KR20040096491A

KR20040096491A - 면역원 부착 저해물질 및 이를 제조하고 사용하는 방법

Info

Publication number: KR20040096491A
Application number: KR10-2004-7006486A
Authority: KR
Inventors: 피터 나쉬; 도날드 엘. 로빈슨
Original assignee: 카마스 인코퍼레이티드
Priority date: 2001-12-28
Filing date: 2001-12-28
Publication date: 2004-11-16
Also published as: CA2438698A1; JP2006504393A; CA2438698C; EP1476184A4; CN1543355A; BR0117062A; WO2003061693A1; AU2002246753A1; AU2002246753B2; AU2002246753B8; EP1476184A1

Abstract

본 발명은 계란 항체 형태의 세균 부착 저해물질, 이를 제조하는 방법, 이를 사용하는 방법을 개시한다. 상기 저해물질은 식용 동물의 혹위와 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 저해하는 기능을 한다. 상기 저해물질은 면역원으로 암컷 조류를 접종하고, 상기 면역원에 대한 항체를 포함하는 난(卵)을 수집하고, 난 내용물을 건조시키고 이를 동물용 사료 또는 음용수에 첨가하여 제조한다. 암컷 조류에 접종되는 특정 면역원에 따라, 난 항체는 동물에서 특정한 콜로니-형성 단백질-소모 세균의 존재에 의해 유발되는 식용 단백질의 소비를 감소시켜 사료 효율(feed conversion rate)을 개선함으로써 가축의 성장을 촉진하고 식용 동물의 고기 및 다른 식품에서 특정한 질환-유발성 콜로니-형성 면역원, 예를 들면E. coli0157:H7의 존재에 의해 유발되는 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는데 사용된다.

Description

면역원 부착 저해물질 및 이를 제조하고 사용하는 방법{IMMUNOGEN ADHERENCE AND METHOD OF MAKING AND USING SAME}

동물에서 식용 단백질을 이용하는 능력의 급격한 감소를 유발하는 통상적인 박테리아 면역원에는 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(Peptostreptococcus anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(Clostridium aminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(Clostridium sticklandii)가 포함되지만 이들에 국한되지 않는다. Russell(USDA-ARS, May 1993)에 따르면, 이들 세균 및 본원에 개시된 다른 세균은 가축 사료에서 최대 25%의 단백질을 소모하는 원인이다. 이는 가축 생산업자에게연간 250억 달러의 손실을 유발하고, 특히 단백질 섭취가 충분해 보이지만 단백질이 종종 결핍되는 초식 동물에서 분명하다. 동물이 사료에서 단백질을 소비하는 동안, 이들 유해 세균은 상기 단백질을 암모니아로 소모적으로 분해시키고, 상기 암모니아는 간과 신장에 의해 요소로 전환되고, 이후 소변으로 숙주로부터 배출된다. 또한, 이들 유해 세균은 숙주가 암모니아를 효율적으로 활용하는데 필요한 유익 세균과 경쟁한다. 이에 더하여, 이들은 좀더 효율적인 암모니아 활용을 위하여 혹위에 다른 유익 세균을 필요로 한다.

본 발명의 주목적은 특정 세균에 계란(fowl egg) 항체를 투여함으로써 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)와 같은 유해 세균의 전이증식(colonization) 및 가축의 혹위와 장관에서 이런 세균의 성장을 실질적으로 예방하고 상기 동물로부터 이들을 실질적으로 제거하는 것이다.

사람에서 식인성(food borne) 질환을 유발하는 일반적인 박테리아 면역원은 대장균(E. coli), 리스테리아(Listeria), 살모넬라(Salmonella), 캠필로박터(Campylobacter) 등인데, 이들은 메스꺼움, 구토, 설사 및/또는 열병과 같은 독감-유사 증상을 초래하고, 일부 경우에 신장 손상 또는 사망을 초래한다. 최근에, 이들 박테리아로 오염된 식품은 수천명 또는 수만명에 위장 통증을 유발하고 수백만 파운드에 달하는 식품의 리콜과 파괴를 초래하였다. 이로 인한 경제적 손실은 엄청나다. 보건에 특히 중대한 위협은 1982년에 처음 확인된 일반적인 장 박테리아의 병원성 균주인E. coli0157:H7이다. 상기 박테리아는 가축의 장관에서 확대되고 분변으로 배출된다. 배출된 상기 박테리아는 동물의 고기에서뿐만 아니라 우유, 과일 주스, 상추, 자주개자리 싹, 무 등과 같은 식품에서 식품 공급에 침입한다.

합텐은 자체적으로 항체를 형성할 수는 없지만 특정 항체와 결합할 수 있는 부분적인 또는 불완전 면역원, 예를 들면 특정 독소이다. 이런 합텐에는 박테리아 독소, 사상균(yeast mold) 독소, 바이러스, 기생충 독소, 해조 독소 등이 포함된다.

다른 콜로니-형성 세균은 방사선균(Actinomycetes), 연쇄구균(Streptococcus), 박테리오드균(Bacteriodes), 예를 들면 박테로이드 루미니콜라(B. ruminicola), 피부궤양균(Crytococcus), 사상균 등이다.

본 발명의 다른 주목적은 특정 면역원이나 합텐에 대한 계란(fowl egg) 항체를 동물에 투여함으로써 면역원(예,E. coli0157:H7)이나 합텐의 부착 및 가축의 혹위 또는 장관에서 이런 면역원이나 합텐의 전이증식과 성장을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 분변으로부터 면역원이나 합텐을 실질적으로 제거하는 것이다.

선행 기술

특정 질환의 진단이나 치료를 위한 계란 항체의 생산은 공지되어 있다. 세균, 특히 비-질환-유발성 단백질-소모성 세균의 전이증식 및 질환-유발성 면역원의 부착과 전이증식의 저해를 위한 계란 항체의 생산은 제시된 바가 없다.

대표적인 선행 특허는 아래와 같다:

Polson, U.S. Patent No. 4,550,019

Stolle et al, U.S. Patent No. 4,748,018

Tokoro, U.S. Patent No. 5,080,895

Carroll, U.S. Patent No. 5,196,193

Lee, U.S. Patent No. 5,367,054

Coleman, U.S. Patent No. 5,585,098

Stolle et al, U.S. Patent No. 5,753,268

Raun, U.S. Patent No. 3,794,732에서는 반추동물에서 사료의 이용을 개선하는 반추동물 일량사료(ration)로 폴리에스테르 항생제의 사용을 기술한다. 구체적으로, 반추동물에서 성장촉진인자로서 항생제의 사용을 제시한다.

Raun, U.S. Patent No. 3,947,836에서는 반추동물 사료 이용을 개선하기 위하여 동물에 경구 제공되는 특이적인 항생제 화합물의 사용을 제시한다. 구체적으로, 동물은 혹위 기능이 발달하고, 여기서 아세테이트와 관련하여 좀더 많은 프로피오네이트가 생산되며, 따라서 사료 이용이 개선된다.

Ivy et al, U.S. Patent No. 4,933,364에서는 식품 생산 포유동물의 성장과 사료 효율(feed efficiency)을 조장하는 대안적 과정을 제시한다. 이들은 식품 생산 포유동물의 사료 효율을 강화시키는 아연 항생제 복합체를 형성하는 불용성 형태로 첨가될 수 있는 아연 항생제의 사용을 제안한다. 이들은 모넨신(monensin)을 상세하게 포괄하는 2개의 미국 특허 3,501,568과 3,794,732를 참조한다.

모넨신과 같은 첨가제의 사용에 관한 다른 참조문헌에서는 이들 재료의 현명한 적용의 필요성을 언급하였는데, 그 이유는 이들이 일부 동물, 예를 들면 말에독성을 나타낼 수 있기 때문이다. 젖소에 사용이 승인되지 않은 이들 항생제는 조심해서 투여해야 한다. 이에 더하여, 모네신이 소 사료에 고전적인 첨가제인 당밀 기초한 보조물질에 첨가될 수 없기 때문에, 사료 섭취가 초기에 감소한다(Pate, F., "lonophores Do Not Appear To Work In Molasses Supplemets", ONA Reportss, November, 1996, 2 pages, Florida Cattleman and Livestock Journal; Lona, R. P. et al, J. Anim. Sci. 75(1): 2571-2579, 1979).

Polson, U.S. Patent No. 4,550,019는 이뮤노솔비티브(immunosorbitive) 과정용 면역 반응물로서 사람을 비롯한 동물의 수동 면역 및 정량적 분석 검사, 특히 진단적, 병리학적, 법의학적, 약동학적 조사를 위한 마이크로 분석용 면역학적 제제를 만들기 위한 계란 노른자 항체의 제조와 용도에 관한다.

Stolle et al, U.S. Patent No. 4,748,018은 포유동물에서 항체에 대한 내성이 먼저 발생한 이후, 다양한 조건하에 항체를 함입하는 다양한 조성물을 이용하여 여러 가지 투여 방법으로 다양한 항원에 대한 계란 노른자 항체를 이용한 포유동물의 수동 면역 방법에 관한다.

