KR102537991B1 - 돼지 체중 증가용 조성물 및 이의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 돼지 체중 증가용 조성물 및 이의 용도에 관한 것으로, 생물 독성을 나타내지 않고, 이유자돈의 일당증체 효과가 우수하며, 축사 내 악취 저감 효과가 우수하므로, 양돈 과정에서 유용하게 활용될 수 있다.

Description

돼지 체중 증가용 조성물 및 이의 용도{Compositon for Increasing Weight of Pig and Use Thereof}

본 발명은 돼지 체중 증가용 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.

돼지는 수의학 분야에서 중동물에 해당하며 소, 닭 등과 같은 가축과 더불어 축산 시장에서 많이 다뤄지는 동물이다. 2018년 축산 통계에 따르면 돼지는 전체 축산업의 40%를 차지하며 생산 및 소비량은 약 200만 톤 이상인 것으로 조사되었다. 하지만, 농림축산검역본부 주관 2017년 국가 항생제 사용 및 내성 모니터링에 따르면 축산업 전체 항생제 사용량 중 돼지가 50% 이상을 차지하므로 돼지 사육에서 항생제 사용량이 상대적으로 높은 것으로 나타나, 유제품 내 항생제 잔류물질 검출, 항생제 주사 조직 내 고름 발생에 따른 육질 저하 등 항생제 남용에 따른 문제들이 발생하고 있는 것으로 보고되었다.

따라서, 축산업에서 항생제를 대체할 수 있는 제제에 대한 연구가 지속적으로 증가하고 있으며, 특히 미생물 제제에 대한 관심이 높아지고 있다. 현재 국내에서 축산용 미생물 제제로 활용 가능한 미생물은 농촌진흥청에서 고시하는 사료 및 비료로 활용 가능한 미생물 목록에 의거하고 있다. 활용 가능한 미생물은 약 30종에 해당하는데, 미국의 경우 AAFCO에서 규정하는 약 50종의 미생물을 활용하여 국내보다 활용 가능한 미생물 종류가 더 다양하다. 사료 시장에서는 농촌진흥청에서 고시하는 사료 및 비료로 활용 가능한 미생물 목록에 포함된 미생물들을 주성분으로 한 미생물 제제가 많이 시판 되고 있는 것으로 알려져 있다. 다만, 이와 같은 미생물 제제에 대한 안전성이 담보되지 않을 뿐만 아니라, 동일 제품 사이에서도 미생물의 생육의 차이에 따른 활성의 차이가 나타나, 축산업에 효과적으로 적용되지 못하고 있는 실정이다.

이에, 본 발명자들은 안전성과 효능이 검증된 양돈 증체용 조성물을 개발하기 위한 연구를 수행하여 본 발명을 완성하였다.

대한민국 특허공개 제10-2007-0090145호

본 발명의 하나의 목적은 Bacillus subtilis KNU-11 균주의 배양물, Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주의 배양물, Lactobacillus casei KNU-12 균주의 배양물, 및 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 배양물을 포함하는 돼지 체중 증가용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 사료첨가제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 돼지에 투여하는 단계를 포함하는 돼지 체중 증가 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 일 양상은 Bacillus subtilis KNU-11 균주의 배양물, Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주의 배양물, Lactobacillus casei KNU-12 균주의 배양물, 및 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 배양물을 포함하는 돼지 체중 증가용 조성물을 제공한다.

본 발명의 돼지 체중 증가용 조성물은 생물 독성을 나타내지 않고, 장내 미생물 균종을 개선하여 이유자돈의 우수한 일당증체 효과를 나타내며, 축사 내 암모니아 가스를 감소시켜 우수한 악취 저감 효과를 나타낼 수 있으므로, 양돈 과정에서 유용하게 활용될 수 있다.

상기 Bacillus subtilis KNU-11 균주는 2017년3월30일자로 한국생명공학연구원에 KCTC13236BP로 기탁되었고, Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주는 2017년3월30일자로 한국생명공학연구원에 KCTC13233BP로 기탁되었고, Lactobacillus casei KNU-12 균주는 2020년9월22일자로 한국생명공학연구원에 KCTC14318BP로 기탁되었으며, Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주는 2017년3월30일자로 한국생명공학연구원에 KCTC13235BP로 기탁되었다.

