KR101676053B1 - 세포학적 시료들을 준비하는 마이크로유체 기구 및 방법 - Google Patents

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Abstract

유체 샘플(fluid sample)로부터 시료(specimen)를 프로세싱(processing)하는 기구(apparatus)로서, 본 기구는, 유체 샘플을 필터로 인도하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들(microfluidic channels)의 제1 세트를 포함하며, 필터는, 시료를 필터로부터 슬라이드로 이송하게끔 형성된 팽창가능한 블래더 상에 배치되어 있다. 본 기구는, 대체로 입자들(particles)의 모노 레이어(monolayer)를 수집하게끔 형성되어 있으며, 팽창가능한 블래더 상에 배치된 필터를 통해 흐르는 유체를 제거하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제2 세트를 포함한다. 또한 본 기구는, 압력 소스(pressure source)와, 압력 소스 및 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트에 연결된 샘플 용기(sample container)와, 필터를 통과하는 유체의 유량을 측정하게끔 형성된 유체 유량계와, 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트에 연결된 착색제 소스(stain source)를 포함한다.

Description

세포학적 시료들을 준비하는 마이크로유체 기구 및 방법{MICROFLUIDIC APPARATUS AND METHOD FOR PREPARING CYTOLOGICAL SPECIMENS}
본 발명은 현미경 검사용 시료들을 준비하는 마이크로유체 기구 및 방법에 관한 것으로 더욱 상세하게는, 샘플 유체에 부유하고 있는 입자들을 수집하고 상기 수집된 입자들을 현미경 검사용 슬라이드(slide)로 이송하는 마이크로유체 기구 및방법에 관한 것이다.
파파니콜로 도말(Papanicolaou(Pap) smears)을 포함하는 많은 의학적 테스트에는, 의사가 도구를 가지고 목표 영역에 있는 피부 또는 점막(mucous membrane)을 브러싱(brushing) 및/또는 스크랩핑(scraping)하여 세포를 수집하는 것이 필요하다. 그 다음 상기 세포는 슬라이드 위에 발라지고, 고정되어 실험실로 옮겨져 그곳에서 상기 슬라이드의 착색이 이루어진다. 그 후 상기 슬라이드는 세포검사기사(cytotechnologist) 및/또는 병리학자에 의해 현미경으로 검사되어 세포의 비정상성을 확인할 수 있게 된다. 평가 과정에서 병리학자는 형성이상(dysplasia) 또는 신조직형성(neoplasia)의 존재를 밝혀내기 위해, 세포의 핵 부분을 착색하는 특징이 있는 다색도 기법(polychrome technique)을 활용할 수 있다. 또한 세포의 세포질을 관찰하기 위해 병리학자는 대조염색(counter-stain)을 적용할 수도 있다. 샘플에는 조직파편, 혈액, 점액 및 여타의 불명료한 인공물들이 포함될 수도 있기 때문에, 테스트가 평가되기 어렵고, 수집된 샘플에 대한 정확한 진단평가를 내리지 못할 수도 있다.
박리된 세포들을 방부제 액체 내에 수집하는 것에 기초한 세포학은 세포들을 슬라이드 위에 직접적으로 바르는 전통적인 방법에 대해 많은 이점을 제공한다. 미국특허 제 6634244, 6572824, 6562299, 6318190, 6225125, 6010909, 5942700, 5772818, 5503802, 5364597 및 5143627호에 개시된 바와 같이, 사이토스핀 기법(Cytospinⓡ technique), 씬프렙 기법(Thin-prepⓡ technique)과 같은 필터 이송 기법(filter transfer technique)을 사용하여 세포부유액(cell suspension)으로부터 슬라이드가 마련될 수 있다.
