KR20010034328A

KR20010034328A - 생체액 처리 시스템

Info

Publication number: KR20010034328A
Application number: KR1020007008053A
Authority: KR
Inventors: 아이작 로쓰맨; 토마스 씨. 쥐셀; 제라드 알. 델지아코; 리챠드 에프. 살리나로; 란디 비. 가세츠
Original assignee: 와이너 길버트 피.; 폴 코포레이션
Priority date: 1998-01-23
Filing date: 1999-01-15
Publication date: 2001-04-25
Also published as: US6682656B2; WO1999037340A2; US20040118789A1; NO20003525D0; NO20003525L; JP2002500931A; AU2229499A; US6497823B1; CA2319261A1; EP1049495A2; US20030075516A1; WO1999037340A3; AU749358B2

Abstract

생체액을 처리하는 장치, 시스템 및 방법은, 생체액의 적어도 한가지 성분을 보관하면서 생체액을 그로부터 적어도 하나의 보체 절편을 결핍시킬 수 있는 보체 필터와 접촉시키는 것을 포함한다.

Description

생체액 처리 시스템{Biological fluid treatment system}

보체 시스템은 자체적으로, 그리고 항체와 결합하여 척추 동물을 감염으로부터 보호하는 역할을 하는 것이다. 보체 시스템은 일련의 반응에서 순차적으로 활성화된 일련의 혈장-유래 (plasma-borne) 혈액 단백질 (전효소)로 이루어진다. 단백질은 캐스캐이드 방식, 즉 한 반응의 생성물이 다음 반응의 출발물질로 사용되는 방식으로 활성화된다. 이러한 캐스캐이드는 최종적으로 최종물질인 5-단백질 멤브레인 어택 복합체 (five-protein membrane attack complex: MAC, C5b-9)를 생성하는데, 이 복합체의 생리학적 기능은 침입하는 미생물로부터 숙주를 보호하는 것이다. MAC는 미생물을 용혈시킨다.

보체 시스템이 통상은 숙주를 보호하는데 유용하기는 하지만, 활성화되었거나 활성화가 가능한 다양한 혈액 단백질 (및 그의 절편)이 존재하게 되면 바람직하지 않은데, 특히 이러한 혈액 단백질 및/또는 그의 절편이 수혈용으로 사용되는 혈액 또는 혈액 성분에 존재하는 경우에는 바람직하지 않다. 예를 들어, 활성화된 보체를 환자에게 수혈하면 아나필락토이드 반응, 혈소판 응고 및/또는 면역 억제와 같은 부작용을 일으킬 수 있다. 보관된 혈액 또는 혈액 성분을 수혈하는 경우에는 이와 같은 문제가 더 심각해질 수 있는데, 이는 혈액 성분의 가공시 및/또는 보관시에 혈장-유래 단백질과 플라스틱제 혈액 백 및/또는 혈액 백 튜빙의 표면 간의 접촉에 의하여 단백질이 활성화되기 때문이다. 단백질이 활성화되면 C3a 및 그의 대사물질인 C3a des Arg⁷⁷과 같은 생물학적으로 활성인 보체 절편이 투여될 수 있다.

따라서, 본 발명의 분야에서는 하나 이상의 보체 절편을 제거하는 혈액 및 혈액 성분과 함께 사용하는 장치가 요구되고 있다. 또한, 보관중에 활성화된 보체가 계속해서 축적될 수 있으므로, 본 발명의 분야에서는 보관 기간 중에 보체 활성화를 더 일으킬 수 있는 추가의 가공 단계를 거치지 않고 소망하는 혈액 성분(들)로부터 하나 이상의 보체 절편을 제거하는 장치에 대한 요구가 분명하다.

본 발명은 종래 기술의 문제점의 적어도 일부를 개선하기 위한 것이다. 본 발명의 이러한 잇점 및 다른 잇점들은 하기로부터 명백해질 것이다.

본 출원은 1998년 1월 23일자로 출원된 미국 가출원 제60/072,315호 및 1998년 1월 29일자로 출원된 제60/072,973호의 이익을 청구하며 그 전체 내용은 참고자료로서 본 명세서에 포함되어 있다.

본 발명은 생체액 처리에 관한 것이며, 구체적으로는 보관 중에 혈액 성분, 특히 혈소판 농축물 또는 분리반출 혈소판 (apheresis platelets)으로부터 하나 이상의 보체 절편을 제거하는 것에 관한 것이다.

도 1은 한면의 봉합부에서부터 다른면의 봉합부까지 뻗어있는 보체 필터를 포함하는, 본 발명의 일 구현예에 따른 혈액 백을 도시한 투시도이다.

도 2는 A--A 선을 따라 절단한 도 1의 혈액 백의 횡단면도이다.

도 3은 백의 말단 봉합부에 고정된 보체 필터를 포함하는, 본 발명의 다른 구현예에 따른 혈액 백을 도시한 투시도이다.

도 4는 보체 필터를 포함하는, 본 발명의 또 다른 구현예에 따른 혈액 백을 도시한 투시도이다.

발명의 개요

본 발명에 따르면, 생체액을 보체 필터와 접촉시키는데, 이때 상기 필터는 생체액으로부터 보체를 결핍시킨다. 보다 바람직한 구현예에 있어서, 필터는 생체액의 바람직한 성분들은 실질적으로 보유하지 않으면서 보체를 보유할 수 있다.

바람직하기로는, 본 발명은 보체 필터를 포함하는 용기에 생체액을 수거하는 단계, 및 상기 용기 내에 생체액을 보관하여 보관 중에 생성되는 상당량의 보체를 필터로 포획하거나 보유하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다. 즉, 필터는 보체 "싱크 (sink)"를 제공할 수 있다. 보다 바람직한 구현예에 있어서, 백은 생체액의 취급 및 보관 프로토콜 중에 사용되므로, 생체액이 백 안에서 움직이게 되면 더 많은 양의 생체액이 보체 필터에 노출되고, 이로 인하여 보체를 지속적으로 제거하거나 보유하게 된다.

본 발명에 따른 시스템, 방법 및 장치는 다양한 생체액 처리 프로토콜과 호환가능하며, 바람직한 구현예에 있어서는 기존의 생체액 취급 단계 또는 절차를 수정할 필요가 없거나 약간 수정하는 정도이다. 따라서 본 발명의 일 구현예의 다른 잇점은 생체액 처리 프로토콜을 실행하는 기술자들을 재교육할 필요가 없다는 것이다.

본 발명에서는 용어가 하기의 의미로 사용된다:

(A) 보체: 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "보체"는 보체 단백질, 보체 성분 (예를 들면, C1 내지 C9), 보체 절편, 성분의 생물학적으로 활성인 절편 (및 그 절편의 대사물질), 보체 인자 (예를 들면, 인자 B 및 인자 D), 보체 보조성분, 및 보체 복합체 (예를 들면, C567 페이지 3)중 적어도 하나를 포함한다. 생물학적으로 활성인 절편과 그의 대사물질의 예로는 C3a, C3a des Arg⁷⁷, C4a, C4a des Arg, C5a, C5a des Arg를 들 수 있다.

(B) 생체액: 생체액은 살아있는 생물체와 관련된 처리 또는 미처리된 임의의 액체 (현탁액 포함), 특히 전혈, 따뜻하거나 차가운 혈액 및 보관된 혈액이거나 신선한 혈액; 식염수, 영양제 및/또는 응고방지 용액을 포함하지만 이들만으로 한정되는 것은 아닌 하나 이상의 생리학적 용액으로 희석한 혈액과 같은 처리된 혈액; 혈소판 농축물 (PC), 분리반출 혈소판, 혈소판-풍부 혈장 (PRP), 혈소판-결핍 혈장 (PPP), 무혈소판 혈장, 혈장, 혈청, 신선한 냉동 혈장 (FFP), 혈장으로부터 얻은 성분, 충전 적세포 (packed red cell: PRC), 버피 코트 (buffy coat: BC)와 같은 혈액 성분; 혈액 또는 혈액 성분으로부터 유도되었거나 골수로부터 유도된 혈액 생성물; 혈장으로부터 분리되어 생리학적 용액에 재현탁된 적세포; 및 혈장으로부터 분리되어 생리액에 재현탁된 혈소판을 포함한다. 생체액을 처리하여 백혈구의 일부를 제거한 다음, 본 발명에 따라서 처리할 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 혈액 생성물 또는 생체액은 전술한 성분들, 및 다른 방법에 따라 얻어지며 비슷한 특성을 갖는 유사한 혈액 생성물 또는 생체액을 의미한다.

"유니트 (unit)"라는 용어는 공급체로부터 제공되거나 일 유니트의 전혈로부터 유도되는 생체액의 양이다. 상기 용어는 1회 공여시, 예를 들면 분리반출하는 동안 유도되는 분량을 의미하기도 한다. 통상, 유니트의 체적은 환자마다, 공여시마다 다르다. 통상, 4 또는 그 이상의 유니트를 합해야만 전혈 유도 혈소판 및 버피 코트와 같은 일부 혈액 성분의 복수 유니트를 채우거나 합할 수 있다.

(C) 보체 필터: 보체 필터는 생체액으로부터 보체를 분리하는데, 예를 들면 (전술한 바와 같이) 보체 필터는 보체를 포획하거나 보체와 결합하거나 보체를 보유한다. 즉, 보체 필터를 사용하여 보체-결핍 생체액을 제공할 수 있다. 예를 들어, 필터는 하나 이상의 보체 절편, 예를 들면 C3a 및 C5a와 같은 생물학적으로 활성인 보체 절편을 제거하거나 보유할 수 있다. 바람직한 구현예에 있어서, 보체 필터는 C3a를 제거한다. 일부 구현예에 있어서는, 보체 필터가 보체 활성화를 억제할 수도 있다.

바람직하기로는 필터는 혈장, 혈소판 및/또는 적혈구와 같은 바람직한 생체액 성분의 임상 효과에 부작용 또는 심각한 부작용을 나타내지 않으면서 보체, 보다 바람직하기로는 C3a를 제거하거나 보유할 수 있다. 보다 바람직하기로는, 필터는 바람직한 생체액 성분(들)의 회수율을 현저하게 감소시키지 않으면서 C3a를 제거하거나 보유한다. 일부 구현예에 있어서, 보체 필터는 인터류킨 8 (IL 8) 및/또는 란테스(RANTES)와 같은 바람직한 물질들을 제거하거나 보유할 수 있다.

일 구현예에 있어서, 보체 필터는 부직포, 멤브레인, 이들의 조합물 등과 같이 임의의 적당한 특성을 갖는 하나 이상의 다공성 기질을 포함한다. 다공성 기질은 임의의 적당한 물리적 크기를 가질 수 있으며 통상적으로는 사이에 중심부가 있는 마주보는 두면 (예를 들면, 제1면과 마주보는 제2면)을 갖는 시이트 형태일 것인데, 이때 다공성 기질 중의 기공은 다공성 기질의 제1면과 제2면 사이로 생체액이 이동할 수 있게 한다. 바람직하게는, 보체 필터는 생체액의 혈장 성분의 일부 (예를 들면, 혈액 중에 존재하는 혈장의 일부, 또는 적혈구 및/또는 혈소판과 같은 기타의 혈액 성분을 현탁시키는 혈장의 일부)가 통과하는 하나 이상의 멤브레인, 보다 바람직하게는 다공성 멤브레인을 포함한다. 멤브레인은 마주보는 두면 (예를 들면, 혈장 성분의 적어도 일부는 멤브레인을 통과하는 처리할 생체액에 대하여 제1면과 마주보는 제2면)과 그 사이에 있는 중심부를 갖는다. 멤브레인의 기공은 일반적으로 멤브레인의 마주보는 두면 사이 (예를 들면, 제1면과 제2면 사이)로 생체액을 통과시킬 수 있다.

보체 필터는 임의의 적당한 기공 등급 (예를 들어, 버블 포인트 등에 의해 밝혀진 바와 같이, 주어진 크기의 입자를 소정 정도로 제거할 수 있는 능력)을 가질 수 있다.

필터는 다공성 매질을 포함하여 멤브레인 또는 기타 매질일 수 있는 추가적인 부재 또는 구조체를 포함할 수 있다. 예를 들면, 일부 구현예에 있어서, 필터는 서로 다른 구조 및/또는 기능을 갖는 추가적인 성분을 포함할 수 있다. 예시적으로, 필터는 다공성 매질 (예를 들면, 부직포 및/또는 직물), 메시 및/또는 스크린과 같은 하나 이상의 추가적인 구조체를 포함할 수 있다.

발명의 상세한 설명

본 발명에 의해 제공된 방법에 따르면, 생체액을 그로부터 보체를 결핍시킬 수 있는 보체 필터와 접촉시켜 보체를 생체액으로부터 결핍시킨다. 보체는 생체액과 필터 사이에 접촉이 개시되는 순간부터 및/또는 계속되는 접촉에 의해 제거될 수 있다. 본 발명의 일부 구현예는 생체액을 보체 필터와 접촉시키는 단계, 및 보체 필터 매질을 통해 실질적으로 한정된 생체액 유동 경로를 따라서 생체액을 통과시키지 않으면서 생체액으로부터 보체를 제거하는 단계를 포함한다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 생체액 처리 방법은 생체액으로부터 보체를 결핍시킬 수 있는 보체 필터를 포함하는 용기 내에 생체액을 수거하는 단계를 포함하는데, 이때 생체액이 용기 내에 수거되는 동안 생체액의 적어도 일부가 보체 필터와 접촉한다. 본 발명의 보다 바람직한 구현예에 있어서, 생체액, 또는 그의 적어도 한 성분을 보체 필터가 들어있는 용기 내에 24시간 동안 보관하고, 보관 중에 생체액 또는 그의 적어도 일부를 필터와 반복적으로 또는 지속적으로 접촉시키며, 보관 중에 생성된 상당량의 보체를 생체액으로부터 제거한다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 표면-개질 멤브레인을 포함하며 생체액으로부터 보체를 제거할 수 있는 보체 필터가 제공된다. 보다 바람직한 구현예에 있어서, 보체 필터는 생리학적 pH 조건에서 네가티브 제타 전위를 갖는 다공성 폴리머 표면-개질 멤브레인을 포함한다.

일 구현예에 있어서, 본 발명은 생체액을 담기에 적당한 용기와 상기 용기 내에 들어있는 보체 필터를 포함하는 생체액 처리 장치를 제공한다. 일부 구현예에 있어서는, 보체 필터 매질을 통하여 실질적으로 한정된 생체액 유동 경로를 제공하지 않고도 생체액이 수거되면서 보체 필터와 접촉하도록 보체 필터를 용기 내에 배치한다.

본 발명의 각 성분을 하기에 상술할 것인데, 유사한 성분에 대해서는 유사한 참조번호를 사용하였다.

도 1은 본 발명의 일 구현예를 설명하는 것으로서, 생체액 처리 장치(100)는 생체액을 수납하는 한정된 내부 용적을 갖는 유연성이 좋은 혈액 백과 같은 용기(10)와 그 내부에 위치한 보체 필터(1)를 포함한다. 도시한 구현예에 있어서, 보체 필터(1)는 제1 표면(3)과 제2 표면(4)을 갖는 다공성 멤브레인(2)을 포함한다.

도시된 용기(10)는 제1면 또는 앞면(11)과 제2면 또는 뒷면(12)을 포함하는데, 상기 제1면과 제2면은 함께 봉합되고 앞면과 뒷면의 내면은 용기의 내벽을 형성한다. 도 2에 도시한 구현예에 따른 횡단면도는 용기(10) 내에 고정된 보체 필터(1)를 나타내는데, 여기서 필터(1)의 일부가 용기의 앞면과 뒷면(11 및 12) 사이에 있는 측면 봉합부 (side seal)에 포함되어 있다.

도 3은 다른 예시적인 구현예를 도시한 것인데, 여기서, 필터(1)는 용기의 앞면과 뒷면(11 및 12) 사이에 있는 상단 봉합부 (top end seal)에서 고정된다. 도시한 구현예에 있어서, 필터(1)는 영역(30 및 31)에서 용기의 앞면과 뒷면(11 및 12) 사이에 고정될 수도 있다. 도 3은 또한 영역(40 및 41)에서 용기의 앞면과 뒷면 사이에 있는 추가의 봉합부를 도시하고 있는데, 이들 봉합부는 필터와 접촉하지 않는다.

또 다른 예시적인 구현예에 있어서, 필터는 용기의 앞면과 뒷면 사이에 있는 봉합부에 들어있지 않다. 예를 들어, 필터의 적어도 일부가 용기의 내벽에 고정될 수 있다. 예시적으로서, 도 4에 도시된 장치(100)의 구현예에 따르면, 필터(1)는 영역(20 및 21)에서 용기(10)의 면(11)의 내표면에 고정된다.

또 다른 구현예 (미도시)에 있어서, 필터는 용기의 내부 공간 내에서 이동가능한다. 예를 들어, 필요에 따라서는, 필터를 용기에 붙이거나 고정시키지 않는다. 물론, 필터를 용기 내에 매달아둘 수 있다.

본 발명에 따르면, 보체 필터(11)는 생체액과 필터 사이에 초기 및/또는 후속의 접촉이 발생하는 동안 생체액으로부터 보체를 결핍시킬 수 있다. 통상, 장치(100)는 생체액이 용기 내에 수거되면서 생체액의 적어도 일부가 필터와 접촉하도록 용기(10)내에 위치한 보체 필터(1)를 포함한다. 예를 들어, 필터(1)는 생체액의 적어도 일부가 멤브레인(2)의 제1 표면(3) 및/또는 제2 표면(4)을 가로질러 스치듯이 통과하도록 용기(10) 내에 위치하고 있어서, 생체액이 용기 내로 수거될 때 보체의 일부를 제거할 수 있다. 일부 구현예에 있어서, 생체액이 멤브레인 표면을 가로질러 스치듯이 통과함에 따라 생체액중 혈장 성분의 적어도 일부가 멤브레인을 통과한다. 즉 혈장은 중심부를 통하여 멤브레인의 한쪽 표면에서 다른쪽 표면으로 이동한다.

도 1, 3 및 4에 따른 통상의 구현예에 있어서, 장치(100)는 생체액이 용기(10) 내에 수거될 때 생체액 전체가 멤브레인(2)를 통과하지는 않는다. 물론, 필요한 경우에는, 멤브레인(2)을 관통하는 실질적으로 한정된 생체액 유동 경로를 제공하도록, 예를 들어 생체액이 용기(10)에 수거되는 동안 실질적으로 생체액 전체가 멤브레인(2)을 통과하도록 장치(100)를 고안할 수도 있다.

바람직하기로는, 생체액 또는 그의 적어도 한 성분을 용기(10)에 보관하며 필터(1)를 용기 내에 넣어서 보관 기간 중에 생체액 또는 적어도 그의 일부를 필터(1)와 반복적으로 또는 지속적으로 접촉시킨다. 이러한 바람직한 구현예에 있어서, 보관 기간 중에 생성된 상당량의 보체는 필터에 의해 보유되거나 포획된다. 따라서, 보관 기간 후에 생체액과 함께 상당량의 보체를 통과시키지 않으면서 생체액을 용기로부터 배출 수 있다.

보체 필터(1)를 제조하기 적당한 여러 가지 물질들이 있으며, 필터는 이들 물질중 어느 한 종류만으로 또는 이들 물질의 조합물로 만들어진다. 바람직하기로는, 다공성 기질은 폴리머 물질을 포함한다 (폴리머 물질을 필수성분으로 하거나 심지어는 전부가 폴리머 물질로 이루어질 수 있다). 예를 들어, 멤브레인(2)은 통상 나일론, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리우레탄, 폴리페닐렌 설파이드, 신디오택틱 폴리스티렌, 폴리에스테르 PET (폴리에틸렌 테레프탈레이트) 및 폴리에스테르 PBT (폴리부틸렌 테레프탈레이트)와 같은 폴리머 물질이나, 이로써 한정되는 것은 아니다.

필요에 따라서는, 멤브레인(2)은 표면 개질될 수 있는데, 예를 들어 멤브레인을 방사 중합하고/하거나 가스 플라즈마 처리에 노출시킬 수 있다. 예를 들어, 멤브레인을 표면 개질하여 멤브레인 표면이 친수성을 띄도록 한다 (미국 특허 제4,880,548호에 개시된 바와 같은 CWST 테스트에 의해 측정된 바에 따르면 약 72dyne/㎝ (72mN/m)의 임계 습윤 표면장력 (CWST: Critical wetting surface tension)을 갖는다). 이와는 다르게, 또는 추가적으로 멤브레인을 표면 개질하여 생체액과 접촉시에 보체를 보획하거나 보체를 지니고 있을 수 있는 능력을 개선하고/하거나 그러한 능력이 장시간 지속되도록 할 수 있다.

예를 들어, 멤브레인(2)을 표면 개질하여 표면의 적어도 일부가 음이온성을 띄도록 하는 것이 바람직한데, 예를 들면 생리학적 pH (약 7∼7.4)에서 네가티브 제타 전위를 갖는 표면을 제공한다. 제타 전위를 측정하는 한가지 방법이 미국 특허 제5,217,627호에 개시되어 있다. 보다 바람직하기로는, 멤브레인(2)을 표면 개질하여 제1 표면(3)과 제2 표면(4)이 음이온성을 띄도록 한다. 본 발명에 따른 이러한 표면 개질은 적당한 임의의 방법에 의해 실시될 수 있으며, 바람직하기로는 적당한 모노머를 멤브레인의 표면 상에 그래프트 중합시키는 방법에 의해 이루어질 수 있다. 이러한 모노머는 분자의 비반응성 말단이 하나 이상의 설폰산기 또는 카르복실 또는 카르복실기와 같은 음이온성 성분을 갖는 하나 이상의 반응성기를 포함하는 것인데, 그의 바람직한 예로는 아크릴산 및 메타크릴산과 같은 아크릴 작용기를 갖는 아크릴산 모노머 또는 메타크릴산 모노머를 들 수 있다. 다른 적당한 모노머로는 이타콘산과 같은 불포화 모노카르복실산 또는 디카르복실산, 말레산 무수물과 같은 무수물의 유도체, 또는 설폰산 및 그의 유도체를 예로 들 수 있다.

보체 제거 메카니즘이 완전하게 밝혀진 것은 않았지만, 보체는 흡착, 예를 들면 보체와 필터 표면 사이의 이온성 상호작용에 의해 제거될 수 있다. 예시적으로 설명해보면, 생리학적 pH에서, C3a는 양이온성을 나타내며 필터의 표면 (상)에서 음이온성 기와 착물을 형성할 수 있다.

멤브레인의 표면에 음이온성 성분을 제공하는 그래프트 중합법은 가교제 없이 실시될 수 있지만, 가교제를 사용하는 것이 바람직하며 특히 전술한 바와 같은 아크릴레이트 모노머를 멤브레인의 표면 상에서 그래프트 중합하는 경우에는 가교제를 사용하는 것이 바람직하다. 본 발명에서는 적당한 임의의 가교제를 사용할 수 있다. 적당한 가교제로는 트리메틸롤프로판 트리아크릴레이트와 같은 트리올 아크릴레이트뿐 아니라, 다가 에스테르, 예를 들면 디올 및 폴리올, 특히 에틸렌 글리콜, 1,2-프로필렌 글리콜, 디에틸렌 글리콜, 디펜틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리테트라메틸렌-옥사이드 글리콜, 및 폴리(에틸렌 옥사이드-코프로필렌-옥사이드) 글리콜과 같은 직쇄 또는 측쇄상의 지방족 디올의 디- 또는 폴리-아크릴레이트 및 메타크릴레이트를 사용할 수 있다. 본 발명에서 사용될 수 있는 다른 가교제 모노머의 예로는 알릴, 말레이미드, 불포화 디카르복실산, 방향족 비닐 화합물, 폴리부타디엔 및 트리멜라이트산 에스테르가 있다.

하나, 바람직하게는 둘 이상의 에틸렌 옥사이드 반복 단위를 포함하는 에틸렌글리콜 디메타크릴레이트는 본 발명에서는 바람직한 가교제이다. 디에틸렌글리콜 디메타크릴레이트(DEGDMA)와 폴리에틸렌글리콜 디메타크릴레이트(PEGDMA)는 바람직한 가교제의 두가지 예이다.

바람직한 구현예에 있어서, 보체 필터의 기공 구조 (예를 들어, 기공 등급)는 적혈구 및/또는 혈소판 등의 생체액의 바람직한 세포 성분이 필터 매질(들)의 안쪽 부분으로 유입하는 것을 방지하는 구조이다. 일부 구현예에 있어서, 예를 들어 필터 내부에 보유된 많은 세포를 감소시키는데 있어서는 바람직한 세포 성분이 필터의 안쪽으로 유입하는 것을 방지하는 것이 유용한다. 예를 들어, 처리할 생체액이 혈소판을 포함하는 구현예들, 예시적으로 최종적으로 수혈할 생체액이 혈소판 농축물이거나 분리반출 혈소판인 구현예들에 있어서 멤브레인의 기공 크기는 많은 혈소판이 멤브레인 안쪽으로 유입하는 것을 방지할 수 있을 정도인 약 2㎛ 이하이다. 다른 구현예에 있어서, 멤브레인은 약 1㎛ 이하의 기공 크기를 갖는다.

필터의 면적과 용기 내에서의 필터의 배열은, 예를 들면 처리할 생체액, 용기의 유형 및/또는 크기, 및 처리 프로토콜에 따라서 달라질 수 있다.

면적에 있어서, 일 구현예에서 멤브레인은, 예를 들어 약 2㎠ 이상, 바람직하게는 약 4㎠ 이상의 면적을 갖는다. 통상의 구현예에 있어서, 멤브레인은 약 120㎠ 이하, 바람직하게는 100㎠ 이하의 면적을 갖는다. 예를 들어, 일부 구현예에 있어서 멤브레인의 면적은 약 6∼75㎠ 이다.

필터(1)는 다양한 배열 형태로 용기(10) 내에 배열될 수 있다. 통상, 필터는 필터의 주 표면 (major surface)이 빈 용기의 주 내벽에 실질적으로 평행한 실질적으로 평면 구조를 갖는다. 필요한 경우에는, 필터는 용기의 적어도 한쪽 말단 및/또는 측면 봉합부의 안쪽 및/또는 그 부근에서부터 다른쪽 말단 또는 용기의 측면 봉합부의 안쪽 또는 그 부근까지 뻗어있을 수 있다. 예를 들어, 도 1은 필터(1)가 용기(10)의 한쪽 측면 봉합부 안쪽에서부터 다른쪽 측면 봉합부까지 뻗어있는 구현예를 나타낸다. 이와는 달리, 필터를 측면 봉합부 및/또는 말단 봉합부중 어느 한쪽 또는 양쪽 모두까지 뻗어있을 필요가 없다. 예를 들어, 도 3은 필터(1)가 용기(10)의 한쪽 말단 봉합부 내에 포함되어 있으며 다른쪽 봉합부로 뻗어있지 않은 구현예를 도시하고 있다. 도 4는 필터(1)가 용기의 측면 봉합부 또는 말단 봉합부 내에 포함되어 있지 않으며 용기(10)의 말단 봉합부 또는 측면 봉합부중 어느 쪽으로도 뻗어있지 않은 다른 구현예를 보여주는 것이다.

추가적으로 또는 이와는 다르게, 필터(1)는 용기의 한쪽 말단 (예를 들어, 생체액을 용기 내로 유입시키는 부분을 포함하는 용기의 "상부(top)")에서부터 용기의 다른 쪽 말단 (예를 들어, 생체액이 용기 내로 들어가는 부분의 반대편 말단으로서, 용기의 "바닥면(bottom)")까지 뻗어있다. 그러나, 통상적인 것은 도 1에 도시한 바와 같이, 필터(1)가 용기의 상부 및 바닥면까지 뻗어있지 않은 것이다. 필요에 따라서는, 필터를 용기의 보다 중심부쪽으로 배치할 수 있거나, 용기의 바닥면이나 상부에 좀 더 가깝게 배치할 수 있다.

생체액 취급 프로토콜에 있어서는, 생체액이 들어있는 용기를 원심분리하거나 요동시키거나 회전시키거나 및/또는 뒤집는 등의 방법으로 용기를 더 많이 움직이는 구현예들에서는 생체액이 접촉하는 필터의 표면적이 더 넓어지게 된다. 또한, 용기를 원심분리하는 방법을 포함하지 않는 일부 구현예들에 따르면, 예를 들어 용기를 분리반출 혈소판용으로 사용하는 경우에는 필터를 용기의 보다 바닥면쪽으로 배치할 수 있다. 처리 도중에 용기를 원심분리하지 않으면 혈소판이 필터에 대하여 원심력을 받지 않게 된다. 이와는 달리, 용기를 원심분리하는 일부 구현예에 따르면, 예를 들어 용기에 혈소판-풍부 혈장(PRP)을 수납한 다음 원심분리하여 혈소판 농축물(PC)을 제공하는 경우에는, 필터를 용기의 보다 상부 쪽으로 배치할 수 있다.

본 발명을 실시하기에 적당한 여러 가지 다양한 용기(10)들이 있는데 이들은 이미 당분야에 공지된 것들이다. 생체액을 수거하는 바람직한 용기로는 엑세스 도관 (access conduits)과 엑세스부 (access port)가 장착된 밀폐 용기가 있다. 일 구현예에 있어서, 이 용기는 분리 반출 시스템에 사용하기에 적당하다.

용기는 생체액과 친화적인 임의의 물질로 만들어질 수 있다. 용기는 당분야에서 공지된 대로 형성될 수 있다. 예시적으로, 용기가 혈액 백과 같이 유연성이 좋은 용기인 일부 구현예에 있어서는, 용기를, 예를 들면 한장의 시이트를 접은 다음 봉합하거나 두장의 시이트를 겹친 다음 봉합하거나 취입 성형 기법으로 만들 수 있다. 일부 구현예에 있어서, 용기는 원심부리를 견딜 수 있다. 예시적으로, 용기는 혈액 수집 백 또는 새틀라이트 백 (satellite bag)과 같이 통상 가소성 PVC, 예를 들어 디옥틸프탈레이트, 디에틸헥실프탈레이트, 트리옥틸트리멜리테이트 또는 시트레이트로 가소화된 PVC로 만들어진 유연성이 좋은 용기일 수 있다. 이 백은, 예를 들면 폴리올레핀, 폴리우레탄, 폴리에스테르, 또는 폴리카보네이트로 만들어질 수 있다. 다른 구현예에 있어서, 용기는 드립 챔버 또는 버블 트랩을 제공하는데 사용되는 것과 같이 단단하거나 실질적으로 단단한 용기일 수 있다.

일부 구현예에 있어서, 생체액이 용기 내에 존재하는 동안 필터를 용기 내부의 한쪽 부분에서 다른쪽 부분으로 이동시킬 수 있다. 예를 들어, 필터는 필터와 생체액이 들어있는 용기 사이에 있는 테더 (tether)에 의해, 또는 테더 없이도 용기 내에서 자유롭게 운동 (예를 들면, 부유)할 수 있다.

필터(1)가 용기(10)에 고정되어 있는 구현예들에 있어서, 필터는 임의의 적당한 방법으로 고정될 수 있다. 예를 들어, 필터의 적어도 일부분, 예를 들어 필터의 말단 또는 엣지 (edge)를 용기의 앞면과 뒷면 사이에 넣어 봉합할 수 있다. 이와는 다르게 또는 추가적으로, 필터의 적어도 일부를 용기의 내벽과 같은 임의의 위치에 고정시킬 수 있다.

예시적으로, 접착제, 솔벤트, 라디오 주파수 봉합법 및/또는 가열 봉합법을 이용하여 용기의 면들을 그들 사이에 들어있는 필터의 말단과 함께 봉합하고/하거나 필터의 일부를 용기의 내벽에 고정시킬 수 있다. 필요에 따라서는 용기는 몇 개의 봉합부를 가질 수 있으며, 이들 봉합부에 필터가 고정되거나 포함될 수 있거나 그렇지 않을 수 있다.

본 발명은 여러 가지 생체액 처리 시스템, 그 장치 및 프로토콜에 적용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명은 개방형 시스템 또는 밀폐형 시스템에서 사용될 수 있으며, 생체액을 공여한 후이거나 공여가 진행되는 중에도 사용되는데, 예를 들면 본 발명은 분리반출 혈액 백 시스템에 포함될 수 있다. 본 발명의 구현예는 생체액을 투여하는 중에도 사용될 수 있는데, 예를 들면, 본 발명의 보체 필터는 수혈 투여 셋트 (transfusion administration set)에 포함될 수도 있다.

본 발명에 의해 제공된 방법에 따르면, 생체액을 보체 필터(1)와 접촉시키면 보체 필터는 생체액으로부터 보체를 제거하거나 결핍시킨다. 생체액이 필터와 접촉하기 시작하면서, 및/또는 생체액 또는 생체액의 적어도 일 성분이 일정 기간에 걸쳐, 예를 들면 보관 기간 중에 필터와 접촉하면서 보체를 제거할 수 있다.

본 발명에 따른 방법의 일 구현예에 있어서, 보체 필터(1)가 설치된 용기(10)를 포함하는 장치(100) 내로 생체액을 유입시킨다. 통상, 생체액이 용기(10)에 수거되면서 생체액의 적어도 일부가 필터(1)와 접촉한다. 필터가 용기 내에서 자유롭게 움직일 수 없는 구현예에 따르면 생체액이 수거되면서 생체액의 적어도 일부는 멤브레인(2)의 제1 표면(3) 및/또는 제2 표면(4)을 가로질러 스치듯이 통과하고 생체액은 소정량의 보체를 결핍한다.

이하에 상술한 것과 같이, 바람직한 구현예에 있어서, 생체액을 수거한 후에, 생체액이 용기 내에서 보관되는 동안에 생체액의 적어도 일부는 필터와 반복적으로 접촉하며 (용기 내에 고정되어 있거나 고정되어 있지 않은) 필터는 보체 "싱크"를 제공한다.

통상, 생체액의 일부가 필터(1)와 접촉할때, 예를 들어 생체액이 멤브레인(2)의 표면(들)을 가로질러 스치듯이 통과할 때 생체액 중의 혈장 성분중 적어도 일부는 멤브레인을 통과한다. 즉, 혈장은 중심부를 통하여 멤브레인의 한쪽 표면에서부터 다른쪽 표면으로 통과한다. 필요한 경우에, 생체액은 필터를 관통하는 실질적으로 한정된 생체액 경로를 따라 통과하지 않으면서 보체 필터와 접촉한다. 예시적으로, 생체액 전부가 필터 멤브레인(2)을 통과하지 않도록 하면서 필터(1)를 용기(10) 내에 배치할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 있어서, 생체액을 용기(10) 내에 수거하거나 회수하고, 생체액 또는 그의 적어도 일 성분을 용기 내에 보관한다. 보관 기간 중에, 생체액 또는 그의 적어도 일부는 필터(1)와 반복적으로 또는 지속적으로 접촉하여 보관 기간 중에 생성된 상당량의 보체를 필터로 걸러낸다.

예를 들어, 필터는 하루 생성된 보체 (바람직하게는 C3a)의 적어도 약 50%를 제거하고/하거나 보유하는 보체 싱크를 제공할 수 있다. 보다 바람직하게는, 필터는 하루에 생성된 보체의 적어도 약 60%를 제거하고/하거나 보유한다. 예시적으로, 필터는 적어도 약 48시간 (2일)에 걸쳐서 생체액, 예를 들어 혈소판-함유 생체액으로부터 보체의 적어도 약 60%를 제거하고/하거나 보유한다. 보관된 생체액이 혈소판 농축물(PC) 또는 분리반출된 혈소판과 같은 혈소판-함유 생체액인 일부 구현예에서는 보체 필터가 5일 또는 그 이상의 보관 기간 동안에 하루에 생성된 C3a의 적어도 약 80%, 심지어는 적어도 약 90%를 제거하고/하거나 보유한다.

본 발명에 따르면, 예를 들면 수혈하는 중에 생체액 또는 그의 적어도 일 성분이 용기로부터 배출되며, 고농도의 보체는 수혈하지 않으면서 생체액을 수혈한다.

바람직하게는, 필터는 혈장, 혈소판 및/또는 적혈구와 같은 바람직한 생체액 성분의 임상적 효과를 현저하게 저해하거나 그러한 효과에 현저하게 부정적인 영향을 나타내지 않으면서 보체를 제거한다. 예를 들어, 혈소판 농축물과 같은 혈소판-함유 수혈 생성물을 제공하는 구현예에 있어서, 필터는 보체를 제거하는 반면에, 회수되는 고농도의 혈소판은 그대로 유지시킨다. 통상, 필터는 용기 내에 보관된 혈소판의 적어도 약 80%가 회수되도록 하여, 예를 들면 수혈용으로 사용한다. 보다 바람직하게는, 필터는 용기 내에 보관된 혈소판의 적어도 약 90%가 회수되도록 한다.

생체액의 보관 기간은 생체액의 종류 및/또는 사용 목적에 따라서 달라지며 당업자들에게는 공지되어 있다. 통상, 보관 기간은 수시간 이상, 보다 통상적으로는 약 24시간 이상이거나, 예를 들면 약 48시간 이상이다. 예시적으로, 혈소판 농축물(PC), 버피 코트로부터 제조된 혈소판, 또는 분리반출된 혈소판과 같은 혈소판생성물에 있어서는 보관 기간이 5일까지이거나 그 이상일 수 있으며, 충전된 적세포 (PRC) 또는 전혈과 같은 적혈구-함유 생성물에 있어서는 수주일까지이거나 그 이상일 수 있다.

전술한 바와 같이, 보관 기간 중에, 생체액 또는 그의 적어도 일부를 필터(1)와 반복적으로 또는 지속적으로 접촉시켜 보체를 제거한다 (예를 들면, 보체가 필터에 결합된다). 예를 들어, 용기가 실질적으로 똑바로 세워진 상태로 보관되는 경우에는 용기 중의 생체액의 수위가 용기 내의 필터의 수위보다 높을 수 있어서, 예를 들면 생체액이 필터에 지속적으로 접촉할 수 있다. 이와는 달리, 또는 추가적으로, 용기를 비스듬한 상태, 예를 들면 실질적으로 수평인 상태로 보관하여, 보관 기간 중에 생체액/필터 접촉을 유지한다.

보관 기간 중에 생체액을 움직여주는 (예를 들어, 혈소판 생성물은 20 ~ 24℃의 온도에서 보관시에 교반하여야 한다) 구현예에 있어서, 생체액의 움직임에 의해 생체액은 필터와 접촉할 수 있고, 추가의 보체가 지속적으로 제거될 수 있다. 예시적으로, 생체액을 움직이는 방법은 생체액이 들어있는 용기를 한 위치에서 다른 위치로 움직이거나/이고 용기를 원심분리하거나 뒤집거나 흔들거나 회전시키는 방법중에서 적어도 한가지 방법으로 실시할 수 있는데, 이로써 한정되는 것은 아니다.

전술한 바와 같이, 보체-결핍 생체액을 용기로부터 배출시켜서 수혈할 수 있다. 필요에 따라서는, 본 발명의 구현예는 보체-결핍 생체액을 미소응집체 필터 및/또는 백혈구 결핍 필터와 같은 혈액 필터를 통해 용기로부터 배출하는 단계, 및 보체-결핍된 여과 생체액을 환자에게 수혈하는 단게를 포함한다.

본 발명의 다른 구현예에 있어서, 생체액을 전술한 바와 같은 보체 필터에 접촉시키기 전에, 생체액을 여과하여 미소응집체 및/또는 백혈구를 제거한다. 다른 구현예에 있어서, 유입구와 유출구가 구비되어 있고, 상기 유입구와 배출구 사이에 있는 생체액 유동 경로를 한정하는 하우징을 포함하는 필터 어셈블리는 필터 유동 경로를 관통하는 보체 필터를 포함한다. 필요에 따라서는, 필터 어셈블리는 복수개의 필터 부재를 포함하고 있어서, 예를 들면 미소응집체 및/또는 백혈구를 제거할 뿐 아니라 보체도 제거한다. 상기 유입구와 유출구 사이의 생체액 유동 경로를 관통하는 보체 필터를 포함하는 필터 어셈블리에 대한 일부 구현예에 있어서, 보체 필터는 바람직한 세포 성분이 통과할 수 있는 기공 구조를 갖는다. 예를 들어, 일 구현예에 있어서, 필터는 혈소판이 통과할 수 있을 정도의 충분한 기공 등급을 갖는다.

본 발명의 일부 구현예에 따르면, 생체액 또는 그의 적어도 일부는 내부에 배치된 보체 필터를 갖는 용기 내로 들어가지만, 생체액 또는 성분이 용기 내에 보관되지는 않는다. 예를 들어, 생체액 또는 성분(들)을 추가로 처리하고 (보체 필터를 가지고 있거나 가지고 있지 않은) 다른 용기로 이동시키고/시키거나 보관하지 않고 바로 수혈할 수 있다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 보체 필터를 드립 챔버 또는 버블 트랩과 같은 용기 내에 장착할 수 있으며, 생체액은 용기 내로 유입되면서 필터와 접촉하게 된다. 필요에 따라서는, 필터를 용기 내에 장착하여 용기 내로 유입되는 생체액의 전부 또는 거의 전부를 필터를 통해 필터의 제1면 또는 상방면에서부터 필터의 제2면 또는 하방면으로 통과시킬 수 있다. 생체액의 거의 전부가 필터를 통과하는 일부 구현예에 있어서, 필터는 바람직한 세포 성분을 통과시키는 기공 구조를 갖는다. 드립 챔버 또는 버블 트랩을 통과하는 보체-결핍 생체액을 환자에게 투여할 수 있다.

본 발명의 다른 구현예에 있어서, 보체 필터는 미다공성 기질 또는 실질적으로 미다공성 기질을 포함한다. 예를 들어, 생체액은 전술한 바와 같은 방법으로 표면 개질된 실질적으로 미다공성 매질을 포함하는 보체 필터와 접촉하고, 생체액은 적어도 일부량의 보체 (예를 들면, C3a)를 고갈시킨다. 미다공성 기질 또는 실질적으로 미다공성 기질을 포함하는 보체 필터를 전술한 바와 같은 용기 (예를 들면, 혈액 백과 같은 유연성이 좋은 용기) 내에 장착할 수 있다.

실시예 1

본 실시예는 혈소판이 보체 필터를 포함하는 백 속에 보관되어 보관 도중에 생성된 보체의 대부분이 필터에 의해 보유될 될 수 있다는 것을 보여준다. 따라서, 고농도의 보체는 수혈하지 않으면서 보관된 혈소판을 직접 수혈할 수 있다.

미다공성 나일론 66의 롤을, 40% 3급 부틸 알콜 (t-buOH)/60% 물의 용액에 2% 메타크릴산 (MAA) 및 2% 디에틸렌글리콜디메타크릴레이트 (DEGMA)가 들어있는 용액으로 처리하였다. 나일론 기질을 상기 용액과 접촉시켜서 나일론 기질이 완전히 적셔지기 시작하도록 하였다. 나일론 롤을 방사(irradiation) 챔버로 옮기고 밀봉하였다. 방사 챔버는 40% t-buOH/60% 물중의 MAA와 DEGMA를 포함하기도 한다. 이 롤을 약 20시간 동안 시간당 10,000rads의 노출 속도로 감마선에 노출시켰다. 감마선 노출후 나일론 롤을 방사 챔버로부터 꺼내어 부직포와 접하도록 놓은 다음 이들을 함께 감아서 부직포 사이에 나일론을 삽입하였다. 삽입된 나일론을 탈이온수로 여러번 세척하여 남아있는 모노머와 비중합된 폴리머를 제거한다. 나일론을 드럼 건조하고 부직포를 나일론 멤브레인 시이트로부터 분리한다.

각각의 면적이 약 5제곱인치(in²)(약 2.5인치×약 2인치)인 여섯장의 멤브레인을 시이트로부터 절단하여 얻는다.

멤브레인은 약 82dynes/㎝의 CWST, 약 7 내지 7.4의 pH에서 약 -20mV의 제타 전위 및 약 0.65㎛의 기공 크기를 갖는다.

세장의 멤브레인을 CLX 혈소판 보관 백 (Medsep Corporation, Covina, CA 제품)에 장착하였는데, 이때 각각의 멤브레인을 도 4에 일반적으로 도시한 바와 같은 백 속에 배열하고 멤브레인의 두 부분을 라디오 주파수 용접을 통해 백의 내표면에 고정 (예를 들면, "택 용접 (tack welded)"한다. 라디오 주파수 용접법을 이용하여 이 백을 봉합한 다음, 스팀 살균 및 후속의 열 처리 싸이클을 사용하여 봉합한다.

다른 세장의 멤브레인을 백에 고정하지 않고 "자유롭게 부유"하도록 하여 CLX백 내에 장착한다. 이 백을 전술한 방법대로 봉합한다.

편의상, 멤브레인이 들어있는 백을 이하에서는 "보체 필터 백"이라고 칭하는데, 이들은 "자유롭게 유동하는" 필터 또는 "고정된" 필터를 포함한다.

멤브레인을 가지고 있지 않은 여섯 개의 CLX백을 대조용으로서 제공한다. 이하에서는 이 백을 "대조용 백"이라 칭한다.

보체 필터 백을 생산한 후에, 혈소판-함유 유체를 다음과 같이 제조하여 처리한다. 세쌍의 ABO 매치쌍으로 된 백혈구-결핍 혈소판-풍부 플라즈마 (PRP)를 채우고 대략 동일한 부피로 나눈 다음 각각의 보체 필터 백 또는 대조용 백에 통과시키는데, 이때 밀폐 시스템을 유지한다. PRP 샘플을 각 유니트로부터 취하여 테스트한다.

PRP-함유 보체 필터 백과 대조용 백을 원심분리하여 혈소판-결핍 플라즈마 (PPP)를 제공할 뿐 아니라 각 백의 바닥에 혈소판 펠릿을 제공한다. 약 55g의 PPP가 혈소판 펠릿과 함께 각각의 백 안에 남겨질 때까지 PPP를 농축하여 일 유니트의 혈소판 농축물 (PC)을 제공한다. PC가 들어있는 백을 실온에서 60분간 방치한 다음, 20 내지 24℃로 설정된 환경 챔버 (environmental chamber) 내의 수평 쉐이커 상에서 보관한다. 테스트한지 1일, 5일 및 7일째 되는 날에 PC 샘플을 각각의 백에서 꺼낸다.

각각의 샘플, 즉 PRP 샘플 (0일째)과, (1일째, 5일째 및 10일째의) 각 PC 샘플에 대하여 다음과 같은 테스트를 실시한다: C3a, 혈소판 카운트 (혈소판 손실율), 저침투압 쇼크 회복성 (hypotonic shock recovery), 형태 변화, pH, 및 응집현상 (PC에 대해서만 실시함).

그 결과는 다음과 같다: 1일째와 5일째에, C3a des Arg⁷⁷은 자유롭게 부유하는 보체 필터 백에서 각각 평균 약 68% 및 88%가, 그리고 고정된 보체 필터 백에서는 각각 약 85% 및 81%가 감소하였다.

5일째에, 자유롭게 부유하는 보체 필터 백과 고정된 보체 필터 백에서의 C3a des Arg⁷⁷의 평균 잔류 농도는 각각 약 780ng/㎖ 및 약 750ng/㎖이다. 상응하는 대조군에서의 C3a des Arg⁷⁷의 평균 잔류 농도는 각각 약 6200ng/㎖ 및 약 4100ng/㎖이다.

5일째, 자유롭게 부유하는 보체 필터 백에서의 혈소판 손실율은 약 8%인 반면, 고정된 보체 필터 백에서의 혈소판 손실율은 약 9%이다.

저침투성 쇼크 회복율 (%HSR)에 있어서는, 1일째, 자유롭게 부유하는 보체 필터 백에서 관찰된 혈소판 %HSR 값이 대조용 백에서 관찰된 것보다 약간 낮다. 5일째와 7일째에는 자동롭게 부유하는 보체 필터 백에서의 혈소판 %HSR 값이 대조용 백의 혈소판 %HSR 값과 차이가 없다.

형태 변화 정도 (%ESC)에 있어서는, 1일째와 5일째, 자유롭게 부유하는 보체 필터 백에서의 혈소판 %ESC 값과 5일째의 고정 보체 필터 백에서의 혈소판 %ESC 값이 대조용에 비해 약간 낮다.

모든 보체 백과 대조용 백은 5일간의 보관 기간 내내 7.3 이상의 pH값을 유지한다.

5일 동안에 걸쳐서 고정된 보체 필터 백에서의 응집현상은 대조용에 비해 큰 차이를 나타내지 않았다. 자유롭게 부유하는 보체 필터 백은 5일째에 대조용보다 약간 더 크고 많은 응집체를 갖는다. 7일째가 되면 양쪽 그룹의 보체 백 모두에서 대조용보다는 더 크고 많은 응집체를 갖게 된다.

본 실시예는 (자유롭게 부유하는 및 고정된) 보체 필터가 보관된 전혈-유도 백혈구-감소 PC에서 C3a를 제거하거나 상기 PC에 C3a가 축적되지 않도록 한다는 것을 보여준다.

실시예 2

멤브레인을 상기 실시예 1에 기재된 바와 같이 제조한다.

여섯개의 멤브레인을 CLX백에 넣는데, 도 3에 통상적으로 도시한 바와 같이 각각의 멤브레인이 백의 윗부분을 향하도록 멤브레인을 배열한다. 멤브레인을 백의 영역(30 및 31)에서 백의 상단 봉합부 (top seal)와 함께 봉합한다. 이 백은 영역(40 및 41)에서 추가로 봉합되기도 하는데, 이 영역에는 멤브레인이 포함되어 있지 않다. 라디오 주파수 용접법을 이용하여 봉합부를 제공한다. 실시예 1에 개시한 바와 같은 방법으로 백을 멸균한다.

멤브레인을 포함하지 않은 여섯개의 CLX백을 대조용으로 제공한다.

보체 필터 백을 생산한 후, 혈소판-함유 유체를 하기와 같이 제조하여 처리한다. 세쌍의 ABO 매치쌍으로 된 백혈구-결핍 혈소판-풍부 플라즈마 (PRP)를 채우고 대략 동일한 부피로 나눈 다음 각각의 보체 필터 또는 대조용 백에 넣는데, 이때 밀폐 시스템을 유지한다. PRP 샘플을 각 유니트로부터 취하여 테스트한다.

실시예 1에 개시한 바와 같은 방법으로 PRP-함유 보체 필터 백과 대조용 백을 가공하여 혈소판 농축물(PC)을 제공하고 쉐이커 상에 보관한다. PC 샘플을 보관한지 1일째, 5일째 및 7일째에 꺼내어 테스트한다.

각각의 샘플, 즉 PRP 샘플(0일째), 및 PC 샘플 (1일째, 5일째 및 7일째)의 중량을 측정하고 다음과 같은 테스트를 실시한다: C3a, 혈소판 카운트 (혈소판 손실율), 저침투압 쇼크 회복성 (hypotonic shock recovery), 형태 변화, pH, 및 응집현상 (PC에 대해서만 실시함).

그 결과는 다음과 같다: 1일째, 5일째 및 7일째에는 보체 필터 보체 백 내에서의 C3a des Arg⁷⁷이 각각 평균 약 88%, 91% 및 92% 감소하였다. 보체 필터 백중의 C3a der Arg⁷⁷의 평균 잔류 농도는 1일, 5일 및 7일째에 각각 약 150ng/㎖, 약 370ng/㎖, 및 약 590ng/㎖이다. 상응하는 대조군에서의 C3a 평균 잔류 농도는 각각 약 1230ng/㎖, 약 4210ng/㎖ 및 약 7420ng/㎖이다.

5일째에 보체 필터 백에 대한 평균 혈소판 손실율은 약 4%이다.

저침투성 쇼크 회복율 (%HSR)에 있어서는, 1일째 보체 필터 백에서 %HSR이 약간 억제된 것을 제외하고는 보체 필터 백과 대조용 백간에 뚜렷한 차이가 없다.

형태 변화율 (%ESC)에 있어서는, 보체 필터 백에 비하여 대조용 백의 혈소판 %ESC 값이 1일째, 5일째 및 7일째에 약간 낮게 나타난다.

응집체 발생은 보체 필터 백이나 각각의 대조군간에 뚜렷한 차이가 없는 것으로 나타난다.

본 실시예는 보체 필터가 보관된 전혈-유도 비백혈구-감소 PC (whole blood derived non-leukocyte-reduced PC)에서 C3a를 제거하거나 상기 PC에 C3a가 축적되지 않도록 한다는 것을 보여준다.

공개 문헌, 특허 및 특허출원을 포함하여 본 명세서에 인용된 모든 참고자료들은 그 전체로서 본 명세서에 포함된다.

