KR102547632B1 - 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 식품 조성물 - Google Patents
고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 식품 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
마 껍질로부터 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물을 제조하는 방법이 제공된다. 이 마 껍질 추출물의 제조 방법은, 마 껍질을 건조/분쇄하는 단계; 물을 첨가한 후 열처리하는 단계; 이를 AMG 300L 효소로 효소처리하는 단계; 및 이를 에탄올 용매로 추출하는 단계를 포함한다.
Description
본 발명은 마 껍질 추출물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 식품 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 4단계 처리 과정을 거쳐 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 식품 조성물에 관한 것이다.
마(Dioscorea batatas Decne.)는 한약명으로 산약(山藥)으로 불리며, 손과 발의 태양양경에 들어가서 그 부족함을 보충하고, 허열을 식히는 약재 중에서 가장 응용범위가 넓은 한약재이다. 그 효능으로는 자양강장, 비위허약, 식욕부진, 신체피로, 감로설사, 진해 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 통상 마를 섭취할 때, 껍질은 제거하고 내부 과육만을 이용하는데, 마 과육에 포함된 뮤신은 위산분비를 억제하고 위궤양을 치료하는데 사용되기도 한다.
한편 마 과육과는 달리 마 껍질은 특유의 역한 냄새와 거친 식감으로 인하여, 현재까지 식용으로 사용되는 예를 거의 찾아보기 힘들고, 마 껍질에 대한 연구도 미흡한 실정이다. 이에 본 발명자들은 부산물로 폐기되던 마 껍질로부터 다양한 생리활성 성분을 추출하고 나아가 해당 성분의 추출율을 높이기 위해 오랜 연구와 실험을 거친 끝에 본 발명에 이르게 되었다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는, 마 껍질로부터 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물을 제조하는 방법을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는, 이러한 방법에 의해 제조된 마 껍질 추출물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 또 다른 과제는, 이러한 마 껍질 추출물을 포함하는 식품 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제들은 이상에서 언급한 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 과제를 달성하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 마 껍질 추출물의 제조 방법은, (1) 마 껍질을 건조하고 분쇄하여 마 껍질 분말을 제조하는 단계; (2) 물에 상기 마 껍질 분말을 첨가한 후 일정 온도에서 열처리하는 단계; (3) 열처리 결과물에 완충용액을 넣은 후 AMG 300L 효소를 첨가하여 효소처리하는 단계; 및 (4) 효소처리 결과물을 물, 알코올 및 에탄올 중 선택된 어느 하나의 용매로 추출하여 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물을 생성하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 마 껍질 추출물은 건조된 마 껍질 분말 1g당 360 내지 420μg의 페난트렌 유도체를 포함할 수 있다.
상기 마 껍질 추출물은 건조된 마 껍질 분말 1g당, 80 내지 110μg의 2, 7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌, 100 내지 120μg의 6,7-다이하이드록시-2,4-다이메톡시 페난트렌 및 160 내지 210μg의 6-하이드록시-2,4,7-트라이메톡시 페난트렌을 포함할 수 있다.
상기 (1) 단계는 60 내지 70℃에서 12 내지 48시간 열풍 건조된 마 껍질을 80 내지 100 메쉬로 분쇄하여 상기 마 껍질 분말을 제조하는 것이고, 상기 (2) 단계는 상기 마 껍질 분말 10g당 80 내지 120mL의 증류수를 가한 후 65 내지 95℃에서 10 내지 60분간 가열하는 것이고, 상기 (3) 단계는 상기 열처리 결과물에 pH 3.3 내지 5.5인 아세트산 완충용액을 추가하여 최종적으로 0.1M 아세트산 완충용액 농도가 되도록 제조한 후 AMG 300L 효소를 첨가하여 40 내지 50℃에서 0.5 내지 48시간 반응시키는 것이고, 상기 (4) 단계는 상기 효소처리 결과물을 80 내지 100% 에탄올로 추출하는 것이다.