일반적으로 필터 이송 방법은 액체 속에 부유 된 세포들의 수집으로 시작된다. 이들 세포들은 수집되어 액체 방부제에 분산(dispersion)될 수 있으며, 또는 이들이 수집된 생물학적 액체(biological liquid) 속에 자연적으로 존재할 수도 있다. PreservCytTM 용액과 같은, 메탄올을 함유하는 액체 방부제에 분산하게 되면, 관심대상의 세포에는 영향을 주지 않으면서, 점액이 분해되고 적혈구 및 염증세포들이 용해된다. 그 다음, 세포들을 농축하여 수집하기 위해, 멤브레인(mebrane)에 의해 덮여진 구멍(aperture)을 지닌 필터를 통해 이 액체를 통과시킨다. 분산 및 필터링의 조합된 방법에 의해, 용해된 적혈구 및 분산된 점액과 같은 조직파편들은 멤브레인의 작은 구멍을 통과하여 흘러서 멤브레인 위에 수집되지 않고 그 양이 상당하게 줄어들게 된다. 그 다음, 멤브레인 상에 수집된 세포들은 슬라이드 위로 옮겨지게 된다. 현존의 필터 이송 방법에서는 통상적으로, 세포가 멤브레인으로부터 "준 건조"("semi-dry) 환경, 즉 액체의 상당량이 필터 조립체로부터 제거된 환경에서 슬라이드로 옮겨지게 된다.
여기서 개시된 기구 및 방법은, 유리 슬라이드들과 같은 층들(strata) 상에 세포학적 시료들을 마련하기 위한 것이며, 더욱 상세하게는 마이크로유체 기법을 이용하여 "습식"("wet") 환경에서 세포학적 시료들을 마련하기 위한 것이다.
일 실시예에서, 유체 샘플(fluid sample)로부터 시료를 프로세싱하는 기구는, 유체 샘플을 필터로 인도하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들(microfluidic channels)의 제1 세트(first set)를 포함하며, 상기 필터는, 시료를 상기 필터로부터 슬라이드로 이송하게끔 형성된 팽창가능한(inflatable) 블래더(bladder) 상에 배치되어 있다. 상기 기구는, 대체로 입자들(particles)의 모노 레이어(monolayer)를 수집하게끔 형성되어 있으며, 팽창가능한 블래더 상에 배치된 필터를 통해 흐르는 유체를 제거하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제2 세트(second set)를 포함한다. 또한 상기 기구는 압력 소스(pressure source)를 포함하거나 또는 압력 소스에 연결될 수 있으며, 상기 기구는, 상기 압력 소스 및 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트에 연결되거나 (또는 연결가능한) 샘플 용기(sample container)와, 필터를 통과하는 유체의 유량을 측정하게끔 형성된 유체 유량계와, 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트에 연결된 착색제 소스(stain source)를 포함한다. 상기 필터는 멤브레인을 포함할 수 있다.
다른 실시예에서, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 기구는 제1 레이어(first layer) 및 제2 레이어(second layer)를 포함한다. 상기 제1 레이어는, 유체 샘플을 필터로 인도하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트를 포함한다. 상기 제2 레이어는, 상기 필터를 통과해 흐르는 유체를 제거하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제2 세트와, 상기 필터로부터 시료를 슬라이드로 이송하게끔 형성되고 상기 필터와 관련되어 위치하는 팽창가능한 블래더를 포함한다. 상기 기구는 대체로 입자들의 모노 레이어를 수집하게끔 형성되는 것이 바람직하며, 팽창가능한 블래더 상에 배치된 필터를 통해 흐르는 유체를 제거하게끔 형성된 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제2 세트를 포함한다. 또한 상기 기구는 압력 소스를 포함하거나 또는 압력 소스에 연결될 수 있으며, 상기 기구는, 상기 압력 소스 및 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트에 연결되거나 (또는 연결가능한) 샘플 용기와, 필터를 통과하는 유체의 유량을 측정하게끔 형성된 유체 유량계와, 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 제1 세트에 연결된 착색제 소스를 포함한다. 상기 필터는 멤브레인을 포함할 수 있다.
또 다른 실시예에서, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법은, 유체 샘플이 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 세트 및 필터를 통과하게끔 하는 단계와, 상기 필터 상에 시료를 수집하는 단계와, 상기 필터가 슬라이드에 접촉하게끔 블래더를 팽창시킴으로써 상기 필터로부터 수집된 시료를 층(stratum)으로 이송하는 단계를 포함한다. 필터 상에 시료를 수집하는 단계는, 액체 부유액(liquid suspension)으로부터 입자들의 실질적인 모노 레이어를 수집하는 단계 및 수집된 입자들을 슬라이드 상에 배치하는 단계를 포함한다. 또한 상기 방법은, 측정된 유체의 유량을 활용하여, 수집된 시료에 의해 막혀진 필터의 비율을 계산하는 단계뿐만 아니라, 착색제가 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 세트를 통과하여 슬라이드 상에 수집된 시료 위에 입혀지게 하는 단계를 포함한다. 상기 필터는 멤브레인을 포함할 수 있다.
첨부된 도면들에 도시된 것은, 도시된 실시예들의 다양한 양상 및 특징들을 잘 보여주기 위해, 반드시 축적에 맞게 도시된 것은 아님을 알 수 있을 것이다.
도 1은 본 개시된 발명의 예시적인 실시예들에 따라 구성된, 마이크로유체 세포학적 시료 준비 기구에 대한 개략적 도면이다.
도 2는 본 개시된 발명의 예시적인 실시예들에 따라 구성된, 마이크로유체 서킷(microfluidic circuit)에 대한 상세 분해 사시도이다.
도 3a는 본 개시된 발명의 예시적인 실시예들에 따라 구성된, 마이크로유체 웨이퍼(microfluidic wafer)에 대한 상세 평면도이다.
도 3b는 본 개시된 발명의 예시적인 실시예들에 따라 구성된, 다른 마이크로유체 웨이퍼에 대한 상세 저면도이다.
도 4a는 도 2의 마이크로유체 서킷에 대한 상세 분해 사시도이다.
도 4b는 도 4a에서 평면 X에 따른 마이크로유체 서킷에 대한 상세 단면도이다.
도 5는 본 개시된 발명의 예시적인 실시예들에 따른 시료 준비 프로세스에 대한 플로우챠트(flow chart)다.
이하, 가능하면 도면을 참조하여, 본 개시된 발명의 실시예들을 기술하고자 한다. 그러나 본 발명은 여기에 기술되고 도시된 실시예들에 국한되는 것은 아니며, 당업자에게는 본 발명의 근원적인 범위 및 그의 등가물로부터 벗어남이 없이 다양한 수정 및 변형이 자명할 것이다. 또한 도시 및 설명을 용이하게 하기 위해, 본 발명의 다른 도면들 및 실시예들에서 동일 또는 유사한 구조 또는 작동에 대해서는 동일한 참조부호가 사용될 수도 있다.
도 1을 참조하면, 본 발명의 일 실시예인 마이크로유체 세포학적 시료 준비 기구(100)는, 샘플 유체(미 도시)를 담고 있는 샘플 바이알(sample vial)(102)을 포함한다. 상기 샘플 바이알(102)에는 압력 소스(104)가 연결된다. 상기 압력 소스에는 펌프(106), 상기 펌프(106)에 연결된 압력용기(108), 상기 압력용기(108)에 연결된 압력계, 그리고 상기 압력용기(108) 및 샘플 바이알(102)에 연결된 압력조절밸브(112)가 포함된다. 펌프(106)는 압력용기(108)를 가압하게끔 형성된다. 압력용기(108) 내의 압력은 압력계(110)로써 관찰된다. 압력용기(108) 및 샘플 바이알(102) 사이에 개재된 압력조절밸브(112)는 샘플 바이알(102)의 압력을 조절하는 데 사용된다.
또한 샘플 바이알(102)은 마이크로유체 서킷(114)에 연결되는데, 상기 마이크로유체 서킷(114)은 샘플 유체(미 도시) 내에 부유하고 있는 입자들(미 도시)을 수집하고, 수집된 입자들(미 도시)을, 현미경 검사를 위한 슬라이드(130)로 이송하게끔 형성되어 있다. 또한 마이크로유체 서킷(114)은 유체 유량계(118)에 연결되는데, 상기 유체 유량계(118)는 마이크로유체 서킷(114)을 통과하는 유체의 유량을 측정하게끔 형성되어 있다.
