KR102133638B1 - Compositions for the prevention or treatment of oral diseases, including extracts of acer tegmentosum maxim and cinnamon - Google Patents
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Abstract
본 발명은 산청목 및 계피의 추출물을 유효성분으로 포함함으로써 구강질환을 야기하는 다양한 병원균의 증식을 억제하여서 구강질환을 예방 또는 치료하는데 뛰어난 효과가 있는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물에 있어서, 상기 구강질환은 구취, 충치, 구내염, 치아우식증, 치주질환, 구강 내 점막 궤양 및 구강건조증으로 구성된 군으로부터 선택되는 구강질환인 것을 특징으로 하는 것을 기술적 요지로 한다.The present invention relates to a composition for the prevention or treatment of oral diseases, which has an excellent effect in preventing or treating oral diseases by inhibiting the proliferation of various pathogens causing oral diseases by including extracts of sancheongmok and cinnamon as active ingredients. In the composition for preventing or treating oral diseases comprising an extract and cinnamon extract as an active ingredient, the oral diseases are selected from the group consisting of bad breath, dental caries, stomatitis, dental caries, periodontal disease, mucosal ulcers in the oral cavity, and dry mouth It is a technical point to be characterized by an oral disease.
Description
본 발명은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 산청목 및 계피의 추출물을 유효성분으로 포함함으로써 구강질환을 야기하는 다양한 병원균의 증식을 억제하여서 구강질환을 예방 또는 치료하는데 뛰어난 효과가 있는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for the prevention or treatment of oral diseases, including Sanchungmok extract and cinnamon extract, and more specifically, by suppressing the proliferation of various pathogens causing oral diseases by including the extract of Sancheongmok and cinnamon as an active ingredient. The present invention relates to a composition for preventing or treating oral diseases, which has an excellent effect in preventing or treating oral diseases.
현대인은 더욱 건강한 삶을 살기 위한 열망중의 하나로 80세 이상까지도 건강한 치아를 갖기를 원할 뿐 아니라 대인관계에 장애가 되는 구취를 줄이기 위해서라도 식사 후 구강세정을 한다. 구강세정은 현대인의 식생활변화에 의한 구강 및 치아의 손상에 따라 발생하는 치아우식증, 구취, 치주염 등 구강질환을 예방하기 위한 목적으로 행하여지고 있다. One of the desires to live a healthier life, modern people not only want to have healthy teeth even over the age of 80, but also wash their mouth after meals to reduce bad breath, which is a hindrance to interpersonal relationships. Oral cleansing is performed for the purpose of preventing oral diseases such as dental caries, bad breath, periodontitis, and the like caused by damage to the oral cavity and teeth caused by changes in the diet of modern people.
현재 시중에 유통되고 있는 구강세정제는 항균효능을 갖는 성분인 불화나트륨, 염화벤제토늄, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 중합체, 염화세틸파이리디늄, 사카린나트륨, 안식향산나트륨 등을 이용하여 충치, 치주염 등을 예방치료 한다. 그러나 이러한 성분들을 삼킬 시에는 구토, 신경쇠약, 혼수상태, 설사 등의 부작용을 나타내며 과량을 삼킬 경우 치명적인 손상이 야기되고, 장기간 사용시에는 구강에 손상을 준다는 연구들이 발표되고 있다.Oral cleaning agents currently on the market use antibacterial and sodium benzoate, polyoxyethylene, polyoxypropylene polymer, cetylpyridinium chloride, sodium saccharin, sodium benzoate, etc. Preventive treatment. However, studies have been published that when swallowing these ingredients, they have side effects such as vomiting, nervous breakdown, coma, and diarrhea. When swallowed excessively, fatal damage is caused, and long-term use damages the oral cavity.
특히, 치주염의 예방치료를 목적으로 사용되고 있는 약제 중 페니실린, 에리스로마이신, 테트라사이클린과 같은 항생제는 살균 및 생육 억제에는 효과적이기는 하나 내성균의 출현을 유발하는 등의 부작용이 크고, 클로르헥시딘과 같은 항균제는 충치 형성을 저해하는 효과는 있으나, 독성이 강한 것으로 알려져 있다.In particular, among the drugs used for the prevention and treatment of periodontitis, antibiotics such as penicillin, erythromycin, and tetracycline are effective for sterilization and growth inhibition, but have side effects such as causing the appearance of resistant bacteria, and antibacterial agents such as chlorhexidine are caries Although it has an effect of inhibiting formation, it is known to have strong toxicity.
따라서 약용식물 등의 천연물로부터 부작용이 없으며 유해 구강미생물에 대해 선택적으로 항균활성이 높고, 기질 분해 효소 억제 등의 기능을 갖는 천연물질의 개발이 필요하다.Therefore, there is no side effect from natural products such as medicinal plants, and it is necessary to develop a natural substance that has a high antimicrobial activity selectively against harmful oral microorganisms and has a function of inhibiting substrate decomposition enzymes.
한편, 산청목은 벌나무(Acer tegmentosum maxim)라고도 불리며, 단풍나무과의 낙엽활엽교목으로 고지대에서 습생하는 식물로 우리나라에서는 전통적으로 산청목 껍질을 약재로 사용해 왔으며 간기능 회복, 지사제 등의 효능과, 독성이 없어 어떤 체질에도 부작용이 없다고 알려져 있다.On the other hand, Sancheongmok is also called acer tegmentosum maxim, and it is a deciduous broad-leaved tree of the Maple family. It is a plant that is cultivated in the highlands and has traditionally used Sancheongmok bark as a medicinal material. There is no side effect of any constitution.
계피(桂皮)는 녹나무속(Cinnamomum) 중 몇 종의 나무껍질에서 나오는 향신료로, 조미료나 향신료, 생약 등으로 사용한다. 한방에서 계피는 몹시 열이 많이 나고, 달고, 매우며, 독이 조금 있다고 그 성질을 표현한다. 동의보감에서는 계피가 속을 따듯하게 하고, 혈맥을 잘 통하게 하고, 간이나 폐의 기를 고르게 하며, 온갖 약기운을 고루 잘 퍼지게 하면서도 부작용을 나타내지 않고 유산시킬 수 있는 약재로 소개되어 있다.Cinnamon is a spice from several types of bark of Cinnamomum, and is used as a seasoning, spice, and herbal medicine. In one shot, cinnamon expresses its properties that it is very feverish, sweet, and very poisonous. In Donguibogam, cinnamon is introduced as a medicine that warms the inside, makes the blood vessels well, evens the liver or lungs, spreads all kinds of medicinal energy evenly, and does not show side effects, but can be miscarried.
상기한 바와 같이, 산청목 및 계피의 다양한 약리 효과에 대하여 보고되어 있지만, 산청목 및 계피의 추출물을 혼합한 혼합물의 구강질환에 대한 예방 또는 치료 효과에 대해서는 아직까지 알려져 있지 않으며, 이에 대한 연구도 전무한 상태이다.As described above, various pharmacological effects of sancheongmok and cinnamon have been reported, but the effect of preventing or treating oral diseases of the mixture of the extracts of sancheongmok and cinnamon is still unknown, and there is no research on this. to be.
이에 본 발명자는 화학적 합성 의약보다 인체에 부작용이 적고, 용이하게 제조 및 섭취할 수 있는 천연물 유래의 유효성분을 포함하면서 구강질환의 예방 또는 치료효과를 나타낼 수 있는 조성물을 개발하고자 노력한 끝에, 산청목 추출물 및 계피 추출물을 혼합한 조성물의 이러한 용도를 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.Therefore, the present inventors tried to develop a composition that has less side effects on the human body than chemical synthetic medicines and contains an active ingredient derived from natural products that can be easily manufactured and consumed, and which can exhibit a prevention or treatment effect of oral diseases. And it confirmed the use of the composition of the cinnamon extract mixed and completed the present invention.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 화학적 합성 의약보다 인체에 부작용이 적고, 용이하게 제조 및 섭취할 수 있는 천연물 유래의 유효성분을 포함하면서 구강질환의 예방 또는 치료효과를 나타낼 수 있도록 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것을 기술적 해결과제로 한다.The present invention has been devised to solve the above problems, and has fewer side effects on the human body than chemical synthetic medicines, and includes an active ingredient derived from natural products that can be easily manufactured and consumed, and exhibits prevention or treatment effects of oral diseases. The technical solution is to provide a composition for the prevention or treatment of oral diseases, which includes an extract of San Cheongmok and cinnamon as an active ingredient.
한편, 본 발명의 목적은 이상에서 언급한 목적으로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 목적들은 아래의 기재로부터 명확하게 이해될 수 있을 것이다.On the other hand, the object of the present invention is not limited to the object mentioned above, other objects not mentioned will be clearly understood from the following description.
상기 기술적 과제를 해결하기 위한 본 발명은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물에 있어서, 상기 구강질환은 구취, 충치, 구내염, 치아우식증, 치주질환, 구강 내 점막 궤양 및 구강건조증으로 구성된 군으로부터 선택되는 구강질환인 것을 특징으로 하는 조성물에 관한 것이다.The present invention for solving the above technical problem is a composition for the prevention or treatment of oral diseases comprising the Sanchokmok extract and cinnamon extract as active ingredients, wherein the oral diseases are bad breath, tooth decay, stomatitis, dental caries, periodontal disease, intraoral It relates to a composition characterized in that it is an oral disease selected from the group consisting of mucosal ulcers and dry mouth.
상기 다른 기술적 과제를 해결하기 위한 본 발명은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 있어서, 상기 구강질환은 구취, 충치, 구내염, 치아우식증, 치주질환, 구강 내 점막 궤양 및 구강건조증으로 구성된 군에서 선택되는 구강질환인 것을 특징으로 하는 조성물에 관한 것이다.The present invention for solving the above other technical problems in the food composition for preventing or improving oral diseases comprising sancheongmok extract and cinnamon extract as an active ingredient, the oral disease is bad breath, cavities, stomatitis, dental caries, periodontal disease, It relates to a composition characterized in that it is an oral disease selected from the group consisting of mucosal ulcers and dry mouth in the oral cavity.
상기 과제의 해결 수단에 의해, 본 발명의 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함함으로써, 구강질환을 야기하는 병원균의 증식을 억제하여서 구강질환을 예방 또는 치료하는데 뛰어난 효과가 있고, 천연물로서 인체에 부작용이 적고, 용이하게 제조 및 섭취할 수 있는 효과가 있다.By the means for solving the above problems, the composition for preventing or treating oral diseases of the present invention includes the Sancheongmok extract and the cinnamon extract as active ingredients, thereby preventing or treating oral diseases by inhibiting the growth of pathogens causing oral diseases. It has an excellent effect, has little side effects on the human body as a natural product, and has an effect that can be easily manufactured and consumed.
도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 산청목 추출물 및 계피 추출물을 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물의 항산화 활성 평가 실험의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따른 산청목 추출물 및 계피 추출물을 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물의 항산화 활성 평가 실험의 결과를 나타낸 사진이다.1 is a graph showing the results of an antioxidant activity evaluation experiment of a composition for the prevention or treatment of oral diseases, including sanchungmok extract and cinnamon extract according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 is a photograph showing the results of an antioxidant activity evaluation experiment of a composition for the prevention or treatment of oral diseases, including San Chongmok extract and cinnamon extract according to an embodiment of the present invention.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이다. 그리고 본 명세서에서 사용된 용어는 실시예들을 설명하기 위한 것이며, 본 발명을 제한하고자 하는 것이 아니다. 본 명세서에서 단수형은 문구에서 특별히 언급하지 않는 한 복수형도 포함한다.Advantages and features of the present invention, and methods for achieving them will be clarified with reference to embodiments described below in detail together with the accompanying drawings. However, the present invention is not limited to the embodiments disclosed below, but will be implemented in various different forms, and only the embodiments allow the disclosure of the present invention to be complete, and have ordinary knowledge in the art to which the present invention pertains. It is provided to completely inform the person of the scope of the invention. And the terms used in this specification are for describing the embodiments, and are not intended to limit the present invention. In the present specification, the singular form includes the plural form unless otherwise specified in the phrase.
이하, 첨부된 도면들을 참조하면서 본 발명의 바람직한 실시예에 대해 상세히 설명하기로 한다. 한편, 해당 기술분야의 통상적인 지식을 가진자로부터 용이하게 알 수 있는 구성과 그에 대한 작용 및 효과에 대한 도시 및 상세한 설명은 간략히 하거나 생략하고 본 발명과 관련된 부분들을 중심으로 상세히 설명하도록 한다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. On the other hand, the illustration and detailed description of the configuration and the action and effect thereof, which can be easily recognized by those having ordinary knowledge in the relevant technical field, will be briefly omitted or omitted, and the details related to the present invention will be described in detail.
먼저, 본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 본 발명에서 이용되는 산청목 추출물 및 계피 추출물은 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토크래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다. 또한, 본 발명에서 이용되는 산청목 추출물 및 계피 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.First, as used herein, the term'extract' has a meaning commonly used in the art as a crude extract, but also includes a fraction that broadly fractionates the extract. That is, the extracts of Sancheongmok and cinnamon used in the present invention include not only those obtained using an extraction solvent, but also those obtained by additionally applying a purification process. For example, a fraction obtained by passing the extract through an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatographs (made for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity), etc. Fractions obtained through various purification methods are also included in the extract of the present invention. In addition, the mountain blueberry extract and cinnamon extract used in the present invention may be prepared in powder form by additional processes such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying.
본 명세서에서 용어 '유효성분으로 포함하는'이란 하기의 산청목 추출물 및 계피 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명은 천연식물재료인 산청목 및 계피로부터 추출한 조성물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 산청목 추출물 및 계피 추출물이 본 발명의 조성물에 포함된 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.The term'comprising as an active ingredient' in the present specification means to include an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the following Sanchungmok extract and cinnamon extract. Since the present invention is a composition extracted from natural plant material, Sancheongmok and cinnamon, there is no side effect to the human body even when administered in excess, so the quantitative upper limit of the Sancheongmok extract and cinnamon extract contained in the composition of the present invention can be carried out by selecting within an appropriate range by those skilled in the art. have.
본 명세서에서 용어 '예방'이란 본 발명의 조성물의 투여로 구강질환을 억제시키거나 진행을 지연시키는 모든 행위를 의미한다. As used herein, the term'prevention' refers to all actions that inhibit oral disease or delay progression by administration of the composition of the present invention.
또한, 본 명세서에서 용어 '투여'란 용어는 임의의 적절한 방법으로 개체에 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.In addition, the term'administration' in the present specification means providing a predetermined composition of the present invention to an individual in any suitable way.
본 발명의 일실시예에 따른 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함한다. 그리고 상기 구강질환은 구취, 충치, 구내염, 치아우식증, 치주질환, 구강 내 점막 궤양 및 구강건조증으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 한다. 바람직하게는, 상기 구강질환이 충치 및 치주질환을 의미할 수 있다.The composition for preventing or treating oral diseases according to an embodiment of the present invention includes an extract of San Cheongmok and cinnamon as an active ingredient. And the oral disease is characterized in that it is selected from the group consisting of bad breath, dental caries, stomatitis, dental caries, periodontal disease, mucosal ulcers in the oral cavity and dry mouth. Preferably, the oral disease may mean tooth decay and periodontal disease.
치주질환(Periodontal Disease)은 치주조직 내 세균성 치태의 침착으로 인한 숙주 반응에 의해 조직 파괴가 발생하는 만성, 감염성 질환(치조골의 흡수를 동반하는 염증성 질환)이다. 이러한 치주질환의 유발원인은 한가지만으로는 설명할 수 없으며 통상 복합적인 원인에 의해 나타나는 만성질환이라고 볼 수 있다.Periodontal disease (Periodontal Disease) is a chronic, infectious disease (inflammatory disease accompanied by alveolar bone absorption) in which tissue destruction occurs due to a host reaction due to the deposition of bacterial plaque in the periodontal tissue. The cause of periodontal disease cannot be explained by one single thing, and it can be regarded as a chronic disease usually caused by complex causes.
구강 내에 상재하면서 충치와 치주질환을 발생시키는 병원성 미생물로 여러 종들이 알려져 있으나, 그 중 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)와 포피로모나스 진지바리스(Porphyromonas gingivalis)가 충치와 치주염을 발생하는 주 병원체인 것으로 알려져 있다 [Liliemark W.F., Crit. Rev. Oral Bio. Med., 7:180??198, 1996]. 구강 내 병원성 미생물은 균체 외 또는 표면으로부터 글루코실 트랜스퍼라아제(Glucosyltransferase, GTase)라는 효소를 분비함으로써 음식물 내 수쿠로즈(sucrose)를 기질로 하여 글루코즈(glucose)와 프락토즈(fructose)를 생성하고, 동시에 글루코즈의 중합체인 불용성 글루칸(insoluble glucan)을 치면에 형성하게 된다. 형성된 글루칸에 다른 미생물들이 치면에 부착하므로써 치면 세균막 즉, 치태(dental plaque)를 형성하게 된다. 이 치태 내에서 젖산균이 증식하여 프락토즈를 탄소원으로 젖산을 생성하고, 부착성 글루칸에 젖산이 포집 농축되고, 이렇게 농축된 고농도의 산은 치아의 구성성분인 인산칼슘 중 Ca2 +를 녹아내리게 하여 치아의 외막인 법랑질(enamel)을 용해시킴으로써 충치를 유발하게 된다 [Sigmund, S.S., 등, J.Periodontol., 63:322-331, 1992].Several species are known as pathogenic microorganisms that cause dental caries and periodontal disease in the oral cavity, but Streptococcus mutans and Porphyromonas gingivalis are the main pathogens causing caries and periodontitis. It is known as [Liliemark WF, Crit. Rev. Oral Bio. Med., 7:180??198, 1996]. Pathogenic microorganisms in the oral cavity secrete an enzyme called glucosyltransferase (GTase) from the surface or outside the cell, producing glucose and fructose using sucrose as a substrate in food, At the same time, insoluble glucan, a polymer of glucose, is formed on the tooth surface. When other microorganisms are attached to the tooth surface by forming the glucan, they form a bacterial membrane, that is, a dental plaque. The lactic acid bacteria proliferate in the plaque produced lactic acid to paroxetine lactose as a carbon source, and the adherent glucans lactic acid is collected and concentrated on, thus the concentrated high-concentration acid is tooth and of the calcium phosphate composition of the dental Ca unloaded melt 2 + Tooth decay is caused by dissolving the enamel, the outer membrane of [Sigmund, SS, et al., J. Periodontol., 63:322-331, 1992].
또한, 구강 내 병원성 미생물은 치아 표면에 세균성 피막인 프라그를 형성하고, 프라그 내에서 증식하는 젖산균으로부터 생성된 젖산이 고농도롤 축적됨으로써 치아의 칼슘 이온(Ca2 +)이 소실된다. 이로 인해, 치아 외막 법랑질의 용해와 함께 충치가 유발되고 프라그로부터 유발된 독성 물질이 치아와 잇몸 사이의 틈새(crevice)로 스며들어 세포내 염증 반응을 일으킴으로써 치은염, 치주염 등의 치주질환이 나타난다.Further, pathogenic microorganisms within the oral cavity is to form a coating of bacterial plaque on the tooth surface, whereby the lactic acid produced from lactic acid bacteria proliferating in a high concentration plaque accumulation roll is lost in teeth is calcium ions (Ca 2 +). Due to this, cavities are induced along with the dissolution of the outer enamel of the tooth, and toxic substances from the plaque penetrate into the crevice between the teeth and gums, causing intracellular inflammatory reactions, resulting in periodontal diseases such as gingivitis and periodontitis.
프라그에서 나오는 내독소(endotixin) 또는 지질다당체(lipopolysaccharide, LPS)로 대표되는 세균성 항원 물질은 치은 조직 내로 침입하고, 이에 의해 유도된 호중구와 대식세포는 프라그에서 나온 세균성 항원 물질을 탐식함으로써 활성화되어 교원질 가수분해 효소(collagenase), 젤라틴 가수분해 효소(gelatinase), 엘라스틴 가수분해 효소(elastase), Cathepsin G 등의 효소를 세포 외로 방출한다. 이들 효소는 서로 협조적으로 작용해서 교원질이나 프로테오글리칸과 같은 치은 조직의 유기 성분을 분해한다.Bacterial antigenic substances represented by endotoxins or lipopolysaccharides (LPS) from the plague penetrate into the gingival tissue, and neutrophils and macrophages induced by it are activated by phagocytosis from the bacterial antigenic substances from the plague. It releases enzymes such as hydrolase (collagenase), gelatin hydrolase (gelatinase), elastin hydrolase (elastase), and Cathepsin G out of the cell. These enzymes work cooperatively with each other to break down organic components of the gingival tissue, such as collagen and proteoglycans.
한편, 호중구 또는 대식세포는 염증성 사이토카인(cytokine)을 방출하고 주위의 치은 섬유아세포를 자극해서 기질 금속단백질분해 효소(matrix metalloproteinase; MMP)의 생산을 촉진하나, 이들 효소의 저해 물질인 TIMF(tissue inhibitor of metalloprotease) 생산량은 거의 변하지 않거나 오히려 억제되기 때문에 기질(교원질)이 분해된다. 따라서, 치은 조직의 연화 및 와해, 지속적인 출혈 등이 나타난다. 교원질 분해에 관여하는 효소의 중요 공급자로서 프라그에 분포하고 있는 포피로모나스 진지발리스(porphylomonase gingivalis)와 같은 치주질환 유발균을 꼽을 수 있다. 이 세균들은 교원질 가수분해 효소 및 트립신과 유사한 단백질 가수분해 효소를 분비하고, 이 효소들에 의해 교원질과 피브로넥틴과 같은 결체조직이 분해된다.On the other hand, neutrophils or macrophages release inflammatory cytokines and stimulate surrounding gingival fibroblasts to promote the production of matrix metalloproteinase (MMP), but inhibitors of these enzymes, TIMF (tissue) Inhibitor of metalloprotease production is almost unchanged or rather inhibited, causing the substrate (collagen) to degrade. Thus, gingival tissue softening and disintegration, persistent bleeding, and the like appear. As a major supplier of enzymes involved in collagen degradation, periodontal disease-causing bacteria such as porphylomonase gingivalis, which are distributed in plaques, can be cited. These bacteria secrete collagen hydrolases and trypsin-like proteolytic enzymes, which break down collagen and connective tissue such as fibronectin.
또한, 세균성 효소들은 불활성 전구물질을 활성화시키거나 TIMF를 분해시킴으로써 MMP 활성을 나타낸다. 다양한 세균성 효소에 의해 치주조직 내의 프로테오글리칸이 분해될 수 있고, 자유 라디칼(free radical) 등의 정상적인 세포 대사산물에 의해 교원질, 프로테오글리칸 및 히아루론산(hyarulonic acid)와 같은 거대분자가 파괴되기도 한다.In addition, bacterial enzymes display MMP activity by activating inactive precursors or degrading TIMF. Proteoglycans in the periodontal tissue can be decomposed by various bacterial enzymes, and macromolecules such as collagen, proteoglycans, and hyalulonic acid may be destroyed by normal cell metabolites such as free radicals.
본 발명의 일실시예에 따르면, 산청목 추출물 및 계피 추출물은 치주질환의 주요 병원균인 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 포피로모나스 진지바리스(Porphyromonas ginivalis)의 성장억제 활성을 확인하였는 바, 산청목 추출물 및 계피 추출물은 구강질환을 야기하는 병원균의 증식을 억제하여 구강질환 예방 또는 치료에 효과가 있는 것으로 판단된다.According to an embodiment of the present invention, the extract of San Cheongmok and cinnamon extract confirmed that the growth inhibitory activity of Streptococcus mutans, Porphyromonas ginivalis, which are the main pathogens of periodontal disease, was confirmed. And cinnamon extract is believed to be effective in preventing or treating oral diseases by inhibiting the proliferation of pathogens causing oral diseases.
아울러 본 발명의 조성물에서 이용되는 산청목 추출물 및 계피 추출물은 물, 증류수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, n-헥산, 염산, 초산, 포름산, 디에틸에테르 및 사이클로헥산으로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 용매를 이용하여 추출된 추출물이다. 바람직하게는 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물인 용매에 산청목 및 계피를 처리하여 수득한 것일 수 있다.In addition, the extracts of mountain blueberry and cinnamon used in the composition of the present invention include water, distilled water, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, acetone, ether, ethyl acetate, methylene chloride, n-hexane, hydrochloric acid, acetic acid, formic acid, and diethyl. It is an extract extracted using one or more solvents selected from the group consisting of ether and cyclohexane. Preferably, it may be obtained by treating acid blue wood and cinnamon in a solvent that is water, ethanol, or a mixture thereof.
본 발명의 조성물에 함유되는 산청목 추출물 및 계피 추출물은 분말 혹은 추출액의 형태로 사용될 수 있으며, 그 양 및 비율은 추출에 사용되는 산청목 및 계피의 양, 추출 농축 정도 및 용도에 따라 다양하게 조절할 수 있다. 예를 들면, 상기 본 발명의 조성물은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 1:1, 1.5:0.5 또는 0.5:1.5의 비율로 혼합하여 사용할 수 있다.Sancheongmok extract and cinnamon extract contained in the composition of the present invention can be used in the form of a powder or extract, and the amount and ratio can be variously adjusted according to the amount of sancheongmok and cinnamon used in the extraction, the degree of extraction concentration and use. . For example, the composition of the present invention may be used by mixing the mountain cedar tree extract and cinnamon extract in a ratio of 1:1, 1.5:0.5 or 0.5:1.5.
본 발명의 일실시예에 따른 조성물은 치약류, 껌(gum), 구강 세정제, 구강 청정제, 구강용 스프레이, 구강용 연고제 및 구강용 패치로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.The composition according to an embodiment of the present invention is characterized by having any one or more formulations selected from the group consisting of toothpaste, gum, mouthwash, mouthwash, mouthwash, mouthwash, and mouth patch. do.
본 발명의 치약류는 연마제, 점결제, 보습제, 유효성분, 발포제, 감미료, 향미제로 이루어진 군으로부터 선택된 조성물을 포함한다.The toothpaste of the present invention includes a composition selected from the group consisting of abrasives, caking agents, moisturizers, active ingredients, blowing agents, sweeteners, flavoring agents.
연마제로서는 수산화알루미늄, 무수규산, 규산알루미늄, 제2인산칼슘, 제2수산화물 및 무수물, 제3인산칼슘, 탄산칼슘, 피로인산칼슘, 불용성 메타인산나트륨, 제3인산마그네슘, 탄산마그네슘, 황산칼슘, 폴리메타아크릴산메틸, 기타 합성수지 등에서 1종 또는 2종 이상을 전체 조성물의 약 10-90%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다.As the abrasive, aluminum hydroxide, silicic acid anhydride, aluminum silicate, dibasic calcium phosphate, dihydrate and anhydride, tricalcium phosphate, calcium carbonate, calcium pyrophosphate, insoluble sodium metaphosphate, tribasic magnesium phosphate, magnesium carbonate, calcium sulfate, Polymethyl acrylate, other synthetic resins or the like may be used in combination of one or two or more in an amount of about 10-90% of the total composition.
점결제로는 가라기닌, 각종 점증용 셀룰로오스 유도체, 잔탄검, 트라가칸트 검(Tragacanth gum) 등의 검류, 폴리비닐 알콜, 폴리아크릴산 나트륨, 폴리아크릴산/말레인산 공중합체, 카르복시비닐 폴리머 등의 합성고분자 유도체 등의 유기계 점결제와 실리카, 라포나이트 등의 무기계 점결제에서 1종 또는 2종 이상을 선택하여 배합하여 사용할 수 있다.As a caking additive, synthetic polymers such as garraginine, various thickening cellulose derivatives, xanthan gum, and tragacanth gum, polyvinyl alcohol, sodium polyacrylate, polyacrylic acid/maleic acid copolymer, and carboxyvinyl polymer It can be used by selecting one or two or more types of organic caking agents such as derivatives and inorganic caking agents such as silica and laponite.
한편, 본 발명의 일실시예에 따른 조성물에는 맨톨(Mentol), 아네톨(Anetol), 오이게놀(Eugenol), 리모넨 (Limonene), 오시멘(Ocimene), n-도데실알콜(n-Dodecy Alcohol), 시트로네놀(Citronenol), 알파터피네올(a-Terpineol), 살리실메틸(Methyl salycilate), 메틸아세테이트(Methyl Acetate), 시트로네릴 아세테이트(Citronelyl Acetate), 시네올(Cineol), 리나롤(Linalool), 에틸리나롤(Ethyl Linalool), 바닐린(Vanillin), 티몰(Thymol), 스피아민트(Speamint)유, 세지(Sage)유, 로즈마리(Rosemary)유, 계피(Cinamon)유 등의 항료를 단독 또는 조합하여 전체 조성물의 0.1-10%, 바람직하게는 0.5-5%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다.On the other hand, in the composition according to an embodiment of the present invention, menthol (Mentol), enetol (Anetol), eugenol (Eugenol), limonene (Limonene), oscimen (Ocimene), n- dodecyl alcohol (n-Dodecy) Alcohol, Citronenol, Alpha-Terpineol, Methyl salycilate, Methyl Acetate, Citronelyl Acetate, Cineol, Linalool, Ethyl Linalool, Vanillin, Thymol, Speamint oil, Sage oil, Rosemary oil, Cinnamon oil, etc. The antibiotics may be used alone or in combination in an amount of 0.1-10%, preferably 0.5-5% of the total composition.
또한, 사카린나트륨, 스테비오사이드, 아스파탐, D-자일로스(D-Xylose) 등과 같은 감미제 등을 배합하여 사용할 수 있다.In addition, sweeteners such as sodium saccharin, stevioside, aspartame, and D-Xylose can be used in combination.
본 발명의 구강조성물에는 트리클로산, 클로로 헥시딘, 벤제토늄클로라이드, 벤잘코늄크로라이드, 세틸피리듐 크리라이드과 같은 양이온성 살균제, 모노플로로인산나트륨과 모노플로로 인산칼륨 등과 같은 알카리금속 모노플로로 포스페이트와 불화나트륨, 불화제일주석 등의 불소화물, 트라넥삼산, 입실론 아미노 카프론산, 알루미늄 클로로 하이드록실 알란토인, 디하이드로 콜레스타놀, 클리틸리친산류, 글리세로 포스테이트, 염화나트륨, 수용성 무기인산 화합물, 아스코르빈산(나트륨), 초산 dl-a-토코페롤, 자일리톨, 염산피리독신, 폴리비닐 피롤리돈 등의 각종 효능성분 중 1종 또는 2종 이상을 선택 배합하여 사용할 수 있다.The oral compositions of the present invention include cationic fungicides such as triclosan, chlorohexidine, benzethonium chloride, benzalkonium chloride, cetylpyridinium chloride, and alkali metal monofluorophosphates such as sodium monofluorophosphate and potassium monofluorophosphate. And sodium fluoride, fluoride such as stannous fluoride, tranexamic acid, epsilon amino capronic acid, aluminum chlorohydroxy allantoin, dihydrocholestanol, clitilic acid, glycero phosphate, sodium chloride, water-soluble inorganic phosphoric acid compounds, Ascorbic acid (sodium), dl-a-tocopherol acetate, xylitol, pyridoxine hydrochloride, polyvinyl pyrrolidone, etc. can be used by selecting one or two or more of various effective ingredients.
또한, 본 발명의 구강조성물에서 발포성분으로 사용하는 계면활성제로는 음이온 계면활성제, 비이온계면활성제 및/또는 양성이온 계면활성제를 사용할 수 있다. 여기서, 음이온 계면활성제로는 라우릴황산나트륨, 미리스틸황산나트륨 등의 알킬황산나트륨, N-라우로일 사르코신산나트륨(Sodium N-Lauroyl sarcosinate), N-미리스틸 사르코신산나트륨(Sodium N-miristyl sarcosinate) 등의 N-아실 사르로신산 나트륨(Sodium N-acyl sarcosinate) 등을 사용할 수 있고, 비이온 계면활성제로는 슈가지방산 에스테르, 말토스 지방산 에스테르, 락토스 지방산 에스테르 등과 같은 당(糖)유래 지방산 에스테르, 폴리옥시 에틸렌 경화 피마자유, 폴리옥시에틸렌고급알콜 에테르, 폴리옥시 에틸렌 폴리옥시 프로필렌 공중합체, 폴리옥시 에틸렌 폴리프로필렌 지방산 에스테르 등을 사용할 수 있다. 양성이온 계면활성제로는 N-라우릴 디 아미노에틸글리신, N-미리스틸 디아미노에틸글리신 등과 같은 N-알킬 디 아미노에틸글리신, N-알킬-N-카르복시 메틸 암모늄 베타인, 2-알킬-1-하이드록시 에틸 이미다조린 베타인 나트륨 등을 사용할 수 있다. 이 경우 발포성분으로는 음이온 계면활성제를 주로 사용하며 대표적인 것으로는 라우릴 황산나트륨과 같은 알킬황산 나트륨을 가장 널리 사용하고 있다. 또한 이들 계면활성제는 1종 단독 또는 2종 이상 혼합하여 사용하며 배합량은 통상 전체 조성물의 0.01-0.5%, 보다 바람직하게는 0.05-0.3%를 사용할 수 있다.In addition, anionic surfactants, nonionic surfactants and/or amphoteric surfactants may be used as surfactants used as foaming components in the oral composition of the present invention. Here, as the anionic surfactant, sodium alkyl sulfates such as sodium lauryl sulfate and sodium myristyl sulfate, sodium N-Lauroyl sarcosinate, sodium N-miristyl sarcosinate, and the like, sodium N-miristyl sarcosinate, etc. Sodium N-acyl sarcosinate can be used, and non-ionic surfactants are sugar-derived fatty acid esters such as sugar fatty acid esters, maltose fatty acid esters, lactose fatty acid esters, poly Oxyethylene cured castor oil, polyoxyethylene higher alcohol ether, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymer, polyoxyethylene polypropylene fatty acid ester, and the like can be used. As the cationic surfactant, N-alkyl diaminoethylglycine such as N-lauryl diaminoethylglycine, N-myristyl diaminoethylglycine, N-alkyl-N-carboxy methyl ammonium betaine, 2-alkyl-1 -Hydroxy ethyl imidazoline betaine sodium, etc. can be used. In this case, anionic surfactant is mainly used as the foaming component, and as a representative example, sodium alkylsulfate such as sodium lauryl sulfate is most widely used. In addition, these surfactants may be used alone or in combination of two or more, and the blending amount may be usually 0.01-0.5% of the total composition, more preferably 0.05-0.3%.
한편, 본 발명의 약학적 조성물 제조시, (a) 상술한 본 발명의 산청목 추출물 및 계피 추출물의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조될 수 있다. 다른 실시예로, (a) 상술한 본 발명의 산청목 추출물 및 계피 추출물의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조될 수도 있다. 상기 용어 '약제학적 유효량'은 상술한 산청목 추출물 및 계피 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.On the other hand, when preparing the pharmaceutical composition of the present invention, (a) a pharmaceutically effective amount of the above-described mountain cheongmok extract and cinnamon extract of the present invention; And (b) a pharmaceutically acceptable carrier. In another embodiment, (a) a pharmaceutically effective amount of the above-described mountain cedar tree extract and cinnamon extract of the present invention; And (b) a pharmaceutically acceptable carrier. The term'pharmaceutical effective amount' means an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the above-described Sanchungmok extract and cinnamon extract.
이때, 상기 약제학적으로 허용되는 담체는 제제에 통상적으로 이용되는 것으로서 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸 히드록시벤조에이트, 프로필히드로시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.In this case, the pharmaceutically acceptable carrier is commonly used in formulations such as lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, Polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methyl hydroxybenzoate, propylhydrocybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, and the like, but is not limited thereto.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may further include a lubricant, a wetting agent, a sweetener, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, etc. in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in detail in Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있다. 이때 본 발명 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 일반적인 투여량은 성인 기준으로 0.001~100mg/kg 범위 내이다.In addition, the pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally. At this time, a suitable dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is variously prescribed by factors such as the formulation method, the administration method, the patient's age, weight, sex, morbidity, food, administration time, administration route, excretion rate, and response sensitivity. Can be. The general dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is within the range of 0.001 to 100 mg/kg on an adult basis.
특별히 한정하는 것은 아니나, 본 발명의 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질 중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안전화제를 추가적으로 포함할 수 있다.Although not particularly limited, the pharmaceutical composition of the present invention is formulated using a pharmaceutically acceptable carrier and/or excipient according to a method that can be easily carried out by those skilled in the art to which the present invention pertains. By doing so, it can be produced in a unit dose form or can be produced by incorporating it into a multi-dose container. In this case, the formulation may be in the form of a solution, suspension, syrup or emulsion in an oil or aqueous medium, or may be in the form of ex, powder, granule, tablet or capsule, and may further include a dispersant or a safety agent.
또한, 본 발명의 다른 실시예로서, 본 발명은 산청목 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다. 이때 상기 구강질환은 구취, 충치, 구내염, 치아우식증, 치주질환, 구강 내 점막 궤양 및 구강건조증으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 한다. 바람직하게는, 상기 구강질환이 충치 및 치주질환을 의미할 수 있다.In addition, as another embodiment of the present invention, the present invention relates to a food composition for prevention or improvement of oral diseases comprising an extract of cinnamon tree and cinnamon as an active ingredient. At this time, the oral disease is characterized in that it is selected from the group consisting of bad breath, dental caries, stomatitis, dental caries, periodontal disease, mucosal ulcers in the oral cavity and dry mouth. Preferably, the oral disease may mean tooth decay and periodontal disease.
구강질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물은, 상술한 구강질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물과 같이, 유효성분으로서 산청목 추출물 및 계피 추출물을 포함한다. 상기 추출물에 관한 설명은 상기 약학적 조성물에서 설명한 바와 동일 또는 유사하다.The food composition for prevention or improvement of oral diseases, such as the pharmaceutical composition for prevention or treatment of oral diseases described above, includes an extract of San Cheongmok and cinnamon as an active ingredient. The description of the extract is the same or similar to that described in the pharmaceutical composition.
상기 식품 조성물은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제 등을 모두 포함한다.The food composition means a natural product or a processed product containing one or more nutrients, and preferably means a state that can be directly eaten after a certain processing process, and in a general sense, is a health functional food. , Beverages, food additives and beverage additives.
구체적으로, 상기 식품 조성물은 유효성분으로서 산청목 추출물 및 계피 추출물뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함할 수 있다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.Specifically, the food composition may include, as an active ingredient, an extract of cinnamon tree and cinnamon, as well as ingredients that are commonly added during food preparation. For example, it may include proteins, carbohydrates, fats, nutrients, flavoring agents and flavoring agents. Examples of the carbohydrates described above include monosaccharides, such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides, etc.; And polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (eg, rebaudioside A, glycyrrhizine, etc.)) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used.
또한, 본 발명의 식품 조성물을 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 산청목 추출물 및 계피 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.In addition, when the food composition of the present invention is prepared as a drink agent, citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, juice, worm extract, jujube extract, licorice extract, etc. Can be included.
이하 실시예를 들어 본 발명을 상세히 설명하기로 하나, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples, but the scope of the present invention is not limited to the following examples.
<< 실시예Example >>
산청목Mountain tree 추출물 및 계피 추출물의 제조 Preparation of extract and cinnamon extract
산청목 및 계피를 분쇄기를 이용하여 각각 분쇄하고 -20℃에서 동결 건조한 후, 건조된 시료 100g 및 80% 에탄올 1L를 혼합기에 투입하여 실온에서 4시간 동안 각각 추출하였다. 추출한 다음 거름종이를 이용하여 찌꺼기를 여과하고 액체 성분만 플라스크에 여과하였다.After crushing each of the mountain blueberry and cinnamon using a grinder, freeze-dried at -20°C, 100 g of dried sample and 1 L of 80% ethanol were added to the mixer, and extracted at room temperature for 4 hours. After extraction, the residue was filtered using filter paper, and only the liquid component was filtered through a flask.
여과된 액체 성분을 65℃의 water bath에서 중탕하여 순수한 산청목 추출물 및 계피 추출물을 제조하였으며, 산청목 추출물 및 계피 추출물을 1:1의 비율로 혼합하여 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물(이하, "산청목/계피 추출 혼합물"이라 함)을 제조하였다.The filtered liquid component was immersed in a water bath at 65°C to prepare a pure Sanchokmok extract and cinnamon extract, and a composition for preventing or treating oral diseases by mixing the Sanchokmok extract and cinnamon extract in a ratio of 1:1 (hereinafter, "Sancheongmok") /"Cinnamon Extract Mixture").
<< 실험예Experimental Example >>
실험예Experimental Example 1: 항산화 활성평가 실험 1: Antioxidant activity evaluation experiment
본 실험예에서는 항산화 활성을 평가하기 위해 자유라디칼을 제거하여 항산화 효능을 측정하는 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 라디칼 소거능 실험을 실시하였다. In this experiment, a free radical was removed to evaluate antioxidant activity, and a DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical scavenging activity experiment was performed.
본 실험은 DPPH의 hydrazyl이 불안정한 질소 원자를 함유하여서 쉽게 수소 원자를 받아들일 수 있으므로, 항산화성 물질과 반응하여 수소 원자를 받아들임에 따라 고유의 정색성을 잃는 성질을 이용한 것이다.This experiment uses the property that the hydrazyl of DPPH contains unstable nitrogen atoms and can easily accept hydrogen atoms, so it reacts with antioxidant substances and loses its inherent coloration by accepting hydrogen atoms.
이에 따라 DPPH를 이용하여 라디칼이 감소하는 정도를 분광광도계(Spectrophotometer)로 측정하여 간접적으로 시료의 항산화 활성을 측정하였으며, 라디칼이 항산화물질로 환원되어 고유의 보라색을 잃고 노란색으로 변하는 것을 관찰하였다.Accordingly, the degree of radical reduction using a DPPH was measured with a spectrophotometer to indirectly measure the antioxidant activity of the sample, and it was observed that the radical was reduced to antioxidant and lost its own purple color and turned yellow.
구체적으로, 빛이 차단된 암실에서 DPPH 0.08g 및 에탄올 1L를 혼합하여 DPPH 용액을 제조하였으며, 제조된 DPPH 용액은 -20℃에 보관하여 사용하였다.Specifically, a DPPH solution was prepared by mixing 0.08 g of DPPH and 1 L of ethanol in a dark room where light was blocked, and the prepared DPPH solution was stored and used at -20°C.
그 다음, 항산화 활성평가를 위한 시료를 농도별로 제작하였다. 산청목/계피 추출 혼합물을 1000㎍/ml, 500㎍/ml, 250㎍/ml, 125㎍/ml, 62.5㎍/ml, 31.25㎍/ml의 6가지 농도로 조제한 용액 1ml(control: 99.5% 에탄올)에 DPPH 용액 1ml를 가한 후, Vortex mixer를 이용하여 10초간 진탕한 다음 37℃에서 30분 동안 incubation 시켜 농도별 시료를 준비하였다.Then, samples for antioxidant activity evaluation were prepared by concentration. 1 ml of a solution prepared from 6 concentrations of 1000 μg/ml, 500 μg/ml, 250 μg/ml, 125 μg/ml, 62.5 μg/ml, and 31.25 μg/ml of the Sancheongmok/Cinnamon extract mixture (control: 99.5% ethanol) After adding 1 ml of the DPPH solution, the mixture was shaken for 10 seconds using a Vortex mixer, and then incubated at 37° C. for 30 minutes to prepare samples according to concentration.
양성대조약물로는 L-ascorbic acid를 상기 시료와 같이 6가지 농도로 조제한 후, DPPH 용액 1ml를 가하여 대조군 용액을 준비하였다.As a positive control drug, L-ascorbic acid was prepared at 6 concentrations as in the sample, and then 1 ml of DPPH solution was added to prepare a control solution.
이후 x-Mark micro spectrophotometer reader를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였으며, 산청목/계피 추출 혼합물 및 양성대조약물의 항산화 작용은 시료를 넣지 않은 대조군(무처리군)의 흡광도를 abs(control)이라고 하고, 산청목/계피 추출 혼합물의 흡광도를 abs(sample)로 하여 다음 식에 따라 DPPH의 활성 저해율을 구하고 이를 도 1에 나타내었다.After that, the absorbance at 517 nm was measured using an x-Mark micro spectrophotometer reader, and the antioxidant activity of the Sancheongmok/cinnamon extract mixture and the positive control drug is called abs(control). Absorbance of the Sanchokmok/cinnamon extract mixture was taken as abs(sample), and the activity inhibition rate of DPPH was obtained according to the following equation, and this is shown in FIG. 1.
저해율(Inhibition, %) = abs(control) - abs(sample) / abs(control) * 100Inhibition (%) = abs(control)-abs(sample) / abs(control) * 100
도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 산청목 추출물 및 계피 추출물을 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물의 항산화 활성 평가 실험의 결과를 나타낸 그래프이다.1 is a graph showing the results of an antioxidant activity evaluation experiment of a composition for the prevention or treatment of oral diseases, including sanchungmok extract and cinnamon extract according to an embodiment of the present invention.
도 1을 참조하면, 양성대조약물인 L-ascorbic acid의 항산화 활성은 농도 1000㎍/ml일 때 92%이고, 500㎍/ml일 때 90%이고, 250㎍/ml일 때 90%이고, 125㎍/ml일 때 89%이고, 62.5㎍/ml일 때 82%이며, 31.25㎍/ml일 때 84%로 나타났다.Referring to FIG. 1, the antioxidant activity of the positive control drug L-ascorbic acid is 92% at a concentration of 1000 μg/ml, 90% at 500 μg/ml, 90% at 250 μg/ml, 125 89% at µg/ml, 82% at 62.5µg/ml, and 84% at 31.25µg/ml.
그리고 실시예에 따른 산청목/계피 추출 혼합물의 항산화 활성은 농도 1000㎍/ml일 때 83%이고, 500㎍/ml일 때 77%이고, 250㎍/ml일 때 63%이고, 125㎍/ml일 때 49%이고, 62.5㎍/ml일 때 32%이며, 31.25㎍/ml일 때는 측정되지 않았다.And the antioxidant activity of the mountain cedar/cinnamon extract mixture according to the embodiment is 83% at a concentration of 1000 µg/ml, 77% at 500 µg/ml, 63% at 250 µg/ml, and 125 µg/ml per day. When it was 49%, when it was 62.5 µg/ml, it was 32%, and when it was 31.25 µg/ml, it was not measured.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따른 산청목 추출물 및 계피 추출물을 포함하는 구강질환의 예방 또는 치료용 조성물의 항산화 활성 평가 실험의 결과를 나타낸 사진으로서, (a)는 농도 1000㎍/ml, (b)는 500㎍/ml, (c)는 250㎍/ml, (d)는 125㎍/ml, (e)는 62.5㎍/ml, (f)는 31.25㎍/ml의 산청목/계피 추출 혼합물에 대한 항산화 활성평가 실험 결과이다.Figure 2 is a photograph showing the results of the antioxidant activity evaluation of the composition for the prevention or treatment of oral diseases, including San Chongmok extract and cinnamon extract according to an embodiment of the present invention, (a) is a concentration 1000㎍ / ml, ( b) 500 µg/ml, (c) 250 µg/ml, (d) 125 µg/ml, (e) 62.5 µg/ml, and (f) 31.25 µg/ml of mountain cedar/cinnamon extract mixture It is the result of the anti-oxidation activity evaluation experiment.
도 2를 참조하면, 산청목/계피 추출 혼합물의 농도가 증가함에 따라 DPPH가 상기 혼합물과 반응하여 고유의 보라색을 잃고 노란색으로 변하는 것을 확인할 수 있다.Referring to FIG. 2, it can be seen that DPPH reacts with the mixture to lose the intrinsic purple color and turns yellow as the concentration of the mountain blueberry/cinnamon extract mixture increases.
즉, 실험예 1의 DPPH 라디칼 소거능 실험 결과로 나타난 바와 같이, 산청목/계피 추출 혼합물은 농도 의존적으로 항산화력을 나타내었으며, 500㎍/ml에서 약 80%의 활성을 보여 본 발명의 조성물은 항산화 효과가 있음을 알 수 있다.That is, as shown in the experimental results of the DPPH radical scavenging activity of Experimental Example 1, the Sancheongmok/Cinnamon extract mixture exhibited concentration-dependent antioxidant power, and showed an activity of about 80% at 500 µg/ml, and the composition of the present invention had an antioxidant effect. It can be seen that there is.
실험예Experimental Example 2: 실시간 2: Real time 중합효소연쇄반응Polymerase chain reaction (Real-time polymerase chain reaction, RT-PCR) 분석 실험(Real-time polymerase chain reaction, RT-PCR) Assay
본 실험예에서는 구강질환 병원균에 대한 항균력을 평가하기 위하여 실시간 중합효소연쇄반응을 통해 산청목/계피 추출 혼합물이 구강질환 병원균 내의 유전자 발현 변화에 미치는 영향을 분석하였다. 이때 구강질환 병원균은 한국생명공학연구원으로부터 제공받은 Streptococcus mutans 및 Porphyromonas ginivalis를 사용하였으며, 각 병원균 내의 유전자(sodA 및 gtfB)의 발현 변화를 전사 수준에서 살펴보기 위하여 병원균의 RNA를 분리하였다. In this experimental example, to evaluate the antimicrobial activity against pathogens in oral diseases, the effect of the mixture of San Cheongmok/cinnamon extract on gene expression in oral disease pathogens was analyzed through a real-time polymerase chain reaction. At this time, as a pathogen for oral diseases, Streptococcus mutans and Porphyromonas ginivalis provided by the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology were used, and RNA of the pathogen was isolated to examine the expression change of genes (sodA and gtfB) in each pathogen at the transcription level.
구체적으로, 각 균주 배양액을 액체배지에 접종하여 37℃에서 24시간 배양한 다음, 균주 배양액 10ml를 다시 액체배지에 접종하여 600nm의 파장에서 흡광도 0.4가 될 때까지 배양하였다. 그 후에 산청목/계피 추출 혼합물을 액체 배지에 적하하여 2시간 동안 배양하였으며, 산청목/계피 추출 혼합물은 MIC(Minimal inhibitory concentration) 이하의 농도인 0mg/ml, 0.05mg/ml. 0.1mg/ml, 0.2mg/ml 및 0.5mg/ml의 농도로 처리되었다.Specifically, each strain culture solution was inoculated into a liquid medium, incubated at 37°C for 24 hours, and then 10 ml of the strain culture solution was inoculated again into a liquid medium, and cultured until absorbance of 0.4 at a wavelength of 600 nm. Thereafter, the Sanchok/Cinnamon extract mixture was added dropwise to a liquid medium and cultured for 2 hours. The Sanchok/Cinnamon extract mixture was 0 mg/ml or 0.05 mg/ml, which was a concentration below the MIC (Minimal inhibitory concentration). Treatment at concentrations of 0.1 mg/ml, 0.2 mg/ml and 0.5 mg/ml.
그 다음, 액체배지에 Trizol 시약(Gibco-BRL)을 첨가하여 각 균주의 total RNA를 추출하였고, cDNA는 역전사 효소반응(Gibco-BRL)을 사용하여 합성하였다.Then, total RNA of each strain was extracted by adding Trizol reagent (Gibco-BRL) to the liquid medium, and cDNA was synthesized using reverse transcriptase reaction (Gibco-BRL).
이때, DNA의 분석은 ABI-Prism 7000을 사용하였고, 실시간 중합연쇄반응은 qPCR SYBR Green Mixes (Applied Bio system Inc., Foster City, CA, USA)을 통해 시행하였으며, PCR 반응조건은 95℃에서 15초간 초기 denatration 후 60℃에서 1분간 annealing 및 extension 과정을 거치도록 하였다.At this time, DNA analysis was performed using ABI-Prism 7000, and real-time polymerization chain reaction was performed through qPCR SYBR Green Mixes (Applied Bio system Inc., Foster City, CA, USA), and PCR reaction conditions were 15 at 95°C. After initial denatration for a second, annealing and extension were performed at 60°C for 1 minute.
그리고 모든 유전자들의 발현 정도는 내부 standard를 사용하여 normalization하였으며, 분석은 적어도 두 개의 독립적인 RNA 샘플을 duplicate로 시행하였다.In addition, the expression level of all genes was normalized using an internal standard, and the analysis was performed by duplicating at least two independent RNA samples.
하기 표 1에 구강질환 병원균의 유전자 염기서열을 나타내었다.Table 1 below shows the gene sequence of oral disease pathogens.
균주 배양액이 접종 및 배양된 액체배지에 산청목/계피 추출 혼합물을 MIC인 0.5mg/ml 이하의 농도로 처리한 후, Real-time PCR을 이용하여 균주의 독력인자의 발현을 관찰한 결과를 하기 표 2에 나타내었다.After treating the cultivar/cinnamon extract mixture with a concentration of 0.5 mg/ml or less in the MIC, the result of observing the expression of the virulence factor of the strain using the Real-time PCR is shown in the following table. It is shown in 2.
(유전자)Strain
(gene)
추출 혼합물의 농도 (mg/mL)Mountain tree / cinnamon
Concentration of extraction mixture (mg/mL)
S. mutans
(gtfB)
S. mutans
(gtfB )
P. gingivalisP. gingivalis
(sodA)(sodA)
상대량 : 발현량의 차이는 각 균주의 16S rRNA 대비 gtfB와 sodA의 발현량을 각각 적용하여 상대적인 정량값을 구하였다.Relative amount: The difference in expression level was obtained by applying the expression levels of gtfB and sodA compared to 16S rRNA of each strain, respectively, to obtain a relative quantitative value.
상기 표 2를 참조하면, S. mutans 균주 배양액에서 균주의 유전자 gtfB는 산청목/계피 추출 혼합물의 농도 0mg/ml 즉, 혼합물이 첨가되지 않았을 때에는 발현이 억제되지 않았고, 0.05mg/ml일 때에도 이와 동일하게 나타났다. 그리고 균주의 유전자는 혼합물의 농도 0.1mg/ml일 때 0.91이고, 0.2mg/ml일 때 0.49이며, 0.5mg/ml일 때 0.46의 발현이 나타났다.Referring to Table 2, the gene gtfB of the strain in the S. mutans strain culture medium has a concentration of 0 mg/ml of the mountain cedar/cinnamon extract mixture, that is, expression is not inhibited when the mixture is not added, and this is the same even when 0.05 mg/ml. Appeared. And the gene of the strain was 0.91 when the concentration of the mixture was 0.1 mg/ml, 0.49 when it was 0.2 mg/ml, and 0.46 when it was 0.5 mg/ml.
또한, P. gingivalis 균주 배양액에서 균주의 독력인자 sodA는 산청목/계피 추출 혼합물의 농도 0mg/ml 즉, 혼합물이 첨가되지 않았을 때에는 발현이 억제되지 않았고, 0.05mg/ml일 때와 0.1mg/ml일 때에도 이와 동일하게 나타났다. 그리고 균주의 독력인자는 혼합물의 농도 0.2mg/ml일 때 0.9이며, 0.5mg/ml일 때 0.88의 발현이 나타났다.In addition, in the culture medium of P. gingivalis strain, the virulence factor sodA of the strain was 0 mg/ml in the concentration of the mountain blueberry/cinnamon extract mixture, that is, the expression was not suppressed when the mixture was not added, and when it was 0.05 mg/ml and 0.1 mg/ml day It appeared the same when. And the virulence factor of the strain was 0.9 when the concentration of the mixture was 0.2 mg/ml, and 0.88 was expressed when 0.5 mg/ml.
즉, Real-time PCR 분석 결과로 나타난 바와 같이, 산청목/계피 추출 혼합물은 농도 의존적으로 S. mutans의 GTFase B를 합성하는 유전자 gtfB의 발현을 억제하였고, P. gingivalis의 독력인자를 합성하는 유전자 sodA의 발현을 억제하였다. 본 발명의 조성물은 0.2mg/ml에서 약 50%의 억제활성을 보여 구강질환 병원균 내의 유전자 발현을 효과적으로 억제하기 위한 항균 활성이 우수한 것을 알 수 있다.That is, as shown in the results of real-time PCR analysis, the mountain blueberry/cinnamon extract mixture inhibited the expression of the gene gtfB synthesizing GTFase B of S. mutans in a concentration-dependent manner, and the gene sodA synthesizing the virulence factor of P. gingivalis Suppressed expression. It can be seen that the composition of the present invention has excellent antibacterial activity for effectively inhibiting gene expression in oral disease pathogens by showing about 50% inhibitory activity at 0.2 mg/ml.
상술한 바와 같이 본 실시예에서는, 산청목/계피 추출 혼합물에 대하여 DPPH 라디칼 소거능 실험으로 항산화 활성을 분석하고, Real-time PCR 분석 실험을 통해 산청목/계피 추출 혼합물의 구강질환 예방 또는 치료의 효과를 평가하였다. 그 결과, 산청목/계피 추출 혼합물은 500㎍/ml에서 약 80%의 항산화 활성을 나타내었으며, 0.2mg/ml에서 약 50%의 구강질환 병원균 내 유전자 발현의 억제활성을 나타내어 항균 활성이 우수한 것을 알 수 있었다.As described above, in the present embodiment, the antioxidant activity was analyzed by the DPPH radical scavenging activity test for the mountain cedar/cinnamon extract mixture, and the effect of preventing or treating oral diseases of the mountain cedar/cinnamon extract mixture was evaluated through a real-time PCR analysis experiment. Did. As a result, the Sancheongmok/Cinnamon extract mixture showed an antioxidant activity of about 80% at 500µg/ml, and an inhibitory activity of gene expression in oral disease pathogens at 0.2mg/ml, showing excellent antibacterial activity. Could.
따라서 이러한 실시예의 결과로부터 본 발명의 산청목 및 계피 추출물은 구강질환을 야기하는 다양한 병원균의 성장과 증식을 억제하여 염증반응의 조절이 가능하고, 항산화 기능을 함으로써, 구강질환을 예방 또는 치료하는데 뛰어난 효과가 있는 것으로 판단된다.Therefore, from the results of these examples, the Sancheongmok and cinnamon extracts of the present invention can suppress the growth and proliferation of various pathogens causing oral diseases, thereby controlling the inflammatory response, and by having an antioxidant function, it is excellent in preventing or treating oral diseases. It is judged that there is.
전술한 내용은 후술할 발명의 청구범위를 더욱 잘 이해할 수 있도록 본 발명의 특징과 기술적 장점을 다소 폭넓게 상술하였다. 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The foregoing has outlined rather broadly the features and technical advantages of the present invention in order to better understand the claims of the invention that follows. Those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains will appreciate that the present invention may be implemented in other specific forms without changing its technical spirit or essential features. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not restrictive. The scope of the present invention is indicated by the following claims rather than the above detailed description, and all modifications or variations derived from the claims and equivalent concepts should be construed as being included in the scope of the present invention.
Claims (5)
상기 산청목 추출물 및 계피 추출물의 중량비는 1:1, 3:1 또는 1:3이고,
상기 구강질환은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 또는 포피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)에 의해 유발되는 충지 또는 치주질환이며,
상기 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 및 포피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)의 유전자 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 조성물.In the composition for the prevention or treatment of oral diseases comprising Sanchokmok extract and cinnamon extract as an active ingredient,
The weight ratio of the Sancheongmok extract and cinnamon extract is 1:1, 3:1 or 1:3,
The oral disease is a caries or periodontal disease caused by Streptococcus mutans or Porphyromonas gingivalis,
A composition characterized by inhibiting the gene expression of said Streptococcus mutans and Porphyromonas gingivalis.
상기 산청목 추출물 및 계피 추출물은 물, 증류수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, n-헥산, 염산, 초산, 포름산, 디에틸에테르 및 사이클로헥산으로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 용매를 이용하여 추출된 것을 특징으로 하는 조성물.According to claim 1,
The sanchokmok extract and cinnamon extract are a group consisting of water, distilled water, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, acetone, ether, ethyl acetate, methylene chloride, n-hexane, hydrochloric acid, acetic acid, formic acid, diethyl ether and cyclohexane. A composition characterized in that it is extracted using at least one solvent selected from.
상기 산청목 추출물 및 계피 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출된 것을 특징으로 하는 조성물.According to claim 1,
The sancheongmok extract and cinnamon extract is a composition characterized in that extracted with water, ethanol or a mixture thereof.
상기 조성물은 치약류, 껌(gum), 구강 세정제, 구강 청정제, 구강용 스프레이, 구강용 연고제 및 구강용 패치로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.According to claim 1,
The composition is characterized in that it has any one or more formulations selected from the group consisting of toothpaste, gum, mouthwash, mouthwash, mouthwash, mouthwash, and mouth patch.
상기 산청목 추출물 및 계피 추출물의 중량비는 1:1, 3:1 또는 1:3이고,
상기 구강질환은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 또는 포피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)에 의해 유발되는 충지 또는 치주질환이며,
상기 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 및 포피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)의 유전자 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 조성물.In the food composition for the prevention or improvement of oral diseases comprising Sanchokmok extract and cinnamon extract as an active ingredient,
The weight ratio of the Sancheongmok extract and cinnamon extract is 1:1, 3:1 or 1:3,
The oral disease is a caries or periodontal disease caused by Streptococcus mutans or Porphyromonas gingivalis,
A composition characterized by inhibiting the gene expression of said Streptococcus mutans and Porphyromonas gingivalis.
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