KR101967970B1 - 심장혈관 질환의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질 (ｃｅｔｐ) 저해인자 및 상기 저해인자를 포함하는 약학적 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 심장혈관 질환, 특히 고지질혈증 또는 혼합형 이상지질혈증을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질 (CETP) 저해인자에 관한 것이다. 본 발명의 추가의 양상은 심장혈관 질환을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 약학적 조성물로서, 치료 유효량의 상기 CETP 저해인자를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

Description

심장혈관 질환의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질 (ＣＥＴＰ) 저해인자 및 상기 저해인자를 포함하는 약학적 조성물 {CHOLESTERYL ESTER TRANSFER PROTEIN (CETP) INHIBITOR AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING SAID INHIBITOR FOR USE IN THE TREATMENT OR PREVENTION OF CARDIOVASCULAR DISEASES}

본 발명은 심장혈관 질환, 특히 고지질혈증 또는 혼합형 이상지질혈증을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질 (cholesteryl ester transfer protein) (CETP) 저해인자 및 상기 CETP-저해인자를 포함하는 약학적 제제에 관한 것이다.

전향적 유행병학 연구는 저밀도 지질단백질-콜레스테롤 (LDL-C) 수준과 심장혈관 질환 (CVD) 위험 사이의 강한 연관성을 보여줬다 (1). 이들 아테롬발생성 LDL-C 수준을 감소시키기 위한 스타틴 요법의 후속적인 적용은 CVD-관련 이환률 및 사망률의 현저한 감소를 초래했다: LDL-C 의 매 1 mmol/ℓ 감소는 CVD 사건의 추정된 22% 감소 및 전 원인 사망률의 10% 감소를 초래한다 (2). 이들 인상적 유익에도 불구하고, 큰 잔류 질환 부담이 지속되며, 이는 개별 환자 뿐만 아니라 세계적 건강관리 비용 둘 모두에 대해 큰 영향을 갖는다 (3). 환자에서 이러한 잔류 CVD 위험을 추가로 감소시키기 위해 신규한 치료법이 요구된다.

LDL-C 를 감소시키고 HDL-C 수준을 상승시키는 하나의 새로운 접근법은 콜레스테롤 에스테르 전달 단백질 (CETP) 을 저해하는 것이다. CETP 은 주로 간 및 지방 조직에 의해 분비되는 혈장 단백질이다. CETP 은 HDL 로부터 아포지질단백질 B (Apo B)-함유 입자 (주로 LDL 및 VLDL) 로의 콜레스테릴 에스테르의 전달을 트리글리세리드와의 교환으로 매개하여, 그에 의해 HDL 내의 콜레스테롤 함량을 감소시키며 (V)LDL 내의 콜레스테롤 함량을 선호한다. 따라서, CETP 저해는 HDL-C 내의 콜레스테릴 에스테르를 유지하고 아테롬발생성 Apo B 분획의 콜레스테롤 함량을 감소시킨다는 가설이 세워졌다.

심장혈관 이환률을 감소시키는 CETP 저해의 잠재성을 지지하는 증거에도 불구하고, CETP 저해인자의 임상 개발은 간단하지 않았다. 제 3 상 임상 시험으로 진행하는 첫번째 화합물은 60 ㎎ 으로 투여된 토르세트라핍이었다. 토르세트라핍은 HDL-C 를 72% 증가시키고 LDL-C 를 25% 감소시키는 것으로 밝혀졌으나, 그것은 후속적으로 아토르바스타틴과 조합되었을 때 아토르바스타틴 단독에 비해 심장혈관 사건 및 사망의 예상 밖의 증가를 포함하는 안전성 염려 때문에 개발이 중단되었다 (11).

이들 사건의 메카니즘은 완전히 이해되고 있지 않지만, 토르세트라핍의 오프-타겟 (off-target) 효과 예컨대 증가된 혈압, 전해질의 변화 (나트륨 및 바이카르보네이트의 증가 및 칼륨의 감소) 및 알도스테론의 증가 (무기코르티코이드 활성과 일치함) 로 인한 것이라는 증거가 증가하고 있다 (11,12,13,14,15). 또한 ILLUMINATE 시험에서 암 사망의 겉보기 (유의하지 않은) 증가에 기여한 것으로 가정된, 엔도텔린-1 의 발현을 토르세트라핍이 증가시킨다는 동물 연구로부터의 일부 증거가 존재한다 (16,17). 이들 관찰은 토르세트라핍의 비교적 높은 투여량과 관련될 수 있었다.

후속적으로, 또다른 CETP 저해인자, 달세트라핍은 제 2b 상 임상 시험에 들어갔다. 달세트라핍은 HDL-C 를 30-40% 증가시키고 LDL-C 농도에 대해 최소 효과를 갖는 약한 저해인자인 것으로 밝혀졌으나, 토르세트라핍의 오프-타겟 효과를 나타내는 것으로 보이지 않았다 (18,19,20). 최근에, 달세트라핍 개발은 또한 약물이 600 ㎎ 으로 투여된 제 3 상 연구에서 무용함을 이유로 종료되었다. 효능의 결여는 아마도 중등도의 CETP 저해와 관련되었을 것이다 (18).

2 가지 더 많은 CETP 저해인자, 아나세트라핍 및 에바세트라핍이 현재 제 3 상 임상 시험 중이다. 제 2 상 연구로부터의 데이타는 2 가지 모두 무기코르티코이드 활성이 없는 CETP 저해인자라는 것을 시사한다. 아나세트라핍 200 ㎎ 1일 1회는 단식한 건강한 대상에서 HDL C 를 97% 증가시키고 LDL-C 를 36% 감소시킨 것으로 밝혀졌고 (21), 150 ㎎ 1일 1회 아나세트라핍은 환자에서 HDL-C 를 139% 증가시키고 LDL-C 를 40% 감소시킨 것으로 밝혀졌다 (22). 에바세트라핍 (환자에서 500 ㎎ 1일 1회 단일요법) 은 HDL-C 를 129% 증가시키고 LDL-C 를 36% 감소시킨 것으로 밝혀졌다 (23).

진행 중인 제 3 상 연구에서, 1일 1회 투여량 100 ㎎ 아나세트라팁이 임상적으로 평가되고 있고, 에바세트라핍에 대해서는 1일 1회 투여량 130 ㎎ 이 평가되고 있다. 그러한 비교적 높은 양의 활성 성분은 여러 문제를 초래할 수 있다.

비교적 높은 양의 위에 언급된 CETP-저해인자가 투여되어야 한다는 사실로 인해, 고체 경구 투여 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐은 비교적 클 것이다. 이는 그러한 정제 및 캡슐을 삼키는데 문제를 야기한다. 대안적으로, 복수의 더 작은 정제 또는 캡슐을 투여하기로 선택할 수 있다; 그러나 이는 환자 준수 및 비용에 대해 음성 영향을 갖는다.

본 CETP-저해인자의 사용의 추가의 단점은 CETP-저해를 얻기 위해 사용되어야 하는 비교적 높은 투여량으로 인해, 더 많고 더 강한 부작용이 발생할 수 있다는 점이다. 이는 환자의 육체적 웰빙에 대해 뿐만 아니라 환자 준수에 대해 둘 다 음성 영향을 가질 수 있다. 더욱이, 알려진 CETP-저해인자의 더 낮은 생체이용률로 인해, 대상간 약동학적 변동이 발생할 수 있다. 게다가, 알려진 CETP-저해인자 (예컨대 아나세트라핍) 가 효과적이기 위해서 비교적 높은 투여량이 필요하므로, 이들 CETP-저해인자를 신체로부터 제거하는데 수년이 걸릴 것이다 (참고문헌 The American Journal of Cardiology available online 4 October 2013: Evaluation of Lipids, Drug Concentration, and Safety Parameters Following Cessation of Treatment With the Cholesteryl Ester Transfer Protein Inhibitor Anacetrapib in Patients With or at High Risk for Coronary Heart Disease Antonio M. Gotto Jr. et al.).

따라서, 위에 언급된 단점을 보이지 않는 강력하고 잘 용인되는 CETP-저해인자 및 그의 약학적 조성물을 제공할 필요가 남아 있다.

본 발명의 첫번째 양상은 심장혈관 질환을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 화합물

(이후 화합물 A 로서 언급됨) 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이며, 여기에서 상기 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량은 1 내지 25 ㎎/일 범위이다.

본 발명의 두번째 양상은 심장혈관 질환을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 약학적 조성물로서, 치료 유효량의 화합물 A 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물로 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량은 바람직하게는 약 1 내지 25 ㎎/일 범위이다.

임상 연구는 화합물 A 가 강력한 CETP-저해인자라는 것을 보여줬다. 다른 알려진 CETP-저해인자에 비해, 거의 완전한 CETP 저해에 도달하기 위해 오직 비교적 낮은 투여량의 화합물 A 가 필요하다. 전형적으로, 2.5 ㎎ 만큼 낮은 반복되는 1일 1회 투여량의 화합물 A 는 거의 완전한 CETP-저해에 도달하는데 이미 충분한 것으로 입증되었다. 이들은 다른 CETP-저해인자에 사용되어야 하는 것보다 상당히 더 낮은 투여량이다.

더욱이, 임상 연구는 또한 화합물 A 가 잘 용인되고 심각한 부작용을 초래하지 않는다는 것을 밝혔다. 예를 들어, 혈압 또는 심박수에 대해 임상적으로 유의한 효과가 관찰되지 않고, 화합물 A 는 혈청 전해질 또는 알도스테론 농도에 대해 효과를 갖는 것으로 보이지 않는다. 임상 연구는 또한 화합물 A 가 식품 효과를 겪지 않고, 청구된 투여량에서 투여 중단시 연장된 잔류 효과를 나타내지 않는다는 것을 밝혔다.

본 발명의 세번째 양상은 약학적 조성물 자체에 관한 것이며, 이 조성물은 1 내지 25 ㎎ 의 화합물 A 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함한다.

본 발명의 네번째 양상은 그러한 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.

정의

본원에서 사용되는 용어 '약학적 조성물' 은 그것의 관습적 의미를 갖고, 약학적으로 허용가능한 조성물을 나타낸다.

본원에서 사용되는 용어 '약학적으로 허용가능한' 은 그것의 관습적 의미를 갖고, 적절한 의학적 판단의 범위 내에서 합리적인 유익/위험 비율에 상응하는 과잉 독성, 자극, 알러지 반응 및 기타 문제 합병증 없이 포유류, 특히 인간의 조직과의 접촉에 적합한, 화합물, 재료, 조성물 및/또는 투여 형태를 나타낸다.

본원에서 사용되는 용어 '치료 유효량' 은 그것의 관습적 의미를 갖고, 포유류에서 요망되는 효과를 생성하는데 효과적인, 예를 들어, 포유류, 특히 인간에게 영향을 미치는 질환 또는 상태의 증상을 감소, 제거, 치료, 예방 또는 제어하는데 효과적인 양 또는 농도를 나타낸다.

용어 '제어' 는 포유류에게 영향을 미치는 질환 및 상태의 진행의 둔화, 간섭, 정지 또는 중단이 있을 수 있는 모든 과정을 나타내는 것으로 의도된다. 그러나, '제어' 는 반드시 모든 질환 및 상태 증상의 완전한 제거를 나타내는 것은 아니고, 예방적 처리를 포함하는 것으로 의도된다.

본원에서 사용되는 용어 '부형제' 는 그것의 관습적 의미를 갖고, 과립, 고체 또는 액체 경구 투여 제형을 제조하기 위한 약학적 기술에서 통상적으로 사용되는 약학적으로 허용가능한 성분을 나타낸다.

용어 '염' 은 본원에서 사용되는 그것의 관습적 의미를 갖고, 화합물 A 의 산 부가 및 염기 염을 포함한다.

용어 '증가된 위험' 은 그것의 관습적 의미를 갖고, 개체에서, 남성 또는 여성이 2.6 mmol/l 초과의 LDL-콜레스테롤 수준을 가져서, 그들이 더 낮은 수준의 경우에 비해 심장혈관 사건의 증가된 위험에 노출되게 되는, 대상, 바람직하게는 인간에서의 상황을 나타낸다.

용어 '치료' 는 본원에서 사용되는 그것의 관습적 의미를 갖고, 치유적, 일시적 및 예방적 처리를 나타낸다.

용어 '심장혈관 질환' 은 그것의 관습적 의미를 갖고, 동맥경화증, 말초 혈관 질환, 고지질혈증, 혼합형 이상지질혈증 베타지질단백혈증, 저알파지질단백혈증, 콜레스테롤과잉혈증, 트리글리세리드과잉혈증, 가족성-콜레스테롤과잉혈증, 협심증, 허혈, 심장 허혈, 뇌졸중, 심근 경색증, 재관류 손상, 혈관성형술 후 재협착증, 고혈압, 뇌경색증 및 대뇌 뇌졸중을 포함한다.

용어 '단위 투여 형태' 는 그것의 관습적 의미를 갖고, 대상, 바람직하게는 인간에게 투여되어, 효과적일 수 있는 능력을 갖고, 치료제, 즉 화합물 A 를 포함하는 물리적으로 및 화학적으로 안정적인 단위 투여물로서 유지되면서 쉽게 취급 및 포장될 수 있는 투여 형태를 나타낸다.

발명의 상세한 설명

본 발명의 첫번째 양상은 심장혈관 질환을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상, 바람직하게는 인간의 치료에서 사용하기 위한 화합물:

(이후 화합물 A 로서 언급됨) 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이며, 여기에서 상기 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량은 약 1 내지 25 ㎎/일 범위이다.

화합물 A 자체는 이미 유럽 특허 출원 EP1730152 에서 기재된 바 있으며, 이 문헌에서 화합물 A 는 많은 기타 CETP-저해인자 중에서 CETP-저해인자로서 식별되었다. 놀랍게도, 이제 EP 1730152 에서 언급된 또는 임상적으로 사용된 기타 CETP-저해인자에 비해 화합물 A 가 예외적으로 양호한 약역학적 및 약동학적 특성을 갖는다는 것, 특히, 화합물 A 가 기타 알려진 CETP-저해인자보다 놀랍게도 더 양호한 생체이용률을 갖는다는 것이 밝혀졌다. 화합물 A 는 임상적으로 약 1 내지 25 ㎎/일, 바람직하게는 1 내지 10 ㎎/일 이하의 비교적 낮은 투여량으로 효과적으로 사용될 수 있다는 것이 또한 밝혀졌다. 그러한 투여량은 바람직하게는 화합물 A 및 부형제를 포함하는 약학적 조성물로서 투여된다. 선행 기술은 그렇게 낮은 투여량으로 CETP-저해인자를 효과적으로 사용하는 것이 가능하다는 것을 공개하거나 시사하지 않는다. 이와 관련하여 아나세트라핍 및 에바세트라핍을 참조하며, 이들은 둘다 임상 환경에서 100 ㎎ 초과의 1일 1회 투여량을 요구했다.

바람직하게는, 투여량 약 5 내지 10 ㎎/일 이하의 화합물 A, 대안적으로 투여량 약 5 ㎎/일 의 화합물 A, 투여량 약 10 ㎎/일 의 화합물 A 또는 투여량 약 25 ㎎/일 의 화합물 A 가 사용된다.

임상 연구는 약 1 내지 25 ㎎/일 의 청구된 투여 범위 내에서 화합물 A 를 투여받은 대상에서 거의 완전한 CETP-저해, HDL-콜레스테롤 농도의 유의한 증가 및 LDL-콜레스테롤 수준의 현저한 감소를 달성하는 것이 가능하다는 것을 보여줬다. 임상 연구는 또한 이들 효과가 화합물 A 의 단일 투여 후에 이미 발생한다는 것을 보여줬다.

그러나, 화합물 A 를 필요로 하는 대상에게 연장된 시간 동안 1일 1회 투여량 약 1 내지 25 ㎎, 바람직하게는 1일 1회 투여량 약 5 내지 10 ㎎ 을 투여하는 것이 바람직하다. 바람직하게는, 화합물 A 를 필요로 하는 대상은 1일 투여량 약 1 내지 25 ㎎, 바람직하게는 약 5 내지 10 ㎎ 을, 1, 5, 10, 20, 40 52, 100 또는 200 주 동안 투여받는다.

투여량 1 내지 25 ㎎/일 을 그것을 필요로 하는 대상, 즉 심장혈관 질환을 앓고 있는 사람 또는 심장혈관 질환에 대한 증가된 위험을 갖는 사람에게 적어도 1 주 동안, 바람직하게는 적어도 3 주 동안 투여하는 것이 특히 바람직하다.

임상 연구는 또한 화합물 A 의 약 1 내지 25 ㎎/일, 바람직하게는 약 5 내지 10 ㎎/일 의 비교적 낮은 투여량에서, 심각한 유해 효과가 보이지 않는다는 것을 보여줬다. 예를 들어, 혈압 또는 심박수에 대해 임상적으로 유의한 효과가 관찰되지 않았고, 화합물 A 는 청구된 투여량에서, 예컨대 혈청 전해질 또는 알도스테론 농도에 대해 오프-타겟 효과를 갖는 것으로 보이지 않는다. 임상 연구는 또한 청구된 1일 투여량에서 화합물 A 는 식품 효과를 겪지 않고 청구된 투여량에서 화합물 A 는 불완전한 약물 세척 (washout) 으로 인해 투여 중단시 연장된 잔류 효과를 보이지 않는다는 것을 보여줬다.

투여량 약 1 내지 25 ㎎/일, 바람직하게는 투여량 약 5 내지 10 ㎎/일 의 화합물 A 는 심장혈관 질환, 예컨대 동맥경화증, 말초 혈관 질환, 고지질혈증, 혼합형 이상지질혈증, 베타지질단백과잉혈증, 저알파지질단백혈증, 콜레스테롤과잉혈증, 트리글리세리드과잉혈증, 가족성-콜레스테롤과잉혈증, 협심증, 허혈, 심장 허혈, 뇌졸중, 심근 경색증, 재관류 손상, 혈관성형술 후 재협착증, 고혈압, 뇌경색증, 대뇌 뇌졸중을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 사람의 치료에서 사용하기에 특히 적합하다.

CETP 활성의 현저한 감소, LDL-콜레스테롤 혈장 농도의 현저한 감소 및 HDL-콜레스테롤 혈장 농도의 유의한 증가, 부작용 및 식품 효과의 결여에 비추어, 1일 투여량 약 1 내지 25 ㎎, 바람직하게는 1 내지 10 ㎎ 의 화합물 A 가 혼합형 이상지질혈증, 고지질혈증, 또는 특히 일차 고지질혈증을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 환자의 치료에서 사용하기에 특히 적합한 것으로 보인다.

화합물 A 자체 외에도, 그것의 약학적으로 허용가능한 염이 또한 사용될 수 있다. 화합물 A 의 약학적으로 허용가능한 염은 그것의 산 부가 및 염기 염, 예컨대 바람직하게는 칼슘, 칼륨 또는 나트륨 염을 포함한다. 적합한 염에 대한 검토를 위해, Stahl 및 Wermuth 에 의한 "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 200) 를 참조한다.

화합물 A 의 약학적으로 허용가능한 염은 화합물 A 의 용액 및 요망되는 산 또는 염기를 적절히 함께 혼합하여 쉽게 제조될 수 있다. 염은 용액으로부터 침전되고 여과에 의해 수집될 수 있거나 또는 용매의 증발에 의해 회수될 수 있다. 염에서의 이온화의 정도는 완전히 이온화된 상태에서부터 거의 이온화되지 않은 상태까지 다양할 수 있다.

본 발명은 또한 상기 심장혈관 질환을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 화합물 A 의 약학적으로 허용가능한 용매화합물 및 그러한 용매화합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

화합물 A 의 소위 '전구약물' 이 또한 본 발명의 범위 내에 있다. 따라서 화합물 A 의 특정 유도체는 그 자체로는 약리 활성이 적거나 없을 수 있지만, 신체 내에 투여되었을 때 요망되는 CETP-저해 활성을 갖는 화합물 A 로 전환될 수 있다. 그러한 유도체는 본 발명의 맥락 내에서 '전구약물' 로서 언급된다. 본 발명에 따르면 전구약물은, 예를 들어, 화합물 A 에 존재하는 적당한 관능기를 예를 들어 H. Bundgaard 에 의한 "Design of Prodrugs" (Elsevier, 1985) 에 기재된 바와 같은 당업자에게 '프로-모이어티 (pro-moieties)' 로서 알려진 특정 모이어티로 대체하여 생산될 수 있다.

화합물 A 의 청구된 투여량은 바람직하게는 그것을 필요로 하는 대상에게 경구 투여된다. 바람직하게는, 화합물 A 는 약학적 조성물에 의해 투여된다. 경구 투여는 화합물이 위장관에 들어가도록 삼키는 것을 수반할 수 있다. 대안적으로, 볼 또는 설하 투여가 또한 이용되어 화합물 A 가 입으로부터 직접 혈류에 들어갈 수 있다. 아래 기재된 바와 같이, 약학적 제제는 경구 투여를 용이하게 하도록 개발될 수 있다.

본 발명의 두번째 양상은 심장혈관 질환을 앓고 있거나 그에 대한 증가된 위험을 갖는 대상의 치료에서 사용하기 위한 약학적 조성물로서, 치료 유효량의 화합물 A 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 포함하는 조성물에 관한 것이다. 화합물 A 및 그것의 약학적 염 또는 전구약물은 위에 기재된 바와 같을 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물로 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량은 바람직하게는 약 1 내지 25 ㎎/일, 더욱 바람직하게는 약 5 내지 10 ㎎/일 범위이다. 대안적으로, 투여량 약 5 ㎎ 의 화합물 A, 투여량 약 10 ㎎ 의 화합물 A 또는 투여량 약 25 ㎎ 의 화합물 A 가 사용된다.

위에 이미 기재된 바와 같이, 임상 연구는 화합물 A 의 그러한 비교적 낮은 투여량으로, CETP 활성의 현저한 감소, LDL-콜레스테롤 혈장 농도의 현저한 감소 및 HDL-콜레스테롤 혈장 농도의 유의한 증가가 달성된다는 것을 보여줬다. 게다가, 그러한 투여량으로 심각한 유해 효과가 발생하지 않았고, 식품 효과가 관찰되지 않았고, 화합물 A 가 투여 중단시 연장된 잔류 효과를 보이지 않는다는 것이 또한 밝혀졌다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 약학적 조성물은 바람직하게는 그것을 필요로 하는 대상에게 1, 5, 10, 20, 40, 52, 100 또는 200 주 동안 투여된다. 약학적 조성물을 그것을 필요로 하는 대상에게 적어도 1 주, 바람직하게는 적어도 3 주 동안 투여하는 것이 특히 바람직하다.

본 발명의 바람직한 구현예에서, 약학적 조성물은 단일 단위 투여 형태로서 제형화되어 있다. 단일 단위 투여 형태는 바람직하게는 고체 경구 투여 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐이다. 바람직하게는, 단일 단위 투여 형태는 약 1 내지 25 ㎎ 의 화합물 A, 바람직하게는 약 5 내지 10 ㎎ 의 화합물 A 를 포함한다. 약 1 내지 25 ㎎, 바람직하게는 약 5 내지 10 ㎎ 의 화합물 A 를 포함하는 고체 경구 투여 형태 예컨대 정제 또는 캡슐을 사용하는 것이 특히 바람직하다.

본 발명의 맥락 내에서 사용될 수 있는 고체 경구 투여 형태는 정제 및 캡슐 외에도 특히 당의정, 로젠지 (lozenges), 알약, 미니-정제, 펠렛, 비이드 및 봉지에 포장된 과립을 포함한다. 본 발명의 약학적 제제에 사용될 수 있는 액체 경구 투여 형태는 드링크, 용액, 음료 및 에멀전을 포함하나, 그에 제한되지 않는다.

본 발명에서 사용하기 위한 약학적 조성물은 화합물 A 외에도 또한 부형제, 즉 과립, 고체 또는 액체 경구 투여 제형의 제조를 위한 약학적 기술에서 통상적으로 사용되는 약학적으로 허용가능한 성분을 포함한다.

부형제의 카테고리의 예는 결합제, 붕괴제, 윤활제, 활주제, 충전제 및 희석제를 포함하나, 그에 제한되지 않는다. 당업자는 일상적 실험에 의해 과도한 부담 없이 과립 및/또는 고체 경구 투여 형태의 특별한 요망되는 특성과 관련하여 하나 이상의 앞서 언급된 부형제를 선택할 수 있다. 사용되는 각각의 부형제의 양은 당업계에서 관습적인 범위 내에서 다양할 수 있다. 하기 참고문헌은 본원에 모두 참조로 포함되며, 경구 투여 형태를 제형화하는데 사용되는 기술 및 부형제를 공개한다. "The Handbook of Pharmaceutical Excipients", 4th edition, Rowe et al., Eds., American Pharmaceuticals Association (2003); 및 "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", 20th edition, Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2000) 를 참고한다.

본 발명의 세번째 양상은 약 1 내지 25 ㎎ 의 화합물 A 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물 자체에 관한 것이다. 바람직하게는, 약학적 조성물은 5 내지 10 ㎎ 의 화합물 A 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다.

화합물 A 및 그것의 약학적 허용가능한 염 및 가능한 전구약물은 위에 기재된 바와 같은 형태일 수 있다.

약학적 조성물은 바람직하게는 위에 기재된 바와 같은 단일 단위 투여 형태로서 제형화되어 있다. 더욱 바람직하게는, 조성물은 액체 경구 투여 형태로서 또는 고체 경구 투여 형태, 가장 바람직하게는 정제 또는 캡슐로서 제형화되어 있다.

바람직한 구현예에서 약학적 조성물은 약 1 내지 25 ㎎, 바람직하게는 5 내지 10 ㎎ 의 화합물 A 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 정제 또는 캡슐을 포함한다.

본 발명의 네번째 양상은 위에 언급된 약학적 조성물의 제조 방법에 관한 것이다. 화합물 A 의 약학적 조성물은 당업자에게 통상적으로 알려진 수단에 의해 제조될 수 있다.

본 발명은 하기 비제한적 실시예에 의해 추가로 설명될 것이다.

실시예

하기 실시예에서 화합물 A 를 시험관내 어세이에서, 생체외에서 및 임상적으로 연구했다. 화합물 A 를 분석하기 위해서 국제 특허 출원 WO2005095409 에 기재된 방법을 사용했다.

실시예 1: 시험관내 및 생체외

시험관내 어세이의 실험 방법

(a) 인간 혈장 제조

인간 혈액을 건강한 남성 자원자로부터 0.1% EDTA 를 항응고제로서 사용하여 얻었고, 3,000 rpm 에서 15 분 동안 4 ℃ 에서 원심분리했다. 인간 혈장을 모으고, 그 후 ³H-표지된 HDL 의 제조에 사용하거나 -80 ℃ 에서 CETP 어세이를 위해 사용 전까지 저장했다. ³H-표지된 HDL 을 Glenn 및 Melton (Methods in enzymology. 263; 339-351, 1996) 에 의해 기재된 바와 같이 인간 혈장으로 제조했다. 혈장의 비중을 비중계에 의해 측정했고, 고체 KBr 을 첨가함으로써 밀도를 1.125 g/㎖ 로 조정했다. 100,000 rpm 에서 4 시간 동안 12 ℃ 에서 원심분리 후에 (회전자: 100.4, Optima TLX, Beckman), d > 1.125 g/㎖ 분획을 4 ℓ 의 Tris-염분-EDTA 완충액 (TSE; 50 mmol/ℓ Tris, 150 mmol/ℓ NaCl, 2 mmol/ℓ EDTA, pH7.4) 에 대해 18 시간 동안 4 ℃ 에서 투석했다. [1,2-³H(N)]-콜레스테롤 (37 MBq/㎖) 을 투석된 혈장 분획에 2 μCi/㎖ 의 양으로 첨가했다. 튜브를 N₂ 기체 스트림 하에 꽉 밀봉하고, 37 ℃ 에서 18 시간 동안 약하게 교반하면서 인큐베이션하여 내생적 LCAT 에 의한 방사성-표지된 콜레스테롤의 에스테르화를 허용했다. 인큐베이션된 혈장 분획을 고체 KBr 에 의해 d = 1.21 g/㎖ 로 조정하고, 100,000 rpm, 12 ℃ 에서 5 시간 동안 원심분리했다. ³H-표지된 HDL 분획을 2 ℓ 의 TSE 에 대해 4 ℃ 에서 18 시간 동안 투석했다. ³H-표지된 HDL 의 방사능을 액체 신틸레이션 계수기에서 계수했다. ³H-표지된 HDL 를 4 ℃ 에서 사용 전까지 저장했다.

