KR20020050235A

KR20020050235A - 난치성 창상의 치료제

Info

Publication number: KR20020050235A
Application number: KR1020027004402A
Authority: KR
Inventors: 다카쿠라쇼지
Original assignee: 후지야마 아키라; 후지사와 야꾸힝 고교 가부시키가이샤
Priority date: 1999-10-12
Filing date: 2000-10-02
Publication date: 2002-06-26
Also published as: US20030207432A1; CA2387199A1; EP1230933A4; EP1230933A1; CN1407902A; AU7453700A; BR0014831A; WO2001026685A1

Abstract

본발명은 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질을 유효성분으로 하는 난치성 창상의 치료제를 제공한다.

Description

난치성 창상의 치료제{REMEDIES FOR INTRACTABLE WOUND}

산업상 이용 가능성

본 발명은 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질을 유효성분으로하는 난치성 창상의 치료제이다.

발명의 개시

본 발명의 난치성 창상의 치료제에 있어서 유효성분으로서 사용될 수 있는 백혈구 엘라스타제 저해 활성을 갖는 물질은 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질이라면 어떠 것이라도 좋고, 또한, 본 발명에 사용가능한 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질에는, 직접적인 저해뿐만 아니라, 백혈구 침윤의 억제 또는 엘라스타제 산물 저해에 의한 간접적인 백혈구 엘라스타제 활성을 저해하는 물질도 포함된다. 즉, 이러한 활성을 갖는 물질은 다수 공지되어 있지만, 이러한 공지 물질을 사용하는 것만이 가능한 것이 아니라, 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질이라면 신규 물질도 사용가능하다. 이러한 물질 중, 특히 적합한 화합물을 아래에 예시한다.

(1) WS 7622A 모노 또는 디황산 에스테르 및 그의 약제학적으로 허용되는 염류: 이들 중, WS 7622A 디황산 에스테르의 이나트륨염 및 WS7622A 디황산 에스테르의 이칼슘염은 각각 하기의 물리화학적 성질을 갖는 공지물질이다(특개평4-279600호 공보).

WS7622A 디황산에스테르의 이나트륨염:

외관: 무색의 결정

용해성: 가용 : 물, 메탄올

불용 : 클로로포름, n-헥산

융점 : 257 ~ 263℃ (분해)

비선광도: [α]²³ _D+37.5°(C=1, 메탄올)

분자식: C₁₇H₆₁N₉O₁₉S₂Na₂

원소분석 (C₁₇H₆₁N₉O₁₉S₂Na₂·6H₂0에 대해):

계산치: C 44.30, H 5.77, N 9.89, S 5.03, Na 3.61%

실측치 : C 44.98, H 5.90, N 10.06, S 5.00, Na 3.98%

분자량 : FAB-MS m/z 1188(M+Na)⁺

박층크로마토그래피:

고정상 전개용매 Rf치

실리카겔 CHCl₃-CH₃OH-H₂O 0.11

(Merck Art 5715) (65:25:4)

n-부탄올-초산-수 0.29

(4 : 2 : 1)

적외흡수스펙트럼:

γ^KBr _max3360, 2960, 1735, 1660, 1640, 1530, 1500, 1380, 1250, 1200, 1060, 1030, 940, 890 cm^-1

¹H 핵자기공명스펙트럼:

(400MHz, D₂O)δ

7.50 (1H, s)

7.27 (1H, s)

7.33-7.24 (3H, m)

6.94 (1H, q, J=7Hz)

6.85 (2H, br d, J=8Hz)

5.53 (1H, m)

5.37 (1H, m)

4.80 (1H,br, s)

4.63-4.57 (2H, m)

4.53 (1H, m)

4.06 (1H, m)

3.99 (1H, d, J=10Hz)

3.56 (1H, br d, J=14Hz)

3.46 (1H, m)

2.97 (3H, s)

2.97-2.88 (2H, m)

2.72 (1H, m)

2.59 (1H, m)

2.51-2.38 (2H, m)

2.09-1.91 (4H, m)

1.82-1.60 (3H, m)

1.77 (3H, d, J=7Hz)

1.50 (3H, d, J=6.5Hz)

1.40 (1H, m)

1.11 (6H, d, J=7Hz)

0.99 (3H, d, J=6.5Hz)

0.97 (3H, d, J=6.5Hz)

¹³C 핵자기공명 스펙트럼:

(100MHz, D₂O)δ

183.6 (s)

177.9 (s)

177.7 (s)

174.8 (s)

173.8 (s)

173.3 (s)

172.4 (s)

167.8 (s)

161.5 (s)

145.5 (s)

144.9 (s)

139.6 (d)

139.0 (s)

137.0 (s)

136.0 (s)

132.3 (d)×2

131.0 (d)×2

129.6 (d)

127.4 (d)

125.9 (d)

77.4 (d)

75.1 (d)

63.8 (d)

62.7 (d)

59.1 (d)

55.9 (d)

54.9 (d)

51.9 (d)

41.9 (t)

37.2 (d)

36.9 (t)

34.1 (q)

32.3 (d)

31.9 (t)

31.8 (t)

31.2 (t)

27.5 (t)

23.7 (t)

21.7 (q)

21.4 (q)×2

21.3 (q)

21.1 (q)

15.5 (q)

아미노산 분석:

WS7622A 디황산 에스테르의 이나트륨염(1mg)을 6N 염산(1ml), 110℃, 20시간의 조건에서 가수분해하고, 감압건고시켜 얻은 화합물을 히다치 835형 자동 아미노산분석기에 의해 측정하였다. 아미노산 스탠다드 샘플로서,화광순약공업(주)의 H형(화광 코드 013-08391) 및 B형(016-08641)을 사용하였다.

그 결과, 트레오닌, 발린, 페닐알라닌, 오르니틴, 암모니아와 몇몇 미지 닌히드린 양성성분이 검출되었다.

WS7622A 디황산에스테르의 이나트륨염의 부분 화학구조식으로서 다음과 같은식이 제안된다.

WS7622A 디황산 에스테르의 이칼륨염:

외관 : 무색 무정형 분말

용해성 : 가용 : 수, 메탄올

불용 : 클로로포름, n-헥산

융점 : 230 ~ 237℃(분해)

비선광도: [α]²³ _D+34°(C=1, 메탄올)

분자식: C₁₇H₆₁N₉O₁₉S₂K₂

원소분석(C₁₇H₆₁N₉O₁₉S₂K₂·6H₂0에 대해) :

계산치 : C 43.21, H 5.63, N 9.65, S 4.91, K 5.99%

실측치 : C 43.96, H 5.44, N 9.97, S 5.09, K 4.49%

분자량 : FAB-MS m/z 1236(M+K)⁺

박층크로마토그래피:

고정상 전개용매 Rf치

실리카겔 CHCl₃-CH₃OH-H₂O 0.13

(Merck Art 5715) (65:25:4)

적외흡수스펙트럼:

γ^KBr _max3360, 2960, 1735, 1660, 1640, 1530, 1500, 1405, 1380, 1250, 1200, 1050, 1030, 940, 890 cm^-1

¹H 핵자기공명스펙트럼:

(400MHz, D₂O)δ

7.52 (1H, s)

7.28 (1H, s)

7.34-7.25 (3H, m)

6.96 (1H, q, J=7Hz)

6.87 (2H, br d, J=8Hz)

5.56 (1H, m)

5.40 (1H, m)

4.84 (1H,br, s)

4.70-4.55 (3H, m)

4.10 (1H, m)

4.03 (1H, m)

3.60 (1H, br, J=14Hz)

3.50 (1H, m)

3.00 (3H, s)

3.00-2.85 (2H, m)

2.76 (1H, m)

2.62 (1H, m)

2.55-2.40 (2H, m)

2.12-1.95 (4H, m)

1.90-1.65 (3H, m)

1.79 (3H, d, J=7Hz)

1.53 (3H, d, J=6.5Hz)

1.45 (1H, m)

1.14 (6H, d, J=7Hz)

1.02 (3H, d, J=6.5Hz)

1.00 (3H, d, J=6.5Hz)

아미노산 분석:

WS7622A 디황산 에스테르의 이칼륨염(1mg)을 6N 염산(1ml), 110℃, 20시간의 조건에서 가수분해하고, 감압건고시켜 얻은 화합물을 히다치 835형 자동 아미노산분석기에 의해 측정하였다. 아미노산 스탠다드 샘플로서,화광순약공업(주)의 H형(화광 코드 013-08391) 및 B형(016-08641)을 사용하였다.

WS7622A 디황산에스테르의 이칼륨염의 부분 화학구조식으로서 다음과 같은 식이 제안된다.

