KR102050328B1

KR102050328B1 - 버섯다당체 함유 천연 유래 복합물을 유효 성분으로 포함하는 산화적 스트레스 억제 활성 보유 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102050328B1
Application number: KR1020170126634A
Authority: KR
Inventors: 임혜원; 신대현; 황옥화; 장경희; 임창진
Original assignee: 주식회사 세바바이오텍; 주식회사 코스모코스
Priority date: 2017-09-28
Filing date: 2017-09-28
Publication date: 2019-12-02
Also published as: KR20190037037A

Abstract

본 발명은 우수한 항산화 활성 및 피부노화 억제 활성을 갖는 버섯다당체 함유 천연유래 복합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액은 천연물 유래의 소재로서 피부에 안정하면서도 항산화 활성, 항염 활성 및 피부노화 방지 효과 효과를 동시에 나타낼 수 있으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 피부 산화적 스트레스 억제용 화장품 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

버섯다당체 함유 천연 유래 복합물을 유효 성분으로 포함하는 산화적 스트레스 억제 활성 보유 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising a mixture of natural origin, including mushroom extracts, as an active principle for preventing oxidative stress}

본 발명은 우수한 항산화 활성 및 피부노화 억제 활성을 갖는 버섯다당체 함유 천연유래 복합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부환경과 직접 접해 있으면서 온도, 습도, 항원 및 자외선 등으로부터 보호해 주는 기능을 가지고 있다. 하지만, 외부 오염물질, 자외선, 스트레스 등의 물리적, 화학적 자극으로 인하여 피부 기능이 저하되어 나이가 들어감에 따라 세포 증식 및 면역 활성이 약해져 피부 세포의 손상을 신속히 복구하지 못하고 피부 구성 성분의 전체적인 악화를 일으켜 피부주름, 탄력 손실 및 각질화 등이 일어나게 된다.

피부의 노화는 크게 내인적 노화와 외인적 노화로 나뉜다. 내인적 노화는 자연적으로 나타나는 노화 현상으로, 임상학적으로 탄력이 감소하고 피부의 결이 거칠어지며 깊은 주름이 생기고 색소가 침착되는 특징이 있다. 외인적 노화는 자외선, 활성 산소종(Reactive oxygen species) 및 스트레스 등의 외부 환경적인 요인에 의해 발생하는 노화 현상으로 최근에는 급속한 산업화와 이에 의한 공기오염과 오존층의 파괴로 UV 양이 증가되고 이는 활성산소종과 같은 강력한 산화 물질들을 발생시켜서 피부 콜라겐 등의 결합조직형성 파괴, 세포막 기능저해, DNA 변이촉진, 단백질 작용 변형, 세포내 신호전달 물질들의 변형 등을 유발하여 인간에게 피부주름 생성, 색소 침착 등을 유발시켜 피부노화를 야기 시키게 된다. 이러한 피부 손상을 방지하기 위하여 레티놀, 레티노이드, 비타민 C, 플라보노이드 및 토코페롤, 코엔자임 Q10 등의 여러 가지 피부 보호 성분이 함유된 화장료 또는 피부 보호제가 개발되고 있다.

최근에는 독성이 상대적으로 적고 자연친화적인 화장품을 개발하기 위해 천연물을 이용 추출공정과 발효기술을 통해 미백, 항노화, 항주름, 항산화, 항염과 같은 생리 활성 물질을 탐색한 후, 이들을 화장품 소재로서 사용하고 있다.

한편, 베타글루칸(β-glucan)은 세균, 버섯, 효모 및 곡물 소스로부터 얻어지는 면역 조절자(immune modulators)로 알려져있고, 다당류를 발생시키고, 이러한 글루코스(glucose) 중합체(polymers)는 특정 병원성 세균 및 균류(fungi) 세포벽의 성분이다. 베타글루칸은 베타-1,6-연계된 곁사슬(side chain)에 상관없이 베타-1,3-연계된 베타-D-글루코피래노실(glucopyranosyl) 유니트(units)로 이루어져있고, 균류 세포벽 성분을 보존하고, 주요 PAMPs 중 하나로 인식되는 것으로 알려져있다(Brown, 2006).

베타글루칸은 글루코스 중합체이고, 백본(backbone)으로 선형 베타(1,3)-연계된 D-글루코스 분자와 다양한 크기의 베타(1,6)-연계된 곁사슬이 백본과 다른 간격으로 존재한다. 다양한 베타(1,3), 베타(1,4) 및 베타(1,6) 베타글루칸-연계 가운데 오직 베타(1,3)만 면역력을 활발하게 하고, 항종양 활성을 보인다. 처음 알려진 베타글루칸의 기능은 항종양 활성(Chihara et al., 1970)이고, 그 이후 항균(antifungal), 항감염(anti-infection)(Onderdonk et al., 1992), 방사선방호(radioprotective)(Gu et al., 2005), 콜레스테롤 감소(cholesterol reduction)(Wolever et al., 2011) 및 식후 당 대사 활성(postprandial glucose metabolic activities)(Battilana et al., 2001)을 포함하는 다른 많은 생물학적 활성이 보고되었다. 베타글루칸은 동물에서의 아스페르길루스(Aspergillus)(Torosantucci et al., 2005) 및 칸디다성 질염(Candida vaginal)(Pietrella et al., 2010) 감염 및 바다 물고기에서의 비브리오(Vibrio) 감염(Zhu et al., 2006)에서 면역강화 활성의 백신 또는 보조제 후보로 예방을 위해 사용되어졌다. 오트 및 보리와 같은 식물의 베타글루칸은 주로 베타(1,4) 연계된 것이고, 버섯 및 균류의 베타글루칸은 베타(1,3) 백본에 짧은 베타(1,6)-연계된 사이드체인으로 가지가 있다(Yan et al., 2005). 이러한 글루칸의 구조, 형태 및 소스의 차이는 생물학적 활성에 영향을 줄 수 있음이 알려져있다(Brown and Gordon, 2001).

이에 본 발명자들은 생체에 부작용이 없으면서 피부 개선 작용이 우수한 천연물질을 찾고자 모색하던 중, 노루궁뎅이버섯과 치마버섯 유래 버섯다당체를 함유하는 천연유래 복합물에 주목하여 이의 약리학적 효과를 실험한 결과, 항산화 활성, 항염 활성 및 피부노화 방지 효과를 모두 가지는 것으로 나타났으며, 이를 통해 화장품 소재로서의 충분한 가치가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

한국공개특허 제10-2004-0060729호

따라서 본 발명의 목적은 피부에 안정하면서도 항산화, 항염 및 피부노화 억제와 같은 고기능성을 가지는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서,

본 발명은 항산화 및 피부노화 억제 활성을 갖는 버섯다당체 함유 천연유래 복합물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 복합물은 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액을 유효성분으로 포함할 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 노루궁뎅이버섯 추출물은 노루궁데이버섯 자실체의 물 추출물일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 치마버섯 배양액은 치마버섯 균사체의 액체 배양물일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 복합물은 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액 이외에 정제수, 인삼 추출물, 엑토인, 1,2-헥산디올, 디프로필렌글라이콜 및 글리세롤 카프릴레이트를 추가로 더 포함할 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액 각각은 복합물 100중량부를 기준으로 0.2 내지 0.3중량부로 포함될 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 복합물을 유효성분으로 포함하는 항산화 및 피부노화 억제용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 활성산소 라디칼의 소거능을 통해 산화적 스트레스로부터 피부를 보호할 수 있는 항산화 기능과 더불어 히알루로니다아제 억제 활성을 통해 피부노화를 억제할 수 있는 기능을 가질 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 유효성분은 전체 조성물 중량 대비 0.1 내지 10%(w/v)로 포함될 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 유연 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 밀크로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 수중유 형 에멀젼, 유중수 형 에멀젼, 페이스크성 무수 생성물, 고체 무수 생성물, 소구체를 사용한 수성 상에서의 오일 분산물, 이온성 지질 소포체, 비이온성 지질 소포체, 연고, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 보디오일, 수중유 형 메이크업베이스, 유중수 형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도우, 마스카라, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 군 중에서 선택되는 1종의 제형일 수 있다.

본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액은 천연물 유래의 소재로서 피부에 안정하면서도 항산화 활성, 항염 활성 및 피부노화 방지 효과 효과를 동시에 나타낼 수 있으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 피부 산화적 스트레스 억제용 화장품 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 버섯다당체를 함유한 천연유래 복합물의 처리 농도별 DPPH 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 버섯다당체를 함유한 천연유래 복합물의 처리 농도별 ABTS+ 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 버섯다당체를 함유한 천연유래 복합물의 처리 농도별 슈퍼옥사이드 라디칼 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 버섯다당체를 함유한 천연유래 복합물의 처리 농도별 아질산염 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 버섯다당체를 함유한 천연유래 복합물의 처리 농도별 히알루로니다아제 억제 활성을 나타낸 그래프이다.

본 발명은 항산화 및 피부노화 억제 활성을 갖는 버섯다당체 함유 천연유래 복합물을 제공함에 그 특징이 있다.

‘노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum Pers. Hericium erinaceus Pers.)’은 가을에 활엽수의 생목이나 죽은 나무 위에 발생하는 목재 백색 부후성 버섯이다. 한국, 일본, 중국. 동남아시아, 유럽, 북아메리카에 분포한다. 크기 5~10㎝의 백색 반구형으로 조직이 스펀지처럼 유연한 노루궁뎅이버섯은 β-D－글루칸 성분이 풍부해 항암 효과가 탁월하고 치매와 당뇨병 등에도 효과가 좋은 것으로 알려지고 있다. 주요 성분으로는 당질과 단백질을 주성분으로 하고, 미네랄을 함유하나 지방함량은 적으며, 유리 아미노산, 유리당(trehalose, manitol, arabinitol, glucose 등), 유기산(malic acid, fumaric acid, citric acid, α-ketoglutaric acid 등)이 존재한다. 또한, 주요 약리 활성 성분으로 신경성장인자 합성 유도촉진 물질(NGF stimulator)을 비롯해, Hela cell 증식억제, 면역기능 조절 성분, 항암, 식이섬유(베타글루칸) 등이 있다.

‘치마버섯(Schizophyllum commume)’은 분류학상으로 담자균류의 주름버섯목 느타리과 치마버섯속에 속하고, 야생에서 채취할 수 있으며, 자실체는 대가 없으며 갓의 측면이 기질에 부착하고 크기가 보통 1.0 ∼ 3.0㎝이며, 모양은 부채형 또는 조개형이며 종으로 주름이 있고 말단은 불규칙하게 갈라지고 미세한 털이 덮혀 있다. 또한, 주름살은 백색이지만 성숙하게 되면 담회색 또는 담자갈색을 띄며, 조직은 건조한 경우 수축하게 되지만 수분을 흡수하면 회복되고, 포자문은 백색이고 포자는 4 ∼ 6 × 1.5 ∼ 2㎛의 크기의 원추형으로 평활하며 흰색을 띄고 있으며, 치마버섯은 활엽수림의 고목 또는 그루터기에 다발로 발생한다. 최근에는 치마버섯과 관련된 여러 연구에서 치마버섯이 생산하는 베타글루칸 이라는 다당체가 여러 가지 다양한 효능이 있음이 밝혀지고 있다.

본 발명자들은 상기와 같은 특징으로 갖는 노루궁뎅이버섯과 치마버섯을 이용하여 버섯다당체를 풍부하게 함유하는 천연 유래의 소재를 제조하였다. 자세하게는 노루궁뎅이버섯 추출물과 치마버섯 배양액에 정제수, 인삼 추출물, 엑토인, 1,2-헥산디올, 디프로필렌글라이콜 및 글리세롤 카프릴레이트를 추가로 배합하여 제조하였다.

이렇게 제조된 조성물을 본 발명에서는 ‘버섯다당체 함유 천연유래 복합물’로 명명하였다.

하기 실시예에서는, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 다양한 생리활성을 조사하였으며, 그 결과 상기 복합물은 페놀 화합물과 플라보노이드가 매우 풍부하며, 활성산소 라디칼의 소거능을 통해 산화적 스트레스로부터 피부를 보호할 수 있는 항산화 기능과 더불어 히알루로니다아제 억제 활성을 통해 피부노화를 억제할 수 있는 기능이 있음을 실험을 통해 입증하였다.

본 발명에 따른 ‘노루궁뎅이버섯 추출물’은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 노루궁뎅이버섯의 자실체 추출물을 의미한다. 예를 들어, 노루궁뎅이버섯 자실체의 조추출물, 극성용매 가용 추출물, 비극성용매 가용 추출물 또는 조추출물의 용매 분획물을 모두 포함하는 개념이다.

상기 노루궁뎅이버섯으로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약제학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서, 본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물이 노루궁뎅이버섯 조추출물인 경우 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출할 수 있 있으며, 초임계 유체를 이용하여 추출할 수도 있다.

추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초임계추출법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.

예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 노루궁뎅이버섯 추출물은 상기한 열수 추출법, 용매 추출법 또는 초임계 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.

따라서 본 발명에 있어서 노루궁뎅이버섯 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.

본 발명에 따른 ‘치마버섯 배양액’은 치마버섯 균사체를 배양하여 수득할 수 있다.

본 발명의 치마버섯 배양액은 치마버섯 균사체를 액상 배지에 접종하여 액체 배양한 후 원심분리한 다음 상층액을 수득한 후 이를 동결·건조하는 과정을 통해 제조될 수 있으나, 특별히 그 과정을 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 상기 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액 각각은 복합물 100 중량부를 기준으로 0.2 내지 0.3중량부로 포함될 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 버섯다당체 함유 천연유래 복합물을 유효성분으로 포함하는 항산화 및 피부노화 억제용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물은 ‘버섯다당체 함유 천연유래 복합물’을 유효성분으로 포함함으로써 활성산소 라디칼의 소거능을 통해 산화적 스트레스로부터 피부를 보호할 수 있는 항산화 기능과 더불어, 히알루로니다아제 억제 활성을 통해 피부노화를 억제할 수 있는 기능을 가진다.

본 발명의 상기 유효성분(버섯다당체 함유 천연유래 복합물)은 전체 조성물 중량 대비 0.1 내지 10%(w/v)로 포함될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 상술한 유효성분(버섯다당체 함유 천연유래 복합물) 이외에, 유효성분과 반응하여 피부보호 효과를 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용되어오던 피부보호제를 혼합하여 사용할 수도 있다.

본 발명의 화장료 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 수렴화장수, 유연화장수, 영양화장수, 각종크림, 에센스, 팩, 파운데이션 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 구체적인 제형으로서는 유연 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 밀크로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 수중유 형 에멀젼, 유중수 형 에멀젼, 페이스크성 무수 생성물, 고체 무수 생성물, 소구체를 사용한 수성 상에서의 오일 분산물, 이온성 지질 소포체, 비이온성 지질 소포체, 연고, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 보디오일, 수중유 형 메이크업베이스, 유중수 형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도우, 마스카라, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 군 중에서 선택되는 1종의 제형을 포함한다.

한편, 본 발명에 따른 상기 화장료 조성물은 유효성분(버섯다당체 함유 천연유래 복합물)을 나노리포좀 내부에 함유시켜 안정화하여 제형화할 수도 있다. 상기 유효성분(버섯다당체 함유 천연유래 복합물)을 나노리포좀 내부에 함유시키면, 유효성분의 성분이 안정화되어 제형화시 침전형성, 변색, 변취 등의 문제점을 해결할 수 있으며, 성분의 용해도 및 경피흡수율을 높일 수 있어 상기 유효성분으로부터 기대되는 효능을 최대로 발현시킬 수 있다.

본 발명에서 나노리포좀은 통상적인 리포좀의 형태를 갖는 것으로서 평균 입자 지름이 10~500nm인 리포좀을 의미한다. 본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 나노리포좀의 평균 입자 지름은 50~300nm이다. 나노리포좀의 평균 입자 지름이 300nm를 초과하는 경우에는 본 발명에서 달성하고자 하는 기술적 효과 중 피부침투의 개선 및 제형 안정성의 개선이 매우 미약하다.

본 발명에 따라 상기 유효성분(버섯다당체 함유 천연유래 복합물)을 안정화하는데 사용되는 나노리포좀은 폴리올, 유성성분, 계면활성제, 인지질, 지방산 및 물을 포함하는 혼합물에 의해 제조될 수 있다.

본 발명의 나노리포좀에 이용되는 폴리올은 특히 제한되지 않으며, 바람직하게는 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 메틸프로판디올, 이소프로필렌글리콜, 펜틸렌글리콜, 에리스리톨, 자일리톨, 솔비톨 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 10~80중량%, 바람직하게는 30~70중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 유성(oil) 성분은 당업계에 공지된 다양한 오일이 이용될 수 있으며, 바람직하게는 헥사데칸 및 파라핀 오일과 같은 하이드로카본계 오일, 에스테르계의 합성오일, 디메치콘 및 사이크로메치콘계와 같은 실리콘 오일, 해바라기유, 옥수수유, 대두유, 아보카도유, 참깨유 및 어유와 같은 동식물성 오일, 에톡시레이티드 알킬에테르계오일, 프로폭시레이티드 알킬에테르계오일, 피토스핑고신, 스핑고신 및 스핑가닌과 같은 스핑고노이드 지질, 세레브로사이드 콜레스테롤, 시토스테롤 콜레스테릴설페이트, 시토스테릴설페이트, C₁₀-₄₀ 지방알콜 및 이의 혼합물이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여1.0~30.0중량%일 수 있으며, 바람직하게는 3.0~20.0중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 계면활성제는 당업계에 공지된 어떠한 것도 사용할 수 있다. 예를 들어, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용될 수 있다. 바람직하게는 음이온성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제이다. 음이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알킬아실글루타메이트, 알킬포스페이트, 알킬락틸레이트, 디알킬포스페이트 및 트리알킬포스페이트를 포함한다. 비이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알콕시레이티드 알킬에테르, 알콕시레이티드 알킬에스테르, 알킬폴리글리코사이드, 폴리글리세릴에스테르 및 슈가에스테르를 포함한다. 특히 바람직한 계면활성제는 비이온성 계면활성제에 속하는 폴리솔베이트류이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.1~10중량%일 수 있으며, 바람직하게는 0.5~5.0중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 또 다른 성분인 인지질은 양쪽친화성 지질이 이용되며, 천연 인지질(예를 들어, 난황 레시틴 또는 대두 레시틴, 스핑고마이엘린) 및 합성 인지질(예를 들어, 디팔미토일포스파티딜콜린 또는 수첨 레시틴)을 포함하며, 바람직하게는 레시틴이다. 특히, 대두 또는 난황에서 추출한 천연 유래의 불포화 레시틴 또는 포화 레시틴이 바람직하다. 통상적으로 천연 유래의 레시틴은 포스파티딜콜린의 양이 23~95%, 그리고 포스파디딜에탄올아민의 양이 20% 이하이다. 본 발명의 나노리포좀의 제조에 있어서, 인지질의 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.5~20.0중량%이며, 바람직하게는 2.0~8.0중량%이다.

본 발명의 나노리포좀 제조에 이용되는 지방산은 고급 지방산으로서, 바람직하게는 C₁₂-₂₂ 알킬 체인의 포화 또는 불포화 지방산으로서, 예컨대, 라우린산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아린산, 올레산 및 리놀레산을 포함한다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.05~3.0중량%일 수 있으며, 바람직하게는 0.1~1.0중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 물은 일반적으로 탈이온화된 증류수이며, 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 5.0~40중량%일 수 있다.

나노리포좀의 제조는 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 이루어질 수 있으나, 가장 바람직하게는 상기 성분들을 포함하는 혼합물을 고압 호모게나이저에 적용하여 제조된다. 고압 호모게나이저에 의한 나노리포좀의 제조는 소망하는 입자 크기에 따라 다양한 조건(예: 압력, 횟수 등)으로 실시할 수 있으며, 바람직하게는 600~1200bar의 압력 하에서 1~5회 고압 호모게나아저를 통과하도록 하여 나노리포좀을 제조할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 유효성분(버섯다당체 함유 천연유래 복합물)을 나노리포좀 충 중량 기준으로 0.1~20.0중량%로 함유할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1>

버섯다당체를 함유한 천연유래 복합물 제조

<1-1> 노루궁뎅이버섯 유래 베타 글루칸 추출

춘천의 한 농장에서 구입한 분말화된 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceus (Bull.) Pers.) 자실체를 고온·고압에서 물 추출(2.1 atm, 100-120℃, 30분)한 후, 추가적으로 진탕배양기를 사용하여 37℃에서 18시간 추출하였다. 이후, Gauze를 이용하여 여과한 다음 여과액을 동결 건조하여 분말화하였다. 이렇게 제조된 노루궁뎅이버섯 추출물을 노루궁뎅이버섯 베타글루칸의 crude source로 사용하였다.

<1-2> 차마버섯 배양액 제조

차마버섯(Schizophyllum commune Fr.) 균사체를 액체 배양한 후, 원심분리한 다음 상층액만을 취하였다. 이후, 배양액을 Gauze를 이용하여 여과한 다음 여과액을 동결 건조하여 분말화하였다.

<1-3> 인삼 추출물 제조

코스모코스에서 공급한 홍삼 건조물 5%를 사용하여 80℃에서 48시간 열수 추출하였다. 이후, Gauze를 이용하여 여과한 다음 여과액을 동결 건조하여 분말화하였다.

<1-4> 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물 제조

본 발명의 버섯다당체 함유 천연 유래 복합물은 아래 표 1의 구성성분 및 함량으로 혼합하여 제조하였다.

노루궁뎅이버섯 추출물 건조분말 2.5 g, 치마버섯 배양액 건조분말 2.5 g, 인삼 추출물 건조분말 1 g 및 엑토인 1 g을 정제수에 충분히 용해시킨 후 상온에서 20분간 3000 rpm으로 원심분리를 하였다. 상등액을 취하여 1,2-헥산디올 12 g, 디프로필렌글라이클 100 g, 글리세릴카프릴레이트 2g과 혼합하여 1 kg의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물을 얻었다.

본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 구성성분 및 함량

구성성분	함량(중량%)
정제수	87.9
노루궁뎅이버섯 추출물 건조분말	0.25
치마버섯 배양액 건조분말	0.25
인삼 추출물 건조분말	0.1
엑토인	0.1
1,2-헥산디올	1.2
디프로필렌글라이콜	10
글리세릴 카프릴레이트	0.2
합계	100

< 실험예 1>

본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 pH, 색상과 성상 분석 및 미생물 검사

상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 pH, 색상과 성상 분석하고 미생물 검사를 진행하였다.

pH는 pH측정기로 측정 하였고, 성상과 색상은 육안으로 관찰하였다.

세균 검사는 시료 1 g (mL)에 희석액 9 mL을 넣어 10배로 희석하고 3개의 페트리디쉬에 1 mL씩을 분주하고 40~45℃ 정도로 식힌 멸균 배양배지 15 mL 가량을 굳기 전에 넣고 흔들어 섞은 후 굳힌 다음 배양기에 5일 배양 후 확인하였다.

버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 일반적 성상 및 미생물 검사

평가항목	결과
pH	5.55
색상	갈색
액상	불투명, 젤
일반세균	0 cfu/ml
진균	0 cfu/ml
황색포도상구균	0 cfu/ml
녹농균	0 cfu/ml
대장균	0 cfu/ml
1 ml 버섯다당체 함유 천연유래 복합물 용액이 미생물 검사에 사용됨.

그 결과 상기 표 2에서 나타낸 바와 같이, 상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물은 pH, 색상 및 액상은 화장품 소재로 적합한 것을 확인하였다. 또한, 일반세균, 진균 등 검사된 미생물이 발견되지 않아, 결격 사유가 되지 않았다.

< 실험예 2>

본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 총 페놀 함량 및 총 플라보노이드 함량 측정

상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물에 포함된 총 페놀 화합물 함량 및 총 플라보노이드 함량을 측정하였다.

총 페놀 화합물 함량 측정: 시료 10 μL를 취해 증류수 90 μL를 첨가한 후, 1 N Folin-Ciocalteu 시약 10 μL를 넣고 실온에서 5분간 반응시켰다. 7% Na₂CO₃용액 100 μL 을 첨가하고 10분간 반응시킨 후에 분광광도계를 이용하여 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 총 페놀 화합물 함량은 갈산(gallic acid)를 증류수에 용해시켜 위와 같은 방법으로 흡광도를 측정한 후 작성한 표준 검량선에 대입하여 산출하였다.

총 플라보노이드 함량 측정: 시료 25 μL에 1 N NaOH 25 μL를 가하고 혼합 후, 디에틸렌글리콜(diethylene glycol)을 250 μL 첨가하고 실온에서 1시간 반응시킨 후에 분광광도계를 이용하여 420 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로 나린긴(naringin)를 사용하여 표준곡선을 작성하였고, 총플라보노이드 함량은 mg naringin equivalent로 표기하였다.

버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 총 페놀 및 총 플라보노이드 함량

총 페놀 함량 (mg gallic acid equivalent/g extract)	총 플라보노이드 함량 (mg naringin equivalent/g extract
5.6± 0.3	11.9±1.8

그 결과 상기 표 3에서 나타낸 바와 같이, 다양한 향장 효능을 보유하는 성분들로 알려지는 총 페놀과 총 플라보노이드를 고농도로 함유됨이 확인되어 화장품 소재로써 매우 긍정적인 것을 확인할 수 있었다.

< 실험예 3>

본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 항산화 및 항염 활성

상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 항산화 및 항염 활성을 평가하기 위하여 DPPH 소거능, ABTS⁺ 소거능, 슈퍼옥사이드 라디칼 소거능, NO 소거활성을 조사하였다.

<3-1> DPPH 소거능

96-well microplate에 시료 30 μL에 6.34 Χ 10^-4M DPPH용액 (dissolved in 99% ethanol) 270 μL를 가하고 잘 혼합하여 실온에서 30분간 방치하였다. 얻어진 반응액을 517 nm 흡광도에서 전자 공여능 (electron donating ability)으로 측정하였다. 각 분획의 억제능은 양성대조군에 비하여 감소된 흡광도로부터 라디칼 소거능을 계산하였다. 이때 활성 비교를 위하여 양성대조군으로는 항산화 효과가 있다고 알려진 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였다.

그 결과 도 1에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 처리 농도에 의존적으로 DPPH 소거활성이 두드러지게 증대되는 것을 확인할 수 있었다.

<3-2> ABTS + 소거능

ABTS 라디칼을 7.4 mM ABTS와 2.6 mM potassium persulfate를 암소에서 12시간 동안 반응시켜서 발생시켰다. 96-well microplate의 well 당 10 μL 추출물 시료를 넣고 희석한 ABTS 용액 290 μL를 가하여 30분간 반응시킨 다음 750 nm 에서 흡광도를 측정하였다. 시료에 의하여 라디칼 소거되는 만큼의 흡광도가 감소되는 정도를 측정하였고 이때 활성 비교를 위하여 양성대조군으로는 항산화 효과가 있다고 알려진 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였다.

그 결과 도 2에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 처리 농도에 의존적으로 ABTS⁺ 소거활성이 두드러지게 증대되는 것을 확인할 수 있었다.

<3-3> 슈퍼옥사이드 라디칼 소거능

312 μM NADH (60 μL), 200 μM nitroblue tetrazolium (60 μL), 40 μM phenazine methosulfate (60 μL) 혼합 용액에 시료 20 μL 를 첨가한 후 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 활성 비교를 위하여 양성대조군으로는 항산화 효과가 있다고 알려진 ascorbic acid 를 사용하였다.

그 결과 도 3에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 처리 농도에 의존적으로 슈퍼옥사이드 라디칼 소거활성이 두드러지게 증대되는 것을 확인할 수 있었다.

<3-4> NO 소거능

0.1 M citrate buffer (pH 3.0) 30 μL와 50 μg/mL NaNO₂ 6μL를 혼합 후, 용액에 시료 60 μL와 Griess Reagent를 150 μL의 첨가한 후 538 nm에서 흡광도를 측정하였다. 활성 비교를 위하여 양성대조군으로는 ascorbic acid 를 사용하였다.

그 결과 도 4에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 처리 농도에 의존적으로 아질산염 소거활성이 두드러지게 증대되는 것을 확인할 수 있었다.

한편, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물이 DPPH, ABTS, Superoxide 라디칼 및 NO를 50% 소거하는 SC₅₀값은 하기 표 4에서 나타내었다.

측정된 여러 활성들의 SC₅₀

평가항목	SC₅₀(mg/ml)
평가항목	버섯다당체 함유 천연유래 복합물	양성 대조군 (아스코르브산)
DPPH	6.1	0.03
ABTS	-	0.10
Superoxide	5.2	0.55
Nitrite	4.0	0.02

상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 경우 항산화 및 항염 활성을 갖는바, 피부에 적용하는 경우 피부 조직에서 산화적 스트레스에 대한 방어 효능을 보유할 것으로 사료된다. 한편, 개별적 활성산소종인 슈퍼옥사이드 라디컬과 nitric oxide (NO)의 지표로 인정되는 nitrite ion이 더 현저히 소거할 수 있었다.

< 실험예 4>

본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 히알루로니다아제 억제 활성

상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 히알루로니다아제 억제 활성을 평가하였다.

시료 10 μL를 취해 히알루로니다아제(0.585 U/ml) 20 μL를 넣고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 기질 (hyaluronic acid solution) 30 μL 첨가하고 45분간 반응시킨 후에 acidic albumin solution 240 μL 첨가하고 실온에 10분 동안 반은 시킨 다음 600 nm에서 흡광도를 측정 하였다. 이 때, 활성 비교를 위하여 양성대조군으로는 아피제닌(apigenin)을 사용하였다.

그 결과 도 5에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물의 처리 농도에 의존적으로 히알루로니다아제 억제 활성이 두드러지게 증대되는 것을 확인할 수 있었다.

한편, 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물이 히알루로니다아제를 50% 억제할 수 있는 IC₅₀값은 하기 표 5에서 나타내었다.

히알루로니다아제 50%를 억제할 수 있는 농도값

평가항목	IC₅₀(mg/ml)
평가항목	버섯다당체 함유 천연유래 복합물	양성 대조군 (아피제닌)
히알루로니다아제	4.9	3.50

< 실시예 2>

본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물을 포함하는 화장료 조성물 제조

상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물을 포함하는 에센스 화장료 조성물을 하기 표 6의 구성 및 함량으로 제조하였다.

점도가 있는 수상형의 에센스 제형을 제조함에 있어서 상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물 함량을 2%, 5%로 사용하고 제형의 사용감에 영향을 줄 수 있는 글리세린의 함량을 조절하여 화장료 조성물을 제조하였다.

에센스 화장료 조성물의 성분 및 함량

성분명	제조예 (%, W/V)
성분명	제조예1	제조예2	제조예3	제조예 4
버섯다당체 함유 천연유래 복합물	2	5	2	5
정제수	88.7	85.7	86.7	83.7
글리세린	3	3	5	5
1,3 부틸렌글라이콜	3	3	3	3
1,2-헥산디올	2	2	2	2
풀루란	0.1	0.1	0.1	0.1
폴리글루타믹애씨드	0.03	0.03	0.03	0.03
알란토인	0.1	0.1	0.1	0.1
알지닌	0.15	0.15	0.15	0.15
디포타슘글리시리제이트	0.1	0.1	0.1	0.1
카보머	0.05	0.05	0.05	0.05
하이드록시에칠셀룰로오스	0.1	0.1	0.1	0.1
스클레로튬검	0.2	0.2	0.2	0.2
소듐하이알루로네이트	0.1	0.1	0.1	0.1
폴리소르베이트80	0.32	0.32	0.32	0.32
향료	0.05	0.05	0.05	0.05
합계	100.00	100.00	100.00	100.00

< 실험예 5>

화장료 조성물의 관능평가

상기 실시예 2를 통해 제조된 본 발명의 에센스 화장료 조성물에 대한 관능평가를 진행하였다.

관능평가는 10명의 30대 및 40대의 주부 패널들에게 상기 실시예 2에서 제조한 에센스 제품을 나누어 주고 2주간 사용하게 한 후 선호도를 각 항목에 대해 5점 척도(1 : 매우 나쁨 2 : 나쁨 3 : 보통 4 : 좋음 5 : 매우 좋음)로 조사하였다.

화장료 조성물의 관능평가 결과

평가항목	결과
평가항목	제조예1	제조예2	제조예3	제조예4
제형의 색상	4.1	3.9	4.3	3.8
제형의 질감(점도, 발림성등)	4.6	4.1	4	4.1
제형의 향에 대한 만족도	4.1	3.9	4.3	3.6
사용 후 피부 자극정도	4.8	4.8	4.4	4.4
사용 후 피부건조 및 보습력	3.8	4.1	3.9	4.5
사용후 피부톤 밝기	3.8	4	3.6	4.2
합계	25.2	24.8	24.5	24.6

그 결과 상기 표 7에서 나타낸 바와 같이, 제조예 1의 에센스(본 발명의 버섯다당체 함유 천연유래 복합물 함량 2% 및 글리세린 3% 함유) 제형에 대한 선호도가 가장 높은 것을 확인할 수 있었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims

노루궁뎅이버섯 추출물, 치마버섯 배양액, 정제수, 인삼 추출물, 엑토인, 1,2-헥산디올, 디프로필렌글라이콜 및 글리세롤 카프릴레이트를 포함하는 항산화, 항염증 및 피부주름 개선용 복합물.
삭제
제1항에 있어서,
상기 노루궁뎅이버섯 추출물은 노루궁뎅이버섯 자실체의 물 추출물인 것을 특징으로 하는 복합물.
제1항에 있어서,
상기 치마버섯 배양액은 치마버섯 균사체의 액체 배양물인 것을 특징으로 하는 복합물.
삭제
제1항에 있어서,
상기 노루궁뎅이버섯 추출물 및 치마버섯 배양액 각각은 복합물 100 중량부를 기준으로 0.2 내지 0.3중량부로 포함되는 것을 특징으로 하는 복합물.
제1항, 제3항, 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 복합물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증 및 피부주름 개선용 화장료 조성물.
제7항에 있어서,
상기 조성물은 활성산소 라디칼의 소거능을 통해 산화적 스트레스로부터 피부를 보호할 수 있는 항산화 기능을 가지며, NO 생성 억제를 통한 항염증 기능 및 히알루로니다아제 억제 활성을 통해 피부노화를 억제할 수 있는 기능을 갖는 것을 특징으로 하는 항산화, 항염증 및 피부주름 개선용 화장료 조성물.
제7항에 있어서,
상기 유효성분은 전체 조성물 중량 대비 0.1 내지 10%(w/v)로 포함되는 것을 특징으로 하는 항산화, 항염증 및 피부주름 개선용 화장료 조성물.
제7항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 유연 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 밀크로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 수중유 형 에멀젼, 유중수 형 에멀젼, 페이스크성 무수 생성물, 고체 무수 생성물, 소구체를 사용한 수성 상에서의 오일 분산물, 이온성 지질 소포체, 비이온성 지질 소포체, 연고, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 보디오일, 수중유 형 메이크업베이스, 유중수 형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도우, 마스카라, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 군 중에서 선택되는 1종의 제형인 것을 특징으로 하는 항산화, 항염증 및 피부주름 개선용 화장료 조성물.