KR101692090B1 - Ｐｂｒ 리간드로서의 트리시클릭 인돌 유도체 - Google Patents

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Abstract

본 발명에 의해, 높은 친화도로 PBR에 결합하고, 투여 후에 우수한 뇌 흡수율을 가지며, PBR에 대해 우수한 선택적 결합을 갖는 인돌-기재 생체내 영상화제가 제공된다. 본 발명은 또한 본 발명의 생체내 영상화제의 합성에 유용한 전구체 화합물, 뿐만 아니라 상기 전구체 화합물의 사용을 포함하는 상기 생체내 영상화제의 합성 방법, 및 상기 방법을 수행하기 위한 키트를 포함한다. 또한, 생체내 영상화제의 자동화된 합성을 위한 카세트가 제공된다. 본 발명의 추가 측면은 본 발명의 생체내 영상화제를 포함하는 방사성제약 조성물, 및 상기 생체내 영상화제의 사용 방법을 포함한다.

Description

ＰＢＲ 리간드로서의 트리시클릭 인돌 유도체 {TRICYCLIC INDOLE DERIVATIVES AS PBR LIGANDS}
인돌 유도체
발명의 기술 분야
본 발명은 생체내 영상화, 및 특히 말초 벤조디아제핀 수용체 (PBR)의 생체내 영상화에 관한 것이다. 높은 친화도로 PBR에 결합하고, 투여 후에 우수한 뇌 흡수율을 가지며, PBR에 대해 우수한 선택적 결합을 갖는 인돌-기재 생체내 영상화제가 제공된다. 본 발명은 또한 본 발명의 생체내 영상화제의 합성에 유용한 전구체 화합물, 뿐만 아니라 상기 전구체 화합물의 합성 방법을 제공한다. 본 발명의 다른 측면은 본 발명의 전구체 화합물의 사용을 포함하는 본 발명의 생체내 영상화제의 합성 방법, 상기 방법을 수행하기 위한 키트, 및 상기 방법의 자동화 버전을 수행하기 위한 카세트를 포함한다. 또한, 본 발명은 본 발명의 생체내 영상화제를 포함하는 방사성제약 조성물, 뿐만 아니라 상기 생체내 영상화제의 사용 방법을 제공한다.
말초 벤조디아제핀 수용체 (PBR)는 주로 말초 조직 및 신경교 세포에 국재화되는 것으로 알려져 있으나, 그의 생리학적 기능은 명확히 밝혀지지 않은 채로 남아있다. 세포하에서, PBR은 미토콘드리아 외막 상에 국재화하는 것으로 알려져 있으며, 이는 미토콘드리아 기능 조절 및 면역계에서의 잠재적 역할을 시사한다. 더욱이, PBR은 세포 증식, 스테로이드합성, 칼슘 흐름 및 세포 호흡에 관여하는 것으로 간주되어 왔다.
비정상적 PBR 발현은 다발성 경화증 (문헌 [Banati et al. 2001 Neuroreport; 12(16): 3439-42], [Debruyne et al. 2002 Acta Neurol Belg; 102(3):127-35]), 라스무센 뇌염 (문헌 [Banati et al. 1999 Neurology; 53(9): 2199-203]), 뇌 혈관염 (문헌 [Goerres et al. 2001 Am J Roentgenol; 176(4): 1016-8]), 포진 뇌염 (문헌 [Cagnin et al. 2001 Brain; 124(Pt 10): 2014-27]) 및 AIDS-관련 치매 (문헌 [Hammoud et al. 2005 J Neurovirol; 11(4): 346-55])를 비롯한 중추신경계 (CNS)의 염증성 질환 상태와 관련되어 있다.
또한 CNS에서, PBR과의 연결성이 변성 질환, 예컨대 파킨슨병 (문헌 [Gerhard et al. 2006 Neurobiol Dis; 21(2): 404-12], [Ouchi et al. 2005 Ann Neurol; 57(2): 161-2]), 피질기저핵 변성 (문헌 [Gerhard et al. 2004 Mov Disord; 19(10): 1221-6]), 진행성 핵상 마비 (문헌 [Gerhard et al. 2006 Neurobiol Dis; 21(2): 404-12]), 다계통 위축 (문헌 [Gerhard et al. 2003 Neurology; 61(5): 686-9]), 헌팅톤병 (문헌 [Pavese et al. 2006 Neurology; 66(11): 1638-43], [Tai et al. 2007 Brain Res Bull; 72(2-3): 148-51]), 근위축성 측삭 경화증 (문헌 [Turner et al. 2004 Neurobiol Dis; 15(3): 601-9]), 및 알츠하이머병 (문헌 [Cagnin et al. 2001 Lancet; 358(9283): 766], [Yasuno et al. 2008 Biol Psychiatry; 64(10): 835-41])에서 증명된 바 있다.
허혈성 졸중 (문헌 [Gerhard et al. 2005 Neuroimage; 24(2): 591-5]), 말초 신경 손상 (문헌 [Banati et al. 2001 Neuroreport; 12(16):3439-42]), 간질 (문헌 [Sauvageau 2002 Metab Brain Dis; 17(1): 3-11], [Kumar et al. 2008 Pediatr Neurol; 38(6)])을 비롯한 다수의 CNS 허혈성 상태가 비정상적 PBR 발현과 관련되어 있는 것으로 나타났다. 외상성 뇌 손상의 동물 모델에서 보고된 PBR 발현의 증가 (문헌 [Venneti et al. 2007 Exp Neurol; 207(1): 118-27])로, PBR은 외상성 뇌 손상에서 손상 정도를 측정하는 바이오마커로서 간주되어 왔다 (문헌 [Toyama et al. 2008 Ann Nucl Med; 22(5): 417-24]). 흥미롭게도, 급성 스트레스는 뇌에서의 PBR 발현의 증가와 관련되어 있고, 반면에 만성 스트레스는 PBR의 하향조절과 관련되어 있다 (문헌 [Lehmann et al. 1999 Brain Res; 851(1-2): 141-7]). 신경교종 경계의 윤곽묘사는 PBR을 영상화하는 [11C]PK11195를 사용하여 가능한 것으로 보고된 바 있다 (문헌 [Junck et al. 1989 Ann Neurol; 26(6): 752-8]). PBR은 또한 신경병증성 통증과 관련될 수 있다 (쯔다(Tsuda) 등이 신경병증성 통증을 갖는 대상체에서 활성화된 소교세포를 관찰한 바 있음 (문헌 [2005 TINS 28(2) pp101-7])).
말초에서, PBR 발현은 폐 염증 (문헌 [Branley et al. 2008 Nucl. Med. Biol; 35(8): 901-9]), 만성 폐쇄성 폐 질환 및 천식 (문헌 [Jones et al. 2003 Eur Respir J; 21(4): 567-73]), 염증성 장 질환 (문헌 [Ostuni et al. Inflamm Bowel Dis; 2010 online publication]), 류마티스 관절염 (문헌 [van der Laken et al. 2008 Arthritis Rheum; 58(11): 3350-5]), 원발성 섬유근육통 (문헌 [Faggioli et al. 2004 Rheumatology; 43(10): 1224-1225]), 신경 손상 (문헌 [Durrenberger et al. 2004 J Peripher Nerv Syst; 9(1): 15-25]), 아테롬성동맥경화증 (문헌 [Fujimura et al. 2008 Atherosclerosis; 201(1): 108-111]), 결장암, 전립선암 및 유방암 (문헌 [Deane et al. 2007 mol Cancer Res; 5(4): 341-9], [Miettinen et al. 1995 Cancer Res; 55(12): 2691-5], [Han et al. 2003 J Recept Signal Transduct Res; 23(2-3): 225-38]), 신장 염증 (문헌 [Tam et al. 1999 Nephrol Dial Transplant; 14(7): 1658-66], [Cook et al. 1999 Kidney Int; 55(4):1319-26]) 및 허혈-재관류 손상 (문헌 [Zhang et al. 2006 J Am Coll Surg; 203(3): 353-64)과 연결되어 있다.
PBR 선택적 리간드인 (R)-[11C]PK11195를 사용한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 영상화는 중추신경계 (CNS) 염증의 일반적인 지표를 제공한다. 그러나, (R)-[11C]PK11195는 높은 단백질 결합, 및 낮은 특이적 대 비-특이적 결합을 갖는 것으로 알려져 있다. 더욱이, 그의 방사성표지 대사물의 역할은 알려져 있지 않고, 결합의 정량화는 복잡한 모델링을 요구한다.
트리시클릭 인돌 화합물은 당업계에 공지되어 있다. 데이비스(Davies) 등(문헌 [J. Med. Chem. 1998; 41(4): 451-67])은 트리시클릭 인돌 화합물 부류를 교시하고, 이들을 멜라토닌 효능제 및 길항제로서 특징규명하였다. 내퍼(Napper) 등 (문헌 [J. Med. Chem. 2005; 48: 8045-54])은 히스톤 및 다른 단백질의 리신 잔기로부터 아세틸 기를 제거하는 효소 패밀리의 구성원인 효소 SIRT1의 선택적 억제와 관련하여 트리시클릭 인돌 화합물 부류에 대한 구조-활성 관계를 교시 및 논의하였다. 트리시클릭 인돌 화합물의 또 다른 부류가 US 6451795에 개시되어 있고, PBR-관련 질환 상태의 치료에 유용한 것으로 논의되어 있다. US 6451795는 0.2 nM 내지 5.0 nM의 가장 활성인 화합물에 대한 IC50 값을 개시하고, 화합물이 말초 신경병증의 예방 또는 치료, 및 중추 신경변성 질환의 치료에 유용하다는 것을 기술한다.
오쿠부(Okubu) 등 (문헌 [Bioorganic & Medicinal Chemistry 2004 12 3569-80])은 테트라시클릭 인돌 화합물 군의 디자인, 합성 및 구조, 뿐만 아니라 이들의 PBR에 대한 친화도 (약 0.4 nM만큼 낮은 IC50 값)를 기재하였다. 본 발명의 출원인에게 양도된 WO 2007/057705는 생체내 영상화 모이어티의 범위로 분류된 테트라시클릭 인돌 유도체를 개시한다. WO 2007/057705에 의해 개시된 바람직한 생체내 영상화 모이어티는 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 단층촬영 (SPECT) 영상화, 가장 바람직하게는 PET에 적합한 것들이다.
또한, 공계류 특허 출원 PCT/EP2009/062827은 WO 2007/057705의 것들과 유사한 테트라시클릭 인돌-유래 생체내 영상화제를 기재한다.
WO 2007/057705 및 공계류 특허 출원 PCT/EP2009/062827에 기재된 테트라시클릭 인돌 유도체는 PBR 수용체에 대해 우수한 친화력을 가지며, 주입 60분 후에 뇌에서의 높은 방사능 비율로 모(parent) 생체내 영상화제가 나타난다. 이들 테트라시클릭 인돌 유도체가 생물학적 분포 연구에서 래트 뇌에서의 합리적인 초기 농도를 또한 달성할지라도, 흡수율은 여전히 비교적 낮고, 개선될 수 있다. 본 발명자들은 또한 이들 선행 기술의 테트라시클릭 인돌 유도체의 후각 망울 (PBR 수용체의 최고 농도를 갖는 뇌 영역)에서의 상대적 체류가 생체내 영상화를 위해 바람직할 만큼 높지 않다는 것을 밝혀낸 바 있다. 따라서, 상기 기재된 선행 기술의 테트라시클릭 인돌 생체내 영상화제의 유리한 특성을 유지하지만 개선된 뇌 흡수율 및 PBR 수용체에 대한 개선된 특이적 결합을 갖는 PBR 생체내 영상화제를 위한 범위가 있다.
본 발명은 생체내 영상화제로서의 사용에 적합한 신규 트리시클릭 인돌 화합물을 제공한다. 본 발명은 또한 본 발명의 생체내 영상화제의 합성에 유용한 전구체 화합물, 뿐만 아니라 상기 전구체 화합물의 합성 방법을 제공한다. 생체내 영상화제의 제조 방법이 또한 본 발명의 전구체 화합물의 사용을 포함하여 제공된다. 본 발명의 생체내 영상화제를 포함하는 제약 조성물이, 제약 조성물의 간편한 제조에 적합한 키트에 더하여 추가로 제공된다. 추가 측면에서, 비정상적 PBR 발현과 관련된 상태의 생체내 영상화를 위한 생체내 영상화제의 용도가 제공된다. 본 발명의 생체내 영상화제는 개선된 뇌 흡수율 및 말초 벤조디아제핀 수용체에 대한 특이성과 함께, 공지된 테트라시클릭 생체내 영상화제의 유리한 특성을 보유한다.
영상화제
한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 생체내 영상화제를 제공한다.
<화학식 I>
Figure 112011083850303-pct00001
상기 식에서,
R1은 C1 -3 알킬 또는 C1 -3 플루오로알킬이고;
R2는 수소, 히드록실, 할로, 시아노, C1 -3 알킬, C1 -3 알콕시, C1 -3 플루오로알킬 또는 C1 -3 플루오로알콕시이고;
R3 및 R4는 독립적으로 C1 -3 알킬, C7 -10 아르알킬이거나, 또는 R3 및 R4는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께, 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1개의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 질소-함유 C4 -6 지방족 고리를 형성하고;
Y1은 O, S, SO, SO2 또는 CH2이고;
Y2는 CH2, CH2-CH2, CH(CH3)-CH2 또는 CH2-CH2-CH2이고;
여기서, 정의된 바와 같은 화학식 I은 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소인 원자를 포함한다.
본 발명의 문맥에서 "생체내 영상화제"는 생체내 영상화에 적합한 방사성표지 화합물이다. 본원에 사용된 용어 "생체내 영상화"는 대상체의 내부 측면의 전부 또는 일부의 영상을 비침습적으로 생성하는 해당 기술을 지칭한다.
달리 명시되지 않는 한, 단독 또는 조합된 용어 "알킬"은 바람직하게는 1 내지 3개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 라디칼을 의미한다. 이러한 라디칼의 예에는 메틸, 에틸, 및 프로필이 포함된다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 "알콕시"는 에테르 연결을 포함하는 상기 정의된 바와 같은 알킬 라디칼을 의미하고, 용어 "에테르 연결"은 기 -C-O-C-를 지칭한다. 적합한 알킬 에테르 라디칼의 예에는 메톡시, 에톡시 및 프로폭시가 포함된다.
용어 "할로겐" 또는 "할로-"는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드로부터 선택된 치환기를 의미한다. "할로알킬" 및 "할로알콕시"는 각각 하나 이상의 할로겐으로 치환된 상기 정의된 바와 같은 알킬 및 알콕시 기이다. 적합하게는 할로알킬 및 할로알콕시 치환기의 경우에, 할로겐은 라디칼의 말단 끝의 수소를 대체한다 (즉, -알킬렌-할로겐 또는 -알콕실렌-할로겐). 용어 "알킬렌"은 n이 1 내지 3인 2가 기 -(CH2)n-을 지칭하고, 용어 "알콕실렌"은 에테르 연결을 포함하는 알킬렌 기를 지칭하고, 여기서 에테르 연결은 상기 정의된 바와 같다.
용어 "시아노"는 기 -CN을 지칭한다.
용어 "히드록실"은 기 -OH를 지칭한다.
용어 "아르알킬"은 기 -알킬렌-페닐을 지칭하고, 여기서 알킬렌은 상기 정의된 바와 같다.
"질소-함유 C4 -6 지방족 고리"는 질소 헤테로원자를 포함하는 포화 C4 -6 알킬 고리이다. 예에는 피롤리디닐, 피페리디닐 및 모르폴리닐 고리가 포함된다.
용어 "생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소인 원자를 포함한다"는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I에서 원자 중 하나의 동위원소 형태가 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소임을 의미한다. 생체내 영상화에 적합하기 위해, 방사성동위원소는 상기 대상체에 투여된 후에 외부적으로 검출가능하다.
키랄 중심 또는 또 다른 형태의 이성질체 중심이 본 발명에 따른 생체내 영상화제에 존재하는 경우에, 거울상이성질체 및 부분입체이성질체를 비롯한 모든 형태의 이러한 이성질체는 본 발명에 포함된다. 키랄 중심을 함유하는 본 발명의 생체내 영상화제는 라세미 혼합물로서, 또는 거울상이성질체적으로 풍부한 혼합물로서 사용될 수 있거나, 또는 라세미 혼합물이 널리 공지된 기술을 이용하여 분리될 수 있고, 개별 거울상이성질체가 단독으로 사용될 수 있다.
바람직한 영상화제
R1은 바람직하게는 메틸 또는 C2 -3 플루오로알킬, 및 가장 바람직하게는 -에틸렌-F (즉, -CH2-CH2-F)이다.
R2는 바람직하게는 수소, 할로, C1 -3 알콕시 또는 C1 -3 플루오로알콕시이다. R2는 가장 바람직하게는 수소, 할로 또는 C1 -3 알콕시, 및 가장 특히 바람직하게는 수소, 플루오로 또는 메톡시이다. R2가 치환기인 경우에 이것은 바람직하게는 5- 또는 6- 위치에 있고, 가장 바람직하게는 5-메톡시, 6-메톡시, 5-플루오로 및 6-플루오로로부터 선택된다.
R3 및 R4는 바람직하게는 독립적으로 메틸, 에틸 또는 벤질이고, 가장 바람직하게는 둘 다 에틸이다.
대안적으로 바람직하게는, R3 및 R4는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 질소-함유 C5 -6 지방족 고리를 형성한다.
Y1은 바람직하게는 CH2이다.
본 발명의 가장 바람직한 생체내 영상화제의 경우에, Y2는 CH2-CH2이다.
본 발명의 바람직한 생체내 영상화제는 단일 광자 방출 전산화 단층촬영 (SPECT) 또는 양전자 방출 단층촬영 (PET)을 이용한 영상화에 적합하다. SPECT의 경우에, 적합한 방사성동위원소는 감마-방출 방사성 할로겐이다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 감마-방출 방사성 할로겐의 예로는 123I, 131I 및 77Br이 있다. 바람직한 감마-방출 방사성 할로겐은 123I이다. 생체내 영상화제의 방사성동위원소가 123I인 경우에, R2가 123I인 것이 바람직하다. PET의 경우에, 적합한 방사성동위원소는 양전자-방출 방사성 비금속이다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 양전자-방출 방사성 비금속의 예로는 11C, 18F 및 124I가 있다. 바람직한 양전자-방출 방사성 비금속은 11C 및 18F이다. 11C의 경우에, R1이 11C 메틸인 것이 바람직하다. 방사성동위원소가 18F인 경우에, R1이 C2 -3 [18F]플루오로알킬, 가장 바람직하게는 -에틸렌-18F인 것이 바람직하다.
본 발명의 생체내 영상화제가 PET 영상화에 적합하고, 18F가 PET 영상화에 적합한 바람직한 방사성동위원소인 것이 바람직하다. 본 발명의 방법에서 PET가 바람직한 이유는 그의 탁월한 감도 및 분해능 때문이며, 따라서 시간 경과에 따른 병소에서의 비교적 작은 변화도 관찰될 수 있다. PET 스캐너는 피코몰 범위의 방사능 농도를 일상적으로 측정한다. 마이크로-PET 스캐너는 현재 약 1 mm의 공간 분해능에 근접하고, 임상 스캐너는 약 4 내지 5 mm에 근접한다.
화학식 I의 바람직한 생체내 영상화제는 하기 화학식 Ia를 갖는다.
<화학식 Ia>
Figure 112011083850303-pct00002
상기 식에서,
R2a는 수소, 할로 또는 C1 -3 알콕시이고;
R3a 및 R4a는 독립적으로 메틸, 에틸 또는 벤질이거나, 또는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제파닐 또는 모르폴리닐 고리를 형성하고;
Y2a는 CH2, CH2-CH2, CH(CH3)-CH2 또는 CH2-CH2-CH2이고;
n은 1, 2 또는 3이다.
화학식 Ia에서, R3a 및 R4a는 바람직하게는 둘 다 에틸이거나, 또는 R3a가 메틸이고 R4a가 벤질이거나, 또는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제파닐 고리를 형성한다.
R2a는 바람직하게는 수소, 메톡시 또는 플루오로이다.
Y2a는 바람직하게는 CH2-CH2 또는 CH(CH3)-CH2이다.
n은 바람직하게는 2이다.
화학식 Ia의 바람직한 생체내 영상화제에서:
R3a 및 R4a는 둘 다 에틸이거나, 또는 R3a가 메틸이고 R4a가 벤질이거나, 또는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제파닐을 형성하고;
R2a는 수소, 메톡시 또는 플루오로이고;
Y2a는 CH2-CH2 또는 CH(CH3)-CH2이고;
n은 2이다.
화학식 Ia의 생체내 영상화제의 비제한적 예는 다음과 같다:
Figure 112011083850303-pct00003
상기 생체내 영상화제 1 내지 11 중에서, 생체내 영상화제 5, 6, 7, 9, 10 및 11이 바람직하고, 생체내 영상화제 5 및 10이 가장 바람직하고, 생체내 영상화제 5가 특히 바람직하다. 임의의 본 발명의 생체내 영상화제의 경우에, 거울상이성질체적으로 순수한 형태가 특히 바람직하다.
전구체 화합물
또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 생체내 영상화제의 제조를 위한, 하기 화학식 II를 갖는 전구체 화합물을 제공한다.
<화학식 II>
Figure 112011083850303-pct00004
상기 식에서,
R11 및 R12 중 하나는, 상기 전구체 화합물과 본 발명의 생체내 영상화제에 대해 상기 정의된 바와 같은 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 본 발명의 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하고, R11 및 R12 중 다른 하나는 각각 R1 및 R2에 대해 본원에 정의된 바와 같고, 임의로 보호기를 포함하고;
R13 -14 및 Y11 -12는 각각 R3 -4 및 Y1 -2에 대해 본원에 정의된 바와 같고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함한다.
"전구체 화합물"은, 검출가능한 표지의 편리한 화학 형태와의 화학 반응이 부위 특이적으로 일어나고; 최소 단계수로 수행가능하고 (이상적으로는 단일 단계); 중요한 정제를 필요로 하지 않으면서 (이상적으로는 추가 정제 없이) 목적하는 생체내 영상화제를 제공하도록 디자인된, 방사성표지 화합물의 비-방사성 유도체를 포함한다. 이러한 전구체 화합물은 합성 화합물이고, 편리하게는 우수한 화학적 순도로 수득할 수 있다.
용어 "보호기"는 원치않는 화학 반응을 억제 또는 저해하지만, 분자의 나머지를 변형시키지 않는 충분히 온건한 조건 하에 당해 관능기로부터 절단되어 원하는 생성물을 수득할 수 있는 충분한 반응성을 갖도록 디자인된 기를 의미한다. 보호기는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 문헌 ['Protective Groups in Organic Synthesis', Theorodora W. Greene and Peter G. M. Wuts, (Third Edition, John Wiley & Sons, 1999)]에 기재되어 있다.
용어 "방사성동위원소의 적합한 공급원"은 방사성동위원소가 전구체 화합물과 공유 결합하도록 전구체 화합물의 치환기와의 반응성을 갖는 화학적 형태의 방사성동위원소를 의미한다. 하기 섹션에서 제시된 각각의 특정 방사성동위원소에 대하여, 방사성동위원소의 하나 이상의 적합한 공급원이 논의된다. 생체내 영상화제 분야에서의 숙련자라면 본 발명에서의 용도에 적합한 방사성동위원소의 상기 및 기타 공급원을 잘 알 것이다.
하기 반응식 1은 그 자체로 전구체 화합물로서 사용될 수 있거나, 또는 소수의 추가적 단계에 의해 전구체 화합물로 전환될 수 있는 화합물을 수득하는 방법을 보여주는 일반적 반응식이다. 반응식 1의 R11 -14 및 Y11 -12는 화학식 II에 대해 상기 정의된 바와 같다.
<반응식 1>
Figure 112011083850303-pct00005
대안적으로, 전구체 화합물의 R12가 고리의 상부 위치에 있는 경우에, 하기 반응식 Ia에 예시된 일반적 합성 경로가 이용될 수 있다.
<반응식 Ia>
Figure 112011083850303-pct00006
상기 반응식 1a에서, -R11a-PG는 보호된 R11 기를 나타내고, 여기서 R11은 적합하게는 및 바람직하게는 본원에 정의된 바와 같다. R11이 히드록시인 경우에, -R11a-PG는, 예를 들어 -O-벤질일 수 있다. R12 -14 및 Y11 -12는 적합하게는 및 바람직하게는 상기 화학식 II에 대해 제공된 바와 같고, 단, R12는 클로로가 아니다. 상기 합성 경로에서, 고리의 하부 위치의 염소는 고리화가 단 하나의 이성질체가 생성되도록 단지 1가지 방식으로 일어나도록 강요한다. 유사한 방법이 WO 2003/014082에 개시되어 있다. 그러나, 본 발명자들이 WO 2003/014082의 교시를 적용하여 본 발명의 전구체 화합물을 수득하였을 때, 수율은 낮았다 (실시예 2(d) 참조). 상기 문제는 고리화 단계에 사용된 용매계를 변경함으로써 극복되었다. WO 2003/014082에서 고리화 단계는 톨루엔 중에서 수행되는 데 반하여, 본 발명자들은 톨루엔 대신에 디에틸 에테르가 사용되는 경우에 최적 수율을 얻는다는 것을 발견하였다. 고리화 단계의 생성물은 디에틸 에테르에 용해되는 데 반하여, 고리화되지 않은 출발 화합물은 그렇지 않다. 따라서, 고리화되지 않은 출발 화합물은 반응 용기의 바닥에 ZnCl2와 함께 남아있고, 고리화된 생성물은 반응 용기 상부의 디에틸 에테르 중으로 이동한다.
따라서 분리된 측면에서, 본 발명은 디에틸 에테르를 포함하는 용매계 중에서 하기 화학식 IIc의 화합물을 ZnCl2와 반응시켜 하기 화학식 IId의 화합물을 형성하는 것을 포함하는, 하기 화학식 IIb의 전구체 화합물의 제조 방법을 제공한다.
<화학식 IIb>
Figure 112011083850303-pct00007
(상기 식에서,
R11b는 R11a에 대해 반응식 Ia에 정의된 바와 같고;
R12b -14b는 화학식 II의 R12 -14에 대해 정의된 바와 같고, 단, R12b는 클로로가 아니고;
Y11b -12b는 화학식 II의 Y11 -12에 대해 정의된 바와 같음);
<화학식 IIc>
Figure 112011083850303-pct00008
(상기 식에서, R12c, Y11c 및 Y12c는 적합하게는 및 바람직하게는 각각 R12, Y11 및 Y12에 대해 본원에 정의된 바와 같고, PGc는 보호기임);
<화학식 IId>
Figure 112011083850303-pct00009
(상기 식에서, R12d, Y11d, Y12d 및 PGd는 각각 R12c, Y11c, Y12c 및 PGc에 대해 정의된 바와 같음).
바람직하게는, 상기 보호기, PGc, PGd는 -벤질이다. 화학식 IIb의 전구체 화합물은 화학식 II의 바람직한 전구체 화합물을 나타낸다.
생체내 영상화제의 방사성동위원소가 18F인 경우에, 18F로 표지하는 것은 전구체 화합물로부터 이탈기의 친핵성 치환에 의해 달성될 수 있다. 적합한 이탈기에는 Cl, Br, I, 토실레이트 (OTs), 메실레이트 (OMs) 및 트리플레이트 (OTf)가 포함된다. 또 다른 전략은 전구체 화합물 상에 존재하는 알킬아미드 기 상의 위치에 적합한 이탈기를 갖는 것일 것이다. 두 경우 모두에서, 전구체 화합물은 [18F]-플루오라이드 이온 (18F-)의 적합한 공급원과의 1단계 반응에 의해 표지될 수 있고, 이는 보통 핵반응 18O(p,n)18F로부터 수용액으로서 수득되고, 양이온성 반대이온의 첨가 및 후속적인 물의 제거에 의해 반응성이 된다. 18F는 또한 전구체 화합물의 히드록실 기를 18F(CH2)3-LG로 O-알킬화시킴으로써 도입될 수 있고, 여기서 LG는 상기 정의된 바와 같은 이탈기를 나타낸다. 대안적으로, 방사성불소 원자는 직접 공유 결합을 통해 방향족 고리, 예컨대 벤젠 고리에 부착할 수 있다. 아릴계의 경우에, 아릴 디아조늄염, 아릴 니트로 화합물 또는 아릴 4급 암모늄염으로부터의 18F-플루오라이드 친핵성 치환은 아릴-18F 유도체로의 적합한 경로이다.
상기 반응식 1 또는 반응식 1a는 본 발명의 18F 생체내 영상화제를 수득하기에 적합한 전구체 화합물에 도달하기 위해 하기 반응식 2에 예시된 바와 같이 계속될 수 있다.
<반응식 2>
Figure 112011083850303-pct00010
출발 화합물 및 중간체는 시판되거나, 또는 출판된 과학 논문, 예를 들어 문헌 [Napper et al. J Med Chem 2005; 48: 8045-54], [Davies et al. J Med Chem 1998; 41: 451-467]으로부터 공지되어 있다.
18F를 포함하는 생체내 영상화제를 수득하기 위한 화학식 II의 바람직한 전구체 화합물에서, R11은 C1 -3 알킬렌-LG이고, 여기서 LG는 이탈기를 나타낸다. 가장 바람직한 이러한 전구체 화합물은 하기 화학식 IIa를 갖는다.
<화학식 IIa>
Figure 112011083850303-pct00011
상기 식에서,
LG는 메실레이트, 토실레이트 및 트리플레이트로부터 선택되고;
R12a-14a, Y12a 및 m은 적합하게는 및 바람직하게는 각각 화학식 Ia의 R2a -4a, Y2a 및 n에 대해 상기 정의된 바와 같다.
화학식 IIa의 바람직한 전구체 화합물의 비제한적 예는 다음과 같다:
Figure 112011083850303-pct00012
상기 전구체 화합물 1 내지 11 중에서, 전구체 화합물 5, 6, 7, 9, 10 및 11이 바람직하고, 전구체 화합물 5 및 10이 가장 바람직하고, 전구체 화합물 5가 특히 바람직하다.
11C-표지된 PET 추적자 화합물은 전구체 화합물을 11C 메틸 요오다이드와 반응시켜 합성할 수 있다. 11C의 반감기는 단지 20.4분이므로, 중간체 11C 메틸 요오다이드가 높은 특이적 활성을 갖는 것, 및 그에 따라 이것을 가능한 한 신속한 반응 과정을 이용하여 제조하는 것이 중요하다. 이러한 11C-표지 기술의 면밀한 검토는 문헌 [Antoni et al. "Aspects on the Synthesis of 11C-Labelled Compounds" in Handbook of Radiopharmaceuticals, Ed. M.J. Welch and C.S. Redvanly (2003, John Wiley and Sons)]에서 찾아볼 수 있다.
본 발명의 11C-표지된 생체내 영상화제는 하기 반응식 3에 예시된 바와 같이 상기 반응식 1을 계속함으로써 수득될 수 있다.
<반응식 3>
Figure 112011083850303-pct00013
영상화 모이어티가 방사성요오드인 경우에, 바람직한 전구체 화합물은 친전자성 요오드화를 겪거나 겪지 않는 유도체를 포함하는 것들이다. 이것의 예로는 유기금속 유도체, 예컨대 트리알킬스탄난 (예를 들어, 트리메틸스탄닐 또는 트리부틸스탄닐), 또는 트리알킬실란 (예를 들어, 트리메틸실릴) 또는 유기붕소 화합물 (예를 들어, 보로네이트 에스테르 또는 유기트리플루오로보레이트)이 있다.
친전자성 방사성요오드화의 경우에, 전구체 화합물은 바람직하게는 활성화된 유기금속 전구체 화합물 (예를 들어, 트리알킬주석, 트리알킬실릴 또는 유기붕소 화합물)을 포함한다. 전구체 화합물, 및 방사성요오드를 유기 분자 내로 도입시키는 방법은 문헌 [Bolton (J. Lab. Comp. Radiopharm. 2002; 45: 485-528)]에 기재되어 있다. 적합한 보로네이트 에스테르 유기붕소 화합물 및 그의 제조는 카발라카(Kabalaka) 등 (문헌 [Nucl. Med. Biol., 2002; 29: 841-843 and 2003; 30: 369-373])에 의해 기재되어 있다. 적합한 유기트리플루오로보레이트 및 그의 제조는 카발라카 등 (문헌 [Nucl. Med. Biol., 2004; 31: 935-938])에 의해 기재되어 있다. 방사성요오드화를 위한 바람직한 전구체 화합물은 유기금속 전구체 화합물, 가장 바람직하게는 트리알킬주석을 포함한다.
방사성요오드 표지된 본 발명의 생체내 영상화제는 하기 반응식 4에 예시된 바와 같이 상기 반응식 1을 계속함으로써 수득될 수 있다.
<반응식 4>
Figure 112011083850303-pct00014
방사성브롬화는 방사성요오드화에 대해 상기 기재된 것과 유사한 방법에 의해 달성할 수 있다. 카발카(Kabalka) 및 바르마(Varma)는 방사성브롬화 화합물을 비롯한 방사성할로겐화 화합물의 다양한 합성 방법을 검토하였다 (문헌 [Tetrahedron 1989; 45(21): 6601-21]).
본 발명의 전구체 화합물은 이상적으로는 멸균된, 비발열성 형태로 제공된다. 따라서, 전구체 화합물은 생체내 영상화제를 포유동물 투여에 적합한 생체적합성 담체와 함께 포함하는 제약 조성물의 제조에 사용될 수 있다. 전구체 화합물은 또한 이러한 제약 조성물의 제조를 위한 키트 또는 카세트에 한 요소로서 포함시키기에 적합하다. 이들 측면은 하기에 보다 상세히 논의되어 있다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 전구체 화합물은 고체 상에 결합되어 있다. 전구체 화합물은 바람직하게는 고체 지지체 매트릭스에 공유 결합되어 제공된다. 이러한 방식으로, 목적하는 생성물이 용액 중에 형성되는 데 반하여, 출발 물질 및 불순물은 고체 상에 결합된 채로 남아있다. 이러한 시스템의 예로서, 18F-플루오라이드를 사용한 고체 상 친전자성 플루오르화를 위한 전구체 화합물이 WO 03/002489에 기재되어 있고, 18F-플루오라이드에 의한 고체 상 친핵성 플루오르화를 위한 전구체 화합물이 WO 03/002157에 기재되어 있다.
제조 방법
추가 측면에서, 본 발명은
(i) 본 발명의 전구체 화합물을 제공하는 것;
(ii) 본원에 정의된 바와 같은 상기 방사성동위원소의 적합한 공급원을 제공하는 것;
(iii) 단계 (i)의 전구체 화합물을 단계 (ii)의 방사성동위원소와 반응시켜, 본 발명의 생체내 영상화제를 수득하는 것
을 포함하는, 본 발명의 생체내 영상화제의 제조 방법을 제공한다.
단계 (i)에서, 전구체 화합물은 전구체 화합물의 설명에 상기 기재된 바와 같이, 자동 합성 장치와 함께 사용하기에 적합한 키트 또는 카세트에 용액으로 제공될 수 있거나, 또는 다르게는 고체 지지체에 결합될 수 있다. 키트 및 카세트는 본 발명의 또 다른 측면을 형성하고, 하기에 보다 상세히 논의될 것이다.
전구체 화합물을 방사성동위원소와 "반응"시키는 단계는, 가능한 한 높은 방사화학 수율 (RCY)로 목적하는 생체내 영상화제를 형성하기에 적합한 반응 조건 하에 두 반응물을 함께 존재하도록 하는 것을 포함한다. 본 발명의 생체내 영상화제를 수득하기 위한 특정 합성 경로는 하기 실험 섹션에 제시되어 있다.
본 발명의 제조 방법에 있어서, 생체내 영상화제, 전구체 화합물 및 방사성동위원소의 적합하고 바람직한 실시양태는 본원에 이미 제공된 바와 같다.
키트 및 카세트
또 다른 추가 측면에서, 본 발명은 최소 횟수의 조작으로 방사성동위원소의 멸균 공급원과의 반응이 목적하는 생체내 영상화제를 제공하도록 하는 본 발명의 생체내 영상화제의 제조를 위한 키트를 제공하고, 상기 키트는 본 발명의 전구체 화합물을 포함한다. 이러한 고려사항은 방사성동위원소가 비교적 짧은 반감기를 갖는 경우에, 및 취급의 용이함 및 그에 따른 방사선사에 대한 감소된 방사선량을 위해 특히 중요하다. 전구체 화합물은 바람직하게는 키트에 동결건조된 형태로 존재하고, 이러한 키트의 재구성을 위한 반응 매질은 바람직하게는 생체적합성 담체이다.
"생체적합성 담체"는, 조성물이 생리학적으로 내약성을 갖도록, 즉, 독성 또는 과도한 불쾌감 없이 포유동물 체내에 투여될 수 있도록 생체내 영상화제가 현탁 또는 용해되는 유체, 특히 액체이다. 생체적합성 담체는 적합하게는 주사가능한 담체 액체, 예컨대 멸균된, 발열원 무함유 주사용수; 수용액, 예컨대 염수 (유리하게는 주사용 최종 제품이 등장성이도록 또는 저장성이 아니도록 평형화될 수 있음); 1종 이상의 장성-조정 물질 (예를 들어, 혈장 양이온의 생체적합성 반대이온과의 염), 당 (예를 들어, 글루코스 또는 수크로스), 당 알콜 (예를 들어, 소르비톨 또는 만니톨), 글리콜 (예를 들어, 글리세롤), 또는 다른 비이온성 폴리올 물질 (예를 들어, 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌 글리콜 등)의 수용액이다. 생체적합성 담체는 또한 생체적합성 유기 용매, 예컨대 에탄올을 포함할 수 있다. 이러한 유기 용매는 보다 친지성인 화합물 또는 제제를 가용화시키는 데 유용하다. 바람직하게는, 생체적합성 담체는 발열원 무함유 주사용수, 등장성 염수 또는 수성 에탄올 용액이다. 정맥 주사를 위한 생체적합성 담체의 pH는 적합하게는 4.0 내지 10.5의 범위이다.
본 발명의 키트에서, 전구체 화합물은 바람직하게는, 임의로는 비활성 헤드스페이스 기체 (예를 들어, 질소 또는 아르곤)와 함께, 주사기에 의한 용액의 첨가 및 회수를 가능하게 하면서, 멸균 완전성 및/또는 방사능 안전성의 유지를 가능하게 하는 밀봉 용기에 제공된다. 바람직한 밀봉 용기는 격막-밀봉 바이알이며, 여기서 기밀 마개는 오버실(overseal) (통상적으로는 알루미늄)로 크림핑(crimped)되어 있다. 이러한 밀봉 용기는 원하는 경우에 (예를 들어, 헤드스페이스 기체를 교체하거나 용액을 탈기하기 위해) 마개가 진공을 견딜 수 있는 추가의 이점을 갖는다.
키트에 사용되는 경우에 전구체 화합물의 바람직한 실시양태는 본원에 앞서 기재된 바와 같다.
키트에 사용하기 위한 전구체 화합물은 무균성 제조 조건 하에 사용되어, 목적하는 멸균된, 비발열성 물질을 제공할 수 있다. 대안적으로, 전구체 화합물은 비멸균성 조건 하에 사용된 후에, 예를 들어 감마선 조사, 오토클레이빙(autoclaving), 건열 또는 화학 처리 (예를 들어, 에틸렌 옥시드)를 이용하여 최종 멸균될 수 있다. 바람적하게는, 전구체 화합물은 멸균된, 비발열성 형태로 제공된다. 가장 바람직하게는, 멸균된, 비발열성 전구체 화합물은 상기 기재된 바와 같은 밀봉 용기에 제공된다.
바람직하게는, 키트의 모든 요소는 실행 사이의 오염 가능성을 최소화하고 멸균성 및 품질 보장을 위해 일회용이다.
PET 영상화를 위한 [18F]-방사성 추적자는 현재 자동 방사성 합성 장치 상에서 종종 편리하게 제조된다. 트레이서랩(Tracerlab)™ 및 패스트랩(Fastlab)™ (GE 헬쓰케어 리미티드(GE Healthcare Ltd))을 비롯한 이러한 장치의 여러 시판예가 있다. 이러한 장치는 통상적으로 방사성 합성을 수행하기 위해 장치에 장착되는, 방사화학이 수행되며 종종 일회용인 "카세트"를 포함한다. 카세트는 보통 유체 통로, 반응 용기, 및 시약 바이알을 수용하기 위한 포트, 뿐만 아니라 방사성 합성 후 소제 단계에서 사용되는 임의의 고체 상 추출 카트리지를 포함한다.
따라서, 또 다른 측면에서 본 발명은
(i) 본원에 정의된 바와 같은 전구체 화합물을 함유하는 용기; 및
(ii) 본원에 정의된 바와 같은 생체내 영상화에 적합한 상기 방사성동위원소의 적합한 공급원으로 용기를 용리하기 위한 수단
을 포함하는, 본원에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제의 자동화된 합성을 위한 카세트를 제공한다.
본 발명의 카세트에 있어서, 전구체 화합물 및 방사성동위원소의 적합한 공급원의 적합하고 바람직한 실시양태는 본원에 앞서 정의된 바와 같다.
카세트는
(iii) 과량의 방사성동위원소의 제거를 위한 이온-교환 카트리지; 및 임의로는
(iv) 전구체 화합물이 하나 이상의 보호기를 포함하는 경우에, 생성된 방사성표지 생성물을 탈보호시켜 본원에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 형성하기 위한 카트리지
를 추가로 포함할 수 있다.
방사성제약 조성물
또 다른 추가 측면에서, 본 발명은 본 발명의 생체내 영상화제를 포유동물 투여에 적합한 형태의 생체적합성 담체와 함께 포함하는 조성물인 "방사성제약 조성물"을 제공한다. 생체적합성 담체는 본 발명의 키트에 관하여 상기 정의된 바와 같다. 본 발명의 방사성제약 조성물에 있어서, 생체내 영상화제의 적합하고 바람직한 실시양태는 본 명세서에서 앞서 정의된 바와 같다.
방사성제약 조성물은 비경구로, 즉, 주사에 의해 투여할 수 있고, 가장 바람직하게는 수용액이다. 이러한 조성물은 임의로 추가 성분, 예컨대 완충제; 제약상 허용되는 가용화제 (예를 들어, 시클로덱스트린 또는 계면활성제, 예컨대 플루로닉(Pluronic), 트윈(Tween) 또는 인지질); 제약상 허용되는 안정화제 또는 항산화제 (예컨대, 아스코르브산, 겐티스산 또는 파라-아미노벤조산)를 함유할 수 있다. 본 발명의 생체내 영상화제가 방사성제약 조성물로서 제공되는 경우에, 상기 생체내 영상화제의 제조 방법은 방사성제약 조성물을 수득하기 위해 필요한 단계, 예를 들어 유기 용매의 제거, 생체적합성 완충제 및 임의의 추가 성분의 첨가를 추가로 포함할 수 있다. 비경구 투여를 위해, 방사성제약 조성물이 멸균이고 비발열성임을 보장하기 위한 단계를 또한 수행할 필요가 있다.
사용 방법
추가 측면에서, 본 발명은
(i) 대상체에 본 발명의 생체내 영상화제를 투여하는 것;
(ii) 상기 대상체에서 상기 생체내 영상화제를 PBR에 결합시키는 것;
(iii) 상기 생체내 영상화제의 방사성동위원소에 의해 방출된 신호를 생체내 영상화 절차에 의해 검출하는 것;
(iv) 상기 신호의 위치 및/또는 양의 영상 표식을 생성하는 것; 및
(v) 상기 대상체에서 상기 생체내 영상화제에 의해 방출된 상기 신호와 직접적으로 관련되어 있는 PBR 발현의 분포 및 정도를 측정하는 것
을 포함하는, 상기 대상체에서 PBR 발현의 분포 및/또는 정도를 측정하는 생체내 영상화 방법을 제공한다.
본 발명의 생체내 영상화 방법에 있어서, 생체내 영상화제의 적합하고 바람직한 실시양태는 본 명세서에 앞서 정의된 바와 같다.
생체내 영상화제의 "투여"는 바람직하게는 비경구로, 및 가장 바람직하게는 정맥내로 수행된다. 정맥내 경로는 대상체의 체내를 통해, 따라서 또한 혈액뇌장벽 (BBB)을 가로질러 상기 대상체의 중추신경계 (CNS)에서 발현된 PBR과 접촉하게 되는, 생체내 영상화제를 전달하는 가장 효율적인 방식을 나타낸다. 더욱이, 정맥내 투여는 실질적인 물리적 개입 또는 실질적인 건강 위험성을 나타내지 않는다. 본 발명의 생체내 영상화제는 바람직하게는 본원에 정의된 바와 같은 본 발명의 제약 조성물로서 투여된다. 본 발명의 생체내 영상화 방법은 또한 본 발명의 생체내 영상화제가 사전 투여된 대상체에 대해 수행되는 상기 정의된 단계 (ii) 내지 (v)를 포함하는 것으로 이해될 수 있다.
투여 단계 이후 및 검출 단계 이전에, 생체내 영상화제를 PBR에 결합시킨다. 예를 들어, 대상체가 온전한 포유동물인 경우에, 생체내 영상화제는 포유동물의 체내를 통해 동적으로 이동하여, 체내 다양한 조직과 접촉할 것이다. 생체내 영상화제가 일단 PBR과 접촉하면, PBR이 있는 조직으로부터의 생체내 영상화제의 제거가 PBR이 없거나 더 적은 조직으로부터의 제거보다 더 오래 걸리도록 특이적 상호작용이 일어난다. PBR이 있는 조직에 결합한 생체내 영상화제 대 PBR이 없거나 더 적은 조직에 결합한 생체내 영상화제 사이의 비율의 결과로서, PBR에 특이적으로 결합한 생체내 영상화제의 검출이 가능해지는 특정 시점에 도달할 것이다. 이상적인 이러한 비율은 2:1 정도이다.
본 발명의 방법의 "검출" 단계는 상기 신호를 감지하는 검출기에 의한, 방사성동위원소에 의해 방출된 신호의 검출을 포함한다. 상기 검출 단계는 또한 신호 데이터의 포착으로서 이해될 수 있다. 단일-광자 방출 단층촬영 (SPECT) 및 양전자 방출 단층촬영 (PET)은 본 발명의 방법에서 사용하기에 가장 적합한 생체내 영상화 절차이다. PET는 본 발명의 방법에서 사용하기 위한 바람직한 생체내 영상화 절차이다.
본 발명의 방법의 "생성" 단계는 데이터세트를 얻기 위해 재구성 알고리즘을 포착된 신호 데이터에 적용하는 컴퓨터에 의해 수행된다. 이어서, 상기 데이터세트는 상기 방사성동위원소에 의해 방출된 신호의 위치 및/또는 양을 보여주는 영상을 생성하도록 조작된다. 생성된 영상을 평가함으로써 "측정" 단계가 수행될 수 있도록, 방출된 신호는 PBR의 발현과 직접적으로 관련되어 있다.
본 발명의 "대상체"는 임의의 인간 또는 동물 대상체일 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 대상체는 포유동물이다. 가장 바람직하게는, 상기 대상체는 온전한 포유동물 생체내이다. 특히 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 대상체는 인간이다. 생체내 영상화 방법은 건강한 대상체에서, 또는 PBR의 비정상적 발현과 관련된 병리 상태 (이하 "PBR 상태")에 걸린 것을 알고 있거나 또는 걸린 것으로 의심되는 대상체에서 PBR을 연구하는 데 이용할 수 있다. 바람직하게는, 상기 방법은 PBR 상태에 걸린 것을 알고 있거나 또는 걸린 것으로 의심되는 대상체의 생체내 영상화에 관한 것이고, 따라서 상기 상태의 진단 방법에 유용하다.
생체내 영상화가 유용할 이러한 PBR 상태의 예에는 다발성 경화증, 라스무센 뇌염, 뇌 혈관염, 포진 뇌염, AIDS-관련 치매, 파킨슨병, 피질기저핵 변성, 진행성 핵상 마비, 다계통 위축, 헌팅톤병, 근위축성 측삭 경화증, 알츠하이머병, 허혈성 졸중, 말초 신경 손상, 간질, 외상성 뇌 손상, 급성 스트레스, 만성 스트레스, 신경병증성 통증, 폐 염증, 만성 폐쇄성 폐 질환, 천식, 염증성 장 질환, 류마티스 관절염, 원발성 섬유근육통, 신경 손상, 아테롬성동맥경화증, 신장 염증, 허혈-재관류 손상 및 암, 특히 결장, 전립선 또는 유방의 암이 포함된다. 본 발명의 생체내 영상화제는 특히 그의 우수한 뇌 흡수율로 인해 CNS의 생체내 영상화에 적합화되어 있다.
대안적 실시양태에서, 본 발명의 생체내 영상화 방법은 상기 대상체에 대한 치료 요법의 과정 동안 반복적으로 수행될 수 있고, 상기 요법은 PBR 상태를 퇴치하는 약물의 투여를 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 생체내 영상화 방법은 PBR 상태를 퇴치하는 약물을 사용한 치료 전에, 치료 동안에, 및 치료 후에 수행될 수 있다. 상기 방식에서, 상기 치료의 효과는 시간 경과에 따라 모니터링될 수 있다. 상기 실시양태에 대하여 바람직하게는, 생체내 영상화 절차는 PET이다. PET는 탁월한 감도 및 분해능을 가지므로, 시간 경과에 따른 병소에서의 비교적 작은 변화라도 관찰될 수 있으며, 이는 치료 모니터링에 있어서 특히 유리하다.
추가의 측면에서, 본 발명은 PBR 상태의 진단 방법을 제공한다. 본 발명의 진단 방법은 상기 정의된 바와 같은 생체내 영상화 방법을, PBR 발현의 분포 및 정도를 특정 임상 양상에 기인하는 것으로 추정하는 추가 단계 (vi), 즉 연역적인 의학적 의사결정기와 함께 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 진단 방법에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 제공한다.
추가 측면에서, 본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 진단 방법에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 방사성제약 조성물의 제조에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 제공한다.
본 발명은 이제 일련의 비제한적 실시예에 의해 예시된다.
실시예의 간단한 설명
실시예 1은 전구체 화합물 5 및 영상화제 5의 합성을 기재한다.
실시예 2는 영상화제 5의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 3은 전구체 화합물 6 및 영상화제 6의 합성을 기재한다.
실시예 4는 영상화제 6의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 5는 전구체 화합물 7 및 영상화제 7의 합성을 기재한다.
실시예 6은 영상화제 7의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 7은 전구체 화합물 9 및 영상화제 9의 합성을 기재한다.
실시예 8은 영상화제 9의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 9는 전구체 화합물 10 및 영상화제 10의 합성을 기재한다.
실시예 10은 영상화제 10의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 11은 전구체 화합물 11 및 영상화제 11의 합성을 기재한다.
실시예 12는 영상화제 11의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 13은 전구체 화합물 5의 거울상이성질체 분리를 기재한다.
실시예 14는 비-방사성 영상화제 5의 거울상이성질체 분리를 기재한다.
실시예 15는 PBR에 대한 친화도를 시험하는 데 사용된 시험관내 효능 검정을 기재한다.
실시예 16은 생체내에서 본 발명의 영상화제의 성능을 검사하는 데 사용된 생물학적 분포 방법을 기재한다.
실시예 17은 이전의 테트라시클릭 인돌 영상화제의 비-방사성 유사체의 합성을 기재한다.
실시예 18은 이전의 테트라시클릭 인돌 영상화제의 합성을 기재한다.
실시예에서 사용된 약어 목록
aq 수성
DCM 디클로로메탄
DMAP 4-디메틸아미노피리딘
DMF 디메틸포름아미드
EDC 1-에틸-3-[3-디메틸아미노프로필]카르보디이미드 히드로클로라이드
EOS 합성의 끝
EtOAc 에틸 아세테이트
IPA 이소프로필 알콜
LC-MS 액체 크로마토그래피-질량 분광측정법
NMR 핵 자기 공명
OBn 벤질옥시
OMs 메실레이트
OTs 토실레이트
RT 실온
TLC 박층 크로마토그래피
Tol 톨루엔
실시예
실시예 1: 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바밀-5-메톡시-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일) 에틸 에스테르 (전구체 화합물 5) 및 9-(2-[18F]플루오로-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 5)의 합성
실시예 1(a): 벤질옥시 아세틸 클로라이드 (1)
디클로로메탄 (50 mL) 중 벤질옥시아세트산 (10.0 g, 60.0 mmol, 8.6 mL)에 옥살릴 클로라이드 (9.1 g, 72.0 mmol, 6.0 mL) 및 DMF (30.0 mg, 0.4 mmol, 32.0 ㎕)를 첨가하고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응의 진행에 따라 처음에는 급격한 기체 발생이 있었으나, 반응 완료시 기체 발생은 중지되었다. 디클로로메탄 용액을 진공하에 농축시켜, 검을 수득하였다. 상기 검을 추가의 옥살릴 클로라이드 (4.5 g, 35.7 mmol, 3.0 mL), 디클로로메탄 (50 mL) 및 1 방울의 DMF로 처리하였다. 급격한 기체 발생이 있었고, 반응물을 추가로 2 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시켜, 벤질옥시 아세틸 클로라이드 (1) 11.0 g (정량적)을 검으로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00015
실시예 1(b): 2-벤질옥시-N-(2-클로로-5-메톡시-페닐) 아세트아미드 (2)
디클로로메탄 (100 mL) 중 벤질옥시 아세틸 클로라이드 (1) (11.0 g, 60.0 mmol) 및 2-클로로-5-메톡시아닐린 히드로클로라이드 (11.7 g, 60.2 mmol)를 0℃에서 교반하고, 트리에틸아민 (13.0 g 126.0 mmol, 18.0 mL)을 15 분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 교반 반응물을 18 시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 다량의 트리에틸아민 히드로클로라이드가 침전되었다. 디클로로메탄 용액을 10％ 수성 탄산칼륨 (50 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 2-벤질옥시-N-(2-클로로-5-메톡시-페닐) 아세트아미드 (2) 18.9 g (정량적)을 검으로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00016
실시예 1(c): (2-벤질옥시-에틸)-(2-클로로-5-메톡시페닐) 아민 (3)
THF (100 mL) 중 2-벤질옥시-N-(2-클로로-5-메톡시-페닐) 아세트아미드 (2) (18.9 g, 62.0 mmol)를 교반하고, 수소화알루미늄리튬 (4.9 g, 130.0 mmol)을 15 분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 수소화알루미늄리튬을 처음 첨가하였을 때 급격한 수소 기체의 발생이 있었다. 이어서, 반응물을 4 시간 동안 환류하에 가열하고, 주말에 걸쳐 실온에서 방치하였다. 이어서, 교반 용액에 물 (50 mL)을 적가하여 반응물을 켄칭하였다. 격렬한 수소 발생이 있었고, 이는 반응 혼합물의 환류를 일으켰다. 이어서, 반응물을 진공하에 슬러리로 농축시켰다. 물 (200 mL) 및 에틸 아세테이트 (200 mL)를 첨가하고, 혼합물을 격렬하게 진탕시켰다. 이어서, 반응물을 셀라이트를 통해 여과하여 침전된 수산화알루미늄을 제거하고, 에틸 아세테이트 용액을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, (2-벤질옥시-에틸)-(2-클로로-5-메톡시페닐) 아민 (3) 18.4 g (정량적)을 검으로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00017
실시예 1(d): 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (4)
에틸 2-옥시시클로헥산카르복실레이트 (30 g, 176 mmol, 28 mL)를 디에틸 에테르 (30 mL)에 용해시키고, 질소하에 0℃로 냉각시켰다. 브롬 (28 g, 176 mmol, 9.0 mL)을 15 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 90 분에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 혼합물을 빙냉 포화 수성 탄산칼륨 (250 mL)에 서서히 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 농축시키고, 진공 라인 상에서 18 시간 동안 건조시켜, 3-브로모-2-히드록시-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (4) 41.4 g (94％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00018
실시예 1(e): 3[(2-벤질옥시-에틸)-(2-클로로-5-메톡시-페닐)-아미노]-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (5)
(2-벤질옥시-에틸)-(2-클로로-5-메톡시페닐) 아민 (3) (10.0 g, 34.2 mmol)을 -40℃에서 질소하에 무수 THF (100 mL) 중에서 교반하고, 칼륨 비스(트리메틸실릴) 아미드 (톨루엔 중 0.5 M 용액 143.0 mL, 72.0 mmol)를 30 분에 걸쳐 첨가하였다. 이어서, 무수 THF (10 mL) 중 3-브로모-2-히드록시시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (4) (8.5 g, 34.2 mmol)를 첨가하고, 1.5 시간의 기간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 아세트산 (10.0 g, 166 mmol, 10.0 mL)을 첨가하고, 진공하에 농축시켜 THF를 제거하였다. 에틸 아세테이트 (200 mL) 및 10％ 수성 탄산칼륨 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 격렬하게 진탕시켰다. 에틸 아세테이트 용액을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 3[(2-벤질옥시-에틸)-(2-클로로-5-메톡시-페닐)-아미노]-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (5) 16.5 g (정량적)을 검으로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다. 조 반응 혼합물의 HPLC (제미니(Gemini) 150 x 4.6 mm, 20 분에 걸쳐 50→95％ 메탄올/물): 18.9 분 (38％), 19.2 분 (25％), 23.1 분 (28％). 반응물의 한 성분을 13C NMR (75 MHz, CDCl3)로 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00019
실시예 1(f): 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (6)
염화아연 (7.1 g, 52.0 mmol)을 질소하에 무수 디에틸 에테르 (150 mL) 중 3[(2-벤질옥시-에틸)-(2-클로로-5-메톡시-페닐)-아미노]-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (5) (8.0 g, 17.0 mmol)에 첨가하고, 환류하에 5.5 시간 동안 가열하였다. 반응물의 환류에 따라 점성의 농밀한 갈색 오일이 반응물 중에 형성되었다. 이어서, 반응물을 냉각시키고, 상청액 디에틸 에테르를 경사분리하고, 에틸 아세테이트 (100 mL)를 첨가하고, 2 N HCl (50 mL) 및 10％ 수성 탄산칼륨 (50 mL)으로 세척하였다. 디에틸 에테르 층을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 오일 (2.0 g)을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A): 에틸 아세테이트 (B) (10→40％ (B), 340 g, 22 CV, 150 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (6) 1.8 g을 수득하였다. 점성의 농밀한 갈색 층을 에틸 아세테이트 (100 mL) 및 2 N HCl (50 mL)로 처리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 분리하고, 10％ 수성 탄산칼륨 (50 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 오일 (5.2 g)을 수득하였다. 디에틸 에테르 (100 mL) 및 무수 염화아연 (7.0 g)을 첨가하였다. 혼합물을 환류하에 추가로 5 일 동안 가열하였다. 암색 검으로부터 경사분리한 에테르 층을 2 N HCl (50 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 검 (2.8 g)을 수득하였다. 상기 검을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A): 에틸 아세테이트 (B) (5→35％ (B), 340 g, 150 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (6) 2.1 g을 수득하였다. 수득한 전체 물질은 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (6) 4.1 g (50％)이었다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00020
실시예 1(g): 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (7)
에탄올 (50 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (6) (2.0 g, 4.1 mmol)에 수산화나트륨 (1.1 g, 27.1 mmol) 및 물 (5 mL)을 첨가하고, 80℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 이어서, 에탄올을 진공하에 증발시켜 제거하고, 잔류물을 디에틸 에테르 (50 mL) 및 물 (50 mL) 사이에 분배하였다. 디에틸 에테르 층을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 검 (71.0 mg)을 수득하였다. 2 N HCl (20 mL)을 사용하여 수성 층을 pH 1로 산성화시키고, 디클로로메탄 (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 디클로로메탄 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (7) 1.6 g (87％)을 발포체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00021
실시예 1(h): 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (8)
9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (7) (1.5 g, 3.7 mmol)을 디클로로메탄 (50 mL)에 용해시키고, 옥살릴 클로라이드 (700 mg, 5.5 mmol, 470 ㎕) 및 DMF (1 방울)를 첨가하고, 반응물을 20℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응의 진행에 따라 약 30 분 동안 적당한 기체 발생이 있었다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시켜, 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (8)을 검으로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00022
실시예 1(i): 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (9)
이어서, 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (8) (1.6 g, 3.7 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시키고, 교반하고, 디에틸아민 (810 mg, 11.0 mmol, 1.1 mL)을 적가하였다. 반응물을 18 시간의 기간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 이어서, 반응 혼합물을 10％ 수성 탄산칼륨 (50 mL)으로 세척하고, 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 검으로 농축시켰다. 조 물질을 디에틸 에테르로부터 결정화시켜, 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (9) 1.2 g (71％)을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00023
실시예 1(j): 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아민 (10)
메탄올 (100 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-8-클로로-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (9) (1.0 g, 2.1 mmol)를 차콜 상 10％ 팔라듐 (1.0 g), 트리에틸아민 (2.9 mg, 2.9 mmol, 4 ㎕)과 함께 55℃에서 18 시간 동안 수소 기체 분위기하에 진탕시켰다. 이어서, 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 여과물을 진공하에 농축시켜, 검 (908 mg)을 수득하였다. 이어서, 검을 디클로로메탄 (100 mL)에 녹이고, 5％ 수성 탄산칼륨 용액 (50 mL)으로 세척하였다. 이어서, 디클로로메탄 용액을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 검을 수득하였다. 이어서, 검을 디에틸 에테르 (50 mL)로부터 결정화시키고, 여과에 의해 결정을 수집하여, 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아민 (10) 523 mg (57％)을 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00024
실시예 1(k): 9-(2-히드록시에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아민 (11)
메탄올 (50 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아민 (10) (1.0 g, 2.1 mmol)을 차콜 상 10％ 팔라듐 (300 mg) 및 과량의 수소 기체와 함께 55℃에서 18 시간 동안 진탕시켰다. 이어서, 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 여과물을 진공하에 농축시켜, 9-(2-히드록시에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아민 (11) 578 mg (100％)을 발포체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00025
실시예 1(l): 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바밀-5-메톡시-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일) 에틸 에스테르 (전구체 화합물 5)
디클로로메탄 (30 mL) 중 9-(2-히드록시에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아민 (11) (478 mg, 1.4 mmol)을 0℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (477 mg, 4.2 mmol, 324 ㎕) 및 트리에틸아민 (420 mg, 4.2 mmol, 578 ㎕)을 첨가하고, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응물을 5％ 수성 탄산칼륨 용액으로 세척하였다. 층을 분리하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 검 (696 mg)을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A): 에틸 아세테이트 (B) (75→100％ B, 22 CV, 120 g, 85 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바밀-5-메톡시-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일) 에틸 에스테르 (전구체 화합물 5)를 검으로서 수득하였고, 이를 디에틸 에테르로부터 결정화시켜, 무색 고체 346 mg (59％)을 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00026
실시예 1(m): 9-(2-[18F]플루오로-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 5)
[18F]플루오라이드를 GE 페트레이스(PETrace) 사이클로트론 상에서 GE 헬스케어(GE Healthcare)로부터 공급받았다. 크립토픽스(Kryptofix) 2.2.2 (2 mg, 5 μmol), 중탄산칼륨 (0.1 mol dm-3, 0.1 mL, 5 mg, 5 μmol) 및 아세토니트릴 (0.5 mL)을 COC 반응 용기에서 [18F]F- /H2O (약 400 MBq, 0.1-0.3 mL)에 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 질소 스트림하에 20 내지 25 분 동안 가열하여 건조시켰다. 건조시킨 후, 냉각없이 아세토니트릴 (1 mL) 중 전구체 화합물 5 (0.5-1 mg, 1.2-2.4 μmol)를 COC 반응 용기에 첨가하고, 100℃에서 10 분 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 제거하고, COC 반응 용기를 물 (1.5 mL)로 세정하고, 주요 조 반응물에 첨가하였다.
이후에, 조 생성물을 다음 조건의 반-정제용 HPLC에 적용하였다: 하이크롬(HICHROM) ACE 5 C18 칼럼 (100 x 10 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 3 mL/분; 0-1 분 40％ B; 1-20 분 40→95％ B; 파장 254 nm; tR 영상화제 5 16 분. 물을 사용하여 영상화제 5 HPLC 정제-피크를 10 mL의 부피로 희석하고, tC18 셉-팩(Sep-Pak) (라이트) 카트리지 상에 흡착시켰다. 카트리지를 물 (2 mL)로 세척하고, 무수 에탄올 (0.5 mL)에 이어서 둘베코 인산염 완충 염수 (4.5 mL)로 용리하였다. 방사화학적 수율 30±7％ (n=4) (자연 붕괴 보정 없이), 시간 90-120 분, 방사화학적 순도 ≥99％.
분석용-HPLC: 페노메넥스 루나(Phenomenex Luna) C18 칼럼 (150 x 4.6 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 1 mL/분; 0-1 분 40％ B; 1-20 분 40→95％ B; 파장 230 nm; tR 영상화제 5 16 분. 도 1에 영상화제 5 및 비-방사성 영상화제 5의 공-용리를 나타내었다.
실시예 2: 9-(2-플루오로-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 5)의 합성
실시예 2(a): 플루오로에틸 토실레이트 (12)
2-플루오로에탄올 (640 mg, 10 mmol, 0.6 mL)을 질소하에 피리딘 (10 mL)에 용해시켰다. 용액을 0℃에서 교반하고, 온도를 5℃ 미만으로 유지하면서 토실 클로라이드 (4.2 g, 21.8 mmol)를 30 분의 기간에 걸쳐 용액에 일부분씩 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 얼음에 이어서 물 (20 mL)을 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하였다. 수성 층이 산성이 될 때까지, 1 N HCl 용액으로 세척하여 잉여 피리딘을 제거하였다. 잉여 토실 클로라이드를 1 M 수성 탄산나트륨으로 세척하여 제거하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 플루오로에틸 토실레이트 (12) 2.1 g (98％)을 무색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00027
실시예 2(b): 2-클로로-5-메톡시-페닐) (2-플루오로에틸) 아민 (13)
2-클로로-5-메톡시아닐린 히드로클로라이드 (5.0 g, 26.0 mmol)를 DMF (50 mL)에 용해시키고, 수소화나트륨 (2.3 g, 오일 중 60％, 57.0 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30 분 동안 질소하에 교반하였다. DMF (5 mL) 중 플루오로에틸 토실레이트 (12) (6.7 g, 31.0 mmol)를 적가하고, 반응물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 100℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (100 mL)에 용해시키고, 물 (2 x 100 mL)로 세척하였다. 유기물을 수집하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 갈색 오일을 수득하였고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A): 에틸 아세테이트 (B) (5 → 30％ (B), 330 g, 18.1 CV, 120 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 2-클로로-5-메톡시-페닐) (2-플루오로에틸) 아민 (13) 1.3 g (25％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00028
실시예 2(c): 3-[(2-클로로-5-메톡시-페닐)-(2-플루오로에틸) 아미노]-2-히드록시-시클로헥실-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (14)
THF (170 mL) 중 2-클로로-5-메톡시-페닐) (2-플루오로에틸) 아민 (13) (6.1 g, 30.0 mmol)의 용액을 -40℃로 냉각시켰다. 칼륨 비스(트리메틸실릴)아미드 (톨루엔 중 0.5 M 용액 126.0 mL, 63.0 mmol)를 적가하고, 반응물을 -40℃에서 30 분 동안 교반하였다. THF (30 mL) 중 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (4; 실시예 1(d)에 따라 제조) (7.4 g, 30.0 mmol)를 -40℃에서 적가하였다. 냉각 조를 제거하고, 반응물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응물을 염수 (300 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 400 mL)로 추출하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 3-[(2-클로로-5-메톡시-페닐)-(2-플루오로에틸) 아미노]-2-히드록시-시클로헥실-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (14) 12.0 g (정량적)을 갈색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다. 이성질체의 혼합물로서의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00029
실시예 2(d) 8-클로로-9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (15)
8-클로로-9-(2-플루오로-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (15)의 합성을 먼저 WO 2003/014082에 기재되어 있는 조건을 이용하여 시도하였다. 무수 THF (20 mL) 중 2-클로로-5-메톡시-페닐) (2-플루오로에틸) 아민 (13; 실시예 2(b)에 따라 제조) (600 mg, 3.8 mmol)의 용액을 빙조에서 냉각시키고, 칼륨 비스(트리메틸 실릴) 아미드 (톨루엔 중 0.5 M 용액 16 mL, 8.0 mmol)로 처리하였다. 30 분 후, THF (4 mL) 중 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (4; 실시예 1(d)에 따라 제조) (1.04 g, 4.2 mmol)를 첨가하고, 반응물을 2 시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에테르로 2회 추출하였다. 추출물을 물, 염수로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (2.5→50％ B, 50 g, 25 CV, 40 mL/분)로 용리하여 정제하였다. 주요 스팟은 3가지 화합물의 혼합물이었다. 상기 혼합물을 톨루엔 (20 mL) 중에서 무수 염화아연 (1.7 g, 12.6 mmol)과 함께 밤새 환류시켰다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 1 N HCL (25 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL) 사이에 분배하고, 이어서 에틸 아세테이트로 1회 더 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 갈색 오일을 수득하였다. 1H NMR에서 이는 몇몇 화합물의 혼합물인 것으로 나타났다. 용매의 범위 내에서 실리카 상 TLC로는 상기 혼합물을 분리된 스팟으로 분리할 수 없었다. 정격의 샘플을 사용한 혼합물의 1H NMR의 비교에서 혼합물이 추정치 25％의 8-클로로-9-(2-플루오로-에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (15)를 함유하는 것으로 나타났다.
이어서, 변형 방법을 수행하였다. 3-[(2-클로로-5-메톡시-페닐)-(2-플루오로에틸) 아미노]-2-히드록시-시클로헥실-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (14) (12.2 g, 30.0 mmol)를 디에틸 에테르 (250 mL)에 용해시키고, 염화아연 (16.4 g, 120.0 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 환류하에 16 시간 동안 가열하였다. 에틸 아세테이트 (500 mL)를 첨가하여 모든 물질을 용해시키고, 2 N HCl (200 mL), 물 (200 mL), 10％ 수성 탄산칼륨 (200 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A): 에틸 아세테이트 (B) (5→20％ B, 12 CV, 10 g, 100 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 8-클로로-9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (15) 5.3 g (2 단계에 걸쳐 50％)을 황색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00030
실시예 2(e): 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (16)
8-클로로-9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (15) (5.3 g, 15.0 mmol)를 메탄올 (180 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (1.8 g, 18.0 mmol, 2.5 mL) 및 10％ Pd/C (메탄올 (20 mL) 중 2 g)를 첨가하였다. 혼합물을 파르(Parr) 수소화기에 넣고, 18 시간 동안 수소 분위기하에 진탕시켰다. 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (300 mL)에 용해시키고, 10％ 수성 탄산칼륨 (200 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (16) 4.2 g (88％)을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00031
