KR102136892B1 - 조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법 - Google Patents

조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102136892B1
KR102136892B1 KR1020200034535A KR20200034535A KR102136892B1 KR 102136892 B1 KR102136892 B1 KR 102136892B1 KR 1020200034535 A KR1020200034535 A KR 1020200034535A KR 20200034535 A KR20200034535 A KR 20200034535A KR 102136892 B1 KR102136892 B1 KR 102136892B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ivermectin
present
gill
ppm
fish
Prior art date
Application number
KR1020200034535A
Other languages
English (en)
Inventor
한현자
최혜승
조미영
김명석
김나영
정승희
Original Assignee
대한민국
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대한민국 filed Critical 대한민국
Priority to KR1020200034535A priority Critical patent/KR102136892B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102136892B1 publication Critical patent/KR102136892B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/105—Aliphatic or alicyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/116—Heterocyclic compounds
    • A23K20/132—Heterocyclic compounds containing only one nitrogen as hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/116—Heterocyclic compounds
    • A23K20/137—Heterocyclic compounds containing two hetero atoms, of which at least one is nitrogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/163—Sugars; Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/10—Anthelmintics

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 어류 기생충, 특히 조피볼락(Sebastes schlegelii)에 기생하는 아가미흡충인 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)의 구제제 및 구제방법에 관한 것이다. 본 발명은 오랜 기간 사용되어 내성이 생긴 프라지콴텔에 비해 높은 구제 효과를 나타내는 기생충 구제제에 관한 것으로서, 조피볼락의 아가미에 감염되어 높은 폐사를 유발하는 아가미흡충을 보다 효과적으로 구제할 수 있으므로, 어류 양식 산업에 매우 유용하게 이용될 수 있다.

Description

조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법{Parasiticide and Method for exterminating Parasites in Sebastes schlegelii}
본 발명은 어류 기생충, 특히 조피볼락(Sebastes schlegelii)에 기생하는 아가미흡충인 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)의 구제제 및 구제방법에 관한 것이다.
조피볼락(Sebastes schlegelii)은 한국 각 해안과 일본 북해도 이남, 중국 북부 연안 등의 북서태평양 지역에 주로 서식하는 난태생 어종이다. 조피볼락은 1980년대 중반 대량 인공 종묘 생산기술 확립, 1990년대 해상가두리양식의 본격화 및 해산어 배합사료기술의 개발 등에 힘입어 양식생산량이 급증하였고, 현재는 넙치에 이어 한국에서 두 번째로 많이 양식되고 있는 품종이다(Choi et al., J. Fish Pathol., 21(3)：259 ~ 270 (2008); Choi et al., J. Fish Pathol., 9(2), 119-126 (1996)). 2018년 22,686톤이 생산되어 양식 생산량의 약 28.2%를 차지하였다(KOSIS, 2019).
조피볼락은 양식과정에서 다양한 질병에 감염되는데, 그 중에서도 조피볼락의 아가미에 감염되어 높은 폐사를 유발하는 아가미흡충 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)에 의해 심각한 피해를 입고 있다. 양식 조피볼락의 아가미흡충 구제를 위해, 프라지콴텔(Praziquantel)을 경구투여하여 사용하고 있다(Kim et al., Journal of fish pathology. 1998 11(1):29-33; Kim et al., Diseases of Aquatic Organisms, 40(3):229-31 (2000)). 다만, 약 20년간 프라지콴텔을 사용하면서 프라지콴텔의 조피볼락 아가미흡충에 대한 구충 효과가 낮아지고 있다. 오랜 기간 사용에 의해 아가미흡충이 프라지콴텔에 대해 내성이 생긴 것으로 여겨지고 있다. 이에 따라 새로운 구충제에 대한 개발 필요성이 제시되었다(Kang et al., Diseases of Aquatic Organisms, 119, 259-263 (2016)).
이에 본 발명자들은, 아가미흡충 구제 효과를 나타내는 구충제를 확인하고, 아가미흡충에 감염된 조피볼락에 대해 효과적인 구제 효과를 나타내는 구충제를 선별하여 본 발명을 완성하였다.
본 배경기술 부분에 기재된 상기 정보는 오직 본 발명의 배경에 대한 이해를 향상시키기 위한 것이며, 이에 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가지는 자에게 있어 이미 알려진 선행기술을 형성하는 정보를 포함하지 않을 수 있다.
본 발명의 목적은 조피볼락(Sebastes schlegelii)에 기생하는 아가미흡충 구제제를 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 구제제를 어류에 투여하는 것을 특징으로 하는 기생충 구제방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 구제제를 포함하는 어류용 사료를 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 페반텔(Febantel), 메벤다졸(Mebendazole), 아자메티포스(Azamethiphos), 이버멕틴(Ivermectin) 및 이들의 약학적으로 허용할 수 있는 염으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 기생충 구제용 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 조성물을 어류에 투여하는 것을 특징으로 하는 어류의 기생충 구제방법을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 조성물을 유효량 함유하는 것을 특징으로 하는 어류용 사료를 제공한다.
본 발명은 오랜 기간 사용되어 내성이 생긴 프라지콴텔에 비해 높은 구제 효과를 나타내는 기생충 구제제에 관한 것으로서, 조피볼락의 아가미에 감염되어 높은 폐사를 유발하는 아가미흡충을 보다 효과적으로 구제할 수 있으므로, 어류 양식 산업에 매우 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 조피볼락 아가미흡충의 in vitro 구충 시험 방법을 나타낸 것으로, (A) 구충제 농도별 살충 시험, (B) 운동성 여부에 따른 살충 효과 판정 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 조피볼락 아가미흡충의 실체 현미경 검경 결과(x40)를 나타낸 것으로, (A) Praziquantel 700ppm에서 아가미흡충 후고착기, (B) 정상적인 아가미흡충 후고착기이다.
도 3은 조피볼락 아가미흡충의 in vivo 구충 시험 방법을 나타낸 것으로, (A) 구충제 경구투여 방법, (B) 구충제 투여 후 조피볼락 아가미를 나타낸 것이다.
도 4는 구충제(3종) 1회 경구투여에 따른 조피볼락 아가미흡충 구제효과 조사 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 구충제(3종) 4회 경구투여에 따른 조피볼락 아가미흡충 구제효과 조사 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 농도별 페반텔 투여 후 조피볼락의 병리조직 검경 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 농도별 이버멕틴 투여 후 조피볼락의 병리조직 검경 결과를 나타낸 것이다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
본 발명자들은 조피볼락에 기생하는 아가미흡충인 마이크로코타일 세바스티스 감염을 구제할 수 있는 구제제를 개발하기 위하여, 8종의 구충제를 선별하였으며, 이와 같은 8개 후보물질에 대해 농도별로 아가미흡충에 대한 사멸 효과를 측정한 결과, 아가미흡충 구제제로 사용되어 온 프라지콴텔(Praziquantel)에 비해 페반텔(Febantel), 메벤다졸(Mebendazole), 아자메티포스(Azamethiphos), 이버멕틴(Ivermectin)이 효과적으로 아가미흡충에 대한 사멸 효과를 보임을 확인할 수 있었다.
따라서, 본 발명은 일 관점에서, 페반텔(Febantel), 메벤다졸(Mebendazole), 아자메티포스(Azamethiphos), 이버멕틴(Ivermectin) 및 이들의 약학적으로 허용할 수 있는 염으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 기생충 구제용 조성물에 관한 것이다.
페반텔(Febantel)은 1975년 Bayer에 의해 개발된 pro-benzimidazole로서, 생체 내에서 대사되어 fenbendazole 및 fenbendazole sulfoxide(oxfendazole)로 전환된다(Stephen W Page, in Small Animal Clinical Pharmacology (Second Edition), 2008).
메벤다졸(Mebendazole)은 합성 benzimidazole로서, 충체의 포도당 섭취를 억제하여 glycogen 결핍을 유도해 충체를 죽게 한다. 광범위한 장내 선충류 감염에 사용하며, 유충기에 대해서도 다소 효과가 있다(임상 기생충학, 2011. 1. 25., 채종일).
아자메티포스(Azamethiphos)는 organothiophosphate 살충제로서, acetylcholine을 choline 및 acetic acid로 분해하는 데 도움이 되는 효소 acetylcholinesterase(EC 3.1.1.7)의 작용을 방해하는 EC 3.1.1.*(carboxylic ester hydrolase) 억제제이다.
이버멕틴(Ivermectin)은 Avermectins의 기질로 알려져 있으며, avermectin B1a가 최소한 83%, B1b가 20% 이하로 구성되어 있다. 작용기전에 대해서는 선충과 절지동물의 말초신경에 있는 gamma amino butyric acid(GABA)의 방출을 유도하는 신호전달을 강화시켜 충체의 말초신경을 마비시키는 것으로 알려졌다. 회선사상충증(onchocerciasis)과 분선충증(strongyloidiasis)에 대한 1차 치료약제이다. 림프관 사상충증(lymphatic filariasis)과 기타 선충류 감염증에도 광범위하게 사용된다(임상 기생충학, 2011. 1. 25., 채종일)
상기 페반텔(Febantel), 메벤다졸(Mebendazole), 아자메티포스(Azamethiphos) 및 이버멕틴(Ivermectin)의 조피볼락 아가미흡충에 대한 구제 효과는 전혀 알려진 바 없다.
본 발명을 적용할 수 있는 상기 어류는 조피볼락(Sebastes schlegelii)인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 기생충은 아가미흡충인 것을 특징으로 할 수 있으며, 상기 아가미흡충은 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, “유효성분”이라 함은 내재된 약리작용에 의해 그 약품의 효능, 효과를 직접 또는 간접적으로 발현한다고 기대되는 물질 또는 물질군으로서 주성분을 포함하는 것을 의미한다.
본 발명에 있어서, 바람직하게는, 상기 페반텔(Febantel)의 농도는 어체중당(kg) 50~500ppm인 것을 특징으로 할 수 있으며, 상기 이버멕틴(Ivermectin)의 농도는 어체중당(kg) 0.02~2ppm인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 어류의 기생충 구제용 조성물은 하나의 양태로 약학제제일 수 있으며, 본 발명의 약학제제는 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 투여될 수 있다. 경구 투여 시에는 상기 유효성분 이외에 결합제, 활택제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소, 향료 등을 추가로 포함할 수 있다. 주사제의 경우에, 본 발명의 약학제제는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장화제, 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있다. 또한, 국소 투여 시에 본 발명의 약학제제는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등을 사용할 수 있다.
본 발명의 약학제제의 제형은 상술한 바와 같이 약학적으로 허용가능한 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있으며, 특히 경구투여용 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명은 다른 관점에서, 상기 어류의 기생충 구제용 조성물을 어류에 투여하는 것을 특징으로 하는 어류의 기생충 구제방법에 관한 것이다.
상기 어류는 조피볼락(Sebastes schlegelii)인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 기생충은 아가미흡충인 것을 특징으로 할 수 있으며, 상기 아가미흡충은 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 투여는 경구투여인 것이 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
즉, 본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구 투여가 모두 가능하며, 본 발명에 따른 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만, 예를 들면, 구강, 근육내, 복강내, 국소 투여 및 약욕(침치) 투여가 가능하다. 이와 같은 임상 투여를 위해 본 발명의 조성물은 공지의 기술을 이용하여 적합한 제형으로 제제화할 수 있다.
본 발명에 있어서, 바람직한 투여 농도는 어체중당(kg) 페반텔(Febantel) 50~500ppm 또는 이버멕틴(Ivermectin) 0.02~2ppm인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 투여 농도로 1회 내지 4회 투여되는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명에 있어서, 유효 투여량은 피처리 어류의 크기, 질량, 투여시간, 투여방법, 건강상태, 질병의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하며, 당해 기술분야의 통상의 전문가에 의해 결정될 수 있다.
본 발명에 따른 구제용 조성물 및 구제방법은 아가미흡충 감염의 구제를 위하여 단독으로, 또는 기타 약물치료 및 생물학적 반응조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명은 또 다른 관점에서, 상기 어류의 기생충 구제용 조성물을 유효량 함유하는 것을 특징으로 하는 어류용 사료에 관한 것이다.
본 발명에 있어서, 상기 사료에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 페반텔(Febantel), 메벤다졸(Mebendazole), 아자메티포스(Azamethiphos), 이버멕틴(Ivermectin) 이외에 어류용 사료에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 성장발육 촉진 물질, 면역 증강용 물질 등 각종 공지의 기능성 사료 첨가제용 물질들을 함께 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 어류용 사료는 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 오일 또는 분말 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 조피볼락 아가미흡충의 in vitro 살충 시험
통영지역 가두리 양식장에서 사육 중인 조피볼락(평균체중 85g, 평균체장 16.9cm)을 실험에 사용하였다. 조피볼락의 아가미를 적출하여 filtering한 멸균해수에 둔 후, 핀셋으로 아가미흡충인 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)를 분리하였다. 분리된 아가미흡충을 24 well plate에 well 당 10마리씩 나누어 담아 실험에 사용하였다(도 1(A)). 구충제 8종을 선정하여 농도별로 멸균해수에 희석한 후, in vitro에서 살충 효과를 평가하였다(표 1). 구충제 용액에 아가미흡충을 노출시킨 2시간 후 육안으로 운동성 여부(도 1(B)) 및 실체 현미경을 통하여 운동성을 관찰하였다. 음성 대조구에는 구충제를 첨가하지 않은 멸균해수를 사용하였다.
구충제 8종 농도별 조피볼락 아가미흡충의 살충시험 결과
구충제명 농도(ppm)
1000 100 10 1
Praziquantel(프라지콴텔) 사멸 생존 생존 생존
Febantel(페반텔) 사멸 생존 생존 생존
Oxfendazole(옥스펜다졸) 생존 생존 생존 생존
Deltamethrin(델타메트린) 생존 생존 생존 생존
Mebendazole(메벤다졸) 사멸 생존 생존 생존
Azamethiphos(아자메티포스) 사멸 사멸 사멸 생존
Ivermectin(이버멕틴) 사멸 사멸 사멸 사멸
Diclazuril(디클라주릴) 생존 생존 생존 생존
상기 표 1은 약물 노출 2시간 후 판정 결과를 나타낸 것이며, 생존; 모든 개체 운동성 있음, 사멸; 모든 개체 운동성 없음을 의미한다.
Oxfendazole, Deltamethrin, Diclazuril은 1,000ppm 이상의 고농도에서도 살충 효과가 없었으며, Praziquantel, Febantel, Mebendazole, Azamethiphos, Ivermectin은 1,000ppm 미만에서 살충 효과를 나타냈다.
1,000ppm 미만의 농도에서 살충 효과를 나타낸 5종의 구충제에 대해 정확한 살충 농도를 판정하기 위하여 다양한 농도로 살충 효과를 시험하였다(표 2).
구충제 5종 농도별 조피볼락 아가미흡충의 살충시험 결과
구충제명 농도(ppm)
Praziquantel
(프라지콴텔)		 1000 600 500 400 300 200 100 50 40 30 10
사멸 사멸 사멸 사멸 △ 생존 생존 생존 생존 생존 생존
Febantel
(페반텔)		 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 10
사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 생존 생존 생존
Mebendazole
(메벤다졸)		 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 10
사멸 사멸 사멸 사멸 생존 생존 생존 생존 생존 생존 생존
Azamethiphos
(아자메티포스)		 100 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1
사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 생존
Ivermectin
(이버멕틴)		 9 8 6 7 6 5 4 3 2 1 0.1
사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 사멸 △
상기 표 2는 약물 노출 2시간 후 판정 결과를 나타낸 것이며, 생존; 모든 개체 운동성 있음, 사멸; 모든 개체 운동성 없음, △; 일부 개체 운동성 있음을 의미한다.
아가미흡충의 살충을 육안으로 관찰하였을 때, Praziquantel은 200ppm 농도에서 2시간 동안 생존하였으며, 300ppm 이상의 농도에서는 운동성이 없었다. 그러나 Praziquantel의 살충 효과를 실체현미경 검경으로 확인한 결과, 600ppm 이상의 농도에서만 완전히 운동성을 상실되어 완전히 살충되는 것으로 확인되었다(도 2). 반면, 실체현미경 검경 시 Febantel은 300ppm에서, Azamethiphos는 2ppm에서, Ivermectin은 1ppm에서도 살충 효과를 나타내었다.
실시예 2: 조피볼락 아가미흡충의 in vivo 구제 효과
조피볼락 아가미흡충 in vitro 구충 효과 결과 효과가 확인된 3종류의 구충제 Febantel, Mebendazole, Ivermectin을 in vivo 구충 시험에 사용하였다. In vivo 실험을 위해서는 통영 지역 가두리양식장의 조피볼락(평균체중 34.5±11g)을 구입하여 사용하였다. 현재 한국에서 시판되는 수산용 Praziquantel의 경우, 아가미흡충의 구충을 위해서 어체중당(kg) 100~200ppm을 2일 간격으로 1~3회 정도 경구투여하는 것이 권장되므로, Praziquantel은 어체중당(kg) 200ppm으로 1회 혹은 4회 경구투여하였다. 실험구 별로 아가미흡충 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis)가 감염되어 있는 조피볼락 10마리씩 순치하였다. 4종의 구충제를 포함하는 사료환(0.6g/개)을 제작하여 1회(수온 18℃), 매일 연속4회(수온 20℃) 연속 매일 투여하여 구충 효과를 평가하였다(도 3(A)).
구충제를 정확한 농도로 경구투여하기 위해서 조피볼락을 MS222로 마취 후 구충제가 포함된 사료환 1개를 핀셋으로 조피볼락의 위까지 삽입하였다. 구충제 투여 3일 후에 아가미를 적출하여 아가미흡충 수를 육안으로 counting하여 구충 효과를 평가하였다(도 3(B)).
3종류의 구충제를 농도별로 투여하고, 구충제를 투여하지 않은 조피볼락의 아가미흡충 수를 대조구로 하여 구충 효과를 평가하였으며, Mann-Whitney’s U-test(p＜0.05)로 통계분석을 수행하였다. Ivermectin 0.02ppm 1회 경구투여 시에 통계적으로 유의성 있게 아가미흡충이 구제되는 것을 확인하였다(표 3 및 도 4). Ivermectin 0.02ppm, Febantel 50ppm 4회 경구투여할 경우 통계학적으로 유의하게 구충 효과가 있는 것으로 확인되었다(표 4 및 도 5). Praziquantel의 경우, 권장사용 농도인 어체중당(kg) 200ppm으로 1회 혹은 4회 경구투여하여도 아가미흡충을 구제할 수 없는 것을 확인하였다.
구충제(3종) 1회 경구투여에 따른 조피볼락 아가미흡충 구제 효과
구충제
(ppm/kg B.W.)		 Praziquantel Febantel Mebendazole Ivermectin 대조구
200 10 100 500 10 100 500 0.02 0.2
충수 23.9±9.5 29.9±15.2 26.7±12.7 24.3±12 19.6±8.7 27.8±17 28.2±14 14.1±5.6 ＊ 19.9±10 25.6±15.9
＊: significant difference (p＜0.05)
구충제(3종) 4회 경구투여에 따른 조피볼락 아가미흡충 구제 효과
구충제
(ppm/kg B.W.)		 Praziquantel Febantel Mebendazole Ivermectin 대조구
200 50 50 0.002 0.02
충수 31.4±11 16±7.7 ＊ 21.4±5.3 24.5±6.6 19.3±4.9 ＊ 27.3±13.6
＊: significant difference (p＜0.05)
실시예 3: Febantel, Ivermectin 투여에 따른 안전성 검사
아가미흡충에 대해 통계적으로 유의적인 구충 효과를 나타낸 2종류의 구충제(Febantel, Ivermectin)에 대한 안전성 평가를 위하여, 조피볼락(평균체중 93.6±17.9g)에 구충제를 고농도로 1회 경구투여 후, 일주일간 폐사율을 측정하였다(수온 20℃) (표 5).
구충제(2종) 고농도 투여 후 조피볼락의 폐사량
구충제(ppm/kg) Febantel Ivermectin 대조구
500 1,000 5,000 0.2 2 20
폐사율(%) 0 0 0 0 0 100 0
Febantel의 경우 5,000ppm을 투여하여도 폐사가 발생하지 않았으나, Ivermectin은 20ppm 투여 시 100% 폐사하였다. Ivermectin의 경우 조피볼락 아가미흡충 구제에 유효농도인 0.02ppm 보다 1,000배 이상의 농도로 구충제를 투여하였을 때 조피볼락이 폐사하는 것을 확인되었다. Febantel의 경우 안정성 평가를 위해서 폐사에 이르게 하는 경구투여 농도를 확인하고자 하였으나, 물리적으로 조피볼락에 경구투여할 수 있는 최대농도가 5,000ppm 정도로 폐사에 이르는 농도를 확인할 수 없었다.
병리조적학적 검경 결과, Febantel 500ppm 및 Ivermectin 2ppm 투여한 조피볼락의 내부장기에는 대조구와 비교하여 세포 변성이 확인되지 않았다. 그러나 Febantel 1,000ppm 투여한 조피볼락의 일부 개체에서 간세포의 핵응축 등의 세포 변성과, Ivermectin의 경우 20ppm 투여한 조피볼락의 간세포의 공포 변성이 확인되어, 2가지 구충제 모두 고농도 투여 시에 간독성이 있는 것으로 판단된다(도 6 및 도 7).
폐사율과 병리조직 조사 이외에 추가적으로 안전성 평가를 위하여, 구충제 투여 후 조피볼락의 미부정맥에서 채혈하여 혈청 분리 후 혈액화학 분석을 수행하였다. Fuji-Dri Chem 4500(Fuji 사, 일본)을 사용하여 글루코즈(GLU), 총단백질(TP), GOT/GPT를 측정하였다. 폐사가 발생한 Febantel 5000ppm 투여구는 폐사로 인하여 혈액분석을 할 수 없었으며, 실험한 모든 구에서 구충제를 투여하지 않은 대조구에 비하여 글루코즈, 총단백질, GOT/GPT의 통계적으로 유의적인 차이를 확인할 수 없었다(표 6 내지 표 8).
Febantel 및 Ivermectin 1회 투여 후 조피볼락(평균체중 34.5±11g)의 혈액화학적 분석 결과
항목(단위) Febantel Ivermectin control
10 100 500 0.02 0.2
GOT(U/L) 37±7.3 25.4±9.5 32.2±9.9 31.6±14.2 31.5±9.6 29.8±8.4
GPT(U/L) 21.6±3.3 15±5 15.6±3.1 16.2±3.9 20.8±1.6 14.8±6.2
GLU(mg/dl) 4.8±1.4 5±1.4 4.6±1.3 3.6±0.5 4.8±1.3 10.2±5.4
TP-ps(g/dl) 3.8±0.4 3.4±0.3 3.3±0.2 3.9±0.2 3.8±0.4 3.05±0.4
Febantel 및 Ivermectin 4회 투여 후 조피볼락(평균체중 34.5±11g)의 혈액화학적 분석 결과
항목(단위) Febantel Ivermectin control
50 0.002 0.02
GOT(U/L) 21±9.6 21±10 17±5.7 27±8.3
GPT(U/L) 11.4±3.9 11.4±2.1 8.8±1.3 14.5±6.4
GLU(mg/dl) 5.4±2.6 8.6±7.1 4.6±2.1 9.4±3.7
TP-ps(g/dl) 3.1±1.1 3.0±0.6 2.5±0.7 3.0±0.5
Febantel 및 Ivermectin 고농도 1회 투여 후 조피볼락(평균체중 93.6±17.9g)의 혈액화학적 분석 결과
항목(단위) Febantel Ivermectin control
500 1000 5000 0.2 2
GOT(U/L) 51.4±10.8 59.8±18.4 60.4 ±39 48±12.4 48±5.6 58.7±25.2
GPT(U/L) 35.6±7.5 29.4±4.9 30.4 ±14 21.6±5.9 29.5±0.7 25.6±7.9
GLU(mg/dl) 3.8±0.8 3.2±0.4 5±3.4 4.2±1.1 3.5±0.7 6.5±4.5
TP-ps(g/dl) 4.16±0.5 3.9 0.4 3.9 ±0.9 3.5±0.5 3.3±0.2 3.7±0.5
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (13)

  1. 페반텔(Febantel), 메벤다졸(Mebendazole), 아자메티포스(Azamethiphos), 이버멕틴(Ivermectin) 및 이들의 약학적으로 허용할 수 있는 염으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 조피볼락(Sebastes schlegelii)의 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis) 구제용 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서, 상기 페반텔(Febantel)의 농도는 어체중당(kg) 50~500ppm인 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 이버멕틴(Ivermectin)의 농도는 어체중당(kg) 0.02~2ppm인 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제1항의 조성물을 어류에 투여하는 것을 특징으로 하는 조피볼락(Sebastes schlegelii)의 마이크로코타일 세바스티스(Microcotyle sebastis) 구제방법.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 삭제
  11. 제7항에 있어서, 페반텔(Febantel)을 어체중당(kg) 50~500ppm의 농도로 경구투여하는 것을 특징으로 하는 구제방법.
  12. 제7항에 있어서, 이버멕틴(Ivermectin)을 어체중당(kg) 0.02~2ppm의 농도로 경구투여하는 것을 특징으로 하는 구제방법.
  13. 제1항의 조성물을 유효량 함유하는 것을 특징으로 하는 어류용 사료.
KR1020200034535A 2020-03-20 2020-03-20 조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법 KR102136892B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200034535A KR102136892B1 (ko) 2020-03-20 2020-03-20 조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200034535A KR102136892B1 (ko) 2020-03-20 2020-03-20 조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102136892B1 true KR102136892B1 (ko) 2020-07-22

Family

ID=71893177

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200034535A KR102136892B1 (ko) 2020-03-20 2020-03-20 조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102136892B1 (ko)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0344306A (ja) * 1989-07-07 1991-02-26 Ciba Geigy Ag 海ジラミの抑制方法
KR101650043B1 (ko) * 2016-06-16 2016-08-22 대한민국 메벤다졸을 함유한 어류의 스쿠티카충 구제용 조성물
KR101789736B1 (ko) * 2017-08-30 2017-10-25 대한민국 이버멕틴을 함유하는 조피볼락의 클라비네마 마리에 감염 구제용 조성물
JP2020007287A (ja) * 2018-07-12 2020-01-16 日本水産株式会社 スズキ目魚類の寄生虫駆除剤及び駆除方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0344306A (ja) * 1989-07-07 1991-02-26 Ciba Geigy Ag 海ジラミの抑制方法
KR101650043B1 (ko) * 2016-06-16 2016-08-22 대한민국 메벤다졸을 함유한 어류의 스쿠티카충 구제용 조성물
KR101789736B1 (ko) * 2017-08-30 2017-10-25 대한민국 이버멕틴을 함유하는 조피볼락의 클라비네마 마리에 감염 구제용 조성물
JP2020007287A (ja) * 2018-07-12 2020-01-16 日本水産株式会社 スズキ目魚類の寄生虫駆除剤及び駆除方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Fish Pathology, 41(4), 147-151, 2006. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Tahir et al. Vector-borne nematode diseases in pets and humans in the Mediterranean Basin: An update
DE60225590T2 (de) C-kithemmer zur behandlung von bakteriellen infektionen
EP2310018B1 (de) Verwendung von nifurtimox zur behandlung der giardiasis
US7709534B2 (en) Method of treating strongyloides infections and medicaments therefor
Sulik et al. Antiparasitic activity of ivermectin: Four decades of research into a “wonder drug”
Rothschild Changes in behaviour in the intermediate hosts of trematodes
US10632137B2 (en) Composition containing ivermectin for exterminating Clavinema mariae infection on Sebastes schlegeli
KR102136892B1 (ko) 조피볼락의 기생충 구제제 및 구제방법
DE69735558T2 (de) Verwendung von Bronopol zur Behandlung von Krankheiten von Fischeiern
US9545386B2 (en) Methods of treating infectious diseases
KR101650043B1 (ko) 메벤다졸을 함유한 어류의 스쿠티카충 구제용 조성물
Nagi et al. Interaction of Escherichia coli and Eimeria brunetti in chickens
DE2312134C2 (de) Anthelmintikum
WO2006029605A1 (de) Verfahren und wirkstoff zur bekämpfung von plasmodien
Sakhare et al. Acute microfilariosis in a non-descript cow
Boussinesq et al. A controlled prospective trial of the prophylactic effect of a single dose of ivermectin against Onchocerca volvulus
Langston et al. Pharmacotherapy of parasitic disease
Nwanwko et al. Comparative efficacy and cost analysis of albendazole, levamisole, and ivermectin on West African dwarf sheep in Makurdi Benue state Nigeria
Khan Back to the Future‒Solutions for Parasitic Problems Rahime Şimşek1, Aqsa Farooqui2, Salah-Ud-Din Khan3 and
Agusta et al. Evaluation of hypoglycemic effect of (+)-1, 1’-Bislunatin in streptozotocin-induced DDY male mice (Mus musculus)
El-Tantawy et al. Could resin extract be used as a new treatment for Araucaria heterophylla toxoplasmosis?
JP2004331498A (ja) 魚類寄生虫の駆除剤及び駆除方法
DE10331253B4 (de) Therapeutika gegen Parasiten von Fischen
WO2002005649A1 (fr) Parasiticide et procede antiparasite
Leida Efficacy of feeding nitrofurazone for control of the microsporidian parasite Pleistophora ovariae

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant