KR102136325B1 - Manufacturing apparatus and method of 3d cell culture dish using vertical air blow - Google Patents

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Abstract

본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치는 극초단 레이저 빔을 발생시키는 레이저 발생기, 상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분기하는 분기 모듈, 상기 복수개의 서브 빔이 조사되어 복수개의 세포 배양 홈이 형성되는 세포 배양판, 그리고 상기 세포 배양판에 발생한 잔해를 제거하는 수직 에어 블로우를 포함하고, 상기 수직 에어 블로우에서 발생하는 에어의 진행 방향은 상기 세포 배양 홈의 깊이 방향과 평행하다.The apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention includes a laser generator that generates an ultra-short laser beam, a branch module that branches the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams, and the plurality of sub-beams is irradiated A cell culture plate in which a plurality of cell culture grooves are formed, and a vertical air blow for removing debris generated in the cell culture plate, and a direction in which air is generated in the vertical air blow is the depth direction of the cell culture groove Parallel

Description

수직 에어 블로우를 이용한 3차원 세포 배양체의 제조 장치 및 방법{MANUFACTURING APPARATUS AND METHOD OF 3D CELL CULTURE DISH USING VERTICAL AIR BLOW}Manufacturing apparatus and method of 3D cell culture using vertical air blow {MANUFACTURING APPARATUS AND METHOD OF 3D CELL CULTURE DISH USING VERTICAL AIR BLOW}

본 발명은 수직 에어 블로우를 이용한 3차원 세포 배양체의 제조 장치 및 방법에 관한 것이다.The present invention relates to an apparatus and method for manufacturing a three-dimensional cell culture using vertical air blow.

2차원 세포 배양체를 이용하여 2차원 평면으로 진행되는 세포 배양 방법은 실제 생체 내에서 자라는 세포와 차이가 크므로, 실험 단계에서는 성공했던 연구가 임상 단계에서는 실패하는 사례가 많았다. 따라서, 2차원 세포 배양체의 한계를 극복하기 위해 3차원 배양체(3D Cell culture dish)가 개발되고 있다.Since a cell culture method that proceeds in a two-dimensional plane using a two-dimensional cell culture is largely different from a cell that grows in vivo, many studies that succeeded in the experimental stage fail in the clinical stage. Accordingly, a 3D cell culture dish has been developed to overcome the limitations of the 2D cell culture.

그러나, 이러한 3차원 세포 배양체는 소프트 리소그래피(Soft lithography) 및 포토리소그래피(Photo lithography) 공정을 이용하여 제조하므로, 제조 비용이 증가하게 된다.However, these three-dimensional cell cultures are manufactured using a soft lithography and photo lithography process, thereby increasing manufacturing cost.

또한, 3차원 세포 배양체의 패턴을 제조하거나 설계 변경을 위해서는 지속적으로 마스크(Mask)를 제조해야 하므로, 제조 비용 및 제조 시간이 증가하게 된다.In addition, since it is necessary to continuously manufacture a mask in order to manufacture a pattern of a 3D cell culture or change a design, manufacturing cost and manufacturing time increase.

본 발명은 전술한 배경 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 열적 데미지를 최소화하며, 제조 비용 및 제조 시간을 절감할 수 있는 수직 에어 블로우를 이용한 3차원 세포 배양체의 제조 장치 및 방법을 제공하고자 한다.The present invention is to solve the problems of the above-described background, to minimize the thermal damage, to provide an apparatus and method for manufacturing a three-dimensional cell culture using a vertical air blow that can reduce the manufacturing cost and manufacturing time.

본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치는 극초단 레이저 빔을 발생시키는 레이저 발생기, 상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분기하는 분기 모듈, 상기 복수개의 서브 빔이 조사되어 복수개의 세포 배양 홈이 형성되는 세포 배양판, 그리고 상기 세포 배양판에 발생한 잔해를 제거하는 수직 에어 블로우를 포함하고, 상기 수직 에어 블로우에서 발생하는 에어의 진행 방향은 상기 세포 배양 홈의 깊이 방향과 평행하다.The apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention includes a laser generator that generates an ultra-short laser beam, a branch module that branches the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams, and the plurality of sub-beams is irradiated A cell culture plate in which a plurality of cell culture grooves are formed, and a vertical air blow for removing debris generated in the cell culture plate, and a direction in which air is generated in the vertical air blow is the depth direction of the cell culture groove Parallel

상기 분기 모듈은 상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분리하는 회절 광학 소자, 그리고 상기 회절 광학 소자를 통과한 상기 서브 빔을 스캐닝하여 상기 서브 빔의 조사 위치를 조절하는 스캐너를 포함할 수 있다.The branching module may include a diffraction optical element that separates the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams, and a scanner that scans the sub-beam that has passed through the diffraction optical element and adjusts the irradiation position of the sub-beam. .

상기 분기 모듈은 상기 스캐너와 상기 세포 배양판 사이에 위치하며, 상기 서브 빔의 초점 거리를 조절하여 상기 서브 빔의 크기를 조절하는 스캔 광학계를 더 포함할 수 있다.The branching module may further include a scanning optical system positioned between the scanner and the cell culture plate, and adjusting a focal length of the sub-beam to adjust the size of the sub-beam.

상기 스캔 광학계를 이용하여 상기 세포 배양 홈의 내벽을 스텝 가공할 수 있다.The inner wall of the cell culture groove may be stepped using the scanning optical system.

상기 세포 배양판에는 복수개의 세포 배양 유닛이 형성되며, 상기 세포 배양 유닛에는 복수개의 상기 세포 배양 홈이 형성되고, 상기 스캐너를 이용하여 상기 세포 배양 유닛 내부에 상기 복수개의 세포 배양 홈을 비순차적으로 가공할 수 있다.A plurality of cell culture units are formed in the cell culture plate, a plurality of the cell culture grooves are formed in the cell culture unit, and the plurality of cell culture grooves are non-sequentially formed in the cell culture unit using the scanner. It can be processed.

상기 복수개의 세포 배양 홈 중 인접하는 세포 배양 홈은 순차적으로 가공하지 않을 수 있다.The adjacent cell culture grooves among the plurality of cell culture grooves may not be sequentially processed.

상기 세포 배양판은 폴리디메틸실록산(Polydimethylsiloxane, PDMS), 폴리에틸렌 테레프타레이트(Polyethylene terephthalate, PET), 폴리이미드(Polyimide, PI), 유리 중에서 선택된 어느 하나를 포함할 수 있다.The cell culture plate may include any one selected from polydimethylsiloxane (PDMS), polyethylene terephthalate (PET), polyimide (PI), and glass.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법은 극초단 레이저 빔을 발생시키는 단계, 상기 극초단 레이저 빔을 분기 모듈에 통과시켜 복수개의 서브 빔으로 분기하는 단계, 상기 복수개의 서브 빔을 세포 배양판에 조사하여 복수개의 세포 배양 홈을 동시에 형성하는 단계, 그리고 수직 에어 블로우를 이용하여 상기 세포 배양판에 발생한 잔해를 제거하는 단계를 포함한다.In addition, the method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention comprises the steps of generating an ultra-short laser beam, passing the ultra-short laser beam through a branch module, and branching into a plurality of sub-beams, the plurality of And irradiating the sub-beams to the cell culture plate to simultaneously form a plurality of cell culture grooves, and removing the debris generated in the cell culture plate using vertical air blow.

상기 복수개의 서브 빔으로 분기하는 단계는 회절 광학 소자를 이용하여 상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분리하는 단계, 상기 서브 빔의 광 경로 상에 위치하는 간격 조절부를 이용하여 상기 회절 광학 소자를 통과한 상기 복수개의 서브 빔간의 간격을 조절하는 단계, 시준기를 이용하여 상기 간격 조절부를 통과한 상기 복수개의 서브 빔을 서로 평행하게 하는 단계, 그리고 스캐너를 이용하여 상기 시준기를 통과한 상기 복수개의 서브 빔을 스캐닝하여 상기 서브 빔의 조사 위치를 조절하는 단계, 그리고 상기 스캐너와 상기 세포 배양판 사이에 위치하는 스캔 광학계를 이용하여 상기 서브 빔의 초점 거리를 조절하여 상기 서브 빔의 크기를 조절하는 단계를 포함할 수 있다.The step of branching into the plurality of sub-beams is a step of separating the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams using a diffractive optical element, and the diffractive optical element using a gap adjusting unit located on an optical path of the sub-beam Adjusting the spacing between the plurality of sub-beams passing through, using the collimator to parallel the plurality of sub-beams passing through the gap adjusting unit, and using the scanner to pass the plurality of collimators Scanning a sub-beam to adjust the irradiation position of the sub-beam, and using a scanning optical system located between the scanner and the cell culture plate to adjust the focal length of the sub-beam to adjust the size of the sub-beam It may include steps.

상기 세포 배양 홈을 형성하는 단계에서, 상기 스캔 광학계를 이용하여 상기 서브 빔의 크기를 조절하면서 여러 번 조사하여 상기 세포 배양 홈의 내벽을 스텝 가공할 수 있다.In the step of forming the cell culture groove, the inner wall of the cell culture groove may be stepped by irradiating several times while adjusting the size of the sub-beam using the scan optical system.

상기 세포 배양판에는 복수개의 세포 배양 유닛이 형성되며, 상기 세포 배양 유닛에는 복수개의 상기 세포 배양 홈이 형성되고, 상기 스캐너를 이용하여 상기 세포 배양 유닛 내부에 상기 복수개의 세포 배양 홈을 비순차적으로 가공할 수 있다.A plurality of cell culture units are formed in the cell culture plate, a plurality of the cell culture grooves are formed in the cell culture unit, and the plurality of cell culture grooves are non-sequentially formed in the cell culture unit using the scanner. It can be processed.

상기 복수개의 세포 배양 홈 중 인접하는 세포 배양 홈은 순차적으로 가공하지 않을 수 있다.The adjacent cell culture grooves among the plurality of cell culture grooves may not be sequentially processed.

본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치 및 방법은 수직 에어 블로우를 사용하여 에어의 진행 방향이 세포 배양 홈의 깊이 방향과 평행하게 함으로써, 레이저 가공 시 발생하여 가공성에 영향을 주는 잔해(Debris)를 용이하게 제거할 수 있다.The apparatus and method for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention use a vertical air blow so that the direction of air is parallel to the depth direction of the cell culture groove, which occurs during laser processing and affects processability Debris can be easily removed.

또한, 극초단 레이저 빔을 이용하여 비열 가공이 가능하므로 열에 반응성이 높은 세포 배양판의 열적 데미지를 최소화할 수 있다.In addition, since non-thermal processing is possible using an ultra-short laser beam, thermal damage of a cell culture plate highly reactive with heat can be minimized.

또한, 극초단 레이저 빔을 여러 번 나누어 가공하므로 보다 세밀한 가공 형상을 확보할 수 있고, 열 전달을 분배하여 열로 인한 품질 저하를 최소화할 수 있다.In addition, since the ultra-short laser beam is divided and processed several times, a more detailed machining shape can be secured, and heat transfer can be distributed to minimize quality degradation due to heat.

또한, 극초단 레이저 빔과 분기 모듈을 세포 배양판에 조사하여 세포 배양 홈을 동시에 가공하여 형성할 수 있으므로, 소프트 리소그래피(Soft lithography) 및 포토리소그래피(Photo lithography) 공정을 이용하지 않아 제조 비용이 절감된다. In addition, since an ultra-short laser beam and a branching module are irradiated on a cell culture plate and can be formed by processing cell culture grooves at the same time, manufacturing cost is reduced by not using a soft lithography and photo lithography process. do.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치의 개략적인 도면이다.
도 2는 도 1의 레이저 발생기 및 분기 모듈을 구체적으로 도시한 도면이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법의 순서도이다.
도 4은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법을 이용하여 제조한 3차원 세포 배양체의 단면도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법 중 세포 배양 홈의 제조 방법의 순서도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법으로 세포 배양 홈을 제조하는 방법을 구체적으로 설명한 도면이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법에 따라 복수개의 세포 배양 홈을 형성하는 순서를 도시한 도면이다.
도 8은 본 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법에 따라 형성된 복수개의 세포 배양 유닛을 포함하는 세포 배양판의 평면도이다.1 is a schematic view of an apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a view specifically showing the laser generator and the branch module of FIG. 1.
Figure 3 is a flow chart of a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.
Figure 4 is a cross-sectional view of a three-dimensional cell culture prepared using a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.
Figure 5 is a flow chart of a method of manufacturing a cell culture groove in the manufacturing method of the three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.
6 is a view specifically explaining a method of manufacturing a cell culture groove as a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.
7 is a view showing a sequence of forming a plurality of cell culture grooves according to a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.
8 is a plan view of a cell culture plate including a plurality of cell culture units formed according to a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention.

이하, 첨부한 도면을 참고로 하여 본 발명의 여러 실시예들에 대하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예들에 한정되지 않는다.Hereinafter, various embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings so that those skilled in the art to which the present invention pertains can easily practice. The present invention can be implemented in many different forms and is not limited to the embodiments described herein.

본 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 동일 또는 유사한 구성요소에 대해서는 동일한 참조 부호를 붙이도록 한다.In order to clearly describe the present invention, parts irrelevant to the description are omitted, and the same reference numerals are assigned to the same or similar elements throughout the specification.

그러면 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치에 대하여 도 1 및 도 2를 참고로 상세하게 설명한다.Then, a device for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention will be described in detail with reference to FIGS. 1 and 2.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치의 개략적인 도면이고, 도 2는 도 1의 레이저 발생기 및 분기 모듈을 구체적으로 도시한 도면이다.1 is a schematic view of an apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention, and FIG. 2 is a view specifically showing the laser generator and the branching module of FIG. 1.

우선, 도 1 및 도 2에 도시한 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치는 극초단 레이저 빔(1)을 발생시키는 레이저 발생기(10), 극초단 레이저 빔(1)을 복수개의 서브 빔(2)으로 분기하는 분기 모듈(20), 복수개의 서브 빔(2)이 조사되어 복수개의 세포 배양 홈(H)이 동시에 형성되는 세포 배양판(30), 그리고 세포 배양판(30)에 발생한 잔해(Debris)(3)를 제거하는 수직 에어 블로우(Air blow)(40)를 포함한다.First, as shown in Figures 1 and 2, the apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention, a laser generator 10 for generating an ultra-short laser beam 1, an ultra-short laser beam ( 1) The branch module 20 for branching into a plurality of sub-beams 2, a cell culture plate 30 in which a plurality of sub-beams 2 are irradiated to simultaneously form a plurality of cell culture grooves H, and cells It includes a vertical air blow (40) to remove the debris (Debris) (3) generated in the culture plate (30).

레이저 발생기(10)에서 생성한 극초단 레이저 빔(1)은 피코초(=10-12초) 내지 펨토초(=10-15초)의 짧은 펄스폭(지속 시간)을 갖는 레이저 빔이다. The ultra-short laser beam 1 generated by the laser generator 10 is a laser beam having a short pulse width (duration) of picoseconds (=10 -12 seconds) to femtoseconds (=10 -15 seconds).

극초단 레이저 빔(1)은 세포 배양판(30)의 열 영향 영역(HAZ) 또는 열 손상을 최소화할 수 있어 가공 중에 발생하는 잔해(Debris) 또는 재질 변형을 최소화할 수 있다.The ultra-short laser beam 1 can minimize the heat-affected zone (HAZ) or thermal damage of the cell culture plate 30, thereby minimizing debris or material deformation that occurs during processing.

분기 모듈(20)은 회절 광학 소자(Diffractive optical element, DOE)(21), 간격 조절부(22), 시준기(Collimator)(23), 그리고 스캐너(Scanner)(24)를 포함한다. The branching module 20 includes a diffractive optical element (DOE) 21, a spacer 22, a collimator 23, and a scanner 24.

회절 광학 소자(21)는 회절 현상을 이용하여 극초단 레이저 빔(1)을 복수개의 서브 빔(2)으로 분리할 수 있다. The diffractive optical element 21 may separate the ultra-short laser beam 1 into a plurality of sub-beams 2 using a diffraction phenomenon.

간격 조절부(22)는 회절 광학 소자(21)를 통과한 복수개의 서브 빔(2)간의 간격을 조절할 수 있다. 간격 조절부(22)는 복수개의 렌즈를 포함할 수 있다. The gap adjusting unit 22 may adjust the gap between the plurality of sub-beams 2 passing through the diffractive optical element 21. The gap adjusting unit 22 may include a plurality of lenses.

회절 광학 소자(21)와 간격 조절부(22) 사이에는 빔 개수 조절부(25)가 설치될 수 있다. 빔 개수 조절부(25)는 마스크를 포함할 수 있다. 따라서, 빔 개수 조절부(25)를 이용하여 일부의 서브 빔(20을 차단함으로써, 필요한 수의 서브 빔(2)으로 조절하여 필요한 수의 세포 배양 홈(H)을 동시에 형성할 수 있다. A beam number adjusting unit 25 may be installed between the diffraction optical element 21 and the gap adjusting unit 22. The beam number adjusting unit 25 may include a mask. Therefore, by blocking some of the sub-beams 20 using the beam number adjusting unit 25, it is possible to simultaneously control the number of sub-beams 2 to form the required number of cell culture grooves H.

시준기(23)는 간격 조절부(22)를 통과한 복수개의 서브 빔(2)을 서로 평행하게 할 수 있다. The collimator 23 may parallel the plurality of sub-beams 2 that have passed through the gap adjusting unit 22.

간격 조절부(22) 및 시준기(23)는 회절 광학 소자(21)와 스캐너(24) 사이에 위치할 수 있다.The spacer 22 and the collimator 23 may be located between the diffractive optical element 21 and the scanner 24.

스캐너(Scanner)(24)는 시준기(23)를 통과한 복수개의 서브 빔(2)을 소정 각도로 반사시켜 스캐닝함으로써, 서브 빔(2)이 세포 배양판(30)에 조사되는 조사 위치를 조절할 수 있다. The scanner 24 scans a plurality of sub-beams 2 passing through the collimator 23 at a predetermined angle to scan, thereby adjusting the irradiation position at which the sub-beams 2 are irradiated to the cell culture plate 30. Can be.

스캐너(24)는 서브 빔(2)의 X 방향 및 Y 방향의 조사 위치를 조절할 수 있다. 그리고, 분기 모듈(20)에 연결된 스캐너 이동부(50)를 이용하여 분기 모듈(20)을 Z 방향으로 이동함으로써, 서브 빔(2)의 Z 방향의 조사 위치를 조절할 수 있다.The scanner 24 may adjust the irradiation positions in the X and Y directions of the sub-beam 2. And, by moving the branch module 20 in the Z direction using the scanner moving unit 50 connected to the branch module 20, the irradiation position in the Z direction of the sub-beam 2 can be adjusted.

스캐너(24)와 세포 배양판(30) 사이에는 서브 빔(2)의 초점 거리를 조절하여 서브 빔(2)의 크기를 확대 또는 축소하는 스캔 광학계(26)가 설치될 수 있다.A scanning optical system 26 that enlarges or reduces the size of the sub-beam 2 by adjusting the focal length of the sub-beam 2 may be installed between the scanner 24 and the cell culture plate 30.

스캔 광학계(26)를 이용하여 세포 배양 홈(H)의 내벽을 스텝 가공할 수 있다. 따라서, 서브 빔(2)을 여러 번 나누어 세포 배양 홈(H)을 가공하므로 보다 세밀한 가공 형상을 확보할 수 있고, 열 전달을 분배하여 열로 인한 품질 저하를 최소화할 수 있다.Using the scanning optical system 26, the inner wall of the cell culture groove H can be stepped. Therefore, since the sub-beam 2 is divided several times to process the cell culture groove H, a more detailed processing shape can be secured, and heat transfer can be distributed to minimize quality degradation due to heat.

스캐너(24)와 세포 배양판(30) 사이에는 대물 렌즈(Objective lens)(60)가 위치할 수 있다. 대물 렌즈(60)는 스캐너(24)를 통과한 서브 빔(2)을 집광시킬 수 있다. An objective lens 60 may be positioned between the scanner 24 and the cell culture plate 30. The objective lens 60 may focus the sub-beam 2 that has passed through the scanner 24.

세포 배양판(30)은 폴리디메틸실록산(Polydimethylsiloxane, PDMS), 폴리에틸렌 테레프타레이트(Polyethylene terephthalate, PET), 폴리이미드(Polyimide, PI), 유리 등을 포함할 수 있다. The cell culture plate 30 may include polydimethylsiloxane (PDMS), polyethylene terephthalate (PET), polyimide (PI), glass, and the like.

특히, 폴리디메틸실록산(PDMS) 등으로 이루어진 세포 배양판(30)은 생체 적합성과 광학적 투과성이 우수하다. 폴리디메틸실록산(PDMS) 등으로 이루어진 세포 배양판(30)은 열에 취약한 재료이긴 하나, 낮은 출력의 극초단 레이저 빔(1)을 이용하므로, 세포 배양판(30)이 손상되지 않는 동시에 높은 가공성을 가질 수 있다. In particular, the cell culture plate 30 made of polydimethylsiloxane (PDMS) or the like is excellent in biocompatibility and optical transparency. The cell culture plate 30 made of polydimethylsiloxane (PDMS) or the like is a material that is vulnerable to heat, but uses an ultra-short laser beam 1 of low power, so that the cell culture plate 30 is not damaged and has high processability. Can have

이와 같이, 극초단 레이저 빔(1)을 이용하여 비열 가공이 가능하므로, 열에 반응성이 높은 세포 배양판(30)의 열적 데미지를 최소화할 수 있다.As described above, since non-thermal processing is possible using the ultra-short laser beam 1, thermal damage of the cell culture plate 30 having high heat reactivity can be minimized.

또한, 열에 대한 반응성이 높은 세포 배양판(30)을 사용하므로, 극초단 레이저 빔(1)을 복수개의 서브 빔(2)으로 분리되어 출력이 저하되어도 가공성에 큰 영향을 주지 않게 된다.In addition, since the cell culture plate 30 having high heat reactivity is used, even if the ultra-short laser beam 1 is divided into a plurality of sub-beams 2 and the output is lowered, the processability is not significantly affected.

수직 에어 블로우(40)는 분기 모듈(20)에 설치되며, 세포 배양판(30)과 인접하여 위치할 수 있다. 세포 배양판(30) 위에는 서브 빔(2)에 의해 복수개의 세포 배양 홈(H)이 형성되고 잔해(3)가 발생한다. 수직 에어 블로우(40)는 세포 배양 홈(H)의 깊이 방향과 평행하게 에어를 진행시켜 세포 배양판(30)에 발생한 잔해(3)를 용이하게 제거할 수 있다. The vertical air blow 40 is installed in the branch module 20 and may be positioned adjacent to the cell culture plate 30. On the cell culture plate 30, a plurality of cell culture grooves H are formed by the sub-beam 2, and debris 3 is generated. The vertical air blow 40 can easily remove the debris 3 generated in the cell culture plate 30 by advancing air parallel to the depth direction of the cell culture groove H.

이와 같이, 수직 에어 블로우(40)를 이용하여 세포 배양판(30)에 발생한 잔해(3)를 제거함으로써, 3차원 세포 배양체의 품질을 향상시킬 수 있다. 또한, 제조 공정 중 실시간으로 수직 에어 블로우(40)를 이용하여 잔해(3)를 제거함으로써, 3차원 세포 배양체의 제조 장치의 가공성을 향상시킬 수 있다. 또한, 극초단 레이저 빔(1)에 의해 가열된 세포 배양판(30)을 수직 에어 블로우(40)에서 발생한 에어를 이용하여 냉각시킬 수 있으므로, 열적 데미지를 최소화할 수 있다. As described above, by removing the debris 3 generated in the cell culture plate 30 using the vertical air blow 40, the quality of the three-dimensional cell culture can be improved. In addition, by removing the debris 3 using the vertical air blow 40 in real time during the manufacturing process, it is possible to improve the processability of the apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture. In addition, since the cell culture plate 30 heated by the ultra-short laser beam 1 can be cooled using air generated in the vertical air blow 40, thermal damage can be minimized.

이러한 수직 에어 블로우(40)는 일정한 강도로 세포 배양판(30)에 에어를 제공할 수 있다. 따라서, 수직 에어 블로우(40)의 바람 등이 서브 빔(2)의 포커싱에 영향을 주는 것을 최소화할 수 있다.The vertical air blow 40 may provide air to the cell culture plate 30 with a constant intensity. Therefore, it is possible to minimize the influence of the wind of the vertical air blow 40 on the focusing of the sub beam 2.

이와 같이, 본 발명의 일 실시예에서는 극초단 레이저 빔(1)을 분기 모듈(20)을 경유하여 세포 배양판(30)에 조사함으로써, 세포 배양판(30)에 세포 배양 홈(H)을 동시에 가공하여 3차원 세포 배양체를 형성할 수 있다. 따라서, 소프트 리소그래피(Soft lithography) 및 포토리소그래피(Photo lithography) 공정을 이용하지 않으므로 제조 비용이 절감된다. As described above, in one embodiment of the present invention, by irradiating the cell culture plate 30 via the ultra-short laser beam 1 via the branch module 20, the cell culture groove H is applied to the cell culture plate 30. Simultaneously processing to form a three-dimensional cell culture. Therefore, the manufacturing cost is reduced because the soft lithography and photo lithography processes are not used.

한편, 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 장치를 이용한 제조 방법에 대해 이하에서 도면을 참고로 상세하게 설명한다.Meanwhile, a manufacturing method using a manufacturing apparatus for a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention will be described in detail below with reference to the drawings.

도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법의 순서도이고, 도 4은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법을 이용하여 제조한 3차원 세포 배양체의 단면도이다.Figure 3 is a flow chart of a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention, Figure 4 is a three-dimensional cell culture prepared using a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention It is a cross section.

도 1 내지 도 4에 도시한 바와 같이, 우선 레이저 발생기(10)를 이용하여 극초단 레이저 빔(1)을 발생시킨다(S10). 극초단 레이저 빔(1)은 세포 배양판(30)의 열 영향 영역(HAZ) 또는 열 손상을 최소화할 수 있어 가공 중에 발생하는 잔해(Debris) 또는 재질 변형을 최소화할 수 있다.1 to 4, first, an ultra-short laser beam 1 is generated using the laser generator 10 (S10). The ultra-short laser beam 1 can minimize the heat-affected zone (HAZ) or thermal damage of the cell culture plate 30, thereby minimizing debris or material deformation that occurs during processing.

다음으로, 극초단 레이저 빔(1)을 분기 모듈(20)에 통과시켜 복수개의 서브 빔(2)으로 분기한다(S20).Next, the ultra-short laser beam 1 is passed through the branch module 20 to branch into a plurality of sub-beams 2 (S20).

이에 대해 아래에서 도 2를 참조하여 상세하게 설명한다. This will be described in detail with reference to FIG. 2 below.

분기 모듈(20)의 회절 광학 소자(21)는 극초단 레이저 빔(1)을 복수개의 서브 빔(2)으로 분리한다. The diffraction optical element 21 of the branch module 20 separates the ultrashort laser beam 1 into a plurality of sub-beams 2.

그리고, 회절 광학 소자(21)와 이격되어 위치하며, 서브 빔(2)의 광 경로 상에 위치하는 간격 조절부(22)를 이용하여 회절 광학 소자(21)를 통과한 복수개의 서브 빔(2)간의 간격을 조절한다. 이를 통해 세포 배양판(30)에 형성되는 세포 배양 홈(H) 사이의 간격을 조절할 수 있다. Then, the plurality of sub-beams (2) passing through the diffractive optical element (21) are positioned apart from the diffractive optical element (21) and using the gap adjusting unit (22) located on the optical path of the sub-beam (2). ). Through this, the gap between the cell culture grooves H formed in the cell culture plate 30 can be adjusted.

그리고, 간격 조절부(22)와 인접하여 위치하며, 서브 빔(2)의 광 경로 상에 위치하는 시준기(23)를 이용하여 간격 조절부(22)를 통과한 복수개의 서브 빔(2)을 서로 평행하게 한다. Then, a plurality of sub-beams (2) passing through the gap-adjusting section (22) are positioned adjacent to the gap-adjusting section (22) and using a collimator (23) located on the optical path of the sub-beam (2). Parallel to each other.

그리고, 시준기(23)와 인접하여 위치하며, 서브 빔(2)의 광 경로 상에 위치하는 스캐너(24)를 이용하여 시준기(23)를 통과한 복수개의 서브 빔(2)을 스캐닝한다. 이와 같이, 스캐너(24)를 이용하여 세포 배양판(30)에 조사되는 서브 빔(2)의 조사 위치를 조절할 수 있다.Then, a plurality of sub-beams 2 passing through the collimator 23 are scanned using a scanner 24 positioned adjacent to the collimator 23 and positioned on the optical path of the sub-beam 2. In this way, the irradiation position of the sub-beam 2 irradiated to the cell culture plate 30 can be adjusted using the scanner 24.

다음으로, 복수개의 서브 빔(2)을 세포 배양판(30)에 조사하여 복수개의 세포 배양 홈(H)을 동시에 형성하여 3차원 세포 배양체를 완성한다(S30).Next, a plurality of sub-beams 2 are irradiated on the cell culture plate 30 to simultaneously form a plurality of cell culture grooves H to complete a three-dimensional cell culture (S30).

이 때, 도 4에 도시한 바와 같이, 서브 빔(2)의 크기 및 강도를 조절하여 여러 번 조사함으로써, 세포 배양판(30)에 계단 형상의 내벽을 만들고 최종적으로 테이퍼(Taper) 형상의 내벽을 가지는 세포 배양 홈(H)을 형성할 수 있다.At this time, as shown in Figure 4, by adjusting the size and strength of the sub-beam 2 several times, to make the inner wall of the stepped shape on the cell culture plate 30, and finally the tapered (Taper) inner wall Cell culture groove (H) having a can be formed.

이에 대해 이하에서 상세히 설명한다.This will be described in detail below.

도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법 중 세포 배양 홈의 제조 방법의 순서도이고, 도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법으로 세포 배양 홈을 제조하는 방법을 구체적으로 설명한 도면이다.Figure 5 is a flow chart of a method of manufacturing a cell culture groove in a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention, Figure 6 is a cell culture as a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention It is a figure specifically explaining a method of manufacturing a groove.

도 5 및 도 6에 도시한 바와 같이, 스캐너(24)와 세포 배양판(30) 사이에 위치하는 스캔 광학계(26)를 이용하여 서브 빔(2)의 크기를 조절할 수 있다. As shown in FIGS. 5 and 6, the size of the sub-beam 2 may be adjusted by using the scanning optical system 26 positioned between the scanner 24 and the cell culture plate 30.

우선, 제1 폭(d1)을 가지는 제1 서브 빔(BA)으로 세포 배양판(30)에 제1 간격(w1)을 가지는 제1 서브 홈(HA)을 가공한다. 그리고, 제2 폭(d2)을 가지는 제2 서브 빔(BB)으로 세포 배양판(30)에 제2 간격(w2)을 가지는 제2 서브 홈(HB)을 가공한다. 그리고, 제3 폭(d3)을 가지는 제3 서브 빔(BC)으로 세포 배양판(30)에 제3 간격(w3)을 가지는 제3 서브 홈(HC)을 가공한다. 그리고, 제4 폭(d4)을 가지는 제4 서브 빔(BD)으로 세포 배양판(30)에 제4 간격(w4)을 가지는 제4 서브 홈(HD)을 가공한다. 그리고, 제5 폭(d5)을 가지는 제5 서브 빔(BE)으로 세포 배양판(30)에 제5 간격(w5)을 가지는 제5 서브 홈(HE)을 가공한다. 따라서, 내벽이 스텝 가공된 세포 배양 홈(H)을 완성하게 된다.First, a first sub-groove HA having a first interval w1 is processed in the cell culture plate 30 with a first sub-beam BA having a first width d1. Then, the second sub-groove HB having the second interval w2 is processed in the cell culture plate 30 with the second sub-beam BB having the second width d2. Then, the third sub-groove HC having the third interval w3 is processed in the cell culture plate 30 with the third sub-beam BC having the third width d3. Then, the fourth sub-groove HD having the fourth interval w4 is processed in the cell culture plate 30 with the fourth sub-beam BD having the fourth width d4. Then, the fifth sub-groove HE having the fifth interval w5 is processed in the cell culture plate 30 with the fifth sub-beam BE having the fifth width d5. Accordingly, the cell culture groove H in which the inner wall is stepped is completed.

이와 같이, 스캔 광학계(26)를 이용하여 세포 배양 홈(H)의 내벽을 스텝 가공할 수 있다. 따라서, 서브 빔(2)을 여러 번 나누어 세포 배양 홈(H)을 가공하므로 보다 세밀한 가공 형상을 확보할 수 있고, 열 전달을 분배하여 열로 인한 품질 저하를 최소화할 수 있다.In this way, the inner wall of the cell culture groove H can be stepped using the scanning optical system 26. Therefore, since the sub-beam 2 is divided several times to process the cell culture groove H, a more detailed processing shape can be secured, and heat transfer can be distributed to minimize quality degradation due to heat.

본 실시예에서는 제5 서브 홈까지만을 도시하였으나, 반드시 이에 한정되는 것은 아니며 다양한 수의 서브 홈을 가공할 수 있다. In this embodiment, only the fifth sub-groove is shown, but the present invention is not limited thereto, and a variety of sub-grooves can be processed.

도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법에 따라 복수개의 세포 배양 홈을 형성하는 순서를 도시한 도면이고, 도 8은 본 본 발명의 일 실시예에 따른 3차원 세포 배양체의 제조 방법에 따라 형성된 복수개의 세포 배양 유닛을 포함하는 세포 배양판의 평면도이다.7 is a view showing a sequence of forming a plurality of cell culture grooves according to a method of manufacturing a three-dimensional cell culture according to an embodiment of the present invention, Figure 8 is a three-dimensional cell according to an embodiment of the present invention It is a plan view of a cell culture plate including a plurality of cell culture units formed according to a method for manufacturing a culture medium.

도 7 및 도 8에 도시한 바와 같이, 세포 배양판(30)에는 동시에 가공되는 복수개의 세포 배양 유닛(31)이 형성될 수 있다. 이러한 세포 배양 유닛(31)에는 복수개의 세포 배양 홈(H)이 형성될 수 있다.7 and 8, a plurality of cell culture units 31 that are processed simultaneously may be formed in the cell culture plate 30. A plurality of cell culture grooves H may be formed in the cell culture unit 31.

분기 모듈(20)의 스캐너(24)를 이용하여 서브 빔(2)을 스캐닝함으로써, 세포 배양판(30)에 복수개의 세포 배양 홈(H)을 차례로 형성할 수 있다. 이때, 스캐너(24)의 스캔 방향을 조절하여 세포 배양 유닛(31) 내부에서 복수개의 세포 배양 홈(H)을 비순차적으로 가공할 수 있다. 즉, 복수개의 세포 배양 홈(H) 중 인접하는 세포 배양 홈(H)은 순차적으로 가공하지 않을 수 있다.By scanning the sub-beam 2 using the scanner 24 of the branch module 20, a plurality of cell culture grooves H can be sequentially formed in the cell culture plate 30. At this time, by adjusting the scanning direction of the scanner 24, a plurality of cell culture grooves (H) in the cell culture unit 31 can be processed out of sequence. That is, adjacent cell culture grooves (H) among the plurality of cell culture grooves (H) may not be sequentially processed.

도 7에 도시된 바와 같이, 제1 세포 배양 홈(H1)을 가공 한 후, 제1 세포 배양 홈(H1)에 인접하지 않으며 가장 멀리 떨어진 제2 세포 배양 홈(H2)을 가공한다. 따라서, 제1 세포 배양 홈(H1)을 가공하는 경우 발생하는 열에 의한 제2 세포 배양 홈(H2)의 열적 손상을 최소화할 수 있다. 그리고, 제2 세포 배양 홈(H2)에 인접하지 않은 제3 세포 배양 홈(H3)을 가공한다. 그리고, 제3 세포 배양 홈(H3)에 인접하지 않은 제4 세포 배양 홈(H4)을 가공한다. 이러한 방법으로 제5 내지 제16 세포 배양 홈(H16)을 차례로 가공한다. 따라서, 서브 빔(2)에 의한 열적 손상을 최소화할 수 있다.As shown in FIG. 7, after processing the first cell culture groove H1, the second cell culture groove H2 that is not adjacent to the first cell culture groove H1 and is farthest is processed. Therefore, thermal damage of the second cell culture groove H2 due to heat generated when the first cell culture groove H1 is processed can be minimized. Then, a third cell culture groove H3 not adjacent to the second cell culture groove H2 is processed. Then, a fourth cell culture groove H4 not adjacent to the third cell culture groove H3 is processed. In this way, the fifth to sixteenth cell culture grooves H16 are sequentially processed. Therefore, thermal damage caused by the sub-beam 2 can be minimized.

다음으로, 수직 에어 블로우(40)를 이용하여 세포 배양판(30)에 발생한 잔해(3)를 제거한다(S40). 수직 에어 블로우(40)는 세포 배양 홈(H)의 깊이 방향과 평행하게 에어를 진행시켜 세포 배양판(30)에 발생한 잔해(3)를 용이하게 제거할 수 있다. 따라서, 3차원 세포 배양체의 제조 장치의 가공성을 향상시킬 수 있다.Next, the debris 3 generated in the cell culture plate 30 is removed using the vertical air blow 40 (S40). The vertical air blow 40 can easily remove the debris 3 generated in the cell culture plate 30 by advancing air parallel to the depth direction of the cell culture groove H. Therefore, the processability of the apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture can be improved.

본 발명을 앞서 기재한 바에 따라 바람직한 실시예를 통해 설명하였지만, 본 발명은 이에 한정되지 않으며 다음에 기재하는 특허청구범위의 개념과 범위를 벗어나지 않는 한, 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것을 본 발명이 속하는 기술 분야에 종사하는 자들은 쉽게 이해할 것이다.Although the present invention has been described through preferred embodiments as described above, the present invention is not limited to this, and the present invention shows that various modifications and variations are possible without departing from the concept and scope of the following claims. Those in the field of technology to which they belong will readily understand.

10: 레이저 발생기 20: 분기 모듈
30: 세포 배양판 40: 수직 에어 블로우10: laser generator 20: branch module
30: cell culture plate 40: vertical air blow

Claims (12)

극초단 레이저 빔을 발생시키는 레이저 발생기,
상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분기하는 분기 모듈,
상기 복수개의 서브 빔이 조사되어 복수개의 세포 배양 홈이 형성되는 세포 배양판, 그리고
상기 세포 배양판에 발생한 잔해를 제거하는 수직 에어 블로우
를 포함하고,
상기 수직 에어 블로우에서 발생하는 에어의 진행 방향은 상기 세포 배양 홈의 깊이 방향과 평행하고,
상기 분기 모듈은
상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분리하는 회절 광학 소자,
상기 회절 광학 소자를 통과한 상기 서브 빔을 스캐닝하여 상기 서브 빔의 조사 위치를 조절하는 스캐너, 그리고
상기 스캐너와 상기 세포 배양판 사이에 위치하며, 상기 서브 빔의 초점 거리를 조절하여 상기 서브 빔의 크기를 조절하는 스캔 광학계
를 포함하고,
상기 스캔 광학계를 이용하여 상기 세포 배양 홈의 내벽을 스텝 가공하는 3차원 세포 배양체의 제조 장치.A laser generator that generates an ultra-short laser beam,
Branching module for branching the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams,
A cell culture plate in which the plurality of sub-beams are irradiated to form a plurality of cell culture grooves, and
Vertical air blow to remove debris from the cell culture plate
Including,
The traveling direction of air generated from the vertical air blow is parallel to the depth direction of the cell culture groove,
The branch module
Diffractive optical element for separating the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams,
A scanner that scans the sub-beam that has passed through the diffractive optical element to adjust the irradiation position of the sub-beam, and
A scanning optical system located between the scanner and the cell culture plate, and adjusting the focal length of the sub-beam to adjust the size of the sub-beam
Including,
A device for manufacturing a three-dimensional cell culture body that steps the inner wall of the cell culture groove by using the scanning optical system. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 제1항에서,
상기 세포 배양판에는 복수개의 세포 배양 유닛이 형성되며,
상기 세포 배양 유닛에는 복수개의 상기 세포 배양 홈이 형성되고,
상기 스캐너를 이용하여 상기 세포 배양 유닛 내부에 상기 복수개의 세포 배양 홈을 비순차적으로 가공하는 3차원 세포 배양체의 제조 장치.In claim 1,
A plurality of cell culture units are formed on the cell culture plate,
A plurality of the cell culture grooves are formed in the cell culture unit,
An apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture body that processes the plurality of cell culture grooves out of sequence inside the cell culture unit using the scanner. 제5항에서,
상기 복수개의 세포 배양 홈 중 인접하는 세포 배양 홈은 순차적으로 가공하지 않는 3차원 세포 배양체의 제조 장치.In claim 5,
An apparatus for manufacturing a three-dimensional cell culture in which adjacent cell culture grooves among the plurality of cell culture grooves are not sequentially processed. 제1항에서,
상기 세포 배양판은 폴리디메틸실록산(Polydimethylsiloxane, PDMS), 폴리에틸렌 테레프타레이트(Polyethylene terephthalate, PET), 폴리이미드(Polyimide, PI), 유리 중에서 선택된 어느 하나를 포함하는 3차원 세포 배양체의 제조 장치.In claim 1,
The cell culture plate is a polydimethylsiloxane (Polydimethylsiloxane, PDMS), polyethylene terephthalate (Polyethylene terephthalate, PET), polyimide (Polyimide, PI), a device for manufacturing a three-dimensional cell culture comprising any one selected from glass. 극초단 레이저 빔을 발생시키는 단계,
상기 극초단 레이저 빔을 분기 모듈에 통과시켜 복수개의 서브 빔으로 분기하는 단계,
상기 복수개의 서브 빔을 세포 배양판에 조사하여 복수개의 세포 배양 홈을 동시에 형성하는 단계, 그리고
수직 에어 블로우를 이용하여 상기 세포 배양판에 발생한 잔해를 제거하는 단계
를 포함하고,
상기 세포 배양 홈을 형성하는 단계에서,
스캔 광학계를 이용하여 상기 서브 빔의 크기를 조절하면서 여러 번 조사하여 상기 세포 배양 홈의 내벽을 스텝 가공하는 3차원 세포 배양체의 제조 방법.Generating an ultra-short laser beam,
Branching the plurality of sub-beams by passing the ultra-short laser beam through a branching module,
Forming a plurality of cell culture grooves simultaneously by irradiating the plurality of sub-beams to the cell culture plate, and
Removing the debris from the cell culture plate using a vertical air blow
Including,
In the step of forming the cell culture groove,
A method of manufacturing a three-dimensional cell culture in which the inner wall of the cell culture groove is stepped by irradiating several times while adjusting the size of the sub-beam using a scanning optical system. 제8항에서,
상기 복수개의 서브 빔으로 분기하는 단계는
회절 광학 소자를 이용하여 상기 극초단 레이저 빔을 복수개의 서브 빔으로 분리하는 단계,
상기 서브 빔의 광 경로 상에 위치하는 간격 조절부를 이용하여 상기 회절 광학 소자를 통과한 상기 복수개의 서브 빔간의 간격을 조절하는 단계,
시준기를 이용하여 상기 간격 조절부를 통과한 상기 복수개의 서브 빔을 서로 평행하게 하는 단계, 그리고
스캐너를 이용하여 상기 시준기를 통과한 상기 복수개의 서브 빔을 스캐닝하여 상기 서브 빔의 조사 위치를 조절하는 단계, 그리고
상기 스캐너와 상기 세포 배양판 사이에 위치하는 상기 스캔 광학계를 이용하여 상기 서브 빔의 초점 거리를 조절하여 상기 서브 빔의 크기를 조절하는 단계
를 포함하는 3차원 세포 배양체의 제조 방법.In claim 8,
The step of branching into the plurality of sub-beams
Separating the ultra-short laser beam into a plurality of sub-beams using a diffractive optical element,
Adjusting an interval between the plurality of sub-beams that have passed through the diffractive optical element by using an interval adjuster located on the optical path of the sub-beam,
Using the collimator to parallel the plurality of sub-beams passing through the gap adjusting unit, and
Scanning the plurality of sub-beams passing through the collimator using a scanner to adjust the irradiation position of the sub-beams, and
Adjusting the size of the sub-beam by adjusting a focal length of the sub-beam using the scanning optical system located between the scanner and the cell culture plate
Method for producing a three-dimensional cell culture comprising a. 삭제delete 제9항에서,
상기 세포 배양판에는 복수개의 세포 배양 유닛이 형성되며,
상기 세포 배양 유닛에는 복수개의 상기 세포 배양 홈이 형성되고,
상기 스캐너를 이용하여 상기 세포 배양 유닛 내부에 상기 복수개의 세포 배양 홈을 비순차적으로 가공하는 3차원 세포 배양체의 제조 방법.In claim 9,
A plurality of cell culture units are formed on the cell culture plate,
A plurality of the cell culture grooves are formed in the cell culture unit,
A method of manufacturing a three-dimensional cell culture in which the plurality of cell culture grooves are sequentially processed inside the cell culture unit using the scanner. 제11항에서,
상기 복수개의 세포 배양 홈 중 인접하는 세포 배양 홈은 순차적으로 가공하지 않는 3차원 세포 배양체의 제조 방법.In claim 11,
A method of manufacturing a three-dimensional cell culture in which adjacent cell culture grooves among the plurality of cell culture grooves are not sequentially processed.
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