KR101761506B1 - 락토바실러스 펜토서스를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 - Google Patents
락토바실러스 펜토서스를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101761506B1 KR101761506B1 KR1020160026193A KR20160026193A KR101761506B1 KR 101761506 B1 KR101761506 B1 KR 101761506B1 KR 1020160026193 A KR1020160026193 A KR 1020160026193A KR 20160026193 A KR20160026193 A KR 20160026193A KR 101761506 B1 KR101761506 B1 KR 101761506B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- strain
- lactobacillus pentosus
- composition
- cells
- mediated immune
- Prior art date
Links
- 241000186684 Lactobacillus pentosus Species 0.000 title claims abstract description 115
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 82
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 title abstract description 69
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 title abstract description 66
- 239000000284 extract Substances 0.000 title description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 69
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 69
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 24
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 210000002707 regulatory b cell Anatomy 0.000 claims abstract description 14
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 26
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 22
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 claims description 21
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 21
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 17
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 15
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 claims description 12
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 claims description 12
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 claims description 11
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 9
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 9
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 9
- 235000021109 kimchi Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 8
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 7
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 7
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 claims description 5
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 claims description 5
- 230000031261 interleukin-10 production Effects 0.000 claims description 5
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 claims description 5
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 claims description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 4
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 claims description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims description 3
- 230000008944 intestinal immunity Effects 0.000 claims description 3
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100030704 Interleukin-21 Human genes 0.000 claims 2
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 claims 2
- 229940100602 interleukin-5 Drugs 0.000 claims 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 claims 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 17
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 14
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 13
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000001629 suppression Effects 0.000 abstract description 5
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 abstract description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 abstract description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 32
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 31
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 29
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 27
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 23
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 21
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 21
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 21
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 21
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 19
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 14
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 12
- -1 tracant Substances 0.000 description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 11
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 11
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 11
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 10
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 10
- 101710181056 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 10
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 10
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 10
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 9
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 9
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 9
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 description 8
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 8
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 210000000068 Th17 cell Anatomy 0.000 description 7
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 7
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 7
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000034841 Thrombotic Microangiopathies Diseases 0.000 description 6
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 6
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 6
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 6-[(5S)-5-[[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]methyl]-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C[C@H]1CN(C(O1)=O)C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 5
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 5
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 208000002029 allergic contact dermatitis Diseases 0.000 description 5
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 5
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 5
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 5
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 4
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 4
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 4
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 4
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 4
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 210000004837 gut-associated lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 4
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 4
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 4
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061557 Allergic otitis media Diseases 0.000 description 3
- 206010052748 Bacterial allergy Diseases 0.000 description 3
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 3
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010013700 Drug hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 3
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 3
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 3
- 229960004784 allergens Drugs 0.000 description 3
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 3
- 201000010435 allergic urticaria Diseases 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 3
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 3
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 3
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 3
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 3
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 3
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000019734 interleukin-12 production Effects 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 3
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 3
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 2
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 2
- 208000006096 Attention Deficit Disorder with Hyperactivity Diseases 0.000 description 2
- 208000036864 Attention deficit/hyperactivity disease Diseases 0.000 description 2
- 206010008874 Chronic Fatigue Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- 101001066288 Gallus gallus GATA-binding factor 3 Proteins 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical class NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 2
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000029662 T-helper 1 type immune response Effects 0.000 description 2
- 230000030429 T-helper 17 type immune response Effects 0.000 description 2
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 2
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 2
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 2
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 208000010216 atopic IgE responsiveness Diseases 0.000 description 2
- 208000015802 attention deficit-hyperactivity disease Diseases 0.000 description 2
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 2
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 2
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 2
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 2
- 230000036732 histological change Effects 0.000 description 2
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000006057 immunotolerant effect Effects 0.000 description 2
- 208000035231 inattentive type attention deficit hyperactivity disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 208000029766 myalgic encephalomeyelitis/chronic fatigue syndrome Diseases 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 2
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 2
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000029069 type 2 immune response Effects 0.000 description 2
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 2
- KZEVSDGEBAJOTK-UHFFFAOYSA-N 1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-2-[5-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]ethanone Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)C(CC=1OC(=NN=1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)=O KZEVSDGEBAJOTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNWHHMBRJJOGFJ-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecan-1-ol Chemical class CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCO WNWHHMBRJJOGFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YJLUBHOZZTYQIP-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NN=C(O1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 YJLUBHOZZTYQIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DFGKGUXTPFWHIX-UHFFFAOYSA-N 6-[2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]acetyl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 DFGKGUXTPFWHIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 1
- 208000001640 Fibromyalgia Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 101001033265 Mus musculus Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 240000001307 Myosotis scorpioides Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 206010057244 Post viral fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 241000238711 Pyroglyphidae Species 0.000 description 1
- 108091008680 RAR-related orphan receptors Proteins 0.000 description 1
- 108091008778 RORγ2 Proteins 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 230000009285 allergic inflammation Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000029560 autism spectrum disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 208000037979 autoimmune inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008970 bacterial immunity Effects 0.000 description 1
- 229960002903 benzyl benzoate Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 201000005311 drug allergy Diseases 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 206010014665 endocarditis Diseases 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000024711 extrinsic asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229940046533 house dust mites Drugs 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- MTNDZQHUAFNZQY-UHFFFAOYSA-N imidazoline Chemical class C1CN=CN1 MTNDZQHUAFNZQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 208000033065 inborn errors of immunity Diseases 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 1
- 230000017307 interleukin-4 production Effects 0.000 description 1
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N isethionic acid Chemical compound OCCS(O)(=O)=O SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940074928 isopropyl myristate Drugs 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N monoethyl carbonate Chemical compound CCOC(O)=O CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003550 mucous cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 231100000989 no adverse effect Toxicity 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 208000028529 primary immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000036647 reaction Effects 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 229940071089 sarcosinate Drugs 0.000 description 1
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 235000021404 traditional food Nutrition 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
-
- A23Y2220/65—
-
- C12R1/225—
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
본 발명은 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P) 및 상기 균주를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 신규한 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주는 조절 T 세포 및 조절 B 세포 유도, 면역 활성 사이토카인(IL-12)에 대한 면역 관용 사이토카인(IL-10; 항염증성 사이토카인)의 비율 조절, 면역글로불린 E(IgE) 생성 억제, 면역과민반응 시 Th1 관련 사이토카인, Th17 관련 사이토카인, 및 Th2 관련 사이토카인의 생성 억제, 및 IgA 분비에 따른 장관면역반응 증진에 의하여 알레르기 및 염증을 효과적으로 제어하는바, Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환, 더욱 바람직하게는 알레르기 또는 염증 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
Description
본 발명은 신규한 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P) 및 상기 균주를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
최근 미국을 중심으로 장내 세균의 균총을 규명하는 메타게놈 프로젝트 진행결과 장내 균총의 분포와 알레르기를 포함하는 다양한 면역계 질환과의 상관관계가 밝혀지고 있다. 이에 따라 장내 세균의 분포와 다양성 그리고 장 면역과 면역계가 밀접히 연관되어 있음이 규명되고 있는 단계이다.
프로바이오틱스(probiotics) 관련 시장 규모를 살펴보면, 2014년 기준 세계 프로바이오틱스 시장규모는 35조 원이며 2020년까지 57조 원으로 연평균 7.6%의 지속적인 성장을 보일 것으로 예측되고 있다. 국내 프로바이오틱스 시장은 2014년 기준 1500억 원으로 시장 규모가 크지는 않으나, 2013년 대비 250%의 성장률을 보이는 등 시장이 급격히 성장하고 있다.
알레르기 억제와 같은 면역제어용 프로바이오틱스 발굴 및 평가 기술은 아직 확립되지 않은 상태이므로, 체계적인 시험관 내(in vitro) 실험 또는 생체 내(in vivo) 실험 모방 스크리닝 시스템을 개발하고 그 기술을 잘 활용한다면 경제적인 효용가치도 막대할 것으로 예상된다.
프로바이오틱스의 근본적 작용기작에 대한 연구는 미비한 상태이며 대부분의 연구가 in vitro에서 행해지고 있다. 즉, 프로바이오틱스 섭취는 구강을 통해 이루어짐에도 불구하고 지금까지의 연구는 대부분 세포주를 이용한 in vitro 실험이 주를 이루었으며 이러한 실험 방법은 사람이 프로바이오틱스 섭취 시 나타낼 수 있는 기능에 대한 연구를 대체할 수 없는 큰 단점이 있다. 또한, 프로바이오틱스에 노출되는 장내 면역계(GALT)는 다양한 면역세포가 동시에 존재하여 상호작용을 일으킴으로써 프로바이오틱스의 면역작용을 나타내나 in vitro 실험은 생체 내 환경과는 차이가 많다.
이에, 본 발명에서는 한국형 전통식품에서 분리한 균주의 항알레르기 활성을 평가하기 위해 다양한 면역세포를 생쥐에서 직접 분리한 후 이들에 대한 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus)의 영향을 평가함으로써 in vivo 시스템에 가까운 연구결과를 도출하였다.
현재 해외의 프로바이오틱스에 대한 면역조절 능력의 평가는 다양한 질환 동물모델에 적용되고 있으며, 그 성과 역시 해마다 가파른 속도로 증가하고 있는 단계이다. 제1형 당뇨병, 류마티스 관절염, 퇴행성 관절염, 궤양성 대장염과 같은 염증성 질환들의 염증 반응 억제를 타겟팅하는 분야만이 아니라, 독감 바이러스나 암과 같은 질병에 대항할 수 있도록 면역 반응을 증대시킬 수 있는 프로바이오틱스의 기능에 대해서도 연구가 활발히 진행 중이다(한국 등록특허 10-1355440). 이외에도 알레르기, 천식, 아토피와 같은 질병의 예방 및 치료 목적으로도 프로바이오틱스의 역할 및 그 기능이 많은 주목을 받고 있다.
대부분의 프로바이오틱스는 그 유래가 인간의 장 또는 식품이기 때문에 동물모델을 이용한 효능이 입증되면 다른 화학적 약제와 안정성의 입증에 큰 문제가 없다는 장점이 있다. 또한, 최근 들어 면역조절제로서 프로바이오틱스의 질병 치료 효능이 다양한 임상실험을 통해 검증되고 있는데, 천식, 궤양성 대장염, 관절염 등의 질병이 많이 시도되어지고 있으며 최근 들어 아토피에 대한 임상시도 및 연구가 가속화 되고 있는 실정이다.
산업화 동향 분석에 따르면, 전통적으로 강세인 유럽에서 프로바이오틱스 개발을 주도하고 있으며 미국, 일본 등지에서도 최근에 기능성 프로바이오틱스 개발 및 사업화가 활발히 진행되고 있는 상태이다. 대표적인 상품으로 VSL3#는 캐나다의 VSL Pharmaceutical company에 의해서 개발되었고, 현재 전 세계 시장을 대상으로 활발한 판매활동을 벌이고 있으며 최근에 국내시장에도 면역조절 개별인정형으로 판매되고 있다.
본 발명자들은 Th1, Th17, 또는 Th2 면역 반응에 의해 유발되는 알레르기 및 염증 질환을 예방 또는 치료하기 위한 프로바이오틱스를 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 전통발효식품인 김치로부터 항알레르기 및 항염증 활성을 갖는 신규한 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) 균주를 선별하고, 상기 균주를 처리한 경우 조절 T 세포 유도, 조절 B 세포 유도, 면역 활성 사이토카인(IL-12)에 대한 면역 관용 사이토카인(IL-10; 항염증성 사이토카인)의 비율 조절, 면역글로불린 E(IgE) 생성 억제, 면역과민반응 시 Th1-관련 사이토카인, Th17-관련 사이토카인, 및 Th2-관련 사이토카인의 생성 억제, 및 장관면역반응 증진에 의하여 알레르기 및 염증이 효과적으로 제어됨을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
이에, 본 발명은 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료 활성을 갖는 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는, Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료 활성을 갖는 신규한 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는, Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예로, 상기 균주는 김치로부터 분리된 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 구현예로, 상기 균주는 생균 또는 사균일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 조절 T세포를 유도할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 조절 B세포를 유도할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 인터루킨-12(IL-12) 생성량에 대한 인터루킨-10(IL-10) 생성량의 비율을 5-30이 되도록 할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 면역글로불린 E(IgE) 생성을 억제시킬 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 Th1, Th17, 또는 Th2 관련 사이토카인 생성을 억제시킬 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 장관면역반응을 증진시킬 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 Th1-매개 면역 질환 또는 Th17-매개 면역 질환은 이식 거부, 자가면역질환, 또는 염증 질환일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 Th2-매개 면역 질환은 알레르기 질환일 수 있다. 상기 알레르기 질환은 구체적으로 식품알레르기, 기관지 천식, 알레르기성 비염(급성 또는 만성), 아토피성 피부염, 알레르기성 결막염, 알레르기성 중이염, 두드러기 및 아나필라시 쇼크, 접촉성 과민증, 알레르기성 접촉성 피부염, 세균 알레르기, 진균 알레르기, 바이러스 알레르기, 약물 알레르기, 갑상선 및 알레르기선 뇌염을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 약학적, 식품, 건강기능성 식품, 화장료, 또는 사료 조성물일 수 있다.
또한, 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방 또는 치료방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는 조성물의 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방 또는 치료용도를 제공한다.
본 발명에 따른 신규한 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)는 조절 T 세포 및 조절 B 세포 유도, 면역 활성 사이토카인(IL-12)에 대한 면역 관용 사이토카인(IL-10; 항염증성 사이토카인)의 비율 조절, 면역글로불린 E(IgE) 생성 억제, 면역과민반응 시 Th1 관련 사이토카인, Th17 관련 사이토카인, 및 Th2 관련 사이토카인의 생성 억제, 및 IgA 분비에 따른 장관면역반응 증진에 의하여 알레르기 및 염증을 효과적으로 제어하는바, Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환, 더욱 바람직하게는 알레르기 또는 염증 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주와 면역세포의 공동배양에 따른 Foxp3의 발현 변화를 측정한 결과이다.
도 2a 내지 도 2d는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 경구 투여에 따른 아토피피부염 개선 효과를 보여주는 결과로서, 도 2a는 귀 두께 변화를 나타내고, 도 2b는 홍반, 각질, 부종 등을 점수화한 결과를 나타내며, 도 2c는 아토피피부염 병변 부위인 마우스 귀를 촬영한 사진이고, 도 2d는 병변부위를 H&E 또는 TB 염색하여 상피세포 두께 및 염증세포 침윤을 관찰한 결과이다.
도 3a는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 경구 투여한 후 마우스의 각 림프절에서 분리한 림프구에서 IL-4 분비량을 측정한 결과이며(PP: Payer's patch, mLN: 장간막 림프절, dLN: 드레이닝 림프절), 도 3b는 병변조직에서 Th2의 전사인자인 GATA-3의 발현을 측정한 결과이다.
도 4a 내지 도 4d는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 생균 또는 사균의 경구 투여에 따른 아토피피부염 개선 효과를 보여주는 결과로서, 도 4a는 귀 두께 변화를 측정한 결과이고, 도 4b는 아토피피부염 병변 부위인 마우스 귀를 촬영한 사진이며, 도 4c는 Th17에 의해 분비되는 IL-17A 양을 측정한 결과이고(PBS: 대조군, 340: 생균, HK340: 사균), 도 4d는 Th17 관련 전사인자인 RORγt의 발현을 측정한 결과이다.
도 5a는 비장세포에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주에 의한 IL-10 분비량 증가를 나타내는 결과이고, 도 5b는 상기 균주 처리에 의해 비장에서 B세포의 활성이 증가함을 보여주는 결과이며, 도 5c는 상기 균주 처리에 의한 B220+CD5+CD1d+ B10 세포 population 증가를 나타내는 결과이다.
도 6은 아토피피부염 마우스 모델에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여에 의한 B220+CD5+CD1d+의 발현 변화를 측정한 결과이다(SPL: 비장, PP: Payer's patch).
도 7은 아토피피부염 마우스 모델에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여 후 Payer's patch 내의 수지상세포(DC)의 빈도 증가, 증가한 수지상세포의 CD80 및 CD86 발현 감소를 나타내는 결과이다.
도 8a 및 도8b는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 수지상세포(DC)에 대한 직접적인 영향을 알아보기 위한 것으로, 도 8a는 골수 유래 수지상세포(bone marrow dendritic cell; BMDC)에 상기 균주 처리 후 IL-10 및 TGF-β의 mRNA 및 단백질 발현을 측정한 결과이고, 도 8b는 수지상세포(DC) 또는 Payer's patch에서 BAFF mRNA 발현을 측정한 결과이다.
도 9a는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여 전(0W)과 투여 후 실험 종료일(8W)에 마우스 분변을 회수하여 IgA의 양을 측정한 결과이고, 도 9b는 IL-6의 양을 측정한 결과이다.
도 10은 식품 알레르기 마우스 모델 제작을 위한 실험 방법 및 스케줄을 나타낸 그림이다.
도 11a 내지 도 11c는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 식품 알레르기 억제 활성을 보여주는 결과로서, 도 11a는 직장온도 변화, 도 11b는 설사 반응, 및 도 11c는 아나필락시스를 측정한 결과이다.
도 12는 접촉성 피부염 마우스 모델에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 경구 투여에 따른 귀두께 변화를 나타낸 결과이다.
도 2a 내지 도 2d는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 경구 투여에 따른 아토피피부염 개선 효과를 보여주는 결과로서, 도 2a는 귀 두께 변화를 나타내고, 도 2b는 홍반, 각질, 부종 등을 점수화한 결과를 나타내며, 도 2c는 아토피피부염 병변 부위인 마우스 귀를 촬영한 사진이고, 도 2d는 병변부위를 H&E 또는 TB 염색하여 상피세포 두께 및 염증세포 침윤을 관찰한 결과이다.
도 3a는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 경구 투여한 후 마우스의 각 림프절에서 분리한 림프구에서 IL-4 분비량을 측정한 결과이며(PP: Payer's patch, mLN: 장간막 림프절, dLN: 드레이닝 림프절), 도 3b는 병변조직에서 Th2의 전사인자인 GATA-3의 발현을 측정한 결과이다.
도 4a 내지 도 4d는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 생균 또는 사균의 경구 투여에 따른 아토피피부염 개선 효과를 보여주는 결과로서, 도 4a는 귀 두께 변화를 측정한 결과이고, 도 4b는 아토피피부염 병변 부위인 마우스 귀를 촬영한 사진이며, 도 4c는 Th17에 의해 분비되는 IL-17A 양을 측정한 결과이고(PBS: 대조군, 340: 생균, HK340: 사균), 도 4d는 Th17 관련 전사인자인 RORγt의 발현을 측정한 결과이다.
도 5a는 비장세포에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주에 의한 IL-10 분비량 증가를 나타내는 결과이고, 도 5b는 상기 균주 처리에 의해 비장에서 B세포의 활성이 증가함을 보여주는 결과이며, 도 5c는 상기 균주 처리에 의한 B220+CD5+CD1d+ B10 세포 population 증가를 나타내는 결과이다.
도 6은 아토피피부염 마우스 모델에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여에 의한 B220+CD5+CD1d+의 발현 변화를 측정한 결과이다(SPL: 비장, PP: Payer's patch).
도 7은 아토피피부염 마우스 모델에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여 후 Payer's patch 내의 수지상세포(DC)의 빈도 증가, 증가한 수지상세포의 CD80 및 CD86 발현 감소를 나타내는 결과이다.
도 8a 및 도8b는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 수지상세포(DC)에 대한 직접적인 영향을 알아보기 위한 것으로, 도 8a는 골수 유래 수지상세포(bone marrow dendritic cell; BMDC)에 상기 균주 처리 후 IL-10 및 TGF-β의 mRNA 및 단백질 발현을 측정한 결과이고, 도 8b는 수지상세포(DC) 또는 Payer's patch에서 BAFF mRNA 발현을 측정한 결과이다.
도 9a는 아토피피부염을 유발시킨 마우스에 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여 전(0W)과 투여 후 실험 종료일(8W)에 마우스 분변을 회수하여 IgA의 양을 측정한 결과이고, 도 9b는 IL-6의 양을 측정한 결과이다.
도 10은 식품 알레르기 마우스 모델 제작을 위한 실험 방법 및 스케줄을 나타낸 그림이다.
도 11a 내지 도 11c는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 식품 알레르기 억제 활성을 보여주는 결과로서, 도 11a는 직장온도 변화, 도 11b는 설사 반응, 및 도 11c는 아나필락시스를 측정한 결과이다.
도 12는 접촉성 피부염 마우스 모델에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 경구 투여에 따른 귀두께 변화를 나타낸 결과이다.
본 발명자들은 Th1 또는 Th2 면역 반응에 의해 유발되는 알레르기 및 염증 질환, 질병 또는 상태를 예방 또는 치료하기 위한 프로바이오틱스를 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 전통발효식품인 김치로부터 항알레르기 및 항염증 활성을 갖는 신규한 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) 균주를 선별하고, 상기 균주를 처리한 경우 조절 T 세포 유도, 조절 B 세포 유도, 면역 활성 사이토카인(IL-12)에 대한 면역 관용 사이토카인(IL-10; 항염증성 사이토카인)의 비율 조절, 면역글로불린 E(IgE) 생성 억제, 면역과민반응 시 Th1-관련 사이토카인, Th17-관련 사이토카인, 및 Th2-관련 사이토카인의 생성 억제, 및 장관면역반응 증진에 의하여 알레르기 및 염증이 효과적으로 제어됨을 확인하였다.
이에, 본 발명은 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료 활성을 갖는 신규한 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, “예방”이란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개선"이란 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다. 이때 상기 조성물은 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방 또는 개선을 위하여 해당 질환의 발병 단계 이전 또는 발병 후, 치료를 위한 약제와 동시에 또는 별개로서 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, “치료”란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환에 대한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 “유효성분으로 포함하는”이란, 상기의 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주는 식품, 바람직하게는 김치로부터 분리한 미생물 균주이므로, 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없어 상기 균주가 본 발명의 조성물에 포함된 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명의 상기 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주는 김치로부터 분리된 균주이며, 상기 균주는 생균 또는 사균 일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 조절 T 세포를 유도할 수 있다. 상기 조절 T 세포 유도는 하기 실시 예에서 입증한 바와 같이 조절 T 세포 전사인자인 Foxp3 발현 증가에 의하여 확인할 수 있다.
본 발명의 일실시예에서 본 발명의 조성물은 조절 T 세포의 활성화를 음성 대조군과 비교하여 2-20배, 5-20배, 5-15배, 5-10배 또는 7-9배 증가시킴을 확인하였다(실시예 3 참조).
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 조절 B 세포를 유도할 수 있다. 상기 조절 B 세포 유도는 하기 실시예에서 입증한 바와 같이 B220+CD5+CD1d+ B 세포(B10 세포)의 발현 증가에 의하여 확인할 수 있다. B10 세포는 B세포의 하위 서브세트로 항염증성 사이토카인인 IL-10 생성 활성이 있는 것으로 알려져 있으며, 염증반응과 자가면역반응을 조절하는데 중요한 역할을 한다.
본 발명의 일실시예에서, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 흡수되어지는 Payer's patch의 수지상세포(DC)를 억제성 수지상세포로 유도함으로써 IL-10 및 BAFF의 생산을 촉진하거나, 림프절을 통해 비장으로 이동하여 직접 조절 B 세포를 유도하는 것을 확인하였다(실시예 6 참조). 본 발명의 조성물은 조절 B세포의 활성화를 음성 대조군과 비교하여 2-20배, 2-10배, 2-8배, 3-7배 또는 4-6배 증가시킨다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 IL-10 생성을 증가시킬 수 있다. IL-10은 대식세포와 모노사이트(monocyte) 및 T-세포 림프구 복제와 염증성 사이토카인 (IL-1, TNF-α, TGF-β, IL-6, IL-8 및 IL-12)의 분비를 억제하는 림프계 세포에 의해 생성되는 항염증성 사이토카인으로서 IL-10이 증가되면 염증반응이 억제된다.
본 발명의 일실시예에서, 장간막 림프절 림프구와 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 공동 배양한 결과, 상기 균주에 의해 림프구에서 IL-10 생성량이 현저히 증가하는 것을 확인하였다. 따라서 본 발명의 조성물은 IL-12 생성량에 대한 IL-10 생성량의 비율을 5-30이 되도록 할 수 있으며, 보다 바람직하게는 IL-12 생성량에 대한 IL-10 생성량의 비율을 10-30, 15-30 또는 20-30이 되도록 할 수 있다(실시예 3-1 참조).
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 IgE 생성을 억제할 수 있다. IgE는 면역 글로불린 E(immunoglobulin E)로 비만세포 또는 혈중의 호염기구 등에 친화성을 가져 이들에 부착된 IgE 항체와 이에 대응하는 항원(알레르겐)이 반응하면 염증반응을 일으키게 된다. 즉, IgE는 알레르기에 의한 아나필락시 또는 염증반응을 일으키는 항체인바 상기 IgE 생성이 억제되면 알레르기 반응 또는 염증반응이 억제되는 것을 알 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 Th1-관련 사이토카인 생성을 억제할 수 있다. 따라서 본 발명의 조성물은 다양한 Th1-매개 면역 질환, 질병 또는 상태의 예방, 개선 또는 치료에 이용될 수 있다.
본 명세서에서 용어 "Th1 세포"는 유전자 발현, 단백질 분비 및 기능적 활성 측면에서 특정되는 헬퍼 T 세포 림포사이트의 서브세트를 의미한다. 예컨대, Th1 세포는 IL-2 및 IFN-γ를 생성하지만 IL-4, IL-5, IL-10 및 IL-13은 생성하지 않는 사이토카인 발현 패턴을 나타낸다. Th1 세포는 다양한 세포 내 병원균에 대한 세포-매개 면역반응, 기관-특이적 자가면역 질환 및 지연성 과민반응에 관여한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "Th1-매개 면역 질환"은 Th1 세포의 생성 및/또는 활성에 의해 생성되는 사이토카인(Th1 관련 사이토카인), 예컨대, IL-1β, IL-2, IL-12, IFN-γ 또는 TNF-α 등이 관여하는 질환을 의미한다. 상기 Th1-매개 면역 질환은 이식거부, 자가면역질환, 또는 염증질환일 수 있고, 보다 구체적으로는 대장염, 염증성 장질환, 제1형 당뇨병, 제2형 당뇨병, 류마티스 관절염, 반응성 관절염(Reactive Arthritis), 골관절염, 건선, 공피증, 골다공증, 아테롬성 동맥경화증, 심근염, 심내막염, 심낭염, 낭성 섬유증, 하시모토 갑상선염, 그레이브스병, 나병, 매독, 라임 질환(Lyme), 보렐리아증(Borreliosis), 신경성-보렐리아증, 결핵, 사르코이드증(Sarcoidosis), 낭창, 원판성 낭창, 동창성 루프스, 루프스 신염, 전신성 홍반성 루프스, 천식, 황반변성, 포도막염, 과민대장 증후군, 크론씨병, 그랜 증후군, 섬유근통, 만성피로 증후군, 만성피로 면역부전 증후군, 근육통성 뇌척수염, 근위축성 측삭경화증, 파킨스병, 다발경화증, 자폐스펙트럼 장애, 주의력결핍 장애, 및 주의력 결핍 과잉행동장애를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 Th17-관련 사이토카인 생성을 억제할 수 있다. 따라서 본 발명의 조성물은 다양한 Th17-매개 면역 질환, 질병 또는 상태의 예방, 개선 또는 치료에 이용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "Th17 세포"는 유전자 발현, 단백질 분비 및 기능적 활성 측면에서 특정되는 헬퍼 T 세포 림포사이트의 서브세트를 의미한다. 예를 들어, Th17 세포는 TGF-β, IL-6 또는 IL-21에 의해 유도되어 IL-17, IL-22 및 IL-21 등을 생성하지만 IL-2, IL-4, IL-5 및 IL-13는 생성하지 않는 사이토카인 발현 패턴을 나타낸다. Th17 세포는 염증 및 자가면역 병인에 직접적인 역할을 하며 병원체에 대한 숙주방어 또는 이상 면역반응을 유도한다고 보고되어 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "Th17-매개 면역 질환"은 Th17 세포의 생성 및/또는 활성에 의해 생성되는 사이토카인(Th17-관련 사이토카인), 예컨대, IL-17이 관여하는 질환을 의미한다. 바람직하게 상기 Th17-매개 면역 질환은 구체적으로는 이식 거부, 자가면역질환 또는 염증 질환일 수 있으며, 보다 구체적으로는 류마티스관절염, 건선, 다발성 경화증, 대장염, 염증성 장질환, 전신홍반루프스 등과 같은 염증성 자가면역질환일 수 있으나, 이것으로 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 Th2-관련 사이토카인 생성을 억제할 수 있다. 따라서 본 발명의 조성물은 다양한 Th2-매개 면역 질환, 질병 또는 상태의 예방, 개선 또는 치료에 이용될 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 IL-4 및 IL-13으로 구성된 군으로부터 선택되는 사이토카인 생성을 억제할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 “Th2 세포”는 유전자 발현, 단백질 분비 및 기능적 활성 측면에서 특정되는 헬퍼 T 세포 림포사이트의 서브세트를 의미한다. 예컨대, Th2 세포는 IL-4, IL-5 및 IL-13 사이토카인(Th2-관련 사이토카인) 발현 패턴을 나타내며, Th2 세포는 체액성 면역반응에 관여한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 “Th2-매개 면역 질환”은 알레르겐-특이 Th2 세포의 생성 및 활성에 의한 IgE 및 비만세포가 관여하는 질환을 의미하며, 바람직하게는 알레르기 질환일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 알레르기 질환은 식품 알레르기, 기관지 천식, 알레르기성 비염(급성 또는 만성), 아토피성 피부염, 알레르기성 결막염, 알레르기성 중이염, 두드러기 및 아나필라시 쇼크, 접촉성 과민증, 알레르기성 접촉성 피부염, 세균 알레르기, 진균 알레르기, 바이러스 알레르기, 약물 알레르기, 갑상선 및 알레르기선 뇌염을 포함한다.
본 발명의 일실시예에서는, 아토피피부염을 유발시킨 마우스에 본 발명의 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 경구투여하고 염증 부위의 림프절에서 분리한 림프구로부터 사이토카인 변화를 측정한 결과, Th1 관련 사이토카인인 IFN-γ, Th17 관련 사이토카인인 IL-17, Th2 관련 사이토카인으로 비만세포의 탈과립을 유도하여 IgE 분비를 매개하는 IL-4 및 IL-13의 생성이 억제되는 것을 확인하였다(실시예 5-3 참조).
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 장관면역반응을 증진시킬 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는, 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 0일차 또는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 투여하고 8주차에 분변을 채취하여 분석한 결과 IgA 분비량이 증가하였으며, IgA의 분비를 유도하는 IL-6의 생성도 증가하는 것을 확인하였다(실시예 7 참조).
본 명세서에서 사용되는 용어 “알레르기”는 인체의 어떤 물질에 대한 과민증, 즉 외부로부터 들어온 물질에 대한 신체 면역계의 과도한 반응으로 유발되는 다양한 질환, 질병 또는 이상 상태를 의미한다. 본 발명의 조성물에 적용되는 알레르기 질환으로는, 바람직하게는, 제 Ⅰ 형 즉시형 과민반응 및 제 Ⅳ 형 지연형 과민반응이다. 제 Ⅰ 형 즉시형 과민반응은 기관지 천식, 알레르기성 비염, 아토피성 피부염, 알레르기성 결막염, 알레르기성 중이염, 두드러기 및 아나필라시 쇼크(anaphylatic shock)이고, 제 Ⅳ 형 지연형 과민반응은 접촉성 과민증, 알레르기성 접촉성 피부염, 세균 알레르기, 진균 알레르기, 바이러스 알레르기, 약물 알레르기, 갑상선염 및 알레르기성 뇌염이다. 제 Ⅰ 형 즉시형 과민반응은 2 단계로 나뉘는데 제 1 단계는 알레르겐의 체내 침입에 의하여 IgE 및 IgG1의 분비를 억제하고, IgG2a의 분비를 증가시키는 IL-12 및 IFN-γ를 생산하는 Th1 세포반응과 IL-4, IL-5 및 IL-13 등을 생산하는 Th2 세포반응의 균형이 Th2 쪽으로 기울어지게 되면 Th2의 과도한 면역반응으로 IL-4 및 IL-13 등이 분비되고 그 영향으로 B 세포가 생산한 IgE 특이항체들이 비만세포(mast cell) 및 호염기구(basophil)의 표면에 부착됨으로써 알레르기 발증이 준비된 단계이다. 이를 알레르겐에 감작되었다고 한다. 알레르기 발증의 제 2 단계는 초기반응과 후기반응으로 나뉘며, 초기반응은 알레르겐이 체내에 재침입하여 비만세포를 자극하고 탈과립 반응을 유발하여 이때 방출된, 히스타민, 지질대사물, 사이토카인 등에 의한 혈관확장 등이 일어나는 것이고, 후기반응은 해당 조직에 호중구, 호산구, 대식세포, Th2 세포, 호염기구 등이 침윤하여 활성화됨으로써 염증이 유발되어 아토피피부염, 비염, 천식 등을 일으키는 것이다. 바람직하게 본 발명의 알레르기는 알레르기성 접촉성 피부염, 알레르기성 아토피 피부염, 또는 식품 알레르기일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 아토피피부염, 식품알레르기, 접촉성피부염 억제활성을 확인하였으며, 생균뿐만 아니라 열처리한 사균 역시 유사한 효과를 나타내는 것을 관찰하였다(실시예 5, 8, 및 9 참조).
이에, 본 발명의 신규한 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주는 약학적, 건강기능성 식품, 식품, 화장료, 또는 사료 조성물로 제조될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 (a) 상술한 본 발명의 락토바실러스 펜토서스의 약제학적 유효량; 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물이다. 본 명세서에서 용어 “약학적 유효량”은 상술한 락토바실러스 펜토서스의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.
본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 유효성분으로 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 사이클로덱스트린, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올, 리포좀 등을 포함하지만 이에 한정되지 않으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액 등 다른 통상의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제, 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제화에 관해서는 레밍턴의 문헌에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 제형에 특별한 제한은 없으나 주사제, 흡입제, 피부 외용제 등으로 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으나, 바람직하게는 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서 “약학적으로 유효한 양”은 의학적 치료 또는 진단에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 진단하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명에 다른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로 본 발명의 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에 활성 성분의 흡수도, 불활성률 및 배설속도, 질병종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 ㎏ 당 0.001 내지 150 ㎎, 바람직하게는 0.01 내지 100 ㎎을 매일 또는 격일 투여하거나, 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감 될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 조성물이 건강기능성 식품 조성물로 제조되는 경우, 조성물은 담체, 희석제, 부형제, 및 첨가제 중 하나 이상을 포함하여 정제, 환제, 산제, 과립제, 분말제, 캡슐제, 및 액제 제형으로 이루어진 군에서 선택된 하나로 제형된 것을 특징으로 한다. 본 발명의 조성물에 첨가 할 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 식품류 등이 있다. 상기 본 발명에 더 포함될 수 있는 첨가제로는, 천연 탄수화물, 향미제, 영양제, 비타민, 광물(전해질), 풍미제(합성 풍미제, 천연 풍미제 등), 착색제, 충진제, 팩트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH조절제, 안정화제, 방부제, 산화 방지제, 글리세린, 알코올, 탄산화제 및 과육으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 성분을 사용할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토오스, 수크로오스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상기 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 외에 본 발명에 따른 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 팩트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기 담체, 부형제, 희석제, 및 첨가제의 구체적인 예로는 이에 한정하는 것은 아니나, 락토오스, 덱스트로즈, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 에리스리톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로즈, 폴리비닐키롤리돈, 셀룰로즈, 폴리비닐피로리돈, 메틸셀룰로즈, 물, 설탕시럽, 메틸 하이드록시 벤조에이트, 프로필하이드록시 벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상이 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명의 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 유효성분 포함하는 항알레르기용 조성물이 화장료 조성물로 제조되는 경우에는, 유효 성분으로서의 락토바실러스 펜토서스 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용 될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명의 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 유효성분 포함하는 항알레르기용 조성물이 사료 조성물로 제조되는 경우, 락토바실러스 펜토서스를 그대로, 또는 사료 제조시 통상적으로 첨가되는 첨가제 등을 가하여 제조할 수 있다. 예컨대, 비타민, 아미노산류, 미네랄 등의 각종 양분, 항산화제, 항생물질, 항균제 및 기타의 첨가제이다. 그 형상에는 분체, 과립, 펠릿 또는 현탁액 등이 포함된다.
본 발명의 조성물이 사료 조성물로 제조되는 경우, 육상 또는 수상 동물에 대하여 단독으로 또는 사료에 혼합하여 공급할 수 있다. 본 발명의 사료에는 분말사료, 고형사료, 모이스트 펠릿사료, 드라이 펠릿사료, EP(Extruder Pellet) 사료, 날먹이 등이 포함되며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료 활성을 갖는 균주는 상술한 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물과 대상 질환을 공통으로 하기 때문에, 상기 조성물과의 관계에서 공통된 내용은 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[
실시예
]
실시예
1: 균주의 분리 및 동정
균주는 락토바실러스 MRS 한천 배지(MRS 배지, BD288130, 디프코사, 미국)를 이용하여 전통식으로 제조된 김치로부터 분리하였으며, 16S rDNA 시퀀싱을 통해 상기 분리된 균주를 동정하였다. 동정 결과, 상기 균주의 16s rDNA 염기서열(서열목록 제1서열)은 기존의 락토바실러스 펜토서스 JCM1558(T) 균주와 99.73%의 상동성을 보였다.
상기 균주의 배양을 위한 배지 조성은 MRS 배지이고, 배양조건은 pH 6.5 ± 0.2, 온도 37℃ 및 48시간 정치배양이며, 산소요구성은 통성혐기성이고, 동결건조보존 또는 세포현탁액 동결을 통해 균주 보존이 가능하다. 본 발명자들은 상기 균주를 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340로 명명하고, 국제미생물기탁기관인 한국미생물보존센터(KCCM)에 2015년 3월 6일자로 기탁하였으며, 수탁번호 KCCM 11675P를 부여받았다.
실시예
2: 실험준비 및 방법
2-1. 실험동물
본 연구를 위해 유전적으로 어떠한 변형도 일어나지 않은 야생형의 생쥐(계통 번호-C57BL/6, 스탁(stock) 번호-000664, the Jackson laboratory)를 사용하였다. 또한, Foxp3의 발현 정도를 비교적 쉽게 확인하기 위해 유전적으로 변형된 생쥐(Foxp3-GFP 넉인 마우스, 계통 이름-B6.Cg-Foxp3tm2Tch/J, 스탁 번호-006772, Jackson laboratory)를 이용하였다. 상기 생쥐의 경우 야생형의 종을 기반으로 만들어졌기 때문에 전반적인 유전 정보는 동일하나, Foxp3가 발현될 때 형광 신호를 낼 수 있는 분자인 EGFP(enhanced green fluorescence protein)가 함께 발현하여 이러한 형광 신호가 Foxp3 발현 정도를 대변해 주기 때문에 상기 생쥐를 이용하면 감지가 어려운 Foxp3의 발현 정도를 항체의 사용 없이도 비교적 용이하게 확인할 수 있다.
2-2. 면역 세포 분리 및
락토바실러스
펜토서스와의
공동배양(co-culture)
생쥐의 장간막 림프절(mesenteric lymph node; MLN)을 적출한 후, 림프절에 존재하는 면역 세포(대부분 림프구)를 단일 세포로 부유하여 실험에 이용하였다. 장내에 존재하는 프로바이오틱스는 장 내 면역계에 존재하는 면역 세포들에 의해 인지되기 때문에 프로바이오틱스의 특성을 분석하기에 적절한 면역 세포는 장간막 림프절에 존재하는 면역 세포이다. 따라서 상기 림프절에서 분리한 면역세포로 락토바실러스 펜토서스 KF340의 특성을 분석하였다.
이를 위해, 상기 방법에 따라 분리한 면역 세포와 락토바실러스 펜토서스 KF340을 1:10 비율 즉, 면역 세포 3x106과 균주 3x107 cfu를 72시간 동안 37℃, CO2 배양기에서 배양하였다. 이때 항생제인 젠타마이신(11811-031, 15 ㎍/mL, GIBCO)을 함께 처리하여 시험 균주의 과잉성장을 방지하였다.
실시예
3: 항알레르기 및 항염증 활성 확인
3-1. 공동배양액 내의 사이토카인 측정
ELISA는 효소를 표식자로 하여 항원항체 반응을 이용한 항원 또는 항체의 양을 측정하는 방법 중 하나이다. 면역 세포와 유산균을 공동 배양 후 상등액에 존재하는 사이토카인의 양을 측정하기 위해 IL-10(Mouse IL-10 ELISA Ready-SET-Go, eBioscience) 및 IL-12p70(Mouse IL-12p70 ELISA Ready-SET-Go, eBioscience) ELISA를 실시하였다. 각각의 사이토카인을 감지하는 코팅용 항체를 96-웰에 처리한 후, 상층액을 넣고 일정시간 동안 반응이 진행되도록 놓아둔 후, 각각의 사이토카인을 감지하는 또 다른 검출용 항체를 처리하였다. 이때 처리하는 검출용 항체는 효소(HRP)와 결합하고 있는데, 이때 효소의 기질(Tetramethylbenzidine Substrate Solution, eBioscience)을 첨가하여 효소-기질 반응에 의한 결과물로 색의 변화가 일어난다. 이러한 간접적인 방법을 통해 사이토카인의 절대량을 측정할 수 있다.
IL-10(interleukin 10)은 대표적인 면역관용 사이토카인이며, IL-12(interleukin 12)는 대표적인 면역 활성 사이토카인으로 알려져 있으므로 두 사이토카인의 절대적/상대적 양을 파악하여 항알레르기 특성을 갖는 유산균을 선별할 수 있다. 이에, 상기 실시예 2-2의 방법에 따라 Foxp3 넉인 실험용 생쥐의 장간막 림프절 세포를 분리하여 각각의 시험 균주와 1:10 비율 혼합한 후 공동 배양하였다. 3일간 배양 후 배양 상등액을 취하여 면역 활성 사이토카인인 IL-12p70과 항염증 사이토카인인 IL-10의 절대량을 ELISA(Enzyme linked immunosorbent assay)를 통해 측정하였으며, 이 두 분자의 양을 상대적으로 수치화하여 비교하였다.
그 결과, 하기 표 1에 나타낸 바와 같이, 장간막 림프절 세포와 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 공동배양 하였을 때 림프구에서 lL-10 및 IL-12p70 분비량의 상대적인 비율(lL-10/IL-12p70)이 24.17로 음성대조군에 비해 높게 나타나는 것을 확인하였다. 이를 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 항염증 활성이 있음을 알 수 있었다.
IL-10(pg/mL) | IL-12p70(pg/mL) | IL10/IL-12p70 | |
PBS | 241.68 | 0* | 0* |
락토바실러스 펜토서스 KF340 | 512.27 | 21.187 | 24.17 |
*미검출(not detect), 검출 영역에서 벗어날 정도도 소량이 분비되므로 항염증활성을 기대할 수 없음.
3-2.
Foxp3
발현 측정
Foxp3는 과도한 면역을 억제하는 T 세포의 서브셋(subset)인 조절 T 세포의 전사인자로, Foxp3 발현 정도를 통해 조절 T 세포의 분포를 확인할 수 있다.
상기 조절 T 세포(regulatory T cell)는 T 세포의 부분 집합 중 하나로 다른 T 세포와 다르게 과도한 면역 반응을 억제하는 역할을 수행한다. 이러한 조절 T 세포가 알레르기 질환을 억제한다는 것이 다양한 연구 결과를 통해 뒷받침되고 있으므로, 시험 균주와 장간막 림프절 세포를 공동배양 시, 조절 T 세포의 분포를 늘릴 수 있는 균주가 항 알레르기 효능을 갖는 프로바이오틱스가 될 가능성이 높다.
따라서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주와 공동배양한 장간막 림프구 면역 세포의 표면 분자 발현 정도를 비교하기 위해, 상기 실시예 3-1의 방법에 따라 분리한 장간막 림프절 면역 세포들에 대하여 유세포 분석법을 통해 Foxp3가 발현할 때 함께 발현하는 GFP 시그널을 측정함으로써 Foxp3의 발현량을 측정 및 비교하였다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주와 공동배양한 면역세포의 경우 Foxp3의 발현량(12.48%)이 대조군에서의 발현량(1.48%)에 비하여 약 8.43배 증가하였다. 이를 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 조절 T 세포 유도 활성을 가지며, 이에 의해 알레르기 질환을 억제할 수 있음을 확인하였다.
실시예
4:
Th2
사이토카인 억제에 의한 항알레르기 활성 확인
락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 Th2 사이토카인 생성 억제를 통해 항알레르기 활성을 나타내는지 평가하고자 하였다.
이를 위해, OVA(20 μg)와 알럼(aluminum hydroxide gel, 2 mg)의 혼합액을 30분간 섞어준 다음 5주령 된 암컷 Balb/c 생쥐에 마리당 100 ㎕씩 1주 간격으로 2차례 복강주사하여 알레르기를 유발하였다. 면역 1주 후 생쥐 비장을 적출하여 단세포화 및 용혈한 비장세포를 96-웰 플레이트에 5×106 세포/웰로 분주하였다. 이때 항원(OVA, 100 ㎍/mL) 및 락토바실러스 펜토서스 KF340(5×107 CFU/웰) 균주를 첨가하고 37℃ CO2 인큐베이터에서 72시간 배양 후 상징액을 회수하고 대표적인 Th2-관련 사이토카인인 IL-4의 분비량을 측정하였다.
그 결과, 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 대조군에 비하여 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 처리한 경우 IL-4 생성이 감소하는 것을 확인하였다. 이는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 IL-4의 생성을 억제함으로써 알레르기 반응을 억제할 수 있음을 의미한다.
OVA | 샘플 | IL-4(%) |
- | 대조군 1 | 25.13 ± 10.18 |
+ | 대조군 2 | 100.00 |
+ | 락토바실러스 펜토서스 KF340 | 50.26 ± 8.62 |
*대조군 1: 알레르기를 유발하지 않은 실험군, 대조군 2: 알레르기를 유발한 실험군
실시예
5:
항아토피
활성 확인
5-1. 아토피피부염 유도
마우스에 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 5×108 CFU/일로 주 5회 이상 8주간 경구투여를 진행하였다. 최초 경구투여 3주 후, 마우스의 귀를 외과용 테이프(surgical tape)를 이용하여 벗긴 후 1.0% DNCB(2,4-디나이트로클로로벤젠, 2,4-dinitrochlorobenzene)와 집먼지 진드기 20 ㎕(10 mg/mL)를 도포하였다. 일주일 후 1% DNCB 및 20 ㎕(10 mg/mL)의 진드기를 주 1회씩 번갈아 처리하는 방법으로 5주 반복하여 아토피 피부염을 유발시켰다.
5-2. 귀 두께 및 조직학적 변화
상기 실시예 5-1의 방법에 따라 집먼지진드기 유도 아토피피부염 마우스 모델에 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 8주간 투여한 후 조직학적 변화를 측정하여 항아토피 활성을 평가하였다. 이때 양성 대조군으로는 아토피피부염 치료제로 사용되고 있는 스테로이드제제인 덱사메타손(dexamethasone)을 이용하여 동일한 조건에서 실험을 진행하였다.
마우스의 귀 두께 변화, 홍반, 부종, 및 각질 발생 정도를 측정한 결과, 도 2a에 나타낸 바와 같이, 아토피피부염을 유발시킨 후 PBS를 투여한 음성 대조군(PBS control)과는 달리, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 투여한 군(340)의 경우 귀 두께가 양성 대조군(Dex)과 유사한 정도로 감소하였으며, 도 2b에 나타낸 바와 같이 귀부분의 홍반, 부종, 각질, 건조 수준(scoring)이 심하게 일어난 음성 대조군과는 달리, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 경구 투여군은 양성 대조군과 유사한 정도의 수준을 보였다.
또한, 육안으로 관찰한 결과 도 2c와 같이 락토바실러스 펜토서스 KF340 경구 투여군은 아토피피부염이 매우 개선된 것을 관찰하였으며, 염증 부위인 귀조직의 조직학적 분석 결과, 도 2d의 H&E 및 TB 염색 결과를 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 투여군이 음성 대조군에 비해 상피세포(epithelial cell) 두께가 감소하였으며 염증 세포의 침윤도 현저히 억제되었음을 확인하였다.
5-3. 사이토카인 변화 측정
세포학적 분석을 위하여 마우스의 염증부위의 림프절인 드레이닝 림프절(표면 림프절, 액와부 림프절, 기관지 림프절)에서 드레이닝 림프구를 분리한 후, 항원인 집먼지 진드기로 세포를 자극시킨 다음 발현되는 사이토카인을 e-Bioscience사의 사이토카인 정량 키트를 이용하여 ELISA 방법을 통해 확인하였다.
그 결과, 하기 표 3에서 볼 수 있는 바와 같이 락토바실러스 펜토서스 KF340을 각각 지속적으로 투여한 실험군에서는 아토피 피부염 발병 및 악화를 촉진하는 염증성 사이토카인인 IFN-γ와 IL-17A의 양이 감소하는 양상을 보였으며, Th2-관련 사이토카인인 IL-4 및 IL-13의 분비량도 감소하여 락토바실러스 펜토서스 KF340이 아토피 피부염 억제 활성이 있음을 확인하였다.
실험군 | IFN-γ(ng/mL) | IL-17A(ng/mL) | IL-4(pg/mL) | IL-13(ng/mL) |
정상 대조군 | 0.01 | 0 | 0 | 0 |
음성 대조군(PBS 투여군) | 3.31 | 38.16 | 69.75 | 2.57 |
락토바실러스 펜토서스 KF340 | 0.58 | 3.37 | 29.75 | 0.71 |
이에 더하여, 장관관련림프조직(gut-associated lymphoid tissue; GALT)에 해당하는 Payer's patch(이하, PPs) 및 장간막림프절(mLN)에서 림프구를 분리하여 상기와 동일한 방법으로 Th2 사이토카인인 IL-4를 측정한 결과, 도 3a에 나타낸 바와 같이, IL-4 분비량이 현저히 감소하는 것을 확인하였으며, 도 3b와 같이 염증이 일어난 귀에서 Th2의 전사인자인 GATA-3의 발현이 유의적으로 감소하였다.
5-4.
락토바실러스
펜토서스
KF340
사균의
항아토피
활성 확인
상기 실시예 5-2 및 5-3을 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 생균이 항아토피 활성을 나타내는 것을 확인하였는바, 상기 균주의 사균도 동일한 항아토피 활성을 나타내는지 검증하고자 하였다.
이를 위해, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법으로 아토피피부염 마우스 모델을 제작하고 상기에서 투여한 락토바실러스 펜토서스 KF340 생균 또는 이를 121℃에서 15분간 열처리하여 준비한 사균을 동일한 방법으로 마우스에 투여하였다.
락토바실러스 펜토서스 KF340 생균 또는 사균 투여에 의한 마우스의 귀두께 변화를 측정한 결과, 도 4a에 나타낸 바와 같이, 상기 생균 및 사균 모두 대조군(PBS)에 비하여 귀 두께 증가가 완화되는 것을 확인하였다. 또한, 도 4b에 나타낸 바와 같이. 귀 사진을 통해서도 홍반, 부종, 각질 등의 증상이 완화되는 것을 관찰할 수 있었으며, 사균 보다는 생균에서 항아토피 활성이 좀 더 높은 것을 알 수 있었다.
이에 더하여, 락토바실러스 펜토서스 KF340 생균 또는 사균 투여에 따른 Th17 세포 및 IL-17A의 변화를 측정하였다. T 세포 매개 질환은 대부분 Th1/Th2에 의해 발생하는 질환으로 생각되어지지만 최근에는 IL-17을 분비하는 Th17 세포가 피부면역에 중요한 역할을 한다고 보고되고 있다. IL-17A는 Th17 세포에서 생성되는 주된 사이토카인으로 조직의 염증 반응에 중요한 역할을 하며, 호중구를 조직으로 불러오는 역할을 한다고 알려져 있다.
실험 결과, 도 4c에 나타낸 바와 같이, 상기 생균 또는 사균 투여에 의해 IL-17의 생성량이 대조군에 비하여 감소하였으며, 도 4d와 같이 유세포 분석을 통해 Th17 관련 전사인자인 RORγt 의 발현도 감소하는 양상을 보이는 것을 확인하였다. 상기 결과를 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 생균 및 사균 모두 Th17 면역반응 억제를 통해 아토피피부염 억제활성이 있음을 알 수 있었다.
실시예
6:
락토바실러스
펜토서스
KF340의
항아토피
활성 기전 구명
6-1.
in vitro
및
in
vivo
에서
B220+CD5+
CD1d
+ 세포 증가 확인
상기 실시예 3-1을 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 IL-10의 생성을 증가시킴을 확인하였으므로, 상기 균주가 조절 T 세포 이외에 IL-10 분비를 유도하는 세포에 영향을 미쳐 항알레르기 활성을 나타내는 것이라 판단하여, in vitro 및 in vivo에서 유세포 분석기(COULTER Epics XL, BECKMAN)를 사용하여 IL-10을 분비하는 세포를 스크리닝하였다.
In vitro 실험 결과, 도 5a에 나타낸 바와 같이, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 처리에 의해 비장에서 IL-10의 분비가 현저히 증가되었고, 특히, 도 5b와 같이 비장의 B 세포에서 그 활성이 유의하게 증가하는 것을 발견하였다. 나아가 도 5c에 나타낸 바와 같이, 상기 균주 처리에 의해 splenic B 세포 내의 B220+CD5+CD1d+ 세포의 population이 현저히 증가하는 것을 확인하였다.
B10 세포(표현형: B220+CD5+CD1d+ 또는 CD19+CD5+CD1d+)는 조절 B 세포의 하위 서브세트로 비장에 특이적으로 많은 IL-10 사이토카인을 분비하여 알레르기를 억제할 수 있다고 보고되어 있으며, 염증반응과 자가면역반응을 조절하는데 중요한 역할을 한다고 알려져있다.
상기 결과를 증명하기 위해, 상기 실시예 5-1에서 제작한 아토피피부염 마우스 모델에 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 경구 투여한 후 마우스의 비장을 적출하여 단세포화 하고 유세포 분석법을 통해 B220+CD5+CD1d+의 발현을 측정하였다.
그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여군(340)의 경우 음성대조군(PBS control)에 비하여 B220+CD5+CD1d+ B 세포의 population이 현저히 증가하는 것을 확인하였다. 그러나 PPs 내에서의 B220+CD5+CD1d+ B 세포는 증가하지 않는 것으로 보아 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 시스테믹한 작용에 의한 것으로 판단된다.
6-2.
락토바실러스
펜토서스
KF340에 의한 DC 유도 확인
상기 실시예 6-1의 결과에서 확인한 바와 같이, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 비장의 B220+CD5+CD1d+ B 세포의 population을 증가시켰으나, 이는 비장에 직접적으로 작용했을 가능성은 매우 낮으므로, PPs 내의 작용으로 인한 이차적 반응(secondary response)으로써 비장에 작용했을 가능성이 있다. 이를 증명하기 위해, 상기 실시예 5-1에서 제작한 아토피피부염 마우스 모델에 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 경구투여한 후 PPs 내의 cell population을 관찰하였다.
그 결과, 도 7에 나타낸 바와 같이, 대조군(PBS control)에 비하여 균주를 투여한 군(340)에서는 PPs 내의 수지상세포(dendritic cell; 이하, DC)의 빈도가 높아짐을 발견하였다. 또한, 증가한 DC는 CD80, CD86의 발현이 감소되는 패턴을 보이는 것을 확인하였다.
6-3.
락토바실러스
펜토서스
KF340에 의한
BAFF
발현 촉진 확인
상기 실시예 6-2의 결과를 통해, 억제성 DC가 림프조직에서 비장으로 이동하여 비장세포(splenocyte)에 영향을 미쳐 직간접적인 영향으로 조절 B 세포의 유도를 도왔을 가능성이 있는 것으로 판단하여, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 DC에 대한 직접적인 영향을 확인하고자 하였다.
이를 위해, 골수 유래 수지상세포(bone marrow dendritic cell; BMDC)에 상기 균주를 처리한 후 관련 사이토카인인 IL-10 및 TGF-β와 조절 B 세포 유도에 있어 중요한 인자로 알려진 BAFF의 mRNA 및 단백질 수준을 Real-time PCR 및 웨스턴 블롯을 통해 측정하였다. 상기 real-time PCR 수행시 사용한 각 프라이머 서열은 하기 표 4에 나타내었다.
유전자 | 방향 | 서열 | 서열번호 |
IL-10 | forward | 5′-ATAACTGCACCCACTTCCCA-3′ | 2 |
reverse | 5′-TCATTTCCGATAAGGCTTGG-3′ | 3 | |
TGF-β | forward | 5′- TGGAGCAACATGTGGAACTC-3′ | 4 |
reverse | 5′- TGCCGTACAACTCCAGTGAC-3′ | 5 | |
BAFF | forward | 5′- AGGCTGGAAGAAGGAGATGAG-3′ | 6 |
reverse | 5′- CAGAGAAGACGAGGGAAGGG-3′ | 7 |
실험 결과, 도 8a에 나타낸 바와 같이, IL-10의 경우에는 대조군에 비하여 mRNA 발현 및 단백질 생산이 현저히 증가하였으나, TGF-β의 경우 유의한 차이가 나타나지 않았다. 그러나 조절 B 세포의 유도에 있어 중요한 인자로 알려진 BAFF의 mRNA 발현수준을 측정한 결과, 도 8b에 나타낸 바와 같이, KF340 균주를 처리한 경우 대조군에 비하여 DC에서 발현이 크게 증가하였으며, 이와 동일하게 아토피피부염 마우스 모델의 PPs에서도 BAFF의 발현이 증가하는 것을 확인하였다.
상기 실험 결과들을 통해, 아토피피부염 모델에서 항아토피 효과를 나타낸 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주는 조절 B 세포의 일종인 비장의 B220+CD5+CD1d+ B10 세포의 population을 증가시킴으로써 IL-10 분비를 증가시키는 특성을 가지고 있는 것을 확인하였다. 이러한 B10 세포의 증가는 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 흡수되어지는 PPs의 DC를 억제성 DC로 유도함으로써 IL-10 및 BAFF의 생산을 촉진하거나, 림프절을 통해 비장으로 이동하여 직접 B10 세포를 유도하는 것으로 여겨진다.
실시예
7:
락토바실러스
펜토서스
KF340의 장관면역 증진활성 확인
락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 장관면역 증진 여부를 평가하기 위하여, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법으로 마우스에 아토피피부염을 유발시키고 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 경구 투여한 후 상기 균주 투여에 따른 분비형 IgA의 농도를 측정하였다. 이를 위해, 실험 0일차와 실험 종료 후(8주차) 마우스의 분변을 수집한 후 BD사의 마우스 IgA 정량 키트를 사용하여 분변 내 IgA 및 IgA의 분비를 유도하는 사이토카인인 IL-6의 양을 측정하였다.
그 결과, 도 9a에 나타낸 바와 같이, 아토피피부염을 유발시킨 마우스에서 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여에 의해 IgA의 생성량이 증가하였다. 또한, IL-6를 측정한 결과, payer's patch에서 IgA의 분비를 유도하는 IL-6 생성이 증가하는 것을 확인하였다. 상기 결과를 통해 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 IgA의 생성을 유도하여 점막면역 강화에 영향을 미치는 것을 알 수 있었다.
실시예
8: 식품 알레르기 억제 활성
8-1.
식품알레르기
유도 및
락토바실러스
펜토서스
KF340 투여
실험동물은 5주령의 자성 BALB/c 마우스를 (주)오리엔트바이오로부터 공급받아 실험동물실에서 일주일간 사육, 순화시킨 후 사용하였다. 도 10에 그림으로 나타낸 실험 과정에 따라, OVA(20 ㎍) 및 알럼(2 mg) 혼합 용액을 마리당 100 ㎕씩 복강 주사하여 1차 면역하고, 14일 뒤 동일한 방법으로 2차 면역을 실시하였다. 2차 면역 14일 후 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 마리당 5×108 CFU/일 농도로 매일 투여하였다. 이때 정상대조군(Naive)은 락토바실러스 펜토서스 KF340 현탁액 대신 현탁 용매인 PBS를 동량 투여하였으며, 양성대조군[PC(daxa)]은 면역억제제인 덱사메타손을 투여하였다. 식품 알레르기 유도를 위해 2차 면역 14일 후부터 3일 간격으로 모든 group에 50 mg/마리/일 농도의 OVA를 경구 투여하여 알레르기를 유발시켰다. OVA 경구투여 후 30분 간격으로 식품 알레르기 유발 지표인 아낙필락시스 반응과 설사반응을 확인하였으며, 직장온도의 변화를 20분 간격으로 60분 동안 측정하였다.
그 결과, 도 11a에 나타낸 바와 같이, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주를 투여한 경우, 직장온도가 샴(sham)군에 비해 높게 유지되었으며, 도 11b 및 도 11c와 같이 설사반응이나 아나필락시스 반응도 역시 샴군에 비해 적게 일어나 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주가 식품 알레르기 증상완화 활성이 있음을 확인하였다.
8-2. 혈청
IgE
변화 확인
실험종료 후 마우스 안와정맥을 통해 채혈한 후, 3500 rpm에서 10분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청 내 IgE 함량은 BD사의 마우스 IgE 정량 키트를 사용하여 측정하였다.
그 결과, 하기 표 5에서 볼 수 있는 바와 같이 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여시 알레르기 증상과 밀접한 관련이 있는 IgE가 감소하였다.
8-3. 사이토카인 변화 확인
각 그룹의 마우스에서 MLN 및 비장을 적출한 후, 단세포한 세포(single cell suspension)를 5x106 농도로 96-웰에 seeding하고, 항원 특이적 반응을 확인하기 위해 세포에 OVA를 20 ㎍ 처리한 후, 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후, 상층액에 존재하는 사이토카인을 BD사의 사이토카인 정량 키트를 이용하여 ELISA 방법을 통해 확인하였다.
그 결과, 하기 표 5에서 볼 수 있는 바와 같이 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주 투여시 MLN 배양상등액에서 IgE 생산을 유도하는 IL-4 및 IL-13 분비가 감소한 바, 락토바실러스 펜토서스 KF340 균주의 식품 알레르기 억제 활성을 확인할 수 있었다.
실험군 | IL-4(pg/mL) | IL-13(pg/mL) | IgE(ng/mL) |
정상 대조군(Naive) | 8.01 | 46.58 | 1737.40 |
샴(sham) | 466.77 | 3049.87 | 27209.26 |
락토바실러스 펜토서스 KF340 | 331.61 | 2544 | 20422.95 |
덱사메타손 | 8.71 | 62.875 | 17434.98 |
실시예
9: 접촉성 피부염 억제 활성
9-1. 접촉성 피부염 유도 및
락토바실러스
펜토서스
KF340 투여
5주령의 암컷 BALB/c를 1주일간 적응시킨 후 0(Day 0)일에 정상대조군(Naive)을 제외한 모든 실험군의 옆구리 털을 제모한 후 5% TMA용액[아세톤과 이소프로필미리스테이트(isopropylmyristate)의 4:1(v/v) 혼합액을 용매로 사용] 50 ㎕를 도포하여 첫 감작을 실시하였다. 감작 5일 후 정상대조군(Naive)을 제외한 모든 실험군을 대상으로 5% TMA 10 ㎕를 양쪽 귀에 2차 감작시키고, 이후 3일에 한번 2% TMA 10 ㎕를 양쪽 귀에 도포하였다. 락토바실러스 펜토서스 KF340은 1차 감작 후 매일 5×108 CFU/마리 농도로 투여하였고, 샴군은 락토바실러스 펜토서스 KF340를 현탁하는데 사용한 PBS만을 동량 투여하였으며, 양성 대조군은 면역억제제로 사용되고 있는 프레드니솔론(P)을 처리하여 실험을 진행하였다.
TMA는 피부 외피를 통과하여 피부 내부로 침입 후 피부조직의 단백질과 결합하여 면역세포의 알레르기성 과민반응을 유도하는 화학적 합텐(hapten)의 일종으로 Th2 반응을 강하게 유도하며, TMA의 반복 처리는 유발부위의 염증발생 및 조직의 두께 증가를 유도한다. 실험 결과, 도 12에 나타낸 바와 같이, 락토바실러스 펜토서스 KF340 투여시 TMA를 처리한 귀 두께가 음성 대조군에 비해 감소하였다
9-2. 혈청
IgE
변화 확인
실험종료 후 마우스 안와정맥을 통해 채혈한 후, 3500 rpm에서 10분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청 내 IgE 함량은 BD사의 마우스 IgE 정량 키트를 사용하여 측정하였다.
그 결과, 하기 표 6에서 볼 수 있는 바와 같이 알레르기성 접촉성 피부염 환자에서 높은 발현을 보이는 IgE 함량이 샴군에 비해 감소하였다.
9-3. 사이토카인 변화 확인
각 그룹의 마우스에서 DLN 및 비장을 적출한 후, 단세포 현탁 과정 후 3x106 세포 96시간 동안 배양하였다. 이때 항원 특이적 반응을 확인하기 위해 세포만 배양하는 경우 및 진드기를 10 ㎍ 처리한 두 경우로 나눠 진행하였으며, 96시간 배양후 상층액에 존재하는 사이토카인을 e-Bioscience사의 사이토카인 정량 키트를 이용하여 ELISA 방법을 통해 확인하였다.
그 결과, 하기 표 6에서 볼 수 있는 바와 같이 DLN에서 Th2-관련 사이토카인인 IL-4의 분비량이 감소하는 것으로 나타나 락토바실러스 펜토서스 KF340가 알레르기성 접촉성 피부염 억제 활성이 있음을 확인하였다.
실험군 | IgE(ng/mL) | IL-4(pg/mL) |
정상 대조군(Naive) | 242.25 | 10.30833 |
샴(sham) | 4729.47 | 196.974 |
락토바실러스 펜토서스 KF340 | 3820.30 | 164.33 |
프레드니솔론(P: Prednisolone) | 2264.40 | 101.8833 |
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
<110> KOREA FOOD RESEARCH INSTITUTE
<120> Composition for Preventing, Improving, or Treating of
Th1-mediated Immune Disease, Th17-mediated Immune Disease, or
Th2-mediated Immune Disease Comprising Extracts from
Lactobacillus pentosus as an Active Ingredients
<130> MP16-217
<150> KR 10-2015-0114938
<151> 2015-08-13
<160> 7
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1532
<212> DNA
<213> Lactobacillus pentosus KF340 16S rDNA
<400> 1
cagagtttga tcatggctca ggacgaacgc tggcggcgtg cctaatacat gcaagtcgaa 60
cgaactctgg tattgattgg tgcttgcatc atgatttaca tttgagtgag tggcgaactg 120
gtgagtaaca cgtgggaaac ctgcccagaa gcgggggata acacctggaa acagatgcta 180
ataccgcata acaacttgga ccgcatggtc cgagtttgaa agatggcttc ggctatcact 240
tttggatggt cccgcggcgt attagctaga tggtggggta acggctcacc atggcaatga 300
tacgtagccg acctgagagg gtaatcggcc acattgggac tgagacacgg cccaaactcc 360
tacgggaggc agcagtaggg aatcttccac aatggacgaa agtctgatgg agcaacgccg 420
cgtgagtgaa gaagggtttc ggctcgtaaa actctgttgt taaagaagaa catatctgag 480
agtaactgtt caggtattga cggtatttaa ccagaaagcc acggctaact acgtgccagc 540
agccgcggta atacgtaagg tggcaagcgt tgtccggatt tattgggcgt aaagcgagcg 600
caggcggttt tttaagtctg atgtgaaagc cttcggctca accgaagaag tgcatcggaa 660
actgggaaac ttgagtgcag aagaggacag tggaactcca tgtgtagcgg tgaaatgcgt 720
agatatatgg aagaacacca gtggcgaagg cggctgtctg gtctgtaact gacgctgagg 780
cttcgaaaag tatgggtcgc aaacaggatt agataccctg gtagtccata ccgtaaacga 840
tgaatgctaa gtgttggagg gtttccgccc ttcagtgctg cagctaacgc attaagcatt 900
ccgcctgggg agtacggccg caaggctgaa actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa 960
gcggtggagc atgtggttta attcgaagct acgcgaagaa ccttaccagg tcttgacata 1020
ctatgcaaat ctaagagatt agacgttccc ttcggggaca tggatacagg tggtgcatgg 1080
ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg caacccttat 1140
tatcagttgc cagcattaag ttgggcactc tggtgagact gccggtgaca aaccggagga 1200
aggtggggat gacgtcaaat catcatgccc cttatgacct gggctacaca cgtgctacaa 1260
tggatggtac aacgagttgc gaactcgcga gagtaagcta atctcttaaa gccattctca 1320
gttcggattg taggctgcaa ctcgcctaca tgaagtcgga atcgctagta atcgcggatc 1380
agcatgccgc gggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccatgaga 1440
gtttgtaaca cccaaagtcg gtggggtaac cttttaggaa ccagccgcct aacgtgggac 1500
agatgattag ggtgaagtcg taacaaggta cc 1532
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-10 Forward
<400> 2
ataactgcac ccacttccca 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-10 Reverse
<400> 3
tcatttccga taaggcttgg 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TGF-b Forward
<400> 4
tggagcaaca tgtggaactc 20
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TGF-b Reverse
<400> 5
tgccgtacaa ctccagtgac 20
<210> 6
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> BAFF Forward
<400> 6
aggctggaag aaggagatga g 21
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> BAFF Reverse
<400> 7
cagagaagac gagggaaggg 20
Claims (24)
- 알레르기, 염증질환, 또는 자가면역질환의 예방, 개선, 또는 치료 활성을 가지는 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P).
- 제1항의 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는, 알레르기, 염증질환, 또는 자가면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 균주는 김치로부터 분리된 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 균주는 생균 또는 사균인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 조절 T 세포를 유도하는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 조절 B 세포를 유도하는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 인터류킨-12(IL-12) 생성량에 대한 인터류킨-10(IL-10) 생성량의 비율을 5 내지 30이 되도록 하는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 면역글로불린 E(IgE) 생성을 억제시키는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 Th1-관련 사이토카인인 인터페론-감마(IFN-γ), 종양괴사인자알파(TNF-α), 또는 인터류킨-12(IL-12)의 생성을 억제시키는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 Th17-관련 사이토카인인 인터류킨-17(IL-17), 인터류킨-21(IL-21), 또는 인터류킨-22(IL-22)의 생성을 억제시키는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 Th2-관련 사이토카인인 인터류킨-4(IL-4), 인터류킨-5(IL-5), 또는 인터류킨-13(IL-13)의 생성을 억제시키는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 조성물은 장관면역을 증진시키는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항의 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는, 알레르기, 염증질환, 또는 자가면역질환 개선용 건강기능성 식품 조성물.
- 제15항에 있어서, 상기 균주는 김치로부터 분리된 것을 특징으로 하는, 건강기능성 식품 조성물.
- 제15항에 있어서, 상기 균주는 생균 또는 사균인 것을 특징으로 하는, 건강기능성 식품 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항의 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) KF340 균주(수탁번호 KCCM 11675P)를 유효성분으로 포함하는, 알레르기, 염증질환, 또는 자가면역질환 개선용 화장료 조성물.
- 제20항에 있어서, 상기 균주는 김치로부터 분리된 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제20항에 있어서, 상기 균주는 생균 또는 사균인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/KR2016/003202 WO2017026620A1 (ko) | 2015-08-13 | 2016-03-29 | 락토바실러스 펜토서스를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020150114938 | 2015-08-13 | ||
KR20150114938 | 2015-08-13 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20170020204A KR20170020204A (ko) | 2017-02-22 |
KR101761506B1 true KR101761506B1 (ko) | 2017-07-25 |
Family
ID=58315081
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020160026193A KR101761506B1 (ko) | 2015-08-13 | 2016-03-04 | 락토바실러스 펜토서스를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR101761506B1 (ko) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102548802B1 (ko) * | 2021-04-30 | 2023-06-29 | 주식회사 레인보우바이오테크 | 김치유래 유산균을 포함하는 프로바이오틱스 조성물 및 이의 용도 |
CN114657100B (zh) * | 2022-04-01 | 2023-07-25 | 江南大学 | 一株能够缓解流感病毒感染小鼠病理特征的戊糖乳杆菌及其应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007308504A (ja) * | 2001-10-12 | 2007-11-29 | Univ Of Reading | ラクトバシルス・ペントサス株を含む組成物およびそれらの使用 |
JP2011004620A (ja) | 2009-06-23 | 2011-01-13 | Tokai Igaku Kensa Kenkyusho:Kk | ラクトバチルス属菌株及び前記菌株を含有する食品及び医薬品 |
WO2014170595A1 (fr) | 2013-04-15 | 2014-10-23 | Greentech | Applications cosmétiques et pharmaceutiques de lactobacillus pentosus |
-
2016
- 2016-03-04 KR KR1020160026193A patent/KR101761506B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007308504A (ja) * | 2001-10-12 | 2007-11-29 | Univ Of Reading | ラクトバシルス・ペントサス株を含む組成物およびそれらの使用 |
JP2011004620A (ja) | 2009-06-23 | 2011-01-13 | Tokai Igaku Kensa Kenkyusho:Kk | ラクトバチルス属菌株及び前記菌株を含有する食品及び医薬品 |
WO2014170595A1 (fr) | 2013-04-15 | 2014-10-23 | Greentech | Applications cosmétiques et pharmaceutiques de lactobacillus pentosus |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20170020204A (ko) | 2017-02-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5718917B2 (ja) | 新規なラクトバチルス・プランタラム及びこれを含む組成物 | |
DK2360237T3 (en) | NEW Lactobacillus plantarum AND COMPOSITION CONTAINING SAME | |
DK2455450T3 (en) | NOVEL Lactobacillus plantarum AND COMPOSITION CONTAINING THIS | |
JP5554994B2 (ja) | 乳酸菌含有製剤 | |
JP5868843B2 (ja) | 乳酸菌含有製剤 | |
KR101644595B1 (ko) | 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
ES2407150T3 (es) | Bacteria ácido láctica novedosa con actividad anti-alérgica, agente anti-alérgico, alimento y composición farmacéutica que comprenden, cada uno de ellos, la bacteria ácido láctica, y proceso para la producción del agente anti-alérgico | |
KR102138832B1 (ko) | 락토바실러스 크리스파투스 kbl693 균주 및 그 용도 | |
KR101724126B1 (ko) | 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis)를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
US20100143303A1 (en) | Composition comprising lactic acid bacterium having high anti-allergic activity, and method for production of the lactic acid bacterium | |
JP2009142266A (ja) | 新規乳酸菌 | |
KR101644594B1 (ko) | 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR101890428B1 (ko) | 페디오코쿠스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus)를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR101635997B1 (ko) | 페디오코쿠스 에시디락티시(Pediococcus acidilactici)를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR101761506B1 (ko) | 락토바실러스 펜토서스를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환, Th17-매개 면역 질환, 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 | |
JP5206134B2 (ja) | 免疫調節剤およびそれを含む抗アレルギー剤 | |
KR102186420B1 (ko) | 스타필로코커스 석시너스 14bme20 균주를 유효성분으로 포함하는 알레르기 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
JP4479162B2 (ja) | 免疫機能調節剤および免疫機能調節食品 | |
KR101959064B1 (ko) | 스타필로코쿠스 에피더미디스 균주를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
Kang et al. | Induction of Th1 cytokines by Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides (KCTC 3100) under Th2-type conditions and the requirement of NF-κB and p38/JNK | |
KR20150051387A (ko) | 큰열매모자반 추출물을 함유하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101644593B1 (ko) | 바실러스 아밀로리퀴페시언스 26n 균주를 유효성분으로 포함하는 항알레르기성 조성물 | |
KR20170041337A (ko) | 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 플란타럼 아종 균주를 유효성분으로 포함하는 Th1-매개 면역 질환 또는 Th2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
RU2791561C2 (ru) | Штамм lactobacillus crispatus kbl693 и его применение | |
KR102143615B1 (ko) | 신규한 카자츠타니아 투리센시스 cau y1706 및 이를 이용한 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
A302 | Request for accelerated examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |