KR102679345B1 - 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 일 측면인 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물은 탈모의 근본적인 치료가 가능하다. 또한, 상기 조성물은 다양한 유형의 탈모에 고르게 효과가 우수하며, 인체 부작용이 없어 안전하다. 또한, 상기 조성물은 원료취 제어를 위한 별도의 처리를 하지 않아도 한방 재료 등에 의한 원료취가 없어 불필요한 화학물질 사용을 최소화할 수 있다.

Description

탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING ALOPECIA OR PROMOTING HAIR GROWTH}
본 발명은 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물에 관한 것이다.
두피의 모발은 체온 조절, 자외선 차단 등 생리적인 기능 뿐만 아니라, 심미적인 기능을 담당하는 신체 부위이다. 두피 모발은 모발의 생장 주기에 따라 두피로부터 탈락하는 것이 일반적이나, 유전적 원인, 호르몬 등 내분비계 교란, 영양 결핍, 약물 부작용, 혈액 순환 불량, 노화 등 다양한 원인에 의하여 비정상적으로 탈락하는 증상이 발생하기도 하는데, 이를 통상 탈모라고 부른다. 전세계적으로 탈모 인구는 약 1억 4천만명 이상인 것으로 추정되며, 국내 탈모 인구는 해마다 증가하여 약 1000만명에 달하는 것으로 알려져 있다. 한편, 탈모는 외모에 대한 관심이 높은 현대인들에게 있어서 중대 질병에 준하는 심각한 증상으로 받아들여지고 있다. 이에, 전 세계적으로 다수의 대학 및 기업 연구소 등에서 모발 성장과 탈모에 대한 세포학적, 생화학적 또는 분자생물학적 연구가 활발히 진행되고 있으며, 탈모 치료 및 모발 성장을 촉진시킬 수 있는 약물의 개발에도 많은 노력을 기울이고 있다. 현재까지 개발된 탈모 치료제 중 가장 대표적인 것은 미국 FDA(Food and Drug Administration)에서 공인 받은 미녹시딜, 피나스테리드 및 프로페시아 등이 있는데 이들은 약물의 효과 지속 기간이 짧고, 성욕감퇴, 임신 여성의 기형아 출산 위험성, 약물 투여 중단시 약물 투여 전보다 병세가 악화되거나 호르몬의 불균형을 야기하는 등의 부작용이 있어, 탈모 치료 효과가 우수하면서도 인체에 안전한 새로운 치료제의 개발이 필요하다.
KR 10-2241951 B1
일 측면에서, 본 발명의 목적은 탈모 개선 또는 예방 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것이다.
일 측면에서, 본 발명의 목적은 발모, 양모, 및 육모 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것이다.
일 측면에서, 본 발명의 목적은 다양한 유형의 탈모에 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것이다.
일 측면에서, 본 발명의 목적은 한방 재료 고유의 냄새를 제어할 수 있는 조성물을 제공하는 것이다.
일 측면에서, 본 발명의 목적은 다양한 제형으로 제조할 수 있는 탈모 개선 또는 예방용 조성물을 제공하는 것이다.
일 측면에서, 본 발명의 목적은 인체 부작용이 없는 탈모 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일 측면에서, 자초(Lithospermum erythrorhizon) 발효 추출물; 토당귀(Angelica gigas) 발효 추출물; 및 일당귀(Angelica acutiloba) 발효 추출물을 포함하며, 상기 자초 발효 추출물은 루미노코커스 토크(Ruminococcus torques)로 발효된 것을 포함하고, 상기 토당귀 발효 추출물은 지고사카로마이세스 비스포러스(Zygosaccharomyces bisporus)로 발효된 것을 포함하며, 상기 일당귀 발효 추출물은 엔테로코커스 듀란스(Enterococcus durans)로 발효된 것을 포함하는, 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 측면인 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물은 탈모의 근본적인 치료가 가능하다. 또한, 상기 조성물은 다양한 유형의 탈모에 고르게 효과가 우수하며, 인체 부작용이 없어 안전하다. 또한, 상기 조성물은 원료취 제어를 위한 별도의 처리를 하지 않아도 한방 재료 등에 의한 원료취가 없어 불필요한 화학물질 사용을 최소화할 수 있다.
도 1은 본 발명의 조성물을 이용하여 제조한 세정제를 사용한 후의 임상 실험 결과를 보이는 사진이다(좌: 사용 전, 우: 사용 후).
이하에서, 각 구성을 보다 상세히 설명하나, 이는 하나의 예시에 불과할 뿐, 본 발명의 권리범위가 다음 내용에 의해 제한되지 아니한다.
본 발명의 명세서 및 청구범위에 사용된 용어 또는 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정 해석되지 아니하며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
일 측면에서 본 발명은 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물로서, 상기 조성물은, 자초(Lithospermum erythrorhizon) 발효 추출물; 토당귀(Angelica gigas) 발효 추출물; 및 일당귀(Angelica acutiloba) 발효 추출물을 포함하며, 상기 자초 발효 추출물은 루미노코커스 토크(Ruminococcus torques)로 발효된 것을 포함하고, 상기 토당귀 발효 추출물은 지고사카로마이세스 비스포러스(Zygosaccharomyces bisporus)로 발효된 것을 포함하며, 상기 일당귀 발효 추출물은 엔테로코커스 듀란스(Enterococcus durans)로 발효된 것을 포함하는, 탈모 예방 또는 양모 촉진용 조성물이다.
자초(Lithospermum erythrorhizon)는 지치과의 여러해살이풀로, 자초는 우리나라 전역에 분포하며, 주로 산이나 들에서 자란다. 자초의 높이는 30~70cm이고, 뿌리는 땅속 깊이 뻗어 있으며 굵고 자주색이다. 줄기나 잎에는 거친 털이 있다. 잎은 자루가 없이 어긋나고 바소꼴이며 길이 3~7cm, 나비 1~2cm로 2~3개의 측맥이 뚜렷하다. 꽃은 5~6월 흰색으로 피고 수상꽃차례가 달린다. 포는 잎모양이며 꽃받침 조각은 5개로 넓은 선형이고 화관동부보다 길다. 화관은 끝이 5개로 얕게 갈라지며 거의 수평으로 퍼진다. 수술은 5개, 암술은 1개이며 씨방에는 십자형의 홈이 있다. 열매는 회백색의 분과이며 광택이 있다. 자초의 뿌리는 예로부터 예로부터 식용색소와 한약재로 사용되었다. 자초에는 시코닌 및 리그난 유도체가 과량 포함되어 있는 것으로 알려져 있다. 시코닌은 나프토퀴논 유도체 물질로 그 아류화합물로서 아세틸시코닌(acetylshikonin), 디하이드로시코닌(dehydroshikonon), 이소부티릴시코닌(isobutyrylshikonin), 베타-디메틸아크릴시코닌(β-dimethlacrylshikonin) 등이 있고, 비만, 췌장염, 항암, 항균 및 항산화 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 또한 리그난 유도체는 세린-팔미토일트랜스퍼라아제(serine-palmitoyltransferase, SPT)의 발현을 증가시키는 효과가 있으며, 이 효소는 세라마이드 합성량을 증가 기능이 있어, 리그난 유도체를 이용하여 습진성 피부염으로 인해 감소된 세라마이드 성분을 회복시켜 피부를 개선시키는 효과를 얻을 수 있다.
토당귀(Angelica gigas)는 미나리과에 속하는 여러해살이풀로 한국과 중국, 일본 등에 분포한다. 높이는 1~2m 정도로, 줄기 전체가 자줏빛을 띠며 향기가 많다. 꽃은 자주색을 띠며, 8-9월에 겹산형 꽃차례로 무리지어 핀다. 열매는 타원형이고 넓은 날개가 가장자리에 달려 있다. 토당귀의 뿌리는 한방에서 진정제, 강장제와 치질, 빈혈 치료 등에 사용된다. 토당귀에는 베타시토스테롤, 니코틴산, 엽산, 비타민 A, 비타민 E, 비타민 B12, 쿠마린 유도체 등의 다양한 유용성분이 함유되어 있다.
또한, 일당귀(Angelica acutiloba)는 미나리과에 속한 다년생 초본인 대화당귀의 뿌리를 건조시킨 것으로, 왜당귀로도 불리며, 그 맛은 달고 매우며, 성질은 따뜻하다. 일당귀는 국내 토종당귀인 참당귀(토당귀)보다는 중국당귀와 더욱 유사하다고 알려져 있으며, 실제 참당귀의 지표물질은 쿠마린(coumarin)계의 데쿠신(decursin), 데쿠시놀(decursinol)이지만, 일당귀의 지표물질은 프탈라이드계의 리구스틸라이드, 부틸리딘 프탈라이드 등으로 각각의 주성분이 상이(추명희 등, 2004년, 한국식품저장유통학회지, 11: 364-372)하다고 알려져 있는 등, 토당귀와 일당귀는 상이한 식물로 보는 것이 타당하다.
본 명세서에서 "발효 추출물"은, 발효 대상을 발효하여 얻은 발효물을 추출하여 얻은 물질을 의미할 수 있다. 발효는 각 발효 미생물의 생육에 최적화된 일반적인환경에서 수행될 수 있다.
일 측면에서, 상기 자초 발효 추출물 및 일당귀 발효 추출물은, 토당귀 발효 추출물을 100 중량부로 할 때, 각각 순서대로 150~300 중량부 및 50~150 중량부로 포함될 수 있다. 또는, 토당귀 발효 추출물을 100 중량부로 할 때, 자초 발효 추출물은 150~250 중량부, 또는 180~220 중량부로 포함될 수 있으며, 일당귀 발효 추출물은 70~150 중량부, 또는 70~130 중량부, 또는 90~110 중량부로 포함될 수 있다.
일 측면에서, 상기 자초 발효 추출물; 및 토당귀 추출물은 용매 추출에 의한 것이며, 상기 일당귀 발효 추출물은 초임계 유체 추출에 의한 것일 수 있다.
상기와 같은 측면에서, 자초 발효 추출물의 추출 용매는, 에탄올 및 아세트산 에틸을 포함할 수 있으며, 바람직하게, 에탄올을 이용하여 1차적으로 추출한 후, 에탄올 추출물을 아세트산 에틸을 이용하여 2차적으로 추출한 것을 포함할 수 있다.
또한, 상기 토당귀 발효 추출물의 추출 용매는, 헥산을 포함할 수 있다.
일 측면에서, 자초 발효 추출물, 토당귀 발효 추출물, 및 일당귀 발효 추출물은 상기와 같은 균주로 발효되고, 상기와 같은 추출방법(용매 등)으로 추출할 때, 효과가 극대화된 이들 발효 추출물의 혼합물을 얻을 수 있다.
일 측면에서, 상기 발효 추출물의 혼합물은 조성물 총 중량을 기준으로, 0.001~99.9 중량%로 포함될 수 있고, 바람직하게는 10~70중량%, 또는 30~50 중량%로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 측면에서, 상기 조성물은 오레가노 추출물, 미선 나무 추출물, 및 제라니움 오일을 더 포함할 수 있다.
상기와 같이 상기 조성물이 오레가노 추출물, 미선 나무 추출물, 및 제라니움 오일을 더 포함함으로써, 자초, 토당귀 및 일당귀의 원료에서 유래된 냄새(원료취)를 제어할 수 있다.
일 측면에서, 상기 오레가노 추출물 및 미선 나무 추출물은, 제라니움 오일을 100 중량부로 할 때, 각각 순서대로, 1500~2500 중량부, 및 1000~2000중량부로 포함될 수 있다.
구체적으로, 상기 오레가노 추출물은, 제라니움 오일 100 중량부를 기준으로, 1800~2500 중량부, 또는 1800~2300 중량부, 1900~2100 중량부로 포함될 수 있고, 상기 미선 나무 추출물은, 제라니움 오일 100 중량부를 기준으로, 1300~1700 중량부, 또는 1400~1600 중량부로 포함될 수 있다.
