 B로 함). 이들의 측정 결과를 사용하여 하기 식(2-3)으로부터 각 해부 시간점에 있어서의 뇌에의 단위 질량당 방사능 분포율(%ID/g)을 산출했다.
또한, 실험은 각 시간점에 있어서 3마리의 동물을 사용하여 행했다.
결과를 표 2-5에 나타낸다. 표 2-5에 나타내는 바와 같이, 화합물 II-1 및 화합물 II-2는 [123I]-IMPY와 마찬가지로, 투여 후 2분점에 있어서 높은 방사능 집적이 확인되고, 그 후, 60분에 걸쳐서 신속하게 소실되는 경향을 나타내고 있었다. 이 결과로부터 화합물 II-1 및 화합물 II-2는 모두 [123I]-IMPY와 마찬가지로, 높은 뇌이행성 및 신속한 뇌로부터의 클리어런스를 갖는 것이 시사되었다.
(표 2-5)
(비교예 II-6) 아밀로이드 주입 모델 쥐를 사용한 123I-IMPY의 ex vivo 오토라디오그램
(1) Aβ1-40(가부시키가이샤 펩티드 켄큐쇼제)을 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕시켜 1㎎/mL의 응집 Aβ 현탁액(이하, 본 실시예에서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 웅성 Wistar계 쥐(7주령)의 편측 편도핵에 상기 아밀로이드 현탁액을 2.5μL(25㎍ 상당) 주입하고, 대조로서 반대측의 편도핵에 인산 완충 생리 식염액(pH7.4)을 2.5μL 주입했다. 아밀로이드 현탁액 및 인산 완충 생리 식염액(pH7.4) 주입 1일 후의 쥐를 검체로 했다.
(3) [123I]-IMPY를 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해하고, 시료 용액으로 했다(시료 용액 중의 방사능 농도 29MBq/mL). 이 용액을 상기 쥐에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다(투여량: 0.5mL, 투여한 방사능: 14.5MBq 상당).
(4) 투여 60분 후에 뇌를 적출하여 마이크로톰(형식: CM3050S, LEICA사제) 을 이용하여 두께 10㎛의 뇌절편을 제작했다. 상기 뇌절편을 이미징 플레이트 상에서 20시간 노광시킨 후, 바이오 이미징 애널라이저(형식: BAS-2500, 후지 샤신 필름 가부시키가이샤제)를 이용하여 화상 해석을 행했다.
(5) 바이오 이미징 애널라이저를 사용한 상기 화상 해석의 종료 후, 티오플라빈 T에 의한 병리 염색을 행하고, 형광 현미경(가부시키가이샤 니콘제, 형식: TE2000-U형, 여기 파장: 400~440㎚, 검출 파장: 470㎚)을 사용한 이미징을 행하여 상기 절편 상에 아밀로이드가 침착되어 있는 것을 확인했다(도 2E의 b).
아밀로이드 뇌내 주입 쥐의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 티오플라빈 T 염색의 이미지를 도 2E에 나타낸다. 이 도면에 나타내는 바와 같이, 아밀로이드 현탁액을 주입한 측의 편도핵에 있어서 명백한 방사능 집적이 확인되지만 아밀로이드가 주입되어 있지 않은 백질에도 비특이적인 집적이 확인되었다.
(실시예 II-12) 뇌내 아밀로이드의 묘출의 확인
본 발명에 따른 화합물이 뇌내 아밀로이드를 묘출할 수 있는지를 평가하기 위해서 하기의 실험을 행했다.
(1) Aβ1-42(와코쥰야쿠코교)를 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕시켜 1㎎/mL의 응집 Aβ 현탁액(이하, 본 실시예에서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 웅성 Wistar계 쥐(7주령)의 편측 편도핵에 상기 아밀로이드 현탁액을 2.5μL(25㎍ 상당) 주입하고, 대조로서 반대측의 편도핵에 인산 완충 생리 식염액(pH7.4)을 2.5μL 주입했다. 아밀로이드 현탁액 및 인산 완충 생리 식염액(pH7.4) 주입 1일 후의 쥐를 검체로 했다.
(3) 화합물 II-1을 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해하고, 시료 용액으로 했다(시료 용액 중의 방사능 농도 22MBq/mL). 이 용액을 상기 쥐에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다(투여량: 0.5mL, 투여한 방사능: 11~13MBq 상당).
(4) 투여 60분 후에 뇌를 적출하여 마이크로톰(형식: CM3050S, LEICA사제) 을 이용하여 두께 10㎛의 뇌절편을 제작했다. 상기 뇌절편을 이미징 플레이트 상에서 20시간 노광시킨 후, 바이오 이미징 애널라이저(형식: BAS-2500, 후지 샤신 필름 가부시키가이샤제)를 이용하여 화상 해석을 행했다.
(5) 바이오 이미징 애널라이저를 사용한 상기 화상 해석의 종료 후, 티오플라빈 T에 의한 병리 염색을 행하고, 형광 현미경(가부시키가이샤 니콘제, 형식: TE2000-U형, 여기 파장: 400~440㎚, 검출 파장: 470㎚)을 사용한 이미징을 행하여 상기 절편 상에 아밀로이드가 침착되어 있는 것을 확인했다(도 2F의 b).
아밀로이드 뇌내 주입 쥐의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 티오플라빈 T 염색의 이미지를 도 2F에 나타낸다. 이 도면에 나타내는 바와 같이, 아밀로이드 현탁액을 주입한 측의 편도핵에 있어서 명백한 방사능 집적이 확인되었다. 한편, 생리 식염액을 주입한 측의 편도핵에 있어서는 다른 부위와 비교한 유의한 방사능 집적은 확인되지 않았다. 또한, 이 오토라디오그램 상에 있어서 아밀로이드 주입 부위 이외에 있어서의 방사능 집적은 거의 보여지지 않았다. 또한, 티오플라빈 T 염색의 결과로부터 방사능 집적 부위에 있어서 아밀로이드가 존재하고 있는 것이 확인되어 있다(도 2F의 b).
이상과 같이, 화합물 II-1에서는 아밀로이드 주입 부위 이외의 부위에 있어서는 방사능 집적은 거의 확인되지 않고, [123I]-IMPY에 있어서 보여진 바와 같은 백질에의 비특이적인 결합도 거의 보여지지 않았다. 결과적으로 화합물 II-1은 오토라디오그램 화상 전체적으로 높은 아밀로이드 묘출 능력을 갖고 있었다. 이상의 결과로부터 화합물 II-1은 뇌내 아밀로이드 묘출에 있어서의 높은 특이성을 갖는 화합물인 것이 나타내어졌다.
(실시예 II-13) 뇌내 아밀로이드의 묘출의 확인
시료 용액으로서 화합물 II-2를 10㎎/mL 아스코르빈산 용액에 용해한 액(시료 용액 중의 방사능 농도 25MBq/mL)을 사용한 외에는 실시예 II-12와 동일한 조작을 행했다.
아밀로이드 뇌내 주입 쥐의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 티오플라빈 T 염색의 이미지를 도 2G에 나타낸다. 이 도면에 나타내는 바와 같이, 아밀로이드 현탁액을 주입한 측의 편도핵에 있어서 명백한 방사능 집적이 확인되었다. 또한, 방사능 집적 부위에 있어서의 티오플라빈 T 염색의 결과로부터 상기 부위에 있어서 아밀로이드가 존재하고 있는 것이 확인되었다. 한편, 생리 식염액을 주입한 측의 편도핵에 있어서는 다른 부위와 비교한 유의한 방사능 집적은 확인되지 않았다.
화합물 II-2에 있어서는, 아밀로이드 주입 부위 이외의 부위에 있어서는 다소의 방사능 집적이 보여지지만 그 집적은 123I-IMPY와 비교해서 상당히 억제되어 있었다. 그 결과, 화상 전체적으로 높은 아밀로이드 묘출 능력을 나타내고 있었다.
이상의 결과로부터 화합물 II-2는 뇌내 아밀로이드 묘출에 있어서의 높은 특이성을 갖는 화합물인 것이 나타내어졌다.
(실시예 II-14) 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피 리딘(비방사성 요오드체)의 합성
브롬화 제2동 8.60g(46.0mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 3'-히드록시아세토페논 2.50g(22.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL를 첨가하고, 가열 환류했다. 2시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=2/1)에 의해 정제하여 2-브로모-3'-히드록시아세토페논 4.42g(20.6mmol 상당)을 얻었다(도 2H, 공정 1).
2-브로모-3'-히드록시아세토페논 987㎎(4.55mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 1.00g(4.55mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 2시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 1mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 10mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(3'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 927㎎(2.76mmol 상당)을 얻었다(도 2H, 공정 2).
별도로, 2-브로모에탄올 2.50g(20.0mmol 상당)과 이미다졸 2.72g(40.0mmol 상당)을 디메틸포름아미드 10mL에 용해하고, 0℃로 냉각시킨 후, t-부틸디페닐클로로실란 5.50g(20.0mmol 상당)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가해서 초산 에틸에 의해 3회 추출을 행했다. 합친 초산 에틸층을 무수황산나트륨에 의해 건조시킨 후 감압 농축하고, 얻어진 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=10/1)에 의해 정제를 행하여 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄 7.04g(19.4mmol 상당)을 얻었다(도 2H, 공정 3).
2-(3'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 300㎎(0.893mmol 상당)을 디메틸포름아미드 5.0mL에 용해하고, 탄산칼륨 370㎎(2.68mmol 상당)을 첨가한 후, 1-브로모-2-(t-부틸디페닐실록시)에탄 357㎎(0.982mmol 상당)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가해서 초산 에틸에 의해 3회 추출을 행했다. 합친 초산 에틸층을 무수황산나트륨에 의해 건조시킨 후, 감압 농축하고, 얻어진 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=3/1)에 의해 정제를 행하여 2-[3'-(2"-t-부틸디페닐실록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 477㎎(0.771mmol 상당)을 얻었다(도 2H, 공정 4).
2-[3'-(2"-t-부틸디페닐실록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 477㎎(0.771mmol 상당)을 테트라히드로푸란 0.98mL에 용해하고, 테트라부틸암모늄플루오리드의 1.0mol/L테트라히드로푸란 용액 0.93mL를 첨가했다. 실온에서 15분간 교반한 후, 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 이어서, 물 5.0mL와 아세토니트릴 2.0mL를 첨가해서 석출된 침전물을 여과 분별했다. 여과 분별한 침전물을 물, 아세토니트릴의 순으로 세정하여 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다 조[1,2-a]피리딘 120㎎(0.316mmol 상당)을 얻었다(도 2H, 공정 5).
얻어진 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸술폭시드, 공명 주파수: 500MHz): δ8.91(s,1H), 8.35(s,1H), 7.52-7.51(m,2H), 7.45(s,2H), 7.35(t,J=8.2Hz,1H), 6.93-6.90(m,1H), 4.06(t,J=4.6Hz,2H), 3.75(t,J=4.6Hz,2H).
(실시예 II-15) 6-트리부틸스타닐-2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
실시예 II-14에서 얻어진 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 70㎎(0.184mmol 상당)을 디옥산 4.0mL에 용해하고, 트리에틸아민 2.0mL를 첨가한 후, 비스트리부틸주석 0.20mL(0.39mmol 상당)와 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 14.0㎎(촉매량)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 20시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류 제거하고, 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=2/1)에 의해 정제를 행하여 6-트리부틸스타닐-2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 73.0㎎(0.134mmol 상당)을 얻었다(도 2I, 공정 1).
얻어진 6-트리부틸스타닐-2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ7.99(d,J=0.9Hz,1H), 7.82(s,1H), 7.64-7.50(m,3H), 7.34-7.31(m,1H), 7.18-7.17(m,1H), 6.90-6.87(m,1H), 4.20(t,J=4.3Hz,2H), 3.98(t,J=4.3Hz,2H), 1.69-1.48(m,6H), 1.39-1.32(m,6H), 1.19-1.05(m,6H), 0.91(t,J=7.4Hz,9H).