WS7622A 모노 또는 디황산 에스테르의 약제학적으로 허용되는 염으로서는, 예를 들면 알칼리 금속염(예를들면, 나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리토금속염(예를 들면, 칼슘염 등), 암모늄염, 에탄올아민염, 트리에틸아민염, 디시클로헥실아민염, 피리딘염 등의 무기염기 또는 유기염기의 모노 또는 디염을 예로 들 수 있다.

상기 WS7622A 모노 또는 디황산 에스테르의 합성을 위한 출발물질인 WS7622A 물질도 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 가지고, 난치성 창상의 치료제로서 사용될 수 있다. 당해 물질은 다음과 같은 물리화학적 성질을 갖는 물질로서 공지되어 있다(특개평 3-218387호 공보, 특개평 4-279600호 공보)

WS7622A 물질의 물리화학적 성질:

외관 : 무색 프리즘 결정

물질의 성질 : 산성

정색 반응 : 양성 : 황산세륨 반응, 요드 증기반응, 염화제2철 반응

음성 : 닌히드린반응, 몰리쉬(Molisch) 반응, 드라겐도 르프(Dragendorff) 반응

용해성 : 가용 : 메탄올, 에탄올, n-부탄올

난용 : 클로로포름, 아세톤, 초산에틸

불용: 수, n-헥산

박층 크로마토그래피(TLC) :

클로로포름-메탄올(5 : 1, v/v)

Rf치 0.51

아세톤-메탄올(10 : 1)

Rf치 0.62

(키젤(Kiesel) 겔 60F₂₅₁실리카겔 플레이트, Merck 사)

융점 : 250~252℃(분해)

비선광도: [α]²³ _D+36°(C=1, 메탄올)

UV 스펙트럼: λ^MeOH _max287 nm(ε= 3600)

λ^MeOH-HCl _max287 nm

λ^MeOH-NaOH _max298 nm

분자식: C₁₇H₆₃N₉O₁₃

원소분석(C₁₇H₆₃N₉O₁₃·2H₂0에 대해) :

계산치 : C 56.56, H 6.77, N 12.63%

실측치 : C 56.65, H 6.62, N 12.27%

분자량 : FAB-MS m/z 984(M+Na)⁺

적외흡수스펙트럼:

γ^KBr _max3400, 3300, 3060, 2980, 2940, 1735, 1710, 1690, 1670 1660, 1640, 1540, 1520, 1470, 1380, 1330, 1300, 1260, 1220, 1200, 1160, 1130, 1090, 1000, 980, 940, 920 cm^-1

¹H 핵자기공명스펙트럼:

(400MHz, D₂O)δ

7.22-7.09 (3H, m)

6.88-6.77 (3H, m)

6.74 (1H, s)

6.46 (1H, s)

5.46 (1H, m)

5.18 (1H, s)

4.85 (1H, s)

4.77 (1H, m)

4.65 (1H, m)

4.50 (1H, m)

3.96 (1H, m)

3.91 (1H, d, J=9Hz)

3.60-3.47 (2H, m)

3.03 (1H, m)

2.90 (3H, s)

2.86 (1H, m)

2.59-2.49 (2H, m)

2.39 (1H, m)

2.29-2.16 (2H, m)

2.00 (1H, m)

1.84 (1H, m)

1.74 (3H, d, J=6Hz)

1.72-1.53 (4H, m)

1.44 (3H, d, J=6Hz)

1.12 (1H, m)

1.10 (6H, d, J=6Hz)

0.99 (3H, d, J=6Hz)

0.94 (3H, d, J=6Hz)

¹³C 핵자기공명 스펙트럼:

(100MHz, CD₃OD)δ

179.7 (s)

176.3 (s)

174.7 (s)

173.3 (s)

172.4 (s)

171.4 (s)

170.3(s)

165.8 (s)

160.2(s)

145.7 (s)

145.6 (s)

137.5 (s)

134.0 (d)

131.4 (s)

130.6(d)×2

129.8(s)

129.1 (d)×2

129.1 (s)

127.6 (d)

119.1 (d)

118.0 (d)

76.0 (d)

73.4 (d)

63.1 (d)

61.4 (d)

57.1 (d)

53.6 (d)

52.7 (d)

50.5 (d)

39.9 (t)

36.1 (t)

35.8 (d)

31.8 (q)

31.0 (t)

30.8 (d)

29.9 (t)

29.7 (t)

25.2 (t)

22.3 (t)

20.2(q)

20.0 (q)×2

19.7 (q)

19.5 (q)

13.3 (q)

아미노산 분석:

WS7622A의 부분 화학구조식으로서 다음과 같은 식이 제안된다:

WS7622A 물질의 염으로서는, 예를 들면 알칼리 금속염(예를들면, 나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리토금속염(예를 들면, 칼슘염 등), 암모늄염, 에탄올아민염, 트리에틸아민염, 디시클로헥실아민염 등의 무기염기 또는 유기염기의 염을 예로 들 수 있다.

유사하게, 인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 WS7622B, C 및 D 물질, 더불어 그의 유도체(특개평 3-218387호 공보)도 난치성 창상이 치료제로서 사용가능하다.

상기 WS7622A 물질(WS7622B, C 및 D 물질도 유사)은 예를 들면 스트렙토마이세스·레시스토미시피커스(Streptomyces resistomycificus) No. 7622주의 배양에 의해 제조될 수 있고, 당해 균주는 부다페스트 조약에 기초한 국제기탁기관인 공업기술원생명공학공업기술연구소에, 기탁번호 FERM BP-2306으로 기탁되어 있다.

(2) 식:

[식 중, R¹은 카르복시, 에스테르화된 카르복시 및 디-저급알킬카바모일로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기를 갖는 저급 알킬기; 페닐 부분에 할로겐, 아미노 또는 니트로, 알킬 부분에 카르복시 또는 에스테르화된 카르복시를 가질 수 있는 페닐(저급) 알킬기; 할로페닐기; 모르폴리노기; 또는 모르폴리노(저급) 알킬기를, R²및 R³는 각각 저급 알킬기를, X는 -또는 NH-를, Y는또는를 각각 의미함]로 표시된 트리플루오로메틸케톤 유도체 및 그의 약제학적으로 허용가능한 염.

(3) 식:

(식 중, R¹~R³는 상기(2)의 화합물과 같은 의미)로 표시되는 트리플루오로메틸케톤 유도체 및 그의 약제학적으로 허용되는 염.

(4) 3(RS)-[[4-(카르복시메틸아미노카르보닐)페닐카르보닐]-L-발릴-L-프롤릴]아미노-1,1,1-트리플루오로-4-메틸-2-옥소펜탄 또는 그의 나트륨 염.

상기 (2) ~ (4)에 기재된 화합물은, 예를 들면 특개평4-297446호 공보에 기재되어 있는 공지 화합물이다. 또한, (2)~(4)의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염으로서는, 알칼리 금속염(예를들면, 나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리토금속염(예를 들면, 칼슘염 등), 암모늄염, 에탄올아민염, 트리에틸아민염, 디시클로헥실아민염 등의 무기염기 또는 유기염기의 염 및 메탄술폰산염, 염산염, 황산염, 질산염, 인산염 등의 유기 또는 무기산 부가염을 예로 들 수 있다.

전기 정의의 바람직한 예를 이하에서 상세히 설명한다.

"저급" 이란 특별히 기재하지 않는한, 탄소원자수가 1 내지 6을 의미한다. 바람직한 "할로겐"의 예로서는 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 들 수 있다. 바람직한 "저급알킬기"로서는, 탄소원자 1 내지 6개를 갖는 직쇄 및 분지 알칸의 잔기, 예를 들면 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 헥실 등, 바람직하게는 탄소원자 1 내지 4개를 갖는 것을 예로 들 수 있다. 바람직한 "에스테르화된 카르복시기"로서는, 알킬에스테르, 즉, 알콕시카르보닐, 예를 들면 저급 알콕시카르보닐(예를 들면 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 프로폭시카르보닐, 부톡시카르보닐, 터트-부톡시카르보닐 등) 및 페닐(저급)알킬 에스테르, 즉, 페닐(저급 알콕시 카르보닐, 예를 들면 벤질옥시카르보닐, 및 벤조일(저급)알킬 에스테르, 즉, 벤조일(저급)알콕시 카르보닐, 예를 들면, 벤조일메톡시카르보닐 등을 들 수 있다.

바람직한 "저급 알킬렌"은 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 이소프로필렌 등을 포함할 수 있다.

바람직한 "디-저급 알킬카바모일"은 N,N-디메틸카바모일, N,N-디에틸카바모일 등을 포함할 수 있다.

(5) 하기의 물리화학적 성질을 갖는 FR901451 물질 및 그의 약제학적으로 허용되는 염:

외관 : 백색 분말

정색 반응: 양성 : 황산 세륨, 요오드 증기, Ehrlich, 닌히드린

음성: 몰리쉬(Molisch)

용해성 : 가용 : 물, 메탄올, 디메틸설폭시드

난용 : 아세톤

불용 : 초산에틸

융점 : 243~245℃ (분해)

비선광도 : [α]²³ _D-15°(C=0.65, H₂O)

자외선흡수 스펙트럼: λ^MeOH _maxnm(ε)275 (4300)

281 (4500), 290 (3900)

분자식: C₆₀H₇₉N₁₃O₁₈

원소분석 (C₆₀H₇₉N₁₃O₁₈에 대해) :

계산치 : C 49.68, H 6.88, N 12.55%

실측치 : C 49.95, H 6.28, N 12.42%

분자량 : FAB-MS m/z 1270(M+H)⁺

박층 크로마토그래피:

고정상 전개용매 Rf치

실리카겔 CHCl₃:MeOH:NH₄OH 0.60

(Merck) (15 : 11 : 5)

RP-18 70% 함수메탄올 0.32

(Merck)

FT 적외선흡수스펙트럼:

γ^KBr _max3390, 3070, 2970, 2880, 1740, 1660, 1530, 1450, 1410, 1380, 1350, 1250, 1190, 1110, 1080, 1010, 750, 700, 670, 660, 620, 600 cm^-1

¹H 핵자기공명스펙트럼:

(400MHz, D₂O)δ

7.70 (1H, d, J=7Hz)

7.52 (1H, d, J=7.5Hz)

7.44-7.23 (7H, m)

7.22 (1H, s)

5.59 (1H, q, J=7Hz)

4.94 (1H, t, J=4.5Hz)

4.85-4.74 (3H, m)

4.58 (1H, dd, J=6Hz, 10Hz)

4.45-4.35 (3H, m)

4.30 (1H, dd, J=4Hz, 7Hz)

4.07(1H, m)

3.66-3.50 (3H, m)

3.44-3.25 (4H, m)

3.16-2.93 (4H, m)

2.87 (1H, d, J=18Hz)

2.80-2.68 (2H, m)

2.56-2.48 (2H, m)

2.08 (1H, dd, J=16Hz, 4Hz)

1.87-1.53 (9H, m)

1.43 (3H, d, J=7Hz)

1.30 (3H, d, J=6.5Hz)

1.45-1.17 (4H, m)

0.95 (3H, d, J=6Hz)

0.84 (3H, d, J=6Hz)

¹³C 핵자기공명 스펙트럼:

(100MHz, D₂O)δ

177.2 (s)130.0 (d) × 256.0 (d)31.4 (t)

176.5 (s)129.8 (d) × 254.1 (d)28.8 (t)

174.6 (s)128.5 (d)53.8 (d)26.6 (t)

174.2 (s)127.8 (d)53.2 (d)25.1 (d)

174.0 (s)125.5 (d)53.1 (d)23.2 (q)

173.2 (s)123.2 (d)52.9 (d)23.2 (t)

173.0 (s)120.9 (d)52.8 (d)23.1 (t)

172.8 (s)118.7 (d)49.5 (d)20.8 (q)

172.6 (s)113.1 (d)48.6 (t)19.4 (q)

172.5 (s)108.8 (s)40.1 (t)18.3 (q)

172.1(s)73.3 (d)39.6 (t)

171.7 (s)69.7 (d)39.4 (t)

171.4 (s)64.3 (d)38.9 (t)

170.3 (s)62.1 (d)35.3 (t)

137.2 (s)60.9 (d)34.8 (t)

136.0 (s)57.1 (d)31.7 (t)

상기 FR901451 물질은 플렉시박터(Flexibacter) 속의 FR901451 물질 생산균이 생산하는 물질로서 공지되어 있다(예를 들면, 국제공개번호 : WO 93/02203호 공보). 또한, 해당 생산균의 일종인 플렉시박터·sp No.758균주는 부다페스트조약에 기초한 국제기탁기관인 공업기술원생명공학공업기술연구소에, 기탁번호 FERM BP-3420으로서 기탁되어 있다.

또한, 상기 FR901451 물질의 약제학적으로 허용되는 염으로서는, 전기 (2) ~ (4)에 기재된 화합물의 약제학적으로 허용되는 염으로서 예시된 염과 동일하게 예시된다.

상기 외에도, 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질의 예로서는, α1-안티트립신, SLPI(Secretory Leukocyte Protease Inhibitor)(American Review of Respiratory Disease Vol. 147, 1993, P442-446), 우리나스타틴, 콜히신, 에리트로마이신, 클라리쓰로마이신, IC1200, 880, ONO-5046 (American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Vol. 153, P391-397), 항엘라스타제 항체 등을 들 수 있다.

본 발명의 난치성 창상의 예로서는, 피부(예를 들면, 욕창, 당뇨병에 수반되는 발궤양 등), 발, 위 및 각막 등이 궤양 등을 들 수 있고, 이 중에서, 당뇨병에 수반되는 발 궤양 등의 난치성 피부궤양의 치료에 특히 적합하다.

본 발명의 난치성 창상 치료제는, 예를 들면 난치성 피부 궤양의 경우에는 통상은 외용제(예를 들면, 로숀제, 연고제, 점안제, 리니멘트제, 에어로졸제, 현탁제, 유제 등)로서 사용되지만, 그 밖에 산제, 미세과립제, 과립제, 정제, 당의정, 주사제, 흡입제, 마이크로캅셀제, 캅셀제, 좌제, 액제, 시럽 등의 관용의 의약 제제의 형태로 사용가능하다. 필요한경우, 희석제 또는 붕해제 (예를 들면, 서당, 유당, 전분, 결정성 셀룰로오스, 저치환 히드록시프로필셀룰로오스, 합성 알루미늄 실리케이트 등), 결합제(예를 들면, 셀룰로오스, 메칠셀룰로오스,히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메칠셀루로오스, 폴리프로필피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 아라비아고무, 폴리에칠렌글리콜 등), 착색제, 감미제, 활택제(예를 들면 스테아린산 마그네슘 등) 기타를 분산배합하는 것이 가능하다.

본 발명의 난치성 창상 치료제의 사용량은 증상 등에도 의하지만, 일반적으로 외용제에 있어서는, 인간 백혈구엘라스타제 저해활성을 갖는 물질 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염으로서 0.001~10% 정도의 범위에서 사용하는 것이 적당하다.

다음에는 본 발명의 효과를 시험예에 의해 설명한다.

시험예 (당뇨병 랫트 발궤양 치료 촉진 작용)

목적:

본 발명의 화합물(도포)의 초산유발 발궤양에 대한 작용을, 정상 렛트와 당뇨병랫트를 사용하여 시험하였다.

사용화합물:

3(RS)-[[4-(카르복시메틸아미노카르보닐)페닐카르보닐]-L=발릴-L-프롤릴]아미노-1,1,1-트리플루오로-4-메틸-2-옥소펜탄의 나트륨염(FR136706)

방법:

7주령의 수컷 SD랫트에 60mg/kg의 스트렙토조토신(STZ)을 꼬리정맥 내에 투여하여 당뇨병을 유발시켰다. STZ 투여 14일 후, 당뇨병 랫트 및 동일 주령의 대조 랫트에 에테르 마취로 좌족부신피질 내에 빙초산 20μL를 투여하고, 그 부분을 괴사시켰다. 2일 후에, 괴사된 표피가 남아있는 경우, 외과적으로 제거하였다. 이후, FR136706(0.2% 용액 PEG(폴리에틸렌글리콜) 400에 용해)의 투여(환부에 50μL씩 도포)를 개시하였다. 대조군에는 PEG400을 동일하게 도포하였다.

초산 투여 2일 후부터 25일 후까지, 종창 스코어(0: 없음, 1: 가벼움, 2:중간, 3:높음)을 육안으로 평가하고, 또한, 궤양의 짧은 쪽 직경과 긴 쪽 직경을 노기스에 의해 측정하였다. 궤양 면적은 궤양의 긴 쪽 직경 과 짧은 쪽 직경으로부터 계산하였다.

결과:

결과는 다음 표에 나타내었다.

정상 랫트의 종창 스코어는 측정 개시일이 최대였다. 이후 서서히 회복하고, 초산 투여 22일 후에는 종창 스코어는 0으로 되었다. 한편, 당뇨병 랫트는 종창의 피크가 초산 투여 7일 후에 나타났고, 그 후 서서히 회복하였으나, 그 경과는 정상 랫트보다도 지연되었다. FR136706은, 정상 랫트에서는 작용을 나타내지 않았지만, 당뇨병 랫트에서는 회복을 촉진시켰다.

당뇨병 랫트의 궤양 면적은 정상 랫트보다도 크고, 또한 그 축소는 정상 랫트 보다도 지연되었다. FR 136706은, 정상 랫트에서는 작용을 나타내지 않았지만, 당뇨병 랫트에서는 궤양 면적의 축소를 촉진시키는 경향이 확인되었다.

발궤양 모델에 대한 작용

동물	검체	투여량(%)	스코어
			종창 스코어
			초산투여 2일후	초산투여 8일후	초산투여11일후	초산투여 15일후	초산투여 18일후	초산투여 22일후	초산투여 25일후
정상랫트	PEG400		2.5±0.2(6)	2.3±0.2(6)	1.8±0.2(6)	1.0±0.2(6)	0.3±0.2(6)	0.0±0.0(6)	0.0±0.0(6)
정상랫트	FR136706	0.2	2.5±0.2(6)	2.0±0.2(6)	1.5±0.2(6)	1.0±0.2(6)	0.5±0.2(6)	0.0±0.0(6)	0.0±0.0(6)
당뇨병 랫트	PEG400		2.2±0.2(6)	2.8±0.2(6)	*2.7±0.2(6)	**2.2±0.3(6)	**2.0±0.3(6)	**1.7±0.3(6)	**1.5±0.2(6)
당뇨병 랫트	FR136706	0.2	2.2±0.2(6)	2.8±0.2(6)	2.5±0.2(6)	1.5±0.2(6)	1.5±0.2(6)	1.2±0.2(6)	&0.7±0.2(6)

7평균±표준 오차(n)

&, &&: 각각 5% 및 1%에서 유의(Wilcoxon 순위 합 검정)

[스코어]

[당뇨병 랫트, PEG400군과 당뇨병 랫트, FR136706, 0.2%군의 스코어, 측정일마다]

*, **: 각각 5%, 1%에서 유의(Wilcoxon 순위 합 검정)

[스코어]

[정상 랫트, PEG400군과 당뇨병 랫트, PEG400군의 스코어, 측정일마다]

발궤양 모델에 대한 작용

동물	검체	투여량(%)	스코어
			종창 스코어
			초산투여 2일후	초산투여 8일후	초산투여11일후	초산투여15일후	초산투여 18일후	초산투여 22일후	초산투여 25일후
정상랫트	PEG400		58.88±4.31(6)	70.29±6.13(6)	52.61±6.36(6)	24.99±2.82(6)	1.51±0.78(6)	0.0±0.0(6)	0.0±0.0(6)
정상랫트	FR136706	0.2	58.37±6.08(6)	71.42±8.43(6)	53.21±5.11(6)	18.32±4.55(6)	0.69±0.36(6)	0.0±0.0(6)	0.0±0.0(6)
당뇨병 랫트	PEG400		69.28±5.33(6)	*95.58±8.62(6)	**86.03±7.71(6)	**51.63±6.12(6)	**23.38±1.42(6)	15.94±3.90(6)	11.05±1.68(6)
당뇨병 랫트	FR136706	0.2	69.17±5.64(6)	91.77±6.16(6)	72.38±10.37(6)	41.00±10.80(6)	16.10±6.43(6)	12.08±3.73(6)	6.99±1.71(6)

평균±표준 오차(n)

*, **: 각각 5%, 1%에서 유의(Student-t 또는 Aspin-Welch)

[궤양 면적]

[정상 랫트, PEG400군과 당뇨병 랫트, PEG400군의 측정일마다]

본 발명은 인간 백혈구 엘라스타제(elastase) 저해 활성을 갖는 물질을 유효성분으로 하는 난치성 창상의 치료제에 관한 것이다.

본 발명자는 인간 백혈구 엘라스타제 저해 활성을 갖는 물질이 난치성 창상의 치료에 유효하다는 신규한 사실을 밝혀내어 본 발명을 완성하였다.

Claims

인간 백혈구 엘라스타제 저해활성을 갖는 물질을 유효성분으로 하는 난치성 창상의 치료제.