KR20070083302A

KR20070083302A - 에모딘을 포함하는 피부주름 개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20070083302A
Application number: KR1020060015431A
Authority: KR
Inventors: 박덕훈; 이종성; 정은선; 현창구; 홍성택
Original assignee: 바이오스펙트럼 주식회사
Priority date: 2006-02-17
Filing date: 2006-02-17
Publication date: 2007-08-24
Also published as: WO2007094533A1

Abstract

본 발명은 에모딘을 포함하는 콜라겐 분해를 억제하고 콜라겐 합성을 촉진하는 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물은 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하여 세포재생을 촉진하며 피부의 주름을 완화하고 피부에 탄력을 부여하는 기능을 가지며 화장품 등의 피부외용제에 사용될 수 있다.

에모딘, 주름, 콜라겐

Description

에모딘을 포함하는 콜라겐 분해를 억제하고 콜라겐 합성을 촉진하는 조성물{Composition for inhibiting collagen degradation and promoting collagen synthesis comprising emodin}

도 1은 에모딘 (emodin)에 의한 콜라겐 생합성 촉진효과의 결과를 나타낸 것이다 (RA: retinoic acid, Ed:emodin).

도 2는 에모딘에 의한 세포증식 유도 효과를 나타낸 것이다 FGF-2:fetal growth factor-2, Ed:emodin).

도 3은 에모딘에 의한 콜라게네이즈 활성 억제효과의 결과를 나타낸 것이다 (Ed:emodin).

도 4는 콜라게네이즈 활성을 억제하는 에모딘의 작용기작을 나타낸 것이다 (Ed: emodin, TNF alpha:tumor necrosis factor alpha).

도 5는 에모딘이 p42/22 mapk, JNK, p38mapk의 인산화 (phsophorylation)에 미치는 효과를 나타낸 것이다 (Ed:emodin)

본 발명은 피부주름 개선용 유효성분으로서의 에모딘 (emodin)과 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

피부 주름형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량과 콜라겐의 함량을 감소시키는 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 발현량과 활성이다.

콜라겐은 피부 진피층에 존재하는 고분자 물질로서 피부에 탄력을 부여하는 주요 성분 중 하나로 알려져 있다. 콜라겐 분해를 촉진하는 요인으로는 크게 자연노화에 의한 것과 스트레스와 같은 외부 환경적인 것을 들 수 있다.

그러므로 피부주름을 개선시키는 방법으로 콜라겐 생합성을 촉진시키고, 동시에 콜라게네이즈 활성을 억제할 수 있는 물질을 찾고자 하는 노력이 시도되고 있다.

에모딘은 전통적으로 완하제(緩下劑)로 사용되어온 Rheum palmatum에 존재하는 안트라퀴논(anthraquinone) 유도체이다. 에모딘의 생물학적인 활성으로는 면역억제효과, 간보호효과, 항암효과 등이 있는 것으로 밝혀져 있다. 에모딘은 3-메틸-1,6,8-트리하이드록실안트라퀴논(3-methyl-1,6,8-trihydroxyanthraquinone)으로서 화학식 구조는 하기와 같다.

본 발명자는 에모딘이 콜라겐 분해를 억제하고 콜라겐 생성을 촉진하는 활성을 가지는 것을 규명하고 실제 피부 주름 개선 활성을 가지는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 하나의 목적은 에모딘을 포함하는 콜라겐 분해를 억제하고 콜라겐 합성을 촉진하는 조성물을 제공하기 위함이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 피부외용제를 제공하기 위함이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 화장품을 제공하기 위함이다.

하나의 양태로서 본 발명은 에모딘을 포함하는 콜라겐 분해를 억제하고 콜라겐 합성을 촉진하는 조성물에 관한 것이다.

본 발명자는 에모딘 (emodin)의 하기와 같은 생리학적 활성을 밝혔다.

에모딘은 콜라겐 합성을 증진시킨다. 사람 정상 섬유아세포 (Human normal fibroblast, 태평양)에서 에모딘을 처리한 후, 콜라겐 합성량을 측정해 본 결과, 에모딘은 농도 의존적으로 콜라겐 합성 촉진 효과를 가지는 것을 확인할 수 있었다.

에모딘은 세포를 증식시킨다. 사람 정상 섬유아세포를 혈청-비함유 상태로 세포를 배양하고 에모딘 처리에 의한 세포 증식 정도를 MTT 어세이 방법을 이용하여 측정한 결과, 에모딘이 농도 의존적으로 인간 섬유 아세포의 증식을 유도하는 것을 확인할 수 있었다.

에모딘은 콜라겐 분해를 억제한다. 에모딘을 콜라겐을 분해시키는 효소인, 콜라게네이즈의 활성과 발현을 억제하는 기작으로 콜라겐 분해 억제 활성을 가진다. 에모딘은 콜라게네이즈(MMP-1)의 AP-1 프로모터를 억제함으로써 작용하며 에모딘의 AP-1 프로모터 활성을 유도는 JNK와 p42/44mapk의 활성을 억제하여 작용하는 것을 확인할 수 있었다.

상기한 바와 같이 에모딘은 세포내에서 콜라겐의 분해를 억제하고 합성을 촉진하는 활성을 가지므로 에모딘은 피부 주름 개선 효과를 가진다. 실제, 본 발명의 구체적인 실시에서 살펴본 바에 의하면, 피부주름 개선 효과를 피부탄력으로 측정한 결과, 에모딘을 함유한 크림을 사용한 사람은 에모딘을 함유하지 않은 크림을 사용한 사람에 비하여 피부탄력이 월등히 증가하였으며 에모딘의 함유 농도가 증가함에 따라 피부탄력도 향상되는 것을 확인할 수 있었다.

에모딘은 조성물의 총중량에 대하여 0.001 내지 20 중량비(w/w%), 바람직하게는 0.01 내지 5 중량비(w/w%)의 함량으로 포함될 수 있다.

본 발명의 조성물은 상기한 바와 같은 에모딘 외에 피부 주름 개선 효과에 유해한 효과를 끼치지 않는 한, 추가의 주름 개선 효과를 갖는 활성 물질을 함께 포함할 수 있다.

상기한 본 발명의 조성물은 피부 주름 개선을 위한 의약품, 식품, 화장품 등에 적용할 수 있으며, 경구용(내용) 또는 비경구용(외용)의 형태를 취할 수 있다.

경구용의 경우, 예를 들어 의약내용품 또는 식품의 형태로 제형화 할 수 있으며, 비경구용(외용)의 경우, 화장품, 의약외용품 등의 형태의 제형화 할 수 있다. 이들 제형은 당업계에 주지된 통상의 담체 또는 첨가제와 배합될 수 있다.

또 다른 양태로서 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 피부외용제에 관한 것이다.

피부누적 자극시험을 실시한 결과, 에모딘은 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었으로 피부 외용제로 사용이 적합하다. 상기 조성물의 제형은 특별히 제한되지 않는다. 예들 들어, 파우더(power), 젤(gel), 연고(ointment), 크림(cream), 액체(liquid), 에어로졸(aerosol) 등의 제형을 가진다.

바람직한 양태에서, 적용가능한 피부외용제의 한 형태는 화장품이다. 화장품은 에모딘 외에도 외에 다른 성분들을 기타 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 맞게 임의로 선정하여 첨가할 수 있다. 본 발명의 화장품에는, 정제수, 유분, 계면활성제, 보습제, 고급 알콜, 킬레이트제, 색소, 지방산, 산화방지제, 방부제, 왁스, pH조절제, 향료 등이 배합될 수 있다.

유분으로는 미네랄오일, 사이클로메치콘, 스쿠알란, 옥틸도데실 미리스테이트, 올리브오일, 마카다미아 너트오일, 글리세릴옥타노에이트, 캐스터오일, 에칠헥실 이소노나노에이트, 디메치콘, 사이크로펜타실록산, 선플라워씨드오일 등이 사용될 수 있다. 계면활성제로는 소르비탄세스퀴놀리에이트, 폴리솔베이트 60, 글리세릴 스테아레이트, 친유형 글리세릴스테아레이트, 소르비탄 올리에이트, 소르비탄 스테아레이트, 디이에이-세틸포스페이트, 소르비탄스테아레이트/슈크로스코코에이트, 글리세릴스테아레이트/폴리에틸렌글라이콜-100 스테아레이트, 세테아레스-6 올리베이트, 아라키딜알코올/베헤닐알코올/아라키딜 글루코사이드. 폴리프로필렌글라이콜-26-부테스-26/폴리에틸렌글라이콜-40 하이드로제네이티드 캐스터오일 등이 사용될 수 있다. 보습제로는 글리세린, 솔비톨, 프로필렌 글라이콜, 부틸렌 글라이콜, 헥실렌 글라이콜, 디글리세린, 베타인, 글리세레스-26, 메칠글루세스-20 등이 사용될 수 있다. 고급 알콜로는 세틸알코올, 스테아릴 알코올, 옥틸도데칸올, 이소스테아릴 알코올 등이 사용될 수 있다. 증점제로는 산탄검, 카보머, 마그네슘알루미늄실리케이트, 셀룰로오스검, 덱스트린 팔미테이트 등이 사용될 수 있다. 킬레이트제로는 디소듐이디티에이, 테트라소듐이디티에이 등이 사용될 수 있다. 색소로는 청색1호, 적색40호, 황색4호, 황색 5호 등이 사용될 수 있다. 지방산으로는 스테아릭애씨드, 미리스틱애씨드, 팔미틱애씨드, 이소스테아릭애씨드, 라우릭애 씨드 등이 사용될 수 있다. 산화방지제로는 토코페릴아세테이드, 부틸레이티드하이드록시톨루엔 등이 사용될 수 있다. 방부제로는 메칠파라벤, 부틸파라벤, 프로필파라벤, 페녹시에탄올, 이미다졸리디닐우레아, 클로르페네신 등이 사용될 수 있다. 왁스로는 카나우바왁스, 칸데닐라왁스, 밀납, 경납 등이 사용될 수 있다. pH조절제로는 트리에탄올아민, 씨트릭애씨드 등이 사용될 수 있다. 향료로는 천연향료, 조합향료 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물로 제조되는 화장품의 제형은 특별히 제한되는 바가 없으며, 예를 들면, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림 등의 제형을 가질 수 있다.

다음의 실시예는 본 발명의 내용을 설명하나, 본 발명의 내용이 여기에 한정되지는 않는다.

실시예 1: 에모딘의 콜라겐 합성 증진 효과

사람의 정상 섬유 아세포 (Human normal fibroblast, 태평양)를 DMEM 배지가 들어 있는 6-웰 마이크로 플레이트에 접종시키고 (2 X 10⁵세포/웰) 5% 농도의 CO₂ 배양기에 37℃로 24시간 배양하였다. 24시간 후, 각 웰에서 배지를 제거한 후, FBS을 0.05% 포함하는 DMEM에 시료 0.025ppm, 0.25ppm, 1.25ppm, 2.5ppm, 5.0ppm을 처 리한 후, 24시간 동안 다시 배양하였다. 24시간 후, 세포배지를 수집하여 샘플을 제조하였다.

콜라겐 합성량은 콜라겐 측정 키트 (Procollagen Type I C-peptide EIA kit (MK101), Takara, Kyoto, Japan)를 이용하여 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (Type I C-peptide: PICP)의 양을 측정하였다. 콜라겐 키트에 포함된 표준용액을 희석한 후, 450nm에서 흡광도를 측정하여 표준농도 곡선을 작성하였다. 각 웰에 POD 효소가 붙어 있는 항체용액을 100ul 첨가하고 농도별로 희석한 표준용액과 상기 샘플의 상층액을 각각 20ul를 첨가하여 혼합하였다. 상기 혼합액을 37 에서 흡광도를 측정하였다. 이 실험은 동시에 2회씩 수행하여 그 평균값을 구하였다. PICP양은 표준농도 곡선에 샘플의 흡광도를 대입하여 계산하였으며 ng/2 X 10⁵세포로 환산하였다.

그 결과, 에모딘은 사람의 정상 섬유 아세포에서 콜라겐I의 합성을 증진시켰다. 그 결과를 도 1에 나타내었다. RA(레티노익산)은 양성대조구로 1 microM(uM)로 처리되었다.

실시예 2: 에모딘의 세포증식 효과

사람 정상 섬유아세포 배양을 이용하여 에모딘에 대한 세포 증식효과를 테스 트하기 위해 시료 0.025ppm, 0.25ppm, 1.25ppm, 2.5ppm, 5.0ppm농도로 처리 후, 혈청-비함유 상태로 세포를 배양하여 세포의 증식 효과를 MTT(3-(4,5-dimetylthiazol-2-yl)2,5-diphenyltetrazolium bromide) 어세이 방법을 이용하여 측정하였다. MTT는 담황색의 기질로서 생세포의 미토콘드리아 내의 호흡쇄효소에 의해 개열하고 암청색의 포마잔을 생성한다. 죽은 세포에서는 반응이 일어나지 않으므로 이 포마잔의 생성량은 생세포수 측정에 이용된다.

실험결과, 에모딘은 농도 의존적으로 인간 섬유 아세포의 증식을 유도한다는 사실을 알 수 있었다 (도 2).

실시예 3: 에모딘의 콜라게네이즈 활성 억제 효과

사람의 정상 섬유 아세포 (Human normal fibroblast)를 DMEM 배지가 들어 있는 6-웰 마이크로 플레이트에 접종시키고 (2 X 10⁵세포/웰) 5% 농도의 CO₂ 배양기에 37℃로 24시간 배양하였다. 4시간 후, 각 웰에서 배지를 제거한 후 FBS를 0.05% 포함하는 DMEM 배지에서 16시간 동안 serum-starvation을 유도하였다. 16시간 후에 TNF-alpha (20ng/ml) 단독 또는 시료 (0.025ppm, 0.25ppm, 2.5ppm, 5.0ppm)와 함께 24시간 처리하였다. 24시간 후, 세포배지를 수집하여 샘플을 제조하였다.

콜라겐을 분해하는 효소인 콜라게네이즈의 활성정도를 측정하는 방법으로 콜라게나제에 대한 항체를 이용하였다. 타입 I 콜라게나제 어세이 키트 (Amersham Biosciences, RPN2629)를 이용하였으며, ELISA 판독기로 흡광도를 측정하였다. 측정된 표준치는 평균+표준편차의 형태로 표시하였고 SPSS/PC+ 프로그램을 이용하여 t-test로 유의성을 검정하였고 그 결과를 도 3에 나타내었다.

실시예 4: 에모딘의 AP -1 프로모터 활성 억제 효과

콜라겐을 분해하는 효소인 콜라게네이즈 (MMP-1)의 활성을 조절하는 emmodin의 억제 메카니즘을 규명하기 위한 실험을 수행하였다. 콜라게네이즈 (MMP-1)의 발현에 중요한 역할을 수행하는 요소인 프로모터에는 AP-1 element가 존재한다고 보고되어 있다. 그러므로 에모딘이 AP-1프로모터의 활성을 억제하므로써 콜라게네이즈 활성을 억제하는 지의 여부를 보기위해, AP-1 프로모터 리포터 (AP-1 promoter reporter)실험을 수행하였다. AP-1 reporter DNA를 인간 섬유아세포 세포에 superfect를 이용하여 삽입하므로써,형질전환을 유도하였고, 형질전환된지 24시간 후에 TNF-alpha (10 ng/ml)와 에모딘을 처리하였다. 16시간이 경과되면, 세포를 수집한 후, Luminometer (Berthold, Germany)를 이용하여 450nm에서 luminescence를 측정한다 (참고: Planta medica 2005; 71:338-343).

도 4에 나타난 것 같이 TNF alpha에 의해 유도된 AP-1 프로모터 활성이 에모딘에 의해 농도 의존적으로 크게 감소되는 현상을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과는 에모딘이 콜라게네이즈인 MMP-1의 활성과 발현을 AP-1 프로모터를 억제하므로써, 그 억제 작용을 나타냄을 시사한다.

실시예 5: 에모딘의 MAPK 의 인산화 억제 효과

도 4에서 에모딘이 TNF alpha에 의한 AP-1 프로모터 활성을 억제함을 알 수 있었다. 이러한 에모딘의 억제 작용이, AP-1 프로모터 활성을 유도하는 단백질 키나아제 (protein kinae)에 영향을 끼쳐서 발생하는 지의 여부를 웨스턴 블랏 (Western blot)를 통해 알아 보았다. 우선 인간 섬유 아세포 (human normal fibroblast cell)를 TNF alpha로 처리함과 동시에 에모딘을 처리하여 4시간 동안 인큐베이션하였다. 4시간 후, 세포를 수집한 후 Phospho-MAPK, phospho-JNK, phospho-p38mapk (Cell signaling technology)에 대한 웨스턴 블랏을 수행하였다. 도 5에 제시된 것처럼, 에모딘은 JNK와 p42/44mapk의 인산화(phosphorylation)는 억제한 반면, p38mapk의 인산화에는 전혀 억제 효과를 나타내지 않았다. 이러한 결과를 토대로, 에모딘은 AP-1 프로모터를 억제함에 있어서 JNK와 p42/44mapk의 활성을 억제하므로써, 그 억제 작용을 나타냄을 알 수 있었다. 더 나아가, 콜라게네이즈 활성억제 작용도 p42/44mapk와 JNK의 활성을 억제하므로써 나타남을 알 수 있었다 (도 5).

제조예 : 에모딘을 함유한 화장료 조성물

A. 에모딘을 함유한 크림

에모딘을 함유한 영양 크림의 제조예는 하기 표 1에 나타낸 바와 같다. 수상인 정제수, 트리에탄올 아민, 프로필렌글리콜을 70℃로 가열하고 용해시키고, 여기에 유상인 지방산, 유성성분, 유화제 및 방부제를 70℃로 가열하여 용해한 액을 첨가하여 유화시켰다. 유화가 완료된 후 상기 용액을 45℃로 냉각시키고 에모딘과 향을 첨가하고 분산시킨 다음 30℃로 냉각하였다.

에모딘을 함유한 영양크림의 성분 및 함량

성분	함량 (중량%)
에모딘 (emodin)	1% 또는 2.0 또는 5.0%
호호바 오일	5.0
유동 파라핀	7.0
세틸아릴 알코올	2.0
폴리글리세릴-3 메칠 글루코스 디스테아레이	2.0
글리세릴 스테아레이트	0.5
스쿠알란	3.0
프로필렌글리콜	4.0
글리세린	5.0
트리에탄올 아민	0.3
카르복시 비닐폴리머	0.3
토코페릴 아세테이트	0.2
방부제, 향	미량
정제수	잔량
합계	100

B. 에모딘을 함유한 화장수

a) 유연 화장수

에모딘을 함유한 유연 화장수의 제조예는 하기 표 2에 나타낸 바와 같다. 수성 성분에 정제수를 가하고 실온에서 용해시켜 수상을 제조하였다. 에모딘, 유성성분, 유화제, 방부제, 향을 실온에서 용해시킨 후, 수상에 첨가하여 혼합하고 여과하였다.

에모딘을 함유한 유연 화장수의 성분 및 함량

성분	함량 (중량%)
에모딘 (emodin)	1.00
EDTA	0.05
피이지 1500	4.00
카보머	0.16
1,3 부틸렌 글라이콜	3.00
폴리옥시에틸렌 하이드로제네이티드 캐스터 오일	0.45
트리에탄올아민	0.12
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합계	100

b) 수렴 화장수

에모딘을 함유한 수렴 화장수의 제조예는 하기 표 3에 나타낸 바와 같다. 수성 성분에 정제수를 가하고 실온에서 용해시켜 수상을 제조하였다. 에모딘, 유상성분, 유화제, 방부제, 향에 에탄올을 가하여 실온에서 용해시켜 알코올상을 제조한 다음 수상에 첨가하여 혼합하고 여과하였다.

에모딘을 함유한 수렴화장수의 성분 및 함량

성분	함량 (중량%)
에모딘	1.00
글리세린	2.00
1,3 부틸렌글라이콜	3.00
EDTA	0.05
에탄올	7.00
폴리옥시에틸렌 하이드로제네이티드 캐스터 오일	0.40
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합계	100

C. 로션

에모딘을 함유한 로션의 제조예는 하기 표 4에 나타낸 바와 같다. 수상인 정제수, 트리에탄올 아민, 부틸렌 글라이콜을 70℃로 가열하여 용해시키고, 여기에 유상인 지방산, 유성성분, 유화제 및 방부제를 70℃로 가열하여 용해한 액을 첨가하여 유화시켰다. 유화가 완료된 후 친수성 증점제인 산탄검 2% 용액을 첨가하여 전체에 대해 0.05 중량%가 되도록 조절하였다. 상기 용액을 45℃로 냉각시킨 후, 에모딘, 향 및 색소를 첨가하고 혼합한 다음 30℃로 냉각하였다.

에모딘을 함유한 로션의 성분 및 함량

성분	함량 (중량%)
에모딘 (emodin)	1.00
글리세린	3.00
카보머	0.10
산탄검	0.05
1,3 부틸렌 글라이콜	3.00
폴리글리세린-3 메칠글루코스 디스테아레이트	1.50
글리세린 스테아레이트	0.50
세테아릴 알코올	0.30
호호바 오일	3.00
유동 파라핀	2.00
스쿠알란	3.00
디메치콘	0.50
토코페릴아세테이트	0.20
트리에탄올아민	0.10
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합계	100

D. 겔

에모딘을 함유한 겔의 제조예는 하기 표 5에 나타낸 바와 같다.

에모딘을 함유한 젤의 성분 및 조성

성분	함량 (중량 %)
에모딘 (emodin)	1.00
EDTA	0.02
1,3 부틸렌 글라이콜	4.00
카보머	0.60
글리세린	5.00
하이드록시에틸 셀룰로오스	0.15
트리에탄올 아민	0.50
트리클로산	0.20
에탄올	5.00
폴리옥시 에틸렌하이드로제네이티드 캐스터 오일	4.00
방부제, 향, 색소	미량
정제수	미량
합계	100

E. 에센스

에모딘을 함유한 에센스의 제조예는 하기 표 6에 나타낸 바와 같다. 정제수에 점증제를 천천히 교반하면서 가하여 균일하게 분산시켰다. 수상 성분들을 혼합하여 수상을 제조하였다. 유화제, 피부 유연제, 향, 방부제에 에탄올을 가하여 용해시켰다. 수상에 알코올상을 교반하면서 가하고 알칼리제를 첨가하였다. 최종적으로 에모딘과 색소를 첨가하였다.

에모딘을 함유한 에센스의 성분 및 함량

성분	함량 (중량 %)
에모딘 (emodin)	1.00
EDTA	0.05
포타슘-세틸포스페이트	0.30
글리세린	5.00
1,3 부틸렌 글라이콜	4.00
글리세릴스테아레이트/피이지-100 스테아레이트	0.50
소르비탄스테아레이트	0.30
호호바 오일	0.50
마카데미아 넛 오일	0.50
토코페릴아세테이트	0.50
부틸레이티드하이드록시 톨루엔	0.05
디메치콘	3.00
폴리아크릴아마이드/C13-14 이소파라핀/라우레쓰-7	1.50
글리세릴폴리메타아크릴레이트/프로필렌 글라이콜	5.00
에탄올	3.00
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합계	100

비교 제조예 : 정제수를 함유한 크림

상기 제조예 A에서 에모딘을 첨가하지 않고 정제수로 대체한 크림의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량 (중량 %)
호호바 오일	5.0
유동 파라핀	7.0
세틸아릴 알코올	2.0
폴리글리세릴-3 메칠 글루코스 디스테아레이트	2.0
글리세릴 스테아레이트	0.5
스쿠알란	3.0
프로필렌 글리콜	4.0
글리세린	5.0
트리 에탄올 아민	0.3
카르복시 비닐폴리머	0.3
토코페릴 아세테이트	0.2
방부제, 향	미량
정제수	잔량
합계	100

실시예 3: 에모딘의 인체 피부에 대한 안전성 확인 실험

에모딘이 인체피부에 안전한지 확인하기 위하여, 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다. 이를 위해 피부누적자극시험을 실시하였다.

스쿠알렌을 베이스로 에모딘을 각각 1%, 5%, 10%를 첨가한 제형을 제조하고, 이를 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적 첩포를 시행하여 에모딘이 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.

첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15ul씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 1을 이용하여 점수화 하였으며, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.

평균반응도=[[반응지수 x 반응도/ 총피검자수 x 최고점수 (4점)] x 100 ] ÷ 검사회수 (9회)

반응도에서 ± 는 1점, +는 2점, ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다.

상기 표 8에서 시험군 1, 2,3 모두 ±, +, ++에 해당하는 사람의 수가 각각 2명, 0명, 0명이고, 평균 반응도는 0.18이었다. 그러므로 평균반응도가 3이하의 반응도를 나타내므로, 에모딘은 뚜렷한 누적자극 양상을 나타내지 않는 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었다.

실시예 4: 에모딘 ( emodin )을 함유한 화장료의 주름개선 효과 측정

에모딘을 함유한 화장료의 주름 개선효과를 임상 시험을 통하여 측정하였다. 제조예 A (에모딘을 각각 1%, 2%, 5% 함유한 영양 크림), 및 비교 제조예 (정제수를 함유한 영양 크림)에서 제조한 영양 크림을 사용하였다.

주름개선 효과는 피부탄력 변화의 측정을 통해 평가하였다. 피부탄력의 측정은 온도 24 내지 26℃, 습도 38 내지 40%로 일정하게 유지되는 조건에서 건강한 여성 30명 (25 내지 35세)을 대상으로 제조예 A의 3종류와 비교 제조예의 영양 크림을 각각 피검자의 얼굴에 1일 2회씩 3개월 동안 사용하게 한 후, Cutometer SEM 474를 이용하여 측정함으로써 이루어졌으며, 판정기준은 피부탄력이 없는 경우를 0, 많은 경우를 5로 하여 상대적인 값을 비교하였다. 시험결과는 하기 표 9에 나타내었다.

표 9에 나타난 바와 같이, 본 발명의 제조예 A가 비교 제조예에 비해 주름개선 효과가 훨씬 우수하였으며, 에모딘의 함유 농도가 증가함에 따라 피부탄력도 향상되었다.

본 발명에 따라 에모딘은 임상 시험결과, 우수한 주름개선 효과가 있고, 피부에 대한 자극이 거의 없어 새로운 주름 개선용 원료로 이용가능함이 확인 되었다. 에모딘을 이용함으로써, 외산 원료의 수입억제 효과와 더불어 원료의 국제 경쟁력 향상을 통해 국내 화장품 업계의 발전에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

Claims

에모딘을 포함하는 콜라겐 분해를 억제하고 콜라겐 합성을 촉진하는 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 피부 주름 개선 효과를 가지는 조성물.
제1항에 있어서, 에모딘이 조성물의 총중량을 기준으로 0.001 내지 20.0 중량비(w/w%)로 포함되는 것인 조성물.
제1항의 조성물을 포함하는 피부외용제.
제4항에 있어서, 상기 조성물이 파우더, 젤, 연고, 크림, 액체 또는 에어로졸의 제형을 가지는 피부외용제.
제1항의 조성물을 포함하는 화장품.
제6항에 있어서, 화장품의 제형이 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림인 피부외용제.