상기 (3) 단계에서 상기 열처리 결과물에 처리된 AMG 300L 효소는 glucoamylase 효소일 수 있다.
상기 다른 과제를 달성하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 마 껍질 추출물은 상기 방법에 의해 제조될 수 있다.
상기 또 다른 과제를 달성하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상기 마 껍질 추출물을 포함할 수 있다.
기타 실시예들의 구체적인 사항들은 구체적인 내용 및 도면들에 포함되어 있다.
상술한 바와 같이 본 발명에 따른 마 껍질 추출물의 제조 방법에 의하면, 마 껍질을 건조하고 분말화한 후 약간의 증류수를 가한 상태에서 가열함으로써 추출이 용이한 형태로 가공한다. 이어서 열처리된 마 껍질 분산액에 대해 AMG 300L 효소로 처리함으로써 마 껍질을 이루는 각종 탄수화물 성분들을 분해하여 생리활성 성분인 페난트렌 화합물을 유리시킨다. 이러한 열처리 및 효소처리 과정을 거친 결과물을 에탄올 추출 용매로 추출함으로써, 페난트렌 유도체의 추출율이 현저히 향상된 마 껍질 추출물을 얻을 수 있다.
도 1은 페난트렌 유도체의 HPLC 크로마토그램이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다. 명세서 전체에 걸쳐 동일 참조 부호는 동일 구성 요소를 지칭한다.
본 발명의 일 실시예에 따라 마(Dioscorea batatas Decne.) 껍질의 추출물에서 페난트렌 화합물(phenanthrene compounds)이 분리되었다. 페난트렌(phenanthrene)은 마 과(Dioscoreaceae family)를 포함하는 다양한 식물에서 자연적으로 발생하는 다환 방향족 탄화수소이다. 페난트렌을 함유한 식물은 전통적으로 치료 목적으로 사용되며, 이의 생물학적 활성과 식물 독성이 연구되고 있다. 특히, 마(Dioscorea batatas Decne. 또는 Chinese yam)는 동아시아 국가에 널리 분포되어 있으며 오랫동안 약용 식물뿐만 아니라 식품 재료로도 사용되고 있다.
본 발명은 마 껍질의 추출물에서 다음과 같은 세 가지의 페난트렌 유도체를 분리하여 확인하였다: 2,7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌 (2,7-dihydroxy-4,6-dimethoxy phenanthrene, 이하 'P1'이라 함), 6,7-다이하이드록시-2,4-다이메톡시 페난트렌 (6,7-dihydroxy-2,4-dimethoxy phenanthrene, 이하 'P2'라 함) 및 6-하이드록시-2,4,7-트라이메톡시 페난트렌 (6-hydroxy-2,4,7-trimethoxy phenanthrene, 이하 'P3'라 함). 여기서, 2,7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌(P1)은 HepG2 인간 간 상피 세포주에서 항산화 활성을, Raw 264.7 쥐 대식세포 세포주에서 항염증 활성을 가진다(Lim et al., Appl Biol Chem 62:29 (2019)). 또한 2,7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌(P1)과 6,7-다이하이드록시-2,4-다이메톡시 페난트렌(P2)은 PM2.5로 유도된 폐 혈관 누출 및 내피 장벽 파괴를 약화시키는 in vivo 효과를 가진다(Lee et al., Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 82:12, 727-740 (2019)). 또한 산약 추출물로부터 분리된 batatasin I 또는 6-하이드록시-2,4,7-트라이메톡시 페난트렌(P3)은 염증, 알러지 질환 또는 성인병의 증상을 개선하는 효능이 있다.
본 발명은 마 껍질로부터 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물의 제조방법에 관한 것으로 건강기능성 성분 또는 약리성분의 효과적인 추출방법을 제공한다. 본 발명은 마 껍질로부터 페난트렌 화합물 3종을 추출하는 방법으로서, 종래 추출방법에 비하여 활성성분 함량이 높은 추출물을 제조하는 방법을 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "추출물"은 마 껍질을 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 특히, 본 발명의 마껍질 추출물은 페난트렌 화합물의 함량이 향상된 것을 특징으로 한다.
본 발명은 마 껍질 추출물에서 페난트렌 유도체의 추출율을 높이기 위해 다음과 같은 네 단계의 처리 과정을 거친다. 구체적으로, 본 발명의 일 실시예에 따른 마 껍질 추출물의 제조 방법은, 건조 단계, 열처리 단계, 효소처리 단계 및 추출 단계를 포함한다.
<제1 단계: 건조 단계>
제1 단계에서 마 껍질을 건조하고 분쇄하여 마 껍질 분말을 제조한다. 예들 들어, 마 껍질을 60 내지 70℃에서 12 내지 48시간동안 열풍 건조한 후 80 내지 100 메쉬로 분쇄하여 마 껍질 분말을 제조한다.
본 발명의 마 껍질은 마 과육과 구분되어 정의될 수 있으며, 예를 들어 단마, 장마, 참마, 둥근마, 단풍마 중 1 이상을 선택하여 사용할 수 있으며, 본 발명의 일 실시예에서는 참마를 사용하였다. 마의 품종마다 마 껍질의 페난트렌 화합물 함량에 차이가 있을 수 있으나, 본 발명의 방법에 따를 경우 일반적인 착즙, 음료 또는 분말 제조 과정에서 추출되는 페난트렌 양에 비하여 현저히 많은 양의 페난트렌 화합물이 추출될 수 있다.
<제2 단계: 열처리 단계>
제2 단계에서 물 또는 증류수에 마 껍질 분말을 첨가한 후 일정 온도에서 열처리한다. 예를 들어, 마 껍질 분말 10g당 80 내지 120mL의 증류수를 가한 후 65 내지 95℃에서 10 내지 60분간 가열한다.
본 발명에서는 마 껍질의 건조 분말을 사용하며, 이어서 건조 분말을 열처리를 통해 연화하는 과정을 수행함으로써 페난트렌 화합물의 추출율을 향상시켰다. 상기 열처리는 추출 이전에 과피를 연화시켜 효소의 작용을 돕고, 활성 화합물의 추출 효율을 증가시키는 역할을 한다. 65 내지 95℃의 온도에서 10 내지 60분동안 마 껍질 분말 수용액을 가열할 경우 과피를 연화시키되 과피의 유효 성분이 파괴되지 않는 범위 내에서 열처리를 수행할 수 있다. 가열 온도가 낮을수록 가열 시간이 길어지며, 가열온도가 높으면 상대적으로 짧은 시간 동안 가열하여도 실질적으로 동일한 열처리 효과를 얻을 수 있다.
<제3 단계: 효소처리 단계>
제3 단계에서 열처리 결과물에 완충용액을 넣은 후 AMG 300L 효소를 첨가하여 효소처리를 수행한다. 예를 들어, 열처리 결과물에 pH 3.3 내지 5.5, 바람직하게는 pH 5.0인 아세트산 완충용액을 추가하여 최종적으로 최종적으로 0.1M 아세트산 완충용액 농도가 되도록 제조한 후 상온 내지 50℃, 바람직하게는 40 내지 50℃에서 AMG 300L 효소를 첨가한 후 약 0.5 내지 48시간, 바람직하게는 1시간동안 효소처리를 수행한다. 효소처리 과정에서 사용되는 AMG 300L 효소는 glucoamylase 효소로 이루어진다.
<제4 단계: 추출 단계>
제4 단계에서 효소처리 결과물을 추출 용매로 추출하여 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물을 생성한다. 여기서 추출 용매는 물, 알코올, 에탄올(주정), 알코올 수용액 및 에탄올(주정) 수용액 등을 포함하며, 바람직하게는 에탄올일 수 있다. 예를 들어, 효소처리 결과물을 80 내지 100% 에탄올로 추출한다. 추출 방법으로는 상온 추출, 가열 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출, 초임계 추출 등이 사용될 수 있다.
상기 네 단계의 과정을 모두 거쳐 제조된 마 껍질 추출물에는 건조된 마 껍질 분말 1g당 360 내지 420μg의 페난트렌 유도체(P1, P2, P3)가 포함된다. 구체적으로, 마 껍질 추출물은 건조된 마 껍질 분말 1g당, 80 내지 110μg의 2, 7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌(P1), 100 내지 120μg의 6,7-다이하이드록시-2,4-다이메톡시 페난트렌(P2) 및 160 내지 210μg의 6-하이드록시-2,4,7-트라이메톡시 페난트렌(P3)을 포함한다. 이러한 페난트렌 유도체의 추출율은 사용하는 효소의 종류 및 마의 품종에 따라 달라질 수 있으나, 어떤 품종을 사용하더라도 AMG 300L을 사용해 효소 처리하여 분해하는 경우 가장 많은 양의 페난트렌 유도체가 추출될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 마 껍질 추출물은 상기 네 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 또한 본 발명은 상기 마 껍질 추출물을 포함하는 식품 조성물에 대한 것으로서, 상기 식품은 음료, 음료 베이스, 건강기능식품, 기능성 식품을 포함할 수 있다.
상기 음료 또는 음료베이스는 예를 들어 기능성 음료의 원료로서 사용될 수 있다. 여기서 기능성 음료는 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나, 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체중조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다. 기능성 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 마 껍질 추출물 및 그 유효성분인 페탄트렌 유도체를 함유하는 것 외에 다른 성분을 함유할 수 있으며, 예를 들어 통상의 음료 등 제품과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가성분으로 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물로는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등, 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이 사용될 수 있다. 상기 향미제로는 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물, 예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100mL당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 5 내지 12g이 될 수 있다. 그 밖에 본 발명의 음료 또는 음료 베이스 조성물은 천연 과일주스, 과일 주스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다
본 발명의 조성물은 투여를 위하여 상기 기재된 유효성분 이외에 그 제조에 통상적으로 사용되는 약학적 또는 식품학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제 등을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제제로 제형화하여 사용할 수 있다.
아울러, 본 발명의 식품 조성물은 항산화 활성을 가지는 것을 특징으로 한다. "항산화"란, 세포내 대사 또는 자외선의 영향으로 인한 산화적 스트레스에 따라 반응성이 높은 자유 라디칼(free radical) 또는 활성산소종(reactive oxygen species; ROS)에 의한 세포의 산화를 억제하는 것을 말하며, 자유 라디칼 또는 활성산소종을 제거하여 이로 인한 세포의 손상이 감소되는 것을 포함하는 개념이다. 본 발명의 식품 조성물의 경우, 페난트렌 화합물이 가지는 강력한 항염증 활성에 따라 상기와 같은 기능을 가지는 기능성 식품일 수 있다.
이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 주재료 및 효소 준비
마 껍질은 경상북도 안동시 태산농장(북후면)에서 구입하여 사용하였으며, 추출물 내 페난트렌 유도체의 추출율 증대를 위해 다음과 같은 효소는 상업적으로 시판되는 것을 구입하여 사용하였다. AMG 300L (glucoamylase(glucan 1,4-alpha-glucosidase)), Fungamyl (800 FAU/g), Vinotaste Pro (2,500 PGNU/g, 75 BGXU/g; pectinases, beta-glucanase, protease, arabinanase) 효소는 Novozymes 제품(Bagsvaerd, Denmark)을 사용하였다.
실시예 2. 열풍 건조 마 껍질 샘플 준비
마 껍질을 65℃에서 24시간 열풍 건조한 후 80 내지 100 mesh로 분쇄하여 마 껍질 분말을 제조하였다.
실시예 3. 페난트렌 화합물의 추출 최적화를 위한 효소의 선정
건조된 마 껍질 분말 10g에 증류수를 약 100 mL 가한 후 95℃에서 10분동안 열처리를 실시하였다. 열처리 후 시료에 효소처리를 위한 완충용액을 추가하였다. 구체적으로 열처리 결과물(즉, 열처리된 시료)에 아세트산 완충용액(pH 5.0)을 추가하여 최종적으로 0.1 M 아세트산 완충용액 농도가 되도록 제조한 후 다양한 효소를 첨가하여 효소처리를 수행하였다(300 내지 500 mL 삼각플라스크 이용).
구체적으로 진탕 배양기(shaking incubator)에서 2시간 이상 효소반응(Viscozyme, AMG 300L, Fungamyl 800L, Vinotaste 등 4종류의 효소 이용)을 실시하여 각 효소마다 페난트렌 화합물의 추출율을 조사하였다. 사용한 효소량은 다음과 같다. 시료 10 g/100 mL acetate buffer : Viscozyme L(5 units), AMG 300L (5 units), Fungamyl 800L (5 units), Vinotaste (0.1 g/L).
효소처리 결과물에 대해 열풍건조를 실시하였다. 이어서 열풍건조된 시료를 80% 에탄올 수용액으로 추출하였다. 즉, 시료 1g에 10 mL 80% 에탄올 수용액을 가하여 1 내지 2시간 상온에서 교반 하면서 (200 rpm, shaking incubator, LabTech, Daihan Lab Co.) 추출한 후, 일부를 채취하여 질소가스로 용매를 제거한 후, DMSO에 녹이고, 여과하여(syringe filter, 0.4 micron, PVDF), HPLC로 정량분석을 실시하였다. 대조군으로는 효소처리를 하지 않은 무처리군을 정했다.
도 1은 페난트렌 유도체의 HPLC 크로마토그램이고, 아래 표 1은 효소 종류별 페난트렌 화합물의 추출율을 나타낸 것이다.
[표 1]
표 1에 나타난 바와 같이, AMG 300L 효소로 처리한 실험군의 페난트렌 유도체 추출율은 360.22 μg/g으로 확인되었으며, 이는 무처리 대조군의 추출율(186.54 μg/g)과 비교하여 1.93배 이상 높은 효과가 있는 것으로 확인되었다. 개별적으로 살펴보면, 페난트렌 유도체 P1(2, 7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌)의 경우 실험군이 대조군보다 1.87배 이상 높은 추출율을 가지며, 페난트렌 유도체 P2(6,7-다이하이드록시-2,4-다이메톡시 페난트렌)의 경우 실험군이 대조군보다 1.87배 이상 높은 추출율을 가지며, 페난트렌 유도체 P3(6-하이드록시-2,4,7-트라이메톡시 페난트렌)의 경우 실험군이 대조군보다 2.00배 이상 높은 추출율을 가지는 것으로 확인되었다.
한편, 본 실시예를 통해 특정 효소, 즉 AMG 300L 효소만이 마 껍질과 반응하여 페난트렌 유도체의 추출율을 높인다는 것이 확인되었다. 표 1에 나타난 바와 같이, 다른 효소(Viscozyme L, Fungamyl, Vinotaste)로 마 껍질을 처리할 경우, 무처리 대조군과 비교하여 오히려 페난트렌 유도체의 추출율이 비슷하거나 오히려 낮아지는 것이 확인되었다. 이 실험을 통해, 마 껍질 추출물의 효소처리에 있어서 AMG 300L 효소와 페난트렌 유도체 간의 특별한 인과관계가 확인되었다.
실험예 1. HPLC를 이용한 마껍질 추출물 시료 내의 페난트렌 함량 분석
페난트렌 화합물(P1, P2, P3)의 표준용액은 페난트렌 유도체를 메탄올에 용해시켜 1 mg/mL로 제조한 후 메탄올로 희석하여 1.25 내지 10 μg/mL (1.25, 2.5, 5, 10 μg/mL)로 사용하였다. 표준 검량선은 3회 반복 시험을 통한 결과로 얻어진 값이다. 페난트렌 화합물(P1, P2, P3)의 정량 분석은 Yoon et al.이 제안한 HPLC-UV를 사용한 방법을 변형하여 적용하였고, 분석 조건은 아래 표 2와 같다(Yoon. Et al., Nat. Prod. Sci. 2007, 13, 378-383).
[표 2]
실시예 4. 메난트렌 화합물의 추출 최적화를 위한 추출용매의 선정
실시예 1 내지 2를 통해 제조된 마 껍질 분말 10g에 증류수를 약 100 mL 가한 후 95℃에서 10분동안 열처리를 실시하고, 열처리 결과물에 대해 AMG 300L 효소를 특정하여 효소처리를 수행하였다. 이어서 효소처리 결과물을 여러 농도(물, 20%, 40%, 60%, 80%, 100%)의 에탄올 수용액으로 실시예 3과 동일한 방법으로 추출하였다. 아래 표 3은 에탄올 농도별 페난트렌 화합물의 추출율을 나타낸 것이다.
[표 3]
표 3에 나타난 바와 같이, 80 내지 100% 에탄올로 효소처리 결과물을 추출하였을 때 페난트렌 유도체 추출율이 397.68 내지 410.21μg/g으로 확인되었으며, 다른 에탄올 농도에 비해 상대적으로 높게 나타났다.
이상 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예를 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
Claims (7)
- 페난트렌 유도체의 추출율이 향상된 마 껍질 추출물의 제조 방법으로서:
(1) 마 껍질을 건조하고 분쇄하여 마 껍질 분말을 제조하는 단계;
(2) 물에 상기 마 껍질 분말을 첨가한 후 일정 온도에서 열처리하는 단계;
(3) 열처리 결과물에 완충용액을 넣은 후 AMG 300L 효소를 첨가하여 효소처리하는 단계; 및
(4) 효소처리 결과물을 에탄올 용매로 추출하여 고농도 페난트렌 유도체를 함유하는 마 껍질 추출물을 생성하는 단계를 포함하되,
상기 마 껍질 추출물은 건조된 마 껍질 분말 1g당, 80 내지 110μg의 2, 7-다이하이드록시-4,6-다이메톡시 페난트렌, 100 내지 120μg의 6,7-다이하이드록시-2,4-다이메톡시 페난트렌 및 160 내지 210μg의 6-하이드록시-2,4,7-트라이메톡시 페난트렌을 포함하는 마 껍질 추출물의 제조 방법. - 제1항에 있어서,
상기 마 껍질 추출물은 건조된 마 껍질 분말 1g당 360 내지 420μg의 페난트렌 유도체를 포함하는 마 껍질 추출물의 제조 방법. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 (1) 단계는 60 내지 70℃에서 12 내지 48시간 열풍 건조된 마 껍질을 80 내지 100 메쉬로 분쇄하여 상기 마 껍질 분말을 제조하는 것이고,
상기 (2) 단계는 상기 마 껍질 분말 10g당 80 내지 120mL의 증류수를 가한 후 65 내지 95℃에서 10 내지 60분간 가열하는 것이고,
상기 (3) 단계는 상기 열처리 결과물에 pH 3.3 내지 5.5인 아세트산 완충용액을 추가하여 최종적으로 0.1M 아세트산 완충용액 농도가 되도록 제조한 후 AMG 300L 효소를 첨가하여 40 내지 50℃에서 0.5 내지 48시간 반응시키는 것이고,
상기 (4) 단계는 상기 효소처리 결과물을 80 내지 100% 에탄올로 추출하는 것을 특징으로 하는 마 껍질 추출물의 제조 방법. - 삭제
- 삭제
- 삭제
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
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| 구명주. 마껍질로부터 분리된 Phenanthrenes와 이의 생리활성에 대한 연구. 경북대학교 대학원 식품공학부 석사학위논문. 2019년 |
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