KR101995062B1 - 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구투여용 약학적 조성물 - Google Patents

비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구투여용 약학적 조성물 Download PDF

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송영구
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Abstract

본 출원은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 약학적 조성물 또는 키트에 대한 것이다. 본 발명의 약학적 조성물 및 키트는 β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제를 추가로 포함할 수 있다.

Description

비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구투여용 약학적 조성물 {A PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ORAL ADMINISTRATION FOR ERADICATING HELICOBACTER PYLORI COMPRISING A COMPLEX OF NON-ABSORBABLE ANTIBIOTIC AND CLAY MINERAL}
본 발명은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구투여용 약학적 조성물에 대한 것이다. 또한 본 발명은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구투여용 키트에 대한 것이다.
H. 파일로리는 위 점막에 영향을 미치는 그램-음성 미호기성 나선형 바실러스로, 인간 위의 상피 세포들에 부착하여 발견될 수 있다. 약물 내성 H. 파일로리 균주들은 치료 실패의 가장 흔한 원인이다. 전세계 인구의 약 50%가 H. 파일로리 양성이며, 개발도상국들은 80% 내지 90%의 유병률을 갖고 선진국들은 35% 내지 40%의 유병률을 갖는다. 1998년 국내에서 처음으로 H. 파일로리 제균치료에 관한 권고안이 발표된 이후로 현재까지 일차 치료로 권고되고 있는 표준 3제법은 클라리스로마이신, 아목시실린, 위산억제제를 복합하여 투여하는 방법이다. 이 표준 3제법의 제균 효과는 현재 70% 내외로 매우 저조한 효과를 보이고 있으나 아직 기존의 3제요법보다 월등한 치료요법이 개발되지 않아 낮은 제균 효과에도 불구하고 3제요법이 일차 치료로 권고되고 있는 실정이다 (Korean J Gastroenterol 2013;62:3-26). 이와 같이 표준 3제요법을 포함한 종래의 치료요법들은 경구 투여된 항생제가 위에서 용해된 후 장에서 흡수되어 혈관을 통하여 이동하고 최종적으로 위점막으로 방출되어 H. 파일로리를 제균하는 과정을 거친다(도 1). 그러나 이는 투여된 항생제가 장에서 흡수된 후 위 점막으로 방출되어 제균작용을 하기 때문에 항생제가 전신 노출되어 항생제로 인한 부작용 위험 및 환자의 부담이 있다.
스멕타이트는 Al, Mg, Fe로 구성된 팔면체 시트 2개가 Si, Al, Fe로 구성된 사면체 시트를 위아래에서 샌드위치-형상으로 결합하여 하나의 단위층(2:1층)을 구성하고 있는 엽상 규산염 미네랄이다. 스멕타이트 단위층은 음전하를 가지고 있는데, 이는 4가 양전하를 갖는 사면체 Si가 3가 양전하를 갖는 Al 또는 Fe와 동형치환(isomophic substitution)되거나 3가 양전하를 갖는 팔면체 Al 또는 Fe3+가 2가 양전하를 갖는 Mg 또는 Fe2+로 동형치환됨으로써 발생한다. 단위층에서 발생한 음전하를 통해 단위층과 단위층 사이에 양이온이 유도되는데 이는 스멕타이트가 약물 담체(carrier)로 사용될 수 있다는 것을 의미한다. 그러므로 약물 전달 비히클로서 스멕타이트의 이용은 최근 큰 관심을 끌어 왔으며, 여러 연구들이 도네페질(donepezil), 린코마이신(lincomycin), 클로헥시딘 아세테이트(chlorhexidine acetate) 및 테트라사이클린(tetracycline) 등을 통제된 전달 및 방출을 위하여 약물이 삽입된스멕타이트 하이브리드들을 보고하여 왔다.
아미노글리코사이드 (aminoglycosides) 계열 항생제는 그람 음성균 치료에 사용되는 대표적인 항생제 이나 경구 약제가 없고 주사제만 사용 가능하여 H. 파일로리 제균 치료에서는 사용된 적이 없었다. 일부 연구에서는 아미노글리코사이드의 H. 파일로리에 대한 인 비트로 활성 평가에서 낮은 최소 억제 농도를 유지함을 확인하였다. 테스트된 아미노글리코사이드들 중 가장 활성인 것은 젠타마이신, 토브라마이신(tobramycin) 및 네틸마이신(netilmicin)으로, 이들은 각각 0.25~0.5 및 0.125~1.00 mg/L의 MIC90 및 MIC50 값들을 갖는다(Brenciaglia MI, Fornara AM, Scaltrito MMet al. Activity of amoxicillin, metronidazole, bismuth salicylate and six aminoglycosides against Helicobacter pylori. JChemother 1996; 8: 52-4). 그러나 아미노글리코사이드들은 경구 투여될 때 위장관에서 거의 흡수가 되지 않기 때문에, 현재까지 비경구적으로만 사용되어 왔다(Turnidge J. Pharmacodynamics and dosing of aminoglycosides. Infect Dis Clin NorthAm2003; 17: 503-28). 또한 실제 인 비보 평가에서 아미노글리코사이드 계열 항생제가 H. 파일로리 제균에 효과를 보인 것은 보고된 바 없다.
이에 본 발명자들은 경구 투여된 후 위장관에서 효과적으로 제균하는 방식의 H. 파일로리 제균제를 연구하던 중 본 발명의 H. 파일로리 제균용 조성물이 장에서 흡수되어 혈관을 통하여 위에서 방출되는 방식이 아닌, 경구 투여된 후 식도를 통해 위에 도달한 항생제가 위 점액층에 부착되어 H. 파일로리를 효과적으로 제균하는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 경구 투여된 후 위 점막에 도포되어 작용하는 H. 파일로리 제균용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 약학적 조성물을 제공한다. 또한 본 발명은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 키트를 제공한다.
