KR20020032211A - 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한전자상거래 시스템 및 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 전문 인터넷 포탈 사이트 및 전자 상거래 시스템에 관한 것으로, 더 상세하게는 과학적인 실험 데이터를 갖추지 않고 무분별하게 과대 부당 광고되고 있는 기능성 식품, 기능성 화장품 소재 및 제품, 기타 유용 생물 소재 제품에 대한 객관적 자료를 인터넷 상에 일반 소비자들에게 통합적으로 제공하고, 천연물을 연구하는 실험자에겐 중복되는 단순 실험을 피하게 함으로써 국가 경쟁력을 키울 수 있으며, 부족한 자료에서 오는 자료 수집의 시간적 낭비를 막을 수 있고, 기능성 생물 소재의 개발, 제조 공급자가 객관적 데이터를 얻기 위한 실험을 의뢰할 수 있으며, 나아가 기존에 실시한 실험 결과까지 검색이 가능할 수 있도록 한, 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 및 방법에 관한 것이다.

종래에는 천연물 자원에 대한 DB는 국내 그 어느 곳에도 없으며, 국가로부터 수많은 연구비를 수주해 받은 결과물을 독식하고 있어 공유가 이루어지고 있지 않으며, 천연물 정보에 있어선 일부 한약재나 약초를 파는 회사에서 일부 정보를 제공하고 있으나 이는 과학적인 근거 없이 제시되고 있고, 소비자들을 현혹시킬 수 있으며, 검색 기능이 없어 많은 자료를 다 뒤져야 하는 불편함이 있고, 동의보감이 CD-ROM화되어 시판되고 있으나 가격이 비싸며, 단순히 동의보감 등 원전에 충실해 일반인이 알아야 하는 민간 처방에 대한 내용이 없고, 이름의 유래 등 일반인들이 궁금해하는 내용에 대한 정보가 없으며, 무엇보다 과학적으로 실험하여 나온 data가 포함되어 있지 않고, 현재와 과거에 사용했던 한약재는 품종이나 성분에 변화가 있을 수 있으며 중국산이 국산으로 둔갑해 시판된다는 사실을 감안하면 문제점이 많다고 볼 수 있다. 그럼에도 불구하고 구전하는 한방 정보를 그대로 전달하거나, 한방 정보의 잘못된 부분을 지적해 줄 수 있는 과학적이고, 객관적인 실험 결과를 배제해 놓고 있다. 또한 천연물 생리활성 검색법을 모아 둔 인터넷 사이트가 있으나 내용이 다양하지 못하고, 활성화되지 않았으며, 업데이트도 되어 있지 않아 현재 대부분 사용 불가능한 실험에 대한 내용이 많다는 문제점이 있다.

상기한 문제점을 해소하기 위하여 본 발명은,

다수 개의 데이터베이스 및 전자 상거래 프로그램이 통합 관리 서버에 구축되어 있으며,

일반 소비자 클라이언트와 전문 소비자 클라이언트는 인터넷과 같은 공중망을 통해 상기 통합 관리 서버에 접속하여 구성하여,

사이트에 접속한 이용자가 회원 가입 형식을 통해서 ID와 패스워드를 입력하여 서버에 접속하는 제 1 과정과 ;

상기 제 1 과정에서 서버에 접속된 이용자가 천연물 정보 은행과 화합물 DB에서 여러 가지 필요한 정보를 검색하여 선택하는 제 2 과정과 ;

상기 제 2 과정에서 정보 검색이 끝난 후, 전문 소비자의 경우 다시 천연물 자원 은행에서 필요한 천연물을 선택하거나, 선택한 천연물을 천연물 생리 활성 검색 은행에 특정 실험을 위탁하는 제 3 과정과 ;

상기 제 3 과정에서 상품을 선택한 후 추가 검색 여부를 판단하는 제 4 과정; 및,

상기 제 4 과정에서 추가 검색이 필요한 경우 상기 제 2 과정으로 리턴하고, 반면에 추가 검색이 필요하지 않은 경우 온라인을 통해 상품을 구매하는 제 5 과정으로 이루어짐을 특징으로 한다.

따라서, 본 발명에 의하면 과학적인 실험 data를 갖추지 않고 무분별하게 과대 부당 광고되고 있는 기능성 식품, 기능성 화장품 소재 및 제품, 기타 유용 생물 소재 제품에 대한 객관적 자료를 인터넷 상에 일반 소비자들에게 통합적으로 제공하고, 천연물을 연구하는 전문 소비자(실험자)에겐 중복되는 단순 실험을 피하게 함으로써 관련 학문 발전을 위해 일조를 할 수 있으며, 부족한 자료에서 오는 자료 수집의 시간적 낭비를 막을 수 있고, 기능성 생물 소재의 개발, 제조 공급자가 객관적 data를 얻기 위한 실험을 의뢰할 수 있어 전반적인 천연물 산업의 국가 경쟁력을 제고시킬 수 있는 효과가 있다.

Description

천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 및 방법{E-commerce system by using database of information on natural products and bioactivity}

본 발명은 전문 인터넷 포털 사이트 및 전자 상거래 시스템에 관한 것으로, 더 상세하게는 과학적인 실험 데이터를 갖추지 않고 무분별하게 과대 부당 광고되고 있는 기능성 식품, 기능성 화장품 소재 및 제품, 기타 유용 생물 소재 제품에 대한 객관적 자료를 인터넷 상에 일반 소비자들에게 통합적으로 제공하고, 천연물을 연구하는 실험자에겐 중복되는 단순 실험을 피하게 함으로써 국가 경쟁력을 키울 수 있으며, 부족한 자료에서 오는 자료 수집의 시간적 낭비를 막을 수 있고, 기능성 생물 소재의 개발, 제조 공급자가 객관적 데이터를 얻기 위한 실험을 의뢰할 수 있으며, 나아가 기존에 실시한 실험 결과까지 검색이 가능할 수 있도록 한, 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 및 방법에 관한 것이다.

일반적으로, 현재 국내에서는 천연물에 대한 데이터베이스(DB)가 구축되어 있지 않으며, 이에 대한 정보도 너무 부족한 게 현실이다.

현재 미국에서는 수 백 만 종의 화합물 라이브러리가 구축되어 있고, 이를 통해 고효율의 검색 방법(High throughput screening)을 통해 빠른 시간에 많은 효능을 검색하고 있어 국가 경쟁력이 너무나 뒤져 있다.

반면에, 천연물에 있어서는 아직 그리 뒤진 것은 아니며, 빠른 DB의 구축과함께 DB를 공유함으로써 난립에서 오는 여러 경제적인 낭비를 방지할 수 있고, 천연물 분야 학문의 국가 경쟁력을 제고시킬 수 있다.

그러나, 현재 천연물 자원에 대한 DB는 국내 그 어느 곳에도 없으며, 국가로부터 수많은 연구비를 수주해 받은 결과물을 독식하고 있어 공유가 이루어지고 있지 않다.

한편, 천연물 정보에 있어선 일부 한약재나 약초를 파는 회사에서 일부 정보를 제공하고 있으나, 이는 과학적인 근거 없이 제시되고 있고 소비자들을 현혹시킬 수 있으며, 검색 기능이 없어 많은 자료를 다 뒤져야 하는 불편함이 있었다.

또한, 동의보감이 CD-ROM화되어 시판되고 있으나 가격이 비싸고, 단순히 동의보감 등 원전에 충실해 일반인이 알아야 하는 민간 처방에 대한 내용이 없으며, 이름의 유래 등 일반인들이 궁금해하는 내용에 대한 정보가 없고, 무엇보다 과학적으로 실험하여 나온 data가 포함되어 있지 않아, 현재 과거 사용하던 한약재와는 품종의 변화가 많이 생겼음에도 불구하고 그대로 사용한다든지, 한방 정보의 잘못된 부분을 지적해 줄 수 있는 현대 과학의 객관적인 결과를 배제해 놓고 있다.

천연물 생리 활성 검색에 있어선 현재 인터넷에 약간 마련된 사이트가 있으나, 내용이 다양하지 못하고 활성화되지 않았으며, 업데이트도 되어 있지 않아 대부분 사용의 불가능한 내용이 많은 문제점이 있었다.

이에 본 발명은 상기한 바와 같은 종래의 문제점을 해소시키기 위하여 창안된 것으로, 과학적인 실험 데이터를 갖추지 않고 무분별하게 과대 부당 광고되고있는 기능성 식품, 기능성 화장품 소재 및 제품, 기타 유용 생물 소재 제품에 대한 객관적 자료를 인터넷 상에 일반 소비자들에게 통합적으로 제공하고, 천연물을 연구하는 실험자에겐 중복되는 단순 실험을 피하게 함으로써 국가 경쟁력을 키울 수 있으며, 부족한 자료에서 오는 자료 수집의 시간적 낭비를 막을 수 있고, 기능성 생물 소재의 개발, 제조 공급자가 객관적 데이터를 얻기 위한 실험을 의뢰할 수 있으며, 나아가 기존에 실시한 실험 결과까지 검색이 가능할 수 있도록 한, 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 및 방법을 제공하는데 그 목적이 있다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템은,

다수 개의 데이터베이스 및 전자 상거래 프로그램이 통합 관리 서버에 구축되어 있으며,

일반 소비자 클라이언트와 전문 소비자 클라이언트는 인터넷과 같은 공중망을 통해 상기 통합 관리 서버에 접속하여 구성함을 특징으로 한다.

또한, 상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 방법은,

사이트에 접속한 이용자가 회원 가입 형식을 통해서 ID와 패스워드를 입력하여 서버에 접속하는 제 1 과정과 ;

상기 제 1 과정에서 서버에 접속된 이용자가 천연물 정보 은행과 화합물 DB에서 여러 가지 필요한 정보를 검색하여 선택하는 제 2 과정과 ;

상기 제 2 과정에서 정보 검색이 끝난 후, 전문 소비자의 경우 다시 천연물 자원 은행에서 필요한 천연물을 선택하거나, 선택한 천연물을 천연물 생리 활성 검색 은행에 특정 실험을 위탁하는 제 3 과정과 ;

상기 제 3 과정에서 상품을 선택한 후 추가 검색 여부를 판단하는 제 4 과정 ; 및,

상기 제 4 과정에서 추가 검색이 필요한 경우 상기 제 2 과정으로 리턴하고, 반면에 추가 검색이 필요하지 않은 경우 온라인을 통해 상품을 구매하는 제 5 과정으로 이루어짐을 특징으로 한다.

도 1 은 본 발명에 따른 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 구성도,

도 2a 내지 도 2d 는 천연물 정보 은행의 데이터베이스 중 황기를 설명한 예시도,

도 3a 및 도 3b 는 화합물 데이터베이스 중 GABA를 설명한 예시도,

도 4 는 천연물 생리 활성 검색 은행의 시험 방법 중 Comet assay법을 이용한 항유전독성 평가 흐름도,

도 5 는 소비자가 사이트에 접속하여 본 발명에 따른 서비스를 이용하는 과정을 도시한 순서도이다.

<도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명>

10 : 통합 관리 서버 20 : 전자 상거래 프로그램

30 : 통신망 40 : 일반 소비자 클라이언트

50 : 전문 소비자 클라이언트 D1 : 천연물 자원 은행 DB

D2 : 천연물 생리 활성 검색 은행 DB D3 : 화합물 DB

D4 : 천연물 정보 은행 DB

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 예를 설명하면 다음과 같다.

본 발명에 따른 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템은 도 1 에 도시한 바와 같이, 다수 개의 데이터베이스(D1 ~ D4) 및 전자 상거래 프로그램(20)이 통합 관리 서버(10)에 구축되어져 있으며, 일반 소비자 클라이언트(40)와 전문 소비자 클라이언트(50)는 인터넷과 같은 공중망(30)을 통해 상기 통합 관리 서버(10)에 접속하여 구성한다.

상기 데이터베이스(D1 ~ D4)는, 천연물을 추출하여 다양한 프랙션(Fraction)으로 나누고 이를 DB화하여 누구나 천연물 추출물, 프랙션을 이용할 수 있게 구축한 천연물 자원 은행 DB(D1)와 ; 천연물에 대한 다양한 생리 활성 검색 방법을 나열하고 이를 DB화하여 누구나 천연물 자원 은행을 통해 천연물 추출물, fraction을이용하거나, 천연물 추출물을 위탁 실험할 수 있게 구축한 천연물 생리 활성 검색 은행 DB(D2)와 ; 화합물에 대한 정보를 세계적인 화합물 DB와 연결시킴으로써 국제적인 화합물 정보를 손쉽게 접할 수 있게 구축한 화합물 DB(D3) ; 및, 천연물에 대한 연구 결과(동의보감, 화합물 정보, 천연물의 과학적인 실험 결과)를 DB화하여 누구나 천연물에 대한 정보를 검색하고, 이용할 수 있게 구축한 천연물 정보 은행 DB(D4)를 포함하여 구성한다.

상기와 같이 구성한 본 발명의 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템은, 소비자가 인터넷을 통해 서비스 서버에 접속하여 회원 가입 후 여러 가지 정보를 얻을 수 있다.

예를 들면, 생리 활성 검색란에 혈압 강하라는 검색어를 치면 지금까지 보고된 혈압 강화 천연물을 찾을 수 있으며, 직접적으로 관련 질환(예, 고혈압)에서 검색해도 관련된 천연물이나 처방을 찾을 수 있다.

또한, 관련 학문 종사자 등 좀 더 심도 있는 검색을 원할 경우(예, coumarin 검색어를 화합물 명에서 검색하면 coumarin이 들어간 천연물을 찾을 수 있다)나 화합물의 2D 구조나 각 특성을 알고 싶은 경우, 또는 특정 천연물에서 보고된 실험 논문을 알고 싶을 경우 등 다양한 검색 방법과 많은 DB를 구축해 놓고 있어, 일반인에서부터 전문가에게까지 도움을 줄 수가 있다.

또한, 천연물 자원 은행에서는 각 종 효소 검색 결과를 같이 올려놓아 소비자가 선택해서 원하는 천연물의 엑스트랙트(extract)를 구입할 수 있으며, 바로 천연물 생리 활성 검색 은행에 특정 실험을 의뢰할 경우 1달 이내에 모든 실험이 끝나서 결과를 사무실에 앉아서 받아 볼 수 있다.

따라서, 이를 위해 자체 구축한 천연물 정보에 대한 DB가 필요하다.

여기에는 천연 약재(한약재) 수백 여 종, 천연 탕재(탕액) 백 여 종, 천연 약물 구성 화학 성분 수 천 여 종, 천연 약재의 기원 약용 식물 및 생약 사진 수 백 여 장 과 여러 가지 검색 기능(생약명, 생약 학명, 생약 사진, 기원 약용 식물명, 기원 약용 식물 학명, 기원 약용 식물 사진, 화학 성분, 생약명의 유래, 약리 효능, 동의보감 기술 내용, 관련 논문, 각 종 민간요법 등)을 제공함으로써 소비자가 쉽게 원하는 정보를 취득할 수 있게 한다.

천연물 자원 은행의 구축을 위해 여러 원산지의 동일 약재를 구입해서 균일한 방법으로 추출, 분리, 정제해서 인터넷에서 손쉽게 원하는 프랙션(fraction)을 선택할 수 있게 DB가 구축되어야 한다.

천연물 생리 활성 검색 은행 논문에 발표한 저자가 작성, 실험하게 하여 신뢰성 있는 실험 결과를 내는 것이 중요하다.

이러한 세 가지 은행 DB(D1, D2, D4)와 화합물 DB(D3)를 잘 연동해서 소비자에게 필요한 정보, 필요한 재료와 실험을 손쉽게 제공해 주는 것이 중요하다.

이하, 본 발명의 실시 예를 첨부된 도면을 참고로 상세 설명하면 다음과 같다.

먼저, 본 시스템의 중요한 부분 중 하나는 예시한 4가지의 DB(D1 ~ D4)는 상호 보완적인 관계를 가지고 있으며, 이 DB(D1 ~ D4)들의 정보를 활용해 소비자 개인에게 필요한 최적의 정보를 제공하기 위해서는 각 DB(D1 ~ D4)들의 연동이 잘 이루어져야 한다.

천연물 정보 은행 DB(D4)는 다양한 생물 자원의 객관성이 인증된 문헌과 직접 생리 활성을 실험한 결과를 종합하여 구축한 것이다.

현재 다양한 종류의 유사 천연물 정보 DB가 있지만 이들은 대부분 문헌을 종합한 것에 불과하다.

본 발명에 사용되는 천연물 정보 은행 DB(D4)는 천연자원의 주요성분에 대한 과학적 데이터를 바탕으로 구축되었다.

상기와 같이 구축한 천연물 정보 은행 DB(D4)의 검색은 가나다순으로 검색이 가능하며, 생약과 탕액으로 나누어 검색할 수 있고, 제목/학명/성분/식물명/생리 활성 등의 세부 내용으로 다음과 같이 검색할 수 있다.

1. 생약(약재편) : ㄱㄴㄷ, ㄹㅁㅂ, ㅅㅇㅈ, ㅊㅋㅌ, ㅍㅎ

2. 탕액(탕액편) : ㄱㄴㄷ, ㄹㅁㅂ, ㅅㅇㅈ, ㅊㅋㅌ, ㅍㅎ

3. 세부 내용 검색

제목 (검색어) 예 : 황기

학명 (검색어) 예 :Astragali Radix

성분 (검색어) 예 : Gamma-Aminobutyric Acid(이하 GABA 라 칭함)

식물명 (검색어) 예 : 단너삼

생리 활성 (검색어) 예 : 혈압 강하, 고혈압 등

상기 제목/학명/성분/식물명/생리 활성 등의 세부 내용 중 어느 하나를 선택하여 검색어로 입력하여도 같은 검색 결과를 얻을 수 있다.

즉, 검색어를 "황기"로 입력하면 도 2a 내지 도 2d에 도시한 바와 같이, 천연물 정보 은행 DB(D4)에 구축되어 있는 제목/학명/식물명/성분/유래/효능/응용/관련자료 등이 검색되어 결과를 출력시킨다.

또한, 상기와 같이 검색된 황기의 성분 중 "GABA"의 화합물을 화합물 DB(D3)를 이용하여 검색하면 도 3a 및 도 3b와 같이 검색 결과를 출력시킨다.

한편, 천연물 자원 은행 DB(D1)는 아직 국내에는 구축되어 있는 곳이 없거나 공개되지 않고 있으며, 다양한 원산지의 동일 품목을 구입해 균일된 방법으로 천연물 엑스트랙트를 만들어 보관하고 실험한 결과를 하기 표(표 1)와 같이 공개한다.

따라서, 전문 소비자의 경우 원하는 프랙션을 손쉽게 구입할 수 있어 비교 실험, 각종 실험 등을 수행하는데 도움을 준다.

[표 1] 천연물 자원 은행: 황기

천연물 생리 활성 검색 은행 DB(D2)는 여러 가지 생리 활성을 검색할 수 있는 실험 방법을 기술하고 공개하여, 서로 필요한 실험을 의뢰하거나 공유할 수 있다.

천연물 정보, 자원 은행과 연계가 되었을 때 더욱 편리한 자료가 될 수 있다.

예를 들어, 천연물 생리 활성 검색 은행 DB(D2)에서 항암 물질과 발암물질의 효능 검색 프로토콜을 검색하면 다음과 같다.

Comet assay(single cell gel electrophoresis)법

생리 활성 검색 소요 기간 : 약 2주일

생리 활성 검색 소요 비용 : 건당 60만원

생리 활성 검색에 필요한 시료량 : 1g

1. 시험 원리

Comet assay(single cell gel electrophoresis)법은 도 4 에 도시한 바와 같이, DNA에 strand breaks, adducts, chromosomal aberrations, cross links, sister chromatid exchanges 및 micronuclei 등을 일으키는 유전 독성 물질(genotoxic carcinogen)을 검색하는데 있어 대단히 유용한 방법으로, 기존의 방법으로는 관찰하기 어려웠던 DNA 손상을 DNA 염색 시약으로 염색하여 형광 현미경 하에서 분석 할 수 있도록 하였다.

또한, Ames test와 마찬가지로 여러 화학 물질의 돌연변이 유발성 및 항 돌연 변이성을 검색할 수 있는 기존의 방법이 있으나, Comet assay(single cell gel electrophoresis)법의 가장 큰 장점은 미생물이 아닌 고등동물을 이용한다는 점이다.

즉, 미생물과 고등동물간에는 유전적, 그리고 생리적으로 큰 차이가 있으며돌연변이 물질의 검색시 Ames test가 모든 물질을 검색할 수 있는 완벽한 방법이 아니기 때문에, 고등동물 세포의 유전자 손상 및 방어 그리고 복구와 같은 현상을 측정함에 있어 Comet assay법이 Ames test보다 훨씬 정확한 방법이 될 수 있다.

또한, 이러한 특성으로 인하여 Comet assay법은 mutagenesis 및 carcinogenesis에 관련되어 있는 여러 가지 물질들의 검색, DNA 손상(damage)과 복구(repair)에 관련된 유전 독성(genetic toxicology)분야, 환경오염에 대한 biomonitoring, 그리고 식품에서 방사선 조사 여부의 검색과 같은 분야로 파급되어 있다.

최근에는 식품 성분으로 DNA 손상을 억제하는 생리 활성 물질의 탐색 분야로도 그 응용 범위가 넓어지고 있다.

2. 검색 능력

Comet assay II system : Interactive Image Analysis System

3. 재료 및 장비

1) PBS buffer, HBSS buffer, RPMI 1640, Agarose gel solution, lysis buffer, Electrophoresis buffer, Neutralization buffer, Fluorescence dye, Proteinase K, Trypan blue, 그외 시약 등은 특급 시약을 사용한다.

2) CO2 incubator

3) Fluorescence microscope

4) Comet assay II system

4. 시험 방법

Comet assay(또는 single cell gel electrophoresis)의 방법은 다음 그림 1에서와 같이 DNA 손상 유도 물질의 세포 처리, 세포의 도말(embedding), 세포 단백질 및 세포막의 용해, DNA의 unwinding, 전기 영동 그리고 염색 및 측정으로 이루어져 있다.

1) 동물 세포주 및 배양

본 실험에 이용된 세포주는 mouse embryo 기원의 non-tumoral normal 3T3 세포를 한국 세포주 은행으로부터 분양 받아 사용한다.

세포주의 배양 및 보존을 위해서는 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, Sigma)에 heat-inactivated된 calf serum(Gibco, U.S.A) 10%, penicillin G(Sigma) 100 unit/㎖, streptomycin sulfate(Sigma) 100 ㎍/㎖을 첨가하여 사용한다.

3T3 세포주는 직경 10 ㎝의 둥근 조직 배양 접시(Falcon, U.S.A) 에서 2 x 105 cell/plate의 농도로 37 C, 5% CO2를 유지하는 습윤 배양기(Labline instruments, U.S.A)로 배양을 실시하며, 또 4일에 한번씩 계대를 실시한다.

2) 의뢰 sample과 발암원의 처리

직접 발암 원(direct carcinogen)인 MNNG(N - methyl - N' - nitro - N - nitroso - guanidine)를 PBS 완충 용액(10 mM, pH 7.4)에 100 ㎍/㎖로 녹인 후 실험 적정 농도가 되도록 HBSS 버퍼(buffer)로 여러 농도로 희석된 의뢰 샘플(sample)을 첨가한다.

한편, 음성 대조구(negative control)로는 HBSS 용액 1 ㎖에 10 ㎕의 PBS 완충 용액을 첨가하고, 양성 대조구(positive control)로는 같은 HBSS 용액 1 ㎖에 실험구(sample treatments)와 마찬가지로 적정 농도의 MNNG(100 ㎍/㎖) 용액을 실험 적정 농도가 되게 첨가한 후, 동일한 방법으로 30분간 반응시킨다.

① Pre-coated agarose gel slide의 준비

PBS 완충 용액에 녹아 있는 0.5% normal melting point agarose(NMA, Sigma, U.S.A)용액을 전자 렌지로 데운 후, 항온 수조에서 60??로 유지한다.

Fully frosted slide glass(ERIE Scientific, U.S.A)의 서리가 슬어 있는 면에 NMA 용액 35 ㎕를 깔아서 건조시킨 후, 다시 75 ㎕를 cover glass(24 X 50mm, Superior, Germany)로 균일하게 깔고 iced된 평평한 stainless box위에 놓아 굳힌다.

이와 같이 만들어진 pre-coated agarose gel slide는 습기가 있는 slide 보관함에 넣어 실험 전까지 4??로 보관한다.

② Cell embedded agarose slide 준비

원심 분리에 의하여 남겨진 처리구별 세포 pellet은 항온 수조에서 45??로 유지되던 0.75% low melting point agarose(LMA, in PBS buffer, Sigma, U.S.A)용액 75 ㎕에 현탁시키고 신속하게 pre-coated agarose gel slide 위로 마이크로 피펫(micropipet)으로 옮긴 후, coverslip를 사용하여 그 세포 현탁액이 골고루 분산되게 덮은 뒤, 얼음이 차 있는 평평한 스테인리스 박스(stainless box) 위에 놓아 굳힌다.

5 분 후, coverslip을 제거하고 세포가 깔린 slide gel 위에 다시 0.75%LMA용액 75 ㎕를 깔고, coverslip을 덮어, 즉시 stainless box위에 놓아 다시 10분간 굳힌다.

다음 coverslip을 벗겨 내고 냉장 보관 중인 alkali lysis buffer에 1시간 동안 침수시켜 핵체만 제외하고 세포내 모든 성분을 용해시킨다.

③ 전기영동

1 시간 동안 lysis 용액에 침수시킨 모든 slide들은 수평상 전기 영동판 위에 각각의 slide를 서로 밀착되게 깔며, 전기 영동용 완충 용액으로 slide 표면 위 0.7 cm까지 가득 채운 후, DNA의 unwinding 과 alkali labile sites(apurine과 apyrimidine lesion, 예를 들면 DNA base adducts 그리고 alkylated bases)의 표출을 위해 20 분간 평형 시간을 준다.

전기 영동은 25 V/300 mA로 고정하여 20 분간 실시한다.

전기 영동 후, 각각의 slide들은 중화 완충 용액으로 충분히 세척하였고 처리구별 세포의 DNA 손상 정도를 살펴보기 위하여 형광 염색 시약 EtBr 100 ㎕로 염색한다.

5. 평가 기준

염색된 slide는 100W mercury lamp(Osram, Germany)가 장착된 형광 현미경(Olympus BX50, Japan)에서 배율 250배로 관찰하며, CCD camera(COHU, U.S.A)를 통해서 보내진 각각의 세포핵의 image는 Comet image analyzing system(Perceptive instrument, U.K.)이 설치된 computer에서 분석한다.

각각의 세포핵에서 DNA 손상 정도는 slide 당 50개의 세포핵 이동거리(migration)를 분석함으로써 정량화하고, 측정된 모든 세포들의 세포간 손상 정도를 파악하기 위하여 DNA 꼬리의 길이에 따라 아래에서와 같이 네 등급으로 나눈다.: none(intact), T(tail length) < 35 ㎛; low(slightly damaged), 35 < T < 75 ㎛; medium(highly damaged), 75 < T <110 ㎛ ; high( very highly damaged), T > 110 ㎛.

6. 참고 자료

1) 지승택, 박종흠, 현창기, 신현길 : Comet assay를 이용한 전통 발효 식품인 배추김치의 항유전 독성 효과, 한국 식품 영양 과학 회지, 29(2), 316-321(2000)

2) Pouget JP, Douki T, Richard MJ, Cadet J : DNA damage induced in cells by gamma and UVA radiation as measured by HPLC/GC-MS and HPLC-EC and comet assay, Chemical Research in Toxicology, 13(7), 541-549(2000)3) Pool-Zobel BL, Adlercreutz H, Glei M, Liegibel UM, Sittlingon J, Rowland I, Wahala K, Rechkemmer G : Isoflavonoids and lignans have different potentials to modulate oxidative genetic damage in human colon cells, Carcinogenesis, 21(6), 1247-1252(2000)

상기와 같이 구축된 데이터베이스(D1~D4)를 이용하기 위하여 소비자 클라이언트가 사이트에 접속하여 서비스를 이용하기 위한 과정을 살펴보면 다음과 같다.

먼저, 사이트에 접속한 이용자는 회원 가입 형식을 통해서 ID와 패스워드를 입력하면 서버에 접속이 가능하다.

서버에 접속된 이용자는 우선 천연물 정보 은행과 화합물 DB에서 여러 가지 필요한 정보를 검색한다.

일반 소비자의 경우 대개 정보검색 수준에서 그치지만 전문 소비자의 경우 정보검색이 끝나면 다시 천연물 자원 은행에서 필요한 천연물을 구입하거나, 구입한 천연물을 천연물 검색 은행에 특정 실험을 위탁할 수 있다.

추후 소비자의 구매, 정보검색 형태를 저장해 두었다가 다음 번 구매시 인센티브나 마일리지를 제공하고, 관련 실험이나 관련 천연물에 대한 기사, 논문 정보를 메일을 통해 보내 준다.

또한, 인기 있는 천연물이나 생리 활성 검색 방법에 대한 정보를 수집하여 추가한다.

따라서, 천연물 자원 은행의 설립을 통해 인터넷을 통해 전국 어디에서나 필요한 엑스트랙트를 손쉽게 구입할 수 있다.

상기와 같이 소비자 클라이언트가 사이트에 접속하여 서비스를 이용하는 과정을 순서도로 도시하면 도 5 에 도시한 바와 같이, 사이트에 접속한 이용자가 회원 가입 형식을 통해서 ID와 패스워드를 입력하여 서버에 접속하는 제 1 과정(100)과 ; 상기 제 1 과정(100)에서 서버에 접속된 이용자가 천연물 정보 은행과 화합물 DB에서 여러 가지 필요한 정보를 검색하여 선택하는 제 2 과정(200)과 ; 상기 제 2 과정(200)에서 정보 검색이 끝난 후, 전문 소비자의 경우 다시 천연물 자원 은행에서 필요한 천연물을 선택하거나, 선택한 천연물을 천연물 생리 활성 검색 은행에 특정 실험을 위탁하는 제 3 과정(300)과 ; 상기 제 3 과정(300)에서 상품을 선택한후 추가 검색 여부를 판단하는 제 4 과정(400) ; 및, 상기 제 4 과정(400)에서 추가 검색이 필요한 경우 상기 제 2 과정(200)으로 리턴하고, 반면에 추가 검색이 필요하지 않은 경우 온라인을 통해 상품을 구매하는 제 5 과정(500)으로 이루어진다.

따라서, 천연물 정보 은행의 설립을 통해 여러 검색(생약명, 생약 학명, 생약 사진, 기원 약용 식물명, 기원 약용 식물 학명, 기원 약용 식물 사진, 화학 성분, 생약명의 유래, 약리 효능, 동의보감 기술 내용, 관련 논문, 각 종 민간요법 등) 기능을 이용하여 다양한 정보를 손쉽게 인터넷으로 얻을 수 있다.

또한, 천연물 정보 은행에 수록된 화합물에 대한 정보를 세계적인 화합물 DB와 연결시킴으로써 국제적인 화합물 정보를 손쉽게 접할 수 있게 했다.

따라서, 천연물 생리 활성 검색 은행을 구축함으로써 손쉽게 인터넷에서 여러 가지 생리 활성 검색 방법을 비교 분석해 보고, 유사한 방법을 이용할 수 있으며, 셋팅된 실험실에서 실험을 위탁함으로써 보다 경제적으로 실험 결과를 얻을 수 있다.

또한, 이것이 외부 기관과 연결을 시켜 줌으로써 활성화를 유도할 수 있으며, 천연물 정보, 자원 은행과 연결하면 천연물 정보 은행을 통해 자료 검색을 하고 나온 천연물을 자원 은행에서 필요한 엑스트랙트를 구입한 후 천연물 검색 은행을 통해 생리 활성 검색을 의뢰하면 1년 이상의 시간이 필요한 실험을 단 몇 주안에 실험 결과를 볼 수 있다.

이상에서 상세히 설명한 바와 같이 본 발명에 따른 천연물 자원, 정보, 생리활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 및 방법은, 과학적인 실험 data를 갖추지 않고 무분별하게 과대 부당 광고되고 있는 기능성 식품, 기능성 화장품 소재 및 제품, 기타 유용 생물 소재 제품에 대한 객관적 자료를 인터넷 상에 일반 소비자들에게 통합적으로 제공하고, 천연물을 연구하는 전문 소비자(실험자)에겐 중복되는 단순 실험을 피하게 함으로써 관련 학문 발전을 위해 일조를 할 수 있으며, 부족한 자료에서 오는 자료 수집의 시간적 낭비를 막을 수 있다.

또한 기능성 생물 소재의 개발, 제조 공급자가 객관적 data를 얻기 위한 실험을 의뢰할 수 있어 전반적인 천연물 산업의 국가 경쟁력을 제고시킬 수 있는 효과가 있다.

본 발명은 기재된 구체적인 예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.

Claims (3)

1. 다수 개의 데이터베이스(D1 ~ D4) 및 전자 상거래 프로그램(20)이 통합 관리 서버(10)에 구축되어져 있으며,

   일반 소비자 클라이언트(40)와 전문 소비자 클라이언트(50)는 인터넷과 같은 공중망(30)을 통해 상기 통합 관리 서버(10)에 접속하여 구성한 것을 특징으로 하는, 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템 이용한 전자 상거래 시스템.
2. 제 1 항에 있어서,

   상기 데이터베이스(D1 ~ D4)는,

   천연물을 추출하여 다양한 프랙션(Fraction)으로 나누고 이를 DB화하여 누구나 천연물 추출물, 프랙션을 이용할 수 있게 구축한 천연물 자원 은행 DB(D1)와 ;

   천연물에 대한 다양한 생리 활성 검색 방법을 나열하고 이를 DB화하여 누구나 천연물 자원 은행을 통해 천연물 추출물, fraction을 이용하거나, 천연물 추출물을 위탁 실험할 수 있게 구축한 천연물 생리 활성 검색 은행 DB(D2)와 ;

   화합물에 대한 정보를 세계적인 화합물 DB와 연결시킴으로써 국제적인 화합물 정보를 손쉽게 접할 수 있게 구축한 화합물 DB(D3) ; 및,

   천연물에 대한 연구 결과(동의보감, 화합물 정보, 천연물의 과학적인 실험 결과)를 DB화하여 누구나 천연물에 대한 정보를 검색하고, 이용할 수 있게 구축한천연물 정보 은행 DB(D4)를 포함하여 구성한 것을 특징으로 하는 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 시스템.
3. 사이트에 접속한 이용자가 회원 가입 형식을 통해서 ID와 패스워드를 입력하여 서버에 접속하는 제 1 과정(100)과 ;

   상기 제 1 과정(100)에서 서버에 접속된 이용자가 천연물 정보 은행과 화합물 DB에서 여러 가지 필요한 정보를 검색하여 선택하는 제 2 과정(200)과 ;

   상기 제 2 과정(200)에서 정보 검색이 끝난 후, 전문 소비자의 경우 다시 천연물 자원 은행에서 필요한 천연물을 선택하거나, 선택한 천연물을 천연물 생리 활성 검색 은행에 특정 실험을 위탁하는 제 3 과정(300)과 ;

   상기 제 3 과정(300)에서 상품을 선택한 후 추가 검색 여부를 판단하는 제 4 과정(400) ; 및,

   상기 제 4 과정(400)에서 추가 검색이 필요한 경우 상기 제 2 과정(200)으로 리턴하고, 반면에 추가 검색이 필요하지 않은 경우 온라인을 통해 상품을 구매하는 제 5 과정(500)으로 이루어진 것을 특징으로 하는 천연물 자원, 정보, 생리 활성 검색 은행을 이용한 전자 상거래 방법.