KR20000035919A - 제약 화합물 - Google Patents

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KR20000035919A
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리마 에스. 알-아와
윌리암 제이. 엘하트
수바라주 브이. 고투무칼라
마이클 제이. 마티넬리
에릭 디. 모어
리챠드 이. 무어
존 이. 문로
브리안 에이치. 노만
비노드 에프. 파텔
추안 쉬
존 이. 토트
벤카트라가반 바수데반
제임스 이. 레이
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피터 지. 스트링거
일라이 릴리 앤드 캄파니
웨인 스테이트 유니버시티
나까무라 글렌 케이.
유니버시티 오브 하와이
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Abstract

본 발명은 항종양제로서 미소관계를 파괴시키는데 유용할 수 있는 암 치료용 신규 크립토피신 화합물을 제공한다. 본 발명은 또한 신규 크립토피신 화합물을 투여하기 위한 제형을 제공한다.

Description

제약 화합물{Pharmaceutical Compounds}
본 발명은 제약 및 유기 화학 분야에 관한 것이며, 항미소관제로서 유용한 신규 크립토피신 화합물을 제공한다.
세포 성장의 정상적인 조절을 받지 않는 세포의 증식을 특징으로 하는 종양성 질병은 사람과 다른 포유동물의 주된 사망 원인이다. 암의 화학요법에서의 임상적 경험을 통해 신규하며 더욱 효과적인 약물이 이 질병을 치료하는데 바람직한 것으로 입증되었다.
진핵 세포의 미소관계는 세포골격(cytoskeleton)의 주요 성분이며, 동적으로조립되고 해체된다. 이것은 중합되어 미소관을 형성하는 튜불린(tublin)의 헤테로2량체이다. 미소관은 세포 구조, 대사 및 분열의 조절에 있어서 중요한 역할을 한다. 미소관의 동적 상태는 그의 정상적인 기능에 중요하다. 세포 분열 시, 튜불린은 중합되어 유사분열 방추사를 형성하는 미소관을 형성한다.
유사분열 방추사의 사용이 끝나면 이 때 미소관은 해중합(解重合)된다. 따라서, 미소관의 중합 또는 해중합을 파괴함으로 유사분열을 억제하는 약물은 임상 용도에 있어서 몇몇의 가장 효과적인 암 화학요법제를 구성한다.
추가로, 본 발명의 화합물은 또한 살진균성도 있다. 또한, 미소관계를 파괴시킬 수 있는 이러한 약물은 연구용으로 유용할 수 있다.
특정 크립토피신 화합물은 문헌에 공지되어 있으나, 대부분의 제약 용도는 용해도 및 안정성이 보다 큰 크립토피신 화합물이 요구된다. 또한, 보다 넓은 범위의 크립토피신 화합물이 있다면 암 환자에 대한 추가의 치료 선택사항을 제공할수 있을 것이다. 이제 본 출원인들은 보다 큰 수용해도를 제공할 수 있는 것은 물론 미소관계를 파괴하는 능력을 지닌 신규 화합물을 발견해 내었다. 본 발명의 화합물은 종양 치료에 유용할 수 있다. 이러한 화합물은 전체 합성 방법을 이용하여 제조할 수 있으므로 제약상 유용한 약물로 개발하는데 매우 적합하다.
본 발명은 하기 화학식 Ⅰ의 신규 크립토피신 화합물, 또는 그의 제약상 허용 가능한 염 또는 용매화합물을 제공한다.
상기 식 중,
Ar은 페닐, 모든 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 치환된 헤테로방향족기, 비치환된 헤테로방향족기, 헤테로시클릭, C1-C12알킬, C2-C12알케닐, C2-C12알키닐, NR51R52, COR52, OR53및 식의 Ar'
{여기서,
R51은 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R52는 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R53은 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R54는 수소, C1-C6알킬, C1-C6알킬(R57'R57"R57'''), 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 헤테로시클릭, 페닐, 할로겐, 4-(t-부틸디메틸실릴옥시)벤질트리페닐포스포늄, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, N(R59)R60, NHOR61, NHCHR61', CN, NO2, 할로겐, OR62, CH2(O)R62', CH2OC(O)R95, CH2N(R96)R96', COR100, (C1-C6알킬)OR100,및 SR63[여기서, R95는 -R98NH3로 이루어진 군으로부터 선택되고; R96및 R96'각각은 독립적으로 수소 및 C1-C6알킬, -R97NH3및 -R99NR99'R99"(여기서, R97은 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R98은 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R99는 C1-C6알킬이고; R99'및 R99"각각은 독립적으로 수소와, R101이 C1-C6알킬이고, R102가 C1-C6알킬이고, R103이 C1-C6알킬인 Si(R101R102R103)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R104는 C(O)C1-C6알킬N(R106)(R59)R60, C(O)C1-C6알킬N+, 융합된 비시클릭 및 NHR105N(R106)(R59)R60<여기서, R105는 C(O)C1-C6알킬, C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, R106은 수소, C1-C6알킬, CO(O)R107<<여기서, R107은 수소, C1-C6알킬과, R108이 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고 R109가 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고 R110이 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 CR108R109R110으로 이루어진 군으로부터 선택됨>>으로 이루어진 군으로부터 선택됨>으로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R111은 수소, C1-C6알킬 및 C(O)OR107로 이루어진 군으로부터 선택됨]으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R55는 수소, C1-C6알킬, C(R57'R57"R57'''), 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 페닐, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', CN, NO2, 할로겐, OR62및 SR63으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R56은 수소, C1-C6알킬, C(R57'R57"R57'''), 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 페닐, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', (C1-C6)알킬NR59R60, CN, NO2, 할로겐, OR104,CR104, OR62및 SR63(여기서, R57은 수소 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R57'은 수소, 할로겐 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R57"은 수소, 할로겐 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R57'''은 수소, 할로겐 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R58은 수소 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R59는 수소, (C1-C6)알킬, t-부톡시카르보닐, 카르보-t-부톡시(t-BOC) 및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R60은 수소 및 (C1-C6)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R61'은 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R61'은 수소, OR64, CH2NHR65, NHR65'및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R62는 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R62'은 수소, OH, OR62및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R63은 수소 및 C1-C6알킬<여기서, R64는 수소, (C1-C6)알킬, R66이 수소, C1-C6알킬 및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고 R67이 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 CH2NR66R67로 이루어진 군으로부터 선택되고; R65는 수소, C1-C6알킬, NH2및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R65'은 수소, C1-C6알킬, NH2및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택됨>로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택됨}으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R1및 R2각각은 독립적으로 할로겐, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트, 포스페이트, OR31, SR31, NR31, OH, SH, NR92, R93, NR94및 NH2(여기서, R92, R93및 R94각각은 독립적으로 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨)로 이루어진 군으로부터 선택되되, 단
R1및 R2중 하나는 OR31, SR31, R31, OH 및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는
R1및 R2는 18번 탄소 및 19번 탄소와 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노(C1-C6) 알킬포스페이트 고리를 형성할 수 있거나, 또는
R1및 R2는 함께 18번 탄소 및 19번 탄소 사이에 제2의 결합을 형성할 수 있고;
R3는 저급 알킬기이고;
R4는 H 또는 OH이고;
R5는 H 또는 OH이고;
R4및 R5는 함께 C13및 C14사이에 제2의 결합을 형성할 수 있고;
R6은 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로알콕시벤질 또는 디할로알콕시벤질기, B-고리 헤테로방향족, 치환된 헤테로방향족, B-고리(C1-C6)알킬, (C3-C8)시클로알킬, 치환된 C3-C8시클로알킬, 치환된 (C1-C6)알킬, 하기 화학식 Ⅲ'의 기 및 Ⅲ"의 기로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체이고;
R7은 NR51R52, R53NR51R52, OR53, H 및 저급 알킬기(여기서, R51및 R52는 독립적으로 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R53은 C1-C3알킬임)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R8은 H 또는 저급 알킬기이거나, 또는
R7및 R8은 시클로프로필 고리를 형성할 수 있고;
R9는 H, 저급 알킬기, 불포화 저급 알킬, 저급 알킬-C3-C5시클로알킬 및 벤질로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R10은 H 또는 저급 알킬기이고;
R11은 수소, OH, 저급 알킬기, 치환된 페닐, 벤질, 치환된 벤질 및 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R14는 수소 및 저급 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R30은 수소 또는 C1-C6알킬이거나, 또는
R30은 11번 탄소에서 N과 함께 3 내지 7원 시클릭 고리를 형성할 수 있고;
R31은 P, S, (C1-C12)알킬, B, R32및 Si{여기서, R32는 아미노산, 탄수화물, 아미노 당, (당류)q, C(O)R33및 식[여기서, R33은 R37R38, R38, R37N(R20')R38, R37N(R20')(C1-C6)알킬C(O)R38, R37N(R20')C(O)R38, R37O(C1-C6)알킬O(C1-C6)알킬O(C1-C6)알킬O(C1-C6)알킬 및 R37(NR18'R20')R38(여기서, R20'은 수소, C1-C6알킬과, R21'이 수소 및 (C1-C6)알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 -CO2R21'로 이루어진 군으로부터 선택되고; R37은 (C1-C6)알킬이고; R38은 R39가 H 또는 (C1-C6)알킬인 COOR39,NH2, (NR18'R20'), 헤테로시클릭, 헤테로방향족, OH, (C1-C6)알킬 및 아미노산<식 중, R40, R41및 R42각각은 독립적으로 수소, R43이 C1-C6알킬인 OR43, 할로, NH2, NO2, R46이 H, Na, (C1-C6)알킬 및 -C(CH3)3로 이루어진 군으로부터 선택된 OPO(OR46)2, R44가 C1-C6알킬인 -OR44페닐과, 비치환된 단순 방향족기 및 치환된 단순 방향족기로 이루어진 군으로부터 선택된 R45임>임)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R34는 (C1-C4)알킬이고; R35는 수소 또는 (C1-C3)알킬이고; R36은 수소, OH, 할로, (C1-C3)알킬, OR34, NO2, NH2및 헤테로방향족임]으로 이루어진 군으로부터 선택됨}로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R50은 수소 또는이고;
n은 0, 1 또는 2이고;
m은 0, 1 또는 2이고;
p은 0, 1 또는 2이고;
q는 2, 3 또는 4이고;
x는 O, C, S, NH 및 알킬아미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Y는 C, O, NH, S, SO, SO2및 알킬아미노로 이루어진 군으로부터 선택되되, 단,
R1이 할로겐, OH, OR31, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트 및 포스페이트으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R2가 OH, NH2, NR31및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는 R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성하거나, 또는 R1및 R2가 함께 제2의 결합을 형성하고; R3가 저급 알킬이고; R4및 R5가 H이거나, 또는 R4및 R5가 함께 C13및 C14사이에 이중 결합을 형성하고; R6이 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디아할로히드록시벤질, 할로히드록시벤질 또는 디할로히드록시벤질이고; R7, R8, R9및 R10각각이 독립적으로 H 또는 저급 알킬기이고; X 및 Y 각각이 독립적으로 O, NH 또는 알킬아미노이고, R50이이고, R11이 수소이면,
Ar은 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족, 비치환된 헤테로방향족 및 치환된 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되지 않거나, 또는
Ar이 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족, 비치환된 헤테로방향족 및 치환된 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R50이이고, R11이 수소이면,
R2는 할로겐, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트, 포스페이트, OR31및 SR31로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는,
R1이 할로겐, OH, OR31, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트 및 포스페이트으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R2가 OH, NH2, NR31및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는 R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성하거나, 또는 R1및 R2가 함께 제2의 결합을 형성하고, R3가 저급 알킬이고, R4가 H이고 R5가 H이고 R50이 수소이고 R11이 수소이면,
Ar은 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족 및 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되지 않거나, 또는
R1이 할로겐, OH, OR31, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트 및 포스페이트으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R2가 OH, NH2, NR31및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는 R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성하거나, 또는 R1및 R2가 함께 제2의 결합을 형성하고, R3가 저급 알킬이고, R4가 H이고 R5가 H이고 R50이 수소이고 R11이 수소이거나; 또는 R50이및 수소로 이루어진 군으로부터 선택되고; R11이 OH, 저급 알킬기, 치환된 페닐, 벤질, 치환된 벤질 및 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되면,
Ar은 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족 및 치환된 헤테로방향족 및 비치환된 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되지 않거나, 또는
R3가 저급 알킬이고; R4및 R5가 H이거나, 또는 R4및 R5가 함께 C13및 C14사이에 이중 결합을 형성하고; R6이 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로히드록시벤질 또는 디할로히드록시벤질이고; R7, R8, R9및 R10각각이 독립적으로 H 또는 저급 알킬기이고; X 및 Y 각각이 독립적으로 O, NH 또는 알킬아미노이고; Ar이 화학식 Ar'이고,
R54, R55, R56중 하나가 알킬 또는 할로겐으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성할 수 있거나, 또는 R1및 R2가 함께 C18및 C19사이에 제2의 결합을 형성할 수 있거나; 또는 R2가 OH 및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되면,
R54, R55, R56중 적어도 2 개는 C1-C6알킬, 단순한 방향족, 페닐, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', CN, NO2, 할로겐, OR62및 SR63으로 이루어진 군으로부터 선택되어만 하거나; 또는
R3가 저급 알킬이고; R4및 R5가 H이거나, 또는 R4및 R5가 함께 C13및 C14사이에 이중 결합을 형성하고; R6가 B-고리 헤테로방향족, 치환된 헤테로방향족, B-고리 (C1-C6)알킬, (C3-C8)시클로알킬, 치환된 C3-C8시클로알킬, 치환된 (C1-C6)알킬, 화학식 Ⅲ'의 기 및 화학식 Ⅲ"의 기이고; X 및 Y 각각이 독립적으로 O, NH 또는 알킬아미노이면,
Ar은 페닐, 또는 모든 단순한 비치환된 방향족 또는 치환된 방향족 또는 헤테로방향족기, C1-C12알킬 및 C1-C12알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되지 않는다.
<화학식 Ⅲ'>
<화학식 Ⅲ">
상기 식 중,
R15, R16및 R17각각은 독립적으로 수소, OR18, 할로, NR18'R19', NO2, OPO3H2, OR19페닐, SCH2페닐, CONH2, CO2H, PO3H2, SO2R23및 ZZ[여기서, R18은 수소, 아릴, C1-C6알킬, C(O)R90및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R18'은 수소, (C1-C6)알킬 및 C(O)R90'으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R19는 C1-C6알킬, C(O)R90"및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)이고; R19'은 수소, (C1-C6)알킬 및 C(O)R90'''(여기서, R90, R90', R90"및 R90'''각각은 독립적으로 수소, (C1-C6)알킬, R91이 (C1-C6)알킬, 아릴 및 수소로 이루어진 군으로부터 선택된 OR91과, 아릴로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R23은 수소 및 (C1-C3)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, ZZ는 단순한 비치환된 방향족기 및 단순한 치환된 방향족기로 이루어진 군으로부터 선택됨]로 이루어진 군으로부터 선택되고,
Z는 -(CH2)n-, -(CH2)p-O-(CH2)m- 및 (C3-C5) 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명은 제약 제형, 유효량의 화학식 Ⅰ의 화합물에 의한 미소관계 파괴 방법, 유효량의 화학식 Ⅰ의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 포유동물 세포 증식의 억제 방법과, 유효량의 화학식 Ⅰ의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 포유동물에서의 종양형성의 치료 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 항진균적 유효량의 화학식 Ⅰ의 화합물을 진균에 감염됐거나 또는 감염되기 쉬운 동물에 투여하는 것을 포함하는 진균 감염의 억제 방법을 제공한다.
본원에 사용된 "단순한 알킬"이라는 용어는 알킬이 포화, 불포화, 분지 또는 직쇄일 수 있는 C1-C7알킬을 가리킬 것이다. 이것의 예로는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 프로페닐, 에테닐, sec-부틸, n-펜틸, 이소부틸, t-부틸, sec-부틸, 메틸화된 부틸기, 펜틸, t-펜틸, sec-펜틸, 메틸화된 펜틸기 등이 있으나, 이에 결코 제한되지 않는다. "알케닐"이라는 용어는 상기된 바와 같은 1 내지 3개의 이중 결합이 있는 알킬기를 가리킨다. "알키닐"이라는 용어는 상기된 바와 같은 1개 이상의 삼중 결합을 갖는 알킬기를 가리킨다. 알키닐이 1개의 삼중 결합만 갖는 것이 특히 바람직하다. n'이 정수 2 내지 12인 "C1-Cn'알킬"이라는 용어는 1 내지 지정된 숫자의 탄소 원자를 갖는 알킬기를 의미한다. C1-Cn'알킬은 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다.
본원에 사용된 "B-고리 C1-C6알킬"이라는 용어는 B-고리 C1-C6알킬기가 3개 이하의 비탄소 치환체를 포함할 수 있는 포화, 불포화, 분지쇄 또는 직쇄 알킬을 가리킨다. 이러한 비탄소 치환체는 OH, SCH2페닐, CO, NH2, CONH2, CO2H, PO3H2, R21이 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 SO2R21로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 가장 바람직하다,
본원에 사용된 "아미노산"이라는 용어는 아미노기를 함유하는 유기산을 의미한다. 따라서, 이 용어에는 천연 및 합성 아미노산이 포함되며, 아미노기는 산에 이웃한 탄소에 결합될 수 있으나 필수적이지는 않다. 아미노산 치환체는 유기산 관능기를 통해 모분자에 결합된다.
본원에 사용된 "탄수화물"이라는 용어는 수소 및 산소가 물에서와 같은 동일한 비율, 또는 거의 물과 같은 비율로 존재하는 탄소, 수소 및 산소로 구성된 치환체류를 가리킨다. "탄수화물"이라는 용어는 또한 알데히드 또는 케톤 알콜, 또는 가수분해 될 때 알데히드 또는 케톤을 생성시키는 화합물을 가리킨다. "탄수화물"이라는 용어는 당업자에게 통상적으로 이해된 바와 같다. 예를 들어, 그 용어는 C12H22O11및 C6H10O5를 가리키나 이에 결코 제한되지 않는다.
본원에 사용된 "아미노 당"이라는 용어는 탄수화물 분자 상의 모든 가능한 위치에 1 내지 3 개의 아미노 치환체를 함유하는 탄수화물기를 가리킨다.
본원에 사용된 "당류"라는 용어는 2당류 또는 다당류를 형성하는 탄수화물 소단위체를 가리킨다. 이 용어는 예를 들어, 유당(lactose), 맥아당(maltose), 자당(sucrose), 과당(fructose), 전분(starch) 등을 의미하나, 이에 결코 제한되지 않는다.
본원에 사용된 "치환된 페닐"이라는 용어는 단순한 알킬, Cl, Br, F 및 I로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있는 1 내지 3개의 비수소 치환체를 갖는 페닐기를 가리킬 것이다.
본원에 사용된 "치환된 벤질"이라는 용어는 모든 가능한 탄소 원자에 결합될 수 있는, 단순한 알킬, Cl, Br, F 및 I로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있는 1 내지 3개의 비수소 치환체를 갖는 벤질기를 가리킬 것이다. 몇몇의 바람직한 치환된 벤질도 역시 설명되어 있다. 본원에 사용된 "알콕시벤질"이라는 용어는 벤질 고리 상의 모든 가능한 위치에 알콕시 치환체를 갖는 벤질기를 가리킨다. 가장 바람직하게는, 알콕시기는 (C1-C3)알킬이다. 메톡시가 특히 바람직하다. 따라서, "할로알콕시 벤질"이라는 용어는 알콕시 치환체 외에 할로 치환체를 갖는 벤질기를 가리킨다. 각각의 할로 및 알콕시기는 모든 가능한 탄소에서 치환된다. 이와 유사하게, "할로히드록시벤질"은 벤질 고리 상의 모든 가능한 탄소에 할로 치환체를 또한 갖는 히드록시 치환된 벤질기를 가리킨다. 마지막으로, "디할로알콕시벤질"이라는 용어는 벤질 고리 상의 모든 가능한 탄소에 각각 독립적으로 치환된 2 개의 할로 치환체를 추가로 갖는 알콕시 치환된 벤질을 가리킨다.
본원에 사용된 "B-고리 헤테로방향족기"라는 용어는 산소, 질소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 비탄소 치환체를 함유하는 방향족 고리를 가리킨다. 특히 바람직한 B-고리 헤테로시클릭 고리는 하기 식 (식 중, R20은 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택되나 이에 제한되지는 않는다.
특히 바람직하게는, "B-고리 헤테로방향족기"는 하기 식으로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체를 가리킨다.
"치환된 방향족"은 단순한 알킬 및 할로로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3 개의 치환체로 치환된 기를 가리킨다.
본원에 사용된 "시클로알킬"은 그 기가 C1-C3알킬, 할로와, R22가 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 OR22로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3 개의 치환체를 포함할 수 있는 포화된 C3-C8시클로알킬기를 가리킨다. 이러한 치환체는 모든 가능한 탄소 원자에 결합될 수 있다. 특히 바람직하게는, 시클로알킬은 치환되거나 또는 비치환된 시클로헥실을 가리킨다.
본원에 사용된 "저급 알콕시기"는 산소 원자에 결합된 탄소 원자수 1 내지 5의 모든 알킬기를 의미한다. 본원에 사용된 "저급 알킬기"는 탄소수가 1 내지 6이며, 그 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸, sec-부틸, 메틸화된 부틸기, 펜틸, t-펜틸, sec-펜틸 및 메틸화된 펜틸기를 비롯하여 직쇄 및 비직쇄 탄화수소쇄를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본원에 사용된 "불포화된 저급알킬기" 및 "포화된 저급 알킬기"라는 용어는 당업자들이 통상적으로 인식하는 불포화되고 포화되었다는 용어와 관련된 의미를 가질 것이다. "저급 알킬"이라는 용어는 포화되고 불포화된 저급 알킬기 모두를 의미할 것이다(예를 들어, 포화된 기에는 이중 또는 삼중 결합이 없음). 본원에 사용된 "알릴자리 치환된 알켄"은 그 위에 알킬 치환체를 함유하는 탄소 원자수 2 내지 7의 알켄을 의미한다.
본원에 사용된 "에폭시드 고리"는 그 주사슬이 2 개의 탄소 원자 및 1 개의 산소 원자로 이루어진 3 원 고리를 의미한다. 본원에 사용된 "아지리딘 고리"는 그 주사슬이 2 개의 탄소 원자 및 1 개의 질소 원자로 이루어진 3 원 고리를 의미한다. 본원에 사용된 "술피드 고리"는 그 주사슬이 2 개의 탄소 원자 및 1 개의 황 원자로 이루어진 3 원 고리를 의미한다. 본원에 사용된 "에피술피드 고리"는 그 주사슬이 2 개의 탄소 및 1 개의 황 원자로 이루어진 3 원 고리를 의미한다. 본원에 사용된 "술페이트기"는 황 원자에 연결된 추가의 2 개의 산소 원자를 갖는 탄소-탄소-산소-황-산소 주사슬로 이루어진 5 원 고리를 의미한다. 본원에 사용된 "모노알킬포스페이트 고리"는 2 개의 추가의 산소 원자(이 중 하나는 저급 알킬기 함유)를 갖는 탄소-탄소-산소-인-산소 주사슬로 이루어진 5 원 고리를 의미한다.
본원에 사용된 "단순한 비치환된 방향족기"는 모노시클릭 또는 비시클릭 공액계, 예를 들어 푸릴, 피롤릴, 티에틸, 피리딜 등이거나, 또는 비시클릭 공액계, 예컨대 인돌릴 또는 나프틸(이에 제한되지는 않음)에 4n+2의 전자수를 갖는 통상의 방향족 고리를 가리키나. 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "단순한 치환된 방향족기"는 할로겐 및 저급 알킬기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일기로 치환된 단순한 방향족 고리를 가리킨다.
본원에 사용된 "헤테로방향족"은 산소, 질소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 개 이상의 비탄소 원자를 함유하는 방향족 고리를 가리킨다. 가장 바람직한 헤테로방향족 고리는 3 내지 8 원 고리이다. 헤테로방향족 고리의 특히 바람직한 기는 3 내지 6원 고리를 가진다. 특히 바람직하게는, 헤테로방향족기는 고리 중에 1 내지 3 개의 비탄소 원자를 가질 것이다. 1 개의 산소 원자를 함유하는 5 원 고리는 바람직한 기 중 하나이나, 이 용어는 이 기에 결코 제한되지 않는다.
본원에 사용된 "헤테로시클릭"은 산소, 질소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 개 이상의 비탄소 원자를 함유하는 시클릭 고리를 가리킨다. 헤테로시클릭 고리는 포화되거나 또는 비포화될 수 있다. 또한, 헤테로시클릭 고리는 서로 융합되어 비시클릭 또는 트리시클릭계를 형성할 수 있다. 이것의 예는 2 개의 이중 결합을 갖는 5 원 고리 또는 1 개의 이중 결합을 갖는 5 원 고리이나, 이에 제한되지는 않는다. 헤테로시클릭 고리는 비치환될 수 있거나, 또는 C1-C6알킬, 카르보닐, 할로겐 및 OR62로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3 개의 치환체를 가질 수 있다. 가장 바람직한 헤테로시클릭 고리는 3 내지 8 원 고리이다. 헤테로시클릭 고리의 특히 바람직한 기는 3 내지 8 원 고리이다. 특히, 바람직하게는, 헤테로시클릭기는 1 내지 3 개의 비탄소 원자를 가질 것이다. 바람직한 헤테로시클릭 고리 중 하나는 1 개의 질소, 1 개의 황 및 1 개의 메틸 치환체와 2 개의 이중 결합을 갖는 5 원 고리이다.
바람직한 헤테로시클릭기는 식을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
"치환된 헤테로방향족"은 단순한 알킬 및 할로로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3 개의 치환체로 치환된 기를 가리킨다.
본원에 사용된 "할로겐" 또는 "할로"는 역사적으로는 할로겐으로 알려진 주기율표 상의 족의 요소들을 가리킨다. 할로겐화의 방법으로는 수소 할라이드의 부가, 고온에서의 치환, 광 할로겐 치환 등이 있으나 이에 제한되지는 않으며, 이러한 방법들은 당업자들에게 공지되어 있다. 특히 바람직한 할로겐으로는 클로로, 플루오로 및 브로모가 있으나, 이에 결코 제한되는 않는다.
본원에 사용된 "아릴"이라는 용어는 당업자에 의한 용어와 통상적으로 관련된 의미를 갖는다. 즉, 그 용어는 방향족 탄화수소로부터 하나의 수소 원자를 제거시킴으로 유래되는 유기 라디칼을 의미한다. 예를 들어, 페닐, 톨릴, 살리실 등이나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "포유동물"이라는 용어는 보다 고등한 척추동물의 포유류를 가리킬 것이다. "동물"이라는 용어는 포유동물, 파충류, 양서류 및 어류를 포함할 것이나 이에 제한되지는 않는다. "포유동물"이라는 용어는 사람을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본원에 사용된 "치료"라는 용어는 열거된 질환의 예방 또는 개선, 또는 확립된 질환의 제거를 포함한다. 본 발명의 크립토피신 화합물은 가축의 건강 목적용은 물론 사람 환자의 치료에 유용할 수 있다.
화합물 중의 목적하는 R6치환체가 아민을 포함한다면, R6기의 아민 치환체는 아미노 보호기로 보호시켜야만 한다. 당업자들은 예를 들어, 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973): Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley(New York, 1981)]을 비롯하여 표준 방법의 지침을 이용하여 적절한 아미노 보호기를 쉽게 선택할 수 있다.
본원에 사용된 "유도체화" 라는 용어는 본 발명의 목적하는 화합물에 접근하도록 하는 당업자에게 공지된 표준 화학적 변형을 가리킨다.
본 발명의 방법은 전적으로 합성 크립토피신 화합물을 제조하는 방법을 제공한다. 시판되는 아미노산은 크립토피신 분자로 용이하게 고리화될 수 있다.
공지된 크립토피신 화합물 중 많은 것들이 항종양 활성의 가능성이 있으나, 약물의 정맥 내 투여 동안 불충분한 수용해성의 문제점이 나타날 수 있다. 이러한 문제점은 본래의 독성을 가질 수 있는 가용화 계면화성제, 예를 들어 크레모포르를 사용하는 것과 관계가 있다. 본 발명은 항종양 활성은 물론 보다 큰 수용성이 있는 신규 크립토피신 화합물을 제공한다. 이러한 화합물은 목적하는 수용성의 특성은 물론 용인될 수 있는 효능을 가진다.
본 발명의 화합물의 제조 방법은 가장 바람직하게는, 용매 존재하에서 완료된다. 당업자들은 표준 방법론을 이용하여 적절한 용매를 선택할 수 있다. 적절한 불활성 유기 용매는 당업자에게 공지된 것, 예를 들어 테트라히드로푸란(THF) 및 디메틸포름아미드(DMF)이나, 이에 제한되지는 않는다. DMF는 특히 바람직하다. 수성 기재 용매는 본원에 사용된 방법 중의 일부에는 적합할 수 있다. 이러한 수성 용매의 pH는 본 공정을 촉진시키기 위해 목적하는 바 대로 조절될 수 있다. 본 발명의 몇몇 통상적인 화합물은 표의 형태로으로 제공되나, 이러한 열거된 화합물은 본 발명의 범위를 어떤 식으로든 제한하지는 않는다.
추가의 바람직한 화합물은 예를 들어, 인접한 Cl 및 OR 기의 위치가 상품화되어 있는, 상기 표 1에 열거된 것들을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, 상기 열거된 동일한 R 치환체의 기본 구조는 하기 식과 같다:
흥미있는 추가의 화합물은 표 1에 열거된 바와 같으나, Ar은 페닐 대신 Ar'이고, R54는 Ar'의 파라 위치에서 OCH3이나, R55및 R56각각은 수소이다.
또한 흥미있는 화합물은 표 1에 열거된 바와 같으나, Y 위치의 O가 NH로 치환된다. 이러한 시리즈 중의 한 화합물의 예는 하기 식과 같다:
또한 바람직한 화합물은 예를 들어, 상기 표 1에 열거된 것은 물론 인접한 Cl 및 OR의 상품화된 위치에 의해 명명되는 화합물이나, 이에 제한되지는 않으며, 열거된 화합물 각각은 크립토피신 고리의 6 위치에 gem 디메틸기 대신 단일 메틸기를 갖는다(예를 들어, 하기 23 참조).
본 발명의 특히 바람직한 화합물은 크립토피신 고리의 6 위치에 디메틸기를 가진다.
본 발명의 바람직한 화합물은 Ar이 Ar'이고 R54, R55및 R56중 하나만이 OCH3이고, R9및 R10각각이 메틸인 표 1에 제시된 바와 같다.
일반적으로 공지된 실릴화제가 본 발명의 화합물의 제조 공정에 사용된다(예를 들어, 문헌[Calvin, E.W., "Silicon Reagents in Organic Synthesis", Academic Press, (London, 1988)] 참조). 특히 유용한 실릴화제는 "트리-저급 알킬 실릴"제를 포함하나, 이 용어에 속하는 것으로 예상되는 것은 트리이소프로필실릴, 트리메틸실릴 및 트리에틸실릴, 트리메틸실릴 할라이드, 실릴화된 우레아(예를 들어, 비스(트리메틸실릴)우레아(BSU))와, 실릴화된 아미드(예컨대, N,O-비스(트리메틸실릴)아세트아미드(BSA))이다. 이 중, BSA가 바람직하다.
본 발명의 몇 몇 바람직한 특성을 본 발명의 바람직한 실시태양이 제공되록록 그 특성이 독립적으로 선택될 수 있는 표의 형태로으로 제시하였다.
본 발명은 하기 특징에 결코 제한되지 않는다.
A) R8은 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸 또는 이소펜틸인 화합물;
B) R7은 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸 또는 이소펜틸인 화합물;
C) R7은 H이고, R8은 메틸이고, R3은 메틸이고, X 및 Y 모두는 O가 아닌 화합물;
D) R3은 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸 또는 이소펜틸인 화합물;
E) R9는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸 또는 이소펜틸인 화합물;
F) R10은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸 또는 이소펜틸인 화합물;
G) C-3, C-6, C-7, C-10, C-16, C-17 및 C-18로 이루어진 군으로부터 선택된 기 중 적어도 하나가 R 입체화학(상기 화학식 Ⅰ에 나타난 바와 같이 번호 붙여짐)인 크립토피신 화합물;
H) C-3, C-6, C-7, C-10, C-16, C-17 및 C-18로 이루어진 군으로부터 선택된 기 중 적어도 하나가 S 입체화학(상기 화학식 Ⅰ에 나타난 바와 같이 번호를 가리킴)인 크립토피신 화합물;
I) Ar'은 NR59R60, NHOR61및 NHCHR61'로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체를 갖는 페닐인 화합물;
J) Y가 알킬아미노, NH 및 O로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물;
K) Y가 O이고, R7및 R10각각이 수소이고; R9가 저급 알킬이고; R1이 할로인 화합물;
L) R7, R8각각이 메틸인 화합물;
M) R7은 수소인 화합물;
N) R2는 글리시네이트인 화합물;
O) R2는 아크릴레이트인 화합물;
P) R1및 R2는 에폭시드 고리를 형성하는 화합물;
Q) R6는 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로히드록시벤질 및 디할로히드록시벤질로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물;
R) R4및 R5는 이중 결합을 형성하는 화합물;
S) n은 O이고; R6는 한 치환체가 할로겐이고, ne는 R12가 저급 알킬인 OR12기인 화합물;
T) 화학식 Ⅰ의 화합물은 미소관계의 파괴에 사용된 화합물;
U) 화학식 Ⅰ의 화합물은 항종양제로 사용된 화합물;
V) 화학식 Ⅰ의 화합물은 포유동물의 치료제로 사용된 화합물;
W) 화학식 Ⅰ의 화합물은 항진균제로 사용된 화합물;
X) R6는 화학식 Ⅲ'이고 파라 히드록시 치환된 화합물;
Y)로 이루어진 군으로부터
로 부터 선택되고;
Z) Z는 n이 0인 -(CH2)n-이고;
AA) Z는 n이 2인 -(CH2)n-이고;
BB) Z는 n이 1인 -(CH2)n-이고;
CC) R15, R16및 R17중 적어도 하나가 SCH2페닐, NH2, CO, CONH2, CO2H, PO3H2와, R21이 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 SO2R21로 이루어진 군으로부터 선택되고;
DD) Ar은 페닐이고;
EE) Ar은 OH, OCH3, 할로 및 메틸로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환체로 치환된 페닐이고;
FF) R2는 할로겐, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트, 포스페이트, OR31R32및 SR31R32로 이루어진 군으로부터 선택되고;
GG) R6는 Z기의 첫 번째 탄소가 트립토피신 분자에 대한 결합 지점에 대하여 식의 Z를 갖고; 화학식 Ⅰ의 화합물은 진균 감염의 치료에 사용되고;
II) R50은 이고;
JJ) R11은 수소이고;
KK) R4및 R5각각은 수소이고;
LL) Ar은 파라 에틸 치환된 페닐이고;
MM) Ar은 파라 메틸 치환된 페닐이고;
NN) Y는 NH이고;
OO) R3는 메틸이고;
PP) R6는로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명은 세포의 증식을 억제하기 위해 본원에 개시된 유효량의 제약 또는 수의 조성물을 환자에 투여하는 것을 포함하는, 과다 증식되고 있는 포유동물 세포에 의해 초래되는 병리적 상태를 경감시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 바람직한 실시태양에 있어서, 본 방법은 또한 병리적 상태를 경감하도록 되어 있는 하나 이상의 추가의 치료 요법을 환자에 투여하는 것을 포함한다. 본 발명의 특히 바람직한 실시태양에 있어서, 병리적 상태는 종양 형성을 특징으로 한다. 본 발명의 또다른 바람직한 실시태양에 있어서, 종양은 유방, 소세포 폐, 비소세포 폐, 결장직장, 백혈병, 흑종, 췌장, 선암, 중추신경계(CNS), 난소, 전립선, 연질 조직 및 연골의 육종, 두경(頭頸), 췌장 및 식도를 포함하는 위, 위, 골수종, 방광, 신장, 갑성선을 포함하는 신경내분비와, 호지킨병 및 비호지킨병으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본원에 사용된 "종양"은 보통의 성장 제한을 받지 않는 세포의 증식 때문에 일어나는 비정상적 성장인 종양을 가리킨다. 본원에 사용된 "항종양제"는 세포의 종양적 표현형을 억제, 제거, 지체 또는 역전시키는 모든 화합물, 조성물, 혼합물, 보조 혼합물 또는 블렌드이다.
항유사분열제는 그 분자의 작용 기작을 기준으로 하여 3 개 군으로 분류될 수 있다. 제1군은 튜불린을 격리시켜 미소관의 형성을 억제하는 콜히친 및 콜세미드를 포함하는 약물로 구성된다. 제2군은 튜불린에 대한 파라결정성 응집물의 형성을 유도하는 빈블라스틴 및 빈크리스틴을 포함하는 약물로 구성된다. 빈블라스틴 및 빈크리스틴은 항암제로 잘 공지되어 있는데, 유사분열 방추사 미소관을 파괴하는 그들의 작용은 우선적으로 과다증식 세포를 억제한다. 제3군은 튜불린의 중합을 촉진시켜 미소관을 안정화시키는 탁솔을 포함하는 약물로 구성된다.
모든 종양 세포의 약물에 대한 내성 및 복합 약물에 대한 내성 표현형의 발휘와, 임상적으로 입증된 종양 세포에 대한 항미소관제의 작용 방식은 비약물에 대해 내성을 갖는 종양 세포에 대한 항미소관제의 세포독성은 물론, 약물에 대해 내성 표현형을 가진 종양 세포에 대한 세포독성을 발전시키는 것을 필요로 한다.
현재, 화학요법, 외과적 수술, 방사선 요법, 생물학적 감응 변형제를 이용한 요법 및 면역요법이 암 치료에 이용된다. 각각의 치료 요법의 방식에는 당업자에게 공지되어 있는 특정 지침이 있고, 하나 또는 모두가 종양 세포의 전체적인 파괴를 달성하기 위한 시도에 사용될 수 있다. 일반적으로 배합 요법이 단일 항종양제를 사용하는 것 보다 더 효과적이기 때문에, 다른 종양제와 합해진 화학식 Ⅰ의 화합물을 사용하는 화학요법인 배합 화학요법도 또한 본 발명에 의해 제공된다. 따라서, 본 발명의 또다른 측면은 상술된 유익함을 제공하는, 치료상 유효량의 1종 이상의 화학식 Ⅰ의 화합물과 그의 무독성 부가염을 포함하는 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 또한 생리학적으로 허용 가능한 액체, 겔 또는 고체 담체, 희석제, 보조제 및 부형제와 함께 제공될 수 있다. 이러한 담체 보조제 및 부형제는 문헌[U.S. Pharmacopoeia, Vol. ⅩⅩⅡ 및 National Formulary Vol. ⅩⅦ, U.S. Pharmacopoeia Convention, Inc., Rockville, MD(1989)]에서 찾아볼 수 있다. 추가의 치료 방식은 문헌[AHFS Drug Information, 1993 e. By the American Hospital Formulary Service, pp. 522-660]에 제공되어 있다. 이들 참고 분헌 각각은 당업자들에게 잘 공지되어 있고 쉽게 이용될 수 있다.
본 발명은 또한 종양 질병을 치료하는데 사용되는 1종 이상의 화합물과 1종 이상의 추가의 항종양제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 화학식 Ⅰ의 화합물과 합해 사용할 수 있는 항종양제는 문헌[Merck Index 11, pp 16-17, Merck & Co., Inc. (1989)]에 제공된 것들을 포함한다. 머크 인덱스(Merck Index)는 당업자들에게 폭 넓게 인식되어 있고 쉽게 이용될 수 있다.
본 발명의 추가의 실시태양에 있어서, 항종양제는 결코 제한되지는 않으나 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실, 6-머캅토푸린, 시토신, 아라비노시드, 히드록시우레아 및 2-클로로데옥시아데노신으로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함할 수 있는 항대사물질일 수 있다. 본 발명의 또다른 실시태양에 있어서, 예상되는 항종양제는 결코 제한되지는 않으나 시클로포스파미드, 메팔란, 부술판, 파라플라틴, 클로람부실 및 질소 머스타드로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함할 수 있는 알킬화제이다. 또다른 실시태양에 있어서, 항종양제는 결코 제한되지는 않으나 빈크리스틴, 빈블라스틴, 탁솔 및 에토포시드로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함할 수 있는 식물 알카로이드이다. 또다른 실시태양에 있어서, 예상되는 결코 제한되지는 않으나 항종양제는 독소루비신, 다우노루비신, 미토마이신 C 및 블레오마이시으로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함할 수 있는 항생제이다. 또다른 실시태양에 있어서, 예상되는 항종양제는 결코 제한되지는 않으나 클라우스테론, 디모스타볼론, 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤, 타목시펜, 폴리에스트라디올 포스페이트, 메게스테롤 아세테이트, 플루타미드, 닐루타미드 및 트릴로탄으로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함할 수 있는 호르몬이다.
또다른 실시태양에 있어서, 예상되는 항종양제는 결코 제한되지는 않으나 L-아스파라기나제 및 아미노아크리딘 유도체, 예를 들어 암사크린(이에 결코 제한되지 않음)으로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함할 수 있는 효소를 포함한다. 추가의 항종양제는 스킬, 롤렌드 티.(Skeel, Roland T.)의 문헌["Antineoplastic Drugs and Biologic Response Modifier: Classification, Use amd Toxicity of Clinically Useful Agent's Handbook of Cancer Chemotherapy (3rded.), Little Brown & Co. (1991)]에 제공된 것들을 포함한다.
이들 화합물 및 조성물을 수의용으로 포유동물에 투여할 수 있다. 예를 들어, 가축을 사람 임상 환자와 상당히 동일한 방식으로 치료할 수 있다. 일반적으로, 치료 효과에 요구되는 투여량은 사용 유형, 투여 방식은 물론 개인 숙주의 특수화된 요구조건에 따라 다를 것이다. 통상적으로, 투여량은 숙주 체중의 0.001 내지 1000 ㎎/㎏, 더욱 일반적으로 0.01 내지 10 ㎎/㎏의 범위일 것이다. 이와 달리, 이 범위에 속하는 투여량을 목적하는 치료적 이득을 얻을 때까지 긴 시간, 통상적으로 24 시간 이상에 걸쳐 일정하게 주입시켜 투여할 수 있다. 실제로, 약물 투여량은 물론 투여 경로는 당업자들에 의해 측정될 수 있는 상대적 유효성, 상대적 독성, 종양의 성장 특징 및 세포 주기에 대한 화학식 Ⅰ의 화합물의 영향, 약물 동력학, 연령, 성, 환자의 신체 조건 및 사전 치료를 기준으로 하여 선택될 수 있다.
추가의 항종양제 함유 또는 무함유의 화학식 Ⅰ의 화합물을 천연 또는 염 형태의 치료 조성물로 제형시킬 수 있다. 제약상 허용 가능한 무독성 염은 무기 염기, 예를 들어 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘 또는 수산화철과, 유기 염기, 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로부터 유래될 수 있는 염기 부가염을 포함한다. 이러한 염은 또한 모든 유리 양이온기에 의해 산 부가염으로 형성될 수 있고, 일반적으로는 예를 들어 무기산(예컨대, 염산 또는 인산), 또는 유기산(예컨대, 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 만델산 등)에 의해 형성될 것이다. 본 발명을 촉진시키는 추가의 부형제는 예를 들어, 문헌[U.S. Pharmacopoeia]에 당업자에 제공되어 있다.
주어진 치료 조성물 중에 포함되는 특정 담체의 적합성은 바람직한 투여 경로에 따라 다르다. 예를 들어, 항종양 조성물은 경구 투여용으로 제형될 수 있다. 이러한 조성물은 통상적으로 액체 용액 또는 현탁액, 또는 고체 형태로 제조된다. 경구용 제형은 일반적으로 결합제, 충전제, 담체, 방부제, 안정화제, 유화제, 완충제, 만니톨, 유당, 전분, 스테아르산 마그네슘, 나트륨 사카린, 셀룰로스, 탄산마그네슘 등과 같은 첨가제를 포함한다. 이들 조성물은 용액, 현탁액, 정제, 환제, 캡슐, 서방성 제형 또는 분말 형태를 이룰 수 있고, 통상적으로 활성 성분 1% 내지 95%를 함유한다. 더욱 바람직하게는, 조성물은 활성 성분 약 2% 내지 약 70%를 함유한다.
본 발명의 조성물은 액체 용액, 현탁액 또는 에멀젼 중 어느 하나인 주사 가능한 형태; 주사 전 액체 중 용액 또는 현탁액에 적합한 고체 형태로 제조될 수 있다. 이러한 주사 가능한 형태는 피하, 정맥 내, 복강 내, 근육 내, 협막 내 또는 흉막 내 투여될 수 있다. 활성 성분 또는 성분들을 종종 생리상 허용 가능하며 활성 성분(들)과 적합한 희석제, 담체 또는 부형제와 혼합할 수 있다. 적절한 희석제 및 부형제는 예를 들어, 물, 염수, 덱스트로스, 글리세롤 등과 그의 배합물이다. 또한, 필요하다면, 조성물에는 최소량의 보조물질, 예를 들어 습윤제 또는 유화제, 안정화제 또는 pH 완충제를 포함시킬 수 있다.
본 발명은 또한 포유동물 세포의 증식을 억제하기에 충분한 양의 화학식 Ⅰ의 화합물을 그 세포와 접촉시켜 포유동물 세포의 증식을 억제하기 위한 화학식 Ⅰ의 화합물의 사용 방법을 제공한다. 바람직한 실시태양은 과다증식성 포유동물 세포의 증식을 억제하는 방법이다. 본 발명의 목적에 있어서, "과다증식성 포유동물 세포"는 성장의 특징적인 조절(예를 들어, 프로그램화된 세포 사멸(programmed cell death))을 받지 않는 포유동물 세포이다. 또다른 바람직한 실시태양은 포유동물 세포가 사람인 경우이다. 본 발명은 또한 포유동물 세포를 1종 이상의 화학식 Ⅰ의 화합물 및 1종 이상의 항종양제와 접촉시키는 것을 제공한다. 예상되는 항종양제의 유형은 상기에서 토의되었다.
본 발명은 또한 복합 약물에 대한 내성 표현형을 비롯하여 약물에 대한 내성 표현형을 가진 과다 증식 세포를 과다 증식 포유동물 세포의 증식을 억제하기에 충분한 양의 화학식 Ⅰ의 화합물로 접촉시켜 그 증식을 억제하기 위한 화학식 Ⅰ의 화합물의 사용 방법을 제공한다. 바람직한 실시태양은 포유동물 세포가 사람인 경우이다. 본 발명은 또한 화학식 Ⅰ의 화합물과, 상기에서 토의된 1종 이상의 추가의 항종양제와 접촉시키는 것을 제공한다.
본 발명은 화학식 Ⅰ의 화합물을 함유하는 유효량의 제약 조성물을 환자에 투여하여 과다증식되는 포유동물 세포에 의해 초래되는 병리적 상태, 예를 들어 종양 형성을 경감하는 방법을 제공한다. 본원에 사용된 "병리적 상태"는 정상적인 성장 제한을 받지 않는 포유동물 세포의 증식으로 발생된 모든 병리를 가리킨다. 이러한 세포의 증식은 상기 토의된 종양 때문일 것이다.
또다른 바람직한 실시태양에 있어서, 종양 세포는 사람이다. 본 발명은 다른 치료요법은 물론 다른 항종양제와 합해진 화학식 Ⅰ의 화합물을 사용하여 이러한 병리적 상태를 경감시키는 방법을 제공한다.
당업자들에게 공지된 표준 방법을 이용하여 본 발명의 화합물의 유효성을 평가할 수 있다.
이러한 방법의 예는 다음과 같다.
본 발명의 화합물은 병원성 진륜류에 대해 유용한 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 크립토코커스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans)를 치료하는데 있어서의 유용성은 효모 질소 기재 덱스트로스 아가 배지를 사용하는 크립토코커스 네오포르만스에 대한 시험 결과로 설명될 수 있다. 이 분석을 수행하기 위해, 본 발명의 화합물을 트윈(Tween) 20으로 보충된 디메틸 술폭시드 중에 가용화시킨다. 84 크립토코커스 네오포르만스 균주의 넓게 펼친 패널에 대해 아가 희석 분석 플레이트 중 약물의 최종 농도가 0.008 ㎍/㎖ 내지 16.0 ㎍/㎖ 범위인 아가 희석 분석 플레이트를 얻기 위해, 84 멸균 증류수/10% DMSO로 2배의 희석물을 만들었다. 바람직한 항진균 활성을 설명하기 위해 84 크립토코커스 네오포르만스 단리물의 패널에 대한 최소 억제 농도를 측정하였다.
코르베트(Corbett) 분석(참조 문헌[Corbett, T.H. et al. Cytotoxic Anticancer Drugs: Models and Concepts for Drug Discovery and Development, pp 35-87, Kluwer Academic Publishers: Norwell, 1992와 또한 Valeriote, et al. Discovery and Development of Anticancer Agents; Kluwer Academic Publisher: Norwell, 1993])을 이용하여 화합물을 KB, 사람 비인강 암 세포주, LoVO, 사람직장결장 선암 세포주에 대한 최소 억제 농도에 대해 선별하였다.
항암제의 계발; 문헌[Kluwer Academic Publisher, Norwell, 1993]의 방법이 화합물을 평가하는데 이용되었다.
대부분의 활성 화합물을 또한 코르베트 분석을 이용하여 4종의 상이한 세포 유형, 예를 들어 쥐의 백혈병, 쥐의 충실성 종양, 사람의 충실성 종양 및 저 악성 섬유아세포에 대한 세포독성에 관해 평가하였다.
화합물을 또한 약물 내성 종양을 비롯하여 생쥐에 이식한 쥐 및 사람 종양의 광범위 스펙트럼에 대해 평가하였다.
종양조직량(T/C)(처리 동물에서의 종양조직량의 평균치 대 비처리 동물에서의 종양조직량의 평균치)를 추가 평가하는데 이용하였다. 42% 이하의 T/C값은 국립 암 연구소 표준(National Cancer Institute Standards)에 의해 활성적인 것으로 여겨지고, 10% 이하의 T/C값은 국립 암 연구소 표준에 의해 활성이 우수하고 임상적 활성의 가능성이 있는 것으로 여겨진다.
물질
빈블라스틴, 시토칼라신 B, 테트라메틸로다민 이소티오시아네이트(TRITC)-팔로이딘, 술포로다민 B(SRB)와, β-튜불린 및 비멘틴에 대한 항생제는 시판되고 있다. 알리(Earle's)염(BME)을 함유하는 기초 배지 이글(Basal Medium Eagle) 및 우태아 혈청(FBS)도 또한 시판되고 있다.
세포주
백혈병 쟈켓(Jurkat) T 세포주 및 A-10 쥐 대동맥 평활근 세포를 American Type Culture Collection으로부터 입수하고, BME 함유 10% FBS와 50 ㎍/㎖ 젠타마이신 술페이트에서 배양시켰다. 빈블라스틴(SKVLB1)에 대해 내성을 가진 것으로 선택된 사람 난소 암종 세포(SKOV3) 및 아세포주를 온타리오주 암 연구소(Ontario Cancer Institute)의 빅토르 링(Dr. Victor Ling)으로부터 입수하였다. 이 세포주 모두를 BME 함유 10% FBS와 50 ㎍/㎖의 젠타마이신 술페이트에서 유지시켰다. 24 시간 후, 빈블라스틴을 1 ㎍/㎖의 최종 농도로 SKVLB1 세포에 첨가하 P-글리코단백질-과발현 세포를 위한 선택압을 유지시켰다.
세포 증식 및 주기 정지 분석
세포 증식 분석을 스켄(Skehan) 등에 의해 설명된 바와 같이 수행하였다. 쟈켓 세포에 있어서, 배양액을 스켄의 문헌에 기재된 지정 약물로 처리하고 혈구계산기로 세포를 계수하여 전체 세포수를 측정하였다. 유사분열에서의 세포수의 백분율을 PBS 중 0.4% 김사(Giemsa)로 염색한 후 PBS로 빨리 세척함으로 측정하였다. 1회 처리 당 1000 개 이상의 세포를 유사분열상 존재하에서 기록하고, 유사 분열 지수를 계수된 세포 전체수에 대한 유사분열상을 가진 세포의 비율로 계산하였다.
면역형광법 분석
A-10 세포를 BME/10% FBS 중의 유리 커버슬립 위에 거의 꽉 차게 될 때까지 배양시켰다. PBS 중의 화합물을 지시된 최종 농도로 첨가하고 세포를 24 시간 더 배양시켰다. 미소관 및 중간 필라멘트를 염색하는 경우, 비특이적 결합 부위를 봉쇄하기 위해, 세포를 냉 메탄올로 고정시키고 PBS 함유 10% 송아지 혈청으로 배양시켰다. 이어서 세포를 37 ℃에서 60 분 동안 배양시켰다. 희석 시, 제조업자가 추천한 모노클로날 항-β-튜불린 또는 모노클로날 항-비멘틴 중 어느 하나를 사용하였다. 이어서 결합된 1차 항체를 플루오레신 결합된 토끼 항-생쥐 IgG로 45 분 동안 배양시켜 시각화하였다. 커버슬립을 현미경의 슬라이드 위에 놓고 형광 패턴을 조사하고, 형광안이 구비된 제이스(Zeiss) 광현미경 Ⅰ11로 플루오레신을 촬영을 하였다. 미세필라멘트를 염색할 경우, 세포를 3% 파라포름알데히드로 고정시키고 0.2% 트리톤(Triton) X-100으로 투과가능하게 하고 수소화붕소 나트륨(1 ㎎/ML)으로 화학적으로 환원시켰다. 이어서 PBS 함유 100 nM TRITC-팔로이딘을 첨가하고 혼합물을 37 ℃에서 45 분 동안 배양시켰다. 세포를 PBS로 신속히 세척한 후 커버슬립을 위에 올린 즉시 상기와 같이 촬영하였다.
쟈켓 세포 증식 및 세포 주기에 대한 크립토피신 및 빈블라스틴의 영향
유사분열에 있어서 세포 증식 및 세포의 백분율에 대한 크립토피신 화합물 및 빈블라스틴의 영향에 대한 용량 반응 곡선을 측정하였다.
세포골격에 대한 시토칼라신 B, 빈블라스틴 및 크립토피신의 영향
대동맥 평활근(A-10) 세포를 유리 커버슬립에서 배양시키고, PBS, 시토칼라신 B 2 μM, 빈블라스틴 100 nM 또는 크립토피신 화합물 10 nM로 처리하였다. 24 시간 후, 미소관 및 비멘틴 중간 필라멘트를 직접 면역형광법으로 시각화하고, 미세필라멘트를 TRITC-팔로이딘을 사용하여 염색하였다. 약물 각각의 형택학적 영향을 조사하였다. 비처리 세포는 핵주위 미소관 조직 중심으로 채워진 광범위한 미소관 네트웍을 나타냈다. 비멘틴 중간 필라멘트는 또한 세포질 전체에 고르게 분포되어 있는 반면 미세필라멘트 관속은 세포의 주축을 따라 모여있다. 시토칼라신 B는 파라결정성 잔여의 축적과 함께 미세필라멘트의 완전한 해중합을 초래하였다. 이 화합물은 미소관의 분포이든지 또는 중간 필라멘트의 분포이든지 어느 것에도 영향을 주지 않았다. 크립토피신 처리된 미소관 및 비멘틴 중간체를 미소관의 결핍, 리멘틴 중간 필라멘트의 파괴에 대해 관찰하였다.
탁솔로 안정화된 미소관에 대한 크립토피신 및 빈블라스틴의 영향
A-10 세포를 탁솔 0 또는 10 μM로 3 시간 동안 처리한 후, PBS, 빈블라스틴 100 nM 또는 크립토피신 화합물 10 nM을 첨가하였다. 24 시간 후, 미소관 조직을상기와 같은 면역형광법으로 조사하였다. 대조구 세포와 비교했을 때, 탁솔 처리된 세포의 미소관은 특히 세포 극 지역에서 넓은 관속을 이루고 있었다. 상기와 같이, 빈블라스틴은 예비처리되지 않은 세포의 미소관의 완전한 해중합을 초래하였다. 그러나, 탁솔로 예비처리하면 빈블라스틴에 응하여 미소관 해중합을 예방하였다. 이와 유사하게, 탁솔로 예비처리된 미소관을 크립토피신 처리하여 관찰하였다.
빈블라스틴 및 크립토피신에 의한 미소관 해중합의 가역성
A-10세포를 24 시간 동안 빈블라스틴 100 nM 또는 크립토피신 10 nM 중 어느 하나로 처리하여 완전한 미소관 해중합을 일으켰다. 이어서 세포를 세척하고, 약물 무함유 배지에서 1 시간 또는 24 시간 동안 배양시켰다. 빈블라스틴을 제거한 후 미소관을 신속히 재중합시키면 1 시간 후 미소관의 두드러진 수준이 보여지고 24 시간 동안 완전한 형택학적 회복을 나타내었다. 크립토피신 화합물을 제거한 후, 세포를 1 시간째에서든지 또는 24 시간째에서든지 본 발명의 크립토피신 화합물로 처리한 후 세포를 시각화하였다.
세포 증식에 대한 빈블라스틴 및 크립토피신 배합물의 영향
SKOV3 세포를 크립토피신 및 빈블라스틴 배합물로 48 시간 동안 처리하였다. 이어서 살아남은 세포의 백분율을 결정하고 배합물 각각에 대한 IC50을 계산하였다.
SKOV3 및 SKVLB1에 대한 크립토피신, 빈블라스틴 및 탁솔의 독성
SKVLB1 세포는 이들이 P-글리코단백질을 과발현시키기 때문에 천연 제품의 항암제는 내성을 갖는다. SKOV3 및 SKVLB1 세포의 성장을 억제하는 탁솔, 빈블라스틴 및 크립토피신 화합물의 능력을 관찰하였다. 이 두 세포주 모두의 탁솔로 유도된 용량 의존적 증식 억제는 IC50이 SKOV3 및 SKVLB1 세포에 대해 1 nM및 8000 nM이었다. 빈블라스틴도 또한 두 세포주 모두를 억제하여 IC50이 SKOV3 및 SKVLB1세포에 대해 각각 0.35 nM 및 4200 nM이었다. 본 발명의 크립토피신 화합물은 IC50이 SKOV3 및 SKVLB1 세포에 대해 약 1 내지 약 1000 pM인 활성을 갖는 것으로 입증되었다.
즉, 본 발명은 미소관 네트웍의 파괴 및 유사분열의 억제를 행하여 세포 증식의 강력한 억제제인 신규 크립토피신 화합물을 제공하는 것으로 입증될 수 있다. 이 연구에 의해 크립토피신 화합물이 미소관 조직을 파괴함으로 유사분열을 비롯하여 정상적인 세포 기능을 함이 설명될 수 있다.
콜히친 및 빈카(Vinca) 알카로이드와 같은 전형적인 항미소관제는 유사분열시 세포 분열을 정지시킨다. 이들 약물 중 하나의 세포 증식에 대한 영향을 크립토피신 화합물과 비교하는 것이 적절할 것이다. 이 목적을 위해, 빈카 알카로이드 빈블라스틴을 전형적인 항미소관제의 대표물로 선택하였다. 따라서, 백혈병 쟈켓 T 세포주의 증식 및 세소 주기 진행에 대한 크립토피신 화합물 및 빈블라스틴의 영향을 비교하였다.
항유사분열 효과는 통상적으로 유사분열 방추사의 미소관이 파괴됨으로 매개되기 때문에, 세포골격 구조에 대한 크립토피신 화합물의 영향은 형광현미경 검사법으로 특성화된다. 크립토피신 화합물 또는 빈블라스틴 중 어느 하나로 처리된 세포를 면역형광 염색시키면 두 화합물 모두는 미소관의 완전한 상실을 초래한다. SKOV3 세포를 사용한 유사한 연구에서 크립토피신 화합물의 항미소관적 영향은 평활근 세포주에 대해서는 독특하지 않은 것으로 나타날 수 있다.
GC3 사람 결장 암종 선별
시험 화합물을 첨가하기 24 시간 전에 96 웰 플레이트 중 선택된 웰에 GC3 사람 결장 암종 세포(100 ㎕ 분석용 배지 중 1x10 세포/웰)로 접종하였다. 세포 무함유 분석용 배지를 96 웰 중의 다른 선택된 웰에 첨가하였다. 분석용 배지(RPMI-1640을 배지로 사용하였으나, 세포의 생존을 허용하는 배지는 어떠한 것이든지 사용될 수 있음)를 투석된 10% 우태아 혈청 및 25 mM HEPES 완충제로 보충하였다.
시험 화합물을 시험하기 전에 갈색병에 보관하였다. 신선한 디메틸술폭시드 원액(200 ㎍/㎖)을 포스페이트 완충염수(PBS) 중 시험 시료의 희석물을 제조하기 직전에 준비하였다. PBS 중 1:20 디메틸술폭시드 용액의 희석물을 최종 농도가 10 ㎍/㎖이 되도록 제조하였다. PBS를 사용하여 연속적인 1:3 희석물(상기 용액 0.5 ㎖ 대 PBS 1 ㎖)을 제조하였다. 팔콘(Falcon) 2054 튜브를 분석에 이용하였다. 시험 화합물 각각의 희석물 중 10 ㎕의 시료를 GB3 플레이트의 웰에 첨가하는 것을 3회 반복 수행하였다. 플레이트를 약 37 ℃에서 72 시간 동안 배양시켰다. 원염인 3-[4,5-디메틸--2-일]-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드염(PBS 중 "MTT" 5 ㎎/㎖) 10 ㎕의 시료를 각각의 웰에 첨가하였다. 플레이트를 37 ℃에서 약 1 시간 동안 배양시켰다. 플레이트를 원심분리시키고 웰로부터 배지를 따라 내고, 산-이소프로판올(이소프로판올 중 0.04 N HCl) 100 ㎕를 각각의 웰에 첨가하였다. 플레이트를 시험 파장 570 nm를 이용하여 1 시간 내에 판독하였다(SpectraMax 판독기).
화학식 Ⅰ의 화합물을 평가해 본 결과 본 화합물은 본 발명의 치료 방법에 유용할 수 있는 것으로 제안되었다. 또한, 본 화합물은 미소관계의 파괴에 유용할 것이다.
본 발명의 화합물을 제조하는 것은 활성화된 에스테르 후 크로마토그래피와 필요하다면 산 유도된 탈블록화를 포함하는 다수의 포로토콜을 이용하여 완성될 수 있다.
예를 들어, 섬광 크로마토그래피 후, 트리에틸아민 및 4-디메틸아미노 피리딘 존재하에서 아세트산 무수물로 1(굵은 숫자는 실시예 부분에 나타난 화합물 번호임)을 처리하여 89% 수율의 3을 생성한다. 이와 유사하게, 1로부터 숙신산 무수물을 작용시킨 후 역상 HPLC 정제를 하여 4를 제조한다. 1의 피리딘 용액을 트리에틸아민 및 4-디메틸아미노 피리딘의 존재하에서 시판되는 니코티노일 클로라이드 히드로클로라이드에 노출시킨 후 크로마토그래피하고 염화수소 처리하여 7을 높은 수율로 수득한다. 1을 시판되는 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트로 처리한 후 양이온 교환(p-톨루엔술포네이트에 대해서는 아세테이트) 및 동결건조와 동시에 역상 HPLC 정제하는 문헌[Nicolaou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1994, 33]의 방법에 따라 피리디늄염 8을 47% 수율로 제조한다. 1 및 시판되는(5 및 9의 경우에서는 제외) N-t-boc 보호된 아미노산으로부터 4-디메틸아미노 피리딘 존재하에서 1,3-디시클로헥실카르보디이미드의 작용을 통해 활성화시키면서 에스테르 5, 9, 11, 13, 15, 17, 19 및 21 모두를 중간 내지 고 수율로 제조한다. 9, 11, 13, 15, 17, 19 및 21 각각으로부터 디옥산 중 염화수소의 4.0 M 용액으로 처리하고 진공에서 용매를 제거하여 히드로클로라이드염 10, 12, 14, 16, 18, 20 및 22를 고 수율로 제조한다. 염산으로 유도된 t-부틸 에스테르 절단 및 수산화나트륨 처리한 후 5로부터 디-나트륨염 6을 유도한다. 포스페이트 관능기를 만드는 문헌[Johns, Synthessm 1988, 142]의 방법을 특징으로 하는 5 단계 순서를 경유하여 5의 제조에 필수적인 산 24를 63%의 수율로 합성한다.
신규 공액 화합물 중 다수를 GC3 종양 세포 모델에서 생체 외 세포독성에 대해 분석하였다. 표2 에 설명된 결과를 분석한 결과, 크핍토피신 55(1)에 대한 양호한 활성에서 우수한 활성은 이 시리즈의 화합물에 대해서는 고유한 것임이 분명하다.
유형 2의 모든 에스테르(카르복실산으로부터 유래된 R1또는 R2)를 제조하는 것은 산 클로라이드, 무수물 및 통상의 활성화제(예를 들어, 카르보디이미드)를 사용하는 여러 기술을 포함한다. 관여된 알콜 외에 어떠한 용매이든지 사용될 수 있다. 순한 염기 및(또는) 촉매(아민, 탄산염)는 어떠한 것이든지 에스테르화를 촉진시키는데 사용될 수 있다.
카르바메이트 9, 11, 13, 15, 17, 19 및 21의 상응하는 염으로의 전환은 모든 강산, 즉 할로겐화수소, 황산수소, 인산수소, 질산수소, 수소, 과염소산수소로 이루어진 무기산, 또는 강 유기산, 예를 들어 트리플루오로아세트산, p-톨루엔술폰산 및 메탄술폰산으로 수행될 수 있다. 상응하는 유리 염기로부터 유형 7의 염을 생성시키는데 동일한 산이 사용될 수 있다. 모든 알칼리 및 알칼리 토금속을 포함하는 여러 반대이온(음이온)은 유형 6의 염을 구성할 수 있다. 여러 반대이온(음이온)은 유형 8의 염, 즉 산(유기산 또는 무기산)의 모든 공액 염기를 구성할 수 있다.
상기 분석을 이용한 크립토피신 유도체에 대한 생체 외 세포독성 데이타
화합물 GC3 IC50(nM)
1 0.065
3 83
4 31
6 3.7
7 116
8 2.2
10 ---
12 0.10
14 21
16 230
18 2.6
20 ---
22 7.2
26 ---
본 발명의 추가의 화합물과 그 GC3 분석 결과를 하기에 나타내었다.
본 발명의 추가의 화합물을 GC3 분석으로 시험한 결과 IC50값은 1 이하 내지 약 700 nM의 범위이나, 가장 일반적인 값은 100 nM 이하이었다. 27, 1 및 12에서의 비교용 예비 용해도 연구로부터의 결과를 하기 표 3에 나타냈다. 이 결과는 12의 용해도가 증가되었음을 가리킨다.
<표 3>
크립토피신 화합물 1, 12 및 27의 용해도 비교
0.05 M 아세테이트 완충제로 부피가 조절된 부형제 % v/v 27(mg/ml) 1(mg/ml) 12(mg/ml)
1. 프로필렌 글리콜에탄올 1510 BQL BQL >2.0
2. 프로필렌 글리콜폴리에틸렌 글리콜 3000 1520 BQL 0.0026 >2.0
3. 폴리소르베이트 80 1(w/v) BQL 0.3113 1-2
4. 에멀포르(Emulphor) EL719 1(w/v) 0.0272 0.3611 1.5
5. 0.05 M 아세테이트 완충제 pH 4.0 100 <0.001 <0.001 0.03
BQL = 제한량 이하(Below quantitation limit), 약 0.001 mg/ml
4-8 범위의 수성 pH에서 1 및 12 사이의 안정 특성에 대한 비교를 실온에서 6 시간 동안 측정하였다. 이 연구로부터의 결과에서 12의 수용해도 및 안정성 프로필이 우수한 것으로 명백히 입증되었다. 예를 들어, pH 8에서 크립토피신 55는 실온에서 용해도값이 10 ㎎/mL이나, 이와 비교해 볼 때 크립토피신 12는 실질적으로 동일한 조건하에서 용해도가 30 ㎎/mL이었다. pH 4에서 크립토피신 55는 수용해도값이 약 50 ㎎/mL이나, 크립토피신 55의 수용해도는 pH가 염기성이 됨에 따라 감소하는 반면, 12의 수용해도는 연구된 pH 범위에 걸쳐 실질적으로 일정하게 유지되었다.
용해도 및 안정성 연구로부터의 결과를 기준으로 하여, 12의 절대적 용해도/안정 특성을 측정하기 위해 적절한 비경구용 부형제를 선택하였다. 하기 표 4는 이들 부형제 중 12의 용해도 프로필을 예시한다. 예비 결과는 제형 6 중 12의 허용 가능한 안정성이 3 주 이하임을 가리킨다.
<표 4>
여러 비경구용 부형제 중 크립토피신 글리시네이트 12의 용해도
부형제 %v/v 12(mg/㎖)
1. 에탄올프로필렌 글리콜0.05 M 시트레이트 완충제pH 4.0 1010충분한 양 0.11
2. 에탄올프로필렌 글리콜0.05 M 아세테이트 완충제pH 4.0 1010충분한 양 1.99
3. 에탄올0.05 M 아세테이트 완충제pH 4.0 10충분한 양 1.29
4. 프로필렌 글리콜0.05 M 아세테이트 완충제pH 4.0 10충분한 양 1.58
5. 폴리소르베이트 800.05 M 아세테이트 완충제pH 4.0 0.5(w/v)충분한 양 2.21
6. 에탄올프로필렌 글리콜0.05 M 아세테이트 완충제pH 4.0 1025충분한 양 10.27
7. 에탄올프로필렌 글리콜0.05 M 아세테이트 완충제pH 4.0 1015충분한 양 4.32
따라서, 본 화합물의 독물학 및 임상적 평가를 또한 용이하게 할 수 있는, 계면활성제 또는 유화제를 함유하지 않는 부형제 중 본 발명의 화합물의 고농도를 달성하는 것이 적절하다. 글리시네이트 에스테르(12)는 또한 보다 긴 시간에 걸쳐 생리적 pH 범위의 수성 환경에서 보다 우수한 안정성을 제공하는데, 이것은 보통의 조건하에서 저장 수명이 증가되었음을 가리킨다. 저장 후에 이어 투여 전 희석시키기 위해, 1 및 27의 농축물을 제조하는 것이 필요하기 때문에, 본 발명의 화합물의 용액을 즉석에서 사용할 수 있도록 준비하는 것이 적절하다.
화학식 Ⅰ의 화합물은 하기 화학식 Ⅱ의 화합물로 제조될 수 있다.
상기 식 중,
Ar, R1, R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9및 R10은 상기 화학식 Ⅰ과 의미가 같고;
R13은 t-부틸카르바메이트(Boc)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R24는 식의 N-히드록시숙신이미드(여기로부터 "NHS") N-히드록시술포숙신이미드 및 그의 염, 2-니트로페닐, 4-니트로페닐 및 2,4-디클로로페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고,
X는 O, NH 또는 알킬아미노이고;
Y는 O, NH 또는 알킬아미노이다.
R기 및 여러 치환체가 상기와 명세서 전반에 걸쳐 정의된 바와 같은 하기 화학식 Ⅲ의 화합물은 하기 화학식 Ⅳ의 화합물을 식의 산 및 실릴화제와 접촉시킴으로써 제조될 수 있다.
상기 식 중,
R27은 H, C1-C12알킬 및 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된다. 비스- N,O-트리메틸실릴 아세트아미드(BSA)가 특히 바람직한 실릴화제이다.
본원에 사용된 "활성 에스테르 치환체"라는 구는 지시된 치환체를 양호한 이틸기로 만드는 치환체를 가리킨다. 적절한 치환체는 표준 참고 지침서, 예를 들어 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973); Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley (New York, 1981), 특히 그린(Greene)의 문헌 180 에서 184 페이지]로부터의 지침 으로 선택될 수 있다. 특히 바람직한 활성 에스테르 치환체기는 N-히드록시-숙신이미드(NHS)이다. 다른 바람직한 기로는 식의 O,N-히드록시숙신이미드, O,N-히드록시술포숙신이미드 및 그의 염, O-2-니트로페닐, O-4-니트로페닐 및 O-2,4-디클로로페닐(여기서, O는 에스테르 관능기를 형성하는데 필수인 산소기를 가리킴)이 있으나, 결코 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 "아미드"라는 용어는 알칼리 조건을 이용하여 절단시킬 수 있는 아미드 관능기를 가리킨다. 추가의 지침서는 예를 들어 그린(Greene, T.W.)의 문헌["Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley (New York, 1981)]이다.
본원에 사용된 "활성 에스테르 치환체"라는 구는 OR24치환체를 양호한 이탈기로 만드는 치환체를 가리킨다. 적절한 치환체는 표준 참고 지침서, 예를 들어 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973); Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley (New York, 1981)]로부터의 지침으로 선택될 수 있다. 특히 바람직한 R25기는 N-히드록시숙신이미드(NHS)이다.
본원에 설명된 공정은 가장 바람직하게는, 용매 존재하에서 완성된다. 당업자는 상기 설명된 공정에 대한 적절한 용매를 산택할 수 있다. 불활성 유기 용매가 특히 바람직하나, 특정조건하에서는 수성 용매가 적절할 수 있다. 예를 들어, R27이 수소이고 R13이 BOC이면, 수성 염기가 효과적일 것이다.
화학식 Ⅰ의 화합물의 바람직한 R6치환체가 아민을 함유하는 경우, 이 때 R6기의 아민 치환체를 아미노 보호기를 사용하여 보호시킬 수 있다. 당업자는 예를 들어, 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973): Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley(New York, 1981)]을 비롯한 표준 문헌의 지침을 이용하여 적절한 아미노 보호기를 용이하게 선택할 수 있다.
R27은 산성, 중성 또는 순한 염기 조건에 의해 -CO2R27치환체가 제거될 수 있게 하는 기이어야 한다. 바람직한 R27기로는 수소, C1-C6알킬, 트리클로로메틸, 트리클로로에틸 및 메틸티오메틸이 있으나, 이에 결코 제한되지 않는다. 특히 바람직하게는, R27은 수소이다.
당업자에게 추가의 지침을 제공하기 위해, 하기 반응식을 제공한다.
화학식 Ⅰ의 화합물은 하기 화학식 Ⅱ의 화합물에 의해 제조될 수 있다.
<화학식 Ⅱ>
상기 식 중,
Ar, R1, R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9및 R10은 상기 화학식 Ⅰ과 의미가 같다. R11'에 대한 용어는 상기 R11에 대해 정의한 바와 같다.
R13은 아미노 보호기로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R24는 활성 에스테르 치환체, 아미드 치환체, O-2-니트로페닐, O-4-니트로페닐 및 O-2,4-디클로로페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고,
X는 O, NH 또는 알킬아미노이고;
Y는 O, NH, C, O, S, SO2또는 알킬아미노이다.
R기 및 여러 치환체가 상기와 명세서 전반에 걸쳐 정의된 바와 같은 하기 화학식 Ⅲ의 화합물은 하기 화학식 Ⅳ의 화합물을 식의 산 및 실릴화제와 접촉시킴으로써 제조될 수 있다.
<화학식 Ⅲ>
<화학식 Ⅳ>
상기 식 중,
R27은 H, C1-C12알킬 및 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된다. 비스- N,O-트리메틸실릴 아세트아미드(BSA)는 특히 바람직한 실릴화제이다.
R25에 대해 본원에 사용된 "활성 에스테르 치환체"라는 구는 OR24치환체를 양호한 이탈기로 만드는 치환체를 가리킨다. 적절한 치환체는 표준 참고 지침서, 예를 들어 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973); Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley (New York, 1981)]으로부터의 지침으로 선택될 수 있다. 특히 바람직한 R25기는 N-히드록시-숙신이미드(NHS)이다.
본원에 설명된 공정은 가장 바람직하게는, 용매 존재하에서 완성된다. 당업자는 상기 설명된 공정에 대한 적절한 용매를 산택할 수 있다. 불활성 유기 용매가 특히 바람직하나, 특정 조건하에서는 수성 용매가 적절할 수 있다. 예를 들어, R27이 수소이고 R13이 BOC이면, 수성 염기가 용매로서 효과적일 것이다.
화학식 Ⅰ의 화합물의 바람직한 R6치환체가 아민을 함유하는 경우, 이 때 R6기의 아민 치환체를 아미노 보호기를 사용하여 보호시킬 수 있다. 당업자는 예를 들어, 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973): Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley(New York, 1981)]을 비롯한 표준 문헌의 지침을 이용하여 적절한 아미노 보호기를 용이하게 선택할 수 있다.
R27은 산성, 중성 또는 순한 염기 조건에 의해 -CO2R27치환체가 제거될 수 있게 하는 기이어야 한다. 바람직한 R27기로는 수소, C1-C6알킬, 트리클로로메틸, 트리클로로에틸 및 메틸티오메틸이 있으나, 이에 결코 제한되지 않는다. 특히 바람직하게는, R27은 수소이다.
당업자에게 추가의 지침을 제공하기 위해, 하기 반응식을 제공한다.
<반응식 Ⅰ'>
반응식 Ⅰ' 및 명세서 전반에 걸쳐 사용된 R1'은 할로겐, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트, 포스페이트 또는 보호된 OH 또는 보호된 SH기이고; R2는 OH 또는 SH이고, R26은 화학 조작 과정 중에 다르게 반응된 후 합성의 후기 단계에서 제거될 수 있는 알콜 보호기를 보호하기 위해 일부 합성 과정 중에 도입시키는 알콜 보호기이다. 이러한 보호기를 형성 및 제거하는 많은 반응은 예를 들어, 문헌[Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (London and New York, 1973): Greene, T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley(New York, 1981)]을 비롯한 다수의 표준 문헌에 기재되어 있다. 당업자는 이러한 문헌으로부터 제공된 지침으로 적절한 알콜 보호기를 구체적으로 선택할 수 있다. 특히 유용한 알콜 보호기는 t-부틸디메틸실릴(TBS)이다. 다른 크립토피신 화합물을 제공하기 위해, 표준 방법을 이용하여 이러한 반응식의 생성물을 유도체화할 수 있다.
일반적인 관점에서 본 발명의 공정은 하기에 예시된 바와 같다.
R6및 R11'은 명세서 전반을 통해 정의된 바와 같다.
또다른 크립토피신 화합물을 제공하기 위해 본원에 제공된 반응식의 생성물을 표준 방법을 이용하여 더 유도체화시킬 수 있다.
당업자는 상기 반응식 및 하기 실시예의 지침을 이용하여 목적하는 화합물을 제조하는데 적절한 출발 물질 및 시약을 사용할 수 있다.
에스테르 출발 물질을 예를 들어, 하기와 같이 제조할 수 있다.
P63-64
R6의 의미는 상기 정의된 바와 같다.
추가의 지침을 제공하기 위해, 하기 반응식을 제공한다. 특정 약어가 반응식에 사용되었고, 제조예 및 실시예는 일반적으로 당업자에게 공지되어 있다. 편의상, 이들 약어로는
DMAP 4-디메틸아미노피리딘
BOC t-부톡시카르보닐
mcpba m-클로로퍼벤조산
TMSCl 클로로트리메틸실란
HEW 호너-엠몬스-와드스워트(Horner-Emmons-Wadsworth) 반응 (포스포네이트와 염기를 사용하여 알데히드를 올레핀화하는 표준 반응)
TMG 1,1,3,3-테트라메틸구아니딘(HWE 반응에 사용되는 표준 염기)
DIBAL 디이소부틸알루미늄 하이드리드(불포화된 에스테르를 알릴산 알콜로 환원시키는 표준 시약)
SAE 예리하지 않은 비대칭 에폭시화(알릴 알콜의 거울상 선택적 에톡시화를 위해 확립된 반응)
TBS t-부틸디메틸실릴
TBS-Otf TBS 트리플루오로메탄술포네이트(알콜의 t-부틸디메틸실릴화를 위한 표준 시약)
AIBN 2,2'-아조비스(이소부티로니트릴) (표준 라디칼 개시제)
ACN 아세토니트릴
DBU 1,8-아자비시클로[5.4.0]운데-7-센(표준 아민 염기)
EDCI 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드가 있다.
에스테르를 제조하는 반응식은 당업자의 편의를 위해 한 특정 출원의 반응식을 제공하는 본원의 제조예 부분에 의해 더 설명된다.
본 발명의 Ar 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 반응식의 예시는 예시된 페닐 고리에 대한 합성 방법만을 제한하는 것이 아니다. 오히려, 당업자는 본 발명의 화합물에 대한 목적하는 출발 물질을 제공하는데 이 공정을 폭 넓게 적용할 수 있다.
필수 반응 시간은 출발 물질 및 수행 온도와 관계 있다. 주어진 공정에 대한 최적 반응 시간은 항상 그러하듯이 짧은 반응 시간이 유리한 생성의 경쟁 목표와 장 시간이 유리한 최대 수율을 고려하여 결정하는 타협안이다.
본 발명의 특정 화합물은 생합성 경로에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, DME-H2O(2:1, 15.0 ㎖) 중 크립토피신 3(약 0.24 mmol)의 용액을 약 0 ℃에서 브로모숙신이미드(약 65 ㎎)로 처리하고, 실온까지 가온시켰다. 약 24 시간 후, 용매를 제거하고 잔류물을 CH3CN과 같은 용매에 용해시키고, 역상 HPLC(65:35 CH3CN/H2O, 6 mL/분이 바람직함)를 행하여 크립토피신의 혼합물을 생성시켰다. 혼합물을 보통의 역상 HPLC(1:1 헥산/에틸 아세테이트, 3 mL/분)로 다시 크로마토그래피하여 목적하는 크립토피신을 생성시켰다.
이와 마찬가지로, 크립토피신 3(약 40 ㎎, 0.063 mmol)을 2:1 DME/H2O(약 6 mL)에 넣고, N-(클로로숙신이미드(0.075 mmol)를 첨가하고, 약 60-70 ℃에서 24 시간 동안 가열시켰다. NCS(8 ㎎)을 더 첨가하고 약 24 시간 동안 더 계속 가열시켰다. 용매를 제거하고 잔류물을 HPLC(35% H2O/CH3CN, 6 mL/분)를 행하여 목적하는 크립토피신 화합물을 생성시켰다. 생성 혼합물을 메탄올/물(약 4:1)을 사용하는 HPLC로 더 정제하여 정제된 목적하는 크립토피신 화합물을 정제하였다.
본 발명을 더 설명하기 위해, 하기 실시예를 제공한다. 본 발명의 범위는 결코 하기 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
제조예 1
단계 1. 메틸 5-페닐-2(E)-에노에이트
THF(750 mL) 중 트리메틸포스포노에이트(37 g, 417 mL, 2.07 몰)의 용액을 0 ℃에서 기계적 교반기 및 N2주입구가 구비된 3 L 둥근 바닥 플라스크에서 교반시켰다. 순수한 테트라메틸구아니딘(239 g, 260 mL, 2.07 몰)을 첨가 깔대기를 통해 찬 용액에 적가하였다. 차가운 투명한 연황색 용액을 0 ℃에서 25 분 동안 교반시켰다. THF(125 mL) 중 히드로신남알데히드(90%, 253 g, 248 mL, 1.9 몰)의 용액을 반응 용액에 서서히 적가하였다. GC에서 추발 물질에 대한 생성물의 비율이 95:5인 것으로 나타났다. 물 500을 반응 용기에 첨가하고 반응 혼합물을 밤새 교반시켜 두 층으로 분리시켰다. 유기층을 단리하고 수성층을 t-BuOMe로 추출하였다. 유기층을 합하고 MgSO4상에서 건조시킨 후 이어서 진공에서 농축시켜 오렌지색 오일을 생성시켰다. 조생성물을 129 ℃/0.3 mmHg에서 증류시켜 흐린 황색의 투명한 오일 360.5 g(91.7% 수율)을 수득하였다.
단계 2. 5-페닐-펜트-2-엔-1-올
THR(1.5 L) 중 에노에이트 에스테르(315.0 g, 1.5 몰)의 용액을 열전대, 기계적 교반기 및 N2주입구가 구비된 12 L 4목 둥근 바닥 플라스크에 충전시키고 -71 ℃까지 i-PrOH/CO2조로 통과시켜 냉각시켰다. 반응 용기에 DIBAL(2.5 L, 톨루엔 중 1.5 M, 3.75 몰)을 -50 ℃ 이하로 반응 온도를 유지시키는 비율로 적가하였다. 첨가가 끝난 후, 반응물을 반응 온도를 -50 ℃ 이하로 하면서 밤새 교반시켰다. 16 시간 후, TLC(3:1 헥산:EtOAc, SiO2) 분석 결과 출발 물질이 없는 것으로 나타났다. 반응물을 1N HCl(150 mL)로 서서히 켄칭시켰다. 이 시점에서, 반응물이 젤라틴성 고체로 되었다. 주걱을 이용하여 반고체로 분쇄시키고, 1N HCl(200 mL)을 첨가하여 혼합물을 보다 유동성으로 만들었다. 진한 HCl(625 mL)을 충전시켜 2상계를 형성시켯다. 층을 분리하고 생성물을 t-BuOMe로 추출하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시킨 후 이어서 진공에서 농축시켜 투명한 흐린 황색 오일, 247.8 g을 생성시켰다. 조생성물을 145 ℃/0.25 mm Hg에서 증류시켜 209.7 g(86.2% 수율)을 수득하였다.
단계 3. (2S,2S)-2,3-에폭시-5-페닐-1-펜탄올
CH2Cl2(350 mL)을 기계적 교반기, 열전대 및 질소 주입구가 구비된 1 L 3목 둥근 바닥 플라스크에 첨가하고, 4 Å 분자체(30 g) 및 L-(+)-디엘틸 타르트레이트(7.62 g, 0.037 몰)을 첨가하였다. 생성 혼합물을 20 ℃까지 냉각시키고, Ti(O-i-Pr)4(9.2 mL, 0.031 몰)로 처리한 후, 2-20 ℃로 온도를 유지시키는 비율로 t-부틸히드로퍼록시드(CH2Cl2중 4.0 M, 182 mL, 0.78 몰)을 첨가하였다. 첨가가 끝나면 반응 혼합물을 30 분 더 교반시킨 후 이어서 CH2Cl2(30 mL) 중 알릴 알콜(50 g, 0.31 몰)의 용액으로 2-20 ℃로 온도를 유지시키는 비율로 처리하였다. 반응물을 동일 온도에서 5 시간 동안 교반시킨 후 이어서 0 ℃에서 물 중 황산제1철 7수화물(312 g) 및 타르타르산(40 g)의 용액으로 여과시켰다. 혼합물을 20 분 동안 교반시킨 후 이어서 분별 깔대기로 옮기고 t-BuOMe(2 x 200 mL)로 추출하였다. 합해진 유기상을 NaCl을 함유하는 30% NaOH 용액으로 0 ℃에서 1 시간 동안 교반시켰다. 층을 다시 분리하고 수성상을 t-BuOMe로 추출하였다. 한해진 유기상을 염수로 세척하고 MgSO4상에서 건조시킨 후 이어서 진공에서 농축시켜 갈색 오일로 52.8 g을 생성시켰다.
단계 4. (2R,3R)-2-히드록시-3-메틸-5-페닐펜탄-1-올
헥산을 기계적 교반기, 열전대 및 질소 주입구가 구비된 5 L 3목 둥근 바닥 플라스크에 첨가하고 0 ℃까지 냉각시켰다. 헥산(800 mL, 1.6 몰) 중 Me3Al3의 2.0 M 용액을 첨가한 후 온도를 20 ℃ 이하로 유지시키면서 헥산(250 mL)/CH2Cl2(50 mL) 중 에폭시드(120 g, 0.677 몰)의 용액을 첨가하였다. 첨가가 끝난 후 탁한 혼합물을 5 ℃에서 35 분 동안 교반시키고 10% HCl(300 mL)의 용액을 적가한 후 진한 HCl(350 mL)을 첨가하였다. 층을 분리하고 유기상을 염수로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 진공에서 휘발성 물질을 제거한 후 오일 122.1 g을 수득하였다.
단계 5. (2R,3R)-2-히드록시-3-메틸-5-페닐-1-일 토실레이트
디올(58 g, 0.31 몰), 디부틸틴 옥시드(1.5 g, 0.006 몰, 2몰 %), 톨루엔술포닐 클로라이드(57.7 g, 0.31 몰), CH2Cl2(580 mL) 및 트리에틸아민(42.0 mL, 0.31 몰)을 기계적 교반기, 열전대 및 질소 주입구가 구비된 5 L 3목 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. (반응을 1 시간 내에 끝낼지라도)생성 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시키고 여과시키고 물로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 진공에서 휘발성 물질을 농축하여 흐린 g℃색 오일 104.1 g을 수득하였다.
단계 6. (2R,3R)-2-[(t-부틸디메틸실릴)옥시[-3-메틸-5-페닐펜트-1-일 토실레이트
CH2Cl2(1200 mL) 중 토실레이트(100 g, 0.29 몰) 및 트리에틸아민(81.0 mL, 0.58 몰)의 용액을 20 분 동안 더 계속 교반시키면서 순수한 TBS-OTf(99 mL, 0.43 몰)로 처리하였다. 반응물을 염수로 세척하고 MgSO4상에서 건조시키고 건조 농축시켰다. 오일을 최소량의 헥산에 용해시키고 실리카 패드로 여과시키고 헥산:EtOAc(9:1)로 용출시켜 갈색 오일 134 g을 생성시켰다.
단계7. (2R,3R,5RS)-2-[(t-부틸디메틸실릴)옥시-3-메틸-5-브로모-5페닐펜트-1-일 토실레이트
CCl4(1680 mL), TBS Ts(140 g, 0.31 몰), NBS(65 g, 0.365 몰) 및 AIBN(16,5 g, 0.10 몰)를 기계적 교반기, 환류 냉각기 및 질소 주입구가 구비된 5 L 3목 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. 혼합물을 교반시키면서 완전한 진공 상태하에서 배출시켜 탈기시키고, 질소(x3)로 다시 채웠다. 이어서 반응 혼합물을 가열 환류시켜 암길색이 되었다. 15 분 후 세게 환류시켜 반응물이 밝은 색으로 되고, 크로마토그래피 분석 시 반응물이 완전하였다. 실온에서 냉각시킨 후, 반응물을 여과시키고 여액을 농축 건조시켰다. 잔류물을 헥산에 재용해기시고 다시 여과시키고 농축 건조시켜 갈색 오일로 170.3 g을 수득하였다.
단계 8. (2R,3R)-2-[(t-부틸디메틸실릴)옥시]-3-메틸-5-페닐펜트-4-(E)-엔-1-일 토실레이트
아세토니트릴(700 mL) 중 브로마이드(100 g, 0.186 몰)의 용액을 기계적 교반기, 환류 냉각기 및 질소 주입구가 구비된 2 L 3목 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. DBU(83.6 mL, 0.557 몰)을 첨가하고 생성 암갈색 용액을 환류에서 15 분 동안 교반시켰다. 실온에서 냉각시킨 후, 용매를 진공 중에서 제거하고, 잔류물을 CH2Cl2(100 mL)중에서 절단하고 실리카 패드로 여과시켰다. 휘발성 물질을 다시 증발시키고 잔류물을 다시 증발시키고 MgSO4상에서 건조시키고농축 건조시켰다. 예비용 mplc(제조예 500) 크로마토그래피를 행하여 목적하는 불포화된 화합물(4 단계에 걸쳐 50.3 g, 60% 수율)을 수득하였다.
단계 9. (3S,4R)-3-[(t-부틸디메틸시릴)옥시]-4-메틸-6-페닐헥스-5(E)-엔-1-니트릴
토실레이트(50 g, 0.11 몰)를 DMSO(25 mL)에 용해시키고 KCN(14.2 g, 0.22 몰) 및 물(25 mL)로 처리하고, 생성 혼합물을 질소하에서 18 시간 동안 60 ℃에서 교반시켰다. 실온에서 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 EtOAc(1 L) 및 물(1 L)로 분배하였다. 수성상을 EtOAc(500 mL)로 추출하고 합해진 유기상을 염수로 추출하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. CH2Cl2를 사용하여 실리카 상에서 플래쉬 크로마트그래피시켜 목적하는 니트를을 92% 수율로 수득하였다.
단계 10. 메틸(5S,6R)-5-[(t-부틸디메틸실릴)옥시]-6-메틸-8-페닐옥타-2(E),7(E)-디에노에이트
니트릴(14.67 g, 46.5 밀리몰)을 톨루엔(200 mL)에 용해시키고, 질소하, -78 ℃에서 냉각시켰다. 톨루엔(37.2 mL, 55.8 밀리몰) 중 DIBAL의 1.5 M 용액을 세게 교반시키면서 적가하였다. 첨가가 끝나면, 냉각조를 제거하고 반응물을 실온에서 1 시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 1N HCl에 조심스럽게 붓고 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반시켰다. 층을 분리하고 유기상을 타르타르산 나트륨 칼륨의 포화 수용액 (2x), 염수로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시켰다. 휘발성 물질을 진공 중에서 제거하고흐린 황섹 오일의 조 생성물을 직접 연속 농축시켰다. 상기로부터 조 알데히드를 THF(90 mL)에 용해시키고, 실온에서 질소하에서 트리메틸 포스포노아세테이트(9.03 mL, 55.8 밀리몰) 및 테트라메틸구아니딘(7.0 mL, 55.8 밀리몰)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 16 시간 동안 교반시킨 후, EtOAc(200 mL) 및 물(100 mLL)로 분배하였다. 수성상을 로 EtOAc(100 mL)로 역추출하고 합해진 유기상을 무르 염수로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 휘발성 물질을 진공중에서 제거하고 조 황색 오일(17.0 g)을 CH2Cl2:시클로헥산(1:1 내지 2:1)을 사용하여 실리카 상에서 플래쉬 크로마트그래피시켜 목적하는 에스테르 13.67 g(78.5%)을 수득하였다.
메틸 에스테르(2.673 밀리몰)을 아세톤에 용해시킨 후 이어서 LiOH(26 mL)를 실온에서 첨가하였다. 탁한 혼합물을 아세톤(20 mL)으로 더 희석하고 혼합물을 실온에서 23.5 시간 동안 교반시켰다. 반응물을 디에틸에테르(400 mL)로 희석하고, 유기물을 1 N HCl(120 mL), 염수(200 mL) 및 H2O(160 mL)로 세척하였다. 유기물을 건조시키고 진공중에서 농축시켜 생성된 황색 오일을℃ 컬럼 크로마토그래피(구배:5% AcOH + 20%-40% EtOAc/헥산)시켜 카르복실산을 황색 오일(960 ㎎, 100%)로 수득하였다.
실시예 2
<크립토피신 55 숙시네이트 (4)의 제조>
트리에틸아민(16 ㎖, 0.115 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(5.7 ㎎, 0.038 밀리몰)을 메틸렌 클로라이드 383 ml 중 1(27 ㎎, 0.038 밀리몰) 및 숙신산 무수물(5. ㎎, 0.057 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 19 시간 동안 교반시킨 후, 숙신산 무수물(0.057 밀리몰, 5.7 g) 및 4-디메틸아미노 피리딘 4.7 ㎎(0.038 밀리몰)을 더 첨가한 후 29 시간 동안 더 교반시켰다. 반응물을 1 N 수성 염산 0.5 ㎖로 처리하고 메틸렌 클로라이드(3 x 0.5 ㎖)로 세척하였다. 햅해진 유기 추출물을 건조(Na2SO4)시키고 여과시키고 진공 중에서 건조시켜 백색 발포체를 형성시켰다. 역상 HPLC 정제하여 표제 화합물을 백색 발포체로 10 ㎎(32%) 수득하였다.
실시예 3
<크립토피신 55(2'-디-t-부틸포스파틸)페닐아세테이트 (5)의 제조>
메틸렌 클로라이드 50 ㎖ 중 1,3-디시킬로헥실카르보디이미드(27 ㎎, 0134 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 250 ml 중 1(0.102 밀리몰) 및 24(46 ㎎, 0.134 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(12 ㎎, 0.120 밀리몰) 의 용액에 첨가하였다.실온에서 6 시간 동안 교반시킨 후, 반응물을 에틸 아세테이트-헥산(3:1) 1 ㎖로 희석하고 셀라이트 마개로 여과시키고 에틸 아세테이트-헥산(3;1)으로 여과시켰다. 여액 및 세척물을 진공중에서 농축시켜 자주색 발포체를 형성시켰다. 에틸 아세테이트-헥산(4:1)로 용출시키는 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 15 g)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 수득하였다.
실시예 4
<크립토피신 55(2'-포스파틸)페닐아세테이트 디-나트륨 (6)의 제조>
1,4-디옥산(81 ㎖, 0.33 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 400 ㎖ 중 5(84 ㎎, 0.081 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 엷은 황색 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반시켰다. 진공 중에서 회백색 발포체로 농축시킨 후 조 인산2수소를 테트라히드로푸란 614 ㎖에 용해시키고 수산화나트륨(33 ㎖, 0.163 밀리몰)의 5.00 N 수용액으로 처리하였다. 10 분 동안 교반시킨 후, 진공 중에서 혼합물을 황갈색 발포체로 농축시켰다. 조염을 아세토니트릴 1 ㎖ 및 고온수 0.1 ㎖에 용해시켰다. 난용성 물질을 여과 제거시키고 영액을 진공 중에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 고체로 69 ㎎(87 %) 수득하였다.
실시예 5
<크립토피신 55 니코티노에이트 히드로클로라이드염의 제조>
니코티노일 클로라이드 히드로클로라이드(23 ㎖, 0.170 밀리몰)에 이어 트리에틸아민(23 ㎖, 0.170 밀리몰)을 실온에서 피리딘 354 ㎖ 중 1(50 ㎎, 0.071 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 1.5 시간 동안 교반시킨 후, 4-디메틸아미노 피리딘(8.6 ㎎, 0.071 밀리몰)을 첨가하였다. 5 시간 동안 교반시킨 후, 추가의 트리에틸아민(23 ㎖, 0.170 밀리몰), 4-디메틸아미노 피리딘(8.6 ㎎, 0.071 밀리몰) 및 니코티노일 클로라이드 히드로클로라이드(15 ㎖, 0.085 밀리몰)을 피리딘 린스제 50 ㎖과 함께 첨가하였다. 18 시간 동안 교반시킨 후, 반응물을 포화된 중탄산나트륨 수용액 0.5 ㎖로 처리하고, 메틸렌 클로라이드 (4 x 1 ㎖)로 세척하였다. 합해진 유기 추출물을 건조(Na2SO4)시키고 여과시키고 진공 중에서 밝은 갈색 오일로 농축시켰다. 에틸 아세테이트-헥산(10:1)로 용출시키는 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 14 g)시켜 유리 염기를 백색 발포체로 수득하였다. 니코티노에이트를 메틸렌클로라이드 1 ㎖에 용해시키고, 디에틸 에테르(90 ㎖, 0.090 밀리몰) 중 염화수소의 1.0 M 용액으로 처리하였다. 투명한 무색 용액을 5 분 동안 실온에 방치하였다. 진공 중에서 용매를 제거하여 표제 화합물을 백색 발포체로 51 ㎎ 수득하였다.
실시예 6
<크립토피신 55 N-메틸피리미디늄 아세테이트 염 (8)의 제조>
트리에틸아민(13 ㎖, 0.090 밀리몰)에 이어 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트(23 ㎎, 0.083 밀리몰)를 메틸렌 클로라이드 751 ㎖ 중 1 (53 ㎎, 0.075 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 비균일한 반응 혼합물을 실온까지 가온시키고 이 시간 동안 추가의 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트 11 ㎎(0.039 밀리몰)을 첨가하였다. 14.5 시간 동안 교반시킨 후, 추가의 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트 11 ㎎(0.039 밀리몰)을 첨가한 후, 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트 11 ㎎(0.039 밀리몰)을 첨가하고, 2.5 시간 후에 트리에틸아민 13 ㎖(0.090㎎)을 첨가하였다. 1 시간 동안 더 교반시킨 후, 반응물을 진공 중에서 오렌지색 발포체로 농축시킨 후, 음이온 교환(p-톨루엔술포네이트의 경우 아세테이트)과 함께 역상 HPLC로 정제한 후 동결건조시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 30 ㎎(47 %) 생성시켰다.
실시예 7
<크립토피신 55 N-t-Boc-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트 (9)의 제조>
메틸렌 클로라이드 20 ㎖ 중 1,3-디시클로헥식카카르보디이미드(10 ㎎, 0.049 밀리몰)의 용액을 무수 메틸렌 클로라이드 143 ㎖ 중 1(23 ㎎, 0.033 밀리몰), N-t-Boc-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트4c(16 ㎎, 0.049 밀리몰) 및 4-디메틸아미노피리딘(결정체는 거의 없음)의 용액에 첨가하였다. 2 시가 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸 아세테이트-헥산(2:1, 1 ㎖)으로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트:헥산(2:1)로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공에서 무색 오일로 농축시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 14 g, 에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 229 ㎎(88 %)수득하였다.
실시예 8
<크립토피신 55 3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트 히드로클로라이드 염 (10)의 제조>
1,4-디옥산(33 ㎖, 0.133 밀리몰) 중 염화수소의 4,0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 265 ㎖ 중 9(27 ㎎, 0.027 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 3 시간 동안 교반시킨 후, 투명한 무색 반응 혼합물을 진공 중에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 26 ㎎(96 %, 디옥산 5 중량 %로 보정됨)을 수득하였다.
실시예 9
<크립토피신 55 N-t-Boc-글리시네이트 (11)의 제조>
메틸렌 클로라이드 67 ㎖ 중 1,3-디시클로헥산카르보디이미드(52 ㎎, 0.251 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 중 1(118 ㎎, 0.167 밀리몰), N-t-Boc-글리신(44 ㎎, 0.251 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(2.0 ㎎, 0.0167 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 50 분 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸 아세테이트-헥산(3:1, 1 ㎖)로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 여과시키고 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트:헥산(2:1)로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공에서 무색 오일로 농축시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 19 g, 3:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 138 ㎎(96 %) 수득하였다.
실시예 10
<크립토피신 55 글리시네이트 히드로클로라이드 염 (12)의 제조>
1,4-디옥산(178 ㎎, 0.707 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 471 ㎖ 중 11(122 ㎎, 0.141 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 1 시간 20 분 동안 교반시킨 후, 투명한 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 120 ㎎(99 %, 디옥산 7 중량 %로 보정됨)을 수득하였다.
실시예 11
<크립토피신 55 N-t-Boc-b-알라니네이트 (13)의 제조>
메틸렌 클로라이드 82 ㎖ 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(45 ㎎, 0.217 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 400 ㎖ 중 1(102 ㎎, 0.145 밀리몰), N-t-Boc-b-알라닌(41 ㎎, 0.217 밀리몰) 및 4-디메틸아미노피리딘(18 ㎎, 0.145 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 3.5 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸 아세테이트-헥산(3:1, 1 ㎖)으로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트:헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공에서 무색 오일로 농축시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 21 g, 2:1에 이어 4:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 121 ㎎(95 %) 수득하였다.
실시예 12
<크립토피신 55 b-알라니네이트 히드로클로라이드 염 (14)의 제조>
1,4-디옥산(170 ㎖, 0.679 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드452 ㎖ 중 13(119 ㎎, 0.136 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 2 시간 15 분 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 110 ㎎(96 %, 디옥산 4 중량 %로 보정됨)을 수득하였다.
실시예 13
<크립토피신 55 N-t-Boc-g-아미노부티레이트 (15)의 제조>
메틸렌 클로라이드 50 ㎖ 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(18 ㎎, 0.088 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 150 ㎖ 중 1(48 ㎎, 0.068 밀리몰), N-t-Boc-4-아미노부티르산(18 ㎎, 0.088 밀리몰) 및 4-디메틸아미노피리딘(8 ㎎, 0.068 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 45 분 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸 아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ㎖)으로 희석하고, 5 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트-헥산(3:1)으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공에서 무색 오일로 농축시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 15 g, 3/1에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 55 ㎎(90 %) 수득하였다.
실시예 14
<크립토피신 55 g-아미노부티레이트 히드로클로라이드 염 (15)의 제조>
디에틸 에테르(297 ㎖, 0.297 밀리몰) 중 염화수소의 1.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 297 ㎖ 중 15(53 ㎎, 0.059 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 백색 페이스트로서 침전된 출발 물질을 추가의 메틸렌 클로라이드 150 ㎖에 다시 용해시켰다. 4 간 동안 교반시킨 후, 추가의 염화수소 용액 59 ㎖(0.059 밀리몰)을 첨가하였다. 14 시간 동안 더 계속 교반시키고 반응 혼합물을 진공 중에서 농축시켜 표제 ㅘ합물을 백색 발포체로 49 ㎎(100 %) 수득하였다.
실시예 15
<크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-알라니네이트 (17)의 제조>
메틸렌 클로라이드 87 ㎖ 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(45 ㎎, 0.219 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 400 ㎖ 중 1(103 ㎎, 0.146 밀리몰), N-t-Boc-(L)-알라닌(41 ㎎, 0.219 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(18 ㎎, 0.146 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 5 시간 50 분 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 추가의 N-t-Boc-(L)-알라닌 5.5 ㎎(0.029 밀리몰), 1.3-디시클로헥식카르보디이미드 6.0 ㎎(0.029 밀리몰) 및 소수의 결정체인 4-디메틸아미노 피리딘으로 처리하였다. 1 시간 동안 교반시킨 후, 반응물을 에틸 아세테이트-헥산(3:1, 1 ㎖)으로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트-헥산(3:1)으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공에서 무색 오일로 농축시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 22 g, 1.5:1에 이어 2:1에 이어 4:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 96 ㎎(75 %) 수득하였다.
실시예 16
<크립토피신 55 (L)-알라니네이트 (18)의 제조>
1,4-디옥산(135 ㎖, 0.542 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 361 ㎖ 중 17(95 ㎎, 0.108 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 2 .5 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 90 ㎎(96 %, 디옥산 6 중량 %로 보정됨)을 수득하였다.
실시예 17
<크립토피신 55 N-t-Boc-(D)-알라니네이트 (19)의 제조 >
메틸렌 클로라이드 47 ㎖ 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(11 ㎎, 0.053 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 130 ㎖ 중 1(25 ㎎, 0.035 밀리몰), N-t-Boc-(D)-알라닌(10 ㎎, 0.053 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(0.4 ㎎, 0.0035 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 5.5 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸 아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ㎖)로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트-헥산(3:1)으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공에서 무색 오일로 농축시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 15 g, 2:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 26 ㎎(83 %) 수득하였다.
실시예 18
<크립토피신 55 (D)-알라니네이트 히드로클로라이드 염 (20)의 제조>
1,4-디옥산(34 ㎖, 0.542 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 274 ㎖ 중 18(24 ㎎, 0.027 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 2.5 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 24 ㎎(100 %, 디옥산 8 중량 %로 보정됨)을 수득하였다.
실시예 19
<크립토피신 55 Na-Ne-di-t-Boc-(L)-리시네이트 (21)의 제조>
메틸렌 클로라이드 96 ㎖ 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(40 ㎎, 0.193 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 400 ㎖ 중 1(105 ㎎, 0.149 밀리몰), Na-Ne-di-t-Boc-(L)-리신(67 ㎎, 0.193 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(18 ㎎, 0.149 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 4 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 추가의 Na-Ne-di-t-Boc-(L)-리신 10 ㎎(0.030 밀리몰)와, 메틸렌 클로라이드 100 중의 용액으로 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 6.1 ㎎(0.030 밀리몰)로 처리하였다. (3:1, 0.5 ㎖)로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트-헥산(3:1)으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공 중 에서 백색 발포체로 농축시키고, Na-Ne-di-t-Boc-(L)-리신 34 ㎎(0.097 밀리몰), 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 20 ㎎(0.097 밀리몰) 및 4-미데틸아미노 피리딘 9.1 ㎎(0.075 밀리몰)을 사용하여 상기 조건에 가하였다. 1.5 시간 동안 교반시킨 후, 반응물을 상기와 같이 처리하여 조 백색 발포체를 생성시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 21 g, 1:1에 이어 4:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 112 ㎎(73 %) 수득하였다.
실시예 20
<크립토피신 55 (L)-리시네이트 디-히드로클로라이드 염 (22)의 제조>
1,4-디옥산(155 ㎖, 0.621 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 345 ㎖ 중 21(107 ㎎, 0.103 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 4 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 여과시켰다. 수집된 백색 고체를 메틸렌 클로라이드(2 x 1 ㎖)로 세척하고 실온에서 진공 중에서 건조시켜 표제 화합물 87 ㎎, (93 %)을 수득하였다.
실시예 21
<크립토피신 55 (2'-디-t-부틸포스파틸)페닐아세테이트 (24)의 제조>
이미다졸(621 ㎎, 9.11 밀리몰) 및 t-부틸디메틸실릴 클로라이드(1.26 g, 8.34 밀리몰)을 0 ℃에서 N,N-디메틸포름아미드 15.2 ㎖ 중 2'-히드록시페네틸 알콜의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 40 분 동안, 실온에서 45 분 동안 교반시킨 후, 이미다졸 155 ㎎(2.28 밀리몰) 및 t-부틸디메틸실릴 클로라이드 229 ㎎(1.52 밀리몰)을 더 첨가하였다. 반응물을 15 분 동안 더 교반시키고, 이 시기에 t-부틸 메틸 에테르 150 ㎖을 더 첨가하였다. 혼합물을 차가운 1 N 수성 염산(1 x 15 ㎖)에 이어 물(1 x 15 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조(Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공하에서 농축하여 황색 오일로 농축시켰다. 에틸 아세테이트-헥산(5:1)로 용출시키는 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 70 g)시켜 엷은 회백색 오일로서 1°실리 에테르 1.81 ℃(94%)을 수득하였다. 1H-테트라졸(421 ㎎, 6.01 밀리몰)을 실온에서 테트라히드로푸란 2 ㎖ 중 실릴 에테르(506 ㎎,2.00 밀리몰) 및 디-t-부틸 디에틸포스포르아미디트(93%, 2.00 밀리몰 600 ㎖)에 첨가하였다. 45 분 동안 교반시킨 후, 반응 혼합물을 -10 ℃까지 냉각시키고, 메틸렌 클로라이드 3.6 ㎖ 중 m-클로로퍼벤조산(99%, 2.61 밀리몰 450 ㎎)로 신속히 처리하였다. 흐린 백색 반응물을 실온까지 가온시키고 15 분 동안 교반시켯다. 반응물을 10 % 수성 중아술페이트 나트륨 4 ㎖로 켄칭시키고, 10 분 동안 세게 교반시키고 t-부틸 메틸 에테르 15 ㎖로 희석하고, 10 % 수성 중아황산나트륨(2 x 10 x 10 ㎖)에 이어 0.5 N 수성 수산화나트륨(2 x 10 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조(Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공하에서 농축하여 무색 오일(941 ㎖)로 농축시켜 다음 단계에 직접 사용하였다. 조 포스페이트을 테트라히드로푸란 10 ㎖에 용해시키고 0 ℃까지 냉각시키고, 테트라히드로푸란(2.4 ㎖, 2.4 밀리몰)중 플루오르화 t-n-부틸암모늄의 1.0 M 용액으로 처리하였다. 0 ℃에서 20 분 동안, 실온에서 1.5 시간 동안 교반시키고, 반응물을 t-부틸 메틸 테르 60 ㎖로 희석하고, 물(1 x 10 ㎖)에 이어 염수(1 x 10 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조(Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공하에서 황색 오일로 농축하였다. 에틸 아세테이트-헥산(3:1)로 용출시키는 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 50 g)시켜 엷은 회백색 오일로서 1°알콜 525 ㎎(79%)을 수득하였다. 물에 이어 나트륨 페리오데이트(239 ㎎, 1.12 밀리몰) 및 루테늄(Ⅲ)클로라이드 수화물(1.8 ㎎, 0.0082 밀리몰)을 실온에서 아세토니트릴-4염화탄소(1:1, 1.49 ㎖)에 첨가하였다. 갈색 혼합물을 실온에서 55 분 동안 신속히 교반시켰다. 진공 중에서 농축하고, 10 % 메탄올-에틸 아세테이트로 용출시키는 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 8 g)시켜, 표제 화합물 109 ㎎(85 %)을 자주색 오일로 수득하였다. 500 MHz1H NMR (CDCl3) d 7.49 (d, 1h, J = 7.53 Hz), 7.30-7.15 (m, 3H), 3.77 (s, 2H), 1.51 (s, 10H).
실시예 22
실시예 21-26의 화합물을 실질적으로 상기와 같은 방법으로 제조하였다.
크립토피신-129의 스펙트럼 특성
EIMS m/s (상대적 세기) 654/656 (2.1/0.8, M-HBr), 412/414 (9.7/3.6), 280/282 (10.3/3.5), 227 (15.2), 195/197 (50.1/16.3), 105 (100), 91 (100); 고분해 EIMS m/z 654.2687 (C35H43ClN2O8), D 2.1 mmu).1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) 7-브로모-5,8-디히드록시-6-메틸-8-페닐-2-옥텐산 (A) 5.76 (2, d; 15.3), 6.68 (3, ddd; 15.3, 3.9 및 5.6, 2.29 (4, ddd; 14.2, 10.6 및 10.4), 2.67 (4, dd; 14.2 및 5.4), 4.95 (5, ddd; 10.3, 10.3 및 1.8), 2.47 (6, m), 1.15 (6-Me, d; 6.5), 4.29 (7, dd; 9.1 및 2.1), 4.84 (8, d; 90), 7.34-7.39 (10/11/12/13/14, m); 3-클로로-4-메톡시페닐알라닌 (B) 4.80 (2, m), 5.73 (2-NH, d; 8.8), 3.01 (3, dd; 14.6 및 7.6), 3.16 (3, dd; 14.3 및 5.6), 7.23 (5, d; 2.0), 3.87 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.4), 7.09 (9, dd; 8.4 및 2.0); 3-아미노-2-메틸프로피온산 (C) 2.73 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.2), 3.25 (3, ddd; 13.5, 6.5 및 6.5), 3.53 (3, ddd; 13.4, 5.4 및 3.9), 6.93 (3-NH, brt; 6.1); 루크산 (D) 4.91 (2, dd; 10.5 및 2.8, 1.49 (3, m), 1.80 (3, m), 1.73 (4, m), 0.92 (4-Me, d; 6.5), 0.89 (5, d; 6.5).
13C NMR (CDCl3) 유닛 d (탄소 위치) A 165.4 (1), 125.2 (2), 141.3 (3), 36.6 (4), 75.7 (5), 37.9 (6), 11.8 (6-Me), 60.3 (7), 76.7 (8), 141.6 (9), 126.8 (10/14), 128.7 (11/13), 128.8 (12); B 171.0 (1), 53.6 (2), 35.0 (3), 130.0 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OMe), 112.3 (8), 128.4 (9); C 175.4 (1), 38.4 (2), 14.0 (2-Me), 41.3 (3), D 170.2 (1), 71.3 (2), 39.6 (3), 24.8 (4), 23.2 (4-Me), 21.4 (5).
실시예 23
크립토피신-129의 스펙트럼 특성
EIMS m/z (상대적 세기) 734/736 (0.3/0.1), 654/656 (0.6/0.2), 412/414 (12.6/4.7), 313/315 (20.3/12.5), 280 (7.6), 227 (3.5), 195/197 (44.7/1.56), 155/157 (35.4/13.6), 105 (33.6), 91 (34.2), 80/81 (100/100); high resolution EIMS m/z 734.1985 (C35H44ClBrN2O8, D-1.6 mmu), 654.2722 (C35H43ClN2O8, D-1.4 mmu). 1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) 7-브로모-5,8-디히드록시-6-메틸-8-페닐-2-옥텐산 (A) 5.78 (2, D; 15.5), 6.69 (3, ddd; 15.1, 9.8 및 5.3), 2.33 (4, m), 2.71 (4, m), 4.97 (5, ddd; 10.4, 10.4 및 1.6), 2.45 (6, m), 1.17 (6-Me, d; 6.3), 4.40 (7, dd; 10.1 및 2.2), 5.06 (8, d; 10.1), 7.36-7.42 (10/11/12/13/14, m); 3-클로로-4-메톡시페닐알라닌 (B) 4.82 (2, m), 5.69 (2-NH, d; 8.7), 3.02 (3, dd; 14.5 및 7.5), 3.17 (3, dd; 14.5 및 5.4), 7.23 (5, d; 2.1), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.4), 7.09 (9, dd; 8.4 및 1.9); 3-아미노-2-메틸프로피온산 (C) 2.73 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.25 (3, ddd; 13.4, 6.5 및 6.5), 3.54 (3, m), 6.92 (3-NH, brt; 5.7); 루크산 (D) 4.91 (2, dd; 10.6 및 2.7), 1.43 (3, m), 1.82 (3, m), 1.75 (4, m), 0.93 (4-Me, d; 6.6), 0.90 (5, d; 6.6).13C NMR (CDCl3) 단위 (탄소 위치) A 165.4 (1), 125.2 (2), 141.2 (3), 36.6 (4), 76.5 (5), 38.2 (6), 11.7 (6-Me), 55.3 (7), 87.4 (8), 137.4 (9), 128.0 (10/14), 128.7 (11/13), 129.3 (12); B 171.0 (1), 53.6 (2), 35.0 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OMe), 112.2 (8), 128.4 (9); C 175.5 (1), 38.4 (2), 14.0 (2-Me), 41.2 (3), D 170.2 (1), 71.2 (2), 39.6 (3), 24.8 (4), 23.2 (4-Me), 21.4 (5).
실시예 24
크립토피신-139의 스펙트럼 특성
EIMS m/s (상대적 세기) 732/734 (0.3/0.3), 652/654 (0.9/0.5), 533 (13.6), 445 (5.7), 195/197 (9.2/11.4), 105 (96.2), 80/82 (100/100); high resolution EIMS m/z 732.1783 (C35H42ClBrN2O8, Æ - 2.1 mmu), 652.2573 (C35H41ClN2O8, Æ-2.1 mmu).1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) 7-브로모-8-옥소-5-히드록시-6-메틸-8-페닐-2-옥텐산 (A) 5.75 (2, d; 15.4), 6.68 (3, ddd; 15.2, 10.1 및 5.0), 2.31 (4, ddd; 14.2, 10.7 및 10.7), 2.63 (4, dd; 14.4 및 5.1), 5.09 (5, ddd; 9.7, 9.7 및 1.5), 2.46 (6, m), 1.18 (6-Me, d; 6.6), 5.41 (7, d; 3.5), 7.94 (10/14, brd; 8.6), 7.50 (11/13, t; 7.8), 7.63 (12, brt; 7.5); 3-클로로-4-메톡시페닐알라닌 (B) 4.80 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.3), 3.04 (3, dd; 14.6 및 7.2), 3.14 (3, dd; 14.4 및 5.5), 7.22 (5, d; 2.0), 3.87 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.3), 7.08 (9, dd; 8.3 및 2.3); 3-아미노-2-메틸프로피온산 (C) 2.76 (2, m), 1.26 (2-Me, d; 7.1), 3.31 (3, ddd; 13.7, 6.8 및 6.6), 3.53 (3m), 6.95 (3-NH, brt; 5.9); 루크산 (D) 4.93 (2, dd; 10.6 및 3.0), 1.51 (3, m), 1.95 (3, m), 1.80 (4, m), 0.97 (4-Me, d; 6.8), 0.91 (5, d, 6.6), 13C NMR (CDC13) 단위 d (탄소 위치) A 165.2 (1), 125.3 (2), 141.0 (3), 36.2 (4), 76.0 (5), 39.3 (6), 13.8 (6-Me), 51.8 (7), 192.3 (8), 134.2 (9), 128.7 (10/14), 129.0 (11/13), 134.0 (12); B 170.9 (1), 53.7 (2), 35.0 (3), 129.8 (4), 131.0(5), 122.4 (6),*(7, 비관찰)), 56.2 (7-OMe), 112.3 (8), 128.4 (9); C 175.6 (1), 38.3 (2), 14.2 (2-Me), 41.1 (3), D 170.2 (1), 71.1 (2), 39.8 (3), 24.7, 23.2 (4-Me), 21.3 (5).
실시예 25
크립토피신-145의 스펙트럼 특성
EIMS m/z (상대적 세기) 734/736/738 (0.5/0.6/0.2), 654,656 (1.5/1.1), 412/414 (2.2/1.0), 313/315 (19.5/12.9), 227 (4.1), 195/197 (11.5/3.7), 105 (14.6), 91 (25.2), 80/82 (100/100); 고분해 EIMS m/z 736.1980 (C35H44ClBrN2O8, Æ - 3.1 mmu), 654.2714 (C35H43ClN2O8, Æ - 0.6 mmu).1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) 7-클로로-5,8-디히드록시-6-메틸-8-페닐-2-옥텐산 (A) 5.81 (2, d; 15.7), 6.72 (3, m), 2.31 (4, m), 2.77 (4, m), 5.62 (5, m), 2.42 (6, m), 1.22 (6-Me, d; 7.0), 4.23 (7, dd; 8.0 및 3.2), 4.94 (8, d; 7.9), 7.32-7.28 (10/11/12/13/14, m); 3-클로로-4-메톡시페닐알라닌 (B) 4.82 (2, m), 5.72 (2-NH, brs), 3.05 (3, m), 3.15 (3, m), 7.23 (5, brs), 3.88 (7-OMe, s), 6.84 (8, brd; 7), 7.09 (9, m); 3-아미노-2-메틸프로피온산 (C) 2.75 (2, m), 1.25 (2-Me, d; 7.0), 3.30 (3, m), 3.53 (3, m), 6.97 (3-N, brs); 루크산 (D) 4.90 (2, dd, 9.7 및 3.6), 1.58 (3, m), 1.82 (3, m), 1.70 (4, m). 0.95 (4-Me, d; 6.6), 0.89 (5, d; 6.6).13C NMR (CDCl3) 단위 d (탄소 위치) A 165.14 (1), 125.2 (2), 141.3 (3), 35.8 (4), 75.8 (5), 41.2 (6), 13.4 (6-Me), 60.7 (7), 76.5 (8), 141.6 (9), 126.8 (10/14), 128.5 (11/13), 128.6 (12); B 170.5 (1), 53.7 (2), 35.0 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 154.0 (7), 56.2 (7.OMe), 112.3 (8) 128.5 (9); C 175.4 (1), 38.4 (2), 14.1 (2-Me), 41.2 (3), D 170.5 (1), 71.3 (2), 39.7 (3), 24.6 (4), 22.9 (4-e), 21.5 (5).
실시예 26
크립토피신-140의 스펙트럼 특성
EIMS m/s (상대적 세기) 690/692 (2.3/1.8), 654/656 (3.8/2.2), 412/414 (5.4/2.1), 280/282 (5.4/2.2), 227 (10.2), 195/197 (27.8/10/4), 155/157 (53.7/16/4), 105 (81.0), 91 (100); 고분해 EIMS m/z 690.2427 (C35H44Cl12N208, Æ 4.8 mmu), 654.2760 (C35H43ClN208, Æ - 5.2 mmu).1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) 7-클로로-5,8-디히드록시-6-메틸-8-페닐-2-옥텐산 (A) 5.77 (2, d; 15.4), 6.68 (3, ddd; 15.3, 9.8 및 5.6 ), 2.29 (4, m), 2.67 (4, m), 4.98 (5, ddd; 10.3, 10.3 및 1.7), 2.64 (6, m), 1.15 (6-Me, d; 6.6), 4.19 (7, dd; 9.2 및 2.1), 4.72 (8, d;, 9.2), 7.33-7.39 (10/11/12/13/14, m); 3-클로로-4-메톡시페닐알라닌 (B) 4.81 (2, m), 5.69 (2-NH, d; 8/8), 3.01 (3, dd; 14.5 및 7.5), 3.16 (3, dd; 14.5 및 5.5), 7.23 (5, d; 2.1), 3.87 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.3), 7.09 (9, dd; 8.4 및 2.0; 3-아미노-2-메틸프로피온산 (C) 2.73 (2, m), 1.22 (2-Me, d; 7.3), 3.24 (3, ddd; 13.5, 6.8 및 6.8), 3.53 (3, m), 6.91 (3-H, brt; 6.0); 로크산 (D) 4.89 (2, DD; 10.4 및 2.9), 1.39 (3, m), 1.69-1.80 (3/4, m), 0.90 (4-Me, d; 6.4), 0.87 (5, d; 6.6). 13 C NMR (CDCl3) 단위 (탄소 위치) A 165.4 (1), 125.2 , 141.4 (3), 36.7 (4), 75.5 (5), 38.1 (6), 10.4 (6-Me), 65.0 (7), 75.8 (8), 141.4 (9), 126.8 (10/14), 128.7 (11/13), 128.8 (12); B 171.0 (1), 53.6 (2), 35.0 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OMe), 112.2 (8), 128.4 (9); C 175.5 (1), 38.4 (2), 14.1 (2-Me), 41.3 (3), D 170.3 (1), 71.3 (2), 39.5 (c), 24.7 (4), 23.2 (4-Me), 21.4 (5).
실시예 28
반응식 1의 실험
-78 ℃에서 CH2Cl250 ㎖ 중 알켄 1(1.15 g, 3.52 밀리몰)의 용액에 피리딘(0.3 ㎖, 3.9 )을 첨가하고, CH2Cl2중 수단(Sudan) 레드 7B의 0.1 % 용액 0.98 ㎖을 적색이 황색으로 변할 때까지 버블링시켰다. 반응 과정을 TLC로 모니터하였다. 반응이 끝나면, 아연 분진(1.63 g, 24.9 밀리몰) 및 빙초산 3.4 ㎖을 첨가하였다. 빙조를 제거하고 혼합물을 실온까지 서서히 가온시키고, 2 시간 더 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과시키고 CuSO4(3 x 30 ㎖)에 이어 물(3 x 20 ㎖)로, 마지ㅏ막으로 수성 NaHCO3(3 x 20 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조(Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공하에서 농축시켜 목적하는 알데히드 0.937 g(88 %)을 생성시ㅋ고 더 정제함 없이 다음 단계에 사용하였다.
브롬화리튬으로 착물화된 1,5 M 용액으로서 메틸리튬(9.6 mL, 14.4 밀리몰)을 THF 120 mL 중 2,5-디메틸벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드의 -78 ℃ 용액에 적가하였다. 용액을 0 ℃까지 서서히 가온시키고, 다시 078 ℃까지 냉각시켰다. THF 40 mL 중 알데히드 2를 -78 ℃에서 일리드에 첨가하였다. 혼합물을 -78 ℃에서 15 분 동안 가온시키고 실온까지 서서히 가온시켯다. 실온에서 1 시간 후, 포화 NH4Cl(50 mL)을 첨가하고 용액을 에테르로 추출하였다. 에테르층을 물(2 x 50 mL)에 이어 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켰다. E:Z의 혼합물로서 조 스티렌을 2 % EtOAc/헥산으로 실리카 상에서 정제하여 투명한 오일 2.32 g(58 %)를 수득하였다. E:Z의 혼합물을 티오페놀(0.3 mL) 및 1,1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴)(VAZO) 존재히에서 벤젠 120 mL에서 8 시간 동안 환류시켰다. 이어서 용액을 주위 온도까지 냉각시키고, 진공하에서 농축하고 컬럼 크러마토그래피(실리카 겔, 2-5% EtOAc/헥산)로 정제하여 투명한 오일로서 순수한 E 이성질체 2,2 g(95%)을 수득하였다.
THF 10 mL 중 에스테르 3(3.2 g, 5.46 밀리몰)의 용액에 2 M KOH 용액 11 mL을 첨가하엿다. 세게 교반시키면서 생성 혼합물을 65 ℃에서 24 시간 동안 가역시켰다. 주위 온도에서 냉각시키고 HCl의 2 M 용액 11 mL을 첨가ㅏ밀리몰고 생성 혼합물을 30 분 더 세게 교반시켰다. 에틸 아세테이트(50 mL)를 혼합물에 첨가하고 층을 분리하였다. 층을 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 더 추출하였다. 합해진 유기층을 50% 염수(3 x 30 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고 여과시키고 진공에서 농축시켜 두터운 황색 오일로서 목적하는 산 2.12 g(100%)을 수득하였다.
DMF 7 mL 중 산 4(2.12 g, 5.46 밀리몰) 및 디이소프로필아민(2.9 mL, 16.4 밀리몰)의 용액에 디페닐포스핀 클로라이드(1.1 mL, 6.01 밀리몰)을 적가하였다. 0 ℃에서 5 분 및 30분 동안 교반시킨 후, DMF 7 mL 중 3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-D-알라닌-2,2,2-트리클로로에틸 에테르 5의 TFA 염을 적가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시키고, 물 100 mL에 붓고 디에틸 에테르(3 x 50 mL)로 세척하였다. 합해진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 셀라이트로 여고시키고 진공에서 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 10-30% EtOAc/헥산)시켜 백색 발포체로서 아미드 6 2.86 g(72%)를 수득하였다.
실시예 28
반응식 1의 실험
-78 ℃에서 CH2Cl250 ㎖ 중 알켄 1(1.15 g, 3.52 밀리몰)의 용액에 피리딘(0.3 ㎖, 3.9 )을 첨가하고, CH2Cl2중 수단(Sudan) 레드 7B의 0.1 % 용액 0.98 ㎖을 적색이 황색으로 변할 때까지 버블링시켰다. 반응 과정을 TLC로 모니터하였다. 반응이 끝나면, 아연 분진(1.63 g, 24.9 밀리몰) 및 빙초산 3.4 ㎖을 첨가하였다. 빙조를 제거하고 혼합물을 실온까지 서서히 가온시키고, 2 시간 더 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과시키고 CuSO4(3 x 30 ㎖)에 이어 물(3 x 20 ㎖)로, 마지ㅏ막으로 수성 NaHCO3(3 x 20 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조(Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공하에서 농축시켜 목적하는 알데히드 0.937 g(88 %)을 생성시키고 더 정제함 없이 다음 단계에 사용하였다.
브롬화리튬으로 착물화된 1,5 M 용액으로서 메틸리튬(9.6 mL, 14.4 밀리몰)을 THF 120 mL 중 2,5-디메틸벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드의 -78 ℃ 용액에 적가하였다. 용액을 0 ℃까지 서서히 가온시키고, 다시 078 ℃까지 냉각시켰다. THF 40 mL 중 알데히드 2를 -78 ℃에서 일리드에 첨가하였다. 혼합물을 -78 ℃에서 15 분 동안 가온시키고 실온까지 서서히 가온시켯다. 실온에서 1 시간 후, 포화 NH4Cl(50 mL)을 첨가하고 용액을 에테르로 추출하였다. 에테르층을 물(2 x 50 mL)에 이어 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켰다. E:Z의 혼합물로서 조 스티렌을 2 % EtOAc/헥산으로 실리카 상에서 정제하여 투명한 오일 2.32 g(58 %)를 수득하였다. E:Z의 혼합물을 티오페놀(0.3 mL) 및 1,1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴)(VAZO) 존재히에서 벤젠 120 mL에서 8 시간 동안 환류시켰다. 이어서 용액을 주위 온도까지 냉각시키고, 진공하에서 농축하고 컬럼 크러마토그래피(실리카 겔, 2-5% EtOAc/헥산)로 정제하여 투명한 오일로서 순수한 E 이성질체 2,2 g(95%)을 수득하였다.
THF 10 mL 중 에스테르 3(3.2 g, 5.46 밀리몰)의 용액에 2 M KOH 용액 11 mL을 첨가하엿다. 세게 교반시키면서 생성 혼합물을 65 ℃에서 24 시간 동안 가역시켰다. 주위 온도에서 냉각시키고 HCl의 2 M 용액 11 mL을 첨가ㅏ밀리몰고 생성 혼합물을 30 분 더 세게 교반시켰다. 에틸 아세테이트(50 mL)를 혼합물에 첨가하고 층을 분리하였다. 층을 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 더 추출하였다. 합해진 유기층을 50% 염수(3 x 30 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고 여과시키고 진공에서 농축시켜 두터운 황색 오일로서 목적하는 산 2.12 g(100%)을 수득하였다.
DMF 7 mL 중 산 4(2.12 g, 5.46 밀리몰) 및 디이소프로필아민(2.9 mL, 16.4 밀리몰)의 용액에 디페닐포스핀 클로라이드(1.1 mL, 6.01 밀리몰)을 적가하였다. 0 ℃에서 5 분 및 30분 동안 교반시킨 후, DMF 7 mL 중 3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-D-알라닌-2,2,2-트리클로로에틸 에테르 5의 TFA 염을 적가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시키고, 물 100 mL에 붓고 디에틸 에테르(3 x 50 mL)로 세척하였다. 합해진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 셀라이트로 여고시키고 진공에서 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 10-30% EtOAc/헥산)시켜 백색 발포체로서 아미드 6 2.86 g(72%)를 수득하였다.
실시예 29
에스테르(2.1 g)을 상기와 같은 방법으로 알데히드 2 2.5 g및 3-메틸벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드로부터 65% 수율로 제조하였다.
산(1.93 g)을 상기와 같은 방법으로 에스테르 2.0 g으로부터 100% 수율로 제조하였다.
아미드(2.9 g)을 상기와 같은 방법으로 산 1.93 g으로부터 72% 수율로 제조하였다.
알콜(2.0 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 아미드 2.4 g으로부터 100% 수율로 제조하였다.
기질(2.3 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 알콜 2.0 g으로부터 76% 수율로 제조하였다.
스티렌(0.86 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 카르바메이트 2.2 g으로부터 54% 수율로 제조하였다.
실시예 30
표제 화합물(0.20 g)인 b 에폭시드를 상기와 같은 방법으로 출발 스티렌 0.667 g으로부터 29% 수율로 제조하였다.
실시예 31
-60 ℃에서 CHCl35.0 mL 중 b 에폭시드(0.10 g, 0.147 밀리몰)의 용액에 클로로트리메틸 실란 (0.093 mL, 0.74 밀리몰)을 첨가하였다. 용액을 -60 ℃에서 30 분 동안 실온에서 1,5 시간 동안 교반시킨 후 진공하에서 농축시켰다. 신 및 안티의 50:50 혼합물을 함유하는 생성 잔류물을 역상 HPLC로 정제하여 목적하는 트란스 이성질체 0.028 g(27%)를 수득하였다.
실시예 32
에스테르(2.75 g)을 상기와 같은 방법으로 알데히드 2 3.39 g 및 4-메톡시벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드 2.7 g으로부터 54% 수율로 제조하였다.
산(1.58 g)을 상기와 같은 방법으로 에스테르 1.7 g으로부터 96% 수율로 제조하였다.
아미드(2.09 g)을 상기와 같은 방법으로 산 1.58 g으로부터 70% 수율로 제조하였다.
알콜(1.35 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 아미드 1.63 g으로부터 98% 수율로 제조하였다.
기질(1.69 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 알콜 1.26 g으로부터 89% 수율로 제조하였다.
스티렌 생성물(0.676 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 카르바메이트 1.43 g으로부터 65% 수율로 제조하였다.
실시예 33
THF 100 mL 중 t-부톡시드 칼륨.17 g, 10.5 밀리몰)의 0 ℃ 용액에 p-니트로-벤질 트리페닐포스포늄 브로마이드(5.0 g, 10.5 밀리몰)을 소량씩 30 분에걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 1 간 동안 교반시켰다. THF 20 mL중 알데히드 2를 미리 형성된 일리드에 적가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 15 분 동안 교반시킨 후, 실온까지 가온시키고 교반시켰다. 포화된 수성 NH4Cl(50 mL)을 첨가ㅏ밀리몰고 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 중에서 농축시켰다. E:Z의 혼합물을 2% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 상에서 정제하여 Z 이성질체 0.5 g 및 E 이성질체 1.1 g(42%)을 황색 오일로 수득하였다.
아미드(3.06 g)을 상기와 같은 방법으로 산 2.55 g으로부터 65% 수율로 제조하였다.
기질(3.3 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 알콜 2.54 g으로부터 87% 수율로 제조하였다.
스티렌 생성물(0.55 g)을 상기와 같은 방법으로 출발 카르바메이트 1.77 g으로부터 42% 수율로 제조하였다.
실시예 34
실시예 35
반응식 2C 실험
CH2Cl2/1.0 mL MeOH 9.0 넹서 -78 ℃에서 알켄 17(0.3 g, 0.50 밀리몰)에 2-피콜린(0.07 mL, 0.074 밀리몰)을 첨가하였다. 이 용액을 1.2 당량의 오존에 가하고 생성 오조니드를 디메틸 술피드(1.1 mL, 2.2 밀리몰)로 켄칭시켰다. 혼합물을 실온까지 온시키고 밤새 교반시켰다. 용액을 물(2 x 20 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공에서 농축하여 알데히드 18 0.251 g(87 %)를 수득하였다.
실시예 37
반응식 3 실험 절차
DMF 3 mL 중 크립토피신 53(0.15 g, 0.23 밀리몰) 및 H2O 2.0 mL의 용액에 진한 H2SO45 드롭을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반시키고 추가의 H2SO45 드롭을을 첨가하고 24 시간 동안 계속 교반시켰다. 포화된 NaHCO3를 모든 반응성이 저하될 때까지 서서히 첨가하고 혼합물을 CH2Cl2로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 농축시켰다. 생성 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 디올 0.13 g을 생성시켰다. THF 4.0 mL 중 디올 및 H2O 2.0 mL의 혼합물에 NaIO4(0.144 g, 0.675 밀리몰)를 첨가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 진공 중에서 농축하고 H2O 5 mL을 첨가하고, CH2Cl2로 추출하였다. 유기층을 분리하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켜 알데히드 18 0.10 g(77 %)을 수득하였다.
THF 3.0 mL 중 TIPS로 보호된 4-히드록시메틸벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드(0.23 g, 0.4 밀리몰)에 -78 ℃에서 n-부틸리튬의 1.6 M 용액 0.25 mL을 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃까지 서서히 가온시키고 10 분 동안 더 교반시켰다. THF 4.0 mL 중 알데히드 18에 0.13 M 오렌지색 일리드 용액 2.5 mL을 적가하였다. 생성 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간 동안, 실온에서 30 분 동안 교반시켰다. 포화된 NH4Cl(20 mL)을 에틸 아세테이트(10 mL)와 함께 첨가하고, 층을 분리하고 유리층을 물(3 x 10 mL) 및 염수로 세척하였다. 마지막으로 Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시키고 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 70 % EtOAc/헥산)를 이용하여 정제하여 목적하는 스티렌 0.09 g(62%)을 수득하였다.
<실시예 38>
DME 30 ml 중의 크립토피신 53(2.9 g, 0.0026 밀리몰) 용액에 2 M 수성 퍼클로르산 용액(15 ml, 30 밀리몰)을 가하고, 생성되는 혼합물을 6 시간 동온 교반하였다. 포화된 NaHCO3(50 ml)으로 조심스럽게 중화시킨 후, 혼합물을 CH2Cl2(4 x 100 mL)으로 추출하고, 합한 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 칼럼 크로마토그래피(실리카겔 5 % MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 19(1.5 g)을 3:1 안티/신 혼합물로서 72 %수율로 얻었다.
THF 20 ml 및 물 15 ml 중의 디올(1.0 g, 1.46 밀리몰) 용액에 NaIO4(1.9 g, 8.9 밀리몰)을 가하고, 혼합물을 질소 하에서 밤새 교반하였다. 감압하에서 THF의벌크를 제거하고, 잔사를 물(100 mL)로 희석하고 CH2Cl2(4 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수 (1 x 25 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 고체를 톨루엔 100 mL 중에 용해시킴으로써 남은 벤즈알데히드를 제거하고, 40 ℃의 회전 증발기상에서 톨루엔을 후속 제거하였다. 톨루엔으로부터 2 회 더 증발시킨 후, 알데히드 18(0.828 g)을 황색 발포체로서 98 % 수율로 얻었다. 남은 알데히드는 추가의 정제없이 사용하였고, 안정성을 이유로 -23 ℃에서 보관하였다. 칼럼 크로마토그래피(실리카겔 5 % MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 19(1.5 g)을 3:1 안티/신 혼합물로서 72 %수율로 얻었다.
<실시예 39>
-50 ℃에서 THF 100 ml 중의 4-(트리이소프로필실옥시메틸)벤질 트리페닐포스포늄 브로마이드(7.6 g, 12.2 밀리몰)에 1.5M n-부틸리튬 용액(8.1 ml, 12.2 밀리몰)을 적가하였다. 혼합물을 실온으로 서서히 가온하고 30 분 동안 더 교반하였다. -78 ℃에서 THF 100 ml 중의 알데히드 18(2.95 g, 5.1 밀리몰)에 이중 팁 바늘을 통하여 적색 일리드 용액을 적가하였다. 생성되는 혼합물을 -78 ℃에서 3 시간 동안 실온에서 45 분 동안 교반하였다. 포화 NH4Cl(100 ml)에 에틸 아세테이트(100 ml)을 가하고, 수성 물질은 에틸 아세테이트(2 x 50 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(3 x 40 ml) 및 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 생성되는 황색 잔사를 칼럼 크로마토그래피(실리카겔 10-20-50 % EtOAc/헥산)로 정제하여 바람직한 스티렌 3.6 g(84%)을 백색 고체로서 E:Z 이성질체로서 얻었다.
이성질체의 혼합물(7.3 g, 8.7 밀리몰)을 벤젠 240 ml 중에 용해시키고, 1.1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴)(VAZO)(0.32 g, 0.87 밀리몰) 및 티오페놀(3.7 ml, 4.0 밀리몰)의 존재하에 가열 환류시켰다. 5 시간 동안 환류시킨 후, 용액을 농축하고, 잔사를 칼럼 크로마토그래피(실리카겔, 5 내지 15 % 하여 19(1.5 g)을 3:1 안티/신 혼합물로서 72 %수율로 얻었다.
<실시예 40>
3-클로로퍼옥시벤조산(0.27 g, 1.59 밀리몰)을 CH2Cl220 mL 중의 스티렌 20(1.25 g, 1.49 밀리몰) 용액을 0 ℃에서 가하였다. 용액을 0 ℃에서 1 시간 동안 가열하고 실온에서 밤새 교반하였다. 이를 진공하에서 농축하고 생성되는 에폭시드를 역상 HPLC에서 분리하여 β에폭시드 22(57 %) 0.67 g을 백색 고체로서 얻었티렌 3.6 g(84%)을 백색 고체로서 E:Z 이성질체로서 얻었다.
<실시예 41>
THF 중의 1.0 M 용액으로서 테르라히드로부틸암모늄 플루오라이드(0.14 ml, 0.14 밀리몰)을 0 ℃에서 THF 3.5 ml 중의 1.0 M β에폭시드 22(0.1 g, 0.117 밀리몰)을 적가하였다. 용액을 실온으로 가온시키고, 20 분 더 계속 교반하고 물 (10 ml) 및 에틸 아세테이트(20 ml)을 부가하였다. 층을 분리하고, 수성층은 CH2Cl2(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 칼럼 크로마토그래피(실리카겔, 70 내지 100 % MeOH-헥산)로 정제하여 순수한 알코올 23 0.068 g을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 42>
0 ℃에서 알코올 23 (0.08 g, 0.114 밀리몰) 용액, N-(tert-부톡시카르보닐)글리신(0.034 g, 0.194 밀리몰) 및 CH2Cl22.0 mL 중의 4-디메틸아미노피리딘(DMAP)(0.004 g, 0.034 밀리몰) 0.068 g을 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(DCC)(0.040 g, 0.194 밀리몰)을 가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 10 분 동안 실온에서 45 분 동안 교반하였다. 남은 잔사를 칼럼 크로마토그래피(실리카겔, 70 내지 80 % MeOH-헥산)로 정제하여 에스테르 0.07 g을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 43>
트리메틸실릴 클로라이드(0.09 ml, 0.75 밀리몰)을 -60 ℃에서 CHCl35.0 mL 중의 b 에폭시드 24(0.16 g, 0.187 밀리몰) 용액에 가하였다. -60 ℃ 내지 -40 ℃에서 2 시간 동안 교반한 후, TMSCl 0.09 ml을 가하고 3 시간 동안 계속 교반하였다. 용액을 실온으로 가온시키고, 농축하고, 역상 예비 HPLC(55:45) CH3CN:H2O에 의해서 정제 분리하여 2 개의 클로로히드린을 생성하였다. 이 정제 결과, 목적하는 클로로히드린 0.058 g(35 %)을 얻었다.
<실시예 44>
1,4-디옥산(0.08 mL, 0.33 밀리몰) 중의 4 M 염화수소 용액을 글리시네이트 25(0.058 g, 0.065 밀리몰)의 용액에 가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 진공에서 농축하고, 진공에서 3 일 동안 유지한 후, 1,4-디옥산을 제거하여 목적하는 염화수소염 26을 정량적인 양으로 얻었다.
<실시예 45>
클로로히드린 25(0.14 g, 0.16 밀리몰), N-(tert-부톡시카르보닐)글리신(0.041 g, 0.24 밀리몰) 및 CH2Cl20.7 mL 중의 4-디메틸아미노피리딘(DMAP)(0.002 g, 0.016 밀리몰)을 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(DCC)(0.049 g, 0.24 밀리몰)을 가하였다. 생성하는 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트를 사용하여 여과하고 진공에서 농축하였다. 생성되는 잔사를 칼럼 크로마토그래피(실리카겔, 50-60-70 % EtOAc/헥산)로 정제하여 디글리시네이트 27 0.158 g(97 %)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 46>
1,4-디옥산(0.1 mL, 0.42 밀리몰) 중의 4 M 염화수소 용액을 디글리시네이트 27(0.044 g, 0.042 밀리몰)의 용액에 가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 진공에서 농축하고, 진공에서 3 일 동안 유지한 후, 1,4-디옥산을 제거하여 목적하는 염화수소염 26을 정량적인 양으로 얻었다.
<실시예 47>
방향제 C'(0.22 g, 1.02 밀리몰)의 유리산, 4-디메틸아미노피리딘(DMAP)(0.032 g, 0.26 밀리몰) 및 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(DCC)(0.21 g, 1.02 밀리몰)을 0 ℃에서 30 분 동안 CH2Cl26.5 mL 중에서 교반하였다. CH2Cl26.0 mL 중의 유리 알코올 29(0.35 g, 0.51 밀리몰)을 적가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 10 분 동안 또한 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 최종적으로 3 시간 동안 가열 환류한 후 실온으로 다시 냉각시켰다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 셀라이트를 통하여 EtOAc를 사용하여 여과하였다. 생성되는 잔사를 칼럼 크로마토그래피(실리카겔, 60-70 % EtOAc/헥산)로 정제하여 상기 에스테르 0.38 g(85 %)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 48>
3-클로로퍼옥시벤조산(0.092 g, 0.54 밀리몰)을 출발 물질인 스티렌 용액에 0 ℃에서 가하였다. 이 용액을 0 ℃에서 1 시간 동안 가열하고 실온에서 밤새 교반하였다. 이를 진공하에서 농축하고 생성되는 에폭시드를 CHCl310 mL 중에 용해시키고 -60 ℃로 냉각시켰다.
신선하게 증류시킨 TMSCl(0.25 ml, 1.95 밀리몰)을 -60 ℃ 용액에 가하고, 이 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. TMSCl(0.5 ml, 3.9 밀리몰)을 더 가하여 -60 내지 -40 ℃에서 2 시간 더 교반하였다. 용액을 실온으로 가온하고 TMSCl(0.25 ml, 1.95 밀리몰)을 더 가하였다. 실온에서 30 분 더 교반한 후, 용액을 농축하고 예비 HPLC에서 정제 분리하여 목적하는 클로로히드린 0.1 g(22 %)을 얻었다.
<실시예 49>
1,4-디옥산(0.11 mL, 0.43 밀리몰) 중의 4 M 염화수소 용액을 CH2Cl20.35 mL 중의 클로로히드린(0.08 g, 0.086 밀리몰) 용액에 가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 진공에서 농축하고, 진공에서 3 일 동안 유지한 후, 1,4-디옥산을 제거하여 목적하는 염화수소염을 정량적인 양으로 얻었다.
<실시예 50>
스티렌 20에 대하여 상기 기재된 방법에 따라서, 알데히드 19(1.0 g, 1.73 밀리몰) 및 3-메틸벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드(0.886 g, 2.2 밀리몰)으로부터 수율 58 %로 스티렌(0.67 g)(상기 도시)을 제조하였다.
<실시예 51>
3-클로로퍼옥시벤조산(0.19 g, 1.1 밀리몰)을 CH2Cl25.0 mL 중의 스티렌(상기 도시)(0.667 g, 1.0 밀리몰)에 가하였다. 생성되는 용액을 밤새 교반하고, 진공하에서 농축하고 β 및 α에폭시드를 1.8:1의 비율로 얻었고, β에폭시드가 많았다. 역상 예비 HPLC(70:30) CH3CN:H2O에 의해서 정제 분리하여 주요 β에폭시드 0.20 g을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 52>
-60 ℃에서 CHCl35.0 mL 중의 β에폭시드(상기 도시)의 용액에 클로로트리메틸실란(0.093 ml, 0.74 밀리몰)을 가하였다. 용액을 -60 ℃에서 30 분 동안 또한 실온에서 1.5 시간 동안 교반하고 진공하에서 농축하였다. 생성되는 잔사는 신 및 안티 클로로히드린을 50:50 혼합물로 함유하며, 이를 역상 예비 HPLC에 의해서 정제하여 목적하는 트랜스 이성질체 0.28 g(27 %)을 얻었다.
<실시예 53>
스티렌 20에 대하여 상기 기재된 방법에 따라서, 알데히드 18(0.2 g, 0.345 밀리몰) 및 3,4-디메틸벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드(0.26 g, 0.62 밀리몰)으로부터 수율 63 %로 스티렌(0.095 g)(상기 도시)을 제조하였다.
<실시예 54>
상기 기재된 방법에 따라서, 3-클로로퍼옥시벤조산(0.081 g, 0.47 밀리몰)을 사용하여 스티렌(0.3 g, 0.44 밀리몰)로부터 β에폭시드 (0.06 g)을 제조하였다.
<실시예 55>
0 ℃에서 CH2Cl22.4 mL 중의 스티렌(상기 도시)(0.492 g, 0.72 밀리몰) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산(0.137 g, 0.79 밀리몰) 및 톨루엔(1.2 ml)을 가하고, 0 ℃에서 30 분 동안 계속 교반하였다. 빙욕을 제거하고, 반응물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. CH2Cl210 mL로 희석한 후, 용액을 10 % Na2SO4(1 X 10 ml), 물(1 X 10 ml) 및 10 % NaHCO3(1 X 10 ml)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조하였다. 농축하여 b/a 조질의 에폭시드를 2:1의 비율로 얻었다.
조질의 에폭시드(0.445 g, 0.638 밀리몰)을 건조 CHCl310 mL에 용해시킨 후, -60 ℃로 냉각시키고, 트리메틸실릴 클로라이드(0.2 ml, 1.5 밀리몰)로 처리하였다. 90 분 동안 교반하고, 용액을 진공에서 농축하였다. 조질의 클로로히드린을 역상 예비 HPLC(CH3CN:H2O)에 의해서 정제하여 생성물(상기 도시) (0.115 g)을 로부터 β에폭시드 (0.06 g)을 제조하였다.
<실시예 56>
스티렌 20에 대하여 상기 기재된 방법에 따라서, 알데히드 18(0.5 g, 0.87 밀리몰) 및 4-메톡시벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드(0.47 g, 1.12 밀리몰)으로부터 수율 36 %로 스티렌(0.21 g)(상기 도시)을 제조하였다.
<실시예 57>
스티렌(상기 도시)(0.3 g, 0.44 밀리몰)에 아세톤 19 mL, 물 9 mL, CH2Cl29 mL 및 NaHCO39 mL을 가하였다. 물 9 mL 중의 옥손(1.08 g, 1.8 밀리몰) 용액을 제조하고, 냉각 스티렌 혼합물에 2 mL를 가하였다. 30 분 동안 격렬하게 교반한 후, 총 6 mL의 옥손 용액에 대하여, 2 mL 더 가하고, 다시 2 mL 더 가한 후 30 분 동안 더 교반하였다. 역상 예비 HPLC에 의해서 반응의 진행을 모니터하고, 2.5 시간 동안 교반한 후 종결된 것을 알았다. 0 ℃에서 유지하면서, 반응을 포화 수성 NaHCO3(50 ml)로 켄칭시키고, CH2Cl250 mL을 추가로 가하였다. 층을 분리하고, 유기층을 10 % Na2SO3(50 mL)로 세척하고, 포화 수성 NaHCO3및 염수로 세척하고,진공에서 농축하였다. b 및 a 에폭시드 혼합물을 역상 예비 HPLC(45:55) CH3CN:H2O0.20 g을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 58>
스티렌 20에 대하여 상기 기재된 방법에 따라서, 알데히드 18(0.911 g, 1.57 밀리몰) 및 4-(tert-부틸디메틸실옥시)벤질 트리페닐포스포늄 클로라이드(1.7 g, 3.27밀리몰)으로부터 수율 53 %로 스티렌(0.649 g)(상기 도시)을 제조하였다.
<실시예 59>
THF 4 mL 중의 -70 ℃의 실릴 보호된 페놀(0.084 g, 0.107 밀리몰)을 테트라부틸암모늄 플루오리드(TBAF)(0.11 ml, 0.11 밀리몰)의 1.0 M THF 용액을 가하였다. 밝은 황색 용액을 -70 ℃에서 30 분 동안 교반한 후, 포화 Na4Cl 2 ml로 켄칭시키고, CH2Cl2(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 10 % MgSO4상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 라디칼 PLC(실리카겔 50 내지 100 % EtOAc/헥산)에 의한 조생성물을 정제하여 바람직한 알코올(0.67 g)(93%)을 백색 g(27 %)을 얻었다.
<실시예 60>
톨루엔 2 ml 중의 방향제 C'(0.040 g, 0.184 밀리몰) 및 카르보디이미다졸(CDI)(0.040 g, 0.25 밀리몰)의 용액을 질소하에서 45분 동안 45℃에서 가열하였다. 톨루엔 1 ml 중의 알코올(상기 도시)(0.10 g, 0.15 밀리몰) 을 가한 후, 반응물을 다시 4 시간 동안 45℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 에탄올 100 ml로 희석하고, 1N 염산(1 x 10 ml) 및 물(1 x 10 ml), 포화 NaHCO3(1 x 10 ml) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키정제하여 상기 에스테르 0.38 g(85 %)을 백색 고체로서 얻었다. 이를 라디칼 PLC(실리카겔 50 % EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 순수한 에스테르(0.097 g)(75%)을 황색 고체로서 얻었다.
<실시예 61>
스티렌(상기 도시)(0.276 g, 0.32 밀리몰)에 아세톤 12 mL, 물 6 mL, CH2Cl26 mL 및 고체 NaHCO3(0.84 g, 10 밀리몰)을 가하고, 이 혼합물을 0 ℃로 냉각하였다. 물 6 mL 중의 옥손(0.78 g, 1.27 밀리몰) 용액을 제조하고, 냉각 스티렌 혼합물에 2 mL를 가하였다. 30 분 동안 격렬하게 교반한 후, 총 6 mL의 옥손 용액에 대하여, 2 mL의 옥손 용액을 가하고, 다시 2 mL 더 가한 후 30 분 동안 더 교반하였다. 역상 예비 HPLC에 의해서 반응의 진행을 모니터하고, 2.5 시간 동안 교반한 후 종결된 것을 알았다. 0 ℃에서 유지하면서, 반응을 포화 수성 NaHCO3(50 ml)로 켄칭시키고, CH2Cl250 mL을 추가로 가하였다. 층을 분리하고, 유기층을 10 % Na2SO3(50 mL)로 세척하고, 포화 수성 NaHCO3및 염수로 세척하고, 진공에서 농축하여 조질의 에폭시드 0.272 g를 황색 발포체로서 얻었다.
트리메틸실릴 클로라이드(0.2 ml, 1.54 밀리몰)을 -60 ℃에서 CH2Cl24 mL 중의 에폭시드 용액에 가하였다. -60 ℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 0.5 N 염산을 가하여 트리메틸실릴 에테르를 가수분해시키고, 이 혼합물을 실온으로 가온하였다. 층을 분리하고, 유기층을 MgSO4상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 조질의 클로로히드린을 라디칼 PLC(실리카겔 50-60-70-100 % EtOAc/헥산)에 의해 2 회 정제하고, 마직막으로, 역상 예비 HPLC CH3CN:H2O에 의해서 목적물(상기 도시)(0.090 g, 31 %)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 62>
CH2Cl20.25 mL 중의 BOC 보호된 아민(상기 도시)(0.070 g, 0.067 밀리몰)에 1,4-디옥산 중의 4 M HCl 용액(0.1 mL, 0.4 밀리몰)을 가하였다. 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 용매를 진공하에서 제거하고, 생성되는 잔사를 높은 진공하에서 2일 동안 유지하여 생성물(0.062 g, 95 %)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 63>
THF 중의 1.0 M 용액으로서 테트라부틸암모늄 플루오리드(TBAF)(4.0 ml, 4.1 밀리몰)을 -78 ℃에서 보호된 알코올(3.1 g, 3.69 밀리몰)에 적가하였다. 용액을 -78 ℃에서 10 분 동안 교반한 후, 빙욕을 제거하고, 실온으로 가온시켰다. 실온에서 30 분 교반한 후, 반응물을 물(80 ml) 및 에틸 아세테이트(100 ml)로 켄g(27 %)을 얻었다. 층을 분리하고, 수성층은 CH2Cl2(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하여 유리 알코올을 얻었다. 칼럼 크로마토그래피(실리카겔, 50-70-100 % 에탄올-헥산)로 정고체로서 얻었다.
<실시예 64>
THF 2.0 ml 중의 알코올(0.13 g, 0.19 밀리몰) 용액에 트리페닐 포스핀(0.065 g, 0.25 밀리몰)을 가하고, 마지막으로 디에틸 아조디카르복실레이트(DEAD)(0.04 ml, 0.25 밀리몰)을 가하였다. 생성되는 황색 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 물(10 ml) 및 CH2Cl2(10 ml)로 켄칭하였다. 수성층을 CH2Cl2(2 x 10 mL)으로 추출하고 합한 유기층을 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 생성되는 잔사를 라디칼 PLC(실리카겔 50 -60-70 % EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 프탈이미드 30(0.14 g)(90%)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 65>
에탄올 1.8 ml 중의 프탈이미드 30(0.1 g, 0.123 밀리몰)에 n-부틸아민(0.04 ml, 0.369 밀리몰)을 가하였다. 이 용액을 75 ℃에서 2 일 동안 가열하고, 진공에서 농축한 후, 라디칼 PLC(실리카겔 10 내지 25 % 에탄올/CH2Cl2)에 의해 정제하여 유리 아민 31(0.048 g)(57 %)을 얻었다.
<실시예 66>
DMF 1.5 ml 중의 N-(tert-부톡시카르보닐)살로신(0.07 g, 0.37 밀리몰)을 1-히드록시벤조트리아졸 수화물(HOBT)(0.05 g, 0.37 밀리몰) 및 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드(EDCI)(0.071 g, 0.37 밀리몰)에 가하였다. 실온에서 45 분 동안 교반한 후, DMF 2.5 ml 중의 아민 31(0.17 g, 0.25 밀리몰)을 이중 팁 바늘을 통하여 적가하였다. 생성되는 혼합물을 3 시간 더 교반하고 물(10 mL)로 켄칭하고, CH2Cl2(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 이를 라디칼 PLC(실리카겔 70-80-100 % EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 목적하는 아미드 32(0.15 g)(71%)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 67>
상기 방법에 따라서 CH2Cl21.2 mL 중의 mCPBA(0.072 g, 0.42 밀리몰)을 사용하여 아미드 32(0.34 g, 0.398 밀리몰)를 에폭시화하였다. 생성되는 조질의 에폭시(0.3 g, 0.345 밀리몰)를 CHCl 중에 용해시키고, -60 ℃로 냉각시켰다. TMSCl(0.22 ml, 1.73 밀리몰)을 더 가하고, 이 용액을 -50 내지 -20 ℃에서 2 시간 더 교반하였다. TMSCl(0.44 ml, 0.173 밀리몰)을 더 가하고 용액을 실온으로 가온하였다. 용액을 진공에서 농축하고 생성되는 생성물을 칼럼 크로마토그래피(실리카겔 70-80 % 메탄올/헥산) 및 라디칼 PLC(실리카겔 2-5 % 메탄올/CH2Cl2)에 의해 정제하여 트랜스 클로로히드린 34(0.1 g)(48%)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 68>
상기 기재된 방법에 따라서, 1,4-디옥산 중의 4 M HCl 용액을 사용하여 BOC 보호된 아민 34(0.045 g, 0.05 밀리몰)의 염화수소염 35(0.041 g)을 정량적인 양으로 제조하였다.
<실시예 69>
THF 10 ml 중의 수소화나트륨(60 % 현탁액) (0.041 g, 1.0 밀리몰) 및 4-카르보메톡시벤질 트리페닐포스포늄 브로마이드(0.5 g, 1.0 밀리몰)을 65 ℃에서 1 시간 동안 가열하고, 실온으로 다시 냉각시켰다. 이 오렌지색 혼합물을 THF (10 ml) 중의 알데히드 18(0.46 g, 0.79 밀리몰)에 가하였다. 생성되는 용액을 실온으로 가온하고 2 시간 동안 더 교반하고, 포화 Na4Cl (30 ml) 및 에탄올 (30 ml)로 켄칭시켰다. 층을 분리하고, 수성 물질은 에탄올(2 x 20 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(30 ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질의 스티렌을 칼럼 크로마토그래피(실리카겔 50-65 % EtOAc/헥산)로 정제하여 맑은 스티렌 0.129 g(23% 수율)을 얻었다.
<실시예 70>
0 ℃에서 CH2Cl28.5 mL 중의 알코올 23(0.32 g, 0.46 밀리몰)의 용액에 트리페닐 포스핀(0.18 g, 0.69 밀리몰)을 가하고, 마지막으로 N-클로로술신이미드(0.092 g, 0.69 밀리몰)을 가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 20 분간 교반하고, 포화 수성 NaHCO3(20 ml)로 켄칭시켰다. 층을 분리하고, 수성층을 CH2Cl2(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질의 황색 고체를 라디칼 PLC(실리카겔 20-50 % EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 벤질 클로라이드 36(0.26 g)(79%)을 백색 고체로서 얻었다.
<실시예 72>
디에틸 아민(0.09 ml, 0.84 밀리몰)을 THF 0.3 ml 중의 벤질 클로라이드 36(0.03 g, 0.42 밀리몰)에 가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 포화 수성 NaHCO3(5 ml)로 켄칭시켰다. 수성층을 CH2Cl2(3 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질의 황색 고체를 라디칼 PLC(실리카겔 50-70-80 % EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 아민 37 (0.026 g)(82 % 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
실시예 73
CHCl30.8 mL중 에폭시드 37(0.05 g, 0.066 밀리몰)의 -66 ℃ 용액에 1,4-디옥산(0.04 mL, 0.166 밀리몰) 중 HCl 0.4 M 용액을 적가하였다. 혼합물을 - 66 ℃에서 10 분 동안 교반시키고 드라이 아이스조를 제거하여 용액을 실온까지 서서히 가온시켰다. 용매를 진공 중에서 제거된 생성 염을 고 진공에서 3일동안 생성 디옥산을 제거하여 목적하는 크립토피신 38만을 정량적 수율로 수득하였다.
실시예 74
에폭시드(상기 화학식)를 상기 방법에 따라 벤질 클로라이드 36(0.195 g, 1.05 밀리몰) 및 N-(t-부톡시카르보닐)피페라진(0.195 5, 1.05 )으로부터 81% 수율로 제조하였다.
실시예 75
CHCl33.0 mL중 에폭시드(상기 화학식) (0.135 g, 0.156 밀리몰)의 -66 ℃ 용액에 트리메틸실릴 클로라이드(0.16 mL, 1.2 밀리몰)을 적가하였다. 혼합물을 -66 ℃에서 2 시간 동안 교반시키고 추가의 TMSCl(0.16 mL, 1.2 mL)을 첨가하였다. 1 시간 후, -66 ℃에서 빙조를 제거하여 용액을 실온까지 서서히 가온시켰다. 용매를 진공 중에서 제거하고 생성 고체를 방사상 PLC(실리카 겔, 2-5% MeOH/CH2Cl2)을 정제하여 클로로히드린(상기 도시) 0.13 g을 92% 수율로 수득하였다.
실시예 76
BOC로 보호된 피페라진의 디히드로클로라이드염(0.116 g)을 상기 방법에 따라 1,4-디옥산 중 4 M HCl(0.32 mL, 1.3 밀리몰)을 사용하여 장량적 수율로 제조하였다.
실시예 77
에폭시드(상기 화학식)를 상기 방법에 따라 벤질 클로라이드 36(0.16 g, 0.22 밀리몰) 및 t-부틸-N-(2-아미노에틸)카르바메이트(0.35 g, 2.22 밀리몰)로부터 78% 수율로 제조하였다.
실시예 78
CH2Cl23.0 mL중 에폭시드(상기 화학식) (0.065 g, 0.076 밀리몰)의 -78 ℃ 용액에 CH2Cl20.9 mL을 1.4-디옥산(0.09 mL, 0-.38 밀리몰) 중 4 M HCl을 적가하였다. 용액을 -78 ℃에서 30 분 동안 교반시킨 후 이어서 실온까지 서서히 가온시켰다. 실온에서 2 시가 더 교반시키고 진공 중에서 농축시켜 클로로히드린(상기 도시) (0.063 g)을 수득하였다.
실시예 79
E:Z의 혼합물로서 스티렌(상기)(1.2 g)을 스티렌 20에 대한 상기 방법에 따라 알데히드 18(1.0 g, 1.73 밀리몰) 및 4-(에틸-2-t-부틸디메틸실릴옥시)벤질 트리페닐포스포늄 브로마이드(1.23 g, 2.08 밀리몰)로부터 86% 수율로 제조하였다. 이성질체의 혼합물을 톨루엔(50 mL)에 용해시키고 1,1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴)(VAZO)(0.040 g, 0.16 밀리몰) 및 티오페놀(0.060 mL, 0.59 밀리몰) 존재하에서 3 시간 동안 가열 환류시켰다. 농축시킨 후 잔류물을 방사성 PLC(20-75% EtOAc/헥산)로 정제하여 E 이성질체(0.813 g, 68%)를 백색 발포체로 수득하였다.
실시예 80
피리딘 후 데스-마틴(Dess-Martin) 시약(0.161 g, 0.379 밀리몰)을 CH2Cl24.5 mL 중 스티렌(상기)(0.135 g, 0.189 밀리몰)의 유리 알콜에 첨가하였다. 혼합물을 ㅐ ℃에서 30 분 동안, 실온에서 20 분 동안 교반시킨 후, EtOAc를 사용하여 셀라이트로 여과시키고, 마지막으로 진공 중에서 농축시켰다. 조 생성물을 방사상 PLC(실리카 겔, 80-100% EtOAc/CH2Cl2)로 급속 정제하여 목적하는 알데히드(0.08 g)을 백색 고체로 59% 수율로 수득하였다.
실시예 81
테트라히드로푸란(3.2 mL) 및 H2O(1.2 mL)을 알데히드(상기)(0.08 g, 0.112 밀리몰)에 첨가하고 혼합물을 0 ℃까지 냉각시켰다. 2-메틸-2-부텐(3.2 mL) 후 NaClO2(0.081 g, 0.896 밀리몰) 및 NaHPO4H2O(0.139 g, 1.0 밀리몰)을 또한 연속으로 첨가하였다. 혼합물을 실온까지 가온시키고 5 시간 동안 세게 교반시켰다. 용액을 CH2Cl25 mL로 희석하고 층을 분라히였다. 수성층을 CH2Cl2(3 X 10 mL)로 추출하고 합해진 유기층을 Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켰다. 조생성물을 방사상 PLC(실리카 겔, 5-10-25% MeOHc/CH2Cl2)로 2회 정제하여 카르복실산(상기) 0.03 g을 37% 수율로 수득하였다.
실시예 82
THF 10 mL 중 [(2-메틸-4-티아졸릴)메틸]트리페닐포스포늄 클로라이드(0.496 g, 1.2 밀리몰)의 혼합물을 -78 ℃에서 n-부틸리튬(0.8 mL, 1.2 밀리몰)의 1.6 M 용액에 적가하였다. 혼합물을 실온까지 서서히 가온시키고 45 분 동안 더 교반시켰다. THF 15 mL 중 알데히드 18(0.5 g, 0.965 밀리몰)을 -78 ℃에서 오렌지색 일리드 용액에 끝이 2 개 달린 바늘로 적가하였다. 생성 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간 동안 실온에서 1.5 시간 동안 교반시켰다. 포화 NH4Cl(30 mL)을 에틸 아세테이트(30 mL)과 함께 첨가하고 층을 분리하고 수성층을 물(2 x 20 mL), 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켰다. 생성 황색 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔 50-70-8-% EtOAc/헥산)로 정제하여 트리페닐포스핀 옥시드와 함께 목적하는 스티렌 0.4 g을 생성시켰다. 트리페닐포스핀 옥시드를 CH3CN:H2O(50:50)을 사용하여 역상 HPLC로 쉽게 정제하여 순수한 티아졸(상기) 0.2 g(34%)를 수득하였다.
실시예 83
스티렌(상기)(0.25 g, 0.37 밀리몰)에 아세톤 15 mL, H2O 6 mL 및 고체 NaHCO3(1.0 g, 11.9 밀리몰)을 첨가하고 혼합물을 0 ℃까지 냉각시켰다. H2O 8 mL 중 옥손(0.92 g, 1.5 밀리몰)의 용액을 제조하고 차가운 스티렌 혼합물(2 mL)에 첨가하였다. 30 분 동안 0 ℃에서 세게 교반시킨 후, 추가의 옥손 용액 2 mL을 첨가하고 다시 추가의 옥손 용액 2 mL을 첨가하여 옥손 용액 총 6 mL을 첨가 한 후 30 분 동안 더 교반시켰다. 반응 과정을 역상 HPLC로 모니터하였을 때, 2 시간 동안 교반시킨 후 완전해 졌음이 밝혀졌다. 0 ℃에 방치시킨 후, 유기층을 포화 수성 NaHCO3(40 mL) 및 CH2Cl240 mL로 켄칭시켰다. 층을 분리하고 유기층을 수성 10% Na2SO4에 이어 포화 수성 NaHCO3(40 mL)에 이어 염수로 세척하고, 마지막으로 Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켰다. b 및 a 에폭시드의 혼합물(50:50)을 역상 HPLC(50:50 CH3CN:H2O)로 정제하여 b 에폭시드(상기) 0.09 g을 백색 고체로 35% 수율로 수득하였다.
실시예 84
스티렌(상기)을 스티렌 20에 대해 상기된 방법으로 알데히드 18(1.3 g, 2.2 밀리몰) 및 2-플루오로벤질트리페닐포스포늄 브로마이드(1.7 g, 3.8 밀리몰)을 33% 수율로 로 제조하였다.
실시예 85
0 ℃에서 CH2Cl21.3 mL 중 스티렌(상기)(0.26 g, 0.387 밀리몰)의 용액에 3-클로로퍼록시벤조산(0.07 g, 0.41 밀리몰) 및 톨루엔(0.65 mL)을 첨가하고, 0 ℃에서 30 분 동안 계속 교반시켰다. 빙조를 제거하고 반응물을 실온에서 24 시간 동안 계속 교반시켰다. 농축시킨 후, 잔류물을 역상 HPLC(CH3CN/H2O)로 정제하여 b-에폭시드(상기)(0.058 g, 24% 회수)를 백색 발포체로 수득하였다.
실시예 86
E:Z의 혼합물로서 스티렌(상기)(0.85 g)을 스트렌 20에 대해 상기된 방법 따라 알데히드 18(2.0 g, 3.45 밀리몰) 및 3-플루오로벤질 트리페닐포스포늄 브로마이드(1.92 g, 4.25 밀리몰)로부터 37% 수율로 제조하였다. 이성질체의 혼합물을 벤젠(25 mL)에 용해시키고 1,1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴)(VAZO)(0.04 g, 0.16 밀리몰) 및 티오페놀(0.06 mL, 0.59 밀리몰) 존재하에서 20 시간 동안 가열 환류시켰다. 농축시킨 후 잔류물을 방사성 PLC(20-100% EtOAc/헥산)로 정제하여 E 이성질체(0.652 g, 77%)를 백색 발포체로 수득하였다.
실시예 87
0 ℃에서 CH2Cl23.0 mL 중 스티렌(상기)(0.622 g, 0.927 밀리몰)의 용액에 3-클로로퍼록시벤조산(0.170 g, 0.985 밀리몰) 및 톨루엔(1.5 mL)을 첨가하고, 0 ℃에서 30 분 동안 계속 교반시켰다. 빙조를 제거하고 반응물을 실온에서 22 시간 동안 계속 교반시켰다. 농축시킨 후, 잔류물을 역상 HPLC(CH3CN/H2O)로 정제하여 b-에폭시드(상기)(0.067 g, 11%)를 황색 발포체로 수득하였다.
실시예 88
E:Z의 혼합물로서 스티렌(상기)(1.24 g)을 스트렌 20에 대해 상기된 방법 따라 알데히드 18(1.5 g, 2.6 밀리몰) 및 4-플루오로벤질 트리페닐포스포늄 브로마이드(1.4 g, 3.1 밀리몰)로부터 71% 수율로 제조하였다. 이성질체의 혼합물을 벤젠(40 mL)에 용해시키고 1,1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴)(VAZO)(0.050 g, 0.20 밀리몰) 및 티오페놀(0.076 mL, 0.74 밀리몰) 존재하에서 24 시간 동안 가열 환류시켰다. 농축시킨 후 잔류물을 방사성 PLC(20-100% EtOAc/헥산)로 정제하여 트리페닐포스핀 옥시드를 함유하는 역상 HPLC(60:40) CH3CN/H2O)로 정제하여 순수한 고체 0.092 g을 수득하였다.
실시예 89
0 ℃에서 CH2Cl24.5 mL 중 스티렌(상기)(0.906 g, 1.35 밀리몰)의 용액에 3-클로로퍼록시벤조산(0.25 g, 1.45 밀리몰) 및 톨루엔(2.2 mL)을 첨가하고, 0 ℃에서 30 분 동안 계속 교반시켰다. 빙조를 제거하고 반응물을 실온에서 23 시간 동안 계속 교반시켰다. 농축시킨 후, 잔류물을 역상 HPLC(CH3CN/H2O)로 정제하여 b-에폭시드(상기)(0.067 g, 11%)를 황색 발포체로 수득하였다. CH2Cl220 mL로 희석한 후, 반응 혼합물을 Na2S2O2(1 x 10 mL), 물(1 x 10 mL), 포화된 NaHCO3((1 x 10 mL) 및 염수(1 x 10 mL)로 세척하고, 마지막으로 마지막으로 Na2SO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켜 b/a 에폭시드의 혼합물로서 생성물 0.81`4 g을 수득하였다. 일부의 0.23 g을 역상 HPLC(CH3CN/H2O)로 정제하여 b-에폭시드(상기) 0.073 g을 백색 발포체로 수득하였다.
실시예 90
1,4-디옥산(0.4 mL, 1.6 밀리몰) 중 HCl의 4 M 용액을 실온에서 CH2Cl230 mL 중 b-에폭시드의 -70 ℃ 용액에 5 분 동안 적가하였다. 2 시간 동안 더 -70 ℃에서 교반시킨 후, 용액을 진공 중에서 농축하였다. 조생성물을 방사상 PLC(실리카 겔, 30-50-100% EtOAc/CH2Cl2) 후 역상 HPLC(50:50) CH3CN/H2O로 정제하여 목적하는 클로로히드린(상기)를 백색 발포체로 0.152 g을 수득하였다.
실시예 91
크립토피신-151, -152, -253, -254, 155, -156, 159, 160, -161, -166, -167, -172, -181, -188, 234, 236, 238, 247, 251 및 255
<표 1>
<표 2>
크립토피신-108과 다양한 트리페닐포스포란의 커플링에 대한 통상적인 실험을 예시적인 실시예로 크립토피신-152의 제조예를 사용하여 설명하였다.
크립토피신-152
신나밀트리페닐포스포란을 THF(5.7 mL) 중 신나밀 트리포스포늄 클로라이드(0.311 ㎎, 0.750 밀리몰)을 부틸리튬(헥산 중 2.5 N 용액 300 μL, 0.750 밀리몰)으로 -78 ℃에서 처리하고 내용물을 실온까지 가온시켰다. 이 반응 혼합물로부터의 신나밀트리페닐포스포란(1.46 mL, 0.182 밀리몰)을 THF(3 mL) 중 알데히드(68.6 mL, 0.122 밀리몰)에 -78 ℃에서 서서히 첨가하고 2 시간 동안 계속 교반시켰다. 반응 혼합물을 주위 온도로 상승시켰다. 포화 NH4Cl(5 mL)에 이어 물(15 mL)로 처리한 후 에틸 아세테이트(40 mL)로 처리하였다. 유기층을 물로 세척하고 MgSO4상에서 건조시키고, 여과시키고 진공 중에서 농축시켰다. 잔류물을 작은 ODS 컬럼에 가ㅏ하고 1:1 H2O/CH3CN 및 1:3 H2O/CH3CN로 용출시켰다. 후기 분획을 증발시켜 크립토피신-152 및 그의 Z 이성질체의 혼합물(E/Z 7:3, 64.3 ㎎, 80%)을 수득하였다.
동일한 실험 절차를 사용하여 알데히드(크립토피신-108)을 1-나프틸메틸 트리페닐포스포란, 3-메톡시벤질 트리페닐포스포란, 3,5-디메톡시벤질 트리페닐포스포란, 메톡시메틸 트리페닐포스포란, 2,4-디메톡시메틸 트리페닐포스포란, 3-플루란메틸 트리페닐포스포란, p-트리플루오메틸벤질 트리페닐포스포란, 2-메틸벤질 트리페닐포스포란, 3,5-디메틸벤질 트리페닐포스포란, 2-나프틸메틸 트리페닐포스포란, 2-플루오로벤질 트리페닐포스포란, 3,5-디플루오로벤질 트리페닐포스포란, 4-히드록시메틸벤질 트리페닐포스포란, 4-(t-Boc-아미노메틸)벤질 트리페닐포스포란, 트리페닐포스포란, 3-(N-t-Boc-아미노)벤질 트리페닐포스포란 및 페닐티오메틸트리페닐포스포늄과 반응시켜 크립토피신-151, -153, -154, -159, -160, -161, -166, -167, -172, -181, -188, -234, -236, -247 255을 각각 수득하였다.
트리페닐포스포늄을 메톡시메틸트리페닐포스포란,3-푸란메틸 트리페닐포스포란 및 4-히드록시메틸벤질 트리페닐포스포란을 사용하였다는 것을 제외하고는 부틸리튬을 상응하는 트리페닐포스포늄 클로라이드 또는 브로마이드염으로부터 일리드를 생성시키는데 염으로 사용하였다.
히드록시메틸트리페닐포스포늄브로마이드, n-부틸리튬 및 크립토피신-108이 관여되는 유사 반응으로 예상치 못한 유사체 크립토피신-155를 생성시켯다.
카르복시 메틸 유사체 크립토피신-251을 제조하는데 약간 변형된 절차를 이용하였다. 4-(카르복시메틸)벤질트리페닐포스포늄 로하이드의 THF(5 mL)용액을 페닐리튬(1.8 M, 653 μL; 1.18 밀리몰)로 -78 ℃에서 5 분 동안 처리하고, 빙수조의 플라스크로 옮기고 내용물을 2 시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 1N HCl(1 mL)로 산성화시키고, 물(30 mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(30 mLx 2)로 추출하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 1:1 H2O/CH3CN 및 35:65 H2O/CH3CN으로 용출시키는 ODS 상 실리카상 플래쉬 크로마토그래피시켰다. 후기 분획을 다음 실험을 이용하여 역상 HPLC 컬럼(에코노실 C18, 10 μ, 250 x 10 mm, 3 mL/분, 2:3 H2O/CH3CN의 아세트산 0.5% 용액)으로 크로마토그래피 하여 크립다.
4-(t-부틸디메틸실릴옥시메틸)벤질브로마이드
디클로로메탄(15 mL) 중 4-히드록시메틸-벤조산 메틸에스테르92 ㎎) 및 트리에틸아민을 -78 ℃에서 t-부틸디메틸실릴트리플레이트(4.47 gm)로 처리하였다. 30 분 후, 내용물을 실온 이하로 가온시키고, 30 분 동안 더 계속 교반시켯다. 물(30 mL) 및 에틸 아세테이트(60 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고 유기층을 0.3 M KHSO4, 물 및 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시키고 여과시켰다. 용매를 증발시키고 잔류물을 10% EtOAc/헥산으로 용출시키는 실리카 상 플래쉬 크로마토그래피시켜 4-(t-부틸디메틸실릴옥시메틸)벤조산 메틸 에스테르(3.3 gm, 95% 수율)를 수득하였다.
디에틸에테르(20 mL) 중에 분산된 리티움알루미늄히드리드(0.21 gm)을 아르곤 하에서 -78 ℃까지 냉각시키고, 디에틸 에테르 10 mL 중 4-(t-부틸디메틸실릴옥시메틸)벤조산 메틸 에스테르를 적가하면서 처리하였다. 30 분 후, 에틸 아세테이트(20 mL)를 과량의 수소화물을 켄칭시키는데 첨가하고 이어서 포화된 염화암모늄(1.5 mL)을 첨가하였다. 침전물을 여과 분리하고 에테르로 세척하였다. 용매를 증발시켜 4-(t-부틸디메틸실릴옥시메틸)벤질알콜(1.71 gm, 93% 수율)을 수득하였다.
4-(t-부틸디메틸실릴옥시메틸)벤질알콜(1.7 gm)을 THF(15 mL)에 용해시키고, -78 에서 인산성 트리브로마이드(0.609 gm)으로 처리하였다. 30 분 후, 반응물을 디에틸에테르(780 mL)로 처리하고 포화된 중탄산나트륨(30 mL), 물 및 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 에테르층을 증발시키고 잔류물(2.0 gm)을 용리제로서 EtOAc/헥산으로 용출시키는 실리카 상 플래쉬 크로마토그래피시켜 4-(t-부틸디메틸실릴옥시메틸)벤질브로마이드91.05 gm, 49% 수율)를 수득하였다.
이성질체화
크립토피신-152 및 그의 시스-이성질체(E/Z 7:3, 62 ㎎ 0.10 밀리몰)의 혼합물을 벤젠(13 mL)에 용해시키고 티오페놀(10 μL, 0.10 밀리몰) 및 1,1'-아조비스(시클로헥산카르보니트릴(12 ㎎, 0.05 밀리몰)로 환류시켰다. 16 시간 후, 혼합물을 주위 온도까지 상승시키고 작은 실리카 컬럼에 가하였다. 컬럼을 클로로메탄으로 세척하고 화합물을 1:1 에틸아세테이트/디클로로메탄으로 용출시켰다. 용매를 증발시켜 크립토피신-151(53 ㎎, 85%)를 수득하였다(여전히 그의 시스 이성질체 약 5%와 섞임).
크립토피신-151: EIMS m/z (상대적 세기) 688/690 (3.3/1.5), 412/414 (18/6), 277 (100), 233 (18), 195/197 (16/6), 193(29), 141 (38); 고분해 EIMS m/z 688.2900 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-152: EIMS m/z (상대적 세기) 664/666 (24/7), 412/414 (21/7), 253 (100), 91 (85); 고분해 EIMS m/z 664.2939 (C37H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-153: EIMS m/z (상대적 세기) 668/670 (3.7/1.4), 412/414 (32/12), 257 (62), 198 (100), 195/197 (36/11); 고분해 EIMS m/z 668.22817 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-154: EIMS m/z (상대적 세기) 698/700 (2.5/0.8), 412/414 (18/5), 287 (28), 228 (35), 195/197 (18/6), 139 (100); 고분해 EIMS m/z 698.2946 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-155: EIMS m/z (상대적 세기) 604/606 (20/6), 412/414 (24/8), 280/282 (24/8), 195/197 (100/33); 고분해 EIMS m/z 604.2894 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치),1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76 (2, d; 15.5), 6.66 (3, ddd; 15.5, 9.5 및 5.9), 2.32 - 2.44 (4-H2, m), 4.92 (5, m), 2.66 - 2.76 (6, m), 0.98 (6-Me, d; 6.8), 5.21 (7, t; 10.9), 5.46 (8, dt;l 10.9 및 7.4), 2.00 (9-H2, m), 1.38 (10-H2, m), 0.91 (10-Me, t; 7.5); B 4.81 (2, m), 5.70 (2-NH, d; 8.5), 3.04 (3, dd; -14.5 및 7.2), 3.14 (3, dd; -14.5 및 5.6), 7.22 (5, d; 2.2), 3.87 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.2); C 2.66 - 2.76 (2, m), 1.22 (2-Me, d; 7.4), 3.27 (3, dt; 13.5 및 6.8), 3.52 (3, m), 6.93 (3-NH, br t; 6.4); D 4.86 (2, dd; 9.8 및 3.5), 1.49 (3, m), 1.71 - 1.80 (3/4, m), 0.90 (4-mE, d; 6.0), 0.94 (5, d; 6.5);13C NMR (CDCl3) 단위 (탄소 위치) A 165.5 (1), 125.0 (2), 141.6 (3), 36.5 (4), 77.9 (5), 36.2 (6), 17.7 (6-Me), 130.0 (7), 131.6 (8), 29.6 (9-H2), 22.8 (10-H2), 13.8 (11-H3); B 171.0a(1), 53.5 (2), 35.1 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OCH3), 112.2 (8), 128.4 (9); C 175.6 (1), 38.3 (2), 14.0 (2-Me), 41.2 (3); D 170.9a(1), 71.6 (2), 39.5 (3), 24.7 (4), 21.4 (4-Me), 23.1 (5).a및b시그널은 상호 변형 가능.
크립토피신-156: EIMS m/z (상대적 세기) 412/414 (23/6), 381 (11), 280/282 (22/6), 195/197 (100/33); high (9.0/3.3), 4.12/414 (84/34), 245 (71), 195/197 (47/7); 고분해 EIMS m/z 592.2568 (C39H41ClN2O8에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-160: EIMS m/z (상대적 세기) 688/690 (3.3/1.5), 412/414 (18/6), 277 (100), 233 (18), 195/197 (16/6), 193(29), 141 (38); 고분해 EIMS m/z 688.2900 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-161: EIMS m/z (상대적 세기) 664/666 (24/7), 412/414 (21/7), 253 (100), 91 (85); 고분해 EIMS m/z 664.2939 (C37H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-166 EIMS m/z (상대적 세기) 668/670 (3.7/1.4), 412/414 (32/12), 257 (62), 198 (100), 195/197 (36/11); 고분해 EIMS m/z 668.22817 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-167: EIMS m/z (상대적 세기) 698/700 (2.5/0.8), 412/414 (18/5), 287 (28), 228 (35), 195/197 (18/6), 139 (100); 고분해 EIMS m/z 698.2946 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-172: EIMS m/z (상대적 세기) 664/666 (24/7), 412/414 (21/7), 253 (100), 91 (85); 고분해 EIMS m/z 664.2939 (C37H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-181 EIMS m/z (상대적 세기) 668/670 (3.7/1.4), 412/414 (32/12), 257 (62), 198 (100), 195/197 (36/11); 고분해 EIMS m/z 668.22817 (C39H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-182: EIMS m/z (상대적 세기) 664/666 (24/7), 412/414 (21/7), 253 (100), 91 (85); 고분해 EIMS m/z 664.2939 (C37H45ClN2O7에 대한 계산치), Δ 1.5 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크토피신-188: EIMS m/z (상대적 세기) 674/676 (20/4), 412/414 (57/20), 280/282 (20/7), 263 (13), 195/197 (89/27); 고분해 EIMS m/z 668.22817 (C35H41ClF2N2O7에 대한 계산치), Δ 1.9 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-234: 크립토피신-234 및 그의 Z 이성질체(58.3 ㎎)을 함유하는 혼합물을 EtOAc/에틸 에테르 용액에서 계속 결정화하여 크립토피신-234(47 ㎎) 및 그의 Z 이성질체(11 ㎎)을 수득하였다.1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.77 (2, d; 15.2), 6.68 (3, ddd; 15.2, 9.7 및 5.4), 2.37 (4, dt; 14.2 및 10.5), 2.52 (4, m), 4.99 (5, m), 2.55 (6, m), 1.13 (6-Me, d; 6.8), 5.99 (7, dd; 15.8 및 8.8), 6.40 (8, d; 15.8), 7.25a(2'/6', d; 8.2), 7.29a(3'/5', d; 8.2), 4.71 (4'-CH2OTBDMS, brs), 0.08 (6H) 및 0.93 (9H) (4'-CH2OTBDMS); B 4.81 (2, m), 5.77 (2-NH, 다른시그널로인해 불명료해짐), 3.03 (3, dd; -14.4 및 7.3), 3.14 (3, dd; -14.4 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.86 (7-OMe, s), 6.83 (8, d; 8.4), 7.07 (9, dd; 8.4 및 2.0); C 2.71 (2, m), 1.22 (2-Me, d; 7.2), 3.29 (3, m), 3.49 (3, m), 6.98 (3-NH, br t; 5.6); D 4.84 (2, m), 1.36 (3, m), 1.59 - 1.71 (3/4, m), 0.73 (4-Me, d, 6.4), 0.77 (5, d, 6.2).a교환가능;13C NMR (CDCl3) 단위 δ (탄소 위치) A 165.5 (1), 125.2 (2), 141.4 (3), 36.4 (4), 77.4 (5), 42.2 (6), 17.3 (6-Me), 129.6 (7), 131.6 (8), 136.4 (1'), 126.0a(2'/6'), 126.3a(3'/5'), 140.9 (4'), 64.7 (4'-CH2O-), 25.9 및 - 5.3 (4'-CH2OTBDMS); B 171.0b(1), 53.6 (2), 35.1 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OCH3), 112.2 (8), 128.4 (9); C 175.6 (1), 38.3 (2), 14.0 (2-Me), 41.1 (3); D 170.9b(1), 71.5 (2), 39.5 (3), 24.5 (4), 22.7 (4-Me), 21.2 (5).a및b시그널은 상호 변형 가능.
크립토피신-236:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76 (2, d; 15.2), 6.68 (3, ddd; 15.2, 9.6 및 5.6), 2.37 (4, m), 2.51 (4, m), 5.00 (5, m), 2.54 (6, m), 1.13 (6-Me, d; 6.9), 6.00 (7, dd; 15.9 및 8.6), 6.39 (8, d; 15.9), 7.20 - 7.30 (2'/3'/5'/6', br m), 4.28 (4-CH2NH-t-Boc, d; 4.9), 4.80 (4'-CH2NH-t-Boc, d; 4.9), 1.46 (4'-C H2NH-t-Boc; s); B 4.80 (2, m), 5.65 (2-NH, d; 8.5), 3.04 (3, dd; -14.4 및 6.9), 3.13 (3, dd; -14.4 및 5.5), 7.22 (5, d; 2.2), 3.87 (7-OMe, s), 6.83 (8, d; 8.4), 7.08 (9, dd; 8.4 및 2.2); C, 2.71 (2, m), 1.22 (2-Me, d; 7.3), 3.27 (3, m), 3.51 (3, m), 6.93 (3-NH, br t; 5.6); D 4.84 (2, dd; 9.9 및 3.5), 1.36 (3, m), 1.58 - 1.70 (3/4, m), 0.74 (4-Me, d, 6.4), 0.78 (5, d, 6.4);13C NMR (CDCl3) 단위 δ (탄소 위치) A 165.4 (1), 125.2 (2), 141.4 (3), 36.5 (4),*(5), 42.2 (6), 17.3 (6-Me), 130.0 (7), 131.4 (8), 135.9 (1'), 126.4 (2'/6'), 127.8 (3'/5'), 138.4 (4'), 44.4 (4'-CH2NH-t-Boc), 28.4 (4'-CH2NH-t-Boc); B 170.9 (1), 53.5 (2), 35.1 (3), 129.9 (4), 131.1 (5), (6), 154.0 (7), 56.2 (7-OCH3), 112.3 (8), 128.4 (9); C 175.6 (1), 38.3 (2), 14.0 (2-Me), 41.2 (3); D 170.9 (1), 71.6 (2), 39.6 (3), 24.5 (4), 22.7 (4-Me), 21.3 (5).*는 용매 시그널 하에 감춰짐.
크립토피신-238: THF(1.5 mL) 중 크립토피신-234(14 ㎎)을 플루오르화 테트라부틸암모늄(25 μL, THF 중 1 M)으로 처리하였다. 1 시간 후, 포화된 NH4Cl(5 mL)후 물(1 mL)을 반응 혼합물에 첨가한 후 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. EtOAc 층을 MgSO4상에서 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 용리제로 CH2Cl 및 EtOAc을 사용하는 작은 실리카 컬럼 상에서 정제하였다. 후기 분획을 증발시켜 크립토피신-238(11.8 ㎎)을 수득하였다. 고분해 EIMS m/z 668.22817 (C35H41ClF2N2O7에 대한 계산치), Δ 1.9 mmu).1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76 (2, d; 15.6), 6.68 (3, ddd; 15.6, 9.8 및 5.5), 2.36 (4, dt; 14.4 및 10.4), 2.51 (4, br dd; 14.4 및 5.1), 5.00 (5, m), 2.55 (6, m), 1.13 (6-Me, d; 6.8), 6.01 (7, dd; 15.9 및 8.8), 6.40 (8, d; 15.9), 7.31 (2'/3'/5'/6', brs); 4.47 (4'-CH2OH, brs); B 4.80 (2, m), 5.78 (2-NH, d; 8.4), 3.01 (3, dd; -14.4 및 7.4), 3.13 (3, dd; -14.4 및 5.5), 7.21 (5, d; 2.0), 3.86 (7-OMe, s), 6.83 (8, d; 8.5), 7.07 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.71 (2, m), 1.21 (2-Me, d; 7.1), 3.28 (3, m), 3.49 (3, m, 6.98 (3-NH, br t; 6.0); D 4.84 (2, dd; 9.9 및 3.2), 1.35 (3, m), 1.58 - 1.71 (3/4, m), 0.74 (4-Me, d; 6.4), 0.77 (5, d; 6.3);13C NMR (CDCl3) 단위 δ (탄소 위치) A 165.5 (1), 125.2 (2), 141.4 (3), 36.4 (8), 77.4 (5), 42.2 (6), 17.3 (6-Me), 130.1 (7), 131.4 (8), 136.1 (1'), 126.3a(2'/6'), 127.2a(3'/5'), 140.4 (4'), 64.9 (4'-CH2OH); B 171.0b(1), 53.7 (2), 35.0 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.3 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OCH3), 112.2 (8), 128.4 (9); C 175.6 (1), 38.2 (2), 14.0 (2-Me), 41.1 (3); D 170.8b(1), 71.5 (2), 39.5 (3), 24.5 (4), 22.7 (4-Me), 21.3 (5).*는 용매 시그널 하에 감춰짐.
크립토피신-246: THF(1.5 mL) 중 크립토피신-236(14 ㎎)을 디옥산(20 μL, 0.08 밀리몰) 중 4 N HCl로 실온에서 처리하였다. 1 시간 후, 용매를 증발시키고 용출시키기 위해 잔류물을 메탄올/물(1:1)을 사용하는 작은 C18 실리카 컬럼(알테크(Alltech), 500 ㎎) 상 플래쉬 크로마트그래피시켰다. 첫 번째 분획(3 mL)을 증발시켜 크립토피신-246(7 ㎎, 85%)을 수득하였다.1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.92 (2, dd; 15.2 및 1.7), 6.69 (3, ddd; 15.2, 11.1 및 3.8), 2.35 (4, m), 2.68 (4, m), 5.06 (5, m), 2.63 (6, m), 1.15 (6-Me, d; 7.4), 6.18 (7, dd; 15.9 및 8.9), 6.50 (8, d; 15.9), 7.40 (2'/6', br d; 8.2), 7.46 (3'/5', br d; 8.2), 4.08 (4'-CH2NH2HCl, s); B 4.51 (2, dd; 11.1 및 3.4), 2.75 (3, m), 3.17 (3, dd; -14.5 및 3.9), 7.27 (5, d; 2.0), 3.83 (7-OMe, s), 6.97 (8, d; 8.5), 7.16 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.73 (2, m), 1.17 (2-Me, d; 8.0), 3.26 (3, m), 3.56 (3, m); D 4.92 (2, dd; 9.8 및 3.9), 1.35 (3, m), 1.54 - 1.65 (3/4, m), 0.71 (4-Me, d; 6.4), 0.75 (5, d; 6.4);13C NMR (CD3OD) 단위 δ (탄소 위치) A 168.4 (1), 125.7 (2), 143.5 (3), 37.7 (4), 78.6 (5), 43.5 (6), 17.5 (6-Me), 133.6 (7), 131.9 (8), 139.5a(1'), 128.0 (2'/6'), 139.3 (3'/5'), 133.3a(4'), 44.0 (4'-CH2NH2HCl); B 174.1 (1), 57.4 (2), 36.3 (3), 132.2 (4), 131.5 (5), 123.3 (6), 155.4 (7), 56.6 (7-OCH3), 113.5 (8), 129.3 (9); C 177.5 (1), 39.0 (2), 15.1 (2-Me), 41.2 (3); D 172.3 (1), 72.8 (2), 41.0 (3), 25.7 (4), 21.7 (4-Me), 23.2 (5).a및b시그널은 상호 변형 가능.
크립토피신-250: 디클로로메탄(80 μL) 중 크립토피신-247(5.1 ㎎)의 용액을 염산(40 μL, 디옥산 중 4 N)으로 처리하였다. 2 시간 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 물로 희석하고 짧은 ODS 컬럼으로 통과시켰다. 컬럼을 물(5 mL)에 이어 CH3CN(3 mL)로 세척하였다. 후기 분획을 증발시켜 크립토피신-250(5 ㎎)을 수득하였다. 역상 HPLC(에코노실(Econosil) C18, 25 cm x 10 mm, 10 μL, 35% H2O/CH3CN, 4 mL/분) 상에서 더 정제하여 순수한 시료(4 ㎎, tR18 분)를 수득하였다. EIMS m/z (상대적 세기) 653/655 (15/10), 533(33), 242(48), 195/97936/13); 고분해 EIMS m/z 653.2865 (C35H44ClN3O7에 대한 계산치), Δ 0.3 mmu).1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.78 (2, d; 15.1), 6.68 (3, ddd; 15.1, 9.6 및 5.4), 2.35 (4, dt; 14.4 및 10.7), 2.48 (4, br dd; 14.4 및 5.1), 5.01 (5, m), 2.53 (6, m), 1.12 (6-Me, d; 6.8), 6.01 (7, dd; 15.9 및 8.7), 6.33 (8, d; 15.9), 6.81 m, 6.89 d, 6.94 s 및 6.99 m (2'/3'-NH3/4'/6'), 7.15 (5', t; 7.8); B 4.78 (2, m), 5.95 (2-NH), 3.02 (3, dd; -14.4 및 7.3), 3.15 (3, dd; -14.4 및 5.5), 7.22 (5, d; 2.0), 3.86 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.4), 7.08 (9, dd; 8.4 및 2.0); C 2.70 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.1), 3.27 (3, m), 3.51 (3, m), 6.99 (3-NH, m); D 4.87 (2, dd; 9.8 및 3.2), 1.39 (3, m), 1.59-1.73 (3/4, m), 0.76 (4-Me, d, 5.4), 0.80 (5, d, 5.6); A 165.8 (1), 125.2 (2), 141.5 (3), 36.4 (4), 77.3 (5), 42.0 (6), 17.1 (6-Me), 131.0 (7), 131.3 (8), 138.3 (1'), 116.0 (2'), 121.1 (4'), 130.0 (5'), 118.0 (6'); B 171.2 (1), 54.0 (2), 35.0 (3), 129.8 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 153.9 (7), 56.1 (7-OCH3), 112.3 (8), 128.4 (9); C 175.6 (1), 38.2 (2), 14.2 (2-Me), 41.0 (3); D 170.9 (1), 71.5 (2), 39.6 (3), 24.6 (4), 22.8 (4-Me), 21.4 (5).
크립토피신-251: EIMS m/z (상대적 세기) 696 (0.7), 652 (M+- CO2; 0.7), 412/414 (4/2), 285 (6), 241 (5), 195/197 (11/3); 고분해 EIMS m/z 668.22817 (C37H45ClN2O9에 대한 계산치), Δ 1.9 mmu), 표 31H NMR 참조; 표 413C NMR 참조.
크립토피신-255:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.78 (2, d; 15.1), 6.67 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.37 (4, dt; 14.9 및 10.3), 2.45 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.94 (5, d, 6.4).
CDCl3에 기록된 스펙트럼; 화학적 이동은 양성자 또는 표에 나타낸 탄소 상에 위치한 메틸 또는 메톡시 관능기에 대한 것이다. 단위 B 및 C 상의 양성자에 대한 화학적 이동은 크립토피신-3에 대한 값의 ±0.2 ppm 및 커플링 상수 ±0.5 Hz 이내이다. 151에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=5',6'=8.7; 186에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',6'=2.0; 5',6'=7.7; 193 및 194에 대한 Hz로의 J (H,H): 3',4'=8.5; 195에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=3',4'=7.9; 2',6'=4',6'=2.4; 표에서의 나머지 오드 (od) 양성자에 대한 관찰가능한 커플링 상수는 크립토피신-8에서의 값의 ±0.5 Hz 이내이다.
CDCl3에 기록된 스펙트럼; 화학적 이동은 양성자 또는 표에 나타낸 탄소 상에 위치한 메틸 또는 메톡시 관능기에 대한 것이다. 단위 B 및 C 상의 양성자에 대한 화학적 이동은 크립토피신-8에 대한 값의 ±0.2 ppm 및 커플링 상수 ±0.5 Hz 이내이다. 163에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=5',6'=8.7; 186에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',6'=2.0; 5',6'=7.7; 193 및 194에 대한 Hz로의 J (H,H): 3',4'=8.5; 195에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=3',4'=7.9; 2',6'=4',6'=2.4; 표에서의 나머지 오드 (od) 양성자에 대한 관찰가능한 커플링 상수는 크립토피신-8에서의 값의 ±0.5 Hz 이내이다. 212에 대한 Hz로의 J (H,H) 및 J (H,F): 3'-F,4-H=4-H, 5-F=8.7; 2',4'=4',6'=2.3.
실시예 92
에폭시드 유사체
크립토피신-157, 158, 164, 165, 168, 169, 170, 171, 173, 174, 177, 178, 179, 180, 182, 183, 200, 242 및 269
스티렌의 에폭시화의 일반적 절차: 디클로로메탄 3 mL 중 스티렌 유사체(0.1 밀리몰) 및 m-클로로퍼록시벤조산(0.3 밀리몰)의 용액을 실온에서 교반시켰다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄(3 mL)로 희석하고 포스페이트 완충제(0.1 M, pH 8, 5 mL)로 세척하여 반응 동안 발생된 3-클로로벤조산을 제거하였다. 오렌지색 층을 분리하고 디메틸 술피드(20 μL)로 처리하여 과량의 과산을 켄칭시키고, 2회 시기에 완충제로 세척하였다. 디클로로메탄층을 분리하고, MgSO4상에서 건조시키고 증발시키고, 잔류물을 역상 컬럼(에코노실(Econosil) C18, 25 cm x 10 mm, 10 μL, 35% H2O/CH3CN, 6 mL/분) 상에서 HPLC시켜 RR 및 SS-에폭시드를 수득하였다.
상세한 실험 및 세포독성 데이타를 표 3에 요약하였다.
크립토피신-157 및 -158: 크립토피신-151을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 역상 HPLC 하여 크립토피신-157 및 -158을 수득하였다.
크립토피신-157: EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 분해 EIMS m/z 704.2862 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 0.3 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-158: EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 분해 EIMS m/z 704.2862 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 0.3 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-164 및 -165: 디클로로메탄 3 mL 중 크립토피신-152(53 ㎎, 0.08 밀리몰) 및 m-클로로퍼록시벤조산(15 ㎎, 0.087 밀리몰)의 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 동일하게 마무리 처리하고 정제하여 화합물 164/165A 164/165B(5 ㎎ 각각), 출발 물질, 다른 분해물질을 수득하였다. 전체 구조를 분석한 결과, 크립토피신-164 및 -165이었으나, 이 화합물들의 에폭시드 잔기의 입체화학은 정해지지 않았다.
크립토피신-164/165A1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.77 (2, d; 15.1), 6.67 (3, ddd; 15.1, 9.7 및 5.4), 2.37 (4, m), 2.44 (4, m), 4.98 (5,m), 2.48 (6, m), 1.06 (6-Me, d; 6.7), 5.83 (7, dd; 15.6 및 8.5), 5.40 (8, dd; 15.6 및 7.8), 3.32 (9, dd; 7.9 및 2.0), 3.75 (1), d; 2.0), 7.26 (2'/6', m), 7.31-7.37 (3'/4'/5', m); B 4.82 (2, m), 5.75 (2-NH, d; 9.2), 3.04 (3, dd; -14.5 및 7.3), 3.14 (3, dd; -14.5 및 5.5), 7.23 (5, d; 2.2), 3.87 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.2), 7.09 (9, dd; 8.2 및 2,2); C 2.73 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.2), 3.29 (3, m), 3.51 (3, m), 6.97 (3-NH, br t; 6.3); D 4.88 (2, dd; 10.0 및 3.7), 1.52 (3, m), 1.79 (3/4, m), 0.92 (4-Me, d; 6.5), 0.95 (5, d; 6.5).13C NMR (CDCl3) 단위 δ (탄소 위치) A 165.4 (1), 125.3 (2), 141.2 (3), 36.5 (4), 77.0 (5), 41.3 (6), 17.0 (6-Me), 136.2 (7), 129.4 (8), 62.5 (9), 60.1 (10), 136.9 (1'), 125.4 (2'/6'), 128.7 (3'/5'), 128.4 (4'); B 171.0 (1), 53.6 (2), 35.0 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 154.0 (7), 56.1 (7-OMe), 112.3 (8), 128.3 (9); C 175.6 (1), 38.3 (2), 14.1 (2-Me), 41.2 (3); D 170.8 (1), 71.5 (2), 39.6 (3), 24.7 (4), 21.4 (4-Me), 22.9 (5).
크립토피신-164/165B1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76 (2, d; 15.3), 6.66 (3, ddd; 15.3, 9.6 및 5.7), 2.36 (4, m), 2.40 (4, m), 5.00 (5, m), 2.47 (6, m), 1.08 (6-Me, d; 6.8), 5.85 (7, dd; 15.5 및 8.5), 5.43 (8, ddd; 15.5, 7.6 및 0.6), 3.35 (9, dd; l.6 및 1.9), 3.75 (10, d; 1.9), 7.27 - 7.37 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.82 (2, m), 5.65 (2-NH, d; 8.5), 3.04 (3, dd; -14.4 및 7.2), 3.14 (3, dd; -14.4 및 5.5), 7.22 (5, d; 2.1), 3.87 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.1); C 2.72 (2, m), 1.22 (2-Me, d; 7.2), 3.27 (3, m), 3.52 (3, m), 6.90 (3-NH, br t; 6.3); D 4.87 (2, dd; 9.8 및 3.8), 1.48 (3, m), 1.77 (3, m), 1.73 (4, m), 0.89 (4-Me, d; 6.4), 0.90 (5, d; 6.6).13C NMr (CDCl3) 단위 δ (탄소 위치) A 165.4 (1), 125.2 (2), 141.2 (3), 36.4 (4), 41.3 (6), 16.9 (6-Me), 135.9 (7), 129.1 (8), 62.3 (9), 60.4 (10), 136.8 (1'), 125.5 (2'/6'), 128.6 (3/5'), 128.4 (4'); B 170.9 (1), 53.6 (2), 35.1 (3), 129.8 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 154.0 (7), 56.1 (7-OMe), 112.2 (8), 128.4 (9); C 175.5 (1), 38.8 (2), 14.0 (2-Me), 41.2 (3); D 170.8 (1), 71.4 (2), 39.7 (3), 24.7 (4), 21.5 (4-Me), 22.9 (5).
크립토피신-168 및 169: 크립토피신-153을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 역상 HPLC 하여 크립토피신-168 및 -169를 수득하였다.
크립토피신-168: EIMS m/z (상대적 세기) 684/686 (7/2), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121 (100); EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 684.2789 (C36H45ClN2O9에 대한 계산치), 2.6 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-169:1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-170 및 171: 크립토피신-153을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 역상 HPLC 하여 크립토피신-168 및 -169를 수득하였다.
크립토피신-170: EIMS m/z (상대적 세기) 682/684 (4/3), 412/414 (11/4), 280/282 (15/4), 255 (25), 195/197 (52/17); 분해 EIMS m/z 684.2789 (C37H47ClN2O8에 대한 계산치), -2.2 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-171: EIMS m/z (상대적 세기) 682/684 (2.0/0.7), 412/414 (7/4), 280/282 (14/4), 255 (19), 195/197 Si, 250 x 10 mm, 10 μ, EtOAc; 헥산, 1:1, 3 mL/분, tR: 81 min).
크립토피신-173 및 174: 크립토피신-171을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 역상 HPLC 하여 크립토피신-173 및 -174를 수득하였다.
크립토피신-173: EIMS m/z (상대적 세기) 704706 (1.3/1.4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121 (100); EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 2.7 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조. 크립토피신-174 :1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-177 및 178: 크립토피신-166을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 역상 HPLC 하여 크립토피신-177 및 -178를 수득하였다.
크립토피신-177: EIMS m/z (상대적 세기) 704706 (1.3/1.4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121 (100); EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 2.7 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조. 크립토피신-178 : EIMS m/z (상대적 세기) 704706 (1.3/1.4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121 (100); EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 2.7 mmu 오차)1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-179 및 180: 크립토피신-167을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 상기 크립토피신-1511의 에폭시화에 대한 동일한 방법을 이용하여 크립토피신-179 및 -180를 수득하였다.
크립토피신-179 : EIMS m/z (상대적 세기) 682/684 (4/3), 412/414 (11/4), 280/282 (15/4), 255 (25), 195/197 (52/17); 분해 EIMS m/z 684.2789 (C37H47ClN2O8에 대한 계산치), 2.9 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-180: EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 0 mmu 오차)1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-182 및 183: 크립토피신-181을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 역상 HPLC 하여 크립토피신-182 및 -183를 수득하였다.
크립토피신-182: EIMS m/z (상대적 세기) 412/414 (1.3/1.4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121 (100); EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C35H42ClFN2O8에 대한 계산치), 2.3 mmu 오차),1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조. 크립토피신-183 : EIMS m/z (상대적 세기) 412/414 (1.3/1.4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121 (100); EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C35H42ClFN2O8에 대한 계산치), -0.7 mmu 오차)1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-200: 크립토피신-188을 m-CPBA로 처리하고 단리된 생성물을 추가량의 과산( 3 당량)을 사용한다는 것을 제외하고는 일반적 절차를 따르고, 12 시간 후에 농축하고 36 시간 동안 계속 교반시켜 크립토피신-200 및 SS-에폭시드를 수득하였다. 크립토피신-200:EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 2.6 mmu 오차)1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-242: 크립토피신-236을 m-CPBA로 처리하고 동일한 절차를 수행하여 크립토피신-242 및 SS-에폭시드를 수득하였다. 크립토피신-242를 보통 상 HPLC((Econosil) C18, 25 cm x 10 mm, 10 μL, 35% H2O/CH3CN, 6 mL/분)로 정제하였다.EtOAc; 헥산, 1:1 , 3 mL/분, tR:81분
크립토피신-242:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.73 (2, d; 15.4), 6.66 (3, ddd; 15.4, 9.7 및 5.4), 2.17 (4, dt; 13.9 및 10.9), 2.53 (4, br dd; 13.9 및 5.0), 5.08 (5, m), 1.61 (6, m), 0.88 (6-Me, d; 6.8), 4.28 (7, br d; 9.6), 5.13 (8, d; 9.6), 2.38 (2'-CH3, s), 7.03 (2', br s), 2.32 (4'-CH3, s), 7.03 (5', brd; 8.5), 7.17 (6', d; 8.5); B 4.80 (2, m), 5.66 (2-NH, d; 8.1), 3.03 (3, dd; -14.4 및 7.2), 3.14 (3, dd; -14.4 및 5.6), 7.21 (5, d; 1.6), 3.87 (7-OMe, s), 6.83 (8, d; 8.3), 7.08 (9, dd; 8.3 및 1.7); C 2.74 (2, m), 1.24 (2-Me, d; 7.1), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.96 (3-NH, br m); D 4.89 (2, dd; 9.8 및 3.4), 1.52 (3, m), 1.87 (3, m), 1.72 (4, m), 0.94 (4-Me, d; 7.3), 0.97 (5, d; 6.8).a및b시그널은 상호 변형 가능.
크립토피신-269: 아세톤 (1.2 mL) 중 크립토피신-243)(6 ㎎)을 실온에서 반응 바이알에서 세게 교반시키면서 고체 K2CO3로 처리하였다. 12 시간 후, 반응 혼합물을 여과시키고 용매를 증발시켰다. 잔류물을 CH2Cl2및 EtoAc를 사용하는 짧은 실리카 컬럼을 이용하여 정제하여 크립토피신-269(5.1 ㎎)을 수득하였다.1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76 (2, d; 15.0), 6.67 (3, ddd; 15.0, 9.6 및 5.4), 2.35 (4, dt; 14.4 및 10.4), 2.64 (4, br dd; 14.4 및 5.1), 5.07 (5, m), 2.50 (6, m), 1.04 (6-Me, d; 6.8), 4.02 (7, br d; 9.8), 4.68 (8, d; 9.8), 7.39 (2'/3'/5'/6', br s), 4.70 (4'-CH2OH, brs); B 4.74 (2, m), 5.72 (2-H, d; 7.8), 2.99 (3, dd; -14.4 및 7.3), 3.14 (3, dd; -14.4 및 5.6), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.84 (8, d; 8.4), 7.08 (9, dd; 8.4 및 2.0); C 2.73 (2, m), 1.21 (2-Me, d; 7.1), 3.23 (3, dt; 13.7 및 7.1), 3.50 (3, dt; 13.7 및 4.5), 6.93 (3-NH, br dd; 7.1 및 4.5); D 4.91 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.47 (3, m), 1.64 - 1.84 (3/4, m), 0.94 (4-Me, d; 6.4), 0.95 (5, d; 6.3);13C NMR (CDCl3) 단위 δ (탄소 위치) A 165.6 (1), 125.0 (2), 141.9 (3), 36.3 (4), 76.4 (5) 38.3 (6), 8.7 (6-Me), 74.0 (7), 62.0 (8), 137.7 (1'), 127.4a(2'/6'), 128.2a(3'/5'), 142.2 (4'), 64.6 (4-'-CH2OH); B 171.1b(1), 53.6 (2), 35.1 (3), 129.9 (4), 131.0 (5), 122.4 (6), 154.0 (7), 56.2 (7-OCH3), 112.3 (8), 128.4 (9); C 175.4 (1), 38.5 (2), 14.1 (2-Me), 41.2 (3); D 170.5b(1), 71.4 (2), 39.7 (3), 24.8 (4), 23.2 (4-Me) 21.6 (5). 동일한 첨자를 갖는a시그널은 상호 교환 가능하다.
<표 6>
CDCl3에 기록된 스펙트럼; 화학적 이동은 양성자 또는 표에 나타낸 탄소 상에 위치한 메틸 또는 메톡시 관능기에 대한 것이다. 단위 B 및 C 상의 양성자에 대한 화학적 이동은 크립토피신-8에 대한 값의 ±0.2 ppm 및 커플링 상수 ±0.5 Hz 이내이다. 163에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=5',6'=8.7; 186에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',6'=2.0; 5',6'=7.7; 193 및 194에 대한 Hz로의 J (H,H): 3',4'=8.5; 195에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=3',4'=7.9; 2',6'=4',6'=2.4; 표에서의 나머지 오드 (od) 양성자에 대한 관찰가능한 커플링 상수는 크립토피신-8에서의 값의 ±0.5 Hz 이내이다. 212에 대한 Hz로의 J (H,H) 및 J (H,F): 3'-F,4-H=4-H, 5-F=8.7; 2',4'=4',6'=2.3.
실시예 93
클로로히드린 유사체
크립토피신-163, 184, 185, 186, 187, 191, 192, 193, 194, 195, 212, 216, 217, 22, 223, 224, 243, 252, 253, 263, 264, 265, 272 및 273
크립토피신-195
EIMS m/z (상대적 세기) 684/686(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 3.0 mmu )1H NMR 데이타 표 9 참조;13C NMR 데이타 표 10 참조.
크립토피신-187
EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한계산치), 2.6 mmu 오차)1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-224
EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 2.6 mmu 오차)1H NMR 데이타 표 6 참조;13C NMR 데이타 표 7 참조.
크립토피신-191, 192, 194, 195, 212, 216, 217, 222 및 223
클로로히드린 제조의 일반적 절차
클로로메탄 3 mL 중 스티렌 유사체(0.1 밀리몰) 및 m-클로로퍼록시벤조산(0.3 밀리몰)의 용액을 실온에서 교반시켰다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄(3 mL)로 희석하고 포스페이트 완충제(0.1 M, pH 8, 5 mL)로 세척하여 반응 동안 발생된 3-클로로벤조산을 제거하여 트랜스 및 시스 히드린을 수득하였다.
크립토피신-195
EIMS m/z (상대적 세기) 684/686(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 3.0 mmu )1H NMR 데이타 표 9 참조;13C NMR 데이타 표 10 참조.
크립토피신-212
EIMS m/z (상대적 세기) 704/706(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), Δ mmu)1H NMR 데이타 표 9 참조;13C NMR 데이타 표 10 참조.
크립토피신-216
EIMS m/z (상대적 세기) 412/414(2.2/1.9), 195/197(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), 2.6 mmu )1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.78 (2, d; 15.1), 6.67 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.37 (4, dt; 14.9 및 10.3), 2.45 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.94 (5, d, 6.4)..
크립토피신-217
EIMS m/z (상대적 세기) 682/684(3/1), 412/414 (6/1), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치);1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.72(2, d; 15.1), 6.66 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.17 (4, dt; 14.9 및 10.3), 2.45 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.97 (5, d, 6.4).
크립토피신-212
EIMS m/z (상대적 세기) 718/720(2.2/1.9), 682/684(25/9), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), Δ mmu)1H NMR 데이타 표 9 참조;13C NMR 데이타 표 10 참조.
크립토피신-223
EIMS m/z (상대적 세기)672/674(1/0.8), 412/414(3/1), 141(100); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), Δ mmu)1H NMR 데이타 표 9 참조;13C NMR 데이타 표 10 참조.
크립토피신-243:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76(2, d; 15.1), 6.67 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.35 (4, dt; 14.9 및 10.3), 6.67 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.97 (5, d, 6.4). 동일한 첨자를 갖는a시그널은 상호 교환 가능하다.
크립토피신-252 및 253
크립토피신-252IMS m/z (상대적 세기) 670/672 (7.2/2.2), 669/671 (19.2/7.8), 280/282 (6.8/2.4), 242 (4.7), 195/197 (43/12); 고분해 EIMS m/z 704.2838 (C39H45ClN2O8에 대한 계산치), Δ mmu)1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.93 (2, d; 15.1), 6.61 - 6.78 (3, m), 2.33 (4, dt; 14.7 및 9.8), 2.69 - 2.80 (4, m), 5.11 (5, m), 2.46 (6, m), 0.95 - 1.04 (6-Me, m), 3.99 (7, brd; 9.4), 4.62 (8, d; 9.4), 7.28 (2', br s), 7.17 (4', brd; 8.1), 7.07 (5', t; 8.1), 6.98 (6, d; 8.1); B 4.50 (2, dd; 10.5 및 3.2), 2.69 - 2.80 (3, m), 3.18 (3, brd; 13.7), 6.61 - 6.78 (5, 8 및 9, m), 3.86 (7-OMe, s); C 2.69 - 2.80 (2, m), 1.19 (2-Me, d; 7.3), 3.28 (3, brd; 13.4), 3.58 (3, br d; 13.4); D 5.01 (2, dd; 9.8 및 2.7), 1.53 (3, m), 1.70 - 1.84 (3/4, m), 0.95 - 1.04 (4/5-Me, m).
크립토피신-253:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.84 (2, dd; 15.3 및 1.6), 6.60 - 6.74 (3, m), 2.10 (4, dt; 14.9 및 11.2), 2.64 (4, m), 5.05 (5, m), 1.50 (6, m), 0.90 (6-Me, d; 6.8), 4.01 (7, dd; 9.5 및 1.2), 4.75 (8, d; 9.5), 6.60 - 6.74 (2'/4'/6', m), 7.09 (5', t; 7.8); B 4.48 (2, dd; 11.4 및 3.9), 2.71 (3, dd; 14.4 및 11.4), 3.16 (3, dd; 14.4 및 3.7), 7.26 (5, d; 2.2), 3.86 (7-OMe, s), 6.96 (8, d; 8.4), 7.15 (9, dd; 8.4 및 2.2); C 2.765 (2, m), 1.18 (2-Me, d; 7.3), 3.26 (3, m), 3.58 (3, dd; 13.5 및 3.1); D 4.94 (2, dd; 9.4 및 3.8), 1.58 (3, m), 1.80 (3, m), 1.70 (4, m), 0.97 (4-Me, d; 6.1), 0.98 (5, d; 6.3a).
크립토피신-263, 264 및 265
크립토피신-263:
1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76(2, d; 15.1), 6.67 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.35 (4, dt; 14.9 및 10.3), 6.67 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.97 (5, d, 6.4). 동일한 첨자를 갖는a및b시그널은 상호 교환 가능하다.
크립토피신-264:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.72(2, d; 15.1), 6.66 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.17 (4, dt; 14.9 및 10.3), 2.45 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.97 (5, d, 6.4). 동일한 첨자를 갖는a및b시그널은 상호 교환 가능하다.
크립토피신-265:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.84 (2, dd; 15.3 및 1.6), 6.60 - 6.74 (3, m), 2.10 (4, dt; 14.9 및 11.2), 2.64 (4, m), 5.05 (5, m), 1.50 (6, m), 0.90 (6-Me, d; 6.8), 4.01 (7, dd; 9.5 및 1.2), 4.75 (8, d; 9.5), 6.60 - 6.74 (2'/4'/6', m), 7.09 (5', t; 7.8); B 4.48 (2, dd; 11.4 및 3.9), 2.71 (3, dd; 14.4 및 11.4), 3.16 (3, dd; 14.4 및 3.7), 7.26 (5, d; 2.2), 3.86 (7-OMe, s), 6.96 (8, d; 8.4), 7.15 (9, dd; 8.4 및 2.2); C 2.765 (2, m), 1.18 (2-Me, d; 7.3), 3.26 (3, m), 3.58 (3, dd; 13.5 및 3.1); D 4.94 (2, dd; 9.4 및 3.8), 1.58 (3, m), 1.80 (3, m), 1.70 (4, m), 0.97 (4-Me, d; 6.1), 0.98 (5, d; 6.3a). 동일한 첨자를 갖는a및b시그널은 상호 교환 가능하다.
크립토피신-272:1H NMR (CDCl3) 아미노 또는 히드록시산 단위 d(탄소 위치, 중복도; Hz 중 J) A 5.76(2, d; 15.1), 6.67 (3, ddd; 15.1, 9.5 및 5.9), 2.35 (4, dt; 14.9 및 10.3), 6.67 (4, m), 4.96 (5, m), 2.52 (6, m), 1.09 (6-Me, d; 6.8), 5.74 (7, dd; 15.1 및 8.9), 6.24 (8, d; 15.1), 7.20 - 7.33 (2'/3'/4'/5'/6', m); B 4.83 (2, m), 5.64 (2-NH, d; 8.8), 3.05 (3, dd; -14.6 및 7.1), 3.14 (3, dd; -14.6 및 5.4), 7.22 (5, d; 2.0), 3.88 (7-OMe, s), 6.85 (8, d; 8.5), 7.08 (9, dd; 8.5 및 2.0); C 2.72 (2, m), 1.23 (2-Me, d; 7.3), 3.29 (3, m), 3.50 (3, m), 6.95 (3-NH, m); D 4.86 (2, dd; 10.0 및 3.4), 1.49 (3, m), 1.63 - 1.85 (3/4, m), 0.89 (4-Me, d, 6.4), 0.97 (5, d, 6.4). 동일한 첨자를 갖는a및b시그널은 상호 교환 가능하다.
CDCl3에 기록된 스펙트럼; 화학적 이동은 양성자 또는 표에 나타낸 탄소 상에 위치한 메틸 또는 메톡시 관능기에 대한 것이다. 단위 B 및 C 상의 양성자에 대한 화학적 이동은 크립토피신-8에 대한 값의 ±0.2 ppm 및 커플링 상수 ±0.5 Hz 이내이다. 163에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=5',6'=8.7; 186에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',6'=2.0; 5',6'=7.7; 193 및 194에 대한 Hz로의 J (H,H): 3',4'=8.5; 195에 대한 Hz로의 J (H,H): 2',3'=3',4'=7.9; 2',6'=4',6'=2.4; 표에서의 나머지 오드 (od) 양성자에 대한 관찰가능한 커플링 상수는 크립토피신-8에서의 값의 ±0.5 Hz 이내이다. 212에 대한 Hz로의 J (H,H) 및 J (H,F): 3'-F,4-H=4-H, 5-F=8.7; 2',4'=4',6'=2.3.
CDCl3에 기록된 스펙트럼; 단위 B 및 C에서의 탄소에 대한 화학적 이동은 크립토피신-8에 대한 값의 ±0.5 ppm 이내이다.*샘플의 크기가 더 작아서 신호는 발견할 수 없었다.+지정은 임시적이다.**용매 신호로 함침. 163 및 195의 4-OMe 탄소는 δ 55.3에서 공명되었다. 185의 2'-Me 및 3'-Me 탄소는 δ 15.0 및 20.9에서 각각 나타났다. 186의 3'-Me 및 4'-Me 탄소는 δ 19.6 및 19.9에서 각각 나타났다. 동일한 탄소가 187에서는 δ 19.5 및 19.8에서 및 224에서는 19.5 및 19.8에서 각각 관찰되었다. 223의 3' 및 5'-Me 탄소는 21.3에서 관찰되었다.
<실시예 94>
하기 2'에서의 일반기 R은, 하기 표 1에 나타낸 바와 같이, 에테르 치환기 및 몇몇 아실 치환기로 구성되어 있다. 신규 크립토피신 유사체는 에스테르화 기술을 통해 적당하게 고수율로 제조되었다. 문헌 [Mulzer, J. Trost B.M. Fleming, I., Ed. Comprehensive Organic Synthesis; 6:323-380, (Pergamon press: Oxford, 1991); Benz, G. Trost, B.M., Fleming, I. Ed., Comprehensive Organic Synthesis, 6:381-417, (Pergamon Press: Oxford, 1991]을 참조하라. 이-나트륨 염 7'을 6'으로부터 유도하고 염산으로 t-부틸 에스테르를 분할하고 수산화 나트륨으로 처리하는 동안, 상응하는 t-부틸 카르바메이트로부터 염산으로 처리하여 아민 히드로클로라이드 염을 고수율로 제조하였다. 니콜라우 (Nicolaou)의 방법에 따라 1'로부터 피리디늄 염 9'를 제조하였다 [Nicolaou 외., Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:1583+ (1994)].
(하기 설명과 합성 방법에서와 같이 사용함)
<표 1>
표 1에 나타낸 공액체의 제조는 통상적으로 활성 에스테르 방법학에 이어 크로마토그래피 및 필요하다면 산 유도 역차단을 동반하는 몇몇 프로토콜에 따른다. 따라서, 트리에틸아민 및 4-디메틸아미노 피리딘의 존재하에서 아세트산 무수물로 1'을 처리하여, 플래시 크로마토그래피 후 89 %로 3'을 제조하였다. 유사하게, 5'는 숙신산 무수물에 이어 역상 HPLC 정화를 통해 제조할 수 있다.7별법으로, 5'는 모노-t-부틸 에스테르 4'을 산 처리하여 고수율로 제조하였다. 트리에틸아민 및 4-디메틸아미노 피리딘의 존재하에서 1'의 피리딘 용액을 시판되는 니코티노일 클로라이드 히드로클로라이드로 노출시키고, 크로마토그래피하고 염화 수소로 처리하여 8'을 고수율로 얻었다. 니콜라우의 방법에 따라 (같은 장소에서) 1'을 시판되는 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트로 처리하고 음이온 교환 (p-톨루엔술포네이트에 대한 아세테이트) 및 동결 건조를 수반하는 역상 HPLC 정화하여, 피리디늄 염 9'를 47 % 수율로 제조하였다. 4-디메틸아미노 피리딘의 존재하서 1' 및 시판되는 (4', 6', 10', 43', 및 45'의 경우를 제외하고) 1,3-디시클로헥실카르보디이미드를 통해 활성화한 N-t-boc 보호된 아미노산으로부터 나머지 에스테르를 모두 적당하게 고수율로 제조하였다. 히드로클로라이드 염은 디옥산 중의 염화 수소의 4.0 M 용액으로 처리하고 감압하에 용매를 제거하여 고수율로 제조하였다. 염산으로 t-부틸 에스테르를 분할하고 수산화 나트륨으로 처리하여, 6'으로부터 이-나트륨 염 7'을 유도하였다. 5'의 제조를 위한 필수적인 산 24'은 포스페이트 관능성 장착을 위한 존스 (Johns)의 방법을 요점으로 한 5 단계 순서를 통해 63 % 수율로 합성하였다 [Perich, J.W.; Johns R.B. 외. Synthesis 1988:142].
상기 기재된 바와 같이, 몇몇의 신규 공액체를 Gc3 종양 세포 모델 중에서 세포독성에 대해 시험관 내에서 분석하였다. 이 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
<표 2>
크립토피신의 세포외 세포독성
화합물 Gc3 IC50(nM) 화합물 Gc3 IC50(nM)
1' 28' 2.6
3' 30' 30
5' 32' 7.2
7' 34' 6.5
8' 36' 2.8
9' 38' 1.6
11' 40' 2.0
13' 42' 15
15' 44' 28
17' 46' 50
19' 47' 2.5
21' 48' 10
25'
안정성 연구를 4 내지 8의 수성 pH 범위에서 수행하고, 완전히 남아있는 생성물의 백분율을 결정하였다.
t-부틸 카르바메이트의 상응하는 염으로의 전환은 임의의 강산, 즉, 할로겐화 수소, 황화 수소, 인산화 수소, 질산화 수소, 아염소산화 수소와 같은 무기산, 또는 강 유기산, 예를 들면, 트리플루오로아세트산, p-톨루엔술폰산 및 메탄술폰산에 의해 영향받을 수 있다. 동일한 산은 상응하는 유리 염기로부터 8'형의 염을 제조하는데 사용할 수 있다. 각종 반대 이온 (양이온)에는 임의의 알칼리 및 알칼리 토금속을 포함하는 7'형의 염이 포함될 수도 있다. 각종 반대 이온 (음이온)에는 9'형의 염, 즉, 산의 임의의 공액 염기 (유기 또는 무기)가 포함될 수도 있다.
크립토피신 55 아세테이트 (3') (LSN 362376)의 제조
0 ℃에서 염화 메틸렌 659 ㎕ 중의 1'의 용액 (93 ㎎, 0.13 mmol)에 트리에틸아민 (55 ㎕, 0.40 mmol), 4-디메틸아미노 피리딘 (1.6 ㎎, 0.013 mmol) 및 아세트산 무수물 (19 ㎕, 0.20 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 메탄올 19 ㎕로 반응을 켄칭시키고, 0.5 부피로 농축시키고, 플래시 크로마토그래피 칼럼 (플래시 실리카 겔 19 g)에 직접 적용하였다. 에틸 아세테이트-헥산 (3:1)로 용리하여 표제 화합물 88 ㎎ (89 %)를 백색 발포체로서 얻었다.
크립토피신 55 숙시네이트tert-부틸 에스테르 (4') (LSN 384665)의 제조
실온에서 염화 메틸렌 무수물 850 ㎕ 중의 1' (133 ㎎, 0.188 mmol), 숙신산 모노-tert-부틸 에스테르10(66 ㎎, 0.377 mmol) 및 4-디메틸아미노 피리딘 (2.3 ㎎, 0.019 mmol)의 용액에 염화 메틸렌 92 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 (78 ㎎, 0.377 mmol)의 용액을 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 셀라이트 150 ㎎으로 처리하고, 에틸 아세테이트-헥산 (3:1) 1 ㎖로 희석하고, 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트-헥산 (3:1)으로 세척하였다. 여과액 및 세척액을 감압하에 농축시켜 회백색 오일을 얻었다. 에틸 아세테이트-헥산 (2:1)으로 용리하면서 크로마토그래피 (플래시 실리카 겔 25 g)하여 백색 발포체로서의 표제 화합물 157 ㎎ (97 %)를 얻었다.
크립토피신 55 숙시네이트 tert-부틸 에스테르로부터 크립토피신 55 숙시네이트 (5') (LSN 377092)의 제조
실온에서 염화 메틸렌 491 ㎕ 중의 4' (127 ㎎, 0.147 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 중의 염화 수소의 4.0 M 용액 (184 ㎕, 0.737 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 감압하에 농축하여 백색 발포체로서의 표제 화합물 119 ㎎ (100 %)를 얻었다.
숙신산 무수물로부터 크립토피신 55 숙시네이트 (5') (LSN 377092)의 제조
실온에서 염화 메틸렌 383 ㎕ 중의 1' (27 ㎎, 0.038 mmol) 및 숙신산 무수물 (5.7 ㎎, 0.057 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (16 ㎕, 0.155 mmol) 및 4-디메틸아미노 피리딘 (4.7 ㎎, 0.038 mmol)을 첨가하였다. 19 시간 동안 교반한 후, 추가의 숙신산 무수물 5.7 ㎎ (0.057 mmol) 및 4-디메틸아미노 피리딘 4.7 ㎎ (0.038 mmol)을 첨가하고 추가 29 시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 1N-염산 수용액으로 처리하고, 염화 메틸렌으로 세척하였다 (3×0.5 ㎖). 모아진 유기 추출물을 건조시키고 (Ns2SO4), 여과하고, 감압하에 농축하여 백색 발포체를 얻었다. 역상 HPLC7정화하여 백색 발포체로서의 표제 화합물 10 ㎎ (32 %)를 얻었다.
크립토피신 55 (2'-디-t-부틸포스파틸)페닐아세테이트 (6') (LSN 379407)의 제조
실온에서 염화 메틸렌 무수물 250 ㎕ 중의 1' (0.102 mmol), 24' (46 ㎎, 0.134 mmol) 및 4-디메틸아미노 피리딘 (12 ㎎, 0.102 mmol)의 용액에 염화 메틸렌 50 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 (27 ㎎, 0.134 mmol)의 용액을 첨가하였다. 실온에서 6 시간 동안 교반한 후, 이 반응물을 에틸 아세테이트-헥산 (3:1)로 희석하고, 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트-헥산 (3:1)로 세척하였다. 여과액 및 세척액을 감압하에 농축하여 보라색 발포체를 얻었다. 에틸 아세테이트-헥산 (4:1)으로 용리하면서, 크로마토그래피 (플래시 실리카 겔 15 g)하여 백색 발포체로서의 표제 화합물 86 ㎎ (82 %)를 얻었다.
2'-(디-t-부틸포스파틸)페닐아세트산 (24') (LSN 379402)의 제조
0 ℃에서 N,N-디메틸포름아미드 15.2 ㎖ 중의 2'-히드록시페네닐 알콜 (1.05 g, 7.60 mmol)의 용액에 이미다졸 (621 ㎎, 9.11 mmol) 및 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (1.26 g, 8.34 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 40 분 동안 실온에서 45 분 동안 교반한 후, 추가의 이미다졸 155 ㎎ (2.28 mmol) 및 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 229 ㎎ (1.52 mmol)을 첨가하였다. 이 반응물을 추가 15 분 동안 교반하고, 이 동안에 tert-부틸 메틸 에테르 150 ㎖를 첨가하였다. 이 혼합물을 차가운 1N 염산 수용액 (1×15 ㎖)에 이어서 물 (1×15 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 감압하에 황색 오일로 농축하였다. 헥산-에틸 아세테이트 (5:1)로 용리하면서, 크로마토그래피 (플래시 실리카 겔 70 g)하여 담색 회백색 오일로서의 1차 실릴 에테르 1.81 g (94 %)를 제조하였다. 실온에서 테트라히드로푸란 2 ㎖ 중의 실릴 에테르 (506 ㎎, 2.00 mmol) 및 디-tert-부틸 디에틸포스포르아미디트 (93 %의 600 ㎕, 2.00 mmol)의 용액에 1-H-테트라졸 (421 ㎎, 6.01 mmol)을 첨가하였다. 45 분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 -10 ℃로 냉각시키고, 염화 메틸렌 3.6 ㎖ 중의 m-클로로페르벤조산의 용액 (99 %의 450 ㎎, 2.61 mmol)으로 신속하게 처리하였다. 불투명한 백색 반응물을 실온으로 가열하고 15 분 동안 교반하였다. 이 반응물을 아황산 나트륨 10 % 수용액 4 ㎖로 켄칭하고, 10 분 동안 세차게 교반하고, tert-부틸 메틸 에테르 15 ㎖로 희석하고, 아황산 나트륨 10 % 수용액 (2×10 ㎖)에 이어서 0.5N 수산화 나트륨 수용액 (2×10 ㎖)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 감압하에 농축하여 무색 오일 (941 ㎎)을 얻었고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. 조 포스페이트를 테트라히드로푸란 10 ㎖ 중에 용해시키고, 0 ℃로 냉각시키고, 테트라히드로푸란 (2.4 ㎖, 2.4 mmol) 중의 테트라-n-부틸암모늄 플로라이드의 1M 용액으로 처리하였다. 0 ℃에서 20 분 동안 실온에서 1.5 시간 동안 교반한 후, 반응물을 tert-부틸 메틸 에테르로 희석하고 물 (1×10 ㎖)에 이어서 염수 (1×10 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 감압하에 황색 오일로 농축하였다. 에틸 아세테이트-헥산 (3:1)로 용리하면서, 크로마토그래피 (플래시 실리카 겔 50 g)하여 회백색 오일로서의 1차 알콜 525 ㎎ (79 %)를 얻었다. 실온에서 아세토니트릴-사염화 탄소 (1:1, 1.49 ㎖) 중의 알콜 용액 (123 ㎎, 0.372 mmol)에 물 (1.1 ㎖)에 이어서 페리오드화 나트륨 (239 ㎎, 1.12 mmol) 및 루테늄(III)클로라이드 수화물 (1.8 ㎎, 0.0082 mmol)을 첨가하였다. 갈색 혼합물을 실온에서 55 분 동안 신속하게 교반하였다. 감압하에 농축한 후, 크로마토그래피 (플래시 실리카 겔 8 g, 10 % 메탄올-에틸 아세테이트로 용리)하여, 보라색 오일로서의 표제 화합물 1.9 ㎎ (85 %)를 얻었다. 500 MHz1H NMR (CDCl3) δ 7.49 (d, 1H, J=7.53 Hz), 7.30-7.15 (m, 3H), 3.77 (s, 2H), 1.51 (s, 18H).
크립토피신 55 (2'-포스파틸)페닐아세테이트 이-나트륨 염 (7') (LSN 374122)의 제조
실온에서 염화 메틸렌 400 ㎕ 중의 6'의 용액 (84 ㎎, 0.081 mmol)에 1,4-디옥산 중의 염화 수소의 4.0 M 용액 (81 ㎕, 0.33 mmol)을 첨가하였다. 담황색 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 감압하에 회백색 발포체로 농축한 후, 조 인산화 이수소를 테트라히드로푸란 614 ㎕ 중에 용해시키고, 수산화 나트륨의 5.00N 수용액 (33 ㎕, 0.163 mmol)로 처리하였다. 10 분 동안 교반한 후, 이 혼합물을 감압하에 황갈색 발포체로 농축하였다. 조 염을 뜨거운 아세토니트릴 1 ㎖ 및 뜨거운 물 0.1 ㎖ 중에 용해시켰다. 불용성물을 여과 제거하고, 여과액을 감압하에 농축하여 백색 고체로서의 표제 화합물 69 ㎎ (87 %)을 얻었다.
크립토피신 55 니코티노에이트 히드로클로라이드 염 (8') (LSN 368265)의 제조
실온에서 피리딘 354 ㎕ 중의 1'의 용액 (50 ㎎, 0.071 mmol)에 니코티노일 클로라이드 히드로클로라이드 (15 ㎎, 0.085 mmol)에 이어서 트리에틸아민 (23 ㎕, 0.170 mmol)을 첨가하였다. 1.5 시간 동안 교반한 후, 4-디메틸아미노 피리딘 (8.6 ㎖, 0.071 mmol)을 첨가하였다. 5 시간 동안 교반한 후, 추가의 트리에틸아민 (23 ㎕, 0.170 mmol), 4-디메틸아미노 피리딘 (8.6 ㎎, 0.071 mmol) 및 니코티노일 클로라이드 히드로클로라이드 (15 ㎎, 0.085 mmol)을 피리딘 린스 50 ㎕와 함께 첨가하였다. 18 시간 동안 교반한 후, 반응물을 포화 중탄산 나트륨 수용액 0.5 ㎖로 처리하고 염화 메틸렌으로 세척하였다 (4×1 ㎖). 모아진 유기 추출물을 건조(Na2SO4)하고, 여과하고, 진공 중에서 농축하여 밝은 갈색 오일로 농축하였다. 에틸 아세테이트-헥산 (3:1)로 용리하면서, 크로마토그래피 (플래시 실리카 겔 50 g)하여 유리 염기로서 백색 발포체를 생성시켰다. 메틸렌 클로라이드 10 mL 중에 용해시키고, 디에틸 에테르(90 mL, 0.090 밀리몰) 중 염화수소의 1.0 M 용액으로 처리하였다. 투명한 무색 용액을 5 분 동안 실온에 방치하고, 용매를 진공 중에서 제거하여 표제 화합물 51 ㎎을 백색 발포체로 수득하였다.
크립토피신 55 N-메틸피리디늄 아세테이트염(9')(LSN 366550)의 제조
메틸렌 클로라이드 96 ㎖ 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(40 ㎎, 0.193 밀리몰)의 용액을 실온에서 무수 메틸렌 클로라이드 400 ㎖ 중 1(105 ㎎, 0.149 밀리몰), Na-Ne-di-t-Boc-(L)-리신(67 ㎎, 0.193 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(18 ㎎, 0.149 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 4 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 추가의 Na-Ne-di-t-Boc-(L)-리신 10 ㎎(0.030 밀리몰)와, 메틸렌 클로라이드 100 중의 용액으로 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 6.1 ㎎(0.030 밀리몰)로 처리하였다. (3:1, 0.5 ㎖)로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트-헥산(3:1)으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공 중 에서 백색 발포체로 농축시키고, 2-플루오로-1-메틸피리디늄 p-톨루엔술포네이트(0.039 밀리몰)을 더 사용하여 상기 조건에 가하였다. 1.5 시간 동안 교반시킨 후, 반응물을 상기와 같이 처리하여 조 백색 발포체를 생성시켰다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 21 g, 1:1에 이어 4:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 30 ㎎(47 %) 수득하였다.
크립토피신55N-t-Boc-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트(10')(LSN 382049)의 제조
무수 메틸렌 클로라이드 400 ㎖ 중 1(105 ㎎, 0.149 밀리몰), N-t-Boc-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트(16 ㎎, 0.049 밀리몰) 및 4-디메틸아미노 피리딘(18 ㎎, 0.149 밀리몰)의 용액을 첨가하였다. 2 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 6.1 ㎎(0.030 밀리몰)로 처리하였다. (3:1, 0.5 ㎖)로 희석하고, 10 분 동안 교반시키고, 셀라이트 마개로 여과시키고, 에틸 아세테이트-헥산(3:1)으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공 중 에서 백색 발포체로 농축시키고, 에틸 아세테이트:헥산으로 세척하였다. 여액 및 세척물을 진공 중에서 농축하여 무색 오일을 수득하였다. 크로마토그래피(플래쉬 실리카 겔 14 g, 2:1/에틸 아세테이트-헥산)시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 29 ㎎ 수득하였다.
<크립토피신 55 3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트 히드로클로라이드 염 (11')(LSN 382048)의 제조>
1,4-디옥산(34 ㎖, 0.542 밀리몰) 중 염화수소의 4.0 M 용액을 실온에서 메틸렌 클로라이드 274 ㎖ 중 18(24 ㎎, 0.027 밀리몰)의 용액에 첨가하였다. 2.5 시간 동안 교반시킨 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 백색 발포체로 24 ㎎을 수득하였다.
<크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-프롤리네이트(16')(LSN 382926)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 100 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.3 mg, 0.0027 밀리몰), N-t-Boc-(L)-프롤린 (8.7 mg, 0.040 밀리몰) 및 1'(19 mg, 0.027 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 35 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(8.3 mg, 0.040 밀리몰) 용액을 가하였다. 45 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 3:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 11 mg(46 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-프롤리네이트 염화수소염(17')(LSN 382927)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 122 ㎕ 중의 16'(11 mg, 0.012 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(15 ㎕, 0.061 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 5 시간 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 고체로서 표제 화합물 10 mg(100 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-글리시네이트(18')(LSN 379403)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 490 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(2.0 mg, 0.0167 밀리몰), N-t-Boc-글리신 (44 mg, 0.251 밀리몰) 및 1'(118 mg, 0.167 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 67 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(52 mg, 0.251 밀리몰) 용액을 가하였다. 50 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 1 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 19 g, 에틸아세테이트-헥산 3:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 138 mg(96 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 글리시네이트 염화수소염(19')(LSN 368422)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 471 ㎕ 중의 18'(122 mg, 0.141 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(178 ㎕, 0.707 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 1 시간 20 분 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 120 mg(99 %, 디옥산 7 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-β-알라니네이트(20')(LSN 379404)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 400 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(18 mg, 0.145 밀리몰), N-t-Boc-β-알라닌 (41 mg, 0.217 밀리몰) 및 1'(102 mg, 0.145 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 82 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(45 mg, 0.217 밀리몰) 용액을 가하였다. 3.5 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 1 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 21 g, 에틸아세테이트-헥산 2:1 그 후, 4:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 121 mg(95 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 β-알라니네이트 염화수소염(21')(LSN 377718)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 452 ㎕ 중의 20'(119 mg, 0.136 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(170 ㎕, 0.679 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 2 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 110 mg(96 %, 디옥산 4 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-γ-아미노부티레이트(22')(LSN 379401)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 150 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(8 mg, 0.068 밀리몰), N-t-Boc-4-아미노부티르산 (18 mg, 0.088 밀리몰) 및 1'(48 mg, 0.068 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 50 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(18 mg, 0.088 밀리몰) 용액을 가하였다. 45 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 5 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 3:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 55 mg(90 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 γ-아미노부티레이트 염화수소염(25')(LSN 368513)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 297 ㎕ 중의 22'(53 mg, 0.059 밀리몰) 용액에 디에틸 에테르(297 ㎕, 0.297 밀리몰) 중의 1.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 백색 고체로서 침전된 출발 물질을 부가적인 염화메틸렌 150 ㎕으로 재용해시켰다. 4 시간 동안 교반한 후, 염화수소 용액 59 ㎕(0.059 밀리몰)를 또한번 가하였다. 계속해서 14 시간 동안 더 교반한 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 49 mg(100 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-알라니네이트(26')(LSN 379405)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 400 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(18 mg, 0.146 밀리몰), N-t-Boc-(L)-알라닌 (41 mg, 0.219 밀리몰) 및 1'(103 mg, 0.146 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 87 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(45 mg, 0.219 밀리몰) 용액을 가하였다. 5 시간 50 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물에 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(6.0 mg, 0.029 밀리몰), N-t-Boc-(L)-알라닌 (5.5 mg, 0.029 밀리몰) 및 4-메틸아미노 피리딘의 몇 개의 결정을 더 가하였다. 1 시간 동안 교반한 후, 에틸아세테이트-헥산(3:1, 1 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 22 g, 에틸아세테이트-헥산 1.5:1 그 후, 2:1 그 후, 4:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 96 mg(75 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-알라니네이트 염화수소염(28')(LSN 377719)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 361 ㎕ 중의 26'(95 mg, 0.108 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(135 ㎕, 0.542 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 2.5 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 표제 49 mg(100 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-(D)-알라니네이트(29')(LSN 382426)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 130 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.4 mg, 0.0035 밀리몰), N-t-Boc-(D)-알라닌 (10 mg, 0.053 밀리몰) 및 1'(25 mg, 0.035 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 47 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(11 mg, 0.053 밀리몰) 용액을 가하였다. 5.5 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물에 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 2:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 26 mg(83 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (D)-알라니네이트 염화수소염(30')(LSN 382425)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 274 ㎕ 중의 29'(24 mg, 0.027 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(34 ㎕, 0.137 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 3.5 시간 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 발포체로서 표제 화합물 24 mg(100 %, 디옥산 8 중량%에 대하여 조정))을 얻었다:
<크립토피신 55 Nα-Nε-디-t-Boc-(L)-리시네이트(31')(LSN 379406)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 400 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(18 mg, 0.149 밀리몰), Nα-Nε-디-t-Boc-(L)-리신(67 mg, 0.193 밀리몰) 및 1'(105 mg, 0.149 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 96 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(40 mg, 0.193 밀리몰) 용액을 가하였다. 4 시간 동안 교반한 후, 추가의 Nα-Nε-디-t-Boc-(L)-리신(10 mg, 0.0303 밀리몰) 및 염화메틸렌 100 ㎕ 중의 용액으로서 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(6.1 mg, 0.030 밀리몰) 용액을 가하였다. 1 시간 동안 더 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 1 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 백색 발포체를 얻고, 이를 Nα-Nε-디-t-Boc-(L)-리신(34 mg, 0.097 밀리몰), 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(20 mg, 0.097 밀리몰) 및 4-메틸아미노 피리딘(9.1 mg, 0.075 밀리몰)를 사용하여 상기 조건에 다시 적용시켰다. 1 시간 동안 교반한 후, 반응을 상기와 같이 수행하여 조질의 백색 발포체로서 표제 화합물 112 mg(73 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-리신 디-염화수소염(32')(LSN 377562)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 345 ㎕ 중의 31'(107 mg, 0.103 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(155 ㎕, 0.621 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 4 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 여과시켰다. 수집한 백색 고체를 염화메틸렌(2 x 1 ml)으로 세척하고, 표제 화합물 87 mg(93 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 Nα-Nε-디-t-Boc-(D)-리시네이트(33')(LSN 382504)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 140 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.4 mg, 0.035 밀리몰), Nα-Nε-디-t-Boc-(D)-리신(247 mg, 0.069 밀리몰) 및 1'(24 mg, 0.035 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 30 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(14 mg, 0.0035 밀리몰) 용액을 가하였다. 70 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 2:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 30 mg(87 %)을 얻었다:
<크립토피신 55(D)-리신 디-히드로클로라이드 염(34')(LSN 377503)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 181 ㎕ 중의 33' 용액(28 mg, 0.027 밀리몰)에 1,4-디옥산(41 ㎕, 0.162 밀리몰) 중의 4 M 염화수소 용액을 가하였다. 5.5 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 표제 화합물 25 mg(96 %, 디옥산 4.5 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-γ-t-부틸 에스테르-(L)-글루타메이트(35')(LSN 382366)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 150 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.5 mg, 0.0038 밀리몰), N-t-Boc-(L)-글루탐산γ-t-부틸 에스테르 (17 mg, 0.057 밀리몰) 및 1'(27 mg, 0.038 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 41 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(12 mg, 0.057 밀리몰) 용액을 가하였다. 60 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(2:1, 2 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(2:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 1:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 28 mg(74 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-α-글루타메이트 염화수소염(36')(LSN 382367)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 232 ㎕ 중의 35'(23 mg, 0.023 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(29 ㎕, 0.116 밀리몰) 중의 4 M 염화수소 용액을 가하였다. 8.5 시간 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 20 mg(97 %, 디옥산 3 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-β-t-부틸 에스테르-(L)-아스파르테이트(37')(LSN 382501) 및 크립토피신 55 N-t-Boc-β-t-부틸 에스테르-(D)-아스파르테이트(39')(LSN 387040) 의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 1.0 ml 중의 4-메틸아미노 피리딘(2.0 mg, 0.066 밀리몰), N-t-Boc-(L)-글루탐산 β-t-부틸 에스테르 (144 mg, 0.499 밀리몰) 및 1'(176 mg, 0.249 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 200 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(103 mg, 0.499 밀리몰) 용액을 가하였다. 45 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 셀라이트 88 mg로 처리라고, 에틸아세테이트-헥산(3:1, 2 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 30 g, 에틸아세테이트-헥산 2:1)하여 혼합된 분획물과 함께 순수한 37'(보다 낮은 Rf)을 얻었다. 혼합된 분획물을 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 25 g, 에틸아세테이트-헥산 1:1 그 후, 2:1 그 후, 3:1)하여 순수한 39'(보다 높은 Rf)와 함께 보다 순수한 37'을 얻었다. 순수한 37'을 포함하는 모든 분획물은 합하여 백색 발포체로서 149 mg(61 %)을 얻고, 순수한 39'를 포함하는 모든 분획물은 합하여 백색 발포체로서 56 mg(23 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-아스파르테이트 염화수소염(38')(LSN 382502)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 498 ㎕ 중의 37'(146 mg, 0.149 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(374 ㎕, 1.49 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 19 시간 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 131 mg(100 %, 디옥산 2 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 (D)-아스파르테이트 염화수소염(40')(LSN 387039)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 271 ㎕ 중의 39'(53 mg, 0.054 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(136 ㎕, 0.542 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 14 시간 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 47 mg(94 %, 디옥산 6 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-α-t-부틸 에스테르-(L)-글루타메이트(41')(LSN 382572)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 120 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.4 mg, 0.0033밀리몰), N-t-Boc-(L)-글루탐산 α-t-부틸 에스테르 (15 mg, 0.049 밀리몰) 및 1'(23 mg, 0.033 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 40 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(10 mg, 0.049 밀리몰) 용액을 가하였다. 45 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 2:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 24 mg(75 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-γ-글루타메이트 염화수소염(42')(LSN 382514)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 212 ㎕ 중의 41'(21 mg, 0.021 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(53 ㎕, 0.212 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 23.5 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트의 플러그를 통과시켰다. 이를 진공하에서 농축시켜 백색 발포체로서 표제 화합물 20 mg(100 %, 디옥산 6 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 N,N'-디-t-Boc-(S)-2,3-디아미노프로피오네이트(43')(LSN 382765)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 110 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.3 mg, 0.0030밀리몰), N,N'-디-t-Boc-(S)-2,3-디아미노프로피온산(18 mg, 0.060 밀리몰) 및 1'(21 mg, 0.030 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 39 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(12 mg, 0.060 밀리몰) 용액을 가하였다. 70 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 15 g, 에틸아세테이트-헥산 2:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 24 mg(80 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (S)-2,3-디아미노프로피오네이트 염화수소염(44')(LSN 382764)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 211 ㎕ 중의 43'(21 mg, 0.021 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(42 ㎕, 0.169 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 5 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 표제 화합물 18.5 여 백색 발포체로서 표제 화합물 24 mg(80 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-세리네이트(45')(LSN 384340)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 200 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.6 mg, 0.0053 밀리몰), N-t-Boc-O-tert-부틸디메틸실릴(L)-세린11(51 mg, 0.160 밀리몰) 및 1'(38 mg, 0.053 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 69 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(33 mg, 0.160 밀리몰) 용액을 가하였다. 4 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(2:1,2 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(2:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 회백색 오일을 얻었고, 이를 다음 단계에 사용하였다. 실온에서 테트라히드로푸란 268 ㎕ 중의 조질 실릴 에테르(54 mg, 0.054 밀리몰)의 용액에 불화수소-피리딘(HF-피리딘 (Aldrich) 0.5 g, 테트라히드로푸란 4 ml 및 피리딘 1 ml로부터 제조됨)의 스톡 용액 268 ㎕을 가하였다. 4 시간 동안 교반한 후, HF-피리딘 (Aldrich) 스톡 용액 67 ㎕을 더 가하였다. 30 분 동안 교반한 후, 반응물을 중탄산나트륨 포화 용액 0.6 ml으로 처리하고, 에틸아세테이트(1 x 3 ml)로 세척하였다. 합한 유기 물질을 건조(Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공하에서 농축하여 담황색 발포체를 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 16 g, 에틸아세테이트-헥산 3:1 그 후, 6:1)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 26 mg(44 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 (L)-세리네이트 염화수소염(46')(LSN 384339)의 제조>
실온에서 염화메틸렌 291 ㎕ 중의 45'(26 mg, 0.029 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(369 ㎕, 0.146 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 2.5 시간 동안 교반한 후, 무색 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 백색 발포체로서 표제 화합물 23 mg(94 %, 디옥산 2 중량%에 대하여 조정)을 얻었다:
<크립토피신 55 글리시딜글리시네이트 염화수소염(47')(LSN 387750)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 128 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.3 mg, 0.0026 밀리몰), N-t-Boc-글리시딜글리시네이트(12 mg, 0.051 밀리몰) 및 1'(18 mg, 0.026 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 28 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(11 mg, 0.051 밀리몰)용액을 가하였다. 3 시간 동안 교반한 후, N,N-디메틸포름아미드 30 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드 (22 mg, 0.102 밀리몰)용액 및 N-t-Boc-글리시딜글리시네이트(24 mg, 0.102 밀리몰)를 더 가하였다. 1.5 시간 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 12 g, 에틸아세테이트 중의 1 % 메탄올)하여 백색 발포체로서 얻었고, 이를 다음 단계에 사용하였다. 실온에서 염화메틸렌 130 ㎕ 중의 N-Boc-글리시딜글리시네이트(12 mg, 0.031 밀리몰) 용액에 1,4-디옥산(16 ㎕, 0.065 밀리몰) 중의 4.0 M 염화수소 용액을 가하였다. 3.5 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 표제 화합물 11 mg(100 %)을 얻었다:
<크립토피신 55 3,6,9-트리옥사데카노에이트(48')(LSN 387414)의 제조>
실온에서 무수 염화메틸렌 100 ㎕ 중의 4-메틸아미노 피리딘(0.3 mg, 0.0026 밀리몰), 3,6,9-트리옥사데카노산(7.8 ㎕, 0.051 밀리몰) 및 1'(18 mg, 0.026 밀리몰) 용액에 염화메틸렌 28 ㎕ 중의 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(11 mg, 0.051 밀리몰)용액을 가하였다. 30 분 동안 교반한 후, 흐린 백색 반응 혼합물을 에틸아세테이트-헥산(3:1, 0.5 ml)로 희석하고, 10 분 동안 교반한 후, 셀라이트의 플러그를 통하여 여과시키고, 에틸아세테이트-헥산(3:1)로 세척하였다. 여액 및 세척액을 진공하에서 농축하여 무색 오일을 얻었다. 이를 크로마토그래피(플래쉬 실리카겔 12 g, 에틸아세테이트 중의 2 % 메탄올)하여 백색 발포체로서 표제 화합물 19 mg(86 %)을 얻었다:

Claims (26)

  1. 하기 화학식 Ⅰ의 화합물, 또는 그의 제약상 허용 가능한 염 또는 용매화합물.
    <화학식 Ⅰ>
    상기 식 중,
    Ar은 페닐, 모든 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 치환된 헤테로방향족기, 비치환된 헤테로방향족기, 헤테로시클릭, C1-C12알킬, C2-C12알케닐, C2-C12알키닐, NR51R52, COR52, OR53및 식의 Ar'
    {여기서,
    R51은 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R52는 수소 및 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R53은 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R54는 수소, C1-C6알킬, C1-C6알킬(R57'R57"R57'''), 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 헤테로시클릭, 페닐, 할로겐, 4-(t-부틸디메틸실릴옥시)벤질트리페닐포스포늄, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, N(R59)R60, NHOR61, NHCHR61', CN, NO2, 할로겐, OR62, CH2(O)R62', CH2OC(O)R95, CH2N(R96)R96', COR100, (C1-C6알킬)OR100,및 SR63[여기서, R95는 -R98NH3로 이루어진 군으로부터 선택되고; R96및 R96'각각은 독립적으로 수소 및 C1-C6알킬, -R97NH3및 -R99NR99'R99"(여기서, R97은 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R98은 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R99는 C1-C6알킬이고; R99'및 R99"각각은 독립적으로 수소와, R101이 C1-C6알킬이고, R102가 C1-C6알킬이고, R103이 C1-C6알킬인 Si(R101R102R103)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R104는 C(O)C1-C6알킬N(R106)(R59)R60, C(O)C1-C6알킬N+, 융합된 비시클릭 및 NHR105N(R106)(R59)R60<여기서, R105는 C(O)C1-C6알킬, C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, R106은 수소, C1-C6알킬, CO(O)R107<<여기서, R107은 수소, C1-C6알킬과, R108이 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고 R109가 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고 R110이 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 CR108R109R110으로 이루어진 군으로부터 선택됨>>으로 이루어진 군으로부터 선택됨>으로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R111은 수소, C1-C6알킬 및 C(O)OR107로 이루어진 군으로부터 선택됨]으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R55는 수소, C1-C6알킬, C(R57'R57"R57'''), 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 페닐, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', CN, NO2, 할로겐, OR62및 SR63으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R56은 수소, C1-C6알킬, C(R57'R57"R57'''), 단순한 비치환된 방향족, 단순한 치환된 방향족, 페닐, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', (C1-C6)알킬NR59R60, CN, NO2, 할로겐, OR104,CR104, OR62및 SR63(여기서, R57은 수소 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R57'은 수소, 할로겐 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R57"은 수소, 할로겐 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R57'''은 수소, 할로겐 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R58은 수소 및 C1-C12알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R59는 수소, (C1-C6)알킬, t-부톡시카르보닐, 카르보-t-부톡시(t-BOC) 및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R60은 수소 및 (C1-C6)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R61'은 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R61'은 수소, OR64, CH2NHR65, NHR65'및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R62는 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R62'은 수소, OH, OR62및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R63은 수소 및 C1-C6알킬<여기서, R64는 수소, (C1-C6)알킬, R66이 수소, C1-C6알킬 및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고 R67이 수소 및 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 CH2NR66R67로 이루어진 군으로부터 선택되고; R65는 수소, C1-C6알킬, NH2및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R65'은 수소, C1-C6알킬, NH2및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택됨>로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택됨}으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R1및 R2각각은 독립적으로 할로겐, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트, 포스페이트, OR31, SR31, NR31, OH, SH, NR92, R93, NR94및 NH2(여기서, R92, R93및 R94각각은 독립적으로 C1-C6알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨)로 이루어진 군으로부터 선택되되, 단
    R1및 R2중 하나는 OR31, SR31, R31, OH 및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는
    R1및 R2는 18번 탄소 및 19번 탄소와 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노(C1-C6) 알킬포스페이트 고리를 형성할 수 있거나, 또는
    R1및 R2는 함께 18번 탄소 및 19번 탄소 사이에 제2의 결합을 형성할 수 있고;
    R3는 저급 알킬기이고;
    R4는 H 또는 OH이고;
    R5는 H 또는 OH이고;
    R4및 R5는 함께 C13및 C14사이에 제2의 결합을 형성할 수 있고;
    R6은 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로알콕시벤질 또는 디할로알콕시벤질기, B-고리 헤테로방향족, 치환된 헤테로방향족, B-고리(C1-C6)알킬, (C3-C8)시클로알킬, 치환된 C3-C8시클로알킬, 치환된 (C1-C6)알킬, 하기 화학식 Ⅲ'의 기 및 Ⅲ"의 기로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체이고;
    R7은 NR51R52, R53NR51R52, OR53, H 및 저급 알킬기(여기서, R51및 R52는 독립적으로 C1-C3알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R53은 C1-C3알킬임)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R8은 H 또는 저급 알킬기이거나, 또는
    R7및 R8은 시클로프로필 고리를 형성할 수 있고;
    R9는 H, 저급 알킬기, 불포화 저급 알킬, 저급 알킬-C3-C5시클로알킬 및 벤질로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R10은 H 또는 저급 알킬기이고;
    R11은 수소, OH, 저급 알킬기, 치환된 페닐, 벤질, 치환된 벤질 및 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R14는 수소 및 저급 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R30은 수소 또는 C1-C6알킬이거나, 또는
    R30은 11번 탄소에서 N과 함께 3 내지 7원 시클릭 고리를 형성할 수 있고;
    R31은 P, S, (C1-C12)알킬, B, R32및 Si{여기서, R32는 아미노산, 탄수화물, 아미노 당, (당류)q, C(O)R33및 식[여기서, R33은 R37R38, R38, R37N(R20')R38, R37N(R20')(C1-C6)알킬C(O)R38, R37N(R20')C(O)R38, R37O(C1-C6)알킬O(C1-C6)알킬O(C1-C6)알킬O(C1-C6)알킬 및 R37(NR18'R20')R38(여기서, R20'은 수소, C1-C6알킬과, R21'이 수소 및 (C1-C6)알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 -CO2R21'로 이루어진 군으로부터 선택되고; R37은 (C1-C6)알킬이고; R38은 R39가 H 또는 (C1-C6)알킬인 COOR39,NH2, (NR18'R20'), 헤테로시클릭, 헤테로방향족, OH, (C1-C6)알킬 및 아미노산<식 중, R40, R41및 R42각각은 독립적으로 수소, R43이 C1-C6알킬인 OR43, 할로, NH2, NO2, R46이 H, Na, (C1-C6)알킬 및 -C(CH3)3로 이루어진 군으로부터 선택된 OPO(OR46)2, R44가 C1-C6알킬인 -OR44페닐과, 비치환된 단순 방향족기 및 치환된 단순 방향족기로 이루어진 군으로부터 선택된 R45임>임)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R34는 (C1-C4)알킬이고; R35는 수소 또는 (C1-C3)알킬이고; R36은 수소, OH, 할로, (C1-C3)알킬, OR34, NO2, NH2및 헤테로방향족임]으로 이루어진 군으로부터 선택됨}로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R50은 수소 또는이고;
    n은 0, 1 또는 2이고;
    m은 0, 1 또는 2이고;
    p은 0, 1 또는 2이고;
    q는 2, 3 또는 4이고;
    x는 O, C, S, NH 및 알킬아미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    Y는 C, O, NH, S, SO, SO2및 알킬아미노로 이루어진 군으로부터 선택되되, 단,
    R1이 할로겐, OH, OR31, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트 및 포스페이트으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R2가 OH, NH2, NR31및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는 R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성하거나, 또는 R1및 R2가 함께 제2의 결합을 형성하고; R3가 저급 알킬이고; R4및 R5가 H이거나, 또는 R4및 R5가 함께 C13및 C14사이에 이중 결합을 형성하고; R6이 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디아할로히드록시벤질, 할로히드록시벤질 또는 디할로히드록시벤질이고; R7, R8, R9및 R10각각이 독립적으로 H 또는 저급 알킬기이고; X 및 Y 각각이 독립적으로 O, NH 또는 알킬아미노이고, R50이이고, R11이 수소이면,
    Ar은 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족, 비치환된 헤테로방향족 및 치환된 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되지 않거나, 또는
    Ar이 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족, 비치환된 헤테로방향족 및 치환된 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R50이이고, R11이 수소이면,
    R2는 할로겐, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트, 포스페이트, OR31및 SR31로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는,
    R1이 할로겐, OH, OR31, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트 및 포스페이트으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R2가 OH, NH2, NR31및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는 R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성하거나, 또는 R1및 R2가 함께 제2의 결합을 형성하고, R3가 저급 알킬이고, R4가 H이고 R5가 H이고 R50이 수소이고 R11이 수소이면,
    Ar은 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족 및 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되지 않거나, 또는
    R1이 할로겐, OH, OR31, SH, 아미노, 모노알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 트리알킬암모늄, 알킬티오, 디알킬술포늄, 술페이트 및 포스페이트으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R2가 OH, NH2, NR31및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 또는 R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성하거나, 또는 R1및 R2가 함께 제2의 결합을 형성하고, R3가 저급 알킬이고, R4가 H이고 R5가 H이고 R50이 수소이고 R11이 수소이거나; 또는 R50이및 수소로 이루어진 군으로부터 선택되고; R11이 OH, 저급 알킬기, 치환된 페닐, 벤질, 치환된 벤질 및 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되면,
    Ar은 C1-C12알킬, C1-C12알키닐, 페닐, 단순한 비치환된 방향족, 치환된 방향족 및 치환된 헤테로방향족 및 비치환된 헤테로방향족으로 이루어진 군으로부터 선택되지 않거나, 또는
    R3가 저급 알킬이고; R4및 R5가 H이거나, 또는 R4및 R5가 함께 C13및 C14사이에 이중 결합을 형성하고; R6이 벤질, 히드록시벤질, 알콕시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로히드록시벤질 또는 디할로히드록시벤질이고; R7, R8, R9및 R10각각이 독립적으로 H 또는 저급 알킬기이고; X 및 Y 각각이 독립적으로 O, NH 또는 알킬아미노이고; Ar이 화학식 Ar'이고,
    R54, R55, R56중 하나가 알킬 또는 할로겐으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R1및 R2가 함께 에폭시드 고리, 아지리딘 고리, 에피술피드 고리, 술페이트 고리, 시클로프로필 고리 또는 모노알킬포스페이트 고리를 형성할 수 있거나, 또는 R1및 R2가 함께 C18및 C19사이에 제2의 결합을 형성할 수 있거나; 또는 R2가 OH 및 SH로 이루어진 군으로부터 선택되면,
    R54, R55, R56중 적어도 2 개는 C1-C6알킬, 단순한 방향족, 페닐, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', CN, NO2, 할로겐, OR62및 SR63으로 이루어진 군으로부터 선택되어만 하거나; 또는
    R3가 저급 알킬이고; R4및 R5가 H이거나, 또는 R4및 R5가 함께 C13및 C14사이에 이중 결합을 형성하고; R6가 B-고리 헤테로방향족, 치환된 헤테로방향족, B-고리 (C1-C6)알킬, (C3-C8)시클로알킬, 치환된 C3-C8시클로알킬, 치환된 (C1-C6)알킬, 화학식 Ⅲ'의 기 및 화학식 Ⅲ"의 기이고; X 및 Y 각각이 독립적으로 O, NH 또는 알킬아미노이면,
    Ar은 페닐, 또는 모든 단순한 비치환된 방향족 또는 치환된 방향족 또는 헤테로방향족기, C1-C12알킬 및 C1-C12알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되지 않는다.
    <화학식 Ⅲ'>
    <화학식 Ⅲ">
    상기 식 중,
    R15, R16및 R17각각은 독립적으로 수소, OR18, 할로, NR18'R19', NO2, OPO3H2, OR19페닐, SCH2페닐, CONH2, CO2H, PO3H2, SO2R23및 ZZ[여기서, R18은 수소, 아릴, C1-C6알킬, C(O)R90및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)로 이루어진 군으로부터 선택되고; R18'은 수소, (C1-C6)알킬 및 C(O)R90'으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R19는 C1-C6알킬, C(O)R90"및 플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC)이고; R19'은 수소, (C1-C6)알킬 및 C(O)R90'''(여기서, R90, R90', R90"및 R90'''각각은 독립적으로 수소, (C1-C6)알킬, R91이 (C1-C6)알킬, 아릴 및 수소로 이루어진 군으로부터 선택된 OR91과, 아릴로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R23은 수소 및 (C1-C3)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, ZZ는 단순한 비치환된 방향족기 및 단순한 치환된 방향족기로 이루어진 군으로부터 선택됨]로 이루어진 군으로부터 선택되고,
    Z는 -(CH2)n-, -(CH2)p-O-(CH2)m- 및 (C3-C5) 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서, Y가 O인 화합물.
  3. 제2항에 있어서, X가 O인 화합물.
  4. 제3항에 있어서, R6이 벤질, 히드록시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로알콕시벤질 및 디할로알콕시벤질로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물.
  5. 제4항에 있어서, R9가 이소부틸이고 R10이 수소인 화합물.
  6. 제5항에 있어서, R8및 R7각각이 독립적으로 수소 또는 저급 알킬인 화합물.
  7. 제3항에 있어서, R11이 수소인 화합물.
  8. 제7항에 있어서, R50이 식(P288) 인 화합물.
  9. 유효량의 제1항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에 있어서 미소관 결합의 파괴 방법.
  10. 유효량의 제1항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 생체 외에 있어서 미소관 결합의 파괴 방법.
  11. 유효량의 제1항의 화합물을 그를 필요로 하는 환자에 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에 있어서 종양의 치료 방법.
  12. 제1항의 화합물과 1종 이상의 그의 제약상 허용 가능한 희석제 또는 담체를 포함하는 제형.
  13. 진균류로 감염되었거나 또는 감염되기 쉬운 동물의 살진균적 유효량의 제1항의 화합물에 의한 치료 방법.
  14. 제13항에 있어서, 동물이 포유동물인 방법.
  15. 제13항에 있어서, 동물이 진균류로 감염된 것인 방법.
  16. 제1항에 있어서, Y가 NH인 화합물.
  17. 제16항에 있어서, R50이 식(P288) 인 화합물.
  18. 제17항에 있어서, X가 O인 화합물.
  19. 제18항에 있어서, R6이 벤질, 히드록시벤질, 할로히드록시벤질, 디할로히드록시벤질, 할로알콕시벤질 및 디할로알콕시벤질로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물.
  20. 제19항에 있어서, R9가 이소부틸이고 R10이 수소인 화합물.
  21. 제20항에 있어서, R8및 R7각각이 독립적으로 수소 또는 저급 알킬인 화합물.
  22. 제18항에 있어서, R11이 수소인 화합물.
  23. 제1항에 있어서, 크립토피신 55 아세테이트, 크립토피신 55 숙시네이트, 크립토피신 55(2'-디-t-부틸포스파틸)페닐아세테이트, 크립토피신 55(2'-포스파틸)페닐아세테이트, 크립토피신 55 니코티노에이트, 크립토피신 55 N-메틸피리미디늄, 크립토피신 55 N-t-Boc-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트, 크립토피신 55 3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-글리시네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-b-알라니네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-g-아미노부티레이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-알라니네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(D)-알라니네이트, 크립토피신 55 (D)-알라니네이트 및 크립토피신 55 Na-Ne-디-t-Boc-(L)-리시네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염인 화합물.
  24. 제1항에 있어서, 크립토피신 129, 크립토피신 138, 크립토피신 139, 크립토피신 145, 크립토피신 140 및 크립토피신 141로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염인 화합물.
  25. 제1항에 있어서, 크립토피신 152, 크립토피신 160, 크립토피신 255, 크립토피신 153, 크립토피신 154, 크립토피신 161, 크립토피신 234, 크립토피신 236, 크립토피신 247, 크립토피신 251 및 크립토피신 238로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염인 화합물.
  26. 제1항에 있어서, 크립토피신 55 숙시네이트 t-부틸 에스테르, 크립토피신 55 (2'-디-t-부틸포스파틸)페닐아세테이트, 2'-(디-t-부틸포스파틸)페닐아세트산, 크립토피신 55 (2'-포스파틸)페닐아세테이트, 크립토피신 55 니코티노에이트, 크립토피신 55 N-메틸피리디듐, 크립토피신 55 N-t-Boc-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-(D)-알라니네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-알라니네이트, 크립토피신 55 (L)-페닐알라니네이트, 크립토피신 55 (L)-히스티디네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-프롤리네이트, 크립토피신 55 (L)-프롤리네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-글리시네이트, 크립토피신 55 글리시네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-β-알라니네이트, 크립토피신 55 β-알라니네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-γ-아미노부티레이트, 크립토피신 55 γ-아미노부티레이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-알라니네이트, 크립토피신 55 (L)-알라니네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(D)-알라니네이트, 크립토피신 55 (D)-알라니네이트, 크립토피신 55 Nα-Nε-di-t-Boc-(L)-리시네이트, 크립토피신 55 (L)-리시네이트, 크립토피신 Nα-Nε-di-t-Boc-(D)-리시네이트, 크립토피신 55 (D)-리시네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-γ-t-부틸 에스테르-(L)-글루타메이트, 크립토피신 55 (L)-α-글루타메이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-β-t-부틸 에스테르-아스파테이트, 크립토피신 55 (D)-아스파테이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-α-t-부틸 에스테르-(L)-글루타메이트, 크립토피신 55 (L)-γ-글루타메이트, 크립토피신 55 N,N'-di-t-Boc-(S)-2,3-디아미노프로피오네이트, 크립토피신 55 (S)-2,3-디아미노프로피오네이트, 크립토피신 55 N-t-Boc-(L)-세리네이트, 크립토피신 55 (L)-세리네이트 및 크립토피신 55 숙시네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염인 화합물.
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