KR102064602B1

KR102064602B1 - 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102064602B1
Application number: KR1020180086123A
Authority: KR
Inventors: 백승현; 박현우; 이광식; 이건국
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2018-07-24
Filing date: 2018-07-24
Publication date: 2020-01-09

Abstract

본 발명은 초록입 홍합을 효모(Saccharomyces cerevisiae) 또는 유산균(lactobacillus)으로 배양하여 얻은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 초록입 홍합 발효액은 멜라닌 생성 억제 효과 및 티로시나아제 활성 저해 효과가 뛰어나며 본 발명의 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물은 미백효과가 우수하다.

Description

초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Whitening of the Skin Comprising the Extract of Fermented Perna Canaliculus}

본 발명은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 초록입 홍합을 효모 또는 유산균으로 배양하여 얻은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부색을 결정하는 인자에는 기본적으로 인종과 지역, 성별, 나이에 따른 차이를 배제하면 기미, 주근깨와 자외선 노출로 인한 태닝과 같은 부분, 또는 전체적인 색소침착, 그 외에 여드름 및 흉터, 각질의 분포상태와 혈액순환, 스트레스, 건강상태 등이 있다. 이상의 인자들 가운데에서도 가장 중요한 인자는 색소침착이다.

피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 멜라노이드, 카로틴, 헤모글로빈, 카로티노이드 등이 있으며, 피부, 모발 및 눈의 다양한 색깔이 이들 색소에 의해 결정된다. 이중 피부의 색을 결정하는 가장 중요한 것은 멜라닌으로서, 이 멜라닌의 생합성에 영향을 미치는 가장 큰 요인은 자외선과 체내 호르몬 분비이다. 멜라닌은 자외선을 흡수 또는 산란시켜 자외선으로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는데 큰 역할을 하는데, 특별한 최대 흡수파장이 없으며 전 영역의 빛을 흡수한다. 또한, 활성산소종을 제거하는 기능이 탁월하나, 때로는 멜라닌 자체가 활성산소를 발생시키기도 하며, 멜라닌 구조 내의 카테콜이나 퀴논에 의하여 다른 물질을 환원시키거나 산화시키고, 멜라닌 자체가 자유라디칼의 성질을 나타내기도 한다.

멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신이 멜라닌형성세포의 멜라노좀에서 티로시나아제에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌(dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것을 시작으로 계속되는 일련의 산화과정을 거쳐 갈색(pheoelanin), 흑색(eumelanin)의 중합체로 형성된다. 이러한 생합성 과정은 멜라노좀이라는 특수한 형태의 갈색 세포내 소기관에서 진행되며 멜라닌 과립을 포함한 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝 부분으로 이동, 각질세포의 식세포작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 각질세포의 핵 주변에 축적된다.

멜라닌의 합성과 멜라노좀의 수, 주위의 각질세포로의 이동은 부분적으로 호르몬과 자외선 등에 영향을 받고 일차적으로는 유전적인 영향을 크게 받는다. 그 밖에 티로시나아제의 발현 및 멜라닌의 합성, 전송에 관여하는 세포내 조절인자인 싸이토카인(cytokine), 구리, 아연, 철 등의 금속 이온 및 인터페론, 프로스타글란딘, 히스타민 등이 관여하는 것으로 알려져 있다.

한편, 최근에는 많은 화장품 회사들이 피부 미백 성분을 개발하기 위해 많은 노력을 하고 있으며, 발효를 통해 얻은 유효성분을 제품에 적용하기도 한다.

예를 들면, 청국장 및 낫또(natto)라는 대표적인 발효 식품에 이용되는 고초균에 의한 발효 산물을 이용하여 생산한 발효액을 이용하여 화장료 조성물을 제공하는 경우가 있다. 이러한 발효액은 미생물에 의해 자극성분들이 분해되거나 다른 물질로 전환됨으로써 피부 자극이 저하되는 장점들이 있으며 미생물에 의한 발효 산물들이 또한 피부에 좋은 영향을 줌으로써 많이 이용되고 있다.

본 발명자들 또한 이러한 목적으로 다양한 천연물을 이용하여 제품 개발을 하였으며, 대표적으로 초록입 홍합 추출물을 이용하여 피부 미백을 개선하는 노력을 해왔다. 이러한 기존 데이터를 바탕으로 본 발명자들은 초록입 홍합을 발효시킴으로써 유효성분이 많이 생성되며 기존의 초록입 홍합 추출물보다 훨씬 뛰어난 피부 미백 효과가 있다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

한국 등록특허 제10-1768029호는 초록입 홍합 추출물을 함유하는 보습용 화장료 조성물에 관하여 기재되어 있고, 한국 등록특허 제10-0852864호는 초록입 홍합 추출물을 함유하는 자극 완화용 화장료 조성물에 관하여 기재되어 있다.

본 발명자들은 피부 색소 침착을 개선하기 위해 천연 식물 성분들에 대한 다양한 피부 생리활성을 검색한 결과 천연 식물 추출물 중에서 초록입 홍합을 효모 또는 유산균으로 배양하여 얻은 초록입 홍합 발효액이 티로시나아제 활성 억제 효과 및 멜라닌 생성 억제 효과, 피부 색소 침착 등을 억제하여 피부 미백을 효과적으로 개선할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

즉, 본 발명의 목적은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기와 같은 목적은 초록입 홍합을 효모 또는 유산균으로 배양하여 얻은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 의해 달성된다.

바람직하게는, 상기 초록입 홍합 발효액은 효모로서 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae) 또는 유산균으로서 비피도 박테리움(Bifidobacterium)을 이용하여 초록입 홍합을 배양하여 수득한 발효액인 것을 특징으로 한다.

또한, 바람직하게는 상기 초록입 홍합 발효액은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 20.0%(w/w)로 함유되는 것을 특징으로 한다.

또한, 바람직하게는 상기 초록입 홍합 발효액은 멜라닌 생성을 억제하고, 티로시나아제 활성을 저해하며, 미백효과를 가지는 것을 특징으로 한다.

또한, 바람직하게는 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명의 목적은 상기 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하여, 멜라닌 생성을 억제하고, 티로시나아제 활성을 저해하며, 미백효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 화장방법에 의해 달성된다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함된 유효성분인 초록입 홍합 발효액은 초록입 홍합을 효모 또는 유산균으로 배양하여 수득한 발효액으로서, 멜라닌 생성 억제효과 및 티로시나아제 활성 저해 효과가 뛰어나므로, 우수한 미백 효과를 가진 성분이다. 그리고, 본 발명의 초록입 홍합 발효액을 함유하는 화장료 조성물은 기존의 초록입 홍합 추출물 함유 화장료 조성물에 비해 미백효과가 우수하다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한, 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다. 용어 약이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.

본 명세서를 통해, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, 포함하다 및 포함하는 이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 초록입 홍합은 뉴질랜드 해안에 서식하는 홍합의 일종으로 녹색홍합(Green-lipped Mussel)으로 불리며 학명은 Perna Canaliculus이다.

초록입 홍합은 불포화 지방산인 오메가 3 외에 각종의 미네랄을 다량 포함하고 있어 항염증, 관절염, 류마티스, 척추염 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에 따른 초록입 홍합 추출물은 초록입 홍합의 다양한 기관 또는 부분으로부터 추출하여 얻은 것을 의미한다.

본 발명에 이용되는 초록입 홍합 발효액은 효모 또는 유산균을 이용하여 초록입 홍합을 배양하여 수득한 초록입 홍합 발효액인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 초록입 홍합을 발효시키는데 사용되는 효모균은 진핵미생물(핵과 세포질이 핵막에 의하여 나누어져 있는 생물)에 속하며 세포벽, 세포막, 핵, 사립체, 과립 등 세포 소기관을 갖추고 있다. 성의 구별이 없는 이들은 주로 budding(출아법)으로 번식하는데, 분리된 많은 효모들 중에는 발효능이 없는 것, budding 대신 fission(분열) 혹은 bud-fission 방법으로 증식하는 것, 자낭포자(ascospore)가 아닌 사출포자(ballistospore)를 형성하거나 포자(spore)형성이 관찰되지 않는 것 등 다양한 그룹의 효모도 존재한다. 크기는 보통 5-10×5-12㎛로 세균의 5 내지 10배 크기이며, 적정 pH는 4.5-5.5이나 1-10에서도 생존한다. pH 1에서 12시간 생존하는 효모는 박테리아보다 산에 강하므로 배지의 pH를 3.5 내지 3.8 정도로 맞추면 박테리아의 오염을 어느 정도 억제할 수 있다.

효모는 균종에 따라서 조금씩 차이가 있으나 대부분 20~25℃에서 잘 자란다. 보통은 50℃ 이상에서는 사멸한다고 하지만 그 온도 이상에서 합성이 되지 않는 성장요소를 배지에 직접 첨가해 줌으로써 어느 정도 극복이 가능하다. 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae )의 경우 40℃ 이상에서 사멸하지만 배지에 올레산(oleic acid)과 에르고스테롤(ergosterol)을 첨가해 줌으로써 이를 방지할 수 있다. 효모 균체 자체는 단세포 식물로서 단백질과 미량광물질을 다량 함유하고 있다. 본 발명의 초록입 홍합을 발효시키는데 사용하기에 바람직한 효모는 사카로마이세스 세레비시애이다.

본 발명의 초록입 홍합을 발효시키는데 사용되는 유산균은 인체에 유익한 미생물의 일종으로서 포도당 또는 유당과 같은 탄수화물을 분해하여 유산(젖산)이나 초산과 같은 유기산을 생성하는 균이다. 유산균이 당으로부터 유산을 만드는 것을 발효라 하며, 이러한 발효과정을 거쳐서 발효식품이 만들어진다. 본 발명에서는 대표적인 유산균(락토 바실러스, 스트렙토 코커스, 비피도 박테리움, 류코노스톡, 페디오 코커스, 락토 코커스)중에서 비피도 박테리움을 이용하여 사용하였다.

본 발명에서, 초록입 홍합 발효액은 다음과 같이 제조될 수 있다:

a) 초록입 홍합 분말을 100 내지 500 메쉬를 이용하여 미세하게 만드는 단계;

b) 상기 단계 a)에서 제조한 초록입 홍합 분말을 통상적인 미생물 배양액에 1 내지 50 g/L 첨가하고, 효모 균주 또는 유산균을 10,000 내지 100,000 cfu/L의 양으로 첨가하는 단계;

c) 상기 단계 b)의 배양물을 30 내지 37℃에서, pH 5 내지 7로 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건으로 약 5 내지 10일간 배양하는 단계; 및

d) 단계 c)의 배양액을 여과한 후 5 내지 10일 동안 저온 숙성시켜 여과하는 단계.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용한 초록입 홍합 발효액은 다음과 같이 제조하여 얻어질 수 있다:

초록입 홍합 분말을 300 메쉬로 분말화한 뒤 배양액에 10 g/L 첨가하고, 효모 균주 또는 유산균 등을 50,000 cfu/L로 첨가하여 30 내지 37℃에서, pH 5 내지 7로 호기적 또는 통성 혐기적인 조건으로 발효조에서 약 7일간 배양한다. 배양 후 이 배양액을 0.25μM의 여과지를 이용하여 여과한다. 이 여과액은 다시 10일간 저온 숙성시킨 후 여과 및 농축시켜 본 발명의 초록입 홍합 발효액을 제조한다.

본 발명에서, 초록입 홍합 발효액은 티로시나아제 활성을 저해하고, 멜라닌 생성을 억제하여 피부 미백을 개선해주는 특징을 가지고 있다.

본 발명에서, 초록입 홍합 발효액의 함량은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001 내지 20.0 %(w/w)이고, 보다 바람직하게는 0.001 내지 20.0 %(w/w)이다. 초록입 홍합 발효액의 함량이 0.0001%(w/w) 미만일 경우에는 뚜렷한 피부 미백 개선 효과를 기대할 수 없고, 초록입 홍합 발효액의 함량이 20.0%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않으며, 피부자극을 유발하거나 제형의 안정성에 있어서 문제가 생긴다.

본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 초록입 홍합 발효액 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하여 티로시나아제 활성 억제, 멜라닌 생성 억제하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 초록입 홍합 발효액을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 화장방법을 수행하면, 티로시나아제 활성 및 멜라닌 생성을 억제하고, 피부 색소 침착을 개선하여 피부 미백 효과를 얻을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

제조예 1. 효모를 이용한 초록입 홍합 효모 발효액 제조

정제수로 세척하고 건조한 초록입 홍합의 다양한 기관 또는 부분을 분말화 한 후 300메쉬를 이용하여 미세하게 만들었다. 이것을 10g/L가 되도록 효모 배양액(Potato Dextrose Broth, 아큐메디아, 미합중국)에 첨가하였다. 발효에 사용한 효모 균주는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)이고, 배양액당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 7일간, 30℃, pH 5-7로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거한 후 0.25 μM 여과지를 이용하여 최종여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 다시 4℃의 저온 창고에서 약 10일간 숙성시킨 후 이 여과 숙성액을 다시 0.25μM의 여과기를 이용하여 여과하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 '초록입 홍합 효모 발효액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 초록입 홍합 효모 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.

제조예 2. 유산균을 이용한 초록입 홍합 유산균 발효액 제조

정제수로 세척하고 건조한 초록입 홍합의 다양한 기관 또는 부분을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 이것을 10g/L되게 유산균 배양액에 첨가하였다. 여기에 탄소원으로 글루코스, pH 조절제로 디포타슘 포스페이트(Dipotassium phosphate)를 첨가하였다. 이때 사용한 유산균은 비피도박테리움이며, 배양액당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 7일간, 37℃, pH 5-7로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25 μM 여과지를 이용하여 최종 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 다시 4℃의 저온 창고에서 약 10일간 숙성시킨 후 이 여과 숙성액을 다시 0.25μM의 여과기를 이용하여 여과하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 '초록입 홍합 유산균 발효액'이라 통칭한다. 이하 실험에 사용한 초록입 홍합 유산균 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.

제조예 3. 초록입 홍합 용매 추출물 제조

초록입 홍합을 정제수로 세척하고 건조시켜서, 분말화한 후 100g을 70% 에탄올 용액 0.6L에 첨가하고, 냉각콘덴서가 장착된 환류 추출기에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 그런 다음, 수득한 추출액을 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5번 여과지로 여과한 후 감압농축기를 이용하여 용매를 제거하고 동결 건조하여 건조 중량5.5g을 얻었다. 이렇게 얻은 추출물을 이하 '초록입 홍합 용매 추출물'이라 통칭하며, 초록입 홍합 추출물은 최종 농도가 1g/100mL되게 사용하였다.

실험예 1: 초록입 홍합 발효액의 티로시나아제 활성 저해 실험

기질로는 인산 나트륨 완충액 (pH 6.8)에 용해한 1.5 mmol/ℓ의 티로신 (시그마사, 미합중국) 40 ㎕를 사용하였다. 제조예 1에서 제조한 초록입 홍합 효모 발효액과 제조예 2에서 제조한 초록입 홍합 유산균 발효액을 각각 0.05 M 인산나트륨 완충용액 (pH 6.8)으로 희석하여 농도(0.5 중량%, 1.0 중량%)별로 시료액을 제조하였다. 티로신 40 ㎕에 상기 농도별 시료액 240 ㎕을 각각 첨가하고, 상기 용액에 티로시나아제 (시그마사, 1500 U/㎖) 20 ㎕을 첨가한 후 37℃에서 15분 동안 반응시킨 다음, 490 nm에서 흡광도를 측정하였다. 비교군으로는 초록입 홍합 발효액 대신에 제조예 3의 초록입 홍합 용매 추출물을 사용하였다. 하기 수학식 1에 의하여 티로시나아제의 활성 저해도를 계산하였으며, 실험 결과는 하기 표 1에 기재하였다.

