KR102543877B1 - Cd154 항체를 이용한 자가면역 질환의 치료 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 CD154에 대한 항체를 이용한 자가면역 질환 또는 염증성 질환 또는 신경퇴행성 질환의 치료 방법에 관한 것이다.

Description

CD154 항체를 이용한 자가면역 질환의 치료
본 발명은 자가면역 질환 및 염증성 질환의 치료, 특히 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 이용한 전신 홍반성 루푸스의 치료에 관한 것이다.
자가면역 질환은 관행적으로 일반 대중의 약 5%-8%에 영향을 미치는 80가지가 넘는 만성 질환을 포함한다. 최근 10년간 면역계를 이해함에 있어 상당한 진전이 있었고, 그 결과 CD40 및 이의 리간드인 CD154와 같은 공동자극 분자의 역할에 대해 보다 올바르게 인식할 수 있게 되었다. 또한, 죽상동맥경화증이 같은 매우 흔한 질환의 발병기전에서 이러한 분자들의 역할도 대두되고 있는데, 이는 이러한 분자를 표적화하는 요법의 적용범위를 크게 확장시킬 수 있다.
CD154는 활성화된 T 림프구 상에서 발현하여, 그 수용체인 CD40과의 상호작용을 통해 T 세포와 다른 세포 유형 간의 상호작용을 조절하는데 중추적인 역할을 한다. CD154/CD40 쌍은 B 세포에 대한 동족 T 세포 보조를 매개하여, 증가된 B-세포 증식과 분화, 항체 생산 및 동종형 클래스 스위칭(isotype class switching)을 유도하는 것으로 알려져 있다. 또한, CD154는 림프절에서의 배아 중심의 형성과 B-세포 생존을 증진시킨다. 따라서, CD154는 자가면역 질환의 강화에 기여하여 전신 홍반성 루푸스(SLE), 류머티스 관절염, 강직성 척추염, 홍반성 신장염, 굿패스츄어 증후군(Goodpasture's disease), 쇼그렌 증후군, 다발성근염, 피부근염, 건선, 측두동맥염, 처그-스트라우스 증후군, 다발성 경화증, 길랑-바레 증후군, 횡단성 척수염, 중증 근무력증, 애디슨병, 갑상선염, 셀리악병, 궤양성 대장염, 유육종증, 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판감소성자반증, 베체트병, 원발성 담즙성 간경변 및 자가면역 당뇨병과 같은 자가면역 질환에 있어서 치료 표적으로서 매우 전도유망한 위치를 점하고 있어서, CD154의 차단이 여러 염증성 및 자가면역 모델 시스템에서 매우 효율적인 것으로 밝혀진 바 있다. 또한, CD154가 죽상동맥경화증 및 신경퇴행성 질환의 염증성 측면에서도 역할을 하는 것으로 시사된 바도 있다.
이전에는 gp39, TRAP 또는 TBAM로 불리던, CD40 리간드(CD40L)로도 알려진 CD154는 39　KDa의 TNF 패밀리의 II형 막 당단백질이다. 261개의 아미노산의 CD154 폴리펩타이드는 215개의 아미노산 세포외 도메인, 24개의 아미노산 막관통 영역, 및 22개의 아미노산 세포질 꼬리로 이루어진다. 다른 TNF 패밀리의 일원들과 같이, CD154는 삼량체 구조를 형성하여 이로써 수용체, 즉 CD 40의 삼량체화를 촉진한다. CD154/CD40 상호작용은 하전된 잔기들, 즉 CD154 상의 염기성 사슬과 CD40 상의 산성 사슬에 의해 안정화된다.
인간 CD154에 대해 인간화된 모노클로날 IgG1 항체인 Hu5c8(BG-9588, 또는 레플리주맙으로도 알려짐)을 자가면역 질환의 범주에 대하여 임상 시험에서 평가하였다. 전신 홍반성 루푸스(SLE)를 앓고 있는 환자에서의 2상 연구의 결과는 자가항체의 순환 수치를 비롯한 질병 바이오마커의 현저한 감소 및 C3 수치의 눈에 띄는 증가가 있어 고무적이었다. 그러나, 임상 효과의 이러한 기대되는 증거에도 불구하고, hu5c8의 추가적인 개발은 해당 치료로 유발되는 심혈관계 혈전 사고 발생의 증가로 인해 중단되었다. Hu5c8을 지정된 매 2주마다 3회분, 이후 매 4주마다 추가로 4회분(총 7회분)을 20　mg/kg의 투여량으로 정맥내 투여하였다(Boumpas et al, Arthritis Rheum. 2003 Mar;48(3):719-27). hu5c8이 인간에 있어서 혈전 효과를 유발하는 기작은 아직은 불명확하지만, 시험관 내에서 hu5c8에 노출된 후 혈소판 활성화가 증가하였음은 입증된 바 있다(Meyer et al., Blood(ASH Annual Meeting Abstracts) 2006 108: Abstract 1516).
전신 홍반성 루푸스(SLE)는 다수의 기관계들이 관여할 수 있는 자가면역 질환, 염증성 다발계통 류머티스성 질환, 또는 콜라겐 혈관병으로 분류되어 왔다. 유럽과 미국에서, 일부 연구에 따르면 이러한 질환에 걸린 사람의 수는 인구 100,000명당 대략 24명 내지 65명 수준에 이르는 것으로 추정된다. 루푸스 유발 인자는 아시아 또는 아프리카 인종, 및 여성을 포함한다. 루푸스를 앓고 있는 환자의 90%는 여성이고 증상의 초기 발병은 15세에서 50세 사이의 연령이 일반적이다. 전신 홍반성 루푸스는 단일 질병이 아니라 광범위하게 다양한 증상, 신체 계통 연관 정도, 및 임상 경과를 갖는 일군의 관련 증후군의 형태로 나타난다. SLE에서 흔히 나타나는 임상적 특징은 혈액 및 림프구 장애(림프절증), 심장 장애(예컨대, 심근병증, 심낭수, 심낭염), 안구 장애(예컨대, 건성 각결막염), 위장관 장애(예컨대, 입궤양형성, 췌장염, 복막염, 인두염), 일반 장애(예컨대, 불안감(malaise), 피로, 열병, 체중 감소), 신경계 장애(예컨대, 뇌졸중, 인지기능 장애, 편두통, 두통, 말초신경장애), 근골격 및 결합조직 장애(예컨대, 관절통, 관절염(미란성(erosive) 또는 파괴성이 아님), 섬유근육통, 골절, 근육염, 골괴사증, 골다공증, 골감소증), 정신질환(예컨대, 정동장애(affective disorder), 불안, 우울증, 정신병, 신경증, 일반 의학적 증상으로 인한 정신 이상, 정신이상), 신장 및 비뇨기 장애(예컨대, 루푸스 신장염, 신증후군), 호흡기, 흉부 및 종격동(mediastinal) 장애(예컨대, 늑막염, 간질성 폐렴, 폐고혈압), 피부 및 피하 조직 장애(예컨대, 탈모증, 피부형 홍반성 루푸스, 피부염, 전신성 홍반, 망상피반, 지방층염, 반구진발진(rash maculo-papular), 전신 홍반성 루푸스 발진, 두드러기) 및 혈관 질환(예컨대, 고혈압, 레이노드 현상, 모세혈관확장증, 혈소판감소증, 혈전정맥염, 혈관염)이다. 추가로, 대부분의 SLE 환자는 항핵-(ANA) 및 항이중가닥 DNA(항-dsDNA) 항체의 존재를 비롯한 비정상적인 항체 패턴을 나타낸다.
SLE의 임상 경과는 일시적이며, 기저 장애(underlying disability) 및 장기 손상 증가시 발적이 재발한다. 코르티코스테로이드는 치료의 초석이 되지만 장기 사용시 가장 빈번하고 광범위한 수의 부작용을 동반한다. 보다 낮은 수준의 활성의 환경 조성에 사용된 기타 약물로는 진통제, 비스테로이드성 항염증제(NSAID); 국소 스테로이드; 및 항말라리아제(예컨대, 클로로퀸 또는 히드록시클로로퀸); 신장성 고혈압 또는 레이노드 증후군을 위한 혈관확장제(칼슘 채널 차단제, 앤지오텐신-전환 효소[ACE] 억제제), 발진 또는 쇼그렌 증후군을 위한 국소 치료제, 수혈, 혈구감소증을 위한 정맥용(i.v.) 글로불린, 항경련제, 편두통 치료제, 재발성 혈전증을 위한 항응고제, 및 우울증 치료제를 포함하는 일반 보조 약물을 포함한다. 고용량의 코르티코스테로이드, 예를 들어 0.5 mg/kg/일 내지 1.0 mg/kg/일의 경구용 프레드니손(또는 등가물), 또는 500 mg/일 내지 1 g/일의 펄스 정맥용 메틸프레드니솔론이 급성 SLE 발적을 관리하는 데 사용되며, 면역억제제(예컨대, 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드)는 다른 치료가 효과가 없는 중등(moderate) 및 중증의 경우, 또는 해당 질환 또는 코르티코스테로이드 사용으로부터 장기간의 주요 장기 손상을 제한하거나 방지하기 위해 일반적으로 사용된다('스테로이드 감량'). 이러한 현재 치료 약품들은 제한된 효능 및/또는 이상 반응 프로파일때문에 부적절하다. 우수한 안전성 프로파일을 갖는 SLE에 대한 유효한 신규 치료제에 대한 높은 의료적 필요성에도 불구하고, 이러한 치료제의 개발은 특히 어려운 것으로 드러났으며 다수의 치료 후보 물질들도 실패한 것으로 확인되었다(Eisenberg, 2009).
CD40/CD154 공동자극 경로는 신경퇴행성 질환 및 신경근 질환의 발병기전과도 관련이 있었던 바, 상기 경로를 방해하는 화합물을 이용한 치료가 신경퇴행성 질환 및 신경근 질환의 치료에 유용한 것으로 보인다(WO　2010/065819호, 본 문헌의 내용은 전체가 본원에 포함됨).
신경퇴행성 질환 및 신경근 질환으로는 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축성 측색 경화증, 중증 근무력증, 다초점 운동 신경병증, 원발성 측색 경화증, 척수근 위축증, 케네디병, 및 척수소뇌 실조증을 포함한다.
흔히 루게릭병이라고 불리는 근위축성 측색 경화증(ALS)은 척추와 뇌의 운동 신경의 퇴행에서 기인하는 근섬유 위축을 특징으로 하는 치명적인 진행성 신경계 질환이다. ALS는 약 30,000여명의 미국 시민들에게서 발생하며, 이중 약 10%만이 가족성 형태의 ALS로 분류된다. ALS가 근위축을 유발하는 척수에서의 운동 신경의 손상을 특징으로 하지만, 해당 질병은 자체적으로도 축삭 이동, 단백질 응집, 흥분독성, 별아교세포증, 미토콘드리아 기능장애, 미세아교세포의 활성화 및 시냅스 리모델링에서도 변화를 나타내고 있다. 미세아교세포의 활성화, 별아교세포증 및 말초부의 침윤성 염증성 세포의 존재에 대해서는 충분히 설명된 바 있다. ALS 환자의 척수 내에는 IgG 면역반응성 침착물이 축적되어, 림프구, 수지상 세포, 단핵구 및 대식세포가 ALS의 척수 내로 침윤한다. 침윤성 면역 세포의 역할에 대해서는 명확히 이해되고 있지는 않지만, 최근의 연구는 침윤성 T 세포 군집이 신경보호 작용을 하는 것이고 세포독성이 아님을 시사하고 있다. ALS는 미세아교세포와 별아교세포의 활성화로 매개되는 면역 성분을 가지고 있음에도, 자가면역 질환으로 간주되지는 않는다. 특이적 면역 조절 경로(예컨대, 공동자극 경로)가 관련된 것으로 설명된 류머티스 관절염 또는 전신 홍반성 루푸스와 같은 질환과는 달리, ALS에 대해서 이러한 경로가 관여되어 있다는 점에 대해서는 설명된 바가 없다.
당업계에서는 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 및 신경근 질환에 대한 효과적인 신규한 치료에 대한 필요성이 대두되고 있다. CD40-CD40L(CD154) 상호작용 경로가 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 및 신경근 질환의 병리생리학과 관련이 있음은 입증된 바 있다. CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 안전하고 유효한 용량으로 투여하는 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 및 신경근 질환의 새로운 치료에 대한 필요성이 대두되고 있다.
하기의 발명의 내용은 본 발명의 모든 양태를 정의하려는 것은 아니며, 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용과 같은 다른 섹션에서 추가의 양태들을 기술한다. 본 문헌 전체 내용을 통일된 개시내용으로 관련시키고자 하기에, 본원에 기술된 특징들의 모든 조합이 - 비록 이러한 특징들의 조합을 본 문헌의 동일한 문장 또는 단락 또는 섹션에서 함께 찾아볼 수 없다하더라도 - 고려된다는 점을 이해하여야 한다. 단수형으로 기술되거나 청구된 본 발명의 양태들과 관련하여, 문맥상 이에 대한 보다 제한된 의미를 분명히 요구하지 않는 한, 이러한 용어들은 "하나 또는 그 이상"을 의미한다. "또는"이라는 용어는 문맥상 분명히 달리 요구하지 않는 한, 해당 항목들을 선택적으로 또는 함께 포함하는 것으로 이해하여야 한다. 본 발명의 양태가 어떤 특징을 "포함하는" 것으로 기술되는 경우, 그 실시양태들은 "상기 특징으로 이루어지는" 또는 "본질적으로 상기 특징으로 이루어지는" 경우도 고려된다. "약"이라는 용어가 사용되는 경우, 본 출원은 특정된 정확한 수치를 사용하는 것도 개시하는 것이다. 점수치(point value)가 언급되는 경우, 본 출원은 사용되는 이러한 수치들에 대해서도 개시하고 있는 것이며, 이는 종말점의 범위의 경우에 있어서도 동일하다.
전신 홍반성 루푸스(SLE)를 앓고 있는 혈청 양성인 환자에 있어서 CD154에 특이적으로 결합하는 1가의 페길화된(PEGylated) Fab'(CDP7657)의 안전성과 내성에 대한 임상 1상의 무작위 추출식, 이중맹검법(double-blind)에 따른, 위약 대조군(placebo-controlled) 연구를 수행하였다. CD154에 특이적으로 결합하는 1가의 페길화된 Fab'는 내성이 좋았으며, 어떠한 혈전색전성 부작용도 관찰되지 않았다.
상기 연구의 결과로, 이제 SLE와 같은 자가면역 질환 및 염증성 질환, 또는 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환의 치료에 있어서 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편에 대한 새로운 투여 용법이 발견되었다.
한 실시양태에서, 본 발명은 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에 사용하기 위한 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 제공하는데, 상기 방법은 약 20-60　mg/kg의 초기 부하 용량의 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을, 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계; 및 상기 초기 부하 용량 투여 약 2주 후, 상기 초기 부하 용량의 약 절반의 추가 용량 또는 용량들의 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을, 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 격주에 약 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 적어도 12주 동안 이를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
본 발명의 또 다른 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 중화 항체 또는 중화 항체 단편이다. 본 발명의 제1, 제2 또는 제3 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 바람직하게는 표면 플라스몬 공명으로 측정시 KD≤4.55　pM의 CD40에 대한 1가 결합 해리 상수를 가진다.
본 발명의 또 다른 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 각각 서열번호 1, 2 및 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1, CDR2 및 CDR3을 갖는 경쇄 가변 영역(LCVR) 및 각각 서열번호 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1, CDR2 및 CDR3을 갖는 중쇄 가변 영역(HCVR)을 포함한다.
본 발명의 추가의 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 서열번호 7로 나타낸 VL 쇄 서열 및 서열번호 8로 나타낸 VH 쇄 서열을 포함하거나, 또는 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 가진다.
본 발명의 추가의 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열과 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 갖는, 변형된 힌지 영역 내의 시스테인에서 페길화된 1가 Fab'이다. 바람직하게는, 본 발명의 11번째 실시양태에 따른 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열과 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 갖는 상기 1가 Fab'는 변형된 힌지 영역 내에 단일 티올기에 공유결합된 말레이미드기; 상기 말레이미드기에 공유결합된 리신 잔기; 및 상기 리신 잔기 상의 각각의 아민기에 결합된 분자량이 약 20 KDa인 메톡시폴리(에틸렌글리콜) 중합체를 가진다. 따라서, 상기 1가 Fab'에 공유결합된 전체 PEG의 총 분자량은 약 40 KDa이다.
도　1은 SLE에 걸린 대상체에서 약물에 대한 항체의 발생을 나타낸 것이다. SLE에 걸린 대상체에 있어서 모든 용량에서 매우 약한 약물에 대한 항체 반응(즉, 커트 지점에 매우 가까움)이 관찰되었다. 투약군 중에서 가장 강한 반응을 보인 60　mg/kg에서 측정된 ADA는 약물이 제거됨에 따라 증가하였다. 분석의 커트 지점은 0.0063　단위/mL(여기서, 1 단위/mL는 1　㎍/mL의 보정액과 같다)이다. SLE에 걸린 환자에서 매우 낮은 수준까지 떨어진 전체적인 약물에 대한 항체가 CD154에 특이적으로 결합하는 1가의 페길화된 Fab'의 약물동태학에는 영향을 주지 않는 것으로 밝혀졌다.
도　2는 CDP7657를 이용한 초기 개념 입증 임상 연구(연구 SL0014) 동안에 수행했던 투여 용법을 나타내고 있는데, 큰 부하 용량을 사용한 후 규칙적이고 동일한 유지 용량을 사용하는 원리를 확립하였다.
도　3은 연구 SL0014의 주요 결과를 나타내고 있는데, 여기서는 하기의 2가지 주요 효능 결과, 즉:
* SLEDAI-2K 반응 지수에서 최소 4-포인트 향상(SRI-4), 및
* 영국 루푸스 평가 그룹(British Isles Lupus Assessment Group, BILAG)을 근거로 한 복합 루푸스 평가(Composite Lupus Assessment, BICLA)에 따른 반응
이라는 두 결과가 모두 위약 치료제를 투여받는 대상체보다 기술된 투여 용법 하에 CDP7657를 투여받는 대상체에 있어서 일관되고도 실질적으로 더 높은 반응율이 나타나고 있음을 입증하고 있다.
도　4는 치료 개시 1달 이내에 나타난 CDP7657에 대한 실질적인 임상 반응을 나타내고 있는데, 이러한 반응은 3개월이 되는 치료 종료 시점까지 계속 증가하였고, 그 후 3개월 더 지속되었다.
도　5는 연구 SL0014에서 사용된 투여 용법과 비교하여, 60　mg 용량의 CDP7657를 단회 투여받는 대상체에 있어서 상이한 혈장 노출 프로파일을 나타내고 있다. 후자인 연구 SL0014에서는 투여를 지속하면서 100　㎍/mL의 표시된 목표치 초과의 혈장 수준을 신속하게 달성한 후 이를 일정하게 유지하고 있다.
