KR101643285B1

KR101643285B1 - （하이드록시알킬）피롤 유도체의 회전장애이성질체

Info

Publication number: KR101643285B1
Application number: KR1020117010427A
Authority: KR
Inventors: 존 누스; 매튜 윌리암스; 라주 모한; 리챠드 마틴; 티에-린 왕; 카즈마사 아오키; 히로유키 츠루오카; 노리유키 하야시; 츠요시 홈마
Original assignee: 엑셀리시스, 인코포레이티드; 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤
Priority date: 2008-10-08
Filing date: 2009-10-07
Publication date: 2016-07-29
Also published as: TWI547479B; CA2736923A1; TWI593674B; WO2010042622A1; HK1155163A1; TW201028377A; JP6121952B2; EP2349997B1; CA2736923C; US8487117B2; ES2547697T3; AU2009302371B2; CN102186817A; BRPI0920459B1; TW201627283A; JP5767586B2; JP2012505225A; EP2349997A1; JP2014196365A; IL212170A

Abstract

본 발명은 심장혈관 질환의 예방 및/또는 치료용 화합물을 포함한다. 상기 화합물은 하기 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체 또는 그의 회전장애이성질체들이다:

상기 식에서, R¹은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고; R²은 2-히드록시-C4-C6 알킬 그룹을 나타내고; R³은 할로게노 그룹, 할로게노-C1-C3 알킬 그룹 등을 나타내고; R⁴은 수소원자, 할로게노 그룹 등을 나타내고; R⁵은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고; R⁶은 수소원자, 할로게노 그룹 등을 나타낸다.

Description

（하이드록시알킬）피롤 유도체의 회전장애이성질체{ATROPISOMERS OF (HYDROXYALKYL)PYRROLE DERIVATIVES}

관련 기술의 요약

미네랄코르티코이드 수용체 (mineralocorticoid receptor, MR)(알도스테론 수용체)는 체내 전해질 균형 및 혈압을 조절하는 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며 (예를 들어, Advances in Physiology Education, 26(1):8-20 (2002)), 스테로이드 구조를 갖는 스피로놀락톤 (spironolactone) 및 에플레레논 (eplerenone)과 같은 미네랄코르티코이드 수용체 길항제가 고혈압 및 심부전을 치료하는데 유용한 것으로 알려져 있다.

고혈압은 심혈관, 심장 및 신장 질환의 주 원인일 뿐만 아니라, 죽상동맥경화증, 심혈관 질환, 허혈성 심장 질환, 당뇨병, 당뇨병성 신장병, 만성 사구체신염 (chronic glomerulonephritis) 및 다낭신 질환 (polycystic kidney disease)과 같이 다른 기전에 의해 개시되는 질환의 진행에 대한 위험 인자이다 (J. Am. Soc. Nephrol., 14:2395-2401 (2003)).

만성 심부전의 사례에서와 마찬가지로 신부전에서, ACE 억제제로 RAAS 캐스캐이드 (cascade)를 방해하는 것이 신장 질환을 제한하는데 도움이 된다는 것이 많은 임상 실험을 통해 확립되었다 (Am. J. Kid. Dis., 37 (4): 677-688 (2001). 또한, 추가 연구들을 통해 알도스테론 길항제가 진행성 신장 질환에서 일반적으로 관찰되는 단백뇨 (proteinuria) 및 신장 손상을 줄여 ACE 억제제 단독에 비해 추가의 치료적 이점을 제공할 수 있음이 확립되었다 (고혈압., 31 :451-458 (1998)).

현재, 비-스테로이드성 골격을 갖는 미네랄코르티코이드 수용체 길항제로서, 국제 공개 공보 WO 2006/012642에 기술된 피롤 유도체들이 알려져 있지만, 본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체는 알려져 있지 않다.

발명의 요약

심혈관 질환을 위한 우수한 예방 또는 치료 약물을 개발하고자 다양한 (하이드록시알킬)피롤 유도체들의 약리 활성에 대해 폭넓게 연구한 결과, 본 발명자들은 화학식 I로 표시되는 화합물과 관련된 회전장애이성질체들이 존재한다는 것과, 상기 회전장애이성질체들 중 하나가 다른 것에 비해 미네랄코르티코이드 수용체 길항 작용 (시험관내 활성 및 생체내 활성) 및 약물 효능을 유지하는데 매우 우수하다는 것을 발견하였다. 나아가, 하나의 회전장애이성질체가 용해도, 경구 흡수율, 혈액 농도, 대사적 안정성 및 안전성 등의 면에서 우수한 특성을 가진다는 것과, 상기가 고혈압, 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증, 원발성 알도스테론증 또는 심장 질환과 같은 질병, 보다 바람직하게는 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 고혈압 등, 특히 바람직하게는 고혈압, 및 특히 바람직하게는 당뇨병성 신장병을 위한, 의약으로서, 바람직하게는 예방 또는 치료 약물 (특히 치료 약물)로서 유용하다는 것을 발견함으로써, 본 발명을 완성하였다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 화학식 I로 표시되는 화합물 (이의 회전장애이성질체 포함), 이의 약제학적 조성물 (예방 또는 치료 약물 (특히 치료 약물)로서의 의약 포함) 및 고혈압, 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증, 원발성 알도스테론증 또는 심장 질환 (보다 바람직하게는 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 및 고혈압; 특히 바람직하게는 고혈압)의 예방 또는 치료를 위한 이들의 용도에 관한 것으로서, 이들은 우수한 미네랄로코티토이드 수용체 길항 작용을 갖는다. 바람직한 화합물/조성물은 동일한 구조의 다른 회전장애이성질체에 비해 우수한 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성을 갖는 본 발명의 화합물의 회전장애이성질체를 포함한다.

즉, 본 발명은 하기를 제공한다:

(1): 화학식 I의 화합물; 또는 이의 N-산화물; 이의 부분입체이성질체, 라세미산염, 또는 부분입체이성질체가 풍부한 화합물; 이의 회전장애이성질체, 회전장애이성질체들의 등량 혼합물(equal mixture), 또는 회전장애이성질체가 풍부한 화합물; 또는 상기 화합물들 중 어느 하나의 약제학적으로 허용가능한 염:

[화학식 I]

상기 식에서,

R¹은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고;

R²은 2-히드록시-C4-C6 알킬 그룹을 나타내고;

R³은 할로게노 그룹, C1-C3 알킬 그룹, C1-C3 알콕시 그룹, 할로게노-C1-C3 알킬 그룹 또는 할로게노-C1-C3 알콕시 그룹을 나타내고;

R⁴은 수소원자, 할로게노 그룹 또는 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고;

R⁵은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고;

R⁶은 수소원자, 할로게노 그룹, C1-C3 알킬 그룹 또는 C1-C3 알콕시 그룹을 나타낸다.

또한, 본 발명은 하기를 포함한다:

(2): 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체;

(3): R¹는 메틸 그룹인, 상기 (1) 또는 (2)에 따른 화합물;

(4): R²는 2-히드록시-1-메틸프로필 그룹인, 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(5): R²는 (1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필 그룹인, 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(6): R³는 메틸 그룹, 클로로 그룹, 할로게노메틸 그룹 또는 할로게노메톡시 그룹인, 상기 (1) 내지 (5) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(7): R³은 클로로 그룹, 디플루오로메틸 그룹, 트리플루오로메틸 그룹, 디플루오로메톡시 그룹 또는 트리플루오로메톡시 그룹인, 상기 (1) 내지 (5) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(8): R³은 클로로 그룹 또는 트리플루오로메틸 그룹인, 상기 (1) 내지 (5) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(9): R⁴은 수소원자 또는 할로게노 그룹인, 상기 (1) 내지 (8) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(10): R⁴은 수소원자, 플루오로 그룹 또는 클로로 그룹인, 상기 (1) 내지 (8) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(11): R⁵는 메틸 그룹인, 상기 (1) 내지 (10) 중 어느 하나에 따른 화합물;

(12): R⁶은 수소원자, 클로로 그룹 또는 메틸 그룹인, 상기 (1) 내지 (11) 중 어느 하나에 따른 화합물; 및

(13): R⁶은 수소원자인, 상기 (1) 내지 (11) 중 어느 하나에 따른 화합물.

더욱, 본 발명은 하기를 제공한다:

(14): 하기 화합물:

1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드; 및

5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

및 이들의 N-산화물, 회전장애이성질체, 및 상기 화합물들 중 어느 하나의 약제학적으로 허용가능한 염.

또한, 본 발명은 하기를 제공한다:

(15): 하기 화합물:

1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

또한, 본 발명은 하기를 제공한다:

(16): 상기 (1) 내지 (15) 중 어느 하나에 따른 화합물의 다른 회전장애이성질체(들)에 비해서 더 큰 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성을 보여주는, 상기 화합물의 회전장애이성질체들 중의 하나.

또한, 본 발명은 하기를 제공한다:

(17): 상기 (1) 내지 (16) 중 어느 하나에 따른 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 의약.

(18): 상기 (1) 내지 (16) 중 어느 하나에 따른 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 심장혈관 질환의 예방 또는 치료 약물;

(19): 상기 (1) 내지 (16) 중 어느 하나에 따른 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 고혈압의 예방 또는 치료 약물; 및

(20): 상기 (1) 내지 (16) 중 어느 하나에 따른 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 당뇨병성 신장병의 예방 또는 치료 약물.

또한, 본 발명은 하기를 제공한다:

(21): 상기 (1) 내지 (16) 중 어느 하나에 따른 회전장애이성질체 및 약리학적으로/약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물.

본 발명의 (하이드록시알킬)피롤 유도체의 회전장애이성질체들 중 하나는 다른 것에 비해 강력한 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성을 갖기 때문에, 이는 고혈압, 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증, 원발성 알도스테론증 또는 심장 질환, 보다 바람직하게는 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 고혈압 등, 특히 바람직하게는 고혈압, 및 특히 바람직하게는 당뇨병성 신장병의 예방 또는 치료를 위한 예방 또는 치료 약물 (특히 치료 약물)로서 유용하다.

본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체들은 동일한 구조를 갖는 다른 회전장애이성질체에 비해 우수한 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성을 가지며, 높은 경구 흡수율, 혈장 농도 수준, 및 긴 혈액 내 반감기를 나타내며, 우수한 약리 활성을 나타내었다. 또한, 본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물의 상기 회전장애이성질체들은 체내 분포, 혈액 내 반감기 등과 같은 우수한 내부 동역학/약동학을 가지며, 신장 및 간과 같은 기관에 대하여 낮은 독성을 갖는다. 나아가, 본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체들은 극히 안정한데, 예를 들어 실온에서 7일간 메탄올 중에 그리고 60℃에서 4시간 동안 아세토니트릴-프탈산 완충액 중에 둔 이후에도 라세미화가 전혀 관찰되지 않았다.

그러므로, 본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체는, 예를 들어 의약으로서 유용하며, 특히 다양한 심혈관 질환 (바람직하게는, 고혈압, 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증, 원발성 알도스테론증 또는 심장 질환)을 예방하거나 치료하기 위한 의약으로서 특히 유용하다.

정의

본 명세서에서의 치환기는 이하에 설명될 것이다.

(1) "할로게노 그룹"은 플루오로 그룹, 클로로 그룹 및 브로모 그룹, 및 바람직하게는 플루오로 그룹 및 클로로 그룹이다.

(2) "C1-C3 알킬 그룹"은 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 곧은 또는 분지된 알킬 그룹, 예컨대 메틸 그룹, 에틸 그룹, n-프로필 그룹 및 이소프로필 그룹, 바람직하게는 메틸 그룹 및 에틸 그룹이다.

(3) "C1-C3 알콕시 그룹"은 상기의 "C1-C3 알킬 그룹"로부터 구조화된 C1-C3 알킬옥시 그룹이고, 예를 들어, 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 곧은 또는 분지된 알콕시 그룹, 예컨대 메톡시 그룹, 에톡시 그룹, n-프로폭시 그룹 및 이소프로폭시 그룹을 나타내고, 바람직하게는 메톡시 그룹을 나타낸다.

(4) "2-히드록시-C4-C6 알킬 그룹"은 곧은 또는 분지된 "C4-C6 알킬 그룹이 2-위치에서 하나의 히드록시 그룹으로 치환되는 그룹이고, 예를 들어, 2-히드록시-1-메틸프로필 그룹, 2-히드록시-2-메틸프로필 그룹, 2-히드록시부틸 그룹, 2-에틸-2-히드록시부틸 그룹, 1-에틸-2-히드록시부틸 그룹, 2-히드록시-(3-메틸)부틸 그룹, 2-히드록시-(3,3-디메틸)부틸 그룹, 2-히드록시펜틸 그룹 및 2-히드록시헥실 그룹은 언급할 수 있고, 바람직하게는 2-히드록시-1-메틸프로필 그룹을 언급할 수 있다.

(5) "할로게노-C1-C3 알킬 그룹"은, 상기의 "C1-C3 알킬 그룹"이 동일 또는 상이한 1 내지 5개의 할로게노 그룹으로 치환되는 그룹이고, 예를 들어, 플루오로메틸 그룹, 디플루오로메틸 그룹, 트리플루오로메틸 그룹, 클로로디플루오로메틸 그룹, 2-플루오로에틸 그룹, 2-플루오로-1-메틸에틸 그룹, 2,2,2-트리플루오로에틸 그룹, 1,1,2,2,2-펜타플루오로에틸 그룹 및 3-플루오로프로필 그룹, 바람직하게는 디플루오로메틸 그룹, 트리플루오로메틸 그룹, 2-플루오로에틸 그룹, 2-플루오로프로필 그룹 및 2-플루오로-1-메틸에틸 그룹 등을 언급할 수 있다.

(6) "할로게노-C1-C3 알콕시 그룹"은 상기의 "C1-C3 알콕시 그룹"이 동일 또는 상이한 1 내지 5개의 할로게노 그룹으로 치환되는 그룹이고, 예를 들어, 플루오로메톡시 그룹, 디플루오로메톡시 그룹, 트리플루오로메톡시 그룹, 2-플루오로에톡시 그룹, 1,1-디플루오로에톡시 그룹, 1,1,2,2,2-펜타플루오로에톡시 그룹 및 3-플루오로프로폭시 그룹, 바람직하게는 디플루오로메톡시 그룹, 트리플루오로메톡시 그룹 등을 언급할 수 있다.

이하, 본 발명은 상세히 설명될 것이다.

화학식 I 에서의 R¹, R², R³, R⁴, R⁵ 및 R⁶이 설명될 것이다.

[화학식 I]

상기 식에서,

R¹은 하기를 나타낸다:

(a) C1-C3 알킬;

(b) 메틸 또는 에틸; 또는

(c) 메틸.

R²은 하기를 나타낸다:

(a) 2-히드록시-C4-C6 알킬;

(b) 2-히드록시-1-메틸프로필; 또는

(c) (1R, 2S)-2-히드록시-1-메틸프로필.

R³은 하기를 나타낸다:

(a) 할로게노, C1-C3 알킬, C1-C3 알콕시, 할로게노-C1-C3 알킬, 또는 할로게노-C1-C3 알콕시; 할로게노 그룹으로서, 클로로 그룹이 바람직하고; C1-C3 알킬 그룹으로서, 메틸 그룹이 바람직하고; C1-C3 알콕시 그룹으로서, 메톡시 그룹이 바람직하고; 할로게노-C1-C3 알킬 그룹으로서, 디플루오로메틸 그룹 또는 트리플루오로메틸 그룹이 바람직하고; 할로게노-C1-C3 알콕시 그룹으로서, 디플루오로메톡시 그룹 또는 트리플루오로메톡시 그룹이 바람직하다;

(b) 메틸, 클로로, 할로게노메틸, 또는 할로게노메톡시;

(c) 클로로, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 디플루오로메톡시, 또는 트리플루오로메톡시; 또는

(d) 클로로 또는 트리플루오로메틸.

R⁴은 하기를 나타낸다:

(a) 수소, 할로게노, 또는 C1-C3 알킬; 또는

(b) 수소 또는 할로게노.

R⁵은 하기를 나타낸다:

(a) C1-C3 알킬; 또는

(b) 메틸.

R⁶은 하기를 나타낸다:

(a) 수소, 할로게노, C1-C3 알킬, 또는 C1-C3 알콕시;

(b) 수소, 클로로, 또는 메틸; 또는

(c) 수소.

화학식 I로 표시되는 바람직한 화합물로서, 하기로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나의 화합물을 언급할 수 있다:

5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;

또는 N-산화물, 어떤 상기의 회전장애이성질체, 또는 임의의 상기의 약제학적으로 허용가능한 염. 임의의 상기의 4개의 입체이성질체의 회전장애이성질체 1쌍 중에서, 더 강력한 미네랄코르티코이드 수용체 길항 작용을 보여주는 것이 더 바람직하다.

화학식 I로 표시되는 바람직한 화합물은 하기 및 N-산화물, 어떤 상기의 회전장애이성질체, 및 임의의 상기의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다(표 1):

임의의 상기의 4개의 입체이성질체의 회전장애이성질체 1쌍 중에서, 더 강력한 미네랄코르티코이드 수용체 길항 작용을 보여주는 것이 더 바람직하다.

또한, 화학식 I로 표시되는 바람직한 화합물은 하기와 같다:

N-산화물, 어떤 상기의 회전장애이성질체, 및 어떤 상기의 약제학적으로 허용가능한 염. 회전장애이성질체 중에서, 더 강력한 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성을 보여주는 것이 더 바람직하다.

화학식 I로 표시되는 바람직한 화합물은 하기를 포함한다(표 2):

이의 N-산화물, 어떤 상기의 회전장애이성질체, 및 어떤 상기의 약제학적으로 허용가능한 염. 회전장애이성질체 중에서, 더 강력한 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성을 보여주는 것이 더 바람직하다.

여기서, 본 명세서의 "울혈성 심부전"은 "만성 심부전" 및 "CHF (만성 심장부전)"을 포함한다.

본 명세서의 "섬유증"의 구체적인 예는 심장내막 섬유증, 맥관 섬유증, 신장 섬유증 및 간 섬유증을 포함한다.

본 명세서의 용어 "심장 질환"이란 허혈성 심장 질환, 심장부전, 심장 수축기 기능이상, 심장 확장 기능장애, 심근 괴사, 폐정맥 울혈, 심방세동, 심근경색, 심근 섬유증 또는 만성 심장부전을 의미한다.

본 명세서의 용어 "신질환" 또는 "신장 질환" 또는 "신장병"은 당뇨병성 신장병, 만성 사구체신염, 다낭성 신장, 비(non)당뇨병성 신장병 및 만성 신장 질환을 포함한다.

이하, 본 발명의 식 I로 표시되는 화합물의 제조 공정이 설명될 것이다.

본 발명의 식 I의 화합물은 하기 [반응식 1]에 보여진 방법으로 제조될 수 있다.

[화학식 I]

식 I의 화합물은 하기 [반응식 1]에 보여진 방법으로 제조될 수 있다.

식 I의 화합물은 5-브로모피롤 (1)과 아릴보론산 유도체인 화합물 (2)의 커플링 반응을 통해 5-아릴피롤카복실산 에스테르 유도체 (3)를 먼저 제조한 다음, 화합물 (3)을 가수분해하여 제조될 수 있다. 그 다음, 산 클로라이드인 화합물 (5)를 제조하고, 화합물 (5)와 아닐린 (6)의 축합 반응을 수행하여 아미드 유도체인 화합물 (7)을 얻은 다음, 화합물 (7)을 알킬화시킨다.

식 I의 화합물이 비대칭 탄소, 축 비대칭 등에서 유래하는 광학 이성질체를 갖는 경우에, 단일 이성질체는 필요에 따라 광학분할을 수행하여 얻을 수 있다.

[반응식 1]

(상기 식에서, R¹은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고; R²은 2-히드록시-C4-C6 알킬 그룹을 나타내고; R³은 할로게노 그룹, C1-C3 알킬 그룹, C1-C3 알콕시 그룹, 할로게노-C1-C3 알킬 그룹 또는 할로게노-C1-C3 알콕시 그룹을 나타내고; R⁴은 수소원자, 할로게노 그룹 또는 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고; R⁵은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고; R⁶은 수소원자, 할로게노 그룹, C1-C3 알킬 그룹 또는 C1-C3 알콕시 그룹을 나타내고; R⁷은 C1-C4 알킬 그룹 또는 아릴 그룹을 나타낸다).

브로모피롤 유도체인 화합물 (1)과 아릴보론산 유도체 (2)의 커플링 반응 (교차커플링 반응)의 참조 문헌으로서, 특허 문헌 (WO 2006/012642)를 언급할 수 있다. 커플링 반응의 촉매로서, 일반적인 팔라듐 시약이 사용될 수 있고, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0)이 바람직하다. 염기로서, 나트륨 카보네이트, 칼륨 카보네이트, 탄산수소나트륨, 나트륨 카보네이트 등이 사용될 수 있고, 나트륨 카보네이트가 바람직하다. 반응 용매로서, 물 또는 할로겐화 탄화수소 용매, 예컨대 메틸렌 클로라이드, 탄화수소 용매, 예컨대 톨루엔, 에테르 용매, 예컨대 테트라히드로푸란, 불활성 극성 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드 및 N,N-디메틸아세트아미드 등이 단독으로 또는 용매 혼합물로서 사용될 수 있고, 톨루엔과 물의 용매 혼합물 등이 바람직하다. 반응 온도로서, 0℃ 내지 비점 범위의 용매, 바람직하게는 실온 내지 비점 범위의 용매이다. 반응 시간으로서, 통상 약 0.5 - 약 24시간이다.

피롤카복실산 에스테르 유도체인 화합물 (3)의 알칼리 가수분해 반응에서, 및 할로겐화 반응, 그 다음 가수분해에 의해 얻은 피롤카복실산 클로라이드 유도체인 화합물 (5)와, 아닐린 유도체인 화합물 (6) 또는 이의 염의 축합 반응에서, 특허 문헌 (WO 2006/012642)에 기재된 방법이 사용될 것이다. 먼저, 피롤카복실산 (4)의 산 클로라이드를 얻기 위한 전환 반응에서, 일반적인 할로겐화 시약이 사용될 수 있고, 바람직하게는 옥살릴 클로라이드이다. 화합물 (5)와, 아닐린 유도체인 화합물 (6)의 축합 반응에서, 염기의 존재에서 반응을 수행하는 것이 바람직하다. 염기로서, 유기 염기, 예컨대 트리에틸아민 및 디이소프로필에틸아민이 바람직하다. 축합 반응의 용매로서, 할로겐화 탄화수소 용매, 예컨대 메틸렌 클로라이드, 탄화수소 용매, 예컨대 톨루엔, 에테르 용매, 예컨대 테트라히드로푸란 또는 극성 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드 및 N,N-디메틸아세트아미드가 바람직하다. 반응 온도로서, -20℃ 내지 비점 범위의 용매, 바람직하게는 실온 내지 비점 범위의 용매이다. 반응 시간으로서, 통상 약 2 - 약 24시간이다.

피롤카복실산의 아미드 유도체인 화합물 (7)의 알킬화에서, 염기 조건 하에서 수행되는 공지의 알킬화 방법이 사용될 수 있다. 알킬화 시약으로서, 예를 들어, 시클릭 황산 에스테르 유도체, 예컨대 4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란 2,2-디옥사이드, 카본산 에스테르 유도체 등이 사용될 수 있고, 바람직하게는 (4S,5S)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란 2,2-디옥사이드이다 [참조 문헌: Bull. Chem. Soc. Jpn. 66, 513-522 (1993)]. 염기로서, 나트륨 tert-부톡사이드, 나트륨 히드라이드, 칼륨 카보네이트 등이 사용될 수 있고, 바람직하게는 나트륨 tert-부톡사이드이다. 반응 용매로서, 알콜 용매, 예컨대 에탄올, 할로겐화 탄화수소 용매, 예컨대 메틸렌 클로라이드, 탄화수소 용매, 예컨대 톨루엔, 에테르 용매, 예컨대 테트라히드로푸란, 및 극성 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드 및 N,N-디메틸아세트아미드가 사용될 수 있고, 바람직하게는 N,N-디메틸아세트아미드이다. 반응 온도로서, -20℃ 내지 비점 범위의 용매, 바람직하게는 실온 내지 비점 범위의 용매이다. 반응 시간으로서, 통상 약 0.5 - 약 24시간이다.

[반응식 2]

(여기서, R^2a 및 R^2b는 1) 서로 동일 또는 상이하고, 메틸 그룹 또는 에틸 그룹을 나타내고, 또는 2) R^2a 또는 R^2b 중 하나는 수소원자를 나타내고, 다른 하나는 메틸 그룹, 에틸 그룹, 프로필 그룹, 이소프로필 그룹, 부틸 그룹 또는 tert-부틸 그룹을 나타내고; R¹, R³, R⁴, R⁵ 및 R⁶은 상기에 기재된 것과 동일한 것을 나타낸다).

알코올 유도체인 식 (I-a)의 화합물은, 상업적으로 이용할 수 있거나 공지의 방법으로 합성될 수 있는 시클릭 황산 에스테르 유도체 (2-1)를 알킬화제로서 사용하여 촉매의 존재에서 황산 에스테르 유도체인 화합물 (2-2)를 먼저 제조한 다음, 화합물 (2-2)를 가수분해하여 [반응식 2]에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다. 산 촉매로서, 염산, 황산, 아세트산 등이 사용될 수 있고, 바람직하게는 염산이다. 용매로서, 물, 알콜 용매, 예컨대 에탄올, 할로겐화 탄화수소 용매, 예컨대 메틸렌 클로라이드, 불활성 탄화수소 용매, 예컨대 톨루엔, 불활성 에테르 용매, 예컨대 테트라히드로푸란, 또는 불활성 극성 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드 등이 사용될 수 있고, 바람직하게는 테트라히드로푸란이다. 반응 온도로서, 0℃ 내지 비점 범위의 용매, 바람직하게는 실온 내지 비점 범위의 용매이다. 반응 시간으로서, 통상 약 0.5 - 약 24시간이다.

앞에서 언급한 화합물 (I)과 관련하여, 피롤과 페닐간의 축 비대칭으로부터 기인하는 회전장애이성질체들이나 sp3 비대칭 탄소 등으로부터 기인하는 광학 이성질체들이 존재하는 경우가 있다. 회전장애이성질체들의 광학 분할은 본질적으로 sp3 비대칭 탄소 등으로부터 기인하는 거울상이성질체의 광학 분할과 동일하다. 예를 들어, 직접 분할은 키랄 컬럼을 이용한 고성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 수행될 수 있다. 키랄 컬럼으로서, 예를 들어, CHIRALPAK AD-H, AS-H 등이 언급될 수 있다.

본 발명에서 회전장애이성질체들은 구속된 분자내 회전으로 인한, 축 또는 면 키랄성 (chirality)에 기초한 구조 이성질체들이다. 본 발명의 화학식 I을 갖는 화합물은 입체 장애로 인해 R³ 그룹을 치환체로 갖는 페닐 그룹과 치환된 피롤 고리를 연결하는 결합의 회전 제한으로 인한 축 비대칭으로부터 기인하는 두 가지 회전장애이성질체들을 갖는다. 본 발명의 회전장애이성질체들과 관련하여, 화학식 I을 갖는 화합물 또는 화학식 I의 화합물이 비대칭 탄소 등으로 인한 이성질체들을 갖는 경우, 상기는 그러한 이성질체 화합물 각각에 대해 존재하는 한 쌍의 회전장애이성질체들 중 어느 하나를 의미한다. 우수한 약리/약동학적 활성, 안정성, 내부 동역학, 안전성 등을 갖는 회전장애이성질체는 의약이 선호하는 바와 같은 바람직한 특성을 갖는다.

여기에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물에 대해 존재하는 회전장애이성질체들 중에서, 우수하거나 바람직한 약리 및/또는 약동학적 활성, 안정성, 내부 동역학, 안전성 등을 갖는 회전장애이성질체를 포함하며, 상기는 의약으로서 바람직한 특성을 갖는다. 하지만, 본 발명은 또한 주요 성분으로서 바람직한 특성을 갖는 회전장애이성질체가 풍부한 화합물/조성물을 포함하거나, 또한 그러한 바람직한 특성이 입증되는 한, 임의의 비율로 다른 회전장애이성질체를 갖는 혼합물을 포함한다. 우수하고/하거나 바람직한 특성을 갖는 회전장애이성질체가 풍부한 화합물/조성물에서, 상기 특성을 갖는 회전장애이성질체는 다른 회전장애이성질체보다 더 높은 농도로 존재한다. 바람직하게는, 상기의 바람직한 회전장애이성질체는 동일한 구조의 회전장애이성질체들을 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98% 또는 99% 초과 포함한다. 바람직한 구체예에서, 상기 바람직한 회전장애이성질체 이외의 다른 구조의 회전장애이성질체들은 감지할 수 없다.

상기 언급된 방법에 의해 생성되는 회전장애이성질체의 분리 및 정제 방법은, 예를 들어 크로마토그래피를 포함하나, 상기 방법에 제한되지는 않는다. 이하, 크로마토그래피를 이용한 일반적인 광학 분할을 보다 상세하게 설명한다.

크로마토그래피를 이용한 광학 분할에서, 당과 같이 유도체와 결합된 비대칭 원소를 포함하는 고정상이 담체로 사용되는 경우, 크로마토그래피의 유지 시간 (retention time)이 차별화되어 분할이 이뤄진다. 이 특성을 이용함으로써, 키랄 컬럼을 이용한 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 직접 분할이 수행될 수 있다. 키랄 컬럼은, 예를 들어 CHIRALPAK AD-H, CHIRALCEL OJ-RH (DAICEL) 등을 포함한다. 회전장애이성질체 혼합물의 경우, 표준 실리카 겔 컬럼이 또한 사용될 수 있다.

본 발명의 회전장애이성질체가 의약으로 사용되는 경우, 앞서 언급한 화학식 I을 갖는 화합물의 회전장애이성질체는 그 자체 (회전장애이성질체가 풍부한 조성물)로 투여되거나, 상기 (회전장애이성질체가 풍부한 화합물/조성물)는 약리학적으로 허용가능한 적절한 부형제, 희석제 등과 혼합되어, 정제, 캡슐, 과립, 분말, 시럽 등으로 경구 투여되거나, 주사제, 좌제, 접착성 조제물 또는 외용 조제물로 비경구 투여될 수 있다.

이러한 약제학적 약물은 부형제, 윤활제, 결합제, 붕해제, 유화제, 안정화제, 조정제 (corrective) 및 희석제와 같은 첨가제를 사용하여 공지된 방법을 통해 생성된다.

본 발명은 또한 시험관내 및 생체내 모두에서 미네랄코르티코이드 수용체 활성을 억제하는 방법을 포함하며, 상기 방법은 미네랄코르티코이드 수용체를 유효 억제량의 본 발명의 화합물과 접촉시키는 것을 포함한다. 바람직한 구체예에서, 상기 수용체는 세포 내에 존재한다. 바람직하게는, 상기 세포는 동물 체내, 바람직하게는 인체내에 존재한다. 상기 방법은, 임의의 치료 효과에도 불구하고, 시험관내 및 생체내 생물학적 과정에서의 미네랄코르티코이드 수용체의 역할을 연구하는데 유용하다.

본 발명은 또한 미네랄코르티코이드 수용체 매개 상태 또는 질환을 예방 또는 치료하는 방법을 포함한다. 상기 상태 또는 질환은, 예를 들어 고혈압, 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증, 원발성 알도스테론증 및 부종을 포함한다. 상기 예방 및/또는 치료 방법은 유효량의 본 발명의 화합물 (단독 또는 약제학적 조성물로)을 동물 (바람직하게는 인간)에게 투여하는 것을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, "치료"는 예방 뿐만 아니라 일시적인 처방 모두를 포함한다.

투여량은 증상, 연령 등에 따라 달라지긴 하지만, 성인 인간을 위한 경구 투여의 경우 용량은 하한선으로서 투여량 당 0.02 mg/kg (바람직하게는 0.1 mg/kg)부터 상한선으로서 투여량 당 100 mg/kg (바람직하게는 10 mg/kg)까지이며, 비경구 투여의 경우 용량은 하한선으로서 투여량 당 0.002 mg/kg (바람직하게는 0.01 mg/kg)부터 상한선으로서 투여량 당 10 mg/kg (바람직하게는 1 mg/kg)까지이며, 상기 투여량은 증상에 따라 하루에 1회부터 6회까지 투여될 수 있다.

바람직한 약리 및/또는 약동학적 활성을 갖는 본 발명의 화합물의 회전장애이성질체는 본원에 기술되고/되거나 당해 기술분야의 숙련자에게 알려진 방법을 이용하여 일상적으로 결정되고 확인될 수 있다.

본원에 언급된 모든 문헌 (특허 및 비특허)은 본원에 참고로 통합되어 있다.

실시예

이하, 본 발명을 실시예 및 시험예를 참고로 상세하게 설명하지만, 본 발명이 이들에 제한되는 것은 아니다.

실시예에서 기호 "NMR" 및 "MS"는 각각 "핵자기공명" 및 "질량 분석기"를 의미한다. 크로마토그래피를 이용한 분리 및 정제 부분에 기술된 용출 용매의 비율은 달리 언급하지 않는 한 부피비를 지칭한다. "NMR"은 달리 언급하지 않는 한 ¹H-NMR을 의미하며, 괄호의 내용은 측정용 용매를 나타내며, TMS (테트라메틸실란)가 모든 경우 내부 표준물질로 사용되었다. 또한, "시성식에 대해 계산된 분석" 및 "이론치"는 각각 원소 분석을 위해 계산된 수치 및 고해상도 질량 분석기 (HRMS)를 의미하며, 상기 측정된 수치는 다음의 "실측치"로 제공된다. 또한, 고성능 액체 크로마토그래피에서, 분석 및 정제는 하기 조건을 이용하여 수행되었다.

분석용 HPLC

기기: SHIMADZU CLASS-VP 시스템 (LC-10ADVP / SCL-10AVP / SPD-M10AVP / CTO10ACVP / DGU12A);

오븐: 40℃, 유속: 1.0 mL/분, 검출: UV(254 nm).

분취용 HPLC

기기: SHIMADZU CLASS-VP 시스템 (LC-8A / SCL-10AVP / SIL-10AP / SPD-10AVP / FRC-10A);

오븐: 실온, 유속: 20 mL/분, 검출: UV(254 nm).

(실시예 1)

1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드

무수 N,N-디메틸아세트아미드 (DMA) (0.53 L) 중 4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드 (28 g, 66 mmol)의 용액에 나트륨 tert-부톡사이드 (15 g, 15 mmol)을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 질소 하에서 교반했다. 무수 DMA (2.0 ml) 중 (4S,5S)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란 2,2-디옥사이드 (15 g, 99 mmol)을 용액에 첨가하고, 70℃에서 2.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 2N HCl (0.14 L)을 첨가하고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 무수 테트라히드로푸란 (THF) (140 ml) 및 5N HCl (0.14 L)을 첨가하고, 60℃에서 90분 동안 교반했다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 포화 탄산수소나트륨 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (9:1 내지 1:1 디클로로메탄:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물의 회전장애이성질체 혼합물을 백색 고형물 (22.5 g, 69%)로서 얻었다.

¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 7.92-7.87 (2H, m), 7.86-7.75 (3.5H, m), 7.72 (1H,s), 7.68-7.56 (2H, m), 7.47 (0.5H, s), 7.38-7.29 (1H, m), 4.09-4.01 (0.5H, m), 3.85-3.75 (0.5H, m), 3.59-3.42 (1H, m), 3.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 1.75-1.61 (1H, m), 1.42 (1.5H, d, J = 6.8 Hz), 1.34 (1.5H, d, J = 6.8 Hz), 1.11 (1.5H, d, J = 6.4 Hz), 1.03 (1.5H, d, J = 6.4 Hz);

MS (ESI) m/z: 495 [M+H]⁺.

체류시간: 5.8분 (이성질체 A), 7.0분 (이성질체 B)

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

표제 화합물의 회전장애이성질체 혼합물 (5.10 g, 10.3 mmol)을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 내지 1:9 헥산:에틸 아세테이트)로 분리하여 회전장애이성질체의 하나 (이성질체 A, 900 mg, 1.82 mmol)를 백색 고형물로서 얻었다.

실시예 1-이성질체 A

¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 7.91 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.85-7.80 (3H, m), 7.73 (1H, s), 7.68-7.58 (2H, m), 7.46 (1H, s), 7.35 (1H, d, J = 6.8 Hz), 3.85-3.75 (1H, m), 3.58-3.50 (1H, m), 3.06 (3H, s), 2.07 (3H, s), 1.58-1.50 (1H, m), 1.42 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.03 (3H, d, J = 6.4 Hz).

MS (ESI) m/z: 495 [M+H]⁺

C₂₄H₂₆F₃N₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 495.1565, 실측치 495.1570.

체류시간: 5.8 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

표제 화합물의 회전장애이성질체 (1.0 g, 1.9 mmol)을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 내지 1:9 헥산:에틸 아세테이트)로 분리하여 또 다른 이성질체 (이성질체 B, 0.26 g, 0.50 mmol)을 백색 고형물로서 얻었다.

실시예 1-이성질체 B

¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 7.90 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.84-7.80 (3H, m), 7.78 (1H, s), 7.72 (1H, s), 7.68-7.57 (2H, m), 7.31 (1H, d, J = 7.3 Hz), 4.09-4.00 (1H, m), 3.54-3.44 (1H, m), 3.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 1.71 (1H, d, J = 4.9 Hz), 1.33 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.11 (3H, d, J = 6.4 Hz).

MS (ESI) m/z: 495 [M+H]+

C₂₄H₂₆F₃N₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 495.1565, 실측치 495.1556.

체류시간: 7.0 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

(실시예 2)

5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드

메틸 5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트의 제조

톨루엔/물 (10:1, 10 ml) 중 메틸 5-브로모-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트 (0.27 g, 1.2 mmol), [4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]보론산 (0.61 g, 2.9 mmol), Na₂CO₃ (0.6 g, 5.7 mmol) 및 팔라듐 테트라키스(트리페닐포스핀) (96 mg, 0.083 mmol)의 혼합물을 110℃에서 1.5시간 동안 질소 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석했다. 혼합물을 물 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (3:1 내지 1:3 헥산:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물 (0.23 mg, 62%)을 담황색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 8.35-8.25 (1H, brs), 7.48 (1H, dd, J = 2.7, 9.0 Hz), 7.45 (1H, d, J = 3.1 Hz), 7.40 (1H, dd, J = 5.5, 8.2 Hz), 7.30 (1H, dt, J = 2.7, 8.2 Hz), 3.82 (3H, s), 2.15 (3H, s).

5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실산의 제조

메탄올 (4.0 ml) 중 메틸 5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트 (0.23 g, 0.77 mmol)의 용액에 5N NaOH (3.0 ml)을 첨가하고 혼합물을 80℃에서 2.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 2N HCl (8.0 ml)를 첨가했다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 내지 1:9 헥산:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물 (211 mg, 96%)을 백색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 11.62 (1H, s), 11.34 (1H, s), 7.74 (1H, dd, J = 2.5, 9.2 Hz), 7.59 (1H, dt, J = 2.5, 8.6 Hz), 7.48 (1H, dd, J = 5.8, 8.6 Hz), 7.32 (1H, d, J = 3.1 Hz), 1.93 (3H, s).

5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드의 제조

디클로로메탄 (60 ml) 중 5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실산 (7.7 g, 27 mmol)의 서스펜션에 옥살릴 클로라이드 (5.1 ml, 59 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 실온에서 2.0시간 동안 교반하고, 그후 용매를 회전식 증발기 상에서 제거했다. 이 갈색 잔류물에 4-(메탄설포닐)아닐린 히드로클로라이드 (5.8 g, 28 mmol), 테트라히드로푸란 (THF) (80 ml) 및 디이소프로필에틸아민 (DIEA) (14 ml, 80 mmol)을 첨가했다. 용액을 실온에서 2.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 농축하고, 이 잔류물에 2N HCl (80 ml) 및 물 (80 ml)을 첨가하고, 수득한 서스펜션을 30분 동안 교반했다. 고형물을 여과하고, 물 및 디이소프로필 에테르 (IPE)로 세정하여, 표제 화합물을 백색 고형물 (11 g, 90%)로서 얻었다.

¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ: 11.40 (1H, s), 9.93 (1H, s), 7.98 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.84 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.77 (1H, d, J = 9.3 Hz), 7.68 (1H, s), 7.65-7.57 (1H, m), 7.54-7.47 (1H, m), 3.16 (3H, s), 2.00 (3H, s.

무수 DMA (160 ml) 중 5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드 (23 g, 52 mmol)의 용액에 나트륨 tert-부톡사이드 (12 g, 0.12 mol)을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 질소 하에서 교반했다. 무수 DMA (20 ml) 중 (4S,5S)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란 2,2-디옥사이드 (12 g, 78 mmol)을 용액에 첨가하고, 70℃에서 2.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 2N HCl (80 ml)을 첨가하고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 무수 THF (0.12 L) 및 5N HCl (0.14 L)을 첨가하고 60℃에서 80분 동안 교반했다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 포화 탄산수소나트륨 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:2, 디클로로메탄:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물의 회전장애이성질체 혼합물 (14.3 g, 52%)을 담황색 고형물로서 얻었다.

MS (ESI) m/z: 513 [M+H]⁺.

체류시간: 5.5분 (이성질체 A), 8.3분 (이성질체 B)

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

표제 화합물의 라세미 혼합물을, 상기에 기재된 것과 유사한 방식으로 동일한 개시 물질 (0.5 g, 1.1 mmol)로부터 합성한 후, 추출 후의 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (3:7 to 2:8 헥산:에틸 아세테이트)로 정제하여 회전장애이성질체 이성질체 A (91 mg, 0.18 mmol) 및 이성질체 B (62 mg, 0.12 mmol)을 각각 얻었다.

실시예 2-이성질체 A

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.87 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.85-7.77 (3H, m), 7.53 (1H, d, J = 8.6 Hz), 7.48 (1H, s), 7.37-7.33 (2H, m), 3.84-3.74 (1H, m), 3.57-3.48 (1H, m), 3.05 (3H, s), 2.06 (3H, s), 1.70 (1H, d, J = 4.7 Hz), 1.41 (3H, d, J = 6.7 Hz), 1.04 (3H, d, J = 6.7 Hz).

MS (ESI) m/z: 513 [M+H]⁺

C₂₄H₂₅F₄N₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 513.1471, 실측치 513.1482.

체류시간: 5.5 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

실시예 2-이성질체 B

¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 7.89 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.82 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.78 (1H, s), 7.73 (1H, s), 7.53 (1H, dd, J = 3.0, 8.3 Hz), 7.39-7.23 (2H, m), 4.10-4.00 (1H, m), 3.50-3.40 (1H, m), 3.05 (3H, s), 2.05 (3H, s), 1.73 (1H, d, J = 5.4 Hz), 1.33 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.13 (3H, d, J = 6.8 Hz).

MS (ESI) m/z: 513 [M+H]⁺

C₂₄H₂₅F₄N₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 513.1471, 실측치 513.1466.

체류시간: 8.3 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

(실시예 3)

5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드

메틸 5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트의 제조

톨루엔/물 (9:1, 10 ml) 중 메틸 5-브로모-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트 (0.44 g, 2.0 mmol), [4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]보론산 (0.90 g, 4.0 mmol), Na₂CO₃ (0.64 g, 6.0 mmol) 및 팔라듐 테트라키스(트리페닐포스핀) (0.12 g, 0.10 mmol)의 혼합물을 110℃에서 2.0시간 동안 질소 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석했다. 혼합물을 물 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄)으로 정제하여 표제 화합물 (0.41 g, 65%)을 담황색 고형물로서 얻었다.

MS (ES) m/z: 318 [M+H]⁺

5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실산의 제조

메탄올 (5.0 ml) 중 메틸 5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트 (0.39 g, 1.3 mmol)의 용액에 5N NaOH (5.0 ml)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 3.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포름산 (3.0 ml)을 첨가했다. 혼합물을 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 물을 첨가하고, 분쇄했다. 고형물을 여과하고, 건조시켜 표제 화합물 (0.37 g, 93%)을 갈색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.38 (1H, s), 7.77 (1H, s), 7.66-7.54 (2H, m), 7.38 (1H, d, J = 8.2 Hz), 2.19 (3H, s).

5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드의 제조

디클로로메탄 (5.0 ml) 중 5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-1H-피롤-3-카복실산 (0.36 g, 1.2 mmol)의 서스펜션에 옥살릴 클로라이드 (0.3 ml, 3.5 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 실온에서 1.0시간 동안 교반하고, 그후 용매를 회전식 증발기 상에서 제거했다. 이 갈색 잔류물에 THF (5.0 ml), 4-(메탄설포닐)아닐린 히드로클로라이드 (0.3 g, 1.4 mmol), 및 DIEA (0.81 ml, 4.8 mmol)을 첨가했다. 용액을 실온에서 3.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 IPE을 첨가하고, 분쇄했다. 고형물을 여과하여 표제 화합물 (0.24 g, 44%)을 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 11.39 (1H, s), 9.92 (1H, s), 7.97 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.96 (1H, s), 7.87-7.79 (3H, m), 7.69 (1H, d, J = 3.1 Hz), 7.47 (1H, d, J = 8.2 Hz), 3.15 (3H, s), 2.01 (3H, s).

무수 DMA (234 ml) 중 5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드 (21 g, 47 mmol)의 용액에 나트륨 tert-부톡사이드 (10 g, 0.11 mol)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 질소 하에서 교반했다. 무수 DMA (50 ml) 중 (4S,5S)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란 2,2-디옥사이드 (11 g, 70 mmol)을 용액에 첨가하고, 70℃에서 2.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 2N HCl (100 ml)을 첨가하고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 무수 THF (120 ml) 및 5N HCl (120 ml)을 첨가하고, 60℃에서 90분 동안 교반했다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 포화 탄산수소나트륨 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 내지 1:9 헥산:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물의 회전장애이성질체 혼합물 (10.9 g, 44%)을 백색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.94-7.86 (2H, m), 7.85-7.79 (3H, m), 7.76 (1H, s), 7.73 (0.5H, s), 7.66-7.60 (1H, m), 7.47 (0.5H, s), 7.34-7.24 (1H, m), 4.10-4.00 (0.5H, m), 3.83-3.73 (0.5H, m), 3.58-3.42 (1H, m), 3.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 1.74-1.58 (1H, m), 1.42 (1.5H, d, J = 7.0 Hz), 1.33 (1.5H, d, J = 7.0 Hz), 1.13 (1.5H, d, J = 6.7 Hz), 1.04 (1.5H, d, J = 6.7 Hz).

MS (ESI) m/z: 529 [M+H]⁺

체류시간: 5.1분 (이성질체 A), 5.7분 (이성질체 B)

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

상기에서 얻은 회전장애이성질체 혼합물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 내지 1:9 헥산:에틸 아세테이트)로 분리하여 이성질체 A 및 이성질체 B를 얻었다.

실시예 3-이성질체 A

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.91 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.84-7.79 (3H, m), 7.70 (1H, s), 7.62 (1H, dd, J = 2.4, 8.2 Hz), 7.45 (1H, s), 7.31 (1H, d, J = 8.2 Hz), 3.83-3.75 (1H, m), 3.57-3.49 (1H, m), 3.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 1.51 (1H, d, J = 2.4 Hz), 1.42 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.04 (3H, d, J = 6.3 Hz).

MS (ESI) m/z: 529 [M+H]⁺

C₂₄H₂₅ClF₃N₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 529.1176, 실측치 529.1192.

체류시간: 5.1 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

실시예 3-이성질체 B

¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ: 9.93 (1H, s), 8.02-7.94 (4H, m), 7.89-7.82 (3H, m), 7.48 (1H, d, J = 7.8 Hz), 5.05 (1H, d, J = 5.9 Hz), 3.86-3.76 (1H, m), 3.35-3.27 (1H, m), 3.17 (3H, s), 1.92 (3H, s), 1.31 (3H, d, J = 6.8 Hz), 0.92 (3H, d, J = 6.4 Hz).

MS (ESI) m/z: 529 [M+H]⁺

C₂₄H₂₅ClF₃N₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 529.1176, 실측치 529.1179.

체류시간: 5.7 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

(실시예 4)

5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드

메틸 5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트의 제조

톨루엔/물 (10:1, 25 ml) 중 메틸 5-브로모-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트 (0.63 g, 2.8 mmol), (2-클로로-4-플루오로페닐)보론산 (1.0 g, 5.7 mmol), Na₂CO₃ (0.91 g, 8.6 mmol) 및 팔라듐 테트라키스(트리페닐포스핀) (0.17 g, 0.14 mmol)의 혼합물을 110℃에서 9.0시간 동안 질소 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석했다. 혼합물을 물 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (6:1 내지 1:1 헥산:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물 (634 mg, 84%)을 백색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 8.50-8.20 (1H, brs), 7.48 (1H, d, J = 3.1 Hz), 7.33 (1H, dd, J = 6.3, 8.6 Hz), 7.24 (1H, dd, J = 2.7, 8.2 Hz), 7.06 (1H, dt, J = 2.7, 8.2 Hz), 3.82 (3H, s), 1.57 (3H, s).

5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-1H-피롤-3-카복실산의 제조

메탄올 (10 ml) 중 메틸 5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-1H-피롤-3-카복실레이트 (0.64 g, 2.4 mmol)의 용액에 5N NaOH (10 ml)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 4.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 물을 첨가하고, Et₂O로 세정했다. 수득한 용액을 농축 HCl으로 중화시키고, 에틸 아세테이트로 추출했다. 유기 층을 물 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축하여 표제 화합물 (610 mg, 정량적)을 갈색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 11.67 (1H, s), 11.43 (1H, s), 7.57 (1H, dd, J = 2.7, 9.0 Hz), 7.43 (1H, dd, J = 6.3, 8.6 Hz), 7.38 (1H, d, J = 3.1 Hz), 7.31 (1H, dt, J = 2.7, 8.6 Hz), 2.05 (3H, s).

5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드의 제조

디클로로메탄 (30 ml) 중 5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-1H-피롤-3-카복실산 (0.61 g, 2.4 mmol)의 서스펜션에 옥살릴 클로라이드 (0.41 ml, 4.8 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 실온에서 2.0시간 동안 교반하고, 그후 용매를 회전식 증발기 상에서 제거했다. 이 갈색 잔류물에 THF (40 ml), 4-(메탄설포닐)아닐린 히드로클로라이드 (495 mg, 2.38 mmol), 및 DIEA (1.6 ml, 9.5 mmol)를 첨가했다. 용액을 실온에서 20시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 회전식 증발기 상에서 농축하고, 2N HCl (30 ml)을 잔류물에 첨가했다. 고형물을 여과하고, 2N HCl, 물 및 IPE로 세정하여 표제 화합물 (812 mg, 84%)을 갈색 고형물로서 얻었다.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 11.49 (1H, s), 9.94 (1H, s), 8.00 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.85 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.74 (1H, d, J = 3.1 Hz), 7.60 (1H, dd, J = 2.7, 9.0 Hz), 7.46 (1H, dd, J = 6.3, 8.6 Hz), 7.33 (1H, dt, J = 2.7, 8.6 Hz), 3.17 (3H, s), 2.12 (3H, s).

5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드의 제조

무수 DMA (8.0 ml) 중 5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드 (0.50 g, 1.2 mmol)의 용액에 나트륨 tert-부톡사이드 (0.27 g, 2.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 질소 하에서 교반했다. (4S,5S)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란 2,2-디옥사이드 (0.28 g, 1.8 mmol) in 무수 DMA (2.0 ml)을 용액에 첨가하고, 70℃에서 2.0시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 2N HCl (2.0 ml)을 첨가하고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 이 잔류물에 무수 THF (4.0 ml) 및 5N HCl (5.0 ml)을 첨가하고, 60℃에서 80분 동안 교반했다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 포화 탄산수소나트륨 및 염수로 세정하고, 그 다음 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (3:7 to 2:8 헥산:에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물의 회전장애이성질체 혼합물 (0.29 g, 50%)을 백색 고형물로서 얻었다.

MS (ESI) m/z: 479 [M+H]⁺

체류시간: 7.0분 (이성질체 A), 10.4분 (이성질체 B)

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

상기에서 얻은 회전장애이성질체 혼합물을 키랄 HPLC [칼럼: CHIRALPAK AD-H (20 mm × 250 mm), 용리액: 헥산-에탄올 (70:30, v/v)]로 분리하여 이성질체 A 및 이성질체 B를 얻었다.

실시예 4-이성질체 A

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.90 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.81 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.79 (1H, s), 7.47 (1H, s), 7.31-7.25 (2H, m), 7.10 (1H, dt, J = 2.7, 8.2 Hz), 3.80-3.70 (1H, m), 3.67-3.57 (1H, m), 3.06 (3H, s), 2.15 (3H, s), 1.59 (1H, d, J = 5.1 Hz), 1.52 (3H, d, J = 7.0 Hz), 0.98 (3H, d, J = 6.3 Hz).

MS (ESI) m/z: 479 [M+H]⁺

C₂₃H₂₅ClFN₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 479.1208, 실측치 479.1194

체류시간: 7.0 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매]

실시예 4-이성질체 B

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.91 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.82 (2H, d, J = 9.0 Hz), 7.76 (1H, s), 7.55 (1H, s), 7.32-7.21 (2H, m), 7.11 (1H, dt, J = 2.7, 8.2 Hz), 4.00-3.89 (1H, m), 3.69-3.60 (1H, m), 3.06 (3H, s), 2.15 (3H, s), 1.58 (1H, d, J = 7.4 Hz), 1.43 (3H, d, J = 6.7 Hz), 1.06 (3H, d, J = 6.3 Hz).

MS (ESI) m/z: 479 [M+H]⁺

C₂₃H₂₅ClFN₂O₄S [M+H]⁺에 대해 계산된 HRMS (ESI), 이론치 m/z 479.1208, 실측치 479.1207

체류시간: 10.4 min

키랄 HPLC 조건: AD-H(0.46 cm × 25 cm)

용리액: 헥산-EtOH [70:30 (v/v), 등용매].

하기 시험예에서, 1-(2-히드록시에틸)-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드를 가장 적합한 비교 화합물로서 선행기술 (WO 2006/012642)에 기재된 화합물로부터 선택하고 사용했다.

(시험예 1)

효모 전사인자 GAL4 (아미노 말단에 있는 147개의 아미노산에 해당)의 DNA 결합 도메인에 결합된 인간 미네랄코르티코이드 수용체 (hMR, NM_000901)의 리간드 결합 도메인 (LBD, 카복시 말단에 있는 대략 308개의 아미노산에 해당)을 갖는, GAL4-hMR 수용체를 발현하는 플라스미드 pM-hMR-LBD를 제조하였다. 루시퍼라아제 유전자를 포함하고, GAL4의 DNA 결합 도메인에 결합하는 서열 (UAS 서열)을 갖는 리포터 플라스미드 (예를 들어, STRATAGENE CLONING SYSTEMS, pFR-Luc)를 이용하여 리포터 분석을 수행하였다.

상기에서 수득한 플라스미드 pM-hMR-LBD 및 리포터 플라스미드를 리포펙션에 의해 인간 태아의 신장세포주 HEK293 내로 유전자 도입시켰다. 다음날, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하고, 활성탄에 의해 처리된 5% FBS를 함유하는 DMEM 배양 배지를 이용하여 화이트 96-웰 플레이트 (Costar)에 웰 당 95 마이크로리터로 분주하였다.

시험 화합물은 미리결정된 농도로 디메틸 설폭사이드에 용해시켜 사용하였고, 배양 배지로 적절히 희석된 실험 화합물을 최종 농도가 0.1%가 되도록 화이트 96-웰 플레이트 상의 세포에 첨가하였다. 시험 화합물을 첨가할 때, 1 nM 알도스테론도 같이 첨가하였다. 대조군 1의 웰 그룹은 디메틸 설폭사이드를 첨가하였고, 대조군 2의 웰 그룹은 1 nM 알도스테론을 첨가하였다. 첨가 후, 하룻밤 동안 배양하였다.

다음날, 배양 배지를 제거한 다음, 첨부된 문서에 따라 루시퍼라아제 기질 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)을 제조하여 50 마이크로리터씩 각 웰에 첨가하였다. 약 30분간 교반하고, Analyst (Molecular Devices)를 이용하여 각 웰의 발광량을 측정하여 루시퍼라아제 활성을 얻었다. 대조군 1의 루시퍼라아제 활성값을 0%로 간주하고 대조군 2의 루시퍼라아제 활성을 100%로 간주할 때, 시험 화합물 첨가군의 각각의 양에 대해 상대적인 루시퍼라아제 활성값을 나타낸 그래프를 작성하였다. 그래프로부터, 최대값을 나타내는 시험 화합물의 농도를 Imax (%)로 계산하고, Imax/2를 나타내는 농도를 ICmax50 (nM)로 계산하였다. ICmax50 값이 표 1에 나타나 있다.

(결과)

하기 (표 3)에 나타난 바와 같이, 본 발명의 회전장애이성질체와 관련하여, 회전장애이성질체들 중 하나만이 강한 활성을 가지고 있었고, 대응하는 회전장애이성질체 혼합물과 비교할 때 유의한 미네랄코르티코이드 수용체 길항 작용을 나타내었다.

시험 화합물	ICmax₅₀ (nM)	Imax (%)
비교 화합물	5.3	105
실시예 1	6.6	115
실시예 1-이성질체 A	2.9	117
실시예 1-이성질체 B	>1000	N.D.¹
실시예 2	6.2	88
실시예 2-이성질체 A	3.8	103
실시예 2-이성질체 B	>1000	N.D.¹
실시예 3	6.7	95
실시예 3-이성질체 A	4.6	108
실시예 3-이성질체 B	>1000	N.D.¹
실시예 4	10	106
실시예 4-이성질체 A	11	103
실시예 4-이성질체 B	>1000	N.D.¹
¹: 측정되지 않음

(시험예 2)

필리핀 원숭이 (Cynomolgus monkey, 수컷)를 사용하였고, 시험 화합물 투여 하루 전부터 단식시켰다.

투여 시료는 시험 화합물에 0.5% MC (메틸 셀룰로오스) 용액을 첨가하여 용량이 3 mg/2mL/kg이 되도록 제조하였다. 투여 시료 각각을 튜브를 이용하여 필리핀 원숭이에게 위장내로 투여하였다. 시료를 투여한 후, 약 5 mL의 0.5% MC를 투여하였다. 투여 시료 각각의 경우, 두 마리의 필리핀 원숭이로 이루어진 하나의 그룹에 투여하였다.

혈액 회수와 관련하여, 투여전과 투여 30분, 1, 2, 4, 6, 8, 24 및 48시간 후, 헤파린으로 처리된 유리 주사기를 이용하여 대퇴정맥으로부터 약 0.5 mL의 혈액을 회수하였다. 혈액을 원심분리 (1,700 × g, 15분, 4℃)하여 혈장을 수득하였다. 혈장은 전처리때까지 냉동고 (-20℃)에 보관하였다.

표준 용액 및 내부 표준 ("IS") 용액의 제조: 시험 화합물 각각을 DMSO (디메틸 설폭사이드)에 용해시켜 각각 10 mM의 용액을 제조하였다. 상기 화합물 용액 각각을 아세토니트릴로 희석하여 표준 용액을 제조하였다. 또한, 니플룸산 (niflumic acid; Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)을 2 mM의 농도로 DMSO에 용해시킨 다음, 아세토니트릴로 희석하여 2 μM의 IS 용액을 제조하였다.

혈장 시료의 전처리: 20 μL의 혈장 시료를 회수한 다음, 25 mL의 정제수, 100 mL의 아세토니트릴 및 100 μL의 메탄올을 첨가하였다. 검량선 (calibration curve)을 준비하기 위해, 25 μL의 정제수, 20 μL의 각각의 표준 용액 (아세토니트릴 용액), 80 μL의 아세토니트릴, 및 100 μL의 메탄올을 20 μL의 공(blank) 혈장에 첨가하였다. 40 μL의 IS의 아세토니트릴 용액을 시료 모두에 첨가한 후, 시료를 교반하고, 캡티바 필터 플레이트 (Varian, Inc.)를 이용하여 흡입한 다음, 여과물을 LC-MS/MS 분석을 위한 시료로 사용하였다.

시험 화합물의 정량 결정: 혈장내 농도를 각 시험 화합물에 대하여 LC-MS/MS 방법에 의해 분석하였다.

[HPLC 분석 조건]

HPLC: WATERS 2795 (Waters Corporation);

컬럼: CAPCELL PAK C8, 2.0 mm I.D. × 50 mm, 5 μm (Shiseido Co., Ltd.)

이동상: A = 5 mM 암모늄 아세테이트 수용액, B = 아세토니트릴

[MS/MS 분석 조건]

MS: Quattro micro API (Waters Corporation)

이온화 방법: 전기분무 이온화 ("ESI")

이온화 모드: 양성

검출 모드: MRM

분석: 약동학 매개변수를 WinNonlin Professional (Ver. 4.0.1, Pharsight Corporation)을 이용하여, 혈장 내 각 약물의 농도로부터 계산하였다. 여기에서, 비구획 모델 (noncompartment model)을 매개변수 계산을 위한 모델로 사용하였다.

(결과)

(표 4)에 나타난 바와 같이, 비교 화합물 및 하기에 열거된 실시예 화합물의 평가 결과, 높은 활성을 갖는 시험 실시예 1에 기술된 회전장애이성질체가 라세믹 형태인 비교 화합물과 비교할 때 상당히 개선된 혈장내 농도를 나타낸 것으로 밝혀졌다.

시험 화합물	AUC¹ (μg·h/mL)	Cmax² (μg/mL)
비교 화합물³	4.09	0.23
실시예 2-이성질체 A	30.32	1.28
실시예 3-이성질체 A	42.49	1.44
¹: AUC: 시간 곡선 대비 혈장 농도하 면적 (LC-MS/MS 방법에 의해 측정됨); ²: Cmax: 최대 농도 ³: 세 마리의 필리핀 원숭이가 사용됨

[산업상 이용가능성]

본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물의 회전장애이성질체는 특히 우수한 미네랄코르티코이드 수용체 길항 작용, 항고혈압 작용, 혈관확장 작용, 심장보호 작용, 신장병 억제 작용, 항동맥경화 작용 및 이뇨 작용과 같은 약리 활성을 나타내며 안정성이 높으므로, 고혈압, 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 당뇨병성 신장병을 포함하는 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증 및 원발성 알도스테론증을 위한 예방 또는 치료 약물로서 유용하다.

Claims

화학식 I의 화합물; 또는 이의 N-산화물; 이의 부분입체이성질체, 라세미산염, 또는 이의 부분입체이성질체들 중 하나의 부분입체이성질체를 다른 부분입체이성질체보다 높은 농도로 포함하는 혼합물; 이의 회전장애이성질체, 회전장애이성질체들의 등량 혼합물(equal mixture), 또는 이의 회전장애이성질체들 중 하나의 회전장애이성질체를 다른 회전장애이성질체보다 높은 농도로 포함하는 혼합물; 또는 상기 화합물들 중 어느 하나의 약제학적으로 허용가능한 염인 화합물:
[화학식 I]

상기 식에서,
R¹은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고;
R²은 2-히드록시-C4-C6 알킬 그룹을 나타내고;
R³은 할로게노 그룹, C1-C3 알킬 그룹, C1-C3 알콕시 그룹, 할로게노-C1-C3 알킬 그룹 또는 할로게노-C1-C3 알콕시 그룹을 나타내고;
R⁴은 수소원자, 할로게노 그룹 또는 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고;
R⁵은 C1-C3 알킬 그룹을 나타내고;
R⁶은 수소원자, 할로게노 그룹, C1-C3 알킬 그룹 또는 C1-C3 알콕시 그룹을 나타낸다.
제1항에 있어서, 회전장애이성질체 또는 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R¹는 메틸 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R²는 2-히드록시-1-메틸프로필 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R²는 (1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R³는 메틸 그룹, 클로로 그룹, 할로게노메틸 그룹 또는 할로게노메톡시 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R³은 클로로 그룹, 디플루오로메틸 그룹, 트리플루오로메틸 그룹, 디플루오로메톡시 그룹 또는 트리플루오로메톡시 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R³은 클로로 그룹 또는 트리플루오로메틸 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R⁴은 수소원자 또는 할로게노 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R⁴은 수소원자, 플루오로 그룹 또는 클로로 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R⁵는 메틸 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R⁶은 수소원자, 클로로 그룹 또는 메틸 그룹인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, R⁶은 수소원자인 화합물.
1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-[2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
또는 이의 N-산화물; 이의 부분입체이성질체, 라세미산염, 또는 이의 부분입체이성질체들 중 하나의 부분입체이성질체를 다른 부분입체이성질체보다 높은 농도로 포함하는 혼합물; 이의 회전장애이성질체, 회전장애이성질체들의 등량 혼합물, 또는 이의 회전장애이성질체들 중 하나의 회전장애이성질체를 다른 회전장애이성질체보다 높은 농도로 포함하는 혼합물; 또는 상기 화합물들 중 어느 하나의 약제학적으로 허용가능한 염인 화합물.
1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-5-[2-(트리플루오로메틸)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
5-[4-플루오로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
5-[4-클로로-2-(트리플루오로메틸)페닐]-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드;
5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸프로필]-4-메틸-N-[4-(메틸설포닐)페닐]-1H-피롤-3-카복사미드; 또는
이의 N-산화물; 이의 부분입체이성질체, 라세미산염, 또는 이의 부분입체이성질체들 중 하나의 부분입체이성질체를 다른 부분입체이성질체보다 높은 농도로 포함하는 혼합물; 이의 회전장애이성질체, 회전장애이성질체들의 등량 혼합물, 또는 이의 회전장애이성질체들 중 하나의 회전장애이성질체를 다른 회전장애이성질체보다 높은 농도로 포함하는 혼합물; 또는 상기 화합물들 중 어느 하나의 약제학적으로 허용가능한 염인 화합물.
제1항, 제2항, 제14항 및 제15항 중 어느 하나의 항에 따른 화합물의 회전장애이성질체로서, 상기 화합물의 회전장애이성질체들 중 다른 회전장애이성질체(들)에 비해서 가장 낮은 IC₅₀의 미네랄코르티코이드 수용체 길항제 활성 농도를 갖는 회전장애이성질체.
제1항, 제2항, 제14항 및 제15항 중 어느 하나의 항에 따른 화합물의 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는, 고혈압, 협심증, 금성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 신장병, 당뇨병성 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증 및 원발성 알도스테론증을 치료 또는 예방하기 위한 의약.
제1항, 제2항, 제14항 및 제15항 중 어느 하나의 항에 따른 화합물의 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 심장혈관 질환의 예방 또는 치료 약물.
제1항, 제2항, 제14항 및 제15항 중 어느 하나의 항에 따른 화합물의 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 고혈압의 예방 또는 치료 약물.
제1항, 제2항, 제14항 및 제15항 중 어느 하나의 항에 따른 화합물의 회전장애이성질체를 활성 성분으로서 포함하는 당뇨병성 신장병의 예방 또는 치료 약물.
제1항, 제2항, 제14항 및 제15항 중 어느 하나의 항에 따른 화합물 및 약리학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 또는 부형제를 포함하는, 고혈압, 협심증, 금성 관상동맥 증후군, 울혈성 심부전, 신장병, 당뇨병성 신장병, 동맥경화증, 뇌경색, 섬유증 및 원발성 알도스테론증을 치료 또는 예방하기 위한 약제학적 조성물.
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