KR102010826B1 - Alcaligenes faecalis GA41 having the activity of Promoting Growth of Ginseng and Use Thereof - Google Patents

Alcaligenes faecalis GA41 having the activity of Promoting Growth of Ginseng and Use Thereof

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KR102010826B1
KR102010826B1 KR1020170148269A KR20170148269A KR102010826B1 KR 102010826 B1 KR102010826 B1 KR 102010826B1 KR 1020170148269 A KR1020170148269 A KR 1020170148269A KR 20170148269 A KR20170148269 A KR 20170148269A KR 102010826 B1 KR102010826 B1 KR 102010826B1
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Abstract

본 발명은 인삼생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 균주 및 이의 이용에 관한 것으로, 보다 상세하게는 인삼 종자 또는 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 균주 및 이의 이용에 관한 것이다.The present invention relates to an alkali Genes Packaris strain having a ginseng growth promoting activity and its use, and more particularly to an alkali Genes Packaris strain having a growth promoting activity of ginseng seeds or ginseng roots and its use.

Description

인삼생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 GA41 및 이의 이용{Alcaligenes faecalis GA41 having the activity of Promoting Growth of Ginseng and Use Thereof}Alcaligenes faecalis GA41 having the activity of Promoting Growth of Ginseng and Use Thereof}

본 발명은 인삼생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 균주 및 이의 이용에 관한 것으로, 보다 상세하게는 인삼 종자 또는 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 균주 및 이의 이용에 관한 것이다.The present invention relates to an alkali Genes Packaris strain having a ginseng growth promoting activity and its use, and more particularly to an alkali Genes Packaris strain having a growth promoting activity of ginseng seeds or ginseng roots and its use.

고려인삼은 우리나라 고유의 중요한 천연자원으로서, 수 천년 전부터 영약 또는 선약으로 동양의학적으로는 물론 인류의 보건을 위해 오늘날까지 널리 사용되고 있는 한국의 대표적인 생약이다. 합성의약품의 부작용과 난치성 질병의 극복에 서양의학이 한계를 보임에 따라, 인삼을 비롯한 생약재 및 천연물에 대한 가치가 새롭게 부각되고 있다. 인삼은 암을 예방하고, 노화를 억제하며, 간장을 보호하고, 피로회복과 뇌기능을 강화하며, 최근에는 환경호르몬의 피해를 막아준다는 보고도 있다. 모든 생약재 중에서 으뜸인 인삼은 극히 제한된 환경에서 자라는 식물로서 다른 작물에 비하여 생육기간이 길고 재배방법 또한 특수하고 까다로워 지금까지 세계의 몇몇 나라에서만 생산되고 있다.Korean ginseng is Korea's unique natural resource, and it is a representative herbal medicine of Korea, which has been widely used for thousands of years as an oriental medicine or medicine for the health of mankind. As Western medicine has shown limitations in overcoming the side effects of synthetic drugs and intractable diseases, the value of herbal medicines and natural products including ginseng is emerging. Ginseng prevents cancer, inhibits aging, protects the liver, strengthens fatigue and improves brain function, and recently, it has been reported to prevent the damage of environmental hormones. Ginseng, the chief of all herbal medicines, is a plant that grows in extremely limited environments. It has a longer growth period than other crops, and its cultivation method is special and difficult, and has been produced only in some countries of the world.

한국은 기후풍토가 인삼의 자생과 재배지로 알맞아 약효가 탁월한 고려인삼을 생산하는 인삼 종주국이다. 그러나 인삼이 건강식품 또는 보건의약품으로서 갖추고 있는 이상적인 조건에 대하여 많은 국가들의 관심이 높아지고, 기존의 인삼생산국 뿐만 아니라 비생산국도 경쟁적으로 인삼의 연구와 생산을 장려하는 정책을 적극 펼쳐 나가고 있는 추세이다. 인삼을 재배하는 나라는 한국을 비롯한 중국, 일본, 미국, 유럽 일부 지역이며, 인삼을 소비하는 나라는 과거에는 그 대부분이 유교 문화권으로 한국, 중국, 일본, 대만 및 동남아 등이었으나 세계 각국에 인삼소비층이 확대되고 있다. 하지만, 고려인삼은 가격면에서 국제경쟁력이 약화되고 있는 실정이며, 국제경쟁력을 강화하기 위해서는 원료삼인 수삼품질 향상을 위한 재배기술 개발 연구가 필요하다. 특히 최근 인삼재배시 가장 시급한 문제점은 적정예정지의 절대부족, 산지토양 조건 악화로 인한 높은 발병율, 이에 따른 농약 사용량의 증가로 인한 잔류 농약으로 인해 수출하지 못하는 예가 많으므로 무농약 원료삼의 안전한 다수확 생산방법에 관한 집중연구가 시급히 요구되고 있다. 또한, 오늘날 다수확을 위해 화학비료를 집중적으로 사용함으로써 토양 생산성감소 및 환경오염 등의 문제를 야기시키고 있으며, 소비자들은 화학농약과 화학비료를 사용하지 않은 친환경 농산물을 선호 하고 있다. Korea is a ginseng seeding country that produces Korean ginseng with excellent medicinal effects due to its climate and climate suitable for its natural growth and cultivation. However, many countries are interested in the ideal condition that ginseng has as a health food or health drug, and not only existing ginseng producing countries but also non-producing countries are actively promoting policies to encourage the research and production of ginseng. Ginseng growers include Korea, China, Japan, the United States, and parts of Europe. In the past, most of the countries that consumed ginseng were Confucian culture, including Korea, China, Japan, Taiwan, and Southeast Asia. This is expanding. However, Korean ginseng has been weakening its international competitiveness in terms of price, and in order to strengthen its international competitiveness, research on the development of cultivation technology for improving the quality of raw ginseng is necessary. In particular, the most urgent problem in the recent ginseng cultivation is the lack of proper scheduled land, high incidence due to deteriorated soil conditions, and many pesticides cannot be exported due to residual pesticides due to the increase of pesticide use. Intensive research is urgently needed. In addition, intensive use of chemical fertilizers for high yields causes problems such as soil productivity and environmental pollution, and consumers prefer eco-friendly agricultural products without chemical pesticides and chemical fertilizers.

인삼은 인삼산업법에 근거하여 재배되는 작물로서, 재배과정 중에 질소인산칼륨 성분 중 하나 이상의 성분을 함유하는 무기질 비료로서 화학적 또는 물리적인 작용에 의하여 생산되는 비료를 사용할 수 없다. 따라서, 인삼을 재배하기 위하여 유기물 비료를 사용할 수 밖에 없으며, 다른 작물 보다 비배관리 및 생육관리가 어려운 것으로 알려져 있다. Ginseng is a crop that is cultivated under the Ginseng Industry Law. It is an inorganic fertilizer containing one or more of the components of potassium phosphate during the cultivation process and cannot use fertilizer produced by chemical or physical action. Therefore, organic fertilizers must be used to grow ginseng, and it is known that cultivation and growth management are more difficult than other crops.

인삼의 양분관리는 인삼 재배 예정지에 화본과(수단그라스, 옥수수, 맥류등) 작물과 콩과작물 및 고구마를 재배하여 3~4회 로터리 작업을 하고 깊이 갈이를 하여 충분히 부숙시키는 방법을 사용하고 있다. 유기물이 작물이 사용 가능하기 까지 많은 시간과 노동력이 필요하므로, 이를 대체할 수 있는 기술 개발이 필요하다.The nutrient management of ginseng uses the method of cultivating flowering plants (Sudangrass, corn, wheat, etc.), legume crops, and sweet potatoes on the planned ginseng cultivation site and rotating them three to four times and grinding them deeply. Since organics require a lot of time and labor to make crops available, there is a need to develop technologies to replace them.

유용미생물이 생산하는 IAA(indole-3-actic acid)는 천연 옥신 중에서 식물계에 널리 분포하고 있으며 극성이동을 하는 대표적인 확산형 옥신으로, 분열과 부정근 형성, 화분의 발아 및 신장촉진, 측근이나 화아형성, 뿌리발근 촉진에 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 최근들어 유용미생물이 생산하는 IAA, 사이드러포어 및 인산가용능을 통하여 식물의 생육촉진효과를 갖는 미생물제제를 개발하고 있으나 인삼에서의 현장 적용연구는 미흡한 실정이다.IAA (indole-3-actic acid) produced by useful microorganisms is widely distributed in the plant system among natural auxins and is a typical diffusion type auxin with polar movement. It can divide and form irregular roots, promote germination and kidney growth of pollen, form entourage or buds. It is known to play a role in promoting rooting. Recently, microorganisms having plant growth promoting effects have been developed through the use of IAA, siderpores and phosphate availability produced by useful microorganisms, but the field application research on ginseng is insufficient.

이에, 본 발명자들은 인삼생육 촉진효과를 갖는 미생물을 선발하고자 예의 노력한 결과, 인삼 생육 촉진효과를 가지는 알카리제네스 패카리스 균주를 선별하였으며, 옥신생성능력이 우수하며 인삼 종자 및 뿌리에 생육 촉진효과를 가지는 것으로 확인하고, 본 발명을 완성하였다.Therefore, the present inventors have made an effort to select a microorganism having a ginseng growth promoting effect, as a result, selected Alkali genes Packaris strain having a ginseng growth promoting effect, excellent auxin production ability and having a growth promoting effect on ginseng seeds and roots It confirmed that it and completed this invention.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 본 발명의 첫번째 해결하려는 과제는 인삼 종자 또는 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 균주를 제공하는데 목적이다.The present invention has been made to solve the above problems, the first object of the present invention is to provide an alkali Genes Packaris strain having growth promoting activity of ginseng seed or ginseng root.

또한, 본 발명은 옥신(Auxin) 생성능, 사이드로포어(siderophore) 생성능 또는 인산(phosphoric acid) 가용능을 가지는 알켈리제네스 패카리스 균주를 제공하는데 목적이 있다.In addition, an object of the present invention is to provide a strain of Alcaligenes Packaris having auxin (Auxin) production capacity, siderophore production capacity or phosphoric acid availability.

이 뿐만 아니라, 본 발명은 인삼생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 균주를 포함하는 미생물 제제를 제공하는데 목적이 있다.In addition to this, an object of the present invention is to provide a microbial preparation comprising an alkali Genes Packaris strain having ginseng growth promoting activity.

상술한 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 수탁번호 KFCC11745P의 알칼리제네스 패카리스 균주를 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides an alkali Genes Packaris strain of Accession No. KFCC11745P.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 균주는 인삼생육 촉진 활성을 가질 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the strain may have ginseng growth promoting activity.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 균주는 인삼 종자 또는 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성을 가질 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the strain may have a growth promoting activity of ginseng seed or ginseng root.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 균주는 인인삼생육 촉진용 미생물 제제용 균주일 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the strain may be a strain for microbial preparation for promoting ginseng growth.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 균주는 옥신(Auxin) 생성능, 사이드로포어(siderophore) 생성능 또는 인산(phosphoric acid) 가용능을 가질 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the strain may have auxin (Auxin) generating ability, siderophore generating ability or phosphoric acid availability.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 균주는 서열번호 1의 16S rRNA 염기서열을 포함할 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the strain may comprise the 16S rRNA base sequence of SEQ ID NO: 1.

한편, 본 발명은 앞서 언급한 칼리제네스 패카리스 균주, 그의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제를 제공한다.On the other hand, the present invention provides a microbial agent for promoting ginseng growth, including the above-mentioned Caligenes packaris strain, its culture or a mixture thereof as an active ingredient.

또한, 본 발명은 앞서 언급한 칼리제네스 패카리스 균주, 그의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제를 이용하는 것을 특징으로 하는 인삼생육 촉진 방법을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a method for promoting ginseng growth, characterized in that the use of a microbial agent for promoting ginseng growth, including the above-mentioned Caligenes packaris strain, its culture or a mixture thereof as an active ingredient.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 배양액은 상기 균주를 LB(Luria Bertani) 배지, NB(nutrient broth) 배지, BHI(brain heart infusion) 배지, KB(King's medium B) 또는 TSB(Tryptic Soy Broth) 배지로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 배지에서 20℃ 내지 40℃에서 배양하여 수득한 것일 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the culture medium is the strain Luria Bertani (LB) medium, nutrient broth (NB) medium, brain heart infusion (BHI) medium, King's medium B (KB) or Tryptic Soy Broth (TSB) It may be obtained by culturing at 20 ℃ to 40 ℃ in any one or more medium selected from the group consisting of the medium.

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 인삼생육 촉진 방법은 인삼 종자의 줄기 길이를 6 ~ 10%, 인삼 종자의 뿌리 길이를 10 ~ 14%, 인삼 종자의 무게를 3 ~ 7% 증가시킬 수 있다.As a preferred embodiment of the present invention, the method for promoting ginseng growth may increase the stem length of the ginseng seed 6 to 10%, the root length of the ginseng seed 10 to 14%, the weight of the ginseng seed 3 to 7%. .

본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 인삼생육 촉진 방법은 인삼 뿌리의 근중을 30 ~ 40%, 근경을 6 ~ 10%, 근장을 4 ~ 8% 증가시킬 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the method for promoting ginseng growth may increase the root weight of ginseng root, 30-40%, root diameter 6-10%, root length 4-8%.

본 발명의 인삼생육 촉진 활성을 가지는 알칼리제네스 패카리스 GA41 및 이의 이용은 옥신(Auxin) 생성능, 사이드로포어(siderophore) 생성능 및 인산(phosphoric acid) 가용능 등의 생물비료 활성을 가지므로, 인삼생육을 촉진하는데 우수한 효과가 있다.Alkali genes Packaris GA41 having a ginseng growth promoting activity of the present invention and its use has biofertilizer activities such as auxin production, siderophore production capacity and phosphoric acid solubility, ginseng growth It has an excellent effect on promoting it.

도 1은 본 발명에서 선별한 인삼 생육 촉진 활성을 가지는 GA41 균주의 및 배양 특성을 나타낸 그림이다.
도 2는 본 발병에서 선별한 GA41 균주를 다른 미생물 균주와 비교한 계통도를 분석하여 균주의 분류학적 위치를 나타낸 데이터이다.
도 3는 본 발명에서 선별한 GA41 균주의 인삼 종자 생육 촉진 활성을 보여주는 그림이다.
도 4는 본 발명에서 선별한 GA41 균주의 인삼 뿌리 생육 촉진 활성을 보여주는 그림이다.
도 5는 본 발명에서 선별한 GA41 균주의 서열번호 1의 16S rRNA 염기서열정보를 나타낸 도면이다.
1 is a diagram showing the and culture characteristics of GA41 strain having ginseng growth promoting activity selected in the present invention.
Figure 2 is a data showing the taxonomic location of the strain by analyzing the phylogeny of GA41 strains selected in the present disease compared to other microbial strains.
Figure 3 is a diagram showing the ginseng seed growth promoting activity of the selected strain GA41 in the present invention.
Figure 4 is a diagram showing the ginseng root growth promoting activity of the strain selected in the present invention.
5 is a view showing 16S rRNA nucleotide sequence information of SEQ ID NO: 1 of the GA41 strain selected in the present invention.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

상술한 바와 같이, 인삼은 인삼산업법에서 의거 질소, 인산, 칼륨을 주성분으로 하는 화학적 비료를 사용할 수 없다. 따라서, 지금까지 수단그라스, 호밀, 옥수수 등 화본과, 콩과 고구마 같은 작물을 재배하여 인삼 예정지 토양에 투입하는 경종적 방법이 사용되고 있으나, 시간과 노동력이 많이 필요하여 이를 해결할 수 있는 비배관리 기술이 필요하다. As mentioned above, ginseng cannot use chemical fertilizers based on nitrogen, phosphoric acid and potassium under the Ginseng Industry Law. Therefore, until now, a seedling method of cultivating crops such as Sudangrass, rye and corn, and crops such as soybeans and sweet potatoes and using them in the ginseng site soil is required. Do.

본 발명은 수탁번호 KFCC11745P의 알칼리제네스 패카리스(Alcaligenes faecalis) 균주를 포함한다.The present invention includes Alcaligenes faecalis strain of accession number KFCC11745P.

이 때, 본 발명의 균주는 인삼생육 촉진 활성을 가질 수 있고, 바람직하게는 인삼 종자 또는 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성을 가질 수 있다.At this time, the strain of the present invention may have a ginseng growth promoting activity, preferably may have a growth promoting activity of ginseng seeds or ginseng root.

또한, 본 발명의 균주는 옥신(Auxin) 생성능, 사이드로포어(siderophore) 생성능 또는 인산(phosphoric acid) 가용능을 가질 수 있다.In addition, the strain of the present invention may have auxin (Auxin) generating ability, siderophore (generating ability) or phosphoric acid (phosphoric acid) availability.

본 발명은 전국 인상 주산지로부터 인삼 근권 토양을 채집한 토양 시료로부터 균주를 분리하였으며, 인삼생육 촉진 활성을 가지는 GA41 균주를 선별하였다.(도 1)In the present invention, strains were isolated from soil samples collected from ginseng root zone soils of the national impression area, and GA41 strains having ginseng growth promoting activity were selected.

선별된 GA41 균주는 생물비료활성을 가지고 있으며, 이를 확인하기 위해, 옥신(Auxin) 생성능, 사이드로포어(siderophore) 생성능 및 인산(phosphoric acid) 가용능을 확인한 결과, 하기 표 1에 기재된 바와 같이 IAA(indole-3-actic acid)의 생성, 사이드로포어의 생성 및 인산 가용능이 확인 되었다.Selected GA41 strains have a biofertilizer activity, and to confirm this, auxin (Auxin) production capacity, siderophore production capacity and phosphoric acid (availability of phosphoric acid) was confirmed, as shown in Table 1 below The formation of (indole-3-actic acid), the formation of sidelopores and the availability of phosphate were confirmed.

또한, 선별된 GA41 균주는 인삼생육 촉진 활성을 가지고 있으며, 이를 확인하기 위해, 인삼 종자의 생육 촉진 활성 및 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성을 확인할 결과, 하기 표 3 및 표 4에 기재된 바와 같이 인삼 종자 및 인삼 뿌리의 생육이 촉진됨을 확인하였다.In addition, the selected GA41 strain has ginseng growth promoting activity, in order to confirm this, as a result of confirming the growth promoting activity and growth promoting activity of the ginseng root, ginseng seeds and as shown in Table 3 and Table 4 below It was confirmed that the growth of ginseng root is promoted.

본 발명에서는 선별한 균주를 동정하기 위해 16S rRNA 서열을 분석한 결과, GA41 균주는 서열번호 1의 16S rRNA 염기서열을 가지며, 알칼리제네스 패카리스(Alcaligenes faecalis) 종에 해당하는 것을 확인할 수 있었으며, 상기 균주를 알칼리제네스 패카리스 GA41 (이하 ‘GA41 균주’로 표기)로 명명하였으며, 한국미생물보존센터에 기탁하였다 (기탁번호 KFCC11745P).In the present invention, as a result of analyzing the 16S rRNA sequence to identify the selected strain, GA41 strain has a 16S rRNA sequence of SEQ ID NO: 1, it was confirmed that corresponds to the species Alcaligenes faecalis, The strain was named Alkaneness Packaris GA41 (hereinafter referred to as 'GA41 strain') and was deposited with the Korea Microorganism Conservation Center (Accession No. KFCC11745P).

한편, 본 발명은 앞서 언급한 알칼리제네스 패카리스 균주, 상기 균주의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제를 포함한다.On the other hand, the present invention includes a microbial agent for promoting ginseng growth, including the above-mentioned alkali genesis Packaris strain, the culture medium or a mixture thereof as an active ingredient.

또한, 본 발명은 앞서 언급한 알칼리제네스 패카리스 균주, 상기 균주의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제를 이용하는 것을 특징으로 하는 인삼생육 촉진 방법을 포함한다.In addition, the present invention includes a method for promoting ginseng growth, characterized in that the above-mentioned alkali genesis packaris strain, a microorganism for promoting ginseng growth comprising a culture medium or a mixture thereof as an active ingredient.

본 발명의 인삼생육 촉진용 미생물 제제 및 인삼생육 촉진 방법의 배양액은 앞서 언급한 알칼리제네스 패카리스 균주를 LB(Luria Bertani) 배지, NB(nutrient broth) 배지, BHI(brain heart infusion) 배지, KB(King's medium B) 또는 TSB(Tryptic Soy Broth) 배지로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 배지에서 배양할 수 있으나, 본 발명의 알칼리제네스 패카리스 균주의 인삼생육 촉진 활성을 높게 유지시킬 수 있는 배지라면 제한 없이 사용할 수 있다.The culture medium of the microorganism preparation for promoting ginseng growth and the method for promoting ginseng growth of the present invention is the above-mentioned alkaline genes Packaris strain Luria Bertani (LB) medium, nutrient broth (NB) medium, brain heart infusion (BHI) medium, KB ( Can be cultured in any one or more medium selected from the group consisting of King's medium B) or TSB (Tryptic Soy Broth) medium, but if the medium that can maintain a high ginseng growth promoting activity of the Alkali ness Packaris strain of the present invention is limited Can be used without

또한, 상기 배양액은 20℃ 내지 40℃의 배양온도, 바람직하게는 25℃ 내지 35℃의 배양온도를 가질 수 있으나, 반드시 이에 제한되는 것은 아니며, 본 발명의 알칼리제네스 패카리스 균주의 인삼생육 촉진 활성을 높게 유지시킬 수 있는 배양온도 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있다. 하지만, 배양온도가 20℃ 미만이면, 균사생육이 아주 느려 장시간 배양해야 할 문제가 발생할 수 있으며, 40 ℃를 초과하면 균사생육 억제와 장기간 배양시 균주 사멸의 문제가 발생할 수 있다.In addition, the culture medium may have a culture temperature of 20 ℃ to 40 ℃, preferably a culture temperature of 25 ℃ to 35 ℃, but is not necessarily limited to this, the ginseng growth promoting activity of the alkali Genes Packaris strain of the present invention If the culture temperature conditions that can maintain the high can be used without limitation. However, if the culture temperature is less than 20 ℃, mycelial growth is very slow may cause a problem to be cultured for a long time, if it exceeds 40 ℃ may cause problems of mycelial growth inhibition and strain killing during long-term culture.

한편, 본 발명의 인삼생육 촉진 방법은 인삼 종자의 줄기 길이를 6% 이상, 바람직하게는 6 ~ 10%, 더욱 바람직하게는 7 ~ 9% 증가시킬 수 있다. 또한, 인삼 종자의 뿌리 길이를 10% 이상, 바람직하게는 10 ~ 14%, 더욱 바람직하게는 11 ~ 13% 증가시킬 수 있다. 또한, 인삼 종재의 무게를 3% 이상, 바람직하게는 3 ~ 7%, 더욱 바람직하게는 4 ~ 6% 증가시킬 수 있다.On the other hand, the method of promoting ginseng growth of the present invention can increase the stem length of the ginseng seed 6% or more, preferably 6-10%, more preferably 7-9%. In addition, the root length of the ginseng seed may be increased by 10% or more, preferably 10-14%, more preferably 11-13%. In addition, the weight of ginseng seed may be increased by 3% or more, preferably 3-7%, more preferably 4-6%.

나아가, 본 발명의 인삼생육 촉진 방법은 인삼 뿌리의 근중을 30% 이상, 바람직하게는 30 ~ 40%, 더욱 바람직하게는 32 ~ 35% 증가시킬 수 있다. 또한, 인삼 뿌리의 근경을 6% 이상, 바람직하게는 6 ~ 10%, 더욱 바람직하게는 7 ~9% 증가시킬 수 있다. 또한, 인삼 뿌리의 근장을 4% 이상, 바람직하게는 4 ~ 8%, 더욱 바람직하게는 5 ~7% 증가시킬 수 있다.Furthermore, the method for promoting ginseng growth of the present invention may increase the root weight of ginseng root by more than 30%, preferably 30 to 40%, more preferably 32 to 35%. In addition, the root diameter of the ginseng root may be increased by 6% or more, preferably 6-10%, more preferably 7-9%. In addition, the root length of the ginseng root can be increased by 4% or more, preferably 4-8%, more preferably 5-7%.

이하 본 발명을 바람직한 실시예를 참고로 하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to a preferred embodiment so that those skilled in the art can easily practice the present invention. As those skilled in the art would realize, the described embodiments may be modified in various different ways, all without departing from the spirit or scope of the present invention.

실시예 1 : 인삼생육 촉진 활성을 가지는 유용미생물 분리Example 1: Useful microorganisms having ginseng growth promoting activity

인삼에 생육촉진효과를 갖는 식물생육촉진근권세균(PGPR균)을 분리하기 위하여, 전국 인삼 주산지로부터 20㎝∼30cm 깊이의 인삼 근권 토양을 채집하였다. 멸균 생리식염수 90㎖에 채집한 토양시료 10g을 첨가하여 180 rpm으로 30분간 진탕 배양기에서 진탕 후 십진 희석하였다. 각각의 희석액 100㎕를 King’s B 배지와 R2A agar 배지에 도말하고 30℃에서 5일간 배양하였다. 각 배지에서 외관상 차이를 보이는 단일 집락을 순수분리하고, 분리 균주는 20% glycerol을 첨가하여 -70도에 보관하면서 생물 비료 활성 조사를 위한 공시균주로 사용하였다.In order to isolate plant growth promoting myobacteria (PGPR), which have a growth promoting effect on ginseng, ginseng rooting soil of 20cm ~ 30cm depth was collected from main ginseng. 10 g of the soil sample collected in 90 ml of sterile physiological saline was added, and the mixture was shaken in a shaking incubator at 180 rpm for 30 minutes, and then diluted in decimal. 100 μl of each dilution was plated in King's B medium and R2A agar medium and incubated at 30 ° C. for 5 days. A single colony showing apparent differences in each medium was purely separated, and the isolated strain was used as a test strain for investigating biofertilizer activity while storing at -70 degrees with 20% glycerol added.

상기와 같은 방법으로 20개 지역의 인삼 재배 토양 및 근권에서 채집한 시료로부터 콜로니 형태 및 색깔이 다른 2,000개의 균주를 분리하였다. 분리한 균주들은 초저온 냉동고에 보관하면서 LB agar에 계대한 후 선택배지를 이용하여 인산 가용능, 사이드로포어 생성능 및 옥신 생성능 등을 검정하였다. 이러한 결과 옥신 생성효과가 우수하고 인삼생육 촉진효과를 갖는 그람음성 세균인 GA41 균주를 선발 하였다(도 1).In the same manner as above, 2,000 strains having different colony shapes and colors were isolated from samples collected from 20 ginseng cultivated soils and rhizospheres. The isolates were stored in cryogenic freezers and assayed for phosphate availability, siderophore production, and auxin production using selective medium after passage to LB agar. As a result, GA41 strain, a Gram-negative bacterium having excellent auxin generating effect and promoting ginseng growth, was selected (FIG. 1).

실시예 2 : 생물비료활성 확인Example 2: Confirmation of biofertilizer activity

(1) 옥신 생성능 확인(1) Confirmation of auxin generating ability

실시예 1에 기재된 바와 같이 옥신을 생성하는 균주를 선발하기 위하여 수집된 균주들은 0.1% L-tryptophan이 포함된 R2A(Reasoner's 2A agar, Difco) agar 배지에 도말하여 30℃에서 2일간 배양하였다. 옥신생성능 검정은 Park 등(2010)의 방법을 개선하여 사용하였다. R2A 배지에서 자라나온 colony 위에 Salkowski 시약을 분무기로 분무하여 균총 주변에 분홍색의 띄를 갖는 균주들을 옥신생산 1차 균주로 선발하였다. 선발 균주는 0.1 % L-tryptophan이 첨가된 R2A 배지(pH7.0)에 접종하고 180rpm으로 30℃에서 24시간 진탕 배양하였다. 배양액을 4℃, 4,000rpm 조건으로 15분간 원심분리 하여 균체를 침강시킨 후 상등액만을 수집하였다. 수집한 상등액은 Salkowski 시약과 1:2의 비율로 혼합하여 30분간 반응시키고 분광광도계(Cary 300 UV-VIS, Agilent, USA)을 이용하여 535nm에서 흡광도를 측정하여 옥신생성능을 확인하였다. 표준곡선은 R2A 배지에 inodole-3-acetic acid(IAA, Sigma, USA)를 0, 10, 25, 50, 75, 100ppm의 농도로 첨가한 후 535nm에서 OD값을 측정한 후 작성하였다. As described in Example 1, the collected strains for selection of auxin-producing strains were plated in R2A (Reasoner's 2A agar, Difco) agar medium containing 0.1% L-tryptophan and incubated at 30 ° C. for 2 days. Auxin production assay was used to improve Park's method (2010). The Salkowski reagent was sprayed onto the colony grown in R2A medium by spraying with a nebulizer to select pink strains around the flora as auxin-producing primary strains. The selected strains were inoculated in R2A medium (pH7.0) to which 0.1% L-tryptophan was added and incubated for 24 hours at 30 ° C at 180 rpm. The culture solution was centrifuged at 4 ° C. and 4,000 rpm for 15 minutes to settle the cells, and only the supernatant was collected. The collected supernatant was mixed with Salkowski reagent at a ratio of 1: 2 and reacted for 30 minutes, and the absorbance was measured at 535 nm using a spectrophotometer (Cary 300 UV-VIS, Agilent, USA) to confirm the auxin performance. Standard curves were prepared after adding inodole-3-acetic acid (IAA, Sigma, USA) to R2A medium at concentrations of 0, 10, 25, 50, 75, and 100 ppm and measuring the OD at 535 nm.

(2) 사이드로포어 생성능 확인 (2) Checking the sideropor generation capability

실시예 1에 기재된 바와 같이 수집 균주들의 사이드로포어 생성능은 Louden et. al,(2011)의 방법에 따라 검정하였다. 증류수 50ml 에 CAS 60 mg을 넣고 녹인 다음, 증류수 40ml에 73mg의 hexadecyl trimethylammonium bromide를 녹인 용액을 첨가하고, 10mM Hcl 10ml에 iron(III)chloridehexahydrate 2.7mg를 첨가하여 잘 섞은 후 고압 멸균하여 청색염료를 준비하였다. 증류수 750ml, agar 15g, 10X MM9 salt 100ml, PIPES 32.24g, 10g casamino acid 용액 30ml, vitamin과 carbon source를 혼합하여 pH 6.8로 조정하고 고압 멸균하여 50℃ 내외로 식힌 후 청색염료를 혼합하여 CAS 배지를 조제하였다. 순수 분리된 균주는 CAS(Chrome Azurol Sulfonate) 배지에 접종한 후 30℃에서 1주일간 배양하면서 균총 주위에 황색띠 생성유무를 조사하여 사이드로포어 생성능을 판정하였다. As described in Example 1, the siderophore generating ability of the collection strains was determined by Louden et. Assay according to the method of al, (2011). Dissolve 60 mg of CAS in 50 ml of distilled water, add a solution of 73 mg of hexadecyl trimethylammonium bromide in 40 ml of distilled water, add 2.7 mg of iron (III) chloridehexahydrate to 10 ml of 10 mM Hcl, mix well, and then sterilize blue dye to prepare a blue dye. It was. Distilled water 750ml, agar 15g, 10X MM9 salt 100ml, PIPES 32.24g, 10g casamino acid solution 30ml, adjusted to pH 6.8 by mixing with vitamin and carbon source, autoclaved to cool to around 50 ℃ and then mixed with blue dye It prepared. Purely isolated strains were inoculated in CAS (Chrome Azurol Sulfonate) medium and incubated at 30 ° C. for 1 week to examine the presence or absence of yellow strips around the flora to determine the siderophore generation ability.

(3) 인산 가용능 검정(3) Phosphate Solubility Assay

실시예 1에 기재된 바와 같이 불용성 인산 가용능은 Ca(PO4)가 0.5% 첨가된 Pikovskaya agar 배지(Himedia, India)를 이용한 plate assay 법으로 확인 하였다(Chatlietal,2008). 근권으로부터 순수 분리한 균주들을 Pikovskaya agar 배지에 접종하고, 30℃에서 1주일 간 배양하면서 균총 주위에 투명대를 형성하는 것을 조사하여 인산가용능의 유무를 판정하였다. 1차 선발한 균주는 Pikovskaya agar 배지위에 4cm 길이로 평형하게 접종하고, 5일 동안 30℃ 조건에서 배양하면서 투명대의 크기를 조사하였다. As described in Example 1, the insoluble phosphate solubility was confirmed by plate assay using Pikovskaya agar medium (Himedia, India) to which 0.5% Ca (PO4) was added (Chatlietal, 2008). Strains purely isolated from the rhizosphere were inoculated in Pikovskaya agar medium and cultured for one week at 30 ° C to form a zona pellucida around the flora, and the presence or absence of phosphate availability was determined. The first selected strains were inoculated equilibrated in Pikovskaya agar medium at 4 cm in length, and cultured at 30 ° C. for 5 days to investigate the size of the zona pellucida.

(4) 결과(4) results

상기 옥신 생성능 확인, 사이드로포어 생성능 확인 및 인산 가용능 검정 결과를 하기 표 1에 나타내였다.Confirmation of the auxin production ability, sideropore production ability and phosphate solubility assay results are shown in Table 1 below.

구분division IAA 생성(㎍/㎖)IAA production (μg / ml) 사이드로포어 생성Create Sidelopor 인산 가용능 Phosphate Availability GA41 균주GA41 strain 161.44161.44 ++ +a + a

* a Symbol: -,+,++ indicate no(<1mm), moderate(1-3mm) and strong(> 3mm in clear zone) activity, respectively.* a Symbol:-, +, ++ indicate no (<1mm), moderate (1-3mm) and strong (> 3mm in clear zone) activity, respectively.

표 1에 나타난 바와 같이, GA41 균주는 IAA 형성, 사이드로포어 및 인산가용능 등 생물비료활성을 가지고 있는 것을 확인하였다.As shown in Table 1, the GA41 strain was confirmed to have biofertilizer activity, such as IAA formation, sideropore and phosphate availability.

실시예 3 : 선발된 GA41 균주의 동정Example 3 Identification of Selected GA41 Strains

본 발명의 실시예 1에서 선별한 GA41 균주를 동정하기 위하여 분자생 물적 방법을 이용하였다.Molecular biological methods were used to identify GA41 strains selected in Example 1 of the present invention.

먼저, 실시예 1에서 선별한 GA41 균주를 LB 배지 20 ㎖에 접종하여 30℃에서 1일간 배양 한 후 13,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 균체를 수확하였다.First, the GA41 strains selected in Example 1 were inoculated in 20 ml of LB medium, incubated at 30 ° C. for 1 day, and then centrifuged at 13,000 rpm for 10 minutes to harvest the cells.

퀴아젠 지노믹 DNA 추출 키트(Qiagen Genomic DNA Extraction Kit; Qiagen, 독일)를 이용하여 수확한 균체에서 지노믹 DNA(genomic DNA)를 분리하였다. 16S rRNA 유전자 부위를 증폭하기 위하여 하기 표 2의 일반적인 프라이머(universal primer) 27F 및 1492R(마크로젠, 한국)를 이용하여 PCR을 수행하였다.Genomic DNA (Genomic DNA) was isolated from the harvested cells using the Qiagen Genomic DNA Extraction Kit (Qiagen, Germany). PCR was performed using the universal primers 27F and 1492R (Macrogen, Korea) shown in Table 2 below to amplify the 16S rRNA gene region.

프라이머 서열Primer sequence 구분division 염기서열Sequence 서열번호SEQ ID NO: 27F27F AGAGTTTGATCMTGGCTCAGAGAGTTTGATCMTGGCTCAG 서열번호 2SEQ ID NO: 2 1492R1492R TACGGYTACCTTGTTACGACTTTACGGYTACCTTGTTACGACTT 서열번호 3SEQ ID NO: 3

PCR 산물은 QIAquick PRC purification kit(Qiagen, 독일)를 이용하여 정제하였으며 염기서열 분석은 (주) 마크로젠에 의뢰하여 분석하였으며, 미국 국립생물정보센터(National Center for Biotechnology Information; NCBI)에서 블라스트 서치(Blast search)를 통해 균주를 동정하였다.PCR products were purified using the QIAquick PRC purification kit (Qiagen, Germany), and sequence analysis was performed by Macrogen Co., Ltd., and blast search (Blast) at the National Center for Biotechnology Information (NCBI). The strain was identified through search.

선발한 균주의 동정을 위하여 16S rRNA 유전자를 분석 한 결과, GA41 균주는 서열번호 1의 16S rRNA 염기서열(1471bp)을 가지는 것을 확인하였다.(도 5)As a result of analyzing the 16S rRNA gene for identification of the selected strain, it was confirmed that the GA41 strain had the 16S rRNA sequence (1471bp) of SEQ ID NO. 1 (FIG. 5).

NCBI 웹에서 상동성 분석을 한 결과, 알카리제네스 패카리스(Alcaligenes faecalis)ZJB-09133(GenBank No. 438851)과 99%의 높은 상동성을 보이는 것을 확인하였으며, 본 발명의 GA41 균주는 알카리제네스 패카리스(Alcaligenesfaecalis)종에 해당하는 것을 확인하였다. As a result of homology analysis on NCBI web, it was confirmed that the homology with Alcaligenes faecalis ZJB-09133 (GenBank No. 438851) was 99% high, and the GA41 strain of the present invention was Alcaligenes pacaris. It was confirmed that (Alcaligenesfaecalis) species.

이에, 본 발명에서는 GA41 균주를 알카리제네스 패카리스 GA41(이하 'GA41 균주'로 표기)로 명명하였으며, 한국미생물보존센터에 기탁하였다(수탁번호 KFCC11745P).Thus, in the present invention, GA41 strain was named as Alcaligenes Packaris GA41 (hereinafter referred to as 'GA41 strain'), and deposited in the Korea Microorganism Conservation Center (Accession Number KFCC11745P).

실시예 4 : 선발된 GA41 균주의 계통도 분석Example 4 Schematic Analysis of Selected GA41 Strains

본 발명의 실시예 1에서 선별한 GA41 균주의 분류학적 위치를 확인하기 위해 알카리제네스 패카리스 표준균주의 염기서열은 미국 국립생물정보센터에서 운영 중인 서버(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)를 통해서 다운받아, seqman (DNASTAR, USA) 프로그램을 이용하여 정렬하였다. 정렬된 염기서열 분석은 MGEGA 4.0 프로그램(Tamura et al., 2011)을 사용하였으며, Neighbor-joining 알고리즘을 이용하여 계통도를 작성하였고, bootstrapping을 1000회 반복으로 실시하여 견고성을 확인하였다.In order to confirm the taxonomic location of the GA41 strain selected in Example 1 of the present invention, the base sequence of the Alkali genesis Packaris standard strain is a server operated by the US National Center for Biological Information (http: //www.ncbi.nlm.nih). .gov) and sorted using the seqman (DNASTAR, USA) program. Aligned sequencing was performed using the MGEGA 4.0 program (Tamura et al., 2011), a schematic was generated using the Neighbor-joining algorithm, and the robustness was confirmed by 1000 iterations of bootstrapping.

그 결과, 또한, 16S rRNA 염기서열을 바탕으로 한 계통수 분석 결과, 선발한 GA41 균주는 Alcaligenes faecalis ZJB-09133(GQ438851)와Alcaligenes faecalis JF682513와 높은 유연 관계를 가지고 있는 것으로 확인되었으며, 계통수의 안정성을 나타내는 Bootstrap 값도 47%로 확인되었다(도 2).As a result, phylogenetic analysis based on 16S rRNA sequences revealed that the selected GA41 strain had a high degree of flexibility with Alcaligenes faecalis ZJB-09133 (GQ438851) and Alcaligenes faecalis JF682513. The Bootstrap value was also found to be 47% (FIG. 2).

실시예 5 : 선발된 GA41 균주의 인삼 종자의 생육 촉진 활성 확인Example 5 Confirmation of Growth Promoting Activity of Ginseng Seeds of Selected GA41 Strains

인삼 종자는 충북 음성군에 위치한 국립원예특작과학원 인삼특작부 시험포장에서 2014년 7월경에 채종하여 개갑이 완료된 재래종 종자를 사용하여 분석하였다. 인삼 종자는 1% sodium hypochlorite로 5분간, 70% 에탄올로 1분간 2회 소독하고, 멸균수로 3회 세척하였다. 1% agar가 함유되어 있는 MS배지를 사각 페트리 디쉬(SPL square dish, 126×126×20mm)에 40ml씩 분주하고 10도 기울여 굳힌 다음에, 소독한 종자를 MS배지 위에 5씩 올려 놓고 20℃ 배양기에서 1달 동안 배양 하였다. 실시예 1에서 선발된 GA41 균주는 0.1 % L-tryptophan이 첨가된 R2A 배지(pH7.0)에 접종하고 180rpm으로 30℃에서 24시간 진탕 배양하였다. 배양액은 0.2㎛ Membrane filter 로 여과한 후 50ul씩 5일 간격으로 4주 동안 인삼 종자에 처리하였다. 인삼 종자의 생육 촉진 활성 조사는 배양액 처리 한달 후에 실시 하였으며, 종자에서 출현된 뿌리 및 줄기 생육을 조사하여 표 3 및 도 3에 나타내었다.Ginseng seeds were harvested in July 2014 at the National Institute of Horticultural & Herbal Science, Gwangju, Korea. Ginseng seeds were sterilized twice with 1% sodium hypochlorite for 5 minutes and 70% ethanol for 1 minute and washed three times with sterile water. Dispense 40 ml of MS medium containing 1% agar into a square Petri dish (126 × 126 × 20mm) and incline it at 10 degrees. Incubated for 1 month at. The GA41 strain selected in Example 1 was inoculated in R2A medium (pH7.0) to which 0.1% L-tryptophan was added, and the culture was shaken for 24 hours at 30 ° C. at 180 rpm. The culture solution was filtered through a 0.2 ㎛ Membrane filter and treated with 50ul each ginseng seed for 5 weeks at 5 days intervals. The growth promotion activity of ginseng seeds was examined one month after the treatment of the culture medium, and the root and stem growths appeared in the seeds are shown in Table 3 and FIG. 3.

구분division 줄기길이(mm)Stem Length (mm) 뿌리길이(mm)Root Length (mm) 무게(mg)Weight (mg) GA41 균주GA41 strain 26.9126.91 12.1112.11 7575 무처리No treatment 24.7024.70 10.7210.72 7171

상기 표 3에 기재된 바와 같이, GA41 균주로 처리한 인삼 종자는 무처리한 인삼 종자보다 뿌리길이, 줄기길이 및 무게가 증가되었음을 확인할 수 있었다. 구체적으로, GA41 균주로 처리한 인삼 종자는 무처리한 인삼 종자보다 줄기길이는 약 8% 더 증가했고, 뿌리길이는 약 12% 더 증가했으며, 무게는 약 5% 더 증가했음을 확인할 수 있었다.As shown in Table 3, the ginseng seed treated with the GA41 strain was found to increase the root length, stem length and weight than the untreated ginseng seed. Specifically, the ginseng seed treated with the GA41 strain increased about 8% more stem length, increased about 12% more root length, and increased about 5% more weight than the untreated ginseng seed.

실시예 6 : 선발된 GA41 균주의 인삼 뿌리의 생육 촉진 활성 확인Example 6 Confirmation of Growth Promoting Activity of Ginseng Roots of Selected GA41 Strains

인삼 뿌리의 생육 촉직 활성 실험은 충북 음성군 소이면에 위치한 인삼 포장에서 수행하였다. 충북 음성군 금왕읍 인삼재배농가에서 구입한 묘삼을 포장에 1칸(1.8m×0.9m=1.62m2)당 72개씩 이식하였다. 병해충 방제 및 기타 재배는 농촌진흥청 인삼표준경작법에 준하여 수행하였다. 실시예 1에서 선발된 GA41 균주는 0.1% L-tryptophan이 첨가된 R2A 배지에 접종하여 30℃, 180rpm으로 2일간 배양하였다. 균주 배양액은 묘삼의 출아가 완료된 날부터 1차 처리를 시작하여 6 log CFU/ml 희석하여 칸 당 5L씩 한달 간격으로 6회 관주 처리하였다. 인삼 생육 조사는 배양액을 최종 처리한 한 달 후에 칸당 20개씩 인삼을 수확하여 뿌리길이 및 무게를 측정하여 표 4 및 도 4에 나타내었다.Growth test of ginseng roots was carried out in ginseng field located in Somyeon, Negong-gun, Chungbuk. 72 ginseng seedlings from the ginseng cultivation farm in Geumwang-eup, Eumseong-gun, Chungbuk were transplanted in a box (1.8m × 0.9m = 1.62m2). Pest control and other cultivation were carried out according to the Ginseng Standard Cultivation Act. The GA41 strain selected in Example 1 was inoculated in R2A medium to which 0.1% L-tryptophan was added and incubated at 30 ° C. and 180 rpm for 2 days. Strain cultures were first treated from the day of germination of seedlings, diluted 6 log CFU / ml, and treated with irrigation 6 times at a monthly interval of 5L per compartment. Ginseng growth survey is shown in Table 4 and 4 by measuring the root length and weight by harvesting 20 ginseng per compartment after one month of the final treatment of the culture solution.

구분division 근중(g)Root weight (g) 근경(mm)Root diameter (mm) 근장(cm)Length (cm) GA41 균주GA41 strain 2.142.14 6.856.85 17.5217.52 무처리No treatment 1.61.6 6.36.3 16.416.4

상기 표 4에 기재된 바와 같이, GA41 균주로 처리한 인삼은 무처리한 인삼보다 근중, 근경 및 근장이 증가되었음을 확인할 수 있었다. 구체적으로, GA41 균주로 처리한 인삼의 뿌리는 무처리한 인삼의 뿌리보다 근중은 약 33% 더 증가했고, 근경은 약 8% 더 증가했으며, 근장은 약 6% 더 증가했음을 확인할 수 있었다.As shown in Table 4, the ginseng treated with the GA41 strain was found to increase in weight, root diameter and root length than untreated ginseng. Specifically, the roots of the ginseng treated with the GA41 strain increased the root weight by about 33%, the root diameter by about 8%, and the root length by about 6%.

이상으로, 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.As described above, specific parts of the present disclosure have been described in detail, and for those skilled in the art, these specific descriptions are merely preferred embodiments, and the scope of the present disclosure is not limited thereto. Will be obvious. Thus, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

한국미생물보존센터(국내)Korea Microbial Conservation Center (Domestic) KFCC11745PKFCC11745P 2017102320171023

<110> REPUBLIC OF KOREA(MANAGEMENT : RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> Alcaligens faecalis GA41 having the activity of Promoting Growth of Ginseng and Use Thereof <130> 1063132 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1471 <212> DNA <213> Alchemilla alpina <400> 1 cgtagattga cgctagcggg atgctttaca catgcaagtc gaacggcagc gcgagagagc 60 ttgctctctt ggcggcgagt ggcggacggg tgagtaatat atcggaacgt gcccagtagc 120 gggggataac tactcgaaag agtggctaat accgcatacg ccctacgggg gaaagggggg 180 gatcgcaaga cctctcacta ttggagcggc cgatatcgga ttagctagtt ggtggggtaa 240 aggctcacca aggcaacgat ccgtagctgg tttgagagga cgaccagcca cactgggact 300 gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtgggga attttggaca atgggggaaa 360 ccctgatcca gccatcccgc gtgtatgatg aaggccttcg ggttgtaaag tacttttggc 420 agagaagaaa aggtacctcc taatacgagg tactgctgac ggtatctgca gaataagcac 480 cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtagggt gcaagcgtta atcggaatta 540 ctgggcgtaa agcgtgtgta ggcggttcgg aaagaaagat gtgaaatccc agggctcaac 600 cttggaactg catttttaac tgccgagcta gagtatgtca gaggggggta gaattccacg 660 tgtagcagtg aaatgcgtag atatgtggag gaataccgat ggcgaaggca gccccctggg 720 ataatactga cgctcagaca cgaaagcgtg gggagcaaac aggattagat accctggtag 780 tccacgccct aaacgatgtc aactagctgt tggggccgtt aggccttagt agcgcagcta 840 acgcgtgaag ttgaccgcct ggggagtacg gtcgcaagat taaaactcaa aggaattgac 900 ggggacccgc acaagcggtg gatgatgtgg attaattcga tgcaacgcga aaaaccttac 960 ctacccttga catgtctgga aagccgaaga gatttggccg tgctcgcaag agaaccggaa 1020 cacaggtgct gcatggctgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa 1080 cgagcgcaac ccttgtcatt agttgctacg caagagcact ctaatgagac tgccggtgac 1140 aaaccggagg aaggtgggga tgacgtcaag tcctcatggc ccttatgggt agggcttcac 1200 acgtcataca atggtcggga cagagggtcg ccaacccgcg agggggagcc aatctcagaa 1260 acccgatcgt agtccggatc gcagtctgca actcgactgc gtgaagtcgg aatcgctagt 1320 aatcgcggat cagaatgtcg cggtgaatac gttcccgggt cttgtacaca ccgcccgtca 1380 caccatggga gtgggtttca ccagaagtag gtagcctaac cgtaaggagg gcgcttacca 1440 cggtgggatt catgactggg gtgaatcgaa g 1471 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 22F_primer <400> 2 agagtttgat cmtggctcag 20 <210> 3 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 1492R_primer <400> 3 tacggytacc ttgttacgac tt 22 <110> REPUBLIC OF KOREA (MANAGEMENT: RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> Alcaligens faecalis GA41 having the activity of Promoting Growth          of Ginseng and Use Thereof <130> 1063132 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1471 <212> DNA <213> Alchemilla alpina <400> 1 cgtagattga cgctagcggg atgctttaca catgcaagtc gaacggcagc gcgagagagc 60 ttgctctctt ggcggcgagt ggcggacggg tgagtaatat atcggaacgt gcccagtagc 120 gggggataac tactcgaaag agtggctaat accgcatacg ccctacgggg gaaagggggg 180 gatcgcaaga cctctcacta ttggagcggc cgatatcgga ttagctagtt ggtggggtaa 240 aggctcacca aggcaacgat ccgtagctgg tttgagagga cgaccagcca cactgggact 300 gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtgggga attttggaca atgggggaaa 360 ccctgatcca gccatcccgc gtgtatgatg aaggccttcg ggttgtaaag tacttttggc 420 agagaagaaa aggtacctcc taatacgagg tactgctgac ggtatctgca gaataagcac 480 cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtagggt gcaagcgtta atcggaatta 540 ctgggcgtaa agcgtgtgta ggcggttcgg aaagaaagat gtgaaatccc agggctcaac 600 cttggaactg catttttaac tgccgagcta gagtatgtca gaggggggta gaattccacg 660 tgtagcagtg aaatgcgtag atatgtggag gaataccgat ggcgaaggca gccccctggg 720 ataatactga cgctcagaca cgaaagcgtg gggagcaaac aggattagat accctggtag 780 tccacgccct aaacgatgtc aactagctgt tggggccgtt aggccttagt agcgcagcta 840 acgcgtgaag ttgaccgcct ggggagtacg gtcgcaagat taaaactcaa aggaattgac 900 ggggacccgc acaagcggtg gatgatgtgg attaattcga tgcaacgcga aaaaccttac 960 ctacccttga catgtctgga aagccgaaga gatttggccg tgctcgcaag agaaccggaa 1020 cacaggtgct gcatggctgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa 1080 cgagcgcaac ccttgtcatt agttgctacg caagagcact ctaatgagac tgccggtgac 1140 aaaccggagg aaggtgggga tgacgtcaag tcctcatggc ccttatgggt agggcttcac 1200 acgtcataca atggtcggga cagagggtcg ccaacccgcg agggggagcc aatctcagaa 1260 acccgatcgt agtccggatc gcagtctgca actcgactgc gtgaagtcgg aatcgctagt 1320 aatcgcggat cagaatgtcg cggtgaatac gttcccgggt cttgtacaca ccgcccgtca 1380 caccatggga gtgggtttca ccagaagtag gtagcctaac cgtaaggagg gcgcttacca 1440 cggtgggatt catgactggg gtgaatcgaa g 1471 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 22F_primer <400> 2 agagtttgat cmtggctcag 20 <210> 3 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 1492R_primer <400> 3 tacggytacc ttgttacgac tt 22

Claims (10)

서열번호 1의 16S rRNA 염기서열을 포함하고, 인삼생육 촉진활성을 가지는 수탁번호 KFCC11745P의 알칼리제네스 패카리스 균주, 그의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하고,
상기 인삼생육 촉진활성은 인삼 종자의 줄기 길이를 6 ~ 10%, 인삼 종자의 뿌리 길이를 10 ~ 14%, 인삼 종자의 무게를 3 ~ 7% 증가시키고, 인삼 뿌리의 근중을 30 ~ 40%, 근경을 6 ~ 10%, 근장을 4 ~ 8% 증가시키는 것을 특징으로 하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제.
It contains the 16S rRNA base sequence of SEQ ID NO: 1, and contains the alkaline genes Packaris strain of Accession No. KFCC11745P having a ginseng growth promoting activity, its culture or a mixture thereof as an active ingredient,
The ginseng growth promoting activity increases the stem length of the ginseng seed 6 ~ 10%, the root length of the ginseng seed 10 ~ 14%, the weight of the ginseng seed 3 ~ 7%, the weight of the ginseng root 30 ~ 40%, Microbial agent for promoting ginseng growth, characterized in that the increase in root length 6 ~ 10%, root length 4 ~ 8%.
삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 균주는 옥신(Auxin) 생성능, 사이드로포어(siderophore) 생성능 또는 인산(phosphoric acid) 가용능을 가지는 것을 특징으로 하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제.
The method of claim 1,
The strain is a microbial agent for promoting ginseng growth, characterized in that it has the ability to produce auxin (Auxin), siderophore (phosphoric acid) or soluble (phosphoric acid).
삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 배양액은 상기 균주를 LB(Luria Bertani) 배지, NB(nutrient broth) 배지, BHI(brain heart infusion) 배지, KB(King's medium B) 또는 TSB(Tryptic Soy Broth) 배지로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 배지에서 20℃ 내지 40℃에서 배양하여 수득한 것을 특징으로 하는 인삼생육 촉진용 미생물 제제.
The method of claim 1,
The culture medium is any one selected from the group consisting of Luria Bertani (LB) medium, nutrient broth (NB) medium, brain heart infusion (BHI) medium, King's medium B (KB) or Tryptic Soy Broth medium (TSB) medium. Microorganism preparation for promoting ginseng growth, characterized in that obtained by culturing at 20 ℃ to 40 ℃ in the above medium.
제1항의 인삼생육 촉진용 미생물 제제를 이용하는 것을 특징으로 하는 인삼생육 촉진 방법.


Ginseng growth promoting method of using the microorganism agent for promoting ginseng growth of claim 1.


삭제delete 삭제delete
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOURNAL OF PURE AND APPLIED MICROBIOLOGY. Volume 9, No. 1, 2015, Pages 715-724.
Microbiological Research. Volume 169, Issue 1, 2014, Pages 83-98.

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