도　6은 도 5에 도시된 2가지 투여 용법의 약동학적 데이터를 나타내고 있는데, 이는 90% 이상의 시간 동안 100　㎍/mL 초과의 노출 수준을 유지하는데 있어서 연구 SL0014의 용법이 성공적이었음을 확인시켜 준다.
도　7은 활성 약물 치료군 및 위약 치료군으로 무작위 추출된 대상체들의 기본 인구 통계학적 특성을 나타내고 있는데, 이는 잘 균형잡인 무작위 추출법이 달성되었음을 입증하고 있다.
도　8은 연구 SL0014를 수행하는 동안에 나타난 이상 반응의 발생과 특징을 나타내고 있는데, 이는 활성 약물 치료군과 위약 치료군 간에 실질적인 차이가 거의 없음을 의미한다. 혈전색전증이 발생하거나 이를 시사하는 사건은 없었다.
본 발명은 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편의 투여가 유익한 자가면역 질환 또는 염증성 질환 또는 신경퇴행성 질환의 치료 방법에 관한 것이다. 본 발명의 다양한 실시양태들은 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편, 특히 CDP7657을 이용하는 자가면역 질환 또는 염증성 질환 또는 신경퇴행성 질환의 치료에 관한 것이다.
본 발명을 보다 쉽게 이해할 수 있도록, 먼저 특정 용어들을 정의한다.
본원에서 "항체" 또는 "항체들"이라는 용어는 이황화 결합에 의해 상호연결된 4개의 폴리펩타이드 사슬인 2개의 중쇄(H) 및 2개의 경쇄(L)로 구성된 면역글로불린 분자를 지칭한다. 각 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 VH로 약칭함) 및 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 상기 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인인 CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 4번째 불변 도메인인 CH4를 가질 수도 있다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서 LCVR 또는 VL로 약칭함) 및 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 상기 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인인 CL로 구성된다. VH 및 VL 영역은 보다 보존된 영역들이 산재된 상보성 결정 영역(CDR)이라고 부르는 것과 프레임워크 영역(FR)이라고 부르는 초가변성 영역으로 더 세분화될 수 있다. 각 VH 및 VL은 아미노 말단에서부터 카르복시 말단으로 하기의 순서로 배열된 3개의 CDR과 4개의 FR로 이루어진다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 이들 CDR의 정확한 경계는 서로 다른 시스템들에 따라 다르게 정의되어 왔다. 카바트(Kabat)가 기술한 시스템은 항체의 어떤 가변 영역에도 적용할 수 있는 분명한 잔기 넘버링 시스템을 제공할 뿐만 아니라, 3개의 CDR을 정의하는 정확한 잔기의 경계도 제공한다. 이러한 CDR은 카바트 CDR로 지칭될 수 있다. 코티아(Chothia) 등은 카바트 CDR 내의 특정 하위 부분들이 아미노산 서열의 수준에서 엄청난 다양성을 가짐에도 불구하고 거의 동일한 펩타이드 백본 구성을 채택한다는 사실을 발견하였다(Chothia et al.(1987) Mol. Biol. 196:901-917; Chothia et al.(1989) Nature 342:877-883). 이들 영역들은 코티아 CDR로 지칭될 수 있는데, 이들은 카바트 CDR과 중첩되는 경계를 가진다. 카바트 CDR과 중첩되는 CDR을 규정하는 다른 경계들은 문헌[Padlan(1995) FASEB J. 9:133-139] 및 [MacCallum(1996) J. Mol. Biol. 262(5):732-45]에 기술된 바 있다. 여전히 다른 CDR 경계의 정의들은 본원에 기술된 시스템 중 하나를 엄격하게 따르지 않을 수 있으나, 그래도 카바트 CDR과 중첩될 것이고, 특정 잔기들 또는 잔기들의 그룹 또는 심지어 전체 CDR이 항원 결합에 현저하게 영향을 미치지 않는다는 예측 또는 실험적 발견에 비추어 보면 이들은 단축되거나 신장될 수 있다. 본원에서 사용된 방법은 이들 시스템 중 임의의 한 시스템에 따라 규정된 CDR을 이용할 수 있으나, 특정 실시양태들은 카바트 또는 코티아가 정의한 CDR을 이용한다. 면역글로불린 또는 면역글로불린들이라는 용어는 각각 "항체" 또는 "항체들"이라는 말과 동의어로 사용된다. 본원에서 사용된 "항체" 또는 "항체들"이라는 용어는, 이에 제한되지는 않지만, 당업계에 공지된 재조합 기술로 생성된 재조합 항체를 포함한다. "항체" 또는 "항체들"은 포유류 종, 예컨대 인간, 인간 이외의 영장류(예컨대, 침팬지, 개코원숭이, 붉은털원숭이 또는 시노몰구스 원숭이와 같은 인간 이외의 영장류), 설치류(예컨대, 마우스, 래트, 래빗 또는 기니피그), 염소, 소 또는 말 종; 또는 조류 종, 예컨대 닭 항체; 또는 어류 종, 예컨대 상어 항체를 포함하는 임의의 기원으로부터 유래할 수 있다. "항체" 또는 "항체들"은 인간 동종형인 IgA1, IgA2, IgD, IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgG4, IgE 및 IgM, 그리고 이들의 변형된 변이체를 비롯한 임의의 동종형 항체를 포함한다. 본원에서의 항체는 관심 "항원"에 대항하여 유도되는 것이다. 바람직하게는, 상기 항원은 생물학적으로 중요한 폴리펩타이드이며, 질환 또는 장애를 앓고 있는 포유동물에 대한 상기 항체의 투여는 그 포유동물에 있어서 치료적 이익을 유도할 수 있다. 그러나, 폴리펩타이드가 아닌 항원에 대항하여 유도된 항체도 고려된다. 항원이 폴리펩타이드인 경우, 이는 막관통 분자(예컨대, 수용체) 또는 리간드, 예컨대 성장 인자 또는 사이토카인일 수 있다. 본 발명에 포함되는 항체를 위해 바람직한 분자 표적으로는 CD 폴리펩타이드, 예컨대 CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22, CD34, CD38, CD40 및 CD154; FcRN; OX40; HER 수용체 패밀리의 일원, 예컨대 EGF 수용체, HER2, HER3 또는 HER4 수용체; 세포 부착 분자, 예컨대 LFA-1, Mac1, p150,95, VLA-4, ICAM-1, VCAM 및 av/b3 인테그린(이의 α 또는 β 서브단위 포함)(예컨대, 항-CD11a, 항-CD18 또는 항-CD11b 항체); 케모카인 및 사이토카인 또는 이들의 수용체, 예컨대 IL-1 α 및 β, IL-2, IL-6, IL-6 수용체, IL-7, IL-12, IL-13, IL-17 형태, IL-18, IL-21, IL-23, TNFα 및 TNFβ; 성장 인자, 예컨대 VEGF; IgE; 혈액형 항원; flk2/flt3 수용체; 비만(OB) 수용체; mpl 수용체; CTLA-4; 폴리펩타이드 C 등을 포함한다.
본원에서 사용된 "항체 단편" 또는 "항체 단편들"이라는 용어는 1종 이상의 도메인 또는 1종 이상의 아미노산이 결여된 자연 발생적으로 생기는 항체를 지칭한다. 통상적으로, 항체 단편은 이러한 자연 발생적으로 생기는 항체의 전체 항원 결합 영역 또는 이의 가변 영역을 포함한다. 항체 단편의 예로는 Fc 부분이 결여되거나 없는 임의의 항체를 포함한다. 항체 단편의 예로는 Fab, Fab', F(ab')2, Fv 및 scFv 단편; 디아바디; 트리아바디; 테트라바디; 미니바디; 본질적으로 1개, 2개 또는 3개의 면역글로불린 도메인(들)로 이루어진 항체, 예컨대 도메인 항체(Domain AntibodiesTM); 단일쇄 항체; 상기 임의의 항체의 이중특이적, 삼중특이적, 사중특이적 또는 다중특이적 변이체도 포함한다. 본원에서 사용된 "항체 단편" 또는 "항체 단편들"이라는 용어는 낙타과의 항체(예컨대, 낙타 또는 라마 유래의 항체, 예컨대 나노바디(NanobodiesTM)) 및 이의 유도체를 지칭하기도 한다. 항체 단편들은 당업계에 잘 알려져 있다(Holliger and Hudson, 2005). 항체 단편의 생산을 위해 다양한 기술들이 개발되었고, 이들은 당업계에 공지되어 있다(Glover and Humphreys, 2004). 본원에서 사용된 "항체 단편" 또는 "항체 단편들"이라는 용어는 인간, 인간화, 영장류화 및 키메라 항체 단편을 포함한다.
본원에서 사용된 "BILAG 점수" 또는 "BILAG" 지수라는 용어는 각각 영국 루푸스 평가 그룹 점수 및 지수를 의미한다(Symmons DP et al. Q J Med. 1988 Nov; 69(259):927-37). BILAG 지수는 연구 SL0007에서 SLE를 앓고 있는 환자에 대한 치료 효능을 평가하기 위해 사용되었다. 이는 SLE 질환 활성을 측정하기 위한 통합적인 지수이다. BILAG 지수의 2004년 버젼을 본 연구에 사용하였다. 이 버젼은 8가지의 신체 계통(전신, 점막 피부, 신경, 근골격, 심혈관계 및 호흡기계, 혈관염, 신장, 및 혈액)에 대한 86가지의 질문으로 구성되어 있다. 질문 중 일부는 환자의 병력에 기초하고, 일부는 검사 결과에 기초하며, 나머지는 실험 결과에 기초한다. 각각의 신체 계통 점수는 E에서 A 범위이며, 여기서 A는 가장 심각한 질환 활성을 나타낸다. 신체 계통 점수의 해석은 하기와 같다: A("활동성") = 심하게 활동성인 질환(질병 완화 치료가 요구되기에 충분함, 예컨대 20 mg/일 초과의 프레드니손, 면역억제제, 세포독성제); B("주의") = 중간 정도로 활동성인 질환(대증 요법만이 요구됨, 예컨대 20 mg/일 이하의 프레드니손 또는 항말라리아제); C("만족") = 안정된 가벼운 질환(치료에 대한 변화 조치 없음); D = 이전에 활동성이었던 질환 - 그러나 현재 발병 없음; E = 사전 질환 활동이 없음. BILAG 알파벳의 장기 신체 계통 점수를 수치로 전환하여 합산하는 경우(각각의 BILAG A=9, 각각의 BILAG B=3, 각각의 BILAG C=1, 및 각각의 BILAG D 또는 E는 0인 규칙을 이용하여), 이를 총 BILAG 점수로 지칭한다.
본원에서 사용된 "CDP7657"이라는 용어는 WO　2008/118356호(그 내용 전체가 본원에 포함됨)에 개시된 CD154에 특이적으로 결합하는 1가의 페길화된 Fab'를 일컫는다. CDP7657은 각각 서열번호 1, 2 및 3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2 및 CDR3을 갖는 경쇄 가변 영역(LCVR), 및 각각 서열번호 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2 및 CDR3을 갖는 중쇄 가변 영역(HCVR)을 가진다. CDP7657은 서열번호 7로 나타낸 VL 쇄 서열 및 서열번호 8로 나타낸 VH 쇄 서열을 가진다. CDP7657은 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 가진다. CDP7657은 WO　2008/118356호에 기술된 바와 같이 변형된 힌지 영역 내의 시스테인에서 페길화된다.
본원에서 사용된 "병용 치료"라는 용어는 2종 이상의 치료제, 예컨대, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편 및 코르티솔의 투여를 일컫는다. 상기 코르티솔은 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편의 투여와 동시에, 이를 투여하기 전에 또는 이를 투여한 후에 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편, 또는 이를 포함하는 조성물의 투여 또는 용량을 이용하는 치료와 관련하여, 본원에서 사용된 "격주"라는 용어는 본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편 또는 상기 조성물을 매 9-19일 마다, 보다 바람직하게는, 매 11-17일 마다, 보다 더 바람직하게는, 매 13-15일 마다, 및 가장 바람직하게는, 매 14일 마다 투여하는 것을 가리킨다.
본원에서 사용된 "KD"라는 용어는 특정 항체-항원 상호작용의 해리 상수를 지칭하기 위한 것이다. 상기 해리 상수는 1가 결합 또는 2가 결합을 지칭할 수 있다. 바람직하게는, 상기 해리 상수는 표면 플라스몬 공명으로 측정된다.
본원에서 사용된 "중화 항체"(또는 "CD154 활성을 중화시킨 항체")라는 용어는 CD154에 대한 결합이 CD154의 생물학적 활성의 억제를 유도하는 항체를 지칭하기 위한 것이다. 이러한 CD154의 생물학적 활성의 억제는 CD154 생물학적 활성에 대한 1종 이상의 지표들을 측정함으로써 평가될 수 있다. 이들 CD154 생물학적 활성의 지표들은 당업계에 공지된 수개의 표준 시험관내 또는 생체내 분석법들 중 1종 이상의 분석법에 의해 평가될 수 있다. 예를 들어, 시험관내 분석법은 CD40L-발현 세포 또는 세포주에 대한 정제된 CD40 단백질의 결합을 억제하는 항체의 역량을 측정할 수 있거나, 또는 CD40L-발현 T-세포 또는 T-세포주와 B 세포 또는 B 세포주의 공동배양 및 후자의 세포에 대한 세포간 부착 분자 1(ICAM-1) 발현의 모니터링을 수반하는 T-세포 의존성 B-세포 활성화의 분석의 역량에 대해 측정할 수도 있다. 생체내 분석법은 적절한 종에서, 예컨대 항체가 인간 이외의 영장류와 같은 적절한 종을 인식한다면 이러한 종들 중에서, 또는 항체가 마우스와 같은 종을 인식한다면 이러한 종들 중에서 파상풍 변성독소 또는 키홀 림펫 헤모사이아닌과 같은 항원에 대한 면역 반응을 검사하는 단계를 포함할 수 있다. 항체가 마우스 CD40L을 인식하는 경우에는, 이는 SLE의 마우스 모델, 예컨대 NZB/W 또는 MRL/lpr 마우스 중에서 평가될 수 있다.
본원에서 사용된 "페길화," "폴리에틸렌 글리콜" 또는 "PEG"라는 용어는 커플링제를 포함하거나 또는 포함하지 않거나, 커플링 또는 활성화 모이어티로(예를 들어, 티올, 트리플레이트, 트레실레이트, 아지리딘, 옥시란으로, 또는 바람직하게는 말레이미드 모이어티, 예컨대, PEG-말레이미드로) 이루어진 유도체화를 포함하거나 또는 포함하지 않는 폴리알킬렌 글리콜 화합물 또는 그의 유도체의(예컨대, 공유 결합을 통한) 부착을 지칭한다. 다른 적절한 폴리알킬렌 글리콜 화합물로는 말레이미도 모노메톡시 PEG, 활성화 PEG 폴리프로필렌 글리콜 뿐만 아니라, 하기 유형의 하전된 중합체 또는 중성 중합체: 덱스트란, 콜로민산 또는 다른 탄수화물계 중합체, 아미노산 중합체, 및 비오틴 및 다른 친화성 시약 유도체를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
"SLEDAI 점수" 또는 "SLEDAI" 지수라는 용어는 각각 전신 홍반성 루푸스 질환 활동성 점수/지수를 의미한다(Hawker et al., J Rheumatol. 1993).
"SRI 점수" 또는 "SRI" 지수라는 용어는 전신 홍반성 루푸스 반응 지수의 점수/지수를 가리킨다(Furie RA et al., Arthritis Rheum. 2009).
본원에서 사용된 "표면 플라스몬 공명"이라는 용어는, 예를 들어 바이어코어(BIAcore) 시스템(스웨덴 웁살라 및 미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 파마시아 바이오센서 아베(Pharmacia Biosensor AB)사 제조)을 사용하여 바이오센서 매트릭스 내의 단백질 농도 변화를 감지함으로써 실시간으로 생체특이적 상호작용을 분석할 수 있도록 해주는 광학적 현상을 일컫는다. 추가의 설명에 대해서는, 실시예 1 및 문헌[Joensson, U., et al.(1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26]; [Joensson, U., et al.(1991) Biotechniques 11:620-627]; [Johnsson, B., et al.(1995) J. Mol. Recognit. 8:125-131]; 및 [Johnnson, B., et al.(1991) Anal. Biochem. 198:268-277]을 참고한다.
제1 실시양태에서, 본 발명은 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에서 사용하기 위한 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 제공하는데, 상기 방법은 하기 단계를 포함한다:
(a) 약 20-60　mg/kg의 초기 부하 용량의 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을, 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계; 및
(b) 상기 초기 부하 용량 투여 약 2주 후, 상기 초기 부하 용량의 약 절반의 추가 용량 또는 용량들의 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을, 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 격주에 약 1회의 빈도로 투여하는 단계. 상기 초기 부하 용량은 약 20　mg/kg, 25　mg/kg, 30　mg/kg, 35　mg/kg, 40　mg/kg, 45　mg/kg, 50　mg/kg, 55　mg/kg 또는 60　mg/kg일 수 있다. 상기 추가 용량은 약 10　mg/kg, 12.5　mg/kg, 15　mg/kg, 17.5　mg/kg, 20　mg/kg, 22.5　mg/kg, 25　mg/kg, 27.5　mg/kg 또는 30　mg/kg일 수 있다.
본 발명의 제2 실시양태에서, 본 발명의 제1 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 적어도 12주 동안 이를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
본 발명의 제3 실시양태에서, 본 발명의 제1 또는 제2 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 중화 항체 또는 중화 항체 단편이다.
본 발명의 제4 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2 또는 제3 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 표면 플라스몬 공명으로 측정시 KD≤4.55　pM의 CD40에 대한 1가 결합 해리 상수를 가진다.
본 발명의 제5 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3 또는 제4 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 각각 서열번호 1, 2 및 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1, CDR2 및 CDR3을 갖는 경쇄 가변 영역(LCVR) 및 각각 서열번호 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1, CDR2 및 CDR3을 갖는 중쇄 가변 영역(HCVR)을 포함한다.
본 발명의 제6 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4 또는 제5 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 바람직하게는 Vκ1 인간 생식세포 패밀리, 보다 바람직하게는 Vκ1 2-1-(1) O12 V-영역 및 가장 바람직하게는 서열번호 7로 나타낸 VL 쇄 프레임워크 서열 유래의 가변 경쇄(VL)에 대한 프레임워크 영역을 포함한다. 가변 중쇄(VH)에 대한 프레임워크 영역은 바람직하게는 VH4 쇄 인간 생식세포 패밀리, 보다 바람직하게는 VH4 1-1 4-59 서열 및 가장 바람직하게는 서열번호 8로 나타낸 VH 프레임워크 서열로부터 유래한다.