마이크로유체 세포학적 시료 준비 기구(100)는 또한 컴퓨터(120)를 포함하는데, 상기 컴퓨터(120)는, 유체 유량계(118)로부터 측정된 마이크로유체 서킷(114)을 통과하는 유체의 유량을 활용하여, 대체로 단일 세포 두께의 시료(single cell thik specimen)(미 도시)가 언제 마이크로유체 서킷(114) 내에 수집되었는가를 확인할 수 있게끔 형성되어 있다. 상술한 확인과정에 대한 상세한 내용은, 2007년 12월 20일자로 "Method for Measuring Occlussion of a Filter by Fluid Flow"의 명칭으로 출원된 가출원번호 제 SN 61/015,340호에 개시되어 있다. 컴퓨터(120)는 펌프(106) 및 압력조절밸브(112)에 연결되어 이들을 조정한다. 컴퓨터(120)는 압력계(110) 및 유체 유량계(118)에 연결되어 이들로부터 정보를 수신한다. 유량계(118)는 또한 폐기물 용기(waste container)(122)에도 연결된다.
도 2에 도시된 바와 같이, 마이크로유체 서킷(114)은 7개의 레이어들을 포함한다. 밑에서부터 시작하여, 베이스 레이어(124)는 마이크로유체 서킷(114)을 지지해주며, 이는 금속으로 형성될 수 있다. 상기 베이스 레이어(124)에는 오목부(126)가 있는데, 상기 오목부(126) 내로 슬라이드 레이어(128)가 장착된다. 상기 슬라이드 레이어(128)는 유리 슬라이드(130)로 만들어지며, 상기 유리 슬라이드(130) 위로 시료(미 도시)가 수집된다.
다음 레이어는, 채널들(channels)의 패턴(pattern)(134)을 지닌 인풋 레이어(input layer)(132)인데, 이는 실리콘 웨이퍼(silicon wafer) 상에 일반적인 포토리소그래픽 기법(photolithigraphic techniques)에 의해 만들어진 SU-8의 리버스 몰드(reverse mold)를 사용하여, 얇은 시트(sheet)의 폴리디메칠실록산(polydimeth ylsiloxane, "PDMS")으로 만들어질 수 있다. 상기 패턴은 도 3a에 도시된 바와 같이, 두 부분으로 이루어진 트리구조(tree structure)일 수 있다. 본 실시예에서, 상기 패턴(134)의 두께는 200 ㎛이며, 상기 패턴(134)에서 가장 큰 채널(136)의 폭은 약 2 mm이고 가장 작은 채널(138)의 폭은 200 ㎛이다. 패턴(134)은 먼저 DWGEditorTM 과 같은 컴퓨터이용설계 소프트웨어(computer aided design software)를 이용하여 설계되고, 그 다음 상기 설계는 포토리소그래픽 마스크(mask)를 만드는 데 사용되며, 상기 포토리소그래픽 마스크는, SU-8과 같은 포토레지스트로 된 몰드(mold)를 만드는 데 사용된다. 인풋 레이어(132)는 인풋 채널들(140) 및 착색제 아웃풋 채널들(output channels)(142)을 포함한다.
도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이, 인풋 채널들(140)은 인풋 도관(input conduit)(144) 및 인풋 튜빙(146)을 통해 샘플 바이알(102)에 연결된다. 이와 유사하게, 착색제 아웃풋 채널들(142)은 착색제 아웃풋 도관(148), 착색제 아웃풋 튜빙(150) 및 유량조절밸브(미 도시)를 통해 폐기물 용기(122)에 연결된다. 인풋 도관(144) 및 아웃풋 도관(148)은 인풋 레이어(132) 상부의 레이어들 내에 있는 개구부들(openings)에 의해 형성된다. 인풋 튜빙(146) 및 아웃풋 튜빙(150)은 일반적인 실험실용 튜빙이다.
도 2 및 도 3a를 참조하면, 인풋 레이어(132)의 중앙부에 원형의 개방된 캐비티(152)가 뚫어져서, 채널들의 패턴(134)으로부터 이웃 레이어인 필터 레이어(156)로 인풋 통로(input path)(154)를 형성한다. 필터 레이어(156)는 일반적인 트랙 에칭된(track etched) 멤브레인(158)을 포함하며, 이 멤브레인(158)은 마일라 D(Mylar D)로 만들어질 수 있으며, 이 멤브레인(158)의 주변(perimeter)은 인접 레이어들에 가압 봉인(pressure sealed) 되거나 접착되어진다(bonded). 대안의 실시예에서 상기 필터 레이어(156)는 용액 속에 있는 입자들을 수집하게끔 형성된 여타의 기구들을 포함한다.
다음 레이어는 아웃풋 레이어(160)가 된다. 도 3b에 도시된 바와 같이, 아웃풋 레이어(160)는 하향면(bottom facing surface)(162) 및 상향면(top facing surface)(164)을 가지고 있다. 상기 하향면(162)에는 인풋 레이어(132)에 있는 채널들의 패턴(134)과 유사한 아웃풋 채널들(166)이 배치되어 있다. 상기 아웃풋 레이어(160) 및 아웃풋 채널들(166) 또한, 상술한 일반적인 리소그래피(lithography) 기법을 사용하여 만들어질 수 있다. 도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이, 아웃풋 채널들(166)은 아웃풋 도관(168) 및 아웃풋 튜빙(170)을 통하고 유체 유량계(118)를 거쳐 폐기물 용기(122)에 연결된다. 상기 상향면(164)은 다음 레이어인 이송 레이어(172)에 접착되어, 블래더(174)를 형성한다.
도 4b에 도시된 바와 같이, 이송 레이어(172)는 하부면(178)에 리세스(recess)(176)를 가진다. 아웃풋 레이어 상부면(164)이 이송 레이어 하부면(178)에 접착되어, 상기 리세스(176)를 덮으면서 블래더(174)를 형성하게 된다. 도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이, 상기 블래더(174)는 공기 도관(180) 및 공기 튜빙(182)을 통해 공기 소스(184)에 연결된다. 상기 공기 튜빙(182)은 내경 0.04 인치의 타이곤(TygonTM ) 튜빙일 수 있다. 대안의 실시예에서, 이송 레이어(172)는 필터 레이어(156)로부터 수집된 시료를 슬라이드 레이어(128)로 기계적으로 이송하게끔 형성된 여타의 기구들을 포함한다.
도 2를 참조하면, 다음의 마지막 레이어는 플렉시글라스(plexiglass) 레이어(186)이다. 상기 플렉시글라스 레이어(186)는, 이를 관통하는 인풋 도관(144), 착색제 아웃풋 도관(148), 아웃풋 도관(168) 및 공기 도관(180) 부분들을 지닌 플렉시글라스 블록(block)으로 구성된다. 상기 플렉시글라스 레이어(186)는, 7개의 모든 레이어들(124, 128, 132, 156, 160, 172, 186)을 함께 유지할 수 있게끔 베이스 레이어(124)에 볼트 체결된다.
도 5에는 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법이 도시되어 있다. 먼저 샘플 입자들이 함유된 액체 샘플을 샘플 바이알(102) 내에 준비한다(단계 A). 착색제 아웃풋 통로를 차단하고 압력 소스(104)를 작동시키면서, 유체 유량계(118)로 측정하여, 요구되는 초기 유량 분당 약 250 마이크로리터(microliter)의 유량을 얻을 수 있도록 충분한 압력을 제공하게끔 압력조절밸브(112)를 조절한다(단계 B). 대체로 단일 세포 두께의 시료가 필터 레이어(156) 내의 멤브레인(158) 상에 수집되었음을 알려주는 유량의 변화가 나타날 때까지, 동일한 압력으로 액체 샘플이 마이크로유체 서킷(114)을 통과하게끔 한다(샘플 내의 세포 농도에 따라 대략 몇 분 소요됨)(단계 C). 그 다음에 압력 소스의 작동을 정지한다(단계 D).
다음 단계로, 공기 소스(184)를 작동시키고, 공기 튜빙(182) 내로 약 15 cm3의 공기를 집어넣어 블래더(174)를 팽창시킨다(단계 E). 블래더(174)를 팽창시키면 블래더(174)가 인풋 통로(154)를 따라 팽창하여, 수집된 시료를 지닌 멤브레인(158)을 유리 슬라이드(130) 상에 누르게 된다(단계 F). 그 다음에 공기 소스(184) 작동을 정지하고 블래더(174)로부터 공기를 방출한다(단계 G). 블래더(174)를 형성하는 이송 레이어(172) 및 아웃풋 레이어(160) 내에 있는 PDMS의 탄력성에 의해, 블래더(174)의 공기가 빠지고 유리 슬라이드(130)로부터 먼 방향으로 수축하게 된다. 이 수축과정에서, 수집된 시료와 유리 슬라이드(130) 사이의 표면장력에 의해, 시료가 멤브레인(158)으로부터 유리 슬라이드(130)로 이송된다. 인풋 레이어(132) 내에 설계된 구멍(aperture)의 형상에 의해 유리 슬라이드(130) 상의 세포 이송 지점의 형상이 정해질 수 있다.
시료가 유리 슬라이드(130)로 이송된 후에, 95% 알코올 용액을 마이크로유체 서킷 내로 몇 분 동안 주입한다(단계 H). 그 다음에, 사쿠라 디알에스-601 슬라이드 스테이너(Sakura DRS-601 slide stainer)에 사용된 시퀀스(sequence)와 같은, 착색제 및 솔벤트의 시퀀스를 인풋 레이어(132) 내로 순차적으로 도입한다(단계 I). 착색제 및 솔벤트 각각은 밸브-조절되는 매니폴드 커플링(valve-controlled manifold coupling)(미 도시)을 거쳐 도입되고, 그 후, 시퀀스 상에서 다음의 도입되는 착색제 또는 솔벤트에 의해 착색제 아웃풋 채널들 외부로 밀려나가게 된다(단계 J). 그 다음에, 착색된 시료가 부착되어 있는 유리 슬라이드(130)를 마이크로유체 서킷으로부터 추출한다(단계 K).

Claims (20)

  1. 샘플 바이알에 들어있는 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법으로서, 상기 방법은,
    유체 샘플을 샘플 바이알에 연결된 하나 이상의 마이크로유체 채널들의 셋트를 유동적으로 통과하게끔 하고, 그 후 하나 이상의 마이크로유체 채널들의 셋트와 연결된 팽창식 블래더 상에 배치된 필터를 통하게끔 하여, 필터 상에 시료를 수집하는 단계; 및
    필터가 슬라이드와 접촉하게끔 블래더를 팽창시킴으로서, 상기 수집된 시료를 필터로부터 슬라이드(slide)로 이송하는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 샘플은 액체부유액 속의 입자들을 포함하며,
    상기 필터 상에 시료를 수집하는 단계는, 상기 액체부유액으로부터, 상기 입자들이 공간적으로 분포된 것을 수집하는 것과, 수집된 입자들을 상기 필터 상에 배치하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 공간적으로 분포된 것은 모노 레이어를 포함하는 것을 특징으로 하는, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    착색제를 상기 하나 또는 복수 개의 마이크로유체 채널들의 세트를 통과시키고, 상기 슬라이드 상에 수집된 시료 상에 입히는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    유체 샘플을 마이크로유체 채널들을 통과하게끔 하여 필터 상에 시료를 수집하는 단계 동안, 상기 필터를 통과하는 유체의 유량을 측정하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법.
  6. 제5항에 있어서,
    유체 샘플을 마이크로유체 채널을 통과하게끔하여 필터 상에 시료를 수집하는 동안, 측정된 유체의 유량을 활용하여, 수집된 시료에 의해 막혀진 필터의 비율을 계산하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 유체 샘플로부터 시료를 프로세싱하는 방법.
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