(실시예 II-16) 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 메탄올/디메틸술폭시드=9/1 혼합 용액(농도: 1㎎/mL) 60μL에 1mol/L 염산 150μL, 1mmol/mL 요오드화 나트륨 15μL, 274MBq의 [123I]요오드화 나트륨 250μL, 10%(W/V) 과산화수소 15μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 하기 조건의 HPLC에 부여하여 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취했다.
HPLC 조건:
칼럼: Phenomenex Luna C18(상품명, Phenomenex사제, 사이즈: 4.6×150㎜)
이동상: 0.1% 트리플루오로초산/아세토니트릴=20/80→0/100(17분)
유속: 1.0mL/분
검출기: 자외 가시 흡광 광도계(검출 파장: 282㎚) 및 방사선 검출 기(raytest사 STEFFI형)
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C8 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량 145㎎}에 통액하고, 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 디에틸에테르 1mL를 통액해서 2-[3'-(2"-히드록시에톡시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 112.9MBq이었다. 또한, 하기 조건에 의한 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 97%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: TLC 플레이트: Silica Gel 60 F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 클로로포름/메탄올/트리에틸아민=100/1/2
검출기: Rita Star(제품명, raytest사제)
(실시예 II-17) 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(비방사성 요오드체)의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)을 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액에 용해한 액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 2J, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 987㎎(4.55mmol 상당)과 2-아미노-5-요오드피리딘 1.00g(4.55mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 110℃의 유욕에서 2시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 10mL-메탄올 1mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 10mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 927㎎(2.76mmol 상당)을 얻었다(도 2J, 공정 2).
별도로, 2-브로모프로판올 7.0g(50.4mmol 상당)과 이미다졸 6.86g(101mmol 상당)을 디메틸포름아미드 50mL에 용해하고, 0℃로 냉각시킨 후, t-부틸디메틸클로로실란 7.59g(50.4mmol 상당)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가해서 디에틸에테르에 의해 3회 추출을 행했다. 합친 디에틸에테르층을 무수황산마그네슘에 의해 건조시킨 후 감압 농축하고, 얻어진 조생성물을 감압 증류(100℃, 70㎜Hg)에 의해 정제를 행하여 1-브로모-3-(t-부틸디메틸실록시)프로판 7.23g(30.2mmol 상당)을 얻었다(도 2J, 공정 3).
2-(4'-히드록시페닐)-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 2.00g(5.95mmol 상당) 을 디메틸포름아미드 30.0mL에 용해하고, 탄산칼륨 2.47g(17.9mmol 상당)을 첨가한 후, 1-브로모-3-(t-부틸디메틸실록시)프로판 1.51g(5.95mmol 상당)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 8일간 교반한 후, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가하고, 초산 에틸에 의해 3회 추출을 행했다. 합친 초산 에틸층을 무수황산나트륨에 의해 건조시킨 후 감압 농축하고, 얻어진 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=1/1)에 의해 정제를 행하여 2-[4'-(3"-t-부틸디메틸실록시프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 1.52g(2.99mmol 상당)을 얻었다(도 2J, 공정 4).
2-[4'-(3"-t-부틸디메틸실록시프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 1.52g(2.99mmol 상당)을 테트라히드로푸란 5.00mL에 용해하고, 테트라부틸암모늄플루오리드의 1.0mol/L 테트라히드로푸란 용액 2.99mL를 첨가했다. 실온에서 30분간 교반한 후, 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 이어서, 물 10mL와 아세토니트릴 5.0mL를 첨가해서 석출된 침전물을 여과 분별했다. 여과 분별한 침전물을 물, 아세토니트릴의 순으로 세정하여 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘 1.03g(2.61mmol 상당)을 얻었다(도 2J, 공정 5).
얻어진 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중디메틸포름아미드, 공명 주파수: 500MHz): δ8.96(s,1H), 8.33(s,1H), 7.98(d,J=8.7Hz,2H), 7.46(s,2H), 7.06(d,J=8.7Hz,2H), 4.63(t,J=5.0Hz,1H), 4.17(t,J=6.0Hz,2H), 3.72(dt,J=5.0,6.0Hz,2H), 1.98(tt,J=6.0,6.0Hz,2H).
(실시예 II-18) 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
브롬화 제2동 28.17g(126mmol 상당)에 초산 에틸 50mL를 첨가해서 현탁시키고, 이것에 4'-히드록시아세토페논 8.18g(60.0mmol 상당)의 초산 에틸 50mL-클로로포름 50mL 혼액을 첨가하고, 가열 환류했다. 5시간 후, 반응액을 실온까지 냉각시켜서 여과를 행하고, 여과액을 감압 농축했다. 잔사를 초산 에틸에 용해하고, 활성탄을 첨가해서 탈색 조작을 행한 후, 용액을 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 클로로포름/메탄올=20/1)에 의해 정제하고, 또한, 초산 에틸-석유 에테르로부터 재결정을 행하여 2-브로모-4'-히드록시아세토페논 7.25g(33.7mmol 상당)을 얻었다(도 2K, 공정 1).
2-브로모-4'-히드록시아세토페논 2.15g(10.0mmol 상당)과 2-아미노-5-브로모피리딘 1.74g(10.0mmol 상당)을 아세토니트릴 50mL에 용해하고, 105℃의 유욕에서 6시간 가열 환류했다. 반응 종료 후, 반응액을 실온까지 냉각시키고, 침전물을 여과 분별한 후, 아세토니트릴에 의해 세정하고, 감압하에서 건조시켰다. 얻어진 조결정은 물 20mL-메탄올 20mL 혼액에 현탁시킨 후, 이것에 포화 탄산수소나트륨 용액을 약 25mL 첨가하고, 초음파 세정기에 의해 5분간 진탕했다. 얻어진 혼합물로부터 침전물을 여과 분별해서 물로 잘 세정하고, 감압하에서 건조시켜 6-브로모-2- (4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 2.41g(8.32mmol 상당)을 얻었다(도 2K, 공정 2).
