KR20010015511A - 작물의 병해 방제용 균주, 이를 함유하는 미생물제제 및그 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명에서는 식물병해 방제 효과가 있는 균주로서 토양으로부터 길항미생물인 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) GB-0365(수탁번호: KFCC-11071)와 바실러스속(Bacillus sp.) GB-017(수탁번호: KFCC-11070)을 분리 제공하고, 또한 곰팡이에 의한 작물의 병해, 이를테면 잿빛곰팡이병, 잘록병, 입고병, 시들음병 및 브라운 패취, 라지패취 등의 주요 원인 미생물들에 대해 생육저지 효과와 과채류 수확후 선도유지 효과를 갖는 상기 균주를 함유한 미생물제제를 제공한다. 본 발명에 따른 미생물제제를 사용하면 미생물제제 내에 포함되어 있는 배양액 중에 생성된 활성성분이 1차로 작용하여 곰팡이의 생육을 억제하고, 2차로 미생물제제 내의 생균이 적용현장에서 서식하면서 활성성분을 생산하여 곰팡이의 생육을 원천적으로 억제하므로 각종 작물의 병해 발병률을 감소시킬 수 있게 된다.

Description

작물의 병해 방제용 균주, 이를 함유하는 미생물제제 및 그 용도{Bacillus subtillis GB-017 KFCC-11070}
본 발명은 토양으로부터 분리한 곰팡이에 의한 작물의 병해 방제와 과채류 수확 후의 선도유지에 효과를 갖는 길항미생물인 균주, 이를 함유하는 미생물제제 및 그 용도에 관한 것이다.
농작물에 발생하는 각종 병충해는 직접적으로 수확량을 감소시키고, 그 품질에도 영향을 미친다. 따라서 병충해를 방제하기 위한 농약 개발 및 이의 사용에 관한 연구가 계속되어 유기합성 농약과 생물학적 제제(생물 농약 또는 미생물 농약)가 개발되었다.
유기합성 농약은 1900년대 초에 개발된 것으로, 작물의 보호 수단으로서 매우 유효하며, 작물의 생산 증대, 안정 공급, 농업 종사자의 노동력의 경감 등에 매우 큰 역할을 담당하여 왔다. 그러나 근년에 들어 특히 선진국을 중심으로 안전 지향, 건강 지향, 자연 지향이라는 사회적 요구가 높아지고 있고, 유기합성 농약이 환경을 파괴하고 인체에 유해하다는 등 문제점이 있어 이러한 단점을 보이지 않는 생물 농약의 개발에 많은 관심이 집중되고 있다.
생물 농약이란 미생물 자체를 직접 이용하거나 미생물이 함유된 제제를 이용하여 농작물에 해를 주는 곤충, 응애, 선충 등의 해충과 각종 식물병 원균 혹은 잡초를 방제하는데 쓰이는 농약이라고 할 수 있다. 이러한 미생물 농약은 유기합성 농약과 비교할 때, 독성이 약하고 생태계에 영향이 적으며 약제 내성이나 저항성 유발을 보이지 않는 특성을 가지고 있는 반면에 약효 발현이 늦고 제품의 안정성 및 생산 방법상의 난점이 있는 경우가 있다. 따라서 최근까지는 생물 농약이 전체 농약시장에서 차지하는 비율이 유기합성 농약에 비해 극히 미약한 상태에 있었다. 그러나 앞에서 서술한 바와 같이 유기합성 농약의 남용에 따른 환경오염을 예방하기 위한 방편으로 저독성의 생물 농약에 대한 연구개발이 끊임없이 집중되고 있다. 지금까지 알려진 생물 농약은 크게 미생물 살충제, 미생물 살균제, 그리고 미생물 제초제 등으로 구별할 수 있다.
미생물과 인간과의 긴밀함은 오래되었고, 문명과 함께 하고 있다. 한국의 식생활에 옛날부터 된장, 간장, 술, 절임, 고추장은 모두 미생물에 의해 만들어지고, 외국의 치즈, 요구르트, 와인 등도 미생물에 의해 만들어진다. 농업에서도 미생물은 여러 가지의 부문에서 이용되고 있다. 미생물을 이용한 대표적인 농업 기술은 퇴비이다. 이와 같이 옛날부터 미생물은 무의식적으로 경험적으로 인간의 생활에 밀접하게 이용되어 왔다. 이러한 미생물은 1632년 레벤버그에 의해 발견되었으며, 이의 순수배양 기술은 약 100여년 전에 고흐에 의해 발견되었다.
토양 중에는 매우 많은 종류의 미생물이 다수 서식하고 있고, 그 수는 흙 1g 당 수천억이라고 한다. 그러나, 현대의 과학으로 해명되고 있는 것은 토양미생물 중 겨우 0.1%이고, 나머지 99.9%는 거의 알려지지 않았다. 길항미생물에 대해서도 아직 미지의 분야라고 말할 수 있을 것이다. 식물은 토양에서 영양분을 섭취하지만, 토양에 시비된 비료는 그대로 식물에 이용되지 않는 것이 많고, 또 그대로는 비바람 등에 의해 모두 유실되어 버린다. 토양미생물은 토양에 사용된 비료나 유기물을 식물에 이용할 수 있는 형태까지 분해하여 균체에 축적하고 있다. 비료의 분해 이외에도, 미생물은 공기 중에서 질소를 고정하거나, 암석에서 미네랄을 빼내어 이것을 균체로 축적하거나 하는 작용을 한다. 이 균체에 축적된 영양분은 비바람에 의해 손실되는 일없이, 미생물의 번식에 수반하여 서서히 식물에 제공된다. 식물이 잎을 떨어뜨리거나 생물이 사멸하거나 하면 그곳에 미생물이 번식한다. 미생물이 번식하면 서서히 식물은 분해되고 무기화 되어 토양으로 변한다. 이 미생물도 마침내 사멸하여 토양으로 변하게 된다. 토양으로 변한 물질은 또 식물의 영양 원으로서 흡수되고, 물질의 순환이 이뤄진다. 만일, 미생물이 없었다면 지구는 생물의 유체로 덮여져 버렸을 것이다. 이와 같이 미생물은 물질의 순환에 큰 역할을 담당하고 있다. 이러한 순환은 결국에 미생물이 살아가기 위해 다양한 것을 먹이로서 섭취하는 사실에 의한 것이나, 그 속에서 미생물끼리도 서로 영향을 주면서 살아가고 있다. 미생물은 생존해 가기 위해서 자신의 생육환경을 확보할 필요가 있다. 이를 위해 다른 미생물의 생육을 억제하는 듯한 물질을 생산하여 자신의 생육환경을 만들어낸다. 이러한 현상을 미생물끼리의 타감작용(알로파티)이라 한다. 먹이의 경합, 물질의 생산, 기생 등에 의해 병원균을 살균하거나, 억제하는 작용을 "길항"이라고 부르고 있다.
이와 같이 모든 미생물은 살아가기 위해 다른 미생물에 대해 영향을 주고 있으며, 이중 각종 병충해 방제에 도움이 되는 것을 "길항미생물"이라고 한다.
반복적인 농약의 사용으로 인해 약제내성균의 출현과 농산물의 잔류독성 및 환경오염 등으로 인해 많은 사회적인 문제가 대두되고 있어 점차 농약의 사용이 제한되고 있고, 일부 식물 병해는 기존의 화학합성 농약으로는 방제가 불가능한 것으로 알려지고 있다. 이러한 상황에서 무공해 생물 농약인 길항미생물에 의한 방제는 매우 바람직하며, 그의 개발이 절실히 요구되고 있다.
최근 이러한 문제점들을 해결하고 농작물의 각종 병해만을 제어하여 농작물의 생산성을 증대시키기 위한 대체 수단으로 미생물 자체 또는 미생물이 생산하는 2차 대사산물을 이용하려는 생물학적 방제에 대한 관심이 고조되면서 선진국에서 이 분야가 매우 활발히 진행되고 있다. 또한 향후 10년 안에 생물학적 방제의 시장이 10조원 이상으로 확대될 것으로 전망되고 있고, 관련 생명공학 기술의 발전에 따라 그 가능성은 점점 높아질 것으로 예상되고 있기 때문에 기존 유기합성 농약을 대체할 독성이 적고 약효가 우수한 미생물 살균제에 대한 필요성이 꾸준히 증가되고 있는 실정이다.
한편, 미생물을 이용한 생물학적 방제 연구는 1900년대 초부터 많은 종류의 세균과 곰팡이를 이용하여 식물 병원균을 억제하려고 많은 노력을 기울여왔다. 지금까지 보고된 생물학적 방제제의 대부분이 Agrobacterium sp., Bacillus sp., Pseudomonas sp., Streptomyces sp. 등의 세균류와 Gliocladium virens, Trichoderma sp. 등의 곰팡이를 이용한 개발 연구들이다. 이 분야의 연구는 최근에 특히 활발하게 전개되고 있고, 2000년대 초기까지 약 2조원의 시장을 형성할 정도로 매년 15∼20%의 고도 성장을 유지할 것으로 예측되고 있다. 특히 최근에는 유독성 농약사용에 대한 규제가 전세계적으로 확산되는 과정에 있어 많은 선진국들이 생물공학 제품개발을 서두르고 있고 새로운 신제품 개발과 등록이 빠른 속도로 진행되고 있으며, 현재 40여개에 달하는 미생물 살균제들이 등록되었고 미국에서만 20여종이 등록되었다. 등록된 대부분의 제품이 토양 전염에 의해 발생하는 특히 Fusarium, Pythium, Rhizoctonia, Sclerotinia, Phytophthora 등에 대한 식물병 방제용이나 이들 제품들은 아직 큰 시장을 점유하지 못하고 있는 실정이다.
본 발명의 목적은 특히 곰팡이에 의한 식물병해를 방제할 수 있는 길항미생물인 균주를 토양미생물로부터 분리 제공하는 데에 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 균주를 이용한 미생물제제와 이의 사용방법을 제공하는 데에 있다.
본 발명자들은 토양미생물로부터 식물 병해에 대한 방제 효과가 있는 균주를 찾아내고자 노력한 결과, 길항미생물인 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) GB-0365(수탁번호: KFCC-11071)와 바실러스속(Bacillus sp.) GB-017(수탁번호: KFCC-11070)을 분리하였으며, 이 길항미생물들을 함유한 미생물제제를 이용한 작물의 주요병해를 일으키는 곰팡이에 대한 방제 효과 및 곰팡이에 의한 작물의 주요병해의 방제를 통해 본 발명을 완성하였다.
본 발명에 따른 미생물제제는 잿빛곰팡이병, 잘록병, 입고병, 시들음병 및 브라운 패취, 라지 패취 등의 곰팡이성 병해의 주요원인 미생물들에 대해 생육저지 효과가 있어 곰팡이에 의한 작물의 주요병해 방제에 매우 효과적인 미생물이라 할 수 있다.
미생물제제에 함유되어 있는 균주들은 자연계 토양 내에서 분리한 것으로서 일반적으로 안전하다고 여겨지는 GRAS(Generally recognised as safe) 균주에 속하며, 전통 발효식품의 주요 작용 균주와 유사한 종류이다. 이러한 본 발명의 균주는 자연계에 살포되었을 때, 비교적 오래 생존할 수 있는 내생포자를 형성하며, 대사산물로서 저분자의 환상 펩티드를 생산하는데 이 성분이 곰팡이에 대한 항균성을 나타낸다. 이러한 환상 펩티드로는 이투린(iturin)과 써팩틴(surfactin)이 대표적이며, 일본 및 구미에서 많은 연구가 진행되고 있는 성분으로서 열안정성이 매우 높고, 독성이 거의 없으며, 식물 병원성 곰팡이에 대해 광범위하고 높은 항균력을 나타낸다. 따라서 이들 균주들에 의한 항곰팡이성 기작은 미생물제제 내에 포함되어 있는 배양액 중에 생성된 활성성분이 1차로 작용하여 곰팡이의 생육을 억제하며, 2차로 미생물제제 내의 생균이 적용현장에서 서식하면서 활성성분을 생산하여 곰팡이의 생육을 원천적으로 억제하여 식물 병해의 발병율을 감소시킨다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다.
실시예 1: 길항미생물의 검색 및 선별
상기의 공시 병원성 미생물에 대한 길항 활성을 갖는 미생물을 분리하기 위해서, 경기 및 강원도 지역의 밭 토양과 삼림 토양을 계절별로 시료로서 채취하였다. 길항균 분리는 통상의 삼중층평판법을 이용하였다. 양질의 밭 토양 250g에 2배량의 증류수를 넣고 가압멸균한 다음, 거즈를 이용하여 여과하였다. 증류수를 사용하여 여액을 1ℓ로 조정한 다음 한천 15g를 용해하고 30㎖용 시험관에 10㎖씩 분주한 다음, 통상의 방법으로 가압멸균하여 50℃의 항온수조에 보관한다. 이어서 채취한 토양시료 1g를 멸균생리식염수 100㎖에 잘 현탁한 다음, 현탁액 2∼3방울을 상기 시험관에 넣고 잘 혼합한 후, 곧바로 페트리디쉬에 부어 고화시킨다. 고화된 페트리디쉬 상에 한천용액 5㎖를 분주하여 고화시킨다. 그 다음 계대배양중인 사면배지로부터 식물병원성 미생물의 포자현탁액(1×105cfu/㎖)을 만들고, 이를 50℃ 항온기에 준비된 감자한천배지 10㎖에 2∼3방울 첨가하고 잘 혼합한 후에 상기의 페트리디쉬에 다시 분주하여 삼중층 평판배지를 제조하였다. 제조된 평판배지를 30℃ 항온기에서 3∼7일간 배양하고, 대상 식물 병원성 미생물에 대한 길항성(투명환의 형성으로 판단)을 조사한 다음, 우수한 미생물을 통상의 방법으로 순수 분리하고 일반세균 배양용 배지(Nutrient Broth)를 이용하여 배양한 다음, 통상의 대칭배양법과 투명환 직경을 조사하고, 가장 길항력이 높은 길항미생물 GB-0365와 GB-017을 선별하였다.
실시예 2: 작물의 주요병해를 일으키는 곰팡이에 대한 길항미생물의 동정
분리한 균주 GB-0365를 전자현미경으로 관찰하면 간균의 형태를 띠고 있었고, 그람염색 결과 그람양성으로 확인되었으며, 운동성을 지니고 있었다. 상기의 토양유래의 길항미생물의 분류학적 특성을 버지의 매뉴얼(Bergey's Mannual)에 따라 그 형태학적 및 생화학적 성질을 조사하여 그 결과를 다음의 표1에 나타냈다.
표1: GB-0365의 형태학적, 생화학적 특성
이 균주는 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis)로 동정되었고, 바실러스 섭틸리스 GB-0365로 명명하였으며, 한국종균협회에 1998년 12월 4일자로 수탁번호 KFCC-11071로 기탁하였다.
표2: GB-017의 형태학적, 생화학적 특성
또한 분리한 균주 GB-017의 경우는 전자현미경으로 관찰하였을 때 간균의 형태를 띠고 있었고, 그람양성이었으며, 운동성을 지니고 있었다. 길항미생물 GB-017의 분류학적 특성을 버지의 매뉴얼에 따라 그 형태적, 생화학적 성질을 조사하여 그 결과를 상기의 표2에 나타냈다. 이 균주는 바실러스 속(Bacillus sp.)으로 동정되었고, 바실러스속 GB-017로 명명하였으며, 한국종균협회에 1998년 12월 4일자로 수탁번호 KFCC-11070로 기탁하였다.
실시예 3: 각종 식물병원균에 대한 생육저지 효과
식물병원균으로는 식물에 가장 피해를 많이 주는 병원균인 잿빛곰팡이병균(Botrytis cineria), 시들음병균(Fusarium sp.), 입고병·잘록병(Pythium sp.), 고추역병균(Phytophtora capsici), 흑부병균(Alternaria citri), 흑성병균(Cladosporium cucumerium), 탄저병균(Colletotrichum gloeosporiodes), 점무늬병(Pleospora sp.), 브라운 패취(Rhizoctonia solani MAFF 511103), 라지 패취(Rhizoctonia solani MAFF 305245)의 10종을 사용하였다. 감자 한천배지를 살균한 후 50℃의 배지에 각 병원균의 균사, 세포, 포자를 혼합 평판하고 배지가 완전히 굳은 다음 길항미생물을 배양한 배양액에 페이퍼디스크(직경 8mm)를 묻힌 후 병원균이 혼합된 페트리디쉬에 올려놓고 각종 병원균의 생육이 잘되는 온도에서 3∼4일 배양하였다. 길항미생물이 각종 병원균에 미치는 영향을 저지원의 직경으로 조사하였다. 그 결과는 다음의 표3에 나타냈다.
표3을 참조하면, 바실러스 섭틸리스 GB-0365 균주와 식물 병원균과의 길항효과 검정 결과, 잿빛곰팡이병의 원인이 되는 보트리티스 시네리아(Botrytis cineria)에 대하여 생육저지 효과를 나타내어 균사생육억제 현상이 높았으며, 작물의 시들음병의 원인이 되는 푸사리움(Fusarium sp.), 입고병과 잘록병의 원인균 피시움속(Pythium sp.), 잔디의 주요 병원성 균인 브라운패취(R. solani MAFF 511103), 라지패취(R. solani MAFF 305245)에 대하여서도 억제 효과를 나타내었다. 반면, 세균과 효모에 대해서는 생육 억제효과가 없는 것으로 보아 식물성 병원균에 대해서만 선택적인 활성을 갖는 것으로 나타났다.
표3: 바실러스 섭틸리스 GB-0365의 미생물에 대한 저지력 검정시험
한편, 바실러스속 GB-017의 경우, 입고병과 잘록병의 원인균 피시움속(Pythium sp.)에 대하여 생육저지 효과가 높았으며, 잿빛곰팡이병의 원인이 되는 보트리티스 시네리아(Botrytis cineria), 시들음병의 원인이 되는 푸사리움(Fusarium sp.), 브라운패취(R. solani MAFF 511103), 라지패취(R. solani MAFF 305245)에 대하여서도 억제 효과를 나타내었다. 세균과 효모에 대해서도 생육 억제효과가 없는 것으로 보아 식물성 병원균에 대해서만 선택적인 활성을 갖는 것으로 나타났다.
표4. 바실러스속 GB-017의 각종 미생물에 대한 저지력 검정시험
실시예 4: 길항미생물의 배양 및 제제화
바실러스 섭틸리스 GB-0365와 바실러스속 GB-017은 500ℓ발효기를 사용하여 배양하였으며, 이때 액체배지를 사용하였는데, 액체배지는 대두분 8g, 포도당 10g, 황산암모늄 5g, 인산칼슘 3g, 황산마그네슘 1.5g을 증류수 1ℓ에 섞은 후 pH를 7.0으로 조절하여 사용하였다. 종배양은 효모엑기스 0.5%, 트립톤 1.0%, 소금 0.5%을 이용하여 삼각플라스크를 사용하였다. 30℃, 200rpm으로 12시간 진탕배양한 종배양 물 1ℓ를 30ℓ의 생산배지가 함유된 50ℓ발효기에 접종하고 30℃에서 120rpm, 1vvm의 조건으로 12시간 전배양한 다음, 400ℓ의 생산배지를 함유하는 500ℓ발효기에 접종하고, 길항활성이 가장 높은 시점(발효개시로부터 14∼16시간)까지 30℃, 120rpm, 0.5vvm의 조건하에서 배양하였다.
상기의 배양물을 용도에 따라 액제 또는 입제의 미생물제제로 제조하였다. 액제 및 입제의 미생물제제의 조성은 다음 표5에 나타냈다.
표5: 바실러스 섭틸리스 GB-0365와 바실러스속 GB-017을 이용한 액제 및 입제 미생물제제의 조성
실시예 5: 온실내 잔디병 방제 효과
액제 미생물제제를 이용하여 주요 잔디병원균인 엽고병(Helminthosporium dictyoides MAFF 511103), 브라운 패취(Rhizoctonia solani MAFF 305245), 라지 패취(Rhizoctonia solani MAFF 305219) 그리고 피시움 마름병균(Pythium aphanidermatum MAFF 305199)에 대해 포트 실험에 의해 길항력을 검정하였다. 공시균주를 밀기울배지(소맥피 100g + 물 100ml)를 이용하여 25℃에서 2주간 증식시켰다. 배양물을 풍건하고 8mesh 채로 여과하여, 계속적인 실험의 접종물로 사용하였다. 소형 포트에 살균된 토양을 1/2 부피로 채우고, 나머지 절반은 살균토양 50g당 접종물 0.1g의 비율로 혼합하여 인위적으로 감염시킨 토양을 채웠다. 그리고 생육이 건전한 잔디를 입수하여 뿌리 부위의 토양을 제거하고, 준비된 포트에 정식하였다. 무처리구는 정식후 액제 미생물제제를 사용하지 않았으며, 처리구는 미생물제제를 기준량으로 1×106cfu/g 토양과 5배량이 되도록 희석하여 살포하고, 생육에 따른 발병의 유무를 관찰하였다. 대조구는 4 종류의 잔디병원균만 처리되고 미생물 제제는 살포되지 않았고, 시험구는 4 종류의 잔디병원균에 의해 발병율이 80% 이상인 상태에서 미생물제제를 살포하였다. 포트실험에서 제조한 미생물제제를 이용한 잔디병의 발병억제 효과를 조사한 결과는 다음 표6에 나타냈다. 대조구에서는 병해가 처리 3∼4일 후면 100% 발병율을 보이는데 반해, 길항미생물을 처리한 시험구에서는 30일까지 발병억제 효과가 뚜렷하게 나타났다.
표6: 바실러스 섭틸리스 GB-0365와 바실러스속 GB-017 균주를 함유한 미생물제제에 의한 잔디병의 발병억제 효과
실시예 6: 감귤 수확후 저장중의 방제 효과
우리나라의 경제 과수 작물로 유망한 감귤의 품종 중 가장 품질과 저장이 우수한 '헤이워드(Hayward)' 품종에 대하여 액제 미생물제제를 처리하여 생물학적 방제의 가능성을 알아보았다. 감귤에서 자연적으로 발생하는 곰팡이는 Pennicillium sp., Trichoderma sp., Fusarium sp., Alternaria 등이었으며 이들을 감자 한천배지에서 배양한 후 헤모사이토미터(Hemocytimeter)를 이용하여 6.3×106 포자/㎖ 농도의 현탁액으로 만들어, 과일 적도면에 2cm 간격으로 두 군데에 형성한 병반에 접종하였다. 실험구는 무처리구, 액제 미생물제제 침지처리구, 곰팡이 복합접종구, 곰팡이 복합접종과 액제 미생물제제 침지처리구로 하였다. 무처리구에서는 저장 4일만에 곰팡이가 발생하였고, 2주간의 저장기간동안 전체의 37.76%가 감염되었다. 또한 액제 미생물제제에만 침지된 처리구는 다른 처리구에 비해 곰팡이의 발생이 현저히 느렸다. 구체적으로 8일 경과후 연결부위에서 약간 보이기 시작하였으나 2주간의 저장기간 동안 다른 감염 증상은 나타나지 않았다. 또한 액제 미생물제제에 침지된 처리구에서 곰팡이의 감염에 의한 증상 외에 세균에 의한 독성은 나타나지 않았다. 곰팡이를 접종한 처리구에서는 저장 3일만에 병반에서 감염 증상이 나타났으며 저장 7일째 전부위로 감염이 확대되었다. 한편, 액제 미생물제제를 처리하고 곰팡이를 접종한 처리구에서는 무처리구나 곰팡이 처리구에 비하여 감염의 확대속도가 느렸으며 저장 6일째 감염 증상이 나타나기 시작하였다.
이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 미생물제제를 사용하면 미생물제제 내에 포함되어 있는 배양액 중에 생성된 활성성분이 1차로 작용하여 곰팡이의 생육을 억제하고, 2차로 미생물제제 내의 생균이 적용현장에서 서식하면서 활성성분을 생산하여 곰팡이의 생육을 원천적으로 억제하므로 각종 작물의 병해 발병률을 감소시킬 수 있게 된다.

Claims (3)

  1. 작물의 병해를 일으키는 곰팡이에 대한 방제용 미생물 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) GB-017 KFCC-11070.
  2. 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) GB-017 KFCC-11070을 대두분 8g, 포도당 10g, 황산암모늄 5g, 인산칼슘 3g, 황산마그네슘 1,5g을 증류수 1ℓ에 섞은 후 pH를 7.0으로 조절한 액체배지에서, 발효개시로부터 14~16시간까지, 30℃, 120rpm, 0.5vvm의 조건하에서 배양하여 얻은 배양물.
  3. 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) GB-017 KFCC-11070 또는 그의 배양물을 유효성분으로 하는 식물의 잿빛곰팡이병, 잘록병, 입고병, 시들음병, 브라운 패취, 라지 패취 방제용 및 과채류 수확 후 선도유지용 살균제.
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