본 발명의 제7 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5 또는 제6 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 CD40에 대해 1가 결합을 나타내며, 바람직하게는 CD154에 특이적으로 결합하는 단 하나의 결합 부위를 가진다. 바람직하게는, 상기 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 VH 도메인 또는 도메인 항체(dAb), Fab, Fab', Fv, Fab-Fv, Fab-dsFv, Fab-Fv-Fv, Fd, HL, dsHL, LH, dsLH, 단일쇄 항체(예컨대, scFv, scFab 및 scFabΔC) 또는 기타 1가의 단편 또는 항체 유도체, 또는 CD154에 대해 특이적이고 1가 결합을 나타내는 이중특이적 또는 다중특이적 항체, 예컨대 DVD-Ig, 트리오맙(TriomabTM), F(ab)2, F(ab')2, F(ab')3, (Fab-Fv)2-Fc 또는 트리바디이다.
본 발명의 제8 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 제6 또는 제7 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 예를 들어, 운반체 단백질, 독소 또는 기타 이펙터 분자, 또는 PEG와 같은 기능성 모이어티에 공유 또는 비공유적으로, 또는 직접 또는 간접적으로 접합된 CD154에 특이적으로 결합하는 임의의 항체 또는 항체 단편을 포함하는 접합체이다. 상기 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은, 예컨대 1종 이상의 시스테인 또는 리신 잔기에서 페길화될 수 있다. 특정 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 단편은 말레이미드 링커를 통해 페길화된 Fab 또는 Fab' 단편이다. 본 발명의 추가의 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 단편은 차단 모이어티, 검출가능한 모이어티(예컨대, 진단적 모이어티를 포함하는 형광성 모이어티, 방사성 동위원소 모이어티, 방사선 불투과성 모이어티 등), 및/또는 치료적 모이어티(예컨대, 세포독성제, 소염제, 면역조절제, 항감염제, 항암제, 항신경퇴행성 제제, 방사성 핵종 등)인 기능적 모이어티에 접합된다.
본 발명의 제9 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 제6, 제7 또는 제8 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 서열번호 7로 나타낸 VL 쇄 서열 및 서열번호 8로 나타낸 VH 쇄 서열을 포함한다.
본 발명의 제10 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 제6, 제7, 제8 또는 제9 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 포함한다.
본 발명의 제11 실시양태에서, 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 제6, 제7, 제8, 제9 또는 제10 실시양태에 따른 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에 사용하기 위한 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 갖는 1가 Fab'이다.
본 발명의 제12 실시양태에서, 본 발명의 제11 실시양태에 따른 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 갖는 1가 Fab'는 변형된 힌지 영역 내의 시스테인에서 페길화된다. 바람직하게는, 본 발명의 제11 실시양태에 따른 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 갖는 상기 1가 Fab'는 변형된 힌지 영역 내의 하나의 티올기에 공유결합된 말레이미드기; 상기 말레이미드기에 공유결합된 리신 잔기; 및 상기 리신 잔기 상의 각각의 아민기에 결합된 분자량이 약 20 KDa인 메톡시폴리(에틸렌글리콜) 중합체를 가진다. 따라서, 상기 1가 Fab'에 공유결합된 전체 PEG의 총 분자량은 약 40 KDa이다.
추가의 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에 사용하기 위한 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 WO　2008/118356호 및 WO　2006/030220호(양 문헌의 내용은 모두 그 내용 전체가 본원에 포함됨)에 기술된 바와 같은 항체, 항체 단편 또는 유도체이다.
본 발명의 제13 실시양태는 본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 제6, 제7, 제8, 제9, 제10, 제11 또는 제12 실시양태에 따른 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에 사용하기 위한 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로서, 상기 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환이 전신 홍반성 루푸스(SLE), 홍반성 신장염, 류머티스 관절염, 혈청음성 척추관절병증, 건선, 건선성 관절염, 피부경화증, 쇼그렌 증후군, 다발성 경화증, 제I형 당뇨병, 자가면역 포도막염 및 신장 증후군 또는 혈관염인 것인, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 것이고, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료받은 대상체는 SLEDAI, BILAG 및 종합 의사 평가(Global Physician assessment)로부터 선택된 지수 중 하나 이상의 기준치로부터의 개선을 달성하는 것이다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 대상체가 이러한 지수들 중 하나에 대해 개선을 달성하는 것인, 본원에 기술된 방법을 이용하여 SLE를 앓고 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 것이고, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료받은 대상체는 SLEDAI 반응 지수 4(SRI-4)를 달성하는 것이다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 대상체가 SLEDAI 반응 지수 4를 달성하는 것인, 본원에 기술된 방법을 이용하여 SLE를 앓고 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 것이고, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료받은 대상체는 SRI-50 지수의 기준치로부터 50%의 개선을 달성하는 것이다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 대상체가 SRI-50 지수의 기준치로부터 50%의 개선을 달성하는 것인, 본원에 기술된 방법을 이용하여 SLE를 앓고 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 것이고, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료받은 대상체는 보체 C3 및 C4 농도의 기준치 또는 정규치로부터 20%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 90%의 증가를 달성하거나, 또는 혈청 중의 항이중가닥 DNA 역가의 20%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 90%의 감소를 달성하는 것이다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 대상체가 보체 C3 및 C4 농도의 기준치 또는 정규치로부터 20%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 90%의 증가를 달성하거나, 또는 혈청 중의 항이중가닥 DNA 역가의 20%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 90%의 감소를 달성하는 것인, 본원에 기술된 방법을 이용하여 SLE를 앓고 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 것이고, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료받은 대상체는 항이중가닥 DNA 항체에 대해 혈청양성에서 혈청음성으로 복귀하는 것이다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 대상체가 항이중가닥 DNA 항체에 대해 혈청양성에서 혈청음성으로 복귀하는 것인, 본원에 기술된 방법을 이용하여 SLE를 앓고 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 본 발명의 항체 또는 항체 단편에 위치한 하나 이상의 시스테인 잔기의 티올기를 통해 PEG에 공유결합된다. 상기 항체 또는 항체 단편에 결합된 각 PEG 분자는 해당 항체 또는 항체 단편에 위치한 시스테인 잔기의 황 원자에 공유결합될 수 있다. 상기 공유 결합은 일반적으로 이황화 결합, 즉, 특히 황-탄소 결합일 것이다. 티올기가 부착 지점으로 사용되는 경우, 적절하게 활성화된 기능적 모이어티, 예를 들어 티올 선택적인 유도체, 예컨대 말레이미드 및 시스테인 유도체가 사용될 수 있다. 활성화된 PEG는 상기 기술된 바와 같은 PEG로 변형된 항체 단편의 제조에서 출발 물질로 사용될 수 있다. 상기 활성화된 PEG는 티올 반응성기, 예컨대 할로카르복실산 또는 에스테르, 예컨대 요오드아세트아미드, 이미드, 예컨대 말레이미드, 비닐 설폰 또는 디설파이드를 함유하는 임의의 PEG일 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 항체 단편 접합체는 2개의 말레이미드 분자를 갖는 2개의 PEG 분자를 포함할 수 있다. 출발 물질은 시판되는 것들(예를 들어, 미국 앨러배마주 헌츠빌 소재의 넥타(Nektar)사 제조품, 전신은 쉐어워터 폴리머스 인코포레이티드(Shearwater Polymers Inc.))로부터 얻을 수 있거나, 또는 통상적인 화학적 절차를 이용하여 시판되는 출발 물질로부터 제조될 수 있다. 구체적인 PEG 분자로는 20　KDa의 분자량을 갖는 메톡시-PEG-아민(넥타, 전신은 쉐어워터; 랩 폴리미어(Rapp Polymere); 및 선바이오(SunBio)로부터 입수가능) 및 M-PEG-SPA(넥타로부터 입수가능, 전신은 쉐어워터)를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 예컨대, EP 0948544호(또한, 문헌["Poly(ethyleneglycol) Chemistry, Biotechnical and Biomedical Applications", 1992, J. Milton Harris(ed), Plenum Press, New York], ["Poly(ethyleneglycol) Chemistry and Biological Applications", 1997, J. Milton Harris and S. Zalipsky(eds), American Chemical Society, Washington DC] 및 ["Bioconjugation Protein Coupling Techniques for the Biomedical Sciences", 1998, M. Aslam and A. Dent, Grove Publishers, New York]; 및 [Chapman, A. 2002, Advanced Drug Delivery Reviews 2002, 54:531-545])도 참조)에 개시된 방법에 따라, PEG화된, 즉 그에 PEG(폴리(에틸렌글리콜))가 공유결합되어 있는 변형된 Fab' 단편이다. 일례로, PEG는 힌지 영역 내의 시스테인에 부착되어 있다. 또 다른 일례로, PEG로 변형된 Fab' 단편은 변형된 힌지 영역 내의 단일 티올기에 공유결합된 말레이미드기를 가진다. 리신 잔기는 말레이미드기에 공유결합될 수 있고, 리신 잔기 상에 있는 각각의 아민기에는 분자량이 대략 20 KDa인 메톡시폴리(에틸렌글리콜) 중합체가 부착될 수 있다. 따라서, Fab' 단편에 부착된 PEG의 총 분자량은 대략 40 KDa일 수 있다.
또 다른 실시양태에서, PEG 기능적 모이어티는 WO 98/25971호(그 내용 전체가 본원에 포함됨) 및 WO 04/72116호(그 내용 전체가 본원에 포함됨)에 기재되어 있는 방법을 사용하여 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편에 부착되며, 이로써, 리실-말레이미드기가 중쇄의 C-말단 종단부에 있는 시스테인 잔기에 부착되며, 리실 잔기의 각각의 아미노기는 그에 공유결합되어 있는, 분자량이 약 20 KDa인 메톡시폴리(에틸렌글리콜) 잔기를 갖는다. 따라서, 항체에 부착된 PEG의 총 분자량은 대략 40 KDa이다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에 사용하기 위한 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로서, 상기 방법이 상기 항체 또는 항체 단편을 이를 필요로 하는 개체에 정맥내, 피하 또는 근육내 투여하는 것을 포함하는 것인, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편이다. 피하 투여가 유리한데, 그 이유는 환자가 치료제, 예컨대 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 자가 투여할 수 있어서 환자나 의료인 모두에게 편리하기 때문이다.
특정 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 중쇄 불변 영역, 예컨대 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영역을 포함한다. 바람직하게는, 상기 중쇄 불변 영역은 글리코실화되지 않도록 조작된다. 또한, 상기 항체는 카파 경쇄 불변 영역 또는 람다 경쇄 불변 영역인 경쇄 불변 영역을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체는 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
본 발명의 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 대상체에 격주로 정맥내, 피하 또는 근육내 투여하기 적절한 약학 조성물에 도입될 수 있다. 통상적으로, 상기 약학 조성물은 본 발명의 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편 및/또는 약학적으로 허용가능한 담체 및/또는 기타 활성 성분, 예컨대 메토트렉세이트 또는 코르티솔을 포함한다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 본 발명의 임의의 실시양태에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물로서, 상기 조성물이 이를 필요로 하는 개체에게 정맥내, 피하 또는 근육내 투여를 위해 제조되는 것인, 약학 조성물이다. 또 다른 실시양태에서, 상기 조성물은 이를 필요로 하는 개체에게 정맥내, 피하 또는 근육내 투여하기 위한 설명서 및 임의로 이를 위한 장치를 포함하는, 사용 설명서가 있는 키트의 일부이다.
본원에서 사용된 "약학적으로 허용가능한 담체"는 생리학적으로 화합가능하고 본원에 기재된 방법에 있어서 대상체에 투여하기 적합한 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항균제 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 담체의 예로는 물, 식염수, 인산염 완충 식염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등 중에서 1종 이상 뿐만 아니라 이들의 조합도 포함한다. 대부분의 경우, 상기 조성물 중에 등장화제, 예를 들어 당, 다가알콜, 예컨대 만니톨, 소르비톨, 또는 염화나트륨을 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 약학적으로 허용가능한 담체는 상기 항체 또는 항체 부분의 저장 수명 또는 유효성을 강화시키는 소량의 보조제, 예컨대 습윤제 또는 유화제, 보존제 또는 완충제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 다양한 형태로 존재할 수 있다. 이러한 형태들에는, 예를 들어, 용액(예컨대, 주사액 및 주입액), 분산액 또는 현탁액, 분말 및 리포좀을 포함한다.
바람직한 형태는 의도한 투여 모드 및 치료 용도에 따라 다르다. 관행적으로 바람직한 조성물은 다른 항체를 이용하여 인간의 수동 면역화에 사용되는 것들과 유사한 조성물과 같은 주사액 또는 주입액의 형태이다.
치료 조성물은 일반적으로 제조 및 저장 조건 하에 멸균 상태이면서 안전성이 있어야 한다. 상기 조성물은 용액, 마이크로에멀젼, 분산액, 리포좀, 또는 높은 약물 농도에 적절한 기타 규칙적 구조물로 제제화될 수 있다. 멸균 주사액은 적절한 용매 중에서 필요량의 활성 화합물(즉, 항체 또는 항체 부분)을 필요에 따라 상기 열거된 성분들 중 하나 또는 이들의 조합과 함께 도입한 후, 여과 멸균시켜 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산액은 염기성 분산액 매질 및 상기 열거된 것들 중 필요한 기타 성분들을 포함하는 멸균 비히클에 상기 활성 화합물을 도입함으로써 제조된다. 멸균 주사액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우, 바람직한 제조 방법은 사전에 멸균 여과된 용액으로부터 활성 성분과 추가로 필요한 임의 성분의 분말을 생성하는 진공 건조 및 동결-건조이다. 용액의 적절한 유동성은 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅을 사용함으로써, 분산액의 경우 요구되는 입자 크기를 유지함으로써, 그리고 계면활성제를 사용함으로써 유지될 수 있다. 주사제 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 조성물 내에 포함시킴으로써 유발될 수 있다. 특정 실시양태에서, 활성 화합물은 신속한 방출에 대해 해당 화합물을 보호할 담체를 이용하여, 예컨대 서방형 제제로 제조될 수 있다. 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르쏘에스테르 및 폴리락트산과 같은 생분해성, 생체적합성 중합체가 사용될 수 있다. 이러한 제제들을 제조하기 위한 여러가지 방법들은 특허를 받았거나 또는 당업계의 숙련자들에게 일반적으로 알려져 있다. 예컨대, 문헌[Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978]을 참조한다.
추가의 실시양태에서, 추가의 활성 성분들이 본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 포함하는 약학 조성물에 도입된다. 특정 실시양태에서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 1종 이상의 추가의 치료제와 함께 공동 제제화 및/또는 공동 투여된다. 예를 들어, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 코르티코스테로이드, 비스테로이드성 항염증제(NSAID), 또는 면역 매개된 질환의 발병기전에 관여하는 것으로 알려진 많은 전염증성 사이토카인, 예컨대 TNF, IL-1, IL-6, CTLA-4, IFN, 또는 B-세포 활성을 표적으로 삼는 것들, 예컨대 CD19, CD20(예컨대, 리툭시맙), CD22(예컨대, 에프라투주맙), BAFF(예컨대, 벨리무맙) 및 BLyS/APRIL(예컨대, 아타시셉트)을 표적화하는 요법과 함께 공동 제제화 및/또는 공동 투여될 수 있다(상기 요법은 그 자체가 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 모이어티와 함께 제제화될 수도 있고, 제제화되지 않을 수도 있다).
추가의 실시양태에서, 본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편, 또는 이를 포함하는 조성물은, 1종 이상의 전술한 치료제들과 병용하여 본 발명의 실시양태에 따라 사용될 수 있다. 이러한 병용 요법은 적은 용량으로 투여된 치료제를 유리하게 이용할 수 있기 때문에, 여러가지 단일 요법들과 관련하여 있을 수 있는 독성 또는 합병증을 피할 수 있다.
본 발명의 방법 또는 용도에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료될 수 있는 자가면역 질환(들) 또는 염증성 질환(들)로는, 이에 제한되지는 않지만, 전신 홍반성 루푸스(SLE), 류머티스 관절염, 강직성 척추염, 홍반성 신장염, 쇼그렌 증후군, 다발성근염, 피부근염, 측두동맥염, ANCA-연관 혈관염, 처그-스트라우스 증후군, 항인지질 증후군, 막성 사구체 신염, 굿패스츄어 증후군, 면역글로불린 A 신장병증, 헤노흐-쉘라인 자반증(Henoch-Schoenlein purpura), 만성 이식 거부, 아토피성 피부염, 심상성 천포창, 건선, 천식, 알레르기, 전신 경화증, 다발성 경화증, 길랑-바레 증후군, 횡단성 척수염, 만성 면역 다발신경병증, 중증 근무력증, 애디슨병, 갑상선염, 자가면역 위염, 악성 빈혈, 셀리악병, 궤양성 대장염, 유육종증, 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판감소성자반증, 베체트병, 원발성 담즙성 간경변, 자가면역 당뇨병, 라임 신경보렐리아증(Lyme neuroborreliosis), 간질성 폐질환을 포함한다.
자가면역 매개된 또는 교차 반응성 면역 매개된 염증이 1차적 병리적 과정으로 확립된 상기 질환들 이외에도, 염증도 많은 질환들에 일조하는 과정들의 조합 중 하나로 보인다.
이들 중, 본 발명의 방법 또는 용도에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로 치료될 수 있는 신경퇴행성 질환(들)은 진행성 신경계 기능장애를 특징으로 하는 유전성 또는 산발성 질환이다. 이러한 질환들은 발병한 신경계의 중추 또는 말초 구조의 위축과 연관되는 경우가 많다. 예를 들어, 신경퇴행성 질환으로는, 이에 제한되지는 않지만, 알츠하이머병, 파킨슨병, 프리드라이히 운동실조증, 헌팅턴병, 근위축성 측색 경화증, 중증 근무력증, 다초점 운동 신경병증, 원발성 측색 경화증, 척수근 위축증, 케네디병 및 척수소뇌 실조증을 포함한다.
이와 유사하게, 죽상동맥경화증, 심부전, 골관절염, 비알콜성 지방간염, 과민성 대장 증후군, 크론병, 당뇨 합병증(신장병증, 신경병증, 동맥병증, 망막병증), 천식, 낭포성 섬유증, 만성 폐쇄성 기도 질환, 간질, 녹내장, 노인 황반 변성, 정신질환(불안, 우울증, 정신병), 만성 피로 증후군, 골부착부병증 / 건병증, 조숙증 / 태내 감염, 비만 / 대사 증후군, 피부과 질환(보통여드름, 주사성좌창, 일광성 각하증), 상처 치유 이상(켈로이드 반흔), 비뇨생식계 질환(전립선증 / 전립선염, 과민성 방광 증후군) 및 암 발생과 같은 질환들도 모두 본 발명의 방법 또는 용도에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 이용하여 치료될 수 있다.