충분히 건조시켜 수분을 제거한 6-브로모-2-(4'-히드록시페닐)이미다조[1,2-a]피리딘 1.45g(5.0mmol 상당)을 N,N-디메틸포름아미드 50mL에 용해하고, 이것에 탄산칼륨 2.07g(15.0mmol 상당)을 첨가했다. 이것에 3-브로모-1-프로판올 680μL (7.5mmol 상당)를 첨가하고, 실온하에서 17시간 교반했다. 반응 종료 후, 반응액을 물에 붓고, 클로로포름에 의해 3회 추출했다. 합친 클로로포름층은 포화 식염수에 의해 세정한 후, 무수황산나트륨에 의해 건조시키고, 여과, 농축했다. 얻어진 조생성물을 메탄올로부터 재결정하여 6-브로모-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 1.28g(3.67mmol 상당)을 얻었다(도 2K, 공정 3).
6-브로모-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 100㎎(0.288mmol 상당)을 디옥산 4.0mL에 용해하고, 트리에틸아민 2.0mL를 첨가한 후, 비스트리부틸주석 0.22mL(0.43mmol 상당)와 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐 22.0㎎(촉매량)을 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 24시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류 제거하고, 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용리액: 헥산/초산 에틸=3/1)에 의해 정제를 행하여 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘 68.0㎎(0.122mmol 상당)을 얻었다(도 2K, 공정 4).
얻어진 6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 NMR 측정 결과(내부 표준 물질: 테트라메틸실란)는 이하와 같았다.
사용 NMR 장치: JNM-ECP-500(니혼 덴시 가부시키가이샤제)
1H-NMR(용매: 중클로로포름, 공명 주파수: 500MHz): δ7.97(s,1H), 7.88(d,J=8.3Hz,2H), 7.74(s,1H), 7.58(d,J=8.3Hz,1H), 7.14(d,J=8.7Hz,1H), 6.98(d,J=8.7Hz,2H), 4.18(t,J=6.0Hz,2H), 3.89(t,J=6.0Hz,2H), 2.08(tt,J=6.0,6.0Hz,2H), 1.59-1.49(m,6H), 1.39-1.31(m,6H), 1.18-1.05(m,6H), 0.90(t,J=7.3Hz,9H).
(실시예 II-19) 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘의 합성
6-트리부틸스타닐-2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]이미다조[1,2-a]피리딘의 메탄올/디메틸술폭시드=9/1 혼합 용액(농도: 1㎎/mL) 100μL에 2mol/L 염산 80μL, 1mmol/mL 요오드화 나트륨 15μL, 414MBq의 [123I]요오드화 나트륨 120μL, 10%(W/V) 과산화수소 20μL를 첨가했다. 상기 혼합액을 50℃에서 10분간 정치한 후, 하기 조건의 HPLC에 부여하여 2-[3'-(4"-히드록시프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘 프랙션을 분취했다.
HPLC 조건:
칼럼: Phenomenex Luna C18(상품명, Phenomenex사제, 사이즈: 4.6×150㎜)
이동상: 0.1% 트리플루오로 초산/아세토니트릴=20/80→0/100(17분)
유속: 1.0mL/분
검출기: 자외 가시 흡광 광도계(검출 파장: 282㎚) 및 방사선 검출 기(raytest사 STEFFI형)
상기 프랙션에 물 10mL를 첨가한 액을 역상 칼럼{상품명: Sep-Pak(등록 상표) Light C8 Cartridges, Waters사제, 충전제의 충전량 145㎎)에 통액하고, 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 상기 칼럼에 흡착 포집했다. 이 칼럼을 물 1mL에 의해 세정한 후, 디에틸에테르 1mL를 통액 해서 2-[4'-(3"-히드록시프로폭시)페닐]-6-[123I]요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 용출시켰다. 얻어진 방사능량은 합성 직후에 있어서 219MBq이었다. 또한, 하기의 조건에 의한 TLC 분석을 행한 결과, 그 방사 화학적 순도는 97%였다.
TLC 분석 조건:
TLC 플레이트: Silica Gel 60 F254(제품명, 메르크사제)
전개상: 클로로포름/메탄올/트리에틸아민=100/1/2
검출기: Rita Star(제품명, raytest사제)
(실시예 II-20~II-21, 비교예 II-7) 옥탄올 추출법을 사용한 분배 계수의 측정
실시예 II-16에서 조제한 화합물 II-4의 디에틸에테르 용액(실시예 II-20), 실시예 II-19에서 조제한 화합물 II-6의 디에틸에테르 용액(실시예 II-21) 및 [123I]-IMPY의 디에틸에테르 용액(비교예 II-7)을 각각 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 의해 희석하고, 방사능 농도 20~30MBq/mL가 되도록 조정했다. 조제 한 시료 용액 각 10μL를 각각 옥탄올 2mL에 첨가하고, 10mmol/L 인산 완충액(pH7.4) 2mL를 더 첨가하여 30초간 교반했다. 이 혼합액을 저속 원심기에 의해 원심 분리(2000회전/분×60분간)한 후, 옥탄올층 및 물층을 각 1mL 분취하고, 각각의 방사능 카운트를 오토웰 감마 시스템(형식: ARC-301B, Aloka사제)에 의해 계측했다. 얻어진 방사능 카운트를 사용하고, 식(2-4)를 사용해서 logPoctanol값을 산출했다.
결과를 표 2-6에 나타낸다. logPoctanol의 값은 어느 화합물에 있어서나 1~3 사이의 값을 나타내고 있었다. BBB를 투과할 수 있는 화합물에 있어서는 logPoctanol값은 1~3 사이의 값의 값인 것이 알려져 있다(Douglas D.Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038). 이상의 결과로부터 양 화합물은 IMPY와 마찬가지로 BBB 투과성을 갖는 것으로 시사되었다.
