KR20050034710A

KR20050034710A - Ｍｃｈ1 안타고니스트로서의 2차 아미노 아닐린계피페리딘 및 이의 용도

Info

Publication number: KR20050034710A
Application number: KR1020057000078A
Authority: KR
Inventors: 마자바디모하매드; 지앙앨런; 루카이; 천치언-안; 디레온존; 위첼존
Original assignee: 하. 룬트벡 아크티에 셀스카브
Priority date: 2002-07-03
Filing date: 2003-07-03
Publication date: 2005-04-14
Also published as: CA2485379A1; US7473698B2; EA200500152A1; CN1319945C; NO20050113L; ZA200409425B; WO2004005257A1; IS7560A; IL165730A0; NZ536329A; US20050245743A1; AU2003259098A1; JP2005532399A; EA008826B1; CN1665786A; BR0312257A; EP1556351A4; PL373621A1; MXPA04012103A; UA77536C2

Abstract

본 발명은 멜라닌 농축 호르몬-1 (MCH1) 수용체에 대해 선택적 안타고니스트인 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 및 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 의약 조성물을 제공한다. 본 발명은 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 및 제약학적으로 허용가능한 담체를 배합하여 수득한 의약 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 및 제약학적 허용가능한 담체를 포함하는 의약 조성물의 제조 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 환자의 체질량 감소 방법으로서, 환자의 체질량을 감소시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 우울증 및/또는 불안증을 겪고 있는 환자의 치료 방법으로서, 환자의 우울증 및/또는 불안증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 비뇨기 장애를 겪고 있는 환자를 치료하는 방법을 제공한다.

Description

ＭＣＨ1 안타고니스트로서의 2차 아미노 아닐린계 피페리딘 및 이의 용도 {SECONDARY AMINO ANILINIC PIPERIDINES AS MCH1 ANTAGONISTS AND USES THEREOF}

멜라닌 농축 호르몬 (MCH)은 본래 연어과 어류 (경골 어류)로부터 단리된 환형 펩티드이다 (Kawauchi 등, 1983). 어류에서 17 개 아미노산 펩티드는 멜라닌색소포 내에서 멜라닌의 응집을 일으키고, α-MSH 의 기능적 안타고니스트로서 작용하여 ACTH 의 방출을 저해한다. 포유류 MCH (19 개 아미노산)는 래트, 마우스 및 인간 사이에서 높게 보존되어, 100 % 아미노산 동일성을 나타내지만, 이의 생리학적 역할은 명확하지 않다. MCH 는 섭식, 수분 균형, 에너지 대사, 일반 각성/주의력 상태, 기억 및 인지 기능, 및 정신 장애를 포함하는 각종 절차에 참여하는 것으로 보고되었다 (Baker, 1991; Baker, 1994; Nahon, 1994; Knigge 등, 1996 참조). 섭식 또는 체중 조절에서의 이의 역할은 최근 Nature 지의 간행물 (Qu 등, 1996)에 의해 뒷받침되며, 이는 ob/+ 마우스들에 비해 ob/ob 마우스들의 시상하부에서 MCH 가 과잉발현되며, 금식이 비만 및 정상 마우스들 모두에서 금식 동안 MCH mRNA 를 더욱 증가시켰다는 것을 설명하고 있다. MCH 는 외측 뇌실 내로 주입되는 경우, 정상 래트들에서도 섭식을 자극하였다 (Rossi 등, 1997).

MCH 는 또한 -MSH 의 행동 효과를 기능적으로 길항하는 것으로 보고되었으며, (Miller 등, 1993; Gonzalez 등, 1996; Sanchez 등, 1997); 또한, 스트레스가 MCH 전구체인 preproMCH (ppMCH) mRNA 수준을 감소시키는 한편, POMC mRNA 수준은 증가시킨 것으로 나타났다 (Presse 등, 1992). 따라서, MCH 는, 섭식 및 성적 활동의 조절 뿐만 아니라, 스트레스에 대한 반응에 관련된 축적성 신경펩티드로서의 역할을 할 것이다 (Baker, 1991; Knigge 등, 1996).

MCH 의 생물학적 효과는 특정 수용체에 의해 매개되는 것으로 생각되지만, MCH 에 대한 결합 부위들은 잘 설명되지 않았다. 삼중수소 리간드 ([³H]-MCH)는 뇌 막에 대해 특이적 결합을 나타내지만 포화 분석에는 이용할 수 없어서, 친화성이나 B_max 중 어느 것도 결정할 수 없다는 것이 보고되었다 (Drozdz 및 Eberle, 1995). 13 위치에서 티로신의 방사성 요오드화는 생물학적 활성이 극적으로 감소된 리간드를 초래한다 (Drozdz 및 Eberle, 1995 참조). 반면, MCH 유사체 [Phe¹³, Tyr¹⁹]-MCH 의 방사성 요오드화는 성공적이었으며 (Drozdz 등, 1995); 상기 리간드는 생물학적 활성을 보유하였으며, 마우스 흑색종 (B16-F1, G4F, 및 G4F-7), PC12, 및 Cos 세포들을 포함하는 각종 세포계에 특이적 결합을 나타내었다. G4F-7 세포에서, K_D = 0.118 nM 이고, B_max 는 ~1100 위치/세포 였다. 중요하게는, 상기 결합은 -MSH 에 의해 저해되지 않지만, 래트 ANF 에 의해 약하게 저해되었다 (Ki = 116 nM 에 대해, 천연 MCH 에 대해 12 nM) (Drozdz 등, 1995). 보다 최근에는 특정 MCH 결합이 형질변형된 각질세포 (Burgaud 등, 1997) 및 흑색종 세포 (Drozdz 등, 1998) 에서 보고되었으며, 여기에서 광가교결합 연구는 수용체가 45~50 k달톤의 겉보기 분자량을 갖는 막 단백질이며, 수용체의 GPCR 상과 (superfamily)의 분자량 범위와 양립성이라는 것을 제안하고 있다. 이 리간드를 사용한 MCH 수용체 국소화의 방사성 자기방사법적 (radioautoradiographic) 연구는 아직까지 보고되어 있지 않다.

MCH 펩티드의 국소화 및 생물학적 활성은 MCH 수용체 활성의 조정이 다수의 치료적 적용에 사용가능할 것이라는 것을 암시한다. 섭식에서 MCH 의 역할은 그의 잠재적인 임상적 사용에 의해 가장 잘 특징되어진다. MCH 는, 갈증 및 배고픔의 조절에 관련된 뇌 영역인 외측 시상하부에서 발현된다 (Grillon 등, 1997); 최근, 강한 오렉신생성제인 오렉신 (orexin) A 및 B 는 외측 시상하부에서 MCH 와 매우 유사하게 국소화되는 것으로 나타났다 (Sakurai 등, 1998). 이 뇌 영역에서의 MCH mRNA 수준은 24 시간의 결식 후 래트에서 증가되었다 (Herve 및 Fellman, 1997); 인슐린 주입 후, MCH 면역반응성 페리케리아 (perikarya) 및 섬유의 과다 (abundance) 및 염색 강도에서의 현저한 증가가, MCH mRNA 수준에서의 현저한 증가와 함께 관찰되었다 (Bahjaoui-Bouhaddi 등, 1994).

래트에서 섭식을 자극하는 MCH 의 능력 (Rossi 등, 1997)은 MCH mRNA 수준이 비만 ob/ob 마우스들 (Qu 등, 1996)의 시상하부에서는 상향조절되고, 렙틴으로 처리된 래트의 시상하부에서는 감소되며, 렙틴처리된 래트의 음식 섭취 및 체중 증가도 감소된다는 관찰과 일치한다 (Sahu, 1998). MCH 는 식품 섭취 및 HPA (시상하부 뇌하수체/부신 축 (adrenal axis))내에서의 호르몬 분비에 대한 멜라노코르틴계의 효과의 기능적 안타고니스트로서 작용하는 것으로 보인다 (Ludwig 등, 1998). 이러한 데이타는 함께 에너지 균형 및 스트레스에 대한 반응의 조절에서의 내생 MCH 의 역할을 제안하며, 비만 및 스트레스 관련 장애의 치료에의 사용을 위한, MCH 수용체에 작용하는 특정 화합물의 개발에 대한 이론적 근거를 제공한다.

현재까지 연구된 모든 종 들에서, 대부분의 MCH 세포군의 뉴런들은 이들이 위치한 외측 시상하부 및 시상밑부의 그들의 영역에서 다소 일정한 위치를 차지하며, 소위 "추체외로 (extrapyramidal)" 운동 회로의 부분의 일부일 수 있다. 이들은 실질적으로, 시상 및 대뇌 피질과 관련된 선조체성- (striato) 및 담창구원심성 (pallidofugal) 경로, 시상하부 영역, 및 시상밑부 핵, 흑색질, 및 중간뇌 중심에 상호 (reciprocal) 연결부를 포함한다 (Bittencourt 등, 1992). 이들의 위치에서, MCH 세포군은 적절한 협조된 운동 활성으로 시상하부성 감정 작용 (visceral activity)를 발현하기 위한 가교 또는 메카니즘을 제공할 것이다. 임상적으로, 운동 장애, 예컨대 추체외로 회로가 관련된 것으로 알려진 파킨슨씨 병 및 헌팅턴 무도병으로의 상기 MCH 계의 연루를 고려하는 것은 일정 가치가 있을 것이다.

인간 유전 연관 연구는 진정한 hMCH 좌위를 염색체 12 에 (12q23~24), 그리고 변형 hMCH 좌위를 염색체 5 에 (5q12~13) 위치시켰다 (Pedeutour 등, 1994). 12q23~24 좌위는 보통염색체 우성 소뇌조화운동불능 II 형 (SCA2)이 매핑된 (mapped) 좌위와 일치된다 (Auburger 등, 1992; Twells 등, 1992). 이 질병은 감람핵-뇌교-소뇌 위축증 (olivopontocerebellar atrophy)을 포함하는 신경퇴행성 질환을 포함한다. 또한, 다리에르 병 (Darier's disease)에 대한 유전자는 12q23~24 좌위로 매핑되었다 (Craddock 등, 1993).

다리에르 병은 비정상 I 각질세포 부착 및 일부 과들에서는 정신병에 의해 특징된다. 래트 및 인간 뇌에서 MCH 신경계의 기능성 및 신경해부학적 패턴 면에서, MCH 유전자는 SCA2 또는 다리에르 병에 대한 좋은 후보자임을 나타낼 수 있다. 흥미롭게도, 높은 사회적 충격이 갖는 질병들이 이 좌위에서 매핑되었다. 실제로, 만성 또는 급성 형의 척추 근육 위축의 원인이되는 유전자는, 유전적 연관 분석을 사용하여 염색체 5q12~13 에 할당되었다 (Melki 등, 1990; Westbook 등, 1992). 또한, 독립적인 계열의 증거 주요 정신분열증의 염색체 5q11.2~13.3 으로의 할당을 뒷받침한다 (Sherrington 등, 1988; Bassett 등, 1988; Gilliam 등, 1989). 상기 연구는 MCH 가 신경퇴행성 질병 및 감정 장애에 어떤 역할을 할 수 있다는 것을 제안한다.

기타 생물학적 계에서의 MCH 의 관찰된 효과에 의해 MCH 관련 화합물에 대한 추가적인 치료적 적용이 제안된다. 예로서, MCH 는 수컷 및 암컷 래트에서 생식 기능을 조절할 수 있다. MCH 전사물 및 MCH 펩티드가 성장한 래트의 고환내 배 세포 안에서 발견되며, 이는 MCH 가 줄기세포 재생 및/또는 초기 정모세포의 분화에 참여할 수 있다는 것을 암시한다 (Hervieu 등, 1996). 내측 시각교차 앞 영역 (MPOA) 또는 배내측 핵 (VMN)에 직접 주사된 MCH 는 암컷 래트에서 성적 활동을 자극시켰다 (Gonzalez 등, 1996). 난포호르몬을 부여한 난소 제거된 래트에서, MCH 는 황체형성 호르몬 (LH) 방출을 자극하는 한편, 항-MCH 항혈청은 LH 방출을 저해하였다 (Gonzalez 등, 1997). 다수의 MCH 세포체들을 함유하는 불확정 구역 (zona incerta)은, 배란전기 LH 급증에 대한 조절 위치로서 이미 동정되었다 (MacKenzie 등, 1984).

MCH 는 ACTH 및 옥시토신을 포함하는 뇌하수체 호르몬의 방출에 영향을 미치는 것으로 보고되었다. MCH 유사체는 또한 간질의 치료에 유용할 수 있을 것이다. PTZ 발작 모델에서, 발작 유도 전의 MCH 주사는 래트 및 기니피그 모두에서 발작 작용을 예방하였으며, 이는 MCH 함유 뉴런이 신경 회로 잠재적인 PTZ-유도 발작에 참여할 수 있다는 것을 제안한다 (Knigge 및 Wagner, 1997). MCH 는 또한 인지적 기능의 행동성 상관에 영향을 미치는 것으로 관찰되었다. MCH 처리는 래트에서의 수동회피반응의 소실을 가속화하여 (McBride 등, 1994), MCH 수용체 안타고니스트가 기억 저장 및/또는 보유에 유리할 수 있다는 가능성을 제기한다. 고통의 조절 또는 인식에서의 MCH 의 가능한 역할은, MCH 양성 섬유에 의한 그레이수도 주위 (periaqueductal grey) (PAG)의 밀집된 신경분포에 의해 뒷받침된다. 결과적으로, MCH 는 액체 섭취의 조절에 참여할 수 있다. 의식이 있는 양에서의 MCH 의 ICV 주입은, 증가된 혈장 부피에 반응하여 이뇨촉진, 나트륨배설촉진 및 칼륨배설 촉진 변화를 생성하였다 (Parkes, 1996). 뇌의 액체 조절 구역에서의 MCH 의 존재를 보고하는 해부학적 데이타와 함께, 상기 결과는 MCH 가 포유류에서 액체 항상성의 중심 제어에 관련된 중요한 펩티드일 수 있음을 나타낸다.

MCH 에 대한 G-단백질 커플링된 수용체의 동정이 최근 발간되었다 (Chambers 등, 1999; Saito 등, 1999). 이들 군들은 MCH 를 인간의 오펀 G-단백질 커플링된 수용체 SLC-1 에 대한 내생적인 리간드로서 동정하였다 (Lakaye 등, 1998). 상기 수용체의 래트 동족체 (이제 MCH-1 으로 칭함)는 섭식 행동과 관련된 래트 뇌의 부위 (예로서, 등쪽내측 및 배내측 시상하부)에 국소화되는 것으로 보고되었다. MCH-1 및 MCH 의 섭식에 대한 영향의 관련은 MCH-1 넉아웃 (knockout) 마우스들의 표현형에 대한 최근 보고에 의해 확실하게 되었다. 두 개의 군은 독립적으로 (Marsh 등, 2002; Chen 등, 2002), 마우스들에서의 MCH-1 수용체 유전자의 표적된 붕괴 (MCH-1 넉아웃)가, 이상식욕항진증을 나타내지만 야생형의 동일배의 새끼 (littermates)에 비해 마르고 체질량이 감소된 동물을 초래하였다는 것을 나타내었다. 체질량에서의 감소는 대사의 증가에 기인한다. 각 군은 MCH-1 넉아웃 마우스들이 식이요법 유도된 비만에 저항성이며, 일정 식사를 유지한 동일배의 새끼와 유사한 체중을 일반적으로 나타낸다는 것을 증명하였다.

결과적으로, MCH-1 수용체에 대한 합성 안타고니스트 분자들이 이제 문헌에서 설명되었다. Bednarek 등 (2002)은 MCH-1 의 고친화성 펩티드 안타고니스트의 합성에 대해 보고하였다. 또한, MCH-1 의 소형 분자 안타고니스트가 Takekawa 등 (Takekawa 등, 2002)에 의해 설명되었다. 이 화합물, T-226296 은 MCH-1 수용체에 대해 높은 친화성을 나타내고 (래트 및 인간 MCH-1 에 대해 약 5~9 nM), MCH 의 뇌실 적용에 의해 유도된 식품 섭취를 저해하는 것으로 나타났다. 이들 데이타는 MCH-1 수용체 안타고니스트를 비만 치료에 사용하는 전략을 입증한다.

또한, 본 발명자들의 자체 연구에서, 본 발명자들은 인간에서의 화합물 효능의 예측에 사용되는 것으로서 잘 알려진 일부 동물 모델들에서 MCH1 안타고니스트들을 시험하였다 (Borowsky 등, 간행물; 발간되지 않은 데이타). 이들 시험은 MCH1 안타고니스트가 비뇨기 장애 뿐만 아니라, 비만, 우울증, 불안증을 치료하는데 유용하다는 것을 나타낸다.

본 발명에서는, 클론된 인간 멜라닌 농축 호르몬-1 (MCH1) 수용체에 결합하는 이차 아미노 아닐린성 피페리딘의 합성이 개시된다. 추가로, 이러한 화합물들은 기타 클론된 G-단백질 커플링된 수용체에 대하여, 클론된 MCH1 수용체에 선택적으로 결합한다. 시험관내 분석에서 측정하여 클론된 수용체의 활성화를 저해하는 능력이 개시된다.

또한, 본 발명의 화합물은 섭식 장애 (비만, 이상 식욕 항진 및 신경성 이상 식욕 항진), 성적/생식 장애, 우울증, 불안증, 우울 및 불안증, 뇌출혈, 울혈 심부전증, 수면 장애와 같은 이상 증세 또는 MCH1 수용체의 길항작용이 유리할 수 있는 임의의 증세를 치료하는데도 사용할 수 있다.

또한, 본 발명의 화합물은 대상의 체질량을 감소시키는데 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물은 비뇨기 장애를 치료하는데 사용될 수 있다.

발명의 개요

본 발명은 하기 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, -NO₂, -OR₃ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이고;

식 중, B 는 독립적으로 N 또는 CH 이며;

식 중, Z 는 CO 또는 SO₂ 이고;

식 중, 각 R 은 독립적으로 -H, -F 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬이며;

식 중, R₄ 는 독립적으로 -OR₃, -NHR₃, -SR₃, -COR₃, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 (이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -OR₂ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 임의 치환됨) 이고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 -H; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬; 아릴 또는 헤테로아릴 (이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR₂로 임의 치환됨) 이며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 (이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 임의 치환됨) 이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].

상기 발명의 추가적인 구현예에서, 상기 화합물은 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체적으로 순수하다. 또 다른 구현예에서, 상기 화합물은 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체적으로 순수하다. 상기 화합물은 (+) 거울상 이성질체이다. 한 구현예에서, 화합물은 (-) 거울상 이성질체이다.

본 발명의 한 실례는 약학적으로 허용가능한 담체 및 본 발명의 임의의 화합물의 치료적 유효량을 포함하는 약학적 조성물이다.

본 발명의 한 실례는 상기 기술된 임의의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 부가혼합하여 제조되는 약학적 조성물이다.

본 발명의 한 실례는 본 발명의 임의의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 부가혼합하는 단계를 포함하는 약학적 조성물의 제조 방법이다.

본 발명의 한 실례는 본 발명의 임의의 화합물의 제조를 위한 합성 방법이다.

본 발명의 예시는 본 발명의 임의의 화합물 또는 약학적 조성물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 치료적 유효량을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 MCH1 수용체에 의해 매개되는 장애의 치료 방법이다.

한 구현예에서, 치료적 유효량은 약 0.03 내지 약 300 mg 이다.

한 구현예에서, 장애는 우울증이다. 한 구현예에서, 장애는 불안증이다. 한 구현예에서, 장애는 비만이다. 한 구현예에서, 장애는 절박성 요실금이다.

한 구현예는 치료적 유효량의 본 발명의 화합물을 우울증, 불안증, 비만 또는 절박성 요실금으로 이루어지는 군으로부터 선택된 장애를 겪는 대상에 투여하는 것을 포함하는, 상기 장애의 치료방법이다.

한 구현예에서, 치료적 유효량은 약 0.03 내지 약 300 mg 이다.

식 중, B 는 독립적으로 N 또는 CH 이며;

식 중, Z 는 CO 또는 SO₂ 이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].

한 구현예에서, 상기 화합물은 하기 구조를 가진다:

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한 구현예에서, 상기 화합물은 하기 구조를 가진다:

[식 중, R₄ 는 아릴 또는 헤테로아릴 (이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -OR₃ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 임의 치환됨) 이고;

식 중, 각 R₃ 는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 (이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN 또는 -OR₂ 로 임의 치환됨) 이며;

식 중, 각 R₂ 는 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 (이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 임의 치환됨) 이다].

본 발명의 한 구현예에서, 상기 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, R₂ 는 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는 아릴 (이때, 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂ 또는 -CN으로 임의 치환됨) 이다].

한 구현예에서, 상기 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, R₂ 는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이고;

식 중, n 은 3 부터 6 까지의 정수이다].

본 발명의 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F 또는 -Cl 이고;

식 중, R₂ 는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₃ 알킬이다].

하기 구조를 갖는 화합물:

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하기 구조를 갖는 화합물:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, R₂ 는 아릴이고, 이때 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂ 또는 CN 으로 임의 치환되고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F 또는 -Cl 이고;

식 중, R₂ 는 하나 이상의 -F, -Cl 또는 -Br 로 임의 치환된 아릴이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F 또는 -Cl 이고;

식 중, R₂ 는 하나 이상의 -F 로 임의 치환된 아릴이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, R₄ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -OR₃ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 임의 치환된 아릴이고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN 또는 -OR₂ 로 임의 치환되며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이다].

본 발명은 또한 하기 구조를 갖는 화합물을 제공한다:

[식 중, R₄ 는 독립적으로 -OR₃, -NHR₃, -COR₃또는 -SR₃이고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR₂ 로 임의 치환되며;

식 중, R₂ 는 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는 아릴 (이때, 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 임의 치환됨) 이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₄ 는 독립적으로 -OR₃, -NHR₃또는 -COR₃ 이고;

식 중, R₃ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR ₂ 로 임의 치환된 아릴이며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는, 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 임의 치환된 아릴이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H 또는 -F 이고;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는, 하나 이상의 -F, -Cl, -Br 또는 -I 로 임의 치환된 아릴이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].

본 발명의 한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, A 는 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I 로 임의 치환된다].

하기 구조를 갖는 화합물:

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한 구현예에서, 하기 구조를 갖는 화합물:

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한 구현예에서, 하기 구조를 갖는 화합물:

[식 중, A 는 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₃ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br 또는 -I 로 임의 치환된 아릴이다].

하기 구조를 갖는 화합물:

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하기 구조를 갖는 화합물:

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본 발명은 또한 하기 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

[식 중, 각 Q 는 독립적으로, 수소;

이고;

식 중, X 는 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -ZR₃, -ZOR₃, -OZR₃, -ZN(R₃) ₂, -N(R₃)ZR₃, -N(R₃)ZN(R₃)₂, -CN, -NO₂, -SR₃, -(CH₂) _qOR₃, -(CH₂)_qSR₃, 아릴, 페녹시 또는 헤테로아릴, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐 또는 C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬 또는 시클로알케닐이며;

식 중, 각 Z 는 독립적으로 CO; CS; SO₂; 또는 부재(null)하고;

식 중, 각 R 은 독립적으로 -H; -F; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬; 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐; -N(R₃)₂; -NO₂; -CN; -CO₂R₃; -OCOR₃; -OR₃; -N(R₃)COR₃ 또는 -CON(R₃)₂ 이며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 -H; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 또는 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐로 임의 치환되고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 -H; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐; C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬 또는 시클로알케닐; 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -N(R₂)₂, -NO₂, -CN, -COR₂, -CO₂R ₂, -OCOR₂, -OR₂, -N(R₂)COR₂, -N(R₂)CON(R₂)₂, -CON(R₂)₂, 아릴, 헤테로아릴, 페녹시, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐, C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬 또는 시클로알케닐로 임의 치환되고;

식 중, 각 R₄ 는 독립적으로 -H; -ZR₃, -ZOR₃, -OZR₃, -ZN(R ₃)₂, -N(R₃)ZR₃, -N(R₃)ZN(R₃)₂, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 아릴, 벤질 또는 헤테로아릴이고, 이때 상기 아릴, 벤질 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -ZR₃, -ZOR₃, -OZR₃, -ZN(R₃) ₂, -N(R₃)ZR₃, -N(R₃)ZN(R₃)₂, -CN, -NO₂, -SR₃, -(CH₂) _qOR₃, -(CH₂)_qSR₃, 아릴, 벤질, 헤테로아릴, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐 또는 C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬, 또는 시클로알케닐이며;

식 중, 각 k 는 독립적으로 1 부터 3 까지의 정수이고;

식 중, 각 m 은 독립적으로 0 부터 1 까지의 정수이며;

식 중, n 은 0 부터 6 까지의 정수이고;

식 중, q 는 1 부터 3 까지의 정수이다].

[식 중, 각 Q 는 독립적으로, 수소;

이고;

식 중, 각 Z 는 독립적으로 CO; CS; SO₂; 또는 부재하고;

식 중, 각 k 는 독립적으로 1 부터 3 까지의 정수이고;

식 중, n 은 0 부터 6 까지의 정수이고;

식 중, q 는 1 부터 3 까지의 정수이다].

본 발명의 한 실례는 약학적으로 허용가능한 담체 및 상기 기술한 임의의 화합물의 치료적 유효량을 포함하는 약학적 조성물이다.

본 발명의 한 실례는 상기 기술된 임의의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 혼합하여 제조되는 약학적 조성물이다.

본 발명의 한 실례는 상기 기술한 임의의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 혼합하는 단계를 포함하는 약학적 조성물의 제조 방법이다.

본 발명의 한 실례는 상기 기술한 임의의 화합물의 제조를 위한 합성 방법이다.

본 발명의 예시는 상기 기술한 임의의 화합물 또는 약학적 조성물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 치료적 유효량을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 MCH1 수용체에 의해 매개되는 장애의 치료 방법이다.

[식 중, 각 Q 는 독립적으로, 수소;

이고;

식 중, X 는 페닐 또는 질소 함유 헤테로사이클이고, 이때 상기 페닐 또는 질소 함유 헤테로사이클은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -ZR₃, -ZOR₃, -OZR₃, -ZN(R₃)₂, -N(R₃)ZR₃, -N(R₃)ZN(R₃) ₂, -CN, -NO₂, -SR₃, -(CH₂)_qOR₃, -(CH ₂)_qSR₃, 아릴, 페녹시 또는 헤테로아릴, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐 또는 C₃-C ₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬 또는 시클로알케닐이며;

식 중, 각 Z 는 독립적으로 CO; CS; SO₂; 또는 부재하고;

식 중, 각 k 는 독립적으로 1 부터 3 까지의 정수이고;

식 중, n 은 0 부터 6 까지의 정수이고;

식 중, q 는 1 부터 3 까지의 정수이다].

[식 중, 각 Q 는 독립적으로, 수소;

이고;

식 중, A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br, -I, -ZR₃, -ZOR₃, -OZR₃, -ZN(R₃)₂, -N(R₃)ZR₃, -N(R₃)ZN(R₃) ₂, -CN, -NO₂, -N(R₃)₂, -OR₃, -SR₃, -(CH₂)_qOR₃, -(CH₂)_qSR₃, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐, C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬, 또는 시클로알케닐이며;

식 중, 각 B 는 독립적으로 N 또는 CH 이고;

식 중, 각 Z 는 독립적으로 CO; CS; SO₂ 이거나 부재하고;

식 중, 각 R 은 독립적으로 -H, -F, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐, -N(R₃)₂, -NO₂, -CN, -CO₂R₃, -OCOR₃, -OR₃, -N(R₃)COR₃ 또는 -CON(R₃)₂ 이며;

식 중, 각 k 는 독립적으로 1 부터 3 까지의 정수이고;

식 중, n 은 0 부터 6 까지의 정수이고;

식 중, q 는 1 부터 3 까지의 정수이다].

한 구현예에서, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br, -I, -ZR₃, -ZOR₃, -OZR₃, -ZN(R₃)₂, -N(R₃)ZR₃, -N(R₃)ZN(R ₃)₂, -N(R₃)₂, -OR₃, -SR₃, -(CH₂)_qOR₃, -(CH₂)_qSR₃, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬이고;

각 Z 는 독립적으로 CO; CS 이거나 부재하고;

각 R 은 독립적으로 -H, -F 이거나 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이며;

각 R₂ 는 독립적으로 -H; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 또는 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐로 임의 치환되고;

각 R₃ 는 독립적으로 -H; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -N(R₂)₂, -NO₂, -CN, -COR₂, -CO₂R₂, -OCOR₂, -OR₂, -N(R₂)COR₂, -N(R₂)CON(R₂) ₂, -CON(R₂)₂, 아릴, 헤테로아릴, 페녹시, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐, C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬 또는 시클로알케닐로 임의 치환된다.

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, R₄ 는 아릴이고, 이때 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐 또는 알키닐 또는 C₃-C₇ 시클로알킬, 모노플루오로시클로알킬, 폴리플루오로시클로알킬, 또는 시클로알케닐이다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

[식 중, R₃ 는 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -N(R₂)₂, -NO₂, -CN, -COR₂, -CO₂R₂, -OCOR₂, -OR₂, -N(R₂)COR₂, -N(R₂)CON(R₂)₂, -CON(R₂)₂, 아릴, 헤테로아릴, 페녹시, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 임의 치환된다].

한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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한 구현예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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상기 기술한 본 발명에서 사용된 것과 같은 "헤테로아릴" 이라는 용어는 하나 이상의 산소, 황 또는 질소 원자를 함유할 수 있는 5 및 6 원 불포화 고리를 포함하는데 사용된다. 헤테로아릴기의 예들은, 이에 제한되지는 않지만, 카바졸, 푸라닐, 티에닐, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴, 트리아졸릴, 티아디아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 및 트리아지닐을 포함한다.

또한, "헤테로아릴" 이라는 용어는 산소, 황 및 질소와 같은 헤테로 원자를 하나 이상 함유할 수 있는 융합 이환 고리계를 포함하는데 사용된다. 이러한 헤테로아릴기의 예들은, 이에 제한되지는 않지만, 인돌리지닐, 인돌릴, 이소인돌릴, 벤조[b]푸라닐, 벤조[b]티오페닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 푸리닐, 벤즈옥사졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤조[b]티아졸릴, 이미다조[2,1-b]티아졸릴, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 1,8-나프티리디닐, 프테리디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 프탈이미딜 및 2,1,3-벤조티아졸릴을 포함한다.

"헤테로아릴" 이라는 용어는 또한 하나 이상의 하기로 치환될 수 있는 상기 언급된 화학적 부분들을 포함한다: -F, -Cl, -Br, -I, CN, -NO₂, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 모노플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 폴리플루오로알킬, 직쇄 또는 분지된 C₂-C₇ 알케닐, 직쇄 또는 분지된 C₂-C ₇ 알키닐; C₃-C₇ 시클로알킬, C₃-C₇ 모노플루오로시클로알킬, C₃-C₇ 폴리플루오로시클로알킬, C₅-C₇ 시클로알케닐.

"헤테로아릴" 이라는 용어는 또한 하나 이상의 질소 원자를 포함하는 상기 언급된 화학적 부분들의 N-산화물을 포함한다. 본 발명에서, 용어 "아릴"은 페닐 또는 나프틸이다.

상기 발명의 추가적인 구현예에서, 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체적으로 순수하다. 상기 발명의 또 다른 구현예에서, 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체적으로 순수하다.

한 구현예에서, 화합물은 (+) 거울상 이성질체이다. 한 구현예에서, 화합물은 (-) 거울상 이성질체이다.

본 발명은 본원에 기술된 임의의 화합물 각각의 순수 입체이성질체를 제공한다. 그러한 입체이성질체는 거울상이성질체, 부분 입체이성질체, 또는 E 또는 Z 알켄 또는 이민 이성질체를 포함한다. 본 발명은 또한, 라세믹 혼합물, 부분 입체 이성질체 혼합물 또는 E/Z 이성질체 혼합물을 포함한 입체 이성질체 혼합물을 제공한다. 입체 이성질체는 순수형으로 합성되거나 (Nogradi, M.; Stereoselective Synthesis, (1987) VCH Editor Ebel, H. 및 Asymetric Synthesis Vol 3, B5, (1983) Academic Press, Editor Morrison J.) 또는 결정 및 크로마토그래피 기법과 같은 각종 방법으로 분리될 수 있다 (Jaques, J.; Collet, A.; Wilen, S.; Enatiomer, Racemates 및 Resolutions, 1981, John Wiley 및 Sons, 및 Asymmetric Synthesis, Vol 2, 1983, Academic Press, Editor Morrison J).

또한 본 발명 화합물은, 거울상이성질체, 부분 입체이성질체, 이성질체로 존재 가능하고, 2 이상의 화합물은 라세믹 또는 부분 입체이성질체 혼합물을 형성하여 존재 가능하다.

본 발명의 화합물은 바람직하게는 80% 순수, 보다 바람직하게는 90% 순수, 가장 바람직하게는 95% 순수하다. 본 발명에 포함되는 것으로, 본원에 기재된 모든 화합물의 약학적으로 허용가능한 염 및 착물이 있다. 이들 염을 제조하는 산과 염기는, 여기에 기재된 산과 염기를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 산은 하기의 무기산을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 염산, 브롬산, 요오드산, 황산 및 붕산. 산은 하기의 유기산을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 아세트산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 주석산, 말레산, 시트르산, 메탄설폰산, 벤조산, 글리콜산, 락트산 및 만델산. 염기는 다음을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 암모니아, 메틸아민, 에틸아민, 프로필아민, 디메틸아민, 디에틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 에틸렌디아민, 히드록시에틸아민, 모포린, 피페라진 및 구아니딘. 본 발명은 또한 본원에 기재된 모든 화합물의 수화물 및 다중형을 제공한다.

본 발명은, 본 발명 화합물의 전구약물을 발명의 범위내에 포함한다. 일반적으로, 이러한 전구약물은 생체내에서 필요 화합물로 즉시 전환되는 본 발명의 화합물의 작용 유도체일 것이다. 따라서, 본 발명에서 용어 "투여"는, 특별히 개시된 화합물 또는 특별히 기재되지 않은 화합물을 이용한 각종 조건에서의 치료를 포함하지만, 이들은 환자에게 투여후 생체내에서 특정 화합물로 전환된다. 적절한 전구약물 유도체의 선택 및 제조를 위한 통상의 방법은 일례로 Design of Prodrugs (H. Bundgaard 편, Elsevier, 1985)에 기재된다.

본 발명은 또한, 본 발명 화합물의 대사물을 포함한다. 대사물은 본 발명 화합물을 생체 조건으로 도입시 생기는 활성종을 포함한다.

본 발명의 한 실례는 본 발명의 임의의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 혼합하는 단계를 포함하는 약학적 조성물의 제조 방법이다.

고체 담체는, 내부 담체 (즉, 영양소 또는 미세영양소 담체), 향미제, 윤활제, 용해체, 현탁제, 필러, 글라이드제, 압축 보조제, 결합제 또는 정제 붕해제로 또한 작용하는 것 하나 이상의 물질을 포함할 수 있고; 이는 또한 캡슐화 물질일 수 있다. 분말에서, 담체는 미세 분리된 활성성분과 혼합된 미세 분리 고체이다. 정제에서, 활성 성분은 적절 비율로 필요 압축 성질을 가진 담체와 혼합되어 목적 형태 및 크기로 압축된다. 분말 및 정제는 활성성분을 99% 이하 함유한다. 적절한 고체 담체는, 일례로 칼슘 인산, 마그네슘 스테아레이트, 타크, 슈가, 락토스, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 저융점 왁스 및 이온 교환 수지를 포함한다.

액체 담체는 용액, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 엘릭셔, 및 압축 조성물 제조에 사용된다. 활성 성분은, 물, 유기 용매, 이들의 혼합물 또는 약학 허용 오일 또는 지방과 같은 약학 허용 액체 담체에 용해 또는 현탁된다. 액체 담체는, 용해화제, 에멀젼화제, 완충제, 방부제, 감미제, 향미제, 현탁제, 점증제, 착색제, 점도 조절제, 안정화제 또는 삽투압조절제와 같은 다른 적절한 약학 첨가제를 함유 가능하다. 구강 또는 비경구 투여의 적절한 액체 담체의 예는, 물 (바람직하게는 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스 용액인, 셀룰로오스 유도체와 같은 상기의 첨가제를 일부 함유), 알콜 (하나 또는 다수개의 OH를 가지는 알콜, 예로서 글리콜) 및 이들의 유도체와 오일이다 (즉, 분화된 코코넛 오일 및 아라키스 오일). 비경구 투여를 위해, 담체는 또한 에틸올레이트 또는 이소프로필 미리스테이트 같은 오일성 에스터이다. 소독 액체 담체는, 비경구 투여용 소독 액체 조성물 형성에 유용하다. 압축 조성물용 액체 담체는, 할로겐화 탄화수소 또는 기타 약학 허용 분사제이다.

소독 용액 또는 현탁액인 액체 의약 조성물은, 일례로, 근육내, 초내, 경막외, 복강내 또는 피하 주사에 사용 가능하다. 소독 용액은 또한, 정맥내 주사 가능하다. 화합물은 소독수, 식염수 또는 기타 적절한 소독 주사 매질을 사용한 투여시에 용해 또는 현탁되는 소독 고체 조성물로 제조 가능하다. 목적하는 담체는, 필요하면 비활성인 결합제, 현탁제, 윤활제, 풍미제, 감미제, 방부제, 염료 및 코팅등 포함한다. 화합물은, 기타 용질 또는 현탁제 (일례로 용액 등장화에 충분한 식염수 또는 글루코스), 담즙염, 아카시아, 젤라틴, 소르비탄 모노올레이트, 폴리소르베이트 80 (소르비톨 및 에틸렌 옥사이드와 공중합된 무수물의 올레이트 에스테르) 등을 포함한 소독 용액 또는 현탁액의 형태로 구강 투여된다.

화합물은 액체 또는 고체 조성물 형태로 구강 투여된다. 구강 투여에 적절한 조성물은 필 (pill), 캡슐, 과립, 정제, 및 분말과 같은 고체 형태, 용액, 시럽, 엘릭셔 및 현탁액과 같은 액체 형태를 포함한다. 비경구 투여를 위한 유용한 형태는 소독 용액, 에멀젼 및 현탁액을 포함한다.

투여 최적량은, 당업자에 의해 결정되며, 사용하는 특정 화합물, 제제의 강도, 투여 방식, 질병 조건의 진행도에 따라 가변이다. 치료받는 특정 대상에 따른 추가 인자, 즉 대상의 나이, 체중, 성별, 식이, 및 투여 회수를 포함하는 것에 의해, 투여량이 조절된다.

한 구현예에서, 치료적 유효량은 일일 당 약 0.03 내지 약 300 mg 이다.

본 발명에서 '치료 유효량'은, 화합물이 효과적인 질병을 가진 대상에게 투여시, 질병의 감소, 퇴쇠 또는 경감을 일으키는 화합물의 임의량이다. 본 발명에서, '대상'은, 인간 또는 포유류인 척추동물이다.

본 발명은, 대상의 이상 (abnormality) 치료에 유효한 MCH1 수용체 안타고니스트인 본 발명 화합물의 양을 대상에게 투여함을 포함하는, MCH1 수용체의 활성을 감소시킴에 의해 이상을 경감하는, 이상을 가지는 대상의 치료 방법을 제공한다.

별도의 구현에서, 이상은, 스테로이드 또는 뇌하수체 호르몬 이상, 에피네프린 분비 이상, 위장관 이상, 심혈관 이상, 전해질 비율 이상, 저혈압, 당뇨, 호흡기 질환, 천식, 생식기 이상, 면역 이상, 엔도크린 이상, 근골격 이상, 신경분비 이상, 인식 이상, 알쯔하이머씨 병과 같은 기억 이상, 감각 조절 및 전달 이상, 운동 조화 이상, 감각 총합 이상, 운동 총합 이상, 파킨슨씨 병과 같은 도파민성 기능 이상, 교감 신경지배 이상, 우울증 및 불안과 같은 감성 이상, 스트레스 관련 이상, 체액 조화 이상, 마비 이상, 고통, 정신착란과 같은 정신 이상, 모르핀 내성, 아편 중독, 편두통 또는 배뇨 충동과 같은 배뇨 이상의 조절이다.

하기의 우울 및 불안 질병 기재는, 본 발명 화합물의 유용성 예시 목적이다. 하기의 우울 및 불안 질병의 정의는, 문헌에 기재된 것이다 (DSM-IV; American Psychiatric Association, 1994a; Diagnostic 및 Statistical Manual of Mental Disorders, 3판, 개정, DSM-III-R, American Psychiatric Association, 1987). 이들 질병 관련 추가의 정보는, 본 문헌 및, 하기에 인용한 문헌에서 발견되며, 이는 여기에 모두 참고로 편입된다.

우울 장애에는 주요 우울 장애 및 기분 저하 장애가 포함된다 (American Psychiatric Association, 1994a; American Psychiatric Association, 1994b). 주요 우울 장애는, 조증 또는 경조증 삽화없이 하나 이상의 주요 우울 삽화 발생을 특징으로 한다. 주요 우울 삽화는 일반적으로 일상 기능을 방해하는 한 가지의 주된 비교적 지속적인 (2 주 이상 동안 거의 매일) 우울 또는 불쾌 기분으로 정의되며; 이는 하기 8 가지 중 4 가지 이상의 병후를 포함해야 한다: 식욕의 변화, 수면의 변화, 정신운동 요동 또는 지연, 일상 활동에서의 흥미 감소 또는 성적 욕동 감소, 피로 증가, 죄책감 또는 무력감, 사고 둔화 또는 집중력 감퇴, 및 자살 충동 또는 자살 동경 (Medical Economics Company, 2002). 기분저하 장애는 주요 우울 삽화로 명명될 만큼 심하지는 않으나, 심한 기간 없이 주요 우울 장애보다 더 오래 지속 유형의 우울증을 수반한다.

본 발명의 화합물들은 임의의 하기 시험 적용에 의해 우울증으로 진단된 환자에서의 우울증 치료에 유효한 것으로 간주된다: Hamilton Depression Rating Scale (HDRS), Hamilton depressed mood item, Clinical Global Impressions (CGI)-Severity of Illness. 또한, 본 발명의 화합물들은 상기 시험에서 측정되는 특정 인자, 예컨대 우울 무드 항목 (depression mood item) 수면 장애 인자 및 불안 인자를 포함하는 HDRS 서브인자 스코어, 및 Illness rating 의 CGI-정도의 개선 유도에 유효한 것으로 간주된다. 또한, 본 발명의 화합물들은 주요 우울 삽화의 재발 방지에 유효한 것으로 간주된다.

불안 장애에는 공황 장애, 공황장애의 병력 유무에서의 광장공포증, 특정 공포증, 사회 공포증, 강박 장애, 외상 후 스트레스 장애, 급성 스트레스 장애 및 일반적인 불안 장애가 포함된다. 본 발명의 화합물들은 상기 장애로 진단된 환자에서의 상기 임의의 모든 장애 치료에서 유효한 것으로 간주된다.

강박 장애는, 과대 망상으로 인식되는 자아이조성 및/또는 반복적이며, 고의적이고 집중적인 거동 (강박 관념) 인, 재귀적인 지속적 공상, 사고, 충동 또는 상상 (충동성) 을 특징으로 한다 (American Psychiatric Association, 1994a). 강박관념 또는 충동성은 현격한 고통을 초래하며, 시간 소모적이거나, 또는 사회적 또는 직업적 기능을 현저하게 방해한다.

본 발명의 화합물들은, 이에 한정되지 않으나, 하기를 포함할 수 있는 적당한 시험 적용으로 강박 장애로 진단된 환자에서의 강박관념 및 충동성 치료에 유효한 것으로 간주된다: Yale Brown Obsessive Compulsive Scale (YBOCS) (Goodman, 1989) (성인용), National Institute of Mental Health Global OCD Scale (NIMH GOCS), CGI-Severity of Illness scale. 또한, 본 발명의 화합물들은 상기 시험에서 측정되는 특정 인자들, 예컨대 YBOCS 합계 스코어에서의 여러 포인트 감소에서 유효한 것으로 간주된다. 또한, 본 발명의 화합물들은, 강박 장애의 재발 방지에 유효한 것으로 간주된다.

불안 장애는, 재발하는 예상치 않은 공황 발작 및 추가적인 발작에 대한 우려, 결과에 대한 걱정 또는 발작의 연속, 및/또는 발작과 관련된 거동에서의 현저한 변화를 특징으로 한다 (American Psychiatric Association, 1994a). 공황 발작은, 하기의 병후들 중 4 가지 (이상) 이 갑자기 발생하거나 10 분 이내에 정점에 도달하는 극단적인 공포 또는 불쾌의 분리성 기간으로 정의된다: (1) 심계항진, 난타성 심장, 또는 심박 가속; (2) 발한; (3) 진정 또는 진탕; (4) 호흡곤란 또는 비구폐쇄의 감지; (5) 질식의 느낌; (6) 가슴 통증 또는 불쾌감; (7) 구역질 또는 복부 통증; (8) 현기증, 불안정감, 어지러움 또는 기절의 느낌; (9) 비현실감 (비현실의 느낌) 또는 이인증 (자아로부터의 분리); (10) 제어 상실의 공포; (11) 사망의 공포; (12) 감각이상 (무감각 또는 자통 감각); (13) 간헐 안면홍조. 불안 장애는 광장공포증, 또는 대중에 나서는 것에 대한 비상식적인 종종 무력한 공포가 동반되거나 또는 동반되지 않을 수 있다.

본 발명의 화합물들은, 공황 발작 발생 빈도를 근거로 하거나 또는 Illness scale 의 CGI-Severity 를 이용하여 불안 장애로 진단된 환자에서의 불안 장애 치료에 유효한 것으로 간주된다. 또한 본 발명의 화합물들은, 상기 평가에서 측정되는 특정 인자의 개선, 예컨대 공황 발작의 빈도 감소 또는 일소, Illness scale 의 CGI-Severity 의 개선, 또는 CGI-Global Improvement 스코어 1 (매우 많이 개선), 2 (많이 개선) 또는 3 (최소한의 개선) 유도에 유효한 것으로 간주된다. 또한, 본 발명의 화합물들은 불안 장애의 재발 방지에 유효한 것으로 간주된다.

사회 공포증으로 공지되기도 한, 사회적 불안 장애는, 낯선 사람에 대한 노출 또는 타인의 감시에 놓이는 하나 이상의 사회적 또는 직능적 상황에서의 특이한 지속적인 공포를 특징으로 한다 (American Psychiatric Association, 1994a). 공포스런 상황에의 노출은 대부분 늘 불안을 야기하며, 이는 공황 발작의 집중으로 접근할 수 있다. 두려워하는 상황은 피하거나 또는 집중적인 걱정 또는 고통을 갖고 견딘다. 두려워하는 상황(들)에서의 회피, 불안한 예감, 또는 고통은 개인의 일상, 직업 또는 학업 기능, 또는 사회적 활동 또는 관계에 현저히 방해되거나, 또는 공포감을 갖고 있다는 것에 대한 현저한 고통이 있다. 더 낮은 정도의 직능 불안 또는 수줍음은 정신약물학적 치료가 필요하지 않다.

본 발명의 화합물들은, 임의의 하기 시험 시행에 의해 사회 불안 장애로 진단된 환자에서의 사회 불안 장애 치료에 유효한 것으로 간주된다: Liebowitz Social Anxiety Scale (LSAS), Illness scale 의 CGI-Severity, 불안에 대한 Hamilton Rating Scale (HAM-A), 우울에 대한 Hamilton Rating Sacle (HAM-D), DSM-IV 의 축 V Social 및 Occupational Funtioning Assessment Scale, 축 II (ICD-10) World Health Organization Disability Assessment, Schedule 2 (DAS 2), Sheehan Disability Scale, Schneier Disability Profile, World Health Organization Quality of Life-100 (WHOQOL-100), 또는 본 발명에 참고 문헌으로 포함되는 Bobes, 1998 의 문헌에 기재된 것과 같은 기타 시험들. 또한, 본 발명의 화합물들은 상기 시험들에 의해 측정되는 개선 유도, 예컨대 Liebowitz Social Anxiety Scale (LSAS) 에서의 기준선으로부터의 변화, 또는 CGI-Global Improvement 스코어 1 (매우 많이 개선), 2 (많이 개선) 또는 3 (최소한의 개선) 에 유효한 것으로 간주된다. 또한, 본 발명의 화합물들은 사회 불안 장애의 재발 방지에 유효한 것으로 간주된다.

일반 불안 장애는, 6 개월 이상 지속되며 당사자가 제어하기 어려운 것으로 판명된 과도한 불안 및 근심 (걱정스런 예측) 을 특징으로 한다 (American Psychiatric Association, 1994a). 이는 하기의 6 가지 병후 중 3 가지 이상이 수반되어야 한다: 안절부절함 또는 막다른 곳에 있는 느낌, 쉽게 피로함, 집중 곤란 또는 공허감, 과민성, 근육 긴장, 수면 장애. 상기 장애에 대한 진단 기준은 DSM-IV (American Psychiatric Association, 1994a) 에 더 기재되어 있으며, 이는 본원에 참고 문헌으로 포함된다.

본 발명의 화합물들은 DSM-IV 에 기재되어 있는 진단 기준에 따라 상기 장애로 진단된 환자에서의 일반 불안 장애 치료에 유효한 것으로 간주된다. 또한, 본 발명의 화합물들은, 예컨대 하기와 같은 상기 장애의 병후 감소에 유효한 것으로 간주된다: 과도한 불안 및 근심, 쉽게 지침, 걱정 조절 곤란, 쉽게 지침, 또는 막다른 곳에 있는 느낌, 쉽게 피로함, 집중 곤란 또는 공허감, 과민성, 근육 긴장, 또는 수면 장애. 또한, 본 발명의 화합물들은 불안 장애 재발 방지에 유효한 것으로 간주된다.

DSM-III-R/IV (American Psychiatric Association, 1987, American Psychiatric Association, 1994a) 에서와 같이 정의된 외상 후 스트레스 장애 (PTSD) 진단에서는, 실질적인 또는 직면되는 사망 또는 심각한 부상, 또는 자신 또는 타인의 육체적 형상에 대한 위협이 수반되며, 강한 두려움, 무력감 또는 공포감을 수반하는 외상성 사고에 대한 노출을 필요 조건으로 한다. 외상성 사고에 대한 노출 결과 발생하는 병후에는, 강박적 사고, 플래쉬백 또는 꿈의 형태로의 사고 재경험 및 사고에 대한 단서 노출에 대한 강한 심리적 고통 및 심리적 반응; 외상 사고를 암시하는 상황 회피, 사고의 상세한 점 회상 불능, 및/또는 상당한 활동에서의 흥미 저하로서 나타나는 일반적인 응답성의 둔화, 타인으로부터의 소외, 제한된 정동 범위, 또는 단축된 미래감 (sense of foreshortened future); 과다경계, 과다한 놀람반응, 수면 장애, 집중력 감퇴, 및 과민성 또는 분노의 폭발을 포함하는 자율 각성이 포함된다. PTSD 진단에서는, 병후가 1 개월 이상 존재하며, 이들이 임상적으로 의미있는 고통 또는 사회적으로, 직업적으로, 또는 다른 중요한 기능 영역에서 감소를 초래하는 것을 필요 조건으로 한다.

본 발명의 화합물들은 임의의 하기 시험 적용으로 PTSD 로 진단된 환자에서의 PTSD 치료에 유효한 것으로 간주된다: Clinician-Administered PTSD Scale Part 2 (CAPS), 환자 평가 Impact of Event Scale (IES) (Medical Economics Company, 2002, p. 2752). 또한, 본 발명의 화합물들은 CAPS, IES, CGI-Severity of Illness 또는 CGI-Global Improvement 시험에서의 개선 유도에 유효한 것으로 간주된다. 또한, 본 발명의 화합물들은 PTSD 의 재발 방지에 유효한 것으로 간주된다.

바람직한 구현예에서, 주제가 되는 발명은 하기에 나타낸 장애의 치료 또는 관리 방법을 제공한다: 우울 장애, 불안 장애, 섭식/체중 장애, 및 비뇨기 장애. 우울 장애의 예는, 주요 우울 장애 또는 기분 저하 장애이다. 불안 장애의 예는 공황 장애, 공황 장애의 병력이 없는 광장공포증, 특정 공포증, 사회 공포증, 강박 장애, 외상 후 스트레스 장애, 급성 스트레스 장애 또는 일반 불안 장애이다. 섭식/체중 장애의 예는, 비만, 체중 증가, 대식증, 신경성 대식증 또는 신경성 거식증이다. 비뇨기 장애의 예는, 이에 한정되지 않으나, 요실금, 과민성 방광, 절박 요실금, 빈뇨, 야간뇨 및 야뇨증이다. 과민성 방광 및 절박 요실금은 양성 전립선 비대증과 연관되거나 또는 연관되지 않을 수 있다.

본 발명은 대상의 식품 소비를 감소시키는 유효량의 본 발명의 화합물을 대상에 투여하는 것을 포함하는, 대상의 섭식 거동 변경 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 섭식 장애 치료 유효량의 본 발명의 화합물을 대상에 투여하는 것을 포함하는, 대상의 섭식 장애 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 구현예에서, 섭식 장애는 비만, 대식증, 신경성 대식증 또는 신경성 거식증이다.

본 발명은 또한, 환자의 체질량 감소 방법으로서, 환자의 체질량을 감소시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 체중 감소를 필요로 하는 환자의 비만증 관리 방법으로서, 환자의 체중 감소를 유도하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 체중 감소를 경험한 환자의 비만증 관리 방법으로서, 환자의 체중 감소를 유지하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, 환자의 우울증 치료 방법으로서, 환자의 우울증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 환자의 불안증 치료 방법으로서, 환자의 불안증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 환자의 우울증 및 불안증 치료 방법으로서, 환자의 우울증 및 불안증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 환자의 주요 우울 장애 (major depressive disorder) 치료 방법으로서, 환자의 주요 우울 장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 환자의 기분저하 장애 치료 방법으로서, 환자의 기분저하장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 강박 장애를 갖는 환자의 강박사고 및 강박행위 치료 방법으로서, 환자의 강박사고 및 강박행위를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 환자의 공황 장애 (광장공포증이 있거나 없음) 치료 방법으로서, 환자의 공황 장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 환자의 사회 불안 장애 치료 방법으로서, 환자의 사회 불안 장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 환자의 범불안 장애 치료 방법으로서, 환자의 범불안 장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 환자의 외상후 스트레스 장애 치료 방법으로서, 대상의 외상 후, 스트레스 장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명의 화합물은 하나 이상의 하기 측정법으로 비만증임을 진단 받은 환자의, 체중 감소 및 체중 감소 유지를 포함하는, 비만증 치료에 효과적일 것으로 생각된다: 증가된 체질량 지수, 증가된 허리 둘레 (복강내 지방 지표), 듀얼 에너지 X선 흡광법 (DEXA) 및 휴지 (안드로이드) 지방 질량. 또한, 본 발명의 화합물은 상기 테스트에서 측정된 특정 요인의 개선을 유도하는데 효과적일 것으로 생각된다.

본 발명의 화합물은, 1주당 불필요한 삽화의 수, 1일당 불필요한 배뇨의 수 및 1회의 배뇨당 적은 부피의 방출로 입증되는, 절박성 요실금 또는 혼합성 요실금 (절박성 요실금이 우세함) 을 갖는 환자의 비뇨기 장애를 치료하는데 효과적일 것으로 생각된다. 또한, 본 발명의 화합물은 상기 테스트에서 측정된 특정 요인의 개선을 유도하는데 효과적일 것으로 생각된다.

본 발명은 또한, 양극성 I 또는 II 장애, 정신분열정동 장애, 우울감을 갖는 인지 장애, 성격 장애, 불면증, 과다수면, 기면증, 일주기 율동 수면 장애, 악몽증, 야경증 또는 몽유병을 겪고 있는 환자를 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 환자의 절박성 요실금, 긴박증 및/또는 빈뇨의 증상을 갖는 방광 과민증을 치료하는 방법으로서, 환자의 방광 과민증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 방광 과민증을 겪고 있는 환자의 절박성 요실금을 완화시키는 방법으로서, 환자의 절박성 요실금을 완화시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 방광 과민증을 겪고 있는 환자의 긴급성 요의 (urinary urgency) 를 완화시키는 방법으로서, 환자의 긴급성 요의를 완화시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 부가적으로, 본 발명은 방광 과민증을 겪고 있는 환자의 빈뇨를 완화시키는 방법으로서, 환자의 빈뇨를 완화시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 비뇨기 장애를 겪고 있는 환자의 치료 방법으로서, 환자의 비뇨기 장애를 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 비뇨기 장애는 요실금, 방광 과민증, 절박성 요실금, 빈뇨, 긴급성 요의, 야간뇨 또는 유뇨증이다.

본 발명은 환자의 장애 증상 완화 방법으로서, 증상을 완화시키는데 유효한 양으로, 본 발명의 화합물 중 임의의 것인 MCH1 안타고니스트를 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명의 구현예에서, 환자는 척추 동물, 포유류, 인간 또는 개과의 동물이다. 또다른 구현예에서, 화합물은 경구 투여된다. 더욱이 또다른 구현예에서, 상기 화합물은 음식과 배합되어 투여된다.

본 발명은 바람직한 구현예의 실험 상세설명으로부터 보다 잘 이해되어질 것이며, 주제 발명은 하기 제시된 것에 대한 치료 방법을 제공한다: 우울증, 불안증, 섭식/체중 장애, 비뇨기 장애. 섭식/체중 장애의 예는 비만증, 개걸증 또는 신경성 개걸증이다. 비뇨기 장애의 예는 요실금, 방광 과민증, 절박성 요실금, 빈뇨, 긴급성 요의, 야간뇨 또는 유뇨증을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 방광 과민증 및 긴급성 요의는 양성 전립샘 비대와 관련되거나 관련되지 않을 수 있다.

본 발명은 환자의 식이 거동 조절 방법으로서, 환자의 음식 소비를 감소시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, 환자의 섭식 장애를 치료하는 방법으로서, 환자의 음식 소비를 감소시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명의 한 구현예에서, 섭식 장애는 개걸증, 비만증 또는 신경성 개걸증이다. 본 발명의 한 구현예에서, 환자는 척추 동물, 포유류, 인간 또는 개과의 동물이다. 또다른 구현예에서, 상기 화합물은 음식과 배합되어 투여된다.

본 발명은 또한, 환자의 체질량 감소 방법으로서, 환자의 체질량을 감소시키는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, 우울증을 겪고 있는 환자의 치료 방법으로서, 환자의 우울증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 불안증을 겪고 있는 환자의 치료 방법으로서, 환자의 불안증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한, 우울증 및 불안증을 겪고 있는 환자의 치료 방법으로서, 환자의 우울증 및 불안증을 치료하는데 유효한 양으로 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 주요 우울 장애, 기분저하 장애, 양극성 I 또는 II 장애, 정신분열정동 장애, 우울감을 갖는 인지 장애, 성격 장애, 불면증, 과다수면, 기면증, 일주기 율동 수면 장애, 악몽증, 야경증, 몽유병, 강박 장애, 광장공포증이 있거나 없는 공황 장애, 외상후 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 사회 공포증 및 범불안 장애를 겪는 환자를 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 하기 실험 상세설명으로부터 보다 잘 이해되어질 것이다. 하지만, 당업자는 논의의 특정 방법 및 결과가, 후술되는 청구범위의 보다 상세히 기재된 본 발명의 예시일 뿐임을 쉽게 이해할 것이다.

실험부

I. 화학적 화합물의 합성 방법

일반법: 모든 반응은 아르곤 분위기 하에서 수행되었으며, 적절한 용매 중의 또는 순수한 시약을 시린지(syringe) 및 캐뉼라(cannula) 기술을 통해 반응 용기로 이송시켰다. 병렬식 합성 반응 배열은 J-KEM 가열 진탕기 (Saint Louis, MO) 를 사용하여 바이알(vial) (불활성 분위기 없음) 에서 수행되었다. 무수 용매를 Aldrich Chemical Company 로부터 구매하여, 그대로 사용하였다.

특별한 언급이 없는 한, ¹H 스펙트럼은, 내부 표준으로서 테트라메틸실란을 사용하여 400 MHz (Bruker, 모델: Avance) 에서 기록되었다. s = 단일항 (singlet); d = 이중항 (doublet); t = 삼중항 (triplet); q = 사중항 (quartet); p = 오중항 (pentet), 육중항 (sext); 칠중항 (sept); br = 브로드(broad); m = 다중항 (multiplet).

원소 분석은 Robertson Microlit Laboratories, Inc. 에 의해 수행되었다. 특별히 언급되지 않는 한, 질량 스펙트럼은 전자스프레이 (electrospray; ESI-MS)를 사용하여 VG Patform II 기구 상에서 수득되었으며, MH⁺ 가 보고되었다. 박막 크로마토그래피 (TLC) 는 실리카겔 60 F₂₅₄ 으로 미리코팅된 유리판 (0.25 mm, EM Separations Tech.) 상에서 수행되었다. 제조용 박막 크로마토그래피는 실리카겔 GF 로 미리코팅된 유리 시트 (2 mm, Analtech) 상에서 수행되었다. 플래시 컬럼 크로마토그래피는 Merck 실리카겔 60 (230 내지 400 메쉬) 상에서 수행되었다. 융점 (mp) 은 Mel-Temp 장치의 열린 모세관에서 수행되었으며, 보정되지 않았다.

하기 반응식은 본 발명의 화합물을 합성하는 방법의 실례이다.

(a) LDA/ PhNTf₂ / THF/ -78 ℃, 그 후 0 ℃ 에서 하룻밤. (b)아미노페닐붕소산/ Pd(PPh)₄/ LiCl/ Na₂CO₃/ DME-H₂O/ 3시간 환류. (c) 10% Pd/C / H₂/ EtOH/ 실온에서 24 내지 48 시간. (d) 산 염화물 (acid chloride)/ 트리에틸아민/ THF/ 0 ℃, 그 후 실온에서 2 내지 3 시간, 또는 카르복실산/ EDC/ DMAP/ CH₂Cl₂/ DMF/ 실온에서 12 시간. (e) 1,4-디옥산 중 4M HCl/ 실온에서 1 시간 또는 TFA/ CH₂Cl₂/ 실온에서 10 분.

(a) 비스(피나콜라토)디보론/ KOAc/ PdCl₂dppf/ dppf/ 80 ℃ 에서 하룻밤. (b) K₂CO₃/ PdCl₂dppf/ DMF/ 80 ℃ 에서 하룻밤. (c) 10 % Pd/C / H₂/ EtOH/ 실온에서 24 내지 72 시간. (d) 1,4-디옥산 중 4M HCl/ 실온에서 1 시간 또는 TFA/ CH₂Cl₂/ 실온에서 10 분. (e) 카르복실산/ EDC/ DMAP/ CH₂Cl₂/ DMF/ 실온에서 12 시간. (f) H₂SO₄/ HNO₃, 0 ℃, 10 분. (g) Fe/ NH₄Cl/ THF/ H₂O/ EtOH/ 95 ℃, 1.5 시간. (h) Cbz-Cl/ NaHCO₃/ CH₃CN/ 실온에서 12 시간.

(b) K₂CO₃/ PdCl₂dppf/ DMF/ 85 ℃ 에서 24 시간. (c) 10 % Pd/C / H₂ (200psi)/ EtOAc/ MeOH/ 실온에서 24 내지 72 시간. (d) 1,4-디옥산 중 4M HCl/ 실온에서 1 시간 또는 TFA/ CH₂Cl₂/ 실온에서 0.2 시간. (e) 카르복실산/ EDC/ DMAP/ CH₂Cl₂/ DMF/ 실온에서 12 시간.

피페리딘 합성의 일반적인 방법 (반응식 1)

TERT -부틸 4-{[(트리플루오로메틸)술포닐]옥시}-3,6-디히드로-1(2 H )-피리딘카르복실레이트: n-부틸 리튬 (17.6 mL, 44.2 mmol, 헥산 중 2.5 M) 을 0 ℃에서 무수 THF (40.0 mL) 중 디이소프로필아민 용액 (96.2 mL, 44.2 mmol) 에 첨가하고, 결과적으로 생기는 혼합물을 20 분간 교반하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃ 로 냉각하고 THF (40.0 mL) 중의 tert-부틸 4-옥소-1-피페리딘카르복실레이트 (Aldrich Chemical Company, 7.97 g, 40.0 mmol)를 상기 반응 혼합물에 적가하고, 이를 그 후 30 분간 교반하였다. THF (40.0 mL) 중의 Tf₂NPh (42.0 mmol, 15.0 g)를 반응 혼합물에 적가하고, 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 하룻밤 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공상태에서 농축하고, 헥산:EtOAc (9:1) 에 재용해시키고, 알루미나 플러그에 통과시킨 후, 상기 알루미나 플러그를 헥산:EtOAc (9:1) 로 세척하였다. 결합된 추출물을 진공상태에서 농축하여 일부 출발물질 Tf₂NPh 로 오염된 목적 물질 (16.5 g)을 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 5. 77 (s, 1H), 4.05 (dm, 2H, J = 3.0 Hz), 3.63 (t, 2H, J = 5.7 Hz), 2.45 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).

T ERT -부틸 4-(3-아미노페닐)-3,6-디히드로-1( 2H )-피리딘 카르복실레이트: 디메톡시에탄 (5.00 mL) 중의 2.0 M Na₂CO₃ 수용액 (4.20 mL), tert-부틸4-{[(트리플루오로메틸)술포닐]옥시}-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘 카르복실레이트 (0.500 g, 1.51 mmol), 3-아미노페닐붕소산 헤미술페이트 (0.393 g, 2.11 mmol), 염화리튬 (0.191 g, 4.50 mmol) 및 테트라키스-트리페닐포스핀 팔라듐 (0.080 g, 0.075 mmol) 의 탈가스 혼합물을 아르곤 하에 3 시간동안 환류 온도에서 가열하였다. 냉각시킨 반응 혼합물의 유기층을 분리시키고, 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 50mL) 로 세척하였다. 결합된 유기 용액을 건조시키고 진공상태에서 농축하였다. 조생성물을 크로마토그래피 (실리카, 헥산:EtOAc:디클로로메탄 6:1:1 및 1 % 이소프로필아민) 하여 목적하는 산물 (0.330 g, 81%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.12 (t, 1H, J = 7.60 Hz), 6.78 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.69 (t, 1H, J =.2. 0 Hz), 6.59 (dd, 1H, J = 2.2, 8.0 Hz), 6.01 (br, 1H), 4.10- 4.01 (d, 2H, J = 2.4 Hz), 3.61 (t, 2H, J= 5. 6 Hz), 2.52-2.46 (m, 2H), 1.49 (s, 9H); ESMS m/e : 275.2 (M + H)⁺.

C₁₆H₂₄N₂O₂ 에 대한 분석 계산값: C, 70.04 ; H, 8.08 ; N, 10.21.

결과값: C, 69.78 ; H, 7.80 ; N, 9.92.

TERT -부틸 4-[3-(아미노) 페닐]-1-피페리딘카르복실레이트: 에탄올 (100 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (3.10 g, 11.3 mmol) 및 10% Pd/C (1.00 g) 혼합물을 기구 (balloon) 방법을 사용하여 2 일동안 실온에서 수소화하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 (Celite) 로 여과하고 에탄올로 세척하였다. 결합된 에탄올 추출물을 진공상태에서 농축하고 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피 (디클로로메탄:메탄올:이소프로필아민 95:5:1) 하여 목적하는 생성물 (2.63 g, 84%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.10 (t, 1H, J = 7.6Hz), 6.62 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.60-6.59 (m, 2H), 4.27-4.18 (m, 2H), 3.62-3.58 (m, 2H), 2.80-2.72 (m, 2H), 2.62-2.59 (m, 1H), 1.89-1.52 (m, 4H), 1.49 (s, 9H); ESMS m/e: 277.2 (M + H)⁺.

T ERT -부틸 4-{3-[(6-브로모헥사노일)아미노]페닐}-1-피페리딘 카르복실레이트. tert-부틸-4-[3-(아미노)페닐]-1-피페리딘카르복실레이트 (2.00 mmol, 0.553 g), 6-브로모헥사노일 클로라이드 (0.427 g, 2.00 mmol, 1.0 당량), 트리에틸아민 (0.404 g, 4.00 mmol) 및 THF (8.00 mL) 로 채워진 25-mL RB-플라스크를 실온에서 4 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 클로로포름 (50 mL) 으로 희석하고, 물 (100 mL), 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 10:1) 로 정제하여 목적 산물 (0.921 g, 95.8 %)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.47 (s, 1H), 7.28-7.22 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 6.5 (d, 1H, J = 7.0 Hz), 3.45-3.39 (m, 2H), 2.85-2.70 (m, 2H), 2.68-2.58 (m, 1H), 2.37 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 1.96-1.71 (m, 7H), 1.68-1.50 (m, 5H), 1.48 (s, 9H); ESMS m/e: 355.4, 476.6.

TERT -부틸 4-(3-{[6-(3,4-디플루오로아닐리노)헥사노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트. tert-부틸-4-{3-[(6-브로모헥사노일)아미노]페닐}-1-피페리딘 카르복실레이트 (40.9 mg, 0.100 mmol), 3,4-디플루오로아닐린 (0.100 mmol, 12.9 mg), K₂CO₃ (0.100 mmol, 13.8 mg), NaI (22.5 mg, 0.150 mmol) 및 DMF (1.00 mL) 로 채워진 5-mL RB 플라스크를 120 ℃에서 12 시간동안 가열하였다. 혼합물을 물 (10mL) 로 희석하였다. 수성층을 클로로포름 (3 x 10 mL) 으로 추출하고, 결합된 추출물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 크로마토그래피 (헥산/EtOAc 10:1) 로 정제하여 담황색 오일로서의 목적 산물 (7.14 mg, 14.3 %)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.47 (s, 1H), 7.31-7.18 (m, 1H), 6.98-6.90 (m, 3H), 6.50-6.43 (m, 1H), 6.40-6.30 (m, 2H), 6.26-6.20 (m, 1H), 4.28-4.18 (m, 2H), 3.06 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.97-2.87 (m, 1H), 2.84-2.72 (m, 2H), 2.68-2.58 (m, 2H), 2.38 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 1.85-1.73 (m, 4H), 1.7-1.54 (m, 4H), 1.48 (s, 9H); ESMS m/e: 502.2 (M + H) ⁺.

실시예 6: 6-(3,4-디플루오로아닐리노)-N-[3-(4-피페리디닐)페닐]헥산아미드. 디클로로메탄 (0.500 mL) 중의 tert-부틸 4-(3-{[6-(3,4-디플루오로아닐리노)헥사노일]아미노}페닐)-1-피페리딘 카르복실레이트 (11.2 mg, 0.0224 mmol) 용액에, 0 ℃에서 트리플루오로아세트산 (25.5 mg, 2.24 mmol)을 서서히 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 i-PrOH/CHCl₃ (1:3, 10 mL) 에 용해시키고, 10% KOH 로 pH 11 로 염기성화시킨 후, H₂O 및 그 후 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공상태에서 농축하여 목적 산물 (8.98 mg, 99 %)을 수득하였다: ¹H NMR (400. MHz, CDCl₃) δ 7.39-7.08 (m, 5H), 7.06-6.94 (m, 2H), 6.91-6.81 (m, 1H), 6.77-6.67 (m, 1H), 3.54-3.42 (m, 2H), 3.25-3.04 (m, 3H), 2.91-2.80 (m, 1H), 2.45-2.32 (m, 2H), 2.11-1.99 (m, 2H), 1.98-1.83 (m, 2H), 1.80-1.62 (m, 4H), 1.55-1.40 (m, 2H), 1.34-1.23 (m, 1H); ESMS m/e: 402.2 (M + H) ⁺.

반응식 I 에 따라 하기 화합물들을 제조하였다.

실시예 1

5-(2-메톡시페닐)-N-[3-(4-피페리디닐)페닐]펜탄아미드: tert-부틸 4-(3-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트를 반응식 I 에 적용하여 상기 산물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.52-6.68 (m, 8H), 3.74 (s, 3H), 3.61-3.35 (m, 2H), 3.14-2.90 (m, 2H), 2.88-2.56 (m, 3H), 2.52-2.27 (m, 2H), 2.10-1.51 (m, 8H); ESIMS m/e: 367.2 [M + H]⁺.

실시예 2

5-페닐-N-[3-(4-피페리디닐)페닐]펜탄아미드: tert-부틸 4-{3-[(5-페닐펜타노일)아미노]페닐}-1-피페리딘 카르복실레이트를 반응식 I 에 적용하여 상기 산물을 수득하였다. ¹H NMR (400MHz, CDCl₃) δ 7.51-6.83 (m, 9H), 3.66-3.40 (m, 2H), 3.08-2.80 (m, 2H), 2.78-2.45 (m, 3H), 2.43-2.28 (m, 2H), 2.08-1.60 (m, 8H); ESIMS m/e: 337.2 [M + H]⁺.

실시예 3

6-옥소-6-페닐-N-[3-(4-피페리디닐)페닐]헥산아미드: tert-부틸 4-{3-[(6-옥소-6-페닐헥사노일)아미노]페닐}-1-피페리딘카르복실레이트를 반응식 I 에 적용하여 상기 산물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.98-7.83 (m, 2H), 7.60-7.31 (m, 4H), 7.28-7.12 (m, 2H), 6.97-6.87 (m, 1H), 3.48-3.31 (m, 2H), 3.10-2.68 (m, 5H), 2.40-2.26 (m, 2H), 2.05-1.63 (m, 8H); ESIMS m/e: 365.2 [M + H]⁺.

실시예 4

2-페녹시-N-[3-(4-피페리디닐)페닐]니코틴아미드: 용매 (CH₂Cl₂:THF, 1:3) 3 mL 중의 tert-부틸 4-[3-(아미노)페닐]-l-피페리딘카르복실레이트 (0.15mmol), 2-페녹시니코티노일 클로라이드 (0.23 mmol) 및 트리에틸아민 (0.30 mmol) 혼합물을 실온에서 12 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 예비 TLC (실리카, EtOAc: 헥산 1:1) 로 정제하여 목적 산물인 tert-부틸 4-(3-{[(2-페녹시-3-피리디닐)카르보닐]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트를 수득하였다. 1.0 mL 의 CH₂Cl₂ 에 용해시킨 상기 정제 산물에 트리플루오로아세트산 (1.0 mL) 을 가하고, 실온에서 1 분간 교반하였다. 반응 혼합물을 진공상태에서 농축하여 상기 목적 산물의 TFA 염을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.85 (s, 1H), 8.76-8.64 (br, 1H), 8.30-8.14 (br, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.49 (t, 2H, J = 7.8 Hz), 7.42-7.29 (m, 3H), 7.24 (t, 3H, J = 5.2 Hz), 7.03 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 3.59 (bd, 2H, J = 11.5), 3.16-3.02 (m, 2H), 2.9-2.79 (m, 1H), 2.14-2.01 (m, 4H); ESIMS m/e: 374.1 [M + H] ⁺.

실시예 5

5-(4-메톡시페닐)-N-[3-(4-피페리디닐)페닐]펜탄아미드: 반응식 1 에 기술된 절차에 따라 제조함.

메틸 (2Z)-2-아세틸-3-(4-플루오로페닐)-2-프로페노에이트. 무수 벤젠 (250 mL) 중의 4-플루오로벤즈알데히드 (25.5 g, 0.220 mol), 메틸 3-옥소부타노에이트 (21.80 g, 0.220 mol) 및 피페리딘 (1.0 mL) 의 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고, 이어서 딘-스타르크 (Dean-Stark) 장치에서 밤새 환류하였다. 반응 혼합물을 그 후 실온으로 냉각시키고, 용매를 진공상태에서 제거하여 메틸 (2Z)-2-아세틸-3-(4-플루오로페닐)-2-프로페노에이트를 검정색 고체 (48.6 g, 99 %) 로서 수득하고, 이를 정제하지 않고 다음 단계에 사용하였다.

메틸 6-(4-플루오로페닐)-2-메톡시-4-메틸-1,6-디히드로-5-피리미딘카르복실레이트. 메틸 (2Z)-2-아세틸-3-(4-플루오로페닐)-2-프로페노에이트 (0.220 mole, 48.8 g), O-메틸 이소우레아 황산수소 (53.40 g, 0.310 mol, 1.5 당량), NaHCO₃ (61.74 g, 0.74 mol, 3.5 당량) 및 에탄올 (1.2 L) 의 혼합물을 24 시간동안 환류하고, 실온으로 냉각 후, 여과하였다. 고체를 에탄올 (200 mL) 로 세척한 후, 결합된 여과액을 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc/Et₃N 50:50:0.1) 로 정제하여 토토머 (tautomer) 혼합물 (4:1, 33.0 g, 53.9 %)을 수득하였다. ¹H NMR (CDCl₃) δ 7.32-7.24 (m, 2H), 7.04-6.95 (m, 2H), 5.81 (s, 1H), 5.38 (d, 1H, J = 2.9 Hz), 4.00 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 2.34 (s,3H).

5-메틸 1-(4-니트로페닐) 6-(4-플루오로페닐)-2-메톡시-4-메틸-1,5(6H)-피리미딘디카르복실레이트. 무수 CH₂Cl₂ (20.0 mL) 중의 메틸 6-(4-플루오로페닐)-2-메톡시-4-메틸-1,6-디히드로-5-피리미딘카르복실레이트 (1.76 g, 6.34 mmol) 및 4-디메틸아미노피리딘 (12.7 mmol, 1.55 g) 용액에 CH₂Cl₂ (20.0 mL) 중의 4-니트로페닐클로로포르메이트 (4.47 g, 22.2 mmol) 용액을 23 ℃에서 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH₂Cl₂ (50 mL) 로 희석하고, 물, 염수로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (헥산/에틸 아세테이트 4:1) 로 정제하였다. 황색 시럽 (syrup) 으로서의 생성물을 수득하였는데, 이를 헥산과 혼합(trituration)시 백색 분말 (2.40 g, 84.3%) 이 되었다. 조생성물을 추가적으로 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다.

메틸 1-{[(4-TERT-부톡시-4-옥소부틸)아미노]카르보닐}-6-(4-플루오로페닐)-2-메톡시-4-메틸-1,6-디히드로-5-피리미딘카르복실레이트. CH₃OH/CH₂Cl₂ (0.1/2.0 mL) 중의 5-메틸-1-(4-니트로페닐) 6-(4-플루오로페닐)-2-메톡시-4-메틸-1,5(6H)-피리미딘디카르복실레이트 (88.7 mg, 0.200 mmol) 및 K₂CO₃ (41.5 mg, 0.300 mmol) 의 용액에 tert-부틸 4-아미노부타노에이트 (31.8 mg, 0.200 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 1 시간동안 교반한 후, 혼합물을 포화 Na₂CO₃ 및 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물질을 플래시 크로마토그래피 (50% EtOAc/헥산 중의 5%-10% 2 M NH₃/MeOH) 로 정제하여 상기 산물 (92.2 g, 99 %)을 수득하였다.

융점 135-138 ℃; ¹H NMR (CD₃OD) δ 7.29-7.23 (m, 2H), 6.97-6.88 (m, 2H), 6.65 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.38-3.30 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.28 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.89-1.78 (m, 2H), 1.43 (s, 9H); ESMS m/e: 464.1 (M + H)⁺.

4-{[(6-(4-플루오로페닐)-5-(메톡시카르보닐)-4-메틸-2-옥소-3,6-디히드로-1(2H)-피리미디닐)카르보닐]아미노}부탄산. 0 ℃ 의 디클로로메탄 (2.00 mL) 중의 메틸 1-{[(4-tert-부톡시-4-옥소부틸)아미노]카르보닐}-6-(4-플루오로페닐)-2-메톡시-4-메틸-1,6-디히드로-5-피리미딘카르복실레이트 (77.3 mg, 0.166 mmol) 에 트리플루오로아세트산 (189 mg, 1.66 mmol)을 서서히 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 이소-PrOH/CHCl₃ (1:3, 10 mL) 에 용해시키고 10% KOH 용액으로 pH 11 로 염기성화시킨 후, H₂O 및 그 후 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공상태에서 농축하여 목적 산물 (58.1 mg, 88.9 %) 을 수득하였다: ESMS m/e: 394.1 (M + H)⁺.

메틸 3-{[(4-{3-[1-(TERT-부톡시카르보닐)-4-피페리디닐]아닐리노}-4-옥소부틸)아미노]카르보닐}-4-(4-플루오로페닐)-6-메틸-2-옥소-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘 카르복실레이트. 10-mL RB-플라스크에 실온에서 DMF:DCM (0.2 : 2.0 mL) 중의 4-{[(6-(4-플루오로페닐)-5-(메톡시카르보닐)-4-메틸-2-옥소-3,6-디히드로-1(2H)-피리미디닐)카르보닐]아미노}부탄산 (77.0 mg, 0.189 mmol), tert-부틸-4-[3-(아미노)페닐]-1-피페리딘카르복실레이트 (52.2 mg, 0.189 mmol), 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (0.567 mmol, 87.8 mg), 4-디메틸아미노피리딘 (11.5 mg, 0.0945 mmol)를 채웠다. 반응 혼합물을 12 시간동안 교반하고, 물 (10.0 mL) 을 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 CHCl₃ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 크로마토그래피 (실리카, 헥산:EtOAc 9:1) 하여 목적 산물 (40.9 mg, 33.2 %)을 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.03 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.36-7.28 (m, 3H), 7.27-7.22 (m, 1H), 6.97-6.89 (m, 3H), 6.72 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.47-3.37 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.37-2.29 (m, 2H), 1.98-1.91 (m,2H), 1.86-1.75 (m, 2H), 1.72-1.54 (m, 7H), 1.48(s, 9H); ESMS m/e : 652.2 (M + H)⁺.

실시예 7: 메틸 4-(4-플루오로페닐)-6-메틸-2-옥소-3-[({4-옥소-4-[3-(4-피페리디닐)아닐리노]부틸} 아미노)카르보닐]-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘카르복실레이트. 0 ℃ 의 디클로로메탄 (2.00 mL) 중의 메틸 3-{[(4-{3-[1-(tert-부톡시카르보닐)-4-피페리디닐]아닐리노}-4-옥소부틸) 아미노]카르보닐}-4-(4-플루오로페닐)-6-메틸-2-옥소-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘카르복실레이트 (40.9 mg, 0.0628 mmol) 의 용액에 트리플루오로아세트산 (71.6 mg, 0.628 mmol)을 서서히 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 이소-PrOH/CHCl₃ (1:3, 10 mL) 에 용해시키고 10% KOH 용액으로 pH 11 로 염기성화시킨 후, H₂O 및 그 후 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공상태에서 농축하여 목적 산물 (34.6 mg, 99 %)을 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.00 (m, 3H), 7.67 (s, 1H), 7.35-7.27 (m, 4H), 7.04-6.98 (m, 3H), 6.65 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.5-3.48 (m, 2H), 3.20-3.11 (m, 3H), 2.42 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 2.36 (s, 3H), 2.13-2.06 (m, 2H), 1.97-1.88 (m, 4H); ESMS m/e: 552.3 (M +H)⁺.

TERT -부틸-4-{3-[(4-{[(5-메톡실카르보닐-6-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-옥소-3,6-디히드로-1 (2H)-피리미디닐)카르보닐]아미노}부타노일)아미노]페닐}-1-피페리딘카르복실레이트. 50-mL RB-플라스크에, 실온에서 DMF:DCM (0.8:8.0 mL) 중의 4-{[(5-아세틸-6-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-옥소-3,6-디히드로-1(2H)-피리미디닐)카르보닐]아미노}부탄산 (313 mg, 0.854 mmol), tert-부틸-4-[3-(아미노)페닐]-l-피페리딘카르복실레이트 (235 mg, 0.857 mmol), 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (7.71 mmol, 265 mg), 4-디메틸아미노피리딘 (10.4 mg, 0.0854 mmol)을 채웠다. 반응 혼합물을 12 시간동안 교반하고, 물 (20.0 mL) 을 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 CHCl₃ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 크로마토그래피 (실리카, 헥산:EtOAc 9:1) 하여 목적 산물 (378 mg, 67.8 %) 을 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.03 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.36-7.28 (m, 3H), 7.27-7.22 (m, 1H), 6.97-6.89 (m, 3H), 6.72 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.47-3.37 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.37-2.29 (m, 2H), 1.98-1.91 (m, 2H), 1.86-1.75 (m, 2H), 1.72-1.54 (m, 7H), 1.48 (s, 9H); ESMS m/e: 554.3 (M-100).

실시예 8: 5-메톡실카르보닐-6-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-옥소-N-{4-옥소-4-[3-(4-피페리디닐) 아닐리노]부틸}-3,6-디히드로-1(2H)-피리미딘카르복스아미드. 0 ℃ 의 디클로로메탄 (5.00 mL) 중의 tert-부틸 4-{3-[(4-{[(5-메톡실카르보닐-6-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-옥소-3,6-디히드로-1(2H)-피리미디닐)카르보닐]아미노}부타노일)아미노]페닐}-1-피페리딘카르복실레이트 (378 mg, 0.579 mmol) 의 용액에 트리플루오로아세트산 (659 mg, 5.79 mmol)을 서서히 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 이소-PrOH/CHCl₃ (1:3, 10 mL) 에 용해시키고 10% KOH 용액으로 pH 11 로 염기성화시킨 후, H₂O 및 그 후 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (디클로로메탄:메탄올 5:1) 로 정제하여 목적 산물 (93.8 mg, 29.3 %)을 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ7.46-7.43 (m, 3H), 7.35-7.29 (m, 2H), 7.12-7.06 (m, 3H), 6.63-6.60 (m, 1H), 6.56-6.52 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.72 (dt, 6H, J = 2.3, 12.3 Hz), 2.66 (tt, 2H, J = 3.6, 11.9 Hz), 2.55 (tt, 1H, J = 3.8, 11.9 Hz), 1.88-1.82 (m, 1H), 1.75-1.63 (m, 6H); ESMS m/e: 554.3 (M + H)⁺.

피페리딘 합성의 일반적인 방법 (반응식 2)

TERT -부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트: 비스(피나콜라토) 디보론 (422 mg, 1.66 mmol), KOAc (444 mg, 4.53 mmol), PdCl₂dppf (37.0 mg, 3.00 몰%) 및 dppf (25.0mg; 3.00 몰%) 로 채워진 50-mL RB-플라스크에, 실온에서 1,4-디옥산 (10.0 mL) 중의 tert-부틸 4-{[(트리플루오로메틸)술포닐]옥시}-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (500 mg, 1.51 mmol) 를 아르곤 하에서 첨가하였다. 혼합물을 밤새 80 ℃ 에서 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 상기 셀라이트를 EtOAc (3 x 20 mL) 로 세척하였다. 결합한 여과액을 H₂O 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc:헥산 1:9) 로 정제하여 tert-부틸 4-(4,4,5,5- 테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (355 mg, 76 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.60-6.34 (br,1H), 4.06-3.86 (br, 2H), 3.55-3.34 (br, 2H), 2.35-2.09 (br, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.26 (s, 12H); ESMS m/e: 310.4 (M + H)⁺.

5-브로모-2,4-디플루오로니트로벤젠. 0 ℃ 의 진한 H₂SO₄ (38.5 mL) 중의 1-브로모-2,4-디플루오로벤젠 (53.0 mmol, 6.00 mL) 현탁액에 내부 온도를 20 ℃ 이하로 유지하면서 진한 HN0₃ (34.0 mL) 을 적가하였다. 결과적으로 생기는 혼합물을 0 ℃ 에서 10 분간 교반하고, 그 후, 격렬히 교반하면서 얼음/물에 부었다. 혼합물을 Et₂O (3 x 100 mL) 로 추출하였다. 결합한 유기 추출물을 NaHC0₃ 수용액 (3 x 100 mL) 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc: 헥산 1:9) 로 정제하여 5-브로모-2,4-디플루오로니트로벤젠을 황색 오일 (12.2 g, 97 %) 로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.45 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 7.16 (dd, 1H, J = 11.0, 8.6 Hz); ESMS m/e: 240, 238, 223, 221, 112

5-브로모-2,4-디플루오로아닐린. 5-브로모-2,4-디플루오로니트로벤젠 (5.04 g, 21.3 mmol), 포화 NH₄Cl (25.0 mL), 철 분말 (5.00 g, 89.5 mmol), 에탄올 (100 mL), THF (50.0 mL) 및 물 (25.0 mL) 로 채워진 250-mL RB-플라스크를 95 ℃ 에서 1.5 시간동안 환류하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 포화 NaHCO₃ (100 mL) 를 첨가하고, 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 상기 셀라이트를 EtOAc (3 x 50 mL) 로 세척하였다. 결합한 여과액을 H₂O 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc:헥산 1:9) 로 정제하여 5-브로모-2,4-디플루오로아닐린 (2.61 g, 59.1 %) 을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.97 (dd, 1H, J = 7.2, 6.7 Hz), 6.85 (t, 1H,J = 8.2 Hz), 3.63 (br, 2H).

벤질 5-브로모-2,4-디플루오로페닐카르바메이트. 250-mL RB-플라스크에 5-브로모-2,4-디플루오로아닐린 (5.00 g, 24.2 mmol), 클로로벤질포르메이트 (4.10 mol, 29.0 mmol), NaHCO₃ (6.10 g, 72.6 mmol) 및 아세토니트릴 (100 mL) 을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25 ℃ 에서 12 시간동안 교반하고, 그 후, 큰 (coarse) 소결 (sintered) 유리, 소결 깔때기 (fritted funnel) 로 여과한 후, EtOAc (3 x 20mL) 로 세척하고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc:헥산 1:9) 로 정제하여 벤질 5-브로모-2,4-디플루오로페닐카르바메이트 (5.05 g,61.0 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.38 (s, 1H), 7.49-7.31 (m, 5H), 6.94-6.89 (m, 1H), 6.81-6.77 (m, 1H), 5.22 (s, 2H); ESMS m/e: 340.1 (M - H⁺).

TERT -부틸 4-(5-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}-2,4-디플루오로페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트. tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (4.58 g, 14.8 mmol), K₂CO₃ (6.14 g, 44.4 mmol) 및 PdCl₂dppf (1.48 mmol, 1.21 g) 을 담은 250-mL RB-플라스크에, 아르곤 하에서 실온의 DMF (150 mL) 중의 벤질 5-브로모-2,4-디플루오로페닐카르바메이트 (5.05, 14.8 mmol) 용액을 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 하에서 밤새 80 ℃ 로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 상기 셀라이트를 EtOAc (3 x 100 mL) 로 세척하였다. 여과액을 H₂0 (3 x 200 mL), 염수 (100 mL) 로 세척하고, MgS0₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물질을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산 1:9) 로 정제하여 tert-부틸 4-(5-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}-2,4-디플루오로페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (1.60 g, 24.5 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.08 (s, 1H), 7.45-7.35 (m, 5H), 6.85-6.70 (m, 1H), 5.95-5.85 (m, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.6-3.5 (m, 2H), 2.5-2.4 (m, 2H), 1.50 (s, 9H); ESMS m/e: 443.3 (M - H⁺).

TERT -부틸 4-(5-아미노-2,4-디플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트. 에틸 아세테이트 (25.0mL) 및 메탄올 (25.0mL) 중의 tert-부틸 4-(5-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}-2,4-디플루오로페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (1.60 g, 3.60 mmol) 및 5% Pd/C (320 mg, 0.100 mmol) 혼합물을 수소폭탄 (hydrogen bomb) (200 psi) 을 사용하여 72 시간동안 실온에서 수소화하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, EtOAc/MeOH (1:1, 3 x 50 mL) 로 세척하였다. 여과액을 진공상태에서 농축하여 tert-부틸 4-(5-아미노-2,4-디플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (1.39 g, 100 %) 를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.73 (t, 1H, J = 10.6 Hz), 6.60-6.54 (dd, 1H, J = 7.6, 6.57 Hz), 4.20 (br, 2H), 3.55(s, 2H), 2.96-2.72 (m, 3H), 1.79-1.71 (m, 2H), 1.58-1.52 (m, 2H), 1.47 (s, 9H); ESMS m/e: 257.3 (M - 56).

에틸 (4E)-5-(2-메톡시페닐)-4-펜테노에이트. 200-mL RB-플라스크에 2-요오도아니솔 (5.00 g, 21.4 mmol), 에틸 4-펜테노에이트 (3.30 g, 25.6 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.740g, 0.600 mmol), 트리에틸아민 (6.00 mL, 42.7 mmol) 및 CH₃CN (45.0 mL) 및 THF (15.0 mL) 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 환류하고, 그 후 실온으로 냉각하였다. 진공상태에서 용매를 제거한 후, 결과적으로 생기는 어두운 갈색의 잔류물을 5% HCl (수성) 에 용해시키고, CH₂Cl₂ 로 세 번 추출하였다. 결합된 추출물을 포화 NaHC0₃ 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 진공상태에서 농축하였다. 어두운 갈색의 오일을 크로마토그래피 (실리카 겔, EtOAc/헥산 1:10) 로 정제하여 생성물을 담황색 오일 (3.40 g, 68 %) 로서 수득하였다.

에틸 5-(2-메톡시페닐)펜타노에이트. EtOAc 및 MeOH (40.0/10.0 mL) 중의 에틸 (4E)-5-(2-메톡시페닐)-4-펜테노에이트 (3.40 g, 14.5 mmol) 용액에, Pd/C (탄소 상의 팔라듐 10%, 0.700 g) 을 화염을 피하기 위하여 소량씩 첨가하였다. 그 후, 반응 혼합물을 300 psi 의 수소 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 압력을 방출시킨 후, 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 상기 셀라이트를 EtOAc (3 x 50 mL) 로 세척하였다. 여과액을 진공상태에서 농축하여 조생성물을 담황색 오일 (3.40 g, 100 %) 로서 수득하고, 이를 추가적인 정제없이 사용하였다.

5-(2-메톡시페닐)펜탄산. 250-mL RB-플라스크에 에틸 5-(2-메톡시페닐) 펜타노에이트 (3.40 g, 14.5 mmol), NaOH (1.74 g, 42.8 mmol), THF (25.0 mL) 및 물 (25.0 mL) 을 채웠다. 반응 혼합물을 2 시간동안 환류하고, 실온으로 냉각시켰다. 상기 반응 혼합물을 진공상태에서 농축하고, 결과적으로 생긴 수용액을 6 M HCl 을 사용하여 pH 가 5 미만이 되도록 산성화하였다. 상기 산성 혼합물을 클로로포름/이소프로필 알콜 (3:1, 3 x 50 mL) 로 추출하고, 결합된 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 후, 진공상태에서 농축하여 백색 고체로서의 생성물 (2.68 g, 90 %) 을 수득하고, 이를 추가적인 정제없이 사용하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.23-7.03 (m, 2H), 6.95-6.76 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.63 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.38 (t, 2H,J = 7.2 Hz), 1.77-1.53 (m, 4H).

TERT -부틸 4-(2,4-디플루오로-5-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트. 15-mL RB-플라스크를, 실온의 DMF:DCM (0.2:5.0 mL) 중의 5-(2-메톡시페닐)펜탄산 (69.0 mg, 0.810 mmol), tert-부틸 4-(5-아미노-2,4-디플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (229 mg, 0.740 mmol), 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (2.22 mmol, 426 mg), 4-디메틸아미노피리딘 (9 mg, 0.07 mmol) 으로 채웠다. 반응 혼합물을 12 시간동안 교반하고, 상기 반응 혼합물에 물 (10.0 mL) 을 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 CHCl₃ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 진공상태에서 농축하여 tert-부틸 4-(2, 4-디플루오로-5-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (310 mg, 83.2 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.36-8.13 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.26-7.06 (m, 1H), 7.06-6.92 (m, 1H), 6.92-6.75 (m, 3H), 4.41-4.02 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.90-2.70 (m, 2H), 2.70-2.63 (m, 2H), 2.63-2.51 (m, 1H), 2.49-2.32 (m, 2H), 1.87-1.72 (m, . 4H), 1.72-1.63 (m, 2H), 1.63-1.52 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).

실시예 11: N-[2,4-디플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]-5-(2-메톡시페닐)펜탄아미드. 0 ℃ 의 디클로로메탄 (5.00 mL) 중의 tert-부틸 4-(2,4-디플루오로-5-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (310 mg, 0.620 mmol) 의 용액에 트리플루오로아세트산 (707 mg, 6.20 mmol) 을 서서히 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 i-PrOH/CHCl₃ (1:3, 10 mL) 에 용해시키고, 10% KOH 용액을 사용하여 pH 11 로 염기성화시킨 후, H₂0 및 이어서 염수로 세척하였다. 유기층을 분리시키고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 진공상태에서 농축하여 목적 산물 (108 mg, 43.3 %) 을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.59 (t,1H, J = 8.2 Hz), 7.10-6.96 (m, 2H), 6.90-6.68 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.09 (d, 2H, J = 12.4 Hz), 2.89 (tt, 1H, J = 11.8 Hz), 2.69 (dt, 2H, J = 2.6, 12.4 Hz), 2.54 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.33 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.76-1.48 (m, 8H); ESMS m/e: 403.3 (M + H)⁺.

피페리딘 합성의 일반적인 방법 (반응식 3)

TERT -부틸 4-(4-플루오로-3-니트로페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트. tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (5.58 g, 16.5 mmol), K₂CO₃ (5.60 g, 40.5 mmol) 및 PdCl₂dppf (1.48 mmol, 1.21 g) 을 담고 있는 150-mL RB-플라스크에 DMF (50.0 mL) 중의 4-브로모-1-플루오로-2-니트로벤젠 (3.30 g, 15.0 mmol) 을 실온에서 아르곤 하에서 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 하에서 12 시간동안 80 ℃ 로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 상기 셀라이트를 EtOAc (3 x 100 mL) 로 세척하였다. 여과액을 H₂O (3 x 200 mL), 염수 (100 mL) 로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조생성물질을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산 1:9) 로 정제하여 tert-부틸 4-(4-플루오로-3-니트로페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (3.13 g, 65.1 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.06-7.89 (m, 1H), 7.66-7.49 (m, 1H), 7.30-7.10 (m, 1H), 6.19-5.95 (br, 1H), 4.10-3.95 (m, 2H), 3.58 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.49-2.34 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).

TERT -부틸-4-(3-아미노-4-플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트. 에틸 아세테이트 (40.0 mL) 및 메탄올 (10.0 mL) 중의 tert-부틸 4-(4-플루오로-3-니트로페닐)-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트 (2.35 g, 8.85 mmol) 및 10% Pd/C (400 mg) 의 혼합물을 수소폭탄 (200 psi) 을 사용하여 실온에서 72 시간동안 수소화시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 상기 셀라이트를 EtOAc/MeOH (1:1, 3 x 50 mL) 로 세척하였다. 여과액을 진공상태에서 농축하여 tert-부틸-4-(3-아미노-4-플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (2.10 g, 98. 0 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.96-6.76 (m, 1H), 6.67-6.54 (m, 1H), 6.54-6.40 (m, 1H), 4.38-4.09 (br, 2H), 4.09-3.58 (br, 2H), 2.87-2.62 (m, 2H), 2.60-2.39 (m, 1H), 1.85-1.65 (m, 2H), 1.64-1.40 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).

TERT -부틸 4-(4-플루오로-3-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트: 25-mL RB-플라스크를, 실온에서 DMF:DCM (0.2:2.0 mL) 중의 5-(2-메톡시페닐)펜탄산 (53.0 mg, 0.250 mmol), tert-부틸-4-(3-아미노-4-플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (59.0 mg, 0.200 mmol), 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (0.400 mmol, 62.0 mg), 4-디메틸아미노피리딘 (10 mg) 으로 채웠다. 반응 혼합물을 12 시간동안 교반하고, 상기 반응 혼합물에 물 (10.0 mL) 을 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 CHCl₃ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조 잔류물을 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 6:1) 로 정제하여 tert-부틸 4-(4-플루오로-3-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (48.4 mg, 50.0 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.36-8.13 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.26-7.06 (m, 2H), 7.06-6.92 (m, 1H), 6.92-6.75 (m, 3H), 4.41-4.02 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.90-2.70 (m, 2H), 2.70-2.63 (m, 2H), 2.63-2.51 (m, 1H), 2.49-2.32 (m, 2H), 1.87-1.72 (m, 4H), 1.72-1.63 (m, 2H), 1.63-1.52 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).

실시예 10: N-[2-플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]-5-(2-메톡시페닐)펜탄아미드.

CH₂Cl₂ (2.0 mL) 중의 tert-부틸 4-(4-플루오로-3-{[5-(2-메톡시페닐)펜타노일]아미노}페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (48.4 mg, 0.100 mmol) 용액에 트리플루오로아세트산 (114 mg, 1.0 mmol) 을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 30 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 CHCl₃/i-PrOH (3:1, 10 mL) 에 용해시키고, 5% KOH 용액을 사용하여 pH 11 로 염기성화시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성층을 CHCl₃/i-PrOH (3:1, 3 x 10 mL) 으로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하여 N-[2-플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]-5-(2-메톡시페닐)펜탄아미드 (38.0 mg, 95 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CD₃0D) δ 8.30-8.12 (m, 1H), 7.64-7.41 (m, 1H), 7.24-7.07 (m, 2H), 7.06-6.92 (m, 1H), 6.92-6.74 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.25-3.06 (m, 2H), 2.80-2.49 (m, 5H), 2.48-2.24 (m, 3H), 1.89-1.71 (m, 4H), 1.71-1.46 (m, 4H); ESMS m/e: 385.2 (M + H)⁺.

3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]프로판산. 50-mL RB-플라스크에 3-(4-히드로옥시페닐)프로피온산 (1.66 g, 10.0 mmol), 3,4-디플루오로요오도벤젠 (2.40 g, 10.0 mmol), 브롬화 구리(I) (0.100 g), 탄산칼륨 (2.76 g, 20.0 mmol), 및 용매로서 n-메틸-2-피롤리돈 (20 mL) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5 분간 교반하고, 그 후, 140 ℃ 로 가열하였다(오일 용기(bath)). 140 ℃ 에서 12 시간동안 교반한 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAC (100 mL) 로 희석시켰다. 희석된 혼합물을 시트르산 (수성, 30 mL), 물 (3 x 50 mL), 염수로 세척하고, MgS0₄ 상에서 건조시켰다. 진공상태에서 용매를 제거하여 조생성물을 수득하고 이를 크로마토그래피 (0.901 g, 32 %) 로 정제하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ11.44-11.06 (br, 1H), 7.24-7.14 (m, 2H), 7.14-7.00 (m, 1H), 7.00-6.86 (m, 2H), 6.86-6.75 (m, 1H), 6.75-6.61 (m, 1H), 2.94 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 2.68 (t, 2H, J = 7.6 Hz); ESMS m/e: 277.2 (M - H)⁺.

TERT -부틸 4-[3-({3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]프로파노일}아미노)-4-플루오로페닐]-1-피페리딘카르복실레이트. 25-mL RB-플라스크를, 실온에서 DMF:DCM (0.4:4.0 mL) 중의 3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]프로판산 (180 mg, 0.650 mmol), tert-부틸-4-(3-아미노-4-플루오로페닐)-1-피페리딘 카르복실레이트 (180 mg, 0.610 mmol), 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (1.22 mmol, 190 mg), 4-디메틸아미노피리딘 (20 mg) 으로 채웠다. 반응 혼합물을 12 시간동안 교반하고, 물 (10.0 mL) 을 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 CHCl₃ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조 잔류물을 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 6:1) 하여 tert-부틸 4-[3-({3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]프로파노일}아미노)-4-플루오로페닐]-1-피페리딘카르복실레이트 (85.0 mg, 25.0 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.32-8.15 (m, 1H), 7.47-6.45 (m, 10H), 4.41-4.07 (br, 2H), 3.17-2.96 (m, 2H), 2.90-2.67 (m, 4H), 2.67-2.56 (m, 1H), 1.91-1.69 (m, 2H), 1.68-1.48 (m, 2H), 1.47 (s, 9H); ESMS m/e 553.3(M - H⁺).

실시예 12: 3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]-N-[2-플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]프로판아미드. CH₂Cl₂ (2.0 mL) 중의 tert-부틸-4-[3-({3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]프로파노일}아미노)-4-플루오로페닐]-1-피페리딘카르복실레이트 (85.0 mg, 0.150 mmol) 용액에 트리플루오로아세트산 (170 mg, 1.50 mmol) 을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 10 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 CHCl₃/i-PrOH (3:1, 10 mL) 에 용해시키고, 5% KOH 용액을 사용하여 pH 11 로 염기성화시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성층을 CHCl₃/i-PrOH (3:1, 3 x 10 mL) 으로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하여 3-[4-(3,4-디플루오로페녹시)페닐]-N-[2-플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]프로판아미드 (65.0 mg, 92 %)를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CD₃0D) δ 8.27-8.12 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.33-7.17 (m, 2H), 7.17-7.06 (m, 1H), 7.06-6.97 (m, 1H), 6.97-6.87 (m, 3H), 6.86-6.74 (m, 1H), 6.74-6.62 (m, 1H), 6.15-5.63 (br, 1H), 3.55-3.31 (m, 2H), 3.15-2.97 (m, 2H), 2.97-2.79 (m, 2H), 2.79-2.59 (m, 3H), 2.05-1.79 (m, 4H); ESMS m/e: 455.2 (M + H)⁺.

TERT -부틸 4-{4-플루오로-3-[(6-옥소-6-페닐헥사노일)아미노]페닐}-1-피페리딘카르복실레이트. 25-mL RB-플라스크를, 실온에서 DMF:DCM (0.2:2.0 mL) 중의 6-옥소-6-페닐헥산산 (51.0 mg, 0.250 mmol), tert-부틸-4-(3-아미노-4-플루오로페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (59.0 mg, 0.200 mmol), 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (0.400 mmol, 62.0 mg), 4-디메틸아미노피리딘 (10 mg) 으로 채웠다. 반응 혼합물을 12 시간동안 교반하고, 물 (10.0 mL) 을 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 CHCl₃ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하였다. 조 잔류물을 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 6:1) 하여 tert-부틸 4-{4-플루오로-3-[(6-옥소-6-페닐헥사노일)아미노]페닐}-1-피페리딘카르복실레이트 (49.0 mg, 51.0 %) 를 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.30-8.14 (m, 1H), 8.04-7.89 (m, 2H), 7.62-7.50 (m, 1H), 7.50-7.37 (m, 3H), 7.09-6.93 (m, 1H), 6.93-6.76 (m, 1H), 4.38-4.01 (br, 2H), 3.13-2.95 (m, 2H), 2.89-2.69 (m, 2H), 2.65-2.54 (m, 1H), 2.54-2.35 (m, 2H), 1.95-1.74 (m, 6H), 1.69-1.48 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).

실시예 9: N-[2-플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]-6-옥소-6-페닐헥산아미드. CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 tert-부틸 4-{4-플루오로-3-[(6-옥소-6-페닐헥사노일)아미노] 페닐}-1-피페리딘 카르복실레이트 (49.0 mg, 0.101 mmol) 용액에 트리플루오로아세트산 (114 mg, 1.01 mmol) 을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 30 분간 교반하고, 진공상태에서 농축하였다. 잔류물을 CHCl₃/i-PrOH (3:1, 10 mL) 에 용해시키고, 5% KOH 용액을 사용하여 pH 11 로 염기성화시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성층을 CHCl₃/i-PrOH (3:1, 3 x 10 mL) 으로 추출하였다. 결합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공상태에서 농축하여 N-[2-플루오로-5-(4-피페리디닐)페닐]-6-옥소-6-페닐헥산아미드 (35.5 mg, 86.0 %) 를 수득하였다. HCl 염: ¹H NMR (400 MHz,CDCl₃) δ 8.14-8.01 (br, 1H), 8.01-7.89 (m, 2H), 7.65-7.52 (m, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.43-7.26 (br, 1H), 7.13-7.00 (m, 1H), 7.00-6.88 (br, 1H), 3.68-3.43 (m, 2H), 3.19-2.92 (br, 4H), 2.89-2.67 (m, 1H), 2.61-2.36 (br, 2H), 2.26-2.06 (m, 2H), 2.06-1.93 (m, 2H), 1.93-1.71 (br, 4H); ESMS m/e: 383.2 (M + H)⁺.

II. 일반적인 구조들의 합성 방법

섹션 I 에 기술된 실시예들은 단지 MCH1 안타고니스트를 합성하는데 사용되는 방법의 실례들이다. 나아가, 상기 실시예들을 합성하는데 사용되는 합성 방법에 기초한 일반화된 방법들을 이용하여 유도체들을 수득할 수 있다.

추가적인 유도체를 형성하기 위하여, 아미노, 아미도, 카르복실산 및 히드록실기 등의 치환체에 대한 보호화 및 탈보호화 전략을 상기 일반화된 합성 방법들에 삽입하는 것이 필요할 수 있다. 상기한 기들의 보호화 및 탈보호화 방법은 당업계에 주지되어 있으며, 예를 들어 Protection Groups in Organic Synthesis, 제 2 판 (Green, T.W. 및 Wuts, P.G.M. (1991), John Wiley & Sons, 뉴욕) 에서 찾을 수 있다.

III. 경구용 조성물

본 발명의 화합물의 경구 조성물의 특정 구현예로서, 본원에 기술된 화합물 중 하나 100 ㎎ 을 총 580 내지 590 ㎎ 가 되도록 미세하게 분할된 충분한 양의 유당과 함께 제제화하여 O 크기의 경질 겔 캡슐에 채운다.

IV. 클론화 쥐 MCH1 수용체에서 화합물의 약리학적 평가

하기 기재하는 프로토콜을 사용하여 클론화 쥐 MCH1 수용체에서 본 발명의 화합물의 약리학적 성질을 평가하였다.

숙주 세포

이종구조적으로 표현된 단백질을 연구하기 위해서 광범위한 호스트 세포를 사용할 수 있다. 이들 세포는 Cos-7, CHO, LM(tk-), HEK293, Peak rapid 293 등과 같은 선별된 포유동물 라인; Sf9, Sf2l 등과 같은 곤충 세포 라인; 크세노푸스 난모세포와 같은 양서류 세포 라인; 및 기타를 포함하나, 이로 제한되지 않는다.

COS 7 세포를 37 ℃, 5 % CO₂에서 보충물 (10 % 소의 송아지 혈청, 4 mM 글루타민, 100 단위/ml 페니실린/100 Fg/ml 스트렙토마이신을 갖는 Dulbecco's 개질 독수리 배지) 을 갖는 DMEM 내의 150 mm 플레이트상에서 성장시킨다. COS-7 셀의 저장 플레이트를 트립신화시키고 3-4 일마다 1:6 으로 분열시킨다.

사람의 태아 신장 293 세포를 37 ℃, 5 % CO₂에서 보충물 (10 % 송아지 혈청, 4 mM 글루타민, 100 단위/ml 페니실린/100 Fg/ml 스트렙토마이신) 을 갖는 DMEM 내의 150 mm 플레이트상에서 성장시킨다. 293 셀의 저장 플레이트를 트립신화시키고 3-4 일마다 1:6 으로 분열시킨다.

사람의 태아 신장 Peak rapid 293 (Peakr293) 세포를 37 ℃, 5 % CO₂에서 보충물 (10 % 태아 소 혈청, 10 % L-글루타민, 50 Fg/ml 젠타마이신) 을 갖는 DMEM 내의 150 mm 플레이트상에서 성장시킨다. Peak rapid 293 셀의 저장 플레이트를 트립신화시키고 3-4 일마다 1:12 로 분열시킨다.

생쥐 섬유아세포 LM(tk-) 세포를 37 ℃, 5 % CO₂에서 보충물 (10 % 소의 송아지 혈청, 4 mM 글루타민, 100 단위/ml 페니실린/100 Fg/ml 스트렙토마이신을 갖는 Dulbecco's 개질 독수리 배지) 을 갖는 DMEM 내의 150 mm 플레이트상에서 성장시킨다. LM(tk-) 셀의 저장 플레이트를 트립신화시키고 3-4 일마다 1:10 으로 분열시킨다.

차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포는, 37℃, 5% CO₂ 에서, 보충물(10% 송아지 혈청, 4 mM L-글루타민 및 100 유닛/ml 페니실린/ 100 Fg/ml 스트렙토마이신)을 갖는 HAM's F-12 배지에서 150 mm 플레이트 상에서 배양되었다. CHO 세포의 스톡 플레이트를 트립신화하고, 매 3-4 일 마다 1:8 로 분할하였다.

마우스 배아 섬유아세포 NIH-3T3 는, 37℃, 5% CO₂ 에서, 보충물(10% 송아지 혈청, 4 mM 글루타민, 100 유닛/ml 페니실린/100 Fg/ml 스트렙토마이신)을 갖는 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 에서 150 mm 플레이트 플레이트에서 배양된다. NIH-3T3 세포의 저장 플레이트를 트립신화하고, 3-4 일 마다 1:8 로 분할하였다.

Sf9 및 Sf21 세포는, CO₂없이 27 ℃에서, 10% 의 우태아 혈정으로 보충된 TMN-FH 배지에서 150 mm 조직 배양 디쉬 상에서 단층으로 배양된다. 또한, 하이-파이브 곤충 세포가, CO₂없이 27 ℃ 에서, L-글루타민으로 보충된 Ex Cell 400™ 배지에서 150 mm 조직 배양 디쉬 상에서 배양된다.

몇 가지 경우에, 부착성의 단층으로 성정하는 세포주가 현탁 배양으로 전환될 수 있어서, 세포 수율을 증가시키고, 통상의 수용체 선별 도식용 균일 분석 물질의 큰 배취를 제공할 수 있다.

일시적 발현

연구되는 단백질을 코딩하는 DNA 는, 하기를 포함하나 이에 제한되지 않는 여러 방법에 의해서, 각종 포유류, 곤충, 양서류 및 기타 세포주 내에서 일시적으로 발현이 될 수 있다; 칼슘 포스페이트 매개, DEAE-덱스트란 매개, 리포좀 매개, 바이러스 매개, 전기 천공 매개 및 미세주입 전달. 상기 방법의 각각은 DNA, 세포주 및 연속해서 이용되는 분석 형태에 의존하여, 분류된 실험 변수의 최적화를 요구할 수 있다.

Peak rapid 293 세포에 적용되는 칼슘 포스페이트 방법에 대한 통상적인 절차를 하기에 기술한다:

부착성 세포를 트랜스펙션 약 24 시간 전에 채취하고, 150 mm 조직 배양 디쉬 내에 3.5 ×10⁶ 세포/디쉬의 밀도로 재 평플레이트 배양하고, 37 ℃, 5% CO₂ 에서 하룻 밤에 걸쳐 배양하도록 한다. CaCl₂및 DNA(250 mM CaCl₂ 내 DNA 15 Fg)의 혼합물 250 Fl 을 5 ml 플라스틱 튜브에 첨가하고, 500 Fl 의 2X HBS (280 mM NaC1, 10 mM KCl, 1.5 mM Na₂HPO₄, 12 mM 덱스트로스, 50 mM HEPES)를 부드럽게 혼합하면서, 서서히 점가한다. 상기 혼합물을 실온에서 20 분 동안 배양하여, DNA 침전물이 형성되도록 한다. 이어서, 상기 DNA 침전 혼합물을 각 플레이트 내의 배양 배지에 첨가하고, 37 ℃, 5% CO₂에서 5 시간 동안 배양한다. 배양 후에, 5 ml 의 배양 배지(DMEM, 10% FBS, 10% L-글루트 및 50 ㎍/ml 겐타마이신)을 각 플레이트에 첨가한다. 이어서 상기 세포를 37 ℃, 5% CO₂에서 24 내지 48 시간 동안 배양한다.

Cos-7 세포에 적용되는 DEAE-덱스트란 방법을 위한 통상적인 절차는 하기와 같이 기술된다; 트랜스펙션용으로 사용되는 세포를 트랜스펙션 24 시간 전에 분할하여, 트랜스펙션시에 70-80% 로 합류하는 플라스크를 제공한다. 간략하게는, 8 Fg 의 필요한 임의의 부가 DNA(예를 들면, G_α단백질 발현 벡터, 리포터 구축물, 항생제 저항성 마커, 목(mock) 벡터 등)를 더한 8 Fg 의 수용체 DNA 를 9 ml 의 완전 DMEM 을 더한 DEAE-덱스트란 혼합물(PBS 내 10 mg/ml)에 부가한다. T225 플라스크(아래로 합류하는) 내에 평 플레이트 배양된 Cos-7 세포를 PBS 로 한 번 세척하고, DNA 혼합물을 각 플라스크에 첨가한다. 상기 세포를 37 ℃, 5% CO₂에서 30 분 동안 배양한다. 배양 후에, 80 FM 클로로퀸을 가진 완전 DMEM 36 ml 를 각 플라스크에 부가하고, 추가로 3 시간 동안 배양하도록 한다. 이어서 배지를 빨아들인 후, 정확히 2 분 동안, 10 % 의 DMSO 를 함유하는 24 ml 의 완전 배지를 빨아들인다. 이어서, 상기 세포를 PBS 로 두 번 세척하고, 각 플라스크에 30 ml 의 완전 DMEM 을 첨가한다. 이어서, 상기 세포를 하룻밤 동안 배양하도록 한다. 다음날 상기 세포를 트립신화에 의해서 채취하고, 수행되는 분석 형태에 따라 필요한 것으로서 재파종된다.

CHO 세포에 적용되는 리포좀-매개 트랜스펙션을 위한 일반적인 절차는 하기와 같이 기술된다; 트랜스펙션용으로 사용되는 세포를 트랜스펙션 24 시간 전에 분할하여, 트랜스펙션 시에 70-80% 로 합류하는 플라스크를 제공한다. 필요한 임의의 부가 DNA(예를 들면, G_α단백질 발현 벡터, 리포터 구축물, 항생제 저항성 마커, 목 벡터 등)를 더한 수용체 DNA 의 각종 비율를 포함할 수 있는 총 10 Fg 의 DNA 가 각각 75 cm²플라스크의 세포를 트랜스펙션하는데 사용된다. 리포좀 매개 트랜스펙션을 제조자의 추천(LipofectAMINE, GibcoBRL, Bethesda, MD)에 따라 수행한다. 트랜스펙션된 세포는 트랜스펙션 후 24 시간이 지나 채취되고, 이용된 분석이 요구하는 바에 따라 사용되거나, 재파종 된다.

Cos-7 세포에 적용되는 전기 천공법을 위한 일반적인 절차는 하기와 같이 기술된다; 트랜스펙션용으로 사용되는 세포를 트랜스펙션 24 시간 전에 분할하여, 트랜스펙션 시에 하부로 합류하는 플라스크를 제공한다. 상기 세포를 그것의 배양 배지 내에서 재현탁된 트립신화에 의해 채취하고 수를 세었다. 4×10⁶세포를 30.0 Fl 의 DMEM 내에 현탁하고, 전기 천공 큐벳에 위치시킨다. 8 Fg 의 필요한 임의의 부가 DNA(예를 들면, G_α단백질 발현 벡터, 리포터 구축물, 항생제 저항성 마커, 목 벡터 등)를 더한 8 Fg 의 수용체 DNA 를 세포 현탁액에 부가하고, 상기 큐벳을 BioRad Gene Pulser 내에 위치시키고, 전기 펄스를 가한다(Gene Pulser 장치: 0.25 kV 볼트, 950 FF 용량). 펄스 후에, 800 Fl 의 완전 DMEM 을 각 큐벳에 부가하고, 현탁액을 무균 튜브에 전달한다. 완전 배지를 각 관에 부가하여, 최종 세포 농도를 1×10⁵ 세포/100 Fl 가 되도록 한다. 이어서, 수행되는 분석 형태에 따라서 필요한 대로 상기 세포를 평플레이트 배양한다.

이종 단백질의 바이러스 매개 발현을 위한 일반적인 절차는 곤충 Sf9 세포의 배큘로바이러스 감염을 위해 하기와 같이 기술된다. 본원에 개시된 수용체를 코딩 하는 DNA의 코딩 영역은 존재 제한 부위 또는 폴리펩티드의 코딩 영역에 시퀀스 5' 및 3'로 조작되는 부위에 pBlueBacⅢ 로 서브 클로닝 될 수 있다. 배큘로바이러스를 생성하기 위하여, 0.5 Fg 의 바이러스 DNA (BaculoGold) 및 3 Fg 의 폴리펩티드를 코딩하는 DNA 구축물을, Pharmingen ("Baculovirus Expression Vector System: Procedures and Methods Manual" 중)에 의해 약술된 바와 같이, 칼슘 포스페이트 동시 침전 방법에 의해 2×10⁶의 Spodoptera frugiperda 곤충 Sf9 세포로 동시 트랜스펙트할 수 있다. 이어서, 상기 세포를 27 ℃ 에서 5 일 동안 배양한다. 동시 트랜스펙션 플레이트의 상층액을 원심 분리에 의해 채취할 수 있고, 재조합 바이러스 플라크를 정제할 수 있다. 세포를 바이러스로 감염시키는 절차, 바이러스 스톡을 제조하는 절차 및 바이러스 스톡의 역가를 측정하는 절차는 Pharmingen 의 매뉴얼에 기술된 바와 같다. 일반적으로, 유사한 이론이 레트로바이러스, 심리키 포레스트 바이러스 및 아데노-, 헤르페스- 및 백시니아 바이러스 등의 이중 가닥 DNA 바이러스를 통한 포유류 세포 발현에 적용될 것이다.

안정된 발현

이종 DNA 는 세포가 영속적으로 외부 단백질을 발현하도록 하면서, 안정적으로 숙주 세포에 혼입될 수 있다. DNA 의 세포로의 전달 방법은 일시적 발현을 위해 상기 기술된 바와 유사하나, 목적된 숙주 세포에 약물 내성을 부여하기 위하여 종속 유전자의 동시 트랜스펙션을 요구한다. 발생하는 약물 내성은 이종 DNA 를 취하는 세포를 선택하고, 유지하기 위하여 이용될 수 있다. 저항성 유전자의 분류에 네오마이신, 카나마이신 및 하이그로마이신이 포함될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 수용체 연구의 목적으로, 이종 수용체 단백질의 안정된 발현이 CHO, HEK293, LM(tk-) 등을 포함하는 포유 동물 세포 내에서 수행될 수 있으나, 반드시 이에 제한되는 것은 아니다.

세포막 제조

결합 분석을 위하여, 트랜스펙션된 세포 펠렛이 빙냉된 버퍼(20 mM tirs. HCl, 5 mM EDTA, pH 7.4) 내에 현탁되고, 7 초 동안 초음파 분해에 의해 균질화 된다. 세포 용해물이 4 ℃ 에 5 분 동안 200×g 에서 원심 분리된다. 이어서, 상층액이 4 ℃ 에서 20 분 동안 40,000×g 에서 원심 분리된다. 생성된 펠렛을 균질화 버퍼 내에서 한 번 세척하고, 결합 버퍼내에서 현탁한다(방사 리간드 결합을 위한 방법 참조). 단백질 농도를 소 혈정 알부민을 표준으로 사용하는 브래드포드(1976) 방법에 의해 결정한다. 결합 분석은 통상적으로 즉시 수행되나, 미래의 사용을 위해 배취 내에서 막을 제조하여 액체 질소에 동결 보관시킬 수 있다.

방사 리간드 결합 분석법

래트 MCH1 수용체에 대한 방사 리간드 결합 분석이 플라스미드 pcDNA3.l-rMCH1-f (ATCC 특허 기탁 번호 제 PTA-3505 호)를 사용하여 수행되었다. 플라스미드 pcDNA3.1-rMCH1-f 는 래트 MCH1 수용체의 발현을 가능케 하기 위하여 래트 MCH1 수용체를 코딩하는 DNA 에 작동 가능하게 연결된 포유 동물 세포 내 DNA 발현을 위해 필요한 조절 요소를 함유한다. 플라스미드 pcDNA3.1-rMCH1-f 는 특허 절차를 위한 목적의 미생물의 기탁의 국제적 인정을 위한 부타페스트 조약하에, 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(ATCC)(12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, U.S.A.)으로 2001 년 7 월 5 일에 기탁되었고, ATCC 특허 기탁 번호 제 PTA-3505 호를 부여받았다.

또한 결합 분석이, 이후에 기술된 바와 같이, 플라스미드 pEXJ.HR-TL231 (ATCC 등록 번호 제 203197 호)을 사용하여 수행될 수 있다. 플라스미드 pEXJ.HR-TL231 은 인간의 MCH1 수용체를 코딩하고, 특허 절차의 목적을 위한 미생물의 기탁의 국제적 인정을 위한 부타페스트 조약하에, 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(ATCC)(12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, U.S.A.)으로 1998 년 9월 17 일에 기탁되었고, ATCC 등록 번호 제 203197 호를 부여받았다.

칼슘 포스페이트 방법을 사용하여, 인간 배아 간 피크 레피드 293 세포(Peakr293 세포)를 MCH1 수용체를 코딩하는 DNA 로 일시적으로 트랜스펙션 시켰고, 세포 막을 상기와 같이 제조하였다. 래트 MCH1 수용체로 트랜스펙션된 Peakr293 세포로부터 막과의 결합 실험을, 50 mM 트리스 pH 7.4, 10 mM MgC1₂, 0.16 mM PMSF, 1 mM 1,10 페난트롤린 및 0.2% BSA 로 이루어진 배양 버퍼를 사용하여, 0.08 nM [³H] 화합물 A(화합물 A 의 합성은 하기에 상세히 기술된다)로 수행하였다. 결합은 25 ℃ 에서 90 분 동안 수행되었다. 세척 버퍼로서 50 nM tris pH 7.4 를 사용하여, 5% PEI 에 미리 담근 GF/C 유리 섬유 필터 상의 빠른 진공 여과에 의해 배양이 종료되었다. 모든 실험에서, 비특이적 결합은 10 pM 화합물 A 를 사용하여 정의된다.

기능 분석

세포는 기능 분석을 사용하여 내재하는 포유 동물 수용체의 존재를 스크리닝할 수 있다. 내재하는 수용제가 존재하지 않거나, 저 수준으로 존재하는 세포를, 기능 분석에 사용하기 위하여, 외인성의 수용체로 트랜스펙션할 수 있다.

광범위한 분석이 수용체의 활성을 스크리닝하기 위하여 사용될 수 있다. 상기는 예를 들면, 포스파티딜 이노시톨, cAMP, Ca⁺⁺ 및 K⁺의 전통적인 측정 내지는; 상기와 동일한 이차 전달자이나, 더욱 높은 재료 처리량을 가지고, 더욱 일반적이고 더욱 민감하도록 변형되거나 개조된 것을 측정하는 시스템; 예를 들면, 물질 대사 변화, 분화 및 세포 분열/증식 등의 수용체 활성으로부터 기인하는 더욱 일반적인 세포 사건을 보고하는 세포 기재 플랫폼; 예를 들면, 심장 혈관, 진통제, 식욕촉진제, 불안 완화제 및 진정제 효과를 포함하는 수용체 활성화와 함께 관여되는 것으로 생각되는 복합적인 생리학적 또는 행동 변화를 모니터하는 고급 유기 분석법이다.

방사 리간드 결합 분석 결과

전술한 화합물은 클로닝된 래트 MCH1 을 사용하여 분석되었다. 상기 화합물의 결합 친화성은 표 I 에 제시된다.

V. 화합물 A 의 합성

화합물 A 의 합성이 하기에 기술된다. 화합물 A 는 전술한 방사 리간드 결합 분석에 사용되었던 식별용 방사선 동위 화합물이다.

N- [3-(1,2,3,6-테트라히드로-4-피리디닐)페닐]아세트아미드:

하룻 밤 동안 환류 온도에서, 디메톡시에탄 (40 mL) 내 Na₂CO₃포화 수용액 (25 mL), t-부틸 4-{[(트리플루오로메틸)술포닐]옥시}-1,2,3,6-테트라히드로-1-피리딘-카르복실레이트 (20 mmol), 3-아세트아미도페닐보론산 (30 mmol) 및 테트라키스-트리페닐포스핀 팔라듐 (0) (1.15 g)의 반응이 t-부틸 4-[3-(아세틸아미노)페닐]-3,6-디히드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트를 제공하였다. 디옥산 내의 HC1 사용하여 BOC 기를 탈보호화 한 후, 염기화(pH 11-12)에 의해 목적된 생성물을 제공하였다.

TERT-부틸 N-(3-브로모프로필)카르바메이트: 디클로로메탄 내에서 염기 존재하에 3-브로모프로필아민 브롬산 및 BOC₂O 로부터 제조되었다.

N-{3-[1-(3-아미노프로필)-1,2,3,6-테트라히드로-4-피리디닐]페닐}아세트아미드: 반응식 A 에 기술된 촉매 Bu₄NI 및 염기와 환류하는 디옥산 내에서, t-부틸N-(3-브로모프로필)카르바메이트 및 N-[3-(1,2,3,6-테트라히드로-4-피리디닐)페닐]아세트아미드의 반응은 t-부틸 3-(4-[3-(아세틸아미노)페닐]-3,6-디히드로-l(2H)-피리디닐)프로필카르바메이트를 제공하였다. 디옥산 내의 HC1 사용하여 BOC 기를 탈보호화 한 후, 염기화(pH 11-12)에 의해 목적된 생성물을 제공하였다.

메틸 (4S)-3-({[3-(4-[3-(아세틸아미노)페닐]-3,6-디히드로-1(2H)-피리디닐)프로필]아미노}카르보닐)-4-(3,4-디플루오로페닐)-6-(메톡시메틸)-2-옥소-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘카르복실레이트: 5-메틸 l-(4-니트로페닐) (6S)-6-(3,4-디플로로페닐)-4-(메톡시메틸)-2-옥소-3,6-디히드로-1,5(2H)-피리미딘디카르복실레이트 (2000년 6월 29일에 공개된 PCT 공개 공보 제 WO 00/37026 호에 기재) 및 N-{3-[l-(3-아미노프로필)-l,2,3,6-테트라히드로-4-피리디닐]페닐}아세트아미드의 반응으로부터 제조되었다: ¹H NMR δ 8.90 (t, 1 H, J=3.6 Hz), 7.75 (s, 1 H), 7.50-7.00 (m, 8 H), 6.68 (s, 1 H), 6.03 (br s, 1 H), 4.67 (s, 2 H), 3.71 (s, 3 H), 3.47 (s, 3 H), 3.38 (ABm, 2 H), 3.16 (m, 2 H), 2.71 (t, 2 H, J=5.4 Hz), 2.56 (m, 4 H), 2.35-1.90 (br, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 1.82 (p,2 H, J=7.2 Hz); ESMS, 612.25 (M+H)⁺

삼중수소화 메틸 (4S)-3-{[(3-{4-[3-(아세틸아미노)페닐]-l-피페리디닐}프로필)아미노]카르보닐}-4-(3,4-디플루오로페닐)-6-(메톡시메틸)-2-옥소-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘카르복실레이트: 메틸 (4S)-3-({[3-(4-[3-(아세틸아미노)페닐]-3,6-디히드로-l(2H)-피리디닐)프로필]아미노}카르보닐)-4-(3,4-디플로로페닐)-6-(메톡시메틸)-2-옥소-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘카르복실레이트를 기술된 콜드 방법(H₂, 벌룬 방법, 메탄올, Pd/C, 하룻밤)을 이용하여 삼중 수소화(Amersham)하여 삼중수소화 메틸 (4S)-3-{[(3-{4-[3-(아세틸아미노)페닐]-l-피페리디닐}프로필)아미노]카르보닐}-4-(3,4-디플루오로페닐)-6-(메톡시메틸)-2-옥소-1,2,3,4-테트라히드로-5-피리미딘카르복실레이트((+)-이성질체)를 제공하였다. 상기 생성물은 MCH 약리학적 분석에서 방사리간드로서 사용되었다.

VI. 체내 표지법

비만(3 일 체중 및 감미된 농축 우유), 우울(강제적인 수영 시험), 불안(사회적 상호 작용 시험) 및 비뇨기 장애(DIRC 및 CSTI)의 치료를 위한 MCH1 안타고니스트의 효과를 예상하기 위하여 하기의 체내 표지법이 수행되었다.

체중에 대한 MCH1 안타고니스트의 효과 (3일)

중량이 180-200 g 인 수컷의 롱 에반스 래트(Charles River)를, 음식과 물에의 접근을 자유롭게 하여 12 시간의 빛/어둠 순환 상에서, 4 개의 군으로 수용하였다. 3 일 동안, 하루에 2 번, 암순환 2 시간 전 및 빛이 들어온 후 2 시간 후에, 복강내 주사를 통해 시험 화합물을 투여하였다. 매일, 각 아침 주사 후에 모든 래트의 중량을 쟀다. 전체 결과를 일일 당 수득한 체중(그램)(평균±표준편차)으로 나타냈고, 두 방식의 아노바(ANOVA)로 분석하였다. 각 시점의 데이타를 한가지 방식의 아노바로 분석하였고, 이 후, 뉴만-케울스(Newman-Keuls) 사후 검증법을 수행하였다. 상기 데이타는 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) (v2.0l) (GraphPad Software, Inc. 사, San Diego, CA)을 사용하여 분석되었다. 모든 데이타는 평균±표준편차로 제시되었다.

감미된 농축 우유에 대한 MCH1 안타고니스트의 효과

실험 개시 시에 중량 17-19 그램의 수컷 C57BL/6 생쥐(Charles River)를 음식과 물에의 접근을 자유롭게 하여, 12 시간의 빛/어둠 순환 상에서, 4 개의 군으로 수용하였다. 7 일 동안, 생쥐의 중량을 재고, 개별 우리안에 두고, 광순환 진입 후 2-4 시간이 지나, 1 시간 동안 감미된 농축 우유(물로 1:3으로 묽힌 네슬레(Nestle))를 마시도록 하였다. 소비된 우유 함량을 각각 한 차례 마시기 전후의 우유병의 중량을 재서 결정하였다. 시험 당일, 생쥐는 우유에 노출되기 30 분 전에 시험 화합물(0.01 % 락트산 중 3, 10 또는 30 mg/kg)및 d-펜플루라민(0.01 % 락트 산 중 10 mg/kg)의 운반체(0.01% 락트산)의 복강내 주사를 맞았다. 시험 당일에 소비된 우유 함량(우유 ml/체중 kg 으로)을 이틀 전에 결정된 각 생쥐의 바셀린 소비량과 비교하였다. 각 시점의 데이타는 한 방식의 아노바로 분석되었다.

래트의 강제 수영 시험(FST)

동물

스프라게-돌레이(Sprague-Dawley) 래트 수컷(Taconic Farms, NY)이 모든 실험에 사용되었다. 래트가 우리당 5 마리씩 수용되었고, 12:12-시간 빛-어둠 순환상에서 보존되었다. 래트가 행동 시험 전 4 일동안 매일 1 분씩 다루어졌다.

약물 투여

5 분간의 시험이 시작되기 60 분 전에, 운반체(2.5% EtOH/2.5% 트윈(Tween)-80), 이미프라민(양성 조절; 60 mg/kg) 또는 시험 화합물의 단일 i.p. 투여를 받도록, 동물이 무작위로 배정되었다. 26 3/8 게이지 바늘(Becton- Dickinson, VWR Scientific, Bridgeport, NJ)을 가진 1 ㏄ 튜버큘린 주사기를 사용하여 모든 주사액이 제공되었다. 주사액의 부피는 1 ml/kg 이었다.

실험 설계

상기 연구에서 사용된 방법은 상기 방법에서 물의 깊이가 31 cm 인 것을 제외하고는 전술한 것과 유사하다(Porsolt 등, 1978). 상기 실험에서 보다 깊은 깊이는 래트의 발이 실린더의 바닥에 닿아 래트 자신을 지지하는 것을 방지한다. 수영 활동은, 깊이 31 cm, 온도 23∼25 ℃의 물을 함유하는 개별 플렉시 유리 실린더(46 cm 높이 ×직경 20 cm)에 래트를 놓아두어 수행되었다. 수영 시험은 항상 900 내지 1700 시간 동안 수행되었고, 초기 15 분의 적응 시험 및 24 시간 후에 5분간의 시험으로 이루어졌다. 약물 치료제는 5 분간의 시험 60 분 전에 투여되었다. 모든 수영 활동 이후에, 래트를 실린더에서 꺼내어, 종이 수건으로 건조시키고, 15 분간 데워진 우리에 둔 후, 자신의 우리로 되돌려 놨다. 컬러 비디오 카메라 및 레코더를 사용하여 모든 시험 활동을 비디오 녹화하였다.

행동 평가

래트의 행동이, 처리 상황을 모르는 1 인에 의해 5 분 시험 동안 5 초 간격으로 평가되었다. 평가된 행동은 하기와 같다:

1. 부동성- 래트는 저항 없이 물에 뜬채로 있었고, 그 머리를 물 위로 올리기 위해 필요한 동작만을 하였고;

2. 오르기- 래트는, 통상 벽 반대 방향으로, 물의 안과 밖에서, 앞발로 활동적으로 움직이고 있었고;

3. 수영- 래트는 단지 그 머리를 물 위로 유지하는 것 이상으로 활동적인 수영 모션, 즉, 실린더 주위로 움직이고 있었고;

4. 다이빙- 래트의 몸 전체가 물에 잠겼다.

데이타 분석

강제 수영 시험 데이타(부동성, 수영, 기어 오름, 다이빙)로 무작위의 일원배치 분산 분석을 하였고, 뉴만-케우이스(Newman-Keuis) 시험을 사용하여 사후 검증법을 실행하였다. 상기 데이타는 그래프패드 프리즘(v2.01) (Graphpad Software, Inc., San Diego, CA)을 사용하여 분석되었다. 모든 데이타는 평균±표준편차로 제시되었다.

생쥐의 강제 수영 시험 (FST)

동물

DBA/2 생쥐(Taconic Farms, NY)가 모든 실험에 사용되었다. 12:12-시간 빛-어둠 순환하에 조절된 상황에서, 동물이 우리당 5 마리씩 수용되었다. 동물은 행동 실험 전 4 일동안 매일 1 분씩 다루어졌다. 상기 방법은 1.5 인치 급식 관으로의 모의 섭식(mock gavage)을 포함하였다.

약물 투여

수영 시험 1 시간 전에, 운반체(5% EtOH/5% 트윈(Tween)-80), 시험 화합물, 이미프라민(양성 조절; 60 mg/kg)의 경구 섭식에 의한 단일 투여를 받도록, 동물이 무작위로 배정되었다.

실험 설계

생쥐의 강제 수영 시험 방법은, 몇가지 변형 외에는, 래트에 대해 전술한 것과 유사하다. 시험에 사용된 실린더는 23∼25 ℃의 물 800 ml로 채워진 1 리터 비이커(10.5 cm 직경 ×15 cm 높이)였다. 1300 내지 1700 시간동안 단지 한 번의 5 분 수영 시험이 각 생쥐에 대해 수행되었다. 약물 치료제가 5 분간의 시험 30-60 분 전에 투여되었다. 모든 수영 활동 이후에, 생쥐를 실린더에서 꺼내어, 종이 수건으로 건조시키고, 15 분간 데워진 우리에 두었다. 후에 자신의 우리로 되돌려 놓았다. 이후 평가을 위해 소니 컬러 비디오 카메라 및 레코더를 사용하여 모든 시험 활동을 비디오 녹화하였다.

행동 평가

시험의 2-5 분 동안의 행동이 TV 모니터에 재생되었고, 검시관에 의해 평가되었다. 부동(부유 상태를 유지하기 위한 최소한의 동작만으로 떠있는 동물) 및 활동(부유 상태를 유지하기 위해 필요한 것 이상인 수영 및 활동)에 소요된 총 시간을 기록하였다.

데이터 분석

강제 수영 시험 데이터 (부동성, 운동성을 나타내는 시간; 초)를 무작위의 일원분산분석 (ANOVA)으로 처리하고, 그 이후의 시험은 Newman-Keuls 시험을 이용하여 수행한다. 데이터는 GraphPad Prism (버젼 2.01) (GraphPad Software, Inc. 사, San Diego, CA)을 사용하여 분석한다. 모든 데이터는 평균 ± 표준편차로서 나타낸다.

사회적 상호작용 시험 (SIT)

랫트를 시험 전에 동물 보호 시설에서 5 일간 적응시킨 후, 5 일간 단독 수용한다. 동물은 매일 5 분간 처리한다. 사회적 상호작용 시험의 고안 및 절차는 앞서 Kennett 등 (1997)에 의해 기재된 바와 같이 수행한다. 시험 당일날, 서로 낯이 익지 않은, 무게가 비슷한 랫트의 쌍 (± 5%)에게 동일한 처리를 하고, 각자의 원래 우리로 돌려보낸다. 동물을 처리군 당 5 쌍씩 5 개의 처리군으로 무작위적으로 나누고, 하기의 복강내 처리 중 하나를 수행한다: 시험 화합물 (10, 30 또는 100 ㎎/㎏), 담체 (1 ㎖/㎏) 또는 클로르디아제폭사이드 (5 ㎎/㎏). 투여는 시험 시작 1 시간 전에 한다. 이어서 랫트를 바닥이 24 개의 동일한 정사각형으로 나뉘어진 백색 펄스펙스(perspex) 시험 상자 또는 활동장 (arena) (54 ×37 ×26 ㎝) 안에 15 분간 넣는다. 에어 컨디셔너를 사용하여 배경 잡음을 발생시키고, 실내를 대략 74℉로 유지한다. 모든 세션은 JVC 캠코더 (모델 GR-SZ1, Elmwood Park, NJ) 및 TDK (HG 최고 브랜드) 또는 Sony 사의 30 분짜리 비디오카세트를 사용하여 비디오 촬영한다. 모든 세션은 1300 내지 1630 시간 동안 수행한다. 털다듬기, 킁킁거리며 냄새맡기, 깨물기, 치고받기, 씨름하기, 쫓아다니기 및 위아래로 기어다니기 등으로 정의된 능동적인 사회적 상호작용을 스톱워치 (Sportsline 모델 226 번, 1/100 초 구분가능)를 사용하여 스코어링하였다. 똑바로 서기 (동물이 뒷발로 서서 몸체를 완전히 일으킴), 털다듬기 (몸체의 핥기, 깨물기, 긁기) 및 세안 (즉, 손을 안면 위에서 반복적으로 움직임)의 횟수, 및 지나다닌 정사각형의 수를 스코어링한다. 수동적인 사회적 상호작용 (동물이 서로의 옆에 또는 서로의 위에 눕기)은 스코어링하지 않는다. 모든 거동은 각 쌍의 처리에 대해 알지 못하는 관찰자에 의해 후에 분석된다. 각 시험의 종료시에는 상자를 젖은 종이 타월로 철저히 닦는다.

동물

수컷 백변종(albino) Sprague-Dawley 랫트 (Taconic Farms, NY)를 쌍으로 12 시간 명암 사이클 (0700 시각에 불이 켜짐) 하에, 음식과 물은 자유롭게 접근하게 하며 수용한다.

약물 투여

시험 화합물을 100 % DMSO 또는 5% 락트산 (v/v) (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO)에 용해시킨다. 클로르디아제폭사이드 (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO)를 2차 증류수에 용해시킨다. 담체는 50% DMSO (v/v) 또는 100% 디메틸아세트아미드 (DMA)로 이루어진다. 모든 약물 용액은 주사 전 10 분 전에 만들어지며, 용액은 시험 당일의 마지막에 폐기된다. 투여된 약물 용액의 부피는 1 ㎖/㎏ 이다.

데이터 분석

사회적 상호작용 데이터 (상호작용하는 시간, 똑바로 서기 및 지나다닌 정사각형)를 무작위의 일원분산분석 (ANOVA)으로 처리하고, 그 이후의 시험은 Student-Newman-Keuls 시험을 이용하여 수행한다. 데이터는 정규성 시험 (Shapiro-Wilk 시험) 처리한다. 데이터는 GBSTAT 프로그램, 버전 6.5 (Dynamics Microsystems, Inc., Silver Spring, MD, 1997)를 사용하여 분석한다. 모든 데이터는 평균 ± 표준편차로서 나타낸다.

배뇨 반사작용의 체내 모델

배뇨 반사작용에 대한 화합물의 효과를 랫트에서, 이전 공개 문헌 (예를 들면, Maggi 등, 1987; Morikawa 등, 1992)에 기재된 바와 같은 "팽창-유도성 규칙적 수축 (distension-induced rhythmic contraction; DIRC)", 및 연속적 혈관통과 서행 수혈 (Continuous Slow Transvesicular Infusion; CSTI) 모델로서 분석하였다.

DIRC 모델

대략 300 g의 무게가 나가는 암컷 Sprague Dawley 랫트를 피하 우레탄 (1.2 g/㎏)으로 마취시켰다. 기관지에 PE240 튜브로 캐뉼라를 꽂아(cannulate), 실험 기간 내내 깨끗한 기도를 제공하였다. 중간선 복강 절개를 수행하고, 좌요관 및 우요관을 분리하였다. 요관을 말단에서 결찰 (방광으로부터 체액의 유출을 방지하기 위해)하고, PE10 튜브로써 앞부분에 캐뉼라를 꽂았다. 소변의 제거를 위해 PE10 관을 외부로 향하게 한 채로, 4-0 명주 봉합사를 사용하여 절개부분을 봉합하였다. 요도구로부터 2.5 ㎝ 뒤로 삽입된 PE50 튜브를 사용하여 요도통과 경로를 통해 방광에 캐뉼라를 꽂았다. 상기 캐뉼라를 테이프로 꼬리에 고정시키고, 압력 변환기에 연결하였다. 방광으로부터의 누출을 방지하기 위해, 4-0 명주사를 이용하여 캐뉼라를 외부요도구에 단단하게 고정하였다.

배뇨 반사작용을 개시하기 위해, 하복부에 압력을 가하여 방광을 먼저 비운 후, 자발적인 방광 수축이 발생 (통상적으로 매 2 내지 3 분마다 한 번의 수축의 속도로 20 - 40 ㎜Hg)할 때까지 보통 식염수로 100 회 증분(increment) (최대 = 2 ㎖)으로 채웠다. 규칙적인 리듬이 성립되면, 담체 (식염수) 또는 시험 화합물을 정맥내 또는 복강내 투여하여, 방광 활성에 대한 이들의 효과를 조사하였다. 5-HT_1A 안타고니스트 WAY-100635를 포지티브 대조로서 제공하였다. 데이터는 약물 적용 전 (기본) 또는 담체 또는 시험 물품의 적용 후의 수축 간격 (초 단위)으로서 표시하였다.

연속적 혈관통과 서행 수혈 (CSTI) 랫트 모델

대략 300 g 의 무게가 나가는 수컷 Sprague Dawley 랫트를 연구에 사용하였다. 랫트를 펜토바르비톤 나트륨 (50 ㎎/㎏, 복강내)으로써 마취하였다. 중간 복부 절개를 통해 방광을 노출시키고, 폴리에틸렌 캐뉼라 (PE50)를 방광의 둥근 부분 (dome) 상의 작은 절개부위를 통해 방광에 도입하고, 캐뉼라를 쌈지봉합 (purse-string suture)으로 고정하였다. 캐뉼라의 다른 쪽 말단은 목 뒷부분으로 피하적으로(subcutaneously) 몸밖으로 내어놓았다. 유사하게, 또다른 캐뉼라 (PE50)를 중간 근처 (paramedian) 복부 절개를 통해 위장으로 도입하고, 자유로운 말단은 목 부분에서 피하적으로 몸밖으로 내어놓았다. 외과적 상처는 명주 4-0 봉합사로 봉합하고, 동물이 적절한 수술후 관리 하에 회복하게 하였다. 다음 날, 동물을 랫트 억제기 (rat restrainer)에 넣었다. 방광-캐뉼라의 개방 말단을 삼구 코크마개를 통해 압력 변환기 및 수혈 펌프에 연결하였다. 100 ㎕/분의 속도로 통상적인 식염수의 연속적 수액에 의해 방광 배설(voiding) 사이클을 개시하였다. 반복적인 배설 수축을 Power Lab 온라인 데이터 습득 소프트웨어 상에 기록하였다. 기본 배설 패턴을 한 시간 동안 기록한 후, 시험 약물 또는 담체를 위장내 카테터를 통해 직접 투여하고, 배설 사이클을 5 시간 동안 관찰하였다. 각 동물에 대해 배뇨 압력 및 빈도수를 처리 전 및 처리 후 (매 30 분 간격으로)에 계산하였다. 방광 용량은 100 ㎕/분 의 일정 수액을 기준으로 상기 빈도수로부터 계산하였다. 시험 약물의 효과는 기본적, 투약 전 방광 용량의 백분율로 나타내었다. WAY 100635를 비교용 포지티브 대조로서 사용하였다.

참조문헌

Auburger, G., et al., (1992) Assignment of the second (cuban) locus of autosomal dominant cerebellar ataxia to chromosome 12q23-24.1, between flanking markers D12S58 and PLA2. Cytogenet. Cell. Genet. 61:252-256.

Bahjaoui-Bouhaddi, M., et al., (1994) Insulin treatment stimulates the rat melanin-concentrating hormone-producing neurons. Neuropeptides 24:251-258.

Baker, B.I. (1991) Melanin-concentrating hormone: a general vertebrate neuropeptide. Int. Rev. Cytol. 126:1-47.

Baker, B.I. (1994) Melanin-concentrating hormone update: functional consideration. TEM 5:120-126.

Bassett, A.S., et al., (1988) Partial trisomy chromosome 5 cosegregating with schizophrenia. Lancet 1:799-801.

Bednarek, M.A., et al. "Synthesis and biological evaluation in vitro of a selective, high potency peptide agonist of human melanin-concentrating hormone action at human melanin-concentrating hormone receptor 1" J Biol Chem 277(16): 13821-13826 (2002).

Bittencourt, J.C., et al., (1992) The melaninconcentrating hormone system of the rat brain: An immunoand hybridization histochemical characterization. J. Comp.Neurol. 319:218-245.

Borowsky, B., et al., Nature Medicine, 2003.

Bradford, M.M. (1976) A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle or protein-dye binding. Anal. Biochem. 72:248-254.

Burgaud, J.L., et al., (1997) Melanin-concentrating hormone binding sites in human SVK14 keratinocytes. Biochem. Biophys. Res. Commun. 241(3):622-629.

Chambers, J., et al., "Melanin-concentrating hormone is the cognate ligand for the orphan G-protein-coupled receptor SLC-1" Nature 400(6741): 261-6 (1999).

Chen, Y., et al, "Targeted disruption of the melanin-concentrating hormone receptor-1 results in hyperphagia and resistance to diet-induced obesity" Endocrinology 143(7): 2469-2477 (2002).

Craddock, N., et al., (1993) The gene for Darier=s disease maps to chromosome 12q23-q24.1. Hum. Mol. Genet. 2:1941-1943.

Dondoni, A., et al., (1995) T. Synthesis, 181.

Drozdz, R. and Eberle, A.N. (1995) Binding sites for melanin-concentrating hormone (MCH) in brain synaptosomes and membranes from peripheral tissues identified with highly tritiated MCH. J. Recept. Signal. Transduct. Res. 15 (1-4):487-502.

Drozdz, R., et al., (1995) Melanin-concentrating hormone binding to mouse melanoma cells in vitro. FEBS 359:199- 202.

Drozdz, R., et al., (1998) Characterization of the receptor for melanin-concentrating hormone on melanoma cells byphotocrosslinking. Ann. NY Acad. Sci. 839(1):210-213.

Gilliam, T.C., et al., (1989) Deletion mapping of DNA markers to a region of chromosome 5 that cosegregates with schizophrenia. Genomics 5:940-944.

Gonzalez, M.I., et al., (1997) Stimulatory effect of melanin-concentrating hormone on luteinizing hormone release. Neuroendocrinology 66(4):254-262.

Gonzalez, M.I., et al., (1996) Behavioral effects of α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH) and melanin-concentrating hormone (MCH) after central administration in female rats. Peptides 17:171-177.

Grillon, S., et al., (1997) Exploring the expression of the melanin-concentrating hormone messenger RNA in the rat lateral hypothalamus after goldthioglucose, injection. Neuropeptides 31(2):131-136.

Herve, C. and Fellmann, D. (1997) Changes in rat melanin-concentrating hormone and dynorphin messenger ribonucleic acids induced by food deprivation. Neuropeptides 31(3):237-242.

Hervieu, G., et al., (1996) Development and stage-dependent expression of melanin-concentrating hormone in mammalian germ cells. Biology of Reproduction 54:1161-1172.

Kauwachi, H., et al., (1983) Characterization of melaninconcentrating hormone in chum salmon pituitaries. Nature 305:321-333.

Knigge, K.M., et al., (1996) Melanotropic peptides in the mammalian brain: The melanin-concentrating hormone. Peptides 17:1063-1073.

Knigge, K.M. and Wagner, J.E. (1997) Melanin-concentrating hormone (MCH) involvement in pentylenetetrazole (PTZ)induced seizure in rat and guinea pig. Peptides 18(7):1095-1097.

Lakaye, B., et al., "Cloning of the rat brain cDNA encoding for the SLC-1 G protein-coupled receptor reveals the presence of an intron in the gene" Biochem Biophys Acta 1401(2): 216-220 (1998).

Ludwig, D.S., et. al., (1998) Melanin-concentrating hormone: a functional melanocortin antagonist in the hypothalamus. Am. J. Physio. Endocrinol. Metab. 274(4):E627-E633.

MacKenzie, F.J., et al., (1984) Evidence that the dopaminergic incerto-hypothalamic tract has a stimulatory effect on ovulation and gonadotropin release. Neuroendocrinology 39:289-295.

Maggi, C.A., et al., "Spinal and supraspinal components of GABAergic inhibition of the micturition reflex in rats." J Pharmacol Exp Ther 240:998-1005 (1987).

Marsh, D.J., et al, "Melanin-concentrating hormone 1 receptor-deficient mice are lean, hyperactive, and hyperphagic and have altered metabolism" Proc Natl Acad Sci U S A 99(5): 3240-3245 (2002).

Martin, R., et al., (1997) J. Tetrahedron Letters, 38, 1633.

McBride, R.B., et al., (1994) The actions of melanin- concentrating hormone (MCH) on passive avoidance in rats: A preliminary study. Peptides 15:757-759.

Melki, J., et al., (1990) Gene for chronic proximal spinal muscular atrophies maps to chromosome 5q. Nature (London) 344:767-768.

Miller, C.L., et al., (1993) α-MSH and MCH are functional antagonists in a CNS auditory paradigm. Peptides 14:1-10.

Morikawa, K., et al., "Inhibitory effect of inaperisone hydrochloride (inaperisone), a new centrally acting muscle relaxant, on the micturition reflex." Eur J Pharmacol 213: 409-415 (1992).

Nahon, J-L. (1994) The melanin-concentrating hormone: from the peptide to the gene. Critical Rev. in Neurobiol 221:221-262.

Parkes, D.G. (1996) Diuretic and natriuretic actions of melanin concentrating hormone in conscious sheep. J. Neuroendocrinol. 8:57-63.

Pedeutour, F., et al., (1994) Assignment of the human promelanin-concentrating hormone gene (PMCH) to chromosome 12q23-24 and two variant genes (PMCHL1 and PMCHL2) to chromosome5pl4 and 5ql2-ql3. Genomics 19:31-37.

Porsolt, R.D., et al., "Behavioural despair in rats: a new model sensitive to antidepressant treatments" Eur J Pharmacol 47(4): 379-391 (1978).

Presse, F., et al. (1992) Rat melanin-concentrating hormone messenger ribonucleic acid expression: marked changes during development and after stress and glucocorticoid stimuli. Endocrinology 131:1241-1250.

Qu, D., et al. (1996) A role for melanin-concentrating hormone in the central regulation of feeding behaviour. Nature 380:243-247.

Rossi, M., et al., (1997) Melanin-concentrating hormone acutely stimulates feeding, but chronic administration has no effect on body weight. Endocrinology 138:351-355.

Sahu, A. (1998) Evidence suggesting that galanin (GAL), melanin-concentrating hormone (MCH), neurotensin (NT), proopiomelanocortin (POMC) and neuropeptide Y (NPY) are targets of leptin signaling in the hypothalamus. Endocrinology 139(2):795-798.

Sakurai, T., et al., (1998) Orexins and orexin receptors: A family of hypothalamic neuropeptides and G protein-coupled receptors that regulate feeding behavior. Cell 92:573-585.

Sanchez, M., et al., (1997) Melanin-concentrating hormone (MCH) antagonizes the effects of α-MSH and neuropeptide EI on grooming and locomotor activities in the rat. Peptides 18:393-396.

Saito, Y., et al., "Molecular characterization of the melanin-concentrating-hormone receptor" Nature 400(6741): 265-269 (1999).

Sherrington, R., et al., (1988) Localization of a susceptibility locus for schizophrenia on chromosome 5. Nature (London) 336:164-167.

Srebnik, M., et al., (1988) J. Org. Chem., 53, 2916-2920.

Takekawa, S., et al., "T-226296: a novel, orally active and selective melanin-concentrating hormone receptor antagonist" Eur J Pharmacol 438(3): 129-35 (2002)

Twells, R., et al., (1992) Chromosomal assignment of the locus causing olivo-ponto-cerebellar atrophy (SCA2) in a cuban founder population. Cytogenet. Cell. Genet. 61:262- 265.

Westbrook, C.A., et al., (1992) Report of the second international workshop on human chromosome 5 mapping. Cytogenet. Cell. Genet. 61:225-231.

본 출원은 2002 년 7 월 3 일 출원된 미국출원 일련번호 제 10/189,145 호의 우선권 주장 출원으로, 상기 출원 내용을 본 출원에 참고로서 반영한다.

본 출원을 통하여, 여러 간행물들이 괄호로 저자 및 연도에 의해 참고된다. 이들 참고문헌들의 완전한 인용은 특허청구범위 바로 직전의 본 명세서 끝부분에서 찾을 수 있을 것이다.

이들 간행물의 전체적인 개시는, 본 발명이 속하는 기술 수준을 보다 완전히 설명하기 위하여 본 출원에 참고로서 포함된다.

Claims

하기 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, -NO₂, -OR₃ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이고;

식 중, 각 B 는 독립적으로 N 또는 CH 이며;

식 중, Z 는 CO 또는 SO₂ 이고;

식 중, 각 R 은 독립적으로 -H, -F 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬이며;

식 중, R₄ 는 독립적으로 -OR₃, -NHR₃, -SR₃, -COR₃, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -OR₂ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 치환될 수 있고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 -H; 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 모노플루오로알킬 또는 폴리플루오로알킬; 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR₂로 치환될 수 있으며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 치환될 수 있고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A, B, Z, n 및 R₄ 는 제 1 항에서 정의된 바와 같다].
제 2 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 및 Z 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, R₄ 는 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -OR₃ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 치환될 수 있고;

식 중, 각 R₃ 는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN 또는 -OR₂ 로 치환될 수 있으며;

식 중, 각 R₂ 는 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 치환될 수 있고;

식 중, n 은 제 1 항에서 정의된 바와 같다].
제 3 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, R₂ 는 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는 아릴이고, 이때, 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂ 또는 -CN으로 치환될 수 있으며;

식 중, n 은 제 1 항에서 정의된 바와 같다].
제 4 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, R₂ 는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이고;

식 중, n 은 3 부터 6 까지의 정수이다].
제 5 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₂ 는 제 5 항에서 정의된 바와 같다].
제 6 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F 또는 -Cl 이고;

식 중, R₂ 는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₃ 알킬이다].
제 7 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

.
제 7 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

.
제 2 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, R₂ 는 아릴이고, 이때 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂ 또는 -CN 으로 치환될 수 있고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].
제 10 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₂ 는 제 10 항에서 정의된 바와 같다].
제 11 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F 또는 -Cl 이고;

식 중, R₂ 는 하나 이상의 -F, -Cl 또는 -Br 로 치환될 수 있는 아릴이다].
제 12 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F 또는 -Cl 이고;

식 중, R₂ 는 하나 이상의 -F 로 치환될 수 있는 아릴이다].
제 13 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

.
제 2 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A, Z, n 및 R₄ 는 제 1 항에서 정의된 바와 같다].
제 15 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, R₄ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -OR₃ 또는 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬로 치환될 수 있는 아릴이고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN 또는 -OR₂ 로 치환될 수 있으며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬이고;

식 중, n 은 제 1 항에서 정의된 바와 같다].
제 2 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, Z 는 제 1 항에서 정의된 바와 같으며;

식 중, R₄ 는 독립적으로 -OR₃, -NHR₃, -COR₃또는 -SR₃이고;

식 중, 각 R₃ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이때, 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR₂ 로 치환될 수 있으며;

식 중, R₂ 는 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는 아릴 (이때, 상기 아릴은 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 치환될 수 있음) 이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].
제 17 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, Z 는 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

식 중, 각 A 는 독립적으로 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₄ 는 독립적으로 -OR₃, -NHR₃또는 -COR₃ 이고;

식 중, R₃ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR ₂ 로 치환될 수 있는 아릴이며;

식 중, 각 R₂ 는 독립적으로 -H, 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는, 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN으로 치환될 수 있는 아릴이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].
제 18 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, 각 A 는 독립적으로 -H 또는 -F 이고;

식 중, R₃ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂, -CN, -OR₂ 또는 -NHR ₂ 로 치환될 수 있는 아릴이며;

식 중, R₂ 는 독립적으로 직쇄 또는 분지된 C₁-C₇ 알킬 또는, 하나 이상의 -F, -Cl, -Br 또는 -I 로 치환될 수 있는 아릴이고;

식 중, n 은 1 부터 6 까지의 정수이다].
제 17 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₃ 는 -NHR₂ 로 치환될 수 있는 아릴이며;

식 중, R₂ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br, -I 로 치환될 수 있는 아릴이다].
제 20 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

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제 18 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

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제 18 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

[식 중, A 는 -H, -F, -Cl, -Br 또는 -I 이고;

식 중, R₃ 는 하나 이상의 -F, -Cl, -Br 또는 -I 로 치환될 수 있는 아릴이다].
제 23 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

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제 23 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 구조를 가지는 화합물:

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제 1 항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
제 1 항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 혼합하여 제조되는 약학적 조성물.
제 1 항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 혼합하는 단계를 포함하는 약학적 조성물의 제조 방법.
제 1 항의 화합물의 치료적 유효량을 대상에게 투여하는 것을 포함하는 MCH1 수용체에 의해 매개되는 장애로 고생하는 대상을 치료하는 방법.
제 29 항에 있어서, 상기 치료적 유효량이 약 0.03 내지 약 300 mg 인 방법.
제 30 항에 있어서, 상기 장애가 우울증인 방법.
제 30 항에 있어서, 상기 장애가 불안증인 방법.
제 30 항에 있어서, 상기 장애가 비만인 방법.
제 30 항에 있어서, 상기 장애가 절박성 요실금인 방법.
제 1 항의 화합물의 치료적 유효량을 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 우울증, 불안증, 절박성 요실금 또는 비만으로 고생하는 대상을 치료하는 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 치료적 유효량이 약 0.03 내지 약 300 mg 인 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 대상이 우울증으로 고생하는 것인 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 대상이 불안증으로 고생하는 것인 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 대상이 비만으로 고생하는 것인 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 대상이 절박성 요실금으로 고생하는 것인 방법.