KR102491505B1

KR102491505B1 - 동규자 추출물부터 분리된 지방산을 포함하는 탈모 방지용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102491505B1
Application number: KR1020210073409A
Authority: KR
Inventors: 김태양; 황성진; 이춘몽; 이광식; 이건국
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2021-06-07
Filing date: 2021-06-07
Publication date: 2023-01-26
Also published as: KR20220165003A

Abstract

본 발명은 동규자(Malva verticillata L.) 추출물에서 분리된 지방산을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는 동규자 추출물로부터 분리된 리놀레산, 올레산 및 팔미트산을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. 상기 탈모 방지용 화장료 조성물은 모유두세포 증식 효과, 세포의 모발 증식 신호전달(β-catenin level, VEGF, IGF-1) 효과와 β-catenin 발현 증가 효과를 가진다.

Description

동규자 추출물부터 분리된 지방산을 포함하는 탈모 방지용 화장료 조성물 {Cosmetic Composition For Preventing Hair Loss Containing Fatty acids isolated from Malva verticillata L. Seed Extract}

본 발명은 동규자(Malva verticillata L.) 추출물에서 분리된 지방산을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

일반적으로 모발의 기능은 두피를 보호하고 체온을 유지하는 등의 외부 자극으로부터 인체 보호의 역할을 한다. 인체의 모발은 약 10만~15만 개 정도이며 모낭에서 형성된다. 각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 성장기, 퇴행기, 휴지기를 거쳐서 성장하고 탈락한다. 이러한 주기는 3~6년에 걸쳐 반복되는데, 일일 평균 50~100개의 모발이 정상적으로 탈락하게 된다.

헤어 사이클은 호르몬, 스트레스, 질병, 환경오염, 흡연 등의 내·외적인 요인에 의해 변형 및 단축되며, 주기의 변화는 성장기 단계의 단축 및 초기 퇴화기 단계 진입, 휴지기 단계의 연장 등의 형태로 나타나게 된다.

탈모증은 이러한 주기 중에서 성장기 모발의 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 휴지기 모발이 많아져 탈락하는 모발의 숫자가 비정상적으로 많아지는 것을 말하며 100개 이상의 모발이 빠지는 경우에 탈모 증상을 의심할 수 있다.

임상학적으로 탈모는 흉터가 형성되는 탈모와 흉터가 형성되지 않는 탈모로 분류되며, 다양한 원인에 의해 발생되지만 유전적인 원인과 남성 호르몬인 테스토스테론이 중요한 인자로 여겨진다.

테스토스테론은 골격근증가, 남성외부생식기, 음낭 성장, 정자 형성 등에 관여하며, 테스토스테론은 환원효소에 의해 디하이드로테스토스테론으로 환원되어 탈모, 여드름, 전립성 비대증에 관여하는 것으로 알려져 있다.(Diane et al; JID 775-778, 1995. Bruchovsky, Net al; JBC 243,2112~2121, 1968).

보다 자세하게는 디하이드로테스토스테론은 모낭 주변의 단백질 합성을 저하함으로써 모낭세포의 증식을 감소시켜 탈모를 유발하는 것으로 알려져 있다.

현재까지 탈모방지 또는 육모촉진에 효과가 있다고 알려진 치료법은 미녹시딜(minoxidil) 용액의 도포나 트리코사카라이드(trichosaccharide)의 복용 등이 있다. 미녹시딜은 고혈압 치료를 위한 혈관확장제로 개발되었으나, 부작용으로 다모증이 보고되면서 발모제로 개발되었다. 미녹시딜의 발모효과에 대한 작용기전은 아직까지 명확히 밝혀지지 않았으나, 혈관확장을 통한 영양공급의 증가로 모발성장이 유도된다고 판단된다. 또한, 피나스테라이드(finasteride)는 남성호르몬 대사에 작용하는 효소인 5 알파-리덕타아제의 활성을 억제시키는 물질로서 처음에는 전립선 비대증 치료제로 개발되었으나, 부작용으로 다모증이 보고되면서 발모제로 개발되었다.

그러나, 미녹시딜과 피나스테라이드는 사용을 중단하면 효과가 사라지기 때문에 지속적으로 사용해야한다는 불편함이 있으며, 미녹시딜의 경우 끈적이는 사용감과 피부 자극이라는 부작용이 보고 되고, 피나스테라이드의 경우 정력감퇴, 발기부전 등의 성기능 장애가 보고되어 지속적인 사용에 제한이 따르는 실정이다.

대한민국 등록특허 제10-131097호는 탈모방지용 한방추출물 및 이를 포함하는 헤어용품 조성물에 대해 개시하고 있다. 대한민국 등록특허 제10-121834호는 동규자 등의 식물 추출물 또는 분획물을 함유하는 조성물, 그의 용도 및 상기 추출물의 제조방법에 대해 개시하고 있다.

본 발명의 목적은 탈모완화 및 발모 촉진을 위해 천연 식물 및 이의 추출물에 대한 다양한 피부 생리활성을 검색한 결과, 동규자(Malva verticillata L.) 추출물로부터 분리한 지방산에서 탈모완화와 관련한 모유두세포 증식 효과, 세포의 모발 증식 신호전달(β-catenin level, VEGF, IGF-1) 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

상기한 과제는, 동규자 추출물로부터 분리된 지방산인 리놀레산, 올레산 및 팔미트산을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지용 화장료 조성물에 의해 달성된다.

바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 화장료 조성물 총 중량 대비 리놀레산 0.5 내지 2.5 중량 %, 올레산 0.5 내지 1.5 중량% 및 팔미트산 0.5 내지 1.5 중량%를 함유할 수 있다.

또한 바람직하게는, 상기 리놀레산, 올레산 및 팔미트산는 2:1:1의 중량비로 혼합되어 포함될 수 있다.

또한 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 모유두세포 증식 효과, 세포의 모발 증식 신호전달(VEGF, IGF-1) 조절 효과 또는 β-카테닌(β-catenin) 발현 증가 효과를 갖는다.

본 발명의 화장료 조성물은 동규자 추출물부터 분리된 지방산을 유효성분으로 포함하하여 탈모를 방지하는 효과를 갖는다. 상기 탈모 방지용 화장료 조성물은 모유두세포 증식 효과, 세포의 모발 증식 신호전달(β-catenin level, VEGF, IGF-1) 조절 효과를 가진다.

도 1은 동규자 추출물의 메틸렌클로라이드 분획물에 분리한 리놀레산, 올레산, 팔미트산을 고속액체크로마토그라피를 이용하여 분석한 것이다.
도 2는 제조예 1의 동규자 추출물과, 제조예 3~18의 리놀레산, 올레산 및 팔미트산 각각 또는 혼합물의 모유두 세포 증식율을 나타낸 것이다.
도 3 및 도 4는 제조예 1의 동규자 추출물과, 제조예 3~18의 리놀레산, 올레산 및 팔미트산 각각 또는 혼합물의 모발 성장인자(IGF-1, VEGF) 발현 촉진 효과를 나타낸 것이다.
도 5는 제조예 1의 동규자 추출물과, 제조예 3~18의 리놀레산, 올레산 및 팔미트산 각각 또는 혼합물의 β-카테닌 발현 촉진 효과를 나타낸 것이다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.

용어 "약"이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.

본 명세서를 통해, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, "포함하다" 및 "포함하는"이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.

본 발명은 동규자 추출물부터 분리된 지방산, 특히 리놀레산, 올레산, 팔미트산을 유효 성분으로 포함하는 탈모 방지용 화장료 조성물에 대한 것이다.

본 발명에 사용된 동규자는 아욱과에 속하는 1년생 초본 식물, 아욱의 씨앗으로써, 북부온대 및 아열대 기후에 주로 자생하며, 우리나라 각지에서 자생한다. 우리나라에서는 오래 전부터 재배하여 식용 채소로써 이용되어져 왔으며, 종자인 동규자는 규자, 규채자 등의 이명으로 예로부터 이뇨, 활장, 하유, 해독 등의 효능이 알려져 있다.

본 발명의 동규자 추출물로부터 분리된 지방산은 포화되거나 불포화된 긴 지방족 사슬을 가진 카복실산이다. 지방산은 일반적으로 생물에 존재하며, 동물의 에너지원이나 세포에서 중요한 구조적 구성 성분으로 사용된다. 지방산은 사슬의 길이나 불포화 탄소 개수에 따라 분류된다. 일반적으로 알려진 포화지방산에는 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산 등이 있으며, 불포화지방산에는 미리스톨레산, 올레산, 리놀레산, 리놀렌산 등이 있다.

상기 동규자 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으나, 바람직하게는 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법, (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출한다.

본 발명에서는 바람직하게는 추출용매를 이용한 용매 추출법을 이용하였다. 본 발명에서 동규자 추출물은 다양한 추출용매, 예를 들어, 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출 용매를 사용하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올을 사용하여 얻어진 것이다.

한편, 본 발명의 동규자 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다. 또한, 본 발명의 동규자 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 및 발효 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출, 초음파를 이용한 추출법에 의한 추출, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 유기용매를 이용한 분획물, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리하거나 자연 상태나 각종 미생물을 이용한 발효산물에 의한 추출물 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 및 추출방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함된다.

상기 추출물의 분획물은 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 유기용매를 가하여 수득한 것일 수 있고, 보다 구체적으로 메틸렌클로라이드을 가하여 수득한 것일 수 있다.

본 발명의 구체예에서, 동규자 추출물로부터 얻어진 헥산 분획물, 메틸렌클로라이드 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물이 모유두세포 증식에 활성을 나타내어 우수한 탈모완화 효과를 나타냄을 확인하였으며, 메틸렌클로라이드 분획물의 탈모완화 효과가 보다 우수함을 확인하였다.

본 발명의 일 실시형태에 따르면, 상기 동규자 추출물로부터 분리된 지방산은 상기 동규자 추출물의 메틸렌클로라이드 분획물로부터 분리된 리놀레산, 올레산 및 팔미트산을 포함할 수 있다. 구체적으로 상기 동규자 추출물로부터 분리된 지방산은 리놀레산, 올레산, 팔미트산을 말하며, 상기 지방산은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.01중량% 내지 10중량%로 함유될 수 있다.

상기 리놀레산은 하기 화학식 1로 표시되는 구조를 가진다.

[화학식 1]

상기 올레산은 하기 화학식 2로 표시되는 구조를 가진다.

[화학식 2]

상기 팔미트산은 하기 화학식 3으로 표시되는 구조를 가진다.

[화학식 3]

바람직하게는, 본 발명에 따른 화장료 조성물은, 화장료 조성물 총 중량 대비 리놀레산을 0.5 중량% 내지 2.5 중량%, 올레산을 0.5 중량% 내지 2.5 중량%, 팔미트산을 0.5 중량% 내지 2.5 중량%로 함유할 수 있다. 보다 바람직하게는, 리놀레산 0.5 내지 2.5 중량 %, 올레산 0.5 내지 1.5 중량% 및 팔미트산 0.5 내지 1.5 중량%를 함유될 수 있다.

본 발명의 일 실시형태에 따르면, 상기 리놀레산, 올레산 및 팔미트산는 2:1:1의 중량비로 혼합되어 포함될 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 동규자 추출물에 분리된 리놀레산, 올레산 및 팔미트산를 포함하여, 모유두세포 증식 효과, 세포의 모발 증식 신호전달(VEGF, IGF-1) 조절 효과 또는 β-카테닌(β-catenin) 발현 증가 효과를 갖는다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 샴푸 제형 또는 계면활성제 비함유 샴푸 제형일 경우, 모발과 두피에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다.

제조예 1: 동규자 추출물 제조

동규자 10kg을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기(100mesh)로 분쇄하여 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하여 농축기를 이용하여 동규자 추출물 1.2kg을 제조하였다.

제조예 2: 동규자 추출물의 메틸렌클로라이드 분획물 및 지방산의 분리

상기 제조예1에서 얻은 동규자 추출물 0.6kg을 헥산과 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 통상적인 방법으로 순차적으로 용매분획을 실시한 후 감압농축하여 헥산 분획물 21.2g, 메틸렌클로라이드 분획물 13.2g, 에틸아세테이트 분획물 12.4g, 부탄올 분획물 8.2g을 수득하였다.

상기에서 얻은 동규자 추출물의 메틸렌클로라이드 분획물을 8,000 rpm에서 15분 동안 원심분리하여 상등액을 취하였다. 이를 분취 고속액체크로마토그라피로 정제하여 리놀레산, 올레산, 팔미트산을 분리하였다. 리놀레산, 올레산, 팔미트산의 정성은 고속액체크로마토그라피를 이용하여 도 1에서 확인하였다.

제조예 3 ~ 18: 동규자 추출물로부터 얻어진 리놀레산, 올레산, 팔미트산의 비율을 달리한 혼합물 제조

상기 제조예 2에서 얻은 리놀레산, 올레산, 팔미트산의 탈모완화 효과를 확인하기 위하여 단일 지방산과 각 지방산의 혼합 비율을 달리한 혼합물을 제조하여 사용하였다. 동규자추출물의 제조예에 따른 리놀레산, 올레산, 팔미트산의 비율(%)는 하기 표 1에 표시하였다.

구분	제조예3	제조예4	제조예5	제조예6	제조예7	제조예8	제조예9	제조예10
리놀레산 (Linoleic acid)	1.0	0	0	1.0	1.0	1.0	2.0	1.0
올레산 (Oleic acid)	0	1.0	0	1.0	1.0	2.0	1.0	2.0
팔미트산 (Palmitic acid)	0	0	1.0	1.0	2.0	1.0	1.0	2.0
구분	제조예11	제조예12	제조예13	제조예14	제조예15	제조예16	제조예17	제조예18
리놀레산 (Linoleic acid)	2.0	2.0	2.0	2.0	1.5	1.5	1.0	1.0
올레산 (Oleic acid)	1.0	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	1.5
팔미트산 (Palmitic acid)	2.0	1.0	1.5	1.0	1.0	2.0	2.0	2.0

실험예 1: 모유두 세포 증식 평가

인간 유래 모유두 세포(human follicle dermal papilla cells, HFDPC)를 1 × 10⁴ cells/ml로 96 well plate에 분주하고, 37℃, 5% CO₂ 세포 배양기에서 24 시간 안정화시켰다. 이를 1% FBS를 함유한 DMEM 배지로 교환한 후 시료를 농도별로 희석하여 처리하고 48 시간 반응시켰다. 그 다음 5 mg/ml 농도의 MTT 시약을 각 well에 20 ㎕씩 첨가하고 37℃, 5% CO₂ 세포 배양기에서 2 ~ 3 시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 각 well의 상층액을 모두 제거하고 DMSO 100 ㎕를 첨가하여 세포를 완전히 용해시킨 후 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 양성 대조군은 모발성장촉진제제인 미녹시딜(minoxidil)을 사용하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 각 시료군의 세포 증식율을 계산하여 도 2에 나타내었다.

동규자 추출물 및 제조예 3~18에 대한 모유두 세포 증식 평가 실험 결과를 도 2에 도시하였다. 도 2에 도시되는 바와 같이, 제조예 1을 포함한 모든 제조예에서 모유두세포 증식 효과를 나타내었다. 특히 리놀레산 2 : 올레산1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 9에서 모유두세포 증식율이 약 27% 증가함으로 가장 우수한 효과를 나타내었다.

실험예 2: 모발 성장인자 발현 촉진 효과

모유두세포를 1 × 10⁵ cells/ml 농도로 96 well에 분주하고 37℃, 5% CO₂ incubator에서 하루 동안 배양한 후 시료를 농도별로 처리하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 반응시켰다. 세포의 배양액을 이용하여 효소면역측정법(ELISA; enzyme-linked immunosorbent assay)을 통해 측정하였다.

세포 배양액에서 IGF-1 (Insuline-like growth factor), VEGF (Vascular endothelial growth factor)의 발현을 ELISA kit를 이용하여 분석하였고, 450 nm에서 흡광도를 찍어 각각의 생성량을 도 3과 도 4에 나타내었다. 이때 양성 대조군은 모발성장촉진제제인 미녹시딜(minoxidil)을 사용하였다.

도 3과 4에 도시되는 바와 같이 제조예 1 및 제조예 3~18에서 모발 성장인자 발현 촉진효과를 나타내었다.

특히 도 3에 도시되는 바와 같이, 리놀레산 1 : 올레산1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 6과 리놀레산 2 : 올레산1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 9에서 IGF-1 생성량이 각각 26%, 27% 증가함으로 가장 우수한 효과를 나타내었다.

또한 도 4에 도시되는 바와 같이, 리놀레산 2 : 올레산1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 9에서 VEGF 생성량이 약 24%로 가장 많이 증가함을 확인하였다.

실험예 3: Wnt/β-catenin 발현율 확인

모유두세포를 2 × 10⁵ cells/well 농도로 6 well에 분주하고 37℃, 5% CO₂ incubator에서 하루 동안 배양한 후, 시료를 농도별로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 수거하여 용해시키고 BCA assay를 이용하여 단백질을 정량하였다. 정량한 단백질은 10% SDS-PAGE gel에서 전기영동 시킨 후 PVDF 멤브레인에 전이시켰다. 1차 항체(β-catenin, santa cruz, USA)를 4℃에서 오버나이트로 shaking 처리한 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2 시간 반응시켰다. 그 후, 1 × TBST로 3 번 세척하고 ECL 반응 kit를 이용하여 밴드를 확인하였다.

각 밴드의 강도(intensity)는 β-actin의 발현을 기준으로 정량하여 β-catenin 발현율을 계산하였으며, 이때 양성 대조군은 모발성장촉진제제인 미녹시딜(minoxidil)을 사용하여 도 5에 도시하였다.

도 3에 도시되는 바와 같이, 제조예 1 및 제조예 3~18에서 β-actin의 발현을 촉진하였다. 특히 리놀레산 1 : 올레산 1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 6과 리놀레산 2 : 올레산 1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 9에서 β-actin의 발현양이 각각 51%, 49% 증가함으로 가장 우수한 효과를 나타내었다.

제형예 1 ~ 2 : 동규자 추출물을 포함하는 탈모 방지용 샴푸의 제조

본 발명에 따른 조성물의 제형예를 상기 제조예 1에서 수득한 동규자 추출물이 3 중량% 포함한 제형예 1과 상기 리놀레산 2 : 올레산 1 : 팔미트산 1로 혼합한 제조예 9를 3 중량% 포함한 제형예 2의 탈모 방지용 조성물은 하기 표의 조성으로 설명하였다. 이는 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 한다.

본 제형예 1과 2에서는 동규자 추출물을 포함하는 탈모 방지용 조성물로 아래 표 2의 함량에 따른 샴푸(shampoo)를 제조하였지만, 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 샴푸, 트리트먼트, 두피 앰플, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

성분	제형예 1 (중량%)	제형예 2 (중량%)	비교예 1 (중량%)
제조예 1	3.0	-	-
제조예 9	-	3.0	-
다이소듐이디티에이	0.03	0.03	0.03
폴리쿼터늄-10	0.1	0.1	0.1
암모늄라우릴설페이트	40.5	40.5	40.5
암모늄라우레스설페이트	15.5	15.5	15.5
코카미도프로필베타인	6.0	6.0	6.0
프로필렌글라이콜	2.0	2.0	2.0
소듐크실렌설포네이트	2.0	2.0	2.0
글라이콜다이스테아레이트	3.0	3.0	3.0
코카마이드이에이	1.0	1.0	1.0
라우라마이드이에이	1.0	1.0	1.0
살리실산	0.13	0.13	0.13
시메티콘	3.0	3.0	3.0
방부제	적량	적량	적량
향	적량	적량	적량
정제수	잔량	잔량	잔량
계	100.0	100.0	100.0

실험예 1 : 화장료의 탈모 방지 효과

본 실험예 1에서는 상기 제형예에서 제조한 샴푸의 탈모 방지 효과를 확인하였다. 탈모 증세가 있다고 인식하는 성인 남성 20명을 무작위로 10명씩 2개 그룹(A, B)으로 나눈 뒤 실험군(A) 10명, 대조군(B) 10명으로 구성하여 4주 동안 실험을 진행하였다. A 그룹을 대상으로 제형예 1의 조성물을, B 그룹을 대상으로 제형예 2의 조성물을, C 그룹을 대상으로 비교예 1의 조성물을 각각 2일 간격으로 사용하여 그 결과를 관찰하였다. 탈모 방지의 정도는 실험 종료 후 피시험자들이 평가 기준(-3:매우 악화, -2:악화, -1:약간 악화, 0:변화 없음, 1:약간 개선, 2:개선, 3:매우 개선)에 따라 관능 평가하도록 하여 아래 표 3에 나타내었다.

피검자	탈모 방지의 정도
피검자	A 그룹	B 그룹	C 그룹
1	1	2	0
2	3	3	-3
3	1	2	0
4	2	3	-2
5	2	3	-1
6	0	1	-3
7	3	3	0
8	3	2	-1
9	2	2	0
10	1	1	-2
평균	1.8	2.2	-1.2

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 제형예 2의 조성물이 비교예 1의 조성물에 비하여 탈모 방지 효과가 뛰어난 것으로 나타났다.

Claims

동규자 추출물로부터 분리된 리놀레산, 올레산 및 팔미트산을 유효성분으로 포함하고, 상기 리놀레산, 올레산 및 팔미트산는 2:1:1의 중량비로 혼합되어 포함된 것을 특징으로 하는, 탈모 방지용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 모유두세포 증식 효과, 세포의 모발 증식 신호전달(VEGF, IGF-1) 조절 효과 또는 β-카테닌(β-catenin) 발현 증가 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 탈모 방지용 화장료 조성물.
삭제
삭제