초록입 홍합 발효액의 티로시나아제 활성 억제 효과

시험 물질농도(중량%)	티로시나아제 활성억제율(%)
초록입 홍합 효모 발효액 0.5 중량%	47.7
초록입 홍합 효모 발효액 1.0 중량%	62.3
초록입 홍합 유산균 발효액 0.5 중량%	51.9
초록입 홍합 유산균 발효액 1.0 중량%	75.8
초록입 홍합 용매 추출물 0.5 중량%	29.3
초록입 홍합 용매 추출물 1.0 중량%	40.9

상기 결과를 통해, 초록입 홍합 효모 발효액 및 초록입 홍합 유산균 발효액을 처리한 경우는 초록입 홍합 용매 추출물(비교군)에 비하여 티로시나아제 활성 억제효과가 우수하였으며, 또한 이로부터 초록입 홍합 발효액이 멜라닌 생성을 억제하여 피부 색소 문제를 해결할 수 있음을 알 수 있다.

실험예 2: 초록입 홍합 발효액의 멜라닌 생합성 억제 실험

B-16 세포(쥐 멜라노마 세포, 한국세포주은행)를 6-웰 플레이트 (well plate)에 1×10⁵ cell/well이 되도록 접종한 후에 24시간 배양하였다. 각 웰에 초록입 홍합 발효액을 각각 0.5 중량%, 1 중량% 처리하고 3 내지 4일 동안 배양한 후 각 웰의 배양액을 원심분리하였다. 분리된 세포는 디메틸설폭사이드(DMSO)에 용해한 1N NaOH 용액 500 ㎕로 용해하여 10분간 90℃ 수욕(water bath)에서 가열하였다. 이 상등액을 490 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 초록입 홍합 발효액을 처리하지 않은 것을 사용하였다. 멜라닌 생성 저해도는 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 그 결과는 표 2에 나타나 있다.

시험 물질농도(중량%)	멜라닌 생성 억제율(%)
초록입 홍합 효모 발효액 0.5 중량%	35.8
초록입 홍합 효모 발효액 1.0 중량%	78.7
초록입 홍합 유산균 발효액 0.5 중량%	44.8
초록입 홍합 유산균 발효액 1.0 중량%	81.9
초록입 홍합 용매 추출물 0.5 중량%	32.1
초록입 홍합 용매 추출물 1.0 중량%	54.4

상기 결과를 통해, 초록입 홍합 효모 발효액 및 초록입 홍합 유산균 발효액을 처리한 경우는 초록입 홍합 용매 추출물(비교군)에 비하여 티로시나아제 활성 억제효과 및 멜라닌 생합성 억제효과가 우수하였으며, 또한 이로부터 초록입 홍합 발효액이 멜라닌 생성을 억제하여 피부 색소 문제를 해결할 수 있음을 알 수 있다.

이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 초록입 홍합 발효액을 포함하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 처방예들로 한정하고자 하는 것은 아니다. 하기 처방예에 사용한 초록입 홍합 발효액은 초록입 홍합 효모 발효액이나 초록입 홍합 유산균 발효액 중 어느 것을 사용하여도 무방하다.

처방예 1: 유연화장수

초록입 홍합 발효액을 함유한 화장료중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
초록입 홍합 발효액	0.5
글리세린	5.0
1.3-부틸렌글리콜	3.0
알란토인	0.1
DL-판테놀	0.3
이.디.티.에이-2NA	0.02
벤조페논-9	0.04
소듐 히아루로네이트	5.0
니콜 HCO 60	0.4
메틸 파라벤	0.2
향,	0.01
증류수	잔량
합 계	100

처방예 2: 영양화장수

초록입 홍합 발효액을 함유한 화장료중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
초록입 홍합 발효액	2.0
글리세릴 스테아레이트SE	1.5
스테아릴 알콜	1.5
라놀린	1.5
폴리솔베이트 60	1.3
솔비탄스테아레이트	0.5
경화식물유	1.0
광물유	5.0
스쿠알란	3.0
트리옥타노인	2.0
디메치콘	0.8
초산토코페롤	0.5
카르복시비닐폴리머	0.12
글리세린	5.0
1.3-부틸렌글리콜	3.0
소듐히아루로네이트	5.0
트리 에탄올아민	0.12
메틸파라벤	0.2
향	0.02
증류수	잔량
합계	100

처방예 3: 영양크림

초록입 홍합 발효액을 함유한 화장료중 영양크림의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
초록입 홍합 발효액	3.0
친유형 모노스테아린산글리세린	2.0
세테아릴알콜	2.2
스테아린산	1.5
밀납	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄스테아레이트	0.6
경화식물유	1.0
스쿠알란	3.0
광물유	5.0
트리옥타노인	5.0
디메치콘	1.0
소듐마그네슘실리케이트	0.1
글리세린	5.0
베타인	3.0
트리에타올아민	1.0
소듐히아루로네이트	4.0
메틸파라벤	0.2
향	0.05
증류수	잔량
합계	100

실험예 3: 화장료 조성물의 미백 효과 실험

20 내지 40세의 특히 피부가 검은 한국 여성 40명을 대상으로 본 발명의 화장료 조성물의 미백 효과 실험을 실시하였다. 실험제품은 먼저 초록입 홍합 효모발효액 3 중량%를 함유한 제품과 초록입 홍합 유산균 발효액 3 중량%를 함유한 제품을 처방예 3의 처방대로 제조하고 대조제품으로는 초록입 홍합 발효액이 들어 있지 않은 것을 사용하였으며 초록입 홍합 용매 추출물 3 중량%를 함유한 제품은 비교제품으로 하였다. 실험은 먼저 대조제품과 초록입 홍합 효모 발효액이 함유된 제품을 20명의 피검자에게 각각 얼굴의 양쪽 면을 사용하였으며, 20명의 피검자는 비교제품과 초록입 홍합 유산균 발효액이 함유된 제품을 20명의 피검자에게 각각 얼굴의 양쪽 면을 사용하였다. 측정 장비로는 Minolta CR 300을 사용하였으며 8주 동안 측정하였다. 실험 결과는 8주에 찍은 L 값과 0주에 찍은 L 값을 비교하였으며 그 결과는 하기 표 6에 나타나있다.

구분	대조 제품	비교 제품	초록입 홍합 효모 발효액 제품	초록입 홍합 유산균 발효액 제품
△L 값	0.121	0.222	0.463	0.475

상기 표 6에 나타난 바와 같이, 초록입 홍합 발효액을 함유한 제품이 대조 제품군에 비하여 미백 효과가 높게 나타났다. 또한, 초록입 홍합 용매 추출물을 함유하는 비교제품에 비해서도 월등히 높은 미백 효과를 나타내었다. 즉, 미백활성을 띈 초록입 홍합 추출물을 발효시킴으로써 미백효과가 증가함을 알 수 있다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 매우 우수한 미백 효과를 갖고 있음을 알 수 있다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

초록입 홍합(Perna Canaliculus)을 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae) 또는 비피도 박테리움(Bifidobacterium)으로 배양하여 얻은 초록입 홍합 발효액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 초록입 홍합 발효액은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 20.0 중량%로 함유되는 것인, 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 계면활성제-함유 클렌징, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
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