KR102323441B1 - 해수온 변화에 대응하는 감태 암배우체 유래 유전자 및 이를 이용한 해양 생태계 환경 변화 진단 방법 - Google Patents

해수온 변화에 대응하는 감태 암배우체 유래 유전자 및 이를 이용한 해양 생태계 환경 변화 진단 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 해수온 변화에 대응하는 감태(Ecklonia cava) 암배우체 유래의 유전자 및 이를 이용한 고온 및 저온 노출 여부 확인 방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 감태 암배우체로부터 유래한 특정 유전자군이 기후변화에 따른 해수온 변화에 의해 특이적인 발현 변화를 나타내어, 이들을 생체지표로 이용함으로써 해수온 상승에 따른 해양 생태계의 고온 및 저온 스트레스 노출 여부를 확인하거나, 감태 암배우체의 생리 및 대사변화를 예측할 수 있는 마이크로어레이 및 키트로 유용하게 이용될 수 있다.

Description

해수온 변화에 대응하는 감태 암배우체 유래 유전자 및 이를 이용한 해양 생태계 환경 변화 진단 방법 {Seawater temperature change responsive genes in female gametophyte of Ecklonia cava and the method for diagnosing marine environmental changes using the same}
본 발명은 해수온 변화에 대응하는 감태(Ecklonia cava) 암배우체의 유전자 및 이를 이용한 해양 생태계의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부를 진단하거나 이에 의한 감태 암배우체의 생리 및 대사변화를 예측하는 방법에 관한 것이다.
감태(Ecklonia cava)는 갈조식물 문(Phaeophyta), 다시마 목(Laminariales), 다시마 과(Laminariaceae), 감태 속(Ecklonia)에 속하는 해조류로서, 한국 연안에서는 동해안 중남부, 남해안 전역, 서해안 남부 및 제주도 연안에 흔하게 분포하며, 중국의 중남부와 일본 중부 해안을 포함한 북태평양 서해안에 한정되어 분포한다.
엽상체는 갈색이고 가죽질이며 수지상의 부착기로부터 50-100 cm 길이의 원주상 줄기를 낸다. 줄기는 어릴 때는 속이 차 있으나 성숙하면 중심부가 대롱처럼 비게 된다. 줄기의 중심부는 피층 아래에 위치한 점액강도로부터 분비된 점액질로 채워진다. 줄기의 끝은 점차 편편하고 얇게 펴져 길이 20-30 cm, 폭 4-5 cm의 중앙엽을 이룬 다음 양쪽으로 우상엽을 낸다. 우상엽은 양쪽 가장자리로부터 다시 폭이 좁은 소엽을 우상으로 어긋나게 낸다. 성숙하면 중앙엽은 5 mm까지 두꺼워진다. 중앙엽과 소엽은 주름이 없이 매끈하다.
엽상체는 포자체로서 성숙하면 중앙엽의 중심부에 짙은 갈색의 자낭군이 형성된다. 감수분열한 자낭군으로부터 유주자가 방출되어 현미경적 크기의 분지 사상체인 암수 배우체로 발달한다. 수배우체로부터 편모성 정자가 방출되어 암배우체 정단부에 위치한 난자로 이동하여 수정이 일어나고 이어서 대형 포자체로 발달하는 이형세대교번 생활사를 보인다. 초기 포자체로부터 성숙한 대형 포자체로 성숙하기까지는 2-3년이 소요된다. 성숙한 엽상체의 피층조직에 함유된 알긴산염을 추출하여 식품 제조, 산업, 의약학적으로 다양하게 이용된다.
감태는 암반 기질이 잘 발달된 조하대 수심 5-20 m 범위에서 해중림을 형성한다. 특히, 다른 생물들의 서식처를 제공함으로써, 연안의 해양생물 다양성에 큰 공헌을 하고 있는 생물이다. 따라서 연안의 해양생물 다양성을 기후변화로부터 보존하기 위해서는 본 종의 보호가 우선되어야한다.
기후변화는 다양한 시간과 공간 속에서 변화하고 있는 지구의 기후에 대하여 그 변화를 총칭하여 가리키는 것으로, 현재의 기후계가 자연적 요인 및 인위적 요인에 의하여 점차 변화하는 것을 말한다. 자연적 요인에는 대기, 해양, 육지, 설빙, 생물권 자신의 내적 요인 외에, 화산 분화에 의한 성층권의 에어로졸(부유 미립자) 증가, 태양 활동의 변화, 태양과 지구의 천문학적 상대위치 관계 등의 외적 요인이 있다. 인위적 요인에는 화석연료 과다 사용에 따른 이산화탄소 등 대기 조성의 변화, 토지 피복의 변화, 삼림파괴 등이 있다. 기후변화의 결과로 인하여, 이상 기상, 지구온난화 및 해수온 상승을 비롯한 각종 지구 환경의 악화 문제가 발생하고 있다.
특히, 최근에는 인간의 활동에 의한 온실 가스의 대기 중 농도 증가로 인하여 지구온난화가 가속화되고 있다. 온실효과로 인하여 지구온난화의 지표인 지구표면 온도는 지난 100년 동안(1906~2005) 0.74±0.18℃ 상승한 것으로 파악된다. 지구온난화에 의해 해수온이 상승하고 있으며, 극지방을 제외한 전 세계의 빙하가 감소하는 현상이 관측되고 있다. 이러한 급격한 수온 변화는 해양 생태계에 큰 영향을 준다. 즉, 해양 생물의 대사를 변화시켜, 결과적으로는 해양 어장 및 해양 동식물종을 교란시킨다.
이러한 환경의 변화에 대응하기 위해, 해양 생물은 자신의 특정 유전자의 발현량을 조절하여 생리 또는 대사를 변화시킴으로써 능동적으로 환경변화에 대처한다. 그러므로 기후변화와 같은 외부 환경변화에 발현량이 변화되는 유전자들을 발굴하여 생체지표로 이용함으로써, 환경변화에 반응하는 생물체의 유전자 발현 변화를 이용한다면 특정지역의 환경변화에 관한 정보뿐만 아니라, 이러한 환경변화가 생명현상에 미치는 영향 및 해당 생물의 건강진단에 관한 정보를 얻을 수 있다. 이러한 기법은 미세한 환경변화도 감지 가능하고, 조기 진단적 가치를 갖으며, 유전자 기능에 대한 고찰을 통해 미래 예측적 기능도 갖을 수 있다. 기후변화에 의한 생태계의 교란에 대한 위험성이 제기되고 있는 현 상황에서, 생명현상의 기본인 유전자와 핵산 물질의 분석을 통하여 환경변화의 영향과 생태계 파급효과를 정확히 진단하는 첨단기술 개발의 필요성이 절실하다.
이에, 본 발명자들은 해수온 변화에 대응하는 생체지표를 발굴하던 중, 해양 생물다양성 유지에 큰 역할을 하고 있는 대형 갈조류의 일종인 감태(Ecklonia cava)의 암배우체를 대상으로 온도변화에 의한 특정 유전자의 발현량 변화를 규명하였고, 이들을 이용한 감태 암배우체의 생리/ 대사 변화 예측을 수행하였다. 고수온 특이 유전자 후보군은 해수온의 변화 정도 및 이에 따른 해양 생태계의 환경 변화를 파악할 수 있는 바이오센서로 유용하게 이용될 수 있음을 제시함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 기후 변화에 따른 해수온 변화에 대응하는 감태(Ecklonia cava) 암배우체 유래의 유전자, 및 이를 이용한 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인 방법 또는 이에 의한 감태 암배우체의 생리 및 대사변화를 예측하는 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 해수온 변화에 대응하여 발현이 증가 또는 감소하는 하기 유전자 염기서열의 전부 또는 일부를 포함하는 올리고뉴클레오티드, 또는 상기 올리고뉴클레오티드에 상보적인 올리고뉴클레오티드 분자가 집적된 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 마이크로어레이를 제공한다:
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또한, 본 발명은 상기 유전자들을 이용한 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 마이크로어레이를 포함하는 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트를 제공한다.
아울러, 본 발명은 상기 유전자들에 대해서 각 유전자에 상보적이고 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍 모두를 포함하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트를 제공한다.
본 발명의 해수온 변화에 대응하는 감태(Ecklonia cava) 암배우체 유래 유전자 및 이를 이용한 해양 생태계 진단 방법은 기후변화에 따른 해수온 변화에 대응하는 감태 유래 특정 유전자의 발현량 변화를 측정함으로써, 해수온 변화에 의한 고온 및 저온 스트레스 노출 여부를 확인할 수 있고, 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화를 예측할 수 있는 바이오 센서 및 키트로 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 감태숲을 나타낸 사진이다.
도 2은 실시예 3에 따른 차등발현 유전자 발굴을 위한 흐름도를 나타낸 것이다.
이하에서 본 발명을 구체적으로 설명한다.
본 발명은 해수온에 대응하여 발현이 변화하는 감태(Ecklonia cava) 암배우체 유래의 유전자를 발굴하였으며, 그 중에서, 고온 및 저온 스트레스에 대한 자기 방어 기작과 깊이 관련되어 있는 유전자를 발굴하였다. 따라서, 상기 고온 및 저온 노출에 대하여 발현량이 변화하는 감태 수 배우체 유래 유전자를 집적한 마이크로어레이를 해수 시료의 고온 및 저온 스트레스 노출 여부 검출 및 수 생태계의 건강 상태를 진단하는데 이용할 수 있다.
감태의 성숙한 엽체로부터 방출된 포자는 발아하여 주로 수온이 낮은 가을에서 겨울철 암 배우체, 수 배우체로 생장하고 성숙한다. 감태의 생활사 중 배우체 단계는 개체군을 유지하고 새로운 세대를 형성하는 단계이며 환경 변화의 영향, 특히 수온에 영향을 받는다 (한수지 48(5), 704-711, 2015, 강진우, 정익교). 그렇기에 종래 성숙한 감태보다 감태 암배우체는 해수온 변화와 관련하여 더욱 민감한 반응을 나타내고, 그로인해 해수온 변화에 대한 직접적이고 근본적인 감태 암 배우체의 생리 및 대사변화를 예측을 할 수 있다. 또한, 이를 근거로 노출 환경에 따른 감태 개체군의 운명을 예측할 수 있다.
본 발명은 하기의 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유전자의 핵산 서열의 올리고뉴클레오티드 또는 그의 상보가닥 분자가 집적된 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인용 마이크로어레이를 제공한다:
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상기 유전자는 감태(Ecklonia cava) 암배우체로부터 유래되는 것이다.
상기 마이크로어레이는 기후변화에 의한 해수온 변화에 대응하는 해양 생태계 반응을 확인하는 것이다.
또한, 본 발명은
1) 실험군인 감태 암배우체와 대조군인 감태 암배우체에서 각각 RNA를 분리하는 단계; 2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA로부터 cDNA를 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지 하는 단계; 3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 상기 마이크로어레이와 혼성화시키는 단계; 4) 반응한 마이크로어레이를 분석하는 단계; 및 5) 분석한 데이터에서 상기 마이크로어레이에 집적된 유전자 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인 방법을 제공한다.
상기 단계 1)은 실험군과 대조군 감태 암배우체의 RNA를 분리하는 단계로, 기술분야에 알려진 방법으로 이루어질 수 있으나, 구체적으로는 감태 암배우체를 모아 막자사발에서 갈아 조직 분말을 만들고, 조직 분말에 CTAB buffer(3% CTAB, 1.0 M NaCL, 0.7 % PVP, 10 mM EDTA, 100 mM Tris-Cl, pH 9.0)를 넣어 잘 섞은 후, 65 ℃에서 5분간 배양하고, 상기 배양한 감태 암배우체를 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여 층을 분리하고, 상등액을 취하였다. 그리고, 상등액의 1/2 volume의 클로로폼을 넣어 잘 섞은 뒤 다시 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분간)하여 상등액을 취하고, Equilibrated Phenol A (pH 4.3) 1/4 volume 및 클로로폼 1/4 volume을 첨가하여 잘 섞은 후, 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여 상등액을 취하였다. 페놀/클로로폼 용액(5:1)을 넣어 잘 섞고, 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여 상등액을 취하고, LiCl 용액(8M)을 1/2 volume 첨가하여 조심스럽게 섞은 후, 4 ℃에서 최소 2시간 동안 배양하였다. 배양액을 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 30분)하여, 용액을 제거하여 침전물을 얻었다. 이후 에탄올(70% DEPC-처리수)을 넣고 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여, 침전물을 수세하고, 에탄올을 제거하였다. 그 후 침전물을 건조시키고, 약 500 μl의 DEPC-처리수에 녹이는 방법으로 이루어질 수 있다.
상기 단계 2)는 실험군과 대조군의 차이를 확인하기 위해 다른 형광물질로 표지하는 단계로서, 구체적으로는 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
상기 단계 3)은 상기한 마이크로어레이와 형광물질로 표지된 cDNA를 혼성화 시키는 단계이다.
상기 단계 4)는 반응된 마이크로어레이를 분석하는 단계로서, 유전자 발현 증감 여부를 확인, 분석할 수 있다.
상기 단계 5)는 분석한 데이터를 통해 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인하는 단계이다. 구체적으로, 유전자의 발현 증감 여부를 확인함으로써 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인할 수 있다.
또한, 본 발명은
1) 실험군인 감태와 대조군인 감태에서 각각 RNA를 분리하는 단계; 2) 단계 1)의 RNA를 상기 각각의 유전자에 상보적이며 유전자 증폭이 가능한 프라이머 쌍 모두를 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계를 포함하는 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기한 마이크로어레이를 포함하는 것을 특징으로 하는 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용 키트를 제공한다.
상기 키트는 기후변화에 의한 해수온 변화에 대응하는 해양 생태계 반응을 확인하는 것이다.
상기 키트는 스트렙타비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(streptavidin-like phosphatase conjugate), 화학 형광물질(chemifluorescent) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 이루어진 형광물질 군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것이다.
상기 키트는 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, dNTP 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), 표식시약, 및 세척 완충용액으로 이루어진 반응시약 군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것이다.
아울러, 본 발명은 상기 각각의 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍 모두를 포함하는 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용 키트를 제공한다.
상기 키트는 기후변화에 의한 해수온 변화에 대응하는 해양 생태계 반응을 확인하는 것이다.
따라서, 상기 유전자들은 해수온 증가에 따른 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부의 확인을 위한 마이크로 어레이 및 키트로 유용하게 사용할 수 있다
이하에서 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다. 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 일 예시일 뿐, 본 발명의 범위가 실시예로 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 감태(Ecklonia cava) 암배우체의 배양 및 고수온 조건 배양
<1-1> 감태 암배우체의 배양
온도변화에 대해 발현량이 변화되는 감태 암배우체의 유전자들을 발굴하기 위해, 국립수산과학원 해조류연수센터에서 감태의 암배우체를 분양받아 15℃에서 배양하였다. 배양액의 조성은 아래와 같다.
Figure 112021038430016-pat00001
<1-2> 감태의 고수온 조건 배양
상기 <1-1>의 감태 암배우체를 정상적인 배양조건보다 2℃ 높은 17℃ 조건에서 0.5, 1, 3, 5일간 배양하였고, 15℃ 배양군을 대조군으로 이용하였다.
<실시예 2> 온도 상승에 의한 감태 암배우체의 유전자 변화 측정
<2-1> 감태 암배우체의 RNA 추출
온도 상승에 의한 감태 암배우체의 유전자 변화를 측정하기 위하여 <1-2>의 고온 노출된 감태 암배우체의 RNA를 분리하였다.
구체적으로, 상기 <1-1>과 <1-2>의 각 온도조건에서 배양한 감태 암배우체를 모아 막자사발에서 갈아 조직 분말을 만들었다. 조직 분말에 CTAB buffer(3% CTAB, 1.0 M NaCL, 0.7 % PVP, 10 mM EDTA, 100 mM Tris-Cl, pH 9.0)를 넣어 잘 섞은 후, 65 ℃에서 5분간 배양하였다. 상기 배양한 감태 암배우체를 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여 층을 분리하고, 상등액을 취한다. 상등액의 1/2 volume의 클로로폼을 넣어 잘 섞은 뒤 다시 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분간)하여 상등액을 취한다. Equilibrated Phenol A (pH 4.3) 1/4 volume 및 클로로폼 1/4 volume을 첨가하여 잘 섞은 후, 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여 상등액을 취하였다. 페놀/클로로폼 용액(5:1)을 넣어 잘 섞고, 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여 상등액을 취한다. LiCl 용액(8M)을 1/2 volume 첨가하여 조심스럽게 섞은 후, 4 ℃에서 최소 2시간 동안 배양하였다. 배양액을 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 30분)하여, 용액을 제거하여 침전물을 얻었다. 이후 에탄올(70% DEPC-처리수)을 넣고 원심분리(12,000 rpm, 4 ℃, 10분)하여, 침전물을 수세하고, 에탄올을 제거하였다. 그 후 침전물을 건조시키고, 약 500 μl의 DEPC-처리수에 녹인다. 추출한 RNA 용액은 변성된 아가로스 겔(agarose gel)을 이용한 전기영동법으로 분리한다. RNA의 순도는 UV spectrometer를 이용하여 확인하였다.
그 결과, 260 nm/280 nm의 값이 1.6-1.8 사이에 있음을 확인하였고, 두 ribosomal RNA subunit(large/small)의 비가 1.5-2.0이 되는 것을 확인함으로써 RNA 변성되지 않음을 판단하였다.
<2-2> cDNA 라이브러리 작성 및 형광표지
상기 감태 암배우체의 정제된 실험군 및 대조군의 전체 cDNA를 작성하였고 Agilent's Low RNA Input Linear Amplification Kit Plus(Agilent Technologies, USA)를 사용하여 Cy3 및 Cy5로 표지하였다.
구체적으로, 감태 암배우체 시료 각각의 single strand cDNA는 random primer를 이용하여 만들어졌으며, 이를 주형으로 second stand cDNA를 합성하였다. 각 double strand cDNA의 말단에는 adaptor를 부가하여, cDNA library를 완성하였다. 염기서열은 Illumina사의 Hi-Seq 2500 염기서열분석기를 이용하여 해독하였다. 각 시료에서 6.0-9.0 Gb에 달하는 정보를 생산하였다. 대조군과 실험군에서 생산된 염기서열 정보를 조립하여, 각 시료들로부터 최소 약 116,000종, 최대 약 128,000종의 unigene을 얻었다.
그 후, T7 중합효소(T7 polymerase)를 첨가하여 40 ℃에서 2시간 동안 선형 증폭(linear amplification)을 수행하였다. 이와 같은 증폭과정을 통해 실험군 및 대조군의 시료를 각각 Cy3-CTP와 Cy5-CTP로 표지하였다.
<실시예 3> 마이크로어레이(microarray) 혼성화(hybridization) 및 분석
<3-1>혼성화(Hybridization) 및 스캐닝(scanning)
형광물질이 라벨링된 감태 암배우체의 cDNA 시료를 PCR purification kit(Qiagen, Germany)을 사용하여 정제하고, 증류수로 용출하였다. 정제된 형광표지-cDNA 시료를 혼성화 완충액(hybridization buffer)(3x SSC,0.3% SDS, 50% 포름아미드(formamide), 20 ㎍ Cot-1 DNA, 20 ㎍ yeast tRNA)에 첨가한 후, microcon YM-30으로 농축하여 혼성화 혼합물을 만들었다. 상기 혼성화 혼합물을 95 ℃로 3분 동안 가열하여 변성시키고, 12,000 g 에서 30초간 원심분리하여 가열된 혼성화 화합물의 온도를 떨어뜨렸다. 제조된 감태 cDNA 마이크로어레이(microarray)에 커버슬립(coverslip)을 덮고, 변성시킨 혼성화 혼합물을 파이펫팅(pipetting)하였다. 마이크로어레이를 GT-Hyb 챔버(Chamber)에 넣고 65 ℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 혼성화가 끝난 후, 챔버에서 마이크로어레이를 꺼내어 세척과정을 수행하고, 마이크로어레이를 회전하여 건조한 후 스캐닝(scanning)할 때까지 암실에서 보관하였다. 실험이 완료된 감태 마이크로어레이를 Axon GenePix 4000B scanner(Axon Instrument, USA)를 사용하여 스캔하였다. GenePix Pro 6.0 program에서, 스캔 이미지로부터 각 점을 그리딩 파일(gridding file)을 이용하여 그리딩하고, 정량화하여 각 점의 Cy5/Cy3 강도 및 비율 등의 분석값이 포함된 GPR 파일(GPR file)을 얻었다.
<3-2> 차등 유전자의 발굴 및 선별
상기 <3-1>의 대조군 및 각 실험군에서 얻어진 약 200,000 종의 unigene들을 대상으로 각 실험군에서 발현량이 증가하거나, 감소한 유전자들을 발굴하였다 (도 2 참조).
구체적으로, <3-1>에서 얻은 GenePix Pro Program에서 얻어진 GPR 파일로부터, 분석 프로그램인 GeneSpring 7.3.1(Agilent Technologies, USA)를 이용하여 아래와 같이 분석을 수행하였다. 표준화(Normalization)는 LOWESS(locally weighted regression scatterplot smoothing)를 이용하여 수행하였고, 신뢰할 수 있는 유전자(Reliable gene)는 중앙값의 합이 배경(background)보다 낮거나, 각 화소(pixel) 값의 표준편차가 유의하지 않은 점을 플래그 아웃(flag-out)함으로써 유의한 유전자를 얻었다. 유의한 유전자(Significant genes)는 정규화된 비율(normalized ratio) 값이 2배 이상 차이를 보이는 것들을 선별하였다.
그 결과, 노출 초기인 0.5 d 노출군과 1 d 노출군에서 각각 70 종(증가 51, 감소 19), 32 종(증가 28, 감소 4)의 unigene의 발현량이 2배 이상 변화된 것으로 파악되었다(표 1). 이중 18종이 unigene이 두 실험군에서 공통으로 나타났다(표 2).
노출 후기인 3 d 노출군과 5 d 노출군에서 각각 unigene 846 종(증가 696, 감소 150) 및 252 종 unigene(증가 233, 감소 19)의 발현량이 2배 이상 변화된 것으로 파악되었다(표 1). 이들 두 노출군에서는 33종의 unigene이 공통으로 확인되었다(표 3).
고수온 노출군에서 발현량이 두배 이상 변화되는 감태 암배우체 유전자(unigene) 수
0.5 d 1 d 3 d 5 d
발현량 증가 51 28 696 233
발현량 감소 19 4 150 19
고수온 노출 초기(0.5 d 및 1 d노출군)에 공통으로 나타나는 차등발현유전자 목록
No. Unigene Symbol Description 유전자발현량 변화
0.5 d 1 d
1 amiC Aliphatic amidase expression-regulating protein [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P27017] -10.58 -6.81
2 At3g57050 Cystathionine beta-lyase, chloroplastic [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P53780] 4.86 4.53
3 atad3-a ATPase family AAA domain-containing protein 3-A [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q58E76] 4.50 5.09
4 Cyb5a Cytochrome b5 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P00173] 11.84 12.01
5 fsjC Putative rRNA methyltransferase {ECO:0000255|HAMAP-Rule:MF_03163} [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q54NX0] 3.52 4.15
6 glnII Glutamine synthetase 2 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P04772] -6.95 -8.82
7 grpE Protein GrpE {ECO:0000255|HAMAP-Rule:MF_01151} [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q7VEJ7] 3.49 4.20
8 heatr1 HEAT repeat-containing protein 1 homolog [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q54ML4] 3.60 4.41
9 hisC Histidinol-phosphate aminotransferase {ECO:0000255|HAMAP-Rule:MF_01023} [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q11VM5] 3.73 4.40
10 infB Translation initiation factor IF-2 {ECO:0000255|HAMAP-Rule:MF_00100} [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q2VZV0] 3.88 4.26
11 kap123 Probable importin subunit beta-4 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot O60100] 3.80 4.58
12 KCS1 3-ketoacyl-CoA synthase 1 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q9MAM3] 5.16 5.27
13 Larp1 La-related protein 1 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q6ZQ58] 3.30 4.49
14 mfd Transcription-repair-coupling factor {ECO:0000255|HAMAP-Rule:MF_00969} [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q55750] 4.49 5.22
15 Pdk [Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase, mitochondrial [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P91622] 3.63 4.20
16 R00823 Putative sugar lactone lactonase [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q92RN9] 5.04 5.48
17 RCH2 Receptor-like protein kinase 2 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q9LHP4] -3.85 -5.02
18 rpsA 30S ribosomal protein S1 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q49XT0] 5.02 6.06
고수온 노출 후기(3 d 및 5 d노출군)에 공통으로 나타나는 차등발현유전자 목록
No. UniGene Symbol Desc 유전자발현량 변화
3 d 5 d
19 Ank2 Ankyrin-2 {ECO:0000250|UniProtKB:Q01484} [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q8C8R3] 5.47 4.98
20 B8ASK4_ORYSI None [Source:UniProtKB/Swiss-Prot B8ASK4] -2.23 2.57
21 cfaD Counting factor associated protein D [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q54TR1] -2.18 2.41
22 crtp3 Crt homolog 3 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q55C66] 5.06 4.92
23 Ctsz Cathepsin Z [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q9R1T3] -2.18 2.57
24 dcd1A Protein dcd1A [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q55BZ5] -2.22 2.47
25 DDB_G0274487 CTL-like protein DDB_G0274487 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q869R1] -2.51 2.46
26 Dnah17 Dynein heavy chain 17, axonemal [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q69Z23] -3.10 2.49
27 eEF1delta Probable elongation factor 1-delta [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q9VL18] -3.09 2.63
28 ENDO2 Endonuclease 2 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q9C9G4] -2.54 2.50
29 glnII Glutamine synthetase 2 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P04772] -4.14 -3.08
30 GNAI_LYMST Guanine nucleotide-binding protein G(i) subunit alpha [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P30682] -2.51 2.44
31 HIF1AN Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q9NWT6] -1.88 2.46
32 HSF24 Heat shock factor protein HSF24 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot P22335] 6.37 4.80
33 oxt Xylosyltransferase oxt [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q7KVA1] 3.48 3.60
34 PCKR1 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q39613] -1.79 2.42
35 PRKG2 cGMP-dependent protein kinase 2 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot Q13237] -2.27 2.43
36 psmb3 Proteasome subunit beta type-3 [Source:UniProtKB/Swiss-Prot O73817] -2.87 2.60
<3-3> 고수온 노출에 의한 감태 암배우체의 생리/ 대사변화 예측
상기 <3-2>에서 선별된 노출 초기 차등발현 unigene 및 노출 후기 차등발현 unigene들을 대상으로 DAVID (the database for annotation, visualization and integrated discovery) Bioinformatics Resources를 이용한 분석을 수행하였다. 그 결과, 고수온 노출 초기에는 Novobiocin biosynthesis; Tyrosine, Phenylalanine, Histidine metabolism; cationic antimicrobial peptide (CAMP) resistance 등이 영향을 받으며, pyridoxal phosphate binding, peptidoglycan catabolic process transaminase activity 등이 변화되는 것으로 나타났다(표 4). 노출 후기에는 Ribosome 이 영향을 받으며, translation 과정과 extracellular exosome 등이 변화되는 것으로 파악되었다(표 5).
이와 같이 제시된 51종의 차등발현 유전자들은 감태 암배우체의 고수온 노출 여부와 이에 의한 생리 및 대사변화를 예측하는 생물학적 지표로 사용될 수 있다.
고수온 노출 초기에 예상되는 감태 암배우체의 생리 및 대사변화
Category Term P-Value Symbol
KEGG PATHWAY Novobiocin biosynthesis 1.90E-04 aminotransferase(hisC)
histidinol-phosphate aminotransferase(hisC)
Tyrosine metabolism 1.50E-03 aminotransferase(hisC)
histidinol-phosphate aminotransferase(hisC)
Phenylalanine metabolism 1.70E-03 aminotransferase(hisC)
histidinol-phosphate aminotransferase(hisC)
Histidine metabolism 2.50E-03 aminotransferase(hisC)
histidinol-phosphate aminotransferase(hisC)
Cationic antimicrobial peptide (CAMP) resistance 7.50E-02 N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase(amiC)
GO TERM pyridoxal phosphate binding 6.20E-03 aminotransferase(hisC)
histidinol-phosphate aminotransferase(hisC)
peptidoglycan catabolic process 2.40E-02 N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase(amiC)
transaminase activity 4.10E-02 aminotransferase(hisC)
고수온 노출 후기에 예상되는 감태 암배우체의 생리 및 대사변화
Category Term P-Value Symbol
KEGG PATHWAY Ribosome 2.90E-06 ribosomal protein L32(RPL32)
ribosomal protein L35(RPL35)
ribosomal protein L35a(RPL35A)
ribosomal protein L9(RPL9)
ribosomal protein S16(RPS16)
ribosomal protein S28(RPS28)
GO TERM translation 8.10E-03 ribosomal protein L32(RPL32)
ribosomal protein L35(RPL35)
ribosomal protein S16(RPS16)
extracellular exosome 7.00E-02 cathepsin Z(CTSZ)
receptor accessory protein 5(REEP5)
ribosomal protein L35a(RPL35A)
ribosomal protein S16(RPS16)
<110> KIOST <120> Seawater temperature change responsive genes in female gametophyte of Ecklonia cava and the method for diagnosing marine environmental changes using the same <130> 2021P-03-007 <160> 51 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1614 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 1 gctcaatcaa atcttccgac tcggccacca attcgatttg accatttttg agcatcttac 60 caatcttaga tttactccac aggtgctgat tggaatcgtg gacacgcacg taaccttcag 120 gtgcattgag ctcgatgcca gggtgtgccg cgtgaatctt gtcgatgtcg aagcttccag 180 ccttttcaac ggcagccttc cagatccaag gacctaagta acccgcttgc gtcacatcac 240 cgataacgga atcttcgccc cacatttcct tgaatgcttt aacgaactcg atgttttcag 300 gaatgtcgag agattggaaa tacttcatgc tagtgtagaa accatccgca ttctcaccac 360 caataccgag aagttcgtcc tctgtagtag aaatcgtcaa catgtcatac tttttagaag 420 tgacaccggc cgccttgagc tgcttgtacc aagccacgtt actaccaccc acaacagcag 480 tgaacatgag gtcaggcttc ttcagcttta ccttattgat caaagaacgg aaatttgtgt 540 gtccaagcgg atagtattcc tcacccacaa ccttacactt aggatccttt ttcttaagaa 600 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aagagaactc agaatccacc ctcatataag 1500 gaaggaacga acgaaccatc actcgggttg gcaaaagaaa acggcctgtc ttgtcagatt 1560 gacctgccag aacgaccatt cagattcacc acccaaaatt accagtctaa tcgaccaatc 1620 agaaccacca gtgaaaagaa atgaacacct gttgatacta atagccgact tattactttg 1680 aaccaatcgt ttttactcaa ttccctaagt ccagtcggtt gaaaggccga agcgaaaagg 1740 ccaagcaact gtccgttcaa cccaccaaga gacgaaagag gagaaagcgc tttcaactag 1800 acccccctcc aagcatcact tggtggtggc cgcggcagaa gcagcagcct tagctgccgc 1860 cgcaggcccg ggcgcggtgt aggactgcat ggctcgggag aggtccgcga tgaggtcctc 1920 ggcggactcg atcccgatgg aaagccgcac caaatcttcc gggaactccc gtgcagcacg 1980 cacctcagcc gggatggagg cgtgggacat ggccccaggc atggagatga ggctgttcac 2040 gctgccgaag ctcaccgtga tcttgaacag cttcgtcacc gagacaatgt gctgggagaa 2100 gacgagggac ccagtacgga agcagactac gctgccgcca ccgctggcct gagccatgtg 2160 gatgtcgtgg tcggggtggc tctccaagcc cgtgtagtgc acgtgcgtgg tgcaagggtg 2220 cgccttgagg aagcgcgcga cgcggatggc gttctcctgc tgcttctgca ctcggaggtg 2280 catggtcttc actcctcgca acagcagcca 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Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 25 gcaagcttcc gcgtgaagcc cggaactctc cccgctatgg ccgacaagca gtcgctgctg 60 agcagccagc acgccacggg catccccgtg gcccagcccg tcgacgcgaa tggcaaggac 120 gtttacggcg cgcccccgca gggcgccgcg gtggcgtaca aggtggagga cgcctcgctg 180 gaggcgcccg agggcggcta caaggacgtg tgggccgcgg tcctcttcgc gggcaacctc 240 ggcgtcatcg gctactatgc cttcgccaag ggcattgaca acctgaagga cgacgagtct 300 gcgacggaca cggacgacga catctccgcc agcgacctgc agctggcgct ggggctggcg 360 gccggcgcgg ccgtggtggg cgcgctgctg tcgctggcct gggtctccta cgcgatgcgc 420 aacgcggcca gtctgatcaa atgcatgctg tggttcaacg tggtggtcaa cgccgcggtg 480 gggttcctgt gcctgctgat cggcgccttc ccgggcttca tcatcttcat gctgctggcg 540 ctgctcaact ggtgctacat gtacctggtc cgccgccgcg tgccgtttgc ggcggccaac 600 ctgacgtgcg cctgcgcgtc tctgctgcag cacaagagcg tgctcaacgt ggcgtacgtg 660 atggtgctgg cgcagttctc gtgggtgctg ctgtggtgcc tggccgcggt gggcgtgtac 720 ggcatcgagg acggcgacga cgacagcagc agcggcagcg aggggccggg cccgctggtg 780 ccgctggccg ccggcgacga ctactggagc gacgacgacg 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Ecklonia cava <400> 29 atcattttct tttatacatc tgcggattta accgtcttaa tgataactgc agctactttg 60 taagggtcag cagctgagtt ggggcgacgg tcttctaagt aaccattcca tcctgcatca 120 actgttacaa ttggaatacg gatagaggct ccacggtcac taataccata gctaaattta 180 tcaatagcct gtgtttcgtg aagacctgtc aaacgcaggt ggttgtcagc accatataca 240 tcaatacact ctttgattac ttcaggagaa gcaccaaaag cagaacaaat agtatcataa 300 gtagctttgt taccggcagt tcttaagaca ctattagaga aattggcgtg cattccagaa 360 ccgttccaat cacctgggac aggcttacag tgccagttaa tcgctacgcc atatttctca 420 gcggtacgtt ccaataaata acggccaatc caaatctgat caccggcatc ttttgctcct 480 ttagcaaaaa tttggaattc ccactgacca gcagcaactt ctccattaat accttctacg 540 ttcaaccctg cttctaagca aatatccatg tgctcttcaa caatttctcg tccgtatgcg 600 tttttcgcac caacagagca ataatatggt ccctgaggtt caggataacc attaacgggg 660 aaaccaagtg gtaaatcggt ctccggatcc cataggaaat actcttgctc gaaaccgaac 720 cagaaatcat tatcatcatc ctgaatggta gcgcgaccat tagttgggtg cggtgtacca 780 tcagcattaa gtacttctgt cattaccacg tatgcatctt tgcgatcagg gtctgggtag 840 atacatactg gttttagcaa acaatcagag gaaccaccct ccgcttgttg tgtggaacta 900 ccatcgaaag accacatggg gcaatcttct agttttccac taaagtcttt tacgatcttt 960 gttttagctc gtaatccttg tgttggtgta ctgccatcaa gccaaatgta ctctagtttt 1020 gattttgcca tcgttcaaaa attgttttgt atttataaaa gtatatcagc tccatcccta 1080 ctcctcttgg agggtaaaag gtggattaaa atccgtaaac aaatgctagc aagaaagaag 1140 ccagactact actaggtgca ccatccgtat cgaagaaaac atcttctgaa actgtgtcaa 1200 atctgatctc cggaataatg gtcaaattac ctgtagtata gcttcctgtc aaagtgaaat 1260 cagaagtatt agtatctgca aaatcaccaa aaacagtggc tttatcttgg aatatctcaa 1320 cccgtgctcc aactttgaaa tcatcactcg ctgcgagttg agcatataaa gctgctccag 1380 aaaacccagt atcatcacct gtatcagtga tagtggcgtt gatacctaag tagaaagatt 1440 cagatacatc aaccccacca gtcaagtcca cctgagaata accatctccg aacaaaccgt 1500 ttaggtaaaa tccaccataa cctgcttgta ccccgaagaa gtaatcgcca gtagggttga 1560 attctgtaat gtcagtaggg ttcaaaatac ttgccataaa gctaaatcca ctctcagaag 1620 aaatatctaa tttgattcct gtgtgagaga aaggaccata agaaaacata taagaagtag 1680 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Ecklonia cava <400> 37 gctgcagctg tgcttcctca tctcggacgg gttcttcgag caggaccgcg agcgcgtgcg 60 gcggctcgtg cgcgaggcca cggagcggcg gcagctgctg gtgctgctca tcgtggaccg 120 cgaggccggc ggcgacgcgt cgattttgaa caccaaggcg gtcaagttcg ccaacggcgc 180 gcccgtcgtg acgccctacc tcgacgagtc gtacccgttc ccgttctacc tggtggtgga 240 ggcgctggcg tcgacgccgg acgcgctggc gggggcgttg cggcagtgga tcgagatggc 300 gtcgcacacg gagtgagttt cttccgtcga gtcaacttcg gggcgtcgac tcaacttcgg 360 ctggtggcgg ccgccgatgg aatgacacga accgatgccc atagacccta cggcccgacc 420 gaccgacccg acagtcaccg acccgacagt caccgacccg acagtcaccg acccgacgcg 480 acagtcaccg accgacccga ccgacccgac aacgcttacg acgacgacgc cgacgccacc 540 gcctgctgcg ccttgtactc catgcccttc tgcaccgcct tggagcccag gtccgccgcc 600 gccgacgtgg cctcggccac gatggagccc gactgcgcct tggcctcgga gatggcgccg 660 tcgatgcgcg actcgtgctg cttgaggaag ggcgcgagga agtgcgagta gaggaagccg 720 gcgccctgcg tggacggcag gaagcaccac acgaggaagc cgagcttgaa cgcgtagtac 780 agagggatcc actgcagaag cgtgtccacg aagacctcca tcatcgagaa gaaggcgtac 840 acgacccagt aggtgagcca ctgcgtgtcg tcgtcgccct cgggcgactc gatggccttg 900 aagctcatgt aggccgggta gacgaagccc accaggttgc agagcaggcc ggcgccaaag 960 ccgaagaaga gaatgagcgt gaagacgacg gcgccgcccg ccgtgaggta gagcttgggc 1020 acgcccgtct gggtctccag cttgcccagc agcgggtact tgtccaggtc ccgcgcgaac 1080 ttgtccatca tcgtcttggc ttgctccatg gttgggctgt gacgcgtggg tgcgcgtccc 1140 gccatcggcg agtcgcgggg gcgcggggct ccgcgggggg ctcggggcgc gcgcgcgcgg 1200 c 1201 <210> 38 <211> 680 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 38 tttttttttt tttttcaccg aaaccaaccc ttcaatgcgc caacgcacac aaacgaccga 60 tgccccccgc ccgtccgccc acgaatggcc ggcggcaggg gtcctagccg cttacgcctg 120 ctgggcgcgc gagccgcggc agcgcttgac cggggcggcc ttgcgcacgg acttcttgac 180 gttggacacg ctcttgcagc ggttgtagcg cgccagcacc ttctgcttga ggtcgctgcg 240 gtagtggttc ttgttcgtct gcttgttgag cgaggccacc gagcggcgga agttcttgtt 300 caggggcgtg acggcgaacg acgtcttcgg cgcgttgccc gagcgcgtgg ccttggtggc 360 catcgtcacg tccttgccct cggcgccgcc gacggacacg tccacggcgc gcgagttggc 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cava <400> 40 gtggggcgcg gccgttcggc tgcagcggtg ggtcgtccag cggcgcccgc ctcccgtcgt 60 ggactccgac gtggagctga gcgaaaccaa actccctgtt cgttcgaact gaaggtctac 120 gccttgaccg cgtagcggcg cagcgggtag ttggcgtcgc gcttggcctg gcgcgccgtc 180 ttggcggcgg cgtgcttggg cgcgaggcgg cggcggatgg cgcgggtctt cttggagcgc 240 aggtcgaggg gcaggtgctt gaccttctcg gccgtcatgc gcgcgcgcag cttctcgcgc 300 tgcgtctgcg agtagaccgt cttcacgcgc gcgatggact tgcgcacgct gccgatcttg 360 gccagcttgc tggcggcggc gcccgccgtc tgcgcgacgc ggagctgcga cagctcggtc 420 ttgagctcca cgagctgctg ctccagctgc gacttgctct tctggcggag gtccgcggcc 480 cggatcttgc ccatgttgct ggaggccagg 510 <210> 41 <211> 501 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 41 ggcgcgccga tcgccgtggc gggcaggttg gtgcggaagt tggcgcggac gacgccgttg 60 gtgccgtggg cgcgcgtcac cttgccccag accacgcggc agtcgtcggc aaggggtcgt 120 cggcaagggg tcggcggtcg tcggtgtagc ggcagtcggg aaagcaaacc aacgcctttc 180 aagaggctac gacatcggag ctctagtcgt gctgggggta cagcatgatg cgcaccggcg 240 cgccgatcgc cgtggcgggc aggttggtgc ggaagttggc gcggacgacg ccgttggtgc 300 cgtgggcgcg cgtcaccttg ccccagacca cgcgggccca ggtagtactg ggtcgccttc 360 ttgtcctcga cgccctggat cttgatcagg ctcgtcttag ggtactgcgt gcgcagcccg 420 cgcaggtagc tcgtgacgac gcccttgacg taaaggcgaa ccggctggtg atcggcggac 480 atcctgcgtg gcctcgatga g 501 <210> 42 <211> 381 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 42 ctccagtgtt tgacatcaac tcgctcacaa gaccccacca cgtactactg ctacgtcgct 60 tgtattcccg tgctacacta catagcccgt tcaaacgtcg tccatgacgc gacacaagcg 120 cgccaccatg gagcgcgtcg tggcagccga cggcgtgttc aacatgtacg cgccgcccgc 180 aatcatcttc ttgcacttcg agcacttcca gatgcccgcg cacgtgcgct taatcatgtc 240 cttaccacag aacacgcacg tgtacttggc gtgctgcgcg acctccaact tacggatgat 300 cttgcgcagc aacgcaccgt agcgggtacc gtacttgccc gtgatgccaa ccttgcgcgt 360 gcgcttgccc attgttgtct g 381 <210> 43 <211> 552 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 43 ctgaaccagc tttcaatgac gcctcccaac ttgcctccga cacggacgac cgacggacga 60 ccgacacggg cgaccgaccg tcaccgacgg gcgaccgacg gccagcttga aggtcctggc 120 gcgtcaggcc cggcgccttc tcctggtcgg ggggtggggc gcggcctggt cgggaccgtc 180 gggtggggcg cggcctggtc cggttgggcg cggcgcgcag aactgaacca gccttcaatg 240 acgcctccca acttgcctcc gacacggacg accgacgacc gacggacgac cgacacgggc 300 gaccgaccgt caccgacgga cgaccgacgg ccagcttaaa ggtcctcgcg cgtcaggccc 360 gggggcagcg actgcaccag cttctcggcc ttctcctggt cgggcaccga gagcgtgtag 420 aggtagcgcg agcagcggat cttgaacttg gtcacgcggt gcgtcttctt gatcttgacc 480 ttgcgggcgt ccttccggcg cgccgtctgc aggaactcgc ggatgtcggt aagctggcgg 540 ggcatctctg gt 552 <210> 44 <211> 598 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 44 gggcaagcga acttcttcaa accagctatt cctcctgcgg gatggcgccc ttggtctcga 60 cgtagatacc gtcgaggaac ttgcggatat ccttgttctt gaccatcgtg gcgccgtgga 120 tgttcgacgc ggtgagcgag accgtgtgga tgtcgttgcc cgtgagcacg agctcgtcct 180 tgacgttggc cgagcgctcg gccgtgacac ccggctgcag cggcacgcgg cgcacgcggc 240 gctcgccgac gaagttgcgg atctccacct tgttgtcctg cagcgtgacg ttgatgggga 300 aatgcgcgta cacgaagcgc agcttgtact ggaagccctg cgtcacgccc gtgatcatgt 360 tggtgatgtg agaggccagc gtgcggatcg tggccatctg cttcttgttg ccgaaccaca 420 tgtcgatgcg cagcgtgttg cccgtcttct gcatgtccac gttcaggtgg cggaagtcct 480 tcgtcagctc gccgcggggg ccggtgacct tgaccacgcg accgccgacc tcgagggtga 540 cgttgtcggg gatgttcagc gtgcgggtgg tgagaatctg gcgcatggtc ctctcgct 598 <210> 45 <211> 523 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 45 tttttttttc gccagaaaca gccctttttt ccacccggat ccccgcgagc gaggctccgc 60 cacaaacgtc gatgggcatc gtcgcgttta acggtagctc ttctgccggc gcgtgcgcgc 120 cgacttgccg ccgaacttct tcgactcgca gcgacggggg tcggcgacga gcagcgtgcg 180 gtcgtacgtc atgagctggt tcttgatctc gttcttcgag gcctcatcga cgttgcgctg 240 gtagtacgcg acgagcgact tggcgatggc ctggcgcacg gcgtagatct gggccgtgta 300 cccgccgccc ttgacgcgca cgcggatgtc gacgttggcg aacttgtcct ggccgagcag 360 gagcacgggc tcgaacgtct tgatgcgcag gatctcgggc tgcatcaggt cgagcggctg 420 cccgttgacg cggatgatgc cgcggccggc cttgcagatg gcgacgctcg tggcgttctt 480 cttgcgtccg tagacctgaa ctgcgtccgt catggtcgtg gct 523 <210> 46 <211> 501 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 46 tttttttttt tgaaagaatc cctgatttga ttcccgacac gaccgtagca ctgcaagcct 60 tacttgttgt ccgggcgacg gcggaagcgc tgcggcggcg cgcggttctt gcggcacgcc 120 tcaccctcag cgaccttgcc ctcgcggcgg cggcagcgca cgacgtgcgc gtggcaggcg 180 cacgagacgc agtactgcat cttgacgtac agcttgggca gctggtacac ctcgtaggcc 240 gaggcgtcct tcacgtcgcg ctgcgccgcc atgtcgacga tgttgcgcac gaggaagcgc 300 ttgatggcct tgtccttggg gacgcagcgg ccgcagttgg agcagcggat gggcttgacg 360 tggccgcggc ccttcttgga ccgaccacag ttacggcgct tgaaagtcat ggtgctgggc 420 ggagaagagc gggggagagc ttgctcgcga aagcaaactc gggtctgcgg gcggcgggtg 480 agcgggtgag cgggcgggtc c 501 <210> 47 <211> 385 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 47 tttttttttt agagatccac gagtctttca ttcccggccc gccgcgactg atgccggacg 60 gccagtagcc gcatcacagc tcacacggca gctcgcagca gcccgcgcgc gcgcacctgc 120 ccgcgcacga agcccctgcc gctgctactg ctactgctgg ggcgacgcgc ttaacgcagc 180 cggcgcgcct cgcgctccca ctcgagcagg cacagaatgt cgccctcccg cacggggccc 240 ttgacgttgc ggatgatgga gcggctgggg tcgtcgtaga actcgacgcg cacctgcgtc 300 acgttgcccg tgttgccggt gcggcccaga acacggttca ccttggcgag cttcacgggc 360 tggtccatgc tgctggtctc tgaag 385 <210> 48 <211> 1418 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 48 ttttttttca ggacgaaaaa cagttcgttc agcttgggct aaggcaacgc cagcgccgcc 60 tccaccagct tcccgtagtt gggcgtgccg acgcccgtga ccgggtccca gcccgcctgc 120 gcctcgaagc cgtcggtgcc gcagcccggg ttgttgccct cggtgatgtc gttgaagagg 180 tccgcgttgt cgtagatgaa ggggttgagg aagcccatcg acgtcttgcc cgcggccgcg 240 cgcgcgtcgt tgatgaggcc cacgacggcc gcaaacgtcg ggcacgccgc cgacgtgccc 300 gccacgccgg gcatcacggc gccgtagatc tccacgttga agttcatggc ctgcgccgac 360 acgtcgggga agccgcggcc cgtctggttg tagagcgagg cgtcgggcag gtcggcggcc 420 gacttggccc aggcgtcgac ggcgtcggtc tggtagctgg ggcgcgacca gcggtcgctg 480 aagccgcccg acgagaggcc cgcgcccttc tcgggcgccg acgagtgcgt gccgcccacg 540 gccgtcacgt agggcgacgc cgacggccac tgcggcgcga agacggtgca cgagtcggtg 600 gccgagccca cgcccgagtc gccgctggcg aacatgatgg agatgccgcg caggccctgc 660 tcctgcgtct cctgcacgac gcggttggcg tagtccatgg ggatcgtggc ctcgtcctcg 720 ccgtacgaca cggagaagag cttgggcacg tcggcgtcgg tcgtgttgcc gacgttgtag 780 agccacgtga ggaagggctc gtcctcgtcg gagaactcgg tgcggcccgc cgtgtaccag 840 atctccgtcg ccacgttgct cgccaccgac gtgatcgtct cggcgtcgag catcgactcg 900 atgccgggct tcttctccga gttgtcgccc acaaacacca ccgacgtggt gttggccgag 960 ggcatgtact tggcccagaa cttctccagg tccgacgtgg acacgtactg ctcgaggaac 1020 gaggccacgg cctgcttggc gtcggggttg ttggtgccct cgacgtcgtc gccgatggag 1080 tacaggtcgc gcagcaccga gggcgtgttg gtggtcacgt cgggctcgac gctcgtgacg 1140 gccagctgct gcacggccgg caggcgcacc gtgggcgaca caaagtcgac gtgctcggcg 1200 accgactcgg gcagcgagta gcccgcggcc gtggtgcgga tggccaggcg gcccgtctcg 1260 cggtggcggt aggccttgta ctcggcgccc agcatgcgct cggccgtggc cacgtcgacg 1320 acggcgctga tcatgtcgcc gttggcgctc tgctcgacgg cggcgtcggc aacgccgaag 1380 cgctgcagca gcgcgcgcac ggcggccacc gactcggg 1418 <210> 49 <211> 2080 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 49 acggaaatga aagggtttag ggtacttctg ggccgctggg ccgcacttcg atccccactc 60 cgttcggagt tcgccgcccg ccgcacgact gacgcggcaa gacgacgacg acgacggccg 120 agggacctta aaccgtgctc ggcacgctct ggtagtgccc aaacgcgctc ttcttggtgt 180 cggcgaggta cttgcgcagc ccgtcgccgg cgaactggcc gcccgtgtcc tggtcgtcgc 240 agtagcacag caggatggtg tcgatgctca tgctgaacac ggccaggaac gacgtggcca 300 cgccgtaggc catgatgccc gtcaccagca gcgggaagat gggcgacgag atgtcggcca 360 cgtcgccgag cgccgtcgcc ggcatgttct ccggcgggtc gtcgatcacc gtgaacatgg 420 ccagcatgct cagccccacc acgcccacct tgcccatgag gatcaggtac gagctgatga 480 tgttcaccgt ggccaccgac gccaggttgc ccagcacgag gtcgaacgcg cgcttcatgg 540 ccgagcagaa cgacgagccc ttcatggcga cgatgatgta cgcgttgaag ctgatgaact 600 tgaggcactt ctcgaagcac cacaggtaca cgcggcagca gcagagggcc atcttgacga 660 tcttgttgtc gtcctgcagc tgcttcgtct tctggtcaat gtactcggcg atgatgcgca 720 tcagctgcac gatggccacg atgagcgagc ccaggatgag cgagcccagg tggtacttga 780 acgcgcgctt gaacgagcgc cacacgggcg agggcttcag ctcgcccttg tccatcgtga 840 agtaccactc gcacacggcg cccgccacgg tgcacatcag tacggccgag accagctggt 900 tgacccacag cagcccgaag aggtggtaga gcatcaggta cggcccgatg tcgtcctgcg 960 actggtccac ctcgatctcg ctgcccgtgt tggggtccgt gtacgactcg gtgatgtccg 1020 acgtggtgat gttctccgcc gaggcgatgt acatgccgaa ccagacccag atgccgagcc 1080 ccacgagcat gaaggccgcg gccgccatgg gcgtcagcgc cagcgtaggc atggcggcca 1140 gcgcgtgcga ggcctccttg acgatgccga tggccacgtt gatgcgcgag cgcaggaaga 1200 tgagcgccag cagcacaatg acgtcggccg cgatgaagca gtaggccgcg taggcgtagt 1260 agtccttcag gtccgacgcc tccaggtccg tcggctgcgc ctcgtcctcg ttcacctggt 1320 acaggtaccg gtccagcagc ccgccgcggt cgcacaggaa aatcgtcgcc gccagcagga 1380 tcgcgcacat gaggataatc gtgctccaga ccatgcactt ggcgaaccgt ttcaggagga 1440 tgatccacac gaacgacgcg gccagcgcca cgaagccgcc gcacagcatg atcgcggcct 1500 cggccttctc cacgtcgccg atccagcgcg ccaccagctg cccgcccgag ttgagcatgt 1560 cgtacagcgg gtcgtcctcg gcctccttga ccacgtactt ctccgtgtac gtctccgagg 1620 tgatgcactc gggctcgttg tcctccagca cctcgtcgca gtcgcggtcg ccgcacgagt 1680 acgacacgcc cgagtcgggg ttgacgcagc ggatcaccga cgtctcgtcc acgtccttgt 1740 tgctcaggca gcggaacagc accgacaccg tgtccatcgg gatcacccac ggcgagcccg 1800 ccgactcggc gccctcctcc acaaactcgc cgtcggccag catcgggcac tcgtccacgc 1860 acacgccgta gaacgggatg tcgaacgggt tgccgccgca gctggggtcg aaggggcacg 1920 aggcctgcga gtaggcccag ttcaggtcct ccgtgatgcg cgggtagtag atgttcttct 1980 tgtcagagta cttgccgtag ccgcacacgt cgccattgtg gtcggtgccg tagatcaggc 2040 gctcgggcat gcccttggcg tagcccacga agcagatggc 2080 <210> 50 <211> 1169 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 50 cccgagtccg ggcgtttgcc caccaccgac acgcggtggt cctggttggt gccgctgttg 60 gcgttgtcga agacgccgcc cgagtacagc tggaacgcca gcttgtcggc ctcgatggcg 120 accgagacga ccgtctgcgc ggccgcggcc tgcagcgagt cctcgtcgtc ctcgggcacg 180 tccgtgaacg aggagatctg ggccgcgggc gagcagctct ggcacgagcc gtccttgccc 240 gtgtacgagt agtccgactc gaggcactgg ccgccgttgt cgatgatgta ctggaacgcc 300 gtgtccatga ggccgccgtt gcagccgtcg tccgtcgtgt cgcagtcgac gatctgctgc 360 tccgagagcg acacgaggtc gcccgtggcg atggcgtgcg cgccctcgat cgaggccgtg 420 gccgagaagg cccagcacga gccgcactgg ccctggtcct tgacgtcgtt gacggcgccg 480 ttgtcgcgcc agtcgaccga cgagtccagc gaggacacgt cgacgtcgcg gccttgaact 540 cgtcccacgt caggtgcgag taggcgttgt ggccgagcgt gtacgacagg cccttggcgt 600 tgtgctcctt gatgtaggcg tcgttctccg cgaagacgtc gaggcgcttc acgtactccg 660 tgggcgtgaa ctcgaagccg tgctcctggc gccaggcctc gaagcgcatc tcgatggcct 720 tgcggaccgt ggtctcgctg gcgtcgaccg tgatggtgcc gttgatgcac gtgtagaacg 780 cgctcttgtc ggcggggttc gcctgccagc gcaggaagcc ggggcccgag ggcgcgtcgg 840 cggggaccgt gaagggcagg tcggccgtcc agtcgccctt ggtgccctgg ccggggcacg 900 agatgccgta gtcgcacagc accagctccg tctggttggc cacgccggcc gtcatcacgc 960 tcatcaggcc ctgcccgccg gggatgtcgt catcggcgtg gccggccagc gacagcgtgt 1020 acgtctcgcc gggcgccacc gtggacggcc agtcggcgct cgtgacgccc cacacgtcgt 1080 cgttgcactt ctcaaagtcc gaggcggcgg cgaagccgag gacagcggcg gcggtgagct 1140 tgaacatggg taacgttatc gagtttcct 1169 <210> 51 <211> 927 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Ecklonia cava <400> 51 cgacaagaca ccagcagtag catcagcagc acgggcacca gcagcggtgg cggcaagcga 60 ctggccgaca ggccgctcaa agcaaaaatc gagacacctc gtcctcctcg ggtatgcgac 120 acgagaggct ttccgtcccg aaggcgtgtc ttcttcggct aacccaggcg tacatctcgt 180 cgcgcacgct ctcggggacg gcgttgaaca acgccgccag caaggggtaa ggagcgttca 240 tccgagacat gatctccaca agtgccgacg agcgcgtgaa caggtgcccg tccttgttaa 300 ggacggcgat gctgctcaga cgctcctggt cttgcccgaa ggagtggagg agcgacagac 360 ccatctcgct gttttgggcg cagaagcgca tgttcccggc gtccgagtta gaaatcatca 420 tccacacgcc agagttgcag aagttgcact cgccgtcgaa gagcaccacc gcgctgtccg 480 cgcactggaa cactgcgtgc tccaccccac ctctcacgtg cgcatcgccc caaaaccaac 540 tgtcgaagtc actccctgac acgttcgggg tcctctccga ctgcggcggc accgtcgagc 600 tcatccccac cacatgtcgg catggccggg gcgttgtttt atgtcgggat tcgactcggc 660 ccacttggtt gccaagtgtt gctgcggact tgccaccaat agttgtgcga acaaccgagg 720 gaaccgcgaa cccagcggcc ccgtgcgcga gcaagagcac tgctgttgcg aacagtccgg 780 tagagtgcat gctgtgaggt gtgttgatgc gactctaggc tctgcacgag gaggcgcgta 840 gggctcgggc ggcgagacgg ctccgatggc gaaggcgaac gaatggagac taagcgtgga 900 agcaaagtcg aagaagaagc agcaggc 927

Claims (12)

  1. 하기 모든 유전자의 핵산 서열의 올리고뉴클레오티드 또는 그의 상보가닥 분자가 모두 집적된, 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 마이크로어레이(microarray):
    서열번호 1로 기재되는 유전자, 서열번호 2로 기재되는 유전자, 서열번호 3으로 기재되는 유전자, 서열번호 4로 기재되는 유전자, 서열번호 5로 기재되는 유전자, 서열번호 6으로 기재되는 유전자, 서열번호 7로 기재되는 유전자, 서열번호 8로 기재되는 유전자, 서열번호 9로 기재되는 유전자, 서열번호 10으로 기재되는 유전자, 서열번호 11로 기재되는 유전자, 서열번호 12로 기재되는 유전자, 서열번호 13으로 기재되는 유전자, 서열번호 14로 기재되는 유전자, 서열번호 15로 기재되는 유전자, 서열번호 16으로 기재되는 유전자, 서열번호 17로 기재되는 유전자, 서열번호 18로 기재되는 유전자, 서열번호 19로 기재되는 유전자, 서열번호 20으로 기재되는 유전자, 서열번호 21로 기재되는 유전자, 서열번호 22로 기재되는 유전자, 서열번호 23으로 기재되는 유전자, 서열번호 24로 기재되는 유전자, 서열번호 25로 기재되는 유전자, 서열번호 26으로 기재되는 유전자, 서열번호 27로 기재되는 유전자, 서열번호 28로 기재되는 유전자, 서열번호 29로 기재되는 유전자, 서열번호 30으로 기재되는 유전자, 서열번호 31로 기재되는 유전자, 서열번호 32로 기재되는 유전자, 서열번호 33으로 기재되는 유전자, 서열번호 34로 기재되는 유전자, 서열번호 35로 기재되는 유전자, 서열번호 36으로 기재되는 유전자, 서열번호 37로 기재되는 유전자, 서열번호 38로 기재되는 유전자, 서열번호 39로 기재되는 유전자, 서열번호 40으로 기재되는 유전자, 서열번호 41로 기재되는 유전자, 서열번호 42로 기재되는 유전자, 서열번호 43으로 기재되는 유전자, 서열번호 44로 기재되는 유전자, 서열번호 45로 기재되는 유전자, 서열번호 46으로 기재되는 유전자, 서열번호 47로 기재되는 유전자, 서열번호 48로 기재되는 유전자, 서열번호 49로 기재되는 유전자, 서열번호 50으로 기재되는 유전자, 서열번호 51로 기재되는 유전자.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 유전자는 감태(Ecklonia cava) 암배우체로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 마이크로어레이.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 마이크로어레이는 기후변화에 의한 해수온 변화에 대응하는 감태 암배우체의 반응을 확인하는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 마이크로어레이.
  4. 1) 실험군인 감태 암배우체와 대조군인 감태 암배우체에서 각각 RNA를 분리하는 단계;
    2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA로부터 cDNA를 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지 하는 단계;
    3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 마이크로어레이와 혼성화시키는 단계;
    4) 반응한 마이크로어레이를 분석하는 단계; 및
    5) 분석한 데이터에서 제 1항의 마이크로어레이에 집적된 유전자 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측 방법.
  5. 제 4항에 있어서,
    단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측 방법.
  6. 1) 실험군인 감태와 대조군인 감태에서 각각 RNA를 분리하는 단계;
    2) 단계 1)의 RNA를 하기 각각의 유전자에 상보적이며 유전자 증폭이 가능한 프라이머 쌍 모두를 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계:

    서열번호 1로 기재되는 유전자, 서열번호 2로 기재되는 유전자, 서열번호 3으로 기재되는 유전자, 서열번호 4로 기재되는 유전자, 서열번호 5로 기재되는 유전자, 서열번호 6으로 기재되는 유전자, 서열번호 7로 기재되는 유전자, 서열번호 8로 기재되는 유전자, 서열번호 9로 기재되는 유전자, 서열번호 10으로 기재되는 유전자, 서열번호 11로 기재되는 유전자, 서열번호 12로 기재되는 유전자, 서열번호 13으로 기재되는 유전자, 서열번호 14로 기재되는 유전자, 서열번호 15로 기재되는 유전자, 서열번호 16으로 기재되는 유전자, 서열번호 17로 기재되는 유전자, 서열번호 18로 기재되는 유전자, 서열번호 19로 기재되는 유전자, 서열번호 20으로 기재되는 유전자, 서열번호 21로 기재되는 유전자, 서열번호 22로 기재되는 유전자, 서열번호 23으로 기재되는 유전자, 서열번호 24로 기재되는 유전자, 서열번호 25로 기재되는 유전자, 서열번호 26으로 기재되는 유전자, 서열번호 27로 기재되는 유전자, 서열번호 28로 기재되는 유전자, 서열번호 29로 기재되는 유전자, 서열번호 30으로 기재되는 유전자, 서열번호 31로 기재되는 유전자, 서열번호 32로 기재되는 유전자, 서열번호 33으로 기재되는 유전자, 서열번호 34로 기재되는 유전자, 서열번호 35로 기재되는 유전자, 서열번호 36으로 기재되는 유전자, 서열번호 37로 기재되는 유전자, 서열번호 38로 기재되는 유전자, 서열번호 39로 기재되는 유전자, 서열번호 40으로 기재되는 유전자, 서열번호 41로 기재되는 유전자, 서열번호 42로 기재되는 유전자, 서열번호 43으로 기재되는 유전자, 서열번호 44로 기재되는 유전자, 서열번호 45로 기재되는 유전자, 서열번호 46으로 기재되는 유전자, 서열번호 47로 기재되는 유전자, 서열번호 48로 기재되는 유전자, 서열번호 49로 기재되는 유전자, 서열번호 50으로 기재되는 유전자, 서열번호 51로 기재되는 유전자; 및
    3) 단계 2)의 유전자 산물을 대조군과 비교하여 발현 정도를 확인하는 단계를 포함하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측 방법.
  7. 제 1항의 마이크로어레이를 포함하는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트.
  8. 제 7항에 있어서,
    상기 키트는 기후변화에 의한 해수온 변화에 대응하는 감태 암배우체의 반응을 확인하는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트.
  9. 제 7항에 있어서,
    상기 키트는 스트렙타비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(streptavidin-like phosphatase conjugate), 화학 형광물질(chemifluorescent) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 이루어진 형광물질 군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트.
  10. 제 7항에 있어서,
    상기 키트는 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, dNTP 및 rNTP, 표식시약, 및 세척 완충용액으로 이루어진 반응시약 군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트.
  11. 하기 각각의 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍 모두를 포함하는 감태 암배우체의 해수온 변화에 의한 스트레스 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트:
    서열번호 1로 기재되는 유전자, 서열번호 2로 기재되는 유전자, 서열번호 3으로 기재되는 유전자, 서열번호 4로 기재되는 유전자, 서열번호 5로 기재되는 유전자, 서열번호 6으로 기재되는 유전자, 서열번호 7로 기재되는 유전자, 서열번호 8로 기재되는 유전자, 서열번호 9로 기재되는 유전자, 서열번호 10으로 기재되는 유전자, 서열번호 11로 기재되는 유전자, 서열번호 12로 기재되는 유전자, 서열번호 13으로 기재되는 유전자, 서열번호 14로 기재되는 유전자, 서열번호 15로 기재되는 유전자, 서열번호 16으로 기재되는 유전자, 서열번호 17로 기재되는 유전자, 서열번호 18로 기재되는 유전자, 서열번호 19로 기재되는 유전자, 서열번호 20으로 기재되는 유전자, 서열번호 21로 기재되는 유전자, 서열번호 22로 기재되는 유전자, 서열번호 23으로 기재되는 유전자, 서열번호 24로 기재되는 유전자, 서열번호 25로 기재되는 유전자, 서열번호 26으로 기재되는 유전자, 서열번호 27로 기재되는 유전자, 서열번호 28로 기재되는 유전자, 서열번호 29로 기재되는 유전자, 서열번호 30으로 기재되는 유전자, 서열번호 31로 기재되는 유전자, 서열번호 32로 기재되는 유전자, 서열번호 33으로 기재되는 유전자, 서열번호 34로 기재되는 유전자, 서열번호 35로 기재되는 유전자, 서열번호 36으로 기재되는 유전자, 서열번호 37로 기재되는 유전자, 서열번호 38로 기재되는 유전자, 서열번호 39로 기재되는 유전자, 서열번호 40으로 기재되는 유전자, 서열번호 41로 기재되는 유전자, 서열번호 42로 기재되는 유전자, 서열번호 43으로 기재되는 유전자, 서열번호 44로 기재되는 유전자, 서열번호 45로 기재되는 유전자, 서열번호 46으로 기재되는 유전자, 서열번호 47로 기재되는 유전자, 서열번호 48로 기재되는 유전자, 서열번호 49로 기재되는 유전자, 서열번호 50으로 기재되는 유전자, 서열번호 51로 기재되는 유전자.
  12. 제 11항에 있어서,
    상기 키트는 기후변화에 의한 해수온 변화에 대응하는 감태 암배우체의 반응을 확인하는 것을 특징으로 하는 감태 암배우체의 고온 및 저온 스트레스에 대한 노출 여부 확인용, 또는 감태 암배우체의 생리 또는 대사 변화 예측용 키트.
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