KR102597791B1 - 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모촉진용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다. 구체적으로 본 발명의 조성물에 의하면 모유두세포를 발달 및 증식시켜 탈모를 예방하고 발모를 촉진시킬 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물에 의하면 천연소재를 활용함으로써 기존 탈모제 등과 달리 장기투여에도 안전성을 제공할 수 있다.

Description

보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모촉진용 조성물{Composition for preventing hair loss or promoting hair growth containing the Elaeagnus macrophylla or the fraction thereof}
본 발명은 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 조성물과 그의 용도에 관한 것이다. 구체적으로 보리밥나무 추출물 등은 모유두세포의 발달을 촉진시켜, 탈모를 예방하고 발모를 촉진시킬 수 있다.
모발은 표피세포가 변화한 것으로 한선, 피지선과 함께 피부 부속 기관이라고 한다. 모발의 구조를 피부의 단면에서 관찰해 보면, 표피는 진피 쪽으로 움푹 파인 관강을 형성하는 데 이것을 모포(follicle)라고 한다. 모포의 위쪽에는 피지선이 붙어 있다. 이곳에서 피지를 분비하고 두피나 모발에 촉촉함을 부여하며 보호하고 있다. 모발은 손톱과 달리 이생 성장을 계속하지는 않는다. 따라서 모발 하나의 독립된 수명이 있으며 성장, 탈모, 신생을 반복하는데 이를 모발주기라 한다. 즉, 성장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen)의 3기로 나누어지고 모발은 성장기에만 생겨난다. 이러한 모발주기는 모낭 내의 인접하고 있는 모유두(dermal papilla cells; DPC), 진피초(dermal sheath cells), 줄기세포, 모아(hair germ) 세포들 사이의 상호작용에 의하여 조절된다.
한편, 탈모 현상이라 함은 모발이 휴지기 상태에서 빠지는 일반적인 휴지기 탈모 현상과 비정상적인 탈모 현상인 생장기 탈모 현상으로 구별할 수 있는데, 특히 후자를 탈모증이라 일컫는다. 다시 말해, 탈모증은 모낭의 성장주기 중 성장기의 모낭에서 자라는 모발보다 퇴행기 또는 휴지기의 모낭에서 자라는 모발의 비율이 높아져 비정상적으로 빠지는 모발이 증가하는 현상을 말한다. 이러한 탈모는 모낭의 축소화 및 성장기 모낭의 감소 등의 특징을 수반한다. 탈모의 원인은 아직까지 명확히 밝혀지지 않았으나 유전적인 원인이 크게 자리하고 있으며, 두피 내 혈액 순환 불량, 남성 호르몬의 과잉 작용, 피지 분비 과잉, 노화, 스트레스 등에 의해서도 발생하는 것으로 알려져 있다. 또한 유적적인 요인 이외에도 노화, 스트레스, 호르몬 불균형, 약물 및 영양 부족 등 다양한 후천적 요인에 의해 발생한다.
대표적인 탈모 치료제로는 미국의 식품의약국(Food and Drug Administration; FDA)의 승인을 받은 피나스테라이드(finasteride, PROPECIA®)와 미녹시딜(minoxidil, Rogain®)이 있다. 피나스테라이드와 미녹시딜은 각각 전립선 비대증 및 고혈압 치료를 위해 개발되었으나, 두 약물 모두 모발성장을 촉진하는 효능이 밝혀져 발모제로 이용되고 있다. 특히, 피나스테라이드는 프로페시아 (Propecia, Merck & Co., Inc.의 상표명)로 시판되고 있는데, II 형 5α-환원효소의 기능을 억제하여 테스토스테론 (Testosterone)이 디하이드로 테스토스테론(Dihydrotestosterone, DHT)로 전환되는 것을 방지함으로써 탈모를 억제하는 것으로 알려져 있다. 그러나 피나스테라이드는 일부 환자들에 대해서는 성욕 감퇴, 발기 부전 등의 부작용을 나타낸다는 문제점이 있다. 따라서 이러한 탈모치료제가 가지는 장기복용의 문제를 해결하기 위하여 인체에 무해하면서도 탈모 예방 및 발모 촉진 소재의 개발이 요구된다.
한편, "보리밥나무(Elaeagnus macrophylla)"는 보리수나무과의 상록 관목 또는 덩굴나무이다. 보리밥나무는 한국·일본·타이완 등에 분포하며, 해안 지대에서 잘 자라며 작은 가지에 은백색 및 연한 갈색의 비늘털이 있다. 보리밥나무는 사람 키 높이 정도로 자라며 약간 덩굴진다. 잎은 어긋나며 길이 5-10cm, 저비 4-6cm의 원형 또는 난형이다. 꽃은 9-10월에 피는데 잎겨드랑이에서 몇 개씩 달리고 꽃잎은 없다. 작은꽃자루는 길이 5-10mm이며 백색과 적갈색의 비늘털이 있다. 열매는 장과로서 길이 15-17mm의 타원형이며 이듬해 4-5월에 빨갛게 익는데 식용한다.
본 발명은, 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은, 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 약학적 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은, 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품, 건강기능보조식품 또는 식품 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 일 구현예에 의하면,
보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 구현예에 의하면,
보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 약학적 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 다른 구현예에 의하면,
보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품, 건강보조식품 또는 식품 조성물이 제공된다.
본 발명의 구체예에 따른 보리밥나무 추출물 등을 함유하는 조성물은 모유두세포의 발달을 촉진하고, 모발성장인자인 ALP(alkaline phosphatase)의 활성을 증진시킴으로써 탈모를 예방하고 발모를 촉진시킬 수 있다. 또한 본 발명의 조성물은 천연소재를 활용하므로 기존 탈모치료제에 비해 안전하다. 따라서 보리밥나무 추출물 등을 포함하는 조성물을 탈모 예방 또는 발모촉진용 화장품, 약품, 건강기능식품 등으로 활용할 수 있다.
도 1은 보리밥나무 잎 또는 가지의 추출용매별 추출물의 모유두세포 발달능을 평가한 것이다. 구체적으로, 추출물 처리시 모유두세포의 발달정도를 ALP로 염색하여 현미경으로 도식화한 것이다.
도 2는 보리밥나무 추출물의 모유두세포 발달능을 ALP 활성정도로 정량적으로 도식화한 것이다.
도 3은 보리밥나무 추출물의 모유두세포 증식능을 평가한 것이다.
도 4는 보리밥나무 추출물의 세포독성을 평가한 것이다.
본 발명은 하기의 설명에 의하여 모두 달성될 수 있다. 하기의 설명은 본 발명의 구체예를 기술하는 것으로 이해되어야 하며, 본 발명이 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 첨부된 도면은 이해를 돕기 위한 것으로, 본 발명이 이에 한정되는 것이 아님을 이해하여야 한다.
본 발명의 실시예는 다양한 변경을 가할 수 있고, 다양한 형태로 실시할 수 있다. 따라서, 본 발명의 사상 및 기술적 특징의 동일성이 인정되는 범위의 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해하여야 한다.
달리 명시하지 않았더라도, 본 발명에 사용된 모든 숫자는 모든 경우마다 “약”이란 용어가 수식하고 있는 것으로 이해되어야 한다. 수식어 “약”은 통상적으로 인식되는 대략적으로의 의미를 갖도록 하기 위한 것인데, 이는 수식된 값의 특정 퍼센트 이내의 의미로서 더욱 정확하게 해석될 수 있고, 보다 구체적으로는 ±20%, ±10%, ±5%, ±2% 또는 ±1% 또는 그 미만을 의미할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 의하면,
보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물이 제공될 수 있다. 상기 조성물은 화장료 조성물, 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물, 건강보조식품 조성물 또는 식품 조성물일 수 있다.
상기 "보리밥나무(Elaeagnus macrophylla)"는 보리수나무과의 상록 관목 또는 덩굴나무이다. 보리밥나무는 한국·일본·타이완 등에 분포하며, 해안 지대에서 잘 자라며 작은 가지에 은백색 및 연한 갈색의 비늘털이 있다. 보리밥나무는 사람 키 높이 정도로 자라며 약간 덩굴진다. 잎은 어긋나며 길이 5-10cm, 저비 4-6cm의 원형 또는 난형이다. 꽃은 9-10월에 피는데 잎겨드랑이에서 몇 개씩 달리고 꽃잎은 없다. 작은꽃자루는 길이 5-10mm이며 백색과 적갈색의 비늘털이 있다. 열매는 장과로서 길이 15-17mm의 타원형이며 이듬해 4-5월에 빨갛게 익는데 식용한다.
용어 "추출물"은 보리밥나무에 추출용매를 처리하여 얻은 추출 결과물뿐만 아니라 보리밥나무 자체를 동물에게 투여할 수 있도록 제제화(예컨대, 분말화)한 가공물도 포함하는 의미를 갖는다. 또한 상기 "추출물"은 상술한 바와 같이 당업계에서 조 추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획화(fractionation)한 분획물도 포함할 수 있다. 즉, 보리밥나무 추출물은 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제 과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획물, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의해 분리한 분획물 등, 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획물을 포함할 수 있다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 용어 "추출물" 및 "분획물"은 추출에 의해 수득되는 추출액 및 분획뿐만 아니라, 상기 추출액 및 분획의 희석액 또는 농축액, 추출액 및 분획을 건조하여 수득되는 건조물, 또는 추출액 및 분획의 조 정제물 또는 정제물을 포함할 수 있다.
상기 보리밥나무는 잎, 꽃, 가지, 줄기 및 뿌리 중 적어도 하나일 수 있으며, 구체적으로 잎, 가지 또는 이들의 조합일 수 있다. 또는 상기 보리밥나무 추출물은 보리밥나무 잎, 꽃, 가지, 줄기 및 뿌리 중 적어도 하나의 추출물일 수 있으며, 구체적으로 보리밥나무 잎, 가지 또는 이들의 조합의 추출물일 수 있다.
상기 추출용매는 추출수행시 액체상태를 유지하여 보리밥나무로부터 유효성분을 추출할 수 있는 용매면 충분하다. 구체적으로 물, 알콜, 염화 탄화수소, 아세토니트릴, 테트라하이드로퓨란, 알킬(메틸 또는 에틸) 아세테이트 및 아세톤으로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
상기 알콜은 예를 들면, C1-C6 알콜, 예를 들면, C1-C4 알콜 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 C1-C6 알콜은 1차 내지 3차 알코올일 수 있다. 상기 C1-C6 알콜은 상기 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 1,3-프로판디올, 부탄올, 펜탄올 및 헥산올로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
상기 염화 탄화수소는 클로로포름(CHCl3) 또는 디클로로메탄(CH2Cl2)일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
상기 용매는 서로 다른 두 유기용매의 혼합물일 수 있다. 예를 들면, 물과 알콜의 혼합물 즉 알콜 수용액일 수 있고, 알콜과 염화 탄화수소의 혼합물일 수 있고, 물과 아세토니트릴의 혼합물일 수 있고, 물과 알킬 아세테이트의 혼합물일 수 있다. 상기 알콜 수용액의 알콜 농도는 예를 들어 약 1 내지 약 100 (v/v)%, 예를 들어 약 10 내지 약 100 (v/v)%, 예를 들어 약 20 내지 약 100 (v/v)%, 예를 들어 약 30 내지 100 (v/v)%, 예를 들어 약 40 내지 100 (v/v)%, 약 50 내지 100 (v/v)%, 약 70 내지 100(v/v)%, 약 80 내지 100(v/v)%, 약 90 내지 100(v/v)%, 약 95 내지 100(v/v)% 일 수 있다. 상기 알콜 수용액은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 1,3-프로판디올, 부탄올, 펜탄올 및 헥산올로 이루어진 군에서 선택되는 알콜 수용액일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 상기 용매는 발효주정 또는 합성주정일 수 있다.
상기 추출은 보리밥나무에 대하여 상기 추출 용매를 약 1 내지 약 100 (부피/중량)배, 예를 들면, 약 1 내지 약 50 (부피/중량)배, 약 3 내지 약 20 (부피/중량)배, 약 3 내지 약 50 (부피/중량)배, 약 3 내지 약 10 (부피/중량)배, 또는 약 3 내지 약 7배 첨가하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 보리밥나무 1kg에 대하여 상기 추출 용매를 약 1 내지 약 100 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 3 내지 약 50 L를 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 5 내지 약 30 L를 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 10 내지 약 30 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 15 내지 약 25 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 3 내지 약 25 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 10 내지 약 25 L 첨가하는 것일 수 있다.
상기 추출은 교반추출, 가온된 액체 추출, 가압된 액체 추출 (pressurized liquid extraction: PLE), 초음파 도움을 받은 추출 (microwave assisted extraction: MAE), 아임계 추출 (subcritical extraction: SE), 또는 이들의 조합에 의하여 수행될 수 있다. 상기 아임계 추출은 아임계 수추출 (subcritical water extraction: SWE)일 수 있다. 아임계 수추출은 초가열된 수추출 (superheated water extraction) 또는 가압된 열수 추출 (pressurized hot water extraction: PHWE)라고도 한다. 상기 가온된 액체 추출은 환류 추출일 수 있다.
상기 추출은 1℃, 10℃, 20℃, 30℃, 40℃, 50℃, 60℃, 70℃, 80℃, 90℃, 100℃, 110℃, 120℃, 130℃, 140℃ 및 150℃ 중 선택되는 임의의 두 개의 수치의 범위로 표시될 수 있다. 구체적으로 예를 들어 약 1℃ 내지 약 150℃, 예를 들어 약 10℃ 내지 약 130℃, 예를 들어 약 10℃ 내지 약 100℃, 예를 들어 약 10℃ 내지 약 70℃, 예를 들어 약 10℃ 내지 약 50℃, 예를 들어 약 10℃ 내지 약 30℃에서 수행하는 것일 수 있다.
상기 추출 시간은 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 2개월, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 10일, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 0.5 시간 내지 약 2개월, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 1개월, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 15일, 에를 들어 약 1 시간 내지 약 10일, 에를 들어 약 1 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 3일, 예를 들어 약 3 시간 내지 약 1개월, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 15일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 10일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 3일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 1개월, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 15일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 10일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 3일일 수 있다.
상기 추출은 상기 용매 중에 보리밥나무, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료를 혼합하고 일정 시간 동안 방치하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방치는 적당한 교반을 포함할 수 있다. 상기 추출은 예를 들면, 1 내지 5회 반복될 수 있다. 상기 반복은 추출이 1회 이상 진행되고, 추출액을 여과하고 남은 보리밥나무를 다시 추출용매에 침지시켜 추출을 진행하는 것을 의미할 수 있다.
상기 추출액은 식물체 잔사로부터 여과, 원심분리 등의 알려진 방법에 의하여 분리할 수 있다. 구체적으로 상압여과, 감압여과 또는 가압여과일 수 있고, 여과지를 이용할 수 있다. 감압여과는 여과지를 중심으로 여과후(後) 부분을 진공상태로 만들어 여과하는 방법일 수 있고, 가압여과는 여과지를 중심으로 여과전(前) 부분에 압력을 가하여 여과하는 방법일 수 있다. 상기 원심분리는 시료를 고속으로 회전시켜 원심력에 의해 고형물을 가라앉혀 상등액을 분리하는 것일 수 있다. 상기 원심분리의 조건은 고형물을 가라앉힐 수 있으면 충분하며, 통상적으로 알려진 방법에 의하여 수행할 수 있다.
상기 추출은 또한 얻어진 추출액으로부터 감압 농축과 같은 알려진 방법에 의하여 용매를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 상기 추출은 또한 얻어진 추출물을 건조에 의하여 건조 추출물을 제조하는 것을 포함할 수 있다. 상기 건조는 감압 건조, 비등 건조, 분무 건조, 상온 건조 또는 동결건조를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 의하면,
상기 조성물에 있어서, 용어 "분획물(fraction)"은 상기 보리밥나무 추출물을 일정한 기준으로 나눈 것을 의미할 수 있다. 상기 분획물은 용매 분획화 (fractionation)에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 상기 용매 분획화는 보리밥나무 추출물을 일정 조건의 용매와 혼합하고 상기 용매에 존재하는 물질을 분리하는 것일 수 있으며, 예를 들어 용매의 극성별로 분리하는 것일 수 있고, 예를 들어 성분의 분자량별로 분리하는 것일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 상기 분획물은 상기 보리밥나무 추출물을 물에 현탁시킨 후 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 n-부탄올로 순차적으로 분획화하여 얻어진 헥산 분획물, 디클로로메탄 분획물, 에틸아세테이트 분획물, n-부탄올 분획물, 물 분획물 또는 이들의 조합일 수 있다.
본 발명의 다른 구체예에 의하면,
상기 분획물은 추출물이나 분획물에 대하여 크로마토그래피를 수행하여 세분화시킨 조성물일 수 있다. 구체적으로 예를 들어 극성에 따른 크로마토그래피일 수 있고, 예를 들어 분자량에 따른 크로마토그래피일 수 있고, 또는 예를 들어 이들 조합에 따른 크로마토그래피일 수 있다. 보다 구체적으로 섞이지 않는 서로 다른 용매들에 의한 액체-액체 크로마토그래피에 의한 분획물일 수 있고, 점차적인 용매의 극성변화에 의해 컬럼을 통과시켜 나누는 컬럼 크로마토그래피에 의한 분획물일 수 있고, 다공성 입자로 구성된 컬럼을 통과시켜 분자크기에 따른 분획물일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또는, 상기 추출물이나 분획물에 대해 컬럼크로마토그래피를 이용하여 서로 다른 극성의 용매를 점차적으로 비율을 달리하여 얻어진 또 다른 분획물일 수 있다. 구체적으로 서로 다른 두 용매 A와 B에 있어서 A:B의 비율이 0:100, 1:99, 5:95, 10:90, 20:80, 30:70, 40:60, 50:50, 60:40, 70:30, 80:20, 90:10 및 100:0으로 단계적으로 극성변화를 일으키는 혼합물에 의한 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 얻어진 분획물일 수 있다. 예를 들어 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 및 90 % 수성메탄올 및 100 % 메탄올의 단계적 혼합물에 의한 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 얻어진 분획물일 수 있다. 또는 예를 들어 100 % CHCl3, 5 %, 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60%, 70 %, 80%, 90% 메탄올이 용해된 CHCl3 및 100% 메탄올의 혼합물에 의한 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 얻어진 분획물일 수 있다. 상기 컬럼 크로마토그래피의 충진제는 순상 또는 역상 실리카겔일 수 있고, 다공성 입자를 가진 충진제일 수 있다. 상기 분획은 1 내지 5회 반복될 수 있다.
상기 분획물은 여과 등의 알려진 방법에 의하여 분리할 수 있다. 구체적으로 상압여과, 감압여과 또는 가압여과일 수 있고, 여과지를 이용할 수 있다. 감압여과는 여과지를 중심으로 여과후(後) 부분을 진공상태로 만들어 여과하는 방법이고, 가압여과는 여과지를 중심으로 여과전(前) 부분에 압력을 가하여 여과하는 방법이다. 상기 분획은 또한 얻어진 분획물로부터 감압 농축과 같은 알려진 방법에 의하여 용매를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 상기 분획은 또한 얻어진 분획물을 건조에 의하여 건조 추출물을 제조하는 것을 포함할 수 있다. 상기 건조는 감압 건조, 비등 건조, 분무 건조, 상온 건조 또는 동결건조를 포함할 수 있다.
본 발명에서 "탈모"는 모발이 휴지기 상태에서 빠지는 일반적인 휴지기 탈모와 비정상적인 탈모 현상인 생장기 탈모를 포함할 수 있다. 구체적으로 상기 생장기 탈모는 모낭의 성장주기 중 성장기의 모낭에서 자라는 모발보다 퇴행기 또는 휴지기의 모낭에서 자라는 모발의 비율이 높아져 비정상적으로 빠지는 모발이 증가하는 현상을 의미할 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 탈모는 유전적인 원인, 두피 내 혈액 순환 불량, 남성 호르몬의 과잉 작용, 피지 분비 과잉, 노화, 스트레스 등에 의해 발생한 탈모를 포함할 수 있다.
상기 "탈모 예방 및 발모 촉진"은 모유두세포의 발달을 촉진시키는 것일 수 있고, 또는 모발성장인자를 활성화시키는 것일 수 있고, 또는 모유두세포의 증식을 촉진시키는 것일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 상기 모유두세포는 모낭의 기저부에 존재하는 세포로, 모낭을 구성하는 세포들에게 산소와 영양을 공급하여 모발의성장과 모낭 주기 조절을 담당한다. 따라서 모유두세포의 증식이 촉진되면 모발이 건강해지고 모발 성장이 촉진되며 탈모를 막을 수 있다. 모발의 성장은 모유두(dermal papilla)를 둘러싸고 있는 상피세포(epithelial cell)가 분열하여 모간(hair shaft)을 만들면서 진행되기 때문에 모유두세포는 상피세포의 분열을 조절하는 중요한 역할을 한다. 또한 남성형 탈모증에서 남성호르몬이 모낭에 작용하는 부위는 모유두로서 모유두세포는 발모에 있어 매우 중요한 역할을 하고 있다.
상기 모발성장인자는 인체가 출생 시 가지고 태어나는 세포분열 활성화인자로 기능이 떨어진 세포를 자극하여 모발 성장기를 연장시키는 것일 수 있다. 상기 성장인자는 섬유아세포 성장인자(bFGF, basic Fibroblast Growth Factor), 혈관내피세포 성장인자(VEGF, Vascular endothelial Growth Factor), 인슐린 유사 성장인자(IGF-1, Insulinlike Growth Factor), Noggin(모낭자극성장인자), 줄기세포증식인자(SCF, Stem Cell Factor), 케라틴형성세포성장인자(KGF ,keratinocyte growth factor), 간세포성장인자(HGF, hepatocyte growth factor), 알칼리 포스파타아제(Alkaline Phosphatase, ALP) 등이 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일 구체예에 의하면,
보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물이 제공될 수 있다. 상기 화장료 조성물은 화장품학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체를 더 포함할 수 있다. 상기 담체는 부형제, 붕해제, 결합제, 활택제 또는 그 조합일 수 있다. 상기 부형제는 미결정 셀룰로오즈, 유당, 저치환도 히드록시셀룰로오즈 또는 그 조합일 수 있다. 상기 붕해제는 전분글리콜산 나트륨, 무수인산일수소 칼슘 또는 그 조합일 수 있다. 상기 결합제는 폴리비닐피롤리돈, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오즈, 히드록시프로필셀룰로오즈 또는 그 조합일 수 있다. 상기 활택제는 스테아린산 마그네슘, 이산화규소, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 비경구 투여 제형으로 제형화될 수 있다. 비경구 투여 제형은 주사제, 또는 피부외용제일 수 있다. 피부외용제는 크림, 겔, 연고, 피부 유화제, 피부 현탁액, 경피전달성 패치, 약물 함유 붕대, 로션 또는 그 조합일 수 있다. 상기 피부외용제는 통상 화장품이나 의약품 등의 피부외용제에 사용되는 성분, 예를 들면 수성성분, 유성성분, 분말성분, 알코올류, 보습제, 증점제, 자외선흡수제, 미백제, 방부제, 산화방지제, 계면활성제, 향료, 색제, 각종 피부 영양제등을 필요에 따라서 적절하게 배합할 수 있다. 상기 피부외용제는, 에데트산이나트륨, 에데트산삼나트륨, 시트르산나트륨, 폴리인산나트륨, 메타인산나트륨, 글루콘산 등의 금속봉쇄제, 카페인, 탄닌, 벨라파밀, 감초추출물, 글라블리딘, 칼린의 과실의 열수추출물, 각종 생약, 아세트산토코페롤, 글리틸리틴산, 트라넥삼산 및 그 유도체 또는 그 염등의 약제, 비타민 C, 아스코르브산 인산마그네슘, 아스코르브산글루코시드, 알부틴, 코지산, 글루코스, 프룩토스, 트레할로스 등의 당류등도 적절하게 배합할 수 있다.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 화장수(스킨로션), 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양 로션, 마사지크림, 영양 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 현탁액, 겔, 분말, 페이스트, 마스크팩 또는 시트 또는 에어로졸 조성물을 포함하는 제형으로 제조될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야에서 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 상기 화장료 조성물은 보존제, 안정화제, 계면활성제, 용해제, 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제 등을 더 포함할 수 있다. 상기 보습제 등의 추가 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 약 0.001 내지 약 10 중량%, 구체적으로 약 0.01 내지 약 3 중량%일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 탈모 예방 또는 발모 촉진을 위하여 단독으로, 또는 탈모 예방 또는 발모 촉진을 위한 다른 방법과 병용하여 사용될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 탈모 예방 또는 발모 촉진을 위하여 다른 화장료 조성물과 함께 사용될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명의 목적을 손상시키지 않는 범위 내에서 다른 조성물을 더 포함할 수 있으며, 이때 다른 조성물은 탈모 예방 또는 발모 촉진을 위한 약학적 조성물, 화장료 조성물, 식품 조성물일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또한, 이때 다른 조성물은 탈모 예방 또는 발모 촉진을 위한 조성물이 아니더라도 본 발명의 조성물과 함께 포함되거나 병용투여되거나 순차적으로 투여될 때, 탈모 예방 또는 발모 촉진에 상승효과가 나타나는 것이면 충분하다.
본 발명의 약학적 조성물은 탈모 예방 또는 발모 촉진을 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선치료, 호르몬치료, 화학치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분의 농도는 치료 목적, 환자의 상태, 필요기간 등을 고려하여 결정할 수 있으며 특정 범위의 농도로 한정되지 않는다. 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서 '약학으로 유효한 양'은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나, 다른 질환의 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와 동시에, 별도로, 또는 순차적으로 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
보다 구체적으로 상기 약학적 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량%, 0.01 중량%, 0.05 중량%, 0.1 중량%, 0.5 중량%, 1.0 중량%, 3 중량%, 5 중량%, 10 중량%, 20 중량%, 30 중량%, 40 중량%, 50 중량%, 60 중량%, 70 중량%, 80 중량% 및 90 중량% 중 선택되는 임의의 두 수치의 범위로 표시되는 산양상 추출물 또는 그의 분획물을 포함할 수 있다. 예를 들면, 약 0.001 중량% 내지 약 95 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 90 중량%, 약 0.01 중량% 내지 80 중량%, 약 0.01 중량% 내지 70 중량%, 약 0.01 중량% 내지 60 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 50 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 30 중량%, 약 0.05 중량% 내지 25 중량%, 약 0.05 중량% 내지 15 중량%, 약 0.05 중량% 내지 5 중량%, 약 0.1 중량% 내지 약 20 중량%, 약 1.0 중량% 내지 10 중량%, 약 1.0 중량% 내지 약 5 중량%, 약 5 중량% 내지 약 50 중량%, 약 5 중량% 내지 약 40 중량% 또는 약 10 중량% 내지 약 50 중량%의 보리밥나무 추출물 또는 그의 분획물을 포함할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 경구 투여 시에는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소 및 향료로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제 또는 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제 또는 보존제 등을 혼합하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서(elixir), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수회 투약 형태로 제조할 수 있고, 또한 용액, 현탁액, 정제, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형할 수 있다.
한편, 제제화에 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말디톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 골수 내, 경막 내, 심장 내, 경피, 피하, 복강 내, 비강 내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함된다. 상기 투여는 전신적으로 또는 국부적으로 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 또한 직장 투여를 위한 좌제의 형태로 투여될 수 있다.
상기 투여는 보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 1회 투여시 0.1 mg 내지 1,000 mg, 예를 들면, 0.1 mg 내지 500 mg, 0.1mg 내지 100 mg, 0.1 mg 내지 50 mg, 0.1 mg 내지 25 mg, 1 mg 내지 1,000 mg, 1 mg 내지 500 mg, 1 mg 내지 100 mg, 1 mg 내지 50 mg, 1 mg 내지 25 mg, 5mg 내지 1,000 mg, 5 mg 내지 500 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 25 mg, 10mg 내지 1,000 mg, 10 mg 내지 500 mg, 10 mg 내지 100 mg, 10 mg 내지 50mg, 또는 10 mg 내지 25 mg을 투여하는 것일 수 있다.
상기 조성물의 투여량은 예를 들어, 성인 기준으로 약 0.001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg일 수 있고, 예를 들어 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg일 수 있고, 또는 에를 들어 약 0.1 mg/kg 내지 약 1 mg/kg 일 수 있다. 상기 투여횟수는 1 일 1회, 1 일 다회, 1주 2 내지 3회, 1달 1 내지 4회 또는 1년 1 내지 12회 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 구체예에 의하면,
보리밥나무 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 식품 조성물이 제공될 수 있다. 상기 식품 조성물에는 건강기능식품 조성물, 건강보조식품 조성물 또는 일반식품 조성물을 포함될 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
상기 건강기능식품, 건강보조식품 또는 식품 조성물은 보리밥나무 추출물 또는 그의 분획물을 단독 또는 다른 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 명세서의 조성물은 원료 100 중량부에 대하여 15 중량부 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 건강기능식품의 종류 중 음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한, 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육, 또는 그 조합을 함유할 수 있다.
하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 다만, 이러한 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : 보리밥나무 추출물 제조방법
보리밥나무 잎과 가지를 각각 10g 준비하고 증류수, 50% 에탄올 수용액 및 100% 에탄올에 각각 침지한 후 상온에서 교반하여 2회 반복 추출하였다. 추출액을 여과하고 각각 0.3μg/ml, 1μg/ml, 3μg/ml, 10μg/ml, 30μg/ml, 100μg/ml로 준비하였다.
실시예 2 : 인간모유두 세포(HFDPCs: human follicle dermal papilla cells)의 배양
인간 모유두 세포 (HFDPCs: human follicle dermal papilla cells)는 primary 세포로서 10% Fetal Bovine Serum (FBS, 소 태아 혈청)과 1 % penicillin이 포함된 Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM)에서 습도 95%, 5% CO2, 37℃로 조절된 배양기에서 배양하였다.
실시예 3 : 보리밥나무 추출물의 모유두세포 발달능 평가
보리밥나무 부위별, 추출용매별 추출물들의 모유두세포의 발달능을 평가하기 위하여 모유두세포의 형태변화를 관찰하고, 모유두세포의 발달지표로 ALP가 활성화되는지를 확인하였다.
구체적으로 인간 모유두세포를 96-well plate에 1 x 104 cells/well의 밀도로 배양하고 각 테스트 조건 하에서 6일 동안 연속적으로 배양하였다. 배지를 농도 별로 2일마다 재처리하여 6일 배양 후, 인간 모유두세포의 ALP 활성을 ALP assay kit을 사용하여 측정하였고. PBS로 세척한 후, 세포를 1% (v/v) Triton X-100(Sigma) 및 2 mM MgSO4 를 함유하는 0.1 M NaNO3-Na2CO3 완충액에서 용해시켰다. 이어서 6mM p-nitrophenyl phosphate를 각 well에 첨가하고 37 ℃에서 30분 동안 배양하였다. 마지막으로, 1.5 M NaOH (Sigma)를 첨가하여 enzyme-substrate 반응을 정지시켰다. SpectraMax 190 마이크로 플레이트 판독기 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 사용하여 405 nm의 파장에서 광학 밀도 (OD) 판독을 수행하였다.
보리밥나무 잎 또는 가지의 추출용매별 추출물을 모유두세포에 처리하였고, 도 1에 의하면, 보리밥나무 가지의 100% 에탄올 추출물을 처리한 모유두세포에서 ALP 염색이 가장 많이 확인되어 모유두세포 발달의 유의한 증가가 확인되었다. 이어서 도 2에 의하면, 보리밥나무 가지의 100% 에탄올 추출물이 다른 조건보다 높은 ALP 활성을 보였으며 특히 보리밥나무 가지의 100% 에탄올 추출물 30 ㎍/㎖ 처리 시 가장 높은 모유두세포 발달효능이 나타났다.
실시예 4 : 보리밥나무 추출물의 모유두세포 증식 분석
모유두세포 (HFDPC, Human Follicle Dermal Papilla Cells)를 1×105 cells/㎖의 농도로 96 well plate에 100㎕ 분주하고, 24시간 동안 37℃, 습도 95%, CO2 5%로 조절된 CO2 배양기에서 배양하였다. 새로운 배지에 세포독성이 나타나지 않는 농도 범위에서 보리밥나무 부위 및 용매별 추출물을 처리하여 6일 동안 배양하였다. 세포주의 생존율을 측정하기 위해 Cell Counting Kit-8(CCK-8, Dojindo Mol. Tech., Rockville., MD, USA)를 이용하여 microplate reader(Molecular Devices, Versa Max ELISA Microplate Reader, USA)로 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포의 재생효능은 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 흡광도로 나타내었다.
도 3에 의하면, 보리밥나무 가지의 100% 에탄올 추출물은 다른 시료에 비해 인체 모유두세포의 증식을 증가시켰다. 특히, 보리밥나무 가지의 100% 에탄올 추출물을 100㎍/㎖ 처리하였을 때, 가장 높은 모유두세포 증식효능을 나타내며 농도의존적으로 모유두세포의 증식을 유발하는 것으로 확인되었다.
즉, 실시예 3 및 4에 의하면 보리밥나무 가지의 에탄올 추출물은 모유두세포를 발달 및 증식시킴으로써 탈모를 예방하고 발모를 촉진하는 것으로 확인되었다.
실시예 5 : 보리밥나무 추출물의 인체각질세포에 대한 세포독성 평가
보리밥나무 추출물의 인체 각질세포(Human epidermal keratinocytes)에 대한 독성을 평가하였다.
인체 각질세포를 1×105 cells/well의 농도로 96 well plate에 분주하고, 24시간 동안 37℃, 습도 95%, CO2 5%로 조절된 CO2 배양기에서 배양하였다. 새로운 배지에 각 시료를 0.3-100 ㎍/㎖ 농도로 세포에 처리하고 6일 동안 배양하였다. 세포의 독성은 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 흡광도로 표시하였다. 도 4에 의하면, 보리밥나무 추출물의 생존율이 모두 100%에 근접하게 나타나, 보리밥나무 추출물들의 처리농도 100 ㎍/㎖ 까지는 인체 각질세포에서 독성이 나타나지 않는 것으로 확인되었다.

Claims (13)

  1. 보리밥나무(Elaeagnus macrophylla) 추출물 또는 그 분획물을 포함하는 탈모 예방용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 보리밥나무는 보리밥나무 가지인 화장료 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 보리밥나무 추출물은 에탄올 추출물인 화장료 조성물.
  4. 삭제
  5. 제3항에 있어서,
    상기 조성물은 세포 내 최종농도가 30 ㎍/㎖ 내지 100 ㎍/㎖인 화장료 조성물.
  6. 삭제
  7. 제3항에 있어서,
    상기 조성물은 화장수(스킨로션), 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양 로션, 마사지크림, 영양 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 현탁액, 겔, 분말, 페이스트, 마스크팩, 시트 또는 에어로졸인 화장료 조성물.
  8. 제3항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체를 더 포함하는 화장료 조성물.
  9. 제1항 내지 제3항, 제5항, 제7항 및 제8항 중 어느 한 항의 조성물을 인간을 제외한 동물에게 투여하는 단계를 포함하는 탈모 예방 방법.
  10. 보리밥나무 추출물을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 약학적 조성물.
  11. 제10항에 있어서,
    상기 조성물은 모유두세포를 발달 또는 증식시키는 약학적 조성물.
  12. 제10항에 있어서,
    상기 조성물은 주사제 또는 피부외용제에 포함되는 약학적 조성물.
  13. 보리밥나무 추출물을 포함하는 탈모 예방용 건강기능식품 조성물.
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