(b) CETP 어세이

CETP 활성을 공여체 HDL 로부터 수용체 VLDL/LDL 로의 ³H-표지된 CE 전달의 속도로서 확인했다. 인간 혈장 (94 ㎕) 을 DMSO (1 ㎕) 에 용해된 화합물과 함께 24 시간 동안 37 ℃ 에서 예비-인큐베이션하고, 그 후 4 시간 동안 4 ℃ 또는 37 ℃ 에서 5 ㎕ 의 ³H-표지된 HDL 과 함께 인큐베이션했다. 100 ㎕ 의 포스포텅스테이트/MgCl₂ 시약 (Wako pure chemical) 을 첨가하여 apoB-함유 지질단백질을 침전시켰다. 3,000 rpm 에서 10 분 동안 실온에서 원심분리 후에, 상청액의 방사능을 액체 신틸레이션 계수기에서 계수했다. CETP 활성을 37 ℃ 및 4 ℃ 에서 인큐베이션된 샘플 사이의 방사능의 차이로서 다음과 같이 확인했다: % 저해 = 100 - {dpm (4 ℃ 에서 DMSO - 37 ℃ 에서 시험 화합물) / dpm (4℃ 에서 DMSO - 37 ℃ 에서 DMSO)} × 100. CETP 활성의 50% 저해를 달성하는 농도 (IC₅₀) 를 추정했다.

생체외 어세이의 실험 방법

(a) 화합물 투여 및 혈액의 수집

시리안 골든 햄스터를 1-주 기후순응 후에 실험에 사용했다. 밤새 단식 후에, 동물에게 0.5% 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 중 화합물 현탁액을 10 ㎖/㎏ 의 부피로 경구 제공했다. 투여 3 시간 후에 에테르로 깊은 마취 하에 복부대동맥으로부터 혈액을 수집했다. 혈청의 제조를 위해, 수집된 혈액을 응고 활성제를 함유하는 플라스틱 튜브로 옮기고, 15 분 동안 실온에서 가만히 놔두고, 원심분리했다. 혈청 CETP 활성을 즉시 확인했다.

(b) 생체외 혈청 CETP 활성의 확인

95 ㎕ 혈청을 2 개의 96-웰 V-바닥 플레이트 내의 1.5 mM 5,5'-디티오-비스(2-니트로벤조산)을 함유하는 5 ㎕ 의 0.1 mM 나트륨 포스페이트 완충 식염수 (pH 7.0) 에 첨가했다. 하나의 플레이트를 4 ℃ 에서 인큐베이션하고, 다른 플레이트를 37 ℃ 에서 인큐베이션했다. 18 시간의 인큐베이션 후에, 각각의 샘플을 아포지질단백질 B-함유 지질단백질의 침전을 위한 100 ㎕ 의 시약 (포스포텅스테이트/MgCl₂ 시약, Wako pure chemical) 과 혼합하고, 10 분 동안 실온에서 가만히 놔두고, 원심분리했다. 상청액 내의 총 콜레스테롤 (TC) 및 유리 콜레스테롤 (FC) 을 상업적 키트 (콜레스테롤 E-시험 wako, 및 유리 콜레스테롤 E-시험 wako; Wako pure chemical) 를 사용하여 측정했다. FC 를 TC 로부터 뺄셈하여 콜레스테릴 에스테르 (CE) 를 계산했다. CETP 활성을 하기 식에 의해 확인했다:

CETP 활성 = [CETP 전달]* / [4 ℃ 인큐베이션 샘플에서의 CE 값]

*CETP 전달 = [4 ℃ 인큐베이션 샘플에서의 CE 값] - [37 ℃ 인큐베이션 샘플에서의 CE 값]

(c) 결과

실시예 2: 화합물 A 또는 플라시보의 복수의 투여를 수령하는 대상의 이중 맹검 무작위 연구

연구 디자인

임상 연구는 18 내지 55 세의 백인 남성 대상의 5 개 그룹에서의 반복된 투여 연구였다. 각각의 대상은 화합물 A/플라시보의 단일 경구 투여를 Day 1 에, 그에 뒤이어 1일 1회 투여를 Days 8 내지 35 (5 ㎎ 화합물 A/플라시보 - 그룹 1) 또는 Days 8 내지 28 (1, 2.5, 10 및 25 ㎎ 화합물 A/플라시보 - 그룹 2 내지 5) 에 수령했다. 모든 투여를 연구 센터에서 표준 아침식사 후에 투여했다. 각각의 투여 그룹 내의 대상을 10 화합물 A 대 2 플라시보의 비율로 연구 치료에 할당했다. 약동학적 및 약역학적 (CETP 활성, CETP 농도, HDL-C, LDL-C, 총 콜레스테롤, 트리글리세리드) 평가를 위한 혈액 샘플을 각각의 투여 전부터 및 간격을 두고 연구 전체를 통하여 마지막 투여 후 336 시간 까지 수집했다. 이차 약역학적 종점 (아포지질단백질 A1, A2, B, 및 E, HDL2-C, HDL3-C, 인지질, HDL-유리 콜레스테롤 [HDL-FC], HDL-콜레스테릴 에스테르 [HDL-CE], HDL-인지질 [HDL-PL], HDL-트리글리세리드 [HDL-TG], 및 LDL 입자 크기를 포함함) 을 간격을 두고 마지막 투여일 전까지 측정했다. 약동학 평가를 위해 소변을 예비 투여로부터 및 간격을 두고 첫번째 및 마지막 투여 후 72 시간까지 수집했다. 유해 사건, 혈압 및 맥박수, ECG 를 포함하는 안전성 평가, 실험실 안전성 시험 (알도스테론을 포함) 및 물리적 검사를 2 가지 연구 전체를 통하여 수행했다.

분석 방법

화합물 A 의 혈장 및 소변 농도를 검증된 액체 크로마토그래피와 직렬 질량 분광분석법 (LC/MS/MS) 방법을 사용하여 확인했다. 2 가지 어세이에 대한 정량화 하한 (LLQ) 은 0.500 ng/㎖ 였다. CETP 의 혈장 농도를 정량화 하한 (LLQ) 이 0.500 ㎍/㎖ 인 검증된 효소-연결 면역흡착 어세이 (ELISA) 방법을 사용하여 확인했다. CETP 활성을 공여체 HDL 로부터 수용체 VLDL/LDL 로의 [³H]-표지된 CE 전달의 속도로서 확인했다. [³H]CE-표지된 HDL 을 인간 혈장에 첨가하고, 4 시간 동안 37 ℃ 에서 인큐베이션했다. 비-HDL 지질단백질이 침전되고 HDL 로부터 분리되고, 상청액 내의 방사능의 양을 정량화했다. CETP 활성을 37 ℃ 및 4 ℃ 에서 인큐베이션된 샘플 사이의 방사능의 차이로서 확인했다. HDL-C 및 LDL-C 를 Modular 분석기 (Roche Diagnostics) 를 사용하여 균일 효소 비색 어세이에 의해 측정했다. 총 콜레스테롤 및 트리글리세리드를 각각 Modular 분석기 (콜레스테롤 옥시다아제 퍼옥시다아제-퍼옥시다아제 아미노페나존 페놀 [CHOP-PAP]) 방법 및 글리세롤 포스페이트 옥시다아제 [GPO-PAP] 방법을 사용하여 균일 효소 어세이에 의해 측정했다. ApoA1, ApoA2, ApoB 및 ApoE 를 Rolf Greiner Biochemica (독일) 로부터의 시약 및 Siemens (독일) 로부터의 N-아포단백질 표준 혈청을 사용하여 면역탁도측정에 의해 측정했다. LDL 입자 크기를 기울기 겔 전기영동에 의해 확인했다. HDL 분획을 조합된 초원심분리-침전 방법 (베타-정량화) 에 의해 분리했다. HDL-2 및 HDL-3 분획을 그 후 추가의 초원심분리에 의해 분리했다. HDL, HDL-2 및 HLD-3 분획 내의 총-콜레스테롤, HDL 분획 내의 유리 콜레스테롤, HDL 분획 내의 트리글리세리드 및 혈장 및 HDL-분획 내의 인지질을 Diasys Diagnostics (독일) 로부터의 효소적 방법 및 시약을 사용하여 측정했다. 측정을 Olympus AU600 자동 분석기에서 수행했고, 각각 Roche Diagnostics (총-콜레스테롤, 트리글리세리드) 및 Diasys Diagnostics (유리 콜레스테롤, 인지질) 로부터의 이차 표준을 사용하여 보정했다. 에스테르화된 콜레스테롤을 총-콜레스테롤과 유리 콜레스테롤 사이의 차이로서 계산했다.

통계 분석

연구를 위한 샘플 크기를 통계적 검증력 보다는 실제적 고려에 기초하여 선택했다. 각각의 그룹 내의 대상의 수는 각각의 연구의 주된 목적을 평가하는데 적절한 것으로 여겨졌다. 대상을 컴퓨터-생성된 무작위화 코드에 의해 각각의 그룹 내에 화합물 A 또는 플라시보에 할당했다. 약동학적 파라미터를 WinNonlin 소프트웨어 버전 4.1 (Pharsight Corporation, USA) 을 사용하여 비-구획 방법에 의해 확인했다. 모든 데이타를 기술 통계학을 사용하여 치료 그룹 마다 열거하고 요약했다. 연구에서, 각각의 화합물 A 투여량 수준에서 기준선으로부터의 최대 퍼센트 변화를 ANOVA 모델을 사용하여 모아진 플라시보와 비교했다. 모든 통계 분석을 SAS 버전 6.12 이상 (SAS Institute Inc. USA) 을 사용하여 수행했다.

약동학적 결과

연구에서, 혈장 농도는 1 내지 25 ㎎ 의 단일 투여 후 투여량에 대략 비례하여 증가하는 것으로 보였지만, 비-비례의 원칙이 정상 상태에서 관찰되었다: 투여량 25-배 증가의 경우에 C_min,ss, AUC_0-tau,ss 및 C_max,ss 에서 각각 7-배, 9-배 및 12-배 증가. T_max 는 투여량에 독립적이었으며, 중간 값은 투여후 4 내지 6 시간이었다. 단일 및 복수 투여 후 변산도는 중간 정도였으며, C_max, C_min 및 AUC 파라미터에 대한 CVs 는 ≤33% 였다. 저점 농도의 시각 검사는 화합물 A 가 매일 투여 1 내지 2 주 내에 정상 상태에 도달했다는 것을 시사한다. 마지막 투여 후 화합물 A 의 평균 말단 반감기는 121 내지 151 시간이었고 투여량에 독립적이었다. 5 내지 25 ㎎ 의 화합물 A 의 단일 및 복수의 투여 사이에 유사한 반감기가 관찰되었다. 화합물 A 는 1일 1회 투여시 투여량-의존적 방식으로 축적되었으며, 1 ㎎ 에서 대략 6-배 증가 내지 25 ㎎ 에서 2-배 증가했다.

약역학적 결과

기준선 약역학적 파라미터는 연구의 치료 그룹 전체에서 잘 균형을 이루었다. 화합물 A 는 단일 및 반복된 투여 후에 둘다 CETP 활성을 투여량-의존적 방식으로 강하게 저해했다. 2.5, 5, 10 내지 25 ㎎ 1일 1회 화합물 A 의 반복된 투여 후에 거의 완전한 CETP 저해가 관찰되었다 (~92 내지 99%) (표 1). 이러한 저해 수준은 반복된 투여 기간 전체를 통하여 유지되었고, 각각의 투여의 최대 효과가 1일 1회 투여의 1 주 내에 달성되었다. 마지막 투여 후 저해의 지속시간은 투여량-의존적이었으며, 활성은 최저 투여량 (1 ㎎) 후 2 주까지 기준선 수준에 접근했으나, 10 및 25 ㎎ 투여 후 2 주에 여전히 기준선보다 대략 50% 아래였다. CETP 활성은 화합물 A 투여와 함께 감소했지만, CETP 의 농도는 단일 및 복수의 투여 후 둘다 투여량-의존적 방식으로 증가했다. CETP 농도는 3 주의 10 ㎎ 및 25 ㎎ 1일 1회 화합물 A 투여 후에 기준선으로부터 2.5- 내지 2.8-배 증가했다. CETP 농도는 혈장 약물 농도와 평행해서 하락했다. 화합물 A 투여의 중단 후에, 1 ㎎ 및 5 ㎎ 화합물 A 후 2 주 내에 농도는 기준선 값에 접근했지만, 10 ㎎ 및 25 ㎎ 화합물 A 후 2 주에 농도는 기준선보다 여전히 대략 1.4-배 더 높았다. CETP 활성 및 CETP 농도의 최대 퍼센트 변화는 모든 화합물 A 투여량 수준 (1 내지 25 ㎎) 에서 플라시보와 통계적으로 유의하게 상이했다 (p < 0.0001).

HDL-C 농도는 복수의 투여 후에 투여량-의존적 방식으로 증가했다. 2.5 내지 25 ㎎ 의 투여량에서 1일 1회 화합물 A 는 대략 96% 내지 140% 의 기준선 HDL-C 로부터의 현저한 증가를 초래했다. LDL-C 농도는 투여량-의존적 방식으로 감소했으며, 기준선으로부터의 최대 감소는 2.5 내지 25 ㎎ 1일 1회 화합물 A 후에 대략 40% 내지 53% 였다. 기준선으로부터의 최대 퍼센트 변화는 HDL-C 의 경우 5 내지 25 ㎎ 의 1일 1회 화합물 투여 후에 및 LDL C 의 경우 10 및 25 ㎎ 후에 플라시보와 통계적으로 유의하게 상이했다 (p < 0.0001). HDL-C 및 LDL-C 농도는 화합물 A 투여의 중단 후에 기준선을 향해 돌아가기 시작했고 이는 CETP 저해의 상실과 일치한다. Apo A-1, Apo E, HDL2-C 및 HDL3-C 의 투여량-관련된 증가, 및 Apo B 농도의 감소를 나타내는 경향이 존재한다. 변산도는 모든 이들 변수의 경우에 높았다; 그럼에도 불구하고 데이타는 5 내지 10 ㎎ 1일 1회 화합물 A 의 투여로 최대 효과가 달성될 수 있었음을 시사한다. Apo A2 또는 인지질에서 투여량-관련 경향이 존재하지 않았으나, 1 내지 10 ㎎ 의 투여 범위 전체에서 HDL-FC, HDL-CE 및 HDL-PL 의 투여량-관련 증가 및 HDL-TG 의 감소가 존재했고, 25 ㎎ 화합물 A 에서 추가의 변화가 관찰되지 않았다. LDL 입자 크기에서 주목할 만한 변화가 존재하지 않았다. 또한, 약역학적 변수에 대한 식품, 연령, 성별 또는 인종의 관련 효과에 대한 증거가 존재하지 않았다.

안전성

1일 1회 25 ㎎ 이하의 반복된 투여는 모든 대상에서 잘 용인되었다. 심각한 유해 사건 및 유해 사건으로 인한 대상 철회가 존재하지 않았다. 혈압 또는 심박수, ECG 변수, 물리적 검사 또는 실험실 안전성 시험에 대한 임상적으로 유의한 효과가 존재하지 않았다. 특히, 화합물 A 는 혈청 전해질 또는 알도스테론 농도에 대해 효과를 갖지 않았다.

표 1. 백인 남성 건강한 대상에서 반복된 경구 투여 후에 화합물 A 에 관한 일차 약역학적 변수의 기준선으로부터의 최대 퍼센트 변화

값들은 평균 (SD) 이다

그룹 1 은 Day 1 및 Days 8 내지 42 에 5 ㎎ 화합물 A/플라시보를 수령했다.

그룹 2-5 는 Day 1 및 Days 8 내지 35 에 1, 2.5, 10 및 25 ㎎ 화합물 A/플라시보를 수령했다.

화합물 A 의 화학명 및 화학식

{4-[(2-{[3,5-비스(트리플루오로메틸)벤질] [(2R,4S)-1-(에톡시카르보닐)-2-에틸-6-(트리플루오로메틸)-1,2,3,4-테트라히드로퀴놀린-4-일]아미노}피리미딘-5-일)옥시]부탄산}

참고문헌

Claims (23)

1. 동맥경화증, 말초 혈관 질환, 고지질혈증, 혼합형 이상지질혈증 베타지질단백혈증, 저알파지질단백혈증, 콜레스테롤과잉혈증, 트리글리세리드과잉혈증, 가족성-콜레스테롤과잉혈증, 협심증, 허혈, 심장 허혈, 뇌졸중, 심근 경색증, 재관류 손상, 혈관성형술 후 재협착증, 고혈압, 뇌경색증 및 대뇌 뇌졸중으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물로서,
   조성물은 하기 구조식의 화합물:
   

   

   
   (이후: 화합물 A) 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 포함하고,
   그것을 필요로 하는 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량이 1 내지 25 ㎎/일 범위인, 약학적 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 그것을 필요로 하는 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량이 5 내지 10 ㎎/일 범위인, 약학적 조성물.
3. 제 1 항에 있어서, 그것을 필요로 하는 대상에게 투여되는 화합물 A 의 투여량이 5 ㎎/일 또는 10 ㎎/일 인, 약학적 조성물.
4. 제 1 항, 제 2 항 또는 제 3 항에 있어서, 조성물이 그것을 필요로 하는 대상에게 1, 5, 10, 20, 40, 52, 100, 또는 200 주 동안 투여되는, 약학적 조성물.
5. 제 1 항, 제 2 항 또는 제 3 항에 있어서, 조성물이 그것을 필요로 하는 대상에게 적어도 1 주 동안 투여되는, 약학적 조성물.
6. 제 1 항, 제 2 항 또는 제 3 항에 있어서, 약학적 조성물이 단일 단위 투여 형태로서 제형화되어 있는, 약학적 조성물.
7. 제 6 항에 있어서, 조성물이 액체 경구 투여 형태 또는 고체 경구 투여 형태로서 제형화되어 있는, 약학적 조성물.
8. 제 7 항에 있어서, 조성물이 정제 또는 캡슐로서 제형화되어 있는, 약학적 조성물.
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