본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편은 숙주 세포에서 면역글로불린 경쇄 및 중쇄 유전자의 재조합 발현에 의해 제조될 수 있다. 항체를 재조합적으로 발현시키기 위해, 숙주 세포를 항체의 면역글로불린 경쇄 및 중쇄를 코딩하는 DNA 단편을 운반하는 하나 이상의 재조합 발현 벡터로 형질감염시켜, 상기 경쇄 및 중쇄가 상기 숙주 세포에서 발현되고, 바람직하게는 상기 숙주 세포가 배양되는 배지 중으로 분비되어 이 배지로부터 항체를 회수할 수 있도록 한다. 표준 재조합 DNA 방법을 사용하여 항체 중쇄 및 경쇄 유전자를 얻고, 이러한 유전자들을 재조합 발현 벡터에 포함시켜서, 이들 벡터를 숙주 세포로 도입할 수 있는데, 이에 대해서는 [Sambrook, Fritsch and Maniatis(eds), Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N.Y.,(1989)], [Ausubel, F. M. et al.(eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates,(1989)] 및 US 4,816,397호와 같은 문헌에 기재되어 있다.
본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 발현시키기 위해, 당업계에 공지된 재조합 DNA 기법에 의해 얻어진 경쇄 및 중쇄를 코딩하는 DNA는 유전자가 전사 및 해독 조절 서열에 작동가능하게 연결되도록 발현 벡터에 삽입된다. 본 문맥에서, "작동가능하게 연결된"이라는 용어는 백터 내의 전사 및 해독 조절 서열이 본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자의 전사 및 해독을 조절하는 이들의 의도된 기능을 수행하도록 항체 유전자가 벡터에 결찰됨을 의미한다. 발현 벡터 및 발현 조절 서열은 사용되는 발현 숙주 세포와 화합가능하도록 선택된다. 상기 경쇄 유전자 및 중쇄 유전자는 개별 벡터에 삽입될 수 있거나, 또는 보다 일반적으로, 두 유전자 모두 동일한 발현 벡터에 삽입된다. 항체 유전자는 표준 방법(예, 유전자 분획 및 벡터 상의 상보성 제한 부위의 결찰, 또는 제한 부위가 없는 경우에는 평활 말단 결찰)에 의해 발현 벡터에 삽입된다. 재조합 발현 벡터는 숙주 세포로부터 항체 사슬의 분비를 촉진하는 신호 펩타이드를 코딩할 수 있다. 항체 사슬 유전자는, 신호 펩타이드가 항체 사슬 유전자의 아미노 말단에 인-프레임(in-frame)으로 연결되도록 벡터에 클로닝될 수 있다. 상기 신호 펩타이드는 면역글로불린 신호 펩타이드 또는 이종성 신호 펩타이드(즉, 비면역글로불린성 단백질의 신호 펩타이드)일 수 있다.
본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편의 항체 사슬 유전자 이외에도, 본 발명의 재조합 발현 벡터는 숙주 세포 중의 항체 사슬 유전자의 발현을 조절하는 조절 서열을 운반한다. "조절 서열"이라는 용어는 항체 사슬 유전자의 전사 또는 해독을 조절하는 프로모터, 인핸서 및 기타 발현 조절 요소(예컨대, 폴리아데닐화 신호)를 포함한다. 이러한 조절 서열은, 예를 들어 문헌[Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif.(1990)]에 기재되어 있다. 조절 서열의 선택을 비롯한 발현 벡터의 설계는 형질전환될 숙주 세포의 선택, 원하는 단백질의 발현 수준 등과 같은 요인에 따라 달라질 수 있음은 당업계의 숙련자에게는 자명할 것이다. 포유동물 숙주 세포의 발현을 위한 바람직한 조절 서열은 포유동물 세포에서 높은 수준의 단백질 발현을 지시하는 바이러스 인자, 예컨대 사이토메갈로바이러스(CMV)에서 유도된 프로모터 및/또는 인핸서(예컨대, CMV 프로모터/인핸서), 원숭이 바이러스 40(SV40)에서 유도된 프로모터 및/또는 인핸서(예컨대, SV40 프로모터/인핸서), 아데노바이러스에서 유도된 프로모터 및/또는 인핸서 [예컨대, 아데노바이러스의 주요 후기 프로모터(AdMLP)] 및 폴리요마(polyoma)에서 유도된 프로모터 및/또는 인핸서를 포함한다.
항체 사슬 유전자 및 조절 서열 이외에도, 재조합 발현 벡터는 숙주 세포에서 벡터의 복제를 조절하는 서열(예컨대, 복제 기원) 및 선택성 마커 유전자와 같은 추가의 서열들을 운반할 수 있다. 상기 선택성 마커 유전자는 벡터가 도입되는 숙주 세포의 선택을 용이하게 할 수 있다(예를 들어, 미국특허 제5,179,017호를 참고한다).
경쇄 및 중쇄의 발현을 위해, 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 발현 벡터(들)을 표준 기법에 의해 숙주 세포로 형질감염시킨다. "형질감염"이라는 용어의 다양한 형태는 원핵 또는 진핵 숙주 세포로 외인성 DNA를 도입하기 위해 흔히 사용되는 광범위하게 다양한 기법들, 예컨대 전기천공법, 칼슘-포스페이트 침전법, DEAE-덱스트란 형질감염 등을 망라하려는 것이다. 본 발명의 항체를 원핵 또는 진핵 숙주 세포에서 발현시키는 것은 이론적으로는 가능하지만, 진핵 세포, 가장 바람직하게는 포유동물 숙주 세포에서 항체를 발현시키는 것이 가장 바람직한데, 그 이유는 이러한 진핵 세포, 특히 포유동물 세포가 적절히 폴딩되어 면역학적으로 활성인 항체를 어셈블링하여 분비하는 데 있어서 원핵 세포보다 가능성이 더 크기 때문이다.
본 발명의 방법에 따라 사용되는 본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 발현시키기 위한 바람직한 포유동물 숙주 세포로는 중국 햄스터 난소 세포(CHO 세포), NSO 골수종 세포, COS 세포 및 SP2 세포를 포함한다. 항체 유전자를 코딩하는 재조합 발현 벡터를 포유동물 숙주 세포에 도입하는 경우, 숙주 세포에서 항체의 발현을 허용하거나, 보다 바람직하게는 항체를 숙주 세포가 성장하는 배양 배지로 분비되도록 하기에 충분한 시간 동안 숙주 세포를 배양하여 항체를 제조한다. 항체는 표준 단백질 정제 방법을 이용하여 배양 배지로부터 회수될 수 있다.
본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편의 재조합 발현을 위한 바람직한 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄를 모두 코딩하는 재조합 발현 벡터를 인산칼슘 매개형 형질감염에 의해 dhfr-CHO 세포에 도입한다. 상기 재조합 발현 벡터 내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자들은 각각 해당 유전자들의 고수준의 전사를 구동시키기 위해 CMV 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 인자에 작동가능하게 연결된다. 상기 재조합 발현 벡터는 DHFR 유전자를 운반하기도 하는데, 이는 메토트렉세이트 선택/증폭을 이용하여 벡터로 형질감염된 CHO 세포의 선택을 가능하게 한다. 상기 선택된 형질전환체 숙주 세포를 배양하여 항체 중쇄 및 경쇄의 발현을 가능하도록 하고, 상기 배양 배지로부터 온전한 항체를 회수한다. 표준 분자 생물학 기법을 이용하여 재조합 발현 벡터를 제조하고, 숙주 세포를 형질감염시키며, 형질전환체를 선택하고, 숙주 세포를 배양하여 배양 배지로부터 항체를 회수한다.
본 발명의 실시양태에 따른 방법을 위해 인간 대상체에게 투여하기에 적절한 바람직한 조성물은 본 발명에 따른 CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편 및 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정화제를 포함한다. 본원에서 사용된 "약학적으로 허용가능한 담체"는 생리학적으로 화합가능하고 본원에 기재된 방법을 위해 대상체에 투여하기 적절한 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항균제 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 허용가능한 담체, 부형제, 또는 안정화제는 사용되는 용량 및 농도에서 수용자에게 무독성이며, 포스페이트, 시트레이트, 및 기타 유기산과 같은 완충제; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 방부제(예컨대, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬-파라벤, 예컨대 메틸- 또는 프로필-파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 이하의 아미노산 잔기)의 펩타이드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라진, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 비롯한 단당류, 이당류 및 기타 탄수화물; 킬레이트제, 예컨대 EDTA; 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨과 같은 당; 나트륨과 같은 염 형성 반대이온; 금속 착물(예컨대, Zn-단백질 착물); 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대 TWEEN, PLURONICS 또는 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
치료 조성물은 일반적으로 제조 및 저장 조건 하에 멸균 상태이면서 안전성이 있어야 한다. 이러한 조성물은 용액 또는 동결건조 형태로 제제화될 수 있다.
본 명세서의 문맥에서 "포함하는(comprising)"은 비롯한(including)이라는 의미이다.
기술적으로 적절하다면 본 발명의 실시양태는 조합될 수 있다.
본 발명을 이제 하기 실시예를 참조하여 설명할 것이지만, 이러한 실시예들은 단지 예시하는 것일 뿐이며 어떠한 식으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 해석해서는 안된다.
실시예
실시예　1
결합 친화도의 측정
비아코어(BIAcore) 3000 장비를 사용하여 생체물질 상호작용 분석(Biomolecular Interaction Analysis, BIA)을 수행하였다. 인간 IgG에 특이적인 어피니퓨어(Affinipure) 염소 F(ab')2 단편, F(ab')2 단편을 아민 커플링 화학을 통해 CM5 센서 칩 상에 대략 4,000 반응 단위(RU: response unit)의 포획 수준으로 고정시켰다. HBS-EP 완충액(10 mM의 HEPES(pH 7.4), 0.15 M의 NaCl, 3 mM의 EDTA, 0.005%(v/v)), 계면활성제 P20)을 전기영동용 완충액으로서 사용하였는데, 그의 유속은 10 ㎕/분이었다. 고정화된 항인간 IgG-F(ab')2에 의한 포획을 위해 10 ㎍/mL의 시험 CD154 항체 또는 Fab의 10 ㎕의 주사액을 사용하였다. 인간 CD154를 다양한 농도(1　nM 이하)로 포획된 CD154 항체 또는 Fab에 대하여 3 ㎕/분의 유속으로 적정하였다. 40 mM의 HCl 주사액 10 ㎕를 2회에 걸쳐 주입한 후, 5 mM의 NaOH 주사액 5 ㎕를 10 ㎕/분의 유속으로 주입하여 표면을 재생시켰다.
실시예　2
연구 SL0013: 2부의 임상 연구 중, 제1부에서는 각각 3명의 건강한 남성 지원자로 구성된 5개의 그룹에서 0.004　mg/kg, 0.02　mg/kg, 0.1　mg/kg, 0.5　mg/kg 및 1.7　mg/kg로 증가하는 CDP7657의 단회 정맥 투여 용량에서, 이후 3명의 건강한 남성 지원자와 3명의 건강한 여성 지원자로 구성된 2개의 그룹을 더 추가하여 0.5　mg/kg의 용량에서 안전성, 내성 및 약동학적 프로파일에 대해 평가하였다. 허용가능한 프로파일을 확립한 후, 제2부의 연구에서는 (전신 홍반성 루푸스; SLE로 확정 진단을 받은) 3명의 환자 지원자들로 구성된 4개의 그룹에서 5　mg/kg, 15　mg/kg, 30　mg/kg 및 60　mg/kg의 단회 정맥 투여 용량에 대하여 평가하였다. 안전성, 내성 및 약동학적 프로파일에 대한 추가의 평가 이외에, 다양한 질환 마커를 사용하여 약물역학적 효과에 대해서도 연구하였다.
이러한 연구를 수행함에 있어서, 항-CD154 항체 / 항체 단편 및 이의 PEG 성분 모두에 대한 기본적인 특성들을 확립하였다.
실시예　3
연구 SL0014: 본 임상 연구에서는, SLE로 확정 진단을 받은 환자들을 10주의 기간에 걸쳐 이중맹검법 형식으로 무작위 추출하여 CDP7657의 6회 정맥 용량(n=16) 또는 위약(n=8)을 투여받도록 하였다. (활성 약물을 투여받는 사람들에게) 시험하는 투여 용법은 단회 부하 용량 30　mg/kg, 이후 매 2주 마다 유지 용량 15 mg/kg의 총 6번의 용량의 CDP7657을 포함하였다. 위약에 대한 CDP7657의 안전성, 내성 및 약동학적 프로파일에 대한 평가 이외에, 본 연구는 치료를 진행하는 동안, 그리고 치료 후 18주 동안 면역원성(항-CD154 및 PEG 성분 모두), 다양한 질환 마커에 대한 효과 및 임상 질환 파라미터에 대한 효과에 대해서도 연구하였다. 이러한 방법으로 질환 완화 효과를 제공하는 본 투여 용법의 안전성, 내성 및 역량을 확립하였다.
SEQUENCE LISTING <110> UCB Biopharma, SPRL <120> Treatment of autoimmune disorders with CD154 antibodies <130> PF0005-WO-PCT <160> 10 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LC CDR1 <400> 1 Arg Ala Ser Glu Asp Leu Tyr Tyr Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LC CDR2 <400> 2 Asp Thr Tyr Arg Leu Ala Asp 1 5 <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LC CDR3 <400> 3 Gln Gln Tyr Tyr Lys Phe Pro Phe Thr 1 5 <210> 4 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HC CDR1 <400> 4 Gly Phe Ser Ser Thr Asn Tyr His Val His 1 5 10 <210> 5 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HC CDR2 <400> 5 Val Ile Trp Gly Asp Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Ser Val Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 6 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HC CDR3 <400> 6 Gln Leu Thr His Tyr Tyr Val Leu Ala Ala 1 5 10 <210> 7 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VLC <400> 7 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asp Leu Tyr Tyr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Arg Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Thr Tyr Arg Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Lys Phe Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 8 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VHC <400> 8 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ser Ser Thr Asn Tyr 20 25 30 His Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Val Ile Trp Gly Asp Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Ser Val Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gln Leu Thr His Tyr Tyr Val Leu Ala Ala Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser 115 <210> 9 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LC <400> 9 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asp Leu Tyr Tyr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Arg Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Thr Tyr Arg Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Lys Phe Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 10 <211> 229 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HC Fab' <400> 10 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ser Ser Thr Asn Tyr 20 25 30 His Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Val Ile Trp Gly Asp Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Ser Val Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gln Leu Thr His Tyr Tyr Val Leu Ala Ala Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Ala Ala 225

Claims (17)

  1. 포유동물 대상체에서 자가면역 질환, 염증성 질환, 신경퇴행성 질환 또는 신경근 질환을 치료하는 방법에 사용하기 위한, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 포함하는 약학 조성물로서, 상기 치료 방법이
    (a) 30 mg/kg의 초기 부하 용량의, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을, 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계; 및
    (b) 상기 초기 부하 용량 투여 2주 후, 상기 초기 부하 용량의 절반의 추가 용량 또는 용량들의, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을, 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 격주에 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함하고,
    CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편이 서열번호 9로 나타낸 경쇄 서열 및 서열번호 10으로 나타낸 중쇄 서열을 갖는 1가 Fab'이며,
    CD154에 특이적으로 결합하는 항체 단편이
    (a) 변형된 힌지 영역 내의 단일 티올기에 공유결합된 말레이미드기를 가지고; 상기 말레이미드기에 리신 잔기가 공유결합되며;
    (b) 상기 리신 잔기 상의 각각의 아민기에 분자량이 20 KDa인 메톡시폴리(에틸렌글리콜) 중합체가 부착되는 것인 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서, CD154에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편이 적어도 12주 동안 이를 필요로 하는 환자에게 투여되는 것인 약학 조성물.
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  12. 제1항에 있어서, 상기 질환은 전신 홍반성 루푸스(SLE), 홍반성 신장염, 류머티스 관절염, 혈청음성 척추관절병증, 건선, 건선성 관절염, 피부경화증, 쇼그렌 증후군, 다발성 경화증, 제I형 당뇨병, 자가면역 포도막염 및 신장 증후군 또는 혈관염인 약학 조성물.
  13. 제1항에 있어서, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 약학 조성물로서, 치료받은 대상체는 SLEDAI, BILAG 및 종합 의사 평가(Global Physician assessment)로부터 선택된 지수 중 하나 이상의 기준치로부터의 개선을 달성하는 것인 약학 조성물.
  14. 제1항에 있어서, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 약학 조성물로서, 치료받은 대상체는 SLEDAI 반응 지수 4(SRI-4)를 달성하는 것인 약학 조성물.
  15. 제1항에 있어서, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 약학 조성물로서, 치료받은 대상체는 SRI-50 지수의 기준치로부터 50% 개선을 달성하는 것인 약학 조성물.
  16. 제1항에 있어서, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 약학 조성물로서, 치료받은 대상체는 보체 C3 및 C4 농도의 기준치 또는 정규치로부터 20%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 90%의 증가를 달성하거나, 또는 혈청 중의 항이중가닥 DNA 역가의 20%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 90%의 감소를 달성하는 것인 약학 조성물.
  17. 제1항에 있어서, 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법에 사용하기 위한 약학 조성물로서, 대상체는 항이중가닥 DNA 항체에 대해 혈청양성에서 혈청음성으로 복귀하는 것인 약학 조성물.
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3122934A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Fusion protein comprising a fragment of cd40 and method of producing same
SI3307322T1 (sl) 2015-09-04 2021-08-31 Primatope Therapeutics Inc. Humanizirana protitelesa proti CD40 in njihove uporabe
EP3423835B1 (en) * 2016-02-29 2023-10-25 Maintect GmbH Predictive markers useful in the treatment of wet age-related macular degeneration
AU2019347730A1 (en) * 2018-09-24 2021-03-25 Janssen Biotech, Inc. Method of providing safe administration of an anti-CD154 antibody
CN114895041A (zh) * 2021-07-01 2022-08-12 浙江大学 一种检测抗蛋白酶体亚基α1-IgG抗体的试剂盒
WO2023099607A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 UCB Biopharma SRL Formulations comprising fab-peg

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008118356A2 (en) * 2007-03-22 2008-10-02 Biogen Idec Ma Inc. Binding proteins, including antibodies, antibody derivatives and antibody fragments, that specifically bind cd154 and uses thereof

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
GB9625640D0 (en) 1996-12-10 1997-01-29 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
AU8867501A (en) * 2000-09-01 2002-03-13 Biogen Inc Co-crystal structure of monoclonal antibody 5c8 and cd154, and use thereof in drug design
GB0303337D0 (en) 2003-02-13 2003-03-19 Celltech R&D Ltd Biological products
US7563443B2 (en) 2004-09-17 2009-07-21 Domantis Limited Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof
JP2012511014A (ja) * 2008-12-05 2012-05-17 エイエルエス・セラピー・デベロップメント・インスティテュート 神経変成疾患を治療する方法
AR083847A1 (es) * 2010-11-15 2013-03-27 Novartis Ag Variantes de fc (fragmento constante) silenciosas de los anticuerpos anti-cd40
AR086074A1 (es) 2011-04-26 2013-11-13 Genentech Inc Composiciones y metodo para tratar enfermedades autoinmunes

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008118356A2 (en) * 2007-03-22 2008-10-02 Biogen Idec Ma Inc. Binding proteins, including antibodies, antibody derivatives and antibody fragments, that specifically bind cd154 and uses thereof

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