상세한 설명 및 실시예를 들어 본 발명을 상당히 상세하게 설명하기는 하였으나, 본 발명은 여러 가지 수정 및 변형 형태가 가능하며 설정된 구체적인 구현예로서 한정되지는 않는 것으로 이해되어야 한다. 이러한 구체적인 구현예는 본 발명을 한정하기 위한 것이 아니며, 오히려 그 반대로 본 발명은 본 발명의 취지 및 범주 내에 들어있는 모든 변형예, 등가예 및 대체예를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

Claims

생체액을 보유하기에 적당한 용기; 및

상기 용기 내에 있는 보체 필터를 포함하는 생체액 처리 장치.
제1항에 있어서, 상기 용기가 유연성이 있는 용기를 포함하는 장치.
제2항에 있어서, 상기 용기가 분리반출 시스템에 사용하기 적당한 것인 장치.
유연성이 있는 용기;

기공 크기가 약 2㎛ 이하인 멤브레인을 포함하는 보체 필터를 포함하며,

상기 필터가 상기 용기 내에 위치하여 용기 내에 있는 생체액과 접촉하며 생체액으로부터 보체를 결핍시키는 것인 생체액 처리 장치.
제4항에 있어서, 상기 멤브레인의 기공 크기가 약 1㎛ 이하인 장치.
생체액을 담기에 적당한 용기; 및

보체 필터를 포함하며,

보체 필터를 관통하는 실질적으로 제한된 생체액 유동 경로를 제공하지 않고 도 용기 내에 수거된 생체액과 접촉하도록 상기 보체 필터가 용기 내에 배열되어 있으며 상기 보체 필터가 생체액으로부터 보체를 결핍시키는 것인 생체액 처리 장치.
생리학적 pH에서 네가티브 제타 전위를 갖는 다공성 고분자 표면-개질 멤브레인을 포함하며 생체액으로부터 보체를 제거하는 보체 필터.
제7항에 있어서, 상기 멤브레인이 그 표면에 결합한 카르복실기를 갖는 것인 필터.
제1항 내지 6항중 어느 한항에 있어서, 멤브레인의 표면에 음이온성기가 결합된 장치.
제1항 내지 6항 및 제9항중 어느 한항에 있어서, 필터의 적어도 일부가 용기에 고정된 장치.
제10항에 있어서, 상기 필터의 일부가 용기의 측면 봉합부 (side seal)에 고정된 장치.
제10항에 있어서, 상기 필터의 일부가 용기의 내벽에 고정된 장치.
제1항 내지 6항 및 9항중 어느 한항에 있어서, 상기 필터가 상기 용기에 매달려 있는 장치.
제1항 내지 6항 및 9항중 어느 한항에 있어서, 상기 필터가 용기에 고정되지 않은 장치.
제6항 또는 9항 내지 14항중 어느 한항에 있어서, 상기 용기가 유연성이 있는 것인 장치.
생체액을 보체 필터와 접촉시키는 단계; 및

보체를 생체액으로부터 제거하는 단계를 포함하는 생체액 처리 방법.
생체액으로부터 보체를 결핍시키는 보체 필터를 포함하는 용기 내에 생체액을 수거하는 단계;

상기 보체 필터를 생체액중 적어도 한종류의 성분과 접촉시키는 단계; 및

상기 생체액의 적어도 한가지 성분으로부터 보체를 제거하는 단계를 포함하는 생체액 처리 방법.
생체액으로부터 보체를 결핍시키는 보체 필터를 포함하는 용기 내에 혈소판-함유 생체액을 보관하는 단계;

상기 보체 필터를 혈소판-함유 생체액과 접촉시키는 단계; 및

혈소판-함유 생체액으로부터 보체를 제거하는 단계를 포함하는 생체액 처리 방법.
내부에 보체 필터가 구비된 용기 내에 혈소판-풍부 혈장 (PRP)을 수거하는 단계;

용기 내의 PRP를 원심분리하여 다량의 혈소판-결핍 혈장 (PPP)를 포함하는 상등층과 농축된 혈소판을 포함하는 침강층을 제공하는 단계;

용기로부터 다량의 PPP의 대부분을 배출하는 단계;

나머지량의 PPP 내에 혈소판을 현탁시켜서 혈소판 현탁액을 공급하는 단계;

적어도 약 24시간의 보관 기간 동안 혈소판 현탁액을 용기 내에 보관하면서 보체 필터를 혈소판 현탁액의 적어도 일부와 접촉시키는 단계; 및

혈소판 현탁액으로부터 보체를 제거하는 단계를 포함하는 생체액 처리 방법.
제17항 또는 18항에 있어서, 필터를 관통하는 실질적으로 한정된 생체액 유동 경로를 통해 생체액을 통과시키지 않으면서 생체액을 필터와 접촉시키는 방법.
제19항에 있어서, 용기 내 생체액중 한종류 이상의 성분을 적어도 약 24시간 동안 보관하는 단계를 더 포함하는 방법.
제20항에 있어서, 용기 내 생체액중 한종류 이상의 성분을 적어도 약 48시간 동안 보관하는 단계를 더 포함하는 방법.
제16항 내지 21항중 어느 한항에 있어서, 상기 생체액으로부터의 보체 제거 단계가 생체액으로부터 C3a를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제21항에 있어서, 보체 제거 단계가 적어도 약 24시간에 걸쳐서 생체액으로부터 C3a의 적어도 약 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제23항에 있어서, 보체 제거 단계가 적어도 약 48시간에 걸쳐서 생체액으로부터 C3a의 적어도 약 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제17항 내지 25항중 어느 한항에 있어서, 수거된 생체액중 하나 이상의 성분이 내부에 들어있는 용기를 움직이는 단계를 포함하는 방법.
제26항에 있어서, 상기 용기를 움직이는 단계가 용기를 흔드는 단계를 포함하는 방법.
제19항에 있어서, 보체 제거 단계가 적어도 약 24시간의 보관 기간 중 혈소판 현탁액으로부터 C3a의 적어도 약 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
생체액으로부터 보체를 결핍시키는 보체 필터를 포함하는 용기 내에 혈소판-함유 생체액을 보관하는 단계를 포함하는 생체액 처리 방법.
제29항에 있어서, 혈소판-함유 생체액을 적어도 약 24시간 동안 용기 내에 보관하는 단계를 포함하는 방법.
제30항에 있어서, 혈소판-함유 생체액을 적어도 약 48시간 동안 용기 내에 보관하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제29항 내지 31항중 어느 한항에 있어서, 보체 제거 단계가 생체액으로부터 C3a를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제30항에 있어서, 보체를 결핍시키는 단계가 적어도 약 24시간에 걸쳐서 혈소판-함유 생체액으로부터 C3a의 적어도 약 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제31항에 있어서, 보체를 결핍시키는 단계가 적어도 약 48시간에 걸쳐서 혈소판-함유 생체액으로부터 C3a의 적어도 약 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
생체액으로부터 C3a를 결핍시키는 보체 필터를 포함하는 용기 내에 혈소판-함유 생체액을 보관하는 단계; 및

생체액으로부터 C3a를 제거하는 단계를 포함하는 생체액 처리 방법.
제35항에 있어서, 적어도 약 24시간 동안 생체액을 보관하는 단계; 및

보관 기간 중에 생성된 C3a의 적어도 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제36항에 있어서, 생체액을 적어도 약 48시간 동안 보관하는 단계; 및

보관 기간 중에 생성된 C3a의 적어도 60%를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제36항에 있어서, 적어도 약 24시간 동안 생체액을 보관하는 단계; 및

보관 기간 중에 생성된 C3a의 약 80% 이상을 제거하는 단계를 포함하는 방법.