HPLC (제미니 150 x 4.6 mm, 20 분에 걸쳐 50→95％ 메탄올/물) 13.6 분 (94％).
실시예 2(f): 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (17)
8-클로로-9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (16) (380 mg, 1.2 mmol)를 에탄올 (4 mL)에 용해시켰다. 물 6 mL에 용해된 수산화나트륨 (580 mg, 14.5 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류하에 밤새 가열하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 조 혼합물을 물로 희석하고, 산성이 될 때까지 2 N HCl을 사용하여 산성화시키고, 디클로로메탄으로 세척하였다. 유기물을 합하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (17) 347 mg (정량적)을 회백색 고체로서 수득하였고, 이를 다음 단계에에 그대로 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz; CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00032
실시예 2(g): 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (18)
무수 디클로로메탄 (2 mL) 중 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (17) (347 mg, 1.2 mmol)의 용액을 질소하에 교반하였다. 옥살릴 클로라이드 (453 mg, 3.6 mmol, 300 ㎕)에 이어서 DMF 한 방울을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소하에 2 시간 동안 교반한 후, 진공하에 증발시켜, 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 371 mg (정량적)을 검으로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00033
실시예 2(h): 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸 아미드 (비-방사성 영상화제 5)
9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (18) (371 mg, 1.2 mmol)를 디클로로메탄 (2 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 디에틸아민 (177 mg, 2.4 mmol, 250 ㎕)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 10％ 수성 탄산칼륨 (2 mL)으로 켄칭하였다. 상 분리기를 통해 디클로로메탄 층을 수집한 후, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A): 에틸 아세테이트 (B) (50→100％ (B), 50 g, 35.2 CV, 40 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 연황색 고체를 수득하였다. 이어서, 고체를 최소량의 디에틸 에테르로 연화처리하여, 9-(2-플루오로에틸)-5-메톡시-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸 아미드 (비-방사성 영상화제 5) 240 mg (58％)을 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00034
실시예 3: 메탄술폰산 2-[4-(피페리딘-1-카르보닐)-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일]-에틸 에스테르 (전구체 화합물 6) 및 [9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (영상화제 6)의 합성
실시예 3(a): 2-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (19)
톨루엔 (100 mL) 중 에틸 2-옥시시클로헥산-카르복실레이트 (5.3 g, 31 mmol, 5.0 mL), DMAP (1.05 g, 9.4 mmol) 및 피페리딘 (5.3 g, 63 mmol, 6.2 mL)을 환류하에 4 일 동안 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 반응물을 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (20 → 80％ (B), 100 g, 8 CV, 85 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 2-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (19) 6.26 g (96％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00035
실시예 3(b): 2-브로모-6-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (20)
2-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (19) (4.0 g, 19 mmol)을 디에틸 에테르 (5 mL)에 용해시키고, N2 하에 0℃로 냉각시켰다. 브롬 (5.9 g, 19 mmol, 1.0 mL)을 15 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 90 분에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여, 2-브로모-6-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (20) 5.86 g (정량적)을 백색 고체로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00036
실시예 3(c): (2-벤질옥시-에틸)-페닐-아민 (21)
둥근 바닥 플라스크에서, 아닐린 (2.0 g, 21.5 mmol, 2.0 mL), 2,6-루티딘 (2.30 g, 21.5 mmol) 및 벤질 2-브로모에틸 에테르 (4.6 g, 21.5 mmol, 3.4 mL)를 DMF (10 mL) 중에서 합하고, 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 이어서 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석하였다. 이를 물 (3 x 20 mL)로 세척하고, 유기물을 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (0→50％ B, 100 g, 19.5 CV, 85 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, (2-벤질옥시-에틸)-페닐-아민 (21) 2.22 g (37％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00037
실시예 3(d): [9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (22)
2-브로모-6-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (20) (1.5 g, 5.2 mmol) 및 (2-벤질옥시-에틸)-페닐-아민 (21) (3.2 g, 10.4 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (5 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (2.13 g, 15.6 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (100 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (30 mL), 물 (2 x 30 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 30 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 SCX 카트리지에 이어서 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (30→100％ B, 12 g, 41 CV, 30 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, [9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (22) 600 mg (27％)을 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00038
실시예 3(e): [9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (23)
메탄올 (15 mL) 중 [9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (22) (600 mg, 1.4 mmol)의 용액에 메탄올 (10 mL) 중 Pd/C (200 mg)의 슬러리를 첨가하였다. 혼합물을 파르 수소화기에 넣고, 수소 분위기하에 24 시간 동안 진탕시켰다. 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 연화처리하여, [9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (23) 332 mg (71％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00039
실시예 3(f): 메탄술폰산 2-[4-(피페리딘-1-카르보닐)-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일]-에틸 에스테르 (전구체 화합물 6)
디클로로메탄 (15 mL) 중 [9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (23) (260 mg, 0.8 mmol)의 용액에 피리딘 (633 mg, 8.0 mmol, 0.65 mL)을 첨가하였다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (458 mg, 4.0 mmol, 0.31 mL)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 2 N HCl (2 x 50 mL) 및 물 (2 x 50 mL)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 디에틸 에테르로 연화처리하여, 메탄술폰산 2-[4-(피페리딘-1-카르보닐)-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일]-에틸 에스테르 (전구체 화합물 6) 263 mg (82％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00040
실시예 3(g): [9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (영상화제 6)
18F를 사용한 전구체 화합물 6의 표지화를 실시예 1(f)에 기재된 바와 같이 수행하였다.
반-정제용 HPLC: 하이크롬 ACE 5 C18 칼럼 (100 x 10 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 3 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 254 nm; tR 영상화제 6, 17 분.
분석용-HPLC: 페노메넥스 루나 C18 칼럼 (150 x 4.6 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 1 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 230 nm; tR 영상화제 6 16 분. 방사화학적 수율 23±2％ (n=3) (자연 붕괴 보정 없이), 시간 90-120 분, 방사화학적 순도 ≥99％. 도 2에 영상화제 6 및 비-방사성 영상화제 6의 공-용리를 나타내었다.
실시예 4: [9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (영상화제 6의 비-방사성 유사체)의 합성
실시예 4(a): (2-플루오로-에틸)-페닐-아민 (24)
둥근 바닥 플라스크에서, 아닐린 (0.5 g, 5.4 mmol), 2,6-루티딘 (0.58 g, 5.4 mmol) 및 2-플루오로에틸 토실레이트 (12; 실시예 2(a)에 따라 제조) (1.17 g, 5.4 mmol)를 DMF (2.5 mL) 중에서 합하고, 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 이어서 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석하였다. 이를 물 (3 x 20 mL)로 세척하고, 유기물을 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (100 g, 0→100％ B, 18 CV, 85 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, (2-플루오로-에틸)-페닐-아민 (24) 435 mg (60％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00041
실시예 4(b): [9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (비-방사성 영상화제 6)
2-브로모-6-(피페리딘-1-카르보닐)-시클로헥사논 (20; 실시예 3(b)에 따라 제조) (500 mg, 1.7 mmol) 및 (2-플루오로-에틸)-페닐-아민 (24) (890 mg, 3.5 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (2 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (682 mg, 5 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (20 mL), 물 (2 x 20 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 20 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 디에틸 에테르로 연화처리하여, [9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-일]-피페리딘-1-일-메타논 (비-방사성 영상화제 6) 151 mg (27％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00042
실시예 5: 메탄술폰산 2-[4-(벤질-메틸-카르바모일)-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일]-에틸 에스테르 (전구체 화합물 7) 및 9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (영상화제 7)의 합성
실시예 5(a): 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (25)
(2-벤질옥시-에틸)-페닐-아민 (21; 실시예 3(c)에 따라 제조) (8.0 g, 26 mmol) 및 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (4; 실시예 1(d)에 따라 제조) (3.2 g, 13 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (30 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (10.6 g, 78 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시킨 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (300 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (100 mL), 물 (2 x 100 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 100 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (2.5→40％ B, 17 CV, 330 g, 100 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (25) 3.49 g (72％)을 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00043
실시예 5(b): 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (26)
9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (25) (35 g, 9.3 mmol)를 에탄올 (9 mL)에 용해시키고, 이어서 물 (15 mL) 중 NaOH (1.56 g)를 첨가하였다. 반응물을 환류하에 2 시간 동안 가열하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 물로 희석하고, 디클로로메탄 (2 x 150 mL)으로 세척하였다. 수성 층을 2 N HCl (150 mL)에 적가하고, 이어서 디클로로메탄 (3 x 150 mL)으로 추출하였다. 유기물을 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (26) 2.48 g (92％)을 황색 고체로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00044
실시예 5(c): 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (27)
9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (26) (600 mg, 1.7 mmol)을 질소하에 무수 DCM (8 mL)에 용해시키고, 옥살릴 클로라이드 (393 mg, 3.1 mmol, 0.26 mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였고, 기체가 격렬하게 발생하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 이어서 디클로로메탄 (8 mL)에 재용해시키고, 0℃로 냉각시키고, N-벤질메틸아민 (412 mg, 3.4 mmol, 0.44 mL)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 밤새 가온하였다. 반응물을 5％ 수성 탄산칼륨 용액으로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 갈색 오일을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (30％ B, 10 g)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (27) 246 mg (64％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00045
실시예 5(d): 9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (28)
메탄올 (15 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (27) (246 mg, 0.5 mmol)의 용액에 메탄올 (10 mL) 중 Pd/C (200 mg)의 슬러리를 첨가하였다. 혼합물을 파르 수소화기에 넣고, 수소 분위기하에 24 시간 동안 진탕시켰다. 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (28) 36 mg (20％)을 녹색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 1H NMR (CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00046
실시예 5(e) 메탄술폰산 2-[4-(벤질-메틸-카르바모일)-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일]-에틸 에스테르 (전구체 화합물 7)
디클로로메탄 (2 mL) 중 9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (28) (36 mg, 0.1 mmol)의 용액에 피리딘 (7.91 g, 1.0 mmol, 8.1 mL)을 첨가하였다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (57 mg, 0.5 mmol, 0.04 mL)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 2 N HCl (2 x 10 mL) 및 물 (2 x 10 mL)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (20→80％ B, 4 g, 45 CV, 18 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 메탄술폰산 2-[4-(벤질-메틸-카르바모일)-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일]-에틸 에스테르 (전구체 화합물 7) 14 mg (32％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00047
실시예 5(f): 9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (영상화제 7)
18F를 사용한 전구체 화합물 7의 표지화를 실시예 1(f)에 기재된 바와 같이 수행하였다. 반-정제용 HPLC: 하이크롬 ACE 5 C18 칼럼 (100 x 10 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 3 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 254 nm; tR 영상화제 7, 17 분.
분석용-HPLC: 페노메넥스 루나 C18 칼럼 (150 x 4.6 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 1 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 230 nm; tR 영상화제 7 16 분. 방사화학적 수율 23±2％ (n=3) (자연 붕괴 보정 없이), 시간 90-120 분, 방사화학적 순도 ≥99％. 도 3에 영상화제 7 및 비-방사성 영상화제 7의 공-용리를 나타내었다.
실시예 6: 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (비-방사성 영상화제 7)
실시예 6(a): 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (29)
에틸 2-옥시시클로헥산카르복실레이트 (5.0 g, 29 mmol, 4.7 mL)를 디에틸 에테르 (5 mL)에 용해시키고, N2 하에 0℃로 냉각시켰다. 브롬 (4.6 g, 29 mmol, 4.2 mL)을 15 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 90 분에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 혼합물을 빙냉 포화 수성 탄산나트륨 용액 (40 mL)에 서서히 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (29) 5.96 g (81％)을 연황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00048
실시예 6(b) 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (30)
(2-플루오로-에틸)-페닐-아민 (24; 실시예 4(a)에 따라 제조) (560 mg, 4.0 mmol) 및 3-브로모-2-히드록시-시클로헥스-1-엔 카르복실산 에틸 에스테르 (29) (500 mg, 2.0 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (4 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (820 mg, 6 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시킨 후, 진공하에 농축시켰다. 생성물을 에틸 아세테이트/에테르 (30 mL/150 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (40 mL), 물 (2 x 100 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 100 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 농축시켜, 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (30) 447 mg (91％)을 황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00049
실시예 6(c): 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (31)
9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (30) (380 mg, 1.3 mmol)를 에탄올 (3 mL)에 용해시키고, 이어서 물 (5 mL) 중 NaOH (520 mg)를 첨가하였다. 반응물을 환류하에 2 시간 동안 가열하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 물로 희석하고, 디클로로메탄 (2 x 50 mL)으로 세척하였다. 수성 층을 2 N HCl (50 mL)에 적가하고, 이어서 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기물을 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (31) 130 mg (37％)을 황색 고체로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00050
실시예 6(d): 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (32)
무수 디클로로메탄 (6 mL) 중 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 (31) (0.5 g, 1.91 mmol)을 실온에서 질소 분위기하에 옥살릴 클로라이드 (490 mg, 3.8 mmol, 0.34 mL) 및 한 방울의 DMF와 함께 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축시켜, 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (32) 545 mg (정량적)을 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00051
실시예 6(e) 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (비-방사성 영상화제 7)
9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르보닐 클로라이드 (32) (110 mg, 0.4 mmol)를 디클로로메탄 (1 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 이어서, N-벤질메틸아민 (92 mg, 0.8 mmol, 98 ㎕)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 10％ 수성 탄산칼륨 용액 (2 mL)으로 켄칭하였다. 상 분리기를 통해 디클로로메탄 층을 수집한 후, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (20→100％ B, 12 g, 30 CV, 30 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 벤질-메틸-아미드 (비-방사성 영상화제 7) 39 mg (28％)을 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00052
실시예 7: 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-6-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 9) 및 6-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 9)의 합성
실시예 7(a): 2-벤질옥시-N-(4-플루오로-페닐)-아세트아미드 (33)
DCM (52 mL) 중 벤질옥시아세트산 (4.6 g, 28.0 mmol, 4.0 mL)의 용액에 옥살릴 클로라이드 (7.7 g, 61 mmol, 5.3 mL) 및 한 방울의 DMF를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 잉여 옥살릴 클로라이드를 진공하에 제거하여, 벤질옥시-아세틸 클로라이드를 수득하였다. 조 아실 클로라이드를 DCM (100 mL)으로 희석하고, 트리에틸아민 (5.3 mL, 41.6 mmol, 4.2 g)에 이어서 4-플루오로아닐린 (3.5 g, 32 mmol, 3.0 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 반응물을 1 M 수성 HCl (100 mL)로 켄칭하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 2-벤질옥시-N-(4-플루오로-페닐)-아세트아미드 (33) 7.1 g (95％)을 황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00053
실시예 7(b): (2-벤질옥시-에틸)-(4-플루오로-페닐)-아민 (34)
무수 디에틸 에테르 (100 mL) 중 LAH (1.25 g, 27 mmol)의 현탁액에 무수 디에틸 에테르 (100 mL) 중 2-벤질옥시-N-(4-플루오로-페닐)-아세트아미드 (33) (6.9 g, 27 mmol)의 용액을 적가하였다. 환류가 유지되도록 하면서 첨가하였다. 일단 첨가가 완료되면, 반응 혼합물을 4 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 빙수에 붓고, DCM을 첨가하였다. 알루미늄 염을 분해하기 위하여, 강염기의 pH에 도달할 때까지 2 M 수성 수산화나트륨 용액을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 DCM으로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (5→50％ B, 100 g, 12 CV, 60 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, (2-벤질옥시-에틸)-(4-플루오로-페닐)-아민 (34) 5.5 g (84％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00054
실시예 7(c): 3-브로모-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (35)
에틸 2-시클로헥손-카르복실레이트 (7.50 mL, 47.0 mmol), DMAP (1.72 g, 14.1 mmol) 및 디에틸아민 (9.77 mL, 94.0 mmol)을 톨루엔 (100 mL) 중에서 환류하에 72 시간 동안 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 톨루엔을 감압하에 제거하였다. 조 오일을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (1:1, 100 g, SiO2)로 용리하여 정제함으로써, 2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아민 6.8 g (73％)을 오렌지색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00055
2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아민 (3.56 mL, 19.3 mmol)을 디에틸 에테르 (5 mL)에 용해시키고, N2 하에 교반하면서 0℃로 냉각시켰다. 브롬 (0.99 mL, 19.3 mmol)을 15 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 3 시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 반응물로부터 고체가 침전되었다. 이를 여과에 의해 수집하고, 에테르로 세척하여, 3-브로모-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (35) 5.85 g (109％)을 연황색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00056
실시예 7(d): 9-(2-벤질옥시-에틸)-6-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (36)
2-벤질옥시-N-(4-플루오로-페닐)-아세트아미드 (33) (5.3 g, 22 mmol) 및 3-브로모-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (35) (3.0 g, 13 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (30 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (9.0 g, 66 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (300 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (100 mL), 물 (2 x 100 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 100 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (10→50％ B, 100 g)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-6-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (36) 196 mg (11％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00057
실시예 7(d): 6-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (37)
메탄올 (40 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-6-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (36) (600 mg, 1.4 mmol)의 용액에 메탄올 (5 mL) 중 Pd/C (100 mg)의 슬러리를 첨가하였다. 혼합물을 파르 수소화기에 넣고, 수소 분위기하에 24 시간 동안 진탕시켰다. 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 진공하에 농축시켜, 6-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (37) 460 mg (80％)을 황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, MeOD-d3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00058
실시예 7(e) 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-6-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 9)
디클로로메탄 (20 mL) 중 6-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (37) (460 mg, 1.4 mmol)의 용액에 피리딘 (1.11 g, 14.0 mmol, 1.1 mL)을 첨가하였다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (722 mg, 6.3 mmol, 0.5 mL)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 2 N HCl (2 x 30 mL) 및 물 (2 x 30 mL)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (0→100％ (B), 10 g, 45 CV, 30 mL/분)로 용리하여 정제한 후, 디에틸 에테르로 연화처리하여, 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-6-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 9) 166 mg (30％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00059
실시예 7(f): 6-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 9)
18F를 사용한 전구체 화합물 9의 표지화를 실시예 1(f)에 기재된 바와 같이 수행하였다.
반-정제용 HPLC: 하이크롬 ACE 5 C18 칼럼 (100 x 10 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 3 mL/분; 0-1 분 40％ B; 1-20 분 40→95％ B; 파장 254 nm; tR 영상화제 9 15 분.
분석용-HPLC: 페노메넥스 루나 C18 칼럼 (150 x 4.6 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 1 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 230 nm; tR 영상화제 9 14 분. 방사화학적 수율 26±8％ (n=4) (자연 붕괴 보정 없이), 시간 90-120 분, 방사화학적 순도 ≥99％. 도 4에 영상화제 9 및 비-방사성 영상화제 9의 공-용리를 나타내었다.
실시예 8: 6-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 9)의 합성
실시예 8(a): (2-플루오로-에틸)-(4-플루오로-페닐)-아민 (38)
둥근 바닥 플라스크에서, 4-플루오로아닐린 (1.3 g, 11.6 mmol, 1.6 mL), 2,6-루티딘 (1.24 g, 11.6 mmol) 및 2-플루오로에틸 토실레이트 (12; 실시예 2(a)에 따라 제조) (2.5 g, 11.6 mmol)를 DMF (5 mL) 중에서 합하고, 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 이어서 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하였다. 이를 물 (3 x 40 mL)로 세척하고, 유기물을 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (10％ B, 100 g, 12 CV, 60 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, (2-플루오로-에틸)-(4-플루오로-페닐)-아민 (38) 383 mg (20％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00060
실시예 8(b): 6-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 9)
3-브로모-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (35; 실시예 7(c)에 따라 제조) (336 mg, 1.2 mmol) 및 (2-플루오로-에틸)-(4-플루오로-페닐)-아민 (38) (383 mg, 2.4 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (2 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (491 mg, 3.6 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (20 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (10 mL), 물 (2 x 10 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 5 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 디에틸 에테르로 연화처리하여, 6-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 9) 40 mg (10％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00061
실시예 9: 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-5-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 10) 및 5-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 10)의 합성
실시예 9(a): 2-벤질옥시-N-(3-플루오로-페닐)-아세트아미드 (39)
DCM (52 mL) 중 벤질옥시아세트산 (4.65 g, 28 mmol, 4.0 mL)의 용액에 옥살릴 클로라이드 (7.7 g, 61 mmol, 5.3 mL) 및 한 방울의 DMF를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 잉여 옥살릴 클로라이드를 진공하에 제거하고, 조 아실 클로라이드를 DCM (100 mL)으로 희석하고, 트리에틸아민 (5.3 mL, 41.6 mmol, 4.2 g)에 이어서 3-플루오로아닐린 (3.5 g, 32 mmol, 3.0 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 반응물을 1 M 수성 HCl (100 mL)로 켄칭하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 2-벤질옥시-N-(3-플루오로-페닐)-아세트아미드 (39) 7.10 g (95％)을 황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00062
실시예 9(b): (2-벤질옥시-에틸)-(3-플루오로-페닐)-아민 (40)
무수 디에틸 에테르 (100 mL) 중 LAH (1.25 g, 27 mmol)의 현탁액에 무수 디에틸 에테르 (100 mL) 중 2-벤질옥시-N-(3-플루오로-페닐)-아세트아미드 (39) (7.0 g, 27 mmol)의 용액을 적가하였다. 환류가 유지되도록 하면서 첨가하였다. 일단 첨가가 완료되면, 반응 혼합물을 4 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 빙수에 붓고, DCM을 첨가하였다. 알루미늄 염을 파괴하기 위하여, 강염기의 pH에 도달할 때까지 2 M 수성 수산화나트륨 용액을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 DCM으로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (5→50％ B, 100 g, 12 CV, 60 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, (2-벤질옥시-에틸)-(3-플루오로-페닐)-아민 (40) 4.1 g (84％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00063
실시예 9(c): 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (41)
3-브로모-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (35; 실시예 7(c)에 따라 제조) (2.3 g, 10 mmol) 및 (2-벤질옥시-에틸)-(3-플루오로-페닐)-아민 (40) (4.1 g, 17 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (10 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (4.09 g, 30 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (200 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (50 mL), 물 (2 x 50 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 50 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (5→100％ B, 100 g, 28 CV, 60 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (41) 1.3 g (30％)을 이성질체 9-(2-벤질옥시-에틸)-7-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드와 함께 혼합물로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (41)의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00064
9-(2-벤질옥시-에틸)-7-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00065
실시예 9(d): 5-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (42)
메탄올 (75 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-5-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (41) 및 9-(2-벤질옥시-에틸)-7-플루오로-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (1.3 g, 3.0 mmol)의 혼합물의 용액에 메탄올 (10 mL) 중 Pd/C (200 mg)의 슬러리를 첨가하였다. 혼합물을 파르 수소화기에 넣고, 수소 분위기하에 24 시간 동안 진탕시켰다. 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 진공하에 농축시켜, 5-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (42) 및 7-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드의 혼합물 743 mg (80％)을 황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 5-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (55)의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00066
7-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00067
실시예 9(e): 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-5-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 10)
디클로로메탄 (30 mL) 중 5-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (42) 및 7-플루오로-9-(2-히드록시-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (743 mg, 2.2 mmol)의 혼합물의 용액에 피리딘 (1.74 g, 22.0 mmol, 1.8 mL)을 첨가하였다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (1.01 g, 8.8 mmol, 0.7 mL)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 2 N HCl (2 x 50 mL) 및 물 (2 x 50 mL)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 반 정제용 HPLC에 의해 물 (A) 및 메탄올 (B) (제미니 5u, C18, 110A, 150 x 21 mm, 20 분에 걸쳐 50→95％ B, 21 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-7-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 10 mg (1％)을 백색 고체로서, 그리고 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-7-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 및 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-5-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 10)의 혼합물 30 mg (9％)을 백색 고체로서 수득하였다. 이들 정제 조건을 이용해서는, 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-5-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 10)를 단일 성분으로 단리할 수 없었다. 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-7-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00068
메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-5-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 10)의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00069
실시예 9(f): 5-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 10)
전구체 화합물 10 및 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-7-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르의 혼합물을 방사성표지화 반응에 사용하였다. 18F를 사용한 표지화를 실시예 1(f)에 기재된 바와 같이 수행하였다. 7-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 영상화제 10을 수득하였다.
반-정제용 HPLC: 하이크롬 ACE 5 C18 칼럼 (100 x 10 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 3 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 254 nm; tR 영상화제 10 15 분; tR 7-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 14 분.
분석용-HPLC: 페노메넥스 루나 C18 칼럼 (150 x 4.6 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 1 mL/분; 0-1 분 50％ B; 1-20 분 50-95％ B; 파장 230 nm; tR 영상화제 10 16 분; tR 7-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 14 분. 영상화제 10의 방사화학적 수율 8.7±1％ (n=3) (자연 붕괴 보정 없이), 시간 90-120 분, 방사화학적 순도 ≥99％. 도 5에 영상화제 10 (상단) 및 7-플루오로-9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (중간) 및 7-플루오로-9-(2-[19F]플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (하단)를 나타내었다.
실시예 10: 5-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 10)의 합성
실시예 10(a): (2-플루오로-에틸)-(3-플루오로-페닐)-아민 (43)
3-플루오로아닐린 (1.4 g, 11.6 mmol, 1.2 mL) 및 2-플루오로에틸 토실레이트 (12; 실시예 2(a)에 따라 제조) (2.5 g, 11.6 mmol) 및 루티딘 (1.24 g, 11.6 mmol)을 교반하고, 100℃에서 밤새 DMF (5 mL) 중에서 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 이어서 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하였다. 이를 물 (3 x 40 mL)로 세척하고, 유기물을 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (10％ B, 100 g, 12 CV, 60 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, (2-플루오로-에틸)-(3-플루오로-페닐)-아민 (43) 184 mg (10％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00070
실시예 10(b): 5-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 10)
3-브로모-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (35; 실시예 7(c)에 따라 제조) (161 mg, 0.6 mmol) 및 (2-플루오로-에틸)-(3-플루오로-페닐)-아민 (43) (184 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (1 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (245 mg, 1.8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (10 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (5 mL), 물 (2 x 5 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 5 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 반 정제용 HPLC에 의해 물 (A) 및 메탄올 (B) (제미니 5u, C18, 110A, 150 x 21 mm, 20 분에 걸쳐 50→95％ B, 21 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 7-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 20 mg (6％)을 백색 고체로서, 그리고 5-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 10) 10 mg (3％)을 백색 고체로서 수득하였다. 7-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00071
5-플루오로-9-(2-플루오로-에틸)-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 10)의 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00072
실시예 11: 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-2-메틸-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 11) 및 9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 11)
실시예 11(a) 4-(4-메틸-시클로헥스-1-에닐)-모르폴린 (44)
딘 스타크가 장착된 플라스크에서, 4-메틸시클로헥사논 (20.1 g, 179.3 mmol, 22 mL) 및 모르폴린 (31.3 g, 359.0 mmol, 31.4 mL)의 용액을 벤젠 (55 mL) 중에서 26 시간 동안 환류시켰다. 벤젠을 진공하에 제거하고, 조 생성물을 감압하에 증류에 의해 정제하여, 4-(4-메틸-시클로헥스-1-에닐)-모르폴린 (44) 23 g (70％)을 오일 (10 mmHg에서 b.p. 120℃)로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00073
실시예 11(b): 5-메틸-2-옥소-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (45)
벤젠 (55 mL) 중 4-(4-메틸-시클로헥스-1-에닐)-모르폴린 (44) (23 g, 127.0 mmol)의 용액에 에틸 클로로포르메이트 (7.5 g, 69.0 mmol, 6.6 mL)를 질소하에 첨가하고, 동시에 엔아민 용액을 신속하게 교반하였다. 18 시간 동안 환류시킨 후, 용액을 냉각시키고, 여과하였다. 엔아민 히드로클로라이드의 침전물을 무수 에테르로 세척하였다. 여과물 및 세척물을 반응 플라스크에 다시 넣고, 10％ 수성 HCl (40 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 15 내지 30 분 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 감압하에 증류에 의해 정제하여, 5-메틸-2-옥소-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (45) 12.5 g (53％)을 오일 (10 mmHg에서 b.p. 85℃ 내지 90℃)로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00074
실시예 11(c): 5-메틸-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (46)
톨루엔 (90 mL) 중 5-메틸-2-옥소-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (45) (5.9 g, 32 mmol), DMAP (1.12 g, 10 mmol) 및 디에틸아민 (4.7 g, 65 mmol, 6.7 mL)을 환류하에 4 일 동안 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 톨루엔을 감압하에 제거하여, 황색 오일을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (20→50％ B, 80 g)로 용리하여 정제함으로써, 5-메틸-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (46) 4.4 g (65％)을 황색 오일로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00075
실시예 11(d): 3-브로모-2-히드록시-5-메틸-시클로헥스-1-엔 카르복실산 디에틸아미드 (47)
5-메틸-2-옥소-시클로헥산카르복실산 디에틸아미드 (46) (4.4 g, 21 mmol)를 디에틸 에테르 (5 mL)에 용해시키고, N2 하에 0℃로 냉각시켰다. 브롬 (3.32 g, 21 mmol, 1.1 mL)을 15 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 90 분에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 혼합물을 빙냉 포화 수성 탄산나트륨 용액 (40 mL)에 서서히 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 3-브로모-2-히드록시-5-메틸-시클로헥스-1-엔 카르복실산 디에틸아미드 (47) 6.1 g (정량적)을 회백색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00076
실시예 11(e) 9-(2-벤질옥시-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (48)
3-브로모-2-히드록시-5-메틸-시클로헥스-1-엔 카르복실산 디에틸아미드 (47) (4.0 g, 14 mmol) 및 (2-벤질옥시-에틸)-페닐-아민 (21; 실시예 3(c)에 따라 제조) (6.3 g, 28 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (14 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (5.72 g, 42 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (200 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (50 mL), 물 (2 x 50 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 50 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 혼합물을 SCX 카트리지 (40 mL)에 이어서 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (10→50％ B, 100 g, 12 CV, 85 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-벤질옥시-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (48) 467 mg (8％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00077
실시예 11(f): 9-(2-히드록시-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (49)
메탄올 (25 mL) 중 9-(2-벤질옥시-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (48) (460 mg, 1.1 mmol)의 용액에 메탄올 (5 mL) 중 Pd/C (100 mg)의 슬러리를 첨가하였다. 혼합물을 파르 수소화기에 넣고, 수소 분위기하에 24 시간 동안 진탕시켰다. 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 진공하에 농축시켜, 9-(2-히드록시-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (49) 250 mg (79％)을 황색 오일로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 정제없이 사용하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00078
실시예 11(g): 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-2-메틸-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 11)
디클로로메탄 (10 mL) 중 9-(2-히드록시-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (49) (250 mg, 0.8 mmol)의 용액에 피리딘 (633 mg, 8.0 mmol, 0.6 mL)을 첨가하였다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (367 mg, 3.2 mmol, 0.2 mL)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 2 N HCl (2 x 20 mL) 및 물 (2 x 20 mL)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (0→100％ B, 10 g, 34 CV, 30 mL/분)로 용리하여 정제하고, 이어서 디에틸 에테르로 연화처리하여, 메탄술폰산 2-(4-디에틸카르바모일-2-메틸-1,2,3,4-테트라히드로-카르바졸-9-일)-에틸 에스테르 (전구체 화합물 11) 250 mg (80％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00079
실시예 11(h): 9-(2-[18F]플루오로-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (영상화제 11)
18F를 사용한 전구체 화합물 11의 표지화를 실시예 1(f)에 기재된 바와 같이 수행하였다.
반-정제용 HPLC: 하이크롬 ACE 5 C18 칼럼 (100 x 10 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 3 mL/분; 0-26 분 50％ B; 파장 254 nm; tR 영상화제 11 15 분.
분석용-HPLC: 페노메넥스 루나 C18 칼럼 (150 x 4.6 mm i.d.), 입자 크기 5 μm; 이동상 A: 물, 이동상 B: 메탄올; 유동 구배: 1 mL/분; 0-1 분 40％ B; 1-20 분 40→95％ B; 파장 230 nm; tR 영상화제 11 17 분. 방사화학적 수율 14±13％ (n=3) (자연 붕괴 보정 없이), 시간 90-120 분, 방사화학적 순도 ≥99％. 도 6에 영상화제 11 및 비-방사성 영상화제 11의 공-용리를 나타내었다.
실시예 12: 9-(2-플루오로-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비 방사성 영상화제 11)의 합성
3-브로모-2-히드록시-5-메틸-시클로헥스-1-엔 카르복실산 디에틸아미드 (47; 실시예 11(d)에 따라 제조) (2.0 g, 7 mmol) 및 (2-플루오로-에틸)-페닐-아민 (24; 실시예 4(a)에 따라 제조) (1.9 g, 14 mmol)의 혼합물을 N2 하에 50℃에서 3 시간 동안 교반하자, 반응물이 갈색으로 변하였다. 생성된 혼합물을 프로판-2-올 (7 mL)에 용해시키고, 무수 염화아연 (2.86 g, 21 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 16 시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (100 mL)에 용해시키고, 2 N HCl (30 mL), 물 (2 x 30 mL) 및 수성 탄산칼륨 용액 (2 x 30 mL)으로 세척한 후, 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 조 혼합물을 SCX 카트리지 (40 mL)에 이어서 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 휘발유 (A) 및 에틸 아세테이트 (B) (0→100％ B, 100 g, 12 CV, 85 mL/분)로 용리하여 정제함으로써, 9-(2-플루오로-에틸)-2-메틸-2,3,4,9-테트라히드로-1H-카르바졸-4-카르복실산 디에틸아미드 (비-방사성 영상화제 11) 400 mg (17％)을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00080
실시예 13: 전구체 화합물 5의 거울상이성질체 분리
Figure 112011083850303-pct00081
전구체 화합물 5 (실시예 1에 기재된 바와 같이 수득함)를 크로마실 아미코트(Kromasil Amycoat) (250x10 mm, 5 ㎛, 100 Å 칼럼, 30％ IPA 사용, 40℃, 13 mL/분, 구동 시간 6 분) 상에서 키랄 초임계 유체 (CO2) 크로마토그래피를 이용하여 그의 거울상이성질체로 분리하였다. 전구체 화합물 5 (60 mg)를 1,4-디옥산 (2 mL)에 용해시키고, 각각의 구동을 위해 200 ㎕까지 한 번에 주입하였다. 두 이성질체 사이의 기준선 분리를 달성하였다. 키랄 테크놀로지스(Chiral Technologies)로부터의 IC (250x4.6 mm, 5 ㎛, 등용매 구동, 80:20 - MeOH:IPA, 0.5 mL/분 및 실온) 상에서 2가지의 분리된 거울상이성질체의 거울상이성질체 순도를 분석용 HPLC로 측정하자, 각각의 거울상이성질체의 99.5％의 거울상이성질체 순도가 나타났다.
실시예 14: 비-방사성 영상화제 5의 거울상이성질체 분리
Figure 112011083850303-pct00082
비-방사성 영상화제 5 (실시예 2에 기재된 바와 같이 수득함)를 크로마실 아미코트 (250x10 mm, 5 ㎛, 100 Å 칼럼, 20％ IPA 사용, 40℃, 14 mL/분, 구동 시간 6 분) 상에서 키랄 초임계 유체 (CO2) 크로마토그래피를 이용하여 그의 거울상이성질체로 분리하였다. 화합물 5 (100 mg)를 1,4-디옥산 (2.5 mL)에 용해시키고, 각각의 구동을 위해 200 ㎕까지 한 번에 주입하였다. 시간이 흐름에 따라 분획이 절단되어, 혼합된 분획이 수집되지 않았음이 확인되었다. 키랄 테크놀로지스로부터의 IC (250x4.6 mm, 5 ㎛, 등용매 구동, 80:20 - MeOH:IPA, 0.5 mL/분 및 실온) 상에서 2가지의 분리된 거울상이성질체의 거울상이성질체 순도를 분석용 HPLC로 측정하자, 각각의 거울상이성질체의 99.5％의 거울상이성질체 순도가 나타났다.
실시예 15: 시험관내 효능 검정
PBR에 대한 친화성을 르 푸르(Le Fur) 등에 의해 개조된 방법을 이용하여 스크리닝하였다 (문헌 [Life Sci. 1983; USA 33: 449-57]). 본 발명의 생체내 영상화제의 비-방사성 유사체를 기존 테트라시클릭 인돌 영상화제의 비-방사성 유사체 (공계류 특허 출원 PCT/EP2009/062827로부터; 하기 실시예 17에 기재된 합성)와 함께 시험하였다.
각각의 시험 화합물 (50 mM 트리스-HCl (pH 7.4), 1％ DMSO를 함유하는 10 mM MgCl2에 용해됨)을 위스타(Wistar) 래트 심장 PBR에의 결합에 대해 0.3 nM [3H] PK-11195와 경쟁시켰다. 반응은 50 mM 트리스-HCl (pH 7.4), 10 mM MgCl2 중에서 15 분 동안 25℃에서 수행하였다. 각각의 시험 화합물을 추정 Ki 주변 농도의 300배 범위에 있는 6개의 상이한 농도에서 스크리닝하였다. 하기 데이터가 관찰되었다.
Figure 112011083850303-pct00083
실시예 16: 생체내 생물학적 분포 방법
본 발명의 영상화제를 기존 테트라시클릭 영상화제 (공계류 특허 출원 PCT/EP2009/062827로부터; 하기 실시예 18에 기재된 합성)와 함께 생체내 생물학적 분포 모델에서 시험하였다.
성체 수컷 위스타 래트 (200 내지 300 g)에게 외측 꼬리 정맥을 통해 1 내지 3 MBq의 시험 화합물을 주사하였다. 주사 후 2, 10, 30 또는 60 분에 (n = 3), 래트를 안락사시키고, 조직 또는 체액을 샘플링하여 감마 계측기 상에서 방사성을 측정하였다.
하기 데이터 기록이 관찰되었다.
Figure 112011083850303-pct00084
도 7 내지 13에 테트라시클릭 영상화제, 및 영상화제 5 내지 7 및 9 내지 11 각각의 뇌에서의 생물학적 분포 프로파일을 도시하였다. 본 발명의 생체내 영상화제가 테트라시클릭 영상화제와 비교하여 우수한 뇌 흡수율 및 PBR-발현 조직에서의 개선된 특이적 흡수를 갖는다는 것을 확인할 수 있다.
실시예 17: (+-)-11-(2-플루오로에틸)-8-메톡시-6,11-디히드로-5-티아-11-아자-벤조[a] 플루오렌-6-카르복실산 디에틸 아미드 (비-방사성 테트라시클릭 인돌 영상화제)의 제조
17(a): (+-)-4-옥소-티오크로만-2-카르복실산 디에틸 아미드 (50)
무수 DCM (100 mL) 중 문헌 [T. Okubo et al. (Bioorg. Med. Chem. 2004; 12: 3569-3580)]에 기재되어 있는 바와 같이 제조한 (+-)-4-옥소-티오크로만-2-카르복실산 (10.4 g, 50 mmol)을 실온에서 질소 분위기하에 옥살릴 클로라이드 (12.6 g, 100 mmol) 및 한 방울의 DMF와 함께 18 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 진공하에 검으로 증발시킨 후, DCM (100 mL)에 재용해시키고, 빙조에서 0℃로 냉각시키고, 교반하고, DCM (20 mL) 중 디에틸아민 (8.03 g, 110 mmol)으로 1 시간의 기간에 걸쳐 적가 처리하였다. 반응물을 1 시간에 걸쳐 실온으로 가온하고, 10％ 수성 탄산칼륨 용액 (100 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 격렬하게 교반하였다. DCM 용액을 분리하였다. 수용액을 DCM (100 mL)의 2개의 추가 배치로 추출하고, 합한 추출물을 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. DCM 용액을 진공하에 농축시켜, 암녹색 오일을 수득하였고, 이를 방치하자 결정화되었다. 결정질 고체를 디에틸 에테르 (50 mL)로 연화처리하고, 여과하여, 표제 화합물 (50) (8.57 g, 65％)을 연녹색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00085
17(b): (+-)-8-메톡시-6,11-디히드로-5-티아-11-아자-벤조[a] 플루오렌-6-카르복실산 디에틸 아미드 (51)
에탄올 (10 mL) 중 (+-)-4-옥소-티오크로만-2-카르복실산 디에틸 아미드 (50) (1.32 g, 5.0 mmol) 및 4-메톡시페닐 히드라진 히드로클로라이드 (0.87 g, 5.0 mmol)의 용액에 진한 황산 (0.73 mL, 1.35 g, 13.8 mmol)을 질소하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 24 시간 동안 환류하에 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 여과하고, 고체를 에탄올로 세척하고, 진공하에 (45℃) 건조시켜, 표제 화합물 (51) (1.05 g, 57％)을 연황색 고체로서 수득하였다. 구조를 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00086
17(c): (+-)-11-(2-플루오로에틸)-8-메톡시-6,11-디히드로-5-티아-11-아자-벤조[a] 플루오렌-6-카르복실산 디에틸 아미드 (기존 테트라시클릭 인돌 영상화제의 비-방사성 유사체)
무수 DMF (4 mL) 중 (+-)-8-메톡시-6,11-디히드로-5-티아-11-아자-벤조[a] 플루오렌-6-카르복실산 디에틸 아미드 (51) (150 mg, 0.41 mmol; 실시예 17(b)에 따라 제조)의 용액에 문헌 [L. Cronin et al. (J. Org. Chem. 2004; 69: 5934-5946)]에 기재되어 있는 바와 같이 제조한 2-플루오로에틸 토실레이트 (166 mg, 0.82 mmol)에 이어서 미네랄 오일 중 수소화나트륨 60％ 분산액 (34 mg, 0.82 mmol)을 질소하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 물 (30 mL)로 켄칭하고, DCM (2 x 30 mL)으로 추출하고, 건조시키고 (MgSO4), 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 실리카 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 5→10％ EtOAc/CH2Cl2로 용리하여 정제하였다. 조 고체를 에테르/석유 스피릿으로 켄칭하고, 여과하고, 진공하에 (45℃) 건조시켜, 표제 화합물 (비-방사성 테트라시클릭 인돌 영상화제) (77 mg, 46％)을 연갈색 고체로서 수득하였다. 구조를 1H NMR (300 MHz, CDCl3)에 의해 확인하였다.
Figure 112011083850303-pct00087
실시예 18: (+-)-11-(2-[18F]플루오로에틸)-8-메톡시-6,11-디히드로-5-티아-11-아자-벤조[a] 플루오렌-6-카르복실산 디에틸 아미드 (테트라시클릭 인돌 영상화제)의 합성
18F-/물을 반응 용기에서 K222 (4 mg), 수성 K2CO3 (0.1 몰 용액 50 ㎕) 및 아세토니트릴 (500 ㎕)에 첨가하고, 100℃에서 질소 스트림하에 20 내지 30 분 동안 건조시켰다. 아세토니트릴 (1000 ㎕) 중 에틸-1,2-디토실레이트 (4 mg)를 첨가하고, 100℃에서 10 분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 반 정제용 HPLC로 정제하고, 18F-플루오로에틸 토실레이트를 함유하는 분획을 수집하였다. H2O를 사용하여 상기 분획을 약 20 mL의 부피로 희석하고, 컨디셔닝 라이트 t-C18 셉 팩 상에 로딩하고, H2O (1x2 mL)로 플러싱하였다. 셉 팩을 고유동의 N2 라인 상에서 20 분 동안 건조시켰다. 이어서, 18F 플루오로에틸 토실레이트를 DMF (500 ㎕)로 용리하였다.
DMF (250 ㎕) 중 전구체 화합물 (+-)-8-메톡시-6,11-디히드로-5-티아-11-아자-벤조[a] 플루오렌-6-카르복실산 디에틸 아미드 (51; 실시예 17(b)에 따라 제조) (13 mg)를 제2 반응 용기에 첨가하고, N2로 5 분 동안 퍼징하였다. 이어서, DMF (2x250 ㎕) 중 NaH (1.3 mg)를 질소하에 첨가하고, 반응 용기를 45℃에서 0.5 내지 1 시간 동안 가열하였다. 이어서, 여기에 상기 제조한 DMF 중 18F 플루오로에틸 토실레이트를 첨가하고, 100℃에서 10 분 동안 N2 퍼징 반응 용기에서 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 물 (1 mL)을 사용하여 반응 용기로부터 세척하였다. 용액을 주사기 필터를 통해 여과하고, 정제용 HPLC 상에서 정제하였다. 주요 방사성 피크를 함유하는 분획을 수집하였다. H2O를 사용하여 이를 약 10 mL의 부피로 희석하고, 컨디셔닝 라이트 C18 셉 팩 상에 로딩하고, H2O (1x2 mL)로 플러싱하고, EtOH (0.5 mL)를 사용하여 P6 바이알로 용리하고, 인산염 완충 염수 (5 mL)를 첨가하였다.

Claims (28)

  1. 하기 화학식 I의 생체내 영상화제.
    <화학식 I>
    Figure 112016073538355-pct00088

    상기 식에서,
    R1은 C1-3 알킬 또는 C1-3 플루오로알킬이고;
    R2는 수소, 히드록실, 할로, 시아노, C1-3 알킬, C1-3 알콕시, C1-3 플루오로알킬 또는 C1-3 플루오로알콕시이고;
    R3 및 R4는 독립적으로 C1-3 알킬, C7-10 아르알킬이거나, 또는 R3 및 R4는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께, 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1개의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 질소-함유 C4-6 지방족 고리를 형성하고;
    Y1은 CH2이고;
    Y2는 CH2, CH2-CH2, CH(CH3)-CH2 또는 CH2-CH2-CH2이고;
    여기서, 정의된 바와 같은 화학식 I은 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소인 원자를 포함한다.
  2. 제1항에 있어서, 생체내 영상화에 적합한 상기 방사성동위원소가 11C, 18F 및 123I로부터 선택되는 것인 생체내 영상화제.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1이 메틸 또는 C2 -3 플루오로알킬인 생체내 영상화제.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, R2가 수소, 할로, C1-3 알콕시 또는 C1-3 플루오로알콕시인 생체내 영상화제.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, R3 및 R4가 독립적으로 메틸, 에틸 또는 벤질인 생체내 영상화제.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, R3 및 R4가 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 질소-함유 C5-6 지방족 고리를 형성하는 것인 생체내 영상화제.
  7. 삭제
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서, Y2가 CH2-CH2인 생체내 영상화제.
  9. 제1항에 있어서, 하기 화학식 Ia의 생체내 영상화제.
    <화학식 Ia>
    Figure 112011083850303-pct00089

    상기 식에서,
    R2a는 수소, 할로 또는 C1 -3 알콕시이고;
    R3a 및 R4a는 독립적으로 메틸, 에틸 또는 벤질이거나, 또는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제파닐 또는 모르폴리닐 고리를 형성하고;
    Y2a는 CH2, CH2-CH2, CH(CH3)-CH2 또는 CH2-CH2-CH2이고;
    n은 1, 2 또는 3이다.
  10. 제9항에 있어서,
    R3a 및 R4a가 둘 다 에틸이거나, 또는 R3a가 메틸이고 R4a가 벤질이거나, 또는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 아제파닐 고리를 형성하고;
    R2a가 수소, 메톡시 또는 플루오로이고;
    Y2a가 CH2-CH2 또는 CH(CH3)-CH2이고;
    n이 2인
    생체내 영상화제.
  11. 제10항에 있어서, 하기 화학 구조의 생체내 영상화제.
    Figure 112011083850303-pct00090
  12. 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제의 제조를 위한, 하기 화학식 II의 전구체 화합물.
    <화학식 II>
    Figure 112015011436173-pct00091

    상기 식에서,
    R11 및 R12 중 하나는, 상기 전구체 화합물과 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 상기 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하고, R11 및 R12 중 다른 하나는 각각 R1 및 R2에 대해 제1항에 정의된 바와 같고, 임의로 보호기를 포함하고;
    R13-14 및 Y11-12는 각각 R3-4 및 Y1-2에 대해 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함한다.
  13. 제12항에 있어서, R11이 C1 -3 알킬렌-LG (여기서, LG는 메실레이트, 토실레이트 및 트리플레이트로부터 선택된 이탈기임)인 전구체 화합물.
  14. 제13항에 있어서, 하기 화학식 IIa의 화합물인 전구체 화합물.
    <화학식 IIa>
    Figure 112016073538355-pct00092

    상기 식에서,
    LG는 제13항에 정의된 바와 같고;
    R12a는 수소, 할로 또는 C1-3 알콕시이고;
    R13a 및 R14a는 독립적으로 메틸, 에틸 또는 벤질이거나, 또는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제파닐 또는 모르폴리닐 고리를 형성하고;
    Y12a는 CH2, CH2-CH2, CH(CH3)-CH2 또는 CH2-CH2-CH2이고;
    m은 1, 2 또는 3이다.
  15. 제12항에 있어서, R12가 트리메틸주석인 전구체 화합물.
  16. 제12항에 있어서, 하기 화학식 IIb의 화합물인 전구체 화합물.
    <화학식 IIb>
    Figure 112016073538355-pct00093

    상기 식에서,
    R11b는 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소의 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기이고;
    R12b-14b는 R12-14에 대해 제12항에 정의된 바와 같고, 단, R12b는 클로로가 아니고;
    Y11b-12b는 Y11-12에 대해 제12항에 정의된 바와 같다.
  17. 디에틸 에테르를 포함하는 용매계 중에서 하기 화학식 IIc의 화합물을 ZnCl2와 반응시켜 하기 화학식 IId의 화합물을 형성하는 것을 포함하는, 제16항에 정의된 바와 같은 화학식 IIb의 전구체 화합물의 제조 방법.
    <화학식 IIc>
    Figure 112016073538355-pct00094

    (상기 식에서,
    R12c는, 상기 전구체 화합물과 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 상기 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하거나,
    R12c는, 수소, 히드록실, 할로, 시아노, C1-3 알킬, C1-3 알콕시, C1-3 플루오로알킬 또는 C1-3 플루오로알콕시이고, 임의로 보호기를 포함하고;
    Y11c은 CH2이고, Y12c는 CH2, CH2-CH2, CH(CH3)-CH2 또는 CH2-CH2-CH2이고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함하고;
    PGc는 보호기임);
    <화학식 IId>
    Figure 112016073538355-pct00095

    (상기 식에서, R12d, Y11d, Y12d 및 PGd는 각각 R12c, Y11c, Y12c 및 PGc에 대해 정의된 바와 같음).
  18. (i) 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제의 제조를 위해, 하기 화학식 II의 전구체 화합물을 제공하는 것;
    <화학식 II>
    Figure 112016073538355-pct00115

    (상기 식에서,
    R11 및 R12 중 하나는, 상기 전구체 화합물과 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 상기 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하고, R11 및 R12 중 다른 하나는 각각 R1 및 R2에 대해 제1항에 정의된 바와 같고, 임의로 보호기를 포함하고;
    R13-14 및 Y11-12는 각각 R3-4 및 Y1-2에 대해 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함한다.)
    (ii) 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 상기 방사성동위원소의 적합한 공급원을 제공하는 것;
    (iii) 단계 (i)의 전구체 화합물을 단계 (ii)의 방사성동위원소와 반응시켜, 상기 생체내 영상화제를 수득하는 것
    을 포함하는, 상기 생체내 영상화제의 제조 방법.
  19. 제18항에 있어서, 자동화된 방법.
  20. (i) 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제의 제조를 위해, 하기 화학식 II의 전구체 화합물을 제공하는 것;
    <화학식 II>
    Figure 112016073538355-pct00116

    (상기 식에서,
    R11 및 R12 중 하나는, 상기 전구체 화합물과 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 상기 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하고, R11 및 R12 중 다른 하나는 각각 R1 및 R2에 대해 제1항에 정의된 바와 같고, 임의로 보호기를 포함하고;
    R13-14 및 Y11-12는 각각 R3-4 및 Y1-2에 대해 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함한다.)
    (ii) 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 상기 방사성동위원소의 적합한 공급원을 제공하는 것;
    (iii) 단계 (i)의 전구체 화합물을 단계 (ii)의 방사성동위원소와 반응시켜, 상기 생체내 영상화제를 수득하는 것
    을 포함하는, 상기 생체내 영상화제의 제조 방법을 수행하기 위한, 상기 전구체 화합물을 포함하는 키트.
  21. (i) 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제의 제조를 위해, 하기 화학식 II의 전구체 화합물을 제공하는 것;
    <화학식 II>
    Figure 112016073538355-pct00117

    (상기 식에서,
    R11 및 R12 중 하나는, 상기 전구체 화합물과 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 상기 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하고, R11 및 R12 중 다른 하나는 각각 R1 및 R2에 대해 제1항에 정의된 바와 같고, 임의로 보호기를 포함하고;
    R13-14 및 Y11-12는 각각 R3-4 및 Y1-2에 대해 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함한다.)
    (ii) 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 상기 방사성동위원소의 적합한 공급원을 제공하는 것;
    (iii) 단계 (i)의 전구체 화합물을 단계 (ii)의 방사성동위원소와 반응시켜, 상기 생체내 영상화제를 수득하는 것
    을 포함하는 상기 생체내 영상화제의 자동화된 제조 방법을 수행하기 위한,
    (1) 상기 전구체 화합물을 함유하는 용기; 및
    (2) 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소의 적합한 공급원으로 단계 (1)의 용기를 용리하기 위한 수단
    을 포함하는, 카세트.
  22. (i) 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제의 제조를 위해, 하기 화학식 II의 전구체 화합물을 제공하는 것;
    <화학식 II>
    Figure 112016073538355-pct00118

    (상기 식에서,
    R11 및 R12 중 하나는, 상기 전구체 화합물과 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 방사성동위원소의 적합한 공급원의 반응시에 상기 생체내 영상화제가 형성되도록, 상기 방사성동위원소의 상기 적합한 공급원과 반응하는 화학적 기를 포함하고, R11 및 R12 중 다른 하나는 각각 R1 및 R2에 대해 제1항에 정의된 바와 같고, 임의로 보호기를 포함하고;
    R13-14 및 Y11-12는 각각 R3-4 및 Y1-2에 대해 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같고, 각각은 임의로 보호기를 추가로 포함한다.)
    (ii) 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 상기 방사성동위원소의 적합한 공급원을 제공하는 것;
    (iii) 단계 (i)의 전구체 화합물을 단계 (ii)의 방사성동위원소와 반응시켜, 상기 생체내 영상화제를 수득하는 것
    을 포함하는 상기 생체내 영상화제의 자동화된 제조 방법을 수행하기 위한,
    (1) 상기 전구체 화합물을 함유하는 용기; 및
    (2) 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화에 적합한 방사성동위원소의 적합한 공급원으로 단계 (1)의 용기를 용리하기 위한 수단
    을 포함하는 카세트에 있어서,
    (3) 과량의 방사성동위원소의 제거를 위한 이온-교환 카트리지; 및 임의로는
    (4) 전구체 화합물이 하나 이상의 보호기를 포함하는 경우에, 생성된 방사성표지 생성물을 탈보호시켜 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 형성하기 위한 카트리지
    를 추가로 포함하는 카세트.
  23. 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 포유동물 투여에 적합한 형태의 생체적합성 담체와 함께 포함하는 방사성제약 조성물.
  24. (i) 대상체에 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 포함하는 방사성제약 조성물을 투여하는 것;
    (ii) 상기 대상체에서 상기 생체내 영상화제를 말초 벤조디아제핀 수용체 (PBR)에 결합시키는 것;
    (iii) 상기 생체내 영상화제의 방사성동위원소에 의해 방출된 신호를 생체내 영상화 절차에 의해 검출하는 것;
    (iv) 상기 신호의 위치, 양 또는 둘 다를 나타내는 영상을 생성하는 것; 및
    (v) 상기 대상체에서 상기 생체내 영상화제에 의해 방출된 상기 신호와 직접적으로 관련되어 있는 PBR 발현의 분포 및 정도를 측정하는 것
    을 포함하는, 상기 대상체에서 PBR 발현의 분포, 정도, 또는 둘 다를 측정하기 위한 생체내 영상화 방법에 사용하기 위한 방사성제약 조성물.
  25. 제24항에 있어서, 상기 생체내 영상화 방법이 상기 대상체에 대한 치료 요법의 과정 동안 반복적으로 수행되고, 상기 요법이 말초 벤조디아제핀 수용체 (PBR) 상태를 퇴치하는 약물의 투여를 포함하는 것인 방사성제약 조성물.
  26. 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 포함하며,
    (i) 대상체에 제1항, 제2항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 생체내 영상화제를 포함하는 방사성제약 조성물을 투여하는 것;
    (ii) 상기 대상체에서 상기 생체내 영상화제를 말초 벤조디아제핀 수용체 (PBR)에 결합시키는 것;
    (iii) 상기 생체내 영상화제의 방사성동위원소에 의해 방출된 신호를 생체내 영상화 절차에 의해 검출하는 것;
    (iv) 상기 신호의 위치, 양 또는 둘 다를 나타내는 영상을 생성하는 것; 및
    (v) 상기 대상체에서 상기 생체내 영상화제에 의해 방출된 상기 신호와 직접적으로 관련되어 있는 PBR 발현의 분포 및 정도를 측정하는 것
    을 포함하는, 상기 대상체에서 PBR 발현의 분포, 정도, 또는 둘 다를 측정하기 위한 생체내 영상화 방법을, PBR 발현의 분포 및 정도를 특정 임상 양상에 기인하는 것으로 추정하는 추가 단계 (vi)과 함께 포함하는, PBR이 상향 조절되는 상태의 진단 방법에 사용하기 위한 방사성제약 조성물.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0905328D0 (en) 2009-03-27 2009-05-13 Ge Healthcare Ltd Indole derivatives
EP2552891B1 (en) * 2010-03-26 2018-08-08 GE Healthcare Limited Tricyclic indole derivatives as pbr ligands
GB201016038D0 (en) 2010-09-24 2010-11-10 Ge Healthcare Ltd In vivo imaging method
GB201016411D0 (en) 2010-09-30 2010-11-10 Ge Healthcare Ltd In vivo imaging method for cancer
GB201021263D0 (en) * 2010-12-15 2011-01-26 Ge Healthcare Ltd Solid phase extraction method
WO2012168697A1 (en) 2011-06-06 2012-12-13 Imperial Innovations Limited Methods to predict binding affinity of tspo imaging agents to tspo
EP2760808B1 (en) * 2011-09-30 2015-11-18 GE Healthcare Limited Calibration and normalization systems and methods for radiopharmaceutical synthesizers
CA2889642A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Ge Healthcare Limited Zinc halide mediated cyclization process leading to tricyclic indoles
AU2013351152A1 (en) * 2012-11-30 2015-05-21 Ge Healthcare Limited Crystallization process of tricyclic indole derivatives
GB201312768D0 (en) * 2013-07-17 2013-08-28 Ge Healthcare Ltd Work-up procedure
GB201316762D0 (en) * 2013-09-20 2013-11-06 Ge Healthcare Ltd Novel compounds
GB201316764D0 (en) * 2013-09-20 2013-11-06 Ge Healthcare Ltd Novel compounds
GB201316766D0 (en) * 2013-09-20 2013-11-06 Ge Healthcare Uk Ltd Macrophage Imaging
US10660966B2 (en) 2014-12-04 2020-05-26 Ge Healthcare Limited Method for removing acetaldehyde
CN106748802B (zh) * 2016-12-26 2018-11-13 南京理工大学 一种制备含氟仲胺的方法
WO2018218025A1 (en) * 2017-05-24 2018-11-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Radiolabeled and fluorescent parp inhibitors for imaging and radiotherapy
US11200669B2 (en) * 2019-11-19 2021-12-14 Uih America, Inc. Systems and methods for determining plasma input function used in positron emission tomography imaging

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000044751A1 (fr) 1999-01-26 2000-08-03 Sanofi-Synthelabo DERIVES DE 4-OXO-3,5-DIHYDRO-4H-PYRIDAZINO[4,5-b]INDOLE-1-CARBOXAMIDE, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
WO2007057705A1 (en) 2005-11-18 2007-05-24 Hammersmith Imanet Limited Tetracyclic indole derivatives as in vivo imaging agents and having peripheralbenzodiazepine receptor affinity (pbr)

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3979391A (en) * 1972-11-22 1976-09-07 Sterling Drug Inc. 1,2,3,4-Tetrahydrocarbazoles
US3939177A (en) * 1972-11-22 1976-02-17 Sterling Drug Inc. 4-Aminomethyl-9-benzyl-1,2,3,4-tetrahydrocarbazoles
FR2599740B1 (fr) * 1986-06-05 1988-08-12 Rhone Poulenc Sante Derives de benzo(b)thiophene de benzo(b)furannecarboxamides, leurs procedes de preparation et les medicaments les contenant
US5270030A (en) * 1988-12-29 1993-12-14 Bio-Technology General Corp. Fibrin binding domain polypeptide and method of producing
WO1999025340A1 (en) 1997-11-14 1999-05-27 Eli Lilly And Company Treatment for alzheimer's disease
ATE240295T1 (de) * 1997-12-03 2003-05-15 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Stickstoffenthaltende tetracyclische verbindungen
JPH11228539A (ja) * 1997-12-03 1999-08-24 Taisho Pharmaceut Co Ltd 含窒素四環性化合物
WO2000034242A1 (en) * 1998-12-11 2000-06-15 Virginia Commonwealth University Selective 5-ht6 receptor ligands
GB0115929D0 (en) 2001-06-29 2001-08-22 Nycomed Amersham Plc Solid-phase electrophilic fluorination
GB0115927D0 (en) 2001-06-29 2001-08-22 Nycomed Amersham Plc Solid-phase nucleophilic fluorination
WO2003014082A1 (en) 2001-08-09 2003-02-20 Eli Lilly And Company Cyclopenta ` b ! indole derivatives as spla2 inhibitors
ATE312817T1 (de) 2001-08-09 2005-12-15 Lilly Co Eli Cyclohept'bö indolderivate als spla2-inhibitoren
GB0905328D0 (en) 2009-03-27 2009-05-13 Ge Healthcare Ltd Indole derivatives

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000044751A1 (fr) 1999-01-26 2000-08-03 Sanofi-Synthelabo DERIVES DE 4-OXO-3,5-DIHYDRO-4H-PYRIDAZINO[4,5-b]INDOLE-1-CARBOXAMIDE, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
WO2007057705A1 (en) 2005-11-18 2007-05-24 Hammersmith Imanet Limited Tetracyclic indole derivatives as in vivo imaging agents and having peripheralbenzodiazepine receptor affinity (pbr)

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Publication number Publication date
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