KR102114246B1 - 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 피부보호용 화장료 조성물 - Google Patents

흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 피부보호용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 작약꽃(Paeonia lactiflora) 추출물을 유효 성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 작약꽃을 초음파 추출, 흑효모를 통한 발효과정을 통해 피부 보습 효과 및 피부장벽 개선효과, 항산화능이 향상된 피부보호용 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 피부보호용 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION FOR PROTECTING OF SKIN COMPRISING EXTRACT OF PAEONIA LACTIFLORA BY ULTRASONIFICATION AND BLACK YEAST FERMENTATION}
본 발명은 피부 보습 기능과 항산화 활성을 갖는 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 화장료 조성물은 피부 보습 및 항산화 효과가 있는 화장품에 유용하게 사용될 수 있다.
2003년 한국인의 주요 사망요인은 암, 뇌혈관질환, 심혈관질환, 당뇨병 순으로 나타났다(Korea National Statistical Office : The cause of death Statistics 2003. Annual Report of on the Cause of Death Statistics. Korea National Statistical Office, 2004). 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)은 심혈관질환, 당뇨병, 암, 퇴행성 신경병, 노화 등 만성퇴행성질환을 유발하는 주요 요인이 될 수 있으며, 항산화 물질은 만성퇴행성의 예방에 도움을 줄 수 있다고 알려져 있다(Bray, T.M. Nutrition. 16, pp578-581, 2000). 모든 호기성 유기체는 대사과정 중에서 필연적으로 해로운 활성 산소종을 수반하게 되므로, 이 활성 산소종을 제거하는 기작을 모든 유기체가 가지고 있어야 생존이 가능하다. 활성 산소종은 크게 과산화수소와 같이 산소 라디칼종을 형성하게 하는 화합물과 산소 라디칼종의 두가지로 분류될 수 있다. 이미 알려진 바와 같이, 과산화수소는 카탈라제(catalase)나 퍼록시다제(peroxidase)에 의해 산소나 물로 전환되나, 산소 라디칼종 제거 기작의 경우, O2-(superoxide anion)를 제거하는 기작 이외의 다른 산소 라디칼종 제거 기작은 아직 확실히 규명되지 않은 상태이다.
산소 라디칼종의 일종인 하이드록시 라디칼은 생명체 내에서 H2O2 및 O2의 반응에 의해 형성되며, 거의 모든 생체물질(biomolecules)에 존재하는 것으로 알려져 있다(Fridovich et al., Ann. Rev. Biochem., 44, pp147-159, 1975; Tauber et al., Blood, 53, pp666-676, 1979). 따라서, 생체 내에서의 항상성을 유지하기 위해서는 필연적으로 반응성이 강한 하이드록시 라디칼에 대한 방어가 요구된다고 하는 것은 자명하다. 이러한 측면에서, 아스코르브산, 요산 등 유기물질은 화학반응으로 하이드록시 라디칼을 제거하는 것으로 알려져 있으나, 이는 근원적으로 하이드록시 라디칼을 제거하는 것이 아니라 반응성이 적은 라디칼로 변환시킴은 물론, 생체 내에서 산화제로 철과 같은 전이금속과 반응하여 오히려 활성 산소라디칼종의 생성을 촉진시킬 수 있는 것으로 보고되고 있다(Borg, DC and Schaich, KM, Handbook of Free Radicals and Antioxidant in Biomedicine, Vol. I, pp 63-80, CRC press, 1989). 인체 생리과정 중 발생하는 활성산소(O2 -, H2O2, OH 및 O2)는 반응성이 매우 강하여 이들에 의하여 야기되는 프리라디칼 반응은 지질을 포함한 주요 거대분자의 파괴효과를 나타낸다(Davies, KJA and Goldberg, AL, J. Biol. Chem., 262, p8220-8226, 1987). 이들은 정상적인 대사 과정, 광증감 반응, 약물대사과정 및 기타 세포대사의 이상을 초래하는 여러 요인에 의해 그 생성이 증가하며, 따라서 생체는 이들에 의하여 일어나는 프리라디칼 반응의 유해 효과에 항상 노출되어 있다고 볼 수 있다(Morehouse, LA and Thomas, CE, J. Free Radicals Biol. Med., 1, p8, 1985).
특히 세포가 나이가 들어감에 따라 이들의 유해 라디칼에 의한 유해작용이 계속적으로 누적될 경우 발암, 동맥경화, 심장질환 및 피부노화 등 연령증가에 따른 여러 성인병과 관련된 질환은 물론 전반적인 세포의 노화를 야기하여 인간의 질병발생과 노화의 원인으로 제시되고 있다(Harman, D., Free Radicals in Biology, Academic Press, New York, pp255-275, 1982). 따라서 반응성 산소대사물에 의해 체내 프리 라디칼 반응을 억제시키거나 인체에 누적되어 있는 유해 활성산소를 제거함으로써, 지질대사, 면역질환 및 암 등의 질환 치료에 유용할 것으로 예상되는 후보물질을 찾고자 하는 연구들이 계속되어 왔다.
한편, 한국공개특허 제2013-0049040호에서는 탁시폴린 배당체를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 작약 추출물의 추출방법을 개시하면서, 작약 추출물이 우수한 피부미백효과, 주름개선효과, 항염 효과 등이 있다고 개시하고 있다.
본 발명자들은 여러 천연물들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모 균사체로 발효하여 제조된 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물에서 피부 보습효과, 피부 장벽 개선효과 및 항산화 효과를 확인하고, 본 발명을 완성하기에 이른 것이다.
또한, 본 발명자들은 통상적으로 이용되는 열수추출, 실온추출, 가온추출 등의 방법 대신에 초음파 추출을 이용하고 초음파 추출물을 흑효모로 발효시켜 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 제조할 경우, 피부 보습 및 항산화 효과가 매우 향상된다는 사실을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 유효성분으로 하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물 및 이를 포함하는 화장료 조성물의 피부 보습효과(실험예 1), 피부 장벽 개선효과(실험예 2), 항산화 효과(실험예 3)를 확인하였다.
상기한 목적은, 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모로 발효시킨 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 피부 장벽기능 개선용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
또한, 본 발명의 목적은 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모로 발효시킨 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 항산화용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
바람직하게는, 상기 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.0001~30.0 중량%로 함유될 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 작약꽃 초음파 추출물은 작약꽃을 정제수, 탄소수 1~4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매에 넣은 후, 초음파추출기로 약 1 내지 12 시간 동안 추출할 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은, 상기 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모균으로 20 내지 40℃의 온도 조건하에서 pH 5 내지 7을 유지하면서, 1 내지 7일 동안 발효시켜 얻을 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
본 발명은 피부 화장료에 적용이 가능하고 인체에 무해하여 안전성이 매우 뛰어난 천연추출물인 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명에 따른 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 보습 효과(실험예 1), 피부장벽 개선 효과(실험예 2), 항산화능(실험예 3)을 나타낸다. 그리고, 본 발명의 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 기존의 작약꽃 추출물 함유 화장료 조성물에 비해 피부 보습 및 항산화 효과가 우수하다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
용어 "약"이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.
본 발명에서, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, "포함하다" 및 "포함하는"이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.
본 발명은 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 및 항산화용 조성물을 제공한다.
작약(Paeonia lactiflora)은 산지에서 자라며 줄기는 여러 개가 한 포기에서 나와 곧게 서고 높이는 60cm 정도이다. 잎과 줄기에 털이 없으며 뿌리는 여러 개가 나오지만 가늘고 양끝이 긴 뾰족한 원기둥 모양으로 굵다. 잎은 어긋나고 밑부분의 것은 작은 잎이 3장씩 두 번 나오는 겹잎이다. 작은 잎은 바소꼴 또는 타원형이나 때로는 2∼3개로 갈라지며 잎맥 부분과 잎자루는 붉은색을 띤다.
꽃은 5∼6월에 줄기 끝에 1개가 피는데 크고 아름다우며 재배한 것은 지름 10cm 정도이다. 꽃색은 붉은색·흰색 등 다양하며 많은 원예 품종이 있다. 꽃받침은 5개로 녹색이고 가장자리가 밋밋하며 끝까지 붙어 있는데 가장 바깥쪽의 것은 잎 모양이다.
본 발명의 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 작약꽃 초음파 추출물을 제조하고 이를 흑효모로 발효시켜 얻을 수 있다. 바람직하게는, 먼저, 작약꽃을 분쇄한 후 물, 탄소수 1~4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매에 넣은 후, 초음파추출기로 20 내지 40℃의 온도 조건(실온)에서 pH 5 내지 7을 유지하면서, 약 1 내지 12 시간 동안 추출하여 작약꽃 초음파 추출물을 제조할 수 있다. 상기 초음파추출의 시간은 추출하고자 하는 시료의 양에 따라 달라질 수 있으며, 추출결과물을 여과 또는 정제하는 과정을 거칠 수 있다.
상기 용매 중 바람직하게는 알코올이 좋으며, 더욱 바람직하게는 에탄올이 좋다. 이때, 상기 에탄올은 바람직하게 70% 에탄올인 것이 좋다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 작약꽃 건조 중량의 3 내지 15배이며, 더욱 바람직하게는 5 내지 10배일 수 있다.
또한, 본 발명의 작약꽃 초음파 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수도 있다.
상기 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모(Aureobasidium pullulans)로 발효시켜 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 제조한다.
흑효모(Aureobasidium pullulans)는 맥주, 포도주 등을 만드는데 사용되는 미생물로서, 곰팡이나 버섯 무리이지만 균사가 없고, 광합성능이나 운동성도 가지지 않는 단세포 생물의 총칭이다. 이는 5천 년 전부터 인간이 식품에 이용해 온 미생물이며, 효모 자체는 값싼 지방이나 단백질원으로 사용된다. 비타민 B군을 풍부하게 함유하고 있고, 비타민 D를 함유하는 것도 있다. 또한, 흑효모균은 베타-글루칸(β-Glucan)을 생산하는 미생물로 흑효모 발효물 자체만으로도 보습효과, 항산화, 진정효과를 나타낸다고 한다. 흑효모 베타-글루칸(β-glucan)은 항암, 인슐린 분비 억제 등의 생리 활성이 있는 것으로 알려져 있는 성분이 다량 함유되어 있다.
그리고 본 발명의 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 상기 작약꽃 초음파 추출물을 1 내지 7일간 상기 흑효모(Aureobasidium pullulans)로 발효시켜 얻은 것을 의미한다. 바람직하게는, 작약꽃 초음파 추출물에 탄소원으로 포도당 1~5 중량%를 첨가하고, 펩톤 0.1~1%, 바람직하게는 0.2~0.5 중량%를 추가로 첨가하여 멸균할 수 있다. 여기에 20~30g/L이 되도록 흑효모(Aureobasidium pullulans) 균주 배양액을 접종하여 배양할 수 있다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 1 내지 7일간, 20 내지 40℃에서 pH 5 내지 7로 유지하며 배양할 수 있다. 배양 후 배양액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거 후 더 이상 배양이 되지 않도록 멸균하는 것이 바람직하다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 화장료 조성물에 첨가되는 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 30.0 중량%이며, 바람직하게는 0.001 내지 25.0 중량%이며, 가장 바람직하게는 0.1 내지 10.0 중량%이다. 상기 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우에는 항산화, 보습, 피부 장벽 개선효과가 나타나지 않으며, 30 중량% 초과인 경우에는 함유량 증가에 대한 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.
본 발명의 화장료 조성물은 화장품학적으로 허용가능한 기제를 포함하는 화장용 조성물을 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물의 유리자유기 소거능은, 표준물질인 L-아스코르브산(Lascorbic acid)과 대비하여 더 우수한 항산화능을 나타내었다. 또한, 작약꽃은 오랫동안 식용되거나 생약으로 사용되어 오던 약재로서 이로부터 추출된 본 발명의 추출물들 역시 독성 및 부작용 등의 문제가 없다.
이하, 제조예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 제조예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 제조예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
제조예 1. 작약꽃 정제수 추출물의 제조
작약꽃을 동결건조하여 마쇄한 후, 작약꽃 시료 중량의 10배에 해당하는 정제수를 첨가하여 12시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출하였다. 감압여과하여 추출액과 잔사를 분리한 다음 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 작약꽃 중량의 5배에 해당하는 정제수를 첨가하여 6시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출하였다. 다시 감압여과한 후, 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 작약꽃 중량의 1배에 해당하는 정제수를 첨가하여 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(whatman) #3 여과지로 여과 후, 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 동결건조물을 50% 글리세린을 이용하여 2%(W/V)가 되게 녹여 작약꽃 정제수 추출물을 제조하였다.
제조예 2. 작약꽃 용매 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 추출용매를 70%(v/v) 에탄올로 대체한 것 이외에는 제조예 1과 동일한 방법으로 작약꽃 에탄올 추출물을 제조하였다.
제조예 3. 작약꽃 초음파 추출물의 제조
작약꽃을 선별하여 충분히 세척한 다음 300메시 체를 통과할 수 있도록 분쇄물을 미세하게 만들었다. 작약꽃 분쇄물을 100g/L가 되도록 70%(v/v) 에탄올을 첨가하여 실온에서 초음파추출기(내추럴솔루션)로 4시간 동안 추출하고 냉침한 후, 와트만(whatman) #3 여과지로 여과 후, 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 동결건조물을 50% 글리세린을 이용하여 2%(W/V)가 되게 녹여 작약꽃 초음파 추출물을 수득하였다.
제조예 4. 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물의 제조
제조예 3에서 제조된 작약꽃 초음파 추출물에 탄소원으로 포도당 2%(W/V)를 첨가하고, 펩톤 0.5%(W/V)를 추가로 첨가하여 멸균할 수 있다. 여기에 25g/L이 되도록 흑효모(Aureobasidium pullulans) 균주 배양액을 접종하여 배양할 수 있다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 7일간, 37℃에서 pH 6으로 유지하며 배양할 수 있다. 배양 후 배양액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거 후 더이상 배양이 되지 않도록 멸균(121℃, 15분, 1.5기압)하였다.
발효 후 배양균을 1차 제거한 작약꽃 발효물을 최종 70%(v/v) 에탄올 수용액이 되도록 에탄올을 첨가하여 환류추출하고 냉침한 후, 여과할 수 있다. 여과가 완료되면 상기 추출단계에서 얻어진 추출액을 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 또는 동결 건조하여 본 발명의 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 제조할 수 있다.
제형예 1. 작약꽃 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조
제조예 1, 제조예 2, 제조예 3 및 제조예 4의 작약꽃 추출물을 각각 포함하는 화장료(제형예 1, 2, 3, 4)를 제조하였으며, 효능의 비교를 위해 작약꽃 추출물 대신에 보습제로서 글리세린 및 1,3-부틸렌글리콜을 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 1), 추출물이나 보습제를 모두 포함하지 않는 화장료 조성물(비교제형예 2)을 하기 표 1에 나타내었다.
(단위: 함량%)
성분 제형예1 제형예2 제형예3 제형예4 비교제형예1 비교제형예2
작약꽃 정제수 추출물
(제조예 1)
5.0 - - - - -
작약꽃 용매 추출물
(제조예 2)
- 5.0 - - - -
작약꽃 초음파 추출물
(제조예 3)
- - 5.0 - - -
흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물(제조예 4) - - - 5.0 - -
글리세린 - - - - 5.0 -
1.3-부틸렌글리콜 - - - - 5.0 -
EDTA-2Na 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02
세토스테아릴알코올 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
글리세릴스테아레이트 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
마이크로크리스탈린 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
스쿠알란 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
유동파라핀 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
트리옥타노인 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
폴리솔베이트 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
솔비탄스테아레이트 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
토코페릴아세테이트 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
사이클로메치콘 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0
BHT 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
향, 방부제 적량 적량 적량 적량 적량 적량
정제수 to 100 to 100 to 100 to 100 to 100 to 100
실험예 1. 작약꽃 추출물의 보습 효과
상기 제형예 1 내지 4와 비교제형예 1 및 2의 화장료 조성물에 대한 임상 보습 효과 및 지속력을 다음과 같이 측정하였다. 설문 조사를 통하여 피부가 건조하다고 느끼는 건강한 성인 남녀 150명을 무작위로 25명씩 그룹을 형성하여 각 그룹에 제형예 1 내지 4와 비교제형예 1 및 2를 각각 1일 2회씩 4주간 두 개의 제형을 한쪽씩 양쪽 안면에 도포하게 하였다. 보습 효과는 실사용 시험 시작 후부터 2주, 그리고 종료 후의 개선 효과를 Corneometer CM 820(Corage +Khazaka,Germany)을 이용하여 표피 수분량에 따른 피부 전기전도도의 증가율(%)을 수치화하여 평가하였다. 실험 결과는 하기 표 2에 나타내었다.
피부 전기전도도의 증가율(%)
구분 사용 전 사용 2주 후 사용 4주 후
제형예 1 24.25 40.51 47.24
제형예 2 24.36 41.23 47.53
제형예 3 22.79 53.87 62.54
제형예 4 24.83 59.12 84.82
비교제형예 1 25.72 36.18 40.88
비교제형예 2 23.12 25.74 26.72
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 비교 제형으로서 화학적 보습제인 글리세린을 함유한 화장료(비교제형예 1)와 비교하여도 본 발명의 작약꽃 추출물을 함유한 화장료(제형예 1, 2, 3, 4)의 보습효과가 더 우수함을 확인할 수 있었다. 특히, 흑효모 발효 작약꽃 추출물을 함유한 제형예 4의 경우, 제형예 1 내지 3과 비교제형예 1 및 2에 비하여 피부 전기전도도의 증가율이 매우 우수하였다. 일반적으로 피부 전도도는 피부 수분량에 비례하므로, 상기의 결과는 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유하는 화장료가 그렇지 않은 화장료에 비해 피부 수분 함량도 높게 유지한다는 것을 확인시켜 준 것이다. 또한, 본 화장료를 피부에 도포한 모든 피검자들에게서 피부 자극을 관찰할 수 없었다.
실험예 2. 작약꽃 추출물의 피부장벽 개선 효과
25℃, 상대습도 45%, 공기의 흐름이 없는 실내에서 건강한 여성 25명을 대상으로 실시하였다. 피부 장벽 손상은 소듐라우릴설페이트(SLS, Sodium Lauryl Sulfate) 1% 수용액을 이용하여 유발하였고, 상기 제형예 1 내지 4의 화장료 조성물을 팔의 상박에 도포한 후 TEWAMETER TM210(C+K eletronic GmhH. Germany)을 이용하여 경피수분 손실량을 측정하였다. 즉, TEWL(Transepidermal Water Loss)값을 시간 변화에 따른 TEWL 값 변화량을 측정하여 피부장벽 회복율(%)을 확인하였다. 실험 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
구분 피부장벽 회복율(%)
2D 4D 6D 8D
제형예 1 20.03 35.39 56.12 66.35
제형예 2 21.31 33.59 54.76 64.89
제형예 3 25.18 45.46 66.37 78.36
제형예 4 50.19 66.35 82.37 95.01
상기 표 3에 나타낸 바와 같이 피부 장벽 개선 효과를 측정한 결과, 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 함유한 제형예 4가 제형예 1 내지 3에 비해 경피 수분 손실량이 매우 개선되었음을 알 수 있었다.
실험예 3. 시험관내 DPPH 법에 의한 항산화 활성 측정
작약꽃 추출물의 시험관내(In vitro) 항산화 효과 측정을 위해 DPPH법(Blois, M. S. : Antioxidant determination by the use of a stable free radical, Nature, 26, 1199-1200, 1958)을 이용하였다. DPPH(1,1- diphenyl picrylhydrazyl)법은 토코페롤(tocopherol), 아스코베이트(ascorbate), 플라보노이드(flavonoid) 화합물, 방향족 아민류, 마일라드(Maillard)형 갈변 생성물질, 펩티드 등의 항산화 활성을 나타내는 생리활성물질에 의해 환원됨으로써 짙은 자색이 탈색되는 정도에 따라 항산화 효과를 수소공여능으로 측정하는 방법으로서, 표준품으로는 L-아스코르브산을 사용하였으며, 각 시료에 2 x 10-4 M DPPH를 넣고 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과, 작약꽃의 정제수 추출물, 70% 에탄올 추출물, 초음파 추출물 및 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물의 DPPH 자유기 소거능은 0.05 g/L농도에서 각각 76.5%, 79.9%, 88.8%, 90.2%로 나타났으며, 표준품으로 사용한 L-아스코르브산의 활성은 82.1%로 나타났다.
시료 및 표준품 DPPH 자유기 소거능
0.01 g/L 0.03 g/L 0.05 g/L
작약꽃 정제수 추출물
(제조예 1)
20.6% 46.3% 76.5%
작약꽃 용매 추출물
(제조예 2)
23.2% 50.4% 79.9%
작약꽃 초음파 추출물
(제조예 3)
28.8% 60.2% 88.8%
흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물 (제조예 4) 34.1% 72.6% 90.2%
L-아스코르브산 25.3% 55.0% 82.1%
제조예 1 내지 4의 작약꽃 추출물들은 다른 항산화제들에 비교할만한 높은 활성을 나타내었으며, 특히 제조예 4의 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물이 L-아스크로브산과 대비하여 더 높은 항산화 활성을 나타내는 것을 알 수 있다. 특히 이러한 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 천연물의 혼합물임에도 불구하고 유의할만한 항산화 활성을 가지고 있음을 알 수 있었으며, 흑효모 발효를 통해 항산화 활성효과가 향상됨을 알 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (6)

  1. 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 화장료 조성물 총 중량 대비 0.0001~30.0 중량%로 함유하는 피부 장벽기능 개선용 화장료 조성물로서,
    상기 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모균으로 20℃ 내지 40℃의 온도에서 pH 5 내지 7을 유지하면서, 1 내지 7일 동안 발효시켜 얻은 것인, 피부 장벽기능 개선용 화장료 조성물.
  2. 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물을 화장료 조성물 총 중량 대비 0.0001~30.0 중량%로 함유하는 항산화용 화장료 조성물로서,
    상기 흑효모 발효 작약꽃 초음파 추출물은 작약꽃 초음파 추출물을 흑효모균으로 20℃ 내지 40℃의 온도에서 pH 5 내지 7을 유지하면서, 1 내지 7일 동안 발효시켜 얻은 것인, 항산화용 화장료 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 작약꽃 초음파 추출물은 작약꽃을 정제수, 탄소수 1~4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매에 넣은 후, 초음파추출기로 1 내지 12 시간 동안 추출하는 것인, 화장료 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것인, 화장료 조성물.
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