KR20040084542A - 간기능 활성증진 및 항고혈장지질용 생맥산 두부 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v)두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 간기능 활성증진용 생맥산 두부에 관한 것이다.
본 발명은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v)두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 항고혈장지질용 생맥산 두부에 관한 것이다.
Description
본 발명은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v)두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 간기능 활성증진용 생맥산 두부에 관한 것이다.
또한 본 발명은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v)두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 항고혈장지질용 생맥산 두부에 관한 것이다.
본 발명의 생맥산 두부에서 사용한 한약재는 생맥산이라고 알려져 있는 약재로써 동의보감을 비롯한 전통의학서에 보혈, 양혈하며, 폐음허(肺陰許)로 인한 권태무력(捲怠無力)·호흡곤란·현기증·해수·열감(熱感) 등의 치료 기능을 갖는 대표적인 처방으로 기록된 약으로 이의 구성약재는 오미자, 맥문동, 인삼 및 황기이다. 상기와 같은 약재가 혼합된 생맥산(生脈散)은 내외상판혹론(內外傷辦惑論)에 따르면 맥문동(麥門冬) 12g 인삼(人蔘) 6g 오미자(五味子) 5g으로 구성된 것으로 적응증(適應症)으로 폐음허(肺陰許)로 인한 권태무력(捲怠無力)·호흡곤란·현기증·해수·열감(熱感) 등에 사용되고 효능은 익기생진(益氣生津)하고 렴음지한(斂陰止汗)하는 효능이 있다. 주치는 기음부족(氣陰不足)으로 인한 체권기단나언(體倦氣短懶言), 구갈다한(口渴多汗), 인건설조(咽乾舌燥),하고 맥(脈)이 허약(虛弱)한 증상(症狀)과 구해(久咳)에 의한 상폐(傷肺)로 기음(氣陰)이 양상(兩傷)되어 나타나는 건해다기(乾咳短氣), 자해(自咳)등의 증상(症狀)을 치료한다. 본 발명에서는 상기 생맥산에 호박을 가미하여 추출물을 제조하고 이를 두부응고제로 사용하여 생맥산 두부를 제조하였다.
본 발명의 생맥산 두부에서 두부응고제로 사용된 한약재의 주요 구성분인 오미자는 경동시장에서 구입하였고 오미자, 맥문동, 황기, 호박의 학명 및 주치, 적응증은 하기와 같다. 맥문동 (麥門冬)은 백합과(덤불란科)에 속하며 학명은 치계초(治階草) Ophiopogon japonicus KER-GAWLER[소엽맥문동(小葉麥門冬)]이며 괴근(槐根)의 건조품으로써 포도당, 점액질, 소량의 β-시토스테롤, 비타민 A모양의 물질이 함유되어 있고 윤조생진(潤燥生津), 화담지해(化痰止咳)하다고 알려져 있다. 기원은 백합과 식물인 지계초의 괴근을 건조한 것으로 효능은 양음윤조(養陰潤燥), 생진지해(生津止咳)하고 주치(主治)는 폐조건해(肺燥乾咳), 토혈(吐血), 객혈(喀血), 폐 (肺), 폐옹(肺癰), 열건구조(咽乾口燥), 허로번열(虛勞煩熱)등에 사용된다.
오미자(五味子)는 오미자과에 속하며 학명이 북오미자(北五味子) Schizandra chinensis BALL.(오미자)이며 성숙과실의 건조품으로 시트랄(citral) 등의 정유, 스치잔드린(schizandrin), 비타민 A 모양의 물질, 비타민 C, 유기산, 에테르 추출물(抽出物)에 각종 약리(藥理)가 인정되어 있다. 렴폐자신(斂肺滋腎), 생진렴두,삽정지사(澁精止瀉)하며 중추신경계흥분(中樞神經系興奮), 진해담(鎭咳 痰), 자궁흥분(子宮興奮), 항균(抗菌), 트랜사민아제(Transaminarze) 강하작용(降下作用)이 인정되고 폐신양허(肺腎陽虛)에 사용된다. 본품은 오미(五味)를 고루 갖추고 있는데, 특히 산(酸)· 미(味)가 탁월하므로 소모된 폐기(肺氣)를 수렴(收斂)하여 익기생진(益氣生津)하고, 아울러 익신기(益腎氣)하여 진원(眞元)을 고섭(固攝)한다. 그 성질이 따뜻하되 건조하지 않아 폐신(肺腎)의 음허(陰虛)와 양허(陽虛)를 막론하고 모두 사용할 수 있다. 일반적으로 폐허(肺虛)로 인한 천해(喘咳), 자한(自汗), 도한(盜汗), 신허(腎虛)로 인한 골정(骨精), 구사불지(久瀉不止) 등을 치료하는 데 사용한다.
인삼(人蔘)은 오갈피나무과에 속하며 인삼(人蔘) Panax ginseng G.A.MEY.(인삼)의 근(根)의 건조품으로서 파나센(panacene), 파나퀼론(panaquilon), 파나신 (panaxin), 진세닌(ginsenin), 인삼산(人蔘酸), 비타민 A, B1, B2, C, 자당, 포도당, 과당, 맥아당, 초인(choine), 무기염, 고미질(苦味質), 점액(粘液)등을 함유하고 있으며 대보원기(大補元氣), 안신익지(安神益智), 건비익기(健脾益氣), 생진(生津)하며 신경계흥분(神經系興奮), 부신피질기능흥분(副腎皮質機能興奮), 성선자극(性腺刺戟)호르몬 모양의 작용, 강심, 혈당강하(血糖降下), 소화흡수와 신진대사 항진(亢進), 항이뇨(抗利尿), 항과민증(Anaphylaxis)등에 작용한다. 주로 급성 쇼크와 만성쇠약자에게 사용한다.
황기(黃耆)는 콩과에 속하며 Astragalus membranaceus BGE.(황기)의 뿌리의 건조품으로 염산, 코린(corin), 아미노산등을 함유하고 있으며 보기승양 (補氣升陽), 탁독배농(托毒排膿)하다. 본품은 기허(氣虛)를 치료하는 요약(要藥)으로 알려져 있으며 기허불함(氣虛不陷)인 경우에 사용하면 보기승양(補氣升陽)하고, 표허불고(表虛不固)인 경우에 사용하면 고표지한(固表止汗)하며, 기혈부족(氣血不足)에 사용하면 익기생혈(益氣生血)하며, 기허부종(氣虛不腫)에 사용하면 온양이수(溫陽利水)하고, 기허혈비(氣虛血痺)에 사용하면 온경화혈(溫經和血)한다. 호로(葫蘆)는 박과에 속하며 Lagenaria siceraria(MOLINA.) STANDL.(밤나무꽃)의 과실(호롱박)로써 포도당, 펜토산 등을 함유하고 있고 이수(利水), 해열(解熱, 거습소종( 濕消腫)에 사용한다.
본 발명은 장기간의 알코올 섭취로 발생된 간기능 장애에 오미자, 인삼, 황기, 맥문동, 호박 등의 한약재를 복합처방한 생맥산 뿐만 아니라 이 생맥산으로 응고시킨 두부가 상당한 회복효과를 나타내는 것을 알 수 있으며 장기 투여하였을 때 간기능 장애의 회복기능이 생맥산을 단독으로 투여했을 때 보다 현저히 증가함을 알 수 있으며 혈액 중 높은 콜레스테롤 농도가 동맥경화증 등 심장순환기계 질환 유발의 주요인자로 작용하기 때문에 각 개인의 혈장 콜레스테롤 농도를 낮추는 약품과 기능성물질 개발에 세계적으로 많은 연구와 노력이 진행되고 있으며 특히 인체에 부작용이 적은 천연물로부터 위의 약재, 또는 기능성물질을 개발할 수 있으며 신규의 간기능활성증진화제 및 천연 고지혈증 치료제로서 개발할 수 있다.
도 1은 실험동물 Sprague-Dawley(수컷)의 시료 투여 후 4주 동안의 성장과 체중변화량을 측정한 결과를 나타난 것이다.
도 2는 실험동물 Sprague-Dawley(수컷)의 시료 투여 후 4주 동안의 성장과 체중변화량을 측정한 결과를 나타난 것이다.
도 3은 일반두부 투여군(T1), 생맥산 두부 투여군(T2) 및 생맥산 투여군(T3)의 간 보호활성효과를 알아보기 위해 4주 간 시료 투여 후 혈장 AST 및 ALT 수치의 변화를 나타낸 것이다.
도 4는 일반두부 투여군(T1), 생맥산 두부 투여군(T2) 및 생맥산 투여군(T3)의 간 보호활성효과를 알아보기 위해 4주 간 시료 투여 후 혈장 AST 및 ALT 수치의 변화를 나타낸 것이다.
도 5는 혈장 트리글리세리드 함량을 나타낸 것이다.
도 6은 혈장 내 콜레스테롤 함량을 나타낸 것이다.
본 발명은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v)두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 것을 특징으로 하는 간기능 활성증진용 생맥산 두부에 관한 것이다.
또한 본 발명은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v)두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 것을 특징으로 하는 항고혈장지질용 생맥산 두부에 관한 것이다.
본 발명에서 사용한 생맥산 두부는 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 60g에 증류수 1500mL를 첨가하여 동일한 방법으로 오미자, 호박 및 기타 한약재 혼합 추출물을 제조한 후 콩가루를 증류수에 첨가하여 10%(v/v) 두유액을 제조한 후 40분간 끊여서 두유액을 제조하고 여과한 후 두유에 두부응고제로써 상기 단계에서 제조한 오미자, 호박 및 기타한약재 혼합 추출물을 10%(v/v) 첨가하고 양성대조군으로 20% 염화마그네슘 용액 2%(v/v)를 첨가하여 두부를 제조한다. 본 발명에서 사용한 생맥산 두부를 제조하기 위한 오미자, 호박 및 기타한약재 혼합 추출물은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박을 각각 50∼200g에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 제조하였다.
또한 본 발명에서 사용한 생맥산 두부를 제조하기 위하여 오미자, 호박 및 기타한약재 혼합 추출물을 제조하였다. 오미자, 호박 및 기타한약재 혼합 추출물은 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 60g(총 300g)에 증류수 1500 mL을 첨가하여 2시간 30분 동안 약탕기(대웅약탕기)에서 추출한 후 가제를 이용하여 1차 여과하고 8,000×g에서 15분간 원심분리한 엑기스를 4℃에 보관하였다가 사용하였다.
본 발명에서 사용한 생맥산 두부를 제조하기 위하여 콩가루 100g에 증류수 1000mL를 첨가하여 통상적인 10%(v/v) 두유액을 제조한 후 잘 저으면서 상기 시료를 40분간 끊였다. 이때 기포가 발생하면 4∼5방울의 콩기름을 첨가하였다. 상기 끊인 두유액을 가제를 사용하여 여과한 후 두유(soybean milk)와 커드(bean curd refuse)를 분리하였다. 분리한 두유를 92℃까지 냉각한 후 50mL의 두유를 비커에 분주하였다. 비커에 두부응고제로써 상기에서 오미자, 호박 및 기타한약재 혼합 추출물을 각각 10%(v/v) 첨가하여 혼합하였으며 양성대조군으로 20% MgCl2용액 2%(v/v)를 첨가하였으며 음성대조군으로는 증류수를 첨가하였다. 상기 두부응고제를 첨가한 시료를 실온에서 1시간 방치하여 두부를 제조하였다.
실험예 1: 실험동물 및 실험군의 분류
실험동물은 체중이 100 ±10g인 Sprague Dawley종의 4주된 웅성 흰쥐를 대한 실험 동물센터에서 구입하여 다시 4주간 건국대학의 동물 사육실에서 적응시켰다. 4주간 적응시키는 동안에 사육실의 온도와 습도는 각각 22 ±2℃, 55 ±5℃로 항온항습을 유지하였다. 식이는 고형사료(삼양사 제품)와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다.
4주간 적응시킨 체중이 350g(8주령) 전후의 흰쥐 7마리를 한 군으로 하여 정상대조군(Normal Control), 음성대조군(Negative Control), 양성대조군(Positive Control) 및 실험군(Test group)으로 분류하였다. 음성대조군은 알코올과 물을, 양성대조군은 시판되고 있는 J사의 숙취해소제(숙취해소 및 간기능회복 기능)와 알코올을 섭취하도록 하였다. 실험군은 알코올과 시판되고 있는 P사의 일반두부를 투여한 T1군(이하 T1으로 표기), 알코올과 생맥산으로 응고시킨 두부를 투여한 T2군(이하 T2로 표기), 알코올과 생맥산(오미자 + 인삼 + 맥문동 + 황기 + 호박)을 투여한 T3군(이하 T3로 표기)으로 설정하였다. 이때 식이는 고형 사료(삼양사 제품)를 자유 공급하였고 알코올은 쥐 한 마리 당 5g/kg.bw/day를 섭취하도록 계산하여 매일 음용수에 희석하여 공급하였다. 각 군의 처리는 표 1과 같다.
표 1. Composition of Groups
실험예 2: 시료의 제조 및 투여
일반두부는 시중에서 구입하였고, 생맥산 두부는 10% 두유액에 두유액 양의 10%만큼의 생맥산으로 실험실에서 직접 두부를 응고시켰다.
일반두부와 생맥산 두부는 60㎏ 성인이 하루 두부 반모(250g)를 섭취하는 것을 기준으로 하여 350g 흰쥐에 맞는 양을 계산하였고 생맥산은 60㎏ 성인이 하루 한약재를 100g 섭취하는 것을 기준으로 하여 역시 350g 흰쥐에 맞는 양을 계산하여 구강투여하였다.
사육 마지막 날 동물을 overnight로 16시간 절식시키고 에틸에테르로 약하게 마취시킨 상태에서 복부를 절개하고 주사기를 이용하여 후대정맥에서 3∼4㎖ 혈액을 채취한다. EDTA 튜브에 넣어 혈액이 응고하는 것을 방지하였다. 채취한 혈액은 Aspartate aminotransferase(AST), Alanine aminotransferase(ALT), 콜레스테롤, 트리글리세리드 (TG) 분석에 사용하였다. 채혈직후 간과 신장을 적출하여, 즉시 냉각된 생리식염수로 세척하고 여과지로 표면의 물기를 제거한 다음 중량을 측정하였다.
체중은 약물 투여한 날부터 부검하기 전날까지 4주 동안 일주일에 한번씩 같은 시간에 측정하였다. 장기의 중량은 부검 후에 실험동물의 후대정맥을 찾아서 채혈한 후 간, 신장을 각각 적출하고 그 중량을 측정하였다.
실험예 3: 생화학적 검사(AST, ALT, 콜레스테롤, TG)
채혈한 혈액을 30분 동안 실온에 방치한 후 3000 ×g에서 15분간 원심분리 하여 얻은 혈장의 활성치는 AST 키트(Boehringer Mannheim, Germany)을 사용하여다음과 같은 원리로 측정하였다. 혈장중의 AST의 작용으로 aspartic acid와 α-ketoglutamic acid는 oxaloacetic acid와 L-glutamic acid로 변화한다. 이때 생성된 oxaloacetic acid는 조효소 NADH의 존재 하에 MDH의 작용으로 malate로 변화되고 이때 NADH가 NAD+로 산화될 때의 흡광도 감소치를 파장 340 nm에서 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다.
ALT의 활성치는 ALT(Boehringer Mannheim, Germany) 키트를 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다. 혈장중의 ALT 작용으로 L-alanine과 α-ketoglutamine acid는 pyruvic acid와 L-glutamic acid로 변화한다. 생성된 pyruvate는 조효소 NADH의 존재 하에 LDH의 작용으로 lactate로 변화되고 이때 NADH가 NAD+로 산화될 때의 흡광도 감소치를 파장 340nm에서 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다.
트리글리세리드(TG)는 글리세롤 비소거법에 의해 TG 키트 (Boehringer Mannheim, Germany)를 이용하여 자동분석기(Hitachi 747)에서 측정하였고, 콜레스테롤은 enzymatic coloimetric test를 이용하여 T. chol. 키트 (Boehringer Mannheim, Germany)를 사용하여 자동 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다.
모든 실험 결과 측정치는 일변수 분석법을 사용하여 통계처리 하였으며 Student's T-test를 이용하여 p<0.5 수준에서 각 실험군 간의 유의성을 검증하였다. 모든 자료는 mean ±standard deviation으로 나타내었다.
실험예 4: 성장과 체중변화량 및 장기중량변화
Pirola와 Lieber 등[참조: Piola RC and Lieber CS. Energy wastage in rats given drugs that induce microsomal enzymes.J Nutr105: 1544-1548, 1975]은 쥐에게 알코올을 섭취시켰을 때 체중증가가 저하되었다는 연구 결과를 보고한 바 있고, 이들의 또 다른 연구[참조: Piola RC and Lieber CS. The energy cost of the metabolism of drugs, including ethanol,Phamacology7: 185, 1972]에 의하면 사람이 전체 에너지 중 50%를 당질 대신 알코올로 섭취하였을 때 체중이 감소되었다는 연구 결과를 제시하였다. 이러한 이유는 알코올 섭취로 인해 산소의 소비가 증가되고 대사율이 증가되며 세포 내 마이크로솜에서 알코올 산화기구의 ATP 생성이 저하되기 때문이다.[참조: Gruchow HW, Sobocinski KA, Barboriak JJ and Scheller JG. Alcoholconsumption, nutrient intake and relative body weight among U.S. adults.Am J Clin Nutr42: 289-595, 1985]
본 발명의 결과도 이와 유사한 경향을 나타내었는데 실험동물 Sprague-Dawley(수컷)의 시료 투여 후 4주 동안의 성장과 체중변화량을 측정한 결과 표 2, 도 1 및 도 2에 나타난 바와 같다. 즉, 알코올을 투여한 음성대조군이 다른 군들에 비해 유의적으로 낮은 체중변화량을 나타내었고 한약재를 투여한 T1군과 생맥산 두부를 투여한 T2군 및 생맥산을 투여한 T3군은 음성대조군에 비해 체중이 정상대조군에 가까운 유의성 있는 증가를 나타내었고 특히 생맥산으로 응고시킨 두부를 투여한 T2군에서 현저한 체중증가 효과를 나타내었다. 반면 일반두부를 투여한 T1군은 음성대조군과 비슷한 체중변화량을 보임으로써 알코올 섭취로 인한 체중감소를거의 회복하지 못하였음을 나타낸다.
실험예 5: 장기의 중량
에탄올을 장기적으로 섭취하면 지방간 및 간장의 섬유화로 간이 비대해지게 된다[참조: Han, B. H., M.H. Park, L.K. Woo and Y.N. Han. (1979) Studies on the anti-oxidant components of Korea Ginseng,Korea Biochem. J. , 12 : 33] 간의 중량은 알콜 섭취에 의해 간 조직 내에 지질이 축척됨으로써 알콜을 섭취시킨 모든 군에서 증가되었다는 연구보고[참조: Levy, R.I., Bonnel, M. and Ernst, N.D. (1976)J. Am. Dieter. Assoc., 58 : 406∼417. 및 Lieber, C.S., Don P. Jones. and M. DeCarli. (1965)Am. J. Clin. Nutr., 44(6) : 1009]와 본 실험 결과도 유사한 경향을 나타내었다. 표 2에 나타난 결과를 보면 알코올을 장기 투여한 음성대조군은 알코올을 투여하지 않은 정상대조군에 비해 대체중간비율(실험동물 체중 100g 당 간중량 %)이 유의적으로 증가하여 지방간 및 간장의 섬유화가 진행되었음 알 수 있었고 따라서 알코올을 장기 투여하면 간이 비대해진다는 위의 보고와 일치함을 알 수 있었다. 그에 반해 생맥산이나 생맥산으로 응고시킨 두부를 투여한 T2군과 T3군은 대체중 간비율이 정상대조군에 가까운 회복세를 나타내어 장기간의 알코올 투여로 인한 지방간 및 간장의 섬유화에 치료 및 개선 효과가 있는 것으로 나타났다. 대체중신장비율(실험동물의 체중 100g 당 신장중량 %)은 모든 실험군이 음성대조군에 유의성(p<0.5)을 보였고 정상대조군에 가까운 수치를 보여 알코올 섭취로 인해 손상된 신장의 회복에 효과가 있음을 나타내었다.특히 T2군과 T3군이 회복효과를 보였고 양성대조군과 T1군 역시 T2군이나 T3군에는 미치지 못하지만 다소 감소된 수치를 나타내 효과가 있음을 나타내었다.
표 2. Total body weight gains and the weight ratio of liver and kidney
실험예 6: 혈장 AST, ALT 효소활성도 변화
표 3과 도 3, 도 4는 일반두부 투여군(T1)과 생맥산 두부 투여군(T2), 그리고 생맥산 투여군(T3)의 간 보호활성효과를 알아보기 위해 4주 간 시료 투여 후 혈장 AST, ALT 수치의 변화를 나타낸 것으로 AST는 L-Aspartate + α-ketoglutarate 에 반응하여 oxaloacetate + glutamate 를 생성시키며 oxaloacetate를 pyruvate로 변화시키는 과정에 참여하는 효소이며, ALT 는 DL-Alanine + α-krtoglutarate 에 반응하여 pyruvate + glutamate 을 생성시키는 전이 효소로 이 효소들은 그 활성 치가 증가하면 간 기능이 저하되었음을 알려주므로 간 질환 판정효소로 알려져 있다.
표 3 및 도 3에 나타난 바와 같이 normal control의 혈장 중 AST 치는 84.43 ±47.88 U/L였으나 알콜을 장기간 투여한 음성대조군의 AST 수치는 254.57 ±463.20 U/L로 약 3배 가량의 상승을 보여 장기간의 알코올 투여로 인해 간손상이 유도되었음을 알 수 있었다. 이에 반해 T2군과 T3군은 61.00 ±3.78 U/L, 64.80 ±6.24 U/L의 AST 활성치를 나타내 음성대조군은 물론 양성대조군(positive control)의 70.29 ±12.60 U/L과 비교했을 때 매우 뛰어난 AST 상승 억제효과를 나타낸 것을 알 수 있었으며 알코올과 함께 일반두부를 투여한 T1군은 78.40 ±36.77 U/L로 AST 상승 억제 효과를 나타내긴 했지만 유의성(p<0.5)을 보이지는 않았다.
표 3 및 도 4에 ALT 효소 활성치를 나타내었다. 정상군의 ALT 수치는 44.00 ±9.04 U/L로 나타났으며 이에 비해 음성대조군은 215.43 ±428.93 U/L으로 정상군에 비해 매우 높은 수치를 나타내어 장기간의 알코올 투여로 인한 간손상을 확인할 수 있었다. T2군과 T3군은 각각 34.14 ±5.49 U/L 및 36.40 ±8.50 U/L으로 정상군보다도 유의적으로(p<0.5) 낮은 수치를 나타냈으며 알코올과 함께 일반두부를 투여한 T1군 역시 T2군이나 T3군에는 미치지 못하지만 37.83 ±6.57 U/L로 낮은 활성치를 보였다.
일반적으로 알코올의 장기 섭취는 AST 및 ALT의 활성치를 증가시키는 경향이 있으며 이는 곧 간 기능의 활성이 감소됨을 시사해주는 것이다. 간기능이 저하될 때 간에서 제일 먼저 나타나는 임상증상의 하나가 AST, ALT 활성의 증가로 볼 수 있다[참조: Kien, C.L. and H.E. Ganther (1983) Manifestations of chronic selenium deficiency in a child receiving total parenteral nutrition.Am. J. Clin. Nutr.37 : 319∼328. 및 Thompson, J.N. and M.L Scott (1970) Impaired lipid and Vitamin E absorption related to atrophy of the pancreas in selenium-deficient chicks.J. Nutr. 100 : 797∼809]. 특히 혈장 ALT는 간세포 변성과 괴사를 예민하게 반영하여 상승하기 때문에 특히 간 담도 질환의 유력한 지표로서 널리 이용되고 있다[참조: 김순호, 손한철, 이은엽, 장철훈 (1999) 최신 임상검사진단학, 계측문화사, pp. 50∼52].
본 발명에서 나타난 결과를 살펴보면 장기간의 알코올 섭취로 발생된 간기능 장애에 오미자, 인삼, 황기, 맥문동, 호박 등의 한약재를 복합처방한 생맥산 뿐만 아니라 이 생맥산으로 응고시킨 두부가 상당한 회복효과를 나타내는 것을 알 수 있으며, 장기 투여하였을 때 간기능 장애의 회복기능이 생맥산을 단독으로 투여했을 때 보다 현저히 증가함을 알 수 있었다.
표 3. Enzyme activity of AST and ALT in plasma
실험예 7: 혈장 트리글리세리드 함량
표 4와 도 5에 혈장 트리글리세리드 함량을 나타내었다. 알코올만을 장기 투여한 음성대조군은 73.71 ±61.20 mg/dL로 정상대조군의 39.57 ±8.62 mg/dL에 비해 혈장 내 트리글리세리드 함량이 현저히 증가하여 장기간의 알코올 투여로 인해 고지혈증이 유도된 것을 알 수 있었다. 보고된 바에 의하면 장기간의 알콜 섭취는 트리글리세리드 함량을 현저하게 높여주어 지방간을 유도하며, 특히 만성적 알콜 섭취는 지방간을 초래하여 영양불량의 주요원인이 되는데[참조: Rahimtoola SH. (1985) 콜레스테롤 and coronary heart disease.J. Am. Med. Assoc.253 : 2094∼2095 및 Castelli WP, Wilson PW, Levy D, Anderson K. (1990) Serum Lipids and risk of coronary artery disease.Atheroscl. Rev. 21 : 7∼10.] 이로 인한 음식물의 섭취감소 특히 단백질, methionine, choline, vitamin E, Se 등의 항 지방간 인자들의 결핍을 초래한다[참조: Cutta, S.K., P.A. Miller, L.B. Greenberg and O.A. Levander (1983) Celenium and acute alcoholism.Am. J. Clin. Nutr.38 : 713∼718].
본 발명에서 결과 T1군은 30.20 ±4.71 mg/dL, T2군은 26.57 ±1.68 mg/dL, T3군은 27.29 ±6.96 mg/dL의 혈장 내 트리글리세리드 함량을 나타내어 음성대조군과 비교할 때 T2군과 T3군이 현저히 고지혈증을 개선시키는 유의성 있는(p<0.05, p<0.01) 연구 결과를 나타내었으며 이는 생맥산(오미자, 인삼, 맥문동, 황기, 호박)이나 또는 생맥산으로 응고시킨 두부가 매우 효과적으로 고지혈증을 치료 또는 개선할 수 있다.
실험예 8: 혈장의 총 콜레스테롤 함량
표 4와 도 6에 혈장 내 콜레스테롤 함량을 나타내었다. 정상군의 95.71 ±6.86 mg/dL에 비해 음성대조군의 혈장 내 콜레스테롤 함량은 113.80 ±38.19 mg/dL로 증가하여 혈장 내 트리글리세리드 함량의 경우와 마찬가지로 장기간의 알코올 투여로 인해 고지혈증이 유발되었음을 알 수 있었다. 실험군 중 T1군은 86.17 ±5.58 mg/dL, T2군은 85.00 ±5.76 mg/dL 및 T3군은 84.00 ±9.20 mg/dL의 수치를 나타내어 모든 실험군에서 현저히 콜레스테롤 수치를 감소시키는 유의성 있는(p<0.05) 결과를 나타내어 뛰어난 고지혈증 개선 및 치료 효과를 기대할 수 있는 가능성을 나타내었다.
혈액 중 높은 콜레스테롤 농도가 동맥경화증 등 심장순환기계 질환 유발의 주요인자로 작용한다는 보고[참조: Rahimtoola SH. (1985) 콜레스테롤 and coronary heart disease.J. Am. Med. Assoc.253 : 2094∼2095; Castelli WP, Wilson PW, Levy D, Anderson K. (1990) Serum Lipids and risk of coronary artery disease.Atheroscl. Rev. 21 : 7∼10; 및 Miettinen TA. (1987) Dietary fiber and lipids.Am. J. Clin. Nutr. 45 : 1237∼1242]에 비추어 각 개인의 혈장 콜레스테롤 농도를 낮추는 약품과 기능성물질 개발에 세계적으로 많은 연구와 노력이 진행되고 있으며 특히 인체에 부작용이 적은 천연물로부터 위의 약재, 또는 기능성물질을 개발하였을 경우 그 부가가치는 막대하리라고 예상된다. 이러한 관점에서 볼 때, 본 연구의 결과들은 신규 천연 고지혈증 치료제로서의 가능성을 제시해 준다.
표 4. Concentration of plasmid lipid in rat.
실험예 9: 생맥산이 생체에 미치는 아급성 독성실험
생맥산이 생체에 미치는 아급성 독성을 실험하기 위하여 실험동물은 체중이 250 ±10g인 Sprague-Dawley(SD)계의 7주된 웅성 흰쥐를 대한 실험 동물센터에서 구입하여 10일간 본 대학의 동물사육실에서 적응시켰다. 적응시키는 동안에 사육실의 온도와 습도는 각각 22 ±2℃, 55 ±5℃로 항온, 항습을 유지하였고 식이는 고형사료(삼양사)와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다.
10일 간 사육실에 적응시킨 체중이 300 g 전후의 흰쥐 6마리를 한 군으로 하여 정상대조군(Normal control group) 및 실험군(Test group)으로 분류하였다. 정상대조군은 사료와 물을 자유 섭식토록 하였으며 매일 오전 11시 30분 2㎖의 증류수를 경구 투여하였다. 실험군 1(이하 T1로 표기)은 사료와 물을 자유 섭식토록 하였으며 매일 오전 11시 30분 생맥산 2㎖을 경구 투여하였다. 이때 식이는 삼양사의 고형사료를 자유 공급하였으며 각 군의 처리는 표 5와 같다.
표 5. Composition of Groups
한약시료는 경동약재시장에서 구입한 인삼(Panax ginsengC. A. Meyer, 충청남도 금산산), 황기(Astragalus membranaceusBUNGE, 강원도 양양산), 오미자(Schizandra chinensis), 맥문동 (Liriope platyphylla) 및 호박 (Cucurbita spp.)을 각각 20g을 혼합하여 총 100g의 한약재에 3차 증류수 1,000㎖을 첨가하여 2시간 30분 동안 끓인 후(대웅약탕기, DWP-2000M) 거즈로 1차 여과하고, 3MM Paper로 2차 여과한 후 최종 volume을 400㎖로 하여 4℃ 냉장고에 보관하면서 사용하였다. 생맥산추출물 400㎖를 사람에게 1일 투여하는 dose로 계산하여 300g의 랫트에게 28일 동안 매일 2㎖ 씩 경구투여 하였다.
시료 투여 시 일반상태 이상유무 관찰하기 위하여 매일 적어도 2회 이상 동물의 일반상태를 세밀히 관찰하였다. 일반상태로서 피부, 피모, 안·점막, 배변, 운동 및 패턴 등에 대하여 이상상태의 발현시간, 정도, 지속시간을 관찰하였고 또 서로에 대한 공격성의 증가 유무, 자해 유무, 조직의 자기융해 등을 면밀히 관찰 체크하였다. 그리고 군마다의 동물 수를 항상 확인하여 시험동물의 실종을 체크하였다.
부검 후 각 장기의 이상유무 관찰하기 위하여 부검 후에는 복강 내 각 기관들의 색깔, 크기, 외형적 변화 등을 육안으로 관찰하여 이상 유무를 체크하고 간장과 신장은 보존액에 보존하였다.
사망률 측정을 위하여 시료 투여 28일 간 각 군의 랫트 사망률을 측정하였다. 또한 체중 측정(1회/1주일) 및 기관중량 측정(부검 후)을 위하여 체중은 시료 투여 후 부검하기 전날까지 4주 동안 일주일에 한번씩 같은 시간에 측정하였으며 장기의 중량은 부검 후에 실험동물의 후대정맥을 찾아서 채혈한 후 각 군의 실험동물의 간 및 신장을 정확히 적출하고 각각의 중량을 측정하여 대체중 장기비율을 계산하였다.
섭이량 및 섭수량 측정을 위하여 시료 투여 28일 간 1회/1일, 매일 동일시간에 각 군의 섭이량 및 섭수량을 측정하여 이상유무를 관찰하였다.
혈액학적 검사(Hematological values 및 CBC differentiation 측정)를 위하여 EDTA tube에 채워진 혈액은 곧바로 잘 흔들어 균등질이 되게 하고 Coulter?JT(coulter electronics Inc, USA, PN 4235846B)로 WBC(White Blood Cell, 백혈구), RBC(Red Blood Cell, 적혈구), HGB(Hemoglobin, 헤모글로빈), HCT (Hematocrit, 혈액용적백분율), 혈소판(Platelet)을 측정하였다. 에탄올에 12시간 담근 후 깨끗이 세척한 slide glass에 면봉막대로 혈액을 도말하여 공기 중에서 건조한 후 Wright stain(Yong Dong pharm, Co. Kyungki, Korea)액을 10방울 떨어뜨려 3분간 고정염색하고 Wright 완충 용액(Yong Dong pharm, Co. Kyungki, Korea) 10방울로 충분히 혼합시켜 5∼6분간 염색하였다. 이때 침사가 고착하지 않도록 유의하여 검경에 불편을 최소화하였다. 이 slide glass는 spray를 사용하여 삼차증류수로 조심스럽게 수세하고 실온에서 건조하였다. 충분히 마른 후 oil immersion하에서 cover slide를 사용하지 않고 검경하였다. Manual WBC differential counter를 사용하여 백혈구를 종류별로 구별하면서 총 백혈구수 백개를 세어서 백분율로 분포를 측정하고 granularcytes는 coulter 결과와 이중확인(double check) 하였다. 망상적혈구(reticulocyte)빈도는 capillary를 사용하여 3차 증류수에 용해시켜 여과 후 실온에 보관중인 1% new methylene blue(sigma)를 혈액과 동량으로 잘 섞어 3∼5분 방치하고 깨끗이 준비된 slide glass에 도말하였다. Reticuolcyte count는 1000개의 적혈구를 계수하는 동안에 나타나는 reticulocyte의 빈도를 백분율로 나타내었다.
혈액생화학적 검사(총단백, 총콜레스테롤, albumin, AST, ALT, alkaline phosphatase, 총bilirubin 측정)를 위하여 EDTA freed tube에 채워진 혈액을 30분 동안 실온에 방치한 후 3000 ×g에서 15분간 원심분리 하여 얻은 혈청의 Aspartate aminotransferase(AST) 활성치는 AST kit(Boehringer Mannheim, Germany)을 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다. Alanine aminotransferase(ALT)의 활성치는 ALT(Boehringer Mannheim, Germany)kit을 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다.
Total 콜레스테롤(T-Chol.)은 enzymatic coloimetric test를 이용하여 T. chol. kit(Boehringer Mannheim, Germany)를 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi747)로 측정하였다. Albumin은 pH 4.2에서 BCG(Brom Cresol-Green)과 결합하여 화합물을 형성하는데 이때의 흡광도를 ALB(Boehringer Mannheim, Germany)kit을 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다.
Alkaline phosphatase(ALP)는 IFCC 검사 원리 하에 ALP(Boehringer Mannheim, Germany) Kit을 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다. Total bilirubin(T-Bil.)은 DPD method 하에 Bil-T(Boehringer Mannheim, Germany) Kit을 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)로 측정하였다. Total protein(TP)은 Biuret method 하에 TP(Boehringer Mannheim, Germany) Kit을 사용하여 자동 생화학 분석기(Hitachi 747)를 이용하여 측정하였다.
뇨검사(pH, 뇨잠혈, 뇨단백, 뇨당, 뇨 케톤의 측정)를 하기 위하여 부검하기 전날 각 군의 실험동물을 각각 한 마리씩 에탄올로 소독된 깔짚이 깔려있지 않은 cage에 넣고 뇨를 배출하기를 기다린 후, 배출된 뇨를 멸균된 캡 튜브에 담은 후, 지시 시험지(Serotech Korea Co. Ltd., Seoul)법을 이용하여 각각의 실험동물의 뇨pH, 뇨단백, 뇨당, 뇨케톤 및 뇨잠혈의 정도를 검사하였다.
사육 마지막날 동물을 overnight로 16시간 절식시키고 체중을 측정하였다. 체중 측정이 끝난 SD계의 랫트를 25㎝ 지름의 데시케이터에 넣고, 증류한 무수 에테르(T.J. Baker Analized ACS reagent, USA)로 3∼4분간 마취시킨 후 해부대에서 복부(ventral)가 보이도록 놓고 네다리를 압핀(thumb tag)으로 고정하였다. 알콜로 복부 전면을 소독한 후 forcep으로 복부피부를 집어서 해부가위로 정중선을 따라서 절제하고, 해부칼로 장기가 보이도록 절개하였다. 0.85% saline(Shinyo purechemicals Co. LTD, Japan)으로 세척하고, 장기가 마르지 않도록 충분히 식염수를 뿌려주면서 EDTA를 처리하지 않은 주사기와 시험관을 이용하여 후대정맥에서 5∼6㎖의 혈액을 채취하여 상온에서 30분 경과 후, 3000 rpm에서 15분간 저온(4℃)원심 분리하여 혈청을 얻었다. 이는 Aspartate aminotransferase(AST), Alanine aminotransferase(ALT), alkaline phosphatase(ALP), Total 콜레스테롤, total protein, albumin, total bilirubin 분석에 사용하였다. EDTA tube에 혈액을 따로 채혈하여 얻은 EDTA 혈액을 이용하여 hematological values 및 CBC differentiation 측정에 사용하였다. 간, 신장을 차례로 절제하여 무게를 측정하고 buffered formalin용액(40% formaldehyde 10 ㎖, 0.65 g sodium phosphate monobasic, sigma, 0.4 g sodium phosphate dibasic, sigma/100 ㎖ T.D.W)에 고정한 후 실온에 보관하였다.
