KR102158225B1 - 헬퍼 t세포의 활성화 방법 - Google Patents
헬퍼 t세포의 활성화 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102158225B1 KR102158225B1 KR1020157018417A KR20157018417A KR102158225B1 KR 102158225 B1 KR102158225 B1 KR 102158225B1 KR 1020157018417 A KR1020157018417 A KR 1020157018417A KR 20157018417 A KR20157018417 A KR 20157018417A KR 102158225 B1 KR102158225 B1 KR 102158225B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- hla
- molecule
- cells
- drb1
- peptide
- Prior art date
Links
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 104
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 title claims abstract description 46
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 83
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 260
- 108700020467 WT1 Proteins 0.000 claims abstract description 188
- 101150084041 WT1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 188
- 102000040856 WT1 Human genes 0.000 claims abstract description 187
- 102100040485 HLA class II histocompatibility antigen, DRB1 beta chain Human genes 0.000 claims abstract description 166
- 108010039343 HLA-DRB1 Chains Proteins 0.000 claims abstract description 166
- 108010065026 HLA-DQB1 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 99
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 claims abstract description 59
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 claims abstract description 59
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 59
- 102100036241 HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 1 chain Human genes 0.000 claims abstract description 57
- 102210026621 HLA-DRB1*13 Human genes 0.000 claims abstract description 47
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 165
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 72
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 64
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 64
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 64
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 55
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 52
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 45
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 42
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 42
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 32
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 28
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 claims description 25
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 claims description 25
- PFBPIHUEFUNOIS-DVQPEGLTSA-N (2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-carbamimidamido-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]pentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]cn1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]cn1)C(O)=O PFBPIHUEFUNOIS-DVQPEGLTSA-N 0.000 claims description 21
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 17
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 13
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 13
- 102210047287 DQB1*03:02 Human genes 0.000 claims description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 30
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 27
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 26
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 25
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 24
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 21
- 210000001728 clone cell Anatomy 0.000 description 20
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 16
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 15
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 11
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 10
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 9
- 101001100327 Homo sapiens RNA-binding protein 45 Proteins 0.000 description 9
- 102100038823 RNA-binding protein 45 Human genes 0.000 description 9
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 7
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 102100031618 HLA class II histocompatibility antigen, DP beta 1 chain Human genes 0.000 description 6
- 108010045483 HLA-DPB1 antigen Proteins 0.000 description 6
- 108010033222 HLA-DRB1*04 antigen Proteins 0.000 description 6
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 5
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 5
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 4
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 4
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 4
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 4
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 4
- 208000034176 Neoplasms, Germ Cell and Embryonal Diseases 0.000 description 4
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 4
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000003115 germ cell cancer Diseases 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 4
- 101100284398 Bos taurus BoLA-DQB gene Proteins 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- -1 16 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- ADPACBMPYWJJCE-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ADPACBMPYWJJCE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- AITGTTNYKAWKDR-CIUDSAMLSA-N Asn-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AITGTTNYKAWKDR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102210010092 DQB1*03:01 Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- WNGHUXFWEWTKAO-YUMQZZPRSA-N Gly-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN WNGHUXFWEWTKAO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- 102100028976 HLA class I histocompatibility antigen, B alpha chain Human genes 0.000 description 2
- 102100040482 HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 3 chain Human genes 0.000 description 2
- 102100028636 HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 4 chain Human genes 0.000 description 2
- 108010010378 HLA-DP Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000015789 HLA-DP Antigens Human genes 0.000 description 2
- 102210053891 HLA-DPB1*03:01 Human genes 0.000 description 2
- 108010062347 HLA-DQ Antigens Proteins 0.000 description 2
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010029657 HLA-DRB1*04:01 antigen Proteins 0.000 description 2
- 102210059845 HLA-DRB1*15:01 Human genes 0.000 description 2
- 108010061311 HLA-DRB3 Chains Proteins 0.000 description 2
- 108010040960 HLA-DRB4 Chains Proteins 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 2
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 2
- 101800000324 Immunoglobulin A1 protease translocator Proteins 0.000 description 2
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1N(C(=O)[C@H]2NCCC2)CCC1 SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- SNVIOQXAHVORQM-WDSKDSINSA-N Ser-Gly-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SNVIOQXAHVORQM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 238000013411 master cell bank Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- COEXAQSTZUWMRI-STQMWFEESA-N (2s)-1-[2-[[(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 COEXAQSTZUWMRI-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FSBCNCKIQZZASN-GUBZILKMSA-N Ala-Arg-Met Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O FSBCNCKIQZZASN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- TTXMOJWKNRJWQJ-FXQIFTODSA-N Ala-Arg-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CCCN=C(N)N TTXMOJWKNRJWQJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WJRXVTCKASUIFF-FXQIFTODSA-N Ala-Cys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WJRXVTCKASUIFF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VBRDBGCROKWTPV-XHNCKOQMSA-N Ala-Glu-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N VBRDBGCROKWTPV-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- OYJCVIGKMXUVKB-GARJFASQSA-N Ala-Leu-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N OYJCVIGKMXUVKB-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DCVYRWFAMZFSDA-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DCVYRWFAMZFSDA-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- MSWSRLGNLKHDEI-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MSWSRLGNLKHDEI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- NLYYHIKRBRMAJV-AEJSXWLSSA-N Ala-Val-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N NLYYHIKRBRMAJV-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- JGDGLDNAQJJGJI-AVGNSLFASA-N Arg-Arg-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JGDGLDNAQJJGJI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CPSHGRGUPZBMOK-CIUDSAMLSA-N Arg-Asn-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CPSHGRGUPZBMOK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RFXXUWGNVRJTNQ-QXEWZRGKSA-N Arg-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N RFXXUWGNVRJTNQ-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- OCDJOVKIUJVUMO-SRVKXCTJSA-N Arg-His-Gln Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N OCDJOVKIUJVUMO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MMGCRPZQZWTZTA-IHRRRGAJSA-N Arg-His-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N MMGCRPZQZWTZTA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YFHATWYGAAXQCF-JYJNAYRXSA-N Arg-Pro-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YFHATWYGAAXQCF-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- PYDIIVKGTBRIEL-SZMVWBNQSA-N Arg-Trp-Pro Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O PYDIIVKGTBRIEL-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- LFWOQHSQNCKXRU-UFYCRDLUSA-N Arg-Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 LFWOQHSQNCKXRU-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- SUMJNGAMIQSNGX-TUAOUCFPSA-N Arg-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O SUMJNGAMIQSNGX-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- TZFQICWZWFNIKU-KKUMJFAQSA-N Asn-Leu-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TZFQICWZWFNIKU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- VOKWBBBXJONREA-DCAQKATOSA-N Asn-Met-His Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N VOKWBBBXJONREA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- UWOPETAWXDZUJR-ACZMJKKPSA-N Asp-Cys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UWOPETAWXDZUJR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N Asp-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- JUWISGAGWSDGDH-KKUMJFAQSA-N Asp-Phe-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JUWISGAGWSDGDH-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- LGGHQRZIJSYRHA-GUBZILKMSA-N Asp-Pro-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CC(=O)O)N LGGHQRZIJSYRHA-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 101100297345 Caenorhabditis elegans pgl-2 gene Proteins 0.000 description 1
- WVJHEDOLHPZLRV-CIUDSAMLSA-N Cys-Asn-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N WVJHEDOLHPZLRV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZVNFONSZVUBRAV-CIUDSAMLSA-N Cys-Gln-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N)CN=C(N)N ZVNFONSZVUBRAV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CVLIHKBUPSFRQP-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CVLIHKBUPSFRQP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MXZYQNJCBVJHSR-KATARQTJSA-N Cys-Lys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)N)O MXZYQNJCBVJHSR-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- ALNKNYKSZPSLBD-ZDLURKLDSA-N Cys-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O ALNKNYKSZPSLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 102210047211 DPB1*04:01 Human genes 0.000 description 1
- 102210048109 DRB1*01:01 Human genes 0.000 description 1
- 102210047784 DRB1*13:02 Human genes 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- SHERTACNJPYHAR-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O SHERTACNJPYHAR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N Gln-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IXFVOPOHSRKJNG-LAEOZQHASA-N Gln-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IXFVOPOHSRKJNG-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- UVAOVENCIONMJP-GUBZILKMSA-N Gln-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UVAOVENCIONMJP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VOLVNCMGXWDDQY-LPEHRKFASA-N Gln-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O VOLVNCMGXWDDQY-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Lys Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ROHVCXBMIAAASL-HJGDQZAQSA-N Gln-Met-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O ROHVCXBMIAAASL-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- OZEQPCDLCDRCGY-SOUVJXGZSA-N Gln-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O OZEQPCDLCDRCGY-SOUVJXGZSA-N 0.000 description 1
- FNAJNWPDTIXYJN-CIUDSAMLSA-N Gln-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O FNAJNWPDTIXYJN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RBSKVTZUFMIWFU-XEGUGMAKSA-N Gln-Trp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RBSKVTZUFMIWFU-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 1
- GTBXHETZPUURJE-KKUMJFAQSA-N Gln-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GTBXHETZPUURJE-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ZXLZWUQBRYGDNS-CIUDSAMLSA-N Glu-Cys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZXLZWUQBRYGDNS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QSDKBRMVXSWAQE-BFHQHQDPSA-N Gly-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN QSDKBRMVXSWAQE-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- XLFHCWHXKSFVIB-BQBZGAKWSA-N Gly-Gln-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O XLFHCWHXKSFVIB-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- GNPVTZJUUBPZKW-WDSKDSINSA-N Gly-Gln-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GNPVTZJUUBPZKW-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HFXJIZNEXNIZIJ-BQBZGAKWSA-N Gly-Glu-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HFXJIZNEXNIZIJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- ZQIMMEYPEXIYBB-IUCAKERBSA-N Gly-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CN ZQIMMEYPEXIYBB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Cys Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Pro zwitterion Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- QSVMIMFAAZPCAQ-PMVVWTBXSA-N Gly-His-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QSVMIMFAAZPCAQ-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 1
- FXGRXIATVXUAHO-WEDXCCLWSA-N Gly-Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN FXGRXIATVXUAHO-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- OOCFXNOVSLSHAB-IUCAKERBSA-N Gly-Pro-Pro Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 OOCFXNOVSLSHAB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- DNAZKGFYFRGZIH-QWRGUYRKSA-N Gly-Tyr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 DNAZKGFYFRGZIH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- GWCJMBNBFYBQCV-XPUUQOCRSA-N Gly-Val-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GWCJMBNBFYBQCV-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- BNMRSWQOHIQTFL-JSGCOSHPSA-N Gly-Val-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BNMRSWQOHIQTFL-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N His-Ala-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)Cc1cnc[nH]1)C(O)=O BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- TXLQHACKRLWYCM-DCAQKATOSA-N His-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O TXLQHACKRLWYCM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- FHKZHRMERJUXRJ-DCAQKATOSA-N His-Ser-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 FHKZHRMERJUXRJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FCPSGEVYIVXPPO-QTKMDUPCSA-N His-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FCPSGEVYIVXPPO-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- IXQGOKWTQPCIQM-YJRXYDGGSA-N His-Thr-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)O IXQGOKWTQPCIQM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- UPJODPVSKKWGDQ-KLHWPWHYSA-N His-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)O UPJODPVSKKWGDQ-KLHWPWHYSA-N 0.000 description 1
- NBWATNYAUVSAEQ-ZEILLAHLSA-N His-Thr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N)O NBWATNYAUVSAEQ-ZEILLAHLSA-N 0.000 description 1
- 101000621309 Homo sapiens Wilms tumor protein Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N Isophenergan Chemical compound C1=CC=C2N(CC(C)N(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUFYAPWIHCUMLL-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WUFYAPWIHCUMLL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LOLUPZNNADDTAA-AVGNSLFASA-N Leu-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LOLUPZNNADDTAA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N Leu-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- ADJWHHZETYAAAX-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N ADJWHHZETYAAAX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FBNPMTNBFFAMMH-UHFFFAOYSA-N Leu-Val-Arg Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N FBNPMTNBFFAMMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKFVKBWCXXLKIK-AVGNSLFASA-N Lys-His-Glu Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N KKFVKBWCXXLKIK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HQXSFFSLXFHWOX-IXOXFDKPSA-N Lys-His-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O HQXSFFSLXFHWOX-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- ATNKHRAIZCMCCN-BZSNNMDCSA-N Lys-Lys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ATNKHRAIZCMCCN-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- LUAJJLPHUXPQLH-KKUMJFAQSA-N Lys-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N LUAJJLPHUXPQLH-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N Lys-Pro-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- YNOVBMBQSQTLFM-DCAQKATOSA-N Met-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YNOVBMBQSQTLFM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RPEPZINUYHUBKG-FXQIFTODSA-N Met-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RPEPZINUYHUBKG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LRALLISKBZNSKN-BQBZGAKWSA-N Met-Gly-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LRALLISKBZNSKN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- IHRFZLQEQVHXFA-RHYQMDGZSA-N Met-Thr-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IHRFZLQEQVHXFA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108700019961 Neoplasm Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000048850 Neoplasm Genes Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- CSYVXYQDIVCQNU-QWRGUYRKSA-N Phe-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O CSYVXYQDIVCQNU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- WEMYTDDMDBLPMI-DKIMLUQUSA-N Phe-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N WEMYTDDMDBLPMI-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- BSKMOCNNLNDIMU-CDMKHQONSA-N Phe-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O BSKMOCNNLNDIMU-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N Pro-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- UVKNEILZSJMKSR-FXQIFTODSA-N Pro-Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 UVKNEILZSJMKSR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AQSMZTIEJMZQEC-DCAQKATOSA-N Pro-His-Ser Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O AQSMZTIEJMZQEC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VZKBJNBZMZHKRC-XUXIUFHCSA-N Pro-Ile-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VZKBJNBZMZHKRC-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N Pro-Phe-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KBUAPZAZPWNYSW-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 KBUAPZAZPWNYSW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- CZCCVJUUWBMISW-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Cys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O CZCCVJUUWBMISW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RNEFESSBTOQSAC-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-His Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O RNEFESSBTOQSAC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FDMCIBSQRKFSTJ-RHYQMDGZSA-N Pro-Thr-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FDMCIBSQRKFSTJ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- YHUBAXGAAYULJY-ULQDDVLXSA-N Pro-Tyr-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YHUBAXGAAYULJY-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N Pro-Val-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- IDQFQFVEWMWRQQ-DLOVCJGASA-N Ser-Ala-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O IDQFQFVEWMWRQQ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- OHKLFYXEOGGGCK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OHKLFYXEOGGGCK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- TUYBIWUZWJUZDD-ACZMJKKPSA-N Ser-Cys-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O TUYBIWUZWJUZDD-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- CRZRTKAVUUGKEQ-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CRZRTKAVUUGKEQ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OJPHFSOMBZKQKQ-GUBZILKMSA-N Ser-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO OJPHFSOMBZKQKQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- QKQDTEYDEIJPNK-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO QKQDTEYDEIJPNK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N Ser-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N Ser-Trp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(O)=O BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N Ser-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 229940126530 T cell activator Drugs 0.000 description 1
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 1
- TYVAWPFQYFPSBR-BFHQHQDPSA-N Thr-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O TYVAWPFQYFPSBR-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N Thr-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- JQAWYCUUFIMTHE-WLTAIBSBSA-N Thr-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JQAWYCUUFIMTHE-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 1
- JKGGPMOUIAAJAA-YEPSODPASA-N Thr-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKGGPMOUIAAJAA-YEPSODPASA-N 0.000 description 1
- SXAGUVRFGJSFKC-ZEILLAHLSA-N Thr-His-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SXAGUVRFGJSFKC-ZEILLAHLSA-N 0.000 description 1
- KERCOYANYUPLHJ-XGEHTFHBSA-N Thr-Pro-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O KERCOYANYUPLHJ-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- YGZWVPBHYABGLT-KJEVXHAQSA-N Thr-Pro-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YGZWVPBHYABGLT-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N Thr-Ser-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N)O XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- BJJRNAVDQGREGC-HOUAVDHOSA-N Thr-Trp-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)O BJJRNAVDQGREGC-HOUAVDHOSA-N 0.000 description 1
- CURFABYITJVKEW-QTKMDUPCSA-N Thr-Val-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N)O CURFABYITJVKEW-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N Thr-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- DTPWXZXGFAHEKL-NWLDYVSISA-N Trp-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DTPWXZXGFAHEKL-NWLDYVSISA-N 0.000 description 1
- CWQZAUYFWRLITN-AVGNSLFASA-N Tyr-Gln-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O CWQZAUYFWRLITN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LTSIAOZUVISRAQ-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gly-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O LTSIAOZUVISRAQ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- SZEIFUXUTBBQFQ-STQMWFEESA-N Tyr-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O SZEIFUXUTBBQFQ-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- TYFLVOUZHQUBGM-IHRRRGAJSA-N Tyr-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 TYFLVOUZHQUBGM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N Val-Ala-Pro Natural products CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NMANTMWGQZASQN-QXEWZRGKSA-N Val-Arg-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N NMANTMWGQZASQN-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- VMRFIKXKOFNMHW-GUBZILKMSA-N Val-Arg-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N VMRFIKXKOFNMHW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UGFMVXRXULGLNO-XPUUQOCRSA-N Val-Ser-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O UGFMVXRXULGLNO-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010045023 alanyl-prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N brefeldin A Chemical compound O[C@@H]1\C=C\C(=O)O[C@@H](C)CCC\C=C\[C@@H]2C[C@H](O)C[C@H]21 KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N 0.000 description 1
- JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N brefeldin-A Natural products CC1CCCC=CC2(C)CC(O)CC2(C)C(O)C=CC(=O)O1 JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003271 compound fluorescence assay Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010084264 glycyl-glycyl-cysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 1
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 1
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010036413 histidylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010028295 histidylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 102000046004 human WT1 Human genes 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010073093 leucyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 238000007422 luminescence assay Methods 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010018625 phenylalanylarginine Proteins 0.000 description 1
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 108010093296 prolyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 108010058119 tryptophyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108010015385 valyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001152—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/001153—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464452—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/464453—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70539—MHC-molecules, e.g. HLA-molecules
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5154—Antigen presenting cells [APCs], e.g. dendritic cells or macrophages
Abstract
본 발명은 WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화시키는 공정을 포함하는, 헬퍼 T세포의 활성화 방법이며, 상기 WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 방법 등을 제공한다.
Description
본 발명은 WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화하는 공정을 포함하는, 헬퍼 T세포의 활성화 방법이며, 상기 WT1 펩티드가, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 방법, 그를 위한 조성물, 세포 상해성 T세포의 활성화 방법, 세포 상해성 T세포(CTL)의 활성화 유도제, 및 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포를 활성화하는 것에 의한 암의 치료 및/또는 예방용 의약 조성물 등에 관한 것이다. 또한, 본원은 2012년 12월 17일 출원의 일본 특허 출원 제2012-274494호에 대하여 우선권을 주장하는 것이며, 참조에 의해 상기 일본 특허 출원의 내용을 본원에 일체화시킨다.
WT1 유전자(Wilms' tumor 1 gene)는 소아의 신장암인 윌름스 종양의 원인 유전자로서 동정되고, 징크 핑거(zinc finger) 구조를 갖는 전사 인자를 코딩한다(비특허문헌 1 및 2, 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 그 후의 연구에 의해 조혈기 종양이나 고형암에서 암 유전자로서 작용하는 것이 나타났다(비특허문헌 3 내지 6, 인용에 의해 본 명세서에 포함됨).
WT1 단백질을 코딩하는 아미노산 서열의 일부를 갖는 펩티드를 사용해서 말초혈 단핵구를 시험관내에서 자극함으로써, 펩티드에 특이적인 세포 상해성 T세포(CTL)가 유도되어, 이들 CTL이 WT1을 내재적으로 발현하는 조혈기 종양이나 고형암의 암세포를 상해하는 것이 나타났다. CTL은 상기 펩티드를 MHC 클래스 I 분자에 결합한 복합체 형태로 인식하기 때문에, 이러한 펩티드는 MHC 클래스 I의 서브타입에 따라 상이하다(특허문헌 1 내지 4 및 비특허문헌 7, 인용에 의해 본 명세서에 포함됨).
한편, CTL이 유효하게 유도되기 위해서는, 암 항원에 특이적인 헬퍼 T세포의 존재가 중요하다(비특허문헌 8, 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 헬퍼 T세포는 항원 제시 세포의 MHC 클래스 II 분자와 항원 펩티드와의 복합체를 인식해서 유도·활성화된다. 활성화된 헬퍼 T세포는 IL-2, IL-4, IL-5, IL-6 또는 인터페론 등의 사이토카인을 생산함으로써, B세포의 증식, 분화, 성숙을 보조한다. 이러한 헬퍼 T세포는 B세포, T세포의 증식·활성화를 촉진함으로써 면역계를 활성화하는 기능을 갖는 점에서, 암 면역요법에서 MHC 클래스 II 결합성의 항원 펩티드를 통하여 헬퍼 T세포의 기능을 증강하고, 암 백신의 효과를 증강하는 것이 유용하다고 시사된다(비특허문헌 9, 인용에 의해 본 명세서에 포함됨).
최근 들어, WT1 단백질을 코딩하는 아미노산 서열의 일부를 갖는 특정한 펩티드(이하, 본 명세서에서 WT1 펩티드라고도 함)에는, 복수의 MHC 클래스 II 분자에 결합하여, 헬퍼 T세포를 활성화할 수 있는 뒤섞인(promiscuous) 헬퍼 펩티드가 존재하는 것이 나타났다(특허문헌 5 및 6, 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 그러나 이 WT1 펩티드가 다른 MHC 클래스 II 분자에 대해서도 효과를 가질지를 검증하는 것은, MHC 클래스 II 분자의 종류가 많은 점에서 대단히 곤란하였다.
Daniel A. Haber et al., Cell. 1990 Jun 29; 61(7):1257-69
Call KM et al., Cell. 1990 Feb 9; 60(3):509-20
Menke AL et al., Int Rev Cytol. 1998; 181:151-212. Review
Yamagami T et al., Blood. 1996 Apr 1; 87(7):2878-84
Inoue K et al., Blood. 1998 Apr 15; 91(8):2969-76
Tsuboi A et al., Leuk Res. 1999 May; 23(5):499-505
Oka Y et al., Immunogenetics. 2000 Feb; 51(2):99-107
Gao FG et al., Cancer Res. 2002 Nov 15; 62(22):6438-41
Zeng G, J Immunother. 2001 May; 24(3):195-204
따라서, 본 발명의 해결 과제는 특정한 WT1 펩티드를 사용함으로써, 광범위한 MHC 클래스 II 분자 양성 대상에 적용하여 헬퍼 T세포를 활성화하는 방법, 세포 상해성 T세포를 활성화하는 방법, 세포 상해성 T세포의 활성화 유도제 및 암의 치료/예방용 의약 조성물 등을 제공하는 것이다.
본 발명자들은 상기 사정을 감안해 예의 연구를 거듭한 결과, 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His를 갖는 펩티드가, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 및 HLA-DQB1*04:01 분자에 결합하여, 헬퍼 T세포를 활성화하고/하거나, 세포 상해성 T세포를 활성화하는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
즉, 본 발명은
(1) WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화시키는 공정을 포함하는, 헬퍼 T세포의 활성화 방법이며, 상기 WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 방법,
(2) WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 적어도 2개의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인, (1)에 기재된 방법,
(3) WT1 펩티드가 또한 HLA-DRB1*01:01 분자, HLA-DRB1*04:01 분자, HLA-DRB1*04:03 분자, HLA-DRB1*04:05 분자, HLA-DRB1*04:06 분자, HLA-DRB1*08:03 분자, HLA-DRB1*09:01 분자, HLA-DRB1*11:01 분자, HLA-DRB1*15:01 분자, HLA-DRB1*15:02 분자, HLA-DRB3*02:02 분자, HLA-DRB4*01:01 분자, HLA-DPB1*02:01 분자, HLA-DPB1*03:01 분자, HLA-DPB1*05:01 분자 및 HLA-DPB1*09:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 HLA 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인, (1) 또는 (2)에 기재된 방법,
(4) WT1 펩티드의 항원 제시 세포에의 첨가가, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 첨가에 의해 행하여지는, (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 기재된 방법,
(5) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, (1) 내지 (4) 중 어느 하나에 기재된 방법,
(6) WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화시키기 위한, WT1 펩티드를 포함하는 조성물이며, 상기 WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 조성물,
(7) WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 적어도 2개의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인, (6)에 기재된 조성물,
(8) WT1 펩티드가 또한 HLA-DRB1*01:01 분자, HLA-DRB1*04:01 분자, HLA-DRB1*04:03 분자, HLA-DRB1*04:05 분자, HLA-DRB1*04:06 분자, HLA-DRB1*08:03 분자, HLA-DRB1*09:01 분자, HLA-DRB1*11:01 분자, HLA-DRB1*15:01 분자, HLA-DRB1*15:02 분자, HLA-DRB3*02:02 분자, HLA-DRB4*01:01 분자, HLA-DPB1*02:01 분자, HLA-DPB1*03:01 분자, HLA-DPB1*05:01 분자 및 HLA-DPB1*09:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 HLA 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인, (6) 또는 (7)에 기재된 조성물,
(9) WT1 펩티드의 항원 제시 세포에의 첨가가, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 첨가에 의해 행하여지는, (6) 내지 (8) 중 어느 하나에 기재된 조성물,
(10) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, (6) 내지 (9) 중 어느 하나에 기재된 조성물,
(11) WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체가 제시되어 있는 항원 제시 세포이며, 상기 MHC 클래스 II 분자가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자인, 항원 제시 세포,
(12) WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포이며, 상기 MHC 클래스 II 분자가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자인, 헬퍼 T세포,
(13) (11)에 기재된 헬퍼 T세포에 의해 활성화되는, 세포 상해성 T세포,
(14) (6) 내지 (10) 중 어느 하나에 기재된 조성물, (11)에 기재된 항원 제시 세포, (12)에 기재된 헬퍼 T세포, 또는 (13)에 기재된 세포 상해성 T세포 중 어느 하나를 유효 성분으로서 포함하는, 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약 조성물,
(15) WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포 중 어느 하나를 유효 성분으로서 포함하는, 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위한 의약 조성물이며, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여하기 위한 의약 조성물,
(16) WT1 펩티드에 특이적으로 결합하는 항체이며, 상기 WT1 펩티드가, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 항체,
(17) HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자 양성 대상에서의 WT1 특이적 헬퍼 T세포의 존재 또는 양을 결정하는 방법이며,
(a) 상기 대상으로부터 취득한 시료를 WT1 펩티드를 사용해서 자극하고,
(b) 사이토카인 또는 헬퍼 T세포의 존재 또는 양을 조사하는
공정을 포함하고, 사이토카인 또는 헬퍼 T세포의 존재 또는 양의 증대가 WT1 특이적 헬퍼 T세포의 존재 또는 양을 나타내는 것인 방법,
을 제공한다.
본 발명에 따르면, WT1 펩티드를 사용함으로써, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자를 갖는 대상에게 적용해서 헬퍼 T세포를 활성화시키는 방법, 그를 위한 조성물, 세포 상해성 T세포를 활성화시키는 방법, 그를 위한 조성물, 세포 상해성 T세포의 활성화 유도제, 및 헬퍼 T세포 및 세포 상해성 T세포를 활성화하는 것에 의한 암의 치료 및/또는 예방용 의약 조성물 등이 얻어지므로, 이러한 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에서의 생체내 및 시험관내에서의 헬퍼 T세포 및 세포 상해성 T세포의 활성화, 나아가 암의 치료 및 예방 등이 가능하게 된다.
도 1은 Clone R82-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 2는 Clone R132-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 3은 Clone R143-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 4는 Clone R145-2의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 5는 Clone Q32-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 6은 Clone Q41-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 2는 Clone R132-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 3은 Clone R143-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 4는 Clone R145-2의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 5는 Clone Q32-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
도 6은 Clone Q41-1의 HLA 구속성을 나타내는 도면이다. 횡축은 WT1-332(흑색 칼럼) 또는 용매(백색 칼럼) 첨가에 의한 IFN-γ 생산량(pg/mL)을 나타낸다. 종축은 항원제시 B-LCL 세포의 종류를 나타낸다. 데이터는 평균값±SD(Triplicate)이다. $:외삽치를 포함하는 데이터.
본 발명은 1의 형태에서, WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 활성화하는 공정을 포함하는 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포의 활성화 방법이며, 상기 WT1 펩티드가 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 방법을 제공한다. 본 발명에서, 세포 상해성 T세포를 활성화하는 공정은 헬퍼 T세포를 활성화하는 공정을 거침으로써 행하여져도 좋다. 또한, 본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것이다. 본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 또한 상기 MHC 클래스 II 분자 중 적어도 2개 또는 그 이상의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것이어도 좋다. 또한, 본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 예를 들어, HLA-DR 분자, HLA-DQ 및 HLA-DP 분자 중 어느 쪽의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 가지고 있어도 된다.
본 발명에서, WT1 펩티드는 서열 번호 1에 나타나는 인간 WT1 단백질의 아미노산 서열 일부를 갖는 펩티드이어도 좋다. 본 발명의 펩티드는 상기 특징을 갖는 한, 그 아미노산 서열 및 길이는 특별히 한정되지 않지만, 펩티드가 너무 길면 단백 분해 효소의 작용을 받기 쉬워지고, 너무 짧으면 펩티드 수용 홈에 잘 결합할 수 없다. 본 발명의 펩티드 길이는 바람직하게는 10 내지 25 아미노산, 보다 바람직하게는 15 내지 21 아미노산, 더욱 바람직하게는 16 내지 20 아미노산, 예를 들어, 16 아미노산, 17 아미노산, 18 아미노산, 또는 19 아미노산이다. 본 발명의 펩티드의 구체예는 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 것이다.
또한, 본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 상기 펩티드의 변이체도 포함한다. 변이체는 예를 들어, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열에서, 수개, 예를 들어, 1 내지 9개까지, 바람직하게는 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 더욱 바람직하게는 1 내지 2개, 보다 바람직하게는 1개의 아미노산이, 치환 또는 결실 또는 부가된 아미노산 서열을 갖는 펩티드로 이루어지는 군에서 선택되는 펩티드를 포함해도 좋다. 펩티드 중의 아미노산의 치환은 어떤 위치에서 어떤 종류의 아미노산과의 사이에서 행하여져도 좋고, 보존적인 아미노산 치환이 바람직하다. 보존적인 아미노산 치환의 예로서는 Glu 잔기를 Asp 잔기로, Phe 잔기를 Tyr 잔기로, Leu 잔기를 Ile 잔기로, Ala 잔기를 Ser 잔기로, His 잔기를 Arg 잔기로 치환하는 것 등을 들 수 있다. 아미노산의 부가 또는 결실은 펩티드 중의 N 말단 및 C 말단에서 행하는 것이 바람직하지만, 배열 내부에서 행하여져도 좋다. 본 발명의 펩티드의 바람직한 구체예는 서열 번호 2를 갖는 것인데, 상기의 어느 펩티드이어도, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것으로서, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포(본 명세서에서, CTL이라고도 함)를 활성화하는 것이 조건이 된다. 일반적으로, 인간 MHC 분자를 HLA 분자라고도 말하므로, 본 명세서에서는 MHC를 HLA와 동의어로서 사용한다.
본 발명의 펩티드는 또한, 상기 아미노산 서열의 수식체이어도 좋다. 상기 아미노산 서열 중의 아미노산 잔기를 공지된 방법으로 수식할 수 있다. 그러한 수식체는 예를 들어, 아미노산 잔기의 측쇄 중의 관능기에 에스테르화, 알킬화, 할 로겐화, 인산화 등을 실시한 것이어도 좋다. 또한, 상기 아미노산 서열을 포함하는 펩티드의 N 말단 및/또는 C 말단에, 여러 가지 물질을 결합시킬 수 있다. 예를 들어, 아미노산, 펩티드, 그들의 아날로그 등을 결합시켜도 좋다. 예를 들어, 히스티딘 태그를 부가해도 되고, 티오레드키신 등의 단백질과 함께 융합 단백질이 되어 있어도 된다. 또는, WT1 펩티드에 검출 가능한 표지를 결합시켜도 좋다. 본 발명의 펩티드에 이들 물질이 결합하고 있을 경우, 이들 물질이 예를 들어, 생체 내 효소 등에 의해, 또는 세포 내 프로세싱 등의 과정에 의해 처리되고, 최종적으로 상기 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 생성하는 것이어도 좋고, MHC 클래스 II 분자와의 복합체로서 세포 표면에 제시됨으로써, 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포 유도 효과를 얻을 수 있다. 이들 물질은 본 발명의 펩티드의 용해성을 조절하는 것이어도 좋고, 내프로테아제 작용 등 그의 안정성을 향상시키는 것이어도 좋고, 또한 예를 들어, 소정의 조직·기관에 특이적으로 본 발명의 펩티드를 딜리버리하는 것이어도 좋고, 또는 또한 항원 제시 세포의 도입 효율을 증강시키는 작용 등을 갖는 것이어도 좋다. 이들 물질은 또한, CTL 유도 능력을 증대시키는 것, 예를 들어, 본 발명의 펩티드 이외의 헬퍼 펩티드이어도 좋다.
본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 당해 기술 분야에서 통상 사용되는 방법 또는 그들의 변형 방법을 사용해서 합성할 수 있다. 이러한 합성 방법은 예를 들어, Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; The Proteins, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976; 펩티드 합성, 마루젠(주), 1975; 펩티드 합성의 기초와 실험, 마루젠(주), 1985; 의약품의 개발 속 제14권·펩티드 합성, 히로카와 서점, 1991 등에 기재되어 있다(이들 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 본 발명에 사용되는 펩티드는 또한, 당해 펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 배열 정보에 기초하여, 유전자 공학적 방법을 사용해서 제조할 수도 있다. 이러한 유전자 공학적 방법은 당업자에게 주지된 것이다. 이들 방법은 문헌에 기재되는 방법 등에 준해서 행할 수 있다(Molecular Cloning, T.Maniatis et al., CSH Laboratory(1983), DNA Cloning, DM.Glover, IRL PRESS(1985))(이들 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨).
본 발명은 상기 설명한 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 배열에도 관한 것이다. WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 배열은 DNA 배열이어도 좋고, RNA 배열이어도 좋다. 본 발명에서, WT1 펩티드를 사용하는 대신, 이들 폴리뉴클레오티드 배열을 사용해도 좋다. 이들 폴리뉴클레오티드 배열을 적당한 벡터에 내장해서 사용해도 좋다. 벡터로서는 플라스미드, 파지 벡터, 바이러스 벡터 등을 들 수 있고, 예를 들어, pUC118, pUC119, pBR322, pCR3, pYES2, pYEUra3, pKCR, pCDM8, pGL2, pcDNA3.1, pRc/RSV, pRc/CMV, pAcSGHisNT-A, λZAPII, λgt11 등을 들 수 있다. 벡터는 발현 유도 가능한 프로모터, 시그널 배열을 코딩하는 유전자, 선택용 마커 유전자, 터미네이터 등의 인자를 적절히 갖고 있어도 되다. 이들 유전자의 세포나 생체에의 도입 방법, 발현 방법 등은 당업자에게 공지이다.
본 발명에 사용되는 항원 제시 세포는 MHC 클래스 II 분자와 함께 상기 WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드를 헬퍼 T세포에 제시할 수 있는 세포이며, 예를 들어, 수상 세포, 말초혈 단핵구 등을 의미한다. 그로 인해, 본 발명에 사용되는 항원 제시 세포가 유래하는 대상은 첨가하는 WT1 펩티드가 결합할 수 있는 MHC 클래스 II 분자와 동일한 분자(예를 들어, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 어느 하나 또는 그 이상의 MHC 클래스 II 분자)를 갖는 것이 아니면 안된다.
본 발명에서, WT1 펩티드의 항원 제시 세포에의 첨가는 WT1 펩티드를 첨가함으로써 직접적으로, 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터의 첨가에 의해, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 첨가에 의해 간접적으로 행하여져도 좋다. 구체적으로는, WT1 펩티드의 항원 제시 세포에의 첨가는 WT1 펩티드와 항원 제시 세포를 접촉시킴으로써, 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터를 항원 제시 세포에 도입함으로써, 행할 수 있다. 이들 첨가는 당해 기술 분야에서 공지된 방법에 의해 실시할 수 있다. 상기 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 및 상기 발현 벡터를 포함하는 세포는 당업자에게 잘 알려진 방법에 의해 취득할 수 있다. 구체적으로는, 본 발명에 사용되는 폴리뉴클레오티드는 상기 WT1 펩티드의 아미노산 서열(예를 들어, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열)에 기초하여 결정할 수 있다. 상기 폴리뉴클레오티드는 예를 들어, DNA 또는 RNA 합성 방법, PCR법 등에 의해 제조할 수 있다. 또한, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터의 종류, 상기 폴리뉴클레오티드 배열 이외에 포함되는 배열 등은 당해 발현 벡터를 도입하는 숙주의 종류, 목적 등에 따라서 적절히 선택할 수 있고, 플라스미드, 파지 벡터, 바이러스 벡터 등을 들 수 있다. 발현 벡터를 포함하는 세포는 예를 들어, 숙주 세포를 형질전환함으로써 제작할 수 있다. 숙주 세포로서는 대장균, 효모, 곤충 세포, 동물 세포 등을 들 수 있다. 숙주 세포에의 도입 방법은 통상의 방법, 예를 들어, 인산 칼슘법, DEAE-덱스트란법, 일렉트로포레이션법, 유전자 도입용 리피드를 사용할 수 있다.
일반적으로, 헬퍼 T세포는 T세포 표면의 TCR·CD3 복합체가 항원 제시 세포 표면의 MHC 클래스 II 분자를 통하여 항원 펩티드를 인식하고, T세포 표면의 인테그린이 항원 제시 세포 표면의 인테그린 리간드에서 자극됨으로써 활성화된다. 본 명세서에서의 헬퍼 T세포의 활성화는 헬퍼 T세포의 활성화뿐만 아니라, 헬퍼 T세포의 유도·증식을 포함하는 것으로 한다. 또한, 본 발명에서 활성화되는 헬퍼 T세포는 미분화 T세포(예를 들어, 나이브 T세포) 등이어도 좋다. 활성화된 헬퍼 T세포는 B 세포 및 세포 상해성 T세포의 유도·증식·활성화를 촉진함으로써 면역계를 활성화하는 기능을 갖는다. 그로 인해, 본 발명의 방법을 암 등의 치료의 보조 요법으로서 사용할 수도 있다. 또한, 시험관내에서 본 발명의 방법을 사용해서 활성화된 헬퍼 T세포를 암 등의 치료 또는 예방, 또는 이들을 위한 보조제로서 사용할 수도 있다. 헬퍼 T세포의 활성화는 인터페론(예를 들어, 인터페론γ 등), 인터류킨 등의 사이토카인의 생산, 분비량을 측정하는 것 등에 의해 평가할 수 있다.
본 발명은 별도의 형태에서, WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위한 조성물을 제공한다. 본 발명에 있어서, 세포 상해성 T세포의 활성화는 헬퍼 T세포의 활성화를 거침으로써 행하여지는 것이어도 좋다. 본 발명의 조성물에 포함되는 유효 성분으로서, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터, 상기 벡터를 포함하는 세포를 예시할 수 있지만, WT1 펩티드를 항원 펩티드로서 항원 제시 세포 표면에서 제시할 수 있는 인자라면, 어떠한 분자이어도 좋다. 이들 인자는 상술한 바와 같이 당업자에게 잘 알려진 방법에 의해 얻을 수 있다.
본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 상술한 바와 같이, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 어느 하나에 결합하는 능력을 갖는 것이다. 또한, 본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 상기 MHC 클래스 II 분자 중 적어도 2개 또는 그 이상의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것이어도 좋다. 또한, 본 발명에 사용되는 WT1 펩티드는 HLA-DR 분자, HLA-DQ, HLA-DP 분자 중 어느 쪽의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖고 있어도 되다.
본 발명의 조성물이 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 어느 하나 또는 그 이상의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에 투여되면, 대상 중의 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포가 활성화됨으로써 면역계가 활성화된다. 또한, WT1 유전자는 각종 암이나 종양, 예를 들어, 백혈병, 골수이형성 증후군, 다발성 골수종, 악성 림프종 등의 조혈기 종양, 위암, 대장암, 폐암, 유방암, 배세포암, 간암, 피부암, 방광암, 전립선암, 자궁암, 자궁경부암, 난소암 등의 고형암에서 고발현되고 있으므로, 본 발명의 조성물을 암의 치료 또는 예방의 보조제로서 사용할 수도 있다. 또는, 본 발명의 조성물을 사용해서 활성화된 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 등은 예를 들어, 상기 암 치료의 보조제로서 사용할 수도 있다.
본 발명의 조성물은 상기 WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터, 또는 상기 벡터를 포함하는 세포 이외에, 예를 들어, 담체, 부형제, 또는 첨가제 등을 포함하고 있어도 좋다. 본 발명의 조성물에 포함되는 상기 WT1 펩티드 등은 WT1 펩티드에 특이적으로 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포를 활성화하는 점에서, 공지의 MHC 클래스 I 구속성 WT1 펩티드를 포함하거나, 또는 이들과 함께 적용되어도 좋다.
본 발명의 조성물의 적용 방법은 원하는 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포의 활성화 정도, 항원 제시 세포의 상태 등의 조건에 따라서 적절히 선택할 수 있다. 당해 적용 방법은 예를 들어, 피내 투여, 피하 투여, 근육내 투여, 정맥내 투여, 경비 투여, 경구 투여 등에 의해 대상에게 투여하는 것, 또는 항원 제시 세포 배양액에 첨가하는 것 등을 들 수 있지만, 이들에 제한되지 않는다. 본 발명의 조성물에 포함되는 상기 WT1 펩티드 등의 양, 조성물의 형태, 적용 횟수 등은 원하는 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포의 활성화 정도, 항원 제시 세포의 상태 등의 조건에 따라서 적절히 선택할 수 있다.
본 발명은 또 다른 형태에 있어서, WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 활성화하는 공정을 포함하는, 대상에서의 암의 치료 또는 예방 방법이며, 상기 WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포를 활성화함으로써 대상의 면역계를 활성화하고, 대상에서의 암을 치료 또는 예방하는 방법이다. 본 발명의 방법에서, 세포 상해성 T세포를 활성화하는 공정은 헬퍼 T세포를 활성화하는 공정을 거침으로써 행하여지는 것이어도 좋다. WT1 펩티드의 항원 제시 세포에의 첨가는 WT1 펩티드를 첨가함으로써 직접적으로, 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터의 첨가에 의해, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 첨가에 의해 간접적으로 행하여져도 좋다. 상기 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 및 상기 발현 벡터를 포함하는 세포는, 상술한 바와 같이 당업자에게 잘 알려진 방법에 의해 취득할 수 있다. 본 발명의 방법을 적용할 수 있는 대상은 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자 양성 대상이다. 본 발명을 적용할 수 있는 암은 어느 것이어도 좋고, 예를 들어, 백혈병, 골수이형성 증후군, 다발성 골수종, 악성 림프종 등의 조혈기 종양, 위암, 대장암, 폐암, 유방암, 배세포암, 간암, 피부암, 방광암, 전립선암, 자궁암, 자궁경부암, 난소암 등의 고형암을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 방법은 MHC 클래스 I 분자 구속성 WT1 펩티드를 사용한 암의 치료 또는 예방 방법 또는 그를 위한 의약 조성물과 병용되어도 좋다.
본 발명은 또한 별도의 형태에 있어서, 상기 조성물을 제조하기 위한 WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터, 또는 상기 벡터를 포함하는 세포의 사용을 제공한다. 또한, 본 발명은 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위해서 사용되는, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터, 또는 상기 벡터를 포함하는 세포를 제공한다.
본 발명은 또한 또 다른 형태에 있어서, WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포를 활성화하기 위한 상기 WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터, 상기 벡터를 포함하는 세포를 포함하는 키트이며, 상기 WT1 펩티드가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 것인 키트에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 키트는 상기 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포의 활성화 방법에 사용된다. 본 발명의 키트는 WT1 펩티드 이외에, 예를 들어, 항원 제시 세포의 취득 수단, 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포의 활성 평가 수단 등을 포함하고 있어도 좋다. 일반적으로는, 키트에는 사용 설명서를 첨부한다. 본 발명의 키트를 사용하여, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 효율적으로 활성화할 수 있다.
본 발명은 별도의 형태에 있어서, WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체가 제시되어 있는 항원 제시 세포를 제공한다. 여기서, 상기 MHC 클래스 II 분자는 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 어느 하나이어도 좋고, 나아가, 상기 MHC 클래스 II 분자 중 적어도 2개 또는 그 이상이어도 좋다. 본 발명의 항원 제시 세포는 당업자 간에서 알려진 방법을 사용해서 제조되어도 좋다. 예를 들어, 암 환자로부터 항원제시능을 갖는 세포를 단리하고, 단리한 세포에 상기 WT1 펩티드(예를 들어, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열을 갖는 펩티드) 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드에서 펄스하거나, 또는 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터를 세포 내에 도입하여, WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 세포 표면에 제시시킴으로써 제작해도 좋다(Cancer Immunol. Immunother. 46:82, 1998, J.Immunol., 158: p1796, 1997, Cancer Res., 59: p1184, 1999 Cancer Res., 56: p5672, 1996, J.Immunol., 161: p5607, 1998, J.Exp.Med., 184: p465, 1996) (이들 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 본 명세서에서, 항원제시능을 갖는 세포란, WT1 펩티드를 제시할 수 있는 MHC 클래스 II 분자를 세포 표면에 발현하는 세포라면, 한정되지 않지만, 항원제시능이 높은 말초혈 단핵구 또는 수상 세포가 바람직하다. 또한, 본 발명의 항원 제시 세포는 실시예에 나타나는 바와 같이, 인터페론γ량의 증가에 의해 확인되는 세포 상해성 T세포 활성의 상승에 의해 그 존재가 확인된다. 본 발명의 항원 제시 세포는 의약 조성물의 유효 성분으로서 세포 요법(예를 들어, 수상 세포 요법)에 있어서 유효하게 사용된다.
본 발명은 또 다른 형태에 있어서, WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포를 제공한다. 여기서, 상기 MHC 클래스 II 분자는 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 어느 하나이어도 좋고, 나아가, 상기 MHC 클래스 II 분자 중 적어도 2개 또는 그 이상이어도 좋다. 본 발명의 헬퍼 T세포로서, 예를 들어, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포를 들 수 있다. 본 발명의 헬퍼 T세포는 당해 기술 분야에서의 공지된 방법을 사용해서 당업자가 용이하게 제조·취득할 수 있다(Iwata, M. et al., Eur. J. Immunol, 26, 2081(1996))(본 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨).
본 발명은 또한 별도의 형태에 있어서, WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포에 의해 활성화되는 세포 상해성 T세포를 제공한다. 본 발명의 세포 상해성 T세포로서, 예를 들어, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포에 의해 활성화되는 세포 상해성 T세포를 들 수 있다. 본 발명의 세포 상해성 T세포는 당업자가 공지된 방법에 의해 용이하게 제조할 수 있다. 예를 들어, 환자의 말초혈 림프구를 단리하고, 이것을 펩티드(예를 들어, 서열 번호 2에 기재된 아미노산 서열을 갖는 펩티드), 상기 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 또는 이것을 포함하는 발현 벡터로 시험관내에서 자극함으로써 제작된다(Journal of Experimental Medicine 1999, 190:1669)(본 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 상기와 같이 제조된 세포 상해성 T세포는 암 등의 치료 또는 예방용 의약 조성물의 유효 성분으로서 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 또 다른 형태에 있어서, 상기 WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자를 갖는 HLA 사량체를 제공한다. 상기 MHC 클래스 II 분자는 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자 중 어느 하나이어도 좋고, 상기 MHC 클래스 II 분자 중 적어도 2개 또는 그 이상이어도 좋다. 본 명세서에서, HLA 사량체는 HLA 단백질을 펩티드와 회합시킨 복합체(HLA 단량체)를 비오틴화하고, 아비딘에 결합시킴으로써 사량체화한 것을 의미한다. HLA 사량체로서, 여러 가지 항원 펩티드를 함유하는 것이 시판되고 있고, 본 발명의 HLA 사량체를 용이하게 제작할 수 있다(Science 279: 2103-2106(1998), Science 274: 94-96(1996))(본 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 본 발명의 사량체는 플로사이트메트리, 형광 현미경 등의 공지된 검출 수단에 의해 결합한 본 발명의 헬퍼 T세포나 세포 상해성 T세포를 용이하게 선별 또는 검출할 수 있도록, 형광 표지되는 것이 바람직하다. 본 발명에서의 HLA 사량체는 사량체에 한정되는 것은 아니고, 필요에 따라 펜타머, 덴드리머 등의 멀티머를 사용할 수도 있다. 본 명세서에 있어서, 멀티머란, HLA 단백질을 펩티드와 회합시킨 복합체(HLA 단량체)를 공지된 방법을 사용해서 2개 또는 그 이상 결합시킴으로써 다량체화한 것을 말한다.
본 발명은 별도의 형태에 있어서, 상기 조성물, 항원 제시 세포, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 또는 사량체 중 어느 하나를 유효 성분으로서 포함하는, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위한 의약 조성물을 제공한다. 본 발명의 의약 조성물은 상기 조성물, 항원 제시 세포, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 또는 사량체 중 어느 하나 또는 그 이상을 유효 성분으로서 포함해도 좋다. 본 발명의 의약 조성물은 암을 치료 또는 예방하기 위해서 사용할 수 있다. 본 발명의 의약 조성물은 WT1을 발현하는 각종 암 및 종양, 예를 들어, 백혈병, 골수이형성 증후군, 다발성 골수종, 악성 림프종 등의 조혈기 종양, 위암, 대장암, 폐암, 유방암, 배세포암, 간암, 피부암, 방광암, 전립선암, 자궁암, 자궁경부암, 난소암 등의 고형암에 적용할 수 있다. 또한, 본 발명의 의약 조성물은 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여하기 위해서 사용할 수 있다. 본 발명의 의약 조성물을, 그 밖의 암의 치료 또는 예방 방법 또는 그를 위한 의약 조성물과 병용해도 좋다. 또한, 본 발명의 의약 조성물은 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포의 활성화제, 증식제, 유도제 등을 포함하고 있어도 좋고, 또는 공지된 MHC 클래스 I 구속성 WT1 펩티드를 포함하고 있어도 좋다.
본 발명의 의약 조성물은 유효 성분 이외에, 예를 들어, 담체, 부형제 등을 포함하고 있어도 좋다. 본 발명의 의약 조성물의 투여방법은 질환의 종류, 대상의 상태, 표적 부위 등의 조건에 따라서 적절히 선택할 수 있다. 당해 방법은 예를 들어, 피내 투여, 피하 투여, 근육내 투여, 정맥내 투여, 경비 투여, 경구 투여 등을 들 수 있지만, 이들에 제한하지 않는다. 본 발명의 의약 조성물에 포함되는 상기 유효 성분의 양, 의약 조성물의 제형, 투여 횟수 등은 질환의 종류, 대상의 상태, 표적 부위 등의 조건에 따라서 적절히 선택할 수 있다.
본 발명은 또 다른 형태에 있어서, 상기 조성물, 항원 제시 세포, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 또는 사량체 중 어느 하나의 유효량을 대상에게 투여하는 공정을 포함하는, 암을 치료 또는 예방하기 위한 방법이며, 대상이, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 것인 방법을 제공한다. 본 발명의 방법에 의해 치료 또는 예방할 수 있는 암은 WT1을 발현하는 각종 암 및 종양, 예를 들어, 백혈병, 골수이형성 증후군, 다발성 골수종, 악성 림프종 등의 조혈기 종양, 위암, 대장암, 폐암, 유방암, 배세포암, 간암, 피부암, 방광암, 전립선암, 자궁암, 자궁경부암, 난소암 등의 고형암이다. 본 발명의 방법은 그 밖의 암의 치료 또는 예방 방법, 예를 들어, 공지의 MHC 클래스 I 분자 구속성 WT1 펩티드를 사용한 암의 치료 또는 예방 방법과 병용되어도 좋다.
본 발명은 또한 또 다른 형태에 있어서, 상기 의약 조성물을 제조하기 위한, 상기한 조성물, 항원 제시 세포, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 또는 사량체의 어느 하나의 사용을 제공한다. 또한, 본 발명은 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위해서 사용되는, 상기한 조성물, 항원 제시 세포, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 또는 사량체를 제공한다. 또한, 본 발명은 암의 치료 또는 예방에 사용되는, 상기한 조성물, 항원 제시 세포, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포 또는 사량체를 제공한다.
본 발명은 1의 형태에 있어서, 상기 WT1 펩티드 또는 상기 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드에 특이적으로 결합하는 항체(이하, 항WT 항체라고도 말함)에 관한 것이다. 본 발명의 항체는 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체 중 어느 것이어도 된다. 구체적으로는, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열을 갖는 펩티드에 특이적으로 결합하는 항체 등을 들 수 있다. 이들 항체의 제조 방법은 이미 주지이며, 본 발명의 항체도 이들의 통상법에 따라서 제조할 수 있다(Current protocols in Molecular Biology edit. Ausubel et al. 1987 Publish. John Wiley and Sons. Section 11.12 내지 11.13, Antibodies; A Laboratory Manual, Lane, H, D.들 편, Cold Spring Harber Laboratory Press 출판 New York 1989)(이들 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 예를 들어, 서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열을 갖는 펩티드를 면역원으로서 사용하고, 집토끼 등의 비인간 동물을 면역하고, 이 동물의 혈청으로부터 통상의 방법에 의해 얻을 수 있다. 한편, 모노클로널 항체의 경우에는, 본 발명에 사용되는 펩티드(서열 번호 2에 나타내는 아미노산 서열을 갖는 펩티드)를 마우스 등의 비인간 동물에 면역하고, 얻어진 비장 세포와 골수종 세포를 세포 융합시켜서 제조한 하이브리도마 세포 안에서 얻을 수 있다(Current protocols in Molecular Biology edit. Ausubel et al. 1987 Publish. John Wiley and Sons. Section 11.4 내지 11.11) (본 문헌은 인용에 의해 본 명세서에 포함됨). 또한, 본 발명의 항WT 항체의 제작은 숙주에 따라서 여러 가지 아쥬반트를 사용해서 면역학적 반응을 높임으로써 행할 수도 있다. 이러한 아쥬반트로서, 미네랄 겔(예를 들어, 프로인트 아쥬반트, 수산화알루미늄 등), 표면활성 물질, 인간 아쥬반트 등을 들 수 있다. 본 발명의 항WT 항체는 친화성 크로마토그래피, 면역학적 진단 등에 사용할 수 있다. 면역학적 진단은 이뮤노블롯법, 방사 면역 측정법(RIA), 효소 면역 측정법(ELISA), 형광 또는 발광 측정법 등으로부터 적절히 선택할 수 있다.
본 발명은 별도의 형태에 있어서, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자 양성 대상에서의 WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하는 방법이며,
(a) 상기 대상으로부터 취득한 시료를 상기 항WT 항체와 반응시키고, 계속해서,
(b) 상기 시료에 포함되는 상기 항WT 항체의 존재 또는 양을 조사하는
공정을 포함하는 방법을 제공한다. 상기 공정(a)에서 사용되는 시료로서, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상으로부터 취득된 것을 사용할 수 있다. 상기 공정(a)에 사용되는 시료는, 예를 들어, 혈액, 림프구 등의 체액, 조직 등을 들 수 있다. 시료의 취득이나 항체와의 반응 등은 당업자라면 공지된 방법을 사용해서 적절히 행할 수 있다. 본 발명에서의 공정(b)는, 예를 들어, 상기 항WT 항체의 국재, 부위, 양 등을 결정하는 것을 포함하므로, 암의 진단, 예후 진단 등에 사용할 수 있다. 상기 항WT 항체는 표지되어 있어도 좋다. 표지로서는 형광 표지, 방사성 표지 등의 공지된 것을 사용할 수 있다. 표지함으로써 WT1 펩티드의 존재 또는 양의 결정을 간편 또한 신속하게 행하는 것이 가능하게 된다.
본 발명은 또 다른 형태에 있어서, 상기 항WT 항체를 필수 구성 성분으로서 포함하는, WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하기 위한 키트에 관한 것이다. 본 발명의 키트는 상기 항WT 항체 이외에, 예를 들어, 항WT 항체의 취득 수단, 평가 수단 등을 포함하고 있어도 좋다. 일반적으로는, 키트에는 사용 설명서를 첨부한다. 본 발명의 키트를 사용함으로써, 상술한 WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하는 방법에서 간편 또한 신속하게 WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하는 것이 가능하게 된다.
본 발명은 또한 별도의 형태에 있어서, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자 양성 대상에서의 WT1 특이적 헬퍼 T세포 또는 WT1 특이적 세포 상해성 T세포의 존재 또는 양을 결정하는 방법이며,
(a) 상기 대상으로부터 취득한 시료를 WT1 펩티드를 사용해서 자극하고,
(b) 사이토카인, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포의 존재 또는 양을 조사하는
공정을 포함하고, 사이토카인, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포의 존재 또는 양의 증대가 WT1 특이적 헬퍼 T세포 또는 WT1 특이적 세포 상해성 T세포의 존재 또는 양을 나타내는 것인 방법을 제공한다. 본 발명의 시료는 항원 제시 세포를 포함하는 것이라면 어떠한 것이어도 좋고, 예를 들어, 말초혈 단핵구, 침윤성 림프구, 종양 세포, 복수 중의 세포, 흉수 중의 세포, 뇌척수액 내의 세포, 골수세포 또는 림프절 세포 등을 들 수 있다. 본 발명에 사용되는 시료는 건강인에서 유래되어도, 또는 암 환자에서 유래되어도 좋다. 건강인에서 유래되는 이들 세포를 사용함으로써, 예를 들어, 암으로 이환하고 있을지의 여부, 또는 그 소인을 가질 것인지의 여부를 진단하는 것 등이 가능해진다. 암 환자에서 유래되는 이들 세포를 사용함으로써, 예를 들어, 암 환자에서 WT1 면역요법이 효과를 가질 것인지의 여부를 예측하는 것 등이 가능해진다. 본 발명의 방법에서, 취득한 시료는 WT1 펩티드에 의한 자극의 전후로 배양되어 있어도 좋고, 상기 배양조건은 당업자가 적절히 결정할 수 있다. WT1 펩티드를 사용한 이들 세포의 자극은 일렉트로포레이션 등의 공지된 방법을 사용해서 행할 수 있고, 시험관내 또는 생체내의 어떤 경우에 행하여져도 좋다. 사이토카인 생산, 헬퍼 T세포, 세포 상해성 T세포의 반응이 존재하거나, 또는 사이토카인 생산량, 헬퍼 T세포 또는 세포 상해성 T세포의 반응량은 기지의 방법에 의해 조사할 수 있다.
본 발명은 또한 또 다른 형태에 있어서, 상기 WT1 펩티드를 필수 구성 성분으로서 포함하는, WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하기 위한 키트에 관한 것이다. 본 발명의 키트는 상기 WT1 펩티드 이외에, 예를 들어, 시료의 취득 수단, 사이토카인 등의 평가 수단 등을 포함하고 있어도 좋다. 일반적으로는, 키트에는 사용 설명서를 첨부한다. 본 발명의 키트를 사용함으로써, 상술한 WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하는 방법에서 간편 또한 신속하게 WT1 펩티드의 존재 또는 양을 결정하는 것이 가능하게 된다.
본 발명은 또한 이하를 제공한다:
WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화시키기 위한, WT1 펩티드를 포함하는 조성물이며, 상기 헬퍼 T세포가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와 상기 WT1 펩티드와의 복합체를 인식하는 것인, 조성물 및 상기 조성물을 유효 성분으로서 포함하는, 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약 조성물;
WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포 중 어느 하나를 유효 성분으로서 포함하는, 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약 조성물이며, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여하기 위한 의약 조성물; 및
WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화시키는 공정을 포함하는, 헬퍼 T세포의 활성화 방법이며, 상기 헬퍼 T세포가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와 상기 WT1 펩티드와의 복합체를 인식하는 것인, 방법.
본 발명은 또한, 이하를 제공한다:
(1) 헬퍼 T세포를 활성화시키기 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포를 포함하는 조성물이며, 상기 헬퍼 T세포가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와 상기 WT1 펩티드와의 복합체를 인식하는 것인, 조성물.
(2) 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포를 포함하는 조성물이며, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여되는, 조성물.
(3) 암을 치료 또는 예방하기 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포를 포함하는 조성물이며, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여되는, 조성물.
(4) WT1 펩티드를 포함하는, 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 기재된 조성물.
(5) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 한 항에 기재된 조성물.
(6) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드인, 상기 (5)에 기재된 조성물.
(7) WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체가 제시되어 있는 항원 제시 세포이며, 상기 MHC 클래스 II 분자가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자인, 항원 제시 세포.
(8) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, 상기 (7)에 기재된 항원 제시 세포.
(9) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드인, 상기 (8)에 기재된 항원 제시 세포.
(10) WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포이며, 상기 MHC 클래스 II 분자가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자인, 헬퍼 T세포.
(11) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, 상기 (10)에 기재된 헬퍼 T세포.
(12) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드인, 상기 (11)에 기재된 헬퍼 T세포.
(13) 상기 (12)에 기재된 헬퍼 T세포에 의해 활성화되는, 세포 상해성 T세포.
(14) 상기 (7) 내지 (9) 중 어느 한 항에 기재된 항원 제시 세포, 상기 (10) 내지 (12) 중 어느 한 항에 기재된 헬퍼 T세포 또는 상기 (13)에 기재된 세포 상해성 T세포 중 어느 하나를 유효 성분으로서 포함하는, 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약 조성물.
본 발명은 또한, 이하를 제공한다:
(1) WT1 펩티드를 항원 제시 세포에 첨가하여, 헬퍼 T세포를 활성화시키는 공정을 포함하는, 헬퍼 T세포의 활성화 방법이며, 상기 헬퍼 T세포가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와 상기 WT1 펩티드와의 복합체를 인식하는 것인, 방법.
(2) WT1 펩티드의 항원 제시 세포에의 첨가가, WT1 펩티드와 항원 제시 세포를 접촉시킴으로써, 또는 WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터를 항원 제시 세포에 도입함으로써 행하여지는, 상기 (1)에 기재된 방법.
(3) 세포 상해성 T세포의 활성화 방법이며, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포를 투여하는 것을 포함하는, 방법.
(4) 암을 치료 또는 예방하기 위한 방법이며, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포를 투여하는 것을 포함하는, 방법.
(5) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 한 항에 기재된 방법.
(6) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드인, 상기 (5)에 기재된 방법.
본 발명은 또한, 이하를 제공한다:
(1) 헬퍼 T세포를 활성화시키기 위한 의약 제조를 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 사용이며, 상기 헬퍼 T세포가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와 상기 WT1 펩티드와의 복합체를 인식하는 것인, 사용.
(2) 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위한 의약 제조를 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 사용이며, 상기 의약이 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여되는 것인, 사용.
(3) 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약 제조를 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 또는 상기 발현 벡터를 포함하는 세포의 사용이며, 상기 의약이 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여되는 것인, 사용.
(4) WT1 펩티드를 포함하는 의약의 제조를 위한, 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 기재된 사용.
(5) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드, 그의 변이체 또는 수식체인, 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 한 항에 기재된 사용.
(6) WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)를 포함하는 펩티드인, 상기 (5)에 기재된 사용.
이하에 실시예를 들어 본 발명을 구체적이고 또한 상세하게 설명하는데, 실시예는 본 발명을 한정하는 것으로 해석해서는 안된다.
실시예
실시예 1: WT1 펩티드(서열 번호 2) 특이적 Th1 클론 세포의 수립
WT1 펩티드(서열 번호 2)(이후 WT1-332로 표기) 특이적 Th1 클론 세포(이하, Th1 클론 세포)의 수립을 목적으로, 이하의 검토를 행하였다.
(1) 시험 재료
주된 시험 재료는 이하와 같다.
피검 물질
[표 1]
보관 조건: -30℃ 설정의 냉동고
*WT1-332: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)
피검 물질의 제조
10mM 아세트산으로 20mg/mL에 용해하고, 여과 멸균해서 냉동 보존(-30℃ 설정)하였다.
피더 세포용 말초혈 단핵구(PBMC)
1) 세포명: PBMC
2) 유래: 건강한 성인 혈액 제공자 말초혈
개인 정보 관리자의 관리 하에 연결 가능 익명화, 및 문서에 의한 설명에 따른 동의를 행하고, 본시험에서 채혈, 제조하였다.
3) 검체 조건: 피더 중, 어느 것인가가 클로닝 실시 검체와 상이한 것.
4) 채취 조건: 첨가 헤파린 나트륨 채혈 40mL
피더용 B-LCL 세포주
5) 세포주명: B-LCL 세포주
6) 유래: 인간 말초혈
7) 입수처: 리켄 셀 뱅크 또는 IHWG 셀 뱅크
군 구성
[표 2]
*세포 내 사이토카인 염색(ICS) 및 클로닝 후, 1회째의 ELISA 시험만 1웰에서 행하였다.
시약류
이 시험에 사용한 시약류 중, 특히 중요한 것을 하기에 나타냈다.
[표 3]
배지류의 제조
인간 AB형 혈청 및 소태자 혈청(FBS)은 비동화 처리 후, 0.2 ㎛ 필터로 여과해서 사용하였다. 배지는 PBMC 분리용에 20 U/mL 헤파린 HBSS를, B-LCL 세포용에 10％ FBS/RPMI-1640(100units/mL penicillin, 100μg/mL streptomycin) 배지를, 기타 배양에는 10％ 인간 AB형 혈청/AIM-V(인비트로젠) 배지를 사용하였다. 세포 배양은, 각 배지 중, 37℃-5％ CO2 인큐베이터에서 행하였다.
(2) 시험 방법
PBMC의 제조
건강인 자원봉사 말초혈로부터 비중 원심법에 의해 PBMC를 제조하고, 그 일부를 WT1-332 특이적 T세포의 유도에 사용하였다. 나머지 세포는 셀 뱅커(쥬지 필드 가부시끼가이샤) 안에 동결보존 하고, 재자극 시의 항원 제시 세포 또는 피더 세포로서 사용하였다.
WT1-332 특이적 T세포의 유도
제조한 PBMC를 1.5×106개/웰×10웰로 24웰 플레이트에 파종하고, 최종 농도 20μg/mL의 WT1-332 및 최종 농도 10ng/mL의 IL-7을 첨가해서 배양을 개시했다 (Day 0, 총 배지량: 2mL/웰).
1주일 후에 재자극을 행하였다. 재자극에는 먼저, 세포 농도를 3.0×106개/mL 이하로 제조한 항원 제시 세포용 PBMC에 최종 농도 20μg/mL의 WT1-332를 첨가해서 2시간 배양하고, 또한 마이토마이신 C(MMC) 용액(최종 농도=50μg/mL)을 첨가해서 45분간 배양하고, AIM-V로 세정해서 항원 제시 세포로 하였다. 이어서, 배양하던 PBMC를 회수 후, 접착 세포를 제거하고, 1.15-1.43×106개/웰로 파종하고, 동일수의 WT1/MMC 처리 완료된 항원 제시 세포와 함께, 최종 농도 10ng/mL의 IL-7을 첨가해서 배양을 재개했다(Day 7). 2일 후에 40 U/mL IL-2 함유 배지로 배양액의 절반량 교환을 행하고, 또한 격일로 20 U/mL IL-2 함유 배지로 배양액의 절반량 교환을 행하면서 1주일 배양을 계속하였다.
세포 내 사이토카인 염색(ICS)
Day 14에 배양 세포를 회수하고, 96웰 환저 플레이트에 2.0×105개씩 2웰에 파종하고, 한쪽에 20μg/mL WT1-332를, 다른 쪽에 용매를 첨가해서 4시간 배양한 후, 또한 최종 농도 1×의 Brefeldin A를 첨가해서 2시간 배양하였다. 세포를 회수하고, PE 표지 항 인간 CD4 항체, FITC 표지 항 인간 CD8 항체를 첨가하고, 4℃, 15분간 반응시켜, Staining Buffer로 세정하고, Cytofix Cytoperm Fix/Perm을 첨가하여, 4℃, 20분간 처리하였다. Perm./Wash Buffer로 세정하고, PerCP 표지 항 인간 IFN-γ 항체를 첨가해서 4℃, 30분간 반응시켜, Perm./Wash Buffer로 세정 후, FACS에 의해 해석하였다.
피더용 B-LCL 세포의 융해, 파종 및 계대
동결 보존 세포로부터 약 3×105개/mL로 배양 개시하고, 서브 콘플루언트 시에 계대 조작을 행하고, PHA 자극 시의 피더용 B-LCL 세포로 하였다.
MACS에 의한 CD4+세포의 단리
메이커의 권장 프로토콜에 준하여, 배양 세포로부터 MACS Microbeads를 사용해서 포지티브 셀렉션을 행하고, CD4+세포를 단리하였다.
한계 희석법에 의한 WT1-332 특이적 Th1 세포의 클로닝 및 증폭
각 피더용 B-LCL 세포 및 PBMC(세포 농도 3×106/mL 이하)를 마이토마이신 C 용액(최종 농도=50μg/mL)으로 CO2 인큐베이터 중 45분간 처리하고, AIM-V로 세정 후, PBMC 2종과 B-LCL 세포 2종의 합계 4종의 세포를 혼화(각 PBMC의 최종 농도 2.5×105개/mL, 각 B-LCL 세포의 최종 농도 2.5×104개/mL) 하였다. 이것을 클로닝하는 검체 수에 따라, 필요 세트 수 제조하고, 최종 농도 200ng/mL로 PHA를 첨가하여, PHA 함유 피더 세포 혼화액으로 하였다.
이어서, 분획한 CD4+세포 중, ICS의 결과로부터 CD4+IFN-γ+세포 비율이 높은 검체를 선택하고, 준비한 PHA 함유 피더 세포 혼화액으로, CD4+세포 농도가 10개/mL가 되도록 조정하고, 96웰 플레이트에 100μL/웰(PBMC 총량: 5.0×104cells/웰, B-LCL 세포: 5.0×103개/웰, PHA: 200ng/mL, CD4+세포: 1개/웰)로 파종하고, 배양을 개시하였다. 5일 후에 배양액과 등량의 80 U/mL IL-2 함유 배지를 첨가하고, 그 후 격일로 80 U/mL IL-2 함유 배지로 배양액의 절반량 교환을 행하였다. 그 사이에, 명확한 세포 증폭이 관찰된 웰은 48웰 플레이트에 스케일 업해 배양을 계속하였다.
클로닝 개시부터 10일 내지 14일 간격으로, 상기와 마찬가지로 PHA 자극에 의한 증폭 자극을 가했지만, 파종 시에, 배양 접시를 24웰 플레이트로, PBMC 총량을 1.0×106개/웰로, B-LCL 세포 총량을 1.0×105개/웰로, PHA 최종 농도를 50ng/mL로, 증폭시키는 Th1 클론 세포수는 2.0×105개/웰 이하로 변경하였다. 또한, IL-2 첨가의 타이밍을 배양 개시부터 3일 후로 하여 더 첨가하는 배지의 IL-2 함유량을 200 U/mL로 하였다.
Th1 클론 세포의 펩티드 자극
클로닝하고, 증폭시킨 Th1 클론 세포의 항원 반응성을 확인하기 위해서, 회수한 Th1 클론 세포를 96웰 환저 플레이트에 1웰 또는 3웰로 파종하였다. 이것에 10 ㎛ 아세트산 또는, 20μg/mL의 각 펩티드를 첨가하여, 배양을 개시해(총 배양액량: 200μL/웰), 약 24시간 후에 배양 상청을 회수하였다.
ELISA
각 배양 상청 중의 IFN-γ 농도는 각 배양 상청을 Assay Diluent(Becton Dickinson사)로 4배 희석 후에 측정하였다. IFN-γ 농도의 측정에는 BD OptEIA ELISA set(human IFN-γ, Becton Dickinson사)를 사용해 첨부 문서에 따라 측정했지만, 항체의 희석 농도를 500배로, 검량선의 범위를 18.75-1200pg/mL로, 또한 발색 반응시간을 5분으로 변경하고, 측정 영역을 초과한 경우에는 외삽치, 흡광도가 0을 하회한 경우에는 0으로서 취급하였다.
Th1 클론 세포 마스터 셀 뱅크의 제작
항원 반응성이 확인된 Th1 클론 세포를 셀 뱅커 안에서 동결보존하고, 마스터 셀 뱅크로 하였다.
평가 항목
WT1-332 자극 하에 14일간 배양을 행한 CD4+세포 중에, WT1-332 특이적 Th1 세포가 유의미하게 유도되어 있는 지의 여부를 평가하기 위해서, 하기 식에 따라 WT1-332 특이적 Th1 세포 비율(％)과, WT1-332 비특이적 Th1 비율(％)을 산출하였다.
WT1-332 특이적 Th1 세포 비율(％)
=WT1-332 자극 시의 CD4+세포 내 IFN-γ+세포수/총 생세포수×
분획 후 CD4+세포 비율/분획 전 CD4+세포 비율×100
WT1-332 비특이적 Th1 세포 비율(％)
=AcOH 첨가 시의 CD4+세포 내 IFN-γ+세포수/총 생세포수×100×
분획 후 CD4+세포 비율/분획 전 CD4+세포 비율×100
각 실험에서 WT1-332 특이적 Th1 비율로부터 WT1-332 비특이적 Th1 비율을 나눈 값이 높은 6 내지 7 검체에 대해서 클로닝을 실시하였다.
각 군의 배양 상청 중 IFN-γ 농도를 ELISA에 의해 측정하고, 용매 첨가 시에 대하여 WT1-332 첨가 시의 IFN-γ 생산량이 500pg/mL 이상 많고, 1.2배 이상 높은 경우에 항원 반응성이 유지되어 있는 것으로 판단하고, 그 후의 조작을 행하였다.
(3) 결과
여러 가지 Th1 클론 세포의 수립을 행할 수 있었다. 얻어진 클론의 일부는 타이핑 결과, 신규 구속 대립 유전자(allele)를 갖고 있는 것이 확인되었다. 결과를 표 4에 나타내었다. 이들 클론을 사용하여, 실시예 2에서 WT1-332가 특정한 HLA 구속성으로 Th1 세포를 활성화할 수 있을지 검토하였다.
[표 4]
* 밑줄은 신규한 구속 대립 유전자를 나타냄.
*HLA 타이핑을 실시하지 않는 HLA좌는 N.T.로 표기하였음.
실시예 2: 수립된 특이적 Th1 클론 세포의 구속 대립 유전자의 결정
실시예 1에서 WT1-332 첨가에 의해 수립된 특이적 Th1 클론 세포(이하, Th1클론 세포)에서, WT1-332가 특정한 HLA 구속성으로 T세포를 활성화할 수 있을지의 검토를 행하고, 또한 그 구속 대립 유전자를 확인하였다.
(1) 시험 물질
B-LCL 세포주
[표 5-1]
[표 5-2]
[표 5-3]
[표 5-4]
[표 5-5]
[표 5-6]
(2) 시험 방법
배지류의 제조
인간 AB형 혈청 및 FBS는 비동화 처리 후, 0.2 ㎛ 필터로 여과해서 사용하였다. 배지는 PBMC 분리용에 20 U/mL 헤파린 HBSS를, B-LCL 세포용에 10％ FBS 및 1％ P/S(100units/mL 페니실린, 100μg/mL 스트렙토마이신) 함유 RPMI-1640을, 그 밖의 배양에는 10％ 인간 AB형 혈청 함유 AIM-V 배지를 사용하였다. 세포 배양은 각 배지 중, 37℃-5％ CO2 인큐베이터에서 행하였다.
시험 개요
적당한 HLA 클래스 II 대립 유전자를 가진 B-LCL 세포에 WT1-332 펄스를 행한 것을 항원 제시 세포로 하고, Th1 클론 세포와 공배양 후, 생산되는 IFN-γ량을 측정함으로써, Th1 클론 세포의 HLA 구속성을 평가하였다.
구체적으로는, 피더용 B-LCL 세포 및 말초혈로 제조한 타가 PBMC를 피더 세포로서 사용하고, PHA 자극 하에서 Th1 클론 세포를 배양하였다. 이어서, WT1-332 또는 용매로 처리한 B-LCL 세포를 항원 제시 세포로 하여, 회수한 Th1 클론 세포와 공배양하고, 생산된 IFN-γ량을 측정해서 WT1-332 특이적 항원 자극의 유무를 평가하였다. 각각의 Th1 클론 세포의 HLA 클래스 II형에 기초하여, 일부 다른 형을 갖는 여러 가지 B-LCL 세포를 항원 제시 세포로서 사용함으로써, 각 Th1 클론 세포의 HLA 클래스 II 구속성을 평가하였다.
피더용 B-LCL 세포의 융해 및 파종
Day 0에 동결보존 세포로부터 1×105개/mL로 배양 개시하고, Day 3에 회수해서 PHA 자극 시의 피더용 B-LCL 세포로 하였다.
PBMC의 제조
Day 2까지 건강인 자원봉사 말초혈로부터 비중 원심법에 의해 제조하고, 세포수를 측정 후, 세포 펠릿을 회수하고, 셀 뱅커(미쯔비시 가가꾸 메디엔스 가부시끼가이샤)에 재현탁 후, 크라이오 튜브에 분주해서 -80℃ 설정의 냉동고 안에서 동결보존 하였다. PHA 자극 시에 동결보존 PBMC를 수시 융해하고, 피더용 PBMC로서 제공하였다.
Th1 클론 세포의 융해 및 파종
Day 2에, 동결보존 세포로부터 20 U/mL IL-2 함유 배지 중에서 2×106cells/mL 이하로 배양 개시하고, Day 3에 회수해서 PHA 자극 시의 Th1 클론 세포로 하였다.
Th1 클론 세포의 PHA 자극
Day 3에, 각 피더용 B-LCL 세포 및 PBMC를, 마이토마이신 C 용액(최종 농도=50μg/mL)으로 CO2 인큐베이터 중 45분간 처리하고, AIM-V로 세정 후, PBMC 2종과 B-LCL 세포 2종의 합계 4종의 세포를 혼화(각 PBMC의 최종 농도 1.0×106개/mL, 각 B-LCL 세포의 최종 농도 1.0×105개/mL) 하였다. 이것을 파종하는 Th1 클론 세포에 대하여 필요 세트수 제조하고, 최종 농도 100ng/mL로 PHA를 첨가하여, PHA 함유 피더 세포 혼화액으로 하였다. 이어서, 배양하던 Th1 클론 세포를 24웰 플레이트에 0.5mL/개(세포 농도 4.0×105개/mL)로 파종하고, 또한 PHA 함유 피더 세포 혼화액을 0.5mL/웰로 파종하고, 배양을 행하였다. Day 6에 배양액과 등량의 200 U/mL IL-2 함유 배지를 첨가하고, Day 8, Day 10, Day 12, Day 14에는 40 U/mL IL-2 함유 배지로 배양액의 절반량 교환을 행하고, Day 15에 구속성 평가 시험에 제공하였다. 또한, 배양 도중에 세포가 콘플루언트에 도달한 경우에는, 20 U/mL IL-2 함유 배지로 계대 배양을 행하였다.
구속성 평가용 항원제시 B-LCL 세포의 융해 및 파종
Day 11에, 동결보존 세포로부터 약 1×105개/mL로 배양 개시하고, Day 15에 세포를 회수해 구속성 평가 시험에 사용하였다.
구속성 평가 시험
Day 15에 Th1 클론 세포를 회수하고, 회수 세포수에 따라서 96웰 환저 플레이트에 1.0-2.5×104cells/100μL/웰, 3웰로 파종하였다. 세포 농도를 1×106개/mL로 제조한 항원제시용 B-LCL 세포를 4-7mL씩 코니컬 튜브 2개에 분주하고, 한쪽에 최종 농도 10 ㎛로 아세트산을, 다른 쪽에 최종 농도 20μg/mL로 WT1-332를 첨가해서 2시간 배양한 후, AIM-V로 세정하고, Th1 클론 세포를 파종한 96웰 플레이트에2.5×104cells/100μL/웰로 첨가하고, 16시간 이상 배양하였다. 또한, WT1-332 반응성을 확인하기 위해서, 동 플레이트에 B-LCL 세포 대신 WT1-332 또는 용매를 첨가한 웰을 준비하였다.
ELISA
각 배양 상청 중의 IFN-γ 농도는 각 배양 상청을 Assay Diluent(Becton Dickinson)로 100배 희석 후에 측정하였다. IFN-γ 농도의 측정에는 BD OptEIA ELISA set(human IFN-γ, Becton Dickinson)를 사용해 첨부문서에 따라 측정했지만, 검량선의 범위를 5-640pg/mL로, 또한 발색 반응시간을 10분으로 변경하고, 측정 영역을 초과한 경우에는 외삽치, 흡광도가 0을 하회한 경우에는 0으로서 취급하였다.
평가 항목
각 배양 상청 중의 IFN-γ량
(3) 결과
(i) Th1 클론 세포 CloneR82-1(DRB1*08:02/14:03, DPB1*02:01, DQB1*03:01/ 03:02)의 HLA 구속성 평가 시험
CloneR82-1의 IFN-γ 생산은 WT1-332 펄스 DRB1*08:02(+) B-LCL(HEV#0052 및 HEV#0324)의 자극에 의해 검출되었다(도 1). 따라서, CloneR82-1은 WT1-332 특이적 HLA-DRB1*08:02-구속성 Th1 클론인 것이 판명되었다.
(ii) Th1 클론 세포 CloneR132-1(DRB1*01:01/13:02, DPB1*04:01/04:02)의 HLA 구속성 평가 시험
CloneR132-1의 IFN-γ 생산은 WT1-332 펄스 DRB1*13:02(+) B-LCL(HEV#0046)의 자극에 의해서만 검출되었다(도 2). 따라서, CloneR132-1은 WT1-332 특이적 HLA-DRB1*13:02-구속성 Th1 클론인 것이 판명되었다.
(iii) Th1 클론 세포 CloneR143-1(DRB1*14:03/15:02, DPB1*02:01/03:01)의 HLA 구속성 평가 시험
CloneR143-1의 IFN-γ 생산은 WT1-332 펄스 DRB1*14:03(+) B-LCL(HEV#0052)의 자극에 의해서만 검출되었다(도 3). 따라서, CloneR143-1은 WT1-332 특이적 HLA-DRB1*14:03 구속성 Th1 클론인 것이 확인되었다.
(iv) Th1 클론 세포 CloneR145-2(DRB1*04:05/14:05, DPB1*05:01)의 HLA 구속성 평가 시험
Clone R145-2의 IFN-γ 생산은 WT1-332 펄스 DRB1*14:05(+) B-LCL(ISH5)의 자극에 의해서만 검출되었다(도 4). 따라서, Clone R145-2는 WT1-332 특이적 HLA-DRB1*14:05 구속성 Th1 클론인 것이 판명되었다.
(v) Th1 클론 세포 CloneQ32-1(DRB1*08:02/14:03, DPB1*02:01, DQB1*03:01/03:02)의 HLA 구속성 평가 시험
CloneQ32-1의 IFN-γ 생산은 WT1-332 펄스 DQB1*03:02(+) B-LCL(HEV#0052 및 HEV#0238)의 자극에 의해 검출되었다(도 5). 따라서, CloneQ32-1은 WT1-332 특이적 HLA-DQB1*03:02 구속성 Th1 클론인 것이 확인되었다.
(vi) Th1 클론 세포 CloneQ41-1(DRB1*04:05/15:01, DPB1*05:01, DQB1*04:01/06:02)의 HLA 구속성 평가 시험
CloneQ41-1의 IFN-γ 생산은 WT1-332를 펄스한 여러 가지 항원 제시 세포(HEV#0174, HEV#0013, HEV#0035 및 HEV#0050)의 자극에 의해 검출되었지만, WT1-332를 펄스한 HEV#0201 및 HEV#0073에서는 검출되지 않았다(도 6). DQB1*04:01은 HEV#0174, HEV#0013, HEV#0035 및 0050에서만 발현하고 있다. 따라서, CloneQ41-1은 WT1-332 특이적 HLA-DQB1*04:01 구속성 Th1 클론인 것이 확인되었다.
본 발명에 의해, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자에 결합하는 능력을 갖는 WT1 펩티드를 사용하여, 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포를 활성화하는 방법 및 그를 위한 조성물, 및 헬퍼 T세포 및/또는 세포 상해성 T세포를 활성화하는 것에 의한 암의 치료 및/또는 예방용 의약 조성물 등이 제공되므로, 의약품 등의 분야, 예를 들어, WT1 유전자를 고발현하고 있는 여러 가지 조혈기 종양, 고형암의 예방약 또는 치료약의 개발, 제조 분야에서 이용 가능하다.
서열 번호 2: 합성 펩티드
SEQUENCE LISTING
<110> Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.
Osaka University
<120> Method for activating helper T cell
<130> 671805
<150> JP 2012-274494
<151> 2012-12-17
<160> 2
<170> PatentIn version 3.2
<210> 1
<211> 449
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Gly Ser Asp Val Arg Asp Leu Asn Ala Leu Leu Pro Ala Val Pro
1 5 10 15
Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Cys Ala Leu Pro Val Ser Gly Ala Ala
20 25 30
Gln Trp Ala Pro Val Leu Asp Phe Ala Pro Pro Gly Ala Ser Ala Tyr
35 40 45
Gly Ser Leu Gly Gly Pro Ala Pro Pro Pro Ala Pro Pro Pro Pro Pro
50 55 60
Pro Pro Pro Pro His Ser Phe Ile Lys Gln Glu Pro Ser Trp Gly Gly
65 70 75 80
Ala Glu Pro His Glu Glu Gln Cys Leu Ser Ala Phe Thr Val His Phe
85 90 95
Ser Gly Gln Phe Thr Gly Thr Ala Gly Ala Cys Arg Tyr Gly Pro Phe
100 105 110
Gly Pro Pro Pro Pro Ser Gln Ala Ser Ser Gly Gln Ala Arg Met Phe
115 120 125
Pro Asn Ala Pro Tyr Leu Pro Ser Cys Leu Glu Ser Gln Pro Ala Ile
130 135 140
Arg Asn Gln Gly Tyr Ser Thr Val Thr Phe Asp Gly Thr Pro Ser Tyr
145 150 155 160
Gly His Thr Pro Ser His His Ala Ala Gln Phe Pro Asn His Ser Phe
165 170 175
Lys His Glu Asp Pro Met Gly Gln Gln Gly Ser Leu Gly Glu Gln Gln
180 185 190
Tyr Ser Val Pro Pro Pro Val Tyr Gly Cys His Thr Pro Thr Asp Ser
195 200 205
Cys Thr Gly Ser Gln Ala Leu Leu Leu Arg Thr Pro Tyr Ser Ser Asp
210 215 220
Asn Leu Tyr Gln Met Thr Ser Gln Leu Glu Cys Met Thr Trp Asn Gln
225 230 235 240
Met Asn Leu Gly Ala Thr Leu Lys Gly Val Ala Ala Gly Ser Ser Ser
245 250 255
Ser Val Lys Trp Thr Glu Gly Gln Ser Asn His Ser Thr Gly Tyr Glu
260 265 270
Ser Asp Asn His Thr Thr Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg Ile
275 280 285
His Thr His Gly Val Phe Arg Gly Ile Gln Asp Val Arg Arg Val Pro
290 295 300
Gly Val Ala Pro Thr Leu Val Arg Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys
305 310 315 320
Arg Pro Phe Met Cys Ala Tyr Pro Gly Cys Asn Lys Arg Tyr Phe Lys
325 330 335
Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His Thr Gly Glu Lys Pro
340 345 350
Tyr Gln Cys Asp Phe Lys Asp Cys Glu Arg Arg Phe Ser Arg Ser Asp
355 360 365
Gln Leu Lys Arg His Gln Arg Arg His Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln
370 375 380
Cys Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg Ser Asp His Leu Lys Thr
385 390 395 400
His Thr Arg Thr His Thr Gly Lys Thr Ser Glu Lys Pro Phe Ser Cys
405 410 415
Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys Lys Phe Ala Arg Ser Asp Glu Leu Val
420 425 430
Arg His His Asn Met His Gln Arg Asn Met Thr Lys Leu Gln Leu Ala
435 440 445
Leu
<210> 2
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic peptide
<400> 2
Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His
1 5 10 15
Claims (14)
- 헬퍼 T세포를 활성화시키기 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 및 상기 발현 벡터를 포함하는 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나를 포함하는 조성물이며, 상기 WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)로 이루어진 펩티드이고, 상기 헬퍼 T세포가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자와 상기 WT1 펩티드와의 복합체를 인식하는 것인, 조성물.
- 세포 상해성 T세포를 활성화시키기 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 및 상기 발현 벡터를 포함하는 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나를 포함하는 조성물이며, 상기 WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)로 이루어진 펩티드이고, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여되는, 조성물.
- 암을 치료 또는 예방하기 위한, WT1 펩티드, WT1 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터, 및 상기 발현 벡터를 포함하는 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나를 포함하는 조성물이며, 상기 WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)로 이루어진 펩티드이고, HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자를 갖는 대상에게 투여되는, 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, WT1 펩티드를 포함하는, 조성물.
- WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체가 제시되어 있는 항원 제시 세포이며, 상기 WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)로 이루어진 펩티드이고, 상기 MHC 클래스 II 분자가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자인, 항원 제시 세포.
- WT1 펩티드를 포함하는 항원 펩티드와 MHC 클래스 II 분자와의 복합체를 인식하는 헬퍼 T세포이며, 상기 WT1 펩티드가 아미노산 서열: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His(서열 번호 2)로 이루어진 펩티드이고, 상기 MHC 클래스 II 분자가 HLA-DRB1*08:02 분자, HLA-DRB1*13:02 분자, HLA-DRB1*14:03 분자, HLA-DRB1*14:05 분자, HLA-DQB1*03:02 분자 및 HLA-DQB1*04:01 분자로부터 선택되는 어느 하나의 MHC 클래스 II 분자인, 헬퍼 T세포.
- 제6항에 따른 헬퍼 T세포에 의해 활성화되는, 세포 상해성 T세포.
- 제5항에 따른 항원 제시 세포, 제6항에 따른 헬퍼 T세포, 또는 제7항에 따른 세포 상해성 T세포 중 어느 하나를 유효 성분으로서 포함하는, 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JPJP-P-2012-274494 | 2012-12-17 | ||
| JP2012274494 | 2012-12-17 | ||
| PCT/JP2013/083580 WO2014098012A1 (ja) | 2012-12-17 | 2013-12-16 | ヘルパーt細胞の活性化方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20150096697A KR20150096697A (ko) | 2015-08-25 |
| KR102158225B1 true KR102158225B1 (ko) | 2020-09-21 |
Family
ID=50978342
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020157018417A KR102158225B1 (ko) | 2012-12-17 | 2013-12-16 | 헬퍼 t세포의 활성화 방법 |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9833493B2 (ko) |
| EP (1) | EP2933261B1 (ko) |
| JP (1) | JP6530192B2 (ko) |
| KR (1) | KR102158225B1 (ko) |
| CN (2) | CN104995203B (ko) |
| AR (1) | AR094026A1 (ko) |
| AU (1) | AU2013365067B2 (ko) |
| BR (1) | BR112015013697A2 (ko) |
| CA (1) | CA2892660C (ko) |
| EA (1) | EA201591168A1 (ko) |
| ES (1) | ES2805337T3 (ko) |
| HK (1) | HK1216755A1 (ko) |
| IL (1) | IL239056A0 (ko) |
| MX (1) | MX2015007745A (ko) |
| MY (1) | MY175935A (ko) |
| NZ (1) | NZ708990A (ko) |
| PH (1) | PH12015501361A1 (ko) |
| SG (2) | SG11201504530VA (ko) |
| TW (1) | TWI646970B (ko) |
| UA (1) | UA118962C2 (ko) |
| WO (1) | WO2014098012A1 (ko) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20080070835A1 (en) | 2003-11-05 | 2008-03-20 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc | Hla-Dr-Binding Antigen Peptide Derived From Wt1 |
| US8765687B2 (en) | 2005-10-17 | 2014-07-01 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | WT1 HLA class II-binding peptides and compositions and methods comprising same |
| CA2645766A1 (en) | 2006-04-10 | 2007-10-25 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Immunogenic wt-1 peptides and methods of use thereof |
| PT2119778E (pt) | 2007-02-27 | 2016-02-15 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Método para ativação de célula t auxiliar e composição para utilização no método |
| AR083295A1 (es) | 2010-10-05 | 2013-02-13 | Univ Osaka | Metodo para activar celulas t auxiliares |
| EP3520810A3 (en) | 2012-01-13 | 2019-11-06 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Immunogenic wt1 peptides and use thereof |
| WO2014098012A1 (ja) | 2012-12-17 | 2014-06-26 | 大塚製薬株式会社 | ヘルパーt細胞の活性化方法 |
| US9919037B2 (en) | 2013-01-15 | 2018-03-20 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof |
| US10815273B2 (en) | 2013-01-15 | 2020-10-27 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof |
| EP3231438B1 (en) | 2014-12-11 | 2020-06-17 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Wt1 immunotherapy for intraocular angiogenic disease |
| CN111647066B (zh) * | 2020-07-01 | 2020-12-18 | 维肽瀛(上海)生物技术有限公司 | Wt1多肽肿瘤抑制剂 |
| AU2022327884A1 (en) | 2021-08-12 | 2024-02-22 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Pharmaceutical composition and method for treatment or prevention of cancer |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012046730A1 (ja) | 2010-10-05 | 2012-04-12 | 国立大学法人大阪大学 | ヘルパーｔ細胞の活性化方法 |
Family Cites Families (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5726288A (en) | 1989-11-13 | 1998-03-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Localization and characterization of the Wilms' tumor gene |
| AU4932199A (en) | 1998-07-31 | 2000-02-21 | Haruo Sugiyama | Cancer antigens based on tumor suppressor gene wt1 product |
| US7063854B1 (en) | 1998-09-30 | 2006-06-20 | Corixa Corporation | Composition and methods for WTI specific immunotherapy |
| MXPA01003344A (es) | 1998-09-30 | 2004-04-21 | Corixa Corp | Composiciones y metodos para inmunoterapia especifica de wt1. |
| US20030235557A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-12-25 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| EP1261711A2 (en) | 2000-02-22 | 2002-12-04 | Corixa Corporation | Compositions and methods for diagnosis and therapy of malignant mesothelioma |
| US20040097703A1 (en) | 2001-03-22 | 2004-05-20 | Haruo Sugiyama | Wt1 modified peptide |
| GB0108491D0 (en) | 2001-04-04 | 2001-05-23 | Gendaq Ltd | Engineering zinc fingers |
| CA2451846A1 (en) | 2001-06-29 | 2003-01-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cancer vaccine comprizing a cancer antigen based on the product of a tumor suppressor gene wt1 and a cationic liposome |
| US8735357B2 (en) | 2001-09-28 | 2014-05-27 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Method of inducing antigen-specific T cells |
| US20050002951A1 (en) | 2001-09-28 | 2005-01-06 | Haruo Sugiyama | Novel method of inducing antigen-specific t cells |
| WO2003106682A1 (ja) | 2002-06-12 | 2003-12-24 | 中外製薬株式会社 | Ｈｌａ−ａ２４拘束性癌抗原ペプチド |
| US7342092B2 (en) | 2002-09-12 | 2008-03-11 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Cancer antigen peptide formulations |
| DE60329201D1 (de) | 2002-09-20 | 2009-10-22 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Substituierte wt1-peptide |
| KR20120054644A (ko) | 2003-01-15 | 2012-05-30 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이량체화 펩티드 |
| EP2343083B1 (en) | 2003-06-27 | 2014-01-15 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Method of diagnosing cancer comprising the measurement of WT1-specific CTL precursor cells |
| US20080070835A1 (en) * | 2003-11-05 | 2008-03-20 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc | Hla-Dr-Binding Antigen Peptide Derived From Wt1 |
| DK1731605T3 (da) | 2004-03-31 | 2010-05-25 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Cancerantigenpeptider der er afledt af WT1 |
| JP4719876B2 (ja) | 2005-04-04 | 2011-07-06 | 国立大学法人愛媛大学 | Ｈｌａクラスｉｉ拘束性ｗｔ１抗原ペプチド |
| US8765687B2 (en) | 2005-10-17 | 2014-07-01 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | WT1 HLA class II-binding peptides and compositions and methods comprising same |
| JP4394724B2 (ja) | 2005-11-30 | 2010-01-06 | 株式会社癌免疫研究所 | 新規ペプチド化合物 |
| US7420880B2 (en) | 2005-12-29 | 2008-09-02 | Timex Group B.V. | Multimode electronic device with calibrating/setting mechanism |
| CA2886551A1 (en) | 2006-02-22 | 2007-08-30 | Haruo Sugiyama | Hla-a*3303-restricted wt1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same |
| CA2645766A1 (en) * | 2006-04-10 | 2007-10-25 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Immunogenic wt-1 peptides and methods of use thereof |
| AU2007340679B2 (en) | 2006-12-28 | 2013-09-12 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | HLA-A*1101-restricted WT1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same |
| PT2119778E (pt) | 2007-02-27 | 2016-02-15 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Método para ativação de célula t auxiliar e composição para utilização no método |
| KR101669279B1 (ko) | 2007-03-05 | 2016-10-26 | 인터내셔널 인스티튜트 오브 캔서 이무놀로지 인코퍼레이티드 | 암 항원 특이적 ｔ 세포의 수용체 유전자 및 그것에 따라 코드되는 펩티드 및 이들의 사용 |
| AR076349A1 (es) * | 2009-04-23 | 2011-06-01 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Peptido auxiliar del antigeno del cancer |
| WO2014098012A1 (ja) | 2012-12-17 | 2014-06-26 | 大塚製薬株式会社 | ヘルパーt細胞の活性化方法 |
-
2013
- 2013-12-16 WO PCT/JP2013/083580 patent/WO2014098012A1/ja active Application Filing
- 2013-12-16 SG SG11201504530VA patent/SG11201504530VA/en unknown
- 2013-12-16 EA EA201591168A patent/EA201591168A1/ru unknown
- 2013-12-16 CN CN201380065804.3A patent/CN104995203B/zh active Active
- 2013-12-16 ES ES13864968T patent/ES2805337T3/es active Active
- 2013-12-16 TW TW102146368A patent/TWI646970B/zh active
- 2013-12-16 CN CN201910520821.0A patent/CN110195040A/zh active Pending
- 2013-12-16 MY MYPI2015701777A patent/MY175935A/en unknown
- 2013-12-16 EP EP13864968.6A patent/EP2933261B1/en active Active
- 2013-12-16 JP JP2014553122A patent/JP6530192B2/ja active Active
- 2013-12-16 MX MX2015007745A patent/MX2015007745A/es unknown
- 2013-12-16 BR BR112015013697A patent/BR112015013697A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-12-16 NZ NZ708990A patent/NZ708990A/en unknown
- 2013-12-16 AU AU2013365067A patent/AU2013365067B2/en active Active
- 2013-12-16 AR ARP130104756A patent/AR094026A1/es unknown
- 2013-12-16 SG SG10201705028WA patent/SG10201705028WA/en unknown
- 2013-12-16 CA CA2892660A patent/CA2892660C/en active Active
- 2013-12-16 UA UAA201507132A patent/UA118962C2/uk unknown
- 2013-12-16 US US14/652,298 patent/US9833493B2/en active Active
- 2013-12-16 KR KR1020157018417A patent/KR102158225B1/ko active IP Right Grant
-
2015
- 2015-05-28 IL IL239056A patent/IL239056A0/en unknown
- 2015-06-16 PH PH12015501361A patent/PH12015501361A1/en unknown
-
2016
- 2016-04-20 HK HK16104510.5A patent/HK1216755A1/zh unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012046730A1 (ja) | 2010-10-05 | 2012-04-12 | 国立大学法人大阪大学 | ヘルパーｔ細胞の活性化方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Microbiol Immunol.,52:591-600(2008.12.1.)* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL239056A0 (en) | 2015-07-30 |
| PH12015501361B1 (en) | 2015-09-02 |
| JPWO2014098012A1 (ja) | 2017-01-12 |
| ES2805337T3 (es) | 2021-02-11 |
| SG10201705028WA (en) | 2017-07-28 |
| EA201591168A1 (ru) | 2016-05-31 |
| BR112015013697A2 (pt) | 2017-11-14 |
| AU2013365067B2 (en) | 2017-10-05 |
| HK1216755A1 (zh) | 2016-12-02 |
| KR20150096697A (ko) | 2015-08-25 |
| SG11201504530VA (en) | 2015-07-30 |
| JP6530192B2 (ja) | 2019-06-12 |
| AU2013365067A1 (en) | 2015-07-09 |
| NZ708990A (en) | 2020-03-27 |
| TW201429487A (zh) | 2014-08-01 |
| US9833493B2 (en) | 2017-12-05 |
| CA2892660A1 (en) | 2014-06-26 |
| MY175935A (en) | 2020-07-15 |
| CA2892660C (en) | 2022-02-15 |
| EP2933261A4 (en) | 2016-07-06 |
| AR094026A1 (es) | 2015-07-08 |
| PH12015501361A1 (en) | 2015-09-02 |
| EP2933261B1 (en) | 2020-06-10 |
| CN110195040A (zh) | 2019-09-03 |
| TWI646970B (zh) | 2019-01-11 |
| WO2014098012A1 (ja) | 2014-06-26 |
| EP2933261A1 (en) | 2015-10-21 |
| CN104995203A (zh) | 2015-10-21 |
| US20150328278A1 (en) | 2015-11-19 |
| UA118962C2 (uk) | 2019-04-10 |
| CN104995203B (zh) | 2019-06-28 |
| MX2015007745A (es) | 2015-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102158225B1 (ko) | 헬퍼 t세포의 활성화 방법 | |
| KR102171794B1 (ko) | 헬퍼 ｔ 세포의 활성화 방법 | |
| KR101391561B1 (ko) | Ｈｌａ-ａ*3303 구속성 ｗｔ1 펩티드, 및 그것을 포함하는 의약 조성물 | |
| KR101598228B1 (ko) | 헬퍼 ｔ 세포의 활성화 방법 및 그를 위한 조성물 | |
| KR20090102772A (ko) | Ｈｌａ-ａ*1101 구속성 ｗｔ1 펩티드 및 이를 포함하는 의약 조성물 | |
| KR20170046192A (ko) | 암 항원 헬퍼 펩티드 | |
| CN109072219B (zh) | 肿瘤抗原肽 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| N231 | Notification of change of applicant | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |