KR101878650B1 - 내성암의 내성 극복 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항암제를 유효성분으로 포함하는 암 치료용 약물 내성 담도암 및/또는 담낭암의 내성 극복 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 약학 조성물은 내성 담도암 및/또는 담낭암 세포의 암 치료용 약물에 대한 감수성을 증가시켜 내성을 극복하고, 나아가 상기 내성 담도암 및/또는 담낭암 세포의 세포증식 및 세포사멸을 유도하여 내성암을 치료하는데 사용될 수 있다.

Description

내성암의 내성 극복 또는 치료용 약학 조성물{PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR TREATMENT OR OVERCOMING CHEMO-RESISTANCE OF DRUG RESISTANT CANCER}
본 발명은 내성 담도암 및 담낭암의 내성 극복 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 히스톤 탈아세틸화 저해제(Histone Deacetylation Inhibitor)를 이용하여, 암 치료용 약물인 항암제 등에 대한 내성 담도암 및/또는 담낭암의 내성을 극복하고, 더 나아가 상기 암 치료용 약물에 대한 감수성을 증가시켜 상기 내성 담도암 및/또는 담낭암을 치료할 수 있는 약학 조성물에 관한 것이다.
암 치료에 주로 사용되고 있는 방법 중 수술과 방사선 치료는 절제부위 또는 조사부위에만 효과가 있는 국소요법인 반면, 항암제 치료요법은 전신에 효과를 나타내는 전신요법이다. 대부분의 암은 국소부위에서 발병하여 전신으로 전이되는 질환이며, 조기에 발견된 경우를 제외하고는, 효과적인 국소요법에도 불구하고 재발하는 경우가 많아 대부분의 암 치료에는 국소요법뿐만 아니라 전신에 퍼진 암에 보다 효과가 있는 항암제 치료요법을 병용하여 사용하고 있다.
항암제 투여는 외과적으로 암 부위를 제거한 이후에 육안으로 관찰하기 어려운 아주 작은 암 조직이나 원발성 부위에서 타 조직으로 전이된 암세포를 제거하는 중요한 치료법이다. 그러나, 암 종별로 특정한 항암제에 대하여 약물 내성을 갖고 있거나, 또는 장기적으로 특정 항암제를 투여하는 경우 약물 내성을 획득하여 항암 효과를 제대로 볼 수 없게 되는 경우가 발생될 수 있다. 상기 암세포의 항암제 내성 획득이라는 문제는 오래 전부터 종양을 치료하는데 큰 장애요인이 되고 있다.
현재로써 전신요법에 해당하는 약물 치료요법의 개발 시 암세포 내성 기작의 규명 및 내성의 극복 방법에 대한 연구는 시작단계에 불과하다는 문제점이 존재한다.
한편, 히스톤 단백질은 5가지 유형(H1, H2A, H2B, H3 및 H4)으로 알려져 있다. 히스톤 H2A, H2B, H3 및 H4는 뉴클레오솜에서 발견되고, H1은 뉴클레오솜들 사이에 위치한 링커이다. 각 뉴클레오솜은 그 핵심 내의 각 히스톤형들 중, 뉴클레오솜 구조의 외부 부분에만 존재하는 H1를 제외한 2가지를 함유한다. 히스톤 단백질이 과아세틸화(Hypoacetylation)될 때, DNA 포스페이트(phosphate) 골격에 대한 히스톤의 더 큰 친화성이 있는 것으로 보고되어 있다. 상기 친화성은 DNA가 단단히 결합되도록 할 뿐만 아니라, DNA가 전사적 조절 요소 및 기구로써 이용이 불가능 하도록 하는 역할을 한다고 알려져 있다. 히스톤 단백질의 아세틸화(acetylation)의 조절은, 히스톤 아세틸 트랜스퍼라제(Histone acetyl transferase: HAT) 및 히스톤 디아세틸라제(Histone deacetylase: HDAC) 간의 활성의 균형을 통해 일어난다. HDAC은 크로마톤 핵심 히스톤의 아세틸기 제거를 촉매 하도록 하여, 과아세틸화된 상태를 형성하고, 이를 통해 DNA 전사를 억제하는 것으로 보고되어 있다.
(특허문헌 1) 국제공개공보 WO2013/149026 A2
본 발명의 일 목적은 암 치료용 약물, 특히 항암제에 대한 내성을 극복하고 더 나아가 그에 대한 감수성을 증진시켜, 내성 담도암 및/또는 담낭암을 치료할 수 있는 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명자들은 연구 결과, 히스톤 탈아세틸화 저해제(Histone deacetylation inhibitor) 계열 화합물로, 특히 (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드((E)-N1-(3-(dimethylamino)propyl)-N8-hydroxy-2-((naphthalen-1-yloxy)methyl)oct-2-enediamide)를 사용하는 경우, 항암제를 포함하는 암 치료용 약물에 대한 내성을 갖는 담도암 및/또는 담낭암 세포에서 내성이 극복되고, 더 나아가 상기 암 치료용 약물에 대한 감수성이 증진되어 상기 암 세포의 증식 억제 및 세포사멸 효과가 향상됨을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.
단, 본 발명에서 상기 “히스톤 탈아세틸화 저해제(Histone Deacetylation Inhibitor)”란 유전자 발현 조절 기작에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있는 히스톤 탈아세틸화 효소(Histone deacetylase; HDAC)의 활성을 저해하는 것으로, 히스톤의 과아세틸화(Hypoacetylation)와 이에 따른 유전자 발현의 변화를 유도한다. 상기 히스톤 탈아세틸화 저해제는 a) 금속(특히, 아연)과 결합 가능한 영역(domain), b) 상기 히스톤 탈아세틸화 효소의 채널을 채울 수 있는 링커(linker), 및 c) 히스톤 탈아세틸화 효소 활성 영역의 가장자리에서 구조체들과 상호 작용할 수 있는 표면 인지 영역의 구조적인 특징을 갖고 있다(J. Med. Chem., 2003, 46(24), 5097-5116).
본 발명에서 "암 치료용 약물"이란 암을 치료하기 위한 약물로, 항암제일 수 있고, 그 종류를 특별히 한정하지는 않으나, 바람직하게는 담도암 또는 췌장암의 치료용 약물일 수 있다. 구체적인 예를 들면, 나이트로젠 머스타드, 이마티닙, 옥살리플라틴, 리툭시맙, 엘로티닙, 네라티닙, 라파티닙, 제피티닙, 반데타닙, 니로티닙, 세마사닙, 보수티닙, 악시티닙, 세디라닙, 레스타우르티닙, 트라스투주맙, 게피티니브, 보르테조밉, 수니티닙, 카보플라틴, 소라페닙, 베바시주맙, 시스플라틴, 세툭시맙, 비스쿰알붐, 아스파라기나제, 트레티노인, 하이드록시카바마이드, 다사티닙, 에스트라머스틴, 겜투주맵오조가마이신, 이브리투모맙튜세탄, 헵타플라틴, 메칠아미노레불린산, 암사크린, 알렘투주맙, 프로카르바진, 알프로스타딜, 질산홀뮴 키토산, 젬시타빈, 독시플루리딘, 페메트렉세드, 테가푸르, 카페시타빈, 기메라신, 오테라실, 아자시티딘, 메토트렉세이트, 우라실, 시타라빈, 플루오로우라실, 플루다가빈, 에노시타빈, 플루타미드, 데시타빈, 카페시타빈, 머캅토푸린, 티오구아닌, 클라드리빈, 카르모퍼, 랄티트렉세드, 도세탁셀, 파클리탁셀, 이리노테칸, 벨로테칸, 토포테칸, 비노렐빈, 에토포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 테니포시드, 독소루비신, 이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 미토마이신, 블레로마이신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 피라루비신, 아클라루비신, 페프로마이신, 템시롤리무스, 테모졸로마이드, 부설판, 이포스파미드, 사이클로포스파미드, 멜파란, 알트레트민, 다카바진, 치오테파, 니무스틴, 클로람부실, 미토락톨, 레우코보린, 트레토닌, 엑스메스탄, 아미노글루테시미드, 아나그렐리드, 나벨빈, 파드라졸, 타목시펜, 토레미펜, 테스토락톤, 아나스트로졸, 레트로졸, 보로졸, 비칼루타미드, 로무스틴, 보리노스텟, 엔티노스텟, 5FU 및 카르무스틴 일 수 있으며, 바람직하게는 젬시타빈(Gemcitabine), 시스플라틴(Cisplatin), 5FU, 카페시타빈(Capecitabine), 올살리플라틴(Olsaliplatine), 보리노스텟(Vorinistat) 및 엔티노스텟(Entinostat) 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 보다 바람직하게는 젬시타빈(gemcitabine), 시스플라틴(Cisplatin), 5-FU, 카페시타빈(Capecitabine), 올살리플라틴(Olsaliplatine), 보리노스텟(Vorinistat) 및 엔티노스텟(Entinostat)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에서 "암 치료용 약물에 대한 내성암"이란, 암 치료용 약물, 특히 항암제 치료에 대하여 극히 낮은 감수성을 나타내어, 항암요법 등의 치료법에 의하여 암의 증세가 호전, 완화, 경감 또는 치료증상을 나타내지 않는 암을 의미한다. 상기 암 치료용 약물 내성암은 특정한 항암제에 대하여 처음부터 내성을 가질 수도 있고, 최초에는 내성을 나타내지 않았으나, 긴 시간의 약물 치료로 인하여 암세포 내의 유전자 변이 등에 의하여 동일한 치료제에 대해 더 이상 감수성을 나타내지 않게 되어 발생할 수도 있다. 상기 약물에 대한 내성 암세포에서는, a) 세포막 변화에 의한 약제의 작용저하, b) p 당 단백질과 ABC 운송 유전자(transporter gene)인 다중 약물 저항성 관련 단백질(multi-drug resistance protein; MRP) 등에 의한 약제배출의 촉진, c) P-450 등의 약물 활성화 효소의 활성 저하, d)DNA 수복활성(Topoisomerase) 의 상승 등이 발생된다.
여기서, 상기 “ABC 운송 유전자(transporter gene)”란, 세포막에 존재하며 폭 넓은 약물 특이성을 갖는 ATP(adenosine triphosphate) 의존적인 배출펌프를 말하며, 특정 약물, 특히 항암제에 노출된 암세포가 전에 사용한 적이 없는 구조나 기능이 다른 다양한 항암제에 내성을 보이는 다중 약물 저항성(multi-drug resistance; MDR)을 유발한다. 현재 49개의 ABC 운송 유전자 중 17개의 유전자가 항암제 내성과 관련되어 있다고 알려져 있다(Wei LY, et. al., Biophys J. 69(3):883-95, 1995; Nakayama K, et. al., Int J Cancer. 97(6):751-60, 2002; Spiegl-Kreinecker S, et. al., J Neurooncol. 57(1):27-36, 2002; Stein U, et. al., Int J Cancer. 97(6):751-60, 2002; Wu X, et. al., Gynecol Obstet Invest. 2003;55(4):225-30; Yasui K, et. al., Cancer Res. 64(4):1403-10; Guo Y, et. al., J Biol Chem. 278(32):29509-14, 2003; Belinsky MG, et. al., Cancer Res. 62(21):6172-7, 2002; Moustafa MA, et. al., Cancer Sci. 95(6):530-6, 2004; Duan Z, et. al., Mol Cancer Ther. 3(7):833-8, 2004; Tian Q, et. al., Pharm Res. 2005 Nov;22(11):1837-53; Yoshida M, et. al., Int J Cancer. 94(3):432-7, 2001; Hopper-Borge E, et. al., Cancer Res. 64(14):4927-30, 2004; Huang Y, et. al., Cancer Res. 64(12):4294-301, 2004; Kool M, et. al., Proc Natl Acad Sci USA. 96(12):6914-9, 1999;Boonstra R, et. al., Br J Cancer. 14;90(12):2411-7, 2004; Marie JP, et. al., Blood. 78(3):586-92, 1991; Hirschmann-Jax C, et. al., Proc Natl Acad Sci USA. 101(39):14228-33, 2004)). 상기 ABC 운송 유전자에 의하여 세포 내 약물의 배출이 증가되면, 세포 내부에 있는 약물의 농도가 낮아지기 때문에 내성이 유도된다고 보고되어 있다.
상기한 바와 같이, 본 발명에서 상기 암 치료용 약물, 즉 항암제 등과 같은 약물에 대한 내성 암으로는, ABC 운송 유전자(ABC transporter gene)의 발현이 증가되고, 보다 상세하게는 상기 ABC 운송 유전자의 전령 RNA(mRNA)인 다중 약물 저항성 단백질 3(Multidrug resistance protein; MRP3) 및 다중 약물 저항성 단백질 4(Multidrug resistance protein; MRP4) 중 어느 하나 이상의 발현이 증가 되어 약물 내성을 나타내는 암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에서 상기 "내성 극복"이란, 특정 약물에 대한 내성을 획득한 암 세포의 치료용 약물에 대한 감수성을 증가시키는 작용을 의미한다. 본 발명의 목적상 상기 특정 약물은 암 치료용 약물, 특히 항암제를 의미한다. 상기 감수성의 증가는 내성이 없는 암세포에 대해 성장억제 등의 효과를 보이는 농도와 비교하여, 내성을 획득한 암세포의 성장억제 및 세포사멸 등의 효과를 보이는 농도가 동등하거나 그 이상으로 상승시키는 정도에 이르는 것을 의미한다. 상기 내성 극복과 동의어로서 "내성억제", "내성해제", "저항성 해제" 및 "감수성 증강" 등이 있다.
구체적으로, 본 발명은 히스톤 탈아세틸화 저해제를 유효성분으로 포함하여, 상기 암 치료용 약물에 대한 감수성을 증가시켜 약물 내성암의 내성을 극복하고, 더 나아가 성장 억제 및 세포 사멸을 유도하여 상기 약물 내성암을 치료할 수 있는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 히스톤 탈아세틸화 저해제로는 하기 화학식 1로 표시되는 (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드 ((E)-N1-(3-(dimethylamino)propyl)-N8-hydroxy-2-((naphthalen-1-yloxy)methyl)oct-2-enediamide); 하기 화학식 2로 표시되는 3-[(다이메틸아미노)메틸]-N-{2-[4-(하이드록시카르바모일)페녹시]-1-벤조퓨란-2-카르복사마이드(3-[(Dimethylamino)methyl]-N-{2-[4-(hydroxycarbamoyl)phenoxy]ethyl}-1-benzofuran-2-carboxamide); 하기 화학식 3으로 표시되는 {6-[(다이에틸아미노)메틸]나프탈렌-2-일}메틸 [4-(하이드록시카르바모일)페닐]카르바메이트((6-((diethylamino)methyl)naphthalen-2-yl)methyl (4-(hydroxycarbamoyl)phenyl)carbamate); 하기 화학식 4로 표시되는 (S)-N-하이드록시-4-(3-메틸-2-페닐부타나미도)벤즈아마이드((S)-N-hydroxy-4-(3-methyl-2-phenylbutanamido)benzamide); 하기 화학식 5로 표시되는 싸이클로펜틸(S)-2-싸이클로헥실-2-((4-(8-(하이드록시아미노)-8-옥소옥탄아미도)벤질)아미노)아세테이트(cyclopentyl (S)-2-cyclohexyl-2-((4-(8-(hydroxyamino)-8-oxooctanamido)benzyl)amino)acetate); 및 하기 화학식 6으로 표시되는 2-(다이페닐아미노)-N-(7-(하이드록시아미노)-7-옥소헵틸)피리미딘-5-카르복사미드(2-(diphenylamino)-N-(7-(hydroxyamino)-7-oxoheptyl)pyrimidine-5-carboxamide) 중 어느 하나로 표시되는 화합물 또는 이의 유도체일 수 있고, 보다 바람직하게는 하기 화학식 1로 표시되는 (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드 일 수 있다:
[화학식 1]
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[화학식 3]
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[화학식 4]
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[화학식 5]
Figure 112016104348359-pat00005
[화학식 6]
Figure 112016104348359-pat00006
본 발명에서, 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화합물을 포함하는 약학 조성물은 암 치료용 약물에 대한 1차 내성 또는 획득 내성을 갖는 암 세포의 내성을 극복하고, 나아가서는 암 치료용 약물에 대한 감수성을 증진시켜 암 세포의 성장 억제 및 세포 사멸을 효과적으로 유도할 수 있다.
보다 상세하게는, 본 발명에서 상기 히스톤 탈아세틸화 저해제는 암 치료용 약물에 대한 내성암에서 발현이 증가 되어 있다고 보고되어 있는 상기 ABC 운송 유전자(ABC transporter gene)의 전령 RNA(mRNA)인 ABCG2, hENT2, 다중 약물 저항성 단백질 2(Multidrug resistance protein; MRP2), 다중약물 저항성 단백질 3(Multidrug resistance protein; MRP3) 및 다중 약물 저항성 단백질 4(Multidrug resistance protein; MRP4) 중 어느 하나 이상의 발현을 억제하여, 암 치료용 약물, 즉 항암제에 대한 내성을 극복시킬 뿐만 아니라, 세포 생존 및 세포 증식(Cell proliferation)과 연관이 있는 AKT, ERK, MET의 발현을 감소시키고, 그의 활성상태인 인산화(phosphorylation) 역시 감소시켜 암 세포 성장억제 및 세포사멸을 효과적으로 효과적으로 유도할 수 있다.
또한, 본 발명에 의한 약학 조성물은 HDAC 동질효소(isozyme)인 HDAC 3, HDAC 4 및 HDAC 7으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 활성을 저해하여 암 치료용 약물, 즉 항암제에 대한 내성을 극복시킬 뿐만 아니라, 내성암 세포의 내성 극복을 효과적으로 유도할 수 있다.
여기서, 상기 “HDAC 동질효소(isozyme)”이란, HDAC과 동일한 기질특이성을 지니면서 다른 분자구조를 지닌 효소 단백질을 의미한다. 보다 자세히는, 주로 핵 안에 위치하는 트리코스타틴 A(TSA)에 의한 저해에 감응성이 있는 I군인 HDAC 1,2,3 및 8; TSA 감응성을 나타내는 Ⅱ군인 HDAC 4,5,6,7 및 9; 및 NAB+ 의존성과 TSA 무 감응성에 의해 구별되는 Ⅲ군인 Sir2로 구별되며, 전사 억제인자 복합체와 회합하여 크로마틴을 전사 불활성인 침묵구조로 바꾸는 역할을 한다(marks et al, Nature cance Rev. 1, 189-202, 2001).
본 발명의 일 구체예에서, 본 발명의 히스톤 탈아세틸화 저해제를 포함하는 약학 조성물은 원암 유전자(oncogene) 또는 암 줄기세포(cancer stem cell)의 마커라고 알려져 있는(Oncogene 7 (1): 3-7, Gastroenterology. 2011 Dec;141(6):2218-2227) C-met 및/또는 ALDH의 발현을 억제하여 약물에 대해 내성을 갖는 암세포뿐만 아니라, 암 줄기세포까지 내성을 극복하고 그 증식을 억제 할 수 있으나, 암 줄기세포에서 특징적으로 발현이 증가 되어 있는 유전자를 억제할 수 있는 경우라면 이에 제한되지 아니하고 포함될 수 있다.
여기서, 상기 "암 줄기세포(cancer stem cell)"는 암세포의 희귀 개체군(rare population)이 대체 줄기세포 및 종양 증폭 세포의 계통이 한정된 개체군을 차례로 유도하는 비대칭 분할을 수행하는 세포를 의미한다. 이들 세포는 느린-세포주기(slow-cycling)의 휴지기인 일반적인 줄기세포와는 대조적으로, 종양의 대부분을 구성하고 C-met, ALDH 등의 유전자 발현이 증가되어 있는 것을 특징으로 한다(Oncogene 7 (1): 3-7, Gastroenterology. 2011 Dec;141(6):2218-2227). 이러한 암 줄기세포는 빠르게 분화하는 세포를 타겟으로 하는 화학적 치료법에 약물 내성을 갖는 것으로 보고 되어 있다.
또한, 본 발명에 따른 약학 조성물은 히스톤 탈아세틸화 저해제에 1종 이상의 항암제를 더 포함하는 것이 바람직하다. 상기 히스톤 탈아세틸화 저해제 및 항암제는 0.02 ~ 20 : 0.5 ~ 1의 중량비로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니고 사용되는 항암제의 종류에 따라 적절히 조절할 수 있다. 상기 함량 범위를 벗어나는 경우 내성극복 또는 암 치료의 상승 효과를 얻을 수 없고, 약물에 의한 독성이 목적하는 개체에 발생할 수 있다는 문제점이 있다.
상기한 바와 같이, 본 발명의 약학 조성물과 상기 항암제를 함께 투여하는 경우에는 매우 낮은 농도에서 약물에 대한 내성을 극복하고, 더 나아가서는 암 치료용 약물에 대한 항암제의 감수성을 현저히 높여 암세포의 성장억제 및 세포사멸을 통한 치료에 시너지 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 히스톤 탈아세틸화 저해제에 추가할 수 있는 항암제로는 암 치료에 사용될 수 있는 일반적인 항암제라면 제한 없이 사용할 수 있으나, 예를 들면 나이트로젠 머스타드, 이마티닙, 옥살리플라틴, 리툭시맙, 엘로티닙, 네라티닙, 라파티닙, 제피티닙, 반데타닙, 니로티닙, 세마사닙, 보수티닙, 악시티닙, 세디라닙, 레스타우르티닙, 트라스투주맙, 게피티니브, 보르테조밉, 수니티닙, 카보플라틴, 소라페닙, 베바시주맙, 시스플라틴, 세툭시맙, 비스쿰알붐, 아스파라기나제, 트레티노인, 하이드록시카바마이드, 다사티닙, 에스트라머스틴, 겜투주맵오조가마이신, 이브리투모맙튜세탄, 헵타플라틴, 메칠아미노레불린산, 암사크린, 알렘투주맙, 프로카르바진, 알프로스타딜, 질산홀뮴 키토산, 젬시타빈, 독시플루리딘, 페메트렉세드, 테가푸르, 카페시타빈, 기메라신, 오테라실, 아자시티딘, 메토트렉세이트, 우라실, 시타라빈, 플루오로우라실, 플루다가빈, 에노시타빈, 플루타미드, 데시타빈, 카페시타빈, 머캅토푸린, 티오구아닌, 클라드리빈, 카르모퍼, 랄티트렉세드, 도세탁셀, 파클리탁셀, 이리노테칸, 벨로테칸, 토포테칸, 비노렐빈, 에토포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 테니포시드, 독소루비신, 이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 미토마이신, 블레로마이신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 피라루비신, 아클라루비신, 페프로마이신, 템시롤리무스, 테모졸로마이드, 부설판, 이포스파미드, 사이클로포스파미드, 멜파란, 알트레트민, 다카바진, 치오테파, 니무스틴, 클로람부실, 미토락톨, 레우코보린, 트레토닌, 엑스메스탄, 아미노글루테시미드, 아나그렐리드, 나벨빈, 파드라졸, 타목시펜, 토레미펜, 테스토락톤, 아나스트로졸, 레트로졸, 보로졸, 비칼루타미드, 로무스틴, 보리노스텟, 엔티노스텟, 5FU 및 카르무스틴으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 사용할 수 있고, 바람직하게는 젬시타빈(gemcitabine), 시스플라틴(cisplatin), 보리노스텟(vorinostat) 및 엔티노스텟(entinostat)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며, 보다 바람직하게는 젬시타빈 및 시스플라틴 중 1종 이상일 수 있다.
본 발명의 약학 조성물로 내성극복 및 내성극복을 통하여 감수성 증진으로 인한 치료 효과를 부여할 수 있는 암의 종류는 특별히 한정하지 않으나, 바람직하게는 암 치료용 약물에 대한 내성을 갖는 유방암, 담도암, 담낭암, 대장암, 자궁암, 위암, 뇌암, 직장암, 폐암, 피부암, 혈액암, 췌장암 및 간암으로 이루어진 군에서 선택되는 암일 수 있고, 바람직하게는 암 치료용 약물에 대한 내성을 갖는 담도암 또는 담낭암일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학 조성물은 캡슐, 정제, 과립, 주사제, 연고제, 분말 또는 음료 형태임을 특징으로 할 수 있으며, 상기 약학 조성물은 인간을 대상으로 하는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 이들로 한정되는 것은 아니지만, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 캡슐, 정제, 수성 현탁액 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 약제적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 경구 투여 시에는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소, 향료 등을 사용할 수 있으며, 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등을 사용할 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서(elixir), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수회 투약 형태로 제조할 수 있다. 기타, 용액, 현탁액, 정제, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형할 수 있다.
한편, 제제화에 적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말디톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함된다. 경구 또는 비경구 투하가 바람직하다. 본원에 사용된 용어 "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내, 병소내 및 두개골내 주사 또는 주입기술을 포함한다. 본 발명의 약학 조성물은 또한 직장 투여를 위한 좌제의 형태로 투여될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 정식, 투여시간, 투여경로, 배출율, 약물 배합 및 예방 또는 치료될 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있고, 상기 약학 조성물의 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약무형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있고, 1일 0.0001 내지 50mg/kg 또는 0.001 내지 50mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 의약 조성물은 환제, 당의정, 캡슐, 액제, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제로 제형될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 암 치료용 약물, 특히 항암제에 대한 내성을 갖는 암의 내성을 극복하고, 더 나아가 상기 암 치료용 약물의 감수성을 증진시킴으로 인하여 내성 암세포의 증식 억제 및 세포 사멸을 유도하여 암을 효과적으로 치료할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 내성 담도암 세포주의 성장 저해에 의한 IC50의 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 비교예에 따른 보리노스텟(Vorinostat) 및 엔티노스텟(Entinostat)의 성장 저해에 따른 IC50의 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 병용투여에 의한 내성 담도암 세포주의 성장 저해율의 결과를 나타낸 것이다.
도 4의 (a) 내지 (d)는 본 발명의 일 실시예에 따른 담도암 내성 세포주의 이종이식 쥐에서 CG200745 약물의 효능을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 내성 췌장암 세포주의 성장 저해에 의한 IC50의 결과를 나타낸 것이다.
도 6의 (a) 내지 (c)는 본 발명의 일 실시예에 따른 웨스턴 블롯 분석(Western blot assay) 결과를 나타낸 것이다.
도 7의 (a) 내지 (c)는 본 발명의 일 실시예에 따른 PCR에 의해 증폭된 약물 방출 유전자의 RNA 발현 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 8의 (a) 및 (b)는 본 발명의 일 실시예에 따른 웨스턴 블롯 분석(Western blot assay) 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 웨스턴 블롯 분석(Western blot assay) 결과를 나타낸 것이다.
도 10는 본 발명의 일 실시예에 따른 병용투여에 의한 웨스턴 블롯 분석(Western blot assay) 결과를 나타낸 것이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[ 실시예 ]
[ 실시예 1] 내성 담도암 세포주( SNU1196 / GR ) 및 내성 췌장암 세포주( Cfpac -1/GR 및 HPAC / GR )의 제조
담도암 세포주 SNU1196을 모세포(SNU1196/P)로 하고, 췌장암 세포주 Cfpac-1 및 HPAC를 모세포(Cfpac-1/P 및 HPAC/P)로 하여, 약물 내성이 존재하는 내성 담도암 세포주(SNU1196/GR) 및 내성 췌장암 세포주(Cfpac-1/GR 및 HPAC/GR)를 구축하였다.
자세하게는 상기 담도암 및 췌장암 모세포에 젬시타빈(gemcitabine) 약물을 MTT 실험을 통해 산정된 IC50에 해당하는 농도로 3일간 투여 하였다. 그 후, 약제가 없는 배지(SNU1196:RPMI1640, Cfpac1:IMDM, HPAC:DMEM/F12)의 볼륨에 10%의 우태아혈청(FBS; hyclone, logan, UT)을 포함하는 영양배지에서 배양하여 세포가 회복되면 IC50의 2배의 농도로 젬시타빈 약물을 투여하고, 3일 후 회복시키는 과정을 반복하였다. 상기 과정을 1년 동안 반복 진행하여 치료제 내성이 존재하는 내성 담도암 세포주(SNU1196/GR) 및 췌장암 세포주(Cfpac-1/GR 및 HPAC/GR)를 구축하였다.
[ 실시예 2] 세포주의 배양
본 발명에 따른 (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드((E)-N1-(3-(dimethylamino)propyl)-N8-hydroxy-2-((naphthalen-1-yloxy)methyl)oct-2-enediamide)(이하, 'CG200745'이라 한다.)의 치료 효과를 확인하기 위하여, 상기 실시예 1에서 얻어진 젬시타빈 내성 담도암 세포주 및 췌장암 세포주와 상기 내성 세포주의 모세포주를 계대배양 하였다. 상기 SNU1196 세포주는 한국 세포주 은행(KCLB, Korean Cell Line Bank, Seoul, Korea)에서 구입하였고, Cfpac-1 세포주 및 HPAC 세포주는 American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA)에서 구입하였다.. 상기 세포주는 한국 세포주 은행 및 ATCC에 의해 제시된 프로토콜에 의하여 배양을 실시하였다.
[ 실시예 3] 내성 담도암 세포주에서 CG200745에 의한 내성 극복 및 치료 효과 확인
상기 담도암 세포주 SNU1196/P 및 SNU1196/GR에서 CG200745에 의한 내성 극복 및 치료 효과를 확인하기 위하여 MTT 실험을 수행하였다.
MTT 실험은 상기 담도암 세포주를 96 웰 플레이트에 3 x 103 cells/well씩 부착 시킨 이후, 다음 날 젬시타빈 및 CG200745를 1/10으로 희석한 농도 별로 투여하고 72시간 동안 배양하였다. 배양 후 MTT(3-[4,5-다이메틸씨아졸-2-일]-2,5 다이페닐테트라졸리움브로마이드 (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyl tetrazolium bromide, Sigma-Aldrich)용액))을 100㎕/well씩 넣고 차광조건에서 3시간 반응 시켰다. 3시간 후 상기 반응 용액을 제거한 뒤 DMSO(다이메틸 설폭사이드(dimethyl sulfoxide)) 100㎕/well씩 넣은 뒤 570nm에서 측정된 흡광도를 Graphpad Prism 4 소프트웨어를 이용하여 IC50 값을 산정하였고, 그 결과를 도 1 에 나타내었다.
도 1에서 보는 바와 같이, 젬시타빈은 SNU1196/GR에서 SNU1196/P에 비하여 100배 이상 높은 비율로 IC50이 산정되었다. 반면에, CG200745은 SNU1196/GR에서 SNU1196/P에 비하여 1.5배 수준에서 IC50이 산정되었다. 또한, CG200745에 대한 IC50는 상기 담도암 세포주 각각에 대하여 1μM 이하에 해당하는 낮은 농도에 해당하는 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과를 통하여 담도암에서 젬시타빈에 의한 내성이 발생한 경우에 CG200745을 통해 약물 내성을 극복할 수 있다는 것을 알 수 있다.
[ 비교예 ] 내성 담도암 세포주에서 타 항암제에 의한 내성 극복 효과 비교
담도암 세포주 SNU1196/P 및 젬시타빈 내성 담도암 세포주인 SNU1196/GR에서 CG200745에 의한 내성 극복 효과와 보리노스텟과 엔티노스텟과의 효과를 비교하기 위하여 MTT 실험을 수행하였다.
보리노스텟 및 엔티노스텟을 1/10으로 희석한 농도별로 담도암 세포주에 투여하고, 72시간 배양하였다. 배양 후 MTT 실험은 상기 실시예 3과 동일하게 수행하여, 결과를 도 2 및 표 1에 나타내었다.
도 2 및 표 1에서 보는 바와 같이, 젬시타빈에 의해 내성이 발생한 SNU1196/GR에서는 보리노스텟은 약 2배 및 엔티노스텟은 약 4배의 IC50이 증가되는 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과를 통하여 내성 담도암 세포에서 보리노스텟 및 엔티노스텟과 비교하여 CG200745으로 인한 내성 극복 효과가 보리노스텟 및 엔티노스텟 약물과 비교하여 현저히 좋은 것을 알 수 있다.
IC50(μM)
세포주 SNU1196/P SNU1196/GR
보리노스텟 1.2 2.6
엔티노스텟 16.4 48.8
[ 실시예 4] 내성 담도암 세포주에서 병용투여에 의한 성장 저해 효과 확인
상기 담도암 세포주(SNU1196/P 및 SNU1196/GR)에서 CG200745와 항암제를 병용 투여하는 경우에 성장 저해 효능을 알아보기 위하여 MTT 실험을 진행하였다. 젬시타빈은 1/10으로 희석한 농도 및 CG200745는 0.25 및 0.5 μM의 각각의 농도로 병용투여 한 뒤 72시간 배양하였다. 상기 배양 후, MTT 실험은 상기 실시예 3과 동일하게 수행하여, 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에서 보는 바와 같이, 젬시타빈을 단독으로 투여 하였을 경우에 비하여 CG200745(CG) 약물과 함께 병용투여 한 경우, 농도에 의존적으로 상기 담도암 세포주 각각에서 생존률이 현저하게 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
[ 실시예 5] 내성 담도암 이종이식 쥐에서의 CG200745에 의한 효과 확인
6~8 주된 수컷 누드 쥐(오리엔트 바이오)를 하기 실험에 사용하였다. 수컷 쥐를 무균의 조건하에서 기르며, 빛 온도 및 습도는 중앙에서 조절하였다. 주사기를 이용하여 수컷 누드 쥐의 오른쪽 옆구리에 상기 실시예 1에 의해 제조된 SNU1196/GR을 삽입하였다. 주입된 종양의 평균 부피가 100mm3 이상 된 후, 30mg/kg(100 μ l/mouse)의 CG200745를 상기한 수컷 쥐에 5일 동안 투약 및 2일 휴약의 스케줄로 3주간 복강 투여하였다. 음성 대조군으로는 상기 CG200745를 대신하여 식염수(Saline)를 동일한 스케줄로 복강 투여하였다. 3주가 지난 뒤 종양의 부피, 쥐의 몸무게 및 종양의 무게 측정을 실시하였으며, 그 결과는 도 4의 (a) 내지 (d)에 나타내었다.
도 4의 (a) 내지 (c)에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따른 CG200745를 복강 투여한 경우 식염수를 투여한 음성 대조군에 비하여 종양의 크기, 부피 및 무게가 현저히 감소한 것을 볼 수 있었다.
또한, 도 4의 (d)에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따른 CG200745를 복강 투여한 경우, 상기 수컷 쥐의 몸무게는 약물의 투여에 의한 변화가 없었다.
상기 결과를 통하여, 본 발명에 따른 CG200745는 세포 내 실험뿐만 아니라 생체 내(in vivo)에서도 내성 담도암의 젬시타빈에 대한 내성을 극복할 뿐만 아니라, 치료 효과 또한 뛰어난 것을 확인할 수 있었다. 또한, 쥐의 몸무게의 변화가 없는 것으로 보아 약물에 의한 부작용도 적을 것으로 예상할 수 있다.
[ 실시예 6] 내성 췌장암 세포주에서 CG200745에 의한 내성 극복 효과 확인
내성 췌장암 세포주 Cfpac-1/GR 및 HPAC/GR에서 CG200745에 의한 내성 극복 효과 및 치료 효과를 확인하기 위하여 MTT 실험을 수행하였다.
상기 췌장암 세포주 및 내성 췌장암 세포주 각각에 젬시타빈, 5FU 및 CG200745 약물을 1/10으로 희석한 농도 별로 투여하고 72시간 배양하였다. 배양 후 MTT 실험은 상기 실시예 3과 동일하게 수행하여, 결과를 도 5 에 나타내었다.
도 5에서 보는 바와 같이, 젬시타빈 및 5FU 약물의 경우 Cfpac-1/GR 세포에서 Cfpac-1/P 세포에 비하여 24.5배 및 31.5배의 IC50 증가를 보였지만, CG200745의 경우 Cfpac-1/P은 11.7μM인 반면 젬시타빈 약물에 내성이 있는 Cfpac-1/GR에서는 9.8μM에서 IC50가 산정되었다. 또한, 젬시타빈 및 5FU 약물에 대하여 HPAC/GR 세포에서 모두 HPAC/P 세포에 비해 7.9배 및 15.2배의 IC50 증가를 보였지만, CG200745 에서는 오히려 HPAC/GR에서 0.9배 감소한 6.8μM에서 IC50이 산정되었다.
상기 결과를 통하여, 본 발명의 CG200745는 젬시타빈에 대하여 내성을 갖는 췌장암세포에 내성 극복 효과가 뛰어난 것을 알 수 있다.
[ 실시예 7] CG200745의 HDAC 저해 여부 확인
CG200745 약물의 HDAC 저해여부를 단백질 수준에서 확인하기 위하여, 실시예 1에서 얻은 담도암 내성 세포주 및 췌장암 내성 세포주 각각에 대한 CG200745의 IC50 농도를 처리하고, 0시간 내지 72시간대에서 수득한 단백질을 이용하여 웨스턴 블롯 분석(Western blot assay)을 하였다.
웨스턴 블롯 분석에 사용된 단백질의 준비 방법은 하기와 같다. 상기 담도암 세포주 및 췌장암 세포주에 아큐타아제(Accutase; Sigma-Aldrich)를 처리하여 수득(harvest)하고, PBS로 세척 후 단백질 분해 억제제가 포함되어 있는 세포 용해 버퍼(cell lysis buffer)를 이용하여 용해시켰다. 상기 용해된 용액을 원심분리기를 이용하여 전체 용액을 분획한 뒤, 단백질이 포함된 용액만을 추출하였다. 상기 추출된 단백질은 브래드포드(Bradford) 방법에 의해 정량화 하였다. 정량화를 통해 동일 농도의 단백질을 SDS-폴리아크릴아미드(polyacrylamide) 겔 전기영동을 수행하여 분리한 뒤, PVDF 막에 옮겼다. 단백질이 옮겨진 막은 비 특이적 결합을 줄이기 위하여 5% 탈지유(non-fat milk)가 포함된 TBS-T(Tris-buffered saline/0.05% Tween-20)용액으로 상온에서 1시간 동안 차단(blocking)한 후, 1차 항체(1: 1000 희석)를 4℃ 조건에서 하룻밤(overnight) 동안 반응시킨 뒤, 2차 항체(1: 5000 희석)을 1시간 동안 상온에서 반응시켰다. 시각화를 위해서는 PIERCE 제품의 강화된 화학발광 시스템(Enhanced chemiluminescence system)을 이용하였다.
웨스턴 블롯 분석은 HDAC의 동질효소(isozyme)에 해당하는 HDAC1, HDAC2, HDAC3, HDAC4, HDAC7 및 HDAC6 마커를 이용하여 수행하였고, 그 결과는 도 6의 (a) 내지 (c)에 나타내었다.
도 6의 (a) 내지 (c)에서 보는 바와 같이, 상기 내성 담도암 세포주 및 내성 췌장암 세포주 각각에 대하여 CG200745의 IC50 농도를 투여한 후, 24, 48 및 72시간에서 HDAC 3, HDAC4 및 HDAC7의 단백질 발현양이 현저하게 감소한 것을 확인할 수 있다.
상기 결과를 통하여 본 발명에 따른 CG200745는 상기 내성 담도암 세포 및 내성 췌장암 세포주에 있어서, HDAC의 동질효소(isozyme)인 HDAC3, HDAC4 및 HDAC7 효소의 발현을 저해하는 것을 통하여 내성 담도암 세포주 및 내성 췌장암 내성 극복 및/또는 암세포의 성장억제 역할을 하는 것을 알 수 있다.
[ 실시예 8] 내성 담도암 세포주 및 내성 췌장암 세포주에서 다중 약물 저항성 유전자 발현 확인
세포로부터 해당 약물을 제거하는 작용을 통하여 암의 화학적 치료 효능의 감도를 결핍시키는 ABC 운송 유전자(transporter gene)에 해당하는 다중 약물 저항성 관련 단백질(multi-drug resistance protein; MRP)의 전령 RNA(mRNA) 발현을 확인하기 위하여 아래의 과정을 수행하였다.
RNeasy Mini (QIAGEN)키트를 이용하여 상기 키트에서 제시된 프로토콜에 의하여, CG200745를 실시예 3의 IC50 농도에서 24 내지 48시간 처리한 내성 담도암 세포주 각각의 RNA 전체(total RNA)를 추출하였다. 상기 추출된 RNA 2 μg를 Superscript Ⅱ(GibcoBRL)와 42℃에서 1시간 동안 반응시켜 cDNA를 얻은 후 하기 표 2의 6개에 해당하는 유전자 프라이머를 이용하여 Taq 폴리머라아제(polymerase)에 의한 유전자 증폭(PCR)한 뒤, 아가로스 겔 전기영동을 수행하였고, 그 결과는 도 7의 (a) 내지 (c)에 나타내었다.
유전자 정방향 프라이머 염기서열 (5'-3') 역방향 프라이머 염기서열 (5'-3')
ABCG2 TATGAGTGGCTTATCCTGCT CACTGATCCTTCCATCTTGT
hENT1 GACAACCAGTCACCAGCCTCAG AGAGCATCCAGCTGCACCTTCA
MRP1 CTGACAAGCTAGACCATGAATGT TCACACCAAGCCGGCGTCTTT
MRP3 GGACCCTGCGCATGAACCTG AGGCAAGTCCAGCATCTCTGG
MRP4 GGATCCAAGAACTGATGAGTTAAT TCACAGTGCTGTCTCGAAAATAG
MRP5 GCTGTTCAGTGGCACTGTCAG TCAGCCCTTGACAGCGACCTT
β -actin GGCATCCTCACCCTGAAGTA GGGGTGTTGAAGGTCTCAAA
도 7의 (a)에서 보는 바와 같이, 담도암 세포주 및 내성이 있는 담도암 세포주 각각에 IC50 농도를 24시간 내지 48시간 투약하였을 때, MRP5 를 제외한 모든 ABC 운송 유전자의 발현이 감소하는 것을 확인할 수 있다.
도 7의 (b) 및 (c)에서 보는 바와 같이, 췌장암 세포주 및 내성이 있는 췌장암 세포주 각각에 IC50 농도를 24시간 내지 48시간 투약하였을 때, hENT1, MRP3 및 MRP4의 유전자 발현이 췌장암 세포주 및 내성이 있는 췌장암 세포주에서 발현이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 MRP4는 내성이 있는 췌장암 세포주에서의 발현이 증가되어 있었으나, CG200745에 의해 그 발현 감소가 현저하게 나타나는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통하여 본 발명에 따른 CG200745는 ABC 운송 유전자인 ABCG2, hENT1, MRP1, MRP3 및 MRP4의 발현을 저해하여 내성 담도암 세포주 및 내성 췌장암 세포주에서 내성 극복 및 암세포의 성장억제 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.
[ 실시예 9] 내성 췌장암 세포주에서 CG200745에 의한 세포 신호 기전
상기 실시예 6의 약물투여에 의한 췌장암 세포주 내에서 내성 극복 시 나타나는 세포 신호기전을 확인하기 위하여, 웨스턴 블롯 분석 (Western bot assay)을 하였다. 웨스턴 블롯 분석은 실시예 7과 동일하게 수행하였다.
웨스턴 블롯 분석은 Ac-Histone H3, C-met, phospho-AKT, AKT, phospho-ERK, ERK, phospho-MEK, MEK, p21, BAX 및 단백질 발현의 정량적 비교를 위한 항존 유전자(housekeeping gene)인 GAPDH 마커를 이용하여 수행하였고, 그 결과는 도 8에 나타내었다.
도 8에서 보는 바와 같이, 원암 유전자(oncogene) 또는 암 줄기세포(cancer stem cell)의 마커라고 알려져 있는(Oncogene 7 (1): 3-7, Gastroenterology. 2011 Dec;141(6):2218-2227) C -met 은 CG200745를 투여한 경우 Cfpac-1/GR 및 HPAC/GR에서 각각의 모세포주에 비하여 발현이 현저하게 줄어드는 것을 확인할 수 있었고, 세포생존, 증식 및 줄기세포 유지 등과 연관이 있는 AKT, MEK 및 ERK뿐만 아니라, 각각의 활성화 형태인 phospho-AKT, phospho-MEK 및 phospho-ERK 역시 CG200745를 투여한 경우에 발현이 줄어드는 것을 확인할 수 있었다. 특히 AKT, MEK 및 ERK는 Cfpac-1/GR 및 HPAC/GR에서 발현이 더욱 현저하게 감소하였다. 또한, 암 억제 단백질인 p 21(Mol. Biol. Cell 17 (1): 402-12.) 의 발현 역시 CG200745를 투여한 경우 상기 세포주 모두에서 24시간에 발현이 현저하게 높아지는 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과를 통하여 본 발명에 따른 CG200745는 내성 췌장암에서 c-met, AKT, MEK 및 ERK 신호전달을 효과적으로 억제하여, 췌장암 세포주의 내성을 효과적으로 극복하는 것을 알 수 있다.
[ 실시예 10] 내성 담도암 세포주에서 CG200745에 의한 세포 신호 기전
상기 실시예 5의 약물투여에 의한 담도암 세포주 내에서 내성 극복 시 나타나는 세포 신호기전을 확인하기 위하여, 웨스턴 블롯 분석 (Western bot assay)을 하였다. 웨스턴 블롯 분석은 실시예 7과 동일하게 수행하였다.
웨스턴 블롯 분석은 Ac-Histone H3, C-met, ALDH, phospho-AKT, AKT, phospho-ERK, ERK, phospho-MEK, MEK, phospho-stat3, stat3, p 21, BAX 및 단백질 발현의 정량적 비교를 위한 항존 유전자(housekeeping gene)인 GAPDH 마커를 이용하여 수행하였고, 그 결과는 도 9에 나타내었다.
도 9에서 보는 바와 같이, 내성 담도암 세포주(SNU1196/GR)에서 시간에 따라 Ac-Histone H3의 양이 담도암 세포주(SNU1196)에 비하여 증가되어 있었다. 또한, 세포 분열 및 세포증식과 관련된 세포신호전달기전 단백질인 AKT, MET, ERK 및 STAT 뿐만 아니라, 상기 단백질의 활성화 형태인 phospho-AKT, phospho-MEK, phospho-ERK, 의 발현이 내성 담도암 세포주에서 현저하게 감소하는 것을 확인하였다. 또한, 암 줄기세포의 마커라고 보고 되어 있는 C -met 및 ALDH 단백질의 발현이 증가되어 있는 내성 담도암 세포주에서 CG200745를 투여 하였을 때 시간에 따라, 상기 단백질의 발현이 감소하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통하여 본 발명에 따른 CG200745는 내성 담도암 세포주(SNU1196/GR)에서 단순히 내성 극복의 효과만이 존재하는 것이 아니라, 세포분열 및 세포증식 억제를 유도함으로써, 내성 담도암 세포주의 치료 효과를 상승시킬 수 있다.
[ 실시예 11] 내성 담도암 세포주에서 병용투여에 의한 세포 신호 기전
상기 실시예 4의 병용투여에 의한 내성 담도암 세포주 내에 세포신호기전을 확인하기 위하여, 웨스턴 블롯 분석(Western blot assay)을 하였다. 웨스턴 블롯 분석은 실시예 7과 동일하게 수행하였다.
웨스턴 블롯 분석은 Ac-Histone H3(Ac-HH3 및 Ac-HH3, Caspase3, PARP, phospho-AKT(p-AKT), AKT, phospho-ERK(p-ERK) 및 ERK 이용하여 수행하였고, 그 결과는 도 10에 나타내었다.
도 10에서 보는 바와 같이, 담도암 세포주(SNU1196)에서는 젬시타빈(G) 0.01 μM 과 CG200745 0.5 μM을 병용투여한 경우, 세포사멸(apoptosis)과 관련되어 있는 단백질인 cleaved Caspase3 및 cleaved PARP의 발현을 현저하게 증가시키는 것을 확인하였다. 또한, 내성 담도암 세포주(SNU1196/GR)에서는 젬시타빈을 단독으로 10 μM 투여한 경우와 비교하여, 젬시타빈(G) 10 μM 와 CG200745 0.5 μM을 병용투여 하였을 때 세포사멸(apoptosis)과 관련되어 있는 단백질인 cleaved Caspase3 및 cleaved PARP의 발현이 현저하게 증가 되는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통하여 본 발명에 따른 젬시타빈(G) 및 CG200745(CG)의 병용투여는 이들을 각각 투여한 경우보다 세포사멸(apoptosis) 단백질인 cleaved Caspase3 및 cleaved PARP의 발현을 현저히 증가시켜 담도암 세포주의 내성극복 및 더 나아가 세포성장의 억제에 시너지 효과를 부여하는 것을 알 수 있다.
이상에서 본 발명에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.

Claims (15)

  1. (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드((E)-N1-(3-(dimethylamino)propyl)-N8-hydroxy-2-((naphthalen-1-yloxy)methyl)oct-2-enediamide)를 유효성분으로 포함하며, 젬시타빈에 대하여 내성을 갖는 담도암 및 담낭암 중 어느 하나 이상의 내성 극복을 위한, 약학 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 약학 조성물은 항암제를 더 포함하는 것을 특징으로 하고,
    상기 약학 조성물에 더 포함되는 항암제는 나이트로젠 머스타드, 이마티닙, 옥살리플라틴, 리툭시맙, 엘로티닙, 네라티닙, 라파티닙, 제피티닙, 반데타닙, 니로티닙, 세마사닙, 보수티닙, 악시티닙, 세디라닙, 레스타우르티닙, 트라스투주맙, 게피티니브, 보르테조밉, 수니티닙, 카보플라틴, 소라페닙, 베바시주맙, 시스플라틴, 세툭시맙, 비스쿰알붐, 아스파라기나제, 트레티노인, 하이드록시카바마이드, 다사티닙, 에스트라머스틴, 겜투주맵오조가마이신, 이브리투모맙튜세탄, 헵타플라틴, 메칠아미노레불린산, 암사크린, 알렘투주맙, 프로카르바진, 알프로스타딜, 질산홀뮴 키토산, 젬시타빈, 독시플루리딘, 페메트렉세드, 테가푸르, 카페시타빈, 기메라신, 오테라실, 아자시티딘, 메토트렉세이트, 우라실, 시타라빈, 플루오로우라실, 플루다가빈, 에노시타빈, 플루타미드, 데시타빈, 카페시타빈, 머캅토푸린, 티오구아닌, 클라드리빈, 카르모퍼, 랄티트렉세드, 도세탁셀, 파클리탁셀, 이리노테칸, 벨로테칸, 토포테칸, 비노렐빈, 에토포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 테니포시드, 독소루비신, 이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 미토마이신, 블레로마이신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 피라루비신, 아클라루비신, 페프로마이신, 템시롤리무스, 테모졸로마이드, 부설판, 이포스파미드, 사이클로포스파미드, 멜파란, 알트레트민, 다카바진, 치오테파, 니무스틴, 클로람부실, 미토락톨, 레우코보린, 트레토닌, 엑스메스탄, 아미노글루테시미드, 아나그렐리드, 나벨빈, 파드라졸, 타목시펜, 토레미펜, 테스토락톤, 아나스트로졸, 레트로졸, 보로졸, 비칼루타미드, 로무스틴, 보리노스텟, 엔티노스텟, 5FU 및 카르무스틴으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 약학 조성물.
  7. 제 6항에 있어서,
    상기 (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드와 상기 약학 조성물에 더 포함되는 항암제는 0.02 ~ 20 : 0.5 ~ 1의 중량비로 포함되는, 약학 조성물.
  8. 삭제
  9. 제 6항에 있어서,
    상기 약학 조성물에 더 포함되는 항암제는 젬시타빈(gemcitabine), 시스플라틴(cisplatin), 보리노스텟(vorinostat) 및 엔티노스텟(entinostat)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 약학 조성물.
  10. (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드((E)-N1-(3-(dimethylamino)propyl)-N8-hydroxy-2-((naphthalen-1-yloxy)methyl)oct-2-enediamide)를 유효성분으로 포함하며, 젬시타빈에 대하여 내성을 갖는 담도암 및 담낭암 중 어느 하나 이상의 치료용, 약학 조성물.
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 제 10항에 있어서,
    상기 약학 조성물은 항암제를 더 포함하는 것을 특징으로 하고,
    상기 약학 조성물에 더 포함되는 항암제는 나이트로젠 머스타드, 이마티닙, 옥살리플라틴, 리툭시맙, 엘로티닙, 네라티닙, 라파티닙, 제피티닙, 반데타닙, 니로티닙, 세마사닙, 보수티닙, 악시티닙, 세디라닙, 레스타우르티닙, 트라스투주맙, 게피티니브, 보르테조밉, 수니티닙, 카보플라틴, 소라페닙, 베바시주맙, 시스플라틴, 세툭시맙, 비스쿰알붐, 아스파라기나제, 트레티노인, 하이드록시카바마이드, 다사티닙, 에스트라머스틴, 겜투주맵오조가마이신, 이브리투모맙튜세탄, 헵타플라틴, 메칠아미노레불린산, 암사크린, 알렘투주맙, 프로카르바진, 알프로스타딜, 질산홀뮴 키토산, 젬시타빈, 독시플루리딘, 페메트렉세드, 테가푸르, 카페시타빈, 기메라신, 오테라실, 아자시티딘, 메토트렉세이트, 우라실, 시타라빈, 플루오로우라실, 플루다가빈, 에노시타빈, 플루타미드, 데시타빈, 카페시타빈, 머캅토푸린, 티오구아닌, 클라드리빈, 카르모퍼, 랄티트렉세드, 도세탁셀, 파클리탁셀, 이리노테칸, 벨로테칸, 토포테칸, 비노렐빈, 에토포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 테니포시드, 독소루비신, 이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 미토마이신, 블레로마이신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 피라루비신, 아클라루비신, 페프로마이신, 템시롤리무스, 테모졸로마이드, 부설판, 이포스파미드, 사이클로포스파미드, 멜파란, 알트레트민, 다카바진, 치오테파, 니무스틴, 클로람부실, 미토락톨, 레우코보린, 트레토닌, 엑스메스탄, 아미노글루테시미드, 아나그렐리드, 나벨빈, 파드라졸, 타목시펜, 토레미펜, 테스토락톤, 아나스트로졸, 레트로졸, 보로졸, 비칼루타미드, 로무스틴, 보리노스텟, 엔티노스텟, 5FU 및 카르무스틴으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 약학 조성물.
  15. 제 14항에 있어서,
    상기 (E)-N1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-N8-하이드록시-2-((나프탈렌-1-일옥시)메틸)옥트-2-에네디아마이드와 상기 약학 조성물에 더 포함되는 항암제는 0.02 ~ 20 : 0.5 ~ 1의 중량비로 포함되는, 약학 조성물.
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US20230019094A1 (en) * 2019-10-31 2023-01-19 Holosmedic Novel compound and pharmaceutical composition for prevention or treatment of cancer comprising same

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2013149026A2 (en) * 2012-03-30 2013-10-03 The Johns Hopkins University Use of n-(4-((3-(2-amino-4-pyrimidinyl) -2-pyridinyl)oxy)phenyl)-4-(4-methyl -2-thienyl)-1-phthalazinamine in combination with histone deacetylase inhibitors for treatment of cancer

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100103819A (ko) * 2007-12-13 2010-09-28 노파르티스 아게 암을 치료하기 위한 치료제의 조합물
WO2013149026A2 (en) * 2012-03-30 2013-10-03 The Johns Hopkins University Use of n-(4-((3-(2-amino-4-pyrimidinyl) -2-pyridinyl)oxy)phenyl)-4-(4-methyl -2-thienyl)-1-phthalazinamine in combination with histone deacetylase inhibitors for treatment of cancer

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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Dig Surg. 33(suppl 1), 제182쪽 PP3-047(2016.09.01.) 1부. *
비특허문헌 1 (MJ. Hepatol., 2012) *
비특허문헌 2 (Dig. Surg., 2016) *

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