Tokoro, U.S. Patent No. 5,080,895는 난(卵)으로부터 유래된 물질을 함유하는 특이적인 항체, 생산 방법 및 감염이나 다른 질환의 치료를 위한 용도; 가축과 가금용 사료, 화장품, 의약품에서 첨가제로서 용도; 혈청 진단 분야에서 용도에 관한다. 명시하지는 않지만, 사료에 난(卵) 항체의 사용은 가축이나 가금에서 장 감염의 치료를 위한 항체의 용이한 경구 투여 수단을 제공한다.

Carroll, U.S. Patent No. 5,196,193 및 U.S. Patent No. 5,443,976은 뱀,거미, 전갈 또는 해파리 독에 대한 말 항체 또는 계란 노른자 항체를 함유하는 항-독 조성물에 관한다.

Lee, U.S. Patent No. 5,367,054는 감염의 치료를 위한 난(卵) 면역글로불린의 대규모 정제 방법에 관한다.

Coleman, U.S. Patent No. 5,585,098은 수유 반추동물의 유제에서 체세포 개수를 낮추기 위한 계란 노른자 면역글로불린의 경구 투여 방법에 관한다.

Stolle et al, U.S. Patent No. 5,753,268은 항-콜레스테롤혈 난(卵) 백신, 생산 방법 및 사람과 다른 동물에서 혈관 질환의 치료를 위한 식이 보조물질로서 용도에 관한다.

본 발명의 요약

전반적으로, 본 발명은 산란기(egg laying age)에 도달한 암컷 조류에 특정한 표적 면역원을 먼저 접종함으로써 가축의 혹위 및/또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하는 가축 투여용 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 관한다. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간이후, 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집한다. 이들 난의 전체 항체-포함 내용물은 껍질로부터 분리하고 건조시킨다. 난 내용물은 사료 증량제(extender) 또는 담체 물질에서 건조시킬 수 있다. 건조되고 분리된 난 항체 부착 저해 물질은 보관하거나 필요에 따라 수송할 수 있다.

조류에 접종되는 표적 면역원은 저해물질의 예상 용도, 사료 효율의 향상이 요구되는 비-질환-유발성 단백질-소모성 세균, 질환의 실질적인 감소나 제거가 요구되는 표적된 질환-유발성 세균에 좌우된다.

표적된 면역원에 특이적인 항체를 함입하는 건조된 난 내용물은 동물 사료 전체에 실질적으로 균일하게 항체 물질을 분포시키고, 이후 생성된 항체-포함 동물 사료를 가축에 제공함으로써 가축에 투여된다. 개선된 사료 이용을 목적하는 경우에, 항체-포함 동물 사료는 도살에 앞서 정상적인 마무리 계획에 따라 가축에 공급된다. 동물의 혹위 또는 장관에서 표적된 세균의 전이증식의 실질적인 예방은 동물로부터 세균을 궁극적으로 제거한다. 세균의 이런 전이증식 억제와 제거는 식품 생산 동물에 공급되는 식용 단백질의 소모적 분해를 실질적으로 감소시킨다. 이에 더하여, 비-암모니아 생산 세균에 대한 경쟁의 결과적인 감소는 숙주에 의한 사료의 최적 효율 이용을 더욱 강화시킨다(Russell, USDA-ARS, May 1993). 가축의 고기로부터 질환-유발성 세균의 제거를 목적하는 경우에, 항체-포함 사료는 도살에 앞서 상기 동물의 장관에서 표적 면역원이나 합텐의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물로부터 면역원이나 합텐이 제거될 수 있을 만큼 충분히 공급한다.

본 발명은E. coli0157:H7에 특이적인 부착 저해물질의 생산 및 상기 박테리아에 의해 유발되는 위 질환의 실질적인 감소나 제거에 관한다. 본 발명은 특히E. coli0157:H7에 의해 유발되는 질환의 제거에 관하여 기술하지만, 본 발명은 다른 콜로니-형성 면역원이나 합텐에 의해 유발되는 질환의 제거에도 동등하게 적용될 수 있다.

본 발명은 숙주 가축의 혹위(rumen)와 장관에서 콜로니-형성 면역원이나 합텐의 부착을 실질적으로 예방하는 세균 부착 저해물질, 이런 부착 저해물질을 생산하는 방법 및 이런 저해물질을 이용하여 (1) 가축에서 특정한 콜로니-형성 단백질-소모성 세균의 존재에 의해 유발되는 식용 단백질의 소비를 감소시켜 사료 효율(feed conversion rate)을 개선함으로써 가축의 성장을 촉진하고 (2) 자체적으로는 대상 질환에 걸리지 않은 가축의 고기 및 다른 식품에서 특정한 질환-유발성 콜로니-형성 면역원이나 합텐의 존재에 의해 유발되는 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 관한다.

본 발명은 가축의 혹위 또는 장관에 부착하는 콜로니-형성 단백질-소모성 세균, 예를 들면 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(Peptostreptococcus anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(Clostridium aminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(Clostridium sticklandii) 및 콜로니 형성 질환-유발성 세균, 예를 들면 대장균(E. coli) 0157:H7, 리스테리아(Listeria), 살모넬라(Salmonella), 캠필로박터(Campylobacter)의 능력을 특이적으로 저해하고, 따라서 번식하고 성장하며 전이증식하는 이들의 능력을 감소시키는 기술개념에 기초한다. 식이 변화는 동물의 일생동안 혹위와 장관이 이들 미생물에 덜 민감하도록 설계된다. 본 발명의 세균 저해물질은 생산업자에 의해 임의로 투여될 수 있긴 하지만, 효율적인 동물 사료 이용을 위하여 사육장 수준에서 마무리 기간동안 신중하게 결정되고 관리된 투여 과정을 예정하고 추진하는 것이 바람직하다. 저해물질의 저용량 장기 누적 효과를 활용하고 현재의 생산 실무에 용이하게 통합될 수 있는 이런 사전결정된 기간은 개선된 동물 실적을 통하여 경제적으로 가장 매력적인 수익률(rate of return)을 제공한다.

질환-유발성 세균의 제거를 위하여, 저해물질은 도살 직전에 또는 동물의 일생에서 실질적인 기간동안 투여할 수 있다. 사육장 수준에서 신중하게 결정되고 관리된 중기 투여 과정을 추진하는 것이 바람직하다. 앞서 밝힌 바와 같이, 설정된 도살전 기간은 저용량 장기 누적 효과를 활용하고 현재의 생산 실무에 용이하게 통합가능하며 가장 경제적이다. 이는 또한, 도살시 잠재적 오염의 근원인 동물 외부에서 진흙과 똥거름으로부터 미생물이 자연적으로 사라지도록 한다. 현재의 사료공급 시스템하에, 가축 사료 효율은 이온투과 담체, 예를 들면 상품명 Rumensin으로 판매되는 사료 첨가제인 모넨신을 사용하여 강화시킨다. 이들은 육우와 식용의 어린 암소에 제공되는 사료용으로 승인되었지만 젖소에는 사용이 승인되지 않은 폴리에스테르 계통의 항생제이다. 대부분의 그램-파지티브 세균은 부적절하게 사용되면 숙주 동물에 매우 유해할 수도 있는 항생제인 이온투과 담체에 비-특이적으로 반응한다. 이들 항생제가 특이적이지 않기 때문에, 섭취된 식물 재료의 셀룰로오스를 소화시키는데 필요한 대부분의 반추 조직체 역시 영향을 받게 된다. 세균의 약물 저항성 균주의 이행(carry over)과 발생 문제 역시 산업에 중요한 관심사이다. 광범위한 범위의 항생제 사용은 인재(human error)에 취약성, 추가 비용, 소비자 저항 등을 비롯한 다른 여러 결점을 안고 있다.

이에 더하여, 모넨신 유형의 첨가제는 통상적으로 사용되는 당밀 기초한 보조물질과 함께 투여될 수 없다.

숙주의 혹위 또는 소화관에 전이증식하는 임의의 세균은 표면에 부착하여 배가하고 성장하는 능력을 보유해야 한다. 본 발명에 의해 해결되는 특이적인 세균 역시 이런 규칙을 벗어나지 않는다. 유익 세균에서 특정 효소의 요구와 같은 다른 인자 역시 고려해야 하기 때문에, 혹위 또는 장관에서 표적된 세균의 개체수를 줄이면서도 다른 정상적인 군총(flora)을 간섭하지 않는 특이적인 반응물(reagent)이 필요하다. 본 발명의 세균 저해물질은 매우 특이적인 방식으로 부착을 강하게 간섭하고, 따라서 표적된 세균이 배가하고 성장하며 전이증식하는 것을 점증적으로 억제한다. 간단한 일일 사료 보조물질의 운반체를 통하여, 산물은 동물에서 임의의 질환을 치료하지는 않지만 혹위 또는 소화관에 거주하는 임의의 박테리아를 특이적으로 제거하고 동일 박테리아의 새로이 도입된 구성원의 부착을 예방하도록 설계된 항체 제제를 숙주에 필수적으로 공급한다. 이런 세균 저해물질은 최종 식품 산물에 직접적인 영향을 주지 않고 동물이나 최종 식품 산물에 원치않는 찌꺼기를 남기지 않는다. 이에 더하여, 유해 세균이 배가되지 못하고 사육장에서 시간의 흐름, 예를 들면 120-일 마무리 기간동안 자연적인 분해로 사육장 환경으로부터 소멸되기 때문에, 재오염의 주요한 잠재적 근원을 제거하는데 도움이 된다. 활성 성분이 완전히 자연산이기 때문에, 이들은 당밀 기초한 보조물질을 비롯한 대부분의 사료와 식품 첨가제에 적합하다.

모든 포유동물과 조류는 어린 후손이 자체적인 항체를 만들 수 있는 능력을 획득할 때까지 즉각적인 면역 반응을 가능하게 하는 유사한 유형의 보호를 제공한다. 좀더 구체적으로, 수동 항체 보호라고 하는 이런 방어 기전은 태반, 모유 또는 둘 모두를 통하여 포유동물 후손에 전달된다. 하지만, 조류 후손은 발생기(embryonic stage)부터 난(卵)에 위치된 항체의 저장을 통하여 수동 항체 보호를 획득한다. 특히, 조류는 모체의 혈청에 존재하는 항체보다 수배 농축된 다량의 항체로 난을 채울 수 있는 능력을 갖는다. 이에 더하여, 조류 항체는 특히 불리한 조건하에 포유동물 항체보다 소화를 통한 불활성에 훨씬 안정하고 저항한다. 일단 면역된 암탉은 노른자에서 독특한 IgY형 면역글로불린 층을 형성하고 알부민에서 통상적인 닭 IgM과 IgA 면역글로불린을 침전시킨다. 알부민은 전란(whole egg) 제제에 저항성을 촉진하고 조류 항체를 보호하는데 조력한다. 더 나아가, 난에 위치된 다량의 항체는 모체가 가장 최근에 노출되고 공격받은 항원에 대하여 훨씬 배타적으로 특이적이다. 이로 인하여, 조류의 난(卵)은 경제적으로 대량 생산되고 매우 특이적이며 안정적인 항체의 가장 이상적인 공급원이다. 본 발명에서는 조류 항체를 생산하는데 닭을 주로 사용하지만, 칠면조, 오리, 거위 등을 비롯한 다른 가금 역시 사용될 수 있다.

구체적으로, 지속적인 연속 생산 흐름을 결과하는 원하는 최종 산물의 함량과 타이밍(timing)에 의해 사전결정된 계획에 따라, 어린 닭, 전형적으로 대형 난 크기, 대량 난 생산, 용이한 취급에 적합하고 대략 19주의 산란기에 도달한 Rhode Island Red, White Leghorn, 반성 교차 잡종 또는 다른 품종을 획득한다. 대략 2 내지 4주의 적절한 분리와 풍토순화 기간이후, 각 군은 항체가 요구되는 특정 항원의 재수화 제제를 이용한 접종 프로그램를 실시한다. 이들 항원은 상업적인 공급원, 예를 들면 American Type Culture Collection(ATCC)으로부터 구할 수 있다. 항원은 근육내, 바람직하게는 피하 주사된다. 대략 4 내지 5주후에 수집된 평균 난은 용이하게 사용가능하고 안정적인 형태로 원하는 특정 항체를 다량 함유한다. 닭은 산란기동안 표적된 항원으로 재접종하여 높은 항체 수준을 유지할 수 있다.

사전결정된 닭 군으로부터 유래된 난(卵) 집단(batch)은 깨뜨리고, 내용물은 껍질로부터 분리하고 혼합하며 저온살균한다(닭으로부터 잠재적 병원성 미생물을 제거하고 사료의 잠재적 오염을 감소시키기 위하여). 전체 난 내용물은 표준 상용 방법, 예를 들면 실온이나 최대 50℃의 뜨거운 공기를 이용한 분무 건조로 건조시키고, 전체 역가 또는 항체 수준을 검사하고 결정한다. 난 내용물은 단독으로 또는 사료 증량제, 예를 들면 건조 콩, 쌀겨 등에서 건조시킨다. 표준 검사 절차,예를 들면 ELISA, 응집 등이 이용된다. 이후, 전형적인 집단은 다른 평균 생산 수준의 닭 군으로부터 유래된 집단과 혼합하여 다수의 표준화된 활성 성분을 결과한다. 건조된 난(卵) 항체 세균 저해물질은 보관하고 콩깍지, 거환 및/또는 정제와 같은 담체 물질로 수송할 수 있다. 사료 포뮬레이터(formulator)와 최종 고객의 요구 및 특정화에 따라, 최종 항체 산물은 일량사료(ration)와 함께, 무해 첨가제, 예를 들면 건조된 유장이나 건조된 콩 단백질 분말, 건조된 콩이나 쌀겨 등을 함유할 수 있다. 상기 과정으로 생산되고 가공된 난은 특정 세균 전이증식에 대하여 적어도 350 내지 700 일일 용량의 관리된 보호를 제공할 만큼 실효하고 안정적인 산물을 제공한다. 본 발명의 방법은 육우와 젖소에서 사료 효율 세균을 조절하는 경제적이고 안전하며 효과적인 수단 및 소 떼에서E. coli0157:H7과 다른 질환-유발성 세균을 조절하는 경제적이고 안전하며 효과적인 수단을 처음으로 제공한다.

구체적으로, 본 발명은 육우와 젖소에서 사료 효율 및 소(cattle)에서 질환-유발성 세균을 제거하는 문제를 해결한다. 하지만, 세균 부착을 예방하는 개념은 다양한 식품 안전과 생산 분야에서 상당한 경제적 잠재력을 갖는다. 이런 분야중 하나는 사료와 음용수에서 특정 유해 미생물을 표적하는 것이다. 이런 응용의 한가지 실례는 닭 및 다른 가금용으로 제조된 동물 사료에서 병원성 또는 부패 미생물을 실효하게 저해하는 산물이다. 다른 응용 분야는 특정 유해 미생물을 표적하는 린스 보조 성분이다. 이런 응용의 실례는 소 사체의 특정 부위를 청소하고 세척하거나 손질된 가금을 냉장하는 용액에 사용되는 병원성 또는 부패 미생물을 실효하게 제거하는 산물이다.

가장 성공적인 전이증식 미생물, 박테리아, 바이러스 기생충 등은 표면에 "아드헤린(adherin)"이라는 다양한 유형의 분자를 전개하는데, 이들은 숙주의 다양한 표면 일부에서 한가지이상 유형의 분자에 단단하게 부착할 수 있다. 부착 저해물질은 매우 독특한 화학적 구조에 자물쇠와 열쇠 형태의 적합(fit)으로 숙주에 부착되는 이들 아드헤린에 단단하게 결합하여 이를 피복하고 둘러싸며 제거할 수 있는 매우 높은 특이적 활성의 조류 항체이다. 이런 직접적인 공격에 더하여, 대부분의 생물 유체, 예를 들면 혈액, 림프액, 타액, 눈물 및 장 분비액에 포함되는 보체 시스템의 보체는 항체 부착을 여러 유형의 방어 활동에 대한 유인으로 인식한다. 따라서, 많은 다른 세포 방어 체계의 동원과 연합되는 특정 항체 부착과 코팅은 표적된 미생물의 화학적 불활성 및 궁극적인 파괴를 신속하게 결과한다.

본 발명은 아래의 실시예로 좀더 구체적으로 설명한다.

실시예 1: 산란 조류의 선택

산란 조류의 계통은 필요와 사용 목적에 따라 달라진다. 닭, 칠면조, 오리, 에뮤(emu) 또는 임의의 다른 가금을 비롯한 산란 가금을 면역할 수 있다. 산란 닭의 통상적인 계통이 바람직하고 일반적으로 연간 산란되는 난의 개수, 난 크기, 사육의 용이함에 기초하여 선택된다. Rhode Island Red, White Leghorn, Red Sex Linked 잡종이 난 크기(large 내지 ex-large, 50-65 gm)에 기초하여 선택되고 면역 계획에 사용하였다. 연간 산란되는 난의 개수와 함께, 이들 동물의 취급 용이성 및 난의 크기와 균일성을 관찰하였다. 임의의 산란 조류를 사용할 수 있긴 하지만, 닭이 비용 및 사용 용이성으로 인하여 최적으로 확인되었다. Red Sex Linked 잡종이 최대 균일성 및 개체당 최대 개수의 난을 제공하였다. 이들 동물은 large 내지 extra-large 등급의 난(50-65 gm) 및 개체당 연간 최대 300개의 난을 생산한다.

실시예 2: 보존 균주의 제조

American Type Culture CollectionE. coli0157:H7 Stock #43895를 모델 박테리아로 이용한다. 상기 세균은 가공되지 않은 햄버거로부터 분리하고 소에 전이증식시켰다. 상기 계통의 ATCC 재수화 방법을 실시하였다. 박테리아는 1.0 ㎖ TSB 액체배지(Tryptase Soy Broth, Becton Dickinson)에 재수화시키고 5 ㎖ TSB 무균 액체배지로 옮기며 37℃에서 하룻밤(대략 18시간)동안 배양하였다. nice turbid 성장을 관찰하였다. 이는 필요에 따라 보존 균주로 사용한다. 이는 콜로니 생산의 확인을 위하여 Sorbitol-MacConkey Agar(Difco)에 선조접종하였다.

실시예 3: 면역원에 대한 H 항원의 제조

H 항원은 산란 가금을 면역하는 면역원으로의 발달을 선별하였다. 제조물에 부가된 농도를 제공하기 위하여 배양동안 H 항원의 최적 성장을 유지하는 특정한 조건을 이용한다. Veal Infusion Agar(VIS)와 Veal Infusion 15 Broth(VIB, Becton Dickinson)가 H 항원 생산에 적합하다. VIB로 접종된 보존 TSB는 22℃ 내지 24℃ 또는 실온에서 18 시간동안 배양한다. 이는 박테리아 편모(flagella) 발생을 촉진한다. VIA로 적층된 플라스크는 VIB 배양액으로 접종한다. 유효한 성장은 22시간후 관찰되었다. 산물은 4일후 수거하였다. 플라스크는 Dulbecco's PSB용액(pH 7.3-7.4)으로 아가 표면을 세척하여 합친다. 산물은 튜브에 수집한다. 밀도는 분광광도계 실사 및 McFarland 탁도계 기준을 이용하여 검사한다. 대략 3 x 10/12/㎖ 원액. 운동성(motility)은 운동성 아가 슬란트(slant)(Northeast Laboratory Services)로 검사한다. 원액은 PBS에서 ㎖당 대략 1 x 10⁹의 농도로 희석하고 실온에서 1시간동안 교반한다. 박테리아의 외부에서 편모를 제거한다. 상층액은 원심분리로 수집한다. 전체 박테리아의 펠렛은 상층액으로부터 분리한다. 건조 중량은 대략 14.7 ㎎/㎖인데, 상기 물질은 H 항원에 대한 보존 면역원(stock immunogen)으로 사용한다. 이는 PBS에서 1 ㎎/㎖로 희석하고 60℃ 내지 70℃에서 30분동안 가열한다. 이는 오염물질을 최소화시키는데 도움이 된다. 티오글리콜레이트(thiogylcollate) 액체배지는 성장을 검사하기 위하여 접종하고, 동물은 면역원으로 접종한다.

실시예 4: 면역원에 대한 O 항원의 제조

Brain Heart Infusion(BFI, acumedia)을 이용하여 박테리아에서 O 항원을 자극한다. 보존 TSB 접종 BHI 액체배지를 생성하고 37℃에서 18시간동안 배양한다. 이는 박테리아에서 일부 항원 발생을 촉진한다. BHI 액체배지를 포함하는 플라스크는 BHI 액체배지 배양액을 접종한다. 플라스크는 부드럽게 교반하면서, 37℃에서 배양한다. 유효한 성장은 22시간후 관찰되었다. 플라스크는 합치고, 상기 물질은 대략 3000 rpm에서 30분동안 원심분리와 무균 염수(0.9%)를 이용하여 수거한다. 산물은 튜브에 수집한다. 밀도는 분광광도계 실사 및 McFarland 탁도계 기준을 이용하여 검사한다. 상기 물질은 대략 1 x 10⁹/㎖로 희석한다. 4% 소디움 디옥시콜레이트(Difco) 용액은 0.9% 무균 염수(Herzberg, 1972)에 녹인 배양액에 1:1 비율로 첨가하고, 실온(22℃ 내지 24℃)에서 대략 18시간동안 교반한다. 상기 물질은 원심분리하여 전체 세포를 제거한다. 상층액은 O 항원에 대한 원액으로 사용한다. 건조 중량은 대략 14.9 ㎎/㎖이다. 산물은 O 면역원에 대하여 무균 PBS(pH 7.4)에서 1 ㎎/㎖로 희석한다.

실시예 5: 면역원에 대한 WC 항원의 제조

Tryptic Soy 액체배지(TSB, Northeast Laboratory Services) + 효모 추출물(BBL)을 전체 세포(WC) 항원 생산에 이용한다. TSB + 효모 추출물 0.6% 액체배지는 TSB 원액을 접종하고 37℃에서 18시간동안 배양한다. 이는 박테리아에서 균체 항원(somatic antigen)과 다른 표면 항원의 발생을 촉진한다. 플라스크는 효모 추출물 액체배지를 함유하는 TSB로 접종한다. 플라스크는 부드럽게 교반하면서, 37℃에서 배양한다. 유효한 성장은 22시간후 관찰되었다. 플라스크는 합치고, 산물은 대략 3000 rpm에서 30분동안 원심분리하여 수거하고 튜브에 수집한다. 산물은 무균 PBS(pH 7.4)에 재현탁시킨다. 밀도는 분광광도계 실사 및 McFarland 탁도계 기준을 이용하여 검사한다. 건조 중량은 대략 19.7 ㎎/㎖이다. 산물은 대략 2 x 10⁹/㎖ 또는 2 ㎎/㎖ 건조 중량으로 희석하고, PBS에 녹인 0.6% 포름알데하이드 용액은 배양액에 1:1 비율로 첨가하고, 실온(22℃ 내지 24℃)에서 대략 18시간동안 교반한다. 티오글리콜레이트(thiogylcollate) 액체배지는 성장을 검사하기위하여 접종하고, 제조물의 pH(pH 7-7.4)를 검사한다. 상층액은 WC 항원에 대한 원액으로 사용한다. 건조 중량은 대략 14.9 ㎎/㎖이다. 산물은 WC 면역원에 대하여 PBS(pH 7.4)에서 1 ㎎/㎖로 희석한다.

실시예 6: 면역원에 대한 A 항원의 제조

Minca Medium을 A 항원 생산에 이용한다. 이는 섬모 및 관련된 아드헤린 항원을 촉진하는 표준 배지이다. 보존 TSB Minca Medium 액체배지(Inf. Immun., Feb. 1977, 676-678)를 접종하고 37℃에서 18시간동안 배양한다. 이는 박테리아에서 부착 항원 발생을 촉진한다. 플라스크는 Minca Medium 액체배지로 접종하고, 천천히 교반하면서 37℃에서 배양한다. 유효한 성장은 22시간후 관찰되었다. 플라스크는 합치고, 산물은 대략 2500 rpm에서 30분동안 원심분리하여 수거하고 튜브에 수집한다. 펠렛은 PBS에 재현탁시키고 교반 막대와 함께 22℃ 내지 24℃(실온)에서 1시간동안 교반한다. 이는 편모를 제거한다. 산물은 튜브에 수집하고, 펠렛은 PBS와 0.01% Tween 20^TM에 재현탁시키고 저온(4℃)에서 30분동안 저속으로 Waring Blender로 옮긴다. 밀도는 분광광도계 실사 및 McFarland 탁도계 기준을 이용하여 검사한다. 산물은 원심분리하여 전체 세포를 제거한다. 상층액은 A 항원에 대한 원액으로 사용한다. 이는 필요한 경우 60℃에서 40분동안 가열하여 불활화시킨다. 보존제로 50 ㎕/㎖제타마이신을 첨가한다. 티오글리콜레이트(thiogylcollate) 액체배지는 성장을 검사하기 위하여 접종한다. 건조 중량은 대략 10.6 ㎎/㎖이다. 산물은 A 면역원에 대하여 PBS(pH 7.4)에서 1㎎/㎖로 희석한다.

실시예 7: 면역원에 대한 P 항원의 제조

Reinforced Clostridial Medium을 P 항원 생산에 이용한다. 이는 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(Peptostreptococcus anaerobius)에 대한 부착 항원을 촉진하는 표준 배지이다. 이들 배양액은 엄격한 혐기성 조건하에 성장시킨다. 보존 균주는 #49031에 대한 ATCC에 따라 성장시킨다. 다른 세균에서처럼, 하위배양액은 소량으로 성장시킨다. 티오글리콜레이트 배지(Difco)는 상기 균주로 접종하고 48시간동안 배양한다. 플라스크는 Reinforced Clostridial Medium 액체배지로 접종한다. 상기 배지는 혐기성 가스의 혼합물로 덮는다. 플라스크는 합치고, 산물은 대략 2500 rpm에서 30분동안 원심분리하여 수거하고 튜브에 수집하며 30분동안 저속으로 이동시킨다. 밀도를 검사한다. 산물은 원심분리하여 전체 세포를 제거한다. 상층액은 P 항원에 대한 원액으로 사용한다. 이는 필요한 경우 60℃에서 40분동안 가열하여 불활화시킨다. 건조 중량은 대략 10.6 ㎎/㎖이다. 산물은 P 면역원에 대하여 PBS(pH 7.4)에서 1 ㎎/㎖로 희석한다.

실시예 8: 면역원에 대한 CS 항원의 제조

Reinforced Clostridial Medium을 CS 항원 생산에 이용한다. 이는 클로스트리듐 스틱란디(Clostridium sticklandii)에 대한 부착 항원을 촉진하는 표준 배지이다. 이들 배양액은 엄격한 혐기성 조건하에 성장시킨다. 보존 균주는 #12662에 대한 ATCC에 따라 성장시킨다. 다른 세균에서처럼, 하위배양액은 소량으로 성장시킨다. 티오글리콜레이트 배지(Difco)는 상기 균주로 접종하고 48시간동안 배양한다. 플라스크는 Reinforced Clostridial Medium 액체배지로 접종한다. 상기 배지는 혐기성 가스의 혼합물로 덮는다. 플라스크는 합치고, 산물은 대략 2500 rpm에서 30분동안 원심분리하여 수거한다. 산물은 튜브에 수집하고 30분동안 저속으로 회전시킨다. 밀도는 분광광도계 실사 및 McFarland 탁도계 기준을 이용하여 검사한다. 산물은 원심분리하여 전체 세포를 제거한다. 상층액은 CS 항원에 대한 원액으로 사용한다. 이는 필요한 경우 60℃에서 40분동안 가열하여 불활화시킨다. 건조 중량은 대략 22 ㎎/㎖이다. 산물은 CS 면역원에 대하여 PBS(pH 7.4)에서 1 ㎎/㎖로 희석한다.

실시예 9: 면역원에 대한 CA 항원의 제조

Reinforced Clostridial Medium을 CA 항원 생산에 이용한다. 이는 클로스트리듐 아미노필루스(Clostridium aminophilus)에 대한 부착 항원을 촉진하는 표준 배지이다. 이들 배양액은 엄격한 혐기성 조건하에 성장시킨다. 보존 균주는 #49906에 대한 ATCC에 따라 성장시킨다. 다른 세균에서처럼, 하위배양액은 소량으로 성장시킨다. 티오글리콜레이트 배지(Difco)는 상기 균주로 접종하고 48시간동안 배양한다. 플라스크는 Reinforced Clostridial Medium 액체배지로 접종한다. 상기 배지는 혐기성 가스의 혼합물로 덮는다. 플라스크는 합치고, 산물은 대략 2500 rpm에서 30분동안 원심분리하여 수거한다. 산물은 튜브에 수집하고 30분동안 저속으로 회전시킨다. 밀도는 분광광도계 실사 및 McFarland 탁도계 기준을 이용하여 검사한다. 산물은 원심분리하여 전체 세포를 제거한다. 상층액은 CA 항원에 대한 원액으로 사용한다. 이는 필요한 경우 60℃에서 40분동안 가열하여 불활화시킨다. 건조 중량은 대략 20.5 ㎎/㎖이다. 산물은 CA 면역원에 대하여 PBS(pH 7.4)에서 1 ㎎/㎖로 희석한다.

실시예 10: 난(卵), 닭, 사료에서 항체를 모니터하기 위한 H, 0, WC, A 항원을 이용한 ELISA 평판의 제조

H, 0, WC ELISA: 96 웰 분석 평판(편평 바닥 Costar(A))은 탄수화물 완충액(pH 9.6)에서 다양한 농도의 항원(H, A, 0, WC 또는 이들의 조합: 10 ㎍ - 200 ㎍/㎖)으로 100 ㎕/㎖ 피복하였다. 평판은 최대 18시간동안 22℃ 내지 37℃에 배양하였다. 웰은 흡출하여 교차-오염을 예방하였다. 평판은 390 ㎕/웰의 0.5% BSA로 차단하고 37℃에서 1시간동안 배양하였다. 평판은 네거티브 대조와 파지티브 대조를 이용하여 교대로 피복하였다. 평판은 Tween^TM20을 함유하는 세척 완충액으로 1회 세척하였다. 100 ㎕/웰의 희석된 시료는 중복 웰 방식으로 웰에 첨가하였다. 37℃에서 1시간동안 배양하였다. 염소 항-닭 IgG와 양고추냉이 과산화효소 공액체(Kirkegard and Perry Laboratories; 1:1000 내지 1:3000)를 첨가하였다. 1시간 배양한 이후, 기질(TMB, KPL)을 제조업자의 사용법에 따라 첨가하고, 10분후 0.1 M 인산을 첨가하여 반응을 중단시켰다. 웰의 광학 밀도는 450 nm에서 Dynatech ELISA Reader로 측정하고, 정보는 추가 데이터 분석을 위하여 기록하였다.

실시예 11: 시간에 흐름에서 개별 난(卵)과 혈청의 분석

난은 특정 항원에 대한 항체 반응을 모니터하기 위하여 면역화 기간동안 다양한 시점에서 선택하였다. 선택된 닭은 0일에 모니터하고 4개월동안 월 기준으로 지속하였다. 전란(whole egg)은 껍질로부터 수집하고, 이후 1 ㎖ 시료를 취한다. 상기 시료는 완충액으로 추출하여 항체 함량을 분석한다. H, 0, WC, A 면역원에 대한 표준 ELISA를 분석에 이용하였다. 네거티브 시도(reading)는 OD 시도로부터 감하였다. 혈청 시료는 4차 면역원 주사로부터 2주후에 각 동물로부터 수집하였다.

하기 표에 제시된 데이터는 첫 4개월동안 얻은 결과의 실례이다.

난 시료 일자	H 닭	O 닭	WC 닭	A 닭
1일: 1차 주사이후	0.03 OD	Neg	0.05 OD	Neg
1개월	0.60 OD	Neg	0.05 OD	Neg
5주	0.74	ND	ND	ND
2개월	1.22 OD	1.11 OD	0.88 OD	0.79 OD
3개월	1.00 OD	1.4 OD	0.99 OD	1.4 OD
4개월	1.16 OD	1.4 OD	0.94 OD	1.22 OD
혈청: 1개월	1.4 OD	0.91 OD	1.17 OD	0.97 OD

실시예 12: 난(卵), 닭, 사료에서 항체를 모니터하기 위한 P, CS, CA 항원을 이용한 ELISA 평판의 제조

P, CS, CA ELISA: 96 웰 분석 평판(편평 바닥 Costar(A))은 탄수화물 완충액(pH 9.6)에서 다양한 농도의 항원(P, CS, CA 또는 이들의 조합: 10 ㎕ - 200 ㎍/㎖)으로 100 ㎕/㎖ 피복하였다. 평판은 최대 18시간동안 22℃ 내지 37℃에 배양하였다. 웰은 흡출하여 교차-오염을 예방하였다. 평판은 390 ㎕/웰의 0.5% BSA로 차단하고 37℃에서 1시간동안 배양하였다. 평판은 네거티브 대조와 파지티브 대조를 이용하여 교대로 피복하였다. 평판은 Tween^TM20을 함유하는 세척 완충액으로 1회 세척하였다. 100 ㎕/웰의 희석된 시료는 중복 웰 방식으로 웰에 첨가하고 37℃에서 1시간동안 배양하였다. 염소 항-닭 IgG와 양고추냉이 과산화효소 공액체(Kirkegard and Perry Laboratories; 1:1000 내지 1:3000)를 첨가하였다. 1시간 배양한 이후, 기질(TMB, KPL)을 제조업자의 사용법에 따라 첨가하고, 10분후 0.1 M 인산을 첨가하여 반응을 중단시켰다. 웰의 광학 밀도는 450 nm에서 Dynatech ELISA Reader로 측정하고, 정보는 추가 데이터 분석을 위하여 기록하였다.

실시예 13: H 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 3마리의 White Leghorn과 3마리의 Rhode Island Red는 보존 H 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200 ㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭중 4마리가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다. ELISA H 시도(reading)는 1:10,000 희석에 대하여 평균 1.00 OD, 1:50,000 희석에 대하여 0.265 OD이었다. Leghorn 닭은 만족스럽지 않았지만, 3마리의 Rhode Island Red는 모두 만족스러웠다. 6주후, 평균 ELISA H 시도(reading)는 반응하는 모든 닭에서 1:20,000 희석에 대하여 1.40 OD이었다.

실시예 14: O 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 6마리의 White Leghorn은 보존 O 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭중 5마리가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다. ELISA O 시도(reading)는 1:10,000 희석에 대하여 평균 1.42 OD, 1:50,000 희석에 대하여 0.68 OD이었다. 6주후, 평균 ELISA O 시도(reading)는 반응하는 5마리 닭에서 1:20,000 희석에 대하여 1.15 OD이었다.

실시예 15: WC 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 6마리의 Rhode Island Red는 보존 WC 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200 ㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭중 4마리가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다. ELISA WC 시도(reading)는 1:10,000 희석에 대하여 평균 0.95 OD, 1:50,000 희석에 대하여 0.250 OD이었다. 6주후, 평균 ELISA WC 시도(reading)는 반응하는 5마리 닭에서 1:20,000 희석에 대하여 0.95 OD이었다.

실시예 16: A 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 6마리의 White Leghorn은 보존 A 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200 ㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭중 5마리가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다. ELISA A 시도(reading)는 1:10,000 희석에 대하여 평균 1.40 OD, 1:50,000 희석에 대하여 0.576 OD이었다. 6주후, 평균 ELISA A 시도(reading)는 반응하는 모든 닭에서 1:20,000 희석에 대하여 1.15 OD이었다.

실시예 17: P 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 6마리의 White Leghorn은 보존 P 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200 ㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭중 5마리가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다.

실시예 18: CS 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 6마리의 White Leghorn은 보존 CS 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200 ㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭중 5마리가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다.

실시예 19: CA 면역원으로 닭의 면역화

6마리의 선택된 산란 닭, 다시 말하면 대략 19주령된 6마리의 Red Sex-Linked 잡종은 보존 CA 면역원을 주사하였다. 1주일 주기로 4가지 주사(500 ㎍, 100 ㎍, 200 ㎍, 250 ㎍)를 제공하였다. 혈청 시료는 마지막 초기 주사로부터 2주후에 수집하였다. 추가 면역이 필요하면, 각 추가 면역(매 6개월)에 100 ㎍을 제공하였다. 4주 이내에, 6마리의 닭 모두가 난(卵)에 우수한 항체를 생산하였다.

