KR20050104934A - Cosmetic composition of lifting and whitening ingredient containing saponin extracted from rhynchosia molubilis - Google Patents

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Abstract

본 발명은 약콩 사포닌을 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 약콩으로부터 추출된 사포닌은 자외선 차단, 자동산화 방지, 프리라디컬 소거 등 항산화 작용을 통한 주름개선 효과와 티로시나제 억제, 멜라닌 생성억제 등 멜라닌 활성억제 작용을 통한 미백 효과를 가짐으로써 기능성이 뛰어나고 안전성면에서도 우수한 화장품 원료로 사용될 수 있다. The present invention relates to a functional cosmetic composition containing medicinal soybean saponin as an active ingredient. Specifically, saponins extracted from medicinal soybeans have anti-wrinkle effect and tyrosinase inhibition through antioxidant action such as UV protection, automatic oxidation prevention, and free radical scavenging. It has excellent whitening effect through melanin activity inhibitory action such as melanin production inhibition and can be used as cosmetic raw material with excellent functionality and excellent safety.

Description

약콩유래 사포닌을 유효성분으로 함유하는 주름개선 및 미백용 화장료 조성물{Cosmetic Composition of Lifting and Whitening Ingredient Containing Saponin extracted from Rhynchosia Molubilis}Cosmetic composition for wrinkle improvement and whitening containing saponin derived from medicinal beans {Cosmetic Composition of Lifting and Whitening Ingredient Containing Saponin extracted from Rhynchosia Molubilis}

본 발명은 약콩 사포닌을 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a functional cosmetic composition containing weak bean saponin as an active ingredient.

보다 상세하게는 본 발명에 따른 약콩으로부터 추출된 사포닌은 자외선 차단, 자동산화 방지, 프리라디컬 소거 등 항산화 작용을 통한 주름개선 효과와 티로시나제 억제, 멜라닌 생성억제 등 멜라닌 활성억제 작용을 통한 미백 효과를 가짐으로써 기능성이 뛰어나고 안전성면에서도 우수한 화장품 원료로 사용될 수 있다. More specifically, the saponin extracted from the medicinal soybean according to the present invention has a whitening effect through anti-wrinkle effect and anti-melanin activity, such as anti-wrinkle effect, anti-oxidation, free radical scavenging, anti-wrinkle effect, tyrosinase inhibition, melanin production inhibition It can be used as a cosmetic raw material having excellent functionality and excellent safety.

약콩(Rhynchosia Molubilis)은 강원도 정선지방에서 자생하는 한국토종의 흑콩(검정콩)으로서 약으로 쓰인다하여 선조들이 붙인 이름이며, 모양과 색깔에서 그 크기가 작고 색깔이 검고 반짝반짝 빛난다하여 쥐의 눈과 같다는 의미로 쥐눈이콩으로 불리기도 하며, 이를 한문으로 번역하여 서목태라고도 한다. 약콩은 색깔이 검지만 크기가 큰 흔히 보는 보통의 서리태와 구분되며 중국 만주지방을 본산지로 하는 대두(Glycine max Merrill)와는 명확히 구별된다. Medicinal beans ( Rhynchosia Molubilis ) is a Korean native black bean (black bean) that grows in Jeongseon province, Gangwon-do. It is named after its ancestors, and its shape and color are small, its color is black, and it shines like a rat's eye. It is also called a rat eye bean in a sense, and it is also called Seomoktae by translating it into Chinese. Medicinal beans are distinguished from common common white tigers, which are black in color but large in size, and are clearly distinguished from Glycine max Merrill, which is native to Manchuria, China.

약콩은 일년생 초본으로 잎은 어긋나게 나오는 3출 복엽이고 꽃은 8월 중순에 잎겨드랑이에 피고 종자 100알의 무게가 12.47g 이다. 생육 특성은 일반 검정콩과 비슷하나 잎이 작고 꼬투리가 작아 2개 정도의 종자가 들어있고 5월 중·하순경에 파종하고 10월 상순경에 수확한다.Medicinal beans are annual herbaceous leaves, with three leaves, with alternate leaves. Flowers bloom in the axilla in mid-August, and weigh 100 seeds (12.47g). Growth characteristics are similar to that of normal black beans, but the leaves are small and the pods contain about 2 seeds, sowing in mid and late May and harvesting in early October.

약콩은 일반 영양성분으로 탄수화물 38.5%, 조단백질 34.7%, 조지방 15.9%를 함유하고 있으며 무기성분은 칼륨, 인, 칼슘, 마그네슘이 풍부하고 당으로는 글루코스와 갈락토스가 다량 함유되어 있으며 지방산은 불포화 지방산이 82.63% 으로 리놀레산(linoleic acid), 올레산(oleic acid), 리놀렌산(linolenic acid)이 주종을 이루고 특히 리놀레산의 함량이 높다. 식물성 에스트로겐으로 알려진 파이토에스트로겐의 하나인 이소플라빈의 함량이 대두보다 2배나 높으며 또한 약콩 껍질에 항산화 활성물질인 페놀성 화합물의 함량이 높게 나타난다. 약콩과 대두는 일반 영양성분으로써는 비슷하지만 기능성 성분, 주로 이소플라빈과 페놀성 화합물에서 차이가 명확히 나타난다.Medicinal beans contain 38.5% carbohydrates, 34.7% crude protein, and 15.9% crude fat.Inorganic ingredients are rich in potassium, phosphorus, calcium and magnesium, and glucose and galactose in sugars. Linoleic acid, oleic acid, and linolenic acid are the predominant species, with 82.63% of them being especially high in linoleic acid. The content of isoflavin, one of the phytoestrogens known as phytoestrogens, is twice as high as that of soybean, and the content of phenolic compound, an antioxidant active substance, is high in the soybean peel. Although soybeans and soybeans are similar in general nutrition, there are clear differences in functional ingredients, mainly isoflavin and phenolic compounds.

기능성 화장품은 1999년 약사법으로부터 독립 제정되고 2000년 7월 1일부터 그 시행이 확정된 화장품법에 기능성 화장품이 명시됨으로써 급격히 발전하였으며 21세기는 바야흐로 기능성 화장품 시대를 맞이하고 있다. 보건복지부령이 정하는 기능성 화장품이란 피부의 미백에 도움을 주는 제품, 피부의 주름개선에 도움을 주는 제품 그리고 피부를 곱게 태워주거나 자외선으로부터 피부를 보호하는데 도움을 주는 제품을 말한다. 화장품에서 요구되는 효능·효과 중에서 미백은 주름방지나 육모·양모와 더불어 가장 중요한 효능·효과 중의 하나이다. 피부의 색소침착은 표피의 기저층에 있는 색소세포에 의해서 생성되는 멜라닌이 그 원인으로, 멜라닌 생성을 억제하는 약제는 미백 화장품의 유효성 원료로서 예로부터 활발한 연구가 있었다. 한편, 최근에는 화장품 분야에 있어서도 화장품 혹은 의약부외품의 원료 공급원으로서 천연물이 주목되고 있다. 이와 더불어 식물 유래성분의 미백효과에 대한 연구도 활발히 이루어지고 있다. Functional cosmetics have been rapidly developed by the introduction of functional cosmetics in the Cosmetics Act, which was enacted in 1999 from the Pharmacist Act in 1999 and its enforcement was confirmed from July 1, 2000. The 21st century is nearing the era of functional cosmetics. Functional cosmetics prescribed by Ordinance of the Ministry of Health and Welfare are products that help to whiten the skin, products that help to improve the wrinkles of the skin, and products that burn the skin finely or protect the skin from ultraviolet rays. Among the benefits and effects required in cosmetics, whitening is one of the most important benefits and effects along with wrinkle prevention, hair growth and wool. Pigmentation of the skin is caused by melanin produced by the pigment cells in the basal layer of the epidermis, and agents that inhibit melanin production have been actively studied as an effective raw material for whitening cosmetics. On the other hand, natural products have recently attracted attention as a raw material supply source for cosmetics or quasi-drug products in the cosmetic field. In addition, research on the whitening effect of plant-derived ingredients is being actively conducted.

