KR102111058B1 - A cosmetic composition for skin moisturizing comprising an extract of plant-derived lactobacillus brevis (ami-1109) femented barley - Google Patents

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김수영
박지훈
이혜자
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김지혜
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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition comprising a green barley fermented extract using a Lactobacillus brevis (AMI-1109) strain. The cosmetic composition exhibits skin moisturizing and skin barrier enhancement effects.

Description

식물유래 락토바실러스 브레비스 (AMI-1109) 청보리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물{A COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN MOISTURIZING COMPRISING AN EXTRACT OF PLANT-DERIVED LACTOBACILLUS BREVIS (AMI-1109) FEMENTED BARLEY}(A COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN MOISTURIZING COMPRISING AN EXTRACT OF PLANT-DERIVED LACTOBACILLUS BREVIS (AMI-1109) FEMENTED BARLEY)

본 발명은 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis AMI-1109) 균주를 이용하여 추출한 청보리 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 상기 화장료 조성물은 피부 보습 및 피부장벽강화 효과를 나타낼 수 있다. The present invention relates to a cosmetic composition comprising a green barley ferment extract extracted using Lactobacillus brevis AMI-1109 strain. The cosmetic composition may exhibit skin moisturizing and skin barrier strengthening effects.

피부는 신체의 외부를 덮고 있는 하나의 막으로 여러 가지 외부의 자극, 장해, 건조 등의 환경요소로부터 신체를 보호해 주는 다양한 생리적 기능을 수행하여 내부 장기와 그 밖의 체내 기관을 보호 조절하는 역할을 한다. The skin is a membrane that covers the outside of the body and performs various physiological functions to protect the body from environmental factors such as various external stimuli, obstacles, and dryness, and protects and regulates internal organs and other internal organs. do.

그러나, 피부는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적 기능이 저하되어 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되게 된다. 또한 광 또는 열에 반복적인 노출로 인해 피부의 외양 또는 기능이 변하게 되는데, 이로 인해 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상 기능 저하, 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등의 생성 및 피부 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다. However, as the age of the skin increases, the physiological function of the living body decreases, secretion of various hormones that regulate metabolism decreases, and the function of immune cells and the activity of cells decrease. In addition, the appearance or function of the skin changes due to repeated exposure to light or heat, which causes free radicals and free radicals to increase, resulting in excessive physical and chemical irritation and stress. It damages the skin by promoting the creation of freckles and skin aging.

이러한 피부노화 및 손상을 방지하여 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻어진 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유 기능을 유지시키고 피부 세포를 활성화시켜 피부 신진대사를 촉진하여 피부 건강을 유지하고자 하는 노력이 계속되고 있으며, 이에 따른 화장품, 피부 외용제 등이 개발되고 있다.In order to prevent skin aging and damage and maintain a healthier and more beautiful skin, by using physiologically active substances obtained from various animals, plants, microorganisms, etc., in addition to cosmetics, it maintains the skin's unique functions and activates skin cells to rejuvenate the skin Efforts to maintain skin health by promoting metabolism continue, and cosmetics and external preparations for the skin have been developed accordingly.

그러나, 이들 물질은 피부 적용시 자극, 홍반, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부 기능 개선 효과를 기대기 어려웠다. 따라서, 기존의 피부 외용제 조성물 보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부 외용제 조성물의 개발이 요구되고 있다.However, these substances have limitations in the amount of use due to safety problems such as irritation, erythema, and redness when applied to the skin, and it is difficult to expect an effect of improving skin function substantially due to insignificant effects. Therefore, there is a need to develop a new composition for external application for skin that is safer and more effective in living body than an existing composition for external application for skin.

한국공개특허 제10-2016-0081211호Korean Patent Publication No. 10-2016-0081211

본 발명의 목적은 청보리 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다. An object of the present invention is to provide a cosmetic composition comprising a fermented extract of green barley.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 측면은 청보리 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.One aspect of the present invention for achieving the above object relates to a cosmetic composition comprising a green barley fermentation extract.

