KR102219249B1 - 녹농균 검출용 중합효소연쇄반응 키트 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 중합효소연쇄반응 키트에 관한 것으로, 본 발명의 중합효소연쇄반응 키트는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)을 매우 높은 정확도로 간편하게 분석할 수 있다. 특히, 식수 또는 식품 등에서 녹농균을 신속하게 검출할 수 있는 장점이 있다.

Description

녹농균 검출용 중합효소연쇄반응 키트 {Primer sets for detection of Pseudomonas aeruginosa, polymerase chain reaction kit thereof}
본 발명은 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 중합효소연쇄반응 키트에 관한 것이다.
녹농균(Pseudomonas aeruginosa)은 자연환경에서 쉽게 발견되는 호기성 그람 음성 간균으로, 면역이 결핍되면 기회주의적 감염을 유발하는 병원체이다. 감염경로는 호흡기, 소화-배설기관, 화상 부위, 상처 등이며, 인체에 감염되면 균이 생산하는 형광성 색소인 피오시아닌에 의해 녹색 농을 형성하고, 패혈증을 유발한다.
녹농균(Pseudomonas aeruginosa)은 주변 토양, 물, 피부 등에 널리 분포하며, 표면에서 빠르게 증식하여 의료용 설비와 장치에서 빈번히 검출되므로 병원에서의 교차 감염을 유발하는 주요 세균으로 인식되고 있다. 한편, 식수의 수질기준 중 미생물에 관한 기준에 따르면 식수 250㎖에서 녹농균은 검출되지 않아야 하므로, 식수를 판매하는 식품회사에서는 신속하게 녹농균을 검출할 수 있는 방법의 개발이 시급한 실정이다.
미생물의 탐지법 중에 가장 많이 사용되어온 방법은 배양법 (culture-based method)으로, 정확도는 높지만, 많은 샘플을 동시에 처리하기가 어려우며, 최소 24시간 이상의 농화배양(enrichment culture)을 필요로 하고, 농화배양 후에도 선택 배양, 확정 시험단계가 필요하기 때문에 이러한 전통적인 배양법은 노동 집약적이며 많은 시간이 소요된다는 단점이 있다.
이 외에도 최근에 배양을 이용한 방법 (culture-based method)을 대체하는 방법으로, 중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction, PCR) 및 항체를 이용한 면역학적 탐지법이 개발되었지만, 면역학적 방법은 실험과정이 간편하나 민감도가 낮고, 다양한 병원균을 탐지하는 데 신뢰할 만한 도구로 사용되어 온 중합효소연쇄반응은 증폭 산물 (product)의 분석을 위한 전기영동 (gel electrophoresis) 과정이 필요하기 때문에 시간이 많이 소모되고 노동 집약적이다.
그에 반면, 실시간중합효소연쇄반응 (real-time polymerase chain reaction, Real-Time PCR) 기법은 증폭 산물 (product)로부터 발생하는 형광의 강도(세기)를 탐지하는 방법으로서 전통적인 중합효소연쇄반응법에 비해 더 신속하고 민감하게 결과를 확인할 수 있으며 분석이 매우 간단하다. 또한, 증폭 산물을 분석하기 위한 전기영동 (gel electrophoresis), DNA간 혼성 (DNA-DNA hybridization), 시퀀싱 (sequencing)과 같은 추가적인 실험이 필요하지 않는 장점이 있다.
대한민국 등록특허 제10-0353506호(2002.09.09)에는, 녹농균 동정 및 감염 진단용 프라이머에 관하여 기재되어 있다. 대한민국 등록특허 제10-1247457호(2013.03.19)에는, 슈도모나스 속 균주의 검출방법에 관하여 기재되어 있다.
본 발명은 긴 검출시간과 슈도모나스(Pseudomonas) 속 간의 구별이 어려운 배지법의 단점을 보완하기 위한 노력의 일환으로, 녹농균의 특이적 검출이 가능한 중합효소연쇄반응 키트를 개발하여 제공하고자 한다.
본 발명은 toxR 유전자를 포함하는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 바이오 마커 조성물을 제공한다.
본 발명은 toxR 유전자의 전부 또는 일부를 클로닝하는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 프라이머 세트를 제공한다. 이때, 상기 프라이머 세트는, 바람직하게 서열번호 1에 기재된 핵산서열로 이루어진 정방향 프라이머와 서열번호 2에 기재된 핵산서열로 이루어진 역방향 프라이머로 구성된 것이 좋다.
본 발명은 상기 프라이머 세트를 포함하는 것을 특징으로 하는 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction)용 키트를 제공한다. 이때, 바람직하게 서열번호 3의 핵산서열로 이루어진 탐침(probe)을 더 포함하는 것이 좋다.
본 발명의 중합효소연쇄반응 키트는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)을 매우 높은 정확도로 간편하게 분석할 수 있다. 특히, 식수 또는 식품 등에서 녹농균을 신속하게 검출할 수 있는 장점이 있다.
도 1은 타사 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과이다.
도 2는 타사 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과, 검출된 위양성 균주를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과이다.
도 4는 본 발명의 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 최소 검출한계 검증 결과이다.
도 5는 식수의 수질검사 적용 실험 결과이다.
본 발명은 긴 검출시간과 슈도모나스(Pseudomonas) 속 간의 구별이 어려운 배지법의 단점을 보완하기 위한 노력의 일환으로, 녹농균의 특이적 검출이 가능한 중합효소연쇄반응 키트를 개발하여 제공하고자 한다.
이를 위하여, 본 발명은 toxR 유전자를 포함하는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 바이오 마커 조성물을 제공한다.
본 발명에서는 기존에 알려지고 보고된 녹농균 유전체 염기서열 187개를 이용하여 생물정보학적 분석방식을 활용해 비교유전체 분석을 수행하였다. 본 발명자들은 유전자 정렬 (gene alignment) 과정을 거쳐 상동성이 높은 유전자로, toxR 유전자를 발굴하고 이를 바이오 마커로 활용하고자 하였다. toxR 유전자는 외독소 에이 단백질(Exotoxin A protein)의 발현을 조절한다.
한편, 본 발명은 toxR 유전자의 전부 또는 일부를 클로닝하는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 프라이머 세트를 제공한다. 이때, 상기 프라이머 세트는, 바람직하게 서열번호 1에 기재된 핵산서열로 이루어진 정방향 프라이머와 서열번호 2에 기재된 핵산서열로 이루어진 역방향 프라이머로 구성된 것이 좋다.
본 발명의 프라이머 세트는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)을 매우 높은 정확도로 간편하게 분석할 수 있다. 특히, 식수 또는 식품 등에서 녹농균을 신속하게 검출할 수 있는 장점이 있다.
본 발명은 상기 프라이머 세트를 포함하는 것을 특징으로 하는 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction)용 키트를 제공한다. 이때, 바람직하게 서열번호 3의 핵산서열로 이루어진 탐침(probe)을 더 포함하는 것이 좋다.
본 발명의 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction)용 키트에 있어, 상기 서열번호 1, 서열번호 2에 기재된 프라이머 및 서열번호 3에 기재된 탐침은, 바람직하게 중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction)을 위한 워킹볼륨 (working volume) 20㎕에 대해, 10pmol의 농도로 첨가되어 사용되는 것이 좋다.
하기 실험에 의하면, 본 발명의 프라이머 세트를 이용할 시, 위양성 결과가 검출되지 않았고, 1×101~2 CFU/㎖ 수준의 검출한계를 나타내어 매우 검출감도가 높은 것을 확인할 수 있었다.
한편, 본 발명에서 개발한 프라이머 세트는 PCR에 사용되는데, 검체를 대상으로 하여 PCR을 수행할 경우, 상기 콜레라균을 검출할 수 있게 된다. PCR용 키트에는 본 발명의 프라이머 세트 외에 버퍼, dNTP 등이 첨가될 수 있는데, 이는 공지의 것을 특별한 것에 한정하지 않고 사용할 수 있으므로, 이에 대한 구체적인 기재는 생략하기로 한다.
한편, 본 발명의 중합효소연쇄반응용 키트에 있어서, 상기 중합효소연쇄반응은, 바람직하게 실시간중합효소연쇄반응인 것이 좋다. Real-Time PCR을 수행하면, 연쇄중합반응 결과 산물을 실시간으로 정량적으로 확인할 수 있어, 현장에서 녹농균의 감염을 즉시 확인할 수 있는 장점이 있다.
이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[ 실시예 1: 본 발명의 녹농균 검출을 위한 중합효소연쇄반응용 키트의 개발]
본 발명의 녹농균 검출을 위한 중합효소연쇄반응용 키트를 하기 표 1, 2와 같은 구성으로 개발하였다.
프라이머 세트
Sequence (5'→3')
Forward primer (서열번호 1) GAC TGC GAC AGA CAG AAC
Reverse primer (서열번호 2) CCG TTC CTC GCA TAG ATG
Probe (서열번호 3) 6-FAM CGA ATC CGT CGT TCG CRT CAC G BHQ-1
* R = A or G
프라이머 세트 키트의 조성
투입량(㎕) 농도(pmol)
MG 2X mastermix 5 -
Forward primer 1 10
Reverse primer 1 10
Probe 1 10
ROX 0.4 -
DW 8.6 -
DNA 3 -
Total 20 -
[ 실험예 1: 슈도모나스( Pseudomonas ) 속 균주의 위양성 검증 실험]
실시간중합효소연쇄반응 (real-time polymerase chain reaction, Real-Time PCR)을 진행하였을 시, 타사 프라이머 키트와 본 발명의 프라이머 키트가 대상 균주를 특이적으로 증폭하는지를 확인하기 위하여 실험을 진행하였다. 타사 프라이머 키트는 Kogene biotech사의 Powerchek™ Pseudomonas aeruginosa Real time PCR kit를 사용하였고, 컨트롤(control) DNA는 타사 프라이머 키트에 포함된 포지티브 컨트롤(positive control) DNA를 이용하였다. 위양성 검증을 위한 균주의 목록은 하기 표 3에 나타낸 바와 같다.
균주명 균주 정보 균주명 균주 정보
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Pseudomonas alcaligenes KCTC 12029
Pseudomonas putida KCTC 1751 Pseudomonas fluorescens KCTC 42821
Pseudomonas peli KCTC 22660 Vibrio parahaemolyticus KCTC 2471
Pseudomonas taetrolens KCTC 12501 Vibrio cholerae ATCC 14033
Pseudomonas taeanensis KCTC 22612 Vibrio vulnificus KCTC 2959
Pseudomonas tarimensis KCTC 42447 EIEC NCCP 15663
Pseudomonas guineae KCTC 22659 ETEC ATCC 35401
Pseudomonas chlororaphis KCTC 12349 EHEC NCCP 15739
Pseudomonas fulva KCTC 23144 EAEC NCCP 14039
Pseudomonas sabulinigri KCTC 22137 EPEC NCCP 15661
Pseudomonas composti KCTC 22642 Bacillus cereus ATCC 17348
Pseudomonas stutzeri KCTC 1066 Yersinia enterocolitica KCCM 41657
Pseudomonas resinovorans KCTC 12498 Staphylococcus aureus KCTC 1621
Pseudomonas citronellolis KCTC 12148 Listeria monocytogenes ATCC 19115
Pseudomonas kribbensis KCTC 32541 Clostridium perfringens NCCP 15911
Pseudomonas basaltis KCTC 22136 Campylobacter jejuni NCCP 11168
Pseudomonas segetis KCTC 12331 Campylobacter coli CCARM 13002
Pseudomonas alkylphenolia KCTC 22206 Salmonella typhimurium ATCC 43971
타사 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과, 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)을 제외한 35개의 균주 중 총 6개 균주(Pseudomonas peli, Pseudomonas chlororaphis , Pseudomonas fulva , Pseudomonas basaltis , EAEC, Yersinia enterocolitica)에서 위양성 결과가 검출되었다 (도 1 내지 2). 도 1은 타사 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과이고, 도 2는 타사 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과, 검출된 위양성 균주를 나타낸 것이다.
한편, 본 발명의 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과, 위양성 결과는 검출되지 않았다(도 3). 도 3은 본 발명의 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 위양성 검증 결과이다.
[ 실험예 2: 최소 검출한계 검증 실험]
본원발명의 프라이머 키트를 이용하여 실시간중합효소연쇄반응(real time PCR) 진행함으로써, 최소 검출 가능한 균수를 측정하였다.
실험 결과, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) ATCC 9027, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) ATCC 27853 균주를 이용한 결과 1×101~2 CFU/㎖ 수준의 검출한계를 나타내었고, 초기 균 농도는 3 반복 실험 평균 3.9×109 CFU/㎖로 확인되었다 (도 4). 도 4는 본 발명의 녹농균 검출용 프라이머 키트를 이용한 최소 검출한계 검증 결과이다.
[ 실험예 3: 식수 수질검사 적용 실험]
식수 적합 판정을 위해, 식수 수질검사 적용실험을 진행하였다. 실험을 위하여, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) ATCC 9027, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) ATCC 27853, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) KVCC BA 0001862 배양액을 각각 1×10-4, -5, -6, -7, -8배 희석 후 혼합하여 각각 1㎖ 접종하였다. 이후, 마이크로실링지 필터(Microsyringe filter; pore size: 0.22μm)를 이용하여 1㎖로 농축하였고, (주)세니젠사의 Genelix rapid DNA extraction kit 이용하여 DNA 분리하였다. 그 후, 본 발명의 프라이머 세트를 사용하여 실시간중합효소연쇄반응(real time PCR)을 수행하였다.
실험 결과, 식수에서 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)이 PCR을 통해 용이하게 검출됨을 확인하였으며, 식수 기준 1 CFU/㎖ 수준의 검출한계를 나타내었다. 초기 균 농도는 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) ATCC 9027, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) ATCC 27853, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa) KVCC BA 0001862 각각 2.2×108, 3.0×108, 4.0×108 CFU/㎖로 확인되었다 (도 5). 도 5는 식수의 수질검사 적용 실험 결과이다.
<110> Sanigen Co.,Ltd. <120> Primer sets for detection of Pseudomonas aeruginosa, polymerase chain reaction kit thereof <130> YP-19-117 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Forward primer for amplification of toxR gene. <400> 1 gactgcgaca gacagaac 18 <210> 2 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Reverse primer for amplification of toxR gene. <400> 2 ccgttcctcg catagatg 18 <210> 3 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Probe <400> 3 cgaatccgtc gttcgcrtca cg 22

Claims (5)

  1. 서열번호 1에 기재된 핵산서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드와 서열번호 2에 기재된 핵산서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 것을 특징으로 하는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 바이오 마커 조성물.
  2. 서열번호 1에 기재된 핵산서열로 이루어진 정방향 프라이머와 서열번호 2에 기재된 핵산서열로 이루어진 역방향 프라이머로 구성된 것을 특징으로 하는 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 검출용 프라이머 세트.
  3. 삭제
  4. 제2항의 프라이머 세트를 포함하는 것을 특징으로 하는 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction)용 키트.
  5. 제4항에 있어서,
    서열번호 3의 핵산서열로 이루어진 탐침(probe)을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction)용 키트.
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6048688A (en) * 1996-11-12 2000-04-11 Kimberly-Clark Corporation Method for detection of Pseudomonas aeruginosa using polymerase chain reaction
KR20010035891A (ko) * 1999-10-04 2001-05-07 손경식 녹농균 감염의 진단방법 및 이를 위한 올리고뉴클레오타이드 프라이머
US20100129811A1 (en) * 2003-09-11 2010-05-27 Ibis Biosciences, Inc. Compositions for use in identification of pseudomonas aeruginosa
KR20110049140A (ko) * 2009-11-04 2011-05-12 재단법인 대구테크노파크 식중독 원인균의 다중 실시간 검출방법
KR101247457B1 (ko) 2010-08-03 2013-03-26 동국대학교 산학협력단 슈도모나스 속 균주의 검출방법

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6048688A (en) * 1996-11-12 2000-04-11 Kimberly-Clark Corporation Method for detection of Pseudomonas aeruginosa using polymerase chain reaction
KR20010035891A (ko) * 1999-10-04 2001-05-07 손경식 녹농균 감염의 진단방법 및 이를 위한 올리고뉴클레오타이드 프라이머
KR100353506B1 (ko) 1999-10-04 2002-09-19 제일제당주식회사 녹농균 동정 및 감염 진단용 프라이머
US20100129811A1 (en) * 2003-09-11 2010-05-27 Ibis Biosciences, Inc. Compositions for use in identification of pseudomonas aeruginosa
KR20110049140A (ko) * 2009-11-04 2011-05-12 재단법인 대구테크노파크 식중독 원인균의 다중 실시간 검출방법
KR101247457B1 (ko) 2010-08-03 2013-03-26 동국대학교 산학협력단 슈도모나스 속 균주의 검출방법

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
M.J.U. Conejero et al., Journal of Applied Microbiology, 95, p.602-611, 2003. *

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