(표 2-6)
(실시예 II-22~II-23, 비교예 II-8) 뇌내 이행성 및 클리어런스의 측정
화합물 II-4 및 화합물 II-6을 사용하여 웅성의 Wistar계 쥐(7주령)에 있어 서의 뇌에의 방사능 집적의 경시적 변화를 측정했다.
화합물 II-4(실시예 II-22), 화합물 II-6(실시예 II-23) 및 상기 참고예 II-1에서 조제한 [123I]-IMPY(비교예 II-8)를 각각 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 액(방사능 농도 20~31MBq/mL)을 조제했다. 이들 액 각각 0.05mL를 각각의 Wistar계 쥐(7주령)에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다. 투여 후 2분, 5분, 30분, 60분에 복부 대동맥으로부터 탈혈된 후에 뇌를 채취하여 뇌의 질량을 측정하고, 또한, 뇌의 방사능을 싱글 채널 애널라이저(검출기 형번: SP-20, 오요코켄코교 가부시키가이샤제)를 이용하여 계측했다(이하, 본 실시예에서 A로 함). 또한, 나머지 전신의 방사능량을 마찬가지로 측정했다(이하, 본 실시예에서 B로 함). 이들의 측정 결과를 사용해서 하기 식(2-5)로부터 각 해부 시간점에 있어서의 뇌에의 단위 질량당 방사능 분포율(%ID/g)을 산출했다.
또한, 실험은 각 시간점에 있어서 3마리의 동물을 사용하여 행했다.
결과를 표 2-7에 나타낸다. 표 2-7에 나타내는 바와 같이, 화합물 II-4 및 II-6은 [123I]-IMPY와 마찬가지로, 투여 후 2분점에 있어서 높은 방사능 집적이 확인되고, 그 후 60분에 걸쳐서 신속하게 소실되는 경향을 나타내고 있었다. 이 결과로부터 화합물 II-4 및 II-6은 [123I]-IMPY와 마찬가지로, 높은 뇌이행성 및 신속한 뇌로부터의 클리어런스를 갖는 것이 시사되었다.
(표 2-7)
(실시예 II-24~II-25) 뇌내 아밀로이드 묘출의 확인
(1) Aβ1-42(와코쥰야쿠코교)를 인산 완충액(pH7.4)에 의해 용해해서 37℃에서 72시간 진탕시켜 1㎎/mL의 응집 Aβ 현탁액(이하, 본 실시예에서 아밀로이드 현탁액이라고 함)을 얻었다.
(2) 웅성 Wistar계 쥐(7주령)의 편측 편도핵에 상기 아밀로이드 현탁액을 2.5μL(25㎍ 상당) 주입하고, 대조로서 반대측의 편도핵에 인산 완충 생리 식염액(pH7.4)을 2.5μL 주입했다. 아밀로이드 현탁액 및 인산 완충 생리 식염액(pH7.4) 주입 1일 후의 쥐를 검체로 했다.
(3) 화합물 II-4를 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 시료 용액(시료 용액 중의 방사능 농도 30MBq/mL, 실시예 II-24) 및 화합물 II-6을 10㎎/mL 아스코르빈산 함유 생리 식염액에 용해한 시료 용액(시료 용액 중의 방사능 농도 30MBq/mL, 실시예 II-25)을 조제했다. 이 용액을 상기 쥐에 티오펜탈 마취하에서 미정맥으로부터 투여했다(투여량: 0.5mL, 투여한 방사능: 11~15MBq 상당).
(4) 투여 60분 후에 뇌를 적출하여 마이크로톰(형식: CM3050S, LEICA사제) 을 이용하여 두께 10㎛의 뇌절편을 제작했다. 상기 뇌절편을 이미징 플레이트 상에 서 20시간 노광시킨 후, 바이오 이미징 애널라이저(형식: BAS-2500, 후지 샤신 필름 가부시키가이샤제)를 이용하여 화상 해석을 행했다.
(5) 바이오 이미징 애널라이저를 사용한 상기 화상 해석의 종료 후, 티오플라빈 T에 의한 병리 염색을 행하고, 형광 현미경(가부시키가이샤 니콘제, 형식: TE2000-U형, 여기 파장: 400~440㎚, 검출 파장: 470㎚)을 사용한 이미징을 행하여 상기 절편 상에 아밀로이드가 침착되어 있는 것을 확인했다(도 2L 및 도 2M).
아밀로이드 뇌내 주입 쥐의 뇌절편에 있어서의 오토라디오그램 및 티오플라빈 T 염색의 이미지를 도 2L 및 도 2M에 나타낸다. 이들 도면에 나타내는 바와 같이, 화합물 II-4 및 II-6 중 어느 것을 투여한 검체에 있어서도 아밀로이드 현탁액을 주입한 측의 편도핵에 있어서 명백한 방사능 집적이 확인되었다. 한편, 생리 식염액을 주입한 측의 편도핵에 있어서는 다른 부위와 비교한 유의한 방사능 집적은 확인되지 않았다. 또한, 이 오토라디오그램 상에 있어서 아밀로이드 주입 부위 이외에 있어서의 방사능 집적은 거의 보여지지 않았다. 또한, 티오플라빈 T 염색의 결과로부터 방사능 집적 부위에 있어서 아밀로이드가 존재하고 있는 것이 확인되어 있다(도 2L 및 도 2M). 이상의 결과로부터 화합물 II-4 및 화합물 II-6은 뇌내 아밀로이드에 집적되는 성능을 갖고, 뇌내 아밀로이드의 묘출 능력을 갖는 것이 시사되었다.
본 발명에 따른 화합물은 진단 약분야에 있어서 이용할 수 있다.
