KR19990035847A - Use of Calendula Glycoside for Psoriasis Treatment - Google Patents
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Abstract
본 발명은 건선에 대한 약제로서 글리코시드 화합물의 용도, 이에 대한 화합물 및 이의 약제학적 제형에 관한 것이다.The present invention relates to the use of a glycoside compound as a medicament for psoriasis, a compound therefor and a pharmaceutical formulation thereof.
Description
미정제 칼렌듈라 식물 추출물은 오랫 동안 여러 질병을 치료하는 민간 약물로 사용되어 왔다. 예를 들어, 이러한 추출물은 소염 치료제 등에 사용되어 왔다.Undecided calendula plant extracts have long been used as a private drug to treat many diseases. For example, these extracts have been used in anti-inflammatory drugs and the like.
국제 특허 출원 WO 91/15218호에는 활성 성분으로서 6종 이상의 상이한 약초의 용매 추출물을 포함하는 건선에 대한 치료 조성물이 기재되어 있다. 상기 출원은 금잔화를 달인 즙이 외부적으로 위궤양 및 장궤양 대해 사용될 수 있을 뿐만 아니라 상처 및 궤양을 서서히 치료하기 위한 팩용으로 사용될 수 있다. 그러나, 금잔화 추출물이 사실상 건선에 대한 치료 조성물에서 활성 성분으로서 단독으로 사용되는 것은 언급되어 있지 않다.International patent application WO 91/15218 describes a therapeutic composition for psoriasis comprising a solvent extract of at least six different herbs as an active ingredient. The application can be used not only for marigold juice externally for stomach ulcers and bowel ulcers, but also for packs for the slow treatment of wounds and ulcers. However, it is not mentioned that marigold extract is used as active ingredient in a therapeutic composition for virtually psoriasis.
피자 씨.(Pizza C.) 및 데 토마시 엔.(de Tommasi N.)의 문헌(Phytochemistry, Vol. 27, number 7, pp 2205-2208(1988))에서는 칼렌듈라 아르벤시스(Arvensis)로부터 세스퀴테르펜 글리코사이드의 분리 및 구조가 기재되어 있다. 칼렌듈라 아르벤시스 L.(Compositae)은 소염제 및 해열 치료제로서 이탈리아의 민간 요법에서 사용되는 약초로 언급되어 있다. 상기 문헌에는 수득된 세스퀴테르펜 글리코사이드가 세포 증식 억제 활성이 있는 지 또는 건선 치료에 사용될 수 있는 지에 대해서는 언급하고 있지 않다.Pizza Mr. Pizza T. and de Tommasi N. Phytochemistry, Vol. 27, number 7, pp 2205-2208 (1988) The separation and structure of terpene glycosides is described. Calendula arbensis L. (Compositae) is an anti-inflammatory and antipyretic agent and is mentioned as an herb used in Italian folk remedies. This document does not mention whether the obtained sesquiterpene glycoside has cell proliferation inhibitory activity or can be used for the treatment of psoriasis.
마스콜로 엔.(Mascolo N.)등의 문헌(Phytotherapy Research, Vol. 1, pp 28-31 (1987))에는 금잔화 추출물이 소염 활성에 대해 공지된 것으로 기재되어 있다. 그러나, 금잔화 추출물이 항건선제로서 사용되는 것은 언급하고 있지 않다.Mascolo N. et al. (Phytotherapy Research, Vol. 1, pp. 28-31 (1987)) discloses that marigold extract is known for its anti-inflammatory activity. However, it is not mentioned that the marigold extract is used as an anti-psoriasis agent.
그라크자 엘.(Gracza L.)의 문헌(Planta Medica 53, page 227(1987))은 칼렌듈라 오피시날리스로부터의 다양한 산소 함유 테르펜 유도체가 기재되어 있다. 이들은 백대하 및 트리코모나시드 활성를 위해 사용되는 것으로 지적되어 있다. 그러나, 상기 문헌에는 항건선제로서 테르펜 유도체를 사용하는 것은 언급하고 있지 않다.Gracza L. (Planta Medica 53, page 227 (1987)) describes various oxygen containing terpene derivatives from calendula officinalis. They are indicated as being used for the action of T. monocytogenes and T. monocide. However, this document does not mention the use of a terpene derivative as an anti-psoriasis agent.
파자카스 비.(Fazakas B.)과 라크즈 지.(Racz G.)의 문헌(Famacia Vol. XIII, number 2, page 91(1965))는 또한 칼렌듈라 오피시날리스(Officinalis)의 꽃 추출물이 백대하(과잉 백대하)의 민간 요법 약초로 사용되며, 우수한 트리코모나시드(trichomonacide) 활성이 있는 것으로 기재되어 있다.Fazakas B. and Racz G. (Famacia Vol. XIII, number 2, page 91 (1965)) also found that flower extract of Calicula officinalis (Officinalis) It is used as a folk medicine herbal medicine of Baek Dae-ha (Excess Chow Taihak) and is said to have excellent trichomonacide activity.
그라크자 엘. 및 스자스즈 케이.(Szasz K.)의 문헌(Acta Pharm. Hung. 38, pp 118-125(1968))에는 상기 파자카스 및 라크즈에 의해 보고된 트리코모나시드 효과의 원인이 되는 용액 또는 용액들을 분리하고 확인할 목적으로 금잔화(칼렌듈라 오피시날리스) 꽃잎을 화학 분석한 것에 대해 보고되어 있다. 분리된 가장 활성인 액체 화합물은 분광 데이타에 따르면 테르펜성 알코올 및 테르펜성 락톤인 것으로 기재되어 있다.Grecjael. And Szasz K. (Acta Pharm. Hung. 38, pp. 118-125 (1968)) disclose a solution or solution which causes the tricomonaside effect reported by Pajakas and Lakz (Calendula officinalis) petals for the purpose of isolating and confirming the petals. The most active liquid compounds isolated are reported to be terpeneic alcohols and terpeneic lactones according to spectroscopic data.
자쿠포빅(Jakupovic) 등의 문헌(Planta Medica 54(3) pp 254-256(1988))에는 칼렌듈라 페르시카(persica)로부터 5종의 세스퀴테르펜 글리코사이드 추출 및 분리가 기재되어 있다. 그러나, 상기 문헌에는 추출되고 분리된 분자에 대해 효과적인 용도 또는 실제 용도에 대해서는 언급되어 있지 않다.Jakupovic et al. (Planta Medica 54 (3) pp 254-256 (1988)) describe the extraction and isolation of five sesquiterpene glycosides from calendula perceica (persica). However, the literature does not mention effective or practical applications for extracted and isolated molecules.
아메드 아 아메드(Ahmed A Ahmed) 등의 문헌(Journal of Natural Products Vol. 56, number 10, pp 1821-1824(1993))은 칼렌듈라 아르벤시스로부터의 추출 생성물에 관련되어 있다. 이 생성물은 4종의 신규한 세스퀴테르펜 글리코사이드로 기술되어 있으며, 이들 중 3종은 공지되어 있다. 그러나, 그의 가능한 용도에 대해서는 언급하고 있지 않다.The article by Ahmed A Ahmed et al. (Journal of Natural Products Vol. 56, number 10, pp 1821-1824 (1993)) relates to the extraction products from calendula arbensis. This product is described as four new sesquiterpene glycosides, three of which are known. However, his possible uses are not mentioned.
EP 364442 B1호에는 칼렌듈라를 포함할 수 있는 약초로부터 선택된 3종 이상의 약초 오일 추출물을 포함하는, 건선에 대한 치료 조성물이 기재되어 있다. 그러나, 개별적인 약초의 추출물은 단독으로 사용되는 경우에 건선에 대해 치료적 효과를 제공하지 않는 것으로 언급되어 있다. 또한, 칼렌듈라를 자체로 달인 즙은 특히 위궤양 및 장궤양 치료에 사용되는 것으로 언급되어 있다. 칼렌듈라를 달인 즙은 건선과 같은 질병에 있어서 피부 세포 증식의 비정상적인 속도(예를 들어, 과증식)에 관련된 피부 질병의 치료에 유리한 것으로 기술되어 있지 않다.EP 364442 B1 discloses therapeutic compositions for psoriasis, comprising at least three herbal oil extracts selected from herbs which may include calendula. However, the individual herbal extracts are said to provide no therapeutic effect on psoriasis when used alone. In addition, calendula itself is said to be used in the treatment of gastric ulcers and ulcers. Calendula juice is not described as beneficial for the treatment of skin diseases associated with abnormal rates of skin cell proliferation (e.g., hyperproliferation) in diseases such as psoriasis.
DE 3836519 C2 호는 연고 기재로서 착유 그리스(milking grease)와 함께 칼렌듈라 오피시날리스의 새로 절삭된 꽃 복합체를 함유하는 약제가 건선을 치료하는 데 유용한 것으로 주장하고 있다. 그러나, 상기 조성물은 치료를 중단시킬 수 있는 알레르기를 유발할 수 있는 것으로 기재되어 있으며, 조성물의 활성 성분 표시나 확인이 없다. 상기 특허에는 세포증식 억제 활성에 대해서도 나타내고 있지 않으며, 또한, 칼렌듈라 오피시날리스를 기재로 하는 상기 주장된 약제의 성분 또는 성분의 혼합물이 활성 성분이라는 것이 분명하지 않다. 또한, 상기 조성물이 건선의 치료에 사용됨을 입증하는 실질적인 증거가 나타나 있지 않다.DE 3836519 C2 claims that a medicament containing a fresh cut flower complex of calendula officinalis together with milking grease as an ointment base is useful for treating psoriasis. However, it has been described that the composition can induce allergies which can stop the treatment, and there is no indication or confirmation of the active ingredient of the composition. It is not clear that the patent also describes the cell proliferation inhibitory activity, and it is not clear that a component or a mixture of ingredients of the claimed medicament based on calendula officinalis is the active ingredient. In addition, there is no substantive evidence demonstrating that the composition is used in the treatment of psoriasis.
따라서, 진피 세포의 과증식에 관련된 질병의 발병, 지속 및/또는 전개를 퇴치하는 데 효과적인, 특히 건선 치료에 효과적인 신규한 세포증식 억제를 개발할 필요가 있다.Accordingly, there is a need to develop novel cell proliferation inhibitors effective in combating the onset, persistence, and / or development of diseases associated with dermal hyperplasia, particularly psoriasis treatments.
발명의 요약SUMMARY OF THE INVENTION
본 발명의 목적은 진피 세포의 과증식에 관련된 질병의 치료, 특히 건식 치료를 위한 약제의 제조시 하나 이상의 화합물을 포함하는 활성 화합물 또는 정제된 식물 추출물을 사용하는 데 있다.It is an object of the present invention to use active compounds or purified plant extracts comprising at least one compound in the manufacture of medicaments for the treatment of diseases associated with hyperplasia of dermal cells, in particular for dry treatment.
본 발명의 제 2의 목적은 진피 세포의 과증식에 관련된 질병의 치료, 특히 건식 치료에 분리 및/또는 정제된 칼렌듈라 활성 화합물을 제공하는 데 있다.A second object of the present invention is to provide a calendula active compound which is separated and / or purified for the treatment, particularly dry treatment, of a disease associated with hyperproliferation of dermal cells.
본 발명의 제 3의 목적은 진피 세포의 과증식에 관련된 질병의 치료, 특히 건식 치료에 사용하기 위한 분리된 화합물을 제공하는 데 있다.A third object of the present invention is to provide a separate compound for use in the treatment of diseases associated with hyperplasia of dermal cells, particularly for dry treatment.
본 발명의 상기 목적 및 기타 목적은 하기 설명 및 실시예로부터 분명하게 될 것이다.These and other objects of the present invention will become apparent from the following description and examples.
본 발명은 화합물에 관한 것으로, 세포 증식에 대해 억제 효과가 있는 것으로 나타난 화합물을 함유하는 식물 추출물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 칼렌듈라(Calendula)종으로부터 유도될 수 있는, 세포에 대해 세포증식을 억제하는 효과가 있는 글리코사이드 화합물 및 세포증식 억제제로서, 특히 건선을 치료함에 있어서의 용도에 관한 것이다.The present invention relates to compounds, and to plant extracts containing compounds which are shown to have an inhibitory effect on cell proliferation. More specifically, the present invention relates to glycoside compounds and cell proliferation inhibitors that have an effect of inhibiting cell proliferation against cells, which may be derived from Calendula species, and in particular, in the treatment of psoriasis.
본 발명의 일면에 따르면 진피 세포의 과증식과 관련된 질병을 치료하기 위한 약제에 사용되는 하기 화학식(I)의 화합물이 제공된다:In accordance with one aspect of the present invention there is provided a compound of formula (I) for use in a medicament for treating a disease associated with hyperplasia of dermal cells:
상기 식에서In the above formula
R1및 R2는 독립적으로 H, OH,R 1 and R 2 are independently H, OH,
및 이와 관련된 에스테르로부터 선택되고,And esters associated therewith,
R3는 OH,R 3 is OH,
및 이와 관련된 에스테르로부터 선택되고,And esters associated therewith,
R4는 C1-C6알킬, H, OH, =CH2또는 C1-C4알킬 카르복실옥시에 의해 임의로 치환된 C6-C12포화 또는 불포화 모노시클릭 또는 폴리시클릭 지방족 고리계로부터 선택되거나, 이와 같은 고리계로 치환된 C1-C6직쇄 또는 측쇄 알칼렌기를 나타내고,R 4 is selected from a C 6 -C 12 saturated or unsaturated monocyclic or polycyclic aliphatic ring system optionally substituted by C 1 -C 6 alkyl, H, OH, ═CH 2 or C 1 -C 4 alkylcarboxyloxy Or a C 1 -C 6 linear or branched alkenylene group substituted by such a ring system,
R5는 -CH3, -CHO, -COOH 및 -CH2OH 및 이로부터 유도된 관련된 에스테르 및 에테르로부터 선택되고,R 5 is selected from -CH 3 , -CHO, -COOH and -CH 2 OH and related esters and ethers derived therefrom,
R6는 -OH,R < 6 > is -OH,
로부터 선택된다..
본 발명의 목적에 따라, "관련된 에스테르 및 에테르"는 본원에서 언급된 R 기의 모든 에스테르 및 일반적으로 포화 또는 불포화 직쇄 또는 측쇄 C1-C20카르복시 알킬 에스테르화 산을 말한다. 적합한 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 2차-부틸, 및 펜타닐, 펜테닐, 헥사닐 및 헥세닐 알킬기의 모든 이성질체를 포함하는 에스테르화 산이 포함된다. 또한, 용어 "관련된 에스테르"에는 벤조산 및 신남산과 같은 방향족 산이 포함된다. 본원에서는 상기 "관련된 에스테르"로 정의된 바와 같은 직쇄 또는 측쇄 알킬기를 포함하는 C1-C20알킬 에테르가 포함된다.For purposes of the present invention, " related esters and ethers " refer to all esters of the R group mentioned herein and generally saturated or unsaturated straight chain or branched C 1 -C 20 carboxyalkyl esterified acids. Suitable examples include esterified acids including methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, secondary-butyl, and all isomers of pentenyl, pentenyl, hexanyl and hexenyl alkyl groups. The term " related esters " also includes aromatic acids such as benzoic acid and cinnamic acid. C 1 -C 20 alkyl ethers including straight or branched chain alkyl groups as defined herein above as "related esters" are included.
본 발명의 또 다른 일면으로In another aspect of the present invention,
R1및 R2는 독립적으로 H, -OH,R 1 and R 2 are independently H, -OH,
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R3는 -OH,R 3 is -OH,
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R4는R 4 is
기로부터 선택되고,≪ / RTI >
R5는 -CH3, -CHO, -COOH 및 -CH2OH 기로부터 선택되고,R 5 is selected from -CH 3 , -CHO, -COOH and -CH 2 OH groups,
R6는 -OH,R < 6 > is -OH,
로부터 선택되는 화학식(I)의 화합물의 용도가 제공된다.Lt; RTI ID = 0.0 > (I) < / RTI >
본 발명의 또 다른 일면으로In another aspect of the present invention,
R1및 R2는 독립적으로 H 및 OH(βOH 또는 αOH)로부터 선택되고,R 1 and R 2 are independently selected from H and OH (? OH or? OH)
R3는 OH,R 3 is OH,
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R4는R 4 is
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R5는 -CH3이고,R 5 is -CH 3 ,
R6는 OH,R 6 is OH,
로부터 선택되는 화학식(I)의 화합물의 용도가 제공된다.Lt; RTI ID = 0.0 > (I) < / RTI >
본 발명은 매우 바람직하게는,The present invention is very preferably,
R1및 R2는 독립적으로 H 및 OH(βOH 또는 αOH)로부터 선택되고,R 1 and R 2 are independently selected from H and OH (? OH or? OH)
R3는 OH 및 (E)-3-메틸펜트-2-에노에이트, 즉R 3 is OH and (E) -3-methylpent-2-enoate,
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R4는R 4 is
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R5는 CH3이고,R 5 is CH 3,
R6는 OH인 칼렌듈라 종으로부터 추출할 수 있는 화학식(I)의 화합물의 용도가 제공된다.There is provided the use of a compound of formula (I) wherein R < 6 > can be derived from a calendula species which is OH.
당업자들은 또한 R1, R2, R6및 R3기가 축방향 또는 수평 방향으로 위치할 수 있음을 인지할 것이다.Those skilled in the art will also appreciate that the R 1 , R 2 , R 6, and R 3 groups may be positioned axially or horizontally.
당업자들이 칼렌듈라 종에서 발견된 두 개의 이성질체로, 화학식(I)의 생리학적 작용성 이성질체, 및 형태 및 구조 이성질체를 포함하는 합성에 의해 유도된 이성질체 뿐만 아니라 화학식(I)의 D 및 L 형태가 본 발명에 포함되는 것임을 인지하는 것은 당연하다. 본 발명의 형태 이성질체의 예로는 하기와 같은 화학식(1a) 및 (1b)가 포함된다:The two isomers found in the Calendula species by those of skill in the art include the physiologically functional isomers of formula (I) and the isomers derived by synthesis including forms and structural isomers, as well as the D and L forms of formula (I) It is to be understood that the invention is included in the invention. Examples of form isomers of the present invention include those of formulas (1a) and (1b) as follows:
상기 식에서,In this formula,
R1, R2, R3, R4, R5및 R6는 화학식(1)에서 정의된 바와 동일하다. 당업자들이 생리학적 작용성성을 갖는 "의자"(화학식(1a))형 및 "보우트"(화학식(1b))형과 관련된 기타 구조 이성질 변이체가 본 발명의 범위내에 포함됨을 인지하는 것은 당연하다. 화학식(I)의 화합물은 종래의 유기 용매 추출 기법을 사용하여 칼렌듈라 종으로부터 분리시킬 수 있다. 일반적으로, 화학식(I)의 화합물은 잎, 줄기, 꽃 부분, 뿌리, 가지 등과 같은 식물 조직으로부터 추출될 수 있다.R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 and R 6 are the same as defined in formula (1). It will be appreciated by those skilled in the art that other structural isostatic variants related to the "chair" (Formula (1a)) and "boat" (Formula (1b)) types having physiological functionalities are included within the scope of the present invention. Compounds of formula (I) may be isolated from calendula species using conventional organic solvent extraction techniques. In general, the compounds of formula (I) may be extracted from plant tissues such as leaves, stems, flower parts, roots, branches, and the like.
본 발명의 또 다른 구체예에서In another embodiment of the present invention
R1및 R2는 독립적으로 -OH, H,R 1 and R 2 are independently -OH, H,
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R3는 (E)-3-메틸펜트-2-에노에이트 및R 3 is (E) -3-methylpent-2-enoate and
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R4는 C1-C6알킬, H, -OH, =CH2또는 C1-C4알킬 카르복실옥시에 의해 임의로 치환된 C6-C12포화 또는 불포화 모노시클릭 또는 폴리시클릭 지방족 고리계로부터 선택되고,R 4 is a C 6 -C 12 saturated or unsaturated monocyclic or polycyclic aliphatic ring system optionally substituted by C 1 -C 6 alkyl, H, -OH, ═CH 2 or C 1 -C 4 alkylcarboxyloxy ≪ / RTI >
R5는 C1-C4알킬, -CHO, -COOH 및 -CH2OH로부터 선택되고,R 5 is selected from C 1 -C 4 alkyl, -CHO, -COOH and -CH 2 OH,
R6는R 6 is
로부터 선택된 상기 화학식(1)에 따른 본 발명의 신규한 화합물 및 이들의 생리학적 작용성 이성질체가 제공된다.(1) and their physiologically functional isomers are provided.
본 발명은 바람직하게는,Preferably,
R1및 R2는 독립적으로 -OH, H,R 1 and R 2 are independently -OH, H,
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R3는 (E)-3-메틸펜트-2-에노에이트 및R 3 is (E) -3-methylpent-2-enoate and
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R4는R 4 is
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R5는 -CH3, -CHO, -CH2OH 및 -COOH로부터 선택되고,R 5 is selected from -CH 3 , -CHO, -CH 2 OH and -COOH,
R6는R 6 is
로부터 선택된 상기 화학식(1)에 따른 신규한 화합물 및 이들의 생리학적 작용성 이성질체가 제공된다.(1) and physiologically functional isomers thereof are provided.
본 발명은 더욱 바람직하게는The present invention is more preferably
R1및 R2는 독립적으로 H 및 -OH로부터 선택되고,R 1 and R 2 are independently selected from H and -OH,
R3는 (E)-3-메틸펜트-2-에노에이트이고,R 3 is (E) -3-methylpent-2-enoate,
R4는R 4 is
로부터 선택되고,≪ / RTI >
R5는 -CH3이고,R 5 is -CH 3 ,
R6는 OH인 화학식(1)에 따른 화합물 및 이들의 생리학적 작용성 이성질체가 제공된다.Compounds according to formula (1) wherein R < 6 > is OH and their physiologically functional isomers are provided.
당업자들은 또한 R1, R2, R6및 R3기가 축방향 또는 수평 방향으로 위치할 수 있음을 인지할 것이다.Those skilled in the art will also appreciate that the R 1 , R 2 , R 6, and R 3 groups may be positioned axially or horizontally.
본 발명의 목적에 따라 "생리학적 작용성 이성질체"는 진피 세포의 증식을 실질적으로 경감시키거나 중단시킬 수 있는 이성질체를 의미한다. 따라서, 이러한 이성질체는 진피 세포에 대해 실질적으로 세포 증식 억제 효과가 있는 것으로 나타나야 하며, 이러한 이성질체는 건신과 같은 피부 질병을 치료하는 데 유용한 것으로 나타난다.For purposes of the present invention, a " physiologically functional isomer " means an isomer capable of substantially alleviating or abolishing the proliferation of dermal cells. Thus, such isomers should appear to have a substantially cellular proliferation inhibitory effect on dermal cells, and such isomers appear to be useful for treating skin diseases such as cancer.
본 발명에 따른 신규한 화합물의 예로는 하기와 같은 화합물들이 있다:Examples of novel compounds according to the invention are the following compounds:
(i) (rel)-1aα, 4aξ, 7aβ, 7ba-데카히드로-1,1,4ξ, 7α-테트라메틸-1H-시클로프로프[에]아줄렌-4ξ-Ο-(2-E-{3-메틸펜트-2-에노일}-β-퀴노보피라노사이드(Van-10-3).(i) (rel) -1a?, 4a?, 7a ?, 7ba-decahydro-1,1,4 ?, 7? -tetramethyl- 3-methylpent-2-enoyl} -? - quinobopyranoside (Van-10-3).
(ii) (rel)-5ξ, 7ξ, 14ξ-유데슴-4(15)-엔-11-Ο-(2-E-{3-메틸}펜트-2-에노일)-β-푸코피라노사이드(Van-10-2).(ii) (rel) -5ξ, 7ξ, 14ξ-yutec-4 (15) -en-11-O- (2-E- {3-methyl} pent-2-enoyl) Side (Van-10-2).
(iii) (rel)-1aα, 4aξ, 7aβ, 7ba-데카히드로-1,1,4ξ, 7α-테트라메틸-1H-시클로프로프[에]아줄렌-4ξ-Ο-(2-E-{3-메틸}펜트-2-에노일}-β-푸코피라노사이드(Van-10-4).(iii) (rel) -1a?, 4a?, 7a ?, 7ba-decahydro-1,1,4 ?, 7? -tetramethyl- 3-methyl} pent-2-enoyl} -? - fucopyranoside (Van-10-4).
생물학적 활성을 기준으로 한 본 발명의 바람직한 신규한 화합물은 상기 화합물(ii) 및 (iii), 이들의 생리학적 작용성 유도체 및 유사체가 있다. 생물학적 활성을 기준으로 하여 가장 바람직한 화합물은 상기 화합물(iii)이다.Preferred novel compounds of the invention on the basis of biological activity are the above compounds (ii) and (iii), their physiologically functional derivatives and analogs. The most preferred compound on the basis of biological activity is the above compound (iii).
본 발명의 구체예로서 진피 세포의 과증식과 관련된 질병의 치료, 특히 건선의 치료를 위한 조성물로 화학식(I)의 화합물의 용도가 포함된다. 당업자들이 이러한 용도에 하기 (iv)와 같은 칼렌듈라 종으로부터 분리된 공지된 화합물의 용도가 포함될 수 있음을 인지하는 것은 당연하다:As an embodiment of the present invention, the use of the compound of formula (I) as a composition for the treatment of diseases associated with the hyperplasia of dermal cells, in particular for the treatment of psoriasis, is included. It will be appreciated by those skilled in the art that the use of known compounds isolated from calendula species such as (iv) may be included in such applications:
(iv) (rel)-1aα, 4aξ, 7aβ, 7ba-데카히드로-1,1,4ξ, 7α-테트라메틸-1H-시클로프로프[에]아줄렌-4ξ-Ο-β-푸코피라노사이드(Van 15A).(iv) (rel) -1a?, 4a ?, 7a ?, 7ba-decahydro-1,1,4 ?, 7? -tetramethyl- 1H- cycloprop [on] azulene- 4? -O-? - fucopyranoside (Van 15A).
건선과 같은 피부 질환의 치료를 위한 약제 제조에 사용되는 바람직한 화합물은 상기 화합합(iii)이다.A preferred compound used in the manufacture of a medicament for the treatment of skin diseases such as psoriasis is the above-mentioned combination (iii).
당업자들은 상기 화합물(i) 내지 (iv)의 유사체가 동일반응계에서 이들로부터 합성될 수 있음을 인지할 것이다. 예를 들어, R1및 R6기가 모두 OH 이거나, R2및 R6기가 모두 -OH인 것들은 적합한 산 클로라이드 또는 산 무수물을 피리딘과 같은 적합한 염기의 존재하에서 적합한 출발 물질, 예를 들어 화합물(iii)과 반응시켜 안겔레이트, 티글레이트 또는 기타 에스테르로 에스테르화될 수 있다. 두 개의 알코올 작용기는 상기 기법에 의해 에스테르화될 것이다. R1및 R6에 대해 상이한 에스테르기를 갖는 유도체, 예를 들어 티글레이트 및 안겔레이트는 또한 화합물(iii)과 같은 적합한 화합물을 두개의 산 클로라이드 또는 두 개의 무수물의 혼합물과 반응시켜 제조될 수 있다. 이는 가능한 4종의 모든 이성질체를 제조할 것이며, 이성질체는 이후 실리카겔상의 크로마토그래피 등과 같은 표준 기법을 사용하여 분리될 수 있다.Those skilled in the art will appreciate that the analogs of (i) to (iv) above can be synthesized from them in situ. For example, those in which the R 1 and R 6 groups are both OH or the R 2 and R 6 groups are both -OH, may be prepared by reacting the appropriate acid chloride or acid anhydride with a suitable starting material, ) To be esterified with angelate, tiglate or other ester. Two alcohol functional groups will be esterified by this technique. Derivatives having different ester groups for R < 1 > and R < 6 >, such as tiglates and angelates, can also be prepared by reacting a suitable compound such as compound (iii) with two acid chlorides or a mixture of two anhydrides. This will produce all four possible isomers, and the isomers can then be separated using standard techniques such as chromatography on silica gel and the like.
화합물 (i) 내지 (iii)상의 에틸 크로토네이트 아암(R3)은 하기 일반적인 과정을 사용하여 다른 카르복실산 에스테르에 의해 치환될 수 있다. R1및 R6하이드록실기는 상기 화합물을 톨루엔 술폰산의 존재하에서 아세톤과 반응시켜 아세토나이드를 형성하므로써, 또는 예를 들어 하기 화합물 A 또는 이와 유사한 화합물과 같은 화합물을 제조하는 본원에서 참고문헌으로 인용된 문헌(Protective Groups in Organic Synthesis, Second Edition, T W Greene, P G M Wuts(ISBN 0 471 62301 6)(e.g. Chapter 2 pp 123-127))에 기술된 것과 같이 당업에 공지된 유사한 기법에 의해 보호될 수 있다:The ethyl crotonate arm (R 3 ) on compounds (i) to (iii) can be replaced by other carboxylic acid esters using the following general procedure. The R 1 and R 6 hydroxyl groups can be prepared by reacting the compound with acetone in the presence of toluenesulfonic acid to form acetonide or as reference herein for example to produce compounds such as the following compounds A or the like Can be protected by similar techniques known in the art, as described in the literature (Protective Groups in Organic Synthesis, Second Edition, TW Greene, PGM Wuts (ISBN 0 471 62301 6) (eg Chapter 2 pp 123-127) have:
에틸 크로토네이트 아암은 예를 들어, 화합물(iii)의 산 또는 염기 가수분해에 의해 제거되어 R3이 OH인 생성물을 수득할 수 있다. 이후 생성된 화합물을 피리딘과 같은 염기의 존재하에서 적합한 산 클로라이드 또는 산 무수물과 반응시킬 수 있다. 다르게는, 이러한 에스테르는 티글산 또는 안겔산과 같은 과량의 유기산과의 에스테르 교환반응에 의해 형성될 수 있다. 마지막으로, 아세토나이드 보호기는 상기 그린 티. 더블유.의 문헌에서 기재된 바와 같이 메탄올중의 요오드와 같은 적합한 분해제에 의해 분해될 수 있다.The ethyl crotonate arm can be removed, for example, by acid or base hydrolysis of compound (iii) to yield a product wherein R < 3 > is OH. The resulting compound can then be reacted with a suitable acid chloride or acid anhydride in the presence of a base such as pyridine. Alternatively, such an ester can be formed by an ester exchange reaction with an excess of an organic acid such as thylacetic acid or angeic acid. Finally, the acetonide protecting group is the green tea. Such as iodine in methanol as described in the literature of < RTI ID = 0.0 > W. < / RTI >
본 발명의 바람직한 구체예에서는 건선 치료용 약제를 제조하기 위해 칼렌듈라 오피시날리스와 같은 칼렌듈라 종으로부터 분리된 하나 이상의 화합물의 용도가 제공된다. 대체로, 상기 화합물은 세스퀴테르펜 글리코사이드와 같은 식물 글리코사이드이다. 또한, 본 발명의 영역에는 칼렌듈라 오피시날리스와 같은 칼렌듈라 종으로부터 분리된 하나 이상의 식물 글리코사이드를 함유함을 특징으로 하는, 건선에 대한 치료 조성물이 포함된다. 일반적으로, 상기 치료 조성물은 하나 이상의 화학식(I)의 세스퀴테르펜 글리코사이드와 같은 하나 이상의 정제된 식물 글리코사이드를 함유한다. 당업자들이 이러한 조성물이 치료적 세포증식 억제 효과를 야기할 수 있는 농도로 두 개 이상의 식물 글리코사이드를 포함할 수 있음을 인지하는 것은 당연하다. 따라서, 치료 조성물은 바람직하지 않은 오염 화합물을 실질적으로 제거하는 칼렌듈라의 식물 추출물을 포함할 수 있다. 식물 추출물은 예를 들어, 화학식(I)에 의해 포함되는 것들과 같은 바람직한 성분으로부터 바람직하지 않은 성분을 실질적으로 분리해내기 위해 수행되는 다수의 용매 추출 단계를 가질 수 있다. 이러한 용매 추출 단계가 수행된 식물 추출물은 하나 이상의 식물 글리코사이드를 함유할 수 있으며, 수 개의 식물 글리코사이드를 함유할 수 있음은 당연하다. 이후, 이러한 식물 추출물은 추가의 용매 추출 과정을 거쳐 화학식(I)의 각각의 활성 식물 글리코사이드를 분리할 수 있다.In a preferred embodiment of the invention there is provided the use of one or more compounds separated from calendula species, such as calendula officinalis, for the manufacture of a medicament for the treatment of psoriasis. In general, the compound is a plant glycoside such as sesquiterpene glycoside. Also included within the scope of the invention are therapeutic compositions for psoriasis, characterized in that they contain one or more plant glycosides isolated from calendula species such as calendula officinalis. In general, the therapeutic compositions contain one or more purified plant glycosides, such as one or more sesquiterpene glycosides of formula (I). It will be appreciated by those of skill in the art that such compositions may include two or more plant glycosides at a concentration that would produce a therapeutic cellular proliferation inhibitory effect. Thus, the therapeutic composition may comprise a plant extract of calendula that substantially eliminates undesirable contaminant compounds. Plant extracts may have a number of solvent extraction steps which are carried out to substantially separate undesirable components from the desired components, such as, for example, those included by formula (I). It is to be understood that the plant extract on which this solvent extraction step is carried out may contain one or more plant glycosides and may contain several plant glycosides. These plant extracts can then be subjected to further solvent extraction to separate the respective active plant glycosides of formula (I).
하기에서는 진피 세포에 대해 세포증식 억제 효과를 나타낼 수 있는 활성 성분을 함유하는 칼렌듈라 종의 정제된 추출물을 수득하는 일반적인 방법, 이러한 추출물의 정제, 추출물로부터 활성 성분의 분리 및/또는 이후 이들의 정제가 기술될 것이다.Hereinafter, a general method for obtaining a purified extract of a calendula species containing an active ingredient capable of exhibiting cell proliferation inhibitory effect on dermal cells, purification of such extract, isolation of an active ingredient from the extract, and / Will be described.
칼렌듈라 종의 꽃을 분쇄기로 분쇄시키고, 형성된 분말이 없어질 때까지 석유 에테르로 속슬레 추출한다. 이후, 추출물을 예를 들어, 회전 증발기와 같은 증발기를 사용하여 감압하에서 농축시켜 추출 잔류물, 즉 미정제 추출물을 제공할 수 있다. 이후, 미정제 추출물을 예를 들어 적합한 용매 및 극성을 증가시키는 용매계를 사용하는 진공 액체 크로마토그래피(VLC)에 의해 분별 분리한다. 적합한 용매로는 극성 및 비극성 유기 용매 및 이들의 혼합물과 같은 용매가 포함된다. 본 발명의 목적에 적합한 추출 방법에서 사용될 수 있는 용매의 예로는 하기의 용매(용적비)가 포함된다.Calendula blooms are pulverized by a pulverizer and are sieved with petroleum ether until the formed powder disappears. The extract can then be concentrated under reduced pressure, for example, using an evaporator, such as a rotary evaporator, to provide an extract residue, i.e., crude extract. The crude extract is then fractionated by vacuum liquid chromatography (VLC) using, for example, a suitable solvent and a polar solvent increasing solvent system. Suitable solvents include solvents such as polar and nonpolar organic solvents and mixtures thereof. Examples of the solvent that can be used in the extraction method suitable for the purpose of the present invention include the following solvents (volume ratio).
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 0 - 10%)Gasoline-ethyl acetate (0 - 10% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 12 - 18%)Gasoline-ethyl acetate (12-18% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 20 - 24%)Gasoline-ethyl acetate (20 - 24% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 24 - 30%)Gasoline-ethyl acetate (ethyl acetate 24-30%)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 35 - 40%)Gasoline-ethyl acetate (35 - 40% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 45%)Gasoline-ethyl acetate (45% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 50 - 55%)Gasoline-ethyl acetate (50 - 55% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 60%)Gasoline-ethyl acetate (ethyl acetate 60%)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 65 - 75%)Gasoline-ethyl acetate (65 - 75% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 80 - 85%)Gasoline-ethyl acetate (80 - 85% ethyl acetate)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 90 - 95%)Gasoline-ethyl acetate (ethyl acetate 90 - 95%)
가솔린-에틸아세테이트(에틸아세테이트 95%)Gasoline-ethyl acetate (95% ethyl acetate)
에틸아세테이트-메틸알코올(메틸알코올 0 - 5%)Ethyl acetate - methyl alcohol (0 - 5% methyl alcohol)
에틸아세테이트-메틸알코올(메틸알코올 10-100%)Ethyl acetate-methyl alcohol (methyl alcohol 10-100%)
헥산, 헥산:클로로포름 혼합물의 용적비는 하기와 같다:The volume ratio of the hexane, hexane: chloroform mixture is as follows:
헥산: 클로로포름Hexane: chloroform
100 : 0100: 0
95 : 595: 5
9 : 19: 1
8 : 28: 2
6 : 46: 4
4 : 64: 6
0: 1000: 100
클로로포름, 및 클로포름:메탄올 혼합물(예를 들어, 5:10, 1:1) 등. 따라서, 미정제 추출물은 예를 들어, 극성을 증가시키는 미리 선택된 비율로 유기 용매의 상이한 혼합물을 사용하여 수회 분별 분리시킬 수 있다.Chloroform, and a chloroform: methanol mixture (e. G., 5:10, 1: 1). Thus, the crude extract may be fractionated several times using different mixtures of organic solvents, for example, in preselected proportions increasing the polarity.
VLC하에서, 실리카 겔(Merck7749)은 예를 들어 일반적으로 진공이 가해진 소결된 깔대기와 같은 용기내에 충전되어 칼럼을 제공한다. 미정제 추출물은 예를 들어 실리카상으로의 흡착에 의해 LVC 칼럼에 도입하도록 준비될 수 있으며(예를 들어, 1:1 중량/중량), 상기 기술된 바와 같이 칼럼의 상부에 배치되고, 미리 지정된 비율로 본원에서 언급된 바와 같은 극성을 증가시키는 용매 또는 용매계로 1회 이상 용리된다. VLC 칼럼으로부터의 용리액을 수집하여, 칼럼 크로마토그래피 또는 기타 적합한 크로마토그래피 방법에 의해 분별 분리 단계를 수행할 수 있다. 미정제 추출물을 분별 분리후, 수집된 용리액을 함유된 활성 성분을 분석하기 위해 정제 얇은막 크로마토그래피(TLC)로 처리할 수 있다. 예를 들어, 어느 한 방법에서, 클로로포름:메탄올의 혼합비가 95:5인 칼럼 크로마토그래피로부터 수득된 Van-5-10으로 표시된 용리액 분획은 3:6:6 비율의 헥산:클로로포름:에틸 아세테이트의 초기 용매계를 사용하는 TLC 분석으로 처리되어, 5개의 분획, 즉 Van-9-1, Van-9-2, Van-9-3, Van-9-4, 및 Van-9-5를 제공한다. 이러한 분획은 화학식(I)에 포함되는 분명한 글리코사이드 분자의 정제된 혼합물을 포함하는 것으로 간주될 수 있으며, 따라서 식물 단백질, 식물 호르몬등과 같은 오염 성분을 실질적으로 함유하지 않는 혼합물로서 여겨질 수 있다. 세포증식억제 활성을 갖는 이러한 용리액 분획은 본 발명의 구체예를 구성한다.Under VLC, silica gel (Merck 7749) is packed in a vessel, such as, for example, a sintered funnel that is typically vacuumed to provide a column. The crude extract can be prepared (e. G., 1: 1 w / w) to be introduced into the LVC column by adsorption onto silica, for example, placed on top of the column as described above, To a solvent or solvent system that increases the polarity as referred to herein. The eluent from the VLC column can be collected and the fractionation step performed by column chromatography or other suitable chromatographic method. After fractionating the crude extract, the collected eluate can be treated with purified thin layer chromatography (TLC) to analyze the contained active ingredient. For example, in one method, the eluant fraction indicated by Van-5-10 obtained from column chromatography with a chloroform: methanol mixture ratio of 95: 5 was eluted with a 3: 6: 6 ratio of hexane: chloroform: ethyl acetate Is treated with TLC analysis using a solvent system to provide five fractions: Van-9-1, Van-9-2, Van-9-3, Van-9-4, and Van-9-5. Such fractions can be regarded as comprising a purified mixture of the apparent glycoside molecules contained in formula (I) and can therefore be regarded as a mixture substantially free of contaminating components such as plant proteins, plant hormones and the like . Such an eluate fraction having cell proliferation inhibitory activity constitutes an embodiment of the present invention.
또 다른 단계에서, 상기 언급된 Van-9-1 내지 Van-9-5는 또 다른 유기 용매 제제를 사용하는 정제 얇은막 크로마토그래피(정제 TLC) 실리카겔 분석법으로 처리할 수 있다. 예를 들어, 용리액 분획 Van-9-2는 용매 제제로서 3:6:4 비율의 헥산:클로로포름:에틸 아세테이트 사용하는 정제 TLC로 처리되어 Van-9-2의 부분획으로 Van-9-2B 및 Van-9-2C를 제공할 수 있다. 정제 TLC 단계로부터 생성된 부분획은 고압 액체 크로마토그래피(HPLC)와 같은 또 다른 크로마토그래피 단계로 처리될 수 있다. 예를 들어, TLC 분리된 Van-9-2B 및 Van-9-2C는 0.1% 트리플루오로 아세트산(TFA)를 함유하는 수중에서 75%의 아세토니트릴의 용매와 함께 옥타데실-실라놀(ODS)(분석용) 칼럼을 사용하여 HPLC 처리될 수 있다. HPLC 기법에 의해 수득된 각각의 분획은 이후 NMR 기법의 사용 및 시험관내 세포증식억제 활성에 대한 이러한 분획들의 분석에 의해 활성 성분을 평가할 수 있다.In another step, the above-mentioned Van-9-1 to Van-9-5 can be treated with purified thin film chromatography (purification TLC) silica gel analysis using another organic solvent formulation. For example, the eluent fraction Van-9-2 was treated with purified TLC using 3: 6: 4 hexane: chloroform: ethyl acetate as the solvent preparation to give Van-9-2B and Van-9-2C can be provided. Partial strokes generated from the purification TLC step can be treated with another chromatographic step, such as high pressure liquid chromatography (HPLC). For example, TLC separated Van-9-2B and Van-9-2C are prepared by reacting octadecyl-silanol (ODS) with a solvent of 75% acetonitrile in water containing 0.1% trifluoroacetic acid (TFA) (Analytical) column. ≪ / RTI > Each fraction obtained by the HPLC technique can then be assayed for the active ingredient by the use of NMR techniques and by analysis of these fractions for in vitro cell proliferation inhibitory activity.
칼렌듈라 오피시날리스의 건조된 꽃잎과 같은 원료를 다량 얻기 위해, 하기의 일반적인 추출 방법이 사용될 수 있다.In order to obtain a large amount of raw material such as dried petals of calendula officinalis, the following general extraction method can be used.
건조된 식물 재료, 예를 들어, 칼렌듈라 오피시날리스의 꽃잎을 조립 분말로 분쇄하고 적합한 유기 용매중에서 추출할 수 있다. 일반적으로 추출 방법은 속슬레 추출, 회분식 추출 및 연속 추출과 같은 공지된 적합한 추출 방법일 수 있다. 따라서, 본 발명의 또 다른 일면에는 특히 속슬레, 회분식 또는 연속 추출 방법에 의해 칼렌듈라 종으로부터 수득될 수 있는 화학식(I)의 항건선 화합물을 제공한다. 이러한 추출 방법은 당업에 공지되어 있다. 바람직하게는 칼렌듈라 종은 칼렌듈라 오피시날리스이고, 바람직한 추출 방법은 연속 추출 방법이다. 연속 추출방법에 사용하기에 적합한 유기 용매에는 메탄올, 에탄올, 디클로메탄, 톨루엔, 헥산, 에틸 아세테이트, 이소프로필 등과 같은 극성 및 비극성 유기 용매가 포함된다. 상기 용매로는 헵탄과 같은 비극성 유기 용매가 바람직하다. 형성된 추출물을 적합한 추출물 중량/용액의 총용적에 대한 백분율(% w/v)이 얻어질 때까지 진공하에서 농축시킨다. 적합한 % w/v 용액비는 10% w/v 내지 60% w/v, 보다 바람직하게는 15% w/v 내지 30% w/v, 매우 바람직하게는 약 20% w/v 이다. 형성된 농축물을 10:0 내지 7:3과 같은 적합한 중량 대 중량비로 극성 용매/수용액중에서 추출한다. 바람직하게는 상기 비는 10:0 내지 8:2이다. 보다 바람직하게는 9:1이다. 적합한 극성 유기 용매는 아세토니트릴, 메탄올, 에탄올, 에틸 아세테이트 등으로부터 선택될 수 있다. 바람직한 극성 유기 용매는 아세토니트릴이다. 헵탄 분획을 버린 후, VAN 함유 극성 유기 용매 분획(아세토니트릴 분획과 같은)을 결합시키고, 극성 유기 용매를 진공하에서 제거할 수 있다. 이후 형성된 고체를 에틸 아세테이트, 메탄올, 아세토니트릴, 디에틸 에테르, 디클로메탄, 톨루엔 등과 같은 적합한 극성 또는 비극성 유기 용매중에서 다시 용해시킨 후, 중탄산나트륨과 같은 염기와 함께 10:30% w/v 비로 물, 0.05 내지 0.1M 농도의 염산과 같은 희석된 무기산 또는 0.2 내지 1.0M 농도의 시트르산과 같은 희석된 유기산, 및 물로 연속해서 세척할 수 있다. 이후 유기 용매 용액을 진공하에서 증발시킨다.Dried plant material, for example, petal of calendula officinalis can be ground into granulated powder and extracted in a suitable organic solvent. In general, the extraction method may be a known and suitable extraction method such as Soxhlet extraction, batch extraction and continuous extraction. Thus, another aspect of the present invention provides an anti-psoriatic compound of formula (I), which may be obtained from a calendula species, in particular by a sslle, batch or continuous extraction method. Such extraction methods are well known in the art. Preferably, the calendula species is calendula officinalis, and the preferred extraction method is a continuous extraction method. Suitable organic solvents for use in the continuous extraction method include polar and nonpolar organic solvents such as methanol, ethanol, dichloromethane, toluene, hexane, ethyl acetate, isopropyl and the like. As the solvent, a nonpolar organic solvent such as heptane is preferable. The resulting extract is concentrated under vacuum until a suitable extract weight / percentage (% w / v) relative to the total volume of solution is obtained. A suitable% w / v solution ratio is 10% w / v to 60% w / v, more preferably 15% w / v to 30% w / v, very preferably about 20% w / v. The concentrate formed is extracted in a polar solvent / aqueous solution at a suitable weight to weight ratio such as 10: 0 to 7: 3. Preferably, the ratio is from 10: 0 to 8: 2. More preferably 9: 1. Suitable polar organic solvents may be selected from acetonitrile, methanol, ethanol, ethyl acetate, and the like. A preferred polar organic solvent is acetonitrile. After discarding the heptane fraction, a polar organic solvent fraction containing VAN (such as an acetonitrile fraction) may be combined and the polar organic solvent removed in vacuo. The resulting solid is then redissolved in a suitable polar or nonpolar organic solvent such as ethyl acetate, methanol, acetonitrile, diethyl ether, dichloromethane, toluene and the like followed by treatment with a base such as sodium bicarbonate in a 10: 30% w / v ratio Water, dilute mineral acid such as hydrochloric acid of 0.05 to 0.1 M concentration or diluted organic acid such as citric acid of 0.2 to 1.0 M concentration, and water. The organic solvent solution is then evaporated under vacuum.
형성된 미정제 제제를 VAN-10-4와 같은 적합한 VAN-10 화합물로 추가 정제시킬 수 있다. 미정제 제제는 극성 유기 용매와 같은 적합한 용적의 유기 용매 또는 적합한 용적의 하나 이상의 극성 용매와 하나 이상의 비극성 유기 용매의 혼합물중에서 다시 용해시킬 수 있다. 바람직하게는 유기 용매는 어느 한 극성 유기 용매가 어느 한 비극성 유기 용매와의 혼합물 형태로 이루어진다. 적합한 유기 용매의 혼합물이 사용되는 경우에는 서로 혼화되어야 한다. 극성 유기 용매 대 비극성 유기 용매의 % 비(v/v)는 80:20 내지 20:80%(v/v), 바람직하게는 30:70 내지 70:30 %(v/v)이다. 예를 들어, 소정량의 미정제 추출물은 50% 극성 유기 용매 대 50% 비극성 유기 용매비의 % 비로 극성 유기 용매 대 비극성 유기 용매의 적합한 용적에서 재용해시킬 수 있다. 바람직한 용매 혼합물은 50% 에틸 아세테이트:50% 헥산이다. 또 다른 적합한 용매가 상기 언급된 극성 및 비극성 유기 용매로부터 선택될 수 있다. 용해된 재료를 플래시 75 칼럼과 같은 플래시 크로마토그래피 장치에 올려 놓고, 예를 들어 50% 에틸 아세테이트:50% 헥산과 같은 이동상으로 적합한 용매 혼합물을 사용하여 적합한 유속으로 용리시킬 수 있다. 플래시 크로마토그래피 칼럼에서 적합한 유속은 사용된 칼럼의 크기에 따라 좌우되며 50 내지 500㎖/분, 바람직하게는 100 내지 250㎖/분, 보다 바람직하게는 약 250㎖/분일 수 있으며, 예를 들어 이동상으로서 50% 에틸 아세테이트:50% 헥산 혼합물을 사용한다. 이동상용 극성 용매:비극성 용매의 비는 상기 개략된 미정제 추출물을 재용해시키기 위해 사용되는 범위내에 있을 수 있다. 실제비는 사용되는 용매 혼합에 의존할 것이다. VAN 혼합물은 기재된 플래시 장치를 사용하여 다수의 분획으로 분리될 수 있다. 이후 이들 분획을 결합하여 증발 건조시킬 수 있다. 증발시킨 후에 결합된 분획(즉, 반 정제된 물질)을 적합한 극성 유기 용매, 예를 들어 상기 언급된 극성 용매중에서 재용해시키고, 용해된 분획의 샘플을 예를 들어 스페리소르브(Spheisorb) 칼럼 등과 같은 역상 칼럼을 사용하는 HPLC에 의해 정제한다. 플래시 크로마토그래피 처리 후, HPLC 처리 전에 수득된 결합된(반정제) 물질의 원액을 이동상으로 사용된 것과 유사한 용매중에서 재용해시키고, 분취액으로 나눌 수 있다. 이후, 분취액을 평등 분리 또는 구배 용리와 같은 당업에 공지된 표준 HPLC에 의해 처리될 수 있다. 당업자들은 이동상중에 재용해된 반정제 물질의 최대 농도가 사용되는 용매에 의존할 수 있음을 인지하는 것은 당연하다. 예를 들어, 결합된(반정제) 추출물의 25㎎/㎖ 이하는 아세토니트릴중에 재용해될 수 있으며, 이후 HPLC 칼럼에서 수행되기 위해 적합한 용적으로 나뉠 수 있다. 각각의 샘플을 사용되는 이동상에 따라 일정 시간 동안 흐르게 하고, VAN-10 화합물은 적합한 시간간격으로 용리시킬 수 있다. 적합한 시간 간격은 이동상으로 상이한 용매계를 사용하는 분석 칼럼상에서 예비 HPLC를 수행시키고, 용리 속도를 최적으로 하며, 샘플이 양호하게 분해되도록 하는 용매계를 선택하므로써 달성될 수 있다. 이동상에서 극성 유기 용매 % : 비극성 유기 용매는 90:10 내지 10:90, 바람직하게는 70 내지 80 : 30 내지 20, 매우 바람직하게는 75 내지 80 : 25 내지 20일 수 있다. 따라서, HPLC 정제용으로 아세토니트릴 : 물로 이루어진 이동상은 75% 아세토니트릴 : 25% 물일 수 있으며, 유속은 사용되는 칼럼의 크기에 따라 조정될 수 있으며, 예를 들어 5㎖/분이다. 적합한 극성 유기 용매로는 상기 언급된 것들이 포함된다. 바람직한 유기 용매로는 아세토니트릴 또는 메탄올이 있다.The resulting crude preparation can be further purified with a suitable VAN-10 compound such as VAN-10-4. The crude preparation may be reconstituted in an appropriate volume of an organic solvent, such as a polar organic solvent, or in a suitable volume of one or more polar solvents and a mixture of one or more nonpolar organic solvents. Preferably, the organic solvent is in the form of a mixture of any polar organic solvent with any non-polar organic solvent. When mixtures of suitable organic solvents are used, they must be miscible with one another. The ratio (v / v) of the polar organic solvent to the nonpolar organic solvent is 80:20 to 20:80 (v / v), preferably 30:70 to 70:30% (v / v). For example, a predetermined amount of the crude extract can be redissolved in a suitable volume of the polar organic solvent versus the nonpolar organic solvent at a ratio of 50% polar organic solvent to 50% nonpolar organic solvent. A preferred solvent mixture is 50% ethyl acetate: 50% hexane. Other suitable solvents may be selected from the above-mentioned polar and nonpolar organic solvents. The dissolved material can be loaded onto a flash chromatography device such as a flash 75 column and eluted at a suitable flow rate using a suitable solvent mixture, for example, as a mobile phase, such as 50% ethyl acetate: 50% hexane. The appropriate flow rate in the flash chromatography column depends on the size of the column used and may be from 50 to 500 ml / min, preferably from 100 to 250 ml / min, more preferably about 250 ml / min, 50% ethyl acetate: 50% hexane mixture is used. The ratio of mobile polar solvent: nonpolar solvent may be within the range used to redissolve the crude extract as outlined above. The actual ratio will depend on the solvent mixture used. The VAN mixture may be separated into a plurality of fractions using the described flash apparatus. These fractions can then be combined and evaporated to dryness. After the evaporation, the bound fraction (i. E., Semi-purified material) is redissolved in a suitable polar organic solvent, e. G., The polar solvent mentioned above, and a sample of the dissolved fraction is passed through a column, such as a Spheisorb column And purified by HPLC using the same reversed phase column. After the flash chromatography treatment, the stock solution of the bound (semi-purified) material obtained before the HPLC treatment can be redissolved in a solvent similar to that used as the mobile phase and divided into aliquots. The aliquots can then be treated by standard HPLC techniques known in the art such as equilibrium separation or gradient elution. Those skilled in the art will appreciate that the maximum concentration of redeposition material redissolved in the mobile phase may depend on the solvent used. For example, less than 25 mg / ml of bound (semi-purified) extract can be redissolved in acetonitrile and then divided into volumes suitable for carrying out on an HPLC column. Each sample is allowed to flow for a period of time according to the mobile phase used and the VAN-10 compound can be eluted at appropriate time intervals. Suitable time intervals can be achieved by performing preliminary HPLC on an analytical column using a different solvent system as the mobile phase, optimizing the elution rate, and selecting a solvent system that allows the sample to dissolve well. % Of polar organic solvent in mobile phase: nonpolar organic solvent may be from 90:10 to 10:90, preferably from 70 to 80:30 to 20, and very preferably from 75 to 80:25 to 20. Thus, for HPLC purification, the mobile phase of acetonitrile: water may be 75% acetonitrile: 25% water, and the flow rate may be adjusted according to the size of the column used, for example 5 ml / min. Suitable polar organic solvents include those mentioned above. Preferred organic solvents include acetonitrile or methanol.
당업자들은 활성 성분의 분리에서 각 단계의 용매 또는 용매의 혼합물의 선택은 각각의 분획의 생물 검정 분석 결과에 의해 좌우될 수 있으며, 최종적으로 활성 성분의 확인은 추출 과정의 상이한 단계에서의 각각의 분획에서 밝혀짐을 인지할 것이다.Those skilled in the art will appreciate that the choice of solvent or mixture of solvents in each step in the separation of the active ingredient can be dictated by the results of the bioassay analysis of each fraction and finally the identification of the active ingredient Will be recognized.
본 발명의 화합물은 시험관내 마우스 태아 섬유아세포에서 세포증식 억제 활성을 갖는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 화학식(I)의 화합물의 세포증식 억제 활성은 세포증식 억제에 대한 여러 시험관내 시험으로 입증되었다. 또한, 화학식(I)의 화합물의 세포증식 억제 활성은 세포증식 억제에 대한 여러 생체내 시험으로도 입증되었다.The compounds of the present invention were found to have cell proliferation inhibitory activity in mouse fetal fibroblasts in vitro. Thus, the cell proliferation inhibitory activity of compounds of formula (I) has been demonstrated by several in vitro tests for inhibiting cell proliferation. In addition, the cell proliferation inhibitory activity of the compound of formula (I) was also verified by various in vivo tests for inhibiting cell proliferation.
본 발명의 화합물은 질병 과정중에 비정상적으로 높은 세포 증식이 관찰되는 피부 질병의 치료에 유용한 것으로 지적되어 있다. 본 발명의 화합물은 세포 증식이 비정상적으로 높은 상기 피부 질환의 인지된 증상으로 건선과 같은 피부 질병 질환을 치료하는 데 사용될 수 있다.The compounds of the present invention are indicated as useful in the treatment of skin diseases in which abnormally high cell proliferation is observed during the course of the disease. The compounds of the present invention can be used to treat dermatological diseases such as psoriasis as a perceived symptom of the abnormally high cellular proliferation of the skin diseases.
따라서, 본 발명은 또한 사람을 포함하는 포유 동물의 건선과 같은 피부 질환의 치료 방법을 제공하며, 이 방법은 화학식(I)의 화합물 또는 생리학적 작용성 유도체의 임상적 유효량을 약제학적 유효 형태로 일일 1회 또는 수회, 또는 기타 적합한 방법, 예를 들어 경구적으로 또는 국소적으로 도포하여 사용하는 단계를 포함한다.Accordingly, the present invention also provides a method of treating skin diseases such as psoriasis in a mammal, including a human, comprising administering a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or a physiologically functional derivative thereof in a pharmaceutically effective form Once or several times a day, or by any other suitable method, for example, orally or topically.
또한, 추가 또는 대안으로써 본 발명의 일면은 예를 들어 건선 등과 같은 치료에 사용하기 위해 화학식(I)의 화합물 또는 이의 생리학적 작용성 유도체를 제공한다.Additionally, as an additional or alternative aspect, one aspect of the invention provides a compound of formula (I) or a physiologically functional derivative thereof for use in therapy, such as, for example, psoriasis and the like.
세포증식 억제제로서 효과를 나타내는 데 요구되는 화학식(I)의 화합물의 양은 물론 다양할 수 있으며, 궁극적으로 의사 또는 수의사의 판단에 좌우된다. 고려되어야 하는 인자로는 처리되는 상태, 투여 경로, 및 제제, 포유동물의 체중, 표면적, 연령 및 일반적인 상태 및 투여되는 특정 화합물의 특성이 포함된다. 본 발명의 세포증식 억제 화합물의 적합한 유효 투여량은 일반적으로 약 0.01 내지 약 120 ㎎/㎏ 체중, 예를 들어 0.1 내지 약 120㎎/㎏체중, 바람직하게는 약 0.1 내지 50㎎/㎏, 예를 들어 0.5 내지 50㎎/㎏이다. 총 일일 투여는 단일 투여, 다수 투여, 예를 들어 일당 2 내지 6회 투여가 주어질 수 있다. 예를 들어, 75㎏의 포유동물(예를 들어, 사람)에 대한 투여량 범위는 일당 약 8 내지 9000㎎이 될 수 있으며, 일반적인 투여량은 일당 약 50㎎일 수 있다. 분리된 다수 투여로 지시되는 경우에 치료량은 일당 4회로 설정된 경우 15㎎의 화학식(I)의 화합물이 일반적일 수 있다.The amount of the compound of formula (I) required to exhibit an effect as a cell proliferation inhibitor may, of course, vary and ultimately depends on the judgment of the physician or veterinarian. Factors to be considered include the condition to be treated, the route of administration, and the formulations, the weight, surface area, age and general condition of the mammal and the characteristics of the particular compound being administered. A suitable effective dose of the cell proliferation inhibiting compound of the present invention will generally be in the range of from about 0.01 to about 120 mg / kg body weight, for example from 0.1 to about 120 mg / kg body weight, preferably from about 0.1 to 50 mg / kg, 0.5 to 50 mg / kg. The total daily dose may be given as a single dose, multiple doses, for example 2 to 6 doses per day. For example, a dosage range for a 75 kg mammal (e.g., a human) can be about 8 to 9000 mg per day, and a typical dose can be about 50 mg per day. When indicated with multiple separate administrations, 15 mg of the compound of formula (I) may be common when the therapeutic dose is set at 4 cycles per day.
반면 활성 화합물이 단독으로 투여될 수 있는 경우, 활성 성분이 약제학적 제형으로 존재하는 것이 바람직할 수 있다. 본 발명의 제형은 의약 용도로 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체 및 임의로 기타 치료 성분과 함께 화학식(I)의 화합물을 포함할 수 있다. 담체는 제형의 나머지 성분과의 상용 면에서 약제학적으로 허용되고, 그의 부형제에 대해 실질적으로 유독하지 않아야 한다.Where, on the other hand, the active compound can be administered alone, it may be desirable for the active ingredient to be present in the pharmaceutical formulation. The formulations of the present invention may comprise a compound of formula (I) in conjunction with one or more pharmaceutically acceptable carriers and optionally other therapeutic ingredients for pharmaceutical use. The carrier should be pharmaceutically acceptable in commensurate with the remainder of the formulation and should be substantially non-toxic to its excipient.
따라서, 본 발명은 또한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 생리학적 작용성 유도체와 함께 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 제형을 제공한다.Accordingly, the present invention also provides a pharmaceutical formulation comprising a compound of formula (I) or a physiologically functional derivative thereof together with a pharmaceutically acceptable carrier.
당업자들은 화학식(I)의 활성 화합물을 포함하는 약제학적 제형이 칼렌듈라 종으로부터 분리 및/또는 정제된 하나 이상의 활성 화합물을 포함할 수 있음을 인지하는 것은 당연하다. 바람직하게는, 칼렌듈라 종은 하나 이상의 칼렌듈라 오피시날리스, 칼렌듈라 아르벤시스 및 칼렌듈라 페르시카로부터 선택될 수 있다. 매우 바람직하게는, 칼렌듈라 종으로부터 분리된 활성 화합물은 칼렌듈라 오피시날리스로부터 분리 및/또는 정제된 것이다. 따라서, 약제학적 제형은 두개 이상의 칼렌듈라 종으로부터 분리 및/또는 정제된 활성 성분을 함유할 수 있으며, 이 활성 성분은 상기 화학식(I)에 의해 포함되는 두 개 이상의 활성 화합물로 구성될 수 있다.Those skilled in the art will appreciate that the pharmaceutical formulation comprising the active compound of formula (I) may comprise one or more active compounds isolated and / or purified from calendula species. Preferably, the calendula species may be selected from one or more of calendula officinalis, calendula arbensis, and calendula percica. Most preferably, the active compound isolated from the calendula species is isolated and / or purified from calendula officinalis. Thus, the pharmaceutical formulations may contain active ingredients separated and / or purified from two or more calendula species, which may consist of two or more active compounds included by formula (I) above.
추가의 구체예에서, 약제학적 제형은 칼렌듈라 종으로부터 유도된 추출물로부터 분리 및/또는 정제된 하나 이상의 활성 화합물과 화학식(I)의 칼렌듈라 아르벤시스 및 칼렌듈라 페르시카로부터 분리 및/또는 정제된 하나 이상의 화합물의 혼합물을 포함할 수 있다.In a further embodiment, the pharmaceutical formulation comprises one or more active compounds isolated and / or purified from an extract derived from a calendula species and one or more compounds separated and / or purified from calendula arborescis and calendula fernica of formula (I) Or a mixture of compounds.
또한 본 발명은 화학식(I)의 화합물 또는 이의 생리학적 작용성 유도체 및 이의 약제학적으로 허용되는 담체와 관련됨을 포함하는 약제학적 제형의 제조 방법을 제공한다.The present invention also provides a process for preparing a pharmaceutical formulation comprising a compound of formula (I) or a physiologically functional derivative thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
본 발명에 따른 제형에는 경구 또는 국소 투여에 적합한 제형이 포함된다. 바람직한 제형으로는 피부와 같은 경피 투여에 적합한 제형들이 있다. 외부 조직, 예를 들어, 피부의 감염에 대한 제형은 예를 들어 0.075 내지 20% w/w, 바람직하게는 0.2 내지 15% w/w, 매우 바람직하게는 0.5 내지 10% w/w로 활성 성분을 함유하는 국소용 연고 또는 크림으로서 도포되는 것이 바람직하다. 연고로 제형되는 경우, 활성 성분은 파라핀성 또는 수혼화성 연고 기재와 함께 사용될 수 있다. 대안으로, 활성 성분은 수중유 크림 기재와 함께 크림으로 제형될 수 있다.Formulations according to the present invention include formulations suitable for oral or topical administration. The preferred formulations are formulations suitable for transdermal administration, such as the skin. Formulations for external tissue, e. G., Infections of the skin, may be formulated, for example, at 0.075 to 20% w / w, preferably 0.2 to 15% w / w, very preferably 0.5 to 10% As a topical ointment or cream. When formulated as ointments, the active ingredient may be used with paraffinic or water-miscible ointment substrates. Alternatively, the active ingredient may be formulated as a cream with an oil-in-water cream base.
경우에 따라, 크림의 수성상은 예를 들어, 30% w/w 이상의 다가 알코올, 즉 두개 이상의 히드록실기를 갖는 알코올, 예를 들어, 프로필렌 글리콜, 부탄-1,3-디올, 만니톨, 소르비톨, 글리세르콜 및 폴리에틸렌 글리콜 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 국소용 제형은 바람직하게는 피부 또는 다른 영향을 받게 되는 영역을 통한 활성 성분의 흡수 또는 침투를 향상시키는 화합물을 포함할 수 있다.Optionally, the aqueous phase of the cream may contain, for example, at least 30% w / w of a polyhydric alcohol, i. E., An alcohol having two or more hydroxyl groups, such as propylene glycol, butane-1,3-diol, mannitol, sorbitol , Glycerol and polyethylene glycols, and mixtures thereof. Topical formulations may preferably contain a compound that enhances absorption or penetration of the active ingredient through the skin or other affected area.
본 발명의 에멀젼의 오일상은 공지된 방법으로 공지 성분으로부터 이루어질 수 있다. 상기 오일상은 에멀젼화제(다르게는 에멀전트(emulgent)로 공지됨)만을 포함할 수 있지만, 지방 또는 오일과 함께, 또는 지방과 오일 모두와 함께 하나 이상의 에멀젼화제의 혼합물을 포함하는 것이 바람직하다. 바람직하게는, 친수성 에멀젼화제는 안정화제로서 작용하는 친유성 에멀젼화제와 함께 포함될 수 있다. 또한 오일과 지방을 모두 함유하는 것이 바람직하다. 또한, 안정화제를 함유하거나 함유하지 않는 에멀젼화제는 유화 왁스를 구성할 수 있으며, 이 왁스는 오일 및/또는 지방과 함께 오일 분산된 상의 크림 제형을 형성하는 유화 연고 기재를 형성한다.The oil phase of the emulsion of the present invention can be made from known components by known methods. The oil phase may comprise only an emulsifying agent (otherwise known as an emulgent), but it preferably comprises a mixture of one or more emulsifying agents together with a fat or oil, or both a fat and an oil. Preferably, a hydrophilic emulsifying agent may be included with the lipophilic emulsifying agent which serves as a stabilizer. Also, it is preferable to contain both oil and fat. In addition, emulsifying agents with or without stabilizers may constitute emulsifying waxes which form an emulsified ointment base that together with the oil and / or fat forms a cream-formulated oil-dispersed phase.
본 발명의 제형에 사용하기에 적합한 에멀젼트 및 에멀젼 안정화제에는 트윈(Tween) 80, 스팬(Span) 80, 세토스테아릴 알코올, 미리스틸 알코올, 글리세롤 모노-스테아레이트 및 나트륨 라우릴 설페이트가 포함된다.Emulsion and emulsion stabilizers suitable for use in the formulation of the present invention include Tween 80, Span 80, cetostearyl alcohol, myristyl alcohol, glycerol mono-stearate, and sodium lauryl sulfate .
제형용으로 적합한 오일 또는 지방의 선택은 약제학적 에멀젼으로 사용되는 대부분의 오일중에서의 활성 성분의 용해도는 매우 낮기 때문에, 목적하는 화장용의 특성을 달성하는 데 달려있다. 따라서, 크림은 바람직하게는 튜브 또는 기타 용기로부터 새어나오는 것을 피하기 위해 적합한 농도를 갖는 비유지, 비착색 및 세척가능 제품이어야 한다. 직쇄 또는 측쇄의 일 또는 이염기성 알킬 에스테르, 예를 들어, 디-이소아디페이트, 이소세틸 스테아레이트, 이소프로필 미리스테이트, 데실 올레에이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트, 2-에틸헥실 팔미테이트 또는 크로다몰(Crodamol) CAP으로 공지된 측쇄 에스테르의 혼합물이 사용될 수 있으며, 마지막 세 개가 바람직한 에스테르이다. 이들은 요구되는 특성에 따라 단독으로 또는 혼합하여 조합하여 사용될 수 있다. 대안으로 백색 연질 파라핀 및/또는 액체 파라핀과 같은 고용융 지질 또는 기타 광물성 오일이 사용될 수 있다.The choice of oils or fats suitable for use in molds depends on achieving the desired cosmetic properties since the solubility of the active ingredient in most oils used as pharmaceutical emulsions is very low. Thus, the cream should preferably be a non-greasy, non-stainable and washable product with a suitable concentration to avoid escaping from the tube or other container. Straight or branched chain or dibasic alkyl esters such as di-iso adipate, isocetyl stearate, isopropyl myristate, decyl oleate, isopropyl palmitate, butyl stearate, 2-ethylhexyl palmitate Or a mixture of branched chain esters known as Crodamol CAP may be used, the last three being preferred esters. They may be used alone or in combination according to the required properties. Alternatively, high melting fat or other mineral oils such as white soft paraffin and / or liquid paraffin may be used.
제형은 용이하게는 단위 투여 형태로 제공될 수 있으며, 제약 분야에서 널리 공지된 방법중 어느 하나로 제조될 수 있다. 모든 방법에는 활성 성분을 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 활성 성분을 액체 담체 또는 미세하게 분할된 고체 담체 또는 이둘 모두와 균일하게 그리고 직접적으로 결합시킨 후, 필요에 따라 생성물을 목적하는 제형으로 형성시켜 제조된다.The formulations may conveniently be presented in unit dosage form and may be prepared by any of the well-known methods in the pharmaceutical arts. All methods involve the step of combining the active ingredient with a carrier which constitutes one or more accessory ingredients. In general, formulations are prepared by uniformly and directly combining the active ingredient with a liquid carrier or a finely divided solid carrier or both, and then, if necessary, shaping the product into the desired formulation.
경구 투여에 적합한 본 발명의 제형은 향기나는 기재, 일반적으로 수크로오스 및 아카시아 또는 트래거캔스중에 활성 성분을 포함하는 캡슐, 교갑, 정제, 마름모꼴 정제; 젤라틴 및 글리세린과 같은 불활성 기재 또는 수크로스 및 아카시아중에 활성 성분을 포함하는 알약(pestille); 및 적합한 액체 담체중에 활성 성분을 포함하는 양치질약과 같은 별개의 단위로 제공될 수 있다. 각각의 제형은 일반적으로 분말 또는 과립, 또는 시럽, 일릭서, 에멀젼 또는 드라프트(draught) 등과 같은 수성 또는 비수성 액체로 용액 또는 현탁액으로서 소정량의 활성 화합물을 함유한다.Formulations of the present invention suitable for oral administration may be presented as a perfumed base, generally a capsule comprising the active ingredient in sucrose and acacia or tragacanth, a cachet, a tablet, a lozenge tablet; Inert substrates such as gelatin and glycerin or pesticides comprising sucrose and active ingredient in acacia; And in a separate unit such as a mouthwash containing the active ingredient in a suitable liquid carrier. Each formulation generally contains a predetermined amount of the active compound as a solution or suspension in an aqueous or non-aqueous liquid, such as a powder or granules, or a syrup, elixir, emulsion, or draft.
정제는 임의로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태로 적합한 기계로 활성 화합물을 압축하여 제조될 수 있으며, 임의로 결합제(예를 들어, 포비돈, 젤라틴, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스), 윤활제, 불활성 희석제, 방부제, 붕해제(예를 들어, 나트륨 전분 글리콜레이트, 가교된 포비돈, 가교된 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스), 계면활성제 또는 분산제와 함께 혼합될 수 있다. 성형 정제는 수분이 있는 분말화된 화합물과 불활성 액체 희석제와의 혼합물을 적합한 기계에서 성형하여 제조될 수 있다. 정제는 임의로 피복되거나 보표화될 수 있으며, 제형되므로써, 예를 들어 목적하는 방출 분포를 제공하는 다양한 비율로 히드록시프로필메틸셀룰로오스를 사용하여 그안의 활성 성분을 서서히 또는 조절하여 방출시킨다.Tablets may optionally be made by compression or molding with one or more accessory ingredients. Compressed tablets may be prepared by compressing the active compound with a suitable machine in the form of a free-flowing fluid such as powder or granules, optionally mixed with a binder (e.g., povidone, gelatin, hydroxypropylmethylcellulose), lubricant, inert diluent, (For example, sodium starch glycolate, crosslinked povidone, crosslinked sodium carboxymethylcellulose), a surfactant or a dispersing agent. Molded tablets may be prepared by molding in a suitable machine a mixture of a wet powdered compound and an inert liquid diluent. The tablets may optionally be coated or tabulated and may be formulated so that the active ingredient therein is slowly or controlled to be released using, for example, hydroxypropylmethylcellulose in various proportions to provide the desired release profile.
시럽은 활성 성분을 설탕, 예를 들어 수크로오스의 농축 수용액에 첨가하여 제조될 수 있으며, 이것에 또 다른 필요 성분이 첨가될 수 있다. 이러한 보조 성분에는 조미료, 설탕의 결정화를 지연시키기 위한 작용제 또는 기타 성분으로서 다가 알코올(예를 들어, 글리세롤 또는 소르비톨)의 용해도를 증가시키기 위한 작용제를 포함할 수 있다.Syrups may be prepared by adding the active ingredient to a concentrated aqueous solution of sucrose, for example sucrose, to which another necessary ingredient may be added. These auxiliary ingredients may include an agent to increase the solubility of the polyhydric alcohol (e. G., Glycerol or sorbitol) as an agent for delaying crystallization of the seasoning, sugar, or other ingredients.
상기 언급된 성분 이외에, 본 발명의 제형에는 추가로 희석제, 완충액, 조미제, 결합제, 계면활성제, 농후제, 윤활제, 방부제(산화방지제 포함)등으로부터 선택된 하나 이상의 보조 성분을 포함할 수 있다.In addition to the above-mentioned ingredients, the formulations of the present invention may further comprise one or more auxiliary ingredients selected from diluents, buffers, seasonings, binders, surfactants, thickeners, lubricants, preservatives (including antioxidants)
본 발명의 또 다른 일면에서는 건선 치료용 약제를 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 생리학적 작용성 유도체의 용도가 제공된다.In yet another aspect of the present invention there is provided the use of a compound of formula (I) or a physiologically functional derivative thereof for the manufacture of a medicament for the treatment of psoriasis.
도 1은 칼렌듈라 오피시날리스의 꽃으로부터 세포증식 억제 화합물을 분리시키기 위한 추출 단계를 나타내는 개략도이다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a schematic diagram showing an extraction step for separating cell proliferation inhibitory compounds from Calendula officinalis flowers. FIG.
도 2는 칼렌듈라 오피시날리스의 추출물로 건선을 앓고 있는 환자를 치료한 결과를 나타낸다.Figure 2 shows the results of treatment of a patient suffering from psoriasis as an extract of calendula officinalis.
본 발명은 하기 비제한적 실시예에 의해 예시될 것이다.The invention will be illustrated by the following non-limiting examples.
실시예 1: 추출물 Van-6-1의 분리Example 1: Isolation of the extract Van-6-1
도 1 참조1
식물 재료의 추출 및 분별 분리Extraction and fractionation of plant material
400g의 분말화된 식물 재료를 모두 소모될 때까지 석유 에테르(60-80°)로 속슬레 추출하였다. 이후, 추출물을 회전 증발기를 사용하여 감압하에서 농축시켜 49g의 추출 잔류물을 얻었다. 식물 재료를 상기 언급된 것과 유사한 조건하에서 클로로포름으로 추가 추출하여 추가 추출물을 얻었다. 이후, 이러한 미정제 추출물을 진공 액체 크로마토그래피(VLC)를 사용하여 분별 분리시켰다. 실리카 겔(Merk 7749)을 진공이 가해진 소결 깔대기에 충전시켜 직경 약 10㎝, 높이 5㎝의 칼럼을 얻었다. 이후 실리카에 흡수된 추출물(1회 20g)(1:1, w/w)을 칼럼의 상부에 배치시키고, 극성을 증가시키는 용매, 즉 헥산, 농도 증가된 클로로포름을 함유하는 헥산, 클로로포름, 증가량의 메탄올을 함유하는 클로로포름으로 용리시켰다. VLC 용리액을 수집하고, 성분에 대해 TLC로 분획을 분석하였다. TLC 분석을 근거로, VLC 용리액을 푸울링(pooling)시켜, 13개의 분획을 얻었다(표 1). 이들 분획을 하기 3T3 생물 검정 과정(실시예 5)에 따라 세포 증식 억제 활성에 대해 시험하였다.400 g of powdered plant material was slaughtered with petroleum ether (60-80 °) until all was consumed. Thereafter, the extract was concentrated under reduced pressure using a rotary evaporator to obtain 49 g of an extraction residue. The plant material was further extracted with chloroform under conditions similar to those mentioned above to obtain further extracts. This crude extract was then fractionated using vacuum liquid chromatography (VLC). The silica gel (Merk 7749) was charged in a vacuum sintered funnel to obtain a column about 10 cm in diameter and 5 cm in height. The extracts (1: 1, w / w), once absorbed in silica (1: 1, w / w), were then placed on top of the column and washed with a solvent increasing in polarity, namely hexane, hexane with increasing concentration of chloroform, chloroform, And eluted with chloroform containing methanol. The VLC eluate was collected and fractions were analyzed by TLC against the components. Based on the TLC analysis, the VLC eluate was pooled and 13 fractions were obtained (Table 1). These fractions were tested for cell proliferation inhibitory activity according to the following 3T3 bioassay (Example 5).
Van-2-6으로 표시된 용리액(클로로포름 및 메탄올의 1:1 혼합물을 사용하여 추출)이 가장 활성인 것으로 밝혀졌다.The eluent (extracted using a 1: 1 mixture of chloroform and methanol) identified as Van-2-6 was found to be the most active.
용리액 Van-2-36을 실리카겔에 대해 극성을 증가시키는 헥산:클로로포름 및 클로로포름: 메탄올 혼합물로 칼럼 크로마토그래피를 수행하였다. 10 내지 60% 클로로포름(헥산중의)으로 용리된 분획으로 Van-5-4를 얻었으며, 5% 메탄올(클로로포름중의(헥산중의))로 용리된 분획으로 Van-5-4를 얻었으며, 5% 메탄올(클로로포름중의)로 용리된 분획으로 Van-5-9를 얻었다. 이러한 분획은 지방산의 혼합물인 것으로 나타났으며(GC 및 NMR 스펙트럼), 세포 성정 억제를 나타내지 않았다. Van-5-10을 5% 메탄올 용리액에서 얻고, Van-5-11, Van-5-12 및 Van-5-15 분획을 10% 메탄올 용리액으로부터 얻었다.The eluant Van-2-36 was subjected to column chromatography with a mixture of hexane: chloroform and chloroform: methanol to increase the polarity to silica gel. Van-5-4 was obtained with a fraction eluted with 10-60% chloroform (in hexanes) and the fraction eluted with 5% methanol (in hexanes in chloroform) gave Van-5-4 , And the fraction eluted with 5% methanol (in chloroform) gave Van-5-9. These fractions were found to be a mixture of fatty acids (GC and NMR spectra) and showed no cell growth inhibition. Van-5-10 was obtained from 5% methanol eluent and Van-5-11, Van-5-12 and Van-5-15 fractions were obtained from 10% methanol eluent.
또한, Van-5-12를 정제하기 위해 정제 TLC(실리카 겔, 용매-클로로포름:메탄올; 95.5)를 사용하였다. 이로써 세포 성장 생물 검정(실시예 5)를 사용하여 매우 활성인 것으로 밝혀진 Van-6-1이 얻어졌다.Further, purified TLC (silica gel, solvent-chloroform: methanol; 95.5) was used to purify Van-5-12. This gave Van-6-1 which was found to be highly active using the cell growth bioassay (Example 5).
실시예 2: Van-9-2의 분리Example 2: Isolation of Van-9-2
VLC 및 TLC 분석을 포함하여, 상기 실시예 1의 절차를 수행하였다. Van-5-10을 정제 TLC(실리카 겔; 용매; 헥산; 클로로포름;에틸 아세테이트, 3:6:6)으로 처리하여 5개의 분획, Van-9-1 내지 Van-9-5를 얻었으며, 이중 Van-9-2는 3T3 세포 생물 검정(실시예 5)를 사용하여 생물학적으로 활성인 것으로 밝혀졌다.The procedure of Example 1 above was performed, including VLC and TLC analysis. Five fractions, Van-9-1 to Van-9-5, were obtained by treating Van-5-10 with purified TLC (silica gel; solvent: hexane; chloroform; ethyl acetate, 3: 6: 6) Van-9-2 was found to be biologically active using a 3T3 cell biology assay (Example 5).
실시예 3: Van-10-2, Van-10-3 및 Van-10-4의 분리Example 3: Isolation of Van-10-2, Van-10-3 and Van-10-4
상기 실시예 1 및 2의 실시예 원안을 수행하여 Van-9-2를 얻었다.The original examples of Examples 1 and 2 were conducted to obtain Van-9-2.
Van-9-2를 정제 TLC(용매: 헥산:클로로포름:에틸 아세테이트, 3:6:4)에 의해 Van-9-2B 및 Van-9-2C로 분리시켰다.Van-9-2 was separated into Van-9-2B and Van-9-2C by purified TLC (solvent: hexane: chloroform: ethyl acetate, 3: 6: 4).
Van-9-2B 및 Van-9-2C를 물중의 75% 아세토니트릴(+ 0.1% 트리플루오로아세트산)을 사용하여 ODS 부석용 칼럼상에서 HPLC에 의해 분리하였다. 이것으로 4개의 분획, Van-10-1, Van-10-2, Van-10-3 및 Van-10-4가 얻어졌다. Van-10-2, Van-10-3 및 Van-10-4에 대한 NMR 데이타가 하기에 제공된다. 아로마덴드라놀 부분에서 Van 화합물의 입체화학적 구조는 하기와 같다:Van-9-2B and Van-9-2C were separated by HPLC on an ODS column using 75% acetonitrile in water (+ 0.1% trifluoroacetic acid). This resulted in four fractions, Van-10-1, Van-10-2, Van-10-3 and Van-10-4. NMR data for Van-10-2, Van-10-3 and Van-10-4 are provided below. The stereochemical structure of the Van compound in the aromadendranol moiety is as follows:
그러나, 당업자들은 하기 구조를 갖는 아로마덴드라놀 부분의 또 다른 입체이성질 변이체가 또한 본 발명에 포함됨을 인지할 것이다:However, those skilled in the art will recognize that another stereogenic variant of the aroma dendronol moiety having the following structure is also included in the present invention:
실시예 4: Van-15A의 분리Example 4: Isolation of Van-15A
도 1 참조1
상기 실시예 1 및 2의 실시예 원안을 수행하여 Van-6-1을 얻었다.The original examples of Examples 1 and 2 were carried out to obtain Van-6-1.
Van-6-1를 칼럼 크로마토그래피(세파덱스 LH20: 용매: 클로로포름:메탄올, 1:1)에 의해 2개의 분획, 즉 Van-15-1(지방산을 함유하는 보다 무거운 분획) 및 Van-15-2(테르펜을 함유하는 보다 가벼운 분획)으로 분별 분리하였다.Van-6-1 was purified by column chromatography (Sephadex LH20: solvent: chloroform: methanol, 1: 1) to give two fractions: Van-15-1 (a heavier fraction containing fatty acids) 2 (a lighter fraction containing terpene).
Van-15-2를 정제 TLC(실리카 겔; 용매: 클로로포름:메탄올, 95:5)로 처리하여 Van-15A 및 소량의 성분 Van-15B를 얻었다. 활성 성분, Van-15A에 대한 NMR 데이타가 하기에 제공된다:Van-15-2 was treated with purified TLC (silica gel; solvent: chloroform: methanol, 95: 5) to give Van-15A and a small amount of Van-15B. NMR data for the active ingredient, Van-15A, is provided below:
실시예 5: 섬유아 세포 계통 3T3의 증식의 가역적 억제Example 5: Reversible inhibition of proliferation of fibroblast line 3T3
마우스 태아 섬유아세포(3T3-Flow로부터 입수할 수 있음)를 96-웰 조직 배양 플레이트상에 플레이팅하였다. 세포를 10% 소태아 혈청(Gibco), 1% 글루타민(Gibco), 1% 페니실린/스트렙토마이신(Gibco) 및 1% 비필수 아미노산(Gibco)를 함유하는 배지(Dulbeco's Modification of Eagles Medium(DMEM), Gibco)중에서 ㎖당 50,000 세포의 농도로 현탁시켰다. 100㎕의 세포 현탁액을 각각의 웰에 점적하여 각 웰당 5000 세포의 농도로 제공하였다. 세포를 24시간 동안 37℃에서 5% CO2분위기에서 인큐베이팅시켰다. 배지를 플레이트로부터 제거하고, 화합물의 희석율을 변화시켜(0, 30, 45, 60, 100㎍/㎖), 내부에 표시된 Van-10-4, Van-10-2, Van-10-3 및 Van-15A를 100% DMSO(Sigma)중에서 상기 화합물을 용해시켜 제조하였다. 이후, 이를 DMEM으로 희석하여 0.5% 농도의 DMSO를 얻었다. 이후, 상기 화합물을 0.5% DMSO(Sigma)를 함유하는 DMEM으로 상기 지적된 농도로 희석하고, 플레이트에 부가하였다(100㎕/웰). 각각의 희석은 3회 수행하였으며, 대조군은 0.5% DMSO를 함유하는 DMEM이었다. 0.5μCi3H-티미딘을 함유하는 50㎕의 DMEM을 각각의 웰에 부가하였다. 이후, 40% 소태아 혈청(Gibco), 4% 페니실린/스트렙토마이신(Gibco), 4% 글루타민(Gibco), 및 4% 비필수 아미노산(Gibco)을 각각의 웰에 부가하였다. 플레이트를 24시간 동안 37℃에서 5% CO2분위기에서 인큐베이팅시켰다. 이후 시험하의 화합물을 포함하는 배지를 제거하고, 플레이트를 인산염 완충 염수(PBS)(pH 7.3)로 2회 세척하였다. 베르센(Versene, Gibco사로부터 입수할 수 있는 EDTA 킬레이트화제)중의 5% 트립신(Gibco) 100㎕를 각각의 웰에 부가하였다. 상기 플레이트를 15분 동안 37℃에서 5% CO2분위기에서 추가 인큐베이팅시킨 후, 세포를 반자동 세포 수집기(Skatron)를 사용하여 웰에서 수집하였다. 수집된 세포를 최적상 "세이프(safe)"(LKB) 4㎖를 함유하는 신틸레이션 바이알(scintillation vial)에 넣고, 액체 신틸레이션 계수기(LKB WALLAC 1217 Rack beta)를 사용하여 방사활성을 측정하였다. 결과가 표 2 에 나타난다.Mouse fetal fibroblasts (available from 3T3-Flow) were plated on 96-well tissue culture plates. Cells were cultured in Dulbeco's Modification of Eagles Medium (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum (Gibco), 1% glutamine (Gibco), 1% penicillin / streptomycin (Gibco) and 1% Gibco) at a concentration of 50,000 cells per ml. 100 [mu] l of cell suspension was dispensed into each well at a concentration of 5000 cells per well. Cells were incubated in a 5% CO 2 atmosphere at 37 < 0 > C for 24 hours. The medium was removed from the plate and the dilution rate of the compound was changed (0, 30, 45, 60, 100 / / ml) to obtain Van-10-4, Van-10-2, Van- -15A was prepared by dissolving the compound in 100% DMSO (Sigma). Thereafter, it was diluted with DMEM to obtain DMSO at a concentration of 0.5%. The compound was then diluted to the indicated concentrations with DMEM containing 0.5% DMSO (Sigma) and added to the plate (100 [mu] l / well). Each dilution was performed 3 times and the control group was DMEM containing 0.5% DMSO. 50 의 of DMEM containing 0.5 C Ci 3 H-thymidine was added to each well. Subsequently, 40% fetal bovine serum (Gibco), 4% penicillin / streptomycin (Gibco), 4% glutamine (Gibco), and 4% nonessential amino acid (Gibco) were added to each well. Plates were incubated in a 5% CO 2 atmosphere at 37 ° C for 24 hours. The medium containing the compound under test was then removed and the plate was washed twice with phosphate buffered saline (PBS) (pH 7.3). 100 [mu] l of 5% trypsin (Gibco) in Versene (EDTA chelating agent available from Gibco) was added to each well. After additional incubation the plates 15 min at 37 ℃ in 5% CO 2 atmosphere for, and the cells were collected from the well using a semi-automatic cell harvester (Skatron). The collected cells were placed in a scintillation vial containing 4 ml of optimal phase " safe " (LKB) and radioactivity was measured using a liquid scintillation counter (LKB WALLAC 1217 Rack beta). The results are shown in Table 2.
실시예 6: 칼렌듈라 식물 분말로부터의 Van-10-4의 추출 및 분별 분리Example 6: Extraction and fractionation of Van-10-4 from calendula plant powder
종류Kinds
a) 속슬레a) Soxhlet
500g의 분말을 석유 에테르(60 - 80) 또는 클로로포름을 사용하여 추출하였다. 추출 기간은 일반적으로 사용된 용매에 무관하게 약 5일이다. 용매의 용적은 약 3ℓ이었으며, 미정제 수율은 60(석유 에테르) 내지 80g(클로로포름)이었다. 조생성물을 동일량의 실리카와 결합시키고, 추가의 5일 동안 방치시켜 분말 형태로 건조시켰다. 따라서, 각각의 회분에 대해 얻어진 총 분말은 120(석유 에테르) 내지 160g(클로로포름)이었다.500 g of powder was extracted with petroleum ether (60 - 80) or chloroform. The extraction period is generally about 5 days, regardless of the solvent used. The volume of the solvent was about 3 L, and the crude yield was 60 (petroleum ether) to 80 g (chloroform). The crude product was combined with the same amount of silica and allowed to stand for another 5 days to dry in powder form. Thus, the total powder obtained for each batch was 120 (petroleum ether) to 160 g (chloroform).
b) VLCb) VLC
30g의 미정제/실리카 분말을 약 5㎝ 깊이 x 10㎝ 폭의 실리카(60Hgel) VLC 칼럼의 상부에 층을 형성시켰다. 이 층을 미세한 모래층으로 피복하고, 하기 용매계를 사용하여 분별 분리하였다:30 g of crude / silica powder was layered on top of a silica (60Hgel) VLC column approximately 5 cm deep x 10 cm wide. This layer was covered with a fine sand layer and fractionated using the following solvent system:
5 x 200㎖ 50% 클로로포름: 석유 에테르(60-80)5 x 200 ml 50% chloroform: petroleum ether (60-80)
5 x 200㎖ 70% 클로로포름: 석유 에테르5 x 200 ml 70% chloroform: petroleum ether
5 x 200㎖ 100% 클로로포름5 x 200 ml 100% chloroform
5 x 200㎖ 10% 메탄올:클로로포름5 x 200 ml 10% methanol: chloroform
상기 마지막 단계로 Van-10-4를 함유하는 분획을 수득하였다. TLC로 모든 Van-10-4가 이 단계에서 VLC 칼럼으로 제거되었음이 확인되었다.In the last step, a fraction containing Van-10-4 was obtained. It was confirmed by TLC that all of the Van-10-4 was removed with a VLC column at this stage.
관련된 분힉을 회전 증발시켜 건조시켰다. 얻어진 샘플의 중량은 약 2 내지 3g이다.The relevant block was rotary evaporated to dryness. The weight of the obtained sample is about 2 to 3 g.
c) 세파덱스c) Sephadex
상기 단계에서 세파덱스 칼럼의 내포는 VLC 샘플을 정제시키는 방법을 훨씬 더 신속하게 한다. 상기 샘플을 클로로포름중에 재용해시키고, 칼럼상에 올려 놓았다. 사용된 칼럼은 높이 20㎝ x 폭 2㎝였으며, 13gm 세파덱스(친유성 LH-20-100)을 함유하였다. 샘플을 유속이 2 내지 3㎖/분인 10% 석유 에테르:클로로포름을 사용하여 용리시키고, 샘플을 1분 간격으로 수집하였다. Van-10-4의 존재가 TLC에 의해 확인되었으며, 관련된 분획의 부피가 커지게 되어 회전 증발시켰다. 얻어진 샘플의 중량은 약 500㎎이었다.The inclusion of the Sephadex column in this step makes the method of purifying the VLC sample much faster. The sample was redissolved in chloroform and placed on a column. The column used was 20 cm high x 2 cm wide and contained 13 gm Sephadex (lipophilic LH-20-100). Samples were eluted using 10% petroleum ether: chloroform with a flow rate of 2-3 mL / min and samples were collected at 1 minute intervals. The presence of Van-10-4 was confirmed by TLC, and the volumetric fractions of the relevant fractions were evaporated and rotary evaporated. The weight of the obtained sample was about 500 mg.
d) 실리카d) silica
작은 실리카 칼럼을 사용하였다. 50㎖의 뷰렛에 석유 에테트(60 - 80)중의 슬러리로서 제조된 20g의 실리카로 충전시켰다. 샘플을 클로로포름중에서 재용해시키고, 칼럼상에 올려 놓았다. 칼럼은 높이 40㎝ x 폭 10㎝였다. 샘플을 하기 용매계를 사용하여 용리시켰다:A small silica column was used. 50 ml of burette was charged with 20 g of silica prepared as a slurry in petroleum ette (60-80). The sample was redissolved in chloroform and placed on a column. The column was 40 cm high x 10 cm wide. The sample was eluted using the following solvent system:
10㎖ 용적, 유속 1㎖/분, 1분 간격으로 수집된 분획 사용10 ml volume, flow rate 1 ml / min, fraction collected at 1 minute intervals
석유 에테르(60 - 80)Petroleum ether (60 - 80)
10% 클로로포름: 에테르10% Chloroform: ether
20% 클로로포름: 에테르20% chloroform: ether
40% 클로로포름: 에테르40% chloroform: ether
50% 클로로포름: 에테르(샘플이 분리되기 시작)50% chloroform: ether (sample begins to separate)
60% 클로로포름: 에테르60% chloroform: ether
70% 클로로포름: 에테르70% chloroform: ether
80% 클로로포름: 에테르80% chloroform: ether
90% 클로로포름: 에테르90% chloroform: ether
100% 클로로포름100% chloroform
10% 에틸 아세테이트: 클로로포름10% ethyl acetate: chloroform
20% 에틸 아세테이트: 클로로포름20% ethyl acetate: chloroform
30% 에틸 아세테이트: 클로로포름30% ethyl acetate: chloroform
40% 에틸 아세테이트: 클로로포름(샘플 용리)40% ethyl acetate: chloroform (sample elution)
50% 에틸 아세테이트: 클로로포름50% ethyl acetate: chloroform
50% 에틸 아세테이트: 클로로포름(칼럼으로부터 모든 Van-10-4가 용리될 때까지 계속된다)50% ethyl acetate: chloroform (continued until all of Van-10-4 was eluted from the column)
이는 TLC에 의해 확인되었다. 상기 방법은 Van-10-4와 다양한 불순물(반정제 샘플)을 함유하는 샘플을 제공한다.This was confirmed by TLC. The method provides a sample containing Van-10-4 and various impurities (semi-purified sample).
실시예 7: 칼렌듈라 오피시날리스 추출물로 건선 치료Example 7: Psoriasis treatment with calendula officinalis extract
재료material
1. 식물 재료의 추출. 제제는 식물 재료의 클로로포름(순수 에탄올중의 5% v/v 클로로포름)추출물로, 20g의 건조된 식물 재료가 100㎖의 용매로 추출되는 비율로 하여 이루어진다.1. Extraction of plant material. The formulation is a chloroform of plant material (5% v / v chloroform in pure ethanol), and 20 g of dried plant material is extracted with 100 ml of solvent.
2. 크림의 제조. 상기 제조된 추출물을 증발 건조시키고 중량을 잰다. '건조' 추출물의 중량을 충분량의 수성 크림 B.P.와 혼합하여 황색/오렌지색을 갖는 크림 100g을 제조하였다.2. Preparation of cream. The prepared extract is evaporated to dryness and weighed. The weight of the 'dry' extract was mixed with a sufficient amount of an aqueous cream B.P. to prepare 100 g of a cream having a yellow / orange color.
3. 플라시보 크림의 제조. 플라시보 크림은 충분량의 베타카로텐을 수성 크림 B.P.에 첨가하므로써 제조하여 천연 약제를 함유하는 것과 거의 동일한 색상의 생성물을 얻었다.3. Preparation of placebo cream. The placebo cream was prepared by adding a sufficient amount of beta-carotene to the aqueous cream B.P. to obtain a product of almost the same color as that containing the natural drug.
칼렌듈라 오피시날리스로부터 얻어진 식물 재료의 추출물은(SSSB)은 건선을 치료하는 경우에 임상학적으로 유용한 것으로 밝혀졌다. 환자들에 대한 실험적 관찰 기간을 연장한 후, 건선이 있는 7명의 환자 그룹에 이중 맹시험을 수행하였다. 환자들(남성 4인, 여성 3인)의 연령은 53 내지 63세이며, 한 사람은 26세였다. 이들은 8.5 내지 25동안 건선을 앓고 있었다. 치료는 시험 전 및 후의 일련의 사진과 치료 전 후의 "건선 증상 점수"를 사용하여 관찰하였다. 치료는 4주 동안 일일 2회 크림을 도포하였으며, 3종의 치료제로 SSSB, 베트노베이트 및 플라세보가 있다.Extracts of plant material from calendula officinalis (SSSB) have been found clinically useful in treating psoriasis. After extending the experimental observation period for the patients, a double blind test was performed on a group of seven patients with psoriasis. Patients (4 males, 3 females) were 53 to 63 years old and 26 years old. They had psoriasis for 8.5 to 25 weeks. Treatment was monitored using a series of photographs before and after the test, and a "psoriasis symptom score" before and after treatment. The treatment was applied twice daily for 4 weeks, and the three treatments were SSSB, betonovate and placebo.
시험 결과가 도 2에 나타난다. 평균 조기치료 점수는 11.1이고, 이는 SSSB 치료 후 3.5로 감소되었으나, 베트노베이트 및 플라세포 치료 후에는 각각 5.5 및 7.4였다.The test results are shown in Fig. The mean early treatment score was 11.1, which was reduced to 3.5 after SSSB treatment, but 5.5 and 7.4 after treatment with vtnovate and plastocytes, respectively.
실시예 8: VAN-10-4의 분리 및 정제Example 8: Isolation and purification of VAN-10-4
실시예 6에서 수행된 바와 같이 15 내지 30g의 속슬레 추출된 미정제물을 15㎖의 50% 에틸 아세테이트: 50% 헥산중에 재용해시켰다. 상기 물질을 플래시 75 칼럼(Biotage Limeted)상에 올려 놓고, 이동상으로서 50% 에틸 아세테이트: 50% 헥산을 사용하여 150 내지 200㎖/분의 유속으로 용리시켰다. 플래시 칼럼으로부터 VAN 화합물의 용리 시간은 TLC로 측정하였다. 미정제 혼합물의 희석된 용액(에틸 아세테이트중에서 재용해된)을 TLC 플레이트(실리카 겔 60)상에 점적하였다. Van 화합물의 혼합물을 표준 바닐린 :농축 황산 전개제(1g 바닐린: 100㎖ 농축 황산)를 사용하여 가시화시키고, Rf 값을 계산하였다. TLC 이동상을 Rf 값이 약 3.0이 될 때까지 극성:비극성 용매의 비를 조작하여 조절하였다. 상응하는 칼럼 용적은 제조자의 설명서(Biotage Limited)에 따른 Rf 값으로부터 산정하였다. 플래시 75 시스템 대한 칼럼 용적은 약 1ℓ이고, 적합한 Rf 값을 제공하는 이동상은 50% 에틸 아세테이트: 50% 헥산이었다.15 to 30 g of Soxhlet extracted crude as redissolved in Example 6 were redissolved in 15 ml of 50% ethyl acetate: 50% hexane. The material was placed on a Flash 75 column (Biotage Limeted) and eluted at a flow rate of 150 to 200 ml / min using 50% ethyl acetate: 50% hexane as mobile phase. Elution time of the VAN compound from the flash column was measured by TLC. A dilute solution of the crude mixture (redissolved in ethyl acetate) was spotted onto the TLC plate (silica gel 60). The mixture of Van compounds was visualized using a standard vanillin: concentrated sulfuric acid development agent (1 g vanillin: 100 ml concentrated sulfuric acid) and the Rf value was calculated. The TLC mobile phase was adjusted by manipulating the ratio of polarity to non-polar solvent until the Rf value was about 3.0. The corresponding column volume was calculated from the Rf value according to the manufacturer ' s instructions (Biotage Limited). The column volume for the Flash 75 system was about 1 L and the mobile phase providing the appropriate Rf value was 50% ethyl acetate: 50% hexane.
상기 방법을 플래시 75 칼럼을 사용하여 시험하는 경우에는 VAN 화합물을 분획 15 내지 19(4 내지 5 칼럼 용적에 상응)중에서 용리시켰다. 수집된 각각의 분획은 250㎖였다. 유사한 조건하의 반복 수행에서, VAN 화합물을 분획 14 내지 18 중에서 용리시켰다. 이들 분획을 결합시키고, 증발 건조시켜 약 200 내지 400㎎ 수율의 반정제 물질을 얻었다. 상기 반정제 물질을 역상 스페리소르브 칼럼을 사용하여 HPLC에 의해 정제하였다. 반정제 물질의 원액은 아세토니트릴중의 25㎎/㎖로 제조하였으며, 200㎕의 분취액을 평등하게 처리하였다. 사용된 이동상은 75% 아세토니트릴: 25% 물이었으며, 유속은 5㎖/분이었다. 각각의 샘플 수행시간은 17 분이었으며, VAN-10-4를 약 14분 동안 용리시켰다. NMR 분광기로 용리액이 VAN-10-4임을 확인하였다.When the method was tested using a Flash 75 column, the VAN compound was eluted in fractions 15-19 (corresponding to 4-5 column volumes). Each fraction collected was 250 ml. In repeated runs under similar conditions, the VAN compound was eluted in fractions 14-18. These fractions were combined and evaporated to dryness to yield about 200-400 mg of semi-refill material. The semi-purified material was purified by HPLC using a reversed phase spericorbate column. The crude solution of the semi-purified material was prepared at 25 mg / ml in acetonitrile, and 200 쨉 l aliquots were treated equally. The mobile phase used was 75% acetonitrile: 25% water and the flow rate was 5 ml / min. Each sample run time was 17 minutes, and VAN-10-4 was eluted for about 14 minutes. NMR spectroscopy confirmed that the eluent was VAN-10-4.
실시예 9: 칼렌듈라 오피시날리스의 추출 - 1㎏ 규모Example 9: Extraction of Calendula officinalis - 1 kg scale
칼렌듈라 오피시날리스(1㎏)의 건조된 꽃잎을 조분말로 분쇄하고, 연속해서 헵탄(1 내지 4ℓ)로 추출하였다. 즉, 헵탄은 연속적으로 추출물로부터 증류되어, 꽃잎 집합체를 통해 침투되었다. 추출물을 진공하에서 500㎖의 용적으로 농축시켰다. 생성된 농축물을 500㎖의 아세토니트릴/물 용액, 9:1(v/v)로 3회 추출하였다. 아세토니트릴 분획을 함유하는 VAN을 결합시키고, 아세토니트릴을 진공 증류에 의해 제거하였다. 형성된 오렌지색 검을 500㎖의 에틸 아세테이트중에 재용해시키고, 500㎖(0.1M) 포화된 중탄산나트륨, 500㎖의 물, 500㎖(0.1M)의 염산 및 최종적으로 500㎖의 물로 연속해서 세척하였다. 이후 상기 에틸 아세테이트 용액을 진공하에서 증류시켜 10g의 오렌지색 오일을 수득하였다.The dried petals of calendula officinalis (1 kg) were ground with coarse powder and extracted successively with heptane (1 to 4 L). That is, heptane was continuously distilled from the extract and penetrated through the petal aggregate. The extract was concentrated under vacuum to a volume of 500 ml. The resulting concentrate was extracted three times with 500 ml of acetonitrile / water solution, 9: 1 (v / v). The VAN containing the acetonitrile fraction was combined and the acetonitrile removed by vacuum distillation. The orange gum formed was redissolved in 500 mL of ethyl acetate and washed successively with 500 mL (0.1 M) saturated sodium bicarbonate, 500 mL water, 500 mL (0.1 M) HCl and finally 500 mL water. The ethyl acetate solution was then distilled under vacuum to give 10 g of an orange oil.
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Cited By (1)
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