상기 오레가노 추출물 및 미선 나무 추출물은 물, 유기용매 또는 유기용매 수용액을 이용하여 추출한 것을 포함할 수 있고, 바람직하게는 벤젠을 이용하여 추출한 추출물을 포함할 수 있다.
일 측면에서, 오레가노 추출물, 미선 나무 추출물, 및 제라니움 오일의 총량은, 조성물 총 중량을 기준으로, 0.1~30 중량%, 또는 0.1~20 중량%, 또는 0.1~10 중량%, 또는 1~5 중량%일 수 있다.
일 측면에서, 상기 발효 추출물의 혼합물은, 오레가노 추출물, 미선 나무 추출물, 및 제라니움 오일의 혼합물의 총 중량을 100 중량부로 할 때, 500~2000 중량부, 또는 1000~2000 중량부, 또는 1000~1500 중량부, 또는 1100~1500 중량부로 포함될 수 있다.
일 측면에서, 상기 조성물은 세정용 조성물 또는 화장료 조성물을 포함할 수 있다.
상기 조성물은 화장품학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유할 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및/또는 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적 방법에 따라 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 조성물은 추가적으로 점증제를 함유할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함되는 점증제는 예컨대, 메틸 셀룰로스, 카르복시 메틸 셀룰로스, 카르복시 메틸 하이드록시 구아닌, 하이드록시 메틸 셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스, 카르복시 비닐 폴리머, 폴리쿼터늄, 세테아릴 알콜, 스테아릭산, 카라기난 등을 사용할 수 있다.
또한, 상기 조성물은 필요에 따라 적절한 각종의 기제와 첨가제를 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 발명자에 의해 용이하게 선정될 수 있다. 필요에 따라 허용 가능한 첨가제를 함유할 수 있으며, 예를 들면, 당업계에 통상적인 방부제, 색소 등의 성분을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.
일 측면에서, 상기 조성물은 앰플, 스킨소프너, 토너, 아스트린젠트, 로션, 마사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양화장수, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상일 수 있다.
일 측면에서, 상기 조성물의 제형은 W/S, W/O, P/W, W/O/W, 또는 O/W/O일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 제조예 및 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 제조예와 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[제조예]
[제조예 1] 탈모 예방 및 양모 촉진용 조성물 제조
정제수로 세척한 후, 건조 및 멸균한 자초를 분말화한 후, 루미노코커스 토크를 접종하여, 자초 발효물을 제조하였다. 제조된 자초 발효물 90g에 에탄올을 약 1.8L를 첨가하고 상온에서 일주일 동안 추출하여, 에탄올 추출물 12g을 추출하였다. 그 후 에탄올 추출물에 아세트산 에틸을 150ml 가하여, 최종 자초 발효물 추출물을 얻었다.
또한, 토당귀 발효 추출물은, 토당귀를 정제수로 세척한 후, 건조 및 멸균한 토당귀를 세절하여 분말화한 후, 지고사카로마이세스 비스포러스 접종하여, 토당귀 발효물을 제조하였다. 제조된 토당귀 발효물 90g에 헥산 약 1.5L를 첨가하고 상온에서 일주일간 추출하여, 토당귀 발효물 헥산 추출물을 제조하였다.
또한, 일당귀 발효 추출물은, 일당귀를 정제수로 세척한 후, 건조 및 멸균한 후 세절하여 분말화하고, 엔테로코커스 듀란스를 접종하여, 일당귀 발효물을 제조하였다. 제조된 일당귀 발효물 1g을 시료 카트리지에 충전하고, 초임계 추출 장치(SFX 3560, Isco Inc.,Lincoln, NE, USA)를 이용하여 추출하여 일당귀 발효 추출물을 제조하였다. 이때 추출압력은 45Mpa, 추출온도는 50℃, 이산화탄소의 유속은 55ml/min, 추출시간은 50분이었다.
제조된 자초 발효 추출물, 토당귀 발효 추출물 및 일당귀 발효 추출물은 각각 2:1:1의 중량비율로 혼합하여, 탈모 예방 및 양모 촉진용 조성물을 제조하였다.
[제조예 2] 향취가 개선된 탈모 예방 및 양모 촉진용 조성물 제조
제조예 1의 조성물에 오레가노 추출물, 미선 나무 추출물 및 제라니움을 혼합하여, 향취가 개선된 조성물을 제조하였다.
구체적인 방법은 다음과 같다. 벤젠으로 오레가노 및 미선 나무 각각을 추출하여 오레가노 추출물과 미선 나무 추출물을 제조하였다. 제조된 오레가노 추출물, 미선 나무 추출물과 제라니움 오일을 순서대로 20:15:1의 중량비율로 혼합하여, 향취 조성물을 제조하였다. 그 후 제조예 1의 조성물과 제조된 향취 조성물을 약 13:1의 중량비율로 혼합하여, 향취가 개선된 탈모 예방 및 양모 촉진용 조성물을 제조하였다.
[실험예]
[실험예 1] 인간 모유두 세포 증식 효과 평가
제조예 1의 조성물이 인간 모유두세포(human hair dermal papilla cell)의 세포 성장에 미치는 효과를 평가하였다.
5% FBS(fetal bovine serum)와 MSCGS가 포함된 MSC(Mesenchymal Stem Cell) 배지(Innoprot, cat. no. P60115)에 인간 모유두세포(Innoprot, cat. no. P10881)를 1 Х 104 cells/이 되도록하여 96 well 플레이트에 접종하여 37℃, 5% CO2 조건 하에서 24 시간 동안 배양하였다. 다시 무혈청배지로 24시간 배양한 후, 상기 실시예의 시료를 5, 25 및 50 ㎍/ml의 농도로 처리하여 72 시간 동안 배양하였다. 양성대조군으로서 미녹시딜(Minoxidil, sigma) 100 μM을 처리하여 상기와 동일하게 배양하였다.
그 후 MTS(CellTiter 96 AQueous One Solution Cell proliferation assay kit, Promega) 시약을 20 ㎕ 첨가하고, 세포배양기에서 3시간 동안 배양 후 ELISA reader를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 성장 정도를 측정하였다.
그 결과는 아래 표 1에 나타내었다.
미처리군
(control)
제조예 1
(5㎍/ml)
제조예 1(25㎍/ml) 제조예 1(50㎍/ml) 미녹시딜(100 μM
cell proliferation(% of control) 100 250 310 330 120
그 결과, 제조예 1의 조성물은 농도의존적으로 인간 모유두세포 증식 효과가 우수함을 알 수 있었고, 미녹시딜에 비해서도 우수한 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
[실험예 2] 모낭 길이 성장 평가
인체로부터 실험 적용을 위한 후두부 생검조직을 채취하여 폴리큘라 유닛으로 티리밍하여 군(group) 당 15개의 모낭 샘플(총 60개)을 분리하였다. 상기 분리한 모낭 샘플을 24 well 플레이트에 2mM L-글루타민(PAA, Coelbe, Germany), 10㎍/ml 인슐린, 10ng/ml 히드로코르티손(hydrocortisone; Sigma, StLouis, MO), 0.1% 훈기존(fungizone; Gibco, NY, USA), 10㎍/ml 스트렙토마이신, 100u/ml 페니실린(Gibco, NY, USA)를 포함하는 500μl의 William's E(Gibco, NY, USA)배지 상에서 각 웰 당 5~6개씩 배양하였다. 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하며, 2-3일 마다 배지를 교환하며 6일차까지 배양하였다.
2-3일 마다 실체현미경으로 모낭 촬영을 한 뒤, Image J 프로그램을 이용하여 성장 길이를 측정하였다. 측정한 날짜 별 각 모낭 성장길이의 평균값을 계산하여 표 2에나타냈다. 표 2에서 볼 수 있듯이, 제조예 1의 조성물(5㎍/ml)을 처리한 경우, 대조군인 미녹시딜을 처리한 군에 비하여 모낭길이 성장이 향상된 것을 알 수 있었다.
미처리군 제조예 1 처리군 미녹시딜 처리군
3일 경과시 모발성장 길이(mm) 0.47 0.95 0.70
6일 경과시 모발성장 길이(mm) 1.27 1.98 1.50
[실험예 3] 5 알파-리덕타아제 발현 억제 효과 확인
Tris-HCL 완충액(pH 7.2) 1.0ml, 테스토스테론 (500㎍/ml) 0.3 ml 및 효소액 1.0 ml를 혼합하고, 상기 제조예의 조성물을 각각 25㎍/ml의 농도로 추가하였다. 이후에, NADPH (0.77mg/ml) 0.5ml을 가하여 반응을 개시하고, 37℃에서 30분간 배양 하였다. 디클로로메탄(Dichloromethane) 5ml을 첨가하여 반응을 정지시켰다. 그 후, 내부 표준물질 (p-hydroxybenzoicacid n-hexyl ester, 0.1mg/ml) 0.5ml을 가하여 10분간 진탕하고, 3000rpm에서 10분간 원심분리 하였다. 그 후, 상층을 제거하고 남은 디클로로메탄층에 메탄올 5ml을 가하여 고속 액체크로마토그래피(HPLC)용 샘플로 사용하였다. 음성대조군으로는 NADPH를 가하기 전에 디클로로메탄을 첨가하여 반응을 일으키지 않도록 한 것을 사용하였고, 양성대교군으로는 100 μM 의 미녹시딜을 사용하였다. 대조군 대비 효소 저해 활성은 하기 표 3에 나타내었다.
음성대조군 제조예 1 미녹시딜
5α-리덕타아제 저해 활성(%) 0 42 25
[실험예 4] 임상을 통한 육모 효과 확인
탈모 증상을 겪고 있는 30대 여성에 대하여, 제조예 1의 조성물을 이용하여 제조한 샴푸를 세달간 사용한 후, 탈모 현상 완화 여부를 관찰하였다. 샴푸 조성은 시중의 삼푸 조성물과 유사하게 구성하였으며, 제조예 1의 조성물은 샴푸 총 중량을 기준으로 약 1중량%로 사용하였다. 그 결과, 도 1과 같이 탈모 현상이 급격히 개선됨을 확인할 수 있었다.
[실험예 5] 기호도 평가
20~30대의 여성 패널 50명에 대하여, 제조예 1과 제조예 2의 조성물의 향취에 대한 기호도를 조사하였다. 0점~10점을 부여하였으며, 향취가 우수할수록 높은 점수를 부여하도록 하였다. 그 결과는 아래 표 4과 같이, 제조예 2의 조성물의 향취가 제조예 1에 비하여 현저히 우수함을 확인할 수 있었다.
제조예 1 제조예 2
향취 점수 6.7 9.5
[비교 실험예]
[비교 실험예 1] 발효 추출물의 함량비율에 따른 탈모 개선, 양모 촉진 개선 효과 비교
자초 발효 추출물, 토당귀 발효 추출물, 일당귀 발효 추출물의 혼합 비율을 아래 표 5와 같이 달리하여, 실험예 1~3의 실험을 수행하고 결과를 표 6에 기재하였다. 이 때 사용되는 조성물의 농도는 25㎍/ml로 하였다.
비교 1 비교 2 비교 3 비교 4 비교 5 비교 6
자초 발효 추출물 2 2 2 2 1.5 2.5
토당귀 발효 추출물 0.5 1.5 1 1 1 1
일당귀 발효 추출물 1 1 0.5 1.5 1 1
비교 1 비교 2 비교 3 비교 4 비교 5 비교 6
cell proliferation(% of control) 250 290 245 285 261 278
6일 경과시 모발성장 길이(mm) 1.55 1.75 1.47 1.69 1.53 1.78
5α-리덕타아제 저해 활성(%) 28 35 27 33 29 37
[비교 실험예 2] 발효물의 발효 균주에 따른 효과 차이
아래 표 7에 기재된 것과 같이, 각 발효물 제조시 사용하는 균주의 종류를 달리하여, 실험예 1~3의 실험을 수행하고, 결과를 표 8에 나타내었다.
비교 7 비교 8 비교 9 비교 10 비교 11 비교 12 비교 13
자초 발효 추출물 락토바실러스 루미노코커스 토크 지고사카로마이세스 비스포러스 엔테로코커스 듀란스 루미노코커스 그나부스 루미노코커스 토크 루미노코커스 토크
토당귀 발효 추출물 락토바실러스 루미노코커스 토크 지고사카로마이세스 비스포러스 엔테로코커스 듀란스 지고사카로마이세스 비스포러스 지고사카로마이세스 바일리 지고사카로마이세스 비스포러스
일당귀 발효 추출물 락토바실러스 루미노코커스 토크 지고사카로마이세스 비스포러스 엔테로코커스 듀란스 엔테로코커스 듀란스 엔테로코커스 듀란스 엔테로코커스 파에시움
비교 7 비교 8 비교 9 비교 10 비교 11 비교 12 비교 13
cell proliferation(% of control) 150 127 162 133 167 159 175
6일 경과시 모발성장 길이(mm) 1.05 0.94 1.11 1.01 1.23 1.18 1.36
5α-리덕타아제 저해 활성(%) 17 15 21 18 21 20 24
[비교 실험예 3] 발효 추출물의 추출 용매에 따른 효과 차이
아래 표 9에 기재된 것과 같이, 각 발효물 제조시 사용하는 균주의 종류를 달리하여, 실험예 1~3의 실험을 수행하고, 결과를 표 10에 나타내었다.
비교 14 비교 15 비교예 16 비교 17 비교 18 비교 19 비교 20
자초 발효 추출물 에탄올로 2회 추출 아세트산 에틸 2회 추출 아세트산 에틸로 추출 후 에탄올로 추출 제조예 1과 동일 제조예 1과 동일 제조예 1과 동일
초임계 추출
토당귀 발효 추출물 제조예 1과 동일 제조예 1과 동일 제조예 1과 동일 에탄올 초임계 추출 제조예 1과 동일
일당귀 발효 추출물 제조예 1과 동일 제조예 1과 동일 에탄올
비교 14 비교 15 비교 16 비교 17 비교 18 비교 19 비교 20
cell proliferation(% of control) 245 252 278 264 275 269 267
6일 경과시 모발성장 길이(mm) 1.42 1.53 1.75 1.46 1.50 1.62 1.58
5α-리덕타아제 저해 활성(%) 19 21 34 27 32 35 33

Claims (8)

  1. 탈모 완화용 화장료 조성물로서,
    상기 조성물은,
    자초(Lithospermum erythrorhizon) 발효 추출물; 토당귀(Angelica gigas) 발효 추출물; 및 일당귀(Angelica acutiloba) 발효 추출물을 포함하며,
    상기 자초 발효 추출물은 루미노코커스 토크(Ruminococcus torques)로 발효된 것을 포함하고,
    상기 토당귀 발효 추출물은 지고사카로마이세스 비스포러스(Zygosaccharomyces bisporus)로 발효된 것을 포함하며,
    상기 일당귀 발효 추출물은 엔테로코커스 듀란스(Enterococcus durans)로 발효된 것을 포함하는, 탈모 완화용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 자초 발효 추출물 및 일당귀 발효 추출물은,
    토당귀 발효 추출물을 100 중량부로 할 때, 각각 순서대로 150~300 중량부 및 50~150 중량부로 포함되는, 탈모 완화용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 자초 발효 추출물; 및 토당귀 발효 추출물은 용매 추출에 의한 것이며,
    상기 일당귀 발효 추출물은 초임계 유체 추출에 의한 것인, 탈모 완화용 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 자초 발효 추출물의 추출 용매는, 에탄올 및 아세트산 에틸을 포함하며,
    상기 토당귀 발효 추출물의 추출 용매는, 헥산을 포함하는, 탈모 완화용 화장료 조성물.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 자초 발효 추출물은,
    에탄올을 이용하여 추출한 후, 아세트산 에틸을 이용하여 추출한 것을 포함하는, 탈모 완화용 화장료 조성물.
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  7. 삭제
  8. 삭제
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