본 발명의 조성물은, 가축의 급이에 적합하도록 통상적으로 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 담체, 부형체 및 희석제는 예를 들면, 락토즈, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케니트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 톨리돈, 물, 꿀, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유일 수 있다. 제제화할 경우 보통 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 고형제제로 제조될 경우에는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스 또는 락토오오스, 젤라틴 등이 포함될 수 있다. 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜렛 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린 등을 더 함유할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 조성물은 Bacillus subtilis KNU-11 균주의 배양물, Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주의 배양물, Lactobacillus casei KNU-12 균주의 배양물, 및 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 배양물을 각각 1 : 1 : 1 : 1의 부피비로 포함할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 Bacillus subtilis KNU-11 균주의 배양 배지는, 배양 배지 중량 100을 기준으로, 글루코오스, 효모 추출물, 염화나트륨 및 인산암모늄을 각각 0.5 : 1 : 0.4 : 0.1의 중량비로 포함할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주, 또는 Lactobacillus casei KNU-12 균주의 배양 배지는, 배양 배지 중량 100을 기준으로, 글루코오스, 효모 추출물, 이인산칼륨, 아세트산나트륨, 황산마그네슘, 구연산암모늄 및 L-글루타메이트를 각각 0.8 : 0.6 : 0.1 : 0.06 : 0.04 : 0.2 : 0.2의 중량비로 포함할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 배양 배지는, 배양 배지 중량 100을 기준으로, 글루코오스, 효모 추출물 및 인산암모늄을 1.5 : 0.4 : 0.1의 중량비로 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함되는 각 균주의 배양물의 제조를 위하여, 각 균주별로 전술한 조성의 배양 배지가 사용될 수 있다. 이와 같은 조성을 갖는 배지는 각 균주의 배양에 통상적으로 사용되는 배지 대비 비용효율적이며, 동속이종 균주의 생장 대비 본 발명의 조성물에 포함되는 배양물의 배양에 사용되는 균주의 생장이 우수하여, 효율적인 배양액의 제조가 가능하다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 조성물은 축사 내 암모니아 가스를 감소시킬 수 있다.

본 발명의 조성물이 돼지에 급이될 경우, 돼지 분변 등으로부터 발생하는 암모니아 가스가 감소하므로, 돼지 축사 내 악취의 저감에 효과적으로 활용될 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 조성물은 돼지 장내 Lactobacillus 속 균주를 증가시킬 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 조성물은 돼지 장내 Clostridium 속 균주를 감소시킬 수 있다.

본 발명의 조성물은 돼지 장내 미생물 균총을 개선하여 효과적으로 돼지의 체중 증가 효과를 나타낼 수 있다.

본 발명의 조성물은 돼지 장내 미생물 중, 장내 유익균으로 알려져 있는 Lactobacillus 속 미생물을 증가시켜 돼지의 체중 증가 효과를 나타낼 수 있다, 또한, 가축에서 신경 독성을 유발하는 Clostridium 속 미생물이 포함된 Unclassified Clostridiaceae를 감소시켜 돼지의 체중 증가 효과를 나타낼 수 있다.

본 발명의 다른 양상은 상기 조성물을 포함하는 사료첨가제를 제공한다.

본 발명에서 사용되는 용어, "사료첨가제"는 돼지의 생산성 향상, 돼지의 건강을 증진 및/또는 유지시키거나 체중 증가를 위하여 사료에 첨가되는 물질을 의미한다. 본 발명에서는 Bacillus subtilis KNU-11 균주의 배양물, Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주의 배양물, Lactobacillus casei KNU-12 균주의 배양물, 및 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 배양물을 유효성분으로 포함할 수 있다.

사료에 포함되는 상기 사료첨가제의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 0.01 내지 20.0%(w/w)일 수 있고, 바람직하게는 0.05 내지 10.0%(w/w)일 수 있다.

본 발명의 사료첨가제는 부형제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 부형제는 유효성분에 적당한 굳기나 형상을 주기 위해서, 또는 주제(主劑)의 양이 적은 경우에 일정 용량, 중량을 주어 취급하기 쉬운 크기로 할 목적으로 첨가되는 성분을 의미한다. 상기 부형제는 사료첨가제의 제조에 있어서 통상적으로 사용되는 것을 포함할 수 있고, 이에 한정되지는 않으나, 밀기울, 옥수수 분말, 곡류 전분, 실리카분말, 규조토 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있으며, 사료 등 기준 및 규격(농림축산식품부 고시 제2014-106호)에서 인정하고 있는 부형제 등을 포함할 수 있다.

본 발명의 사료첨가제는 당업계의 통상적인 제형으로 제조될 수 있으며, 분말 또는 소정의 형태를 가진 펠릿 형상으로 구현될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 상기 사료첨가제는 체내 흡수를 증진시키기 위해 분말화되거나, 소장에서의 활성을 강화하기 위해 지방코팅 제형으로 제조될 수 있다.

상기 부형제는 전체 사료 첨가제 100 중량부에 대해 50 내지 99 중량부로 포함될 수 있다.

본 발명의 또 다른 양상은 상기 조성물을 돼지에 투여하는 단계를 포함하는 돼지 체중 증가 방법을 제공한다.

상기 조성물은 단독 또는 사료와 함께 돼지에 투여됨으로써, 돼지의 체중의 증가 효과를 나타낼 수 있다. 상기 투여는 상기 조성물을 돼지에 급이하여 이루어지는 것일 수 있다.

상기 조성물은 특히, 이유자돈에 투여되어, 이유자돈의 체중을 효과적으로 증가시킬 수 있다.

돼지 체중 증가용 조성물 및 이의 용도에 따르면, 생물 독성을 나타내지 않고, 이유자돈의 일당증체 효과가 우수하며, 축사 내 악취 저감 효과가 우수하므로, 양돈 과정에서 유용하게 활용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른 4종 미생물 복합제제에 활용되는 (A) Bacillus subtilis KNU-11, (B) Lactobacillus acidophilus KNU-02, (C) Lactobacillus casei KNU-12, 및 (D) Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 미생물 생장곡선을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 구체예에 따른 4종 미생물 복합제제의 미생물 군집 분석 결과를 나타낸 그림이다.
도 3은 본 발명의 일 구체예에 따른 4종 미생물 복합제제의 (A) 제브라피쉬 및 (B) 줄지렁이에 대한 생물 독성 시험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 구체예에 따른 4종 미생물 복합제제의 이유자돈 일당증체 효과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 구체예에 따른 4종 미생물 복합제제의 이유자돈 축사 내 암모니아 가스 저감 효과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 일 구체예에 따른 4종 미생물 복합제제의 급이에 따른 이유자돈의 장내 미생물 군집 변화 및 기능성 유전자 발현을 나타낸 그림이다.

이하 본 발명을 하나 이상의 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 양돈 증체용 4종 미생물의 대량배양을 위한 개량 배지 및 이를 활용한 미생물 생육 비교

양돈 증체 목적으로 분리된 Bacillus subtilis KNU-11, Lactobacillus acidophilus KNU-02, Lactobacillus casei KNU-12, 및 Saccharomyces cerevisiae KNU-06의 대량 배양을 위해 개량된 Bacillus 용 배지, Lactobacillus 용 배지, 및 Saccharomyces 용 배지의 조성을 확립하였으며 그 조성은 표 1 내지 표 3과 같다.

Bacillus 용 배지(pH 5.3)
재료	중량비(%)
글루코오스(덱스트로오스)	0.5
효모 추출물	1
염화나트륨	0.4
인산암모늄	0.1

Lactobacillus 용 배지(pH 5.85)
재료	중량비(%)
글루코오스(덱스트로오스)	0.8
효모 추출물	0.6
이인산칼륨	0.1
아세트산나트륨	0.06
황산마그네슘.7H2O	0.04
구연산암모늄	0.2
L-글루타메이트(MSG)	0.2

Saccharomyces 용 배지(pH 5.35)
재료	중량비(%)
글루코오스(덱스트로오스)	1.5
효모 추출물	0.4
인산암모늄	0.1

또한, 개량 배지의 활용 가능성을 확인하기 위하여, 기존에 사용되는 최적 배지 중 Bacillus 배양을 위한 nutrient 배지, Lactobacillus 배양을 위한 MRS 배지, 및 Saccharomyces 배양을 위한 YPD 배지와의 미생물 생육을 비교하였다. 미생물 생육 확인은 분광광도계(spectrophotometer)를 활용하여 O.D._600nm value를 시간 단위별로 측정함으로써 미생물 생육 곡선으로 최적배지와 개량배지에서의 미생물 생육을 비교하였다.

그 결과, 개량 배지에서의 미생물 생육이 최적 배지에서의 미생물 생육과 유사한 흡광도 값을 보이는 것으로 확인되어(도 1), 확립한 배지를 활용하여 양돈 증체용 4종 미생물의 대량 배양에 활용할 수 있음을 확인하였다.

실시예 2. 4종 미생물 복합제제의 제작 및 안전성 검증

2-1. 4종 미생물 복합제제의 제작

4종 미생물을 활용하여 미생물 복합제제 제작을 위해 각각의 미생물을 대상으로 대량 배양을 실시하였다. 대량 배양에는 300 L scale fermenter를 활용하였으며 B. subtilis KNU-11와 S. cerevisiae KNU-06의 경우 100rpm, 30℃의 조건에서, L. acidophilus KNU-02와 L. casei KNU-12의 경우 100rpm 37℃의 조건에서 3일간 배양되었다. 배양된 상기 4종의 균주들의 미생물 배양액을 1:1:1:1의 부피비로 혼합하여 양돈 증체용 4종 미생물 복합제제를 제작하였다.

이후, 4종 미생물 복합제제를 활용한 실증 시험을 시행하기 앞서, 미생물 복합제제의 안전성 검증을 두 단계로 진행하였다.

2-2. 4종 미생물 복합제제의 안전성 검증: 미생물 군집 분석

4종 미생물 복합제제의 품질관리(quality control)를 위하여, 4종 미생물 복합제제의 미생물 군집 분석을 수행하였다.

구체적으로, 실시예 2-1에서 제조한 양돈 증체용 4종 미생물 복합제제를 13,000rpm, 25℃ 조건에서 1분간 원심분리하고, 수득된 총 세포(total cell)로부터 Qiagen사 PowerFecal DNA extraction kit을 활용하여 총 DNA를 추출하였다. 이후 미생물 군집 분석을 위하여, 서열 라이브러리(sequencing library)를 제작하였다.

서열 라이브러리는 Ion torrent PGM platform에 활용될 수 있도록 제작되었다. 세균 군집 분석을 위하여 16S rRNA 영역 내 V4-V5 영역이 사용되었으며, 진균 군집 분석을 위하여 ITS2 영역이 사용되었다. 상기 영역의 서열과 Ion torrent PGM platform용 sequencing barcode와 adaptor 및 포함된 primer set을 사용하여 세균 군집 분석 및 진균 군집 분석에 사용되기 위한 서열 라이브러리를 제작하고, 서열 Ion torrent PGM platform을 사용하여 시퀀싱을 수행하였다.

미생물 군집 분석은 리눅스 운영체체 기반의 QIIME ver 1.9 program 및 시퀀싱 데이터를 사용하여 수행되었다. Greengene 13.8 version의 데이터베이스를 사용하여 세균 군집 분석을 수행하였으며, UNITE version7 데이터베이스를 사용하여 진균 군집 분석을 수행하였다.

그 결과 세균 군집의 경우 Bacillus속 미생물이 50%, Lactobacillus속 미생물이 40%, 기타 10%인 것으로 확인되었고, 진균 미생물 군집의 경우 99.6%가 Saccharomyces속 미생물인 것으로 확인되어(도 2), 미생물 복합제제에 포함된 4종 균주의 품질이 우수한 것으로 확인되었다.

2-3. 4종 미생물 복합제제의 안전성 검증: 생물 독성 시험

4종 미생물 복합제제의 안전성 검증을 위하여, 양돈 증체용 4종 미생물 복합제제에 대한 생물 독성 시험을 수행하였다.

구체적으로, 생물 독성 시험은 수계 환경에 노출된 것을 가정한 수계 환경 독성 평가 및 토양 환경에 노출된 것을 가정한 토양 환경 독성 평가로 진행되었다. 생물 독성 시험의 경우 OECD 가이드라인 및 농촌진흥청 농약관리법에 고시된 생물 독성 시험을 참고하여 진행되었다. 수계 환경 독성 평가에는 제프라피쉬(Danio rerio)를, 토양 환경 독성 평가에서는 줄지렁이(Eisenia fetida)를 사용하였으며, 수계 환경 독성 평가는 4일간, 토양 환경 독성 평가는 7일간 진행되었다. 수계 환경 독성 평가 및 토양 환경 독성 평가에서, 실시예 2-1에서 제조된 양돈 증체용 4종 미생물 복합제제는 원액, 500배 희석액 및 1000배 희석액으로 사용되었으며, 실험이 끝난 이후 사용된 개체 중 죽은 개체의 수를 측정하여 생존율(survival rate)을 분석하였다.

그 결과, 각각의 농도 구간에서 제브라피쉬 및 줄지렁이의 생존율이 감소하지 않는 것으로 확인되어(도 3), 4종 미생물 복합제제는 생물 독성을 나타나지 않는 것으로 확인되었다.

실시예 3. 4종 미생물 복합제제의 양돈 증체 효과 및 악취 저감 효과 확인

3-1. 4종 미생물 복합제제의 양돈 증체 효과 확인

실시예 2-1에서 제조된 4종 미생물 복합제제를 사용한 실증 시험을 통하여 양돈 증체 효과를 확인하였다.

구체적으로, 경상북도 군위 소재 축산농가를 대상으로 가축 관련 질병이 발병되지 않은 유자돈을 대상으로 6주 동안 실시예 2-1에서 제조된 4종 미생물 복합제제 처리군 (500배 희석 후 투여) 과 비처리군으로 나누어 실증 시험이 진행되었으며, 시험군 당 각각 100두의 이유자돈이 사용되었다. 6주 동안 처리군과 비처리군 축사에서 건강하고 활발한 3주령 이유자돈을 5마리씩 선발하여 매주 무게를 측정하고, 6주 동안의 일당증체율을 계산하였다.

그 결과, 처리군의 일당증체율은 0.351kg/day으로 확인되어, 무처리군의 0.256kg/day 대비 일당증체율이 약 100g 더 높은 것으로 확인되었다(도 4).

3-2. 4종 미생물 복합제제의 악취 저감 효과 확인

실시예 2-1에서 제조된 4종 미생물 복합제제에 의한 악취 저감 효과를 확인하기 위하여, 축사 내 암모니아 가스 농도 변화를 확인하였다.

구체적으로, 처리군 축사와 비처리군 축사에 R9600 악취 측정기 모듈(SUPMEA, China)를 설치하여, 실시예 3-1에서 양돈 증체 효과에 대한 실증 시험이 진행되는 3주 동안 암모니아 가스를 측정하였다. 매주 축사를 방문하여 모듈에 저장된 측정 기록값을 회수하였으며, R9600 모듈용 data manager program을 사용하여 측정 기록값을 상대 비교함으로써, 축사 내 암모니아 가스 농도 변화를 분석하였다.

그 결과, 암모니아 가스는 무처리군 축사에서 57.6%가 감소한 반면, 처리군 축사에서 79.4%가 감소한 것으로 나타나(도 5), 4종 미생물 복합제제의 악취 저감 효과가 우수한 것으로 확인되었다.

실시예 4. 4종 미생물 복합제제에 의한 장내 미생물 군집 변화 확인

실시예 3-1에서 확인된 4종 미생물 복합제제에 의한 이유자돈 증체 효과의 이유를 확인하기 위하여, 이유자돈에 대한 장내 미생물 군집 분석을 수행하여 장내 미생물 군집 변화를 확인하였다.

구체적으로, 실시예 3-1에서 실증 시험을 진행하는 동안 처리군 축사와 무처리군 축사로부터 돈분의 상태가 좋은 7점의 돈분 시료를 매주 채취하였으며 Qiagen사 PowerFecal DNA extraction kit을 활용하여 총 DNA를 추출하였다. 이후, 도분 시료로부터 추출된 총 DNA를 사용한 것을 제외하면, 실시예 2-2와 동일한 방법으로 미생물 군집 분석을 수행하여, 실시예 2-1에서 제조된 4종 미생물 복합제제에 의한 이유자돈 장내 미생물을 분석하였으며, 이유자돈의 장내 미생물 군집 내 기능성 유전자(functional gene)의 변화를 분석하였다.

그 결과, 무처리군 대비 처리군에서 장내 유익균으로 알려져 있는 Lactobacillus 속 미생물이 증가하고 가축에서 신경 독성을 유발하는 Clostridium 속 미생물이 포함된 Unclassified Clostridiaceae가 감소한 것으로 확인되었다. 또한, 4종 미생물 복합제제가 처리된 이유자돈의 장내 미생물 군집 내 항생제 생합성, 2차 대사산물 생합성, 탄수화물 소화 및 흡수 관련 유전자가 무처리군에 비해 더 높게 검출 되었으며, 세균 독소 및 beta-lactam계 항생제 저항 관련 유전자가 무처리군에 비해 더 낮게 검출된 것으로 확인되었다(도 6).

이제까지 본 발명에 대하여 그 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

한국생명공학연구원 KCTC13236BP 20170330 한국생명공학연구원 KCTC13233BP 20170330 한국생명공학연구원 KCTC14318BP 20200922 한국생명공학연구원 KCTC13235BP 20170330

Claims (10)

1. Bacillus subtilis KNU-11 균주(수탁번호: KCTC13236BP)의 배양물, Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주(수탁번호: KCTC13233BP)의 배양물, Lactobacillus casei KNU-12 균주(수탁번호: KCTC14318BP)의 배양물, 및 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주(수탁번호: KCTC13235BP)의 배양물을 각각 1 : 1 : 1 : 1의 부피비로 포함하는 돼지 체중 증가용 조성물로서,
   상기 조성물은 돼지에 급이됨으로서, 급이된 돼지의 분변으로 인해 발생하는 돼지 축사 내 악취를 저감시키고; 돼지 축사 내 암모니아 가스를 감소시키고; 상기 조성물이 급이된 돼지 장내 미생물 균총의 개선으로서 돼지 장내 Lactobacillus 속 균주를 증가시키며; 및 상기 조성물이 급이된 돼지 장내 미생물 균총의 개선으로서 돼지 장내 Clostridium 속 균주를 감소시키는 것이고,
   상기 Bacillus subtilis KNU-11 균주의 배양물은, 배양 배지 중량 100을 기준으로, 글루코오스, 효모 추출물, 염화나트륨 및 인산암모늄을 각각 0.5 : 1 : 0.4 : 0.1의 중량비로 포함하는 배양 배지에서 배양되어 돼지 체중 증가용 조성물에 혼합되는 것이고,
   상기 Lactobacillus acidophilus KNU-02 균주의 배양물 및 Lactobacillus casei KNU-12 균주의 배양물은, 배양 배지 중량 100을 기준으로, 글루코오스, 효모 추출물, 이인산칼륨, 아세트산나트륨, 황산마그네슘, 구연산암모늄 및 L-글루타메이트를 각각 0.8 : 0.6 : 0.1 : 0.06 : 0.04 : 0.2 : 0.2의 중량비로 포함하는 배양 배지에서 배양되어 돼지 체중 증가용 조성물에 혼합되는 것이고,
   상기 Saccharomyces cerevisiae KNU-06 균주의 배양물은, 배양 배지 중량 100을 기준으로, 글루코오스, 효모 추출물 및 인산암모늄을 1.5 : 0.4 : 0.1의 중량비로 포함하는 배양 배지에서 배양되어 돼지 체중 증가용 조성물에 혼합되는 것이고,
   상기 돼지 체중 증가용 조성물에 포함되는 상기 배양물은 상기 배양 배지의 성분을 포함하는 것인, 돼지 체중 증가용 조성물.
   
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9. 제 1 항의 조성물을 포함하는 사료첨가제.
   
10. 제 1 항의 조성물을 돼지에 투여하는 단계를 포함하는 돼지 체중 증가 방법.
    
    

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