본 발명의 약학적 조성물 및 키트는 판상 점토 전달체를 포함하는바, 위 점막에 도포가 가능하고, 위 점막에 표적 치료가 가능하다. 또한 산도가 낮은 위 내 환경에서 항생제 파괴가 감소되고, 장내 세균에 대한 영향을 최소화하는 장점이 있다.
도 1은 종래 3제 요법에 의한 H. 파일로리의 제균 과정을 나타낸다.
도 2는 본 발명의 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체가 H. 파일로리를 제균하는 과정을 나타낸다.
도 3은 젠타마이신-스멕타이트 복합체 (S-GEN)의 헬리코박터 파일로리 제균 활성을 보여준다. 왼쪽 상단 디스크: 스멕타이트, 오른쪽 상단 디스크: S-GEN, 아래쪽 디스크: 젠타마이신.
도 4는 네틸마이신-스멕타이트 복합체(S-NET)의 헬리코박터 파일로리 제균 활성을 보여준다. 왼쪽 디스크: 스멕타이트, 오른쪽 디스크: S-NET
도 5는 인 비보에서 항-H. 파일로리 약효를 확인하기 위한 프로토콜이다. 상기 프로토콜은 C57BL/6 마우스에서 H. 파일로리 접종 및 감염 발달, 그리고 치료가 이어지는 것을 포함한다.
도 6은 그룹 1 내지 8을 이용한 H. 파일로리 감염의 치료 효과에 대한 연구 후 위 점막 조직들과 PCR 결과이다.
본 발명은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 약학적 조성물에 대한 것이다.
또한 본 발명은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함하는 헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 키트에 대한 것이다.
또한 본 발명은 본 발명의 약학적 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 헬리코박터 파일로리의 제균 방법에 대한 것이다.
또한 본 발명은 본 발명의 약학적 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 헬리코박터 파일로리가 원인인 질환의 예방 또는 치료 방법에 대한 것이다.
이하, 본 발명을 자세히 설명한다.
비흡수성 항생물질
본 발명의 비흡수성 항생물질은 점토광물과 복합체의 형태로 경구 투여된 후 식도를 지나 위에 도달 시 위 점막에 도포된다. 위 점막에 도포된 복합체로부터 상기 항생물질이 방출되어 H. 파일로리를 제균하게 된다.
본 발명의 비흡수성 항생물질은 복합체가 경구 투여된 후 위에서 H. 파일로리의 제균에 사용되지 않는 경우, 흡수되지 않고 배설됨으로써 항생제 부작용 및 환자의 부담을 경감시킨다. 또한 이 경우 본 발명의 비흡수성 항생물질은 점토광물과 결합된 복합체 형태이기 때문에 장내 세균에 대한 영향이 적고, 위산 조건에서 항생제의 파괴가 최소화된다.
본 발명의 비흡수성 항생물질은 특별히 제한되는 것은 아니나, 아미노글리코사이드계 화합물일 수 있다.
본 발명의 아미노글리코사이드계 화합물은 젠타마이신(gentamicin), 토브라마이신(tobramycin), 아미카신(amikacin), 네오마이신(neomycin), 네틸마이신(netilmicin) 등이 될 수 있으며, 바람직하게는 젠타마이신이 될 수 있다.
점토광물
일반적으로 점토광물은 규산판(silica sheet)과 알루미나판(alumina sheet)이 결합되어 형성된 결정단위들이 적층된 층상 구조, 즉 판상 구조를 갖는데, 이와 같은 점토광물 중 층간 팽창성을 갖는 점토광물에서는 결정 단위들 사이에 수소결합이 존재하지 않아 결정단위들 사이의 결합력이 약하므로 이들 결정단위들 사이에 수분이 흡입되면 팽창될 수 있다. 따라서 층간 팽창성을 갖는 점토광물의 결정 단위들 사이에는 상대적으로 큰 크기를 갖는 이온이더라도 용이하게 유입시킬 수 있다. 한편, 층간 팽창성을 갖는 점토광물에 있어서는, 4가 양전하를 갖는 사면체 Si가 3가 양전하를 갖는 Al 또는 Fe와 동형치환(isomorphic substitution)되거나 3가 양전하를 갖는 팔면체 Al 또는 Fe3+가 2가 양전하를 갖는 Mg 또는 Fe2+로 동형 치환됨으로써 음의 층전하가 발생하지만, 층과 층사이또는 표면에 칼슘 이온(Ca2+), 마그네슘 이온(Mg2+), 나트륨 이온(Na+), 칼륨 이온(K+) 등의 양이온이 결합되어 전체적으로는 전기적 중성을 띠게 된다.
본 발명의 점토광물은 판상 구조, 구체적으로는 층간 팽창성을 가지고 있으며, 내부에 항생물질을 삽입하여 전달체로 사용될 수 있는 점토광물이다. 본 발명의 점토광물은 스멕타이트계 광물일 수 있으며, 예컨대, 몬모릴로나이트(montmorillonite) 또는 벤토나이트(bentonite), 바이델라이트(beidellite), 논트로나이트(nontronite), 사포나이트(saponite), 헥토라이트(hectorite) 등이 될 수 있다.
비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체
본 발명의 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체에 있어서, 점토광물은 상기 비흡수성 항생물질을 위 점액층으로 전달하는 전달체, 즉 담체로서 사용된다. 상기 복합체는 점토광물 내에 비흡수성 항생물질이 삽입된 구조이다. 상기 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체가 경구 투여되어 식도를 통하여 위에 도달한 후 위 점액층에 부착되어 항생물질을 방출하게 된다(도 2). 즉, 본 발명의 복합체는 경구 투여되어 식도를 통하여 위에 도달한 후 위에서 항생물질이 용해되어, 용해된 항생물질이 장으로 이동하여 장에서 흡수되고 혈관을 타고 이동하여 위 점막으로 방출되어 H. 파일로리를 제균하는 과정으로 제균을 수행하는 것이 아니다.
본 발명의 점토광물은 판상 구조인바, 위 점액층(점막)에 도포가 가능하고 약물 담지력이 우수한 바, 위 점액층에 표적 치료가 가능하다. 또한 환부에 효과적으로 최소억제농도 (MIC) 유지가 가능하여 항생물질에 대한 환자의 부담이 경감된다.
본 발명의 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체는 당업계에 공개된 일반적인 방법을 이용하여 제조할 수 있다. 점토 광물과 의약을 결합시킨 복합체의 제조 방법은 지금까지 다수의 논문 등을 통하여 공개된 바 있으며, 당업자는 이를 적절히 이용하여 본 발명의 복합체를 제조할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체는 그 전체가 본 발명에 참조로서 포함되는 한국등록특허 10-1541876호의 방법에 의하여 제조될 수 있다. 이 경우, 본 발명의 복합체는 이온교환막에 의해 서로 분리된 제1 공간 및 제2 공간에 팽창성 격자 구조를 갖는 점토광물 미립자의 분산용액 및 항생물질 용액을 각각 공급하고 제1 시간동안 유지하는 단계; 및 상기 제2 공간으로부터 상기 항생물질 용액을 제거한 후 상기 제2 공간에 항생물질 이온 세척용액을 공급하는 단계를 포함하는, 복합체의 제조방법을 이용하여 제조될 수 있다.
β-락탐 항생제
본 발명의 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체는 β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제와 함께 대상에게 투여될 수 있다. 그러므로 본 발명의 약학적 조성물 및 키트는 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체 외 β-락탐 항생제 및 위산억제제를 추가로 포함할 수 있다.
상기 β-락탐 항생제는 페니실린, 메티실린(methicillin), 암피실린(ampicillin), 아목시실린, 세팔로스포린, 카바페넴 등이 될 수 있으며, 바람직하게는 아목시실린이 될 수 있다.
위산억제제
본 발명의 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체는 β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제와 함께 대상에게 투여될 수 있다. 본 발명의 위산억제제는 프로톤 펌프 억제제이다. 본 발명의 위산억제제는 일반적인 위산억제제를 사용하면 되고 특별히 제한되는 것은 아니다. 예컨대, 본 발명의 위산억제제는 오메프라졸(omeprazole), 에소메프라졸(esomeprazole), 라베프라졸(rabeprazole), 란소프라졸(lansoprazole), 판토프라졸(pantoprazole) 등이 될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물 또는 키트를 이용하는 대상이 위가 약하거나, 위산이 과다분비되는 경우 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체와 함께 위산억제제를 병용 투여할 수 있다.
키트
본 발명의 키트는 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함한다. 바람직하게는 본 발명의 키트는 β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제를 더 포함한다. 본 발명의 키트는 H. 파일로리의 제균을 위한 경구 투여용 키트이다.
약학적 조성물
본 발명의 약학적 조성물은 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체를 포함한다. 바람직하게는 본 발명의 약학적 조성물은 β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제를 더 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물의 상기 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체는 경구 투여되어 식도를 통하여 위에 도달한 후 위 점액층에 부착되어 항생물질이 방출된다. 상기 약학적 조성물은 우레아제 억제 활성을 가지며, 헬리코박터 파일로리 균이 원인인 위장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 H. 파일로리가 원인인 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다. 상기 헬리코박터 파일로리가 원인인 질환은 위장관 손상, 위염, 위궤양, 십이지장궤양, 위염, 위암 또는 MALT 림파종일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체, β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제를 0.01 내지 80 중량% 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.02 내지 65 중량% 포함할 수 있다. 그러나 이는 투약자의 필요에 따라 증감할 수 있으며, 연령, 식생활, 영양 상태, 병의 진행 정도 등 상황에 따라 적절히 증감할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물 내 상기 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체, β-락탐 항생제 및/또는 위산억제제의 비율, 즉 조성은 당업자가 적절히 결정할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 바람직한 약제학적 제제는 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 시럽, 츄잉 타블렛 등과 같은 경구투여용 제제가 있으며 이들 약제학적 제제는 약제학적으로 허용 가능한 통상의 담체, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등을 사용하여 조제할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여 용량은, 환자의 상태, 연령, 성별 및 합병증 등의 다양한 요인에 따라 전문가에 의해 결정될 수 있지만 일반적으로는 성인 1kg 당 0.1㎎ 내지 10g, 바람직하게는 10 mg 내지 5g의 용량으로 투여될 수 있다. 또, 단위 제형당 상기 약학적 조성물의 1일 용량 또는 이의 1/2, 1/3 또는 1/4의 용량이 함유되도록 하며, 하루 1 내지 6 회 투여될 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 담당 의사는 이를 적절히 조절할 수 있다.
헬리코박터 파일로리가 원인인 질환
본 발명의 약학적 조성물 및 키트는 헬리코박터 파일로리가 원인인 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 것일 수 있다. 상기 헬리코박터 파일로리가 원인인 질환은 위장관 손상, 위염, 위궤양, 십이지장궤양, 위염, 위암 또는 MALT 림파종일 수 있다.
치료 방법 또는 제균 방법
본 발명은 본 발명의 약학적 조성물을 대상에게 경구 투여하는 단계를 포함하는 H. 파일로리의 제균 방법에 대한 것이다. 또한 본 발명은 본 발명의 약학적 조성물을 대상에게 경구 투여하는 단계를 포함하는 H. 파일로리가 원인인 질환의 예방, 개선 또는 치료 방법에 대한 것이다.
상기 대상은 H. 파일로리가 감염된 것으로 진단되거나, 또는 H. 파일로리 감염의 우려가 있는 포유동물일 수 있다. 상기 포유동물은 인간을 포함한다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
<재료 및 방법>
<실험 윤리>
대한민국의 인천의 National Center of Efficacy Evaluation for the Development of Health Products Targeting Digestive Disorders의 the Institutional Animal Care and Use Committee의 승인을 받아 래트들에 대하여 동물 시험을 수행하였다. 마우스 실험들은 원광대학교 약학대학교의 Institutional Animal Care and Use Committee에 의하여 검토 및 승인받았다. 마우스들은 대한민국, 익산의 원광대학교의 동물 이용 및 관리를 위한 가이드라인 및 통제에 따라 처리되고 임의로 물과 표준 실험 식이를 공급받았다.
<통계 분석>
데이터들은 평균±SD으로 나타내었으며, 실험군들은 비모수 Mann-Whitney-U 테스트를 이용하여 비교되었다. MINITAB 통계 소프트웨어 프로그램 (Minitab Inc., PA, USA)을 이용하여 검출 비율에 대하여 95% CIs를 얻었다. 만약 두 값들의 95% CI들이 중첩되지 않으면, 그것들은 상당히 다른 것으로 고려되었다. P 값 < 0.05은 통계적으로 중요한 것으로 고려되었다. 결과들은 Statistics Package for Social Science (SPSS 12.0 for Windows; SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 이용하여 분석되었다.
<실험예 1> 항생물질-점토광물 복합체의 제균 활성
<1-1> 항생물질의 삽입
젠타마이신(gentamicin) 용액 (2mg/mL)이 Bio Basic Inc.에서 생산된 United States Pharmacopeia (USP)-등급 젠타마이신 설페이트를 이용하여 제조되었다.
Ca-스멕타이트(smectite)는 국내 경북 지역의 벤토나이트를 정제하여 제조하였다. 젠타마이신-스멕타이트 복합체인 S-GEN (젠타마이신-삽입된 스멕타이트 하이브리드)는 Ca-스멕타이트의 그랩 당 젠타마이신 용액 250 ml를 혼합하고 24 시간 동안 힘차게 저어 제조하였다. 혼합 후 하이브리드 용액은 8 시간 동안 50 ℃에서 5 L의 증류수로 투석되었고, 이는 설페이트 이온이 PbCl2로 검출되지 않을 때까지 3회 또는 4회 반복되었다. 하이브리드 분말이 2일 내지 3일 동안 투석된 하이브리드 용액을 동결 건조함으로써 수득되었다. 하이브리드로부터 방출된 젠타마이신의 양은 뱃치-방출 테스트에 의하여 결정되었는데, 이때 25 mL의 pH 1.2 용액이 반복해서 하이브리드 분말의 동일한 100 mg에 첨가되었다. 상청액으로부터 젠타마이신 농도가 LC-MS를 이용하여 측정되었다. LC 분석들은 Thermo Scientific ICS 시스템을 이용하여 수행되었다. MS 분석은 전자분무 이온화와 Thermo Scientific MSQ Plus 단일-사극자(quadrupole) 매스 스펙트로미터를 이용하여 수행되었다. 1 시간 내 방출된 젠타마이신의 총 양은 하이브리드 100 mg 당 ~ 5.0mg으로 확인되었다.
한편, 동일한 방법으로 젠타마이신 대신 네틸마이신을 사용하여 네틸마이신-스멕타이트 복합체인 S-NET을 제조하였다.
<1-2> 인 비트로에서 제균 활성 평가
S-GEN 및 S-NET의 제균 활성을 평가하였다. 헬리코박터 파일로리 균을 배지에 도포 (빨간색)한 뒤 디스크 형태로 시료을 만들어 배지 위에 두고 제균 효능을 측정하였다. 이때, 디스크 주변으로 빨간색이 없어지면 제균 효능이 있다는 것을 의미한다.
그 결과, 젠타마이신-스멕타이트 복합체 (S-GEN) 및 네틸마이신-스멕타이트 복합체(S-NET)은 모두 헬리코박터 파일로리의 제균 활성을 갖는 것이 확인되었다 (도 3 및 도 4, 도 3의 왼쪽 상단: 스멕타이트, 오른쪽 상단: S-GEN, 아래쪽: 젠타마이신; 도 4의 왼쪽: 스멕타이트, 오른쪽: S-NET).
<실험예 2> 래트에서 위 점막의 도포
7 주령 수컷 Sprague-Dawley 래트들 (체중 220 g±20%)이 위 점막의 도포를 테스트하기 위하여 대한민국 오산의 Samtako Ltd.로부터 구입되었다. 래트들은 실험 전 24 시간 동안 금식되었다. 10 마리 래트들의 두 개 그룹들이 10 mL/kg (150mg/kg)으로 스멕타이트(smectite) 또는 S-GEN이 섭취되었고 1 시간 후 안락사되었다. 위 점막의 도포 효율의 분석을 위하여, 래트들의 위들이 대만곡(greater curvature)을 따라 절제 및 절단 되고, 고정되었다(pinned). 위 분포 비율이 하기 식 1에 따라 계산되었다.
<식 1>
위 분포 비율(%) = {위 분포 영역(cm2)/위 전체 영역 (cm2)} × 100
비율 및 영역은 Leica Application Suite V4 (Leica Microsystems Ltd., Korea)을 이용하여 분석되었다. 위 분포 비율은 평균 (±표준편차)으로 나타내었다.
<실험예 3> 인 비보에서 항-H. 파일로리 약효
<3-1> 실험 동물들의 접종
4 주령 수컷 C57BL/6 마우스들이 항-H. 파일로리 평가를 위하여 일본, 시즈오카의 Japan SLC, Inc.으로부터 구입되었다. 마우스들은 실험 시작 당시 5 주령이었고 18 내지 20 g의 체중을 가졌다. 접종을 위하여 H. 파일로리 SS1가 사용되었다. 박테리아는 미세호기 조건 하 (10% CO2, 85% N2 and 5% O2) 72 시간 동안 37 ℃에서 브루셀라 혈액 한천(Merck, Germany)에서 배양되었다. 인 비보에서 항-H. 파일로리 평가를 위하여, 80 마리의 마우스들이 실험 전 1 주 동안 적응되었다.
적응 후 동물들은 12 시간 동안 금식되었고, 70 마리가 2.0 × 109 cfu/mL H. 파일로리 현탁액 0.5mL으로 감염되었고, 주 당 3회로 매 48 시간마다 경구 섭식을 통하여 위내로 투여되었다. 접종일은 0일로 고려되었고 그 다음부터 1일 내지 21일로 고려되었다. 감염되지 않은 그룹은 정상 대조군으로 이용하였으며, 등가의 부피의 PBS 및 증류수를 받았다.
<3-2> 실험 동물들의 처리
마우스들은 10마리씩 하기 8개 그룹들로 나뉘었고, 마지막 접종 후 1 주 동안 쉬었다:
그룹 1: 감염되지 않은 마우스들인 정상군.
그룹 2: 증류수를 받은 무-처리 대조군.
그룹 3: 아목시실린(amoxicillin) (14.25mg/kg), 클라리스로마이신(clarithromycin) (7.15mg/kg) 및 위산억제제(proton pump inhibitor) (PPI, 400 μmol/kg으로 PPI를 받은 모든 그룹들에서 오메프라졸(omeprazole)이 사용되었다)으로 처리되었으며, 양성 대조군으로 이용하였다.
그룹 4: 아목시실린 (14.25 mg/kg), 젠타마이신 (4 mg/kg) 및 PPI (400 μmol/kg)으로 처리되었다.
그룹 5: 아목시실린 (14.25 mg/kg), S-GEN (78mg/kg) 및 PPI (400 μmol/kg)으로 처리되었다.
그룹 6: 젠타마이신 (4mg/kg) 및 PPI (400 μmol/kg)으로 처리되었다.
그룹 7: S-GEN (78mg/kg) 및 PPI (400 μmol/kg)으로 처리되었다.
그룹 8: 아목시실린 (14.25 mg/kg) 및 PPI (400 μmol/kg)으로 처리되었다.
상기 처리들은 7일 연속하여 하루 한 번 경구 투여로 진행되었다. 감염된 마우스들에서 H. 파일로리의 혈청학적 지위를 확인하기 위하여 H. 파일로리 면역글로불린 G (IgG) 수준들이 처리 전 ELISA 키트 (Cusabio Biotech Co., USA)로 확인되었다.
<실험예 4> 박테리아 확인
마지막 투여 12 시간 후, 마우스들은 안락사 되었고, 위 조직을 추출하였다. 유문으로부터 위 점막이 Campylobacter-like organism (CLO) 테스트 및 H. 파일로리에 대한 PCR을 위하여 생체검사되었다. 추가적으로 마우스 당 0.5 g의 대변이 직장 및 대장에서 수집되었고, 동일 부피의 증류수에서 현탁되었고, H. 파일로리 항원 (Ag) 검출 및 대변에서 H. 파일로리 PCR을 위하여 여과되었다.
<4-1> CLO 테스트
유문부의 위 점막 샘플들이 CLO 키트들 (Asan Pharmaceutical Co., Seoul, Korea)로 분석되었고, 우레아제(urease) 활성을 시험하기 위하여 12시간 동안 37 ℃에서 배양되었다. 반응 (색 변화)은 연한 노랑일 때 음성 또는 어두운 빨강일 때 양성으로 간주되었다. 반응 점수는 0 내지 3으로, 0 은 색 변화가 없고, 1은 밝은 빨강, 2는 밝은 보라, 3은 어두운 빨강이다.
<4-2> 위 점막에서 H. 파일로리 PCR
H. 파일로리 DNA들이 비드 비터/페놀 추출 방법 (Kim B-J, Lee S-H, LyuM-A et al. Identification of mycobacterial species by comparative sequence analysis of the RNA polymerase gene (rpoB). J Clin Microbiol 1999; 37: 1714-20)을 이용하여 제조되었다. 박테리아 현탁액이 200μL 의 페놀, 클로로포름, 이소아밀 알코올 (50:49:1) 및 유리 비드들(지름, 0.1mm; Biospec Products, Bartlesville, OK, USA) 200 μL (paced volume)으로 채워진 2.0 mL 스크류캡 마이크로 원심분리 튜브에 위치되었다. 튜브는 미니-비드 비터(beater) (Biospec Products)로 30 초 동안 진동되었고, 상 분리를 위하여 원심분리 되었다 (15분 동안 12,000 g). 수상(aqueous phase)은 그 뒤에 다른 깨끗한 튜브로 이동되었고, 10 μL의 3M 소듐 아세테이트 및 250μL의 아주 찬 무수(absolute) 에탄올이 첨가되었다. DNA를 침전시키기 위하여, 혼합물은 10 분 동안 -20 ℃에서 유지되었다. 수확된 DNA 펠렛들이 60 μL의 Tris-EDTA 버퍼 (pH 8.0)에 용해되었고, PCR을 위한 주형 DNA로 사용되었다. PCR은 AccuPower PCR Premix (Bioneer, Daejeon, Korea)를 사용하여 수행되었다. 처음 변성/활성화 단계 (5분 동안 95℃) 후, DNA (50 ng)가 하기 프라이머들을 이용하여 변성 (60 초 동안 94℃), 어닐링 (60 초 동안 62℃) 및 신장 (90 초에서 72℃)의 35 사이클 동안 20μL 부피에서 증폭되었다: H. 파일로리-특이적 ureA 및 ureC, 센스 50-TGATGCTCCACTACGCTGGA-30 (서열번호 1) 및 안티센스 50-GGGTATGCACGGTTACGAGT-30 (서열번호 2) (예상 산물 265 bp)(Kim YB, Kim ST, Lee SW et al. The influence of number of gastroscopic biopsy specimens on follow-up Campylobacter-like organism (CLO) test. Korean J Gastroenterol 2000; 35: 422-8), 및 GAPDH, 센스 50-TGGGGTGATGCTGGTGCTG-AG-30 (서열번호 3) 및 안티센스 50-GGTTTCTC CAGGCGGCATGTC-30 (서열번호 4) (예상 산물 497 bp) (Kundu P, Mukhopadhyay AK, Patra R et al. Cag pathogenicity is and independent up-regulation of matrix metalloproteinases-9 and -2 secretion andexpression in mice by Helicobacter pylori 감염. J Biol Chem2006; 281:34651-62). PCR 산물들은 1.5 % 아가로스 겔에서 전기영동에 의하여 분석되었다.
<4-3> 마우스 대변에서 H.파일로리 항원 검출
H. 파일로리 항원이 제조업자의 지침에 따라 상업적으로 이용가능한 SD Bioline H. 파일로리 Ag 키트 (Standard Diagnostics, Inc.)를 이용하여 평가되었다. 표본들 (250mg)이 실온에서 30 분 동안 희석 용액과 배양되었고, 그 다음에 100 μL이 H. 파일로리 항원 시험 장치에 위치되었다. 결과는 15 분 후에 체크되었다. 단일의 빨간 선은 음성을 가리키고 이중 빨간 선은 양성 H. 파일로리 결과를 나타내었다(Moon D-I, Shin E-H, Oh H-G et al. Usefulness of a Helicobacter pylori stool antigen test for diagnosing H. pylori infected C57BL/6 mice. Lab Anim Res 2013; 29: 27-32).
<4-4> 마우스 대변에서 H.파일로리 PCR
대변 검체들로부터 게놈 DNA가 제조업자의 지침에 따라 AccuPrep Stool DNA Extraction Kit (Bioneer, Daejeon, Korea)을 이용하여 추출되었다(Lee J-U, Jung K, Kim O. Absence of vertical transmission of Helicobacter pylori in an experimental murine model. JVetSci 2006; 7: 225-8). 서열번호 1 및 2의 프라이머들의 세트가 H. 파일로리-특이적 ureA 및 ureC (265 bp)를 증폭시키기 위하여 사용되었다 (Kim YB, Kim ST, Lee SW et al. The influence of number of gastroscopic biopsy specimens on follow-up Campylobacter-like organism (CLO) test. Korean J Gastroenterol 2000; 35: 422-8). 주형 DNA (50ng) 및 각 프라이머 20 pmol이 1U의 Taq DNA 폴리메라제, 250 μM 의 각 디옥시뉴클레오사이드 트리포스페이트, 50mM Tris-HCl (pH 8.3), 40mM KCl, 1.5mM MgCl2 및 겔 로딩 염료를 포함하는 PCR 혼합물 튜브에 첨가되었다. 부피는 증류수를 이용하여 20 μL으로 조정되었다. 95 ℃에서 5분 동안의 초기 변성 후, 반응 혼합물은 35 증폭 사이클에 가하여졌고 (94 ℃에서 60초, 62 ℃에서 60초, 그리고 72 ℃에서 90초), 뒤이어 72 ℃에서 10 분의 신장이 이어졌다 (GeneAmp 9700, Perkin Elmer, USA).
PCR 산물들은 1.5% 아가로스 겔에서 전기영동되었다 (Lee H-A, Park Y-S, KimO. Prevalence of Helicobacter species in feces of dogs using polymerase chain reaction analysis. Lab Anim Res 2007; 23:339-44)
<실험예 5> 염증성 사이토카인들의 정량화
마우스들의 눈(ophthalmic) 정맥총(venous plexus) 내로 헤파린화된(heparinized) 마이크로헤마토크리트(microhaematocrit) 튜브의 삽입에 의하여 21일에 IL-8 및 TNF-α 분석을 위하여 혈장이 수득되었다. 혈장 IL-8 및 TNF-a 레벨들은 마우스 ELISA 키트들 (R&D Systems,Minneapolis,MN, USA)을 이용하여 측정되었다.
<결과>
래트들에서 위 점액층의 도포
10mL/kg (150mg/kg)의 실험 조건들을 선택하고, 하이브리드로부터 약물 방출 시간을 고려하여 경구 투여 1 시간 후 실험 래트들을 안락사시켰다. S-GEN은 60.2%(±14.3%) 도포 비율을 보였다.
인 비보에서 항-H. 파일로리 평가
H. 파일로리에 대한 S-GEN의 인 비보 약효를 평가하기 위하여, H. 파일로리 감염 모델을 만들었다 (도 5). 또한, 파일로리 감염을 확인하기 위하여, H. 파일로리 IgG 레벨들이 처리 전후에 확인되었다 (표 1: 각 그룹에서 H. 파일로리 IgG의 혈장 농도).
그룹 접종 N H.파일로리 IgG 농도
H.파일로리 감염 처리 처리 전 처리 후
그룹 1 No 증류수 10 0.26±0.01 0.25±0.00**
그룹 2 Yes 증류수 10 0.58±0.05a* 0.74±0.01
그룹 3 Yes AMX+CLR+PPI 10 0.33±0.01**
그룹 4 Yes AMX+GEN+PPI 10 0.35±0.01**
그룹 5 Yes AMX+S-GEN+PPI 10 0.32±0.01**
그룹 6 Yes GEN+PPI 10 0.40±0.01**
그룹 7 Yes S-GEN+PPI 10 0.34±0.01**
그룹 8 Yes AMX+PPI 10 0.35±0.01**
AMX: 아목시실린
CLR: 클라리스로마이신
GEN: 젠타마이신
A 데이터들은 70마리의 감염된 마우스들 (그룹 2 내지 8)의 평균 ± 표준편차로 나타내었다.
*그룹 1과 상당히 다름 (p<0.01)
**그룹 2와 상당히 다름 (p<0.01)
위 점막의 H. 파일로리 PCR 및 CLO 테스트
마우스들에서 H. 파일로리의 반복된 위내 접종은 위 점막의 CLO 테스트에서 양성 반응 (빨간색)을 만들었다 (표 2: 처리 후 위 점막으로 CLO 테스트 결과).
그룹a CLO 테스트에 의한 음성 동물의 퍼센트(95% CIb) CLO 값
그룹 1 100 (72.2-100.0) 0.0±0.0
그룹 2 0 (0.0-27.6) 3.0±0.0
그룹 3 70 (39.7-89.2)* 0.9±1.5*
그룹 4 60 (31.2-83.1)* 1.2±1.6*
그룹 5 80 (49.0-94.3)* 0.6±1.3*
그룹 6 50 (23.7-76.3) 1.5±1.6
그룹 7 60 (31.2-83.1)* 1.2±1.6*
그룹 8 60 (31.2-83.1)* 1.2±1.6*
a 각 그룹은 10 마리 마우스들로 구성된다.
b발생 퍼센트(incidence percentage) (95% CI)는 MiniTab 통계 프로그램으로 계산되었다.
*그룹 2와 상당히 다름 (p<0.05)
위 점막의 치유율 (100-양성 반응들)은 그룹 3 내지 8에서 각각 70%, 60%, 80%, 50%, 60% 및 60%이었다. 그룹 5의 CLO 점수는 H. 파일로리 감염된 그룹들 중 가장 낮았고, 그룹 2의 그것보다 상당히 더 낮았다.
H. 파일로리-특이적 ureA 및 ureC (265 bp)의 PCR 산물들은 1.5% 아가로스 겔에서 전기영동되었고, 시각화되었다(도 6).
치유율은 CLO 테스트에 의하여 확인된 것들과 동일하였다.
마우스의 대변에서 H. 파일로리 항원 및 PCR
대변에서 H. 파일로리을 검출하기 위하여 대변 항원 키트를 이용하였다. 그룹 2에서 양성 결과들이, 그리고 다른 그룹들에서 음성 결과들이 계속하여 관찰되었다.
H. 파일로리-감염된 마우스들에서 치료적 효과들을 평가하기 위하여 H. 파일로리 PCR이 수행되었다 (표 3: 처리 후 대변에서 H. 파일로리의 PCR 분석). 치유율은 그룹 3 (표준 치료) 및 그룹 5 (아목시실린/S-GEN/PPI로 치료)에서 각각 90% 및 100%였다.
그룹a 대변 PCR에 의한 음성 동물들의 퍼센트 (95% CIb)
그룹 1 100 (72.2-100.0)
그룹 2 0 (0-27.6)
그룹 3 90 (60.0-98.2)*
그룹 4 80 (49.0-94.3)*
그룹 5 100 (72.2-100.0)*
그룹 6 70 (39.7-89.2)*
그룹 7 80 (49.0-94.3)*
그룹 8 70 (39.7-89.2)*
a 각 그룹은 10 마리 마우스들로 구성된다.
b발생 퍼센트(incidence percentage) (95% CI)는 MiniTab 통계 프로그램으로 계산되었다.
*그룹 2와 상당히 다름 (p<0.05)
염증성 사이토카인들의 정량화
S-GEN을 포함하는 항-H. 파일로리가 사이토카인들의 생산에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 염증성 사이토카인들의 혈장 농도들이 마우스들에서 측정되었다(표 4). 치료 그룹들에서 IL-8 및 TNF-a의 레벨들은 그룹 2에서의 그것들보다 상당히 낮았다 (표 4: IL-8 및 TNF-a의 혈장 농도). 그룹 5에서 IL-8 및 TNF-a의 혈장 레벨들은 처리 그룹들 중 가장 낮았다.
그룹a IL-8 농도(μg/ml) TNF-α 농도(μg/ml)
그룹 1 3.73±0.82* 16.14±4.99*
그룹 2 7.71±0.66 44.43±6.23
그룹 3 4.12±0.45* 23.59±0.48**
그룹 4 3.98±0.21* 23.20±2.52**
그룹 5 3.57±0.38* 17.65±3.21**
그룹 6 4.24±0.42* 24.30±1.84**
그룹 7 4.08±0.25* 18.76±1.33**
그룹 8 4.52±0.36* 22.13±3.59**
데이터는 그룹 당 10 마리 마우스들에 대한 평균 ± 표준편차로 표현되었다 (μg/ml)
a 각 그룹은 10 마리 마우스들로 구성된다.
*그룹 2와 상당히 다름 (p<0.05)
**그룹 2와 상당히 다름 (p<0.01)
실험결과 검토
본 발명에서는, 마우스 모델에서 S-GEN의 항-H. 파일로리 약효를 평가하였다. 본 발명의 실험 결과들은 H. 파일로리 치료에 있어 현재 세계적 표준인 3제(triple) 요법을 포함하는, 다른 치료 요법들의 그것과 비교하여 마우스 위들에서 H. 파일로리 로드를 감소시키는데 있어 S-GEN의 상당히 개선된 항미생물 약효를 입증하였다.
본 발명자들은 S-GEN을 개발하고 그것이 H. 파일로리 감염의 치료에 효과적인지 여부를 평가하였다. H. 파일로리는 주로 위 점막 상피 표면에 부착된 점액 층 내에 산다. 그러므로, 효과적인 치료를 위하여 S-GEN은 상기 점액 층을 가로지르고 위벽 상(on)에 유지되어야 한다. 본 발명에서, S-GEN은 말단의 위벽(on)에 잘 분포되었고, S-GEN의 60.2% 존재가 관찰되었는데, 이는 1 시간까지 효과적으로 S-GEN 유지가 이루어졌다는 것을 가리킨다. 이 결과는 S-GEN이 H. 파일로리의 직접적인 제균에 사용될 수 있다는 것을 제안한다.
처리 후 위 점막으로 H. 파일로리 PCR 및 CLO 테스트들의 결과들에서, 그룹 5는 치료된 그룹들 중 가장 높은 치유율 (80%)을 보였다. 게다가 그룹 5의 CLO 값은 치료된 그룹들 중 가장 낮았다 (0.6±1.3). 항-H. 파일로리 약효는 그룹 5에서 명확하였다. H. 파일로리 감염에 대한 치료 후 대변으로한 H. 파일로리 PCR 테스트의 경우, 음성 결과들이 그룹 5에서만 계속하여 관찰되었다. 그러므로 S-GEN 3제 치료에 의하여 부여된 우수한 항-H. 파일로리 활성은, 그것의 직접적인 제균 효과 및 종래의 항생제들의 다른 요법들과 비교하여 위 점막에서 더 오랜 시간 도포되어 제균효과가 좀 더 지속되는 것으로 설명될 수 있다.
흥미롭게도 S-GEN-치료된 마우스들은, H. 파일로리-감염되었으나 치료되지 않은 마우스들과 비교하여, 상당히 감소된 H. 파일로리-유도된 전염증성(proinflammatory) 사이토카인들 (IL-8 및 TNF-a)을 가졌다. IL-8은 호중구들을 끌어당겨, 염증을 촉진하며, IL-1β와 함께 TNF-α는 가스트린 분비를 유도하는데, 이는 H. 파일로리-유도된 고가스트린혈증(hypergastrinaemia) 및 염증 반응들에서 이들 사이토카인들의 역할을 제안한다. H. 파일로리에 대한 면역 반응은 질병 발병에 기여한다. 그러므로 여기에서 관찰된 대로 전염증성 반응의 감소는 조직 손상을 영구화하는데 책임이 있는 염증성 반응을 감소시킬 것으로 예상된다. S-GEN 치료 후 다른 요법들로 달성된 것보다 더 나은 항-H. 파일로리 효과 및 집락화(colonization)의 초기 제거가 위 염증을 감소시킬 수 있었다.
본 발명에서 S-GEN으로 한 치료는 마우스 체중에 영향을 미치지 않았다. 경구 투여에 의한 스멕타이트의 안전성은 입증되었고, 젠타마이신은 위 점막을 통하여 흡수되지 않았다.
본 발명자들은 H. 파일로리에 대항하여 S-GEN의 강한 항미생물 활성 및 위 점막 층에서 S-GEN의 장시간 도포효과를 입증하였다. S-GEN 처리는 PPI를 포함하는 2제(double) 또는 3제 요법으로 치료된 마우스들 또는 치료되지 않은 마우스들에 비하여 인 비보에서 박테리아 부담을 감소시켰다. 직접적인 제균 효과에 추가하여, S-GEN는 전염증성 사이토카인 생산을 억제하여 염증 반응들을 감소시키는 것을 도왔다.
<서열목록의 설명>
서열번호 1은 H. 파일로리-특이적 ureA 및 ureC의 증폭을 위한 센스 프라이머의 염기서열이다.
서열번호 2는 H. 파일로리-특이적 ureA 및 ureC의 증폭을 위한 안티센스 프라이머의 염기서열이다.
서열번호 3은 GAPDH의 증폭을 위한 센스 프라이머의 염기서열이다.
서열번호 4는 GAPDH의 증폭을 위한 안티센스 프라이머의 염기서열이다.
<110> KOREA INSTITUTE OF GEOSCIENCE AND MINERAL RESOURCES <120> A PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ORAL ADMINISTRATION FOR ERADICATING HELICOBACTER PYLORI COMPRISING A COMPLEX OF NON-ABSORBABLE ANTIBIOTIC AND CLAY MINERAL <130> LNP180126 <160> 4 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for amplification of ureA and ureC specific for H. pylori. <400> 1 tgatgctcca ctacgctgga 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for amplification of ureA and ureC specific for H. pylori. <400> 2 gggtatgcac ggttacgagt 20 <210> 3 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for amplification of GAPDH <400> 3 tggggtgatg ctggtgctg 19 <210> 4 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for amplification of GAPDH <400> 4 ggtttctcca ggcggcatgt c 21

Claims (11)

  1. 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체, β-락탐 항생제 및 위산억제제를 포함하며,
    상기 비흡수성 항생물질은 젠타마이신 또는 네틸마이신이고,
    상기 점토광물은 층간 팽창성을 가지고 있으며, 내부에 항생물질을 삽입하여 전달체로 사용될 수 있는 점토광물로, 몬모릴로나이트, 벤토나이트, 바이델라이트, 논트로나이트, 사포나이트 및 헥토라이트로 구성되는 군으로부터 선택되는 점토광물인,
    헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 약학적 조성물.
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  6. 제 1항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 상기 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체가 경구 투여되어 식도를 통하여 위에 도달한 후 위 점액층에 부착되어 항생물질을 방출하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 우레아제 억제 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 헬리코박터 파일로리 균이 원인인 위장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  9. 비흡수성 항생물질 및 점토광물의 복합체, β-락탐 항생제 및 위산억제제를 포함하며,
    상기 비흡수성 항생물질은 젠타마이신 또는 네틸마이신이고,
    상기 점토광물은 층간 팽창성을 가지고 있으며, 내부에 항생물질을 삽입하여 전달체로 사용될 수 있는 점토광물로, 몬모릴로나이트, 벤토나이트, 바이델라이트, 논트로나이트, 사포나이트 및 헥토라이트로 구성되는 군으로부터 선택되는 점토광물인,
    헬리코박터 파일로리 제균을 위한 경구 투여용 키트.
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