KR101566490B1 - Process for preparing functional hoichoontang comprising natural herbs - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a preparing method of a soup for rejuvenation having various functions comprising a natural extract and, more specifically, to a preparing method of a soup for rejuvenation comprising a natural extract which mixes taste and nutrition as well as showing various functions such as an anti-oxidative action. According to the present invention, it has effects of anticipating a revenue increase of a manufacturer as well as satisfaction of consumers by providing a manufacturing standard about a producing method of a soup for rejuvenation having excellent taste and nutrition and showing various functions.

Description

천연 추출물을 포함하는 기능성 회춘탕의 제조 방법{Process for preparing functional hoichoontang comprising natural herbs}BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a process for preparing a functional rejuvenation herbal product comprising a natural extract,

본 발명은 천연 추출물을 포함하여 제조되어 다양한 기능성을 나타내는 회춘탕의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게 항산화작용 등 다양한 기능성을 나타낼 뿐만 아니라 맛과 영양이 어우러지도록 한 천연 추출물을 포함하는 회춘탕의 제조 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a variety of functionalities including a natural extract, and more particularly, to a method for producing a variety of functional products such as antioxidant activity and the like, And a manufacturing method thereof.

최근 산업 기술의 발전과 다양한 음식 소재의 개발로 인하여 식생활이 날로 개선되고 있는데, 이에 따라 정서에 부합되는 고유한 다양한 소재를 포함하면서도 기능성이 가미되는 조리 기술들이 속속 개발되고 있다.Recently, due to the development of industrial technology and development of various food materials, the eating habits have been improved all the time. Accordingly, cooking techniques including various unique materials matching the emotions and functionalities are continuously being developed.

예로부터 오리는 고급요리의 재료로 본초강목, 동의보감 등의 문허에 따르면 해독작용이 있고 고혈압, 동맥경화, 당뇨 등 성인병에 효과적이며, 고단백, 고열량 식품으로의 산후조리 및 환자 회복에 도움을 주는 것으로 알려져 있다. 오리고기 기름은 인체에 꼭 필요한 필수지방산인 리놀산, 아라키돈산, 리놀렌산 등을 다량 함유하고 있어, 피 속의 콜레스테롤을 억제하여 체내 산소 공급을 수월하게 한다. 오리고기는 또한 필수아미노 산과 무기질, 비타민 C, E, B1, B2, 칼슘, 인, 철, 칼륨 등 양질의 광물질 함량이 높아 최상의 영양공급원이다.Since ancient times, duck has been used as a high quality food, and it has a detoxifying effect according to the instructions of the main herb kangmok, gungbogak, etc., and is effective for adult diseases such as hypertension, arteriosclerosis and diabetes, and helps in postpartum cooking and recovery of high- It is known. Duck meat oil contains essential fatty acids such as linoleic acid, arachidonic acid, and linolenic acid, which are essential for human body, and it suppresses cholesterol in blood and facilitates oxygen supply to the body. Duck meat is also the best source of nutrients due to its high quality minerals such as essential amino acids and minerals, vitamins C, E, B1, B2, calcium, phosphorus, iron and potassium.

주지된 바와 같이 오리백숙은 육질이 연하고 맛과 영양이 풍부하여 보양 음식으로 서민들의 많은 사랑을 받고 있는 우리나라 전통음식의 하나이다. 그런데, 오리는 특유의 냄새가 많이 나는 단점이 있어 조리를 하는데 신중해야 한다. As is well known, Ducklip Sook is one of the traditional foods of Korea, which is rich in taste and nutrition and has a lot of people's love. However, the duck has a disadvantage that it has a distinctive smell, so be careful when cooking.

종래, 오리는 특유의 냄새를 제거하기 위하여 여러 가지 향이 많은 재료를 함께 넣어서 조리하였는데, 이러한 조리 수단들은 특유의 냄새를 확실하게 억제 또는 제거하지 못하였고, 영양에 있어서도 기대 이하였다. 그래서 최근에는 오리의 특유의 냄새를 제거하고 영양도 풍부한 조리방법이 개시되고 있다.Traditionally, ducks have been cooked with various flavorful ingredients in order to remove the characteristic odor. Such cooking means can not reliably suppress or remove the characteristic odor, and the nutritional value is also lower than expected. Therefore, recently, a cooking method rich in nutrition has been disclosed by removing the characteristic odor of ducks.

이에 관련된 기술을 보면, 한국 등록특허 제10-1232471호(2013.02.05.)호에는 오리의 뼈와 물을 질량기준 1:1 내지 3의 비율로 넣고 센불로 100℃ 기준으로 12시간 내지 24시간 끓여 오리 육수를 만드는 단계, 손질하여 머리와 내장과 털을 제거한 오리 고기를 한약재, 향신료, 소금과 함께 육수에 넣고 30 분간 100℃ 이상의 센불로 끓이는 단계를 구비하여 이루어지는 오리 백숙 조리 방법에 있어서, 상기 오리 고기를 센불로 끓이는 단계 전에 오리 고기를 발아곡물분을 분산시킨 발아곡물분 분산액에 1 시간 이상 침지시키는 연육 단계를 더 구비하여 이루어지는 오리 백숙 조리 방법 및 이를 이용한 오리 누룽지탕 조리 방법이 개시되어 있다. According to the related art, Korean Patent No. 10-1232471 (Feb. 23, 2013) discloses that duck bones and water are added in a ratio of 1: 1 to 3 by mass and heated at 100 ° C for 12 to 24 hours And boiling the duck meat with the hair, the viscera and the hair removed therefrom by boiling the duck meat with the medicinal herb, the spice, and the salt in boiling water for 30 minutes at a temperature of 100 ° C or higher, There is provided a method for preparing ducklings and a method for preparing ducklings using the ducklings, comprising the steps of: a step of dipping the ducklings in a dispersion of germinated cereal grains in which the ducklings are dispersed before the step of boiling the ducklings; .

이 기술에 의하면, 오리 고기를 본격적으로 센불로 조리하기 전에 다량의 효소를 포함하고 있는 발아곡물분 분산액에 침지시켜 단백질의 분해를 유발함으로써 오리 고기를 찌거나 삶아 국물을 함께 섭취하는 요리에서 이질적인 맛과 풍미가 섞이는 일이 없이 육질을 부드럽게 할 수 있고, 발아곡물분의 영양분을 섭치할 수 있고, 곡물과 함께 끓여 죽을 얻는 경우에 짧은 조리시간에 비해서 국물에 들어있는 풀기를 증가시켜 죽의 미감을 높일 수 있다고 한다.According to this technique, duck meat is immersed in a germinated grain dispersion containing a large amount of enzymes before being cooked in high heat to induce decomposition of protein, thereby boiling or boiling duck meat and eating soup together. It is possible to soften the meat without mixing with the flavor, to control the nutrients of the germinated cereal grains, and to obtain the boil with the grain, the loosening of the soup is increased compared to the short cooking time, It is said that it can increase.

또한, 한국 등록특허 제10-0656097호(2006.12.05.)에는 한약재추출물 용액을 이용한 한약재 향미가 부여된 오리장육의 제조방법이 개시되어 있는데, 특히 각종 한약재로 만든 추출물(엑기스)용액을 이용하여 오리를 조림 조리하여 장육을 제공할 수 있고, 맛이 뛰어나면서도 오리의 잡내가 완전히 제거되고, 각종 한약재의 유익성분 및 향이 오리에 배도록 하여 건강에도 유익한 한약재 향미를 부여하기 위한 것으로서, 오리장육 조리 방법에 있어서, 물 40ℓ, 간장 7ℓ및 팔각향 400~500g, 헛개나무 1Kg, 가시오가피 800g, 녹차 100g, 황기 100g, 계피 100g, 감초 100g,마늘 1Kg, 생강600g, 홍고추 500g로 이루어지는 한약재의 향신재료를 대형 용기에 넣고 24시간 가열하여 한약재추출물용액을 제조하는 한약재추출물용액제조과정과; 오리의 깃털을 제거하여 조리 가능하도록 손질 처리하는 오리 전처리과정과; 한약재추출물용액 제조과정에서 만들어진 한약재추출물용액에 오리 10 마리를 넣고 2시간 가열하여 한약재추출물용액에 녹아있는 향 및 영양이 오리에 배어들도록 하는 오리장육조리과정과; 오리장육조리과정 이후 남아있는 육수에 카랴멜색소 150~200g를 첨가하는 과정과; 색소가 첨가되어 조리 완료된 오리를 건져내어 절단한 후 포장 처리하는 가공 및 포장과정으로 구성된 것을 특징으로 한다.Korean Patent No. 10-0656097 (Dec. 2006) discloses a method for producing ducklings having a herb medicine flavor imparted with a herbal medicine extract solution. In particular, a method for producing ducklings using various extracts The ducks can be cooked and cooked to provide the meat, and the taste of the duck is completely removed, and the beneficial components and flavors of various herbal medicines are distributed in the ducks, thereby imparting a herbal medicine flavor beneficial to health. , The spice material of herbal medicines comprising 40 liters of water, 7 liters of soy sauce and 400 to 500 grams of octagonal scent, 1 gram of hodgkin, 800 grams of green tea, 100 grams of green tea, 100 grams of hwanggi, 100 grams of cinnamon, 100 grams of licorice, 1 kilogram of garlic, 600 grams of ginger, Preparing a medicinal herb extract solution solution by heating in a container for 24 hours; A duck preprocessing step of removing the feathers of the ducks and preparing the ducks for cooking; A duck meat cooking process in which 10 ducks are added to the herbal medicine extract solution prepared in the process of preparing the herbal medicine extract solution and heated for 2 hours so that the flavor and nutrition dissolved in the herbal medicine extract solution are infiltrated into the duck; Adding 150 to 200 g of a caramel color to the remaining broth after the duck meat cooking process; And a processing step of picking up the duck after the coloring is completed to cut the duck and cutting the processed duck.

그러나, 음식 문화가 날로 발전하고 소비자의 기호가 점점 고급화되는 경향이 있어서 여전히 육류, 해산물 및 한약재 등을 포함하여 기능성이 가미된 보양식을 제공함에 있어서 철저한 위생관리 뿐만 아니라 정확한 제조 기준과 그 기능성이 가미된 제품의 개발이 요구되고 있다.However, as the food culture tends to evolve and consumers' preferences are becoming more and more advanced, there is still a need for thorough hygiene management in providing functional foods, including meat, seafood and herbal medicines, The development of a new product is required.

한국 등록특허 제10-1232471호(2013.02.05.)Korean Patent No. 10-1232471 (Feb. 한국 등록특허 제10-0656097호(2006.12.05.)Korean Patent No. 10-0656097 (December 5, 2006)

본 발명자는 오리고기를 대상으로 맛과 영양이 뛰어나고 기능성이 겸비된 요리 제품을 개발하기 위하여 예의 연구한 결과, 후술하는 바와 같이 다양한 한약재를 전처리하여 준비된 육수를 오리고기와 해산물에 적용하여 제조된 회춘탕이 맛과 영양이 어우러져 뛰어난 기호성을 제공함과 동시에 혈행개선 등의 다양한 기능성을 나타내는 것을 확인하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다.The inventors of the present invention have conducted intensive researches on duck meat to develop a culinary product having excellent taste and nutrition and functionality. As a result, the present inventors have found that, as described later, It was found that the taste and nutritional characteristics of the tang served to provide excellent palatability and at the same time exhibited various functionalities such as improvement of blood circulation and completed the present invention.

따라서, 본 발명의 목적은, 일면에 있어서, Accordingly, an object of the present invention is, in one aspect,

다양한 한약재를 전처리하여 준비된 육수를 오리고기와 해산물에 적용함으로써 맛과 영양이 어우러져 뛰어난 기호성을 제공함과 동시에 혈행개선 등의 다양한 기능성을 나타내는 회춘탕의 제조방법을 제공하는 것에 있다.It is an object of the present invention to provide a method for manufacturing a rejuvenating hot water which is prepared by pretreating various herbal medicines and applied to duck meat and seafood to provide various tastes and nutrients,

본 발명은, 추가의 일면에 있어서, 오리고기를 포함하는 육류와 해산물과 및 다양한 한약재를 처리하여 회춘탕을 제조함에 있어서 최적의 제조 표준을 제공하는 것에 있다.A further aspect of the present invention is to provide an optimal manufacturing standard for producing a rejuvenation bath by processing meat, seafood, and various herbal medicines containing duck meat.

본 발명에 의하면 맛이 영양이 뛰어나고 혈행개선 등의 다양한 기능성을 나타내는 회춘탕 제조에 대한 제조 표준을 제공함으로써 소비자의 만족감과 더불어 관련 제조 산업체의 수입 증가를 기대할 수 있는 효과가 있다.According to the present invention, it is possible to expect an increase in income of a related manufacturing industry as well as a satisfaction of a consumer by providing a manufacturing standard for manufacturing a rejuvenation bath which shows various functions such as an excellent nutrition and a blood circulation improvement.

도 1 내지 4는 시험군 및 대조군의 항산화 효능을 나타내는 그라프도이다.
도 5는 시험군 및 대조군의 폴리페놀의 함량을 나타내는 그라프도이다.
도 6은 플라보노이드 함량을 나타내는 그라프도이다.
도 7 및 9는 시험 시료의 밀도 측정 결과를 나타내는 그라프도이다.
도 10 내지 도 12는 피브린 클롯 에세이 결과를 나타내는 사진 및 그라프도이다.
도 13 및 도 14는 시험 시료의 트롬빈 에세이 결과를 나타내는 그라프도이다.
도 15 및 도 16은 시험 시료의 FXa 에세이 결과를 나타내는 그라프도이다.
도 17은 시험 시료의 항-혈전 활성 결과를 나타내는 사진 및 그라프도이다.
도 18은 트리부티린 플레이트 에세이 결과를 나타내는 사진이다.
도 19는 시험 시료의 칼슘재첨가 시간 에세이에 의한 결과를 나타내는 그라프도이다.
1 to 4 are graphs showing the antioxidant efficacy of the test group and the control group.
Figure 5 is a graph showing the content of polyphenol in the test group and the control group.
6 is a graph showing flavonoid content.
7 and 9 are graphs showing density measurement results of the test sample.
10 to 12 are photographs and graphs showing the result of the fibrin clot assay.
13 and 14 are graphs showing the results of thrombin assay of the test sample.
15 and 16 are graphs showing the results of the FXa assay of the test sample.
Fig. 17 is a photograph and a graphed view showing the result of anti-thrombogenic activity of the test sample. Fig.
18 is a photograph showing the results of a tributyrin plate assay.
19 is a graph showing the result of the calcium re-addition time assay of the test sample.

본 발명은, 일면에 있어서, 다양한 한약재를 전처리하여 준비된 육수를 오리고기와 해산물에 적용함으로써 맛과 영양이 어우러져 뛰어난 기호성을 제공함과 동시에 혈행개선 등의 다양한 기능성을 나타내는 회춘탕의 제조방법을 제공한다.In one aspect, the present invention provides a method for manufacturing a rejuvenating hot water which shows various functions such as blood circulation improvement, while providing excellent palatability by mixing seaweed prepared by pretreating various herbal medicines on duck meat and seafood by mixing with taste and nutrition .

본 발명은, 다른 일면에 있어서,According to another aspect of the present invention,

a) 엄나무, 가시오가피, 수삼, 도라지, 헛개나무, 황칠나무, 꾸지뽕 뿌리, 뽕뿌리, 녹두, 황귀, 당귀, 송담, 천궁, 생강, 대추, 마늘, 울금, 하수오 및 초석잠을 포함하는 원료를 전처리하는 단계;a) Pretreatment of raw materials including seedlings, gooseberries, ginseng, bellflower, hornbeam, yellowtail, cedarwood root, mulberry root, mung bean, thunderbolt, angelica, cassia root, ginger, jujube, garlic, ;

b) 상기 전처리된 원료를 통에 넣고 찬물을 가한 후 55℃~80℃를 유지하여 30분 내지 1 시간 30분 동안 열수 추출하는 단계;b) adding the pretreated raw material into a barrel, adding cold water, and maintaining hot water at a temperature of 55 to 80 ° C for 30 minutes to 1 hour and 30 minutes;

c) 상기 b) 단계에서 얻어진 열수 추출물 50~60중량%에 오리고기 15~25중량%와 바지락 1~2 중량%를 첨가하는 단계;c) adding 15 to 25% by weight of duck meat and 1 to 2% by weight of clam to 50 to 60% by weight of the hot-water extract obtained in step b);

d) 상기 c) 단계의 혼합물에 소금 0.01~0.04 중량%를 넣은 후 진공 상태로 20~25분 동안 센불로 가열한 후 서서히 압력을 낮추는 단계 ; 및 d) adding 0.01 to 0.04% by weight of salt to the mixture of step c), heating the mixture in a vacuum for 20 to 25 minutes, then gradually lowering the pressure; And

e) 상기 d) 단계의 가열된 혼합물에 문어 10~20중량%와 전복 3~5 중량%를 넣고 7~20분 동안 센불로 가열한 후 미나리를 첨가해 조리하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 한약재와 해산물을 이용한 오리탕의 제조 방법을 제공한다.e) adding 10 to 20% by weight of octopus and 3 to 5% by weight of abalone to the heated mixture in step d), heating the mixture for 7 to 20 minutes with high heat, and adding buttercup to cook the mixture. The present invention also provides a method for producing oritang using herbal medicines and seafood.

본 발명은, 추가의 일면에 있어서,The present invention, in a further aspect,

상기 원료의 혼합비는 정제수 100 중량부를 기준으로 엄나무 0.3~2 중량부, 가시오가피 0.3~2 중량부, 수삼 0.3~2 중량부, 도라지 0.3~2 중량부, 헛개나무 0.1~0.5 중량부, 황칠나무 0.1~0.5 중량부, 꾸지뽕뿌리 0.1~0.5 중량부, 뽕뿌리 0.1~0.5 중량부, 녹두 0.1~0.5 중량부, 황귀 0.1~0.5 중량부, 당귀 0.1~0.2 중량부, 송담 0.1~0.2 중량부, 천궁 0.1~0.2 중량부, 생강 0.1~0.2 중량부, 대추 0.1~0.2 중량부, 마늘 0.1~0.2 중량부, 울금 0.02~0.1 중량부, 하수오 0.02~0.1 중량부 및 초석잠 0.02~0.1 중량부인 것을 특징으로 하는 한약재와 해산물을 이용한 오리탕의 제조 방법을 제공한다.0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.1 to 0.5 parts by weight of hornblende, 0.1 to 0.5 parts by weight of horseradish tree 0.1 0.1 to 0.5 parts by weight of roots, 0.1 to 0.5 parts by weight of roots, 0.1 to 0.5 parts by weight of mulberry roots, 0.1 to 0.5 parts by weight of mung beans, 0.1 to 0.5 parts by weight of mulberry roots, 0.1 to 0.2 parts by weight of ginseng, 0.1 to 0.2 parts by weight of ginger, 0.1 to 0.2 parts by weight of jujube, 0.1 to 0.2 parts by weight of garlic, 0.1 to 0.2 parts by weight of garlic, 0.02 to 0.1 part by weight of ganoderma, 0.02 to 0.1 part by weight of sodium chloride and 0.02 to 0.1 part by weight of ground stone The present invention also provides a method for manufacturing oriental bath using herbal medicines and seafood.

이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described more specifically.

본 발명에서 사용되는 재료는 신선한 재료를 사용하는 것이 바람직한데, 먼저 주원료인 오리고기는 핏물을 제거하여 사용하는 것이 좋고, 바지락은 해캄을 해서 사용하고, 문어와 전복은 싱싱한 것이나 살아 있는 것을 엄선하여 사용한다.The raw materials used in the present invention are preferably fresh materials. First, duck meat, which is the main raw material, is preferably used by removing the blood, and the clam is used as the sea cucumber. The octopus and the abalone are selected freshly and alive use.

먼저, a) 원료를 전처리하는 단계에서는 엄나무, 가시오가피, 수삼, 도라지, 헛개나무, 황칠나무, 꾸지뽕 뿌리, 뽕뿌리, 녹두, 황귀, 당귀, 송담, 천궁, 생강, 대추, 마늘, 울금, 하수오, 초석잠을 포함하는 원료를 준비하여 각 재료의 특성에 맞게 전처리한다. First, a) a step of pretreating a raw material is carried out in a step of pretreating a raw material, such as a tree, a ginseng, a bellflower, a bellflower, a hornbeam tree, Prepare the raw materials including foundation stone sleep and preprocess according to the characteristics of each material.

엄나무는 독이 없고 염증 치료에 탁월한 효과가 있고, 관절염, 종기, 암, 피부병 등 염증질환에 탁월한 효과가 있고, 신경통에도 잘 들으며, 만성간염 같은 간장질환에도 효과가 크고, 늑막염, 풍습으로 인한 부종 등에도 좋은 효과가 있으며 진통작용도 상당하다고 알려져 있는데, 본 발명에서는 원목 생산 후 음지에서 자연 건조시킨 후 적당한 크기(예, 15cm)로 세절하여 사용한다.Pomegranate is not poisonous, has an excellent effect in the treatment of inflammation, has an excellent effect on inflammatory diseases such as arthritis, boils, cancer and skin disease, is well tolerated by neuralgia, has a great effect on hepatic diseases such as chronic hepatitis, Is also known to have a good effect and analgesic action is also significant. In the present invention, after natural wood is dried after drying, it is used in a suitable size (for example, 15 cm).

가시오가피는 항염증작용 및 진통, 해열작용이 있으며 심장질환에 영향을 주어 혈압을 낮추는 효과가 있다. 그리고, 불면증이나 피로회복에 좋은 작물이다. 본 발명에서는 잔가지를 음지에서 자연건조 시킨 후 마찬가지로 적당한 크기로 잘라서 사용하는 것이 좋다.It has anti-inflammatory, analgesic and antipyretic effects and has an effect on blood pressure by affecting heart disease. And it is a good crop for insomnia and fatigue. In the present invention, it is preferable to naturally dry the twig in a shade and cut it into a suitable size.

수삼은 잘 알려진 바와 같이, 인삼의 일종으로서 우리 인체에 갖가지 탁월한 약리적 효능을 발휘하는 원료로 널리 이용되고 있다. 특히, 수삼은 피로회복은 물론 체력증진 및 스트레스 이완 효과가 있고 혈액순환 촉진 작용, 노화방지, 혈중 알콜 농도 감소 및 분해작용, 위장 기능 개선, 항암작용, 간기능 보호, 기억력 증진, 강장 및 장기능 촉진 작용, 성인병 예방, 동맥경화 예방작용 등의 많은 효능이 알려져 있다. 수삼은 일정량을 구입하여 냉장보관 후 사용 전 세척한다.As well known, ginseng is widely used as a raw material showing excellent pharmacological effects to human body as a kind of ginseng. In particular, ginseng has the effects of improving physical strength and relaxing stress as well as restoring fatigue, improving blood circulation, preventing aging, decreasing blood alcohol and decomposing blood, improving gastrointestinal function, inhibiting cancer, protecting liver function, improving memory, Promoting action, prevention of adult diseases, prevention of arteriosclerosis and many other effects are known. Purchase a certain amount of fresh ginseng, store it in the refrigerator and wash it before use.

도라지는 당질, 칼슘, 철분이 많고 섬유질이 주요 성분을 이루고 뿌리에는 인삼의 주요 성분 가운데 하나인 사포닌이 함유되어 있어 식품이나 약재로 널리 쓰인다. 도라지는 사용전에 물에 담가 쓴 맛을 우려내고, 섬유질을 부드럽게 해주면 좋다.Platycodon is mainly composed of carbohydrate, calcium, iron, fiber, and saponin, which is one of the main components of ginseng. The bellflower is soaked in water before use.

이와 같은 엄나무, 가시오가피, 수삼 및 도라지는 정제수 100 중량부를 기준으로 0.3~2 중량부로 사용하는 것이 바람직하고, 0.5~0.6 중량부로 사용하는 것이 더욱 바람직하다.It is preferable to use 0.3 to 2 parts by weight, and more preferably 0.5 to 0.6 parts by weight, of these fruits such as raisins, raisins, ginseng and bellflower, based on 100 parts by weight of purified water.

헛개나무는 은은한 향기가 있고 단맛이 있어 먹을 수 있으며 음식맛을 한결 돋우고, 본초 강목에는 술을 썩히는 작용이 있다고 하며 생즙은 술독을 풀고 구역질을 멈추게 하는 것으로 알려져 있다. 헛개나무는 굵은 통목을 증기처리 후 건조하여 기계를 이용하여 20mm 정도로 슬라이스하여 사용하는 것이 좋다.Hovenia trees have a fragrant scent, they are sweet, they can be eaten, they enhance the taste of the food, and the main course has a function of drinking alcohol, and juice is known to dissolve the digestion and stop the nausea. It is recommended to use a slice of about 20mm by using a machine after steam treatment of a thick log of wood.

황칠나무는 인간의 질병의 치유 및 예방에 유용한 성분을 다량 함유하고 있고, 최근 들어 다양한 기능성 연구결과가 보고되고 있어 기능성 식품에 바람직하게 사용될 수 있다. 황칠나무는 통목이나 가지를 증기처리 후 건조하여 기계를 이용 10mm 정도로 슬라이스하여 사용하는 것이 좋다.Hwangchujang contains a large amount of components useful for the healing and prevention of human diseases, and recently, various functional research results have been reported and can be preferably used for functional foods. It is good to use the dried wood of the wild forest after steam treatment of the manchis or branches and to slice about 10mm by using the machine.

또한, 꾸지 뽕나무는 약명으로 상황, 상백피 또는 저살자로도 불리워진다. 이 뽕나무는 여성의 통경, 어혈, 신장결석 등을 없애고 자궁암, 자궁근종 등에 특효가 있는 것으로 알려져 있으며, 줄기, 줄기껍질, 잎, 열매, 뿌리가 약재로 쓰이는 데, 본 발명에서는 꾸지뽕 뿌리를 수확한 후 자연 건조하고, 길이 10cm 정도로 잘라 사용한다.In addition, the mulberry tree is also called as a situation, a bark, or a bark. This mulberry is known to have a special effect on uterine cancer, uterine myoma and the like by eliminating a female's blood flow, eosinophilia and kidney stones. The stem, stem skin, leaf, fruit and root are used as medicines. In the present invention, After drying naturally, cut to about 10cm in length is used.

뽕뿌리는 생약명으로 상백피라 불리우는데, 껍질에는 다양한 성분들과 들어있어 해열, 진해, 사폐평천(瀉肺平喘), 행수소종(行水消腫) 등에 좋은 약재로 알려져 있다. 뽕뿌리는 찌고 말린 것을 사용하는 것이 좋다.Mulberry root is a generic name called mulberry, and its shell contains various ingredients and is known to be a good medicine for fever, shinhae, 淸肺 平 喘, It is good to use the roasted and dried ones.

녹두는 특히 오리 고기와 잘 어울리는 음식으로 오리 요리에 많이 사용되는 성분이다. 녹두는 생산 후 자연 건조시켜 사용하는 것이 좋다.Mung bean is a food that is especially well suited to duck meat, and is widely used in duck dishes. It is recommended to use natural dried after production.

황기는 인삼과 더불어 기를 보호하는 대표적인 약재로 피부 등의 인체를 둘러싸고 있는 표피를 충실하게 하여 기가 밖으로 빠져나가는 것을 막는 동시에 식은땀을 그치게 하고 정기를 보전시키며, 양기를 원활히 순환하게 하여 몸 안의 불필요한 수분을 밖으로 배출시키고 종기 등을 치료한다. 전체적으로 식은땀이나 땀을 많이 흘리는 사람들, 즉 몸이 허약한 사람들에게 기를 보한다. 황귀는 생산 후 말려서 찌기를 3회 정도 반복하여 사용하는 것이 좋다.Hwanggi is a representative medicinal material that protects ginseng along with ginseng. It keeps the epidermis surrounding the body of the skin faithful and prevents the gigas from escaping out. It keeps the sweat from stopping, keeps the period and keeps the periodic cycle smoothly, To the outside and treat the boil. Overall, the eclipses are sweating or sweaty people, that is, those who are weak in the body. It is recommended to use it repeatedly about 3 times after it is dried after production.

이와 같은 헛개나무, 황칠나무, 꾸지뽕 뿌리, 뽕뿌리, 녹두 및 황귀는 정제수 100 중량부를 기준으로 각각 0.1~0.5 중량부로 사용하는 것이 좋고, 0.3 중량부로 사용하는 것이 가장 바람직하다.It is preferable to use 0.1 to 0.5 parts by weight of each of Hovenia dulcis Houttuynia cordata, Hwangchulchil, Cucurbitaceae root, Mulpongi, Mung bean and Saururus, based on 100 parts by weight of purified water, and most preferably 0.3 part by weight.

당귀는 껍질과 뿌리가 약재로 사용되는데, 몸을 따뜻하게 해주고 피의 막힘을 풀어주어 혈액순환을 원활히 해주고 강장, 진통, 진정 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 당귀는 향이 너무 강하므로 건조 후 낮은 온도에서 찌고 말려서 사용한다.Angelica is used as a medicinal substance in shells and roots. It warms the body and releases blood clogging to smooth blood circulation, and it is said to be effective in tonic, analgesic, sedative and so on. Angelicae is so fragrant that it is dried and dried at low temperature.

또한, 송담은 소나무 담쟁이덩굴로서 당뇨병 치료효과 관절염, 근육통에 효과 어혈제거, 원기회복, 양기충전, 체질개선효과, 기침, 가래, 요통, 편두통 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 본 발명에서는 굵은 송담을 걷어 껍질을 벗기고 증기처리 후 건조하여 사용하는 것이 좋다.Also, it is known that Songdam is effective for treating diabetes mellitus arthritis, muscle pain, ejaculation, rejuvenation, amniotic filling, improvement of constitution, cough, sputum, back pain and migraine. In the present invention, it is preferable to remove the husks and remove the husks, steam treatment, and drying.

천궁은 껍질과 뿌리가 약재로 사용되는데, 두통, 복통에 좋고 피순환을 원활히 하는 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 천궁은 향이 너무 강한 부분이 있어서 건조 후 낮은 온도에서 찌고 말려서 기계로 슬라이스하여 사용하는 것이 좋다.The skin and root of the celestial gland are used as medicines, which are good for headache, abdominal pain, and are said to have an effect of smooth circulation. It is recommended to use sliced and dried machine at low temperature.

생강은 동의치료에서는 찬기운을 내보내며 구역을 멈추고 가래를 내보내는 효과가 있어 추위로 인한 머리아픔, 구역, 위가 차고 배가 아픈데, 기침 등에 사용되고 있다. 또한 방향성 건위약, 입맛을 돋우는 약으로 신진대사 기능을 촉진한다. 생강은 수확 후 토굴에 저장된 것을 세척 후 껍질을 벗기고 사용한다.Ginger in the treatment of bronchial ginga, the effect of stopping the area and sending out the sputum is cold, headache, nausea, stomachache, stomachache, cough is used. It also promotes metabolic function as a directional medicine, a placebo, and an appetizer. After harvesting, ginger is stored in the crypts and washed and then peeled.

대추는 비타민류나 식이성섬유, 플라보노이드, 미네랄 등은 노화를 방지하는 동시에 항암 효과, 특히 대추 안에 함유하고 있는 베타카로틴은 체내의 유해 활성산소를 여과, 흡착 제독하는 작용을 하여 노화를 방지, 항암, 심장질환 등 성인병 예방에 역할을 한다고 알려져 있다. 대추는 음지에서 자연건조 한 것을 사용하는 것이 좋다.The jujube contains vitamins, dietary fiber, flavonoids, and minerals that prevent aging and anti-cancer effects. In particular, beta-carotene, which is contained in jujube, acts as an anti-aging agent by filtering and adsorbing harmful active oxygen, It is known to play a role in prevention of adult diseases such as heart disease. Jujube is naturally dried in the shade is good to use.

마늘은 항균, 항암, 소염작용이 뛰어나고 비위를 따뜻하게 해 주는 식품으로서, 소화를 돕고 남성에게는 정력을 보강해 주기도 하여 대체의학 식품으로 많이 이용됨은 물론 마늘에는 단백질과 지방, 탄수화물, 카로틴, 비타민 등 매우 다양한 영양소가 들어 있어 음식을 만드는 양념으로 많이 사용된다. 마늘은 수확 후 저장된 마늘을 껍질을 제거 후 통으로 사용한다.Garlic is an anti-bacterial, anti-cancer, and anti-inflammatory food, and it helps to digest and helps digestion. It strengthens men's energy and it is widely used as an alternative medicine food. Garlic is rich in protein, fat, carbohydrate, carotene and vitamins. It contains a variety of nutrients and is often used as a spice to make food. Garlic is used to remove garlic after harvesting and remove the skin.

상기 당귀, 송담, 천궁, 생강, 대추 및 마늘은 정제수 100 중량부를 기준으로 0.1~0.2 중량부의 범위로 사용되는 것이 좋다.It is preferable that the Angelica gigas Nakai, Songkam, Seokgung, Ginger, Jujube and Garlic are used in the range of 0.1 to 0.2 parts by weight based on 100 parts by weight of purified water.

상기 울금은 간장제 질환인 담낭염, 담도염, 담석증에 효과가 좋으며, 율무는 약해진 비(脾)의 기능을 강하게 하고, 소염, 해열, 진통효과가 있다고 알려져 있다. 울금은 수확 후 자연건조하여 사용한다.It is known that Ulgum is effective against hepatitis diseases such as cholecystitis, cholangitis, and gallstones, and Ulmu strengthens the function of weakened spleen and has anti-inflammatory, antipyretic and analgesic effects. Ulgum is dried by natural drying after harvesting.

하수오는 강정, 강장, 간을 보하고, 피를 맑게 해주는 작용을 하며, 흰머리를 검게하고, 차전자(질경이)는 이뇨, 정간, 해열, 간염, 혈뇨, 대하에 효과가 좋다. 마찬가지로 하수오도 쪄서 말린 후 사용한다.It is effective for diarrhea, diarrhea, paralysis, hepatitis, hemorrhoids, epilepsy, and so on. Likewise, it is steamed and dried and then used.

초석잠은 석잠풀의 뿌리를 제외한 식물체 전체를 지칭하는 약용식물로서, 한방에서 미열이 있고 배뇨가 곤란하며 몸이 붓는 증세에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 초석잠은 쪄서 말린 후 사용한다. 울금, 하수오, 및 초석잠은 정제수 100 줄양부에 대하여 각각 0.02~0.1 중량부로 사용하는 것이 좋다.Corundum sleep is a medicinal plant that refers to the whole plant except for the root of the persimmon grass. It is known that it has fever in one room, it is difficult to urinate, and it is effective in swelling of the body. The foundation stone sleep is used after steamed and dried. It is preferable to use 0.02 to 0.1 part by weight of each of 100 parts of purified water,

이어서, 이와 같이 전처리된 원료들은 b) 단계에서 상기 설정한 배합비로 혼합한 후 통에 넣고 중온에서 추출하여 육수를 우련내다. 추출 온도는 55℃~80℃가 적당하고, 추출 시간은 30분 내지 1 시간 30분이 바람직하다.Subsequently, the raw materials thus pretreated are mixed in the mixing ratio set in the step b), and then they are poured into a pail and extracted at a middle temperature to produce broth. The extraction temperature is suitably from 55 to 80 DEG C, and the extraction time is preferably from 30 minutes to 1 hour and 30 minutes.

이어서 이와 같이 우려낸 열수 추출물 50~60중량%에 잘 손질된 오리고기 15~25중량%와 바지락 1~2 중량%를 첨가한 후 곧바로 사용하거나 또는 저온(예, 4℃)에서 1시간 내지 하룻밤 동안 숙성시켜 육질을 연하게 하고 냄새를 제고하고 육수가 골고루 스며들게 하는 것이 바람직할 수 있다. 이어서, 소량의 소금(예, 0.01~0.04 중량%)를 가한 후 후 진공 상태에서 20~25분 동안 센불(예, 100 ~ 150 ℃)로 가열한다. 그 후 서서히 압력을 낮추어 준다. Subsequently, 15 to 25% by weight of well-prepared duck meat and 1 to 2% by weight of clam are added to 50 to 60% by weight of the above-mentioned hot-water extract, or they are used immediately or at a low temperature (for example, 4 ° C) It may be desirable to aged to soften the flesh, improve the smell, and soak the broth evenly. Subsequently, a small amount of salt (for example, 0.01 to 0.04% by weight) is added and then heated to a high vacuum (for example, 100 to 150 ° C) for 20 to 25 minutes. Then gradually reduce the pressure.

그 다음 가열된 혼합물에 문어 10~20중량%와 전복 3~5 중량%를 넣고 7~20 분 정도 센불(예, 100 ~ 150 ℃)로 가열한 후 미나리를 적당량 첨가한다.Next, 10 to 20% by weight of octopus and 3 to 5% by weight of abalone are added to the heated mixture and heated to a high temperature (for example, 100 to 150 ° C) for 7 to 20 minutes, and then an appropriate amount of parsley is added.

한편, 미나리는 각종 비타민과 무기질, 섬유질이 풍부한 알칼리성 식품으로 해독과 혈액을 정화하는데 탁월한 효능이 있으며, 몸 안의 독과 숙취 해소의 효능이 있다. 본 발명에서는 그 양은 특별히 한정할 필요는 없고 적당량을 사용하는데, 저작감의 측면에서 약간만 데쳐서 요리하여 먹는 것이 좋다.On the other hand, buttercup is an alkaline food rich in various vitamins, minerals and fibers, and has excellent efficacy in detoxifying and cleansing blood, and has the effect of eliminating poison and hangover in the body. In the present invention, the amount thereof is not particularly limited and an adequate amount is used.

상기 설명과 같이 한약재를 사용하여 추출한 육수는 조리되는 오리에 스며들도록 함으로서, 오리의 특유의 냄새를 제거함은 물론 오리를 사람이 먹었을 때 각종 한약재가 갖고 있는 성분을 섭취할 수 있도록 한 것이다.As described above, the broth extracted by using the herbal medicine material allows the duck to permeate into the cooked duck, thereby eliminating the characteristic odor of the duck, and allowing the duck to ingest various herbal ingredients when the person eats it.

위와 같은 방법에 의해 제조되는 본 발명에 따른 회춘탕은 후술하는 시험예의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이 맛과 영양이 어우려져 만족할 만한 소비자의 반응을 불러 일으킬 뿐만 아니라 항산화작용, 혈행개선 효능, 항고지혈 효과, 항혈전효과 등의 다양한 기능성을 나타내므로 성인병의 예방에 매우 적합한 식품임을 확인할 수 있다.
As can be seen from the results of the test examples described later, according to the present invention produced by the above method, the taste and nutrition are mixed with each other to cause a satisfactory consumer reaction. In addition to the antioxidative action, blood circulation improving effect, , Anti-thrombotic effect, and the like, it can be confirmed that it is a food suitable for prevention of adult diseases.

<실시예><Examples>

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .

실시예 1~4: 회춘탕의 제조Examples 1 to 4: Preparation of Reishi

엄나무, 가시오가피, 수삼, 도라지, 헛개나무, 황칠나무, 꾸지뽕 뿌리, 뽕뿌리, 녹두, 황귀, 당귀, 송담, 천궁, 생강, 대추, 마늘, 울금, 하수오 및 초석잠을 포함하는 원료를 특성에 알맞게 전처리한 후, 다음의 표 1에 나타낸 바와 같은 양으로 혼합한 후, 정제수를 넣고 60℃에서 1시간 동안 우려내어 열수 추출물을 얻었다.The raw material including the seeds of the wood, the goose ginseng, the fresh ginseng, the bellflower tree, the hornbeam tree, the germany tree, the ginger root, the ginger root, the mungbean root, the mung bean, the thunderbolt, After the pretreatment, they were mixed in amounts as shown in the following Table 1, and purified water was added thereto, and hot water extracts were obtained at 60 ° C for 1 hour.

실시예1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 실시예 4Example 4 비교예 Comparative Example 엄나무A tree 3.0g3.0 g 5.6g5.6 g 15.2g15.2 g 20g20g 5.0g5.0g 가시오가피A goose 3.0g3.0 g 5.6g5.6 g 15.2g15.2 g 20g20g -- 수삼 Ginseng 2.0g2.0 g 5.6g5.6 g 15.2g15.2 g 3.0g3.0 g 3.0g3.0 g 도라지 Bellflower 2.0g2.0 g 5.6g5.6 g 15.2g15.2 g 3.0g3.0 g 1.0g1.0 g 헛개나무 Hinoki 1.0g1.0 g 2.8g2.8 g 2.8g2.8 g 5.0g5.0g -- 황칠나무Woodwort 1.0g1.0 g 2.8g2.8 g 2.8g2.8 g 5.0g5.0g -- 구지뽕뿌리Gojipong roots 1.0g1.0 g 2.8g2.8 g 2.8g2.8 g 5.0g5.0g 5.0g5.0g 뽕뿌리Mulberry roots 1.0g1.0 g 2.8g2.8 g 2.8g2.8 g 5.0g5.0g -- 녹두green gram 1.0g1.0 g 2.8g2.8 g 2.8g2.8 g 5.0g5.0g 2.8g2.8 g 황기Hwanggi 1.0g1.0 g 2.8g2.8 g 2.8g2.8 g 5.0g5.0g 1.0g1.0 g 당귀Angelica 2.0g2.0 g 1.4g1.4 g 1.5g1.5 g 1.0g1.0 g 1.0g1.0 g 송담Sendam 2.0g2.0 g 1.4g1.4 g 1.5g1.5 g 1.0g1.0 g -- 천궁Celestial 2.0g2.0 g 1.4g1.4 g 1.5g1.5 g 1.0g1.0 g 1.0g1.0 g 생강ginger 2.0g2.0 g 1.4g1.4 g 1.5g1.5 g 1.0g1.0 g 1.5g1.5 g 대추Jujube 2.0g2.0 g 1.4g1.4 g 1.5g1.5 g 1.0g1.0 g 1.0g1.0 g 마늘garlic 2.0g2.0 g 1.5g1.5 g 1.5g1.5 g 1.0g1.0 g 1.5g1.5 g 울금Kool 0.2g0.2 g 0.5g0.5 g 0.7g0.7g 1.0g1.0 g 0.5g0.5 g 하수오Sewage 0.2g0.2 g 0.7g0.7g 0.7g0.7g 1.0g1.0 g -- 초석잠Foundation stone sleep 0.2g0.2 g 0.7g0.7g 0.7g0.7g 1.0g1.0 g -- 정제수Purified water 1 Kg1 Kg 1 Kg1 Kg 1 Kg1 Kg 1 Kg1 Kg 1 Kg1 Kg

상기 열수 추출물에 잘 손질된 오리고기와 바지락을 다음의 표 2에 나타낸 양으로 첨가한 후 4℃에서 하룻밤 동안 숙성시켜 육질을 연하게 하고 냄새를 제고하고 육수가 골고루 스며들게 하였다. 이어서 조리 전에 소량의 소금를 가한 후 진공 상태에서 22분 동안 센불로 가열하였다. 그 후 서서히 압력을 낮추어 주고, 그 다음 가열된 혼합물에 문어와 전복을 넣고 10 분 동안 센불로 가열한 후 미나리를 첨가하여 회춘탕을 제조하였다.The duck meat and clam in this hot water extract were added in the amounts shown in the following Table 2 and then aged at 4 ° C overnight to soften the meat, improve the smell, and soak the broth well. Subsequently, a small amount of salt was added before cooking and then heated to a high temperature for 22 minutes under vacuum. Then, the pressure was gradually lowered, and then the octopus and the abalone were added to the heated mixture, and the mixture was heated to high temperature for 10 minutes and then added with parsley to prepare a rejuvenation bath.

실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 실시예 4Example 4 비교예 Comparative Example 열수 추출물Hot water extract 500g500g 560g560 g 580g580g 600g600g 550g550g 오리고기duck meat 150g150g 210g210g 230g230g 250g250g 210g210g 바지락 Clam 20g20g 14g14g 20g20g 10g10g 20g20g 문어 octopus 200g200g 140g140g 140g140g 150g150g 100g100g 전복 abalone 30g30g 35g35g 40g40g 50g50g 50g50g 소금Salt 0.1g0.1 g 0.3g0.3 g 0.2g0.2 g 0.4g0.4 g 0.2g0.2 g 미나리Parsley 200g 200g 100g100g 100g100g 150g150g 150g150g

실시예 5: Example 5:

실시예 2에서 제조된 회춘탕을 가열식 장치를 이용하여 추출한 후 동결건조하여 건조중량을 측정하고 PBS(phosphate buffered saline)에 현탁하여 후속 시험을 위한 시료(이하, 이 시료를 HCT라고 한다)로 사용하였다.
The rejuvenation bath prepared in Example 2 was extracted by using a heating device and then lyophilized to measure the dry weight and suspended in PBS (phosphate buffered saline) to be used as a sample for subsequent testing (hereinafter referred to as HCT) Respectively.

시험예 1: 항산화 효과 분석Test Example 1: Antioxidant effect analysis

1-1) DPPH(1,1-diphenol-2-picrylhydrazyl) 라디칼 제거 효능 시험1-1) DPPH (1,1-diphenol-2-picrylhydrazyl) radical removal efficacy test

유리 라디칼인 DDPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)는 자주색을 띄며 517 nm에서 최대 흡광도를 보이므로 유리 라디칼 제거 작용을 가지고 있는 물질과 반응시 노란색이 되면서 흡광도 값이 낮아지는 것을 이용하여 항산화 효과를 측정한다.The free radical DDPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) has a purple color and exhibits maximum absorbance at 517 nm. Therefore, when it reacts with a substance having free radical elimination action, Measure the effect.

실시예 5의 회춘탕의 시료의 시험관 내 항산화능 분석은 517 nm에서 최대 흡광도를 보이는 자유라디칼인 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)와 상기 시료를 반응시켜 노란색이 되면서 흡광도 값이 낮아지는 것을 이용하여 자유라디칼 억제에 대한 항산화 효과를 측정하였다. 도 1 내지 4는 시험군 및 대조군의 항산화 효능을 나타내는 그라프도이다. The in vitro antioxidant activity of the sample of Example 5 was determined by reacting the free radical, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), having the maximum absorbance at 517 nm with the sample, The antioxidant effect on free radical inhibition was measured using the lagging method. 1 to 4 are graphs showing the antioxidant efficacy of the test group and the control group.

그 결과, 시료를 처리하지 않은 DPPH의 OD517 value는 약 1.4로 확인되었으며, 실시예 5의 시료(HCT)에서는 각 농도에서 1.3429 (1 μg), 1.3371 (2 μg), 1.1799 (5 μg), 1.1243 (10 μg), 1.0838 (20 μg), 0.9422 (50 μg)의 OD517 value가 확인되었다(도 3 참조). 이러한 OD517 값의 결과는 아무것도 처리하지 않은 대조군(Control group, Con)을 100%로 볼 때, 실시예 2의 시료(HCT)는 1, 2, 5, 10, 20, 50 μg/ml 농도에서 자유라디칼을 5.02, 5.43, 16.55, 20.48, 23.34, 33.36% 억제시켰다(도 4 참조). 양성대조군 아스코르브산은 1, 2, 5, 10, 20, 50, 100, 200 μg/ml 농도에서 각각 1.152, 1.1842, 1.1839, 1.1627, 1.1291, 0.8778, 0.1714, 0.1452의 OD517 value가 확인되었으며(도 1 참조), 자유라디칼을 각 농도 순서대로, 17.91, 15.62, 15.64, 17.15, 19.55, 37.45, 87.79, 89.65% 억제시켰고, I50 농도는 62.465 μg로 확인되었다(도 2 참조). As a result, the OD 517 value of the untreated DPPH was found to be about 1.4. In the sample (HCT) of Example 5, 1.3429 (1 μg), 1.3371 (2 μg), 1.1799 OD 517 values of 1.1243 (10 μg), 1.0838 (20 μg) and 0.9422 (50 μg) were confirmed (see FIG. 3). The results of the OD 517 values are shown in Table 1, where the control (control group, Con) was 100%, the sample (HCT) of Example 2 had a concentration of 1, 2, 5, 10, 20 and 50 μg / ml Free radicals were inhibited by 5.02, 5.43, 16.55, 20.48, 23.34, 33.36% (see FIG. 4). The OD 517 values of positive control ascorbic acid were 1.152, 1.1842, 1.1839, 1.1627, 1.1291, 0.8778, 0.1714 and 0.1452 at 1, 2, 5, 10, 20, 50, 100 and 200 μg / ), Free radicals were inhibited in the order of 17.91, 15.62, 15.64, 17.15, 19.55, 37.45, 87.79, 89.65%, and the I 50 concentration was 62.465 μg.

본 발명의 시료(HCT)는 자유라디칼 억제 효능을 보였으며, 시료의 가장 높은 농도에서 양성대조군 Ascorbic acid 5 μg/ml와 50 μg/ml의 자유라디칼 억제율과 유사한 항산화능을 보였다.The HCT of the present invention showed free radical scavenging activity, and showed the antioxidant activity similar to that of the positive control ascorbic acid of 5 μg / ml and 50 μg / ml of free radicals at the highest concentration of the sample.

1-2) 총 폴리페놀 함량 분석1-2) Analysis of total polyphenol content

총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법에 따라 실시예 5의 시료 0.1 g에 메탄올 10 ㎖을 가하여 70℃에서 30분 동안 추출한 후 1 ㎎/㎖로 희석하여 사용한다. 검액 50 ㎕에 증류수 650 ㎕를 넣은 후 Folin-Denis reagent를 50 ㎕가하여 3분 동안 실온에서 반응시킨다. 반응시킨 후 10% Na2CO3 포화용액을 100 ㎕을 첨가하고, 최종 볼륨을 1 ㎖로 맞추기 위해 증류수 150 ㎕을 넣어 잘 혼합시킨다. 37℃ 수조에서 1 시간 동안 반응시킨 후 UV-Vis 분광광도계를 이용하여 725 ㎚에서 흡광도를 측정한다. 공시험은 시료 용액 대신 메탄올 용액을 동일하게 처리하며, 표준곡선은 탄닌산의 농도를 0∼500 ㎍/㎖이 되도록 하고 이로부터 총 페놀 함량을 구한다. 그 결과를 도 5에 나타냈다. 도 5는 시험군 및 대조군의 폴리페놀의 함량을 나타내는 그라프도이다.The total polyphenol content is determined by adding 10 ml of methanol to 0.1 g of the sample of Example 5 according to the Folin-Denis method, extracting at 70 캜 for 30 minutes, and diluting to 1 mg / ml. Add 650 μl of distilled water to 50 μl of the sample solution, add 50 μl of Folin-Denis reagent, and allow to react at room temperature for 3 minutes. After the reaction, 100 μl of a 10% Na 2 CO 3 saturated solution was added, and 150 μl of distilled water was added to adjust the final volume to 1 ml. After reacting in a 37 ° C water bath for 1 hour, the absorbance is measured at 725 nm using a UV-Vis spectrophotometer. The blank test is carried out in the same manner as in the case of the methanol solution except that the standard curve is such that the concentration of tannic acid is from 0 to 500 μg / ml and the total phenol content is obtained therefrom. The results are shown in Fig. Figure 5 is a graph showing the content of polyphenol in the test group and the control group.

도 5에서 확인되는 바와 같이, 본 발명의 시료(HCT)에서 폴리페놀 함량이 확인되었고, 3.3 ± 0.22 mg/g의 값을 보였다. 이는 붉은 고추 (7.5 mg/g), 땅콩 (5.2 mg/g), 녹차 잎 (4.2 mg/g), 홍삼 (3.9 mg/g), 톳 (3.9 mg/g), 수삼 (3.6 mg/g), 들깨 (3.6 mg/g) 보다 다소 낮았지만, 보리 (2.9 mg/g), 잣 (2.7 mg/g), 인삼 (2.7 mg/g), 피망 (2.4 mg/g), 블루베리 (2.4 mg/g), 유자 (2.4 mg/g), 포도 (2.0 mg/g), 천문동 (1.9 mg/g), 파프리카 (1.5 mg/g), 생강 (1.5 mg/g), 표고버섯 (1.4 mg/g), 미역 (1.3 mg/g), 연근 (1.2 mg/g), 목이버섯 (1.1 mg/g), 복분자 (0.8 mg/g), 사과 (0.7 mg/g) 보다 높은 폴리페놀 함량을 보였다.
As can be seen in FIG. 5, the content of polyphenols in the sample of the present invention (HCT) was found to be 3.3 ± 0.22 mg / g. (3.9 mg / g), red pepper (7.5 mg / g), peanut (5.2 mg / g), green tea leaves (4.2 mg / g) (2.9 mg / g), pine nut (2.7 mg / g), ginseng (2.7 mg / g), green pepper (2.4 mg / g) and blueberry (2.4 mg / g) (1.5 mg / g), mushroom (1.4 mg / g), citrus fruits (1.5 mg / g), citrus fruits ), Seaweed (1.3 mg / g), lotus root (1.2 mg / g), thymus mushroom (1.1 mg / g), bokbunja (0.8 mg / g) and apple (0.7 mg / g).

1-3) 총 플라보노이드 함량 분석1-3) Total flavonoid content analysis

총 플라보노이드 함량은 Davis 등의 방법에 따라, 추출물 0.1 g에 메탄올을 10 ㎖을 가하여 70℃에서 30분 동안 추출 한 후 1 ㎎/㎖로 만들어 사용한다. 검액 100 ㎕에 1 ㎖의 에틸렌글리콜을 첨가하고 다시 1N NaOH 100 ㎕을 넣어 잘 혼합시켜 37℃ 수조에서 1시간 반응시킨 후 UV-Vis 분광광도계를 사용하여 420 ㎚에서 흡광도를 측정한다. 공시험은 시료 용액 대신 methanol 용액을 동일하게 처리하였으며, 표준곡선은 naringin의 농도를 0~300 ㎍/㎖이 되도록 하여 작성하고 이로부터 총 플라보노이드 함량을 구하고 그 결과를 도 6에 나타내었다. 도 6은 플라보노이드 함량을 나타내는 그라프도이다.Total flavonoid content is determined by Davis et al., And 0.1 g of the extract is added with 10 ml of methanol and extracted at 70 ° C for 30 minutes to make 1 mg / ml. Add 1 ml of ethylene glycol to 100 μl of the sample solution, add 100 μl of 1N NaOH, mix well and incubate in a 37 ° C water bath for 1 hour. Measure the absorbance at 420 nm using a UV-Vis spectrophotometer. In the blank test, the methanol solution was treated in place of the sample solution, and the standard curve was prepared so that the concentration of naringin was 0 to 300 μg / ml. From this, the total flavonoid content was determined, and the result was shown in FIG. 6 is a graph showing flavonoid content.

시험 시료(HCT)의 플라보노이드 함량은 1.555 ± 0.113 mg/g의 값을 보였으며, 호두 (8.8 mg/g), 수삼 (4.9 mg/g), 붉은 고추 (4.3 mg/g), 김 (4.2 mg/g), 복분자 (3.8 mg/g), 유자 (3.3 mg/g), 톳 (2.6 mg/g), 땅콩 (2.5 mg/g), 다시마 (2.5 mg/g), 대추 (2.2 mg/g), 들깨 (1.9), 잣 (1.6) 보다 낮거나 다소 낮았지만, 보리 (1.5 mg/g), 녹차 잎 (1.5 mg/g), 어성초 (1.4 mg/g), 감귤 (1.2 mg/g), 블루베리 (1.2 mg/g), 감 (1.2 mg/g), 참깨 (1.2 mg/g), 인삼 (1.1 mg/g), 토종벌꿀 (1.1 mg/g), 표고버섯 (1.0 mg/g), 우엉 (1.0 mg/g)과 유사하거나 높은 플라보노이드 함량을 보였다.
The flavonoid content of the test sample (HCT) was 1.555 ± 0.113 mg / g, and the content of walnuts (8.8 mg / g), ginseng (4.9 mg / g), red pepper (4.3 mg / (2.5 mg / g), peanut (2.5 mg / g), jujube (2.2 mg / g) (1.5 mg / g), green tea leaves (1.5 mg / g), greens (1.4 mg / g), citrus fruits (1.2 mg / g) (1.2 mg / g), sesame (1.2 mg / g), ginseng (1.1 mg / g), native honey (1.1 mg / g) and mushroom (1.0 mg / , And burdock (1.0 mg / g), respectively.

시험예 2: 항혈전 효과 시험Test Example 2: Anti-thrombotic effect test

2-1) 투르비디티 에세이2-1) Tourbird essay

피브린 클롯의 밀도를 실시간 추적하여 시료의 억제활성을 분석한다. 1% 인간 피브리노겐 (100 mM NaCl을 함유하는 50 mM Tris-HCl (pH 7.4) 중에서 준비함) 90 μl에 10 U/ml 트롬빈 10 μl과 다양한 농도의 시료를 동시에 첨가한 후 수회 피펫팅하여 완전히 섞은 혼합물을 96-웰 마이크로플레이트에 부하하여 24시간 동안 350nm와 405nm로 측정한다. 대조군은 시료를 첨가하지 않은 혼합물을 같은 조건으로 반응시킨 후 측정한다. 마이크로플레이트 판독기(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 측정한다. 실시예 5의 시료와 피브린 클롯 형성의 주요 인자들을 동시에 처리 후 405 nm에서 피브린 클롯을 실시간 추적하여 동·식물성 유래 추출물의 피브린 클롯 억제효능을 분석하였다. 그 결과를 도 7 내지 도 9에 나타냈다. 도 7 및 9는 시험 시료의 밀도 측정 결과를 나타내는 그라프도이다.Analyze the inhibitory activity of the sample by real time tracking of the density of the fibrin clot. 10 μl of 10 U / ml thrombin and samples of various concentrations were simultaneously added to 90 μl of 1% human fibrinogen (prepared in 50 mM Tris-HCl (pH 7.4) containing 100 mM NaCl) and then pipetted several times to obtain a completely mixed mixture Is loaded into a 96-well microplate and measured at 350 nm and 405 nm for 24 hours. Controls are prepared by reacting mixtures without added samples under the same conditions. Using a microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif., USA). The fibrin clot inhibitory effect of the extract from the plant-derived plant was analyzed by simultaneously monitoring the fibrin clot formation factors and the sample of Example 5 simultaneously at 405 nm. The results are shown in Fig. 7 to Fig. 7 and 9 are graphs showing density measurement results of the test sample.

그 결과, 인간 피브리노겐과 인간 트롬빈만 반응시킨 음성대조군에서 60분 동안 지속적으로 피브린 클롯의 밀도가 증가하여 약 0.5~0.43의 OD405 value를 확인하였고, 인간 피브리노겐과 인간 트롬본에 8 IU u-PA를 첨가한 양성대조군에서는 반응 시작 후 10분 동안 피브린 클롯의 밀도가 증가했으나 이후 피브린 클롯 형성이 강하게 억제된 것을 확인하였다(도 9 참조). 실시예 5의 시료(HCT)에서는 각 농도에서 0.238 (1 μg), 0.2199 (2 μg), 0.1469 (5 μg), 0.1426 (10 μg), 0.1522 (20 μg), 0.1505 (50 μg), 0.1338 (100 μg), 0.1143 (200 μg)의 OD405 value가 확인되었다(도 7 참조). 이는 인간 피브리노겐과 인간 트롬빈만 반응시킨 음성 대조군의 피브린 클롯 밀도와 비교해볼 때 시료의 가장 높은 농도에서 73.44%의 피브린 클롯 억제 효능이 확인되었으며, 각각 44.70 % (1 μg), 48.91 % (2 μg), 65.87 % (5 μg), 66.87 % (10 μg), 64.64 % (20 μg), 65.03 % (50 μg), 68.91 % (100 μg), 73.44 % (200 μg)의 피브린 클롯 억제효능을 확인하였다(도 8 참조). 8 IU u-PA를 이용한 양성 대조군의 억제효능(93.5 %)(도 9 참조)과 시료의 억제효능을 비교해보면, 기존의 혈전증 질환 치료에 이용되고 있는 u-PA 효능에 비해 다소 낮은 억제효능을 보였다. 이러한 결과를 통해, 시료에서 피브린 클롯의 형성을 약 19.4-79.3 % 억제시키는 항-피브린 클롯 활성이 있음을 확인하였다.
As a result, in the negative control with only human fibrinogen and human thrombin, the density of fibrin clots was continuously increased for 60 minutes to confirm OD 405 value of about 0.5 to 0.43, and 8 IU u-PA was added to human fibrinogen and human trombone In the positive control added, the density of the fibrin clot was increased for 10 minutes after the start of the reaction, but it was confirmed that the fibrin clot formation was strongly inhibited thereafter (see FIG. 9). (HCT) of Example 5 contained 0.238 (1 μg), 0.2199 (2 μg), 0.1469 (5 μg), 0.1426 (10 μg), 0.1522 (20 μg), 0.1505 100 μg), an OD 405 value of 0.1143 (200 μg) was confirmed (see Fig. 7). This showed that fibrin clot inhibitory activity was 73.44% (1 μg), 48.91% (2 μg), respectively, at the highest concentration of the sample when compared to the fibrin clot density of the negative control with only human fibrinogen and human thrombin. , Fibrin clot inhibitory activity of 65.87% (5 μg), 66.87% (10 μg), 64.64% (20 μg), 65.03% (50 μg), 68.91% (100 μg) and 73.44% (See FIG. 8). In comparison with the inhibitory effect of the positive control group (93.5%) (see FIG. 9) and the inhibitory effect of the sample using 8 IU u-PA, the inhibitory effect was somewhat lower than the u-PA effect used for treating the thrombosis disease It looked. These results confirmed that the sample had an anti-fibrin clot activity that inhibited the formation of fibrin clots by about 19.4-79.3%.

2-2) 피브린 클롯 에세이2-2) Fibrin clot essay

피브린 클롯을 형성시키기 위해 모든 재료를 첨가한 혼합물과 다양한 농도의 시료를 동시에 반응시키거나 각 재료와 다양한 시간으로 미리 반응시켜 피브린 형성에 대한 억제활성을 분석한다. 1% 인간 피브리노겐(100 mM NaCl을 함유하는 20 mM Tris-HCl (pH 7.4)에 준비됨) 90 μl에 0.5 U/ml 트롬빈 10 μl과 다양한 농도의 시료를 동시에 또는 미리 반응시킨 것을 첨가한 후 수회 피펫팅하여 완전히 섞은 혼합물을 6시간 동안 반응시켜 형성된 피브린 클롯의 무게를 측정하여 억제 효능을 분석한다. 대조군은 시료를 첨가하지 않은 혼합물을 같은 조건으로 반응시킨 후 측정한다.To form a fibrin clot, the inhibitory activity against fibrin formation is analyzed by simultaneously reacting the mixture with all the ingredients and various concentrations of the sample or reacting with each material in advance at various times. To 90 μl of 1% human fibrinogen (prepared in 20 mM Tris-HCl (pH 7.4) containing 100 mM NaCl), 10 μl of 0.5 U / ml thrombin and samples of various concentrations were simultaneously or preliminarily reacted. The mixture is pipetted and reacted for 6 hours to measure the weight of the formed fibrin clots and analyze the inhibitory effect. Controls are prepared by reacting mixtures without added samples under the same conditions.

다양한 농도 (5-100 μg)의 시험 시료와 피브린 클롯 형성의 주요 인자들을 동시에 처리 후 3 시간동안 반응시킨 후 형성된 피브린 클롯의 무게를 측정하여 본 발명 시료의 fibrin clot 형성억제 효능을 분석하였다. 결과 분석을 위해 음성대조군(fibrinogen에 아무것도 처리하지 않은 음성대조군과 fibrinogen, thrombin만 처리하여 fibrin clot을 형성시킨 음성대조군), 양성대조군(실험군과 동일한 조건에서 u-PA를 처리한 대조군), 실험군(fibrin clot 형성 시 다양한 농도로 시료를 처리한 군)으로 실험을 수행하였다. 그 결과를 도 10 내지 12에 나타내었다. 도 10 내지 도 12는 피브린 클롯 에세이 결과를 나타내는 사진 및 그라프도이다.The test samples of various concentrations (5-100 μg) and the main factors of fibrin clot formation were simultaneously treated and reacted for 3 hours. The fibrin clot thus formed was weighed to analyze the fibrin clot formation inhibitory effect of the present invention sample. For the analysis of the results, a negative control (a negative control with no fibrinogen and a negative control with fibrinogen and thrombin treated only with fibrin clot), a positive control (a control group treated with u-PA under the same conditions as the experimental group) fibrin clot formation at various concentrations). The results are shown in Figs. 10 to 12 are photographs and graphs showing the result of the fibrin clot assay.

그 결과, 음성대조군을 통해 피브린 클롯이 강하게 형성된 것을 확인하였고 인간 피브리노겐과 인간 트롬빈만 반응시킨 음성대조군의 억제 효능을 0 %라고 볼 때, 양성대조군인 8 IU u-PA에서 약 90 %의 fibrin clot 형성억제 효능을 확인하였다(도 12 참조). 본 발명의 시료를 처리한 실험군에서는 가장 높은 농도(100 μg)에서 약 16 %의 억제 효능을 보였으며, 5 μg에서 약 3 %, 10 μg에서 약 5 %, 20 μg에서 약 4 %, 50 μg에서 약 10 %, 100 μg에서 약 16 %의 fibrin clot 형성억제 효능을 확인하였다(도 10 및 11 참조). 피브린 클롯 에세이를 통해 혈전의 주요 구성물인 피브린 클롯은 피브리노겐과 트롬빈에 의해 강하게 형성되지만, 본 발명의 시료에서 5-31 %의 억제율을 보이는 fibrin clot 형성억제 효능이 존재함을 확인하였고, 농도 의존적으로 효능이 증가하였으며, u-PA의 억제 효능보다 낮았지만 과도한 혈전의 형성을 예방 및 억제할 수 있는 항-피브린 클롯팅 활성을 확인하였다.As a result, it was confirmed that a fibrin clot was strongly formed through a negative control, and that the inhibitory effect of a negative control with human fibrinogen and human thrombin alone was 0%. In the positive control group 8 IU u-PA, about 90% of fibrin clots (See Fig. 12). In the experimental group treated with the present invention, the inhibitory effect was about 16% at the highest concentration (100 μg), about 3% at 5 μg, about 5% at 10 μg, about 4% at 50 μg And about 16% at 100 [mu] g (see Figs. 10 and 11). Although the fibrin clot, which is a major constituent of the thrombus, is strongly formed by fibrinogen and thrombin through the fibrin clot assay, it has been confirmed that the sample of the present invention has an inhibitory effect on formation of fibrin clot showing a 5-31% inhibition rate, Fibrin clotting activity, which was lower than the inhibitory effect of u-PA, but could prevent and inhibit excessive thrombus formation.

2-3) 2-3) 트롬빈Thrombin 에세이( Essay( ThrombinThrombin assayassay ))

피브리노겐을 피브린으로 형성시키고, 응고반응에 중요한 인자인 트롬빈에 대한 억제효과를 분석하기 위해 트롬빈에 시료를 전처리 또는 동시 처리한 후 트롬빈에 대한 합성된 기질(S-2238)을 이용하여 효소활성을 측정한다. 다양한 농도의 시료와 0.25 U 트롬빈을 최종 30 μl으로 적정하고 10분 동안 전처리 후 트롬빈의 합성된 기질 (S-2238) 10 μl (4 mM)과 5분 동안 반응시킨 후 405 nm로 측정한다. 대조군은 시료를 첨가하지 않거나 트롬빈만 처리한 혼합물을 같은 조건으로 반응시킨 후 측정한다. 마이크로플리이트 판독기(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 측정한다. 그 결과를 도 13 및 도 14에 나타냈다. 도 13 및 도 14는 시험 시료의 트롬빈 에세이 결과를 나타내는 그라프도이다. 다양한 농도 (5, 10, 20, 40 μg)의 시료와 트롬빈을 10분 동안 반응시킨 후 트롬빈의 효소활성을 측정하여 시료의 트롬빈 효소억제 효능을 분석하였다.To determine the inhibitory effect of fibrinogen on fibrin and to inhibit thrombin, which is an important factor in the coagulation reaction, pretreatment or simultaneous treatment of samples with thrombin followed by measurement of enzyme activity using the synthesized substrate for thrombin (S-2238) do. Titration of various concentrations of 0.25 U thrombin to final 30 μl, pretreatment for 10 minutes, and reaction with 10 μl (4 mM) of the thrombin-synthesized substrate (S-2238) for 5 minutes are then carried out at 405 nm. The control group is measured after adding the sample without addition of the sample or reacting only the thrombin-treated mixture under the same conditions. Using a microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif., USA). The results are shown in Fig. 13 and Fig. 13 and 14 are graphs showing the results of thrombin assay of the test sample. After thrombin was reacted with various concentrations (5, 10, 20, and 40 μg) of the sample for 10 minutes, thrombin enzyme activity was measured to analyze the thrombin enzyme inhibitory activity of the sample.

결과 분석을 위해 음성대조군(vehicle만 처리한 대조군), 양성대조군(thrombin만 처리한 대조군), 실험군(thrombin에 다양한 농도로 시료를 처리한 군)으로 실험을 수행하였다. 그 결과, 인간 트롬빈만 반응시킨 양성대조군에서 트롬빈과 트롬빈에 특이적인 기질이 반응하여 반응물로부터 3.24(mmol/min/mg)의 Vmax value를 확인하였고 이 값을 트롬빈 효소활성 100 %로 하여 비교분석하였다. 시료를 다양한 농도로 (5, 10, 20, 40 μg) 처리한 실험군(HCT)에서는 각 농도에서 1.206 (5 μg), 0.998 (10 μg), 0.813 (20 μg), 0.387 (40 μg)의 Vmax value가 확인되었다(도 13 참조). 시료 처리군에서는 5 μg에서 63.25 %, 10 μg에서 69.71 %, 20 μg에서 75.47 %, 40 μg에서 88.71 %의 트롬빈(thrombin) 억제 효능을 확인하였다(도 14 참조). 트롬빈 에세이법을 통해, 본 발명의 시료가 혈전의 응고인자인 인간 트롬빈의 효소활성을 17-88 % 억제시키는 항-트롬빈 활성(anti-thrombin activity)을 갖고 있음을 확인하였다. 이러한 결과는 혈전의 주요 구성물인 피브린 클롯을 형성하는 응고인자 트롬빈(thrombin)을 억제시켜 혈액응고의 지연 효과를 기대할 수 있을 것으로 보인다.For the analysis of the results, experiments were conducted with negative control (control group treated only with vehicle), positive control group (control group treated with thrombin alone), and experimental group (group treated with various concentrations of thrombin). As a result, a Vmax value of 3.24 (mmol / min / mg) was confirmed from the reaction product of thrombin and thrombin-specific substrate reacted with human thrombin-only positive control, and this value was compared with 100% of thrombin enzyme activity . In the experimental group (HCT) treated with samples at various concentrations (5, 10, 20, and 40 μg), Vmax at each concentration was 1.206 (5 μg), 0.998 (10 μg), 0.813 (20 μg), and 0.387 value was confirmed (see Fig. 13). In the sample-treated group, thrombin inhibitory activity was confirmed to be 63.25% at 5 μg, 69.71% at 10 μg, 75.47% at 20 μg, and 88.71% at 40 μg (see FIG. 14). Through the thrombin assay, it was confirmed that the sample of the present invention had an anti-thrombin activity which inhibits the enzyme activity of human thrombin, which is a clotting factor of thrombus, by 17-88%. These results suggest that the coagulation factor thrombin, which is a major constituent of the thrombus, can be inhibited to form a fibrin clot.

2-4) 응고인자 activated factor X 에세이2-4) Coagulation factor activated factor X essay

응고인자 activated factor X은 prothrombin을 응고반응에 중요한 인자인 ㅌ트롬빈(rombin)으로 활성화시킨다. 트롬빈 뿐만 아니라 activated factor X에 대한 언제효과를 분석하기 위해 시료를 전처리 또는 동시 처리한 후 activated factor X에 대한 합성된 기질(S-2222 또는 S-2765)을 이용하여 효소활성을 측정한다. 다양한 농도의 시료와 10 mU activated factor X을 최종 30 μl으로 적정하고 10분 동안 전처리 후 activated factor X의 합성된 기질 (S-2222 또는 S-2765) 10 μl (4 mM)과 5분 동안 반응시킨 후 405 nm로 측정한다. 대조군은 시료를 첨가하지 않거나 activated factor X만 처리한 혼합물을 같은 조건으로 반응시킨 후 측정한다. ㅁ마이크로플레이트 판독기(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 측정한다.Activated factor X activates prothrombin as an important factor in the coagulation reaction. In order to analyze the effect of activated factor X as well as thrombin, pretreatment or simultaneous treatment of samples is carried out and enzyme activity is measured using a synthesized substrate (S-2222 or S-2765) for activated factor X. After 10 min of pretreatment, 10 μl of activated S-2222 or S-2765 (4 mM) was reacted for 5 min. And then measured at 405 nm. Controls are obtained after reacting the mixture with no added sample or treated with activated factor X under the same conditions. Measure using a microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif., USA).

Factor X activated (FXa) assay법은 thrombus(혈전)의 주요 구성물인 fibrin clot을 형성시키기 위한 주요 응고인자인 human thrombin의 생성을 돕는 활성화 인자, FXa을 이용한 assay이며, FXa에 시료를 전처리하여 시료의 FXa 효소활성 억제 효능을 평가하기 위한 실험법이다. The Factor X activated (FXa) assay is an assay using FXa, an activating factor that helps the production of human thrombin, a major cofactor for forming the fibrin clot, a major component of thrombus (thrombus). FXa is pretreated with a sample This is an experimental method for evaluating the inhibitory effect of FXa enzyme activity.

다양한 농도 (5, 10, 20, 40 μg)의 시험 시료와 FXa을 10분 동안 반응시킨 후 FXa의 효소활성을 측정하여 동·식물성 및 식물성 유래 추출물의 FXa 효소억제 효능을 분석하였다. 그 결과를 도 15 및 도 16에 나타내었다. 도 15 및 도 17은 시험 시료의 FXa 에세이 결과를 나타내는 그라프도이다. 결과 분석을 위해 음성대조군(vehicle만 처리한 대조군), 양성대조군(FXa만 처리한 대조군), 실험군(FXa에 다양한 농도로 시료를 처리한 군)으로 실험을 수행하였다.The FXa enzyme activity was assayed after reacting FXa with various concentrations (5, 10, 20, and 40 μg) of the test sample for 10 minutes. The FXa enzyme inhibitory activity of the extracts of the plant, plant and plant was analyzed. The results are shown in Fig. 15 and Fig. 15 and 17 are graphs showing the FXa assay results of the test sample. Experiments were performed with negative control (vehicle only control), positive control (FXa only control), and experimental group (FXa treated group).

그 결과, FXa만 반응시킨 양성대조군에서 FXa과 이에 특이적인 기질이 반응하여 반응물로부터 1.27(mmol/min/mg)의 Vmax value를 확인하였고 이 값을 FXa 효소활성 100 %로 하여 비교분석하였다. 다양한 농도(5, 10, 20, 40 μg)로 처리한 실험군에서는 각 농도에서 1.157 (5 μg), 0.85 (10 μg), 0.799 (20 μg), 0.723 (40 μg)의 Vmax value가 확인되었다(도 15). 시험 시료에서 5 μg에서 7.44 %, 10 μg에서 32.0 %, 20 μg에서 36.08 %, 40 μg에서 42.16 %의 FXa 억제 효능을 확인하였다.As a result, Vmax value of 1.27 (mmol / min / mg) was confirmed from the reaction product by reacting FXa with a substrate specific to FXa in the positive control, and this value was compared with that of FXa enzyme activity as 100%. Vmax values of 1.157 (5 μg), 0.85 (10 μg), 0.799 (20 μg) and 0.723 (40 μg) were identified at various concentrations in the experimental groups treated with various concentrations of 5, 10, 20 and 40 μg 15). In the test sample, FXa inhibitory activity was confirmed to be 7.44% at 5 μg, 32.0% at 10 μg, 36.08% at 20 μg and 42.16% at 40 μg.

FXa assay법을 통해, 시험 시료가 thrombus(혈전)의 응고 활성화 인자인 human FXa의 효소활성을 4-42 % 억제시키는 anti-FXa activity를 갖고 있어서 높은 억제효능을 확인하였다. 이러한 결과는 트롬빈의 억제효능과 마찬가지로, 혈전 및 피브린 클롯을 형성하는 응고 활성화 인자 FXa을 억제시켜 혈액응고의 지연 효과를 기대할 수 있을 것으로 보인다.
Through the FXa assay, the test sample has anti-FXa activity which inhibits the enzymatic activity of human FXa, which is a coagulation activator of thrombus (thrombus), by 4-42%. These results, as well as the inhibitory effect of thrombin, can be expected to suppress the coagulation activating factor FXa, which forms thrombus and fibrin clot, and to delay the coagulation of blood.

2-5) 설치류 혈액을 이용한 2-5) Using rodent blood antianti -- thromboticthrombotic activityactivity assayassay

인간 혈액과 실험동물로부터 분리한 마우스 또는 래트 혈액을 이용한 시료의 혈전억제활성을 분석한다. 다양한 농도의 시료를 각 혈액 300 μl에 첨가한 후 37℃에 6시간 반응시켜 혈액 클롯을 형성시킨 후 생성된 혈전의 밀도를 분석한다. 대조군은 시료를 첨가하지 않고 식염수를 첨가 후 같은 조건으로 반응시킨 것을 비교한다.The thrombosuction activity of a sample using mouse blood or rat blood isolated from human blood and an experimental animal is analyzed. A sample of various concentrations is added to 300 μl of each blood, and the mixture is reacted at 37 ° C. for 6 hours to form a blood clot, and the density of the produced blood clot is analyzed. The control group was compared with those without addition of the sample and the addition of the saline solution and the reaction under the same conditions.

Anti-thrombotic activity assay법은 실험동물의 혈액(rodent blood)을 이용한 항혈전 효능 평가법이며, 혈액 채취 후 자연응고 후 형성되는 혈전에 시료를 적정시간 처리 후 남은 혈전의 양을 분석하여 시료의 혈전억제 효능을 평가하는 assay법이다. 다양한 농도(100, 200 μg)의 시험 시료와 설치류 혈액을 3 시간 동안 반응시킨 후 남은 혈액 클롯의 무게를 측정하여 동·식물성 및 식물성 유래 추출물의 혈전억제 효능을 분석하였다. 그 결과를 도 17에 나타내었다. 도 17은 시험 시료의 항-혈전 활성 결과를 나타내는 사진 및 그라프도이다. 결과 분석을 위해 음성대조군(blood에 아무것도 처리하지 않은 대조군), 양성대조군(실험군과 동일한 조건에서 u-PA를 처리한 대조군), 실험군(blood에 다양한 농도로 시료를 처리한 군)으로 실험을 수행하였다.The anti-thrombotic activity assay is a method for evaluating the antithrombotic efficacy by using rodent blood of an experimental animal. The thrombus formation after natural coagulation after blood sampling is analyzed for the amount of remaining thrombus after the appropriate time treatment of the sample, It is an assay method to evaluate the efficacy. The test samples and rodent blood of various concentrations (100, 200 μg) were reacted for 3 hours, and the remaining blood clots were weighed to analyze the thrombosection efficacy of the plant, plant and plant derived extracts. The results are shown in Fig. Fig. 17 is a photograph and a graphed view showing the result of anti-thrombogenic activity of the test sample. Fig. Experiments were performed with negative control (control without any treatment of blood), positive control (control treated with u-PA under the same conditions as the experimental group), and experimental group (samples treated with various concentrations of blood) Respectively.

음성대조군을 통해 혈액 클롯이 강하게 형성된 것을 확인하였고 양성대조군인 20 IU u-PA에서 약 70 %의 blood clot 억제 효능을 확인하였다. 시험 시료에서는 100 μg에서 약 10.76 %, 200 μg에서 약 15.31 %의 혈전억제 효능을 확인하였다(도 17 참조).A negative control group was used to confirm that the blood clot was strongly formed, and the positive control group, 20 IU u-PA, showed a blood clot inhibitory effect of about 70%. In the test sample, the thrombus inhibition efficacy was confirmed to be about 10.76% at 100 μg and about 15.31% at 200 μg (see FIG. 17).

Anti-thrombotic activity assay를 통해, 실험동물 혈액의 혈전의 형성과정에서 시험 시료에서 혈전생성을 7.6-38.8% 억제하였다. 시험 시료의 억제효능은 u-PA의 억제 효능(약 70%)보다 낮은 효과를 보였지만, 본 발명의 시험 시료는 실험동물의 혈액에 작용하여 과도한 혈전형성 억제 및 예방을 통해 응고계(coagulation system) 조절 및 혈행개선 효과를 기대할 수 있을 것으로 보인다.
Through the anti-thrombotic activity assay, thrombogenesis in the test samples was inhibited by 7.6-38.8% during the formation of thrombus in experimental animal blood. However, the test sample of the present invention acts on the blood of an experimental animal to inhibit the formation of coagulation system by inhibiting and preventing excessive thrombus formation. However, the inhibitory effect of the test sample is lower than that of u-PA (about 70% Control and blood circulation.

시험예 3: 항고지혈 효과Test Example 3: Antihyperlipidemic effect

고지혈증은 혈액 속에 있는 콜레스테롤이나 중성지방 등의 지질이 비정상적으로 증가한 상태를 말한다. 혈액 속에 저밀도 콜레스테롤과 중성지방이 쌓이면 혈액의 흐름을 방해하고 이로 인해 각종 혈관 질환이 생긴다. 고지혈증은 특별한 증상이 나타나지 않아서 이후 죽상동맥경화증, 심장병, 뇌졸중, 혈전증 등으로 발병할 수 있다. 따라서, 본 실험에서는 동·식물성 및 식물성 유래 추출물에서 고지혈 증상을 완화 및 억제 효과를 기대할 수 있는 중성지방 억제효능을 탐색하고자 하였다. 이를 위해, 중성지방 성분을 이용한 트리부티린 플레이트 에세이(tributyrin plate assay)를 수행하여 중성지방 용해 여부를 확인하였으며, 지질분해효소에 특이적인 합성기질을 이용한 지질분해효소 유사 효능을 분석하였다.Hyperlipidemia refers to a state of abnormally increased lipid such as cholesterol or triglycerides in the blood. When low-density cholesterol and neutral fat accumulate in the blood, it interferes with the flow of blood, resulting in various vascular diseases. Hyperlipidemia does not show any special symptoms, and can be followed by atherosclerosis, heart disease, stroke, thrombosis and the like. Therefore, in this experiment, we tried to investigate the triglyceride inhibitory effect which can be expected to alleviate and inhibit hyperlipidemia symptoms in the extracts of plant, vegetable and plant origin. For this purpose, tributyrin plate assay using neutral lipid components was performed to confirm the dissolution of triglyceride and the lipidolytic enzyme - like effect using a lipase - specific synthetic substrate was analyzed.

결과 분석을 위해 음성대조군(vehicle만 처리한 대조군), 실험군(다양한 농도로 시료를 처리한 군)으로 실험을 수행하였다.For the analysis of the results, experiments were performed with negative control (control group treated only with vehicle) and experimental group (group treated with various concentrations).

3-1) 트리부티린 플레이트 에세이3-1) Tributyrin Plate Essay

1 % 트리부티린 용액을 적정량으로 희석하여 2 % 아가 용액과 함께 최종 용적 5 ml로 트리부티린 플레이트를 준비한다. 트리부티린 플레이트에지름 3mm well을 만들어 다양한 농도의 시료를 37 ℃에서 1 시간 동안 반응시킨다. 맑은 영역(clear zone)을 측정하여 시료의 lipolytic activity를 분석한다. 그 결과를 도 18에 나타내었다. 도 18은 트리부티린 플레이트 에세이 결과를 나타내는 사진이다. Dilute a 1% tributyrin solution in an appropriate amount and prepare a tributyrin plate with a final volume of 5 ml with 2% agar solution. Tributyrin plates are made into 3 mm diameter wells and reacted at 37 ℃ for 1 hour at various concentrations. Analyze the lipolytic activity of the sample by measuring the clear zone. The results are shown in Fig. 18 is a photograph showing the results of a tributyrin plate assay.

음성대조군을 통해 비히클(vehicle, PBS buffer)만 처리했을 때 플레이트 내 중성지방에 아무런 반응이 나타나지 않는 것을 확인하였다. 시험 시료를 1시간 처리한 실험에서 10 μg에서 미미한 용해 효과를 보였고 20 μg에서 중성지방이 용해되어 clear zone이 나타난 것을 확인하였다.A negative control (vehicle, PBS buffer) alone did not show any response to neutral fat in the plate. In the experiment with the test sample for 1 hour, it showed a slight dissolution effect at 10 μg and it was confirmed that the clear zone appeared at 20 μg by dissolving the neutral fat.

3-2) 지질용해 활성 에세이3-2) Lipid-active activity essence

P-nitrophenyl butyrate(PNPB)의 기질(10 mM)를 이용하여 spectrophotometric assay 수행한다. 기질 용액에 다양한 농도의 시료를 60 ℃에서 15분 동안 반응시킨 후 405 nm에서 10분간 p-nitrophenol (PNP)를 측정하여 Vmax 값으로 분석한다. 마이크로플레이트 판독기(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 측정한다.Perform a spectrophotometric assay using a substrate (10 mM) of P-nitrophenyl butyrate (PNPB). The samples were incubated at 60 ° C for 15 minutes at various concentrations and then assayed for p-nitrophenol (PNP) at 405 nm for 10 minutes. Using a microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif., USA).

3가지 기질 용액에 다양한 농도의 시료 (10, 20, 50 μg)를 60℃에서 15분 동안 반응시킨 후 405 nm에서 10분간 p-니트로페놀(PNP)를 측정하여 Vmax 값으로 분석하여 lipolytic agent(lipase)와 비교하였다. 음성 대조군에서 비히클만 처리한 군의 효능은 0 Vmax (mU/min/μg), 양성 대조군에서 lipase 1 μg를 처리한 군의 효능은 p-니트로페닐 데카노에이트 합성 기질에서 0.7 Vmax (U/min/mg), p-니트로페닐 부티레이트 합성기질에서 0.2 Vmax (mU/min/mg), p-니트로페닐 팔미테이트 합성 기질에서 0.3 Vmax (U/min/mg)로 확인되었다(표 3 참조). Three kinds of substrate solution with various concentrations of the sample (10, 20, 50 μg) and then reacted at 60 ℃ for 15 minutes and analyzed at 405 nm with V max value was measured for 10 minutes p- nitrophenol (PNP) lipolytic agent (lipase). The efficacy of the vehicle-only group in the negative control was 0 V max (U / min / μg), the efficacy of the group treated with 1 μg of lipase in the positive control group was 0.7 V max (U / min / mg) in the synthesis substrate of p-nitrophenyl decanoate and in the synthesis substrate of p-nitrophenyl butyrate 0.2 V max (mU / min / mg) and 0.3 V max (U / min / mg) in the p-nitrophenyl palmitate synthesis substrate (see Table 3).

시험 시료의 지질분해효소 유사 효능 평가를 수행한 결과, 농도 50 μg일 때 p-니트로페닐 데카노에이트 합성 기질에서 0.102 ± 0.01 Vmax (mU/min/μg), p-니트로페닐 부티레이트 합성 기질에서 0.045 ± 0.004 Vmax (mU/min/μg), p-니트로페닐 팔미테이트 합성 기질에서 0.092 ± 0.007 Vmax (mU/min/μg)의 결과를 얻었다. 양성 대조군인 lipase보다 낮은 효능을 보였으며, 시험 시료의 가장 높은 농도(50 μg)에서 lipase 1 μg 효소활성(100 %)의 약 22 %에 해당하는 활성을 보였다. 결과적으로, 트리부티린 플레이트 에세이(tributyrin plate assay)와 lipolytic activity assay법을 통해 동·식물성 및 식물성 유래 추출물에서 중성지방 성분을 분해하고 lipase와 유사한 활성의 지질분해 효능을 확인하였다.As a result of lipidolytic enzyme-like activity evaluation of the test sample, it was found that when the concentration was 50 μg, it was 0.102 ± 0.01 V max in the synthesis substrate of p-nitrophenyl decanoate (mU / min / μg), 0.045 ± 0.004 V max in the synthesis substrate of p-nitrophenylbutyrate (mU / min / μg), 0.092 ± 0.007 V max in the p-nitrophenyl palmitate synthesis substrate (mU / min / μg) were obtained. The activity of lipase was lower than that of the positive control. The highest concentration of test sample (50 μg) showed about 22% of lipase 1 μg enzyme activity (100%). As a result, lipid-degrading activity of lipid-degrading lipid components was observed in tributyrin plate assay and lipolytic activity assay.

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시험예 4: 항응고 효과Test Example 4: Anticoagulant effect

심혈관질환은 혈액의 응고 성질 때문에 몸 안에서 혈액이 응고되어 혈전이 형성되고 결국 혈관을 막거나 혈전 부스러기가 미세한 혈관으로 날아가 혈관을 막는 뇌경색(뇌졸중, 중풍)과 같은 색전증으로 발병된다. 따라서, 혈액 응고 작용을 억제시켜 혈전이 잘 생성되지 않도록 하는 시료의 항응고 효능을 확인하기 위해 시험 시료에 대한 응고 저해 효능을 분석하였다. Cardiovascular diseases are caused by embolism, such as stroke (stroke, paralysis), which clog blood vessels, clog blood vessels, or clog blood vessels to flow into fine blood vessels. Therefore, the anticoagulant activity of the test sample was analyzed to confirm the anticoagulant activity of the sample which inhibits the blood coagulation action and prevents the thrombus from being generated well.

칼슘재첨가시간 실험은 인간 혈장(human plasma)에 CaCl2를 첨가하여 응고되는 시간과 정도를 실시간으로 분석하는 방법으로 여기에 전처리한 시료의 항응고 효과를 확인하였고, APTT와 PT 실험을 통해 동·식물성 및 식물성 유래 추출물이 응고계의 외인성과 내인성 factor 중 어떤 응고계 factor에 작용하여 항응고 효과를 보이는지 확인하였다.CaCl 2 was added to the human plasma to analyze the time and extent of coagulation in real time. The anticoagulant effect of the pretreated sample was confirmed by APTT and PT experiments. · Whether the extracts of plant and vegetable origin have an anticoagulant effect on any coagulation factors, exogenous and endogenous factors of the coagulation system.

결과 분석을 위해 음성대조군(human plasma에 아무것도 처리하지 않은 대조군), 양성대조군(실험군과 동일한 조건에서 항응고제(heparin)를 처리한 대조군), 실험군(human plasma에 다양한 농도로 시료를 처리한 군)으로 실험을 수행하였다.For analysis of the results, a negative control (a control group with no treatment with human plasma), a positive control group (a control group treated with heparin under the same conditions as the experimental group) and an experimental group Experiments were performed.

4-1) 칼슘재첨가 시간 에세이4-1) Calcium additive time essay

동·식물성 및 식물성 유래 추출물의 항응고 활성을 분석하기 위해 칼슘재첨가시간을 측정한 결과를 도 19에 나타내었다. 도 19는 시험 시료의 칼슘재첨가 시간 에세이에 의한 결과를 나타내는 그라프도이다.Fig. 19 shows the result of measuring the calcium addition time to analyze the anticoagulant activity of the extracts of plant, vegetable and plant origin. 19 is a graph showing the result of the calcium re-addition time assay of the test sample.

인간 혈장과 CaCl2만 반응시킨 음성대조군에서 60분 동안 지속적으로 혈장의 밀도가 증가하여 약 0.37의 OD650 value를 확인하였고, 인간 혈장에 동·식물성 및 식물성 유래 추출물을 전처리한 실험군에서는 CaCl2 첨가 후 약 20분 동안 혈장의 밀도가 유지되어 응고가 지연된 것을 확인하였다.In the negative control group in which human plasma and CaCl 2 were only reacted, the density of plasma was continuously increased for 60 minutes, and the OD 650 value of about 0.37 was confirmed. In the experimental group in which human, plasma and plant and plant extracts were pretreated, CaCl 2 The plasma density was maintained for about 20 minutes and the coagulation was delayed.

또한, 동·식물성 및 식물성 유래 추출물은 CaCl2 첨가 1시간 후 plasma의 밀도로부터 1/2(half time)이 되는 시간을 1.66-fold(HCT1), 1.91-fold(HCT2) 지연시켰다(표 4 참조).Further, vegetable and animal and vegetable-derived extract is added to the CaCl 2 1 time the 1/2 (half time) from the density of the time after the plasma was 1.66-fold (HCT1), 1.91 -fold (HCT2) delay (Table 4 ).

Figure 112015037909660-pat00002
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4-2) APTT 및 PT assay4-2) APTT and PT assay

시험 시료의 항응고 활성을 분석하기 위해 내인성 응고계 검사인 APTT, 외인성 응고계 검사인 PT를 측정한 결과, 시험 시료의 APTT는 대조군의 정상응고시간 53.6±1.3 sec와 비교할 때, 66.6 ± 4.4 sec (10 μg), 103.1 ± 3.9 sec (20 μg)로 각각 24.3 %, 92.4 % 지연되었다(표 5). PT 결과에서 대조군의 정상응고시간 18.1 ± 0.5 sec와 비교할 때, 20.5 ± 1.2 sec (10 μg), 21.5 ± 0.8 sec (20 μg)로 각각 13.3 %, 18.8 % 지연시켰다(표 5 참조). In order to analyze the anticoagulant activity of the test sample, APTT, an endogenous coagulation test, and PT, an extrinsic coagulation test, were 66.6 ± 4.4 sec compared to the normal coagulation time of the control group of 53.6 ± 1.3 sec (10 μg) and 103.1 ± 3.9 sec (20 μg), respectively, delayed by 24.3% and 92.4%, respectively (Table 5). PT results were delayed by 13.3% and 18.8%, respectively, to 20.5 ± 1.2 sec (10 μg) and 21.5 ± 0.8 sec (20 μg), respectively, compared to the normal coagulation time of control 18.1 ± 0.5 sec.

Figure 112015037909660-pat00003
Figure 112015037909660-pat00003

시험 시료에 의해 APTT가 약 71-103 초로 상당히 지연된 결과를 통해, 내인성 경로의 응고인자들 (I, II, V, X, XII, XI, IX, VIII 응고인자, 프리칼리크레인 (prekallikrein), 고분자중량 키니노겐 (high molecular weight kininogen, HMWK))과 반응하여 혈액응고를 상당히 지연시켰음을 확인하였다. 또한, 동·식물성 및 식물성 유래 추출물의 PT가 21초 이상으로 지연되어 정상수치보다 약 10초 지연된 결과를 통해, 외인성 경로에서 혈전을 형성시키는 응고인자들 (I, II, V, VII, X)과 반응하여 혈액응고를 지연시켰음을 확인하였다. APTT와 PT assay를 통해,(I, II, V, X, XII, XI, IX, VIII clotting factors, prekallikrein, and macromolecules of the endogenous pathway) High molecular weight kininogen (HMWK)) to significantly retard blood clotting. The coagulation factors (I, II, V, VII, X), which form thrombus in the exogenous pathway, were delayed by about 10 seconds compared with the normal value, And the blood coagulation was delayed. Through APTT and PT assays,

시험 시료가 human plasma의 응고시간을 내인성 응고계인 APTT에서 14.4-92.4 % 지연시켰으며 식물성 유래 추출물에서 가장 높은 지연효능을 보였다(92.4 %). 외인성 응고계인 PT에서 13.3-21.0 % 지연시켰다. 이러한 시험 시료의 응고지연 효능은 heparin의 응고지연 효능(약 70 %)보다 낮았지만, human plasma에 작용하여 혈액응고 지연을 통해 응고계 조절 및 혈행개선 효과를 기대할 수 있을 것으로 보인다.The test samples delayed the clotting time of human plasma by 14.4-92.4% in the endogenous coagulating system APTT and showed the highest delaying effect (92.4%) in the plant extracts. The PT was delayed by 13.3-21.0% in the extrinsic coagulation system. Although the coagulation retarding effect of these test samples was lower than that of heparin (about 70%), it could be expected to have effects on the coagulation control and blood circulation by acting on human plasma and delaying blood coagulation.

시험예 5: 관능 평가Test Example 5: Sensory evaluation

훈련받은 50명의 관능 평가원들을 선발하였고, 평가원들은 남자 25명, 여자 25명으로 구성하였다. 각 시료에 대하여 식감, 향, 진한 맛, 감칠 맛, 전체적인 기호도 등의 다양한 항목에 대하여 시료들을 평가한 후 매우 좋다(6), 보통으로 좋다(5), 보통이다(4), 그저 그렇다(3), 약간 떨어진다(2), 매우 떨어진다(1)의 6단계로 표시하여 관능평가를 실시하였다. 50 trained sensory evaluators were selected and the evaluators consisted of 25 males and 25 females. It is very good (6), usually good (5), common (4), and so on (3) after evaluating the samples for various items such as texture, smell, rich taste, ), Slightly dropped (2), and very low (1).

실시예1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 실시예 4Example 4 비교예Comparative Example 식감Texture 5.65±1.105.65 ± 1.10 5.85±1.265.85 ± 1.26 5.40±1.115.40 ± 1.11 5.28±1.215.28 ± 1.21 4.10±1.094.10 ± 1.09 incense 5.63±0.935.63 ± 0.93 5.36±1.305.36 ± 1.30 5.40±0.935.40 0.93 5.25±1.215.25 ± 1.21 4.10±1.524.10 ± 1.52 진한맛A deep flavor 4.95±1.514.95 1.51 5.52±1.205.52 ± 1.20 5.63±1.265.63 ± 1.26 5.32±1.255.32 ± 1.25 4.27±0.514.27 ± 0.51 감칠맛Richness 4.05±1.094.05 ± 1.09 5.45±0.935.45 ± 0.93 5.23±1.025.23 ± 1.02 4.95±1.224.95 ± 1.22 4.51±1.274.51 ± 1.27 전체적 기호도Overall likelihood 5.33±0.925.33 ± 0.92 5.62±0.715.62 + - 0.71 5.41±0.615.41 ± 0.61 5.33±0.805.33 + - 0.80 4.32±0.984.32 ± 0.98

실시예에서 제조된 총 5가지의 제품의 관능평가를 실시하고 그 결과를 표 6에 나타내었다. 그 결과 실시예 2의 제품이 식감과 기호도에서 매우 우수하였고, 실시예의 제품이 비교예의 것에 비하여 현저히 우수한 결과를 나타내었다.The sensory evaluation of the five products produced in the examples was carried out, and the results are shown in Table 6. As a result, the products of Example 2 were excellent in texture and taste, and the products of the Examples showed remarkably superior results than those of Comparative Examples.

이상 설명한 바와 같이 본 발명에 의하여 회춘탕의 제조에 대한 다양한 개발 방향을 제시하였고, 이에 제조 산업 관계자들의 관심과 역할 등이 추가로 발생하는 계기를 제공하여, 일자리 창출과 웰빙 식문화에 앞장서 갈 수 있는 연구 사업으로 판단된다. 사회적, 문화적으로 건강과 관련된 이슈가 대중매체 등에서 현재와 미래에 계속 대두되고 있으므로, 본 발명과 같은 기능성 식품들이 많이 개발되어 사회적인 다양한 문제를 해결할 방향을 제시하였다.
As described above, according to the present invention, various development directions for the manufacture of the rejuvenated hot water are suggested. Accordingly, it is possible to provide an opportunity for the interest and role of the persons concerned in the manufacturing industry to occur, thereby leading to job creation and well- It is judged to be a research project. Social and cultural issues related to health continue to be present in the media and the like in the present and the future. Therefore, many functional foods such as the present invention have been developed and suggested directions for solving various social problems.

Claims (2)

a) 엄나무, 가시오가피, 수삼, 도라지, 헛개나무, 황칠나무, 꾸지뽕 뿌리, 뽕뿌리, 녹두, 황귀, 당귀, 송담, 천궁, 생강, 대추, 마늘, 울금, 하수오 및 초석잠을 포함하는 원료를 전처리하는 단계;
b) 상기 전처리된 원료를 통에 넣고 찬물을 가한 후 55℃~80℃를 유지하여 30분 내지 1 시간 30분 동안 열수 추출하는 단계;
c) 상기 b) 단계에서 얻어진 열수 추출물 50~60중량%에 오리고기 15~25중량%와 바지락 1~2 중량%를 첨가하는 단계;
d) 상기 c) 단계의 혼합물에 소금 0.01~0.04 중량%를 넣은 후 진공 상태로 20~25분 동안 센불로 가열한 후 서서히 압력을 낮추는 단계 ; 및
e) 상기 d) 단계의 가열된 혼합물에 문어 10~20중량%와 전복 3~5 중량%를 넣고 7~20분 동안 센불로 가열한 후 미나리를 첨가해 조리하는 단계;를 포함하고,
원료의 혼합비는 정제수 100 중량부를 기준으로 엄나무 0.3~2 중량부, 가시오가피 0.3~2 중량부, 수삼 0.3~2 중량부, 도라지 0.3~2 중량부, 헛개나무 0.1~0.5 중량부, 황칠나무 0.1~0.5 중량부, 꾸지뽕뿌리 0.1~0.5 중량부, 뽕뿌리 0.1~0.5 중량부, 녹두 0.1~0.5 중량부, 황귀 0.1~0.5 중량부, 당귀 0.1~0.2 중량부, 송담 0.1~0.2 중량부, 천궁 0.1~0.2 중량부, 생강 0.1~0.2 중량부, 대추 0.1~0.2 중량부, 마늘 0.1~0.2 중량부, 울금 0.02~0.1 중량부, 하수오 0.02~0.1 중량부 및 초석잠 0.02~0.1 중량부인 것을 특징으로 하는 한약재와 해산물을 이용한 오리탕의 제조 방법.
a) Pretreatment of raw materials including seedlings, gooseberries, ginseng, bellflower, hornbeam, yellowtail, cedarwood root, mulberry root, mung bean, thunderbolt, angelicae, cassia root, ginger, jujube, garlic, ;
b) adding the pretreated raw material into a barrel, adding cold water, and maintaining hot water at a temperature of 55 to 80 ° C for 30 minutes to 1 hour and 30 minutes;
c) adding 15 to 25% by weight of duck meat and 1 to 2% by weight of clam to 50 to 60% by weight of the hot-water extract obtained in step b);
d) adding 0.01 to 0.04% by weight of salt to the mixture of step c), heating the mixture in a vacuum for 20 to 25 minutes, then gradually lowering the pressure; And
e) adding 10 to 20% by weight of octopus and 3 to 5% by weight of abalone to the heated mixture in step d), heating the mixture for 7 to 20 minutes with high heat, and adding buttercup to cook,
0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.3 to 2 parts by weight of ginseng, 0.1 to 0.5 parts by weight of hornblende, 0.1 to 0.5 parts by weight of hornbug, 0.1 to 0.5 parts by weight of roots, 0.1 to 0.5 parts by weight of roots, 0.1 to 0.5 parts by weight of mulberry roots, 0.1 to 0.5 parts by weight of mung beans, 0.1 to 0.5 parts by weight of spermatids, 0.1 to 0.2 parts by weight of Angelica keiskei, 0.1 to 0.2 parts by weight of ginger, 0.1 to 0.2 parts by weight of ginger, 0.1 to 0.2 parts by weight of garlic, 0.02 to 0.1 parts by weight of garlic, 0.02 to 0.1 parts by weight of sewage, and 0.02 to 0.1 part by weight of ground stone A process for preparing oritang using herbal medicines and seafood.
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