본 발명에서, “청보리”는 보리(Hordeum vulgare L.)의 일종으로, 외떡잎식물 벼목 화분과에 속하는 푸른빛을 띄는 풋보리 또는 청맥(靑麥)이라고 불린다. 청보리는 인체에 필요한 여러가지 비타민, 미네랄, 아미노산 등이 함유되어 있어 영양의 보고로 알려져 있으며, 기존의 연구 결과에 따르면 아미노산 18종, 비타민 15종, 무기질 8종, 엽록소 뿐 아니라, SOD (superoxide dismutase), 헥사코산올(hexacosanol), 옥타코사놀(octacosanol), 폴리코사놀(polycosanol) 등의 지구력과 관련 있는 성분이 다량 함유되어 있는 것으로 알려져 있다.In the present invention, "green barley" is a kind of barley ( Hordeum vulgare L.) , and is called blue-green foot barley or green wheat belonging to the monocotyledonous potted plant. Green barley contains various vitamins, minerals, and amino acids necessary for the human body, and is known as a nutritional report. According to the results of previous research, 18 amino acids, 15 vitamins, 8 minerals, chlorophyll, as well as superoxide dismutase (SOD) It is known to contain a large amount of components related to endurance, such as hexacosanol, octacosanol, and polycosanol.

본 발명에서 “발효”는 발효 균주 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정을 의미한다. 발효 균주를 통한 발효과정을 거친 원료는 발효 전보다 최소 2배에서 최대 수 십배의 효과가 증대되는 것으로 알려져 있다. 발효를 거친 대사물질은 피부에 좋은 각종 아미노산, 유기산, 항산화물질을 함유하여 피부대사를 촉진시켜 피부결을 매끄럽게 가꿔준다. 또한 발효과정을 거치면서 입자가 작아지고 중금속 등의 독성이 분해되어 흡수율이 좋을 뿐 아니라 피부트러블이나 알레르기 부작용을 완화시켜준다.In the present invention, "fermentation" refers to a process of decomposing organic substances using enzymes owned by a fermentation strain. It is known that the raw material that has undergone the fermentation process through the fermentation strain increases the effect of at least 2 to up to several tens of times than before fermentation. The fermented metabolites contain various amino acids, organic acids, and antioxidants that are good for the skin to promote skin metabolism and smooth skin texture. In addition, through the fermentation process, the particles become small and the toxicity of heavy metals and the like decomposes, so that the absorption rate is good, and skin troubles and allergic side effects are alleviated.

이에 본 발명에서는 청보리에 발효과정을 거쳐 발효 추출물을 제조하였으며, 청보리에 함유된 성분의 효과를 더욱 극대화시킴으로써 우수한 화장료 조성물을 제공하고자 한다.Accordingly, in the present invention, a fermentation extract was prepared through a fermentation process on green barley, and the present invention intends to provide an excellent cosmetic composition by maximizing the effect of the components contained in green barley.

상기 청보리 발효 추출물은 청보리를 멸균하고 발효 균주를 접종하여 소정의 조건에서 발효한 후, 특정 용매로 추출하여 제조할 수 있다.The green barley ferment extract may be prepared by sterilizing green barley, inoculating the fermentation strain, fermenting under a predetermined condition, and then extracting with a specific solvent.

구체적으로, 상기 발효 추출물은 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주를 접종하여 수득할 수 있다.Specifically, the fermentation extract can be obtained by inoculating a strain of Lactobacillus genus.

보다 구체적으로, 상기 락토바실러스 속 균주는 락토바실러스 브레비스 (Lactobacillus brevis AMI-1109)로 일 수 있다.More specifically, the strain of genus Lactobacillus may be Lactobacillus brevis AMI-1109.

본 발명의 “락토바실러스 브레비스 AMI-1109(KCCM12385P)”는 제주도 김치로부터 분리 및 동정된 락토바실러스 브레비스의 신규한 균주이다. 락토바실러스 브레비스 균주에 관하여는 한국등록특허 제10-1968242호를 참고할 수 있다. "Lactobacillus brevis AMI-1109 (KCCM12385P)" of the present invention is a novel strain of Lactobacillus brevis isolated and identified from Kimchi, Jeju Island. For the Lactobacillus brevis strain, reference may be made to Korean Patent Registration No. 10-1968242.

본 발명의 일 실시예에서 청보리를 건조시킨 후 분쇄하여 정제수와 혼합하고 120 내지 125℃ 온도 범위에서 가열 멸균하였다. 상기 멸균된 청보리에 락토바실러스 브레비스 AMI-1109 균주를 접종시킨 후 30~37°C 온도 범위에서 3~10일간 발효시킴으로써 청보리 발효 추출물을 수득하였다(실시예 1).In one embodiment of the present invention, after drying and grinding the green barley, it is mixed with purified water and sterilized by heating in a temperature range of 120 to 125 ° C. After inoculating the sterilized green barley with Lactobacillus brevis AMI-1109 strain, fermented green barley extract was obtained by fermenting for 3-10 days at a temperature range of 30-37 ° C (Example 1).

또한 구체적으로 상기 청보리 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 피부 보습 또는 피부장벽 강화용일 수 있다. In addition, specifically, the cosmetic composition containing the green barley ferment extract may be for moisturizing the skin or strengthening the skin barrier.

본 발명에서, “보습”이란, 피부에 수분을 공급하여 보충하거나, 피부의 수분이 빠져나가지 않도록 보호하는 것을 모두 포함한다. 일반적으로 피부의 수분량은 진피층에서는 70% 정도이나 표피층으로 갈수록 감소하여 각질층에서는 약 10 내지 30%가 된다. 이러한 세포 층의 수분함량이 10% 이하로 되면 피부가 거칠어지고 신체 보호 기능이 약화되어 노화 현상이 나타나게 되는 바, 수분 공급 및 보습은 피부 보호에 중요하다. In the present invention, "moisturizing" includes both supplementing and supplying moisture to the skin, or protecting the skin from moisture. In general, the moisture content of the skin is about 70% in the dermal layer, but decreases toward the epidermal layer, resulting in about 10 to 30% in the stratum corneum. When the moisture content of the cell layer is less than 10%, the skin becomes rough and the body protection function is weakened, resulting in aging. Moisture supply and moisturization are important for skin protection.

본 발명에서, “피부장벽”이란 피부 구조는 외부에 드러나 있는 표피와 안쪽의 진피로 나뉘는데 표피에서도 가장 바깥쪽에 위치한 각질층에 해당하는 부분이다. 피부장벽의 역할은 외부 유해 요소가 피부에 침입하지 못하도록 방어하면서, 내부 수분이 빠져나가지 않도록 보호하는 것이다. In the present invention, the "skin barrier" skin structure is divided into the epidermis exposed on the outside and the dermis on the inside, which is the part corresponding to the outermost stratum corneum layer in the epidermis. The role of the skin barrier is to protect the internal moisture from escaping while preventing external harmful elements from entering the skin.

본 발명에서, “피부장벽강화”란 피부 장벽이 약해지면 외부 자극에 취약해지고 수분을 쉽게 잃어 피부가 건조, 민감해질 가능성이 높아지는 바, 이를 예방, 방지 또는 개선하는 것을 말한다. In the present invention, “strengthening the skin barrier” means that when the skin barrier becomes weak, it is vulnerable to external stimuli and easily loses moisture, thereby increasing the likelihood of skin becoming dry and sensitive, preventing, preventing or improving it.

구체적으로 상기 청보리 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 히알루론산(Hyaluronic Acid), 아쿠아포린 3(Aquaporin3, AQP3) 및 필라그린(Filaggrin)의 생성량을 증가시킬 수 있다. Specifically, the cosmetic composition comprising the fermented barley barley extract may increase the amount of hyaluronic acid, aquaporin3, AQP3, and filamentgrin.

본 발명의 일 실시예에서는 피부 보습인자인 히알루론산(Hyaluronic Acid) 및 아쿠아포린3(Aquaporin3)의 생성량 증가 효과를 확인하였으며, 특히 락토바실러스 브레비스 AMI-1109 균주를 이용하여 수득된 청보리 발효 추출물이 발효시키지 않은 청보리 추출물에 비해 뛰어난 피부 보습 효과를 나타내는 것을 확인하였다(도 1 및 도 2).In an embodiment of the present invention, the effect of increasing the production of hyaluronic acid (Hyaluronic Acid) and aquaporin3, which are skin moisturizing factors, was confirmed, and in particular, the green barley fermentation extract obtained using the Lactobacillus brevis AMI-1109 strain fermented It was confirmed that it exhibits an excellent skin moisturizing effect compared to the unexcited green barley extract (FIGS. 1 and 2).

본 발명의 일 실시예에서는 피부장벽강화인자인 필라그린의 생성량을 증가시킴을 확인하였는 바, 본 발명의 청보리 발효 추출물이 피부장벽강화 용도로 사용될 수 있음을 확인하였다(도 3).In one embodiment of the present invention, it was confirmed that the production amount of pilar green, a skin barrier strengthening factor, was increased, and it was confirmed that the green barley fermented extract of the present invention can be used for skin barrier strengthening purposes (FIG. 3).

이에 따라, 본 발명의 청보리 발효 추출물은 신규한 락토바실러스 속 균주 중 하나인 락토바실러스 브레비스 AMI-1109 균주를 이용하여 제조함으로써, 피부 보습관련 인자 및 피부장벽강화관련 인자의 생성량을 현저히 증가시키는 바, 피부 보습 및 피부장벽강화용 화장료 조성물 또는 피부 외용제로 활용될 수 있다. Accordingly, the green barley ferment extract of the present invention is manufactured using the Lactobacillus brevis AMI-1109 strain, one of the new strains of the genus Lactobacillus, thereby significantly increasing the production of factors related to skin moisturizing and skin barrier strengthening, It can be used as a cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier strengthening or as a skin external agent.

본 발명의 화장료 조성물은 용액, 외용 연고, 크림, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The cosmetic composition of the present invention is a solution, ointment for external use, cream, foam, nutrient lotion, soft lotion, pack, softener, latex, makeup base, essence, soap, liquid detergent, bathing agent, sunscreen cream, sun oil, suspension, emulsion Liquids, pastes, gels, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, patches and sprays can be prepared in a formulation selected from the group consisting of, but not limited to no.

본 발명의 상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The cosmetic composition of the present invention may further include one or more cosmetically acceptable carriers formulated in general skin cosmetics, and for example, oil, water, surfactant, moisturizer, lower alcohol, and thickener as common ingredients , Chelating agents, pigments, preservatives, fragrances, etc. may be appropriately blended, but is not limited thereto.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.The cosmetically acceptable carrier included in the cosmetic composition of the present invention varies depending on the formulation of the cosmetic composition.

본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an ointment, paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide, etc. as carrier components This may be used, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로하드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder, etc. may be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally, chlorofluorohard Propellants such as locarbon, propane / butane or dimethyl ether, but are not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent may be used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, and the like can be used, in particular, cottonseed oil, peanut oil, corn seed oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan May be used, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid diluents such as water, ethanol or propylene glycol as carrier components, ethoxylated isostearyl alcohol, suspensions such as polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, micro Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or trakant may be used, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

구체적으로, 상기와 같은 화장료 조성물에 있어서 상기 청보리 발효 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.005중량% 내지 30.0중량% 포함될 수 있다. 더욱 구체적으로는 0.01중량% 내지 20중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서 우수한 피부 미백 효과가 나타나는 이점이 있으며, 조성물의 제형이 안정화되는 이점이 있다.Specifically, in the cosmetic composition as described above, the green barley ferment extract may be included in an amount of 0.005% to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. More specifically, it may be included as 0.01% to 20% by weight. Within the above range, there is an advantage of exhibiting an excellent skin whitening effect, and there is an advantage that the formulation of the composition is stabilized.

또한, 본 발명의 조성물은 피부에 직접 도포하거나 살포하는 등의 경피 투여 방법으로 사용될 수 있으며, 본 발명 조성물의 투여 경로는 목적조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. In addition, the composition of the present invention can be used as a transdermal administration method such as applying or spraying directly on the skin, and the route of administration of the composition of the present invention can be administered through any general route as long as it can reach the target tissue.

본 발명의 조성물의 사용량은 연령, 병변의 정도 등의 개인 차이나 제형에 따라 적절하게 조절될 수 있으며, 1일 1회 내지 수회 적?량을 피부에 도포하여 1 주일 내지 수개월 사용될 수 있다.The amount of the composition of the present invention can be appropriately adjusted according to the individual difference or formulation such as age, degree of lesions, etc., and applied to the skin once to several times a day to be used for a week to several months.

본 발명의 청보리 발효 추출물은 피부 보습 및 피부장벽강화 효과가 우수하다. Cheongbori fermentation extract of the present invention is excellent in skin moisturizing and skin barrier strengthening effect.

또한, 본 발명의 조성물은 천연물 유래의 물질이어서 독성이 없으며, 인체에 적용하여도 부작용을 유발하지 않아 화장료 조성몰로의 활용도가 높다.In addition, since the composition of the present invention is a substance derived from natural products, it is non-toxic, and does not cause side effects even when applied to the human body, and thus has high utilization as a cosmetic composition molar.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야한다. It should be understood that the effects of the present invention are not limited to the above-described effects, and include all effects that can be deduced from the configuration of the invention described in the detailed description or claims of the invention.

도 1은 청보리 발효 추출물(실시예 1) 및 청보리 추출물(비교예 1)의 히알루론산(Hyaluronic Acid) 생성량 비교 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 청보리 발효 추출물(실시예 1) 및 청보리 추출물(비교예 1)의 아쿠아포린 3(Aquaporin3, AQP3) 생성량 비교 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 청보리 발효 추출물(실시예 1) 및 청보리 추출물(비교예 1)의 필라그린(Filaggrin) 생성량 비교 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
1 is a graph showing the comparison results of hyaluronic acid (Hyaluronic Acid) production of green barley fermented extract (Example 1) and green barley extract (Comparative Example 1).
Figure 2 is a graph showing the comparison results of the production of aquaporin 3 (Aquaporin3, AQP3) of the green barley fermented extract (Example 1) and green barley extract (Comparative Example 1).
Figure 3 is a graph showing the results of comparison of the amount produced by Filaggrin of the green barley fermented extract (Example 1) and the green barley extract (Comparative Example 1).

이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 관하여 상세히 서술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.Hereinafter, exemplary embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings, but it is apparent that the present invention is not limited by the following examples.

실시예 1. 락토바실러스 브레비스(Example 1.Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevisLactobacillus brevis AMI-1109)를 이용한 청보리 발효 추출물 제조  AMI-1109) Preparation of Green Barley Ferment Extract

정제수로 세척하고 건조시킨 청보리 전초를 조분쇄하여 20배의 추출용매(정제수)로 121°C 15분간 고압 열수추출을 하였다. 발효를 위한 종균은 멸균된 유산균 배양배지(Lactobacillus MRS Broth, 디프코, 미합중국)에서 배양된 유산균(Lactobacillus brevis AMI-1109)을 사용하였으며 배양이 완료된 후 균체만 회수하여 1x107 cfu/ml 농도로 청보리 추출물에 접종하였다. 발효는 발효조를 이용하여 1~3일간, 25~35°C로 유지하며 진행하였다. 발효가 완료된 청보리 발효물은 원심분리하여 균체를 제거하고 0.2 ㎛ 여과지를 이용하여 최종 여과하였다. 추출 여과된 청보리 추출물은 동결건조하여 사용하였다.The washed and dried blue barley outpost was coarsely crushed with purified water, and high pressure hot water was extracted for 15 minutes at 121 ° C with 20 times the extraction solvent (purified water). Inoculum for the fermentation was sterilized lactic acid bacteria culture medium (Lactobacillus MRS Broth, deep nose, the United States of America), the lactic acid bacteria (Lactobacillus brevis AMI-1109) was used to recover only the microbial cells after the culture is completed cheongbori to 1x10 7 cfu / ml concentration incubated at The extract was inoculated. Fermentation was conducted using a fermentation tank for 1 to 3 days, maintained at 25 to 35 ° C. The fermented green barley fermented product was centrifuged to remove the cells, and finally filtered using 0.2 μm filter paper. The extracted filtered barley barley extract was used by lyophilization.

비교예 1. 청보리 추출물 제조Comparative Example 1. Preparation of green barley extract

정제수로 세척하고 건조시킨 청보리 전초를 조분쇄하여 20배의 추출용매(정제수)로 121°C 15분간 고압 열수추출을 하였다. 추출된 청보리 추출물을 원심분리하여 추출 상등액을 회수하고 추출물을 0.2 ㎛의 크기를 가진 필터로 여과하여 청보리 추출물을 제조하였다. 추출 여과된 청보리 추출물은 동결건조하여 사용하였다. The washed and dried blue barley outpost was coarsely crushed with purified water, and high pressure hot water was extracted for 15 minutes at 121 ° C with 20 times the extraction solvent (purified water). The extracted green barley extract was centrifuged to recover the extract supernatant, and the extract was filtered through a filter having a size of 0.2 μm to prepare a green barley extract. The extracted filtered barley barley extract was used by lyophilization.

실험예 1. 피부각질형성세포 배양Experimental Example 1. Culture of keratinocytes

피부각질형성세포인 HaCaT 세포는 Dr. C.G. Hyun (Jeju National University, Korea)로부터 분양 받아 100 units/㎖ 페니실린-스트렙토마이신 및 10 % 태아 소 혈청(fetal bovine serum, FBS)이 함유된 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 배지를 사용하여 37 ℃, 5% CO2항온기에서 배양하였으며, 3~4일 간격으로 계대배양을 시행하였다.The skin keratinocytes, HaCaT cells, were 37 ° C. using Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) medium containing 100 units / ml penicillin-streptomycin and 10% fetal bovine serum (FBS) from CG Hyun (Jeju National University, Korea). Cultured in a 5% CO 2 incubator, passage was performed at intervals of 3 to 4 days.

실험예 2. 세포 독성 평가(EZ-cytox assay)Experimental Example 2. Cytotoxicity evaluation (EZ-cytox assay)

실시예 1의 피부 안정성을 확인하기 위해, EZ-사이톡스 분석(EZ-cytox assay)법을 이용하여 세포 독성 평가를 수행하였다. EZ-사이톡스 분석(EZ-cytox assay)은 살아있는 세포의 탈수소효소(Dehydrogenase)와 반응하여 주황색의 수용성 formazan을 생성하는 원리를 이용하여 세포생존율을 측정하는 대표적인 방법이다.To confirm the skin stability of Example 1, cytotoxicity evaluation was performed using the EZ-cytox assay method. The EZ-cytox assay is a representative method of measuring cell viability using the principle of generating orange water-soluble formazan by reacting with dehydrogenase of living cells.

구체적으로, 피부각질형성세포에서의 독성을 확인하기 위하여 HaCaT 세포를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 5 X 104 세포/mL로 96 웰 플레이트에 분주하여 37℃, 5% CO2 조건에서 18시간 동안 반응시킨 후, 마이크로플레이트리더 (microplate reader)를 사용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료 군에 대한 평균 흡광도 값을 구하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 세포생존율을 평가하였다. 그 결과는 표 1에 나타내었다. Specifically, in order to confirm the toxicity in keratinocytes, HaCaT cells were dispensed into 96-well plates at 5 X 10 4 cells / mL using DMEM medium with 10% FBS added, and 37 ° C, 5% CO 2 conditions After reacting for 18 hours, the absorbance was measured at 450 nm using a microplate reader. Average absorbance values were obtained for each sample group, and cell viability was evaluated by comparing with the absorbance values of the control group. Table 1 shows the results.

세포 생존율(대조군 %)Cell viability (% control) 농도(ug/ml)Concentration (ug / ml) 00 5050 100100 200200 실시예 1Example 1 100100 117117 120120 121121

상기 표 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 청보리 발효 추출물은 농도에 상관 없이 우수한 세포 생존율을 나타냈으며, 피부각질형성세포에 대한 독성이 거의 없어 안정성이 높음을 확인하였다.As shown in Table 1, the green barley ferment extract of Example 1 exhibited excellent cell viability regardless of concentration, and it was confirmed that stability was high because there was little toxicity to keratinocytes.

실험예 3. 청보리 발효 추출물의 보습 효과 확인Experimental Example 3. Confirmation of moisturizing effect of green barley ferment extract

3-1. 보습인자 히알루론산(Hyaluronic Acid) 생성량 증가효과 확인3-1. Confirm the effect of increasing the production of hyaluronic acid (Hyaluronic Acid)

실시예 1 및 비교예 1의 보습 효과를 확인하기 위하여 히알루론산 생성량 증가효과를 확인하는 실험을 수행하였다. In order to confirm the moisturizing effect of Example 1 and Comparative Example 1, an experiment was performed to confirm the effect of increasing the amount of hyaluronic acid production.

구체적으로, HaCaT 세포를 24 웰(well) 플레이트에 1.0 × 105 cells/mL로 분주하여 37℃, 5% CO2 조건에서 18시간 동안 배양하였다. 무혈청DMEM으로 교환하고 실시예 1 및 비교예1을 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 배양 배지를 걷어 15,000 rpm으로 5분간 원심분리하고 상층액을 걷어내어 정량 전까지 냉동보관(-20℃) 하였다. 효소면역측정법(ELISA: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)은 히알루론산 ELISA 키트(Elabscience Biotechnology Co.,Ltd )를 이용하였으며 제조사에서 제공한 방법에 의해 진행하였다. 그 결과는 표 2에 나타내었다.Specifically, HaCaT cells were dispensed at 1.0 × 10 5 cells / mL in a 24 well plate and cultured for 18 hours at 37 ° C. and 5% CO 2 conditions. The cells were cultured for 24 hours by exchanging with serum-free DMEM and treating Example 1 and Comparative Example 1. After that, the culture medium was collected, centrifuged at 15,000 rpm for 5 minutes, and the supernatant was removed and stored (-20 ° C) until quantification. The enzyme immunoassay (ELISA: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) was used as a hyaluronic acid ELISA kit (Elabscience Biotechnology Co., Ltd) and was performed by the method provided by the manufacturer. Table 2 shows the results.

히알루론산(Hyaluronic Acid) 생성량 증가(%)Hyaluronic acid production increase (%) -- 농도(μg/ml)Concentration (μg / ml) %% % of control% of control -- -- 100100 0.640.64 청보리Green barley 5050 8080 0.100.10 청보리 발효물Green barley fermentation 5050 154.83154.83 0.540.54

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 청보리 발효 추출물은 비교예 1의 청보리 추출물에 비해 히알루론산 생성량을 현저히 증가시킴을 확인하였는 바, 락토바실러스 브레비스 AMI-1109 균주를 이용한 청보리 발효 추출물의 우수한 피부 보습 효과를 확인하였다. . As shown in Table 2, it was confirmed that the green barley ferment extract of Example 1 significantly increased the amount of hyaluronic acid production compared to the green barley extract of Comparative Example 1, and the superiority of the green barley ferment extract using the Lactobacillus Brevis AMI-1109 strain The skin moisturizing effect was confirmed. .

3-2. 보습인자 아쿠아포린 3(Aquaporin3, AQP3) 생성량 증가효과 확인3-2. Confirmation of the increase effect of the moisturizing factor Aquaporin 3 (AQP3)

실시예 1 및 비교예 1의 보습 효과를 확인하기 위하여 아쿠아포린 3 생성량 증가효과를 확인하는 실험을 수행하였다. In order to confirm the moisturizing effect of Example 1 and Comparative Example 1, an experiment was performed to confirm the effect of increasing the amount of aquaporin 3 production.

HaCaT 세포를 24 웰(well) 플레이트에 1.0 × 105 cells/mL로 분주하여 37℃, 5% CO2 조건에서 18시간 동안 배양하였다. 무혈청 DMEM으로 교환하고 시료를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 각 군마다 배양액 제거 및 PBS로 세척 후 단백질 정량에 영향을 줄 수 있는 약물이 포함되지 않은 PBS를 처리하였다. 저온, 상온의 인큐베이션(incubation)을 반복하여 세포를 용해시킨 후 단백질을 수거하였다. 정량은 AQP3-ELISA 키트(Elabscience Biotechnology Co.,Ltd)를 이용하였으며 제조사에서 제공한 방법에 의해 진행하였다. 그 결과는 표 3에 나타내었다.HaCaT cells were dispensed into 24 well plates at 1.0 × 10 5 cells / mL and cultured for 18 hours at 37 ° C. and 5% CO 2 conditions. The cells were exchanged for serum-free DMEM, and the samples were processed to incubate for 24 hours. Subsequently, each group was treated with PBS containing no drug that could affect protein quantification after removal of the culture solution and washing with PBS. The cells were lysed by repeating incubation at low temperature and room temperature, and then the protein was collected. Quantitatively, AQP3-ELISA kit (Elabscience Biotechnology Co., Ltd) was used and was performed by the method provided by the manufacturer. Table 3 shows the results.

아쿠아포린 3(Aquaporin3, AQP3) 생성량 증가(%)Aquaporin 3 (AQP3) production increase (%) -- 농도(μg/ml)Concentration (μg / ml) %% % of control% of control -- -- 100100 0.760.76 청보리Green barley 5050 59.6059.60 0.450.45 청보리 발효물Green barley fermentation 5050 200.85200.85 0.310.31

상기 표 3에 나타난 바와 같이, 실시예 1 은 비교예 1에 비해 아쿠아포린 3 인자의 생성량을 현저하게 증가시키는 것을 확인하였는 바, 아쿠아포린 3 보습 인자의 생성을 증가시킴으로써 피부의 보습에 효과적임을 확인하였다. As shown in Table 3, it was confirmed that Example 1 significantly increased the production amount of the aquaporin 3 factor compared to Comparative Example 1, thereby confirming that it was effective in moisturizing the skin by increasing the production of the aquaporin 3 moisturizing factor. Did.

실험예 4. 청보리 발효 추출물의 피부장벽강화 효과 확인Experimental Example 4. Confirmation of skin barrier strengthening effect of green barley fermented extract

실시예 1 및 비교예 1의 피부장벽강화 효과를 확인하기 위하여 필라그린(Filaggrin) 생성량 증가효과를 확인하는 실험을 수행하였다. In order to confirm the skin barrier strengthening effect of Example 1 and Comparative Example 1, an experiment was performed to confirm the effect of increasing the amount of Filaggrin production.

HaCaT 세포를 24 웰(well) 플레이트에 1.0 × 105 cells/mL로 분주하여 37℃, 5% CO2 조건에서 18시간 동안 배양하였다. 무혈청DMEM으로 교환하고 시료를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 각 군마다 배양액 제거 및 PBS로 세척 후 단백질 정량에 영향을 줄 수 있는 약물이 포함되지 않은 PBS를 처리하였다. 저온, 상온 인큐베이션(incubation)을 반복하여 세포를 용해시킨 후 단백질을 수거하였다. 정량은 Filaggrin-ELISA 키트(Elabscience Biotechnology Co.,Ltd)를 이용하였으며 제조사에서 제공한 방법에 의해 진행하였다. 그 결과는 표 4에 나타내었다.HaCaT cells were dispensed into 24 well plates at 1.0 × 10 5 cells / mL and cultured for 18 hours at 37 ° C. and 5% CO 2 conditions. The cells were exchanged for serum-free DMEM, and the samples were processed to incubate for 24 hours. Subsequently, each group was treated with PBS containing no drug that could affect protein quantification after removal of the culture solution and washing with PBS. The cells were lysed by repeating low temperature and room temperature incubation to collect the protein. Quantitatively, a Filaggrin-ELISA kit (Elabscience Biotechnology Co., Ltd.) was used and was performed by the method provided by the manufacturer. Table 4 shows the results.

필라그린(FLG) 생성량 증가(%)Increased amount of pilar green (FLG) production (%) -- 농도(μg/ml)Concentration (μg / ml) %% % of control% of control -- -- 100100 0.480.48 청보리Green barley 5050 130.40130.40 0.550.55 청보리 발효물Green barley fermentation 5050 152.29152.29 0.690.69

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 실시예 1 은 비교예 1에 비해 우수한 필라그린 인자의 생성량을 증가시키는 것을 확인하였는 바, 본 발명의 청보리 발효 추출물이 피부장벽 강화 용도에 활용될 수 있음을 확인하였다. As shown in Table 4, it was confirmed that Example 1 increased the amount of the production of a good pilargreen factor compared to Comparative Example 1, and it was confirmed that the green barley ferment extract of the present invention can be used for skin barrier strengthening use. .

제조예 1. 청보리 발효 추출물을 함유하는 에센스 제조 Preparation Example 1 Preparation of Essence Containing Fermented Green Barley Extract

하기의 표 5와 같이 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하였다(단위: 중량%).A cosmetic composition of an essence formulation was prepared as shown in Table 5 below (unit:% by weight).

원료명Raw material name 함량(중량%)Content (% by weight) 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 22 세테아릴글루코사이드Cetearyl glucoside 1One 호호바씨오일Jojoba seed oil 55 실리카Silica 0.50.5 글리세린glycerin 1010 청보리 발효 추출물 Green barley ferment extract 55 정제수Purified water to 100to 100

제조예 2. 청보리 발효 추출물을 함유하는 크림 제조Preparation Example 2. Preparation of cream containing fermented barley extract

하기의 표 6과 같이 크림 제형의 화장료 조성물을 제조하였다(단위: 중량%).A cosmetic composition of a cream formulation was prepared as shown in Table 6 below (unit: wt%).

조성물Composition 함량(중량%)Content (% by weight) 청보리 발효 추출물Green barley ferment extract 55 스테아린산Stearic acid 1515 에탄올ethanol 1One 수산화칼륨Potassium hydroxide 0.70.7 글리세린glycerin 55 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 방부제antiseptic 적량Proper incense 적량Proper 정제수Purified water to 100to 100

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단 일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.The foregoing description of the present invention is for illustration only, and a person having ordinary knowledge in the technical field to which the present invention pertains can understand that it can be easily modified to other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention. will be. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not restrictive. For example, each component described as a single type may be implemented in a distributed manner, and similarly, components described as distributed may be implemented in a combined form.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is indicated by the following claims, and all modifications or variations derived from the meaning and scope of the claims and equivalent concepts should be interpreted to be included in the scope of the present invention.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microbial Conservation Center (Overseas) KCCM12385PKCCM12385P 2018111220181112

Claims (6)

청보리 발효 추출물을 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물로서,
상기 발효 추출물은 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주를 접종하여 수득한 것이며,
상기 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주는 락토바실러스 브레비스 AMI-1109(Lactobacillus brevis AMI-1109) KCCM12385P인, 화장료 조성물.
As a cosmetic composition for moisturizing the skin comprising a green barley fermented extract,
The fermented extract is obtained by inoculating a strain of Lactobacillus genus,
The Lactobacillus ( Lactobacillus ) genus strain is Lactobacillus Brevis AMI-1109 ( Lactobacillus brevis AMI-1109) KCCM12385P, cosmetic composition.
삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 피부장벽 강화용도를 추가로 더 포함하는 것인, 화장료 조성물.
According to claim 1,
The cosmetic composition is to further include a skin barrier strengthening, cosmetic composition.
제4항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 히알루론산(Hyaluronic Acid), 아쿠아포린 3(Aquaporin3, AQP3) 및 필라그린(Filaggrin) 중 어느 하나 이상의 인자의 생성량을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
The method of claim 4,
The cosmetic composition is hyaluronic acid (Hyaluronic Acid), aquaporin 3 (Aquaporin3, AQP3), and characterized in that to increase the amount of production of any one or more of the elements of Filaggrin (Filaggrin), cosmetic composition.
제1항에 또는 제4항에 있어서,
상기 청보리 발효 추출물은 건조중량으로 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.001중량% 내지 30.0중량% 포함되는 것인, 화장료 조성물.
The method of claim 1 or 4,
The cheongbori fermentation extract is 0.001% to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition by dry weight, cosmetic composition.
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