KR102119524B1 - Cosmetic composition comprising the extract of fermented Sprout leaf/stem ginseng for skin anti-wrinkle effect and producing method thereof - Google Patents
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Abstract
본 발명은 새싹삼 발효액 또는 이의 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하여 증숙된 새싹삼 잎, 줄기 형태로 수득하고, 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출하여 얻어진 추출물을 발효한 발효액 또는 상기 발효액을 추출한 발효 추출액을 수득하여 피부 주름개선 효과가 우수하고 피부 자극에 대한 부작용이 없는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.
또한, 본 발명은 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물을 제공함으로써, 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.
또한 본 발명에서 상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기는 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 추출 용매를 사용하여 추출되는 것이 바람직하다.
아울러, 본 발명은 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하는 단계(S10), 상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출하는 단계(S20), 상기 단계(S20)의 새싹삼 잎, 줄기 추출액을 클루이베로마이세스로 발효하여 발효액을 얻는 단계(S30), 상기 단계(S30)의 새싹삼 잎, 줄기 발효액에서 배양균을 제거한 후 열수추출법을 이용하여 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻는 단계(S40), 상기 단계(S30)의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 상기 단계(S40)의 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액에 안정화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료를 포함하여 화장료 조성물을 얻는 단계(S50)로 이루어지는 것을 특징으로 한다.The present invention relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles and a method for manufacturing the same, comprising a fermented sprout or an extract thereof as an active ingredient, and more specifically, a sprouted sprout, a stem sprouted by steaming a stem, and in the form of a stem. Obtained and obtained by fermenting the extract obtained by ultrasonically extracting the steamed young leaves, stems, or fermented extracts obtained by extracting the fermented liquid, excellent in improving wrinkles of the skin and having no side effects on skin irritation. An object of the present invention is to provide a cosmetic composition for improving skin wrinkles using a fermentation broth or a fermentation extract as an active ingredient.
In addition, the present invention provides a cosmetic composition for improving wrinkles of the skin, which uses the leaves of sprouts, stem fermentation liquid or fermentation extract as an active ingredient, thereby promoting fibroblast proliferation, inhibiting intramolecular procollagen synthesis, gene expression of MMP-1, and The present invention relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles, and a method for manufacturing the same, using the leaves of sprout, stem fermentation liquid or fermentation extract thereof as an active ingredient to improve wrinkles.
In addition, in the present invention, the steamed sprout leaves, stems are water, any one selected from the group consisting of anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate and 1,3-butylene glycol. It is preferably extracted using an extraction solvent.
In addition, the present invention is a bud of a bud, a step of steaming the stem (S10), the step of extracting the steamed bud, the stem by ultrasonic (S20), the bud of the bud of the step (S20), the stem extract Kluy Step of obtaining fermentation broth by fermentation with Veromyces (S30), step of obtaining culture of germ leaves, stem fermentation extract by using hot water extraction method after removing the cultured bacteria from the bud and stem fermentation liquid of step (S30) (S40) In step (S50) to obtain a cosmetic composition comprising a stabilizer, vitamins, pigments, pigments and fragrances in the sprout, leaf, stem fermentation broth of the step (S30) or the leaves, stem fermentation extract of the step (S40) (S50) It is characterized by being made.
Description
본 발명은 새싹삼 발효액 또는 이의 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하여 증숙된 새싹삼 잎, 줄기 형태로 수득하고, 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출하여 얻어진 추출물을 발효한 발효액 또는 상기 발효액을 추출한 추출액을 수득하여 피부 주름개선 효과가 우수하고 피부 자극에 대한 부작용이 없는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles and a method for manufacturing the same, comprising a fermented sprout or an extract thereof as an active ingredient, and more specifically, a sprouted sprout, a stem sprouted by steaming a stem, and in the form of a stem. Obtained, the fermented broth or fermented broth obtained by extracting the steamed sprouts, stems by ultrasonic extraction, or the extract obtained by extracting the fermented broth has excellent skin wrinkle improvement effect and has no side effects on skin irritation. Or it relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles using the fermented extract as an active ingredient.
또한, 본 발명은 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물을 제공함으로써, 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for improving wrinkles of the skin, which uses the leaves of sprouts, stem fermentation liquid or fermentation extract as an active ingredient, thereby promoting fibroblast proliferation, inhibiting intramolecular procollagen synthesis, gene expression of MMP-1, and The present invention relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles, and a method for manufacturing the same, using the leaves of sprout, stem fermentation liquid or fermentation extract for improving wrinkles as an active ingredient.
화장품의 기능은 청결과 미적 기능뿐만 아니라, 수분, 공해 물질과 스트레스, 자외선 등의 외적인 요인과 면역세포의 기능저하, 세포 활성의 저하 등의 내적 요인에 기인한 자유 라디칼(Free Radical), 활성산소, 과산화물 등에 의한 단백질, 핵산, 세포막 지질 파괴 등의 피부 노화의 원인을 제거하거나 억제하는 것이다. The functions of cosmetics are not only clean and aesthetic, but also free radicals and free radicals due to external factors such as moisture, pollutants and stress, ultraviolet rays, and internal factors such as deterioration of immune cells and decreased cell activity. , To remove or inhibit the causes of skin aging such as destruction of proteins, nucleic acids, cell membrane lipids by peroxide, and the like.
또한, 소비자의 고기능 화장품에 대한 욕구를 충족시키기 위한 미백, 피부주름 개선 및 억제, 그리고 자외선 차단 기능을 갖는 화장품들이 계속해서 개발되고 있다. 그 중에서도 특히 주름 개선 및 억제 제품은 피부를 젊게 유지하려는 소비자의 많은 관심을 받는 대상이다.In addition, cosmetics that have whitening, skin wrinkle improvement and suppression, and UV protection to meet the consumer's desire for high-performance cosmetics are continuously being developed. In particular, wrinkle improvement and suppression products are receiving much attention from consumers who want to keep their skin young.
사람의 피부는 일반적으로 나이가 들어감에 따라 내·외적인 환경에 의하여 수분, 탄력성, 색 및 윤기를 잃고 거칠어진다. 이것을 피부 노화라고 하며, 기미, 주름, 주근깨 등이 많아지는 과정이다. A person's skin generally loses moisture, elasticity, color, and shine due to internal and external environments as it ages and becomes rough. This is called skin aging, and is a process in which spots, wrinkles, and freckles increase.
아이 때는 체내에 콜라겐(collagen)이 많아서 온몸이 매끌매끌하지만, 나이가 들면 콜라겐이 부족하거나 질이 저하되어 피부는 탄력을 잃고 주름이 생기게 된다. 피부의 주름은 피부의 수분 함유량과 콜라겐의 함유량 그리고 면역 기능 등의 여러 요인에 영향을 받으며, 이 중에서도 가장 큰 영향을 미치는 것이 콜라겐의 함유량인 것으로 알려져 있다.When a child has a lot of collagen (collagen) in the body, the whole body is smooth, but with age, the collagen is insufficient or the quality is reduced, so the skin loses elasticity and wrinkles are formed. Wrinkles of the skin are affected by various factors such as skin moisture content, collagen content, and immune function, and it is known that collagen content is the most important.
콜라겐은 피부의 진피층에 존재하며 전체 피부 건조중량의 약 70%를 차지한다. 피부의 탄력은 이 콜라겐과 엘라스틴(elastin, 탄력섬유)에 의해서 유지되는 것으로 알려져 있다.Collagen is present in the dermal layer of the skin and accounts for about 70% of the total dry skin weight. Skin elasticity is known to be maintained by this collagen and elastin.
콜라겐 분자는 파이브로블라스트(Fibroblast) 내에서 만들어지며, 이들이 세포 밖으로 분비된 후에 3중 나선 구조를 형성한다. 콜라겐의 주된 기능으로는, 피부의 기계적인 견고성 유지, 결합 조직의 저항력 및 조직의 결합력 강화, 세포 접착의 지탱, 세포 분할 및 분화의 유도 등이 알려졌다(Van der Rest 등, 1990).Collagen molecules are made in fibroblasts, and after they are secreted out of cells, they form a triple helix structure. Main functions of collagen have been known to maintain the mechanical robustness of the skin, strengthen the resistance of connective tissues and tissues, sustain cell adhesion, induce cell division and differentiation (Van der Rest et al., 1990).
생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외기질의 합성과 분해는 조절이 되나 노화가 가속화 되면서 그 합성이 감소하며 콜라겐을 분해하는 효소인 기질금속단백질분해효소(MMP; Matrix metalloproteinase)의 발현이 촉진 되면서 피부 내 콜라겐 섬유구조의 변화를 초래하여 피부탄력을 잃은 부분이 노쇠하게 되고 점차 주름이 생기게 된다.In vivo, synthesis and decomposition of extracellular matrix such as collagen is regulated, but as the aging accelerates, its synthesis decreases, and the expression of matrix metalloproteinase (MMP), an enzyme that breaks down collagen, is accelerated, and collagen in the skin is promoted. Due to the change in the fiber structure, the part that has lost skin elasticity is aging and wrinkles are gradually formed.
또한, 자연 노화에 의한 세포 활성의 감소 및 콜라게나아제(collagenase) 의 활성으로 인한 내적 요인 및 공해, 자외선, 스트레스 등의 외적 요인에 의한 활성산소 및 자유 라디칼의 증가로 인해 피부의 탄력이 감소하게 된다(Ingrid Emerit 등, Free radical and aging, 1992).In addition, the elasticity of the skin decreases due to an increase in free radicals and free radicals due to internal factors and pollution, ultraviolet rays, stress, etc., due to a decrease in cellular activity due to natural aging and activity of collagenase. (Ingrid Emerit et al., Free radical and aging, 1992).
기질금속단백질분해효소(MMP)는 자연 노화와 자외선 노출에 의해서 생체 내에서 분비되는 단백질 분해제로 세포외기질(ECM; Extra Cellular Matrix)내의 결합조직(Collagen, Elastin, Glycosamino-glycans 등)을 분해하는 효소(Enzyme)이다. 기질금속단백질분해효소(MMP)는 다형핵성호중구(Polymorphonuclearneutrophil), 대식 세포(Macrophage), 섬유아세포(Fibroblast), 골세포(Born cell)와 같은 세포로부터 분비되는 칼슘 및 아연의존성 엔도펩티다제(Endopeptidase)로 중성 pH에서 작용하며 기질로써 여러 가지 세포외기질을 이용한다. 그 종류는 MMP1 ~ 28까지 존재한다. 이중 노화와 관련된 기질금속단백질분해효소는 MMP 1, MMP 2, MMP 3, MMP 9, MMP 12의 발현 증가와 관련이 있으며, collagen 분해와 관련하여 더 세분화 하여 집중적으로 연구되는 기질금속단백질분해효소는 MMP 1, MMP 9이다.Substrate metal protease (MMP) is a proteolytic agent secreted in vivo by natural aging and exposure to UV light, which degrades connective tissue (Collagen, Elastin, Glycosamino-glycans) in the extracellular matrix (ECM). Enzyme. Substrate metal protease (MMP) is a calcium- and zinc-dependent endopeptidase secreted from cells such as polymorphonuclear neutrophils, macrophages, fibroblasts, and bone cells. Endopeptidase) acts at neutral pH and uses various extracellular matrix as substrates. The types exist from MMP1 to 28. Among them, matrix metal protease related to aging is related to increased expression of MMP 1, MMP 2, MMP 3, MMP 9, and MMP 12. MMP 1 and MMP 9.
일반적으로 80세에는 20세에 비해 65%의 콜라겐이 감소하여 피부의 두께가 얇아지고, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 관련이 있다고 알려져 있다(Arthur K. Balin 등, Aging and the skin, 1989). In general, it is known that at 80 years of age, 65% of collagen is reduced compared to 20 years of age, and the thickness of the skin becomes thinner, which is closely related to the formation of wrinkles on the skin (Arthur K. Balin et al., Aging and the skin, 1989).
또한, 근래에는 피부 노화에 대한 광범위한 연구가 진행되면서 피부에서 콜라겐의 중요성이 한층 강조되고 있다. 피부 내 콜라겐의 합성촉진, MMP 1, MMP 9 등과 같은 기질금속단백질분해효소의 활성억제를 통하여 진피 기질의 성분이 증가됨으로써 항산화, 주름개선, 탄력증진, 피부강화 및 상처 치유와 같은 항노화의 효과를 기대할 수 있는 것으로 알려져 있다.In addition, the importance of collagen in the skin has been further emphasized in recent years with extensive research on skin aging. Anti-aging effects such as antioxidant, wrinkle improvement, elasticity enhancement, skin strengthening and wound healing by increasing the composition of dermal matrix through the promotion of collagen synthesis in the skin and the inhibition of the activity of matrix metalloproteinases such as MMP 1 and MMP 9 It is known that can be expected.
이러한 효과를 얻기 위하여, 종래에는 콜라겐을 화장품에 배합하여 제품화 하였다. 그러나 이들 화장품은 콜라겐을 피부 표면에 도포하는 것으로서, 고분자인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 그 기능을 기대할 수 없다. In order to obtain such an effect, conventionally, collagen was formulated into a cosmetic product. However, these cosmetics apply collagen to the surface of the skin, and it is difficult to expect its function due to the difficulty in percutaneous absorption of collagen, which is a polymer.
또한, 근래에는 피부의 진피에 직접 콜라겐을 주입하지만, 이 방법 역시 부작용으로 인해 올바른 피부 주름의 개선을 기대하기는 어렵다. In addition, although collagen is directly injected into the dermis of the skin in recent years, it is difficult to expect correct skin wrinkle improvement due to side effects.
최근에는 이 문제를 해결하고자 콜라겐 합성을 촉진하는 물질에 대한 관심이 높아졌으며, 콜라겐 합성 촉진물질로는 레티노익 산(Retinoic acid), 동물 태반 유래의 단백질(일본특허 특개평 8-231370), 클로렐라추출물, 베툴리닉 산(Betulinic acid) 등이 알려져 있으나, 레티노익 산은 불안정하여 제형 기술이 복잡하며, 피부에 자극과 발작 등의 안전성 문제로 인해 사용에 한계가 있고, 동물 태반 유래의 단백질은 광우병에 의한 소 적출물의 사용이 금지되고 있으며, 클로렐라추출물과 베툴리닉 산 모두 효과가 미미하여 제한적으로 사용하고 있기에 실질적인 피부 콜라겐의 합성 촉진에 의한 피부 주름 개선효과를 기대하기는 어렵다. In order to solve this problem, interest in substances that promote collagen synthesis has increased recently, and retinoic acid, a protein derived from animal placenta (Japanese Patent Laid-Open No. 8-231370), chlorella Extract, betulinic acid, etc. are known, but retinoic acid is unstable, so the formulation technology is complicated, and it is limited in use due to safety problems such as irritation and seizure on the skin, and protein derived from animal placenta is mad cow disease The use of bovine extract by is prohibited, and since both chlorella extract and betulinic acid are insignificant and limitedly used, it is difficult to expect an effect of improving skin wrinkles by promoting the synthesis of synthetic skin collagen.
따라서, 생체에 안전하고 사용의 간편성과 콜라겐 생성 촉진효과를 갖는 새로운 콜라겐 생성 촉진, 이 물질을 함유하는 피부를 당겨주는 물리적인 당김효과, MMP 1, MMP 9 등의 활성을 억제하는 자극이 없는 천연유래 화장료 개발이 절실히 요구되고 있다. Therefore, it is safe to the living body and promotes the creation of new collagen, which has the convenience of use and the effect of promoting collagen production, the physical pulling effect that pulls the skin containing this substance, and no stimulation that suppresses the activities of MMP 1, MMP 9, etc. Development of derived cosmetics is urgently required.
그 중에서도 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)은 드릅나무과 다년생 약용작물로서 전 세계적으로 가장 널리 알려진 약재로 약 2000년 전부터 식의약품으로 널리 사용되어 왔으며, 진세노사이드와 같은 다양한 약리성분들과 작용에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 주요 약리작용으로는 항암, 항노화, 피로회복, 뇌기능 강화 등으로 알려져 있으며 최근 건강기능식품에 대한 관심이 증가하면서 다양한 제품으로 개발되고 있다.Among them, ginseng (Panax ginseng CA Meyer) is a perennial medicinal plant and is the most widely known herb in the world.It has been widely used as a food and drug since 2000, and studies on various pharmacological components and effects such as ginsenoside Is actively progressing. The main pharmacological action is known as anti-cancer, anti-aging, fatigue recovery, brain function enhancement, etc. Recently, as interest in health functional food has increased, it has been developed into various products.
특히 그 중 새싹삼은 새싹삼(sprout ginseng)은 인삼과 산양삼의 묘삼을 수경 토경으로 필요로 하는 상태로 짧게는 3주에서 길게는 4월까지 재배한 것으로 보통 인삼묘삼과 산양묘삼을 1 ~ 2년 재배한 것을 사용하여 사업용으로 사용하며, 잎과 줄기, 뿌리가 붙어 있는 8 ~ 10 cm 크기의 전초 형태의 수삼을 식용으로 이용하고 있다. 특히, 생리활성 성분인 사포닌의 함량 또한 뿌리에서 14.3 ~ 15.8 mg/g, 잎은 140.8 ~ 180 mg/g으로서 근경에 비해 6배가량 높은것으로 보고되고 있다.In particular, the sprouted ginseng (sprout ginseng) is a condition that requires ginseng of ginseng and wild ginseng as hydroponic soil, and is grown for 3 weeks to 4 months in short. It is used for business using cultivated materials, and 8~10 cm sized ginseng with leaves, stems and roots is used for food. In particular, the content of the physiologically active ingredient saponin is also 14.3 to 15.8 mg/g in the root and 140.8 to 180 mg/g in the leaf, which is reported to be 6 times higher than the root diameter.
종래에 사용되고 있는 피부주름개선에 효과있는 물질은 아스코르브산, 레티놀 및 콜라게나제활성을 단순히 억제하는 물질로 화장료나 의약품에 배합함으로써 피부의 주름 개선 및 노화를 방지하는 방법으로 이용되어 왔는데, 가격이 고가일 뿐만 아니라 배합 시 안정성이 좋지 못하거나 그 효과가 미미하여 실질적인 효과를 얻기가 어려운 문제점이 있었다.Materials that are effective in improving skin wrinkles that have been used in the past are substances that simply inhibit ascorbic acid, retinol, and collagenase activity, and have been used as a method of improving wrinkles and preventing aging of the skin by blending them in cosmetics or medicines. In addition to being expensive, there is a problem in that it is difficult to obtain a practical effect due to poor stability or insignificant effects when compounding.
본 발명은 상기와 같은 문제를 해결하기 위해 안출된 것으로 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하여 증숙된 새싹삼 잎, 줄기 형태로 수득하고, 상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출한 후 감압농축하며 Kluyveromyces 균주를 접종해 새싹삼 잎, 줄기 발효물을 수득하여 이를 유효성분으로 하는 피부 주름개선 효과가 우수하고 피부 자극에 대한 부작용이 없는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.The present invention was devised to solve the above problems, and the leaves of buds and stems are steamed to obtain boiled buds and stems, and the boiled buds and stems are extracted with ultrasonic waves and concentrated under reduced pressure. Inoculation of Kluyveromyces strains to obtain the leaves and stem fermentation of sprouts, which has excellent skin wrinkle improvement effect as an active ingredient and has no side effects on skin irritation. It is an object to provide a cosmetic composition for improvement.
또한, 본 발명은 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물을 제공함으로써, 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 데 목적이 있다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for improving wrinkles of the skin, which uses the leaves of sprouts, stem fermentation liquid or fermentation extract as an active ingredient, thereby promoting fibroblast proliferation, inhibiting intramolecular procollagen synthesis, gene expression of MMP-1, and It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition for improving skin wrinkles and a method for manufacturing the same, using the leaves of sprout, stem fermentation liquid or fermentation extract thereof as an active ingredient to improve wrinkles.
상기와 같이 본 발명에 따른 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법은 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하여 초음파로 추출한 후 클루이베로마이세스로 발효한 발효액 또는 상기 발효액을 추출한 추출액으로 수득하여 피부 주름 개선 효과가 우수하고 피부 자극에 대한 부작용이 나타나지 않는 효과가 있다.As described above, the cosmetic composition for improving skin wrinkles using the leaves of sprout, stem fermentation broth or fermentation extract according to the present invention as an active ingredient, and a method for manufacturing the same, are fermented with Kluyveromyces after steaming the leaves and stems of the sprouts and extracting them with ultrasonic waves. It is obtained as a fermentation broth or an extract obtained by extracting the fermentation broth, and thus has an excellent effect of improving skin wrinkles and has no side effects on skin irritation.
또한, 본 발명에 따른 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법은 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출물을 유효성분으로 하는 화장료 조성물을 제공함으로써, 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선하는 효과가 있다.In addition, the cosmetic composition for improving skin wrinkles using the bud sprout, stem fermentation broth or fermentation extract according to the present invention as an active ingredient, and a method for manufacturing the same, by providing a cosmetic composition using the bud sprout, stem fermentation broth or fermentation extract as an active ingredient , It promotes fibroblast proliferation, inhibits intramolecular procollagen synthesis, and gene expression of MMP-1 to improve skin wrinkles.
도 1은 본 발명에 따른 주름 개선 효과를 가지는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효 추출물의 제조방법을 나타낸 플로우 차트.Figure 1 is a flow chart showing a method of manufacturing a sprout, leaves, stem fermentation broth or ferment extract having a wrinkle improvement effect according to the present invention.
본 발명은 주름 개선에 효과가 있는 근본적인 물질을 찾고자 자연의 여러 가지 천연물들을 탐색한 결과 새싹삼이 항산화, 항염, 미백 등의 효과가 우수한 것을 확인하였으며, 특히 이를 증숙하고 말리는 증포과정을 거친 후 초음파로 추출하여 새싹삼 잎, 줄기의 유효성을 극대화 하면서도 안정성을 확보하였다. 또한, 초음파 추출을 통해 확보된 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효하여 얻은 발효액 또는 발효 추출물을 화장료 조성물에 일정 농도이상 배합하여 사람 피부에 직접 도포한 실험결과에서도 피부 주름 개선 효과가 우수하고 피부 자극에 대한 부작용이 없는 것을 확인하였다.In the present invention, as a result of exploring various natural products in nature to find a fundamental substance that is effective in improving wrinkles, it was confirmed that the buds have excellent antioxidant, anti-inflammatory, and whitening effects. Extracted to maximize the effectiveness of the leaves, stems, and stability. In addition, the effect of improving the wrinkles of the skin is excellent even in the experiment result of directly applying the fermented liquid or fermented extract obtained by fermenting the buds, leaves, and stems obtained through ultrasonic extraction to the cosmetic composition over a certain concentration, and applied directly to human skin. And confirmed that there were no side effects for skin irritation.
그 결과, 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액이 현저하게 섬유아세포 증식 촉진, 분자 내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선 효과를 나타냄을 확인하여 본 발명을 완성하였다.As a result, it was confirmed that the fermentation broth fermented with the buds and leaves of the stem with Kluyveromyces markedly promoted fibroblast proliferation, inhibited intracellular procollagen synthesis, and gene expression of MMP-1, thereby improving skin wrinkles. The present invention was completed.
본 발명에 따른 새싹삼 잎, 줄기 발효액을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 대하여 설명하면 다음과 같다.When explaining the cosmetic composition for improving skin wrinkles using the leaves of sprout, stem fermentation broth according to the present invention as an active ingredient.
본 발명의 화장료 조성물은 새싹삼 잎, 줄기를 증숙과 건조과정을 통해 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출하여 얻은 추출액을 감압농축 한 후 클루이베로마이세스로 발효시켜 얻은 발효액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.The cosmetic composition of the present invention concentrates the extract obtained by extracting the sprout, leaves, and stems, which are steamed through the process of steaming and drying, by ultrasonic concentration, and fermentation solution obtained by fermentation with Kluyveromyces as an active ingredient. It is characterized by being a cosmetic composition for improving skin wrinkles.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효시켜 수득한 새싹삼 잎, 줄기 발효액으로부터 추출한 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.In addition, the cosmetic composition of the present invention is characterized in that it is a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing as an active ingredient an extract extracted from the leaves of sprouts, stems, and the leaves of sprouts obtained by fermenting the buds and stems with Kluyveromyces.
상기 새싹삼 잎, 줄기의 바람직한 추출 중량비는 새싹삼 잎, 줄기 10 내지 50 중량%가 되는 것이 바람직하며, 상기 새싹삼 잎, 줄기는 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 추출 용매를 사용하여 추출되는 것이 바람직하다.The preferred extraction weight ratio of the sprouts leaves and stems is preferably 10 to 50% by weight of the leaves and stems, and the leaves and stems are water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl It is preferably extracted using any one extraction solvent selected from the group consisting of acetate, butyl acetate and 1,3-butylene glycol.
상기 새싹삼 잎, 줄기는 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 새싹삼 잎, 줄기 추출액이 제조될 수 있다.The leaves and stems of the sprouts can be prepared according to conventional methods known in the art, that is, under conditions of normal temperature and pressure, using a conventional solvent, the leaves of the sprouts and stems.
일 예로, 본 발명의 조성물의 유효성분인 새싹삼 잎, 줄기는 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출하거나 새싹삼 잎, 줄기를 상기 용매를 이용하여 추출한 후, 이를 혼합하여 제조할 수 있다.As an example, the active ingredient of the composition of the present invention, bud leaves, stems are selected from the group consisting of water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate and 1,3-butylene glycol. After extracting using a solvent or extracting sprouts, stems, and using the solvent, it can be prepared by mixing it.
상기 새싹삼 잎, 줄기는 증숙과 건조를 반복하는 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 얻는 단계;와 이를 초음파로 추출하여 추출액을 얻는 단계;와 새싹삼 추출액을 감압농축하는 단계;와 농축액에 클루이베로마이세스를 접종하여 발효시킨 발효액 또는 이를 추출하여 발효추출액을 얻는 단계를 통하여 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 추출액을 수득하는 단계를 수행한다The buds, leaves, stems are steamed sprouts and leaves to repeat the steaming and drying steps to obtain a stem; and extracting this by ultrasonic extraction to obtain an extract; and concentrating the sprouts extract under reduced pressure; and Kluyvero in the concentrate Performing a step of obtaining a fermentation broth of a sprout, a stem fermentation broth or an extract thereof through the step of obtaining a fermentation broth or fermentation broth fermented by inoculating Myces
한편, 본 발명의 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액은 상술한 추출법에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제과정을 거친 추출물도 포함한다.On the other hand, the fermentation broth fermented with the leaves, stems of the present invention with Kluyveromyces include not only extracts by the above-described extraction method, but also extracts that have been subjected to a conventional purification process.
예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액에 포함된다고 해석한다.Obtained through various purification methods additionally performed, such as separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (made for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity) It is interpreted that the fraction is also included in the fermentation broth fermented with the buds and stems of the present invention with Kluyveromyces.
또한, 본 발명의 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액은 발효액을 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조된 것을 포함하기도 한다.In addition, the fermentation broth of the present invention, fermented fermented broth leaves and stems with Kluyveromyces may include those prepared in powder form by additional processes such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying.
본 발명의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액은 상기 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액 또는 상기 발효액을 추출한 추출액으로써, 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선 효과가 우수하고 피부 자극에 대한 부작용이 없는 천연의 안전 제제에 해당하며, 생산비용이 저렴하다.Sprout leaves, stem fermentation broth, or stem ferment extract of the present invention is a fermentation broth fermented with the buds, stems, or extracts of the fermentation broth, promoting fibroblast proliferation, intramolecular procollagen synthesis , It suppresses the gene expression of MMP-1, has excellent effect of improving wrinkles on the skin, and is a natural safe formulation without side effects on skin irritation, and has low production cost.
본 발명에서 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액은 농축된 액상일 수도 있고, 건조된 분말형태일 수도 있다.In the present invention, the fermentation broth fermented with buds and stems of Kluyveromyces in the present invention may be concentrated liquid or dried powder.
본 발명에 사용되는 발효 균주로 클루이베로마이세스 종(Kluyveromyces spp), 사카로마이세스 종(Saccharomyces sp.), 칸디다 종(Candida spp), 클루이베로마이세스 종(Lactobacillus sp.), 바실러스 종(Bacillus sp)을 포함하며, 보다 구체적으로는 클루이베로미세스 종을 포함하고, 보다 더 구체적으로는 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis)를 이용하여 발효를 진행하였다.As a fermentation strain used in the present invention, Kluyveromyces spp, Saccharomyces sp., Candida spp, Lactobacillus sp., Bacillus species ( Bacillus sp), and more specifically, contains the species Kluyveromyces, and more specifically, fermentation was performed using Kluyveromyces lactis.
본 발명의 새싹삼 잎, 줄기 발효액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물은 매우 우수한 주름 개선 효능을 나타내며, 적용 제품들에서 우수한 안정성을 나타낸다.The cosmetic composition for improving wrinkles of the skin containing the sprouts of the buds of the present invention and the stem fermentation broth as an active ingredient exhibits very good wrinkle improvement efficacy and excellent stability in applied products.
또한, 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하여 피부의 주름을 개선 등의 효과를 가진다.In addition, it has effects such as promoting fibroblast proliferation, intramolecular procollagen synthesis, and suppressing gene expression of MMP-1 to improve wrinkles on the skin.
본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액 또는 발효액을 추출한 추출액은 화장료 조성물 중 총 중량대비 0.01 내지 20.0 중량%이며, 바람직하게는 0.1 내지 15.0 중량%이며, 보다 바람직하게는 1 내지 10.0 중량%이다. According to a preferred embodiment of the present invention, the fermentation broth or the fermentation broth extract fermented with the buds and stems of Kluyveromyces is 0.01 to 20.0 wt% of the total weight of the cosmetic composition, preferably 0.1 to 15.0 wt% Is, more preferably 1 to 10.0% by weight.
상기 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효액을 추출한 추출액은 화장료 조성물 총 중량대비 0.01 중량% 미만인 경우 섬유아세포 증식 촉진, 분자내 Collagen, TIMP-1, Tropoelastin의 유전자 발현과 MMP-1의 유전자 발현을 억제효과가 나타나지 않는 문제가 있으며, 20.0 중량% 초과인 경우 건조 피부를 가진 사람에게 피부 가려움과 따끔거림이 발생되는 문제가 발생할 수 있다. The sprout, leaf, stem fermentation broth or extract extracted from the fermentation broth promotes fibroblast proliferation when it is less than 0.01% by weight compared to the total weight of the cosmetic composition, and inhibits the gene expression of Collagen, TIMP-1 and Tropoelastin in the molecule and gene expression of MMP-1. There is a problem that does not appear, and if it is more than 20.0% by weight, itching and tingling of the skin may occur in people with dry skin.
본 발명의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 발효액을 추출한 추출액은 피부 주름 개선의 효과를 가지며, 건조 피부를 가진 사람을 제외하고는 피부 자극에 대한 부작용이 없기 때문에, 20 중량%를 초과하여 100 중량%까지 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 화장료 조성물로 사용할 수 있다.The extract of the leaves of the buds of the present invention, the stem fermentation broth or the fermentation broth extract has the effect of improving skin wrinkles and has no side effects on skin irritation, except for those with dry skin, exceeding 20 wt% and 100 wt% Until the leaves of sprouts, stem fermentation liquid or leaves of sprouts, stem fermentation extract can be used as a cosmetic composition.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 새싹삼 잎, 줄기를 클루이베로마이세스로 발효한 발효액 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The ingredients included in the cosmetic composition of the present invention include ingredients commonly used in cosmetic compositions in addition to the fermentation broth fermented with Kluyveromyces as the active leaves, stems, etc., such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, Conventional adjuvants such as vitamins, pigments, pigments and flavors, and carriers.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 팩, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleaning , May be formulated as an oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, it can be prepared in the form of a flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, pack, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, any one or more of animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, trakant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide as carrier components It can be used by selecting.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane /Propellant such as butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 산탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizing agent or emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, butyl Len glycol, 1,3-butyl glycol oil, polyoxyethylene cured castor oil, glycerol, glycerin, aliphatic esters, phenoxyethanol, triethanolamine, polyethylene glycol, beeswax, polysorbate 60, sorbitan sesquioleide, paraffin, Sorbitan stearate, lipophilic monostearic acid glycerin, stearic acid, glyceryl stearate/page-400 stearate, carboxypolymer, sitosterol, polyglyceryl 2-oleate, ceramide, cholesterol, steareth-4, disetyl phosphate , Macadamia oil, carboxyvinyl polymer, xanthan gum or any one or more of fatty acid esters of sorbitan.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 글리세린, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 스테아린산, 세틸알코올, 글리세릴모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트, 솔비탄세스퀴올레이트, 글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트, 왁스, 파리핀, 스쿠알란, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드, 카르복시비닐폴리머, 트리에탄올아민, 아가 또는 트라칸트 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, liquid diluents such as water, ethanol, glycerin, butylene glycol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester Same suspending agent, microcrystalline cellulose, hydroxyethylcellulose, sodium hyaluronate, phenoxyethanol, aluminum metahydroxide, bentonite, stearic acid, cetyl alcohol, glyceryl monostearate, polyoxyethylene sorbitan monostearate , Sorbitan sesquioleate, glyceryl monostearate/glyceryl stearate/polyoxyethylene stearate, wax, parpin, squalane, caprylic/capric triglyceride, carboxyvinyl polymer, triethanolamine, agar or tra Any one or more of Kant can be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivatives, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide as a carrier component Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters can be selected and used.
본 발명에 따른 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법은 첨부 도면을 참조하여 설명하면 다음과 같다.A method of manufacturing a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing a sprout of a young ginseng leaf, a stem fermentation broth or an extract thereof as an active ingredient will be described with reference to the accompanying drawings.
도 1은 본 발명에 따른 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법을 보여주는 플로우 차트이다.1 is a flow chart showing a method of manufacturing a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing a sprout of ginseng leaves, a stem fermentation broth or an extract thereof according to the present invention as an active ingredient.
이하, 본 발명에 대한 바람직한 실시 내용은 첨부한 도면을 참조하여 설명하면, 본 발명의 새싹삼 잎, 줄기 발효액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법은 하기 단계를 포함하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.Hereinafter, a preferred embodiment of the present invention will be described with reference to the accompanying drawings, a method for preparing a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing the sprouted leaves and stem fermentation broth of the present invention as an active ingredient includes the following steps: Preferably, but not limited to.
본 발명의 제조방법을 각 단계별로 나누어서 설명하면 다음과 같다.When explaining the manufacturing method of the present invention in each step is as follows.
상기 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하여 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 얻는 단계(S10)를 수행한다.The step (S10) is performed to obtain the sprouted leaves and stems by steaming the sprouted leaves and stems.
상기 새싹삼 잎, 줄기를 증숙기에 넣고 증숙기 내부에 정제수를 채워 넣은 후 40 내지 80℃에서 8 내지 16시간 동안 증숙을 수행하고, 상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 20 내지 60의 온도에서 8 내지 48시간동안 건조과정을 수행한다.The sprouted leaves and stems were put in a steamer and filled with purified water inside the steamer, followed by steaming at 40 to 80°C for 8 to 16 hours, and the steamed sprouts and leaves at 8 to 20 to 60°C. Drying is performed for 48 hours.
상기의 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하고 건조하는 증포과정을 1 내지 6회까지 반복하여 수행한다.The distillation process of steaming and drying the leaves and stems of the buds is repeated 1 to 6 times.
상기의 범위를 벗어나 90 내지 96℃를 초과하여 장시간 증숙과정을 진행할 경우, 새싹삼에 함유된 사포닌류 또는 프라디코딘류 등의 유효성분이 파괴될 수 있으며, 120℃보다 더 높은 온도로 증자를 진행 시 새싹삼 자체 조직체가 흐믈해지기 때문에 제품으로써 가치가 낮아진다. 또한, 상기의 증숙 온도 범위 중 40℃보다 낮은 온도로 증숙과정을 진행할 경우 충분히 증숙되지 않는 어려움이 있기 때문에 상기의 온도와 시간은 새싹삼 잎, 줄기의 형태를 유지하고 유효성을 높이기 위한 최적의 증숙조건 범위이다.When the steaming process is performed for a long time exceeding 90 to 96°C outside the above range, active ingredients such as saponins or pradicodines contained in the bud ginseng may be destroyed, and when the steaming is performed at a temperature higher than 120°C The value of the product is lowered because the organization itself sprouts. In addition, if the steaming process is performed at a temperature lower than 40°C among the steaming temperature ranges, there is a difficulty in not being steamed sufficiently, so the above temperature and time are optimal steaming to maintain the shape of the leaves and stems and increase the effectiveness. It is a condition range.
상기 증숙과정을 통하여 얻은 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출하여 새싹삼 잎, 줄기 추출액을 얻는 단계(S20)를 수행한다.A step (S20) of obtaining a bud extract and a stem extract by performing ultrasonic extraction of a bud and a stem obtained through the steaming process is performed.
상기 단계(S10)에서 얻은 새싹삼 잎, 줄기에 25 내지 100 g/L의 비율로 증류수를 가하여 초음파추출기에 넣은 후 10 내지 70 KHz를 가지는 파장과 100 내지 1,000 watt 출력으로 새싹삼 잎, 줄기를 추출하되, 40 내지 80℃에서 2 내지 12시간 동안 추출을 수행한다. After adding distilled water at a rate of 25 to 100 g/L to the buds and stems obtained in the step (S10), put them in an ultrasonic extractor, and then put the buds and stems at a wavelength of 10 to 70 KHz and 100 to 1,000 watt output. Extraction is performed at 40 to 80°C for 2 to 12 hours.
그 후, 3 내지 8 ㎛ 여과지로 여과하여 추출액을 확보한다. Then, it is filtered through 3 to 8 µm filter paper to secure the extract.
상기 파장과 출력범위는 새싹삼 잎, 줄기의 조직이 파쇄되어 침전물이 발생하지 않도록 하는 최적의 범위이고, 상기 온도범위는 새싹삼 잎, 줄기에 함유된 진세노사이드 포함 유효성분이 파괴되지 않게 최적으로 용출시킬 수 있는 범위이다.The wavelength and output range are optimal ranges so that the tissues of the leaves and stems of the sprouts are not crushed, and the temperature range is optimal so that the active ingredients, including the ginsenosides contained in the leaves and the stems, are not destroyed. It is the range that can be eluted.
상기 새싹삼 잎, 줄기 초음파 추출액에 클루이베로마이세스를 접종하여 발효액을 얻는 단계(S30)를 수행한다.The step of obtaining a fermentation broth by inoculating Kluyveromyces with the sprouted leaves and stem ultrasonic extract is performed (S30).
상기 단계(S20)에서 얻은 새싹삼 잎, 줄기 추출액에 클루이베로마이세스를 접종하여 25 내지 35 ℃ 호기적 조건에서 24 내지 120 시간 발효를 진행한다. 클루이베로마이세스는 YM 배지에 종균배양한 후 원심분리하여 PBS(phosphate buffered saline)용액으로 2 ~ 3회 세척한 후 균체만을 새싹삼 잎, 줄기 추출물에 접종하였다. Inoculate Kluyveromyces in the sprout, leaf, and stem extracts obtained in the step (S20) to proceed with fermentation for 24 to 120 hours at 25 to 35°C aerobic conditions. Kluyveromyces was seed cultured in YM medium, centrifuged, washed 2-3 times with a phosphate buffered saline (PBS) solution, and then inoculated into the leaves and stem extracts of only the cells.
발효종료 후 원심분배를 통하여 배양균을 1차 제거하고, 이렇게 얻은 여과액을 다시 여과기를 이용하여 0.2 ㎛까지 여과한 후 더 이상 배양되지 않도록 멸균 처리를 한다.After completion of fermentation, the cultured bacteria are first removed through centrifugal distribution, and the filtrate thus obtained is again filtered to 0.2 μm using a filter, and sterilized to prevent further culture.
상기 단계(S30)에서 수득한 새싹삼 잎, 줄기 발효액은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 20.0 중량%이 포함될 수 있다.Sprout leaves, stem fermentation broth obtained in the step (S30) may contain 0.01 to 20.0% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.
상기 새싹삼 잎, 줄기 발효액은 화장료 조성물 총 중량대비 0.01 중량% 미만인 경우 리폭시게나아제, 히아루로니다아제의 활성억제 및 자유라디칼의 소거 효과가 나타나지 않는 문제가 있으며, 20 중량% 초과인 경우 건조 피부를 가진 사람에게 피부 가려움과 따끔거림이 발생되는 문제가 있다. If the fermentation broth of the leaves and stems is less than 0.01% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition, there is a problem that the activity inhibition of lipoxygenase and hyaluronidase and the scavenging effect of free radicals do not appear, and when it exceeds 20% by weight, dry skin People with skin have itching and tingling problems.
상기 단계(S30)의 새싹삼 잎, 줄기 발효액에서 배양균을 제거한 후 중탕 추출법을 이용하여 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻는 단계(S40)를 수행한다.After removing the cultured bacteria from the bud and stem fermentation broth of the step (S30), a step (S40) of obtaining a bud and bud and stem fermentation extract using a hot water extraction method is performed.
상기 단계(S30)에서 수득한 새싹삼 잎, 줄기 발효액에 멸균 및 방부제를 투여한 후, 중탕 추출법으로 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻는다. After the sterilization and preservatives are administered to the sprouts leaves and stem fermentation broth obtained in the step (S30), the leaves of sprouts and stem fermentation are obtained by a hot water extraction method.
상기 배양균을 제거한 새싹삼 잎, 줄기 발효액을 3 내지 7시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 3 내지 8 ㎛ 여과지로 여과한다. 여과가 완료 후 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻는다.After removing the cultured bacteria, the leaves and stem fermentation broth are refluxed 3 times for 3 to 7 hours, cooled, and then filtered with 3 to 8 μm filter paper. After the filtration is completed, extracts of young leaves, stem fermentation are obtained.
상기 단계(S40)에서 수득한 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 20.0 중량%이 포함될 수 있다.Sprout leaves, stem fermentation extract obtained in the step (S40) may contain 0.01 to 20.0% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.
상기 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액은 화장료 조성물 총 중량대비 0.01 중량% 미만인 경우 리폭시게나아제, 히아루로니다아제의 활성억제 및 자유라디칼의 소거 효과가 나타나지 않는 문제가 있으며, 20 중량% 초과인 경우 건조 피부를 가진 사람에게 피부 가려움과 따끔거림이 발생되는 문제가 있을 수도 있다. When the fermented extract of the young sprout and the stem is less than 0.01% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition, there is a problem that the activity inhibition of lipoxygenase and hyaluronidase and the scavenging effect of free radicals do not appear, and when it exceeds 20% by weight People with skin may have skin itching and tingling problems.
상기 단계(S30)의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 상기 단계(S40)의 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액에 안정화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료를 포함하여 화장료 조성물을 얻는 단계(S50)로 이루어지는 것을 특징으로 한다.Comprising the step (S50) of obtaining a cosmetic composition comprising a stabilizer, vitamins, pigments, pigments and flavors in the sprout, leaf, stem fermentation broth of the step (S30) or the leaves, stem fermentation extract of the step (S40) It is characterized by.
이하, 본 발명의 제조예, 실시예, 비교예, 시험예 및 제형예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, it will be described in detail by the production examples, examples, comparative examples, test examples and formulation examples of the present invention.
하기 실시예, 비교예, 시험예 및 제형예는 본 발명을 예시하는 것일뿐, 본 발명이 하기 실시예, 비교예, 시험예 및 제형예에 한정되는 것이 아니다.The following examples, comparative examples, test examples and formulation examples are merely illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples, comparative examples, test examples and formulation examples.
[[ 제조예Manufacturing example ] ] 증숙한Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출액 제조방법 Leaf, stem ultrasonic extract manufacturing method
새싹삼 잎, 줄기를 증숙기에 넣고 증숙기 내부에 정제수를 채워 넣은 후 40 내지 80℃에서 8 내지 16시간 동안 증숙을 수행하고, 상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 20 내지 60℃의 온도에서 8 내지 48시간동안 건조과정을 수행한다.After inserting the buds and leaves of the stem into the steamer and filling the purified water inside the steamer, steaming is performed at 40 to 80°C for 8 to 16 hours, and the steamed buds and leaves and stems are heated at a temperature of 20 to 60°C. Drying is performed for 48 hours.
상기의 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하고 건조하는 증포과정을 1 내지 6회까지 반복하여 수행한다.The distillation process of steaming and drying the leaves and stems of the buds is repeated 1 to 6 times.
새싹삼 잎, 줄기를 증숙기에 일정량의 정제수를 채워 넣은 후 80℃에서 12시간 동안 증숙을 진행하고 50℃의 온도에서 12시간 동안 건조하여 총 4회 반복하여 증숙과 건조하는 4증4포를 진행하였다. After filling the sprouts, leaves, and stems with a certain amount of purified water in a steamer, steaming is performed at 80°C for 12 hours, and dried at a temperature of 50°C for 12 hours. Did.
4증4포의 증숙과정을 통하여 확보된 새싹삼 잎, 줄기는 다시 초음파 추출기에 25 g/L의 비율이 되도록 증류수를 가하여 60 KHz, 출력 500 watt)로 50℃로 4시간 추출하였다. 그 후, 6 마이크로의 필터여과지(와트만(whatman) #3), 1 마이크로의 필터여과지, 0.45 마이크로 필터여과지 순으로 여과하였다. 여과된 새싹삼 잎, 줄기 추출액은 다시 감압 농축기(buchi사)를 이용하여 50℃에서 농축한 후 동결건조기(일신랩)로 동결 건조하여 건조 중량 4.75 g을 얻었으며, 수득한 새싹삼 잎, 줄기 추출 분말 효능 평가 시에 사용하였다.The leaves and stems of the sprouts, which were secured through the steaming process of 4 and 4 bags, were again added to distilled water to a ratio of 25 g/L to the ultrasonic extractor, and extracted at 50°C for 4 hours at 60 KHz, output 500 watt). Thereafter, 6 micro filter paper (whatman #3), 1 micro filter paper, and 0.45 micro filter paper were filtered in this order. The filtered sprout and stem extracts were concentrated again at 50°C using a vacuum concentrator (buchi), and then freeze-dried with a freeze dryer (Ilshin Lab) to obtain a dry weight of 4.75 g. It was used at the time of powder efficacy evaluation.
[[ 실시예Example ] ] 증숙한Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출 발효액의 제조방법 Leaf, stem ultrasonic extract fermentation method
상기 제조예에서 제조된 새싹삼 잎, 줄기 추출액에 균주 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis)를 접종하여 30℃ 호기적 조건에서 72시간 발효를 진행한다. 발효 종료후 발효배양액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거하고, 이렇게 얻은 여과액을 다시 여과기를 이용하여 0.2 ㎛ 까지 여과한 후 더 이상 배양되지 않도록 멸균(121℃, 15분, 1.5기압)하였다. 멸균하여 얻어진 새싹삼 잎, 줄기 발효액을 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다.Inoculated with the strain Kluyveromyces lactis in the sprout, leaf, and stem extracts prepared in the preparation example, fermentation is performed for 72 hours at 30°C aerobic conditions. After the fermentation, the fermentation broth was centrifuged to remove the culture bacteria first, and the filtrate thus obtained was again filtered to 0.2 μm using a filter and sterilized to prevent further culture (121° C., 15 minutes, 1.5 atm). . The leaves and stem fermentation broth obtained by sterilization were transferred to a concentration tank and concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50°C or lower.
[[ 비교예Comparative example 1] One] 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출액 제조방법의 Leaf, stem of ultrasonic extract manufacturing method 비교예Comparative example 1 One
본 비교예 1에서는 새싹삼 잎, 줄기를 새싹삼 잎, 줄기는 다시 초음파 추출기에 25 g/L의 비율이 되도록 증류수를 가하여 60 KHz, 출력 500 watt로 50℃로 4시간 추출하였다. 그 후, 6 마이크로의 필터여과지(와트만(whatman) #3), 1 마이크로의 필터여과지, 0.45 마이크로 필터여과지 순으로 여과하였다. 여과된 새싹삼 잎, 줄기 추출액은 다시 감압 농축기(b
[[ 비교예Comparative example 2] 2] 새싹삼Sprout 잎, 줄기 일반 추출액 제조방법의 Leaf, stem of general extract manufacturing method 비교예Comparative example 2 2
본 비교예 2에서는 새싹삼 잎, 줄기를 환류식 출기에 25 g/L의 비율이 되도록 70℃에서 4시간 추출하였다. 그 후, 6 마이크로의 필터여과지 (와트만, whatman) #3), 1 마이크로의 필터여과지, 0.45 마이크로 필터여과지 순으로 여과하였다. 여과된 새싹삼 잎, 줄기 추출액은 다시 감압 농축기(b
[[ 시험예Test example 1] 본 발명의 1] of the present invention 증숙한Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출 발효액에 의한 세포 증식 및 독성 확인 Confirmation of cell proliferation and toxicity by leaf and stem ultrasonic extraction fermentation broth
< 세포 배양 ><Cell culture>
상기 실시예의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 건조분말과 비교예 1, 2 및 제조예에서 제조된 새싹삼 잎, 줄기 추출액 건조분말 시료의 주름개선에 작용하는 유전자 발현을 확인하기 위하여 CCD-986Sk(Human fibroblast cell line)을 사용하였다. CCD-986Sk 세포는 10 %(v/v)의 FBS(fetal bovine serum, Gibco, USA), 100 U/mL의 penicillin-streptomycin 항생제(Gibco, USA)가 포함된 DMEM(Dulbecco's modified eagle's medium, Gibco, USA)배지를 사용하여 5% CO2 및 37℃ 조건의 인큐베이터에서 배양하였다.CCD-986Sk (Human fibroblast) to confirm the gene expression that acts on wrinkle improvement of the dry sprout powder of the above Example, the dry powder of the stem fermentation broth and Comparative Example 1, 2, and the dry powder samples of the sprout extract prepared in Preparation Examples. cell line) was used. CCD-986Sk cells contain 10% (v/v) of FBS (fetal bovine serum, Gibco, USA), 100 U/mL of penicillin-streptomycin antibiotic (Gibco, USA), DMEM (Dulbecco's modified eagle's medium, Gibco, USA) medium was cultured in an incubator at 5% CO 2 and 37°C.
< 세포 생존율 측정 실험(<Cell viability measurement experiment ( MTTMTT assayassay ) >)>
상기 실시예의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 건조분말과 비교예 1, 2 및 제조예에서 제조된 새싹삼 잎, 줄기 추출액 건조분말 시료에 대하여 세포 증식에 미치는 영향을 확인하였다. 세포 증식 및 독성 확인을 위하여 하기와 같은 방법으로 실험을 진행하였다.The effects on cell proliferation of the dry ginseng leaves, stem fermentation broth samples of the Examples and the dry ginseng leaves, stem extract samples prepared in Comparative Examples 1 and 2 and Preparation Examples were confirmed. In order to confirm cell proliferation and toxicity, experiments were conducted as follows.
배양하고 있는 세포 CCK-986Sk(Human fibroblast cell line)을 96 웰 마이크로플레이트에 2×105 cell/wells 로 분주(分株)하여 24시간 항온조에서 배양하고, 실시예, 비교예 1, 2, 제조예에서 수득한 시료를 농도 별 각각 0(대조군), 6.25, 12.5, 25, 50, 100 ㎍/㎖로 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양 후, DMEM 배지를 제거하고 MTT(3-(4, 5- dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 용액을 처리하여 2시간 동안 추가 배양을 하였다. 2시간 후 배지를 제거하고 마이크로플레이트의 각 웰에 DMSO를 첨가하여 5분간 교반한 후, 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 시료 주입량만큼 10% 우태아혈청(Fetal Bovine Serum, FBS) 배지를 투여하여 세포 성장의 최적 조건으로 동시배양을 하였으며, 대조군의 세포증식을 100%로 하고 시료 투입 실험군의 세포 증식율을 계산하였다.The cultured cells CCK-986Sk (Human fibroblast cell line) was dispensed into 2 x 10 5 cell/wells in a 96-well microplate and cultured in a 24-hour thermostat, and prepared in Examples, Comparative Examples 1 and 2 The samples obtained in the examples were treated with 0 (control), 6.25, 12.5, 25, 50, and 100 µg/ml for each concentration, and then cultured for 24 hours. After incubation for 24 hours, DMEM medium was removed, and MTT (3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) solution was treated for 2 hours for further incubation. After 2 hours, the medium was removed and DMSO was added to each well of the microplate, followed by stirring for 5 minutes, and absorbance was measured at 570 nm. As a control group, 10% fetal bovine serum (FBS) medium was administered at the same amount as the sample injection amount, and co-culture was performed under optimal conditions for cell growth. The cell growth rate of the control group was set to 100%, and the cell proliferation rate of the sample injection experiment group was calculated. .
세포증식 효과는 수학식 1에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.The cell proliferation effect was calculated by Equation 1, and the results are shown in Table 1 below.
표 1에 나타낸 바와 같이, 세포 성장 최적 조건에서의 세포 증식을 100%로 하였을 때, 12.5 ~ 100 ㎍/㎖의 농도까지 세포 생존률을 실험한 결과 실시예, 비교예 1, 2, 제조예의 모든 건조분말 시료에서는 세포독성이 없거나 약간의 독성을 나타내는 것을 확인하였다. As shown in Table 1, when cell proliferation under the optimal conditions for cell growth was 100%, the cell viability was tested to a concentration of 12.5 to 100 µg/ml, and all drying of Examples, Comparative Examples 1 and 2, and Production Examples It was confirmed that the powder sample had no or little cytotoxicity.
특히, 실시예와 제조예에서는 일정 농도에서 세포 증식효과가 있는 것으로 확인되는 반면 비교예 1과 2의 경우 조금씩 세포생존률이 낮아지는 것을 확인하였고, 비교예 2의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 생존률이 82%까지 낮아지는 것을 확인하였다.Particularly, in Examples and Production Examples, it was confirmed that the cell proliferation effect was observed at a certain concentration, whereas in Comparative Examples 1 and 2, it was confirmed that the cell viability decreased gradually, and in Comparative Example 2, the survival rate at a concentration of 100 µg/ml was observed. It was confirmed that this was lowered to 82%.
[[ 시험예Test example 2] 2] ProcollagenProcollagen typetype I I peptidepeptide (( PIPPIP ) 생합성) Biosynthesis
CCD-986Sk 세포를 2Х105 cell/wells 농도로 12-well plate에 접종하고, 각 well에 시료를 12.5, 25, 50, 100 ㎍/㎖의 농도로 처리하여 37℃에서 5% CO2의 조건으로 48시간동안 배양한 후 procollagen type C-peptide assay kit를 사용하여 peptide 생합성 정도를 측정하였다.CCD-986Sk cells were inoculated into 12-well plates at a concentration of 2Х10 5 cells/wells, and samples were treated in each well at concentrations of 12.5, 25, 50, and 100 µg/ml, under conditions of 5% CO 2 at 37°C. After incubation for 48 hours, the degree of peptide biosynthesis was measured using a procollagen type C-peptide assay kit.
*Positive control : EGCG(epigallocatechin gallate) : 50 ㎍/㎖*Positive control: EGCG (epigallocatechin gallate): 50 μg/ml
상기 표 2에서 보는 바와 같이, Procollagen type I peptide에 대한 생합성량을 측정한 결과 실시예는 비교예 1, 2와 제조예에서 제조된 건조분말 보다 procollagen type I peptide의 생합성량이 증가하였다. 비교예 1과 2에서는 새싹삼을 증숙할 시 초음파보다 그 효과가 높은 것을 확인 할 수 있었으며, 두가지를 모두 적용한 제조예에서 더 우수한 효과를 보였고, 제조예의 시료를 클루이베로마이세스로 발효하였을 때 그 효과가 더욱더 증대되는 것을 확인할 수 있었다. 양성대조군인 EGCG(Epigallocatechine gallate)와 비교했을 때 그 효과가 거의 유사한 정도를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.As shown in Table 2, as a result of measuring the biosynthesis amount for Procollagen type I peptide, in Examples, the biosynthesis amount of procollagen type I peptide increased compared to the dry powders prepared in Comparative Examples 1 and 2 and Preparation Example. In Comparative Examples 1 and 2, when steaming sprouts, it was confirmed that the effect was higher than that of ultrasound, and it showed a better effect in the manufacturing example in which both were applied. It was confirmed that the effect was further increased. When compared with the positive control group EGCG (Epigallocatechine gallate), it was confirmed that the effect was almost similar.
[[ 시험예Test example 3] 3] MMPMMP -1 -One expressionexpression 유전자 발현 억제율 Gene expression inhibition rate
CCD-986Sk 세포를 2Х105 cell/wells 농도로 12-well plate에 접종하고, 각 well에 시료를 12.5, 25, 50, 100 ㎍/㎖의 농도로 처리하여 37℃에서 5% CO2의 조건으로 48시간동안 배양한 후 1X PBS로 세척 및 lysis buffer를 이용하여 세포를 분해하여 원심분리를 통해 상등액을 확보하였다. 확보한 상등액은 전지영동을 통해 단백질을 분리하고 분리한 단백질은 PVDF membrane을 통해 1시간동안 blocking buffer에서 배양하였다. MMP-1 각각의 항체를 1/1000배 희석하고 배양하여 세척하고를 반복하고, 다시 IgG HRP의 각각의 항체를 1/1000배 희석하여 실온에서 2시간동안 배양 후 다시 세척한 후 ViLBER chemidoc(Vilber Loumat, France)을 이용하여 밴드확인 및 정량하였다.CCD-986Sk cells were inoculated into 12-well plates at a concentration of 2Х10 5 cells/wells, and samples were treated in each well at concentrations of 12.5, 25, 50, and 100 µg/ml, under conditions of 5% CO 2 at 37°C. After incubation for 48 hours, cells were decomposed using washing and lysis buffer with 1X PBS to obtain supernatant through centrifugation. The obtained supernatant was separated by protein through electrophoresis, and the isolated protein was incubated in a blocking buffer for 1 hour through a PVDF membrane. After diluting each antibody of MMP-1 1/1000 times, incubating and washing, repeat, and after diluting each antibody of IgG HRP 1/1000 times, incubating at room temperature for 2 hours, washing again, and then ViLBER chemidoc(Vilber Loumat, France) for band identification and quantitation.
expression(%)MMP-1
expression(%)
상기 표 3에서 보는 바와 같이, MMP-1 단백질 발현량을 측정한 결과 실시예, 비교예 1, 2, 제조예 모두 농도 의존적으로 MMP-1 단백질 발현량이 감소되었다. 특히, 실시예의 경우 100 ㎍/㎖ 농도에서 64.46%까지 발현률이 감소되는 것을 확인할 수 있었으며, 양성대조군인 EGCG와 유사한 활성을 보이는 결과를 확인할 수 있었다.As shown in Table 3, as a result of measuring the expression level of MMP-1 protein, all of Examples, Comparative Examples 1, 2, and Production Examples showed a concentration-dependent decrease in MMP-1 protein expression. In particular, in the case of the example, it was confirmed that the expression rate was reduced to 64.46% at a concentration of 100 μg/ml, and a result showing activity similar to that of the positive control EGCG was confirmed.
[[ 제형예Formulation example 1] 본 발명의 1] of the present invention 증숙된Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출 발효액을 함유하는 화장수의 제조 Preparation of lotion containing leaf, stem ultrasonic extraction fermentation broth
실시예의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 건조 분말을 함유한 화장료 중 화장수(스킨로션)의 제형예는 표 4와 같다.Table 4 shows a formulation example of a cosmetic lotion (skin lotion) in a cosmetic composition containing dry powder of a young sprout, a stem fermentation broth, and an example.
상기 화장수를 제조하기 위하여, 표 4에 기재된 11번에 2, 3, 4 및 8번을 순서대로 투입하고 교반하여 용해시킨 후, 5번을 60 ℃ 정도 가열하여 용해시킨 후, 10번을 투입하여 용해한 후 11번에 투입하였다. 마지막으로 1, 6, 7 및 9번을 투입하여 충분히 교반한 뒤 숙성시켰다.In order to prepare the lotion, 2, 3, 4, and 8 were sequentially added to No. 11 in Table 4, stirred and dissolved, and then heated and dissolved No. 5 at about 60° C. and then No. 10 was added. After dissolving, it was added to No. 11. Lastly, 1, 6, 7, and 9 were added to sufficiently stir and aged.
[[ 제형예Formulation example 1] 본 발명의 1] of the present invention 증숙된Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출 발효액을 함유하는 영양로션의 제조 Preparation of nutrient lotion containing leaf, stem ultrasonic extraction fermentation broth
실시예의 증숙된 새싹삼 잎, 줄기 초음파 추출 발효액 건조 분말을 함유한 화장료 중 영양로션의 제형예는 표 5와 같다.Table 5 shows a formulation example of a nutritional lotion in a cosmetic composition containing boiled young ginseng leaves, stem ultrasonic extract fermentation liquid dry powder of the embodiment.
상기 영양로션을 제조하기 위하여, 표 5에 기재된 10, 11, 13 및 16번을 혼합 교반하면서 80 ~ 85 ℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 12번을 80 ~ 85 ℃사이로 가열 용해한 후 유화하였다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50 ℃까지 냉각한 뒤 15번을 투입하고 45 ℃까지 냉각한 뒤 14번을 투입하고 35 ℃에 1번을 투입하여 25 ℃까지 냉각한 뒤 숙성시켰다.In order to prepare the nutrient lotion, 10, 11, 13 and 16 listed in Table 5 were mixed and stirred, heated to between 80 and 85° C., added to the production unit, and then acted as emulsifiers to 2, 3, 4, 5, 6 , 7, 8, 9 and 12 were heat-dissolved between 80 and 85 °C, and then emulsified. After the emulsification, the mixture was cooled to 50°C with stirring using a stirrer, and then added 15 times. After cooling to 45°C, 14 times were added, and once at 35°C, the mixture was cooled to 25°C and aged.
[[ 제형예Formulation example 3] 본 발명의 3] of the present invention 증숙된Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출 발효액을 함유하는 영양크림의 제조 Preparation of nutritious cream containing fermented liquid from leaves and stems
실시예의 증숙된 새싹삼 잎, 줄기 초음파 추출 발효액 건조 분말을 함유한 화장료 중 영양크림의 제형예는 표 6과 같다.Table 6 shows a formulation example of a nutrient cream in a cosmetic composition containing steamed sprouts, stems, and ultrasonic extract fermentation liquid dry powder of the embodiment.
상기 영양크림을 제조하기 위하여 표 6에 기재된 12, 13, 14 및 16번을 혼합 교반하면서 80 ~ 85 ℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 및 11번을 80 ~ 85 ℃사이로 가열하여 용해한 후 15번을 투입 교반하여 제조부에 투입하고 유화하였다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 35 ℃까지 냉각하고 1번을 투입하여 25 ℃까지 냉각한 뒤 숙성시켰다.In order to prepare the nutrient cream, 12, 13, 14 and 16 listed in Table 6 were mixed and stirred, heated to between 80 and 85° C., added to the production unit, and then acted as an emulsifier. 2, 3, 4, 5, 6 No. 7, 8, 9, 10, and 11 were heated and dissolved between 80 and 85° C., and 15 were added and stirred, and then added to the production unit and emulsified. After the emulsification was completed, the mixture was cooled to 35° C. while stirring using a stirrer, and 1 was added to cool to 25° C. and then aged.
[[ 제형예Formulation example 4 ] 본 발명의 4] of the present invention 증숙된Steamed 새싹삼Sprout 잎, 줄기 초음파 추출 발효액을 함유하는 에센스의 제조 Preparation of Essence Containing Leaf, Stem Ultrasonic Extract Fermentation Solution
실시예의 증숙된 새싹삼 잎, 줄기 초음파 추출 발효액 건조 분말을 함유한 화장료 중 에센스의 제형예는 표 7과 같다.Examples of the formulation of the essence in the cosmetic composition containing the dried powder of the sprouted young ginseng leaves, stem ultrasonic extraction fermentation broth of the embodiment are shown in Table 7.
상기 에센스를 제조하기 위하여 표 7에 기재된 2, 3, 4, 5 및 6번을 일정한 온도에서 균질화하여 제조되는 것을 비이온계 양친매성 지질이라 칭한다. 상기 비이온계 양친매성 지질과 1, 7, 8 및 14번을 혼합하고 일정한 온도에서 균질화하여 마이크로플루이다이져를 통과하고 이어 9번을 일정한 온도에서 서서히 접종하여 균질화한 후 다시 마이크로플루이다이져에 재차 통과시켰다 그리고 10, 11, 12 및 13번을 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시켰다.To prepare the essence, those prepared by homogenizing 2, 3, 4, 5 and 6 in Table 7 at a constant temperature are referred to as nonionic amphiphilic lipids. The nonionic amphiphilic lipid was mixed with 1, 7, 8, and 14, homogenized at a constant temperature, passed through a microfluidizer, and then slowly inoculated at 9 at a constant temperature to homogenize, and then back to the microfluidizer. It was passed again and stabilized and aged by dispersing by adding 10, 11, 12, and 13.
본 발명에서 설명한 것은 새싹삼 발효액 또는 이의 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법을 위한 실시예에 불과한 것으로, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.What is described in the present invention is only an example for a cosmetic composition for improving skin wrinkles and a method for manufacturing the same, which contains a sprouted fermentation broth or an extract thereof as an active ingredient, and the present invention is not limited to the above-described examples, but various different forms It can be implemented as, only this embodiment is to provide the complete disclosure of the present invention, and to provide those who have ordinary knowledge in the art to which the present invention pertains to the scope of the invention. It is only defined by the scope of the claims.
Claims (10)
상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기는 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 추출 용매를 사용하여 초음파 추출되는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물.According to claim 1,
The steamed sprouts, stems, water, any anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate, and any one selected from the group consisting of 1,3-butylene glycol is used as an extraction solvent. A cosmetic composition for improving skin wrinkles using as an active ingredient the leaves of young ginseng, a stem fermentation broth or a fermentation extract thereof, characterized in that it is ultrasonically extracted.
상기 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.01 내지 20.0 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물.According to claim 1,
The sprout sprout, stem fermentation broth or the fermentation extract thereof is a cosmetic composition for improving skin wrinkles using the sprout sprout, stem fermentation broth or fermentation extract thereof as an active ingredient, characterized in that it contains 0.01 to 20.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
상기 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액은 피부 주름 개선 효과를 가지며 피부 자극에 대한 부작용이 없는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물.According to claim 1,
The sprout, leaf, stem fermentation broth or fermentation extract thereof has a skin wrinkle improvement effect and has no side effects on skin irritation. .
상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 초음파로 추출하는 단계(S20);
상기 단계(S20)의 새싹삼 잎, 줄기 추출액을 클루이베로마이세스로 발효하여 발효액을 얻는 단계(S30);
상기 단계(S30)의 새싹삼 잎, 줄기 발효액에서 배양균을 제거한 후 열수추출법을 이용하여 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻는 단계(S40); 및
상기 단계(S30)의 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 상기 단계(S40)의 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액에 안정화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료를 포함하여 화장료 조성물을 얻는 단계(S50)로 이루어져 섬유아세포 증식을 촉진하고, 분자내 procollagen synthesis, MMP-1의 유전자 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법.Steaming the leaves and stems of sprout through the steaming process of steaming and drying (S10);
The step of extracting the steamed sprouts, stems by ultrasonic (S20);
A step of obtaining a fermentation broth by fermenting the bud and stem extracts of step S20 with Kluyveromyces;
Removing the cultured bacteria from the bud and stem fermentation broth of the step (S30) and then obtaining the bud and stem fermentation extract using hot water extraction (S40); And
Consists of a step (S50) to obtain a cosmetic composition comprising a stabilizer, vitamins, pigments, pigments and flavors in the sprout, leaf, stem fermentation broth of the step (S30) or the leaves, stem fermentation extract of the step (S40) (S50) A method for preparing a cosmetic composition for improving wrinkles of skin, which uses as an active ingredient a sprout, leaf, stem fermentation broth or a fermentation extract thereof, which promotes fibroblast proliferation and inhibits intramolecular procollagen synthesis and gene expression of MMP-1.
상기 단계(S10)는 상기 새싹삼 잎, 줄기를 증숙기에 넣고 증숙기 내부에 정제수를 채워 넣은 후 40 내지 80℃에서 8 내지 16시간 동안 증숙을 수행하고, 상기 증숙된 새싹삼 잎, 줄기를 20 내지 60℃의 온도에서 8 내지 48시간 동안 건조과정을 수행하되,
상기 새싹삼 잎, 줄기를 증숙하고 건조하는 증포과정을 1 내지 6회까지 반복하여 얻은 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법.The method of claim 5,
In the step (S10), the sprouts, leaves, and stems are put in a steamer and filled with purified water inside the steamer, and steaming is performed at 40 to 80°C for 8 to 16 hours, and the steamed sprouts and leaves are 20 The drying process was performed for 8 to 48 hours at a temperature of 60 to 60°C,
Method for producing a cosmetic composition for improving skin wrinkles using as an active ingredient the leaves, stem fermentation broth or a fermented extract thereof, characterized in that the steaming process for steaming and drying the leaves and stems is repeated 1 to 6 times. .
상기 단계(S20)는 상기 단계(S10)에서 얻은 새싹삼 잎, 줄기에 25 내지 100 g/L의 비율로 증류수를 가하여 초음파추출기에 넣은 후 10 내지 70 KHz를 가지는 파장과 100 내지 1,000 watt 출력으로 새싹삼 잎, 줄기를 추출하되, 40 내지 80℃에서 2 내지 12시간 동안 추출을 수행한 다음, 3 내지 8 ㎛ 여과지로 여과하여 추출액을 확보하는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법.The method of claim 5,
The step (S20) is added to distilled water at a rate of 25 to 100 g/L on the buds, leaves, and stems obtained in step (S10), and then placed in an ultrasonic extractor with a wavelength of 10 to 70 KHz and 100 to 1,000 watt output. Sprout leaves, stems are extracted, but extraction is performed at 40 to 80° C. for 2 to 12 hours, and then filtered with 3 to 8 μm filter paper to secure the extracts. Method for manufacturing a cosmetic composition for improving skin wrinkles using the extract as an active ingredient.
상기 단계(S30)는 상기 단계(S20)에서 얻은 새싹삼 잎, 줄기 추출액에 클루이베로마이세스를 접종하여 25 내지 37℃ 호기적 조건에서 24 내지 120시간 발효를 진행하고, 클루이베로마이세스는 YM 배지에 종균배양한 후 원심분리하여 PBS용액으로 2 ~ 3회 세척한 후 균체만을 새싹삼 잎, 줄기 추출물에 접종하며, 발효종료 후 원심분배를 통하여 배양균을 1차 제거하고, 이렇게 얻은 여과액을 다시 여과기를 이용하여 0.2 ㎛까지 여과한 후 더 이상 배양되지 않도록 멸균 처리하여 얻은 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법.The method of claim 5,
The step (S30) is inoculated with Kluyveromyces in the bud, stem, and stem extracts obtained in the step (S20) to proceed with fermentation for 24 to 120 hours at 25 to 37°C aerobic conditions, and Kluyveromyces is YM. After culturing the seed cells in the medium, centrifuged, washed 2-3 times with PBS solution, and then inoculated only into the leaves and stem extracts of the cells, the culture bacteria were first removed through centrifugal distribution after fermentation, and the filtrate thus obtained. A method for preparing a cosmetic composition for improving skin wrinkles using a sprout, a stem fermentation broth or a fermentation extract thereof, as an active ingredient, characterized in that it is obtained by sterilization so that it is no longer cultured after filtering to 0.2 μm again using a filter.
상기 단계(S40)는 상기 단계(S30)에서 수득한 새싹삼 잎, 줄기 발효액에 멸균 및 방부제를 투여한 후, 중탕 추출법으로 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻고,
상기 배양균을 제거한 새싹삼 잎, 줄기 발효액을 3 내지 7시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 3 내지 8 ㎛ 여과지로 여과하며, 여과 완료 후 새싹삼 잎, 줄기 발효 추출액을 얻는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름개선용 화장료 조성물의 제조방법.The method of claim 5,
In the step (S40), after sterilization and preservatives are administered to the bud and stem fermentation liquid obtained in the step (S30), the bud and leaf and stem fermentation extracts are obtained by a hot water extraction method,
After removing the cultured bacteria, the leaves and stem fermentation broth are refluxed 3 times for 3 to 7 hours, cooled, filtered with 3 to 8 μm filter paper, and after completion of the filtration, the leaves of sprout and stem fermentation are obtained. A method for producing a cosmetic composition for improving skin wrinkles, using the sprouted leaves, stem fermentation broth or fermentation extract thereof as an active ingredient.
상기 단계(S40)에서 수득한 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 20.0 중량%이 포함되는 것을 특징으로 하는 새싹삼 잎, 줄기 발효액 또는 이의 발효 추출액을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물의 제조방법.
The method of claim 5,
Sprout leaves, stem fermentation broth or fermentation extract obtained in step (S40), 0.01 to 20.0% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition, sprouts leaves, stem fermentation broth or fermentation extract thereof as an active ingredient Method for manufacturing a cosmetic composition for improving skin wrinkles.
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