KR20070009581A - 종양 및 전이성 질환 치료 방법 및 조성물 - Google Patents

종양 및 전이성 질환 치료 방법 및 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20070009581A
KR20070009581A KR1020067018079A KR20067018079A KR20070009581A KR 20070009581 A KR20070009581 A KR 20070009581A KR 1020067018079 A KR1020067018079 A KR 1020067018079A KR 20067018079 A KR20067018079 A KR 20067018079A KR 20070009581 A KR20070009581 A KR 20070009581A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
tumor
immunoglobulin
administered
melanoma
natalizumab
Prior art date
Application number
KR1020067018079A
Other languages
English (en)
Inventor
낸시 베너
Original Assignee
엘란 파마슈티칼스, 인크.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 엘란 파마슈티칼스, 인크. filed Critical 엘란 파마슈티칼스, 인크.
Publication of KR20070009581A publication Critical patent/KR20070009581A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
    • C07K16/2842—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily against integrin beta1-subunit-containing molecules, e.g. CD29, CD49
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation

Abstract

본 발명은 림프종, 백혈병, 전립선암, 및 전이성 질환의 치료용 조성물, 방법 및 병용요법을 제공한다. 구체적으로, 본 발명은 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린 리간드(예컨대, MadCAM-1 및 VCAM-1)에 결합하는 면역글로블린을 포함하는 조성물의 종양 성장과 진행의 억제 및 전이의 억제에 관한 용도를 개시한다. 종양 및 전이를 치료하는데 사용되는 바람직한 면역글로블린은 나탈리주마브이다. 상기 면역글로블린을 이용한 조성물과 방법은 단독 또는 다른 시약들 및 다른 암 치료 방식과 병용하여 사용될 수 있다.
종양, 전이성질환, α4 인테그린, 면역글로블린

Description

종양 및 전이성 질환 치료 방법 및 조성물{METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING TUMORS AND METASTATIC DISEASE}
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2004년 2월 6일에 미국에 가출원된 미국 가출원 번호 제 60/541,946호를 기초로 우선권의 이익을 주장한다.
본 발명은 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린 리간드(예컨대, MadCAM-1 및 VCAM-1)의 면역글로블린을 이용하여 α4 인테그린의 발현과 관련된 악성 및/또는 전이성 질환을 가지는 개체를 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한 종양의 성장 및/또는 전이의 진행(metastatic progression) 및/또는 전이의 발달(development of metastases)을 억제하는 약제의 제조를 위한 용도를 제공한다.
양성 및 악성 종양 모두 정상 세포에서는 발견되지 않는 양상으로 단백질이 발현되는 것으로 알려져 있다. 종양 또는 악성 세포에서 나타나는 단백질의 양상으로 질병의 단계를 알 수 있다(즉, 초기 단계 또는 전이성 질환). 악성으로 진행될 수록, 세포들은 그들이 기원한 조직과는 점점 더 다르게 나타난다. 암의 진행을 결정하는데 사용되는 단계의 도표와 관계없이, 암이 더 미분화되게 진행될수록 상기 세포들이 더 많이 전이가 되고 및/또는 전통요법에 의한 치료에 더 내성이 생기게 된다. 암 치료 요법에는 다음 치료가 하나 이상 포함될 수 있다:화학요법, 수술, 방사선 요법, 온열요법(hyperthermia), 면역요법, 골수 이식, 호르몬 요법 및 생물요법.
인테그린은 세포-접착, 면역 세포 이동 및 활성과 관련된 세포-표면 당단백질의 한 종류이다. 알파-4 인테그린은 호중구를 제외한 순환하는 모든 백혈구에서 발현되고, 베타-1(β1) 또는 베타-7(β7) 인테그린 소단위체와 결합하여 헤테로다이머 수용체를 형성한다. 알파-4 베타-1(α4β1) 인테그린과 알파-4 베타-7(α4β7) 인테그린 모두 혈관 내피세포를 가로질러 백혈구를 이동시키는 역할을 하고(Springer et al., Cell, 1994, 78:301-14;Butcher et al., Science, 1996,272 : 60-6), 실질 조직(parenchyma) 내에서 세포 활성화와 생존에 기여를 한다(Damle etal., J. Immunol ., 1993; 151 : 2368-79; Koopman et al., J. Immunol ., 1994,152 : 3760-7; Leussink et al., Acta Neuropathol ., 2002,103 : 131-136). α4β1 인테그린은 림프구(lymphocyte), 단핵구, 대식세포, 비만세포, 호염구 및 호산구에서 지속적으로 발현된다.
알파-4 베타-1(매우 늦은 항원-4, VLA-4로도 알려져 있음)은 혈관세포 부착 분자-1(VCAM-1)(Lobb et al., J. Clin. Invest. 1994,94 : 1722-8)에 결합하여 많은 만성 염증 부위에서 혈관 내피세포에서 발현된다(Bevilacqua et al. , 1993, Annu. Rev. Immunol., 11: 767-804; Postigo et al. , 1993, Res. Immunol., 144: 723-35). α4β1 인테그린은 피브로넥틴 및 다른 세포외기질(ECM) 성분 등을 포함한 다른 리간드와 결합한다.
알파-4 베타-7 인테그린은 점막성 어드레신 세포 부착분자(mucosal addressin cell adhesion molecule, MAdCAM-1)와 결합하고 장(gut)으로 림프구의 귀환(homing)을 매개한다(Farstad etal. , 1997, Am. J. Pathol., 150: 187-99; Issekutz, 1991, J. Immunol. 147: 4178-84).
따라서 단독으로 사용하거나 다른 약물과 병용하여 사용하여 암, 일반적으로 전이를 포함한 진행된 단계의 종양을 치료하는 암의 성장 및 전이를 억제하는 새로운 약제, 조성물 및 이들 약제와 조성물을 이용한 방법이 필요하다.
발명의 요약
본 발명은 종양 및/또는 전이성 질환을 치료하고 및/또는 종양의 성장을 억제하는 새로운 방법, 조성물, 및 병용요법을 제공한다. 상기 방법, 조성물 및 병용요법은 림프종, 백혈병, 흑색종, 전립선암과 같은 α4가 발현되는 암, 및 α4가 발현되는 모든 원발성 종양의 전이성 질환을 치료하도록 제시되는 것이 바람직하다.
따라서, 본 발명의 일측면은 항-α4 면역글로블린 또는α4 인테그린 리간드(예컨대, MadCM-1 및 VCAM-1)에 대한 면역글로블린을 그들이 필요한 개체에 종양 성장 및/또는 전이 및/또 전이 확산을 억제하는데 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함하는 종양 성장 및/또는 전이 및/또는 전이 확산을 억제하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 상기 항-α4 항체가 α4β1 인테그린 및/또는 α4β7 인테그린에 결합하고, 더욱 바람직하게는 상기 면역글로블린이 단클론 항체(예컨대, 나탈리주마브(natalizumab))이다.
본 발명의 다른 측면은 상기 치료되는 종양이 고형 종양(solid tumor) 또는 연조직 종양(soft tissue tumor)이다. 상기 방법, 병용요법 및 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린 리간드에 대한 면역글로블린을 이용하여 치료가 될 수 있는 고형 종양(solid tissue tumors)은, 이에 반드시 제한되는 것은 아니지만, 흑생종(예컨대, 피부 흑색종(cutaneous melanoma), 전이성 흑색종(metastatic melanoma) 또는 안내 흑색종(intraocular melanoma)), 전립선암, 및 원발성 종양의 전이성 병변을 포함한다.
본 발명의 또 다른 측면은 상기 치료될 수 있는 종양이 뼈 종양, 백혈병(예컨대, 만성 골수성 백혈병(chronic myelogenous leukemia), 급성 골수성 백혈병(acute myelogenous leukemia), 성인 급성 림프구성 백혈병(adult acute lymphoblastic leukemia), 급성 골수성 백혈병(acute myelogenous leukemia), 성숙 B-세포 급성 림프구성 백혈병(mature B-cell acute lymphoblastic leukemia), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphoblastic leukemia), 전림프구성 백혈병(prolymphocytic leukemia)또는 모발상 세포 백혈병(hairy cell leukemia)) 또는 림프종(예컨대, 비호지킨 림프종(non-Hodgkin's lymphoma), 피부 T-세포 림프종(cutaneous T-cell lymphoma) 또는 호지킨 질병(Hodgkin's disease))과 같은 연조직 종양이다.
본 발명의 다른 실시예는 항-α4 인테그린 면역글로블린이 약 1mg/kg 개체 중량 내지 약 100mg/kg 개체 중량(그리고 상기 범위내의 모든 정수값)의 양으로 개체에 투여되는 것이다. 더욱 바람직하게는 상기 항-α4 인테그린 면역글로블린이 약 1mg/kg 개체 중량 내지 약 10mg/kg 개체 중량의 양으로 개체에 투여되는 것이다. 바람직하게는, 상기 면역글로블린이 나탈리주마브이다.
본 발명의 또 다른 측면에서는, 상기 면역글로블린이 단독으로 투여되거나 다중치료 요법(multimodality format)으로 다른 암 치료 방식과 병용하여 사용될 수 있다. 예컨대, 상기 종양이 흑색종인 경우에, 상기 흑색종을 외과적으로 제거한 후에 상기 개체에 나탈리주마브룰 투여할 수 있다. 상기 종양이 흑색종인 경우에 상기 방법은 격리된 사지 관류(isolated limb perfusion), 국부적 주입 화학요법(regional chemotherapy infusion), 전신 화학요법(systemic chemotherapy), 또는 2차 항체(예컨대, 항-GM-2 강글리오사이드 항체, 항-GD 강글리오사이드 항체, 항-GD3 강글리오사이드 항체) 또는 항혈청을 이용한 면역요법과 같은 암 치료 방식과 추가적으로 병용할 수 있다. 상기 화학요법제는 하기 약제 중 하나 이상일 수 있다:다카르바진(dacarbazine), 카르무스틴(carmustine), 로무스틴(lomustine), 타우로무스틴(tauromustine), 포테무스틴(fotemustine), 세무스틴(semustine), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastine), 빈데신(vindesine), 택솔(taxol), 디브로모듈시톨(dibromodulcitol), 데토루비신(detorubicin), 피리트렉심(piritrexim) 및 인터페론(예컨대, interferon-a2).
본 발명의 다른 측면은 뇌, 폐, 간 및 뼈로의 전이를 치료하는 방법일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 다른 림프종 치료 방식과 병용하여 α4 인테그린또는 그들의 리간드(예컨대, MadCAM-1 및 VCAM-1)에 면역글로블린을 이용하여 림프종을 치료하는 방법일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 α4 인테그린 또는 그들의 리간드(예컨대, MadCAM-1 및 VCAM-1)에 면역글로블린을 당업계에 공지된 다른 암 치료 방식과 병용하여 사용될 수 있는 병용요법일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린 리간드(예컨대, MadCAM-1 및 VCAM-1)에 면역글로블린을 포함하며 그들이 필요한 개체에 투여되는 경우에 종양 성장의 억제 및/또는 전이 억제 및/또는 질병 진행을 늦추거나 억제하는 약제의 제조를 위한 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 항-α4 인테그린 면역글로블린을 포함하며 그들이 필요한 개체에 투여되는 경우에 종양 성장 및/또는 전이 진행 및/또는 전이의 발달을 억제하는 약제의 제조를 위한 용도를 제공하는 것이다. 바람직하게는, 상기 개체는 화학요법, 면역요법, 수술, 방사선 요법, 온열요법(hyperthermia) 또는 암 치료의 부작용을 개선시키는 약물을 추가적으로 치료되는 것이다. 바람직하게는, 상기 종양은 흑색종, 백혈병, 전립선암 또는 림프종이다.
도 1은 종양을 확립시킨 이 후, 대조구, 택솔, IgG4 또는 나탈리주마브를 투여하는 동안에 MOLT-4 제노그래프트(xenografts)의 원발성 종양 크기를 나타낸 그래프리다. SCID 마우스에 식염수(N=20), 나탈리주마브(N=20), IgG4(N=20), 또는 택솔(N=20)를 투여하였다. 식염수(saline), 나탈리주마브 및 IgG4를 -7, -4, 0, 3, 7, 10, 14m 17, 21, 24, 28, 31, 35, 38, 42 및 45 일에 투여하였다. MOLT-4 백혈병 제노그래프트를 피하로 0일에 이식하였다. 택솔은 1-5 일에 정맥내로 투여하였다. 종양은 일주일에 두 번 측정하였다.
1. 정의 및 두문자어(Definitions and Acronyms)
본 발명의 상세한 설명에 따라, 하기 약어 및 정의가 적용된다. 본 명세서에서 "a", "an" 및 "the" 단수 형태는 명세서에 명백히 다르게 언급하지 않는다면 복수 형태를 포함한다. 예를 들면, "an antibody(항체)"에 대한 참고(reference)는 복수의 상기 항체들을 포함하고, "the dosage(투여)"에 대한 참고는 당업자에게 공지된 하나 이상의 투여 및 그들의 동등물 등을 포함한다.
본 명세서에서 논의된 간행물(publication)은 본 발명의 출원일 이전에 그들의 개시를 위해서만 제공된다. 본 발명이 선행 발명에 통해 상기 간행물보다 앞서는 권리를 인정하는 것으로 본 명세서에서 해석되지 않는다. 또한 제공된 공개일은 실제 공개일과 다를 수 있으며, 이는 별개로 확인될 필요가 있다.
1.1 정의
본 발명에서 "개체" 또는 "환자"라는 용어는 포유동물을 포함하는 의미이다. 상기 포유동물은 개과, 고양이과, 영장류, 소과, 양, 돼지, 낙타류(camelid), 염소, 설치류 또는 말일 수 있다. 바람직하게는 상기 포유동물은 인간이다.
"나탈리주마브(natalizumab)" 또는 "티사브리
Figure 112006064117784-PCT00001
(Tysabri
Figure 112006064117784-PCT00002
)"은 전체가 본 명세서의 참고문헌으로 편입되는 미국 특허 제 5,840,299호 및 제 6,033,665호에 개시되어 있는 인간화된 VLA-4에 대한 인간화된 항체를 의미한다. 또한, 본 발명에는 다른 VLA-4 특이적 항체들도 포함된다. 상기 항-VLA-4 항체들과 면역글로블린들은 미국 특허 제 6,602,503호 및 제 6,551,593호, 공개된 미국 출원 제 20020197233호 (Relton et al.)에 개시된 면역글로블린들을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 항체는 상기 특허와 출원에서 개시된 방법에 의해, 포유동물 세포 발현에 의해 또는 형질전환 동물 발현 시스템(예컨대, 염소)을 통해서 제조될 수 있다.
본 명세서에서 "효능"이라는 용어는 특정 치료 처방 계획의 효과를 의미한다. 효능은 종양 성장 억제, 종양 질량의 감소, 방사선 영상과 같은 것에 의해 측정되는 전이성 병변의 감소, 종양 성장의 감소, 항원에 결합되는 검출가능한 종양의 결핍 등과 같은 특징(반드시 이에 제한되는 것은 아니다)을 기초로 측정될 수 있다. 종양 진행을 측정하는 다른 방법은 본 명세서에서 논의될 것이고 치료 및 진단을 하는 의사에게 알려져 있다.
용어 "약학적으로 허용가능한 담체" 또는 "약학적으로 허용가능한 부형제"라는 문구는 단지 담체로서 작용하는 것으로 의도되는, 즉, 그 자체가 생물학적 활성을 갖는 것으로 의도되지 않는 제제의 일부를 형성하는데 사용되는 임의의 화합물을 의미한다. 일반적으로, 상기 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제는 안전하고, 비독성이고, 생물학적이지 않거나 또는 다른 것이 바람직하다. 본 명세서 및 특허청구범위에서 사용되는 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제는 상기 담체 또는 부형제를 하나 또는 그 이상 포함한다.
본 명세서에, "치료"("treating" 및 "treatment" 등)라는 용어는 일반적으로 기대되는 약리학적 및 생리학적 효과를 얻는 것을 의미한다. 보다 상세하게, 종양 및 전이성 질환을 가지고 있는 개체를 치료하는데 사용되는 본 명세서에 기재된 시약(reagent)은 치료학적으로 유효한 양으로 다음 중 하나 이상을 얻을 수 있게 제공된다: 종양 성장 억제, 종양 질량 감소, 전이성 병변 감소, 치료 시작 후에 새롭게 전이성 병변으로 발전 억제 또는 종양 감소로 검출 가능한 질병이 없어짐(방사선 영상(radiologic imaging), 생물학적 유체 분석(biological fluid analysis), 사이토제네틱스(cytogenetics), 형광 인 시튜 하이브리다이젠(fluorescence in situ hybridization), 면역세포화학(immunocytochemistry), 콜로니 분석(colony assays), 멀티파라메터 유세포기(multiparameter flow cytometry), 또는 폴리머라제 사슬 반응(polymerase chain reaction)에 의해 측정됨). 본 명세에서, 용어 "치료"는 포유류, 특히 인간의 질병의 모든 치료를 포괄한다.
"치료학적 유효량"은 포유류에게 투여되는 경우 종양에 대하여 충분히 효과적인 본 명세서에 개시되는 약제, 시약 또는 화합물, 조성물 또는 시약들의 혼합물의 양을 의미한다.
"종양"이라는 용어는 양성 및 악성 성장 또는 암을 포함한다. 바람직하게는 상기 종양은 악성이다. 상기 종양은 흑색종과 같은 고형 종양 또는 림프종, 백혈병 또는 뼈 암과 같은 연조직 종양일 수 있다.
"원발성 종양"이라는 용어는 환자의 신체 중에서 다른 조직 또는 장기에 있는 전이성 병변이 아니고 원래 신생물을 의미한다.
"전이성 질환", "전이" 및 "전이성 병변" 이라는 용어는 원발성 종양에 비하여 멀리 있는 위치로 이동한 세포의 그룹을 의미한다.
1.2 두문자어
하기 두문자어는 동류의 용어에 대해서 일반적으로 사용되며, 당업계에 잘 알려져 있다.
α4β1 알파-4 베타-1
α4β7 알파-4 베타-7
Ab 항체
ABDIC 독소루비신, 블레오마이신, 다카르바진, 로무스틴 및 프레드니손
ALL 급성 림프성 백혈병
AML 급성 골수성 백혈병
BMT 골수 이식
CAF 시클로포스파미드, 아드리아마이신 및 5-플루오로우라실
CAMP 로무스틴, 미톡산트론, 시타라빈 및 프레드니손
CAVP 로무스틴, 멜파란, 에토포시드 및 프레드니손
CBVD 로무스틴, 블레오마이신, 빈블라스틴, 덱사메타손
CCNU 로무스틴
CEFF(B) 시클로포스파미드, 에토포시드, 프로카르바진, 프레드니손 및 블레오마이신
CEM 로무스틴, 에토포시드, 메토트렉세이트
CEP 로무스틴, 에토포시드, 프레드니무스틴
CEVD 로무스틴, 에토포시드, 빈데신 및 덱사메타손
CHOP 시클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴 및 프레드니손
CLL 만성 림프성 백혈병
CMF 시클로포스파미드, 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실
CML 만성 골수성 백혈병
CNS 중추신경계
CTCL 피부 T-세포 림프종
DHAP 덱사메타손, 고 용량 시타라빈 및 시스플라틴
ECM 세포외 기질
EPOCH 에토포시드, 빈크리스틴, 독소루비신, 시클로포스파미드 및 프레드니손
ESHAP 에토포시드, 메틸프레디솔론, 고용량(HD) 시타라빈 및 시스플라틴
EVA 에토포시드, 빈블라스틴 및 독소루비신
EVAP 에토포시드, 빈블라스틴, 시타라빈 및 시스플라틴
GAP-BOP 시클로포스파미드, 독소루비신, 프로카르바진, 블레오마이신, 빈크리스틴 및 프레드니손
HD 고용량
3H-FUDR 3H-플록수리딘
IFN 인터페론
IFN-a2 인터페론-a2
IFNβ-1a 인터페론β-1a
IHC 면역조직화학
i.m. 근육내의
IMVP-16 이포스파이드, 메토트렉세이트 및 에토포시드
i.p. 복강내의
i.v. 혈관내의
m-BACOD 메토트렉세이트, 블레오마이신, 독소루비신, 시클로포스파미드, 빈크리스틴, 덱사메타손 및 류코보린
MAb 단클론 항체
MACOP-B 메토트렉세이트, 독소루비신, 시클로포스파미드, 빈크리스틴, 프레드니손, 블레오마이신 및 류코보린
MadCAM-1 점막성 어드레신 세포 부착 분자 1(CD106이라고도 알려짐)
MeCCNU 세무스틴 또는 메틸CCNU
MF 진균증 살균제
MIME 메틸-gag, 이포스파미드, 메토트렉세이트 및 에토프시드
MINE 미토쿼존, 이포스파미드, 비노렐빈 및 에토포시드
MOPLACE 시클로포스파미드, 에토포시드, 프레드니손, 메토트렉세이트, 시타라빈 및 빈크리스틴
MOPP 메클로레타민, 빈크리스틴, 프로카르바진 및 프레드니손
MS 다발성 경화증
MTX 메토트렉세이트
MTX-CHOP 메토트렉세이트 및 CHOP
NAT 나탈리주마브(Tysabri®)
PBMC 말초 혈관 단핵구 세포
PCVP 빈블라스틴, 프로카르바진, 시클로포스파미드 및 프레드니손
p.o. 경구 투여(per os)
ProMACE-MOPP 표준 MOPP와 함께 류코보린, 프레드니손, 메토트렉세이트, 독소루비신, 시클로포스파미드, 에토포시드
s.c. 피하의
SDS-PAGE 소듐 도데실 설페이트 폴리아크릴아미드 겔 전기영동
SCID 중증 합병성 면역결핍
TNM 종양(tumor), 결절(node) 및 전이(metastases)는 암 단계 등급에 대한 미국 합동 위원회
VABCD 빈블라스틴, 독소루비신, 다카르바진, 로무스틴 및 블레오마이신
VCAM-1 혈관 세포 부착 분자 1(CD106 및 INCAM-110이라고도 알려짐)
VLA-4 매우 늦은(very late) 항원 4(알파-4 베타-1, α4β1 인테그린, VLA-4a 및 CD49d라고도 알려짐)
2. 질병
본발명의 일 측면에서, 여기에 기재된 방법 및 조성물은 악성종양(malignancy)의 진행을 저해하거나 더디게 하는 데에 사용될 수 있다. 이러한 악성종양은 고형 또는 연조직(soft tissue) 종양일 수 있다. 연조직 종양은 뼈암(bone cancer), 림프종(lymphoma) 및 백혈병일 수 있다. 본발명의 다른 측면은 상기 방법 및 조성물을 전이 또는 전이진행을 저해하거나 방지하기 위하여 사용하는 것이다.
따라서, 본발명의 일 측면은 종양 또는 전이성 질환을 면역글로블린(immunoglobulin)으로 치료하는 것이다. 상기 면역글로블린은 α4 및 바람직하게는 α4β1 인테그린 및/또는 α4β7 인테그린을 타겟으로 할 수 있다. 대신, 상기 면역글로블린은 α4의 리간드(예를 들어, VCAM-1 및/또는 MadCAM-1)을 타겟으로 할 수 있다. 상기 면역글로블린은 단독으로, 서로 조합하여, 또는 이에 한정되지는 않으나 화학 치료, 외과수술, 방사선 치료, 온열치료, 면역 치료, 호르몬 치료, 생물 치료(예를 들어, 세포 파괴를 초래하는 면역 작동체 기작, 싸이토카인, 면역 치료, 인터페론, 인터류킨-2, 암 백신 치료 및 입양 치료(adoptive therapy))와 같은 다른 암 시술법(modality) 및 상기 암 시술법의 부작용을 호전시키는 약과 조합하여 사용될 수 있다.
2.1 암 치료
암이라는 용어는 다수의 소기관을 이루는 각 기관의 각 암과 함께 악성종양의 집합을 포함한다. 일반적으로, 암 진단시에 “암”은 다양한 유전적, 생화학적, 면역학적 및 생물학적 특징을 가진 세포의 여러 가지 하위집단이라는 사실에 있다.
본발명의 조성물 및 방법에 의해 치료되는 암의 종류는 α4 인테그린(즉, α4β1 및/또는 α4β7) 또는 이들의 리간드(예를 들어, VCAM-1 및/또는 MadCAM-1)를 나타내는 것들이다. 이에 한정되지는 않으나, 바람직한 암은 흑색종(예를 들어, 피부 흑색종, 전이성 흑색종 및 안내 흑색종), 전립선 암, 림프종(예를 들어, 피부 T-세포 림프종, 진균증 살균제(mycosis fungicide), 호지킨 및 비-호지킨 림프종 및 일차 중추신경계 림프종), 백혈병(예를 들어, 전-B 세포 급성 림프구성 백혈병(lymphoblastic leukemia), 만성 및 급성 림프성 백혈병(lymphocytic leukemia), 만성 및 급성 골수성 백혈병, 성인 급성 림프구성 백혈병, 성숙 B-세포 급성 림프구성 백혈병, 전림프성 백혈병, 모발상 세포 백혈병 및 T-세포 만성 림프성 백혈병) 및 이러한 단백질을 세포 표면에 나타내는 전이성 종양을 포함한다. 진균증 살균제(MF), 세자리(Sezary) 증후군, 피부의 망상 세포 육종 및 여러 가지 다른 피부 림프성 이상(dyscrasias)는 예전에는 별개의 질환으로 생각되었음에도 불구하고, 현재는 피부 T-세포 림프종(CTCL)의 별개의 임상적 증상으로 간주되고, 상기 용어에 포함된다는 것을 유념해라(Lynn D. Wilson 등, “Cutaneous T-Cell Lymphomas", in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 2220 - 2232 (Vincent T. DeVita, Jr. et al., editors 5th ed. 1997); Bank et al., 1999, J. Cutan . Pathol . 26(2): 65 - 71. 참조)
2.2 전이성 질환
일단, 환자에서 종양이 진단되면, 첫 번째 의문점은 종양이 진행되었는지, 그리고 국부 림프절 및 다른 기관에 확산되었는지이다. 종국적으로 대부분 암으로 인한 사망은 통상적인 암 치료법에 저항성을 보이는 전이로부터 초래된다. 전이는 다른 기관 및 같은 기관의 다른 영역으로 정착될 수 있게 하여 외과 수술, 방사선 치료, 약품 치료 및/또는 생물학적 치료에 의한 암의 완치를 거의 불가능하게 만든다.
또한, 여기에 기재된 방법, 병용요법 및 조성물에 의한 치료에 대해서 고려되는 것은 전이암의 치료이다. 암은 일반적으로 발생한 조직내의 한 곳에서 성장을 시작한다. 암이 진행됨에 따라 암은 환자내의 다른 위치로 이전될 수 있다. 예를 들어, 전립선에서 발생하는 암은 폐로 이전될 수 있다. 전이성 질환에 일반적인 다른 위치 및 본 발명에서 고려되는 것은 뇌, 폐, 간 및 뼈로의 전이성 암을 포함한다. 여러 가지 인테그린 소단위체(즉, α2, α4 및 β3)는 정상 전립선 조직 및 정상 멜라닌 세포에 비하여 전이에 의해 발현이 증진되는 점이 알려졌다(Hartstein et al., 1997, Ophthal . Plast . Reconstr . Surg ., 13(4): 227-38).
모든 종양(tumor)에서 전이가 이루어지는 데에 있어서 필수적인 단계가 있다. 그 단계들은 다음을 포함한다.
(1) 종양(neoplasm)으로의 형질전환 후에, 종양이 위치한 기관/조직 환경에 의해 종양 세포의 점진적인 증식
(2) 직경 1 내지 2mm를 초과한 증식을 위한 종양의 신혈관형성(neovascularization) 또는 혈관형성(angiogenesis)
(3) 응집 분자(cohesive molecules)의 발현이 감소-조절되어 세포의 운동성 또는 일차 병소로부터 분리되는 능력이 상승
(4) 단일 종양 세포 또는 세포 집단의 분리 및 색전(embolization)되며 대다수의 이러한 세포는 빠르게 파괴됨
(5) 일단 종양 세포가 분리 및 색전 단계에서 생존하면, 이들은 혈관의 내강(lumen)에서 증식하기 시작한다. 상기 세포는 침입과정(invasion) 동안 일어나는 것과 유사한 기작에 의해 기관 실질조직(parenchyma)으로 일혈(溢血, extravasate)된다.
(6) 적절한 세포 표면 수용체를 가지는 종양세포는 측분비적(paracrine) 성장 인자에 반응할 수 있고, 기관 실질조직내에서 증식한다.
(7) 숙주 방어(특이적 및 비특이적 면역 반응 모두)에 대한 종양세포의 회피
(8) 직경 1 내지 2mm가 초과되게 증식되도록 전이되기 위하여, 전이는 혈관 네트워크를 발달시켜야 한다.
따라서, 원발성 종양이 이러한 단계를 거치기에 충분한 시간이 주어진다면, 부위 또는 원발성 종양과 이격된 부위에서 전이성 병소를 형성할 것이다. 기재된 시약, 방법 및 병용요법은 전이 과정에서 이러한 단계의 하나 또는 그 이상의 단계를 저해하거나 막는다. 종양 전이의 기작 및 병리에 대해 추가 세부사항에 대해서는 공지된 문헌(Isaiah J. Fidler "Molecular Biology of Cancer: Invasion and Metastasis" in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 135 - 152(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997))을 참조하라.
따라서, 본발명의 일 측면은 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린의 리간드(예를 들면, VCAM-1 및 MadCAM-1)를 타겟으로 하는 면역글로블린을 사용하는 방법 및 이를 포함하는 조성물을 제공하는 것이다. 바람직한 항-α4 인테그린 면역글로블린은 나탈리주마브와 같은 항-VLA-4 항체이다. 이러한 면역글로블린은 단독으로 또는 전이를 저해하거나 전이성 병소의 진행을 막는 다른 약제 또는 암 치료 방식과 조합하여 사용될 수 있다. 따라서, 상기 조성물 및 방법은 α4 인테그린 또는 α4 인테그린의 리간드를 나타내는 원발성 종양의 전이를 치료하는 데에 사용될 수 있다.
3. 면역글로블린 치료법
상기 암을 치료하는 데에 될 수 있는 면역글로블린은 α4β1 및/또는 α4β7이 그들의 상응하는 리간드, 즉 VCAM-1 또는 MadCAM-1과 결합하는 것을 저해하는 항-α4 인테그린을 포함한다. 또한 상기 리간드에 대한 면역글로블린을 사용할 수있다. 이러한 면역글로블린은 항체(즉, 단클론, 유인원화된, 인간화된 또는 키메라 항체 뿐만아니라 인간 항체 및 쌍-특이성 항체)일 수 있다. 면역글로블린은 항체의 면역원성 단편(예를 들어 Fab, scFv, Fab', F(ab')2, Fab″, Fabc 또는 재조합으로 합성된 단편) 또는 재조합으로 합성된 면역글로블린일 수 있다. 바람직한 항-α4 항체는 나탈리주마브이다. 그러나, α4β1 및 α4β7을 구별할 수 있는 면역글로블린을 포함하여 다른 항-α4 인테그린 면역글로블린이 역시 고려될 수 있다. 바람직한 면역글로블린은 단클론 항체이며, 상기 개체 환자가 인간인 경우에는 보다 바람직한 면역글로블린은 인간화 또는 유인원화된 항체이다.
이러한 항체는 단독으로 또는 다른 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린 리간드에 대한 면역글로블린과 병용하여 사용될 수 있다. 발명의 다른 측면은 병용 요법의 형태로 다른 통상적인 암 치료 방식과 조합하여 사용되는 항-α4 항체의 용도일 수 있다.
4. 병용요법
암에 대한 많은 치료법이 있다. 암을 치료하는 데 사용되는 특정 암치료법 또는 치료 시술의 조합은 암의 유형, 단계, 환자(예를 들면 체중, 성별, 나이, 건강상태, 선행 암 등) 및 환자의 치료에서의 위치(예를 들면, 최초 치료, 블라스트 크라이시스(blast crisis), 초기치료에 대한 내성, 암 재발 또는 수개월 또는 수년 전 첫 번째 암의 치료에 의해 유발된 것일지도 모르는 두 번째 암)에 크게 달려있다. 따라서, 의사는 환자가 질환과 싸우는 데에 있어서의 필요한 것 및 삶의 질에 대한 환자의 자가-결정에 가장 적절한 여러가지 치료 방식을 자주 조합하여야 한다. 치료 시술법은 이에 한정되지는 않으나, 외과 수술, 방사선 요법, 화학 요법, 생물학적 요법(예를 들면, 싸이토카인, 면역 요법 및 인터페론), 호르몬 요법 및 온열 요법을 포함한다.
통상적인 화학요법은 호르몬 요법(예를 들면, 항-에스트로겐, 아로마타아제 저해제, 고나도트로핀 방출 호르몬 유사체 및 항-안드로겐), 항종양 알킬화제(예를 들면, 머스타드, 니트로소우레아, 테트라진 및 아지리딘), 시스플라틴 및 그 유사체, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트, 안티폴레이트, 5-플루오로피리미딘, 시타라빈, 아자시티딘, 젬시타빈, 6-티퓨린 및 히드록시우레아), 토포아이소머라제 상호작용제, 항-마이크로튜블제(예를 들면, 빈카알칼로이드, 탁산 및 에스트라무스틴), 분화제(예를들어, 레티노이드, 비타민 D3, 극성-비극성(apolar) 화합물, 부틸레이트 및 페닐아세테이트, 세포독성 약제, 싸이토카인 및 이들의 조합) 및 플루다라빈, 2-클로로데옥시아데노신, 2'-데옥시코포르마이신, 호모해링토닌(HHT), 수라민, 블레오마이신 및 L-아스파라기나아제와 같은 다른 화학 요법제가 추가적으로 분류될 수 있다.
4.1 림프종 치료를 위한 병용요법
본발명의 일 측면은 림프종을 치료하기 위한 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린 리간드(예를 들어 MadCAM-1 및 VCAM-1)에 결합하는 면역글로블린의 용도를 고려하는 것이다. α4 인테그린 또는 α4 인테그린의 리간드를 발현하는 어떠한 림프종 세포가 여기에 기재된 병용요법 치료에 고려된다.
이러한 병용요법에 의해 치료되는 림프종은 이에 한정되지는 않으나 피부 T-세포 림프종(CTCL), T-세포 비-호지킨 림프종, 주변 T-세포 림프종, 악성 거대 세포 림프종, 항-면역아세포 림프종 및 전구체 T-LBL을 포함한다. 림프종의 치료는 치료되는 객체, 질병의 타입 및 그 단계에 다시 의존된다. 존재하는 백혈병 및 림프종 치료 시술법은 일반적으로 공지된 문헌(CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997))에 기재되어 있다. 또한 치료가 고려되는 것은 B-세포 림프종이다(예를 들어, 여포 림프종(follicular lymphoma), 확산 거대 B-세포 림프종(diffuse large B-cell lymphoma), 만틀 세포 림프종(mantle cell lymphoma), B-CLL/SLL, 면역세포종/발덴스트롬(ommunocytima/Waldenstrom's) 및 MALT-형/단핵세포형(monocytoid) B-세포 림프종). 또한 버킷 림프종, 확산 거대 B-세포 림프종, 여포 림프종, 전구체 B-LBL, 전구체 T-LBL, 악성 거대 세포 림프종(anaplastic large cell lymphoma), 주변 T-세포 림프종과 같은 소아성 림프종(perdiatric lymphoma)도 고려될 수 있다.
림프종을 치료하는 데에 사용하는 통상적인 약제 조합은 이에 한정되지는 않으나, CHOP(즉, 시클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴 및 프레드니손), GAP-BOP(즉, 시클로포스파미드, 독소루비신, 프로카르바진, 블레오마이신, 빈크리스틴 및 프레드니손), m-BACOD(즉, 메토트렉세이트, 블레오마이신, 독소루비신, 시클로포스파미드, 빈크리스틴, 덱사메타손 및 류코보린), ProMACE-MOPP(즉, 표준 MOPP와 함께 류코보린, 프레드니손, 메토트렉세이트, 독소루비신, 시클로포스파미드, 에토포시드), ProMACE-CytaBOM(프레드니손, 독소루비신, 시클로포스파미드, 에토포시드, 시타라빈, 블레오마이신, 빈크리스틴, 메토트렉세이트 및 류코보린), MACOP-B(메토트렉세이트, 독소루비신, 시클로포스파미드, 빈크리스틴, 프레드니손, 블레오마이신 및 류코보린)이다. 재발된 공격적인(aggressive) 비-호지킨 림프종에 대해서 하기 화학 치료제 약물이 본 명세서에 기재된 항체와 약물과 병용하여 함께 사용될 수 있다:IMVP-16(즉, 이포스파이드, 메토트렉세이트 및 에토포시드), MIME(즉, 메틸-gag, 이포스파미드, 메토트렉세이트 및 에토포시드), DHAP(즉, 덱사메타손, 고 용량 시타라빈 및 시스플라틴), ESHAP(즉, 에토포시드, 메틸프레드니손, 고용량(HD) 시타라빈 및 시스플라틴), CEFF(B)(즉, 시클로포스파미드, 에토포시드, 프로카르바진, 프레드니손 및 블레오마이신), CAMP(즉, 로무스틴, 미톡산트론, 시타라빈 및 프레드니손).(Margaret A. Shipp, et al., "Non-Hodgkin's Lymphomas," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997) 참조)
재발된 저항성 호지킨 병에 대한 것과 같은 어떤 림프종에 사용된 회수 화학치료를 위한 치료는 이에 한정되지는 않으나, VABCD(즉, 빈블라스틴, 독소루비신, 다카르바진, 로무스틴 및 블레오마이신), ABDIC(즉, 독소루비신, 블레오마이신, 다카르바진, 로무스틴 및 프레드니손), CBVD(즉, 로무스틴, 블레오마이신, 빈블라스틴, 덱사메타손), PCVP(즉, 빈블라스틴, 프로카르바진, 시클로포스파미드 및 프레드니손), CEP(즉, 로무스틴, 에토포시드, 프레드니무스틴), EVA(즉, 에토포시드, 빈블라스틴 및 독소루비신), MOPLACE(즉, 시클로포스파미드, 에토포시드, 프레드니손, 메토트렉세이트, 시타라빈 및 빈크리스틴), MIME(즉, 메틸-gag, 이포스파미드, 메토트렉세이트 및 에토포시드), MINE(즉, 미토쿼존, 이포스파미드, 비노렐빈 및 에토포시드), MTX-CHOP(즉, 메토트렉세이트 및 CHOP), CEM(즉, 로무스틴, 에토포시드 및 메토트렉세이트), CEVD(즉, 로무스틴, 에토포시드, 빈데신 및 덱사메타손), CAVP(즉, 로무스틴, 멜파란, 에토포시드 및 프레드니손), EVAP(즉, 에토포시드, 빈블라스틴, 시타라빈 및 시스플라틴) 및 EPOCH(즉, 에토포시드, 빈크리스틴, 독소루비신, 시클로포스파미드 및 프레드니손)를 포함한다(예를 들어 Vincent T. DeVita et al., “Hodgkin's Disease," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 2242-2283(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997) 참조).
CTCL에 대해서는 통상적인 치료법은 환자의 평가에 달려 있다. 따라서 TNM 단계에 기초하여 환자는 여기에서 기재된 방법 및 조성물과 조합하여 국부 화학 요법, 솔라렌(psoralen) 자외선 요법, 지엽적 외부 빔 방사선 요법, 체외 광화학 요법, 인터페론(IFN), 뉴클레오티드 유도체와 함께 전신성 화학요법 또는 광자 조사에 의해 치료될 수 있다. 부가적인 치료시술법은 공지되어 있으며, 문헌(CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997))을 참조하라.
따라서, 본발명의 일 측면은 환자에서 림프종의 진행 및/또는 림프종 진행을 저해하는 데에 사용되는 항-α4 면역글로블린 또는 α4, α4β1 및 α4β7의 리간드에 대한 면역글로블린의 용도를 고려한다.
4.2 흑색종의 병용요법
본 발명의 다른 측면은 흑색종 성장의 저해 및/또는 흑색종 전이의 성장 또는 확산의 저해를 고려한다. 항-α4 인테그린(즉, α4β1 및 α4β7) 면역글로블린 또는 α4 인테그린의 리간드를 인식하는 면역글로블린은 흑색종을 치료하기 위해 단독으로 또는 다른 암 시술법과 조합하여 사용될 수 있다. 본 방법 및 조성물은 이에 한정되지는 않으나 피부 흑색종, 전이 흑색종 및 안내 흑색종을 치료하는 것으로 고려된다. 이러한 흑색종을 치료하기 위한 통상적인 치료법은 공지되어 있다(Anthony P. Albino et al., "Molecular Biology of Cutaneous Malignant Melanoma," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 1935-1947(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997); Charles M. Balch et al., "Cutaneous Melanomas," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 1947-1994 및 Jose A. Sahel et al., "Intraocular Melanoma," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 1995-2012 참조)
예를 들어 전이 흑색종 치료를 위해서 외과 수술, 분리된 사지 관류(isolated limb perfusion), 지엽적 화학 요법 주입(예를 들어 데카르바진 또는 시스플라틴과 함께), 방사선 요법, 면역 요법(예를 들어 GD2 및 GD3 강글리오시드에 대한 항체를 이용하는 치료), 내부병소 면역 요법, 전신성 화학요법, 온열 요법, 전신성 면역 요법, 암 백신 및 이들의 조합을 항-α4 면역글로블린 또는 α4, α4β1 및 α4β7의 리간드에 대한 면역글로블린과 추가적으로 병용하여 사용될 수 될 수 있다.
4.3 백혈병 치료를 위한 병용요법
본 발명의 다른 측면은 치료될 백혈병에 대한 통상적인 치료 시술법과 조합하여 항-α4 면역글로블린 또는 α4 리간드에 대한 면역글로블린을 사용하여 어떤 백혈병의 치료법을 제공하는 것이다.
급성 골수성 백혈병(AML)에 대한 종래의 치료법은 이에 한정되지는 않으나, 안트라싸이클린(anthracycline)/시타라빈-기반 유도법, 골수 이식(BMT)와 같은 강도 높은 후-경감(post-remission) 치료법 또는 고용량(HD) 시타라빈을 포함한다.
급성 전골수구성 백혈병에 대한 종래의 치료법은 이에 한정되지는 않으나 레티노익산 및 안트라싸이클린/시타라빈-기반 치료를 포함한다. 환자는 또한 피브리노겐 수준을 100mg/dL 이상 유지하기 위해 동결 침전(cyroprecipitate) 또는 신선한 동결 혈장이 투여될 수 있다. 혈소판 수혈도 인체 내 1일간 혈소판 수치가 >50,000/μL를 유지하기 위해 필요할 수 있다.
급성 림프구성 백혈병(ALL)에 대한 종래의 치료 시술법은 안트라싸이클린, 시클로포스파미드, 아스파라기나아제 또는 빈크리스틴 및 프레드니손을 부가한 조합을 이용한 4 또는 5 약물 유도 투여법을 포함한다. 택일적으로, 의사는 안트라싸이클린, 에피도필로톡신 또는 본 명세서에 기재된 면역글로블린 조성물과 조합한 항-대사물질과 결합된 시타라빈을 기초로 하는 강도 높은 병합치료(intensive consolidation therapy)를 사용할 수도 있다. 반면에 다른 측면은 머캅토퓨린 및 상기 면역글로블린과 결합된 경구 메토트렉세이트를 사용하는 연장 유지 치료(protracted maintenance therapy)를 사용할 수 있다. 또한 택일적으로 상기 면역글로블린과 조합하여 CNS 예방법에 대한 예방적 지주막하(prophylactic intrathecal) 화학요법(두개골 방사선 요법가 함께 또는 두개골 방사선 요법없이)의 사용을 고려한다. 본 발명과 조합하여 사용할 수 있는 백혈병 치료를 위한 치료 시술법에 관한 추가적인 정보에 대해서는 이하의 문헌을 참조하라: Issa Khouri et al., "Molecular Biology of Leukemias," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 2285-2293(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997); David A. Scheinberg et al., "Acute Leukemias," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 2293-2321; 및 Albert B. Deisseroth et al., "Chronic Leukemias" in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 2321-2343.
4.4 전이성 질환의 치료를 위한 병용요법
전이의 치료는 전이의 위치 및 전이가 발생한 원발성 종양에 따라서 조성물, 복합 치료, 여기에서 기재된 방법 자체 또는 다른 암 치료 시술법과 조합한 방법과 함께 할 수 있다. 종양이 전이되는 가장 일반적인 부위는 뇌, 폐, 간, 뼈, 악성 늑막(malignant pleural) 및 심장 일혈부, 및 악성 복수(malignant ascites)이다.
4.4.1 뇌 전이체
뇌 전이체는 중추신경계(CNS) 밖 조직에서 발생한 종양세포가 뇌를 직접적으로 연루되기 위하여 2차적으로 퍼질 때 발달한다. 두개골 내부 전이체는 뇌 실질조직, 두개골 신경, 혈관(경막 만곡(dural sinuse)을 포함하여), 경막(the dura), 연수막 및 두개골의 안쪽면에 연루될 수 있다. 두개골 내부 전이체에서 가장 일반적인 것은 내부 실질조직(intraparenchymal) 전이체이다. 1차 종양에 의한 뇌 전이체의 빈도는 폐(48%), 유방(15%), 흑색종(9%), 대장(5%), 다른 알려진 1차 종양(13%) 및 다른 미확인 1차 종양(11%)이다(Jay S. Loeffler, et al., "Metastatic Brain Cancer," in CANCER: PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY 2523-2536(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997) 참조). 뇌 전이와 관련된 증상은 정신상태 변화, 편측 부전마비(hemiparesis), 편측감각 손실, 울혈유두(papilledema) 및 실조성 보행(gait ataxia)이다. 따라서, 새롭게 뇌 전이로 진단된 환자는 대개 오랫동안 항경련제 예방 및 코르티코세테로이드에 놓여 진다. 그러한 약제는 페니토인 소듐 및 페노바비탈을 포함한다.
뇌 전이체는 쉽게 도달되면 외과적으로 전이체를 제거하여 치료될 수 있다. 화상 및 위치와 기술의 진보와 함께 뇌 전이체의 외과적 제거와 연관된 사망률을 감소되어 왔다. 그러나 위험은 여전히 남아있다. 따라서, 방사선 요법은 뇌 전이가 된 환자의 치료의 주요 수단(mainstay)이다. 방사선 요법은 외과적 수술에 보조 치료법으로써 외과적 수술과 결합될 수 있다. 대신에 방사선 외과 요법이 사용될 수 있다. 방사선 외과 요법은 적은 부피에 높은 1회 분량의 방사선을 전달하기 위하여 다중 집적성 빔을 사용하는 외부 조사 기술이다. 방사선 외과 요법은 메틸-CCNU 또는 ACNU와 같은 다른 화학요법제 또는 방사선 요법, 메틸-CCNU, ACNU 및 테가푸르(경구투여 5-플루오로우라실)의 조합과 병용하여 투여될 수 있다.
화학요법도 뇌 전이체에 사용될 수 있다. 1차 종양에 따라 이하의 제조를 단독으로 또는 조합으로 환자에 투여될 수 있다: 시클로포스파미드, 5-플루오로우라실, 빈크리스틴, 메토트렉세이트, 독소루비신, 프레드니손 및 아드리아마이신(예를 들어 CAF 또는 CMF의 조합으로)
여기에 기재된 항체 조성물 및 항체를 사용하는 방법은 뇌 전이체에 대해서 여기에서 기재된 또는 공지된 통상적인 치료 시술법의 어떤 것과도 결합하여 사용될 수 있다(예를 들어 Jay S. Loeffler et al., 1997 참조).
4.4.2 폐 전이(lung metastases)
폐는 전이성 질환에서 두번째로 빈도가 높은 부위이다.
해부학상으로, 폐는 혈관이 많은 부위이고, 원발성 종양의 정맥 분포 시스템으로부터 배출됨에 따라 순환하는 종양 세포에 의해 만나는 최초의 모세혈관상이다. 따라서, 상기 폐는 초기 여과 부위로써 작용을 하고 산재성의 종양 세포가 기계적으로 트랩되어지는 부위이다. 반면, 트랩되어진 그리고 증식이 계속되어지고 전이성 병변을 형성하는 세포는 상기 세포가 유래된 최초의 원발성 종양에 대게 좌우된다. 폐 전이의 조혈 과정은 가장 일반적인 수단이다. 그러나 폐질환의 전이는 림프계를 통해서도 발생한다. 상기의 내용은 Harvey I. Pass 등에 의해 발표된 문헌인 Cancer:Principles & Practice of Oncology의 "Metastatic Cancer to the Lung"(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997)에 개시되어 있다.
폐 전이를 가지고 진행되는 가장 일반적인 원발성 종양은 연조직육종(soft tissue sarcoma), 직장결장암(colorectal carcinoma), 배아종(germ cell tumors), 골육종(osteosarcoma), 소아과의 종양(pediatric tumors)(예를 들면, 횡문근육종(rhabdomyosarcomas), 유잉육종(Ewing's sarcoma), 윌름종양(Wilm's tumor), 지방육종(liposarcomas), 평활근육종(leiomyosarcomas), 꽈리육종(alveolar sarcomas), 윤활막육종(synovial sarcomas), 섬유육종(fibrosarcomas), 신경성육종(neurogenic sarcomas) 및 상피성육종(epithelial sarcomas), 흑색종(melanoma), 콩팥세포암종(renal cell carcinoma) 및 유방암(breast carcinoma)을 포함한다. 이러한 원발성 종양들로부터 유래된 대부분의 전이암들은 수술에 의해 치료되어 진다. 그러나, 때로는 화학요법과 병행하는 수술을 추천하고 있다. 예를 들어, 폐로 전이 되어진 배아종은 수술요법으로 절제 후 치료 효과가 있는 시스플라틴-기반의 병용 화학요법을 수행한다.
폐 전이의 치료는 종종 전이 절제술(metastasectomy)이 관여한다(예컨데, 폐 전이 손상 병변의 수술학적인 제거). 따라서 본 발명의 일측면은 폐 전이의 치료를 위하여 본 명세서에서 논의되었거나 당업계에 잘 알려진 것과 같은 전통적인 치료법과 병용하여 상기 개시된 항체의 용도를 고려하는 것이다. 추가적인 치료 방식은 Hervey I. Pass 등이 1997년에 개시된 문헌을 참조할 수 있다.
따라서, 본 발명의 일측면은 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는α4-리간드(예컨데, VCAM-1 및 MadCAM-1)를 인식하고 결합하는 면역글로블린과 폐 전이의 치료를 위해 어떤 유용한 치료 방식을 사용하는 방법과 결합하는 것을 고려하는 것이다.
4.4.3 간 전이(liver metastases)
간에서의 전이성 질환은 많은 원발성 종양 부위들로부터 발생할 수 있다. 해부학적인 정맥 분포 때문에 위장관 종양은 간 전체에 널리 퍼져 있게 되므로 많은 환자들이 간에서 처음으로 암 진단을 받게 된다. 대부분의 위장관 종양은 간으로 전이되고, 비교적 짧은 생존이 남았다는 극단적인 진단을 받게 된다. 그러나, 간으로의 직장의 전이는 절제하는 치료법을 통해 치료할 수 있다.
전신 화학요법은 간장의 전이 치료에 있어서 가장 많이 사용되고 있는 치료법이다. 전신 화학요법에 대한 반응은 원발성 종양에 의해 다양하게 나타난다. 선택할 수 있는 다른 치료법에는 간동맥 화학요법이 있다. 정상 간세포가 간문맥 및 간동맥으로부터 그들의 혈액을 얻는 반면, 간 전이는 오직 간동맥에 의해서만 전파된다. 따라서, 상기 3H-플록스우리딘(3H-FUDR)(또는 다른 화학요법의 약제 또는 시약제들)을 간동맥으로 주입하는 간동맥 화학요법이 있고, 그 결과 정상 간 조직에서보다 전이 조직에서의 약물의 농도(15배)가 매우 증가하게 된다. 또한 간동맥을 통해 투여되는 추가적인 약제는 이에 제한되지는 않으나, 플루오로우라실, 5-플루오로우라실-2-데옥시우리딘, 비스클로에틸니트로소우레아, 미토마이신 C, 시스플라틴 및 독소루비신일 수 있다.
간으로의 전이에 있어서, 치료 방식은 전신 화학요법(예컨테, 3H-플록스우리딘(3H-floxuridine)을 이용), 간내 치료법(intrahepatic therapy), 간동맥 결합 또는 색전술(embolization) , 화학 색전술(chemoembolization), 방사선 치료법(radiation therapy), 알콜 주입(alcohol injection) 및 저온 수술(cryosurgery)을 포함할 수 있다. 화학 색전술을 위한 약제의 처방은 (1) DSM 및 미토마이신 C(mitomycin C); (2) 콜라겐(collagen), 시스플라틴(cisplatin), 독소루비신(doxorubicin) 및 미토마이신 C; (3) 플루오로우라실(fluorouracil), 미토마이신 C, 에티오디지드 오일(ethiodized oil) 및 젤라틴(gelatin); (4) 안지오스타틴(angiostatin)(또는 신혈관 생성 또는 혈관신생을 억제하는 다른 약제), 시스플라틴, 독소루비신 및 미토마이신 C; (5) 리피돌(lipiodol) 및 독소루비신; (6) 겔 거품(gel foam) , 독소루비신, 미토마이신 C 및 시스플라틴; (7) 독소루비신, 미토마이신 C 및 리피돌; 및 (8) 폴리비닐(polyvinyl), 알콜(alcohol), 플루오로우라실 및 인터페론(interferon)을 사용할 수 있다. 추가적인 치료 및 상세한 내용은 John M. Daly 등이 발표한 CANCER:PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY, 2551-2569의 "Metastatic Cancer to the Liver"(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997)을 참고한다.
간으로의 전이에 있어서 이용 가능한 치료 방식은 본 발명의 면역글로블린을 포함하는 조성물 및 방법을 병용하여 사용할 수 있다.
4.4.4 골(뼈) 전이(Bone metastases)
골 전이의 치료는 다중양상 방법론을 이용하는 것이 가장 좋은 접근 방법이다. 골(뼈)이 가진 문제점 중 하나는 뼈 골절 및 뼈 치유(healing)의 발생에 있다. 뼈 종양을 위한 종양 덩어리는 수술을 수행할 수 있고, 사지의 절단을 포함할 수 있다. 또한, 수술치료 이외에, 방사선은 골격 전이체에 사용될 수 있다. 국소적인 외부 방사(localized external radiation), 반신 방사(hemibody radiation) 또는 전신 방사핵 치료법(systemic radionuclide therapy)이 매우 광범위한 산재성의 뼈 질환에 사용될 수 있다. 89Sr과 같은 뼈를 찾는 동위원소는 고에너지 동위원소인 32P-오르소포스페이트 보다 더 좋은 내성이 있어서 선호되고 있다. 골 전이 치료를 위한 부가적인 치료 방식 및 상세한 사항은 John H. Healy가 발표한 CANCER:PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY, 2570-2586의 "Metastatic Cancer to the Bone"(Vincent T. DeVita et al., editors, 5th ed., 1997)을 참고한다.
골 전이에 있어서 가능한 치료법은 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는 α4 인테그린(예컨데, VCAM-1 및 MadCAM-1)에 결합하는 리간드에 대한 항체를 이용한 방법 및 조성물을 병용하여 사용할 수 있다.
4.5 암치료와 연관되어 상태를 개선하기 위한 병용 요법
일반적으로, 방사선 또는 화학요법을 이용한 최초 암 치료 방식의 아이디어에는 정상세포 보다 빠르게 증식하는 암 세포에 해롭게 작용하여 상기 암 세포들이 화학요법 및 방사선에 더 민감하게 하는 것이다. 그러나 방사선 및 화학요법 또는 다른 새로운 암 치료 방식으로 환자를 치료하는 것은 치료 받는 환자에게 부작용을 일으킨다. 따라서, 본 발명의 일측면은 환자의 치료에 사용되는 치료 방식의 병용에 의해 발생하는 부작용을 개선하는 화합물 및 조성물의 용도에 대한 것이다. 예를 들어, 약물을 항암 치료와 함께 환자에게 병용되어 투여될 수 있는데 이로 인하여 발생하는 메스꺼움, 구토, 점성 및 다른 구강의 문제, 방광염, 폐독성, 심독성, 탈모 및 생식선 부전과 같은 부작용을 치료하도록 환자에게 항앙 치료법과 병용하여 약물을 투여할 수 있다. 반면, 이러한 시약들 중에서 어떤 것은 단지 미용적(예컨데, 탈모 방지)인 것이 있을 수 있으나, 암 치료를 위한 긍정적인 태도를 유지하게 하고 우울증을 억제하는 것은 치료를 받는 환자의 전반적인 치료 반응에 도움을 주는 것으로 연구 결과 나타났다. 따라서 본 명세서에서 기재하고 있는 상기 시약 및 병용된 치료는 암 치료 방식들과 병용하여서 뿐만아니라 상기 부작용을 개선시키는 약물 치료와 추가적으로 결합 될 수 있다. 암 치료법의 부작용을 감소시키는 자세한 방법에 대해서는 CANCER:PRINCIPLES & PRACTICE OF ONCOLOGY(Vincent T. DeVita et al., 5th ed., 1997)을 참고한다.
5. 면역글로블린 제형화 및 투여방법
본 발명의 일측면은 항-α4 면역글로블린 또는 α4 리간드(예컨데, VCAM-1 및 MadCAM-1)에 결합하는 면역글로블린의 용도에 관한 것이다. 이러한 면역글로블린은 전체의 항체, 항체 단편 또는 상기의 폴리펩티드들을 인식 및 결합하는 재조합되어 생산된 면역글로블린 일 수 있다.
상기에서 논의된 항체 또는 면역글로블린은 생리학적으로 허용가능한 담체와 함께 개체로 투여되는 것이 바람직하다. 상기 항체는 이에 제한되지는 않으나, 피하(s.c.), 경막하, 정맥내(i.v.), 근육내(i.m.), 지주막하, 복강내(i.p.), 뇌내, 동맥내 또는 병변내 투여를 포함하는 비경구 투여, 국소적 투여(예컨데, 수술 응용 또는 수술적 죄약) 및 폐로 투여(예컨데, 에어로졸, 흡입제 또는 파우더) 및 하기에 추가적으로 논의되는 것과 같은 다양한 방식에 의해 투여될 수 있다. 항- α4 면역글로블린 또는 α4의 리간드에 대한 면역글로블린은 정맥내 또는 피하내로 투여되는 것이 바람직하다.
상기 방법에 따른 면역글로블린은 다양한 방법으로 제형화 될 수 있다. 제형(투여되는 개체에 치료학적으로 효과적인 제형) 내에서 치료학적 활성을 가진 면역글로블린면역글로블린면역글로블린내지 1 g/mL 일 수 있다. 바람직하게는, 상기 면역글로블린 조성물을 그들을 필요로 하는 개체에 투여 시 개체의 혈액에서의 농도는 약 10 ug/mL 이상에 도달하는 것이 바람직하다.
바람직하게, 상기 면역글로블린은 예를 들면, 적절한 비활성 담체와 함께 멸균된 생리적 식염수와 같은 비경구 투여용으로 제형화 할 수 있다. 또한 상기 담체 용액에서의 면역글로블린의 농도는 일반적으로 약 1~150 mg/mL 사이이다. 상기 투여되는 용량은 투여 경로에 따라 결정된다. 바람직한 투여 경로는 비경구적 투여, 피하내 투여 또는 정맥내 투여를 포함한다.
비경구적 투여일 경우, 본 발명의 면역글로블린은 계면활성제의 첨가가 있거나 또는 없는 오일 및 물과 같은 멸균된 액체가 될 수 있는 약학적 담체와 함께 생리학적 허용가능한 희석제내의 물질의 현탁액 또는 용액의 주사용 투약으로 투여될 수 있다. 다른 허용가능한 희석제로는 동물, 채소 또는 합성유래의 오일, 예를 들면, 땅콩 오일, 대두 오일 및 미네랄 오일이 있다. 일반적으로, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 글리콜은 액체 담체로 적합하며, 특별히 주사 가능한 용액으로 적합하다. 본 발명의 항체 및 면역글로블린은 데포 주입(depot injection) 또는 이식 조제품의 형태로 투여될 수 있고, 활성 성분의 지속적인 방출이 가능하도록 제형화 될 수 있다. 바람직한 조성물은 20mg/mL의 단클론 항체를 포함하고, 염산으로 pH 6.0으로 조정되고, 50mM L-히스티딘, 150mM 염화나트륨(NaCl)으로 이루어진 액상 버퍼로 제형화 된다.
본 발명에 따라, α4 를 인식하고 결합하는 면역글로블린, α4 이합체 또는 α4(또는 α4 이합체)에 결합하는 리간드는 단독으로 투여될 수 있고 또는 상기에서 기술한 바와 같은 종양을 치료 및 개선하기 위한 다른 시약들과 함께 투여될 수 있다. 상기 시약들은 또한 환자의 치료에 사용되기 위한 약제의 제조에 사용될 수 있다. 다른 암 치료제의 투여는 면역글로블린의 투여 전, 투여 시, 또는 투여 후에 수행할 수 있다. 개체 면역글로블린의 투여는 수술치료, 방사선, 호르몬 치료요법, 면역요법, 온열요법 또는 다른 암 치료법의 이전, 치료 시 또는 치료 후에 수행될 수 있다. 개체 면역글로블린의 투여는 필요에 따라 매일, 일주일에 한번 또는 한달에 한번 씩 수행될 수 있다. 바람직하게는 상기 면역글로블린은 일주일에 한번 이상으로 투여할 수 있다. 면역글로블린의 치료학적 제형은 바람직한 순도를 가지는 상기 면역글로블린을 임의의 생리학적 허용가능한 담체, 첨가제, 보존제 또는 안정제(REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCE, 16th ed., A. Osol, Ed., 1980 및 최신판)와 혼합하여 동결건조된 단단한 고체 또는 액상용액의 형태로 저장용으로 제조된다. 허용가능한 면역글로블린 담체, 첨가제 또는 안정제는 투여되는 복용량 및 농도에 있어서 환자에게 비독성, 비치료적 및/또는 비면역적이며, 또한 인산염, 구연산염 및 다른 유기 산과 같은 버퍼; 아스코르브산을 포함하는 항산화제; 저 분자량의 폴리펩티드(약 10개의 잔기 이하); 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로블린과 같은 단백질들; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 폴리머; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 라이신과 같은 아미노산들; 단당류, 이당류 및 글루코스, 만노스 또는 덱스트린과 같은 다른 탄수화물들; 에틸렌디아민테트라아세테이트(EDTA)와 같은 킬레이팅 시약; 만니톨 또는 소르비톨과 같은 당 알콜; 소듐과 같은 염-형성 반대이온들; 및/또는 트윈®, 플루로닉스 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 비이온 계면활성제일 수 있다. 담체 분자의 특이적 예로는 이에 제한되지는 않으나, 글리코스아미노글리칸(예컨데, 헤파린 설페이트), 히알루론산, 케라탄-설페이트, 콘드로이틴 4- 설페이트, 콘드로이틴 6-설페이트, 헤파란 설페이트, 더르마틴 설페이트, 페를레칸 및 펜토폴리셀페이트를 포함할 수 있다.
면역글로블린을 포함하는 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 비독성 담체 또는 희석제를 포함하는 것이 바람직하고, 이는 동물 또는 사람에게 투여하기 위한 약학적 조성물을 제형화하는데 일반적으로 사용되는 베히클(vehicles)이다. 상기 희석제는 혼합물의 생물학적 활성에 영향을 주지 않는 것으로 선택한다. 예를 들면, 이에 제한되지는 않으나, 증류수, 생리적 인산염-완충식염수, 링거 용액, 덱스트로스 용액 및 한크 용액(Hank's solution)을 포함한다.
본 발명의 약제는 식물성의 또는 다른 유사한 오일, 합성 지방산 글리세리드, 고지방산의 에스테르 또는 프로필렌 글리콜과 같은 비수용성 또는 수용성 용매에서 용해화, 현탁화 또는 유상화 되어 주입하기 위한 제형으로 제형화 할 수 있다. 상기 제형화는 또한 용해제, 등장제, 현탁제, 유화제, 안정제 및 보존제와 같은 통상적인 첨가제를 포함할 수 있다.
상기 면역글로블린은 흡입 또는 폐로 전달을 통해 투여되는 에로졸 제형에 이용될 수 있다. 상기 본 발명의 시약은 디클로로디플루오메탄, 프로판, 질소 등과 같은 가압되어 허용 가능한 압축 불활성 가스(propellant)로 제형화 될 수 있다.
상기 면역글로블린은 예를 들면, 코아세르베이션 기술 또는 콜로이달 약물 전달 시스템(예를 들면, 리포좀, 알부민 미소구형, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐) 또는 마크로에멀젼에서 계면중합(예를 들면, 히드록시메틸셀룰로즈 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-메틸메타크릴레이트 마이크로캡슐)에 의해 제조된 마이크로캡슐에 포괄될 수 있다. 이러한 기술들은 REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCE 에 개시되어 있다.
생체내 투여용으로 사용되는 상기 면역글로블린은 반드시 멸균되어야 한다. 상기 멸균은 동결건조 및 재결합(reconstitution) 이전 또는 이후에 멸균된 여과막을 통한 여과에 쉽게 수행되어 진다. 상기 면역글로블린은 통상적으로 동결건조된 형태 또는 용액의 형태로 저장된다.
치료상의 면역글로블린 조성물은 일반적으로 정맥주사 용액 백(bag)이거나 피하 주입용 주사 바늘 또는 유사한 날카로운 도구에 의해 뚫을 수 있는 마개를 가진 바이알과 같은 멸균이 가능한 포트를 가지고 있는 용기에 담는다.
지속적 방출 제형의 적절한 예로는 단백질을 함유하는 고체 소수성 폴리머들의 반투막성 매트릭스를 포함하고 있고, 상기 매트릭스는 형상화된 물건, 예를 들면, 필름 또는 마이크로캡슐의 형태일 수 있다. 상기 지속적 방출 매트릭스의 예로는 폴리에스테르, 히드로겔(예를 들면, Langer 등이 발표한 J. Biomed . Mater . Res. 15:167-277,1981 및 Chem . Tech . 12:98-105,1982에 기재된 폴리(2-히드록시에틸-메타아크릴에이트) 또는 폴리(비닐알콜)), 폴리락티드(미국특허 제 3,773,919호), L-글루타민산 및 감마 에틸-L-글루타메이트 공중합체(Sidman 등이 발표한 Biopolymers 22: 547-556,1983), 비분해성 에틸렌-비닐 아세테이트(Langer 등이 발표한 상기 문헌), LUPRON DEPOTTM(즉, 젖산-글리콜산 코폴리머 및 루프롤리드 아세테이트로 이루어진 주입가능한 미소구형)과 같은 분해성 젖산-글리콜릭산 공중합체 및 폴리-D-(-)-3-히드록시뷰티릭산(EP 133,988)을 포함한다.
에틸렌-비닐 아세테이트 및 젖산-글리콜릭산과 같은 폴리머가 100일 이상 분자들의 방출이 가능한 반면, 특정 히드로겔은 단기간 동안 단백질을 방출한다. 캡슐화된 항체가 신체 내에 오랫동안 남아 있을 때, 상기 항체가 37℃에서 공기 중에 노출하게 되면 변성화 되거나 또는 응집될 수 있고, 그 결과 생물학적 활성을 잃고 면역원성에 변화가 일어날 수 있다.
관련이 있는 메카니즘에 따라 면역글로블린 안정화를 고안하는 것이 합리적인 전략이다. 예를 들면, 만약 응집 메카니즘이 티오-다이설파이드 교환을 통한 분자 사이의 S-S 결합 형성이 된 것으로 알려진 것이라면, 안정화는 변형된 설프히드릴 잔기, 산 용액으로부터의 동결건조, 조절된 수분 성분, 적절한 첨가제의 사용, 개선된 특정 폴리머 매트릭스 조성물 등에 의해 획득될 수 있다.
지속적 방출되는 면역글로블린 조성물은 리포좀으로 포괄된 면역글로블린을 포함한다. 면역글로블린을 포함하는 리포좀은 공지된 방법에 의해 제조된다(Epstein et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA 82:3688-92, 1985; Hwang et al., Proc. Natl . Acad . Sci . USA 77:4030-4, 1980; 미국특허 제4,485,045호; 제 4,544,545호; 제6,139,869호; 및 제6,027,726호). 통상적으로, 상기 리포좀은 작고(약 200 내지 800 Å), 기름 성분이 약 30 몰 % 콜레스테롤보다 많은 유니라멜라 타입이며; 최적의 면역글로블린 치료를 위해 조절되는 선택 비율이다.
본 발명의 면역글로블린은 지속적 방출 형태, 예를 들면 데포 주입, 이식 조제품 또는 삼투펌프의 형태로 투여될 수 있고, 활성 성분의 지속된 방출이 가능한 방식으로 제형화 할 수 있다. 지속적 방출 제형을 위한 이식은 당업계에 잘 알려져 있다. 이식은 생분해성 또는 비-생분해성 폴리머를 지닌 미소구형, 슬래브 등으로 제형화 되어진다. 예를 들면, 젖산의 폴리머 및/또는 글리콜릭산 중합체는 숙주에 좋은 내성이 있는 침식 가능한 중합체를 형성한다. 상기 이식을 예컨데, 고체 종양 근처에 함으로써 활성 약제의 국부 농도가 신체의 다른 부위에서보다 증가 된다.
면역글로블린의 일반적인 일일 복용량은 상기에서 언급한 요인들에 따라 약 1 ㎍/㎏ 내지 약 200 ㎎/㎏ 개체 중량 또는 그 이상일 수 있고, 바람직하게는 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 150 ㎎/㎏ 개체 중량 일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏ 개체 중량 일 수 있다. 더욱더 바람직하게는 1 ㎎/㎏ 내지 약 75 ㎎/㎏환자 중량(및 상기 수치들 간의 모든 정수 수치)의 범위 일 수 있다. 일반적으로, 임상의학자는 목적하는 효과를 얻을 때까지 면역글로블린을 투여할 것이다. 이러한 치료 과정은 공지된 어세이에 의해 쉽게 관찰할 수 있다.
"안정한" 면역글로블린, 항체 또는 항체 단편 제형화는 저장하는 동안 그 안에 있는 단백질이 물리적인 안정성 및/또는 화학적인 안정성 및/또는 생물학적인 활성을 반드시 지니고 있는 것이다. 단백질 안정성을 측정하기 위한 다양한 분석 기술은 당업계에 공지된 방법을 이용할 수 있고, Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301(Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Pubs. 1991) 및 A. Jones, Adv . Drug Delivery Rev . 10:29-90, 1993의 문헌을 참고할 수 있다. 안정성은 선택된 시간 동안 선택된 온도에서 측정할 수 있다. 바람직하게 상기 제형은 상온(약 30℃) 또는 40℃에서 적어도 1달간 안정하며 및/또는 약 2 내지 8℃에서는 적어도 2년간 안정하다. 또한 상기 제형은 제형을 냉동(예컨대, -70℃) 및 해동 후에도 안정할 수 있다.
약학적 제형에 있어서 면역글로블린의 "생물학적 활성의 유지"는, 만약 주어진 시간에서 면역글로블린의 생물학적 활성이 그 시점에서 나타나는 생물학적 활성의 약 10%(어세이의 오차범위 내)이내라면 상기 약학적 제형은 예를 들면 항원 결합 어세이에서 결정된 것에 의해 제조되어 진 것이다.
본 발명은 하기 실시예를 참조로 하여 상세히 기술되지만, 다양한 변형이 본 발명의 기술적 사상에서 벗어남 없이 만들어질 수 있으며 당업자에게 잘 알려져 있다.
< 실시예 1>
시험관 내 종양 세포 증식에 있어서 나탈리주마브의 효과
나탈리주마브가 형질전환된 세포 및 종양 형성을 가능하게 하는 클로날 증식의 유도 또는 억제의 능력이 있는지 확인하기 위하여, 시험관 내에서 수용체를 발현하는 악성 세포의 성장을 자극하는 나탈리주마브의 능력을 측정하는 실험을 하였고, 상기 연구는 동물 종양 모델에서 수행하였다.
종양 세포주의 증식에서 양성 또는 음성 효과의 평가는 3H-티미딘 결합 어세이를 이용하여 수행하였다. 인간 종양 세포의 성장 및/또는 전이의 억제 또는 증식의 평가는 종양을 이종이식한 누드/SCID 마우스 모델을 이용하여 결정하였다. 32개의 종양 세포주를 스크린 하였고, 상기 32개의 종양 세포주 중 12개의 세포주는 직장암, 직장 선암, 결장 선암 또는 결장암 세포주이고; 7개의 세포주는 흑색종 또는 멜라닌 결핍 흑색종; 6개의 세포주는 방광 이행 세포암 또는 방광암; 3개의 세포주는 백혈병; 2개의 세포주는 림프종 및 2개의 세포주는 전립선암 세포주였다.
면역조직화학(immunohischemistry:IHC) 및 유세포분석(fluorescence activated cell sorting:FACS)은 α4 발현을 확인하기 위하여 수행하였다. 26개의 세포주 중에서 5개의 세포주는 면역조직화학에 의해 양성으로 평가되었다. 유세포 분석에 의해 음성 또는 비슷한 결과를 보인 21개의 세포주 중에서 4개의 세포주는 유세포 분석을 통해 매우 양성적(> 85%)인 결과를 나타냈다. 상기 면역조직화학에 의해 음성 또는 비슷한 결과를 보인 2개의 세포주는 유세포 분석에 의해 약하게 적당한 양성적(moderately positive)(22.5 및 77.6%)인 결과를 보였다. 6개의 세포주는 면역조직화학 분석에 의해 평가되지 않았다. 단지 한 개의 세포주만이 유세포분석에 의해 적당하게 양성적인(moderately positive)(68.4%) 결과를 나타냈다.
또한 VCAM-1 결합에 대한 세포접착 어세이를 수행하였다. 11개의 세포주 중에서 7개의 세포주가 양성으로 나타났다. 세포 증식 어세이에서 9개의 세포주 중 9개의 세포주 모두가 독성 또는 증식효과가 없는 것으로 나타났다. AS283, HT-29, MOLT-4 및 UM-UC-3 세포주들은 Tysabri®(나탈리주마브)을 처리하였고, 삼중 수소 티미딘의 흡수를 측정하였다. 8개의 다른 농도(0.001-100 mg/mL)로 1, 2, 3, 4 및 5일째 노출시킨 결과, 독성 또는 증식 효과가 나타나지 않았다.
< 실시예 2>
SCID 마우스에 피하 이식된 인간 MOLT -4 이종 이식( xenografts )의 성장에 미치는 나탈리주마브(natalizumab)의 효과
이 실험의 목적은 나탈리주마브(natalizumab)의 투여가 암컷 SCID 마우스에 피하 이식된 인간 MOLT-4 급성 림프구성 백혈병 이종 이식(xenografts)의 성장에 미치는 영향을 측정하기 위한 것이다.
재료 및 방법
실험(In-life experimental work)은 0 일부터 시작하여 80일에 종료하였다. 5 내지 6 주령의 암컷 SCID 마우스는 타코닉팜사(Taconic Farms Inc, Germantown, NY)로부터 구입하였으며, 실험 1주일전부터 실험실에서 순응시켰다. 상기 실험동물은 마이크로 아이솔레이트 케이지(micro-isolator cages)의 무균시설(pathogen-free barrier facility)에서 12시간 낮/밤 주기로 하여 케이지(cage)당 5마리씩 사육되었다. 상기 실험동물에게는 여과시킨 버밍햄(Birmingham)시의 물과 살균된 설치류 푸드 에드리비튬(adlibitum)을 제공하였다. 마우스는 살균가능한(sterilizable) 설치류 음식물(Harlan-Teklad TD8656)에 의해 사육되었다. 케이지는 주 2회 교체하였다. 상기 실험동물을 매일 관찰하였으며, 임상학적 특징을 기록하였다.
30에서 40 밀리그램의 MOLT-4 인간 백혈병 단편을 마우스의 오른쪽 액서레리(auxillary) 부위에 12-게이지(gauge) 투관침을 사용하여 이식한 다음 사육하였다. 종양 단편 이식일을 실험일 0일로 하였다. 종양은 약물투여 전 75-144mg(크기가 75-144mm3)에 도달할때까지 성장시켰다. 충분한 개체의 마우스에 종양 단편을 이식하였기 때문에 약물투여를 시작하는 개시일(종양 이식후 14일째)에 근접한 종양 중량을 가지는 마우스를 선별할 수 있었다. 상기 선별된 적당한 크기의 종양을 가진 실험동물들은 임의선택적으로 투여군으로 나뉘어졌다. 투여 첫째날의 평균(mean)종양 무게의 수치는 84 또는 96mg이었고; 14일째의 중앙값(median) 종양 무게는 75 또는 88 mg이었다.
종양 단편 이식일에 하나의 도너(donor)종양을 취하여, 이등분으로 절단하였 다. 종양의 절반은 O.C.T 화합물에서 냉동하였으며, 다른 절반은 10% 포르말린액에서 고정시켰다. 상기 냉동하거나 포르말린에 고정된 종양들은 분석을 위하여 바이오젠 아이덱사(Biogen Idec Inc)로 이송되었다. 마우스의 이식에 사용하기 위하여 각각의 도너(donor) 종양으로부터의 절제된 단편은 마우스의 이식에 사용되기 위하여 티오글라이코레이트(thioglycollate) 배지가 담긴 튜브에 옮긴 후 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션되었다.
나탈리주마브(natalizumab; 20mg/mL 용액, GenSicor Pharmaceuticals Inc., Lot Nos. F23014 및 G23004)와 희석제(Tysabri®용 Placebo, Gensia Sicor Pharmaceuticals Inc., Lot No. F85002)는 바이오젠 아이덱사(Biogen Idec Inc)로부터 받았으며 설명서에 따라 +2-8℃에서 보관하였다. 0.97-mg/mL 용액 바이알(Vial)의 인간 면역글로블린(IgG4) 용액은 시그마-알드리치(St.Louis, MO, Lot No.122K9159)로부터 공급받았으며 설명서에 따라 -84℃에서 보관하였다. 택솔®(파크릴탁셀)의 임상적 제형(6.0mg/mL in 50% 크레모포어(cremophor)-EL 50% 에탄올, Bristol-Myers Squibb Company, princeton, NJ; Lot No. 2L57296)을 구입하였으며 설명서에 따라 냉동시켰다. 식염수(0.9% 식염수, 동물용)은 피닉스 파마슈티컬사(St. Joseph, MO, Lot Nos.. 262053F, 206205F, 208281F)에서 구입하였으며, 실온에서 보관하였다. 각 제형일(formulation)에는 새로운 식염수를 사용하였다.
14일째에, 20mg/mL 나탈리주마브 용액을 티사브리®용 플라세보(Tysabri®용 Placebo)로 희석하여 1.0mg/mL를 만들었고, 그 후의 주사(injection)일에는 20mg/mL 스탁 솔루션을 타사브리®용 플라세보(Tysabri®용 Placebo)로 희석하여 0.5-mg/mL 나탈리주마브 용액을 제조하였다. 나탈리주마브 바이알(Vial)은 흔들지 않고 인버트(invert)로 혼합하였다. 각 제형일에는 나탈리주마브와 타사브리®용 플라세보(Tysabri®용 Placebo)의 신규 바이알을 사용하였다. 14일째에 IgG4의 0.97-mg/mL 스탁 솔루션(stock solution)을 해동시킨 후 마우스에 주사하였다. 그 후의 주사(injection)일에는 0.97-mg/mL 스탁 솔루션을 0.9% 식염수에 희석하여 0.5mg/mL의 IgG4 용액을 제조하였다. 각 제형일에는 IgG4의 신규 바이알을 사용하였다. 통상적 제형인 50% 크레모포어(cremophor)-EL/50% 에탄올에 6mg/mL 택솔 용액이 분주된 것은 각 주사일에 0.9% 식염수에 희석되어 12.5% 크레모포어(cremophor)-EL/12.5%에탄올/75% 식염수에 1.5-mg/mL의 용액이 되도록 제형화되었다. 모든 투여액은 제형 후 2 내지 3시간 내에 주사되었다.
14, 17, 24, 31, 38 및 45일째 실험군 1(식염수)과 실험군 2(나탈리주마브)에 투여할 2개 투여액의 1mL 분주된 것은 제형 후에 투여병으로부터 즉시 취하였다. 각 1mL의 나탈리주마브와 식염수 분주된 것은 실험 명칭, 실험군 번호, 화학물 이름, 투여량, 투여경로, 주사 부피, 실험일 및 “Prep Lab"을 기재한 바이알(vial)에 분산(dispense)되었고 즉시 냉동되었다.
추가적으로 2개의 식염수와 나탈리주마브의 1mL 투여액은 각 군에 주사전에 2개의 실링게(1mL/실링게)에 주입되었다. 20마리로 구성된 각 군에 투여되는 동안 상기 실링게를 실온에 두었다. 투여종료후에 각 실링게의 내용물은 실험번호, 군번호, 화합물 명칭, 투여량, 투여경로, 주사부피, 실험일 및 “Animal Lab"이 기재된 바이알(vial)에 분산(dispense)되었고, 상기 바이알은 즉시 냉동되었다. 실험이 종 료된 후 상기 분주된 것은 분석을 위하여 코반스 레버레토리사(Covance Laboratories, Inc)로 이송되었다.
약물투여
실험동물은 임의적으로 각 20마리씩 6 군과 30마리의 1 군으로 나뉘어졌다. 두 실험군(실험군 1과 5)에는 0.9% 식염수(saline)를 처리하였다. 실험군 2, 6 및 7은 나탈리주마브를 투여하였다. 실험군 3의 실험동물은 IgG4(이소타입 대조구)을 투여하였다.
실험군 4의 실험동물에는 택솔®(양성 대조구)을 투여하였다. 식염수, 나탈리주마브 및 IgG4(실험군1,2,3,5 및 6)의 투여는 14,17,21,24,28,31,35,38,42 및 45일째(5주 동안 Q3Dx2, 금요일부터 월요일 스케줄)에 IP 투여를 하였다. 실험군 7(30마리의 마우스 실험군)의 나탈리주마브 투여는 14, 17, 21, 24, 28, 31, 35 및 38(4주동안 Q3Dx2)째에 실시하였다. 14일째에 나탈리주마브는 10mg/kg의 양으로, 그 다음 투여부터는 5mg/kg/dose의 양으로 투여하였다. 14일째 IgG4는 9.7mg/kg의 투여양으로 투여하였고, 그 다음 투여부터는 5mg/kg/dose의 양으로 투여하였다. 택솔®은 14일째 투여를 시작하여, 정맥주사로(IV) 하루에 한번 5일 연이어(Q1Dx5) 15mg/kg/dose의 양으로 투여하였다. 모든 테스트 화합물들은 0.1mL/10g 체중의 베히클(vehicle)부피로 각각의 투여일에 각각의 동물 무게에 맞게 정확하게 투여하였다.
주사(실험일 24일과, 41일)전에 측정한 2가지 경우를 제외하고는, 투여를 시 작하는 실험일 14일에 실험동물의 무게를 측정하고 피하에 있는 종양을 측정하였다. 투여의 종료 후 종양과 신체의 중량데이터는 일주일에 두번 수집하였다. 종양부피는 캘리퍼스(caliper) 측정(mm)에 의하여 조사하였고, 타원체 구(ellipsoid sphere)에 대한 공식을 이용하였다: LχW2/2=mm3, 상기 L 및 W는 각 측정에 의해 수집된 큰값과 작은값 수직 치수(perpendicular dimensions)이다. 상기 공식은 또한, 종양무게, 단위당 밀도(1mm3=1mg)을 산출하는데도 사용되었다.
실험군 7의 실험동물 혈액을 투여의 과정이 끝난후에 수집하였다. 실험동물 No. 1-5는 14일째 주사후 8시간에 채혈하였다. 5마리 실험동물은 21일(실험동물 No. 6-10), 28일(실험동물 No. 11-15), 35일(실험동물 No. 16-20) 및 38일(실험동물 No. 21-25)의 주사전에 채혈되었다. 실험동물 No. 26-30은 38일 주사후 8시간에 채혈되었다. 혈액은 CO2/O2 마취하에 레트로-오비탈 펑쳐(retro-orbital puncture)에 의해 채혈되었다. 실험동물로부터 최대양의 채혈(terminal bleeding)을 위하여 코팅되지 않은 모세관을 사용하였으며, 혈액은 마지막 실험동물이 채혈된 각 시간으로부터 실온에서 30분 동안 두어 응집(clot)시켰다. 혈액 샘플을 +4℃에서 10분 동안 10,000rpm에서 원심분리하였다; 혈청을 분리하고 드라이아이스에서 냉동시켰다. 모든 혈청샘플은 분석을 위하여 바이오젠 아이덱사로 수송하기 전까지 -84℃에서 보관하였다.
실험군 5와 6의 실험동물의 원발성(primary) 종양을 28일째에 절제하였고, 하루 후 실험군 5의 중앙값(median) 종양무게는 466mg에 도달하였다.
마취 투여와 수술/ 수술 후 회복과정(post-surgery recovery procedures)은 승인된 표준 실험 방법에 따라 수행되었다. 간단히 살펴보면, 각 동물을 마취한 다음 상기 절개부위를 소독액으로 소독하였다.
절개는 종양(종양의 직경보다 3~4mm길게)의 한쪽면의 표면을 따라 수행하였다. 상기 피부는 반전(reflect)되었고, 종양은 절개를 통해 노출(everted)되었다. 종양은 피부와 근육으로부터 적출되었다. 상기 절개된 부위는 4.0mm 상처용 클립으로 봉합되었다. 각각의 적출된 종양은 절반으로 자른 다음 반은 O.C.T 화합물에 냉동시키고, 나머지 반은 10% 포르말린 용액에 고정시켰다. 절제된(resection) 부위에서 종양이 재성장하는지 여부는 일주일에 2번 관측하였고, 새로운 고형 종양이 형성되면,그것의 크기를 기록하였다.
실험군 1-4의 실험동물 No. 1-10은 종양 이식 후 47일째(2003.5.16)에 안락사시키고; 실험군 1-4의 실험동물 No. 11-20은 48일째(2003.5.17) 안락사시켰다. 실험군 5 및 6의 모든 살아있는 동물(실험군 5의 실험동물 No. 12 와 실험군 6의 실험동물 No. 8을 제외, 그 이유는 하기에 설명하였음.)은 종양 이식 후 80일째(2003.5.19)에 안락사시켰다. 실험군 5의 실험동물 No. 12은 과도한 종양 무게(>4000mg)때문에 73일째에 희생되었으며(sacrificed), 실험군 6의 실험동물 No. 8은 종양 궤양화에 의해 73일째에 희생되었다. 실험군 7의 5마리 동물은 14, 21, 28, 35일째에 안락사시켰으며, 10마리 실험동물은 38일째에 안락사 시켰다. 47, 48, 80일째 모든 동물의 사체는 해부하여 조직병리학적으로 분석하기 위하여, 서던 리서치 인스티튜트의 안전 평가 부서(Safetye assessment department)에 보냈다. 실험군 7의 실험동물은 조직병리학적 조사 및 해부에서 제외되었다.
실험군 1-6의 실험동물에 종양 이식(피하)은 실험 0일째 실시하였다. 약물 투여는 14일째 개시하였고, 45일째 투여를 종료하였다. 실험군 5 및 실험군 6에서 원발성(primary) 종양의 적출은 이식 후 28일째에 실시하였다. 80일째에는 상기 동물을 안락사시켰다. 절제하지 않은(non-excision) 실험군의 실험동물은 47일에서 48일째 안락사시켰다.
실험군 세포주 투여 N(개체수) 투여양(mg/kg) 투여부피(mL/kg)
1 MOLT-4 식염수 20 0 10
2 MOLT-4 택솔 20 15 10
3 MOLT-4 hIgG4 20 10/5 10
4 MOLT-4 나탈리주마브 20 10/5 10
5 MOLT-4 식염수 20 10 10
6 MOLT-4 나탈리주마브 20 10/5 10
실험군 7-10의 실험동물에서, 종양이식(피하)는 0일째 실시하였다. 7일째 투여 시작하였고, 45일째에 투여를 종료하였다. 모든 동물은 46-47일째 안락사시켰다.
실험군 세포주 투여 N(개체수) 투여양 투여부피
7 MOLT-4 식염수 20 0 10
8 MOLT-4 택솔 20 15 10
9 MOLT-4 hIgG4 20 10/5 10
10 MOLT-4 나탈리주마브 20 10/5 10
실험군 11의 실험동물에 있어서, 종양의 이식(피하)은 0일째 실시하였고, 약물의 투여는 14일째 시작하였으며, 45일째 투여를 종료하였다. 각 실험군의 5마리씩은 1, 7, 14, 21, 24일째 안락사시켰다. 이 실험군은 나탈리주마브 혈청 레벨의 확인하는데 사용하였다.
실험군 세포주 투여 N(개체수) 투여양 투여부피
11 MOLT-4 나탈리주마브 30 10/5 10
나탈리주마브 투여는 10mg/kg의 양으로 특정된 날에 하였다. 그 다음 투여(doses)는 일주일에 두 번(즉, 매 3~4일) 투여하였다. 투여 레벨은 1회 투여후에 약동학(pharmacokinetics)의 모델링 및 확실하게 반복된 투여량 약동학(confirmatory repeated dose pharmacokinetic)연구를 통한 혈청농도를 근거로 결정하였다. 투여 레벨은 반복된 투여양(dose administration)에 따라 20ml/mL의 최소혈청농도로 선택하여 수행하였다.
MOLT-4 종양에 나탈리주마브 투여는 절제한 실험군에서 종양성장을 늦추는 효과를 나타내었고, 절제한 실험군의 몇몇 동물에서는 투여 후 종양이 없어졌다. MOLT-4 종양이식전에 나탈리주마브 투여는 종양 성장을 현저히 저하시켰다. 나탈리주마브 투여는 투여기간의 과정중에 동물의 체중이 증가한 것에 의하여 동물의 건강에 영향을 미치지 않는다는 것을 알 수 있었다.
비특이적 사망 수, 부분적 또는 완전한 종양 퇴화(regression)의 수, 종양 제거된 생존동물의 수 및 평가 크기(evaluation size)에 도달하는 각 동물의 시간(4개의 종양 덩어리가 두배로 되는데 소요되는 시간(time to reach four tumor mass doubling))을 조사하였다. 4개의 종양 덩어리가 두배로 도달하는 각각의 실험동물에 있어서의 시간은 중앙값(median) 종양(T-C)의 성장에 있어서 전반적 지연을 계산하는데 이용되어진다.
모든 계산에 있어서, 실험군 1(식염수 처리한 실험동물)을 대조군(C)으로 사용하였다. 중앙값(median) 종양 무게, 평균(mean) 종양무게 및 표준편차 및 대조군에서의 중앙값(median) 종양과 평균(mean) 종양무게에 대한 투여군에서의 중앙값(median) 종양무게와 평균(mean) 종양무게의 비교(각각 MEDIAN T/C=median T/median C x 100% 및 MEAN T/C=mean T/mean C x 100%)는 각각의 데이터 수집일에 각각의 실험군별로 계산하였다(값은 표 8-2 부터 8-8까지 나타내었다.). 평균(Mean) 체중과 표준편차는 각각의 데이터 수집일에 각각의 실험군에서 계산하였다(값은 표 8-9 부터 8-15까지 나타내었다.)
실험군 1, 2, 3 및 4의 실험동물 No 1-10의 종양은 47째 적출하였다. 실험군 1, 2, 3 및 4의 실험동물 No 11-20의 종양은 48째 적출하였다. 실험군 5 및 6의 실험동물 No.1-20의 원발성(primary) 종양은 28 일째 외과적으로 적출하였다. 실험군 5 및 6의 모든 생존 실험동물의 이차 종양(원발성 종양 부위에서 재성장한 종양)은 80일째 적출하였다. 실험군 6의 실험동물 No. 1 및 15는 80일째에 해부학적으로 이차종양을 나타내지 않았다(실험군 5의 실험동물 No.4 및 실험군 6의 실험동물 No.3은 28일째 수술후 회복기간(post-surgery recovery) 동안 사망하였으므로 2차 종양을 확인할 수 없었다. 실험군 5의 No 19 실험동물은 47일째 죽어서 발견되어, 사후 부검을 실시하였다. 실험군 5의 No.12는 실험 73일째에 과도한 종양 무게(4224mg)때문에 실험에서 제외되었다. 실험군 6에서 실험동물 No. 8은 73일째에 종양 궤사로 인하여 실험에서 제외되었다. 실험군 5의 실험동물 No. 10, 17 및 20은 73일째에 죽은채로 발견되었고 현저한 부패(autolysis) 때문에 부검을 실시하지 않았다.).
100mg 이상 나가는 각 종양은 반으로 절제하여 O.C.T 화합물에서 드라이 아이스/에탄올 슬러시를 이용하여 냉동시켰고 -84℃에서 보관하였다. 100mg이하인 종양(실험군 4의 실험동물 No 1, 3, 7, 9, 11, 12, 14-18 및 20)은 전체로서(in toto) O.C.T 화합물에서 완전히 냉동시켰다. 100mg이하의 중량인 실험군 4의 실험동물 No. 2, 4, 5, 6, 8, 13 및 19의 종양은 전체로서 10% 포르말린 용액에 고정시켰다. 실험종료 후 O.C.T 화합물에서 냉동된 모든 종양 시료(총 145개의 종양 시료)는 찰스 리버 레버레토리(Charles River Laboratories)의 시에라 바이오메디카 부(Sierra Biomedica, Division)로 보내져 면역조직화학 분석에 의해, in vivo 에서 MOLT-4가 VLA-4를 발현하는 것을 확인하였고, 따라서 본 연구를 위한 타당한 종양 모델임을 알 수 있었다.
면역조직화학분석은 통상적인 항-CD49D 항체와 각각의 투여 실험군에서 실험동물의 소단위체(subset으로부터 MOLT-4 종양의 냉동 절편을 이용하여 수행하였다 각 종양의 다른 절반이 존재하는 경우에는 10% 포르말린에 고정시키고, 서던 리서치의 안전 평가 부서(Safety Assessment Department)에 조직병리학 분석을 위해 보내졌다.
데이터 분석
각각의 종양 측량 및 생체중량을 수집하였고, 서던 리서치 인스티튜트에서 개발한 ADAS(Automated Data Acquisition System) 소프트웨어를 사용하여 분석하였다. 모든 데이터는 목적에 맞게 MS 엑셀로 산출되었다. SigmaPlotTM 은 로(raw) 데이터를 그래픽식으로 나타내는데 사용되었다. 실험군들간의 성장 데이터를 통계학적으로 비교하기 위하여, 실험종료(실험군 1-4의 경우 47일째, 실험군 5 및 6의 경우 80일째)전에 마지막 측정한 날의 각 실험동물의 종양무게를 종료점으로 사용하였다.
SigmaStatTM 소프트웨어는 스튜던트 t-테스트(Student's t-test)에 사용되었다. 맨-휘트니 순위합 검정(Mann-Whitney rank sum test)은 상기 데이타 세트가 정상 테스트 또는 등분산 테스트(equal variance test)를 통과하지 못할 경우 t-테스트 대신하여 사용되었다. 통계적 분석결과의 사본은 이 명세서에 첨부되어 있다.
투여 용액 분석( Dose solution analysis )
두개의 투여 용액(MP-21520 및 MP-21522)은 각각 +16% 및 +19% 로 근소하게 목적 농도 ± 15%를 초과하였다. 이러한 차이는 식염수 투여용액 및 희석제에 존재하는 0.01-0.04 유닛의 280nm 흡광도에 의한 것이라고 생각되어진다. 이러한 흡광도는 샘플 컨테이너 스탑퍼(sample container stopper)에서 추출될 수 있는 식염수에 의한 것이라고 생각된다.
SC MOLT -4 백혈병 이종 이식 모델의 성장( Growth of SC MOLT -4 Leukemia Xenografts )
종양 단편 이식일에 티오글라이코레이트(thioglycollate) 배지가 있는 튜브로 옮겨지고, +37℃에서 24시간 동안 인큐베이션된 종양 단편이 담긴 어떤 튜브에서도 종양 단편의 성장은 관찰되지 않았다. 식염수 투여된 실험군(실험군 1)에 있어서 95% 종양 이종 이식을 나타내었는데, 20개 중 1개의 이종 이식(xenograft)은 성장에 실패하였다(no-take). 실험군 1에 있어서, 종양을 갖지 못한 실험동물 No. 20은 모든 계산에서 제외되었다. 종양 성장과 식염수 투여는 체중 감소없이 잘 이루어졌다(tolerated) 되었다. 47일째에 중앙값(median) 종양의 중량은 1764mg이었고, 4개의 종양덩어리로 더블링되는데 30.2 일이 걸렸다.
실험군 5에서 모든 20개체의 식염수 투여 실험동물 종양은 이식 후 빠르게 증식하였다. 종양은 28일째 외과적으로 적출되었다. 수술 후 회복(post-surgery recovery) 기간에 한마리의 실험동물이 죽었다(실험동물 No.4). 실험동물들은 수술 후 급격히 몸무게가 줄었으나(2g[10%]의 최대 평균 체중 감소), 후에 몸무게가 회복되고 계속 성장하였다. 관찰된 체중감소는 적출된 종양 중량의 감소와 마취에 의한 것으로 여겨진다. 4마리는 실험도중 사망하였다. 실험동물 No.19는 47일째 죽어서 발견되었고. 실험동물 No.10, 17 및 20은 73일째 죽은채 발견되었다. 모든 동물의 종양은 절제된 원발성 종양부위에서 다시 자라났다. 80일째 중앙값(median) 종양의 무게는 2363mg이었고, 중앙값(median) 종양이 4개의 종양 덩어리로 더블링(four tumor mass doubling)되는데 60.9일이 걸렸다.
나탈리주마브의 효과
나탈리주마브(실험군 2)를 투여한 경우 죽지않고 잘 견디었으며, 투여한 일주일동안 1g(5%)의 평균체중변동이 있었다. 모든 20개의 종양은 실험하는 동안 성장하였다. 47일째 중앙값(median) 종양무게는 1240mg이었고, 상기 중앙값(median) 종양이 4개의 종양 덩어리로 더블링(four tumor mass doubling)되는데 33.5일이 걸렸다. 47일째에, 식염수 투여군(실험군 1) 및 나탈리주마브 투여군(실험군 2) 각각의 종양 중량을 비교한 결과, 나탈리주마브 투여군에서의 종양 무게는 식염수 투여군의 종양 무게와 통계학적으로 유의한 차이를 나타내지 않았다(p=0.1032, 맨-휘트니 순위합 검정(Mann-Whitney rank sum test)). 이것은 두 실험군에서 종양이 비슷한 속도로 자라고 있음을 나타내는 것이다.
나탈리주마브를 처리한 실험군 6의 모든 20개체의 실험동물에서의 종양은 이식후 빠른 속도로 자라났다. 28일째 종양을 절제하였다. 한마리의 실험동물(실험동물 No. 3)이 수술 후 회복기간(post-surgery recovery period)에 죽었다. 종양 절제 수술에 따라 바로 최소 체중 감소가 있었다.(1g[5%]의 최대 평균 체중 감소 )그러나 후에 체중을 회복하였다. 19마리의 실험동물 중 17마리의 원발성 종양을 절제한 부위에서 종양이 재성장하였다. 2마리의 실험동물은 80일째 연구의 종료일에 종양이 없었다. 80일째 중앙값(median) 종양 무게는 1006mg에 달하였다. 중앙값(median) 종양이 4개의 종양덩어리로 더블링되지 않았다.(>66.0 일).
식염수 투여군(실험군 5)과 나탈리주마브 투여군(실험군 6)에서의 각각 실험동물들 체중을 비교한 결과, 나탈리주마브 투여군에서 종양의 성장이 식염수 투여 군에서 종양의 성장과 통계학적 차이를 나타냈는데(P=0.0189, t-test), 이는 나탈리주마브 투여한 종양은 식염수 처리한 실험군의 종양에 비해 낮은 속도로 재성장하는 것을 나타내는 것이다.
실험군 7에서 나탈리주마브를 투여한 모든 30개체 실험동물의 종양이 성장하였다. 종양의 성장은 수치로 나타내지 않았는데, 상기 동물은 정기 혈액 채취를 위하여 정기적으로 제거(remove)되었기 때문이다.
IgG4 의 효과
IgG4를 투여군(그룹 3)은 죽거나 체중의 감량없이 모든 개체가 잘 견디었다. 모든 20개체의 실험동물은 실험의 종료시 종양을 가지고 있었다. 47일째 중앙값(median) 종양의 중량은 1731mg이었고, 상기 중앙값(median) 종양이 4개의 종양덩어리로 더블링되는데 31.7일이 소요되었다. 47일에 식염수 투여군과 IgG4 투여군에서 각각의 종양 중량을 비교한 결과, IgG4 투여한 실험군의 종양무게는 대조군에서의 종양의 중량과 비교하여 통계학적으로 유의적 차이를 나타내지 않았다(p=0.8004, 맨-휘트니 순위합 검정(Mann-Whitney rank sum test)). 이는 두 실험군의 종양이 비슷한 속도로 성장하는 것을 나타내는 것이다.
택솔 ®의 효과
택솔® 투여군(실험군 4)은 죽거나 몸무게의 감량이 유지됨 없이 잘 견디었다. 5%(1g)의 평균 최대 체중감량이 투여(17일째, 21일째)한 후에 관찰되었다. 택솔은 세포독성제제이기 때문에 근사치의 최대 내성 투여량(approximate maximum tolerated dosage)을 투여하였다. 실험동물은 투여 후(post-treatment) 기간에 체중을 다시 회복하였다. 택솔®의 투여는 MOLT-4 종양 이종 이식(xenograft) 성장을 저해하는데 매우 효과적이었다. 실험의 종료시 20개체 중 12개체에서 종양이 관측되지 않았고, 8마리중 3마리에서 실험 과정 중 종양 덩어리(mass)가 두배로 되었다. 택솔® 투여군에서 종양의 성장은 부형제(vehicle)를 투여한 대조군의 종양성장과 통계학적으로 차이를 나타내었는데(p<0.0001, Mann-Whitney rank sum test), 이것은 택솔®의 투여가 종양의 성장을 억제하는 것을 나타내는 것이다.
조직병리학적 분석( Histopathologic evaluaion )의 결과 요약
요약하면, 다른 투여군간에 자궁, 난소, 림프절, 폐, 간의 손상 및 비장의 확대를 포함하는 총체적 병변이 일정치 않게 관찰되었으나, 약물투여와 관련이 있다는 것을 찾을 수 없었다.
비장과 간에서의 수질 조혈(extramedullary hematopoiesis), 병소의 괴사, 간의 염증, 장간막의 염증 및 심장 심외막의 석화(石化; mineralization)를 포함하는 미세 병변(microscopic lesions)이 다양한 투여군에서 일정치 않게 관찰되었다.
모든 이러한 변화는 우발적이고 자연발생적으로 여겨지며, 모든 테스트 약물의 투여와는 상관없는 것으로 판단되었다. 이종 이식(Xenograft) 성장의 강화는 어떠한 투여 실험군에서도 관찰되지 않았다. 이종 이식(Xenograft) 성장의 확장(extension)은 실험군 5와 실험군 6의 각각 4마리 마우스의 하면 복부(서혜(鼠蹊; inguinal))의 피부에서 관찰되었다. 이종 이식(Xenograft)의 전이 또는 확장은 실험군 5 마우스의 국부적으로 림프구(겨드랑이(axillary), 서혜부(inguinal), 장골(iliac), 하악(mandibular) 및 종격(mediastinal))및 실험군 6 마우스의 서혜부 림프구에서 관찰되었다. 흉선의 전이는 실험군 5와 실험군 6의 각각 한 마리의 마우스로부터 관찰되었다. 나탈리주마브 투여에 따른 이차 인간 급성 림프구성 백혈병의 전이 또는 성장을 악화시키는 증거는 없었다.
종양의 면역 조직학적 분석( immunohistological analysis )의 요약
생체내(in vivo)에서 MOLT-4가 VLA-4를 발현하는 것을 확인하여, 실험동물 모델이 이 연구에 타당한(valid) 종양 모델임을 입증하기 위하여, 종양 절편을 면역조직화학분석에 의해 조사하였다. 면역조직화학분석은 통상적인 항CD49d항체와 각 투여군 실험동물의 부분집합(subset)으로부터 냉동시킨 MOLT-4 종양 절편을 사용하였다.
MOLT-4 세포의 CD49d-특이적 면역양성(immunopositivity)은 로버스트(robust), 그레뉼라 투 위스피(granular to wispy), 디퓨즈 세포질 염색(diffuse cytoplasmic) 및 세포 표면 염색에 의해서 확인하였다. 디퓨즈 세포질 염색(diffuse cytoplasmic staining)을 하면 세포 표면 CD49d 뿐만 아니라 세포질내의 CD49d도 항CD49d항체와 결합한다. 식염수 투여한 대조군과 IgG 4 투여한 대조군의 종양 절편은 로버스트 염색하였고, 면역조직화학 염색 점수는 3 내지 4이었다(각각, “밀접한 공간의 군집된 세포들” 내지 “밀집되어 압축된 세포들”). 부검 전에 약물투여하지 않은 기간이 연장된 나탈리주마브 투여군의 실험동물로부터의 종양 절편을 로버스트 염색하였으며, 면역조직화학 염색 점수는 3 내지 4이었다. 나탈리주마브를 투여하고 약물 투여 종료에 따라 안락사시킨 실험동물에서, CD49d에 대한 면역조직화학염색은 현저히 감소되어 없어지게(absent)되었고 종양 절편의 면역조직화학 염색 점수는 0 내지 2이었다(각각, "표시되어지지 않은 세포들" 내지 "밀접한 공간에서 흩어진 각각의 세포들"). 종양 용해(tumorilytic)제제인 택솔을 투여한 마우스는 면역조직화학염색의 분석하기에 충분치 않은 종양 크기를 가지고 있었다. 상기의 같은 결과는 본 연구의 실험적 조건하의 in vivo에서 MOLT-4 인간 백혈병 세포주가 CD49d를 발현하는 것을 확인시켜주는 것이다.
결론
SC-이식된 MOLT-4 인간 급성 림프구성 백혈병 이식(xenografts) 성장은 나탈리주마브의 투여에 의해 저해되지 않는다. 그러나 1차 종양이 절제된 부위에서의 고형 종양 재성장은 나탈리주마브의 투여에 의해 저해된다. IgG 4의 투여는 (xenografts)의 성장에 영향을 미치지 않는다. 택솔®의 투여는 1차 종양의 성장을 저해하여 실험 종료시 20개체의 실험동물 중 12 개체에서 종양이 관찰되지 않았다. 실험동물의 조직병리학적 분석 결과, 나탈리주마브 또는 IgG4 투여에 의한 인간 급성 림프구성 xenografts의 성장 또는 전이를 악화시키는 증후는 발견되지 않았다. 모든 투여군에서 다양한 총체적 손상 및 미세 손상은 랜덤하게 분포하였다. 그러나 발견된 모든 손상은 자연발생적(spontaneous)또는 우발적(incidental)인 것으로 식염수, 나탈리주마브, IgG4 또는 택솔®의 투여와는 관계가 없는 것으로 판단되었다.
상기 인용된 모든 문헌들은 모든 목적을 위하여 완전하게 본출원에 합치된다. 본출원은 모든 목적을 위하여 완전하게 본출원에 합치되는 2004년 2월 6일에 출원된 미국 가출원 제60/541,946과 연관되어 있다.

Claims (29)

  1. 항-α4 면역글로블린을 그들이 필요한 개체에 종양 성장 및/또는 전이를 억제하는데 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함하는 종양 성장 및/또는 전이 진행 및/또는 전이의 발달을 억제하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 항-α4 항체가 α4β1 인테그린 및/또는 α4β7 인테그린에 결합하는 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린가 나탈리주마브(natalizumab)인 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 종양이 흑색종(melanoma), 전립선암(prostate cancer), 백혈병(leukemia) 또는 림프종(lymphoma) 인 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 흑색종이 피부 흑색종(cutaneous melanoma), 전이성 흑색종(metastatic melanoma) 또는 안내 흑색종(intraocular melanoma)인 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제4항에 있어서, 상기 림프종이 비호지킨 림프종(non-Hodgkin's lymphoma), 피부 T-세포 림프종(cutaneous T-cell lymphoma) 또는 호지킨 질병(Hodgkin's disease)인 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 제4항에 있어서, 상기 백혈병이 만성 골수성 백혈병(chronic myelogenous leukemia), 급성 골수성 백혈병(acute myelogenous leukemia), 성인 급성 림프구성 백혈병(adult acute lymphoblastic leukemia), 성숙 B-세포 급성 림프구성 백혈병(mature B-cell acute lymphoblastic leukemia), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphoblastic leukemia), 전림프구성 백혈병(prolymphocytic leukemia)또는 모발상 세포 백혈병(hairy cell leukemia)인 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 제 3항에 있어서, 상기 개체에 나탈리주마브를 약 1mg/kg 개체 중량 내지 약 100mg/kg 개체 중량의 양으로 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 개체에 나탈리주마브를 약 1mg/kg 개체 중량 내지 약 10mg/kg 개체 중량의 양으로 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 제8항에 있어서, 상기 나탈리주마브가 약 1mg/kg 개체 중량 내지 약 20mg/kg 개체 중량의 양으로 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  11. 제4항에 있어서, 상기 종양은 흑색종이고 상기 흑색종을 수술 절제 한 후 상기 개체에 나탈리주마브를 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 제4항에 있어서, 상기 종양은 흑색종이고 상기 흑색종을 치료하기 위하여 상기 개체에 수술, 격리된 사지 관류(isolated limb perfusion), 국부적 주입 화학요법(regional chemotherapy infusion), 전신 화학요법(systemic chemotherapy), 또는 2차 항체 또는 항혈청을 이용한 면역요법을 추가적으로 실시하는 것을 특징으로 하는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 2차 항체가 항-GM2 강글리오사이드 항체, 항-GD2 강글리오사이드 항체 또는 항-GD3 강글리오사이드 항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  14. 제12항에 있어서, 상기 국부적 주입 화학요법 또는 전신 화학요법이 다카르바진(dacarbazine), 카르무스틴(carmustine), 로무스틴(lomustine), 타우로무스틴(tauromustine), 포테무스틴(fotemustine), 세무스틴(semustine), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastine), 빈데신(vindesine), 택솔(taxol), 디브로모듈시톨(dibromodulcitol), 데토루비신(detorubicin), 피리트레심(piritrexim) 및 인터페론(interferon)으로 이루어진 그룹에서 선택된 적어도 하나의 화학요법제를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 인터페론은 인터페론-α2인 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 제1항에 있어서, 상기 전이는 뇌, 폐, 간 또는 뼈로 전이되는 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 전이가 폐로 되고, 상기 종양은 흑색종인 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 제1항에 있어서, 상기 종양은 림프종이고, 상기 개체를 하나 이상의 화학요법제 및/또는 방사선요법으로 추가적으로 치료하는 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 항-α4 인테그린 면역글로블린 또는α4 인테그린 리간드에 대한 면역글로블린을 투여하고, 화학치료요법, 면역치료요법 및/또는 방사선요법으로 치료하는 것을 포함하는 종양 성장 및/또는 전이 진행 및/또는 전이의 발달을 억제하는 병용요법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린이 항-α4β1 인테그린 항체 또는 항-α4β7 인테그린 항체인 것을 특징으로 하는 병용요법.
  21. 제20항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린이 나탈리주마브인 것을 특징으 로 하는 병용요법.
  22. 제20항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린을 그들이 필요한 개체에 정맥내(intravenously), 경막내(intrathecally) 또는 피하내(subcutaneously)로 투여하는 것을 특징으로 하는 병용요법.
  23. 제20항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린이 나탈리주마브이고 약 1mg/kg 개체 중량 내지 약 100mg/kg 개체 중량의 양으로 투여되는 것을 특징으로 하는 병용요법.
  24. 제23항에 있어서, 나탈리주마브가 약 10mg/kg 개체 중량 내지 약 30mg/kg 개체 중량의 양으로 투여되는 것을 특징으로 하는 병용요법.
  25. 제20항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린을 매일, 일주일에 한번 또는 한달에 한번 투여하는 것을 특징으로 하는 병용요법.
  26. 제25항에 있어서, 상기 항-α4 면역글로블린을 일주일에 한번 투여하는 것을 특징으로 하는 병용요법.
  27. 항-α4 인테그린 면역글로블린을 포함하며 그들이 필요한 개체에 투여되는 경우에 종양 성장 및/또는 전이 진행 및/또는 전이의 발달을 억제하는 약제의 제조를 위한 용도.
  28. 제27항에 있어서, 상기 개체를 화학요법, 면역요법, 수술, 방사선 요법, 온열요법(hyperthermia), 암 치료의 부작용을 개선시키는 약물로 추가적으로 치료하는 것을 특징으로 하는 용도.
  29. 제27항에 있어서, 상기 종양은 흑색종, 백혈병, 전립선암 또는 림프종인 것을 특징으로 하는 용도.
KR1020067018079A 2004-02-06 2005-02-03 종양 및 전이성 질환 치료 방법 및 조성물 KR20070009581A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US54194604P 2004-02-06 2004-02-06
US60/541,946 2004-02-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20070009581A true KR20070009581A (ko) 2007-01-18

Family

ID=34860234

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020067018079A KR20070009581A (ko) 2004-02-06 2005-02-03 종양 및 전이성 질환 치료 방법 및 조성물

Country Status (19)

Country Link
US (1) US20050255118A1 (ko)
EP (2) EP2394652A3 (ko)
JP (1) JP4996261B2 (ko)
KR (1) KR20070009581A (ko)
CN (1) CN1946407B (ko)
AR (1) AR047534A1 (ko)
AU (1) AU2005213324B2 (ko)
BR (1) BRPI0507451A (ko)
CA (1) CA2555365A1 (ko)
EA (1) EA009873B1 (ko)
IL (1) IL177201A0 (ko)
MX (1) MXPA06008746A (ko)
NO (1) NO20063951L (ko)
NZ (1) NZ584288A (ko)
PE (1) PE20060009A1 (ko)
TW (1) TWI375563B (ko)
UY (1) UY28741A1 (ko)
WO (1) WO2005076843A2 (ko)
ZA (1) ZA200606557B (ko)

Families Citing this family (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT3417875T (pt) 2003-02-10 2020-08-24 Biogen Ma Inc Formulação de imunoglobulinas e método de preparação das mesmas
JP4315982B2 (ja) 2004-01-09 2009-08-19 ファイザー インコーポレイティッド ＭＡｄＣＡＭに対する抗体
WO2007007152A2 (en) * 2005-07-11 2007-01-18 Pfizer Limited Anti-madcam antibodies to treat metastatic cancers and chloroma
ES2627923T3 (es) * 2007-01-11 2017-08-01 Novo Nordisk A/S Anticuerpos anti-KIR, formulaciones y usos de los mismos
EP2231185A4 (en) * 2007-12-07 2012-06-27 Elan Pharm Inc METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING LIQUID TUMORS
GB0800311D0 (en) * 2008-01-09 2008-02-20 Cytosystems Ltd Apparatus and method for filtering biological material
WO2009129333A1 (en) * 2008-04-15 2009-10-22 Oxigene, Inc. Methods for enhancing the efficacy of vascular disrupting agents
US20100158893A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Baxter International Inc. Systems and methods for obtaining immunoglobulin from blood
AU2010236257A1 (en) * 2009-04-17 2011-11-03 Biogen Idec Ma Inc. Compositions and methods to treat acute myelogenous leukemia
US20110158982A1 (en) * 2009-10-05 2011-06-30 The Regents Of The University Of Michigan COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING MAdCAM
WO2012048275A2 (en) 2010-10-08 2012-04-12 Caridianbct, Inc. Configurable methods and systems of growing and harvesting cells in a hollow fiber bioreactor system
EP2632492B1 (en) 2010-10-25 2017-10-04 Biogen MA Inc. METHODS FOR DETERMINING DIFFERENCES IN ALPHA-4 INTEGRIN ACTIVITY BY CORRELATING DIFFERENCES IN sVCAM AND/OR sMAdCAM LEVELS
RU2665952C2 (ru) 2011-07-22 2018-09-05 Пасилекс Фармасьютикалз Инк. Синтетическая летальность и лечение рака
WO2014081405A2 (en) * 2011-08-17 2014-05-30 Dennis Brown Compositions and methods to improve the therapeutic benefit of suboptimally administered chemical compounds including substituted hexitols such as dibromodulcitol
WO2014018913A2 (en) * 2012-07-27 2014-01-30 University Of Connecticut Santacruzamate a compositions and analogs and methods of use
US9657105B2 (en) 2013-03-15 2017-05-23 City Of Hope CD123-specific chimeric antigen receptor redirected T cells and methods of their use
RU2527154C1 (ru) * 2013-03-27 2014-08-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ повышения биодоступности цисплатина в саркому -45, индуцированную в эксперименте
EP2992018B1 (en) * 2013-04-29 2019-02-13 OGD2 Pharma Targeting o-acetylated gd2 ganglioside as a new therapeutic and diagnostic strategy for cancer stem cells cancer
US10633625B2 (en) 2013-11-16 2020-04-28 Terumo Bct, Inc. Expanding cells in a bioreactor
JP6855243B2 (ja) 2014-01-24 2021-04-07 エイアイ・セラピューティクス・インコーポレーテッド 癌治療のためのアピリモド（ａｐｉｌｉｍｏｄ）組成物
EP3122866B1 (en) 2014-03-25 2019-11-20 Terumo BCT, Inc. Passive replacement of media
JP6830059B2 (ja) 2014-09-26 2021-02-17 テルモ ビーシーティー、インコーポレーテッド スケジュール化された細胞フィーディング
JP6716585B2 (ja) 2014-11-07 2020-07-01 エイアイ・セラピューティクス・インコーポレーテッド 結腸直腸癌の処置に使用するためのアピリモド
AU2015342869A1 (en) 2014-11-07 2017-06-15 AI Therapeutics, Inc. Apilimod for use in the treatment of renal cancer
WO2017004592A1 (en) 2015-07-02 2017-01-05 Terumo Bct, Inc. Cell growth with mechanical stimuli
WO2017011907A1 (en) 2015-07-17 2017-01-26 Pacylex Pharmaceuticals Inc. Epigenetic silencing of nmt2
EP3464565A4 (en) 2016-05-25 2020-01-01 Terumo BCT, Inc. CELL EXPANSION
US11685883B2 (en) 2016-06-07 2023-06-27 Terumo Bct, Inc. Methods and systems for coating a cell growth surface
US11104874B2 (en) 2016-06-07 2021-08-31 Terumo Bct, Inc. Coating a bioreactor
US11624046B2 (en) 2017-03-31 2023-04-11 Terumo Bct, Inc. Cell expansion
WO2018184028A2 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Terumo Bct, Inc. Cell expansion
RU2650587C1 (ru) * 2017-04-26 2018-04-16 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы в16 у мышей
CR20200076A (es) 2017-07-14 2020-06-10 Pfizer ANTICUERPOS CONTRA MAdCAM
US20210338727A1 (en) * 2018-09-13 2021-11-04 Nkarta, Inc. Natural killer cell compositions and immunotherapy methods for treating tumors
WO2020180882A1 (en) 2019-03-05 2020-09-10 Nkarta, Inc. Cd19-directed chimeric antigen receptors and uses thereof in immunotherapy
RU2762730C1 (ru) * 2021-03-30 2021-12-22 Елена Рудольфовна Милаева Средство для ингибирования метастазирования в легких
RU2765955C1 (ru) * 2021-03-30 2022-02-07 Елена Рудольфовна Милаева Средство для ингибирования метастазирования в легких

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
US6033665A (en) 1989-09-27 2000-03-07 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating leukocyte adhesion to brain endothelial cells
CA2072249C (en) 1991-06-28 2003-06-17 Saiko Hosokawa Human monoclonal antibody specifically binding to surface antigen of cancer cell membrane
WO1994016094A2 (en) * 1993-01-12 1994-07-21 Biogen, Inc. Recombinant anti-vla4 antibody molecules
US5840299A (en) 1994-01-25 1998-11-24 Athena Neurosciences, Inc. Humanized antibodies against leukocyte adhesion molecule VLA-4
US6027726A (en) 1994-09-30 2000-02-22 Inex Phamaceuticals Corp. Glycosylated protein-liposome conjugates and methods for their preparation
US6551593B1 (en) 1995-02-10 2003-04-22 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Treatment of Inflammatory bowel disease by inhibiting binding and/or signalling through α 4 β 7 and its ligands and madcam
WO1998037902A1 (en) * 1997-02-28 1998-09-03 The Regents Of The University Of California Inhibition of cell-cell binding by lipid assemblies
MY153569A (en) * 1998-01-20 2015-02-27 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Inhibitors of ?4 mediated cell adhesion
KR100628818B1 (ko) * 1998-09-14 2006-09-27 보드 오브 리전츠, 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 인테그린 길항제를 사용하여 다발성 골수종 및 골수종에의한 골흡수를 치료하는 방법
EP2332578A1 (en) 1999-12-16 2011-06-15 Biogen Idec MA Inc. Methods of treating central nervous system ischemic or hemorrhagic injury using anti alpha4 integrin antagonists
WO2002045653A2 (en) * 2000-12-08 2002-06-13 Uab Research Foundation Combination radiation therapy and chemotherapy in conjuction with administration of growth factor receptor antibody
US6894033B2 (en) * 2001-06-11 2005-05-17 Transition Therapeutics Inc. Combination therapies using vitamin B12 and therapeutic agents for treatment of viral, proliferative and inflammatory diseases
CA2494870A1 (en) * 2001-08-06 2003-03-06 The Regents Of The University Of California Methods for inhibiting angiogenesis
BR0307975A (pt) * 2002-02-25 2005-01-11 Elan Pharm Inc Métodos para reduzir cronicamente a inflamação patológica em um paciente e para determinar a eficácia de um regime de administração crÈnica para tratar inflamação patológica em um indivìduo, composição e terapia combinada para tratamento crÈnico de inflamação patológica em um paciente e uso de um inibidor de alfa-4-integrina
WO2005056606A2 (en) * 2003-12-03 2005-06-23 Xencor, Inc Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
CA2542886A1 (en) * 2003-11-05 2005-05-19 Neelima M. Bhat Enhanced b cell cytotoxicity of cdim binding antibody

Also Published As

Publication number Publication date
AR047534A1 (es) 2006-01-25
EP2394652A2 (en) 2011-12-14
WO2005076843A2 (en) 2005-08-25
EP1718310A4 (en) 2009-05-06
PE20060009A1 (es) 2006-02-11
US20050255118A1 (en) 2005-11-17
AU2005213324B2 (en) 2011-06-09
UY28741A1 (es) 2005-08-31
ZA200606557B (en) 2008-02-27
JP2007520557A (ja) 2007-07-26
TWI375563B (en) 2012-11-01
EA200601433A1 (ru) 2007-02-27
NZ584288A (en) 2011-10-28
EP2394652A3 (en) 2012-10-24
EA009873B1 (ru) 2008-04-28
MXPA06008746A (es) 2007-01-23
JP4996261B2 (ja) 2012-08-08
EP1718310A2 (en) 2006-11-08
CA2555365A1 (en) 2005-08-25
CN1946407A (zh) 2007-04-11
CN1946407B (zh) 2011-10-05
IL177201A0 (en) 2006-12-10
BRPI0507451A (pt) 2007-07-10
AU2005213324A1 (en) 2005-08-25
NO20063951L (no) 2006-11-02
WO2005076843A3 (en) 2006-01-26
TW200536556A (en) 2005-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20070009581A (ko) 종양 및 전이성 질환 치료 방법 및 조성물
AU2002250352B2 (en) Combination therapy
CN102895663A (zh) 含有用于调节血管发育的egfl7拮抗剂的组合物及方法
KR101482956B1 (ko) 류마티스 관절염의 진단 및 치료에 사용되는 항-ｃｄ6 단일클론성 항체를 포함하는 약학 조성물
WO2000074634A2 (en) Methods and compositions for modulating cell proliferation and cell death
CN103282050A (zh) 包含特异性识别cd38的抗体和硼替佐米的抗肿瘤组合
Sedlacek et al. Antibodies as carriers of cytotoxicity
US7598043B2 (en) Use of vascular endothelial growth factor receptor 1+ cells in treating and monitoring cancer and in screening for chemotherapeutics
JP2008502738A (ja) ヒトの癌を処置するための、ｖｅｇｆインヒビターの使用
TW202045209A (zh) 使用ror1抗體免疫結合物之癌症治療
MX2014010591A (es) Terapia combinada para el tratamiento de cancer de ovario.
WO2016153839A1 (en) Combination of a pd-1 antagonist and vorinostat for treating cancer
CN106687124A (zh) 并用il‑18与分子靶向抗体的癌治疗药
Chari et al. Complete remission achieved with single agent CNTO 328, an anti–IL-6 monoclonal antibody, in relapsed and refractory myeloma
CA3105947A1 (en) Administration of sumo-activating enzyme inhibitor and anti-cd20 antibodies
AU2019230013A1 (en) Methods for treating acute myeloid leukemia and related conditions
KR20080089645A (ko) 암의 적출 장기 관류 병용 요법
US10975163B2 (en) Methods of increasing delivery of anti-cancer agents to targets
US20220047643A1 (en) Fibroblasts and microvesicles thereof for reduction of toxicity associated with cancer immunotherapy
AU2011211351A1 (en) Methods and compositions for treating tumors and metastatic disease
JP2005516907A (ja) 霊長類ｉｆｎ−ガンマ結合分子の使用
RU2795560C2 (ru) Лечение рака иммуноконъюгатами антител к ror1
JP5202956B2 (ja) 癌の治療およびモニタリングならびに化学療法薬に関するスクリーニングにおける血管内皮増殖因子受容体１＋細胞の使用法

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
NORF Unpaid initial registration fee