기능성 천연물로서 약콩에 대한 연구는 이소플라빈의 항암효과, 항산화 효과 등의 식품·음료·약품 분야에 집중되어 있고, 또한 약콩 추출물의 기능성 소재 개발이 활발하게 진행되고 있으나 약콩 추출물 중에서 유효성분을 추출하여 화장품의 원료로 사용하는 연구는 아직 미흡한 상태이다.The research on medicinal soybeans as a functional natural product is concentrated in the food, beverage, and pharmaceutical fields, such as the anticancer and antioxidant effects of isoflavin. Therefore, the research to use as a raw material of cosmetics is still insufficient.

또한 근래 각광받는 기능성 물질의 하나인 사포닌은 주로 인삼에서 분리된 사포닌이 이용되고 있으나, 인삼 사포닌 성분은 고가의 원료이기 때문에 이를 기능성 제품에 적용할 경우 제품 원가 상승으로 기업의 경제적 수익성을 악화시키는 주요요인으로 작용하고 있다. 그러므로 이러한 애로상항을 타개하기 위하여 인삼 사포닌의 대체물질로 저가의 그리고 고품질의 새로운 사포닌의 개발이 요구되어 왔다. In addition, saponins, which are one of the most popular functional substances, are mainly used saponins separated from ginseng, but since ginseng saponins are expensive raw materials, when applied to functional products, the cost of products increases the product's economic profitability. It acts as a factor. Therefore, in order to overcome these difficulties, development of new saponins of low cost and high quality as substitutes for ginseng saponins has been required.

본 발명자들은 기능성 원료인 사포닌에 주목하여 인삼에 비하여 저렴하면서도 품질면에서 뒤떨어지지 않는 사포닌의 새로운 분리원을 개발하고자 하였으며 이를 이용하여 노화방지 및 미백기능의 기능성 전문화장품에 적용하고자 하였다. The present inventors have focused on saponins, which are functional raw materials, to develop new separation sources of saponins which are cheaper than ginseng and are not inferior in quality, and are intended to be applied to functional cosmetics having anti-aging and whitening functions.

본 발명의 목적은 기능성 물질인 사포닌의 새로운 분리원을 제공하고 이를 통하여 얻은 사포닌을 주름개선 및 미백용 화장품의 원료로 제공하는 것이다. It is an object of the present invention to provide a new separation source of saponin, a functional substance, and to provide the saponin obtained through this as a raw material for cosmetics for wrinkle improvement and whitening.

본 발명은 약콩유래 사포닌을 함유하는 기능성 화장품을 제공한다. 이 때 기능성은 주름개선 또는 미백활성을 포함한다. The present invention provides a functional cosmetic containing saponin derived from medicinal beans. Functionality at this time includes wrinkle improvement or whitening activity.

이하 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 약콩에서 추출한 사포닌을 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a functional cosmetic composition containing saponin extracted from medicinal beans as an active ingredient.

이를 위하여 우선 본 발명에서는 약콩으로부터 사포닌 성분을 추출하였다. 구체적으로 약콩을 수성 및 유기용매를 이용하여 순차추출하여 정제 사포닌을 얻었다. 약콩으로부터 사포닌을 정제하는 방법은 당업자들이 주지하는 통상의 추출 방법을 모두 이용가능하다. To this end, in the present invention, saponin components were extracted from the medicinal beans. Specifically, medicinal soybeans were sequentially extracted using aqueous and organic solvents to obtain purified saponins. Methods for purifying saponin from medicinal soybeans can be any of conventional extraction methods known to those skilled in the art.

상기 과정으로 정제된 약콩 사포닌이 기능성 화장품의 원료로 사용될 수 있는지 검증하기 위하여 본 발명에서는 약콩 사포닌의 생리활성을 검색하였다. In order to verify whether the medicated soybean saponin can be used as a raw material of functional cosmetics, the present invention searched for the biological activity of the soybean saponin.

그 첫 번째로 주름개선의 효과를 확인하기 위하여 프리라디칼 소거 활성, 자동산화 방지활성 및 자외선 흡수효과를 시험하였다. First of all, free radical scavenging activity, automatic antioxidant activity, and ultraviolet ray absorption effect were tested to confirm the effect of wrinkle improvement.

프리라디칼(free radicals)에 의한 피부노화 과정은 지질 과산화, 단백질 산화, DNA 산화, 멜라닌 생성, 결합조직의 절단 및 비정상적인 교차결합 등을 포함한다. 이들 반응들은 거의 대부분 라디칼 반응으로서 자동산화반응 과정을 거쳐 진행되고 있다. 자동산화 반응은 연쇄 반응으로 이 반응이 진행되는 동안 많은 생체 구성 성분들이 산화적 손상을 받게 된다. 따라서 자동산화 반응을 되도록이면 빨리 차단시켜야 한다. 생체 내에서 자동산화 반응을 차단시키는 역할은 항산화제가 담당하고 있다. The process of skin aging by free radicals includes lipid peroxidation, protein oxidation, DNA oxidation, melanin production, connective tissue breakdown and abnormal crosslinking. Most of these reactions are radical reactions and proceed through automatic oxidation. Automated oxidation is a chain reaction, which causes many biological components to undergo oxidative damage during this process. Therefore, the automatic oxidation reaction should be blocked as soon as possible. Antioxidants are responsible for blocking the automatic oxidation in vivo.

자동산화 반응의 가장 대표적인 지질과산화 반응을 예로 들어보면, 세포막의 성분인 인지질에는 다가 불포화 지방산이 많이 들어 있다. 자외선에의 노출 등에 의해 피부에서 생성된 프리라디칼은 불포화지방산에 있는 반응성 메틸렌기로부터 알릴자리 수소를 탈취함으로써 지질 라디칼을 생성시키고 이어서 지질 라디칼을 전자 재배열 후 산소와 반응하여 과산화 라디칼을 생성시킨다. 생성된 과산화 라디칼은 새로운 지질 라디칼을 만들고 이 지질 라디칼은 과산화 라디칼을 만드는 연쇄반응을 일으킨다. 이러한 과정의 연쇄반응을 자동산화 반응이라고 한다. 이러한 자동산화 반응의 종결은 토코페롤과 같은 항산화제가 수소원자를 과산화 라디칼에 줌으로써 달성된다. For example, the most representative lipid peroxidation reaction of the automatic oxidation reaction, phospholipids, which are components of the cell membrane, contain many polyunsaturated fatty acids. Free radicals produced in the skin, such as by exposure to ultraviolet rays, generate lipid radicals by deodorizing allylzyl hydrogen from reactive methylene groups in unsaturated fatty acids, and then react with oxygen after electron rearrangement to generate peroxide radicals. The resulting peroxide radicals create new lipid radicals, which trigger a chain reaction that produces peroxide radicals. The chain reaction of this process is called automatic oxidation reaction. Termination of this automatic oxidation reaction is accomplished by an antioxidant such as tocopherol giving hydrogen atoms to the peroxide radical.

수소 원자를 주는 능력, 이는 바로 환원력이며 환원력이 클수록 강력한 항산화제가 된다. 이러한 환원력을 측정할 수 있는 시약으로 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical(DPPH)이 있다. 이 DPPH법은 매우 간편하고 짧은 시간에 결과를 알 수 있기 때문에, 천연물 중의 항산화 물질을 검색하는 경우나 항노화 화장품 원료들의 비교 평가시 이용하면 좋다.The ability to give a hydrogen atom, which is the reducing power, the greater the reducing power is a powerful antioxidant. A reagent capable of measuring such reducing power is 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical (DPPH). This DPPH method is very simple and can be used in a short time. Therefore, the DPPH method can be used when searching for antioxidants in natural products or when evaluating anti-aging cosmetic ingredients.

구체적으로 본 발명에서는 DPPH법으로 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 프리라디컬 소거 작용을 확인하였고, 자동산화가 잘 되는 물질인 리놀산을 이용하여 자동산화 억제 활성을 시험하였다. Specifically, in the present invention, the free radical scavenging action of the saponin derived from the soybean according to the present invention was confirmed by the DPPH method, and the autooxidative inhibitory activity was tested using linoleic acid, which is a good autooxidant.

그 결과 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌은 프리라디컬 소거 활성이 우수한 것으로 나타났으며, 자동산화의 항산화 효과도 우수하였다(도 1 및 도 2 참조).As a result, the weak soybean-derived saponin according to the present invention was shown to have excellent free radical scavenging activity, and also had an excellent antioxidant effect (see FIGS. 1 and 2).

또한 태양 자외선은 피부 색소침착에 큰 영향을 미친다. 피부가 UVB (290-320 nm) 및 UVA (320-400 nm)로 대별되는 태양 자외선에 노출될 경우, UVB는 주로 피부의 표피층까지 UVA는 진피층까지 도달된다. Solar ultraviolet rays also have a significant effect on skin pigmentation. When the skin is exposed to solar ultraviolet light, which is roughly classified as UVB (290-320 nm) and UVA (320-400 nm), UVB mainly reaches the epidermal layer of the skin and UVA reaches the dermal layer.

UVB는 염증을 일으키거나 세포 손상에 관여하고, 또한 색소침착을 일으키거나 참여한다. 구체적으로 UVB는 표피세포인 케라티노사이트로 하여금 멜라닌 합성 지령인자를 방출토록 하여 이 인자들이 멜라노사이트를 활성화시켜 멜라닌 합성을 유도하게 된다. UVB causes inflammation or is involved in cell damage, and also causes or participates in pigmentation. Specifically, UVB causes keratinocytes, which are epidermal cells, to release melanin synthesis command factors, thereby inducing melanin synthesis by activating melanocytes.

한편 UVA는 진피층에 도달하여 활성산소의 생성을 경유하여 진피층에 손상을 준다. 특히 진피의 결합조직인 콜라겐 등의 단백질과 글리코사미노글리칸 등의 물질들을 파괴함으로써 주름생성을 촉진시키는 것으로 보고되고 있다. 따라서 자외선으로부터 색소침착 억제 및 주름 생성 억제를 위해서는 UVB 및 UVA를 차단시킬 필요가 있다.UVA, on the other hand, reaches the dermis and damages the dermis via the production of free radicals. In particular, it is reported to promote wrinkle formation by destroying proteins such as collagen and glycosaminoglycan, which are connective tissues of the dermis. Therefore, it is necessary to block UVB and UVA in order to suppress pigmentation and wrinkle formation from ultraviolet rays.

본 발명에서는 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 자외선흡수 정도를 확인하기 위하여, 자외선 차단 능력이 우수한 것으로 알려진 알부틴과 자외선 흡광도를 측정하여 비교하였다.In the present invention, in order to confirm the degree of ultraviolet absorption of the medicinal soybean-derived saponins according to the present invention, arbutin and ultraviolet absorbance known to have excellent UV blocking ability were measured and compared.

그 결과 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌은 알부틴과 유사한 정도의 자외선 흡수도를 나타내었다(도 3 참조). As a result, the weak soybean-derived saponins according to the present invention showed ultraviolet absorbance similar to that of arbutin (see FIG. 3).

따라서 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌은 항산화효과, 프리라디컬 소거 활성 및 자외선 차단효과가 우수하므로 주름방지에 유용한 것으로 확인되었다.Therefore, the weak soybean-derived saponin according to the present invention has been found to be useful for anti-wrinkle because of its excellent antioxidant effect, free radical scavenging activity and UV blocking effect.

또한, 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 주름개선 효과를 in vivo 시험을 통하여 확인해보았다. 즉, 주름은 자외선이나 나이의 증가에 의해 용이하게 발생하므로, UV로 주름을 유발한 백색토끼를 이용하여 주름방지 및 개선 효능을 평가하였다.In addition, the anti-wrinkle effect of the weak soybean-derived saponin according to the present invention was confirmed through an in vivo test. That is, wrinkles are easily generated by the increase of UV rays or age, and thus anti-wrinkle and improvement effects were evaluated by using white rabbits that cause wrinkles with UV rays.

그 결과 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌이 육안 및 감촉상으로 주름개선에 현저한 효과가 있음을 확인하였다(도 4 참조).As a result, it was confirmed that the weak soybean-derived saponin according to the present invention has a remarkable effect on wrinkle improvement with the naked eye and feel (see FIG. 4).

본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 생리활성 확인시험 그 두 번째로 미백 효과를 확인하기 위하여 티로시나아제 활성 억제를 시험하고 육안으로 미백의 정도를 관찰하였다. Biological Activity Confirmation Test of Medicinal Soybean-Derived Saponins According to the Present Invention In order to confirm the whitening effect, the tyrosinase activity inhibition was tested and the degree of whitening was visually observed.

사람의 색소세포에서 생성되는 멜라닌은 유멜라닌(eumelanin)과 페오멜라닌(pheomelanin)으로 대별된다. 유멜라닌의 생성과정은 다음과 같다. 즉, 티로시나제에 의해 타이로신이 도파(DOPA, 3,4-dihydroxyphenylalanine)를 거쳐 도파퀴논(DOPA-quinone)으로 산화되고 도파퀴논은 자발적으로 엔도사이클(endocycle)을 형성하여 루코도파크롬(leucodopachrome)으로 된다. 루코도파크롬은 도파퀴논과의 환원적 호환작용으로 산화되어 도파와 도파퀴논으로 된다. 도파는 다시 티로시나제에 의해 산화되어 도파퀴논을 형성하고, 도파/도파퀴논 산화환원 회로가 멜라닌 생성의 산화적 구동장치로 작용한다. 이어서 도파크롬은 CO2 이탈반응과 도파크롬 타우토머라제(dopachome tautomerase)에 의해 5,6-dihydroxy-indol (DHI)과 5,6-dihydroxyindol carboxylic acid (DHICA)로 되며, 이들은 도파퀴논 이하의 중간 대사물이 자동산화 반응, 광화 반응, 혹은 티로시나제, 도파크롬 타우토머라제, DHICA-옥시다제 등에 의해 중합되어 유멜라닌으로 된다. 자동산화는 금속이온 특히 철, 구리 등의 2가 이온에 의해 촉진된다. 한편 페오멜라닌은 도파퀴논에 시스테닐 도파 등의 부가물을 경유하여 생성된다.Melanin produced by human pigment cells is roughly divided into eumelanin and pheomelanin. The production process of eumelanin is as follows. That is, tyrosine is oxidized to dopaquinone (DOPA-quinone) via dopa (DOPA, 3,4-dihydroxyphenylalanine) by tyrosinase, and dopaquinone spontaneously forms an endocycle to become leucodopachrome. . Rucodopachrome is oxidized in a reductive compatibility with dopaquinone to form dopa and dopaquinone. Dopa is again oxidized by tyrosinase to form dopaquinone, and the dopa / dopaquinone redox circuit acts as an oxidative driver of melanin production. Dopachrome is then converted to 5,6-dihydroxy-indol (DHI) and 5,6-dihydroxyindol carboxylic acid (DHICA) by CO 2 desorption and dopachome tautomerase. The intermediate metabolite is polymerized by autooxidation reaction, mineralization reaction or tyrosinase, dopachrome tautomerase, DHICA-oxidase and the like to become eumelanin. Automatic oxidation is facilitated by metal ions, especially divalent ions such as iron and copper. Pheomelanin, on the other hand, is produced via adducts such as cystenyl dopa to dopaquinone.

1990년대에 들어서, 분자생물학적 기법을 이용하여 멜라닌 생성과정에 대한 연구는 크게 발전하였다. 이와 더불어 멜라닌 생성 기구의 1효소설에서 3효소설로의 새로운 전개가 이루어지고 있다. 멜라닌 생성관련 3효소 이론의 응용은 미백제 개발을 위한 새로운 접근법이 되고 있다. 하지만 상기에 서술한 바와 같이 멜라닌 생성과정은 크게 대별해 보면, 핵심 효소인 티로시나제 등의 효소작용과 자동산화반응으로 이루어짐을 알 수 있다. 멜라닌생성에 있어서 결정적으로 중요한 핵심효소는 티로시나제이다. 이 효소는 아미노산 타이로신으로부터 시작되는 멜라닌 생합성 과정 중에서 타이로신으로부터 도파, 도파로부터 도파퀴논, 그리고 DHI로부터 유멜라닌으로의 전환을 촉매하는데 관여한다.In the 1990s, the study of melanin production using molecular biological techniques was greatly developed. Along with this, a new development is being made from the one-enzyme theory of the melanin production mechanism to the three-enzyme theory. The application of the three-enzyme theory related to melanin production is becoming a new approach for the development of whitening agents. However, as described above, the melanin production process is largely divided, and it can be seen that the enzymatic action and automatic oxidation reaction of tyrosinase, such as a key enzyme. A critically important key enzyme in melanogenesis is tyrosinase. The enzyme is involved in catalyzing the conversion of tyrosine to dopa, dopa to dopaquinone, and DHI to eumelanin during the melanin biosynthesis process starting with the amino acid tyrosine.

최근 수년간 멜라닌 생성과 제어 메카니즘 연구의 진보는 매우 현저하였다(Mishima, Y., et al., 1998; Maeda, K., 1997; Mishima, Y., et al., 1996). 이러한 연구 성과에 의해, 색소세포내의 티로시나제 저해뿐만 아니라 멜라닌 생성의 억제, 티로시나제 활성 억제, 멜라닌 배출촉진 등 미백 메카니즘의 문제는 다각적으로 연구되고 있다. 특히 자외선에 의한 멜라닌 생성에 관여하는 것으로는 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2) 등의 아라키돈산 대사산물, 색소세포 호르몬 등의 존재가 밝혀졌다(Maeda, K., 1997; Mishima, Y., et al., 1996). 또한 멜라닌 색소세포내에 있어서 멜라닌 모노머를 적당한 화합물로 트랩시키는 멜라닌 생성 억제법도 제창되고 있다(Mishima, Y., et al., 1998) 종래의 미백제로서는, 비타민 C 유도체 (Egawa, M., et al., 1997). 알부틴 및 코직산 (Maeda, K., et al., 1991)이 유효 성분으로 허가되어 있다. 최근에 미백제로 연구 개발되어 보고되고 있는 것으로는, DL-α-tocopheryl ferulate(Funasaka, Y., et al, 1997). 안정형 비타민 C 유도체들(예, L-ascobic acid-2-glucoside; Egawa, M, et al., 1997), ellagic acid (Tachibana, S., et al., 1997), α-hydroxy acids(AHAs) (Sinomiya, T., 1997), 3,5-dicaffeoy 1-quinate (Shinmotom, H., 1997) 등이 있으며, 그 외에 코직산과 유용성 감초 추출물인 glabridin 의 병용에 의한 상승적 미백작용에 관한 연구보고도 있다(Koide, G., et al., 1997).      Advances in melanin production and control mechanism research in recent years have been very significant (Mishima, Y., et al., 1998; Maeda, K., 1997; Mishima, Y., et al., 1996). As a result of this research, problems of whitening mechanisms such as inhibition of tyrosinase in pigment cells, inhibition of melanin production, inhibition of tyrosinase activity, and promotion of melanin release have been studied in various ways. In particular, the presence of arachidonic acid metabolites such as prostaglandin E2, pigment cell hormone, and the like has been shown to be involved in melanin production by ultraviolet light (Maeda, K., 1997; Mishima, Y., et al., 1996). In addition, a method of inhibiting melanogenesis that traps melanin monomers with appropriate compounds in melanocytes has been proposed (Mishima, Y., et al., 1998). As a conventional whitening agent, vitamin C derivatives (Egawa, M., et al. , 1997). Arbutin and kojic acid (Maeda, K., et al., 1991) are licensed as active ingredients. Recently researched and developed as a whitening agent, DL-α-tocopheryl ferulate (Funasaka, Y., et al, 1997). Stable vitamin C derivatives (eg L-ascobic acid-2-glucoside; Egawa, M, et al., 1997), ellagic acid (Tachibana, S., et al., 1997), α-hydroxy acids (AHAs) (Sinomiya, T., 1997), 3,5-dicaffeoy 1-quinate (Shinmotom, H., 1997), and other reports on synergistic whitening by the combination of kojic acid and glabridin, an oil-soluble licorice extract. (Koide, G., et al., 1997).

본 발명에서는 티로시나제의 기능을 억제하여 타이로신이 산화되어 멜라닌이라는 흑색의 고분자를 형성하는 것을 억제한 정도를 측정하는 방법(Pomerantz S. H., J. Biochem., 24, 161-168(1966))을 이용해 미백효과를 판정하였다. In the present invention, whitening using a method of inhibiting the function of tyrosinase and measuring the extent to which tyrosine is inhibited from oxidizing to form a black polymer called melanin (Pomerantz SH, J. Biochem., 24, 161-168 (1966)) The effect was judged.

그 결과 미백효과가 뛰어난 것으로 알려진 비타민 C에 비하여 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌이 활성 저해효과가 높은 것으로 나타났으며, 약콩유래 사포닌을 실험동물 및 자원자에 도포하여 그 미백효과를 육안으로 관찰하였을 때에도 미백 효과가 우수한 것으로 나타났다(표 2, 도 5 참조). As a result, the weak soybean-derived saponin according to the present invention was found to have higher activity inhibitory effect compared to vitamin C, which is known to have excellent whitening effect, and even when the whitening effect was observed visually by applying the soybean-derived saponin to experimental animals and volunteers. The whitening effect was found to be excellent (see Table 2, Figure 5).

따라서 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌은 우수한 미백 화장료로 이용될 수 있다.Therefore, the weak soybean-derived saponin according to the present invention can be used as an excellent whitening cosmetic.

본 발명은 안전성이 우수한 화장료 조성물을 제공한다. 이를 위하여 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 피부 누적 자극성을 시험하고, 광선에 의한 독성을 시험하였다. The present invention provides a cosmetic composition excellent in safety. To this end, the cumulative skin irritation of the medicinal soybean-derived saponins according to the present invention was tested and the toxicity by light was tested.

구체적으로 화학 물질 중에서 우발적 또는 의도적으로 사람의 피부에 접촉 가능성이 있는 것에 대해서 실험동물을 이용하여 그 피부에 지속적으로 접촉 후 국소적으로 나타나는 자극성을 검토하는 방법으로 피부누적 자극성을 시험하였다. Specifically, the cumulative skin irritation was tested by examining the irritation that appears locally after continuous contact with the skin using a test animal for the possibility of accidental or intentional contact with human skin among chemicals.

또한 광선에 의해 나타나는 피부 자극 반응을 통하여 매일 자외선을 조사하여 광독성의 유무를 시험한 후 평가 기준에 의해 광독성 유무를 판정하였다.In addition, UV light was irradiated daily through the skin irritation response indicated by light to test the presence of phototoxicity, and then the presence of phototoxicity was determined by evaluation criteria.

그 결과 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌은 피부누적 자극이나 광독성이 거의 나타나지 않음을 확인하였다. As a result, it was confirmed that the weak soybean-derived saponin of the present invention showed little skin cumulative irritation or phototoxicity.

본 발명에 따라 추출된 약콩 사포닌은 화장품의 원료로 이용될 수 있으며 이를 위하여 통상의 부형제 등을 부가하여 화장품 조성물을 제조한다. 구체적으로 본 발명의 화장품 조성물은 수용액, 오일액, 또는 그 밖의 용액, 예컨대 에멀젼, 크림, 겔 현탁액, 마이크로캡슐, 분발, 과립, 캡슐, 고체 등의 형태일 수 있다. 이들은 공지의 방법으로 본래 형태로 제제하거나, 로션, 에멀젼, 크림제, 연고제, 경고제, 패프(paps)제, 에어로졸제, 주사제, 내복제, 좌제 등으로서 제조하여 신체에 도포, 첨부, 분무, 주사, 음용, 삽입할 수 있다. 이들의 제제 형태 중에서도 로션, 에멀젼, 크림제, 연고제, 경고제, 패프제, 에어로졸제 등의 피부 외용제가 바람직하다. The medicated soybean saponin extracted according to the present invention can be used as a raw material for cosmetics, and for this purpose, a cosmetic composition is prepared by adding a conventional excipient. Specifically, the cosmetic composition of the present invention may be in the form of an aqueous solution, an oil liquid, or other solutions such as emulsions, creams, gel suspensions, microcapsules, powders, granules, capsules, solids, and the like. They are formulated in their original form by known methods, or prepared as lotions, emulsions, creams, ointments, warnings, paps, aerosols, injections, oral preparations, suppositories, etc. You can inject, drink or insert. Among these formulation forms, external skin preparations such as lotions, emulsions, creams, ointments, warnings, patches, aerosols and the like are preferred.

본 발명의 조성물은, 범용되는 부형제 및 향료 등을 비롯하여, 유지류, 계면활성제, 보존제, 금속이온봉쇄제, 수용성 고분자, 증점제, 분말성분, 자외선 차단제, 보습제, 약효 성분, 산화방지제, pH 조정제, 세정제, 건조제, 유화제 등을 적절하게 포함할 수 있다. 이들 각종 성분을 본 발명의 조성물에 첨가하는 경우에는 본 발명의 소기의 목적을 손상하지 않는 범위 내에서 첨가해야 한다. The composition of the present invention includes oils, surfactants, preservatives, metal ion sequestrants, water-soluble polymers, thickeners, powder ingredients, sunscreens, moisturizers, active ingredients, antioxidants, pH adjusters, cleaning agents, as well as general-purpose excipients and fragrances. , Desiccant, emulsifier and the like may be appropriately included. When adding these various components to the composition of this invention, it should add in the range which does not impair the intended objective of this invention.

이하 실시예를 들어 본 발명을 보다 상세히 기술할 것이나, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니며 청구범위에 기재된 본 발명의 보호범위 내에서 다양한 보완 및 변형이 가능하다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명할 것이다.The present invention will be described in more detail with reference to the following Examples, but the scope of the present invention is not limited to these Examples, and various modifications and variations are possible within the protection scope of the present invention described in the claims. It will be apparent to those of ordinary skill in the art.

<실시예 1> 약콩 사포닌의 추출Example 1 Extraction of Weak Bean Saponin

약콩 100g과 70% 알콜 500ml을 3시간동안 환류 냉각하였다. 여과한 액을 농축하고, 농축액 40ml에 에테르 120ml과 증류수 200ml을 분별 깔대기에 넣고 4시간 동안 상분리하였다. 그 후 아래층인 수층에 부탄올 120ml을 가하여 4시간동안 상분리시켰다. 위 층인 부탄올층을 5회에 걸쳐 증류수를 100ml씩 가하여 세척하고, 세척한 부탄올 층은 농축하고 부탄올이 완전히 제거되도록 증류수를 가하여 농축시켰다. 100 g of weak beans and 500 ml of 70% alcohol were refluxed for 3 hours. The filtrate was concentrated, and 120 ml of ether and 200 ml of distilled water were added to a separatory funnel in 40 ml of the concentrate, followed by phase separation for 4 hours. Then, 120 ml of butanol was added to the lower aqueous layer, followed by phase separation for 4 hours. The butanol layer was washed five times with 100 ml of distilled water, and the washed butanol layer was concentrated and distilled water was added to completely remove butanol.

농축시킨 액을 동결 건조하여 0.5g의 사포닌을 추출(수득율 0.5%)하였다. The concentrated solution was freeze-dried to extract 0.5 g of saponin (yield 0.5%).

<실시예 2> 약콩 사포닌 크림의 제제Example 2 Formulation of Medicinal Soybean Saponin Cream

하기 표 2의 처방에 따라 약콩 사포닌 크림을 제제하였다.Weak bean saponin cream was prepared according to the prescription of Table 2 below.

약콩 사포닌 크림의 조성Composition of medicinal soy saponin cream 성분ingredient 대조군 크림(%)Control Cream (%) 악콩 사포닌 크림(%)Akkong Saponin Cream (%) 히드록시 에칠 셀룰로오스Hydroxy ethyl cellulose 0.10.1 0.10.1 프로필렌 글리콜Propylene glycol 1010 1010 방부제antiseptic 0.40.4 0.40.4 카르복시 비닐 폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.20.2 0.20.2 글리세릴 스테아레이트Glyceryl Stearate 3.53.5 3.53.5 모노스테아린산 폴리옥시에칠렌소르비탄Monostearic acid polyoxyethylene sorbitan 0.50.5 0.50.5 세토 스테아릴 알콜Cetostearyl alcohol 2.52.5 2.52.5 초산 토코페롤Tocopherol Acetate 0.50.5 0.50.5 올리부유Olibuyu 4.04.0 4.04.0 유동 파라핀Floating paraffin 7.07.0 7.07.0 트리 에탄올 아민Triethanolamine 0.30.3 0.30.3 약콩 사포닌Medicinal Bean Saponins 무첨가No addition 0.3첨가0.3 addition 정제수Purified water 적량을 가하여 100중량%로 한다.Add appropriate amount to make it 100 weight%.

<시험예 1> 프리라디칼 소거 작용<Test Example 1> Free radical scavenging action

DPPH 용액 0.5ml에 시료(약콩 사포닌, 실시예 2에 따른 약콩 사포닌 크림 및 대조군 크림)를 0.23%, 0.3%, 0.6%, 0.9%, 1.2%, 1.5%, 1.8%, 2.1%의 농도로 1ml을 넣고 에탄올 용액 1ml을 첨가하여 섞은 다음 37℃에서 10분간 방치 후 517nm에서 흡광도를 측정하여 그 결과를 도 1에 나타내었다. In 0.5 ml of DPPH solution, 1 ml of sample (weak soy saponin, weak soy saponin cream and control cream according to Example 2) at a concentration of 0.23%, 0.3%, 0.6%, 0.9%, 1.2%, 1.5%, 1.8%, 2.1% After adding 1ml of ethanol solution, the mixture was mixed and left for 10 minutes at 37 ° C. The absorbance was measured at 517 nm, and the results are shown in FIG. 1.

도 1에서 나타난 바와 같이, 음성 대조군 크림에 비하여 약콩 사포닌 크림은 현저한 프리라디칼 소거작용 효과를 나타내았고, 정제한 약콩 사포닌은 양성대조군인 비타민 C와 유사한 활성능을 보였다. As shown in FIG. 1, compared to the negative control cream, the soybean saponin cream showed a significant free radical scavenging effect, and the purified soybean saponin showed similar activity as that of the positive control vitamin C.

<시험예 2> 리놀산 자동산화 방지 활성<Test Example 2> linoleic acid automatic oxidation prevention activity

리놀산 용액 3ml과 4mg/ml로 조정한 각각의 시료 0.075ml을 첨가한 후 4℃에서 24시간 방치하였다. 상기 혼합액을 에탄올에 첨가하여 교반한 후 티오시안산암모늄 용액 0.1ml과 염화 제1철 0.1ml을 첨가하여 3분간 방치한 후 500nm에서 흡수 파장을 측정하였다. 3 ml of linoleic acid solution and 0.075 ml of each sample adjusted to 4 mg / ml were added and then left at 4 ° C. for 24 hours. After the mixture was added to ethanol and stirred, 0.1 ml of ammonium thiocyanate solution and 0.1 ml of ferrous chloride were added thereto, and the mixture was left for 3 minutes, and then the absorption wavelength was measured at 500 nm.

도 2에서 나타난 바와 같이, 대조군 크림에 비해 약콩 사포닌, 약콩 사포닌 크림은 항산화 효과가 뛰어난 비타민 C 및 알부틴과 비슷한 항산화 효과를 가진 것으로 나타났다.As shown in Figure 2, compared to the control cream, medicinal soybean saponin, medicinal soybean saponin cream was shown to have an antioxidant effect similar to vitamin C and arbutin excellent in the antioxidant effect.

<시험예 3> 자외선 흡수스펙트럼 측정Test Example 3 UV Absorption Spectrum Measurement

자외선 분광기를 사용하여 각 시료를 녹인 용매를 대조하여 자외선 흡광도(190~350nm)를 측정하여 비교하였다.Ultraviolet absorbance (190 ~ 350nm) was measured by comparing the solvent dissolved in each sample using an ultraviolet spectrometer.

도 3에서 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 약콩 사포닌 및 약콩 사포닌 크림은 자외선 차단 능력이 우수한 것으로 알려진 알부틴과 유사한 효과를 나타내었다.As shown in FIG. 3, the medicinal soybean saponin and the medicinal soybean saponin cream according to the present invention showed an effect similar to that of arbutin, which is known to have excellent UV blocking ability.

<시험예 4> 토끼 피부 주름개선 측정<Test Example 4> Wrinkle improvement measurement of rabbit skin

자외선이나 나이의 증가에 의해 피부에 주름이 용이하게 발생하므로, UV로 주름을 유발한 백색토끼(체중 1.5~3.0 kg)를 이용하여 각각의 시료 500mg을 매일 2회 도포하여 주름방지 및 개선 효능을 평가하였다.Wrinkles easily occur on the skin due to the increase of UV rays and age, so 500ml of each sample is applied twice a day using white rabbits (1.5 ~ 3.0 kg in weight) that caused wrinkles by UV to prevent wrinkles and improve efficacy. Evaluated.

도 4에 나타난 바와 같이, 도포하기 전 토끼 피부는 육안과 감촉으로 측정한 결과 피부가 주름이 지고 감촉이 두들두들 하였으나 도포 후 육안으로 보았을때 주름이 펴져 있었고 감촉상 매끈매끈하였다.As shown in FIG. 4, the rabbit skin before the application was measured by the naked eye and the texture of the skin was wrinkled and the texture was beaten.

<시험예 5> 티로시나아제 활성 억제 시험<Test Example 5> Tyrosinase activity inhibition test

티로시나아제에 대한 저해활성은 각각의 시료 15㎕을 마이크로플레이트 (96well)에 넣고, 인산완충용액(PH 6.86) 150㎕, L-티로신 용액 25㎕을 넣은 후 머쉬룸 티로시나아제(sigma, USA) 7㎕를 첨가하여 30℃에서 10분간 반응시킨 후 마이크로플레이트를 사용하여 490nm에서 측정하였다. For inhibitory activity against tyrosinase, 15 µl of each sample was placed in a microplate (96well), 150 µl of phosphate buffer solution (PH 6.86) and 25 µl of L-tyrosine solution were added, followed by mushroom tyrosinase (sigma, USA). After adding 7 μl and reacting at 30 ° C. for 10 minutes, the resultant was measured at 490 nm using a microplate.

티로시나아제 활성 억제 효과Tyrosinase activity inhibitory effect IC50 IC 50 약콩사포닌Weak bean saponin 0.05%0.05% 약콩사포닌 크림Pharmacy saponin cream 0.1%0.1% 대조군 크림Control cream 1%One% 알부틴Arbutin 0.0005%0.0005% 비타민CVitamin C 0.0005%0.0005%

IC50은 효소활성 저해율 50%에 달하는 저해물질의 농도이다.IC 50 is the concentration of inhibitor reaching 50% inhibition rate of enzyme activity.

시료물질을 미백효과가 뛰어난 알부틴과 비타민 C와 비교해보았을 때, 대조군 크림보다 약콩 사포닌 크림이 티로시나아제 효소활성 저해효과가 높았으며, 약콩 사포닌 크림보다 정제한 약콩 사포닌이 티로시나아제 효소활성 저해효과가 뛰어났다.When comparing the sample material with arbutin and vitamin C, which showed excellent whitening effect, medicinal soybean saponin cream had higher inhibitory effect on tyrosinase enzyme activity than that of control cream. Was excellent.

<시험예 6> 토끼 피부 미백 실험<Test Example 6> rabbit skin whitening experiment

백색 토끼(체중 1.5~3.0 kg)의 피부에 멜라닌 색소를 투여하여 검은 반점을 생성시킨 다음 매일 각각의 시료 500mg을 바른 20일 후 멜라닌의 제거 유무를 통하여 미백 효과를 평가하였다.Melanin was applied to the skin of white rabbits (weight 1.5-3.0 kg) to produce black spots, and then the whitening effect was evaluated by removing melanin 20 days after applying 500 mg of each sample daily.

도 5에 나타난 바와 같이 대조군 크림의 경우 자연방치한 대조구획과 유사한 변화를 보였으나, 약콩 사포닌 및 약콩 사포닌 크림은 현저히 검은 반점이 사라졌다. As shown in FIG. 5, the control cream showed a similar change to the control group that was left unattended, but the dark soybean saponin and the weak soy saponin cream disappeared significantly.

<시험예 7> 인체 피부 미백 효과 관찰Test Example 7 Observation of Skin Whitening Effect of Human Body

대조군 크림과 약콩 사포닌 크림을 실험자(20-40세의 여성) 10명의 2그룹으로 나누어 얼굴에 도포하였다. 각 그룹은 1일 2회 연속 1개월간 대조군 크림과 약콩 사포닌 크림 500mg을 도포하였다.A control cream and a weak soy saponin cream were applied to the face divided into two groups of ten experimenters (20-40 years old female). Each group applied control cream and medicinal soybean saponin cream 500mg twice a day for 1 consecutive month.

한 그룹 왼쪽 얼굴에는 대조군 크림을 도포하였고 오른쪽 무도포하였고, 다른 그룹은 왼쪽 얼굴에는 약콩 사포닌 크림을 도포하였고 오른쪽 무도포하여 얼굴 좌우양쪽 비교실험을 하였다.A control cream was applied to the left face of one group and the right non-coated, and the other group applied the saponin saponin cream to the left face.

얼굴 좌우 양편의 도포부위 피부를 화상분석으로 얼굴색을 비교하여 어두운 색을 5, 중간색을 3, 가장 환한 색을 1로 정하고 그 중간정도를 어림잡아 평하였다.The skin color of the applied areas on both sides of the face was analyzed by image analysis, and the dark color was set to 5, the middle color to 3, and the brightest color to 1.

인체 피부 미백 효과Human skin whitening effect 실험인원Experimental number 1One 22 33 44 55 66 77 88 99 1010 오른쪽 피부색(크림 무도포 부분)Right skin color (no cream part) 33 33 2.52.5 33 33 33 2.52.5 33 33 2.52.5 왼쪽 피부색(대조군 크림 도포부분)Left skin color (control cream application) 2.52.5 2.52.5 2.52.5 33 2.52.5 33 22 2.52.5 2.52.5 22 오른쪽 피부색(크림 무도포 부분)Right skin color (no cream part) 2.52.5 33 2.52.5 33 33 33 2.52.5 33 33 2.52.5 왼쪽 피부색(약콩사포닌크림 도포부분)Left skin color (weak bean saponin cream applied part) 1.51.5 1.51.5 1One 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1One 1One 1.51.5 1One

상기 표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 대조군 크림에 비해 약콩 사포닌 크림의 미백 효과가 탁월함을 확인하였다.As can be seen in Table 4, it was confirmed that the whitening effect of the weak soy saponin cream compared to the control cream.

<시험예 8> 누적 피부 자극성 시험Test Example 8 Cumulative Skin Irritation Test

(1) 사육 환경 및 관리(1) Breeding environment and management

(가) 사육 환경 : 실내 온도 23±3℃, 습도 50±10%(A) Breeding environment: Room temperature 23 ± 3 ℃, Humidity 50 ± 10%

(나) 사료 및 음수 : 토끼용 고형사료, 음수는 상수도수, 자유섭취(B) Feed and negative water: solid feed for rabbits, negative water for drinking water, free intake

(2) 시험군의 구성(2) Composition of test group

건강한 암컷동물 3마리 이용, 동물의 등 부위를 약 2.0×2.0㎝ 정도의 크기로 척추를 중심으로 한 구역을 대조군으로 하고 나머지 구역을 시험구획으로 하여 시험구역에 물질을 도포하였다.Three healthy female animals were used, and the material was applied to the test area with the back area of the animal about 2.0 × 2.0 cm in size, with the area around the spine as the control and the remaining area as the test compartment.

(3) 실험 방법(3) Experiment method

(가) 시험물질의 적용 24시간 전에 제모를 실시(토끼3마리)하고, 시험 부위 (각각 2.0×2.0㎝) 구획을 정하였다.(A) Hair removal was performed 24 hours before application of the test substance (3 rabbits), and a test site (each 2.0 × 2.0 cm) was defined.

(나) 첩보부위 중 손상된 피부 구획에 16G 주사 바늘로 상처를 낸 후 24시간 방치하였다.(B) The wounded area of the spy was wound with a 16G injection needle and left for 24 hours.

(다) 시험물질[약콩사포닌, 약콩사포닌 크림, 대조군 크림]을 시험구획에 하루에 아침저녁으로 2회에 걸쳐서 0.5g을 16일간 발라주었다. 대조구획은 공기 중에 방치하였다.(C) The test substance [weak soy saponin, weak soy saponin cream, control cream] was applied to the test compartment 0.5g twice a day and evening for 16 days. The control compartment was left in the air.

(4) 관찰 및 검사 항목(4) observation and inspection items

(가) 일반 증상 관찰 : 시험물질 투여 후, 매일 외관, 사료 섭취, 음수 상태 및 일반적인 현상(A) Observation of general symptoms: daily appearance, feed intake, negative state and general phenomenon after administration of test substance.

(나) 체중 측정 : 투여시 및 적용 16일째에 각각 측정하였다.(B) Body weight measurement: measured at the time of administration and 16 days of application.

(다) 적용부의 관찰 : 시험물질 16일 적용 후 30분, 24시간, 48시간, 72시간 후 홍반과 가피형성, 부종형성 등을 각각 확인하여 매회 나타나는 자극 평가점을 총합하여 평균치로 평가하였다.(C) Observation of the applied part: After 30 days, 24 hours, 48 hours, 72 hours after application of the test substance 16 days, erythema, crust formation, edema formation, etc. were respectively confirmed, and the stimulus evaluation scores each time were summed and averaged.

(5) 피부 반응의 평가 및 자극성의 판정(5) evaluation of skin response and determination of irritation

피부 반응의 평가는 "의약품 등의 독성시험 기준"을 이용하여 판정한다. 또한 결과에 대한 자극성의 정도 판정은 일반적으로 많이 이용되는 Draize의 P.I.I (Primary Irritation Index)의 산출 방법을 따른다.Evaluation of skin reactions is made using the "toxicity test criteria for pharmaceuticals". In addition, the determination of the degree of stimulus for the result follows the commonly used method of calculating the Primary Irritation Index (P.I.I) of Draize.

P.I.I 평가 기준표P.I.I Evaluation Criteria Table 피부반응정도Skin response 평점grade 홍반형성Erythema formation 부종형성Edema 홍반판정평점Hongban Fan Jeongpyeong 부종판정평점Edema judgment score 홍반이 없다Have no erythema 부종없다No edema 00 00 약한 정도의 홍반Weak erythema 약한 정도의 홍반Weak erythema 1One 1One 명확한 홍반Clear erythema 명확한 부종Clear edema 22 22 중간 강한 홍반Medium strong erythema 중등도위 부종(1㎜정도)Moderate edema (about 1 mm) 33 33 삼홍색의 강한 홍반Deep red erythema 강한 부종(1㎜이상)Strong edema (more than 1 mm) 44 44 안정성 구분Stability Classification 1차 자극성Primary irritant 00.1~0.50.6~1.51.6~3.03.1~5.05.1~6.56.6~8.000.1 ~ 0.50.6 ~ 1.51.6 ~ 3.03.1 ~ 5.05.1 ~ 6.56.6 ~ 8.0 무자극실질적 사용함에 있어 자극이 없음극미한 자극온화한 자극보통자극부분적 자극심한 자극No irritation In practical use No irritation Mild irritation Mild irritation Normal irritation Partial irritation

(6) 시험결과(6) Test result

약콩 사포닌 피부 누적 시험 결과Pharmacopoeia saponin skin accumulation test result 관찰시간Observation time 건강한 피부Healthy skin 손상된 피부Damaged skin 30분후30 minutes later 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 24시간 후24 hours later 00 00 -- 00 00 -- 48시간 후48 hours later 00 00 -- 00 00 -- 72시간 후After 72 hours 00 00 -- 00 00 -- 소 계sub Total 00 00 -- 00 00 -- 평 균Average 00 00 -- 00 00 -- 평균의 합계Sum of average 00 00 누적 피부 자극지수Cumulative Skin Irritation Index 0(무자극)0 (no stimulation) 0(무자극)0 (no stimulation)

약콩 사포닌 크림 피부 누적 시험 결과Pharmacopoeia saponin cream skin accumulation test result 관찰시간Observation time 건강한 피부Healthy skin 손상된 피부Damaged skin 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 30분 후30 minutes later 00 00 -- 00 1One -- 24시간 후24 hours later 00 00 -- 00 00 -- 48시간 후48 hours later 00 00 -- 00 00 -- 72시간 후After 72 hours 00 00 -- 00 00 -- 소 계sub Total 00 00 -- 00 1One -- 평 균Average 00 00 -- 00 0.250.25 -- 평균의 합계Sum of average 00 0.250.25 누적 피부 자극지수Cumulative Skin Irritation Index 0(무자극)0 (no stimulation) 0.25(실질적 사용함에 있어 자극이 없음)0.25 (no stimulus in practical use)

대조군 크림 피부 누적 시험 결과 Control cream cumulative test results 관찰시간Observation time 건강한 피부Healthy skin 손상된 피부Damaged skin 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 30분 후30 minutes later 00 00 -- 1One 22 -- 24시간 후24 hours later 00 00 -- 00 1One -- 48시간 후48 hours later 00 00 -- 00 00 -- 72시간 후After 72 hours 00 00 -- 00 00 -- 소 계sub Total 00 00 -- 1One 33 -- 평 균Average 00 00 -- 0.250.25 0.750.75 -- 평균의 합계Sum of average 00 1One 누적 피부 자극지수Cumulative Skin Irritation Index 0(무자극)0 (no stimulation) 1(극미한 자극)1 (mineral stimulus)

상기 표 6 내지 8에서 알 수 있는 바와 같이, 대조군 크림은 피부누적에 약간의 자극을 보였지만 본 발명에 따른 약콩 사포닌 및 약콩 사포닌 크림은 누적 사용에도 거의 자극이 나타나지 않았다. As can be seen in Tables 6 to 8, the control cream showed some irritation to skin accumulation, but the weak soy saponin and weak soy saponin cream according to the present invention showed little irritation even in cumulative use.

<실시예 9> 광독성 시험Example 9 Phototoxicity Test

상기 시험예 8에서 (3)실험 방법에서 하루에 아침저녁으로 시험구획에 시험물질[약콩사포닌, 약콩사포닌 크림, 대조군 크림]을 2회에 걸쳐서 0.5g을 발라준 후 UV lamp로 조사하는 것을 16일간 실시하였다. 대조구획은 공기 중에 방치하였다(UV lamp로 조사하지 않는다).In Experimental Example 8 (3) in the test method in the morning and evening a day, the test substance (weak soy saponin, weak soy saponin cream, control cream) was applied twice in 0.5g and irradiated with UV lamp 16 It was carried out for a day. The control compartment was left in the air (not irradiated with UV lamp).

약콩 사포닌 광독성 시험 결과Pharmacopoeia saponin phototoxicity test result 관찰시간Observation time 건강한 피부Healthy skin 손상된 피부Damaged skin 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 30분 후30 minutes later 00 00 -- 1One 00 -- 24시간 후24 hours later 00 00 -- 00 00 -- 48시간 후48 hours later 00 00 -- 00 00 -- 72시간 후After 72 hours 00 00 -- 00 00 -- 소 계sub Total 00 00 -- 1One 00 -- 평 균Average 00 00 -- 0.250.25 00 -- 평균의 합계Sum of average 00 0.250.25 피부 자극지수Skin irritation index 0(무자극)0 (no stimulation) 0.25(실질적 사용함에 있어 자극이 없음)0.25 (no stimulus in practical use)

약콩 사포닌 크림 광독성 시험 결과Pharmacopoeia saponin cream phototoxicity test result 관찰시간Observation time 건강한 피부Healthy skin 손상된 피부Damaged skin 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 30분 후30 minutes later 1One 00 -- 1One 00 -- 24시간 후24 hours later 00 00 -- 1One 00 -- 48시간 후48 hours later 00 00 -- 00 00 -- 72시간 후After 72 hours 00 00 -- 00 00 -- 소 계sub Total 1One 00 -- 22 00 -- 평 균Average 0.250.25 00 -- 0.50.5 00 -- 평균의 합계Sum of average 0.250.25 0.50.5 피부 자극지수Skin irritation index 0.25(실질적 사용함에 있어 자극이 없음)0.25 (no stimulus in practical use) 0.5(실질적 사용함에 있어 자극이 없음)0.5 (no stimulus in practical use)

대조군 크림 광독성 시험 결과 Control Cream Phototoxicity Test Results 관찰시간Observation time 건강한 피부Healthy skin 손상된 피부Damaged skin 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 홍반Erythema 부종edema 기타Etc 30분 후30 minutes later 00 00 -- 1One 22 -- 24시간 후24 hours later 00 00 -- 1One 1One -- 48시간 후48 hours later 00 00 -- 00 00 -- 72시간 후After 72 hours 00 00 -- 00 00 -- 소 계sub Total 00 00 -- 22 33 -- 평 균Average 00 00 -- 0.50.5 0.750.75 -- 평균의 합계Sum of average 00 1.251.25 피부 일차 자극지수Skin Primary Irritation Index 0(무자극)0 (no stimulation) 1.25(극미한 자극)1.25 (minor stimulus)

상기 표 9 내지 11에서 알 수 있는 바와 같이, 대조군 크림은 광선 노출에 약간의 자극을 보였지만 본 발명에 따른 약콩 사포닌 및 약콩 사포닌 크림은 거의 자극이 나타나지 않았다. As can be seen in Tables 9 to 11, the control cream showed some irritation to light exposure, but the weak soy saponin and weak soy saponin cream according to the present invention showed little irritation.

약콩으로부터 추출된 사포닌은 주름개선 및 미백원료로 효능면에서 뛰어나고 안전성면에서 우수한 효과가 있다. 따라서 약콩유래 사포닌은 화장품의 기초 원료로 안전하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라 주름개선 및 미백의 기능성 화장품 원료로 사용될 수 있다. 또한 약콩유래 사포닌은 고가의 인삼 사포닌을 대체할 수 있어 경제적으로도 크게 유용하다. Saponin extracted from medicinal soybean is excellent in efficacy and safety in wrinkle improvement and whitening ingredients. Therefore, the soybean-derived saponin can be safely used as a basic raw material of cosmetics as well as functional cosmetic raw materials for wrinkle improvement and whitening. In addition, the soybean-derived saponins can replace expensive ginseng saponins and are economically useful.

도 1은 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 프리라디칼 소거작용 효과를 나타내는 그래프이다.1 is a graph showing the effect of free radical scavenging of the saponin derived from soybean according to the present invention.

도 2는 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 자동산화 항산화 효과를 나타내는 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the antioxidant effect of the soybean-derived saponin of the present invention.

도 3은 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 자외선 차단 효과를 나타내는 그래프이다. Figure 3 is a graph showing the sunscreen effect of the medicinal soybean-derived saponin according to the present invention.

도 4는 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 주름개선 효과를 나타내는 사진이다. Figure 4 is a photograph showing the anti-wrinkle effect of the soybean-derived saponin according to the present invention.

도 5는 본 발명에 따른 약콩유래 사포닌의 미백 효과를 나타내는 사진이다. Figure 5 is a photograph showing the whitening effect of medicinal soybean-derived saponin according to the present invention.

Claims (3)

약콩으로부터 추출된 사포닌을 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물.Functional cosmetic composition containing saponin extracted from medicinal beans as an active ingredient. 제1 항에 있어서, 기능성은 항 멜라닌활성을 통한 미백효과를 갖는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the functionality has a whitening effect through anti-melanin activity. 제1 항에 있어서, 기능성은 항산화 활성, 자동산화방지 활성 또는 자외선 차단 활성을 통한 주름방지 및/또는 개선의 효과를 갖는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the functionality has the effect of anti-wrinkle and / or improvement through antioxidant activity, anti-oxidation activity or sun protection activity.
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