실시예 20: 원액 생산 전란 반응물의 제조

선택된 닭은 전란 반응물의 생산 집단(batch)을 생산하는데 이용되는E. coli0157:H7에 대한 4가지 면역원 군 또는 혐기성 생물에 대한 3가지 면역원 군으로부터 합동시켰다. Sterling(U.S. Patent No. 5,753,228)은 난의 선별과 이들의 저장에 관한 훌륭한 개관을 제시한다. 난은 무작위화시키고 껍질을 제거하였다. 전란은 잘 혼합하고 표준 조건(3.5분동안 60℃(140℉))하에 저온살균하였다( Charley, H. and C. Weaver, 3rd Edition, Foods: a scientific approach, Merrill-Prentice Hall, p. 350, 1998). 일단 저온살균된 시료는 활성을 검사하고, 건조하거나 담체에 분무할 때까지 4℃에 저장하였다. 250 ㎕ 시료를 분석하였다. ELISA 결과의 실례를 제시한다:

저온살균된 전란:E. coli0157:H7

면역원	희석	O.D.
WC	500	0.532
WC	2500	0.113
H	500	0.466
H	2500	0.115
O	500	0.338
O	2500	0.128
A	500	0.588
A	2500	0.155

저온살균된 전란: 혐기성 생물

면역원	희석	집단#1	집단#2	집단#3
CA	100	0.339	0.275	0.627
CA	500	0.104	0.296	0.201
P	100	0.724	0.882	0.576
P	500	0.248	0.594	0.651
CS	100	0.457	0.268	0.650
CS	500	0.304	0.143	0.476

실시예 21: 사료 첨가 담체의 코팅

전란이 급수(water supply)에 또는 완전 분말된 난으로 건조 형태에 분배될 수 있긴 하지만, 담체의 사용은 상기 물질을 균일한 방법으로 분포시키는데 도움이 된다. 이는 표준 사료와의 혼합을 용이하게 한다. 다수의 담체가 필요한 사료 첨가제로서 운반체를 제공하는데 사용될 수 있다. 가공되지 않고 정제되고 탈피된 형태의 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp) 등. 저온살균 생산된 전란 제조물은 담체에 피복하고 동물에 직접 먹이거나 10-15% 습도로 건조시킨다. 대략 1000 ㎖의 전체 저온살균된 난(卵)은 50 lbs 펠렛된 대두피에 분무한다. 소(cattle)에 바람직한 담체는 펠렛된 대두피이고, 어린 돼지에 바람직한 담체는 펠렛된 대두피의 미세 분말이다. 이들 사료 첨가제는 표준 동물 사료와 혼합한다. 바람직한 수준은 10-15 lbs 사료 첨가제 vs. 2000 lbs 동물 사료이다.

실시예 22: 반응물로 코팅이후 사료 첨가 시료의 분석

시료는 사료 첨가제 집단(batch)을 담체에 피복한 이후 이들 집단으로부터 수집하고 분석하였다. 결과는 아래와 같다:

제품명	수분%	단백질%	지방%	가공이전 섬유%
피복되지 않은 가공이전 대두피	11.59	26.76	9.10	18.63
CAMAS EYE 0157가공이전 대두피	12.35	25.67	8.26	19.46
CAMAS EYE*가공이전 대조 대두피	12.06	24.89	9.92	20.38
피복되지 않은 대두 펠렛	11.65	9.89	2.43	33.47
CAMAS EYE효율 펠렛	12.37	10.19	2.57	33.12

*CAMAS EYE는 본 발명에 따라 생산된 저해물질을 나타낸다.

실시예 23: 시간의 흐름에서 생산 난(卵)의 분석 -- E. coli 0157:H7

전란 제조물의 시료는 초기 면역 계획이 완결된 이후 시간의 흐름에서 활성을 모니터하기 위하여 H, 0, WC, A 면역원에 대한 ELISA 시스템을 이용하여 분석하였다. 각 군으로부터 선택된 동물은 생산 군에 배치하였다. 4개월에서 6개월까지 평균 ELISA OD 시도(reading)(네거티브 감수됨)는 하기 표에 제시한다. 난은 250 ㎕ 전란(whole egg)을 이용하여 시료를 수득하고, PBS 완충액에서 1:500과 1:2,500 희석하며, 적합한 ELISA를 실시하여 각 희석에서 평균 OD 시도를 측정하였다. 네거티브 대조 시도는 각 시도로부터 감한다. 상기 면역원은 우수한 특이성과 함께 동물에서 서로 다른 반응을 보였다. 이들 검사에서 A 면역원이 가장 우수한 반응을 제공하였다. 이들 면역원에 대한 데이터는 아래에 제시한다:

면역원	4개월	5개월	6개월
H: 1:5001:2500	0.3880.085	0.8480.237	0.7180.195
O: 1:5001:2500	0.5930.147	0.7920.294	0.7040.184
WC: 1:5001:2500	0.3980.062	0.7300.273	0.5780.130
A: 1:5001:2500	0.7000.102	1.0140.305	0.9090.224

실시예 24: 시간의 흐름에서 생산 난(卵)의 분석 -- 사료 효율

전란 제조물의 시료는 초기 면역 계획이 완결된 이후 시간의 흐름에서 활성을 모니터하기 위하여 P, CS, CA 면역원에 대한 ELISA 시스템을 이용하여 분석하였다. 각 군으로부터 선택된 동물은 생산 군에 배치하였다. 4개월에서 6개월까지 평균 ELISA OD 시도(reading)는 하기 표에 제시한다. 난은 250 ㎕ 전란(whole egg)을 이용하여 시료를 수득하고, PBS 완충액에서 1:500과 1:2,500 희석하며, 적합한 ELISA를 실시하여 각 희석에서 평균 OD 시도를 측정하였다. 네거티브 대조 시도는 각 시도로부터 감한다. 상기 면역원은 우수한 특이성과 함께 동물에서 서로 다른 반응을 보였다.

면역원	4개월	5개월	6개월
P: 1:5001:2500	1.182 OD0.785 OD	1.128 OD0.489 OD	0.942 OD0.343 OD
CS: 1:5001:2500	0.843 OD0.318 OD	0.989 OD0.356 OD	0.582 OD0.187 OD
CA: 1:5001:2500	1.156 OD0.409 OD	1.087 OD0.282 OD	0.998 OD0.507 OD

실시예 25: 사료 첨가제에서 항체 활성에 대한 분석 -- E. coli 0157:H7

피복된 껍질의 시료는 저온살균, 분무, 건조, 저장이후 활성을 모니터하기위하여 H, 0, WC, A 면역원에 대한 ELISA 시스템을 이용하여 분석하였다. 우수한 항체 반응은 생산 전란 집단(batch)의 처리 및 가공되지 않은 대두피에서 건조이후에 기록되었다. 2가지 집단에 대한 데이터는 아래에 제시한다:

집단: 피복된 껍질	WC 면역원	H 면역원	O 면역원	A 면역원
집단 #1: 1:101:100	0.673 OD0.106 OD	1.103 OD0.236 OD	1.105 OD0.229 OD	1.299 OD0.302 OD
집단 #2: 1:101:100	1.174 OD0.177 OD	1.291 OD0.396 OD	1.180 OD0.327 OD	1.224 OD0.458 OD

실시예 26: 사료 첨가제에서 항체 활성에 대한 분석 -- 사료 효율

피복된 껍질의 시료는 저온살균, 분무, 건조, 저장이후 활성을 모니터하기 위하여 P, CS, CA 면역원에 대한 ELISA 시스템을 이용하여 분석하였다. 우수한 항체 반응은 생산 전란 집단(batch)의 처리 및 가공되지 않은 대두피에서 건조이후에 기록되었다. 15 lbs 피복된 껍질의 1g 시료를 추출하고 분석하였다. 3가지 집단에 대한 데이터는 아래에 제시한다:

집단: 피복된 껍질	P 면역원	CS 면역원	CA 면역원
집단 #1: 1:1001:500	0.067 OD0.057 OD	0.289 OD0.131 OD	0.051 OD0.037 OD
집단 #2: 1:1001:500	0.028 OD0.049 OD	0.039 OD0.015 OD	0.095 OD0.021 OD
집단 #3: 1:1001:500	0.046 OD0.012 OD	0.115 OD0.055 OD	0.136 OD0.012 OD

실시예 27: 사료 혼합이후 활성 항체와 난 단백질의 회수

피복되고 정제된 대두피는 항-E. coli0157:H7 부착 저해물질을 함유하는 생산 전란 반응물로 피복하였다. 사료 첨가제(15 lbs)는 2000 lbs의 표준 소 사료에 첨가하였다. 대조 사료 첨가제는 임의의 닭의 전란으로 생산하였다. 대두피는 상기 제제로 피복하고, 특정 항체를 함유하는 검사 사료 첨가제로 혼합하였다. 혼합된 사료의 시료는 수집하고, 식품에서 난 단백질을 탐지하기 위하여 ELISA WC 면역원 및 상용 ELISA에 대한 활성 항체를 분석하였다(Vertatoxg Quantitative Egg Allergen Test, Neogen). 데이터는 2가지 일량사료(ration) 집단에 대하여 아래의 차트로 제시한다.

혼합 사료	첫 번째 집단	두 번째 집단
검사 시료-첨가제: 1:60001:12000	0.172 OD0.009 OD	0.112 OD0.036
대조 시료-첨가제 없음: 1:60001:12000	0.0490.005	NegNeg
검사 시료-첨가제: 난 단백질	0.958 OD 17 ppm	1.268 OD>20 ppm
대조 사료-첨가제 없음: 난 단백질	0.800 OD 15 ppm	1.050 OD 20 ppm

실시예 28: 소의 사양(feeding)

2가지 소 군은E. coli0157:H7 사료 첨가제(정제된 대두피에 피복됨) 또는 대조 사료 첨가제(대조 난으로 피복되고 특정 부착 저해물질이 없음)를 사양하였다. 동물은 15 lbs 사료 첨가제 vs. 2000 lbs 사료의 비율로 사양하였다. 이들은 매일 동물 개체당 평균 IO lbs이었다. 동물의 체중은 출발 시점에서 대략 1000 lbs이었고 시판 시점에서 1400 lbs 이상이었다. 모든 동물은 매우 건강하게 보였고, 검사 동물은 87일동안 좀더 많은 사료를 사양하였다. 검사 시작 시점에서E. coli0157:H7에 대하여 검사 동물은 5마리가 양성이었고 대조 동물은 1마리가 양성이었다. 사료 첨가제를 사양하고 30일 이내에 모든 검사 동물이E. coli0157:H7에 대하여 음성이었고 30일 초과된 3가지 연속 시료에서 여전히 음성이었다. 시료 채취는 표준 프로토콜을 따랐다. 모든 동물은 이표(ear-tag)를 부착하고 별개의축사에 위치시켰다. 동물은 첫달동안 매주 시료를 채취하고, 이후 시장에 판매할 때까지 2주마다 시료를 채취하였다. 직장으로부터 그래브 시료(grab sample)를 채취하고 무균 표지된 가방에 위치시켰다. 모든 시료는 랩에서 처리 때까지 얼음위에 놓아두었다. 모든 시료는 매일 수집하고 4시간 이내에 처리하였다. 분변 시료는 0.6% 효모 추출물을 함유하는 TSB로 희석하였다. 상기 혼합물 희석액은 cefixime-tellurite 보조물질(DynalO)과 함께 또는 이런 보조물질없이 Sorbitol-MacConkey Agar(Difco)에 선조접종하였다. 추가 검사를 위하여 무색 콜로니를 채집한다. 라텍스 응집 검사를 이용하여 대장균(E. coli) 혈청형(serogroup) 0157(Oxoid dry Spot^TM E. coli0157)을 확인하였다. 양성이면, 개별 콜로니는 SMC 아가 선조접종 평판에서 추가 분리를 위하여 선별하였다. 분리된 콜로니는 EHE. coli0157(Binax, NOWㄾ EHE. coli0157)에 대한 상용 EIA를 실시하였다. 생화학적 검증은 API-20E(Analytab Products)로 실시할 수 있다(Appl. Environ. Microbiol., 62(7) 2567-2570, 1966; J. Clin. Micro. 36(10): 3112, 1998).

E coli0157:H7의 가장 부담스런 특징중의 하나는 적은 개체수로도 인체에 질환을 유발할 수 있다는 점이다. 가령, 인체에서 증상이 나타나는데 독력 살모넬라(Salmonella)는 적어도 10,000개 이상의 개체수가 필요하지만E. coli0157:H7은 10개 정도면 충분하다. 따라서, 상기 미생물을 보유하거나 이런 미생물로 오염된 동물은 도살되는 경우에 16톤 정도의 간고기(ground beef)에 영향을 줄 수 있는데, 부적절하게 제조된 이런 산물은 1회 섭취로도 질환을 유발할 수 있다. 동물이 임의의 한 시점에서 이런 미생물을 보유할 가능성이 낮긴 하지만, 특정 사육장에서 이의 존재 가능성은 높다.

공식적으로 인정된E. coli0157:H7 위협으로부터 소비자를 보호하는 방법은 현재 3가지가 있다. 이들 3가지 방법은 (1) 조리, (2) 증기 저온살균, (3) 방사선 처리인데, 이들 모두 인간과 기계적 오류, 비용, 소비자 저항 등과 같은 문제점을 안고 있다.

숙주의 소화관에 전이증식하는 미생물은 배가하기 위하여 표면에 부착할 수 있는 능력을 보유해야 한다.E. coli0157:H7 역시 이런 규칙을 벗어나지 않는다본 발명의 부착 저해물질은 부착을 강하게 간섭하고, 따라서 표적된 특정 세균이 배가하고 전이증식하는 것을 점증적으로 억제한다. 간단한 일일 사료 첨가제의 운반체를 통하여, 산물은 동물(소는E. coli0157:H7에 감염되지 않는 일시적인 숙주이다)에서 임의의 질환을 치료하지는 않지만 소화관에 거주하는 임의의 박테리아를 제거하고 새로이 도입된 박테리아의 부착을 예방하도록 설계된 특정 항체 제제를 숙주에 필수적으로 공급한다. 이런 부착 저해물질은 숙주 자체에 직접적인 영향을 주지 않고 동물에 원치않는 찌꺼기를 남기지 않으며, 따라서 최종 식품 산물에 영향을 주지 않는다. 이에 더하여, 미생물이 증식되지 못하고 사육장에서 시간의 흐름(예, 사육장에서 120-일 마무리 기간)동안 자연적인 분해를 통하여 동물에 붙어있는 진흙과 똥거름으로부터 소멸되기 때문에, 도살시에 오염의 주요한 잠재적 근원이 제거된다. 불량하게 관리되는 사육장 유거수(runoff)를 통하여 또는 비료로 똥거름의 도포에 의해 다른 식품 공급원을 교차 오염시키는 위험 역시 제거된다.

본원의 기술사상 및 범위를 벗어나지 않는 본 발명의 다양한 개변이 가능하다. 본원에 기술된 특정 구체에는 설명을 목적으로 하고, 본 발명은 첨부된 특허청구범위에 의해서만 한정된다.

Claims

식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 단백질-소모성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간이후, 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

C. 상기 난의 항체-포함 내용물은 껍질로부터 분리하고

D. 상기 분리된 항체 물질은 건조시키고;

E. 건조된 난 항체 산물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

F. 생성된 항체-포함 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 1 항에 있어서, 단백질-소모성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(Peptostreptococcus anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(Clostridiumaminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(Clostridium sticklandii)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서, 아래의 단계가 추가로 포함되는 것을 특징으로 하는 방법:

건조 사료 담체 물질을 제공하고,

상기 담체 물질을 항체-포함 내용물로 피복하여 상기 항체-포함 내용물을 건조시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질을 동물 사료 또는 음용수에 분포시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질 및 동물 사료 또는 음용수를 제공하여 동물의 장관에서 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 3 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 항체-포함 내용물은 건조시키고;

F. 건조된 난 항체-포함 내용물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 내용물 및 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 5 항에 있어서, 아래의 단계가 추가로 포함되는 것을 특징으로 하는 방법:

건조 사료 담체 물질을 제공하고;

상기 담체 물질을 항체-포함 내용물로 피복하여 상기 항체-포함 내용물을 건조시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질을 동물 사료 또는 음용수에 분포시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질 및 동물 사료 또는 음용수를 제공하여 동물의 장관에서 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 6 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의CS 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 항체-포함 내용물은 건조시키고;

F. 건조된 난 항체-포함 내용물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 내용물 및 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 8 항에 있어서, 아래의 단계가 추가로 포함되는 것을 특징으로 하는 방법:

건조 사료 담체 물질을 제공하고;

상기 담체 물질을 항체-포함 내용물로 피복하여 상기 항체-포함 내용물을 건조시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질을 동물 사료 또는 음용수에 분포시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질 및 동물 사료 또는 음용수를 제공하여 동물의 장관에서 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 9 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 항체-포함 내용물은 건조시키고;

F. 건조된 난 항체-포함 내용물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 내용물 및 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 11 항에 있어서, 아래의 단계가 추가로 포함되는 것을 특징으로 하는 방법:

건조 사료 담체 물질을 제공하고;

상기 담체 물질을 항체-포함 내용물로 피복하여 상기 항체-포함 내용물을 건조시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질을 동물 사료 또는 음용수에 분포시키고;

상기 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질 및 동물 사료 또는 음용수를 제공하여 동물의 장관에서 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 12 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물,비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 단백질-소모성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 사료 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 사료 담체 물질은 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복하고;

G. 난의 항체-포함 내용물로 피복된 담체 물질은 동물 사료 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

H. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 담체 물질 및 동물 사료를식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 14 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 사료 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 사료 담체 물질은 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복하고;

G. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 담체 물질은 동물 사료 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

H. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 건조 담체 물질 및 동물 사료를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 16 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의CS 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 사료 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 사료 담체 물질은 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복하고;

G. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 담체 물질은 동물 사료 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

H. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 건조 담체 물질 및 동물 사료를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 18 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 방법에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 사료 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 사료 담체 물질은 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복하고;

G. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 담체 물질은 동물 사료 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

H. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 건조 담체 물질 및 동물 사료를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방하고 상기 동물의 성장을 촉진한다.
제 20 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 고기에서 표적된 콜로니-형성 질환-유발성 면역원의 존재에 의한 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 질환-유발성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시키고;

F. 건조된 난의 항체 산물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 표적된 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 22 항에 있어서, 질환-유발성 면역원은 대장균(E. coli), 리스테리아(Listeria), 살모넬라(Salmonella), 캠필로박터(Campylobacter)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 22 항에 있어서, 건조 사료 담체를 제공하고, 난의 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체를 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 24 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 대장균(E. coli) 면역원의 능력을 저해하여 대장균(E. coli) 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 고기에서 표적된 콜로니-형성 질환-유발성 대장균(E. coli) 면역원의 존재에 의한 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 질환-유발성 대장균(E. coli) 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 대장균(E. coli) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시키고;

F. 건조된 난의 항체 산물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 대장균(E. coli) 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 26 항에 있어서, 건조 사료 담체를 제공하고, 난의 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체를 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 27 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 리스테리아(Listeria) 면역원의 능력을 저해하여 리스테리아(Listeria) 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 고기에서 표적된 콜로니-형성 질환-유발성 리스테리아(Listeria) 면역원의 존재에 의한 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 질환-유발성 리스테리아(Listeria) 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 리스테리아(Listeria) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시키고;

F. 건조된 난의 항체 산물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 리스테리아(Listeria) 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 29 항에 있어서, 건조 사료 담체를 제공하고, 난의 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체를 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 30 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물,비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 살모넬라(Salmonella) 면역원의 능력을 저해하여 살모넬라(Salmonella) 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 고기에서 표적된 콜로니-형성 질환-유발성 살모넬라(Salmonella) 면역원의 존재에 의한 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 질환-유발성 살모넬라(Salmonella) 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 살모넬라(Salmonella) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시키고;

F. 건조된 난의 항체 산물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 살모넬라(Salmonella) 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 32 항에 있어서, 건조 사료 담체를 제공하고, 난의 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체를 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 33 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 캠필로박터(Campylobacter) 면역원의 능력을 저해하여 캠필로박터(Campylobacter) 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 고기에서 표적된 콜로니-형성 질환-유발성 캠필로박터(Campylobacter) 면역원의 존재에 의한 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 질환-유발성 캠필로박터(Campylobacter) 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 캠필로박터(Campylobacter) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시키고;

F. 건조된 난의 항체 산물은 동물 사료 또는 음용수 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

G. 생성된 항체-포함 동물 사료 또는 음용수를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 장관에서 캠필로박터(Campylobacter) 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 35 항에 있어서, 건조 사료 담체를 제공하고, 난의 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체를 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 36 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 고기에서 표적된 콜로니-형성 질환-유발성 면역원의 존재에 의한 질환의 발병률을 실질적으로 감소시키거나 제거하는 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 질환-유발성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 사료 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 사료 담체 물질을 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복하고;

G. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 상기 담체 물질은 동물 사료 전체에 실질적으로 균일하게 분포시키고;

H. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복된 건조 담체 물질 및 동물 사료를 식용 동물에 제공하여 상기 동물의 혹위 또는 장관에서 면역원의 부착을 실질적으로 예방한다.
제 38 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 표적된 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 40 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 식용 단백질을 활용하는 동물의 능력을 감소시키는 것으로 알려진 면역원인 것을 특징으로 하는 방법.
제 41 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 40 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 사람에게 식인성(food borne) 질환을 유발하는 것으로 알려진 면역원인 것을 특징으로 하는 방법.
제 43 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 대장균(E. coli), 리스테리아(Listeria), 살모넬라(Salmonella), 캠필로박터(Campylobacter)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 40 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 45 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 47 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 48 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 50 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 51 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 53 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 54 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 대장균(E. coli)의 대장균(E. coli) 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 대장균(E. coli) 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 대장균(E. coli) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간이후, 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

C. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

D. 상기 분리된 난 항체 부착 저해 물질을 건조시킨다.
제 56 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 57 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 리스테리아(Listeria)의 리스테리아(Listeria) 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 리스테리아(Listeria) 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 리스테리아(Listeria) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간이후, 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

C. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

D. 상기 분리된 난 항체 부착 저해 물질을 건조시킨다.
제 59 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 60 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 살모넬라(Salmonella)의 살모넬라(Salmonella) 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 살모넬라(Salmonella) 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 살모넬라(Salmonella) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간이후, 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

C. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

D. 상기 분리된 난 항체 부착 저해 물질을 건조시킨다.
제 62 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 63 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 상기 면역원은 캠필로박터(Campylobacter)의 캠필로박터(Campylobacter) 항원이고, 상기 방법은 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 캠필로박터(Campylobacter) 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 캠필로박터(Campylobacter) 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간이후, 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

C. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

D. 상기 분리된 난 항체 부착 저해 물질을 건조시킨다.
제 65 항에 있어서, 건조 사료 물질을 제공하고, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 담체 물질을 난의 분리된 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 66 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 표적된 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질의 생산 방법에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 담체 물질을 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복한다.
제 68 항에 있어서, 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 건조 사료 담체 물질을 제공하는 것을 특징으로 하는 방법.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 표적된 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 방법으로 생산되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 70 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 식용 단백질을 활용하는 동물의 능력을 감소시키는 것으로 알려진 면역원인 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 71 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 70 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 사람에게 식인성(food borne) 질환을 유발하는 것으로 알려진 면역원인 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 73 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 대장균(E. coli), 리스테리아(Listeria), 살모넬라(Salmonella), 캠필로박터(Campylobacter)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 70 항에 있어서, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체 물질을 난의 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 75 항에 있어서, 건조 사료 담체 물질은 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 것을 특징으로 세균 부착 저해물질.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 표적된 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질에 있어서, 상기 표적된 면역원에 특이적인 항체를 함입하는 건조된 난 내용물을 함유하는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 77 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 식용 단백질을 활용하는 동물의 능력을 감소시키는 것으로 알려진 면역원인 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 78 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius), 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum), 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 78 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 사람에게 식인성(food borne) 질환을 유발하는 것으로 알려진 면역원인 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 80 항에 있어서, 콜로니-형성 면역원은 대장균(E. coli), 리스테리아(Listeria), 살모넬라(Salmonella), 캠필로박터(Campylobacter)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 세균 부착 저해물질에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원이고, 아래의 단계로 구성되는 방법으로 생산되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 펩토스트렙토코커스 아네로비우스(P. anaerobius)의 P 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 82 항에 있어서, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체 물질을 난의 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 83 항에 있어서, 건조 사료 담체 물질은 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 것을 특징으로 세균 부착 저해물질.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 세균 부착 저해물질에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원이고, 아래의 단계로 구성되는 방법으로 생산되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 스틱란디(C. sticklandii)의 CS 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 85 항에 있어서, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체물질을 난의 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 86 항에 있어서, 건조 사료 담체 물질은 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 것을 특징으로 세균 부착 저해물질.
식용 동물의 혹위 또는 장관에 부착하는 면역원의 능력을 저해하여 이들 면역원의 배가 능력을 감소시킴으로써 식용 동물의 혹위 또는 장관에서 단백질-소모성 면역원의 존재에 의한 식용 단백질의 소모를 감소시켜 식용 동물의 성장을 촉진하는 세균 부착 저해물질에 있어서, 상기 단백질-소모성 면역원은 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원이고, 아래의 단계로 구성되는 방법으로 생산되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원으로 접종하고;

B. 조류 및 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)에서 클로스트리듐 아미노필룸(C. aminophilum)의 CA 항원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 상기 수집된 난의 분리된 항체-포함 내용물을 건조시킨다.
제 88 항에 있어서, 난의 분리된 항체-포함 내용물의 건조는 건조 사료 담체 물질을 난의 항체-포함 내용물과 접촉시켜 달성하는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질.
제 89 항에 있어서, 건조 사료 담체 물질은 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 것을 특징으로 세균 부착 저해물질.
식용 동물의 혹위 또는 장관에서 표적된 콜로니-형성 면역원의 부착을 실질적으로 예방하기 위하여 식용 동물에 투여되는 세균 부착 저해물질에 있어서, 아래의 단계로 구성되는 방법으로 생산되는 것을 특징으로 하는 세균 부착 저해물질:

A. 산란기에 도달한 암컷 조류를 특정 표적된 콜로니-형성 면역원으로 접종하고;

B. 조류에서 표적된 면역원에 대한 항체가 생산될 수 있을 만큼 충분한 기간을 허용하고;

C. 상기 조류에 의해 산란된 난(卵)을 수집하고;

D. 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물을 껍질로부터 분리하고;

E. 건조 담체 물질을 제공하고;

F. 상기 건조 사료 담체 물질을 상기 수집된 난의 항체-포함 내용물로 피복한다.
제 91 항에 있어서, 건조 사료 담체 물질은 콩깍지, 쌀겨, 옥수수, 목화씨 껍질, 증류된 건조 곡물, 비트 펄프(beet pulp)에서 선택되는 것을 특징으로 세균 부착 저해물질.