모든 실험 결과 측정치는 일변수 분석법을 사용하여 통계처리 하였으며 Student's T-test를 이용하여 p<0.05 수준에서 각 실험군 간의 유의성을 검증하였다. 모든 자료는 mean ±standard deviation으로 나타내었다.
시료투여 후 매일 적어도 2회 이상 실험동물의 일반상태를 세밀히 관찰하였는 바, 시료 투여기간 중 시험 물질에 기인된 특이한 이상 임상 증상은 관찰되지 않았다. 즉, 피부, 피모, 안·점막, 배변, 운동 및 패턴 등에 대하여 이상상태가 전혀 관찰되지 않았으며 상대 동물에 대한 공격성 및 자신에 대한 자해, 조직의 융해 등 이상 징후도 전혀 발견되지 않았다.
사육 마지막날 실험동물을 overnight로 16시간 절식시키고 에테르로 3∼4분간 마취시킨 상태에서 부검 후 정상대조군과 각각의 실험군의 심장, 폐, 간장, 신장, 비장, 부신, 위, 정소의 이상유무를 관찰하였다. 각 실험군의 장기들은 정상대조군의 장기들과 비교하여 모양 및 형태, 크기, 색깔 등에서 전혀 외형적 이상 변화를 나타내지 않았으며 각 장기의 빛깔 및 형태가 아주 선명한 것으로 관찰되어 투여시료에 기인한 각 장기의 이상적 특이 증상은 나타나지 않는 것으로 사료되었다.
시료 투여 후 4주 동안 정상대조군 및 생맥산을 투여한 T1군의 섭이량 및 섭수량은 일정하였으며 전혀 기복을 나타내지 않았고 정상대조군과 실험군을 망라하여 사망한 실험동물은 없었다.
실험동물 Sprague-Dawley 계 랫트(수컷)의 시료 투여 후 4주 동안의 주간 체중변화량은 정상대조군과 거의 차이를 나타내지 않았다. 시료 투여 후 4주 동안의 총 체중증가량 역시 표 6에 나타난 바와 같이 정상대조군에 비해 유의성(p<0.05)있는 차이점을 나타내지 않았다. 즉, 시료를 투여한 4주 간 실험동물의 주간 체중변화량 및 총 체중증가량은 T1이 정상군과 비슷한 수치를 보임으로써 투여시료가 체중의 증감에 특별한 영향을 미치지 않는다는 연구 결과를 나타내었다. 실험동물의 장기 중량 변화는 표 6에 나타난 바와 같다. 실험동물의 체중 당 간중량 %는 정상대조군에서 2.94 ±0.077의 수치를 나타내었는데 모든 실험군에서 유의성(p<0.05)있는 차이를 나타내지 않아 투여시료가 실험동물의 장기 중량에 특별한 영향을 나타내지 않는 결과를 보여주었다. 실험동물의 체중 당 신장중량 % 역시 0.711 ±0.043의 수치를 보인 정상대조군에 비해 모든 실험군에서 유의성(p<0.05)있는 차이를 나타내지 않았다.
표 6. Total body weight gains and the weight ratio of liver and kidney
각 군(n = 6)의 실험동물로부터 채취한 뇨에 대한 routine urinalysis 결과를 표 7에 나타내었다. 통상 검체의 뇨의 변화는 신장, 뇨로계의 병태를 잘 반영하므로 진단 예후 판정에 유용하며 아울러 체액의 변화를 잘 반영하므로 대사 장애, 당뇨병, 간질환, 전해질의 unbalance 등의 지표가 된다.
표 7에 나타난 정상대조군 및 실험군의 뇨 pH는 7.5 ∼ 8.5를 나타내 정상군과 실험군 사이에 별다른 차이를 나타내지 않는 것으로 나타났으며 urinalysis의 기준치에도 부합되어 투여시료에 기인한 뇨 pH의 특이 사항은 나타나지 않았다.
각 실험동물의 뇨단백은 urinalysis의 기준치 상 negative(-) ∼ trace(±)를 나타내는 것이 정상이나 본 실험에서는 T1군 6마리 중 1마리에서 trace, 4마리에서 1 positive 1마리에서 2 positive를 나타냈으며 정상대조군에서도 6개체 중 1마리에서 trace, 3 마리에서 1 positive, 1마리에서 2 positive를 나타내는 등 거의 모든 실험동물에서 뇨단백이 검출되었다. 이와 같이 정상대조군과 실험군 모두에서 positive 한 결과가 나타난 것은 투여시료가 뇨단백 이상을 유발한 것으로는판단할 수 없다. 통상 정상대조군의 뇨단백이 음성인데 반하여 시험군의 뇨단백이 양성으로 나타나는 경우는 투여약재에 기인한 사구체성 단백뇨, 세뇨관성 단백뇨, 신정 및 신후성단백뇨 등의 병적단백뇨를 의심할 수 있는데 반하여 정상대조군 및 시료투여군 모두에서 단백뇨가 검출될 시는 운동성단백뇨, 기능성단백뇨 등의 생리적단백뇨(비병적단백뇨)로 판단할 수 있다. 본 실험에서 정상대조군과 실험군 모두에서 단백뇨가 검출된 것은 야행성인 랫트에서 야간에 뇨를 채취함으로 인해 활발한 운동성 생리적단백뇨가 검출된 것으로 판단되었으며 부검 후 신장에 아무런 이상징후를 발견할 수 없었던 점등도 활발한 운동으로 인해 운동성 생리적 단백뇨가 검출되었다는 판단을 뒷받침해 준다.
검체의 뇨에서 당이 검출되는 것은 당뇨병, 신성당뇨, 내분비질환, 췌장질환, 간경변, 뇌종양 등의 징후를 반영하는 것이다. 표 7에 나타난 바와 같이 정상대조군 및 한약재 시료 추출물을 투여한 T1군 모두에서 당이 검출되지 않은 것으로 연구 결과가 나타나 투여시료에 기인한 뇨당의 이상상태는 나타나지 않는다.
표 7에 정상대조군과 실험군 각 군의 뇨 케톤 측정결과를 나타내었다. 뇨 케톤은 지방산 산화 항진 여부를 진단하는 주요 지표로써 케톤체는 생체 energy 의존도가 당질보다 지방산으로 기울 때 증가하며 이의 증가는 인슐린의 결핍을 반영한다. 따라서 검체의 뇨에서 케톤이 검출되는 것은 검체가 중증당뇨병이거나 또는 당질 섭취부족 심한 경우 기아상태에 직면해 있음을 나타낸다. 뇨 케톤에 대한 본 실험의 연구 결과에서는 정상대조군 랫트 6마리 중 2마리에서 1 positive를 나타내었으며, T1군은 1마리에서 1 positive를 나타내었다. 상기와 같이 정상대조군과 실험군 모두에서 positive 결과가 나타난 것은 투여시료가 뇨 케톤체 이상을 유발한 것으로는 판단할 수 없다. 오히려 실험동물들이 충분한 식이를 섭취한 점과 모든 실험군에서 뇨당이 검출되지 않은 연구 결과로 미루어 볼 때 실험동물들이 섭취한 삼양사 사료의 조성(조단백 22.1% 이상, 조지방 3.5% 이상, 조섬유 5.0% 이하, 조회분 8.0% 이하 …)이 상기와 같은 결과를 초래한 것으로 판단되었다. 즉 정상대조군과 실험군의 랫트들이 섭취한 사료가 당질인 조섬유의 비율은 지극히 낮았고 상대적으로 조지방 및 조단백의 비율은 조섬유의 5, 6 배에 달할 정도로 높았기 때문에 뇨 케톤이 증가한 것으로 판단되었다. 보다 정확한 결과를 얻기 위해서는 사료를 바꾸어 섭식시킨 후 재 실험이 필요하다.
뇨잠혈은 요로의 이상을 진단하는 지표로 표 7에 정상대조군과 실험군 각 군의 뇨잠혈 측정결과를 나타내었다. 각 군 모두에서 뇨잠혈이 검출되지 않았으며 따라서 투여시료에 기인한 뇨잠혈의 이상상태는 나타나지 않은 것으로 판단되었다.
표 7. Urinary analysis
4주간 시험물질 투여 후 hematological values 및 CBC differentiation 측정 결과를 표 8에 나타내었다. 생맥산을 투여한 T1군의 RBC, WBC, HCT, HGB, PLT, Reticulocyte, WBC diff. count 수치를 Student's T-test에 의해 통계 처리한 결과, 각각의 실험군에서 미미한 차이를 나타냈지만 정상군의 그것과 비교하여 유의적인 차이(p<0.05)를 나타내는 군은 전혀 없었다. 따라서 투여시료에 기인한 혈액학적 독성은 전혀 나타나지 않은 것으로 연구결과가 나타났다.
표 8. Hematological results
표 9에 4주간 시험물질 투여 후 혈액 생화학적 검사를 한 결과를 나타내었다. T1군의 TP, albumin, T-Bil., ALP, AST, ALT, T-Chol. 수치를 통계 처리한 결과, 각각의 실험군에서 미미한 차이를 나타냈지만 정상군의 그것과 비교하여 유의적인 차이(p<0.05)를 나타내는 군은 전혀 없었다. 따라서 투여시료에 기인한 혈액생화학적 독성은 전혀 나타나지 않은 것으로 판단되었다.
표 9. Biochemical values
이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명은 장기간의 알코올 섭취로 발생된 간기능 장애에 오미자, 인삼, 황기, 맥문동, 호박 등의 한약재를 복합처방한 생맥산 뿐만 아니라 이 생맥산으로 응고시킨 두부가 상당한 회복효과를 나타내는 것을 알 수 있으며 장기 투여하였을 때 간기능 장애의 회복기능이 생맥산을 단독으로 투여했을 때 보다 현저히 증가함을 알 수 있다. 또한 혈액 중 높은 콜레스테롤 농도가 동맥경화증 등 심장순환기계 질환 유발의 주요인자로 작용하기 때문에 각 개인의 혈장 콜레스테롤 농도를 낮추는 약품과 기능성물질 개발에 세계적으로 많은 연구와 노력이 진행되고 있으며 특히 인체에 부작용이 적은 천연물로부터 위의 약재, 또는 기능성물질을 개발할 수 있으며 신규의 간기능활성증진화제 및 천연 고지혈증 치료제로서 이용할 수 있는 기능성 식품산업에 매우 유용한 발명이다.
Claims (2)
- 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v) 두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 것을 특징으로 하는 간기능 활성증진용 생맥산 두부.
- 오미자, 맥문동, 황기, 인삼 및 호박 각각 50∼200g으로 이루어진 생맥산에 증류수 1000∼3000mL를 첨가하여 2∼5시간 약탕기로 추출한 후 가제로 여과하고 5000∼8000×g에서 10∼30분간 원심분리하여 추출한 생맥산 추출물을 콩으로 이루어진 10%(w/v) 두유액에 상기 두유액의 5∼30%(v/v) 함유하는 것을 특징으로 하는 항고혈장지질용 생맥산 두부.
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|---|---|---|---|
| KR1020030019690A KR20040084542A (ko) | 2003-03-28 | 2003-03-28 | 간기능 활성증진 및 항고혈장지질용 생맥산 두부 |
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| KR (1) | KR20040084542A (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20080098193A (ko) * | 2007-05-04 | 2008-11-07 | 박갑주 | 생맥산 추출물 및 그 추출물을 이용한 생맥산 두부 |
| JP2011157340A (ja) * | 2010-01-28 | 2011-08-18 | Hyuk Han Kwon | 生脈散エキスとそのエキスを利用した生脈散豆腐およびその製造方法（ｓａｅｎｇｍａｅｋｓａｎｅｘｔｒａｃｔ、ｓａｅｎｇｍａｅｋｓａｎｂｅａｎｃｕｒｄｕｓｉｎｇｓａｅｎｇｍａｅｋｓａｎｅｘｔｒａｃｔａｎｄｐｒｅｐａｒｉｎｇｍｅｔｈｏｄｏｆｔｈｅｓａｍｅ） |
-
2003
- 2003-03-28 KR KR1020030019690A patent/KR20040084542A/ko active IP Right Grant
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