Claims (25)
- 하기 식(1):
(식 중 A1, A2, A3 및 A4는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소,R1은 할로겐 치환기,R2는 할로겐 치환기,m은 0~2의 정수이다.단, 상기 R1 및 R2 중 어느 한쪽 이상은 방사성 할로겐 치환기이며, 또한, 상기 A1, A2, A3 및 A4 중 1개 이상은 탄소이며, 상기 R1은 탄소인 A1, A2, A3 또는 A4에 결합된다.)로 나타내어지는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염. - 제 1 항에 있어서, 상기 A1, A2, A3 및 A4 중 3개 이상은 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 2 항에 있어서, 상기 A1, A2, A3 및 A4는 모두 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R1은 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R2는 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 하기 식(2):
(식 중 A5, A6, A7 및 A8은 각각 독립적으로 탄소 또는 질소,R3은 비방사성 할로겐 치환기, 니트로 치환기, 알킬쇄의 탄소수가 1~4인 트리알킬스타닐 치환기 및 트리페닐스타닐기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기,R4는 비방사성 할로겐 치환기, 메탄술폰산 치환기, 트리플루오로메탄술폰산 치환기 및 방향족 술폰산 치환기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기,n은 0~2의 정수이다.단, 상기 A5, A6, A7 및 A8 중 1개 이상은 탄소이며, 상기 R3은 탄소인 A5, A 6, A7 또는 A8에 결합된다.)로 나타내어지는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염. - 제 6 항에 있어서, 상기 A5, A6, A7 및 A8 중 3개 이상은 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 7 항에 있어서, 상기 A5, A6, A7 및 A8은 모두 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 6 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R3은 염소, 요오드, 브롬, 니트로 치환기, 트리메틸스타닐 치환기, 트리부틸스타닐 치환기 및 트리페닐스타닐기로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 하기 식(1):
(식 중 A1, A2, A3 및 A4는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소,R1은 할로겐 치환기,R2는 할로겐 치환기,m은 0~2의 정수이다.단, 상기 R1 및 R2 중 어느 한쪽 이상은 방사성 할로겐 치환기이며, 또한, 상기 A1, A2, A3 및 A4 중 1개 이상은 탄소이며, 상기 R1은 탄소인 A1, A2, A3 또는 A4에 결합된다.)로 나타내어지는 화합물 또는 그 염을 함유해서 이루어지는 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제. - 제 10 항에 있어서, 상기 A1, A2, A3 및 A4 중 3개 이상은 탄소인 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
- 제 11 항에 있어서, 상기 A1, A2, A3 및 A4는 모두 탄소인 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
- 제 10 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R1은 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
- 제 10 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R2는 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
- 하기 식(3):
(식 중 A9, A10, A11 및 A12는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소,R5는 방사성 할로겐 치환기,R6은 수소, 수산기, 메톡시기, 카르복실기, 아미노기, N-메틸아미노기, N,N-디메틸아미노기 및 시아노기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기,p는 0~2의 정수이다.단, 상기 A9, A10, A11 및 A12 중 1개 이상은 탄소이며, 상기 R5는 탄소인 A9, A10, A11 또는 A12에 결합된다.)으로 나타내어지는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염. - 제 15 항에 있어서, 상기 A9, A10, A11 및 A12 중 3개 이상은 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 16 항에 있어서, 상기 A9, A10, A11 및 A12는 모두 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 15 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R5는 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 하기 식(4):
(식 중 A13, A14, A15 및 A16은 각각 독립적으로 탄소 또는 질소,R7은 비방사성 할로겐 치환기, 니트로 치환기, 알킬쇄의 탄소수가 1~4인 트리알킬암모늄기, 알킬쇄의 탄소수가 1~4인 트리알킬스타닐 치환기 및 트리페닐스타닐기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기,R8은 수소, 수산기, 메톡시기, 카르복실기, 아미노기, N-메틸아미노기, N,N-디메틸아미노기 및 시아노기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기,q는 0~2의 정수이다.단, 상기 A13, A14, A15 및 A16 중 1개 이상은 탄소이며, 상기 R7은 탄소인 A13, A14, A15 또는 A16에 결합된다.)로 나타내어지는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염. - 제 19 항에 있어서, 상기 A13, A14, A15 및 A16 중 3개 이상은 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 제 20 항에 있어서, 상기 A13, A14, A15 및 A16은 모두 탄소인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그 염.
- 하기 식(3):
(식 중 A9, A10, A11 및 A12는 각각 독립적으로 탄소 또는 질소,R5는 방사성 할로겐 치환기,R6은 수소, 수산기, 메톡시기, 카르복실기, 아미노기, N-메틸아미노기, N,N-디메틸아미노기 및 시아노기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 기,p는 0~2의 정수이다.단, 상기 A9, A10, A11 및 A12 중 1개 이상은 탄소이며, 상기 R5는 탄소인 A9, A10, A11 또는 A12에 결합된다.)으로 나타내어지는 화합물 또는 그 염을 함유해서 이루어지는 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제. - 제 22 항에 있어서, 상기 A9, A10, A11 및 A12 중 3개 이상은 탄소인 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
- 제 23 항에 있어서, 상기 A9, A10, A11 및 A12는 모두 탄소인 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
- 제 22 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R5는 18F, 76Br, 123I, 124I, 125I 및 131I로 이루어지는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 저독성 알츠하이머병 진단제.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JPJP-P-2006-140044 | 2006-05-19 | ||
| JP2006140044 | 2006-05-19 | ||
| JP2006324701 | 2006-11-30 | ||
| JPJP-P-2006-324701 | 2006-11-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20090010987A true KR20090010987A (ko) | 2009-01-30 |
Family
ID=38723203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020087028172A KR20090010987A (ko) | 2006-05-19 | 2007-05-15 | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8303935B2 (ko) |
| EP (1) | EP2019103B1 (ko) |
| JP (1) | JP5238496B2 (ko) |
| KR (1) | KR20090010987A (ko) |
| AT (1) | ATE535527T1 (ko) |
| AU (1) | AU2007252658B2 (ko) |
| BR (1) | BRPI0711818A2 (ko) |
| CA (1) | CA2653783A1 (ko) |
| ES (1) | ES2376491T3 (ko) |
| IL (4) | IL195378A0 (ko) |
| NO (1) | NO20085265L (ko) |
| NZ (1) | NZ573363A (ko) |
| RU (1) | RU2008150377A (ko) |
| TW (1) | TW200808795A (ko) |
| WO (1) | WO2007135890A1 (ko) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW200803903A (en) * | 2006-04-28 | 2008-01-16 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Novel compound having affinity to amyloid |
| ATE535527T1 (de) | 2006-05-19 | 2011-12-15 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Verbindung mit affinität zu amyloid |
| TW200811175A (en) * | 2006-06-21 | 2008-03-01 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Novel compound with affinity with amyloid |
| KR20090025282A (ko) * | 2006-06-21 | 2009-03-10 | 니혼 메디피직스 가부시키가이샤 | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 |
| JPWO2008056481A1 (ja) * | 2006-11-09 | 2010-02-25 | 日本メジフィジックス株式会社 | 放射性画像診断剤 |
| JPWO2008059714A1 (ja) * | 2006-11-17 | 2010-03-04 | 日本メジフィジックス株式会社 | 新規アミロイド親和性化合物 |
| TW200823211A (en) * | 2006-11-30 | 2008-06-01 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Novel compound having affinity for amyloid |
| US8343459B2 (en) | 2007-02-13 | 2013-01-01 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Method for production of radiation diagnostic imaging agent |
| TW200918102A (en) * | 2007-10-24 | 2009-05-01 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Novel compound having affinity for amyloid |
| CA2704027A1 (en) | 2007-10-26 | 2009-04-30 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Novel compound having affinity for amyloid |
| JPWO2009057577A1 (ja) * | 2007-10-30 | 2011-03-10 | 日本メジフィジックス株式会社 | 新規アミロイド親和性化合物の使用及び製造方法 |
| EP2216050A4 (en) * | 2007-10-30 | 2012-11-21 | Nihon Mediphysics Co Ltd | USE OF NEW COMPOUNDS WITH AMYLOID AFFINITY AND METHOD OF MANUFACTURING THEREOF |
| CA2704172A1 (en) * | 2007-10-30 | 2009-05-07 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Use of novel compound having affinity for amyloid, and process for production of the same |
| EP2218464A1 (en) * | 2009-02-11 | 2010-08-18 | Technische Universität München | Compounds for non-invasive measurement of aggregates of amyloid peptides |
| WO2011108236A1 (ja) * | 2010-03-01 | 2011-09-09 | 日本メジフィジックス株式会社 | 放射性ヨウ素標識有機化合物またはその塩 |
| AU2012259929B2 (en) | 2011-05-20 | 2016-08-04 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Novel compound having affinity for amyloid |
| AU2012274639B2 (en) | 2011-06-24 | 2016-08-11 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Novel compound with amyloid affinity |
| CA2907605A1 (en) | 2013-05-23 | 2014-11-27 | F. Hoffmann-La Roche Ag | 2-phenylimidazo[1,2-a]pyrimidines as imaging agents |
| US20200009273A1 (en) * | 2017-03-07 | 2020-01-09 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Radioactive fluorine-labeled precursor compound, and method for producing radioactive fluorine-labeled compound using same |
Family Cites Families (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4727145A (en) * | 1986-09-22 | 1988-02-23 | Ortho Pharmaceutical Corporation | 2- Or 3- aryl substituted imidazo [1,2-a]pyridines |
| US4833149A (en) * | 1986-09-22 | 1989-05-23 | Ortho Pharmaceutical Corporation | 2- or 3-aryl substituted imidazo[1,2-a]pyridines |
| US4871745A (en) * | 1986-09-22 | 1989-10-03 | Ortho Pharmaceutical Corporation | 2- or 3-aryl substituted imidazo(1,2-A)pyridines and their use as antisecretory agents |
| US4791117A (en) | 1986-09-22 | 1988-12-13 | Ortho Pharmaceutical Corporation | 2- or 3-aryl substituted imidazo[1,2-a]pyridines and their use as calcium channel blockers |
| DE4327027A1 (de) | 1993-02-15 | 1994-08-18 | Bayer Ag | Imidazoazine |
| EP0859642A2 (en) * | 1995-10-17 | 1998-08-26 | G.D. Searle & Co. | Method of detecting cyclooxygenase-2 |
| US6812327B1 (en) * | 1996-10-25 | 2004-11-02 | Human Genome Sciences, Inc. | Neutrokine-alpha polypeptides |
| EP1105163A4 (en) | 1998-08-20 | 2003-05-02 | Univ California | METHOD FOR MARKING AMYLOID PLAQUES AND NEUROFIBRILLIC GIFTS |
| JP4025468B2 (ja) * | 1999-07-29 | 2007-12-19 | 三井化学株式会社 | 有機電界発光素子 |
| AU2001249672A1 (en) * | 2000-03-31 | 2001-10-15 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Method for using 2- or 3-aryl substituted imidazo(1,2-a) pyridines as h3 antagonists |
| EP1268478B1 (en) | 2000-03-31 | 2007-05-02 | Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc. | Phenyl-substituted imidazopyridines |
| US20010051632A1 (en) * | 2000-03-31 | 2001-12-13 | Wenying Chai | Phenyl-substituted indolizines and tetrahydroindolizines |
| DE10040016A1 (de) * | 2000-08-16 | 2002-02-28 | Boehringer Ingelheim Pharma | Neue beta-Amyloid Inhibitoren, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel |
| US6514969B2 (en) * | 2000-08-16 | 2003-02-04 | Boehringer Ingelheim Pharma Kg | β-amyloid inhibitors, processes for preparing them, and their use in pharmaceutical compositions |
| WO2002016333A2 (en) | 2000-08-24 | 2002-02-28 | University Of Pittsburgh | Thioflavin derivatives and their use in diagnosis and theraphy of alzheimer's disease |
| MXPA03007595A (es) * | 2001-02-26 | 2003-12-04 | Bristol Myers Squibb Pharma Co | Analogos de acido ascorbico para metalorradiofarmaceuticos. |
| US6596731B2 (en) | 2001-03-27 | 2003-07-22 | Hoffmann-La Roche Inc. | Substituted imidazo[1,2-A] pyridine derivatives |
| TWI245764B (en) * | 2001-04-23 | 2005-12-21 | Hank F Kung | Amyloid plaque aggregation inhibitors and diagnostic imaging agents |
| CN1518550A (zh) | 2001-06-21 | 2004-08-04 | ʷ��˿�������ȳ�ķ����˾ | 用于预防和治疗疱疹病毒感染的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物 |
| JP4436928B2 (ja) | 2001-08-27 | 2010-03-24 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | スチルベン誘導体、およびアミロイド斑の結合および画像化のためのその使用 |
| GB0205281D0 (en) * | 2002-03-06 | 2002-04-17 | Novartis Ag | Organic compounds |
| AU2003242233A1 (en) | 2002-06-12 | 2003-12-31 | Bf Research Institute, Inc. | Probe compound for image diagnosis of disease with amyloid accumulation, compound for staining age spots/diffuse age spots, and remedy for disease with amyloid accumulation |
| CA2496633A1 (en) * | 2002-08-30 | 2004-04-29 | Bf Research Institute, Inc. | Diagnostic probes and remedies for diseases with accumulation of prion protein, and stains for prion protein |
| JP2006505610A (ja) | 2002-11-05 | 2006-02-16 | イヨン ベアム アプリカスィヨン エッス．アー． | １８−ｆ標識放射性製剤の安定化 |
| NZ548098A (en) | 2003-12-31 | 2010-05-28 | Schering Plough Ltd | Control of parasites in animals by the use of imidazo[1,2-b]pyridazine derivatives |
| TW200803903A (en) | 2006-04-28 | 2008-01-16 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Novel compound having affinity to amyloid |
| ATE535527T1 (de) | 2006-05-19 | 2011-12-15 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Verbindung mit affinität zu amyloid |
| KR20090025282A (ko) * | 2006-06-21 | 2009-03-10 | 니혼 메디피직스 가부시키가이샤 | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 |
| TW200918102A (en) * | 2007-10-24 | 2009-05-01 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Novel compound having affinity for amyloid |
| CA2704027A1 (en) * | 2007-10-26 | 2009-04-30 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Novel compound having affinity for amyloid |
| EP2216050A4 (en) * | 2007-10-30 | 2012-11-21 | Nihon Mediphysics Co Ltd | USE OF NEW COMPOUNDS WITH AMYLOID AFFINITY AND METHOD OF MANUFACTURING THEREOF |
-
2007
- 2007-05-15 AT AT07743357T patent/ATE535527T1/de active
- 2007-05-15 TW TW096117253A patent/TW200808795A/zh unknown
- 2007-05-15 US US12/227,487 patent/US8303935B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-15 RU RU2008150377/04A patent/RU2008150377A/ru not_active Application Discontinuation
- 2007-05-15 EP EP07743357A patent/EP2019103B1/en not_active Not-in-force
- 2007-05-15 CA CA002653783A patent/CA2653783A1/en not_active Abandoned
- 2007-05-15 JP JP2008516608A patent/JP5238496B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-15 NZ NZ573363A patent/NZ573363A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-05-15 WO PCT/JP2007/059922 patent/WO2007135890A1/ja active Application Filing
- 2007-05-15 ES ES07743357T patent/ES2376491T3/es active Active
- 2007-05-15 BR BRPI0711818-0A patent/BRPI0711818A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-05-15 KR KR1020087028172A patent/KR20090010987A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-05-15 AU AU2007252658A patent/AU2007252658B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-11-19 IL IL195378A patent/IL195378A0/en unknown
- 2008-12-16 NO NO20085265A patent/NO20085265L/no not_active Application Discontinuation
-
2010
- 2010-11-30 IL IL209650A patent/IL209650A0/en unknown
- 2010-11-30 IL IL209649A patent/IL209649A0/en unknown
- 2010-11-30 IL IL209651A patent/IL209651A0/en unknown
-
2012
- 2012-06-29 US US13/537,422 patent/US8506930B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO20085265L (no) | 2009-02-18 |
| US20090252679A1 (en) | 2009-10-08 |
| IL209650A0 (en) | 2011-02-28 |
| EP2019103B1 (en) | 2011-11-30 |
| ATE535527T1 (de) | 2011-12-15 |
| AU2007252658B2 (en) | 2012-03-29 |
| JPWO2007135890A1 (ja) | 2009-10-01 |
| IL209649A0 (en) | 2011-02-28 |
| ES2376491T3 (es) | 2012-03-14 |
| NZ573363A (en) | 2012-01-12 |
| EP2019103A4 (en) | 2010-05-05 |
| US20120271053A1 (en) | 2012-10-25 |
| RU2008150377A (ru) | 2010-06-27 |
| BRPI0711818A2 (pt) | 2011-12-13 |
| TW200808795A (en) | 2008-02-16 |
| JP5238496B2 (ja) | 2013-07-17 |
| US8506930B2 (en) | 2013-08-13 |
| IL195378A0 (en) | 2011-08-01 |
| WO2007135890A1 (ja) | 2007-11-29 |
| EP2019103A1 (en) | 2009-01-28 |
| AU2007252658A1 (en) | 2007-11-29 |
| IL209651A0 (en) | 2011-02-28 |
| CA2653783A1 (en) | 2007-11-29 |
| US8303935B2 (en) | 2012-11-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20090010987A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| KR20100101577A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물의 사용 및 제조 방법 | |
| KR20090025282A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| WO2008118122A2 (en) | Compounds and amyloid probes thereof for therapeutic and imaging uses | |
| KR20100091965A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| KR20100072344A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| JP5048655B2 (ja) | 新規アミロイド親和性化合物 | |
| KR20140040722A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| KR20090083414A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| KR20100089858A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물의 사용 및 제조 방법 | |
| KR101854228B1 (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| KR20090091287A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물 | |
| KR20100101576A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물의 사용 및 제조 방법 | |
| KR20100094478A (ko) | 신규 아밀로이드 친화성 화합물의 사용 및 제조 방법 | |
| CN101466711A (zh) | 对淀粉状蛋白具有亲和性的新化合物 | |
| JP5247442B2 (ja) | 新規